RU2012117576A - Инсектицидные белки - Google Patents
Инсектицидные белки Download PDFInfo
- Publication number
- RU2012117576A RU2012117576A RU2012117576/10A RU2012117576A RU2012117576A RU 2012117576 A RU2012117576 A RU 2012117576A RU 2012117576/10 A RU2012117576/10 A RU 2012117576/10A RU 2012117576 A RU2012117576 A RU 2012117576A RU 2012117576 A RU2012117576 A RU 2012117576A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- protein
- ecrylba
- seq
- plant
- crylba
- Prior art date
Links
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims abstract 72
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims abstract 66
- 230000000749 insecticidal effect Effects 0.000 title claims abstract 7
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract 42
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims abstract 18
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 claims abstract 16
- 241001147398 Ostrinia nubilalis Species 0.000 claims abstract 13
- 241000255777 Lepidoptera Species 0.000 claims abstract 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract 5
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims 50
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims 29
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims 27
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims 25
- 238000000034 method Methods 0.000 claims 16
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 claims 13
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims 11
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims 11
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims 11
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims 9
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims 9
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims 8
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims 7
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims 7
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 claims 6
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims 6
- 244000299507 Gossypium hirsutum Species 0.000 claims 6
- 235000014676 Phragmites communis Nutrition 0.000 claims 5
- 241000625753 Anticarsia Species 0.000 claims 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- 240000000111 Saccharum officinarum Species 0.000 claims 3
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 claims 3
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims 2
- 241000219310 Beta vulgaris subsp. vulgaris Species 0.000 claims 2
- 240000002791 Brassica napus Species 0.000 claims 2
- 235000006008 Brassica napus var napus Nutrition 0.000 claims 2
- 240000007124 Brassica oleracea Species 0.000 claims 2
- 235000003899 Brassica oleracea var acephala Nutrition 0.000 claims 2
- 235000011301 Brassica oleracea var capitata Nutrition 0.000 claims 2
- 235000001169 Brassica oleracea var oleracea Nutrition 0.000 claims 2
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims 2
- 235000003222 Helianthus annuus Nutrition 0.000 claims 2
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 claims 2
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 claims 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 claims 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims 2
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 claims 2
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 claims 2
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 claims 2
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 claims 2
- 235000007201 Saccharum officinarum Nutrition 0.000 claims 2
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 claims 2
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 claims 2
- 235000021536 Sugar beet Nutrition 0.000 claims 2
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 claims 2
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 claims 2
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 claims 2
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 claims 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims 2
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 claims 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 claims 2
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 claims 2
- 241000589158 Agrobacterium Species 0.000 claims 1
- 101710187578 Alcohol dehydrogenase 1 Proteins 0.000 claims 1
- 102100034035 Alcohol dehydrogenase 1A Human genes 0.000 claims 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 claims 1
- 241000209763 Avena sativa Species 0.000 claims 1
- 235000007558 Avena sp Nutrition 0.000 claims 1
- 241000193755 Bacillus cereus Species 0.000 claims 1
- 241000194107 Bacillus megaterium Species 0.000 claims 1
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 claims 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 claims 1
- 241000193388 Bacillus thuringiensis Species 0.000 claims 1
- 101000981883 Brevibacillus parabrevis ATP-dependent tryptophan/phenylalanine/tyrosine adenylase Proteins 0.000 claims 1
- 101000981889 Brevibacillus parabrevis Linear gramicidin-PCP reductase Proteins 0.000 claims 1
- 101000906861 Chondromyces crocatus ATP-dependent tyrosine adenylase Proteins 0.000 claims 1
- 241001057636 Dracaena deremensis Species 0.000 claims 1
- 241000701832 Enterobacteria phage T3 Species 0.000 claims 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims 1
- 102000002812 Heat-Shock Proteins Human genes 0.000 claims 1
- 108010004889 Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 claims 1
- 241000208818 Helianthus Species 0.000 claims 1
- 244000020551 Helianthus annuus Species 0.000 claims 1
- 102000004195 Isomerases Human genes 0.000 claims 1
- 108090000769 Isomerases Proteins 0.000 claims 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 claims 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims 1
- 108091026898 Leader sequence (mRNA) Proteins 0.000 claims 1
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 claims 1
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 claims 1
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 claims 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims 1
- 101710091688 Patatin Proteins 0.000 claims 1
- 240000007377 Petunia x hybrida Species 0.000 claims 1
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 claims 1
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 claims 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 claims 1
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 claims 1
- 240000006394 Sorghum bicolor Species 0.000 claims 1
- 235000011684 Sorghum saccharatum Nutrition 0.000 claims 1
- 108010043934 Sucrose synthase Proteins 0.000 claims 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 102000044159 Ubiquitin Human genes 0.000 claims 1
- 108090000848 Ubiquitin Proteins 0.000 claims 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims 1
- 241001520823 Zoysia Species 0.000 claims 1
- 210000004507 artificial chromosome Anatomy 0.000 claims 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 claims 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 claims 1
- 229940097012 bacillus thuringiensis Drugs 0.000 claims 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims 1
- 235000005513 chalcones Nutrition 0.000 claims 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000002523 lectin Substances 0.000 claims 1
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 claims 1
- -1 mtl Proteins 0.000 claims 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims 1
- 125000000430 tryptophan group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C12 0.000 claims 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 claims 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 claims 1
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 abstract 4
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/32—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Bacillus (G)
- C07K14/325—Bacillus thuringiensis crystal peptides, i.e. delta-endotoxins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H5/00—Angiosperms, i.e. flowering plants, characterised by their plant parts; Angiosperms characterised otherwise than by their botanic taxonomy
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N47/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom not being member of a ring and having no bond to a carbon or hydrogen atom, e.g. derivatives of carbonic acid
- A01N47/40—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom not being member of a ring and having no bond to a carbon or hydrogen atom, e.g. derivatives of carbonic acid the carbon atom having a double or triple bond to nitrogen, e.g. cyanates, cyanamides
- A01N47/42—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom not being member of a ring and having no bond to a carbon or hydrogen atom, e.g. derivatives of carbonic acid the carbon atom having a double or triple bond to nitrogen, e.g. cyanates, cyanamides containing —N=CX2 groups, e.g. isothiourea
- A01N47/44—Guanidine; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
- C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
- C12N15/8279—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance
- C12N15/8286—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance for insect resistance
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
- Y02A40/10—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in agriculture
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
- Y02A40/10—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in agriculture
- Y02A40/146—Genetically Modified [GMO] plants, e.g. transgenic plants
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Insects & Arthropods (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Physiology (AREA)
- Botany (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Catching Or Destruction (AREA)
Abstract
1. Сконструированный белок CrylBa (eCrylBa), содержащий мутацию в одном или нескольких положениях аминокислот в домене I, где указанный сконструированный белок имеет улучшенную растворимость или инсектицидную активность в отношении по меньшей мере кукурузного мотылька (Ostrinia nubilalis) по сравнению с нативным белком CrylBa или белком CrylBa дикого типа.2. Белок eCrylBa по п.1, где мутация расположена в альфа-спирали 4 или альфа-спирали 5 домена I.3. Белок eCrylBa по п.2, где мутация имеет место в положении аминокислоты, соответствующем положению 150, 178, 189 или 199 в SEQ ID NO:2.4. Белок eCrylBa по п.3, где мутация имеет место в положении 150, 178, 189 или 199 SEQ ID в NO:5.5. Белок eCrylBa по п.4, где мутация имеет место в положении, соответствующем аминокислотам 2 и 150; или аминокислотам 2, 150 и 178; или аминокислотам 2, 150 и 189; или аминокислотам 2, 150 и 199 в SEQ ID NO:5.6. Белок eCrylBa по п.5, где мутация имеет место по аминокислотам 2 и 150; или аминокислотам 2, 150 и 178; или аминокислотам 2,150 и 189; или аминокислотам 2, 150 и 199 в SEQ ID NO:5.7. Белок eCrylBa по п.6, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:6, где X в положении 2 представляет собой любую аминокислоту иa) Х в положении 150 представляет собой Pro, Phe, Trp или Lys, и X в положении 189 представляет собой Leu, и 199 представляет собой Ser; илиb) Х в положении 189 представляет собой Ser, когда Х в положении 150 представляет собой Lys; илиc) Х в положении 199 представляет собой Lys, когда Х в положении 150 представляет собой Lys.8. Белок eCrylBa по п.7, где белок содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:9 или SEQ ID NO:10.9. Белок eCrylBa по любому одному из пп.1-8, где белок обладает активностью в отношении чешуекрылых или жесткокрылых насекомых.10. Белок eCrylBa по п.9, где чешуекрылые насе�
Claims (59)
1. Сконструированный белок CrylBa (eCrylBa), содержащий мутацию в одном или нескольких положениях аминокислот в домене I, где указанный сконструированный белок имеет улучшенную растворимость или инсектицидную активность в отношении по меньшей мере кукурузного мотылька (Ostrinia nubilalis) по сравнению с нативным белком CrylBa или белком CrylBa дикого типа.
2. Белок eCrylBa по п.1, где мутация расположена в альфа-спирали 4 или альфа-спирали 5 домена I.
3. Белок eCrylBa по п.2, где мутация имеет место в положении аминокислоты, соответствующем положению 150, 178, 189 или 199 в SEQ ID NO:2.
4. Белок eCrylBa по п.3, где мутация имеет место в положении 150, 178, 189 или 199 SEQ ID в NO:5.
5. Белок eCrylBa по п.4, где мутация имеет место в положении, соответствующем аминокислотам 2 и 150; или аминокислотам 2, 150 и 178; или аминокислотам 2, 150 и 189; или аминокислотам 2, 150 и 199 в SEQ ID NO:5.
6. Белок eCrylBa по п.5, где мутация имеет место по аминокислотам 2 и 150; или аминокислотам 2, 150 и 178; или аминокислотам 2,150 и 189; или аминокислотам 2, 150 и 199 в SEQ ID NO:5.
7. Белок eCrylBa по п.6, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:6, где X в положении 2 представляет собой любую аминокислоту и
a) Х в положении 150 представляет собой Pro, Phe, Trp или Lys, и X в положении 189 представляет собой Leu, и 199 представляет собой Ser; или
b) Х в положении 189 представляет собой Ser, когда Х в положении 150 представляет собой Lys; или
c) Х в положении 199 представляет собой Lys, когда Х в положении 150 представляет собой Lys.
8. Белок eCrylBa по п.7, где белок содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:9 или SEQ ID NO:10.
9. Белок eCrylBa по любому одному из пп.1-8, где белок обладает активностью в отношении чешуекрылых или жесткокрылых насекомых.
10. Белок eCrylBa по п.9, где чешуекрылые насекомые представляют собой кукурузную юго-западную огневку, тростниковую огневку, хлопковую совку, соевую совку и гусеницу совки рода Anticarsia.
11. Белок eCrylBa по п.1, где специфическая активность указанного белка eCrylBa по меньшей мере в 3 раза выше, чем у нативного белка CrylBa.
12. Вариантный белок CrylBa, где тирозин (Y) или гистидин (Н) в положении 150 замещен на аминокислоту, отличную от Y или Н.
13. Белок CrylBa по п.12, где аминокислота представляет собой Lys, Phe, Trp, Pro, Thr, Leu, Ala, Val, Ser, Arg, Gly или Asp.
14. Белок CrylBa по п.13, где белок содержит SEQ ID NO:3.
15. Белок CrylBa по п.12, где валин (Val) в положении 81 замещен на аминокислоту, отличную от Val; или аланин (Ala) в положении 155 и метионин (Met) в положении 178 замещены на аминокислоты, отличные от Ala или Met, соответственно.
16. Белок CrylBa по п.15, где V81 замещен на триптофан (W).
17. Белок CrylBa по п.16, содержащий SEQ ID NO:11.
18. Белок CrylBa по п.15, где аланин (А) в положении 155 замещен на аспарагин (Asp), и метионин (Met) в положении 178 замещен на серии (Ser).
19. Белок CrylBa по п.18, содержащий SEQ ID NO:12.
20. Белок CrylBa no любому одному из пп.12-19, где белок обладает активностью в отношении чешуекрылого или жесткокрылого насекомого.
21. Белок CrylBa по п.20, где чешуекрылое насекомое представляет собой кукурузного мотылька, кукурузную юго-западную огневку или тростниковую огневку.
22. Молекула нуклеиновой кислоты, содержащая последовательность нуклеиновой кислоты, которая кодирует белок по любому одному из пп.1-21.
23. Химерный ген, содержащий гетерологичную промоторную последовательность, функционально связанную с молекулой нуклеиновой кислоты по п.22.
24. Химерный ген по п.23, где указанный промотор представляет собой экспрессируемый в растении промотор.
25. Химерный ген по п.24, где указанный экспрессируемый в растении промотор выбран из группы, включающей промотор убиквитина, cmp, TrpA кукурузы, mtl, 5' UTR гена 9 бактериофага Т3, сахароза-синтетазы 1 кукурузы, алкогольдегидрогеназы 1 кукурузы, светоулавливающего комплекса кукурузы, белка теплового шока кукурузы, малой субъединицы карбоксилазы RuBP гороха, опинсинтазы И плазмиды, нопалинсинтазы Ti плазмиды, халкон-изомеразы петунии, богатого глицином белка 1 бобов, пататина картофеля, лектина, 35S CaMV и малой субъединицы S-E9 RuBP карбоксилазы.
26. Рекомбинантный вектор, содержащий химерный ген по любому одному из пп.23-25.
27. Вектор по п.26, дополнительно определенный как плазмидный, космидный, фагмидный вектор, вектор на основе искусственной хромосомы, фага или вируса.
28. Трансгенная клетка-хозяин любого организма за исключением человека, содержащая химерный ген по п.23 или рекомбинантный вектор по п.26.
29. Трансгенная клетка-хозяин по п.28, дополнительно определенная как бактериальная клетка или растительная клетка.
30. Клетка-хозяин по п.29, где бактериальная клетка представляет собой клетку Е.coli, Bacillus thuringiensis, Bacillus subtilis, Bacillus megaterium; Bacillus cereus, Agrobacterium или Pseudomonas.
31. Клетка-хозяин по п.29, где растительная клетка представляет собой клетку сорго, пшеницы, подсолнечника, томата, картофеля, капустной культуры, хлопчатника, риса, сои, сахарной свеклы, сахарного тростника, табака, ячменя, масличного рапса или маиса.
32. Трансгенное растение, содержащее растительную клетку по п.31.
33. Трансгенное растение по п.32, дополнительно определенное как однодольное растение.
34. Трансгенное растение по п.33, дополнительно определенное как растение кукурузы, пшеницы, овса, риса, ячменя, газонной травы, сахарного тростника или пастбищное растение.
35. Трансгенное растение по п.34, где указанное растение представляет собой растение кукурузы.
36. Трансгенное растение по п.34, где указанное растение представляет собой растение сахарного тростника.
37. Трансгенное растение по п.32, дополнительно определенное как двудольное растение.
38. Трансгенное растение по п.37, дополнительно определенное как соя, другое бобовое, хлопчатник, подсолнечник, капустная культура и другой овощ, сахарная свекла, табак или масличный рапс.
39. Потомство любого поколения растения по любому одному из пп.32-38, где потомство содержит молекулу нуклеиновой кислоты.
40. Часть растения для размножения от любого поколения трансгенного растения по любому одному из пп.32-39, где часть растения для размножения содержит молекулу нуклеиновой кислоты.
41. Часть растения для размножения по п.40, дополнительно определенный как семя, часть растения для вегетативного размножения или черенок.
42. Инсектицидная композиция, содержащая сконструированный белок CrylBa по любому одному из пп.1-21 и приемлемый сельскохозяйственный носитель.
43. Композиция по п.42, где сельскохозяйственный носитель представляет собой растение, которое экспрессирует белок eCrylBa.
44. Способ получения устойчивого к насекомым трансгенного растения, включающий введение молекулы нуклеиновой кислоты по п.22 в растение, таким образом, получая трансгенное растение, где молекула нуклеиновой кислоты вызывает экспрессию белка в количестве, которое борется с насекомыми.
45. Способ по п.44, где насекомые являются чешуекрылыми насекомыми.
46. Способ по п.45, где чешуекрылых насекомых выбирают из группы, которая включает кукурузного мотылька, кукурузную юго-западную огневку, тростниковую огневку, хлопковую совку, соевую совку и гусеницу совки рода Anticarsia.
47. Способ получения белка eCrylBa, включающий:
a) определение белка CrylBa, имеющего домен I указанного белка;
b) замещение по меньшей мере одной нативной аминокислоты на участке в домене I по меньшей мере одной другой аминокислотой; и
c) получение белка eCrylBa, произведенного таким образом, где eCrylBa имеет улучшенную растворимость или инсектицидную активность в отношении по меньшей мере кукурузного мотылька по сравнению с нативным белком CrylBa.
48. Способ по п.47, где участок в домене I представляет собой альфа-спираль 4 или альфа-спираль 5.
49. Способ по п.48, где мутация имеет место в положении аминокислоты, соответствующем положению 150, 178, 189 или 199 в SEQ ID NO:2.
50. Способ по п.47, где мутация имеет место в положении 150, 178, 189 или 199 в SEQ ID NO:5.
51. Способ по п.50, где мутация имеет место в положении, соответствующем аминокислотам 2 и 150; или аминокислотам 2, 150 и 178; или аминокислотам 2, 150 и 189; или аминокислотам 2, 150 и 199 в SEQ ID NO:5.
52. Способ по п.51, где мутация имеет место по аминокислотам 2 и 150; или аминокислотам 2, 150 и 178; или аминокислотам 2, 150 и 189; или аминокислотам 2, 150 и 199 в SEQ ID NO:5.
53. Способ по п.52, где белок eCrylBa содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:6, где Х в положении 2 представляет собой любую аминокислоту и
a) Х в положении 150 представляет собой Pro, Phe, Trp или Lys, и X в положении 189 представляет собой Leu, и 199 представляет собой Ser; или
b) Х в положении 189 представляет собой Ser, когда Х в положении 150 представляет собой Lys; или
c) Х в положении 199 представляет собой Lys, когда Х в положении 150 представляет собой Lys.
54. Способ по п.53, где белок eCrylBa содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:9 или SEQ ID NO:10.
55. Способ по любому одному из пп.47-54, где белок eCrylBa обладает активностью в отношении чешуекрылых или жесткокрылых насекомых.
56. Способ по п.55, где чешуекрылыми насекомыми являются кукурузный мотылек, кукурузная юго-западная огневка, тростниковая огневка, хлопковая совка, соевая совка и гусеница совки рода Anticarsia.
57. Способ борьбы с чешуекрылым насекомым, включающий приведение насекомого в контакт с эффективным количеством белка eCrylBa, имеющего по меньшей мере одну аминокислотную мутацию в домене I указанного белка, где белок имеет улучшенную растворимость или инсектицидную активность в отношении чешуекрылого насекомого по сравнению с нативным Белком CrylBa.
58. Способ по п.57, где чешуекрылым насекомым является кукурузный мотылек, кукурузная юго-западная огневка, тростниковая огневка, хлопковая совка, соевая совка и гусеница совки рода Anticarsia.
59. Способ обеспечения растениевода средством борьбы с по меньшей мере кукурузным мотыльком (Ostrinia nubilalis), включающий поставку или продажу растениеводу трансгенного семени, содержащего молекулу нуклеиновой кислоты, которая кодирует сконструированный белок CrylBa (eCrylBa), имеющий мутацию в одном или нескольких положениях аминокислот в домене I, где белок eCrylBa имеет улучшенную растворимость или инсектицидную активность в отношении по меньшей мере кукурузного мотылька по сравнению с нативным белком CrylBa.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US24798609P | 2009-10-02 | 2009-10-02 | |
| US61/247,986 | 2009-10-02 | ||
| PCT/US2010/050369 WO2011041256A2 (en) | 2009-10-02 | 2010-09-27 | Insecticidal proteins |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2012117576A true RU2012117576A (ru) | 2013-11-10 |
| RU2613778C2 RU2613778C2 (ru) | 2017-03-21 |
Family
ID=43826844
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012117576A RU2613778C2 (ru) | 2009-10-02 | 2010-09-27 | Инсектицидные белки |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (4) | US9243262B2 (ru) |
| EP (1) | EP2482639B1 (ru) |
| CN (2) | CN105753950B (ru) |
| AU (1) | AU2010300850B2 (ru) |
| BR (1) | BR112012009381A2 (ru) |
| CA (1) | CA2775582A1 (ru) |
| CL (1) | CL2012000799A1 (ru) |
| IL (1) | IL218798A0 (ru) |
| IN (1) | IN2012DN02413A (ru) |
| MX (1) | MX342640B (ru) |
| RU (1) | RU2613778C2 (ru) |
| UA (1) | UA110925C2 (ru) |
| WO (1) | WO2011041256A2 (ru) |
| ZA (1) | ZA201202266B (ru) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2010077816A1 (en) | 2008-12-16 | 2010-07-08 | Syngenta Participations Ag | Corn event 5307 |
| CN105753950B (zh) | 2009-10-02 | 2020-06-16 | 先正达参股股份有限公司 | 杀虫蛋白 |
| US20140242048A1 (en) * | 2013-02-25 | 2014-08-28 | Beijing Dabeinong Technology Group Co., Ltd. | Methods For Controlling Pests |
| CN103146717A (zh) * | 2013-02-25 | 2013-06-12 | 北京大北农科技集团股份有限公司 | 杀虫基因及其用途 |
| CN107074917B (zh) | 2014-10-16 | 2022-05-24 | 先锋国际良种公司 | 具有改进的活性谱的杀昆虫多肽及其用途 |
| BR122020004891B1 (pt) * | 2014-10-16 | 2024-01-30 | Monsanto Technology Llc | Molécula de ácido nucleico recombinante, polinucleotídeo, proteína inseticida quimérica, célula hospedeira, composição inibidora de insetos, e métodos para controlar uma praga de lepidópteros |
| EP3207144B1 (en) | 2014-10-16 | 2019-05-01 | Monsanto Technology LLC | Lepidopteran-active cry1da1 amino acid sequence variant proteins |
| US11130964B2 (en) | 2014-11-20 | 2021-09-28 | Monsanto Technology Llc | Insect inhibitory proteins |
| WO2016209708A1 (en) | 2015-06-22 | 2016-12-29 | AgBiome, Inc. | Pesticidal genes and methods of use |
| CN109475124B (zh) * | 2015-08-27 | 2021-11-19 | 孟山都技术公司 | 新型昆虫抑制蛋白 |
| CA3007317A1 (en) * | 2016-01-26 | 2017-08-03 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Novel bacillus thuringiensis gene with lepidopteran activity |
| CN109517069A (zh) * | 2018-10-18 | 2019-03-26 | 先正达参股股份有限公司 | 一种用于表达Bt杀虫蛋白的高效蛋白质表达系统 |
| CN111676233A (zh) * | 2020-06-17 | 2020-09-18 | 中国农业科学院作物科学研究所 | 抗虫基因Cry1Ab-l及其编码蛋白与应用 |
Family Cites Families (31)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4683202A (en) | 1985-03-28 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying nucleic acid sequences |
| US4683195A (en) | 1986-01-30 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences |
| US4800159A (en) | 1986-02-07 | 1989-01-24 | Cetus Corporation | Process for amplifying, detecting, and/or cloning nucleic acid sequences |
| US5614395A (en) | 1988-03-08 | 1997-03-25 | Ciba-Geigy Corporation | Chemically regulatable and anti-pathogenic DNA sequences and uses thereof |
| NZ228234A (en) | 1988-03-08 | 1992-09-25 | Ciba Geigy Ag | Non-coding chemically regulatable dna fragments, their use and preparation |
| NZ230375A (en) | 1988-09-09 | 1991-07-26 | Lubrizol Genetics Inc | Synthetic gene encoding b. thuringiensis insecticidal protein |
| WO1990010076A1 (en) | 1989-02-24 | 1990-09-07 | Monsanto Company | Synthetic plant genes and method for preparation |
| US6855873B1 (en) | 1989-05-31 | 2005-02-15 | Bayer Bioscience, N.V. | Recombinant plant expressing non-competitively binding Bt insecticidal cryatal proteins |
| EP0400246A1 (en) * | 1989-05-31 | 1990-12-05 | Plant Genetic Systems, N.V. | Prevention of Bt resistance development |
| US5187091A (en) * | 1990-03-20 | 1993-02-16 | Ecogen Inc. | Bacillus thuringiensis cryiiic gene encoding toxic to coleopteran insects |
| DE69133128T2 (de) | 1990-04-12 | 2003-06-18 | Syngenta Participations Ag, Basel | Gewebe-spezifische Promotoren |
| US5451513A (en) | 1990-05-01 | 1995-09-19 | The State University of New Jersey Rutgers | Method for stably transforming plastids of multicellular plants |
| US5994629A (en) | 1991-08-28 | 1999-11-30 | Novartis Ag | Positive selection |
| GB9304200D0 (en) | 1993-03-02 | 1993-04-21 | Sandoz Ltd | Improvements in or relating to organic compounds |
| UA48104C2 (ru) | 1991-10-04 | 2002-08-15 | Новартіс Аг | Фрагмент днк, содержащий последовательность, которая кодирует инсектицидный протеин, оптимизированную для кукурузы, фрагмент днк, обеспечивающий направленную желательную для сердцевины стебля экспрессию связанного с ней структурного гена в растении, фрагмент днк, обеспечивающий специфическую для пыльцы экспрессию связанного с ней структурного гена в растении, рекомбинантная молекула днк, способ получения оптимизированной для кукурузы кодирующей последовательности инсектицидного протеина, способ защиты растений кукурузы по меньшей мере от одного насекомого-вредителя |
| US5530197A (en) * | 1992-08-19 | 1996-06-25 | Plant Genetic Systems, N.V. | Control of ostrinia |
| EP0589110A1 (en) * | 1992-08-19 | 1994-03-30 | Plant Genetic Systems N.V. | Control of ostrinia |
| US5849870A (en) | 1993-03-25 | 1998-12-15 | Novartis Finance Corporation | Pesticidal proteins and strains |
| US5877012A (en) | 1993-03-25 | 1999-03-02 | Novartis Finance Corporation | Class of proteins for the control of plant pests |
| GB9318207D0 (en) | 1993-09-02 | 1993-10-20 | Sandoz Ltd | Improvements in or relating to organic compounds |
| US5576198A (en) | 1993-12-14 | 1996-11-19 | Calgene, Inc. | Controlled expression of transgenic constructs in plant plastids |
| US5605793A (en) | 1994-02-17 | 1997-02-25 | Affymax Technologies N.V. | Methods for in vitro recombination |
| US5545818A (en) | 1994-03-11 | 1996-08-13 | Calgene Inc. | Expression of Bacillus thuringiensis cry proteins in plant plastids |
| US5545817A (en) | 1994-03-11 | 1996-08-13 | Calgene, Inc. | Enhanced expression in a plant plastid |
| US5849320A (en) | 1996-06-13 | 1998-12-15 | Novartis Corporation | Insecticidal seed coating |
| US5876739A (en) | 1996-06-13 | 1999-03-02 | Novartis Ag | Insecticidal seed coating |
| US6023013A (en) * | 1997-12-18 | 2000-02-08 | Monsanto Company | Insect-resistant transgenic plants |
| US6060594A (en) * | 1997-12-18 | 2000-05-09 | Ecogen, Inc. | Nucleic acid segments encoding modified bacillus thuringiensis coleopteran-toxic crystal proteins |
| US6121521A (en) * | 1998-04-01 | 2000-09-19 | Novartis Ag | Chimeric insecticidal protein and DNA coding therefor |
| US7253343B2 (en) | 2003-08-28 | 2007-08-07 | Athenix Corporation | AXMI-003, a delta-endotoxin gene and methods for its use |
| CN105753950B (zh) | 2009-10-02 | 2020-06-16 | 先正达参股股份有限公司 | 杀虫蛋白 |
-
2010
- 2010-09-27 CN CN201610282033.9A patent/CN105753950B/zh active Active
- 2010-09-27 BR BR112012009381A patent/BR112012009381A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2010-09-27 UA UAA201204964A patent/UA110925C2/uk unknown
- 2010-09-27 RU RU2012117576A patent/RU2613778C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2010-09-27 EP EP10821081.6A patent/EP2482639B1/en not_active Not-in-force
- 2010-09-27 WO PCT/US2010/050369 patent/WO2011041256A2/en active Application Filing
- 2010-09-27 IN IN2413DEN2012 patent/IN2012DN02413A/en unknown
- 2010-09-27 US US13/499,102 patent/US9243262B2/en active Active
- 2010-09-27 CN CN201080044606.5A patent/CN102596988B/zh active Active
- 2010-09-27 MX MX2012003658A patent/MX342640B/es active IP Right Grant
- 2010-09-27 AU AU2010300850A patent/AU2010300850B2/en not_active Revoked
- 2010-09-27 CA CA2775582A patent/CA2775582A1/en not_active Abandoned
-
2012
- 2012-03-22 IL IL218798A patent/IL218798A0/en unknown
- 2012-03-28 ZA ZA2012/02266A patent/ZA201202266B/en unknown
- 2012-03-30 CL CL2012000799A patent/CL2012000799A1/es unknown
-
2015
- 2015-12-09 US US14/963,937 patent/US10196633B2/en active Active
- 2015-12-09 US US14/963,898 patent/US10167323B2/en active Active
-
2018
- 2018-12-04 US US16/208,856 patent/US10934330B2/en active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US20190194644A1 (en) | 2019-06-27 |
| ZA201202266B (en) | 2012-12-27 |
| CA2775582A1 (en) | 2011-04-07 |
| US20120210464A1 (en) | 2012-08-16 |
| MX342640B (es) | 2016-10-07 |
| AU2010300850A1 (en) | 2012-04-12 |
| CN102596988B (zh) | 2016-07-13 |
| CN105753950A (zh) | 2016-07-13 |
| CN102596988A (zh) | 2012-07-18 |
| CN105753950B (zh) | 2020-06-16 |
| US10196633B2 (en) | 2019-02-05 |
| US9243262B2 (en) | 2016-01-26 |
| US10167323B2 (en) | 2019-01-01 |
| US10934330B2 (en) | 2021-03-02 |
| EP2482639A2 (en) | 2012-08-08 |
| MX2012003658A (es) | 2012-04-30 |
| WO2011041256A2 (en) | 2011-04-07 |
| BR112012009381A2 (pt) | 2017-03-01 |
| EP2482639A4 (en) | 2013-05-22 |
| AU2010300850B2 (en) | 2015-02-12 |
| US20160222374A1 (en) | 2016-08-04 |
| UA110925C2 (uk) | 2016-03-10 |
| RU2613778C2 (ru) | 2017-03-21 |
| US20160201083A1 (en) | 2016-07-14 |
| IL218798A0 (en) | 2012-06-28 |
| WO2011041256A3 (en) | 2011-06-09 |
| EP2482639B1 (en) | 2017-08-02 |
| CL2012000799A1 (es) | 2012-10-12 |
| IN2012DN02413A (ru) | 2015-08-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2012117576A (ru) | Инсектицидные белки | |
| US11060103B2 (en) | Genes encoding insecticidal proteins | |
| ES2315360T3 (es) | Proteinas insecticidas de bacillus thuringiensis. | |
| EP3425046B1 (en) | Herbicide tolerant protein, encoding gene and use thereof | |
| BR102013002599A2 (pt) | Plantas resistentes a glifosato e métodos associados | |
| WO2008073877B1 (en) | Novel bacillus thuringiensis crystal polypeptides, polynucleotides, and compositions thereof | |
| CA2838517C (en) | Herbicide-resistant protein, encoding gene and use thereof | |
| JP2011182793A (ja) | ＢａｃｉｌｌｕｓＴｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓの新規な結晶ポリペプチド、ポリヌクレオチド、およびそれらの組成物 | |
| CA2348755A1 (en) | Polypeptide compositions toxic to diabrotica insects, obtained from bacillus thuringiensis; cryet70, and methods of use | |
| RU2008122542A (ru) | Растения, характеризующиеся улучшенными ростовыми характеристиками, и способ их получения | |
| US20210324404A1 (en) | Herbicide tolerance protein, encoding gene thereof and use thereof | |
| CN111304178B (zh) | 除草剂耐受性蛋白质、其编码基因及用途 | |
| CN110628733B (zh) | 除草剂耐受性蛋白质、其编码基因及用途 | |
| WO2017034853A1 (en) | Irdig17912 insecticidal cry toxins | |
| Wu et al. | Transform of an ectopically expressed bulb lectin gene from'Pinellia pedatisecta'into tobacco plants conferring resistance to aphids ('Myzus nicotianae') | |
| CN111334484B (zh) | 除草剂耐受性蛋白质、其编码基因及用途 | |
| CN110656094B (zh) | 除草剂耐受性蛋白质、其编码基因及用途 | |
| CN110628732B (zh) | 除草剂耐受性蛋白质、其编码基因及用途 | |
| EP2882857A1 (en) | Compositions and methods for increasing pest resistance in plants | |
| CN108026149B (zh) | 工程化的cry6a杀虫蛋白 | |
| CN115340987B (zh) | 除草剂耐受性蛋白质、其编码基因及用途 | |
| CN114585731A (zh) | 突变的羟基苯丙酮酸双加氧酶多肽、其编码基因及用途 | |
| CN114317578A (zh) | 杀虫蛋白的用途 | |
| RU2001132595A (ru) | Токсичные для жесткокрылых насекомых полипептидные композиции и резистентные к насекомым трансгенные растения | |
| CA2924415A1 (en) | Novel genes encoding insecticidal proteins |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180928 |