RU2018129169A - Грызуны, имеющие сконструированный участок разнообразия тяжелой цепи - Google Patents

Грызуны, имеющие сконструированный участок разнообразия тяжелой цепи Download PDF

Info

Publication number
RU2018129169A
RU2018129169A RU2018129169A RU2018129169A RU2018129169A RU 2018129169 A RU2018129169 A RU 2018129169A RU 2018129169 A RU2018129169 A RU 2018129169A RU 2018129169 A RU2018129169 A RU 2018129169A RU 2018129169 A RU2018129169 A RU 2018129169A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
rodent
conotoxin
nucleotide sequences
region
heavy chain
Prior art date
Application number
RU2018129169A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2763320C2 (ru
RU2018129169A3 (ru
Inventor
Линн МАКДОНАЛД
Джон МАКВИРТЕР
Эндрю Дж. МЕРФИ
Original Assignee
Регенерон Фармасьютикалз, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=58010373&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RU2018129169(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Регенерон Фармасьютикалз, Инк. filed Critical Регенерон Фармасьютикалз, Инк.
Publication of RU2018129169A publication Critical patent/RU2018129169A/ru
Publication of RU2018129169A3 publication Critical patent/RU2018129169A3/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2763320C2 publication Critical patent/RU2763320C2/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
    • A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
    • A01K67/0275—Genetically modified vertebrates, e.g. transgenic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/43504—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/715—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons
    • C07K14/7158—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons for chemokines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
    • C07K16/461—Igs containing Ig-regions, -domains or -residues form different species
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
    • C07K16/461—Igs containing Ig-regions, -domains or -residues form different species
    • C07K16/462—Igs containing a variable region (Fv) from one specie and a constant region (Fc) from another
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/8509—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells for producing genetically modified animals, e.g. transgenic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2207/00—Modified animals
    • A01K2207/15—Humanized animals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2217/00—Genetically modified animals
    • A01K2217/07—Animals genetically altered by homologous recombination
    • A01K2217/072—Animals genetically altered by homologous recombination maintaining or altering function, i.e. knock in
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2217/00—Genetically modified animals
    • A01K2217/07—Animals genetically altered by homologous recombination
    • A01K2217/075—Animals genetically altered by homologous recombination inducing loss of function, i.e. knock out
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2217/00—Genetically modified animals
    • A01K2217/15—Animals comprising multiple alterations of the genome, by transgenesis or homologous recombination, e.g. obtained by cross-breeding
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2227/00—Animals characterised by species
    • A01K2227/10—Mammal
    • A01K2227/105—Murine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2267/00—Animals characterised by purpose
    • A01K2267/01—Animal expressing industrially exogenous proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/51—Complete heavy chain or Fd fragment, i.e. VH + CH1
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/567—Framework region [FR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2318/00—Antibody mimetics or scaffolds
    • C07K2318/10—Immunoglobulin or domain(s) thereof as scaffolds for inserted non-Ig peptide sequences, e.g. for vaccination purposes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/8509—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells for producing genetically modified animals, e.g. transgenic
    • C12N2015/8518—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells for producing genetically modified animals, e.g. transgenic expressing industrially exogenous proteins, e.g. for pharmaceutical use, human insulin, blood factors, immunoglobulins, pseudoparticles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2510/00—Genetically modified cells
    • C12N2510/04—Immortalised cells

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Battery Electrode And Active Subsutance (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Claims (115)

1. Грызун, геном которого содержит вариабельный участок тяжелой цепи иммуноглобулина, который включает сконструированный участок DH, где сконструированный участок DH включает одну или более нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует представляющий интерес полипептид, не являющийся иммуноглобулином, или его часть.
2. Грызун по п. 1, где вариабельный участок тяжелой цепи иммуноглобулина представляет собой вариабельный участок тяжелой цепи иммуноглобулина человека.
3. Грызун по п. 1 или 2, где вариабельный участок тяжелой цепи иммуноглобулина функционально связан с константным участком тяжелой цепи иммуноглобулина.
4. Грызун по п. 3, где константный участок тяжелой цепи иммуноглобулина представляет собой эндогенный константный участок тяжелой цепи иммуноглобулина.
5. Грызун по любому из предыдущих пунктов, где представляющий интерес полипептид, не являющийся иммуноглобулином, представляет собой хемокиновый рецептор.
6. Грызун по п. 5, где хемокиновый рецептор представляет собой атипичный хемокиновый рецептор (ACKR).
7. Грызун по п. 6, где ACKR представляет собой D6 хемокиновый рецептор-ловушку.
8. Грызун по п. 7, где сконструированный участок DH включает 5, 10, 15, 20, 25 или больше нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует внеклеточную часть D6 хемокинового рецептора-ловушки.
9. Грызун по п. 8, где сконструированный участок DH включает 25 нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует внеклеточную часть D6 хемокинового рецептора-ловушки.
10. Грызун по п. 8 или 9, где внеклеточная часть D6 хемокинового рецептора-ловушки выбрана из группы, состоящей из N-концевого участка, внеклеточной петли и их комбинаций.
11. Грызун по п. 9, где каждая из 25 нуклеотидных последовательностей кодирует последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична последовательности, представленной в таблице 3.
12. Грызун по п. 9, где каждая из 25 нуклеотидных последовательностей кодирует последовательность, которая практически идентична последовательности, представленной в таблице 3.
13. Грызун по п. 9, где каждая из 25 нуклеотидных последовательностей кодирует последовательность, которая идентична последовательности, представленной в таблице 3.
14. Грызун по любому из предыдущих пунктов, где одна или более нуклеотидных последовательностей содержат одну или более нуклеотидных замен, которые увеличивают частоту возникновения соматической гипермутации в одной или более нуклеотидных последовательностях.
15. Грызун по любому из пп. 1–4, где представляющий интерес полипептид, не являющийся иммуноглобулином, представляет собой конотоксин или токсин тарантула.
16. Грызун по п. 15, где конотоксин выбран из группы, состоящей из α-конотоксина, δ-конотоксина, κ-конотоксина, μ-конотоксина, ω-конотоксина и их комбинаций.
17. Грызун по п. 16, где конотоксин представляет собой μ-конотоксин.
18. Грызун по п. 17, где сконструированный участок DH включает 5, 10, 15, 20, 25 или больше нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует часть μ-конотоксина, токсина тарантула или их комбинаций.
19. Грызун по п. 18, где сконструированный участок DH включает 26 нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует часть μ-конотоксина и/или токсина тарантула.
20. Грызун по п. 19, где каждая из 26 нуклеотидных последовательностей кодирует последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична последовательности, представленной в таблице 4.
21. Грызун по п. 19, где каждая из 26 нуклеотидных последовательностей кодирует последовательность, которая практически идентична последовательности, представленной в таблице 4.
22. Грызун по п. 19, где каждая из 26 нуклеотидных последовательностей кодирует последовательность, которая идентична последовательности, представленной в таблице 4.
23. Грызун по любому из пп. 15–22, где одна или более нуклеотидных последовательностей содержат одну или более нуклеотидных замен, которые увеличивают частоту возникновения соматической гипермутации в одной или более нуклеотидных последовательностях.
24. Грызун по любому из предыдущих пунктов, где сконструированный участок DH дополнительно включает первую и вторую последовательности сигнала рекомбинации, фланкирующие каждую из одной или более нуклеотидных последовательностей.
25. Грызун по п. 24, где первая последовательность сигнала рекомбинации содержит последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична первой последовательности сигнала рекомбинации, представленной на фигуре 2.
26. Грызун по п. 24, где первая последовательность сигнала рекомбинации содержит последовательность, которая практически идентична первой последовательности сигнала рекомбинации, представленной на фигуре 2.
27. Грызун по п. 24, где первая последовательность сигнала рекомбинации содержит последовательность, которая идентична первой последовательности сигнала рекомбинации, представленной на фигуре 2.
28. Грызун по п. 24, где вторая последовательность сигнала рекомбинации содержит последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична второй последовательности сигнала рекомбинации, представленной на фигуре 2.
29. Грызун по п. 24, где вторая последовательность сигнала рекомбинации содержит последовательность, которая практически идентична второй последовательности сигнала рекомбинации, представленной на фигуре 2.
30. Грызун по п. 24, где вторая последовательность сигнала рекомбинации содержит последовательность, которая идентична второй последовательности сигнала рекомбинации, представленной на фигуре 2.
31. Грызун по п. 24, где первая и вторая последовательности сигнала рекомбинации выбраны из представленных на фигуре 2.
32. Грызун по любому из предыдущих пунктов, где в геноме грызуна отсутствует один или болееэндогенных генных сегментов DH дикого типа.
33. Грызун по любому из предыдущих пунктов, где в геноме грызуна отсутствует одна или более эндогенных последовательностей сигнала рекомбинации.
34. Грызун по любому из пп. 1–33, где грызун представляет собой крысу или мышь.
35. Выделенная клетка или ткань грызуна, геном которых содержит вариабельный участок тяжелой цепи иммуноглобулина, который включает сконструированный участок DH, где сконструированный участок DH включает одну или более нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует представляющий интерес полипептид, не являющийся иммуноглобулином, или его часть.
36. Иммортализированная клетка, полученная из выделенной клетки грызуна по п. 35.
37. Эмбриональная стволовая клетка грызуна, геном которой содержит вариабельный участок тяжелой цепи иммуноглобулина, который включает сконструированный участок DH, где сконструированный участок DH включает одну или более нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует представляющий интерес полипептид, не являющийся иммуноглобулином, или его часть.
38. Эмбрион грызуна, полученный за счет эмбриональной стволовой клетки грызуна по п. 37.
39. Способ получения грызуна, геном которого содержит вариабельный участок тяжелой цепи иммуноглобулина, который включает сконструированный участок DH, при этом способ предусматривает
(a) осуществление вставки фрагмента ДНК в эмбриональную стволовую клетку грызуна, при этом указанный фрагмент ДНК содержит одну или более нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует представляющий интерес полипептид, не являющийся иммуноглобулином, или его часть;
(b) получение эмбриональной стволовой клетки грызуна, образованной на (a); и
(c) получение грызуна с применением эмбриональной стволовой клетки из (b).
40. Способ по п. 39, где представляющий интерес полипептид, не являющийся иммуноглобулином, представляет собой хемокиновый рецептор.
41. Способ по п. 40, где хемокиновый рецептор представляет собой атипичный хемокиновый рецептор (ACKR).
42. Способ по п. 41, где ACKR представляет собой D6 хемокиновый рецептор-ловушку.
43. Способ по п. 42, где фрагмент ДНК включает 5, 10, 15, 20, 25 или больше нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует внеклеточную часть D6 хемокинового рецептора-ловушки.
44. Способ по п. 43, где фрагмент ДНК включает 25 нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует внеклеточную часть D6 хемокинового рецептора-ловушки.
45. Способ по п. 43 или 44, где внеклеточная часть D6 хемокинового рецептора-ловушки выбрана из группы, состоящей из N-концевого участка, внеклеточной петли и их комбинаций.
46. Способ по п. 39, где представляющий интерес полипептид, не являющийся иммуноглобулином, представляет собой конотоксин или токсин тарантула.
47. Способ по п. 46, где конотоксин выбран из группы, состоящей из α-конотоксина, δ-конотоксина, κ-конотоксина, μ-конотоксина, ω-конотоксина и их комбинаций.
48. Способ по п. 47, где конотоксин представляет собой μ-конотоксин.
49. Способ по п. 48, где фрагмент ДНК включает 5, 10, 15, 20, 25 или больше нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует часть μ-конотоксина, токсина тарантула или их комбинаций.
50. Способ по п. 49, где фрагмент ДНК включает 26 нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует часть μ-конотоксина и/или токсина тарантула.
51. Способ по п. 44 или 50, где фрагмент ДНК дополнительно содержит первую и вторую последовательности сигнала рекомбинации, фланкирующие каждую из 25 или 26 нуклеотидных последовательностей.
52. Способ получения грызуна, геном которого содержит вариабельный участок тяжелой цепи иммуноглобулина, который включает сконструированный участок DH, при этом способ предусматривает
осуществление модифицирования генома грызуна таким образом, что он содержит вариабельный участок тяжелой цепи иммуноглобулина, который включает сконструированный участок DH, где сконструированный участок DH содержит одну или более нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует представляющий интерес полипептид, не являющийся иммуноглобулином, или его часть, с получением тем самым указанного грызуна.
53. Способ по п. 52, где представляющий интерес полипептид, не являющийся иммуноглобулином, представляет собой хемокиновый рецептор.
54. Способ по п. 53, где хемокиновый рецептор представляет собой атипичный хемокиновый рецептор (ACKR).
55. Способ по п. 54, где ACKR представляет собой D6 хемокиновый рецептор-ловушку.
56. Способ по п. 55, где геном грызуна модифицируют, чтобы он включал 5, 10, 15, 20, 25 или больше нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует внеклеточную часть D6 хемокинового рецептора-ловушки.
57. Способ по п. 56, где геном грызуна модифицируют, чтобы он включал 25 нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует внеклеточную часть D6 хемокинового рецептора-ловушки.
58. Способ по п. 56 или 57, где внеклеточная часть D6 хемокинового рецептора-ловушки выбрана из группы, состоящей из N-концевого участка, внеклеточной петли и их комбинаций.
59. Способ по п. 52, где представляющий интерес полипептид, не являющийся иммуноглобулином, представляет собой конотоксин или токсин тарантула.
60. Способ по п. 59, где конотоксин выбран из группы, состоящей из α-конотоксина, δ-конотоксина, κ-конотоксина, μ-конотоксина, ω-конотоксина и их комбинаций.
61. Способ по п. 60, где конотоксин представляет собой μ-конотоксин.
62. Способ по п. 61, где геном грызуна модифицируют, чтобы он включал 5, 10, 15, 20, 25 или больше нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует часть μ-конотоксина, токсина тарантула или их комбинаций.
63. Способ по п. 62, где геном грызуна модифицируют, чтобы он включал 26 нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует часть μ-конотоксина и/или токсина тарантула.
64. Способ по п. 57 или 63, где геном грызуна модифицируют, чтобы он дополнительно включал первую и вторую последовательности сигнала рекомбинации, фланкирующие каждую из 25 или 26 нуклеотидных последовательностей.
65. Способ по любому из пп. 39–64, где вариабельный участок тяжелой цепи иммуноглобулина представляет собой вариабельный участок тяжелой цепи иммуноглобулина человека.
66. Способ по любому из пп. 39–64, где вариабельный участок тяжелой цепи иммуноглобулина функционально связан с константным участком тяжелой цепи иммуноглобулина.
67. Способ по п. 66, где константный участок тяжелой цепи иммуноглобулина представляет собой эндогенный константный участок тяжелой цепи иммуноглобулина.
68. Способ получения антитела от грызуна, при этом способ предусматривает стадии:
(a) иммунизации грызуна антигеном, причем грызун имеет геном, содержащий вариабельный участок тяжелой цепи иммуноглобулина, который включает сконструированный участок DH, где сконструированный участок DH включает одну или более нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует представляющий интерес полипептид, не являющийся иммуноглобулином, или его часть;
(b) содержания грызуна в условиях, подходящих для того, чтобы у грызуна вырабатывалсяиммунный ответ на антиген; и
(c) выделения из грызуна или клетки грызуна антитела, которое связывает антиген.
69. Способ по п. 68, где клетка грызуна представляет собой В-клетку.
70. Способ по п. 68, где клетка грызуна представляет собой гибридому.
71. Способ по любому из пп. 68–70, где представляющий интерес полипептид, не являющийся иммуноглобулином, представляет собой хемокиновый рецептор.
72. Способ по п. 71, где хемокиновый рецептор представляет собой атипичный хемокиновый рецептор (ACKR).
73. Способ по п. 72, где ACKR представляет собой D6 хемокиновый рецептор-ловушку.
74. Способ по п. 73, где сконструированный участок DH включает 5, 10, 15, 20, 25 или больше нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует внеклеточную часть D6 хемокинового рецептора-ловушки.
75. Способ по п. 74, где сконструированный участок DH включает 25 нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует внеклеточную часть D6 хемокинового рецептора-ловушки.
76. Способ по п. 74 или 75, где внеклеточная часть D6 хемокинового рецептора-ловушки выбрана из группы, состоящей из N-концевого участка, внеклеточной петли и их комбинаций.
77. Способ по любому из пп. 68–70, где представляющий интерес полипептид, не являющийся иммуноглобулином, представляет собой конотоксин или токсин тарантула.
78. Способ по п. 77, где конотоксин выбран из группы, состоящей из α-конотоксина, δ-конотоксина, κ-конотоксина, μ-конотоксина, ω-конотоксина и их комбинаций.
79. Способ по п. 78, где конотоксин представляет собой μ-конотоксин.
80. Способ по п. 79, где сконструированный участок DH включает 5, 10, 15, 20, 25 или больше нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует часть μ-конотоксина, токсина тарантула или их комбинаций.
81. Способ по п. 80, где сконструированный участок DH включает 26 нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует часть μ-конотоксина и/или токсина тарантула.
82. Способ по п. 75 или 81, где сконструированный участок DH дополнительно содержит первую и вторую последовательности сигнала рекомбинации, фланкирующие каждую из 25 или 26 нуклеотидных последовательностей.
83. Способ по любому из пп. 68–82, где вариабельный участок тяжелой цепи иммуноглобулина представляет собой вариабельный участок тяжелой цепи иммуноглобулина человека.
84. Способ по любому из пп. 68-83, где вариабельный участок тяжелой цепи иммуноглобулина функционально связан с константным участком тяжелой цепи иммуноглобулина.
85. Способ по п. 84, где константный участок тяжелой цепи иммуноглобулина представляет собой эндогенный константный участок тяжелой цепи иммуноглобулина.
86. Способ по любому из пп. 39–85, где грызун представляет собой крысу или мышь.
87. Грызун, геном которого содержит
вариабельный участок тяжелой цепи иммуноглобулина человека, который содержит один или более генных сегментов VH человека, сконструированный участок DH и один или более генных сегментов JH человека, при этом сконструированный участок DH включает:
(i) одну или более нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует внеклеточную часть атипичного хемокинового рецептора (ACKR); и
(ii) первую и вторую последовательности сигнала рекомбинации, фланкирующие каждую из одной или более нуклеотидных последовательностей из (i);
где вариабельный участок тяжелой цепи иммуноглобулина человека функционально связан с одним или более эндогенными генами константного участка иммуноглобулина таким образом, что грызун характеризуется тем, что при его иммунизации антигеном в нем вырабатываются антитела, содержащие вариабельные домены тяжелой цепи человека, кодируемые одним или более генными сегментами VH человека, сконструированным участком DH и одним или более генными сегментами JH человека, функционально связанными с константными доменами тяжелой цепи грызуна, кодируемыми одним или более эндогенными генами константного участка иммуноглобулина, и где антитела проявляют специфическое связывание с антигеном.
88. Грызун по п. 87, где ACKR представляет собой D6 хемокиновый рецептор-ловушку.
89. Грызун по п. 88, где сконструированный участок DH включает 25 нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует внеклеточную часть D6 хемокинового рецептора-ловушки.
90. Грызун по п. 89, где внеклеточная часть D6 хемокинового рецептора-ловушки выбрана из группы, состоящей из N-концевого участка, внеклеточной петли и их комбинаций.
91. Грызун, геном которого содержит
вариабельный участок тяжелой цепи иммуноглобулина человека, который содержит один или более генных сегментов VH человека, сконструированный участок DH и один или более генных сегментов JH человека, при этом сконструированный участок DH включает:
(i) одну или более нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует часть токсина; и
(ii) первую и вторую последовательности сигнала рекомбинации, фланкирующие каждую из одной или более нуклеотидных последовательностей из (i);
где вариабельный участок тяжелой цепи иммуноглобулина человека функционально связан с одним или более эндогенными генами константного участка иммуноглобулина таким образом, что грызун характеризуется тем, что при его иммунизации антигеном в нем вырабатываются антитела, содержащие вариабельные домены тяжелой цепи человека, кодируемые одним или более генными сегментами VH человека, сконструированным участком DH и одним или более генными сегментами JH человека, функционально связанными с константными доменами тяжелой цепи грызуна, кодируемыми одним или более эндогенными генами константного участка иммуноглобулина, и где антитела проявляют специфическое связывание с антигеном.
92. Грызун по п. 91, где каждая из одной или более нуклеотидных последовательностей кодирует часть μ-конотоксина, токсина тарантула или их комбинаций.
93. Грызун по п. 92, где сконструированный участок DH включает 26 нуклеотидных последовательностей, каждая из которых кодирует часть μ-конотоксина и/или токсина тарантула.
94. Грызун по п. 87 или 91, где одна или более нуклеотидных последовательностей содержат одну или более нуклеотидных замен, которые увеличивают частоту возникновения соматической гипермутации в одной или более нуклеотидных последовательностях.
95. Грызун по любому из пп. 87–94, дополнительно содержащий вставку из одного или более генных сегментов VL человека и одного или более генных сегментов JL человека в эндогенном локусе легкой цепи.
96. Грызун по п. 95, где сегменты VL и JL человека представляют собой генные сегменты Vκ и Jκ, и при этом они встроены в эндогенный локус легкой κ-цепи.
97. Грызун по п. 96, где генные сегменты Vκ и Jκ человека функционально связаны с геном Cκ грызуна.
98. Грызун по п. 95, где сегменты VL и JL человека представляют собой генные сегменты Vλ и Jλ, и при этом они встроены в эндогенный локус легкой λ-цепи.
99. Грызун по п. 98, где генные сегменты Vλ и Jλ человека функционально связаны с геном Cλ грызуна.
100. Грызун по любому из пп. 87–99, где грызун представляет собой крысу или мышь.
RU2018129169A 2016-01-13 2017-01-12 Грызуны, имеющие сконструированный участок разнообразия тяжелой цепи RU2763320C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201662278127P 2016-01-13 2016-01-13
US62/278,127 2016-01-13
PCT/US2017/013247 WO2017123804A1 (en) 2016-01-13 2017-01-12 Rodents having an engineered heavy chain diversity region

Publications (3)

Publication Number Publication Date
RU2018129169A true RU2018129169A (ru) 2020-02-13
RU2018129169A3 RU2018129169A3 (ru) 2020-05-25
RU2763320C2 RU2763320C2 (ru) 2021-12-28

Family

ID=58010373

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2018129169A RU2763320C2 (ru) 2016-01-13 2017-01-12 Грызуны, имеющие сконструированный участок разнообразия тяжелой цепи

Country Status (13)

Country Link
US (2) US20190037816A1 (ru)
EP (2) EP3402326A1 (ru)
JP (4) JP6979955B2 (ru)
KR (2) KR20230006929A (ru)
CN (2) CN114128676A (ru)
AU (2) AU2017206785C1 (ru)
BR (1) BR112018014250A2 (ru)
CA (1) CA3011359A1 (ru)
IL (2) IL302725A (ru)
MX (1) MX2018008701A (ru)
RU (1) RU2763320C2 (ru)
SG (2) SG10201914034WA (ru)
WO (1) WO2017123804A1 (ru)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018193457A1 (en) * 2017-04-20 2018-10-25 Ramot At Tel-Aviv University Ltd. Recombination activating gene (rag) induced v(d)j gene targeting
JP2023515270A (ja) * 2020-04-21 2023-04-12 テンパス・ラボズ・インコーポレイテッド Ｔｃｒ／ｂｃｒプロファイリング
MX2020012914A (es) * 2020-11-27 2022-05-30 Centro De Investig Cientifica Y De Educacion Superior De Ensenada Baja California Cicese Proteina andamio para la generacion de proteinas quimericas de union a antigeno.

Family Cites Families (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK0814159T3 (da) 1990-08-29 2005-10-24 Genpharm Int Transgene, ikke-humane dyr, der er i stand til at danne heterologe antistoffer
US5670356A (en) 1994-12-12 1997-09-23 Promega Corporation Modified luciferase
US5874304A (en) 1996-01-18 1999-02-23 University Of Florida Research Foundation, Inc. Humanized green fluorescent protein genes and methods
US6586251B2 (en) 2000-10-31 2003-07-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modifying eukaryotic cells
US6596541B2 (en) 2000-10-31 2003-07-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modifying eukaryotic cells
EP1572079A4 (en) * 2002-03-29 2006-09-06 Centocor Inc MAMMAL-CDR MIMETIC BODIES, COMPOSITIONS, PROCESSES AND APPLICATION PURPOSES
WO2005012531A2 (en) * 2003-08-01 2005-02-10 Genentech, Inc. Antibody cdr polypeptide sequences with restricted diversity
US8211648B2 (en) * 2005-07-22 2012-07-03 Kalobios Pharmaceuticals, Inc. Secretion of antibodies without signal peptides from bacteria
MY159787A (en) 2006-06-02 2017-01-31 Regeneron Pharma High affinity antibodies to human il-6 receptor
MX2010001307A (es) * 2007-08-02 2010-07-30 Novimmune Sa Anticuerpos anti-proteína regulada con la activación, expresada y secretada por los linfocitos t normales y metodos de uso de los mismos.
TWI476280B (zh) 2008-03-07 2015-03-11 Regeneron Pharma 來自二倍體宿主胚胎注射之ｅｓ－細胞衍生的老鼠
EP2271758B1 (en) * 2008-04-14 2018-09-12 Innovative Targeting Solutions Inc. Sequence diversity generation in immunoglobulins
RU2425880C2 (ru) * 2009-07-30 2011-08-10 Учреждение Российской академии наук Институт общей генетики им. Н.И. Вавилова РАН Способ получения трансгенных мышей
RS55315B2 (sr) 2010-02-08 2020-08-31 Regeneron Pharma Miš sa zajedničkim lakim lancem
US20130045492A1 (en) 2010-02-08 2013-02-21 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods For Making Fully Human Bispecific Antibodies Using A Common Light Chain
US9796788B2 (en) 2010-02-08 2017-10-24 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Mice expressing a limited immunoglobulin light chain repertoire
US20130185821A1 (en) 2010-02-08 2013-07-18 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Common Light Chain Mouse
US20120021409A1 (en) 2010-02-08 2012-01-26 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Common Light Chain Mouse
EP2371863A1 (en) * 2010-03-30 2011-10-05 Pierre Fabre Médicament Humanized anti CXCR4 antibodies for the treatment of cancer
US8871996B2 (en) 2010-06-09 2014-10-28 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Mice expressing human voltage-gated sodium channels
US8486647B2 (en) 2010-06-09 2013-07-16 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Neuropeptide release assay for sodium channels
PL2738259T3 (pl) * 2011-02-25 2020-08-24 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Myszy adam6
JP2014533930A (ja) * 2011-09-19 2014-12-18 カイマブ・リミテッド 免疫グロブリン遺伝子多様性の操作およびマルチ抗体治療薬
US10246509B2 (en) 2011-10-17 2019-04-02 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Restricted immunoglobulin heavy chain mice
KR20140136462A (ko) 2012-03-06 2014-11-28 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 공통 경쇄 마우스
WO2013134881A1 (en) * 2012-03-14 2013-09-19 Innovative Targeting Solutions Inc. Generating targeted sequence diversity in fusion proteins
BR112014022855A2 (pt) * 2012-03-16 2017-07-18 Regeneron Pharma animal não humano geneticamente modificado, mamífero geneticamente modificado, e, método para fabricar um animal não humano
WO2013184761A1 (en) 2012-06-05 2013-12-12 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for making fully human bispecific antibodies using a common light chain
US9644021B2 (en) * 2013-01-11 2017-05-09 The California Institute For Biomedical Research Bovine fusion antibodies
RU2015143108A (ru) 2013-03-13 2017-04-20 Регенерон Фарматютикалз, Инк. Мышь с общей легкой цепью
TR201901668T4 (tr) 2013-03-13 2019-02-21 Regeneron Pharma Sınırlı bir immünoglobulin hafif zincir repertuvarını eksprese eden fareler.
EP3354732B1 (en) 2014-06-23 2020-01-08 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Nuclease-mediated dna assembly
KR102531016B1 (ko) 2014-11-21 2023-05-10 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 쌍 형성된 가이드 rna를 사용하는 표적화된 유전자 변형을 위한 방법 및 조성물
CA2971213C (en) 2014-12-19 2023-09-26 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for targeted genetic modification through single-step multiple targeting

Also Published As

Publication number Publication date
RU2763320C2 (ru) 2021-12-28
KR102482103B1 (ko) 2022-12-28
JP2019501660A (ja) 2019-01-24
AU2017206785C1 (en) 2023-09-07
CA3011359A1 (en) 2017-07-20
SG10201914034WA (en) 2020-03-30
CN108777951B (zh) 2021-11-05
KR20180108652A (ko) 2018-10-04
BR112018014250A2 (pt) 2018-12-18
JP2021101738A (ja) 2021-07-15
MX2018008701A (es) 2019-06-06
AU2017206785A1 (en) 2018-08-02
WO2017123804A1 (en) 2017-07-20
JP2023024619A (ja) 2023-02-16
CN108777951A (zh) 2018-11-09
KR20230006929A (ko) 2023-01-11
IL260526A (ru) 2018-08-30
EP4257599A2 (en) 2023-10-11
JP6979955B2 (ja) 2021-12-15
US20220174920A1 (en) 2022-06-09
EP4257599A3 (en) 2024-01-17
WO2017123804A9 (en) 2017-08-17
AU2017206785B2 (en) 2023-03-16
AU2023201372A1 (en) 2023-04-06
SG11201805973WA (en) 2018-08-30
US20190037816A1 (en) 2019-02-07
IL260526B2 (en) 2023-10-01
RU2018129169A3 (ru) 2020-05-25
IL302725A (en) 2023-07-01
EP3402326A1 (en) 2018-11-21
JP2024091951A (ja) 2024-07-05
IL260526B1 (en) 2023-06-01
CN114128676A (zh) 2022-03-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2018138047A5 (ru)
RU2019112589A (ru) Отличные от человека животные со сконструированным локусом легкой лямбда-цепи иммуноглобулина
JP2016512034A5 (ru)
RU2014153673A (ru) Гуманизированные не относящиеся к человеку животные с ограниченными локусами тяжелой цепи иммуноглобулина
RU2014133653A (ru) Гуманизированные грызуны, которые экспрессируют тяжелые цепи, содержащие домены vl
JP2017509355A5 (ru)
JP2020530760A5 (ru)
JP2015525071A5 (ru)
RU2015143110A (ru) Мыши, экспрессирующие ограниченный репертуар легких цепей иммуноглобулина
RU2016141307A (ru) Отличные от человека животные, которые вырабатывают однодоменные связывающие белки
RU2018119366A (ru) Мыши с гуманизированной легкой цепью
SI2840892T1 (en) Animals other than humans with modified immunoglobulin heavy chain sequences
JP2021137030A5 (ru)
RU2019121863A (ru) Антитела со встроенным в легкие цепи гистидином и генетически модифицированные отличные от человека животные для их получения
CA2532117A1 (en) Humanized immunoglobulin loci
JP2010529042A5 (ru)
JP2015505477A5 (ru)
JP2015502177A5 (ru)
RU2011129459A (ru) Трансгенные животные (не человек), экспрессирующие гуманизированные антитела, и их применение
JP2020503885A5 (ru)
JP2014110814A5 (ru)
JP2015510767A5 (ru)
RU2015147726A (ru) Мышь с общей легкой цепью
RU2017106292A (ru) Мыши, у которых вырабатываются связывающие белки, содержащие vl-домены
RU2014153674A (ru) Способ получения полностью человеческих биспецифических антител с применением общей легкой цепи