RU2017101673A - Способ получения ацетоина - Google Patents
Способ получения ацетоина Download PDFInfo
- Publication number
- RU2017101673A RU2017101673A RU2017101673A RU2017101673A RU2017101673A RU 2017101673 A RU2017101673 A RU 2017101673A RU 2017101673 A RU2017101673 A RU 2017101673A RU 2017101673 A RU2017101673 A RU 2017101673A RU 2017101673 A RU2017101673 A RU 2017101673A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- gene
- nucleic acid
- recombinant yeast
- sequence
- als
- Prior art date
Links
- ROWKJAVDOGWPAT-UHFFFAOYSA-N Acetoin Chemical compound CC(O)C(C)=O ROWKJAVDOGWPAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims 8
- GFAZHVHNLUBROE-UHFFFAOYSA-N hydroxymethyl propionaldehyde Natural products CCC(=O)CO GFAZHVHNLUBROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims 40
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims 29
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims 29
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims 26
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims 26
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims 12
- 108010000700 Acetolactate synthase Proteins 0.000 claims 9
- 108700007698 Genetic Terminator Regions Proteins 0.000 claims 8
- 108010007843 NADH oxidase Proteins 0.000 claims 8
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims 8
- 108010084631 acetolactate decarboxylase Proteins 0.000 claims 7
- 238000013518 transcription Methods 0.000 claims 5
- 230000035897 transcription Effects 0.000 claims 5
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 claims 5
- 108010011939 Pyruvate Decarboxylase Proteins 0.000 claims 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims 4
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims 3
- 101100028920 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) cfp gene Proteins 0.000 claims 2
- 101150108656 Prom2 gene Proteins 0.000 claims 2
- FUSUHKVFWTUUBE-UHFFFAOYSA-N buten-2-one Chemical compound CC(=O)C=C FUSUHKVFWTUUBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims 2
- 238000000034 method Methods 0.000 claims 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 claims 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims 1
- 101150034686 PDC gene Proteins 0.000 claims 1
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 claims 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims 1
- 101150050575 URA3 gene Proteins 0.000 claims 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y106/00—Oxidoreductases acting on NADH or NADPH (1.6)
- C12Y106/03—Oxidoreductases acting on NADH or NADPH (1.6) with oxygen as acceptor (1.6.3)
- C12Y106/03001—NAD(P)H oxidase (1.6.3.1), i.e. NOX1
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/52—Genes encoding for enzymes or proenzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/80—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for fungi
- C12N15/81—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for fungi for yeasts
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
- C12N9/0006—Oxidoreductases (1.) acting on CH-OH groups as donors (1.1)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
- C12N9/0012—Oxidoreductases (1.) acting on nitrogen containing compounds as donors (1.4, 1.5, 1.6, 1.7)
- C12N9/0036—Oxidoreductases (1.) acting on nitrogen containing compounds as donors (1.4, 1.5, 1.6, 1.7) acting on NADH or NADPH (1.6)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/1022—Transferases (2.) transferring aldehyde or ketonic groups (2.2)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/88—Lyases (4.)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/02—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group
- C12P7/04—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group acyclic
- C12P7/16—Butanols
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/02—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group
- C12P7/04—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group acyclic
- C12P7/18—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group acyclic polyhydric
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/24—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carbonyl group
- C12P7/26—Ketones
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y202/00—Transferases transferring aldehyde or ketonic groups (2.2)
- C12Y202/01—Transketolases and transaldolases (2.2.1)
- C12Y202/01006—Acetolactate synthase (2.2.1.6)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y401/00—Carbon-carbon lyases (4.1)
- C12Y401/01—Carboxy-lyases (4.1.1)
- C12Y401/01001—Pyruvate decarboxylase (4.1.1.1)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y401/00—Carbon-carbon lyases (4.1)
- C12Y401/01—Carboxy-lyases (4.1.1)
- C12Y401/01005—Acetolactate decarboxylase (4.1.1.5)
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02E—REDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
- Y02E50/00—Technologies for the production of fuel of non-fossil origin
- Y02E50/10—Biofuels, e.g. bio-diesel
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Mycology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Claims (68)
1. Рекомбинантные дрожжи, имеющие пониженную активность пируватдекарбоксилазы, в геном которых вставлена:
- одна или более нуклеиновых кислот, кодирующих ацетолактатсинтазу или ALS,
- одна или более нуклеиновых кислот, кодирующих ацетолактатдекарбоксилазу или ALD, и
- одна или более копий нуклеиновых кислот, кодирующих NADH-оксидазу или NOXE.
2. Рекомбинантные дрожжи по п. 1, отличающиеся тем, что указанные рекомбинантные дрожжи включают одну или более ДНК-конструкций, выбранных из группы, включающей следующие формулы:
(I) 5'-[ген 1]х1-3' и 5'-[ген 2]х2-3' и 5'-[ген 3]х3-3',
(II) 5'-[ген 1]x1-[ген 2]х2-3' и 5'-[ген 3]х3-3',
(III) 5'-[ген 1]х1-[ген 2]х2-[ген 3]х3-3', и
их комбинацию, где:
- "ген 1" обозначает нуклеиновую кислоту, выбранную из группы, включающей ALS, ALD или NOXE;
- "ген 2" обозначает нуклеиновую кислоту, выбранную из группы, включающей ALS, ALD или NOXE, но отличающуюся от гена 1;
- "ген 3" обозначает нуклеиновую кислоту, выбранную из группы, включающей ALS, ALD или NOXE, но отличающуюся от генов 1 и 2;
- "ALS" представляет собой нуклеиновую кислоту, кодирующую ацетолактатсинтазу;
- "ALD" представляет собой нуклеиновую кислоту, кодирующую ацетолактатдекарбоксилазу;
- "NOXE" представляет собой нуклеиновую кислоту, кодирующую NADH-оксидазу;
- каждое из "х1", "х2" и "х3" независимо друг от друга представляет собой целое число в диапазоне от 0 до 50, предпочтительно от 0 до 20, и,
при условии, что указанные рекомбинантные дрожжи включают по меньшей мере одну нуклеиновую кислоту, кодирующую каждую из ALS, ALD и NOXE.
3. Рекомбинантные дрожжи по п. 2, отличающиеся тем, что указанные рекомбинантные дрожжи включают по меньшей мере одну ДНК-конструкцию формулы (II), где "ген 3" обозначает нуклеиновую кислоту, кодирующую NADH-оксидазу.
4. Рекомбинантные дрожжи по п. 2, отличающиеся тем, что указанные рекомбинантные дрожжи включают по меньшей мере одну, предпочтительно по меньшей мере две ДНК-конструкции формулы (IIa), идентичные или отличающиеся, причем каждая формула (IIa) имеет следующую формулу:
(IIа) 5'-[(пром5)y1-ген 1-терм5]х5-[пром1-ген 1-терм1]х1-[пром2-ген 2-(терм2)z1]х2-3' и 5'-[(пром3)у2-ген 3-(терм3)z2]х3-3',
где:
- ген 1, ген 2 и ген 3 являются такими, как определено в п. 2 или 3, и "х1", "х2" и "х3" являются такими, как определено в п. 2;
- "х5" представляет собой целое число, равное 0 или 1;
- "у1", "у2", "z1" и "z2", каждое независимо от других представляет собой целое число, равное 0 или 1;
- когда указанные рекомбинантные дрожжи включают по меньшей мере две ДНК-конструкции формулы (IIa), то "х1", "х2", "х3", "х5", "у1", "у2", "z1" и "z2" могут быть идентичными или отличающимися;
- "пром1" представляет собой регуляторную последовательность, которая контролирует экспрессию последовательности, кодирующей ген 1;
- "пром2" представляет собой регуляторную последовательность, которая контролирует экспрессию последовательности, кодирующей ген 2;
- "пром3" представляет собой регуляторную последовательность, которая контролирует экспрессию последовательности, кодирующей ген 3;
- "пром5" представляет собой регуляторную последовательность, которая контролирует экспрессию гена 1, причем указанный пром5 является идентичным или отличающимся от пром1;
- "терм1" представляет собой последовательность терминатора транскрипции, который прекращает экспрессию последовательности, кодирующей ген 1;
- "терм2" представляет собой последовательность терминатора транскрипции, который прекращает экспрессию последовательности, кодирующей ген 2;
- "терм3" представляет собой последовательность терминатора транскрипции, который прекращает экспрессию последовательности, кодирующей ген 3;
- "терм5" представляет собой последовательность терминатора транскрипции, который прекращает экспрессию гена 1, причем указанный терм5 является идентичным или отличающимся от терм1.
5. Рекомбинантные дрожжи по п. 2, отличающиеся тем, что указанные рекомбинантные дрожжи включают по меньшей мере одну, предпочтительно по меньшей мере две ДНК-конструкции формулы (IIb), идентичные или отличающиеся, причем каждая формула (IIb) имеет следующую формулу:
(IIb) 5'-[(пром5)y1-ALS-терм5]x5-[пром1-ALS-терм1]x1-[пром2-ALD-(терм2)z1]х2-3' и 5'-[(пром3)y2-NOXE-(терм3)z2]х3-3',
где:
- ALS, ALD и NOXE являются такими, как определено в любом из пп. 1-4; "х1", "х2" и "х3" являются такими, как определено в п. 2; и "х5" и "у1", "у2", "z1" и "z2" являются такими, как определено в п. 4;
- когда указанные рекомбинантные дрожжи включают по меньшей мере две ДНК-конструкции формулы (IIb), то "х1", "х2", "х3", "х5", "у1", "у2", "z1" и "z2" могут быть идентичными или отличающимися;
- "пром1" представляет собой регуляторную последовательность, которая контролирует экспрессию последовательности, кодирующей ацетолактатсинтазу;
- "пром2" представляет собой регуляторную последовательность, которая контролирует экспрессию последовательности, кодирующей ацетолактатдекарбоксилазу;
- "пром3" представляет собой регуляторную последовательность, которая контролирует экспрессию последовательности, кодирующей NADH-оксидазу;
- "пром5" представляет собой регуляторную последовательность, которая контролирует экспрессию последовательности, кодирующей ацетолактатсинтазу, причем указанный пром5 является идентичным или отличающимся от пром1;
- "терм1" представляет собой последовательность терминатора транскрипции, который прекращает экспрессию последовательности, кодирующей ацетолактатсинтазу;
- "терм2" представляет собой последовательность терминатора транскрипции, который прекращает экспрессию последовательности, кодирующей ацетолактатдекарбоксилазу;
- "терм3" представляет собой последовательность терминатора транскрипции, который прекращает экспрессию последовательности, кодирующей NADH-оксидазу; и
- "терм5" представляет собой последовательность терминатора транскрипции, который прекращает экспрессию последовательности, кодирующей ацетолактатсинтазу, причем указанный терм5 является идентичным или отличающимся от терм1.
6. Рекомбинантные дрожжи по п. 2, отличающиеся тем, что рекомбинантные дрожжи включают по меньшей мере две ДНК-конструкции формулы (II), (IIa) или (IIb), при условии, что все копии нуклеиновой кислоты NOXE расположены в одной из по меньшей мере двух ДНК-конструкций формулы (II), (IIa) или (IIb).
7. Рекомбинантные дрожжи по п. 2, отличающиеся тем, что указанные рекомбинантные дрожжи включают по меньшей мере две, предпочтительно строго две ДНК-конструкции следующих формул (IIc) и (IId):
(IIc) 5'-[(пром5)y1-ALS-терм5]x5-[пром1-ALS-терм1]x1-[пром2-ALD-(терм2)z1]х2-3' и 5'-[(пром3)y2-NOXE-(терм3)z2]х6-3'; и
(IId) 5'-[(пром5)y1-ALS-терм5]x5-[пром1-ALS-терм1]x1-[пром2-ALD-(терм2)z1]х2-3' и 5'-[(пром3)y2-NOXE-(терм3)z2]x7-3',
где:
- ALS, ALD и NOXE являются такими как определено в любом из пп. 1-6, "пром1", "пром2", "пром3", "пром5", "терм1", "терм2", "терм3" и "терм5" являются такими, как определено в п. 4 или 5; "х1", "х2" и "х3" являются такими, как определено в п. 2; и "х5", "у1", "у2", "z1" и "z2" являются такими, как определено в п. 4;
- "х1"-"х3", "х5", "у1", "у2", "z1" и "z2" для каждой из формул (IIc) и (IId) являются идентичными или отличающимися; и
- "х6" и "х7" представляют собой целые числа от 0 до 50, предпочтительно от 0 до 20, предпочтительно от 0 до 12, более конкретно от 2 до 5, предпочтительно от 3 до 4, а еще лучше равные 3, при условии, что одно из "х6" и "х7" представляет собой 0.
8. Рекомбинантные дрожжи по п. 1, отличающиеся тем, что нуклеиновая(ые) кислота(ы), кодирующая(ие) ацетолактатсинтазу или ALS, представляет/представляют собой нуклеиновую(ые) кислоту(ы), выбранную(ые) из группы, состоящей из последовательностей, имеющих по меньшей мере 65%, предпочтительно по меньшей мере 80% идентичность нуклеиновых кислот с последовательностями нуклеиновых кислот SEQ ID NO: 1, 3 и 5.
9. Рекомбинантные дрожжи по п. 1, отличающиеся тем, что нуклеиновая(ые) кислота(ы), кодирующая(ие) ацетолактатдекарбоксилазу или ALD, представляет/представляют собой нуклеиновую(ые) кислоту(ы), выбранную(ые) из группы, состоящей из последовательностей, имеющих по меньшей мере 36%, предпочтительно по меньшей мере 80% идентичность нуклеиновых кислот с последовательностями нуклеиновых кислот SEQ ID NO: 7, 9 и 11.
10. Рекомбинантные дрожжи по п. 1, отличающиеся тем, что нуклеиновая кислота(ы), кодирующая(ие) NADH-оксидазу или NOXE, представляет/представляют собой нуклеиновую(ые) кислоту(ы), выбранную(ые) из группы, состоящей из последовательностей, имеющих по меньшей мере 78%, предпочтительно по меньшей мере 80% идентичность нуклеиновых кислот с последовательностями нуклеиновых кислот SEQ ID NO: 21, 23, 25 и 27.
11. Рекомбинантные дрожжи по п. 1, отличающиеся тем, что каждая из нуклеиновых кислот, кодирующих ацетолактатсинтазу, ацетолактатдекарбоксилазу и NADH-оксидазу, находится под контролем промотора, идентичного или отличающегося, причем указанные промоторы характеризуются последовательностью нуклеиновых кислот, выбранной из группы, состоящей из последовательностей, имеющих по меньшей мере 80% идентичность нуклеиновых кислот с последовательностями нуклеиновых кислот SEQ ID NO: 29-39, 49 и 50.
12. Рекомбинантные дрожжи по п. 1, отличающиеся тем, что каждая из нуклеиновых кислот, кодирующих ацетолактатсинтазу, ацетолактатдекарбоксилазу и NADH-оксидазу, находится под контролем терминатора транскрипции, идентичного или отличающегося, причем указанные терминаторы транскрипции характеризуются последовательностью нуклеиновых кислот, выбранной из группы, состоящей из последовательностей, имеющих по меньшей мере 80% идентичность нуклеиновых кислот с последовательностью нуклеиновых кислот SEQ ID NO: 40-48.
13. Рекомбинантные дрожжи по п. 1, отличающиеся тем, что активность пируватдекарбоксилазы снижают при помощи разрушения по меньшей мере одного гена pdc.
14. Рекомбинантные дрожжи по п. 1, отличающиеся тем, что когда рекомбинантные дрожжи принадлежат к роду Saccharomyces, то активность пируватдекарбоксилазы снижают при помощи разрушения по меньшей мере двух генов pdc, предпочтительно выбранных из группы, состоящей из pdc1, pdc5, pdc6 и их комбинации, и более конкретно, из группы, состоящей из pdc1 и pdc6.
15. Рекомбинантные дрожжи по п. 13 или 14, отличающиеся тем, что активность пируватдекарбоксилазы снижают при введении по меньшей мере одной ДНК-конструкции(ий), выбранной из группы, включающей формулы (I)-(III), и, предпочтительно по меньшей мере одной из указанных ДНК-конструкции(ий), включающих только по меньшей мере одну нуклеиновую кислоту(ы), кодирующую ALS и/или ALD.
16. Рекомбинантные дрожжи по любому из пп. 2-14, отличающиеся тем, что ДНК-конструкция(ии), выбранная(ые) из группы, включающей формулы (I)-(III), включающие по меньшей мере ген(ы) NOXE, вставлена/вставлены в эндогенный ген URA3 указанных рекомбинантных дрожжей.
17. Применение рекомбинантных дрожжей, таких как определено по любому из пп. 1-16, для получения ацетоина и/или его производных, в частности метилвинилкетона.
18. Способ получения ацетоина, причем указанный способ включает стадии:
(а) культивирования рекомбинантных дрожжей, таких как определено по любому из пп. 1-16, в подходящей культуральной среде; и
(с) выделения ацетоина.
19. Способ по п. 18, отличающийся тем, что указанная культуральная среда включает источник углерода, предпочтительно выбранный из группы, включающей глюкозу и сахарозу.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP14306205.7 | 2014-07-25 | ||
| EP14306205 | 2014-07-25 | ||
| PCT/EP2015/066927 WO2016012561A1 (en) | 2014-07-25 | 2015-07-23 | Method for producing acetoin |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2017101673A true RU2017101673A (ru) | 2018-08-30 |
| RU2017101673A3 RU2017101673A3 (ru) | 2018-12-06 |
| RU2686614C2 RU2686614C2 (ru) | 2019-04-29 |
Family
ID=51263347
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017101673A RU2686614C2 (ru) | 2014-07-25 | 2015-07-23 | Способ получения ацетоина |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US10301655B2 (ru) |
| EP (1) | EP3172313A1 (ru) |
| JP (2) | JP6847036B2 (ru) |
| KR (1) | KR102281701B1 (ru) |
| CN (1) | CN106715679B (ru) |
| AU (1) | AU2015293864B2 (ru) |
| CA (1) | CA2956184C (ru) |
| IL (1) | IL250099B (ru) |
| NZ (1) | NZ728287A (ru) |
| RU (1) | RU2686614C2 (ru) |
| WO (1) | WO2016012561A1 (ru) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106967741B (zh) * | 2017-04-03 | 2020-02-21 | 天津大学 | 一种体外酶反应生产l(+)-乙偶姻的方法 |
| CN107177620B (zh) * | 2017-06-28 | 2020-12-18 | 南宁中诺生物工程有限责任公司 | 一种利用廉价原料生产四甲基吡嗪的方法 |
| EP3428282A1 (en) * | 2017-07-11 | 2019-01-16 | Alderys | Ectoine-producing yeast |
| WO2019011946A1 (en) * | 2017-07-11 | 2019-01-17 | Adisseo France S.A.S. | YEAST PRODUCING THREONINE |
| CN107955805B (zh) * | 2017-12-13 | 2020-03-06 | 江南大学 | 一种稳定性提高的nadh氧化酶及其在乙偶姻生产中的应用 |
| WO2019124782A2 (ko) * | 2017-12-20 | 2019-06-27 | 건국대학교 산학협력단 | 에탄올에서 아세토인, 부탄디올 또는 부탄올의 생산방법 |
| US11441142B2 (en) | 2017-12-20 | 2022-09-13 | Konkuk University Industrial Cooperation Corporation | FLS variant having increased activity |
| CN109370958A (zh) * | 2018-12-12 | 2019-02-22 | 佛山市海天(高明)调味食品有限公司 | 一株增加酱油中3-羟基-2-丁酮含量的植物乳杆菌及其应用 |
| CN110257442A (zh) * | 2019-06-03 | 2019-09-20 | 苏州凯祥生物科技有限公司 | 一种含混合糖浆香料的特异糖原培养基、制备方法及应用 |
| CN116287028A (zh) * | 2023-03-10 | 2023-06-23 | 天津大学 | 一种生物酶法利用甲醛合成乙偶姻的方法 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU777059A1 (ru) * | 1978-12-06 | 1980-11-07 | Институт Биохимии И Физиологии Микроорганизмов Ан Ссср | Способ выделени ацетоина |
| FR2887258B1 (fr) * | 2005-06-17 | 2007-09-21 | Agronomique Inst Nat Rech | Souches de levures saccharomyces transformees presentant une production d'ethanol reduite par fermentation |
| US8652817B2 (en) * | 2005-07-01 | 2014-02-18 | Univeristy Of Florida Research Foundation, Inc. | Recombinant host cells and media for ethanol production |
| FR2916000B1 (fr) * | 2007-05-07 | 2013-07-05 | Lallemand Sas | Moyens pour reduire l'accumulation d'acetoine dans des milieux de fermentation alcoolique |
| BR112012006939A2 (pt) * | 2009-09-29 | 2015-09-08 | Butamax Tm Advanced Biofuels | célula hospedeira de produção de levedura recombinante e método para a produção de um produto selecionado do grupo que consiste em 2,3-butanodiol, isobutanol, 2-butanol, 1-butanol, 2-butanona, valina, leucina, ácido lático, ácido málico, álcool, isoampilico e isoprenoides |
| WO2013076144A2 (en) * | 2011-11-21 | 2013-05-30 | Metabolic Explorer | Microorganism strains for the production of 2,3-butanediol |
-
2015
- 2015-07-23 AU AU2015293864A patent/AU2015293864B2/en active Active
- 2015-07-23 CN CN201580052256.XA patent/CN106715679B/zh active Active
- 2015-07-23 US US15/327,207 patent/US10301655B2/en active Active
- 2015-07-23 JP JP2017524104A patent/JP6847036B2/ja active Active
- 2015-07-23 KR KR1020177005199A patent/KR102281701B1/ko active IP Right Grant
- 2015-07-23 RU RU2017101673A patent/RU2686614C2/ru active
- 2015-07-23 WO PCT/EP2015/066927 patent/WO2016012561A1/en active Application Filing
- 2015-07-23 EP EP15749744.7A patent/EP3172313A1/en active Pending
- 2015-07-23 NZ NZ728287A patent/NZ728287A/en unknown
- 2015-07-23 CA CA2956184A patent/CA2956184C/en active Active
-
2017
- 2017-01-15 IL IL250099A patent/IL250099B/en unknown
-
2020
- 2020-08-13 JP JP2020136738A patent/JP2020195384A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2020195384A (ja) | 2020-12-10 |
| JP6847036B2 (ja) | 2021-03-24 |
| CA2956184A1 (en) | 2016-01-28 |
| EP3172313A1 (en) | 2017-05-31 |
| AU2015293864B2 (en) | 2019-07-11 |
| NZ728287A (en) | 2019-01-25 |
| IL250099B (en) | 2021-12-01 |
| CN106715679A (zh) | 2017-05-24 |
| IL250099A0 (en) | 2017-08-31 |
| US10301655B2 (en) | 2019-05-28 |
| RU2017101673A3 (ru) | 2018-12-06 |
| AU2015293864A1 (en) | 2017-02-02 |
| CN106715679B (zh) | 2021-07-02 |
| RU2686614C2 (ru) | 2019-04-29 |
| US20170159081A1 (en) | 2017-06-08 |
| CA2956184C (en) | 2021-10-19 |
| KR20170041768A (ko) | 2017-04-17 |
| KR102281701B1 (ko) | 2021-07-23 |
| BR112017001542A2 (pt) | 2018-01-30 |
| JP2017525388A (ja) | 2017-09-07 |
| WO2016012561A1 (en) | 2016-01-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2017101673A (ru) | Способ получения ацетоина | |
| Xue et al. | Prospective and development of butanol as an advanced biofuel | |
| JP5442441B2 (ja) | ｎ−ブタノールを高収量で生物学的に製造する方法 | |
| RU2006129295A (ru) | Эволюционирующие микроорганизмы для получения 1,2-пропандиола | |
| JP2012501678A5 (ru) | ||
| RU2012103038A (ru) | Введение днк в растительные клетки | |
| JP2010142240A5 (ru) | ||
| JP2010526542A5 (ru) | ||
| RU2008101367A (ru) | Способы и композиции для экспрессии отрицательной смысловой вирусной рнк в собачьих клетках | |
| JP2014530626A5 (ru) | ||
| JP6448682B2 (ja) | アルデヒドおよび対応するアルコールの微生物合成 | |
| JP2013500722A5 (ru) | ||
| JP2021171060A (ja) | グリセロール生成が抑制された組換え耐酸性酵母及びこれを用いた乳酸の製造方法 | |
| Helalat et al. | Producing alcohol and salt stress tolerant strain of Saccharomyces cerevisiae by heterologous expression of pprI gene | |
| RU2016111682A (ru) | Модифицированный микроорганизм для улучшенного получения аланина | |
| Wang et al. | Heat shock treatment improves Trametes versicolor laccase production | |
| CN107828788B (zh) | 一种PRRSV感染相关的lncRNA及其siRNA在抑制病毒复制中的应用 | |
| WO2017000870A1 (zh) | 一种乳酸脱氢酶人源化酿酒酵母及其构建方法 | |
| AR092218A1 (es) | Cepas de levadura modificadas para producir etanol a partir de acetato | |
| US9434963B2 (en) | Process for butanol production | |
| JP2011504741A5 (ru) | ||
| KR101677231B1 (ko) | 무혈청배지（serum free medium）를 이용한 메갈로사이티바이러스의 효율적 제조방법 | |
| JP6392534B2 (ja) | ロイシン酸生産活性を有するタンパク質及びその利用 | |
| Meena et al. | Biocatalytic route for the synthesis of active pharmaceutical diol: A greener approach | |
| CN114107517B (zh) | 一种与猪流感病毒抗性相关的snp标记及其应用 |