RS61401B1 - 2-heteroaril-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamidi za lečenje raka - Google Patents

2-heteroaril-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamidi za lečenje raka

Info

Publication number
RS61401B1
RS61401B1 RS20210096A RSP20210096A RS61401B1 RS 61401 B1 RS61401 B1 RS 61401B1 RS 20210096 A RS20210096 A RS 20210096A RS P20210096 A RSP20210096 A RS P20210096A RS 61401 B1 RS61401 B1 RS 61401B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
oxo
dihydropyridazine
carboxamide
pyridin
chlorophenyl
Prior art date
Application number
RS20210096A
Other languages
English (en)
Inventor
Ilona Gutcher
Ulrike Röhn
Norbert Schmees
Ludwig Zorn
Lars Röse
Benjamin Bader
Christina Kober
Rafael Carretero
Detlef Stöckigt
Horst Irlbacher
Michael Platten
Original Assignee
Bayer Ag
Bayer Pharma AG
Deutsches Krebsforsch
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bayer Ag, Bayer Pharma AG, Deutsches Krebsforsch filed Critical Bayer Ag
Publication of RS61401B1 publication Critical patent/RS61401B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/501—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D237/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings
    • C07D237/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D237/04—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings having less than three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D237/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings
    • C07D237/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D237/06—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D237/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D237/14—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D237/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings
    • C07D237/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D237/06—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D237/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D237/24—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

Opis
[0001] Predmetni pronalazak pokriva jedinjenja 2-heteroaril-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida opšte formule (I) kako su ovde opisani i definisani, postupke pripreme pomenutih jedinjenja, intermedijerna jedinjenja korisna za pripremu pomenutih jedinjenja, farmaceutske kompozicije i kombinacije koje sadrže pomenuta jedinjenja, i upotrebu pomenutih jedinjenja za proizvodnju farmaceutskih kompozicija za lečenje ili profilaksu bolesti, naročito raka ili stanja sa poremećenim imunološkim odgovorima, kao jedini agens ili u kombinaciji sa drugim aktivnim sastojcima.
POZADINA
[0002] Nakon vezivanja liganda, AHR se translocira u jezgro gde heterodimerizuje sa ARNT (AHR nuklearni translokator) na čega stupa u interakciju sa DRE (elementi odgovora na dioksin) gena koji reaguju na AHR da bi regulisao njihovu transkripciju. AHR je najpoznatiji po vezivanju za toksine iz okoline i indukovanju metaboličkih mašina, poput enzima citokroma P 450 (npr. CYP1A1, CYP1A2 i CYP1B1), potrebnih za njihovo uklanjanje (Reyes i sar., Science, 1992, 256(5060): 1193-5). Aktiviranje AHR pomoću ksenobiotike pokazalo je njegovu ulogu u brojnim ćelijskim procesima kao što su embriogeneza, tumorogeneza i inflamacija.
[0003] AHR se eksprimira u mnogim ćelijama imunog sistema, uključujući dendritične ćelije (DC), makrofage, T ćelije i NK ćelije, i igra važnu ulogu u imunoregulaciji (Nguyen i sar., Front Immunol, 2014, 5:551). Na primer, klasični egzogeni AHR ligandi TCDD i 3-metilholantren, su poznati da indukuju duboku imunosupresiju, promovišu karcinogenezu i indukuju rast tumora (Gramatzki i sar., Oncogene, 2009, 28(28):2593-605; Bui i sar., Oncogene, 2009, 28(41):3642-51; Esser i sar., Trends Immunol, 2009, 30:447-454). U kontekstu imunosupresije, AHR aktivacija promoviše regulatorno stvaranje T ćelija, inhibira diferencijaciju Th1 i Th17, direktno i indirektno, i smanjuje aktivaciju i sazrevanje DC (Wang i sar., Clin Exp Immunol, 2014, 177(2):521-30; Mezrich i sar., J Immunol, 2010, 185(6): 3190-8; Wei i sar., Lab Invest, 2014, 94(5):528-35; Nguyen i sar., PNAS, 2010, 107(46):19961-6). AHR aktivacija modulira urođeni imunološki odgovor i pokazalo se da konstitutivna ekspresija AHR negativno reguliše odgovor interferona tipa I na virusnu infekciju (Yamada i sar., Nat Immunol, 2016). Pored toga, miševi sa konstitutivno aktivnim AHR spontano razvijaju tumore (Andersson i sar., PNAS, 2002, 99(15):9990-5).
[0004] Pored ksenobiotika, AHR takođe može da veže metaboličke proizvode razgradnje triptofana. Metaboliti triptofana, poput kinurenina i kinurenske kiseline, su endogeni AHR ligandi koji aktiviraju AHR pod fiziološkim uslovima (DiNatale i sar., Toxicol Sci, 2010, 115(1):89-97; Mezrich i sar., J Immunol, 2010, 185(6):3190-8; Opitz i sar., Nature, 2011, 478(7368):197-203). Poznato je da drugi endogeni ligandi vezuju AHR, mada su njihove fiziološke uloge trenutno nepoznate (Nguyen & Bradfield, Chem Res Toxicol, 2008, 21(1):102-116).
[0005] Imunosupresivne karakteristike kinurenina i razgradnja triptofana su dobro opisane i obuhvaćene su u imunosupresiju povezanu sa rakom. Enzimi indolamin-2,3-dikiseonikaze 1 i 2 (IDO1/IDO2) kao i triptofan-2,3-dikiseonikaza 2 (TDO2) odgovorni su za katalizu prvog i ograničavajuće nivoa metabolizma triptofana. IDO1/2 posredovana degradacija triptofana u tumorima i limfnim čvorovima koji odvode tumore smanjuje imunološke odgovore protiv tumora i inhibicija IDO može suzbiti stvaranje tumora na životinjskim modelima (Uyttenhove i sar., Nat Med, 2003, 9(10):1269-74 ; Liu i sar., Blood, 2005, 115(17): 3520-30; Muller i sar., Nat Med, 11(3):312-9; Metz, Cancer Res, 2007, 67(15):7082-7).
[0006] TDO2 se takođe snažno eksprimira u raku i može dovesti do proizvodnje imunosupresivnog kinurenina. Kod glioma, aktivacija AHR sa kinureninom, nizvodno od TDO posredovane degradacije triptofana, pospešuje rast tumora kao posledicu inhibicije antitumorskih imunih odgovora, kao i direktno promovisanje opstanka i motiliteta tumorskih ćelija (Opitz i sar., Nature, 2011, 478(7368):197-203). AHR ligandi koje generišu tumorske ćelije stoga deluju i autokrino i parakrino na tumorske ćelije i limfocite, pospešujući rast tumora.
[0007] Predmetni pronalazak pokriva jedinjenja 2-heteroaril-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida opšte formule (I) koja inhibiraju AHR.
Stanje tehnike
[0008] WO 2010/059401 odnosi se na jedinjenja i kompozicije za proširenje broja CD34+ ćelija za transplantaciju. Konkretno, WO 2010/059401 se, između ostalog, odnosi na heterociklična jedinjenja koja su sposobna da regulišu prema dole aktivnost i/ili ekspresiju AHR.
[0009] WO 2012/015914 odnosi se na kompozicije i postupke za modulaciju aktivnosti AHR. Konkretno, WO 2012/015914 se, između ostalog, odnosi na heterociklična jedinjenja koja moduliraju aktivnost AHR za upotrebu u terapijskim kompozicijama.
[0010] WO 2007/058392 se odnosi na nova heterociklična jedinjenja i njihovu farmaceutsku primenu. Konkretno, WO 2007/058392 se, između ostalog, odnosi na heterociklična jedinjenja koja imaju inhibitornu aktivnost ćelijske infekcije virusom hepatitisa.
[0011] WO 2002/022587 se odnosi na nova jedinjenja koja pokazuju inhibitorne aktivnosti protiv AMPA receptora i/ili kainatom receptora. Konkretno, WO 2002/022587 se, između ostalog, odnosi na jedinjenja piridazinona i triazinona.
[0012] US 5,418,233 se odnosi na derivate heterobiarila koji inhibiraju agregaciju ćelija-ćelija i interakciju ćelija-matriks. Konkretno, US 5,418,233 odnosi se na derivate heterobiarila koji su antagonisti histaminskih receptora.
[0013] WO 2015/143164 se odnosi na antimikrobna sredstva i metode skrininga. Konkretno, WO 2015/143164 se odnosi između ostalog na jedinjenja piridazinona kao antibiotike.
[0014] WO 2009/142732 se odnosi na supstituisane derivate piridazinona i njihovo korišćenje kao antagoniste / inverzne agoniste H3. WO 2008080056 opisuje pirazinone koji su korisni u lečenju raka.
[0015] Međutim, stanje tehnike ne opisuje jedinjenja 2-heteroaril-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4- karboksamida opšte formule (I) iz ovog pronalaska kako su ovde opisana i definisana.
[0016] Sada je nađeno, i ovo predstavlja osnovu ovog pronalaska, da jedinjenja predmetnog pronalaska imaju iznenađujuća i korisna svojstva.
[0017] Konkretno, iznenađujuće je pronađeno da jedinjenja iz predmetnog pronalaska efikasno inhibiraju AHR za što su dati podaci u delu sa biološkim eksperimentima i mogu se stoga koristiti za lečenje ili profilaksu raka ili drugih stanja u kojima egzogeni i endogeni AHR ligandi indukuju neregulisani imunološki odgovor, nekontrolisani rast ćelija, proliferaciju i/ili preživljavanje tumorskih ćelija, imunosupresiju u kontekstu karcinoma, neodgovarajuće ćelijske imunološke odgovore, ili neodgovarajuće ćelijske inflamatorne odgovore ili bolesti koje prate nekontrolisani rast ćelija, proliferaciju i/ili preživljavanje tumorskih ćelija, imunosupresija u kontekstu karcinoma neodgovarajući ćelijski imunološki odgovori, ili neodgovarajući ćelijski inflamatorni odgovori, posebno kod kojih su nekontrolisani rast ćelija, proliferacija i/ili preživljavanje tumorskih ćelija, imunosupresija u kontekstu raka, neodgovarajući ćelijski imunološki odgovori, ili neodgovarajući ćelijski inflamatorni odgovori posredovani sa AHR-om, kao što su, na primer, tečni i čvrsti tumori, i/ili njihove metastaze, npr. tumori glave i vrata uključujući tumore mozga i moždane metastaze, tumori grudnog koša uključujući tumore pluća ne-malih ćelija i tumore pluća malih ćelija, gastrointestinalni tumori uključujući uključujući tumor debelog creva, kolorektalni tumor i tumor pankreasa, tumori jetre, endokrini tumori, tumori dojke i drugi ginekološki tumori, urološki tumori uključujući tumore bubrega, bešike i prostate, tumori kože i sarkomi, i/ili njihove metastaze.
OPIS PRONALASKA
[0018] U skladu sa prvim aspektom, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I):
u kojoj
R<1>predstavlja C2-C6-hidroksialkil, pri čemu su navedene C2-C6-hidroksialkil grupe opciono supstituisane jednom sa cijano, -COOR<10>, -CONR<11>R<12>, C1-C4-alkoksi ili C3-C6-cikloalkilom i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
C3-C6-cikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa C1-C3-alkilom i/ili jedan do tri puta sa halogenom, ili
C3-C6-cikloalkil-C1-C3-alkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa C1-C3alkilom i/ili jedan do tri puta sa halogenom, ili
(C3-C6-cikloalkil)2-C1-C3-alkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa C1-C3-alkilom i/ili jedan do tri puta sa halogenom, ili
4- do 6-člani heterocikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa C1-C3-alkilom i/ili jedan do tri puta sa halogenom;
R<2>predstavlja hloro, cijano, dimetilamino, metil, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, metoksi, difluorometoksi ili trifluorometoksi;
R<3>predstavlja vodonik, fluor, hlor ili metil;
R<4>predstavlja vodonik ili fluor;
R<5>predstavlja monociklični heteroaril, koji je opciono supstituisan jedan do tri puta, nezavisno jedan od drugoga, sa R<6>;
R<6>predstavlja C1-C4-alkil, C1-C4-haloalkil, C3-C6-cikloalkil, C1-C4-alkoksi, halogen ili cijano; X predstavlja CH ili N;
R<10>predstavlja C1-C4-alkil;
R<11>i R<12>su isti ili različiti i predstavljaju, nezavisno jedan od drugoga, vodonik ili C1-C3-alkil, ili
zajedno sa atomom azota za koji su vezani grade 4- do 6-člani heterociklični prsten koji sadrži azot, navedeni prsten opciono sadrži jedan dodatni heteroatom odabran od O, S, NH, NR<a>gde R<a>predstavlja grupu C1-C4-alkil;
[0019] njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0020] Dalje, obuhvata njihovu upotrebu u kombinaciji sa drugim lekovima protiv raka, kao što su imunoterapeutici, ciljani agensi protiv raka ili hemoterapija.
DEFINICIJE
[0021] Izraz "supstituisan" označava da su jedan ili više atoma vodonika na označenom atomu ili grupu zamenjeni sa izborom iz naznačene grupe, pod uslovom da normalna valenca naznačenog atoma pod postojećim okolnostima nije prekoračena. Dozvoljene su kombinacije supstituenata i/ili promenljivih.
[0022] Izraz "opciono supstituisan" znači da broj supstituenata može biti jednak ili različit od nule. Ako nije drugačije naznačeno, moguće je da su opciono supstituisane grupe supstituisane sa onoliko opcionih supstituenata koliko se može smestiti zamenom atoma vodonika sa nevodoničnim supstituentom na bilo kom raspoloživom atomu ugljenika. Obično je moguće da broj opcionih supstituenata, kada su prisutni, bude 1, 2 ili 3.
[0023] Izraz "sadrži" kada se koristi u specifikaciji uključuje "sastoji se od".
[0024] Ako se u ovom tekstu bilo koja stavka naziva „kako je ovde pomenuto“, to znači da može biti navedena bilo gde u ovom tekstu.
[0025] Izrazi pomenuti u ovom tekstu imaju sledeća značenja:
Izraz "halogen" označava fluor, hlor, brom ili jod, naročito atom fluora, hlora ili broma.
[0026] Izraz "C1-C6-alkil" označava linearnu ili razgranatu, zasićenu, monovalentnu ugljovodoničnu grupu koja ima 1, 2, 3, 4, 5 ili 6 atoma ugljenika, npr. metil, etil, propil, izopropil, butil, sek-butil, izobutil, tert-butil, pentil, izopentil, 2-metilbutil, 1-metilbutil, 1-etilpropil, 1,2-dimetilpropil, neo-pentil, 1,1-dimetilpropil, heksil, 1-metilpentil, 2-metilpentil, 3-metilpentil, 4-metilpentil, 1-etilbutil, 2-etilbutil, 1,1-dimetilbutil, 2,2-dimetilbutil, 3,3-dimetilbutil, 2,3-dimetilbutil, 1,2-dimetilbutil ili 1,3-dimetilbutil grupu, ili njihov izomer. Naročito, navedena grupa ima 1, 2, 3 ili 4 atoma ugljenika ("C1-C4-alkil"), npr. metil, etil, propil, izopropil, butil, sek-butil izobutil, ili tert-butil grupa, tačnije 1, 2 ili 3 atoma ugljenika ("C1-C3-alkil"), npr. grupa metil, etil, n-propil ili izopropil.
[0027] Izraz "C1-C6-haloalkil" označava linearnu ili razgranatu, zasićenu, monovalentnu ugljovodoničnu grupu u kojoj je izraz "C1-C6-alkil" kao što je definisano gore, i u kojoj se jedan ili više atoma vodonika zamenjuju, identično ili različito, sa atomom halogena. Naročito, pomenuti atom halogena je atom fluora. Pomenuta grupa C1-C6-haloalkil je, na primer, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, 2-fluoroetil, 2,2-difluoroetil, 2,2,2-trifluoroetil, pentafluoroetil, 3,3,3-trifluoropropil ili 1,3-difluoropropan-2-il. Naročito, pomenuta grupa ima 1, 2, 3 ili 4 atoma ugljenika ("C1-C4-haloalkil"), tačnije 1, 2 ili 3 atoma ugljenika ("C1-C3-haloalkil"), npr. grupa fluorometil, difluorometil ili trifluorometil.
[0028] Izraz "C2-C6-hidroksialkil" označava linearnu ili razgranatu, zasićenu, monovalentnu ugljovodoničnu grupu u kojoj je izraz "C2-C6-alkil" kao što je definisano gore, i u kojoj su 1 ili 2 atoma vodonika zamenjeni sa hidroksi grupom, npr. grupom 1-hidroksietil, 2-hidroksietil, 1,2dihidroksietil, 3-hidroksipropil, 2-hidroksipropil, 1-hidroksipropil, 1-hidroksipropan-2-il, 2-hidroksipropan-2-il, 2,3-dihidroksipropil, 1,3-dihidroksipropan-2-il, 3-hidroksi-2-metil-propil, 2-hidroksi-2-metil-propil, 1-hidroksi-2-metil-propil.
[0029] Izraz "C1-C4-alkoksi" označava linearnu ili razgranatu, zasićenu, monovalentnu grupu sa formulom (C1-C4-alkil)-O-, koja označava metoksi, etoksi, n-propoksi, izopropoksi, n-butoksi, sek-butoksi, izobutoksi ili tert-butoksi.
[0030] Izraz "C3-C6-cikloalkil" označava zasićeni, monovalentni, monociklični ugljovodonični prsten koji sadrži 3, 4, 5 ili 6 atoma ugljenika ("C3-C6-cikloalkil"). Pomenuta grupa C3-C6-cikloalkil je monociklični ugljovodonični prsten, npr. ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil ili cikloheksil.
[0031] Izraz "C2-C7-alkilen" označava linearnu ili razgranatu, zasićenu, dvovalentnu ugljovodoničnu grupu u kojoj je izraz "C2-C7-alkil" kao što je definisano gore, i u kojoj 2 atoma vodonika iz različitih atoma ugljenika su uklonjena da se obrazuje biradikalna grupa.
[0032] Izraz "4- do 6-člani heterocikloalkil" označava monociklični, zasićeni heterocikl sa ukupno 4, 5 ili 6 atoma u prstenu, koji sadrži jedan ili dva identična ili različita heteroatoma u prstenu iz niza N i O, moguće je da se navedena grupa heterocikloalkil veže za ostatak molekula preko bilo kog od atoma ugljenika ili, ako postoji, preko atoma azota.
[0033] Navedena grupa heterocikloalkil, bez ograničenja na to, može da bude 4-člani prsten, kao što je na primer azetidinil ili oksetanil,; ili 5-člani prsten, kao što je na primer tetrahidrofuranil, 1,3-dioksolanil, pirolidinil, imidazolidinil, pirazolidinil, 1,2-oksazolidinil ili 1,3-oksazolidinil, na primer; ili a 6-člani prsten, kao što je tetrahidropiranil, piperidinil, morfolinil, piperazinil, 1,3-dioksanil, 1,4-dioksanil ili 1,2-oksazinanil,.
[0034] Naročito, "4- do 6-člani heterocikloalkil" označava 4- do 6-člani heterocikloalkil kako je definisano gore koji sadrži jedan atom kiseonika u prstenu i opciono još jedan heteroatom u prstenu iz niza: N, O. Tačnije, "5- ili 6-člani heterocikloalkil" označava monociklični, zasićeni heterocikl sa ukupno 5 ili 6 atoma u prstenu, koji sadrži jedan atom kiseonika u prstenu.
[0035] Izraz "monociklični heteroaril" označava monovalentni, aromatični prsten koji ima 5 ili 6 atoma u prstenu ("5- ili 6-člana heteroaril" grupa), koji sadrži najmanje jedan heteroatom u prstenu i opciono jedan ili dva dodatna heteroatoma u prstenu iz niza: N, O i/ili S, i a koji je vezan preko atoma ugljenika u prstenu ili opciono preko atom azota u prstenu (ako to dozvoljava valencija).
[0036] Navedena grupa heteroaril može biti 5-člana heteroarilna grupa, kao što je, na primer, tienil, furanil, pirolil, oksazolil, tiazolil, imidazolil, pirazolil, izoksazolil, izotiazolil, oksadiazolil, triazolil, tiadiazolil ili tetrazolil; ili 6-člana heteroarilna grupa, kao što je, na primer, piridinil, piridazinil, pirimidinil, pirazinil ili triazinil.
[0037] Generalno, i ukoliko nije drugačije naznačeno, heteroarilne ili heteroarilenske grupe uključuju sve moguće njihove izomerne oblike, npr.: tautomere i pozicione izomere u odnosu na tačku vezivanja za ostatak molekula. Tako, za neke ilustrativne primere koji nisu ograničavajući, izraz piridinil obuhvata piridin-2-il, piridin-3-il i piridin-4-il; ili izraz tienil obuhvata tien-2-il i tien-3-il.
[0038] Naročito, heteroarilna grupa je izotiazolil, pirazolil, piridinil, piridazinil ili pirimidinil grupa.
[0039] Tamo gde se u tekstu koristi pluralni oblik reči jedinjenja, soli, polimorfi, hidrati, solvati i slično, podrazumeva se i jedno jedinjenje, so, polimorf, izomer, hidrat, solvat ili slično.
[0040] Pod „stabilnim jedinjenjem“ ili „stabilnom strukturom“ podrazumeva se jedinjenje koje je dovoljno robusno da preživi izolaciju do korisnog stepena čistoće iz reakcione smeše i formulisanje u efikasno terapijsko sredstvo.
[0041] Jedinjenja prema predstavljenom pronalasku opciono sadrže jedan ili više asimetričnih centara, u zavisnosti od lokacije i prirode željenih različitih supstituenata. Moguće je da su u (R) ili (S) konfiguraciji prisutni jedan ili više asimetričnih atoma ugljenika, što može rezultirati racemskim smešama u slučaju jednog asimetričnog centra, i dijastereomernim smešama u slučaju višestrukih asimetričnih centara. U određenim slučajevima moguće je da asimetrija bude prisutna i zbog ograničene rotacije oko date veze, na primer, centralne veze koja je susedna prema dva supstituisana aromatična prstena navedenih jedinjenja.
[0042] Poželjna jedinjenja su ona koja proizvode poželjniju biološku aktivnost. Odvojeni, čisti ili delimično prečišćeni izomeri i stereoizomeri ili racemske ili dijastereomerne smeše jedinjenja iz ovog pronalaska takođe su obuhvaćeni obimom ovog pronalaska. Prečišćavanje i odvajanje takvih materijala može se izvršiti standardnim tehnikama poznatim u tehnici.
[0043] Poželjni izomeri su oni koji proizvode poželjniju biološku aktivnost. Oni odvojeni, čisti ili delimično prečišćeni izomeri ili racemske smeše jedinjenja iz ovog pronalaska su takođe obuhvaćeni obimom ovog pronalaska. Prečišćavanje i odvajanje takvih materijala može se izvršiti standardnim tehnikama poznatim u tehnici.
[0044] Optički izomeri mogu biti dobijeni razdvajanjem racemičnih smeša prema konvencionalnim postupcima, na primer, formiranjem dijastereoizomernih soli korišćenjem optički aktivne kiseline ili baze ili formiranjem kovalentnih dijastereomera. Primeri odgovarajućih kiselina su vinska, diacetilvinska, ditoluoilvinska i kamforsulfonska kiselina. Smeše dijastereoizomera mogu se razdvojiti u njihove pojedinačne dijastereomere na osnovu njihovih fizičkih i/ili hemijskih razlika metodama poznatim u tehnici, na primer hromatografijom ili frakcionom kristalizacijom. Optički aktivne baze ili kiseline se zatim oslobađaju iz odvojenih dijastereomernih soli. Drugačiji postupak za razdvajanje optičkih izomera uključuje upotrebu hiralne hromatografije (npr., HPLC kolone koje koriste hiralnu fazu), sa ili bez konvencionalne derivatizacije, optimalno odabrane da maksimizuju razdvajanje enantiomera. Pogodne HPLC kolone koje koriste hiralnu fazu su komercijalno dostupne, kao što su na primer one koje proizvodi Daicel, npr., Chiracel OD i Chiracel OJ, između mnogih drugih, koje se sve mogu rutinski odabrati. Takođe su korisna enzimska razdvajanja, sa ili bez derivatizacije. Optički aktivna jedinjenja iz ovog pronalaska se takođe mogu dobiti hiralnim sintezama koristeći optički aktivne početne materijale.
[0045] Da bi se razlikovali različiti tipovi izomera jedan od drugog, upućuje se na odeljak E IUPAC pravila E (Pure Appl. Chem.45, 11-30, 1976).
[0046] Ovaj pronalazak obuhvata sve moguće stereoizomere jedinjenja prema prikazanom pronalasku kao pojedinačne stereoizomere, ili kao bilo koje smeše navedenih stereoizomera, npr. (R)- ili (S)-izomeri, u bilo kom odnosu. Izolacija jednog stereoizomera, npr. a single enantiomer ili jednog enantiomera ili jednog dijastereomera, jedinjenja iz ovog pronalaska postiže se bilo kojim pogodnim postupkom u stanju tehnike, kao što je na primer hromatografija, naročito
1
hiralna hromatografija.
[0047] Dalje, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu postojati kao N-oksidi, koji su definisani tako što je najmanje jedan azot iz jedinjenja iz ovog pronalaska oksidisan. Predmetni pronalazak obuhvata sve takve moguće N-okside.
[0048] Predmetni pronalazak takođe obuhvata korisne oblike jedinjenja iz ovog pronalaska, kao što metaboliti, hidrati, solvati, prolekovi, soli, naročito farmaceutski prihvatljive soli, i/ili koprecipitati.
[0049] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu postojati u vidu hidrata, ili u vidu solvata, pri čemu jedinjenja iz predmetnog pronalaska sadrže polarne rastvarače, naročito na primer vodu, metanol ili etanol, kao strukturni element kristalne rešetke jedinjenja. Moguće je da količina polarnih rastvarača, naročito vode, postoji u stehiometrijskom ili nestehiometrijskom odnosu. U slučaju stehiometrijskih solvata, mogući su, npr. hidrati, hemi-, (semi-), mono-, seskvi-, di-, tri-, tetra-, penta- itd. solvati ili hidrati, redom. Predmetni pronalazak obuhvata sve takve hidrate ili solvate.
[0050] Dalje, moguće je da jedinjenja iz ovog pronalaska postoje u slobodnom obliku, npr. kao slobodna baza, ili kao slobodna kiselina, ili kao cviterjon, ili da postoje u vidu soli. Navedena so može biti bilo koja so, bilo organska ili neorganska adiciona so, naročito bilo koja farmaceutski prihvatljiva organska ili neorganska adiciona so, koja se uobičajeno koristi u farmaciji ili koja se koristi, na primer, za izolovanje ili prečišćavanje jedinjenja iz predmetnog pronalaska.
[0051] Izraz " farmaceutski prihvatljiva so" se odnosi na neorganske ili organske adicione soli jedinjenja iz ovog pronalaska. Na primer, videti S. M. Berge, i sar. "Pharmaceutical Salts," J. Pharm. Sci. 1977, 66, 1-19.
[0052] Pogodna farmaceutski prihvatljiva so jedinjenja iz ovog pronalaska može biti, na primer, kisela adiciona sol jedinjenja predmetnog pronalaska koja nosi atom azota, na primer u lancu ili u prstenu, koja je dovoljno bazična, kao što je adiciona so sa kiselinom sa neorganskom kiselinom ili „mineralna kiselina“, kao što je na primer hlorovodonična, bromovodonična, jodovodonična, sumporna, sulfamska, bisulfurna, fosforna ili azotna kiselina, na primer, ili sa organskom kiselinom, kao što su na primer mravlja, sirćetna, acetosirćetna, piruvična, trifluorosirćetna, propionska, maslena, heksanska, heptanska, undekanska, laurinska, benzoeva, salicilna, 2-(4-hidroksibenzoil)-benzoeva, kamforna, cimetna, ciklopentanpropionska, diglukonska, 3-hidroksi-2-naftoic, nikotinska, pamoična, pektinska, 3-fenilpropionska, pivalinska, 2-hidroksietansulfonska, itakonska, trifluorometansulfonska, dodecilsulfurna, etansulfonska, benzensulfonska, para-toluensulfonska, metansulfonska, 2-naftalensulfonska, naftalindisulfonska, kamforsulfonska kiselina, limunska, vinska, stearinska, mlečna, oksalna, malonska, sukcinska, jabučna, adipinska, alginska, maleinska, fumarna, D-glukonska, mandelinska, askorbinska, glukoheptanska, glicerofosforna, asparaginska, sulfosalicilna, ili tiocijanska kiselina.
[0053] Dalje, još jedna pogodna farmaceutski prihvatljiva so jedinjenja ovog pronalaska koja je dovoljno kisela je so alkalnog metala, na primer natrijumova ili kalijumova so, so zemnoalkalijskog metala, na primer kalcijumova so, magnezijumova so ili stroncijeva so, ili aluminijeva so ili cinkova so, ili amonijeva so izvedena iz amonijaka ili iz organskog primarnog, sekundarnog ili tercijarnog amina koji ima 1 do 20 atoma ugljenika, kao što je etilamin, dietilamin, trietilamin, etildiizopropilamin, monoetanolamin, dietanolamin, trietanolamin, dicikloheksilamin, dimetilaminoetanol, dietilaminoetanol, tris(hidroksimetil)aminometan, prokain, dibenzilamin, N-metilmorfolin, arginin, lizin, 1,2-etilendiamin, N-metilpiperidin, N-metil-glukamin, N,N-dimetil-glukamin, N-etil-glukamin, 1,6-heksanediamin, glukozamin, sarkozin, serinol, 2-amino-1,3-propandiol, 3-amino-1,2-propandiol, 4-amino-1,2,3-butantriol, ili so sa kvaternarnim amonijum jonom koji ima 1 do 20 atoma ugljenika, kao što je tetrametilamonijum, tetraetilamonijum, tetra(n-propil)amonijum, tetra(n-butil)amonijum, N-benzil-N,N,N-trimetilamonijum, holin ili benzalkonijum.
[0054] Stručnjaci u ovoj oblasti će dalje prepoznati da je moguće da se adicione soli kiselina navedenih jedinjenja pripremaju reakcijom jedinjenja sa odgovarajućom neorganskom ili organskom kiselinom bilo kojom od brojnih poznatih metoda. Alternativno, soli alkalnih i zemno alkalnih metala kiselih jedinjenja iz ovog pronalaska se pripremaju reakcijom jedinjenja iz ovog pronalaska sa odgovarajućom bazom putem niza poznatih metoda.
[0055] Predmetni pronalazak obuhvata sve moguće soli jedinjenja prema prikazanom pronalasku kao pojedinačne soli, ili kao bilo koju smešu pomenutih soli, u bilo kom odnosu.
[0056] U ovom tekstu, posebno u eksperimentalnom delu, za sintezu intermedijara i primera iz ovog pronalaska, kada se jedinjenje pominje kao oblik soli sa odgovarajućom bazom ili kiselinom, tačan stehiometrijski sastav navedenog oblik soli, dobijen odgovarajućim postupkom pripreme i/ili prečišćavanja, u većini slučajeva je nepoznat.
[0057] Ako nije drugačije naznačeno, sufiksi hemijskih imena ili strukturnih formula koje se odnose na soli, kao što su "hidrohlorid", "trifluoroacetat ", "natrijumova so", ili "x HCl", "x CF3COOH", "x Na<+>", na primer, znače oblik soli, čija stehiometrija nije navedena.
[0058] Ovo se odnosi analogno na slučajeve u kojima su intermedijari sinteze ili primeri njihovih jedinjenja ili njihovih soli, dobijeni opisanim postupcima pripreme i/ili prečišćavanja, kao solvati, poput hidrata, sa (ako je definisano) nepoznatim stehiometrijskim sastavom.
[0059] Dalje, ovaj pronalazak obuhvata sve moguće kristalne oblike ili polimorfe jedinjenja iz ovog pronalaska, bilo kao pojedinačni polimorf, bilo kao smešu više od jednog polimorfa, u bilo kom odnos.
[0060] Pored toga, ovaj pronalazak takođe obuhvata prolekove jedinjenja prema pronalasku. Izraz "prolekovi" ovde označava jedinjenja koja i sama mogu biti biološki aktivna ili neaktivna, ali se tokom njihovog boravka u telu pretvaraju (na primer metabolički ili hidrolitički) u jedinjenja prema pronalasku.
[0061] Pronalazak dalje obuhvata sve moguće kristalizovane i polimorfne oblike otkrivenih jedinjenja, pri čemu polimorfi postoje ili kao jedna forma polimorfa ili postoje kao smeša nekoliko polimorfa u svim koncentracijama.
[0062] U skladu sa drugom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<1>predstavlja C2-C6-hidroksialkil, pri čemu su navedene C2-C6-hidroksialkil grupe opciono supstituisane jednom sa cijano, -COOR<10>, -CONR<11>R<12>, C1-C4-alkoksi ili C3-C6-cikloalkilom i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
C3-C6-cikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili C3-C6-cikloalkil-C1-C3-alkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
(C3-C6-cikloalkil)2-C1-C3-alkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
1
4- do 6-člani heterocikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom;
R<2>predstavlja hloro, cijano, dimetilamino, metil, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, metoksi, difluorometoksi ili trifluorometoksi;
R<3>predstavlja vodonik, fluor, hlor ili metil;
R<4>predstavlja vodonik ili fluor;
R<5>predstavlja monociklični heteroaril, koji je opciono supstituisan jedan do tri puta, nezavisno jedan od drugoga, sa R<6>;
R<6>predstavlja C1-C4-alkil, C1-C4-haloalkil, C3-C6-cikloalkil, C1-C4-alkoksi, halogen ili cijano; X predstavlja CH ili N;
R<10>predstavlja C1-C4-alkil;
R<11>i R<12>su isti ili različiti i predstavljaju, nezavisno jedan od drugoga, vodonik ili C1-C3-alkil, ili
zajedno sa atomom azota za koji su vezani grade 4- do 6-člani heterociklični prsten koji sadrži azot, navedeni prsten opciono sadrži jedan dodatni heteroatom odabran od O, S, NH, NR<a>u kojoj R<a>predstavlja grupu C1-C4-alkil;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0063] U skladu sa trećom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<1>predstavlja C2-C6-hidroksialkil, pri čemu su navedene C2-C6-hidroksialkil grupe opciono supstituisane jednom sa cijano, -COOR<10>, -CONR<11>R<12>, C1-C4-alkoksi ili C3-C6-cikloalkil i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
C3-C6-cikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa C1-C3-alkilom i/ili jedan do tri puta sa halogenom, ili
C3-C6-cikloalkil-C1-C3-alkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa C1-C3-alkilom i/ili jedan do tri puta sa halogenom, ili
(C3-C6-cikloalkil)2-C1-C3-alkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa C1-C3-alkilom i/ili jedan do tri puta sa halogenom, ili
4- do 6-člani heterocikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa C1-C3-alkilom i/ili jedan do tri puta sa halogenom;
R<2>predstavlja hloro, cijano, dimetilamino, metil, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, metoksi, difluorometoksi ili trifluorometoksi;
R<3>predstavlja vodonik, fluor, hlor ili metil;
R<4>predstavlja vodonik ili fluor;
R<5>predstavlja monociklični heteroaril, koji je opciono supstituisan jedan do tri puta, nezavisno jedan od drugoga, sa R<6>;
R<6>predstavlja C1-C4-alkil, C3-C6-cikloalkil, C1-C4-alkoksi, halogen ili cijano;
X predstavlja CH ili N;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0064] U skladu sa četvrtom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<1>predstavlja C2-C5-hidroksialkil, pri čemu su navedene C2-C5-hidroksialkil grupe opciono supstituisane jednom sa cijano, -COOCH3, -CONH2, metoksi ili ciklopropilom i opciono jedan do tri puta sa fluorom, ili
C4-C6-cikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa metilom i/ili jedan do dva puta sa fluorom, ili
C3-C4-cikloalkil-metil supstituisan jednom sa hidroksi, ili
5- ili 6-člani heterocikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi, navedeni heterocikloalkil sadrži jedan atom kiseonika;
R<2>predstavlja hloro, cijano, dimetilamino, metil, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, metoksi, difluorometoksi ili trifluorometoksi;
R<3>predstavlja vodonik ili fluor;
R<4>predstavlja vodonik ili fluor;
R<5>predstavlja monociklični heteroaril, koji je opciono supstituisan jedan do tri puta, nezavisno jedan od drugoga, sa R<6>;
R<6>predstavlja metil, difluorometil, metoksi, halogen ili cijano;
X predstavlja CH ili N;
R<10>predstavlja C1-C4-alkil;
R<11>i R<12>su isti ili različiti i predstavljaju, nezavisno jedan od drugoga, vodonik ili C1-C3-alkil, ili
zajedno sa atomom azota za koji su vezani grade 4- do 6-člani heterociklični prsten koji sadrži azot, navedeni prsten opciono sadrži jedan dodatni heteroatom odabran od O, S, NH, NR<a>u kojoj R<a>predstavlja grupu C1-C4-alkil;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i
1
solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0065] U skladu sa petom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<1>predstavlja C2-C5-hidroksialkil, pri čemu su navedene C2-C5-hidroksialkil grupe opciono supstituisane jednom sa cijano, -COOCH3, -CONH2, metoksi ili ciklopropilom i opciono jedan do tri puta sa fluorom, ili
C4-C6-cikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa metilom i/ili jedan do dva puta sa fluorom, ili
C3-C4-cikloalkil-metil supstituisan jednom sa hidroksi, ili
5- ili 6-člani heterocikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi, navedeni heterocikloalkil sadrži jedan atom kiseonika;
R<2>predstavlja hloro, dimetilamino, metil, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, difluorometoksi ili trifluorometoksi;
R<3>predstavlja vodonik;
R<4>predstavlja vodonik ili fluor;
R<5>predstavlja grupu odabranu od:
pri čemu * označava tačku vezivanja pomenute grupe sa ostatkom molekula;
R<6a>predstavlja vodonik, metil, fluor ili hlor;
X predstavlja CH ili N;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i
1
solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0066] U skladu sa šestom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (Ia):
u kojoj
R<2>predstavlja hloro, dimetilamino, metil, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, difluorometoksi ili trifluorometoksi;
R<7>predstavlja vodonik, metil, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, hidroksimetil, metoksimetil, etil, izopropil, ciklopropil, cijano, -COOCH3ili -CONH2;
R<8>predstavlja vodonik, metil, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, hidroksimetil ili metoksimetil, pri čemu jedan od R<7>i R<8>je različit od vodonika, ili zajedno R<7>i R<8>grade ciklopentilni ili cikloheksilni prsten, koji je opciono supstituisan jedan do dva puta sa fluorom, ili heterocikloalkilni prsten, koji sadrži jedan atom kiseonika;
R<9>predstavlja vodonik ili metil, ili zajedno R<8>i R<9>grade ciklopropilni ili ciklobutilni prsten; njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0067] U skladu sa sedmom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (Ib):
1
u kojoj
R<2>predstavlja hloro, dimetilamino, metil, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, difluorometoksi ili trifluorometoksi;
R<5>predstavlja grupu odabranu od:
pri čemu * označava tačku vezivanja pomenute grupe sa ostatkom molekula;
R<6a>predstavlja vodonik, metil, fluor ili hlor;
R<7>predstavlja vodonik, metil, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, hidroksimetil, metoksimetil, etil, izopropil ili ciklopropil;
R<8>predstavlja vodonik, metil, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, hidroksimetil ili metoksimetil,
pri čemu jedan od R<7>i R<8>je različit od vodonika, ili
zajedno R<7>i R<8>grade ciklopentilni ili cikloheksilni prsten, koji je opciono supstituisan jedan do dva puta sa fluorom, ili heterocikloalkilni prsten, koji sadrži jedan atom kiseonik ili atom sumpora;
R<9>predstavlja vodonik ili metil, ili zajedno R<8>i R<9>grade ciklopropilni ili ciklobutilni prsten; njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0068] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<1>predstavlja C2-C6-hidroksialkil, pri čemu su navedene C2-C6-hidroksialkil grupe opciono supstituisane jednom sa cijano, -COOR<10>, -CONR<11>R<12>, C1-C4-alkoksi ili C3-C6-cikloalkilom i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili C3-C6-cikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa C1-C3-alkilom i/ili jedan do tri puta sa halogenom, ili
1
C3-C6-cikloalkil-C1-C3-alkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa C1-C3-alkilom i/ili jedan do tri puta sa halogenom, ili
(C3-C6-cikloalkil)2-C1-C3-alkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa C1-C3-alkilom i/ili jedan do tri puta sa halogenom, ili
4- do 6-člani heterocikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa C1-C3-alkilom i/ili jedan do tri puta sa halogenom;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0069] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<1>predstavlja C2-C5-hidroksialkil, pri čemu su navedene C2-C5-hidroksialkil grupe opciono supstituisane jednom sa cijano, -COOCH3, -CONH2, metoksi ili ciklopropilom i opciono jedan do tri puta sa fluorom, ili
C4-C6-cikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa metilom i/ili jedan do dva puta sa fluorom, ili
C3-C4-cikloalkil-metil supstituisan jednom sa hidroksi, ili
5- ili 6-člani heterocikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi, navedeni heterocikloalkil sadrži jedan atom kiseonika;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0070] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<1>predstavlja C2-C6-hidroksialkil, pri čemu su navedene C2-C6-hidroksialkil grupe opciono supstituisane jednom sa cijano, -COOR<10>, -CONR<11>R<12>, C1-C4-alkoksi ili C3-C6-cikloalkilom i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
C3-C6-cikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili C3-C6-cikloalkil-C1-C3-alkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
(C3-C6-cikloalkil)2-C1-C3-alkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
4- do 6-člani heterocikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom;
1
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0071] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<1>predstavlja C2-C6-hidroksialkil, pri čemu su navedene C2-C6-hidroksialkil grupe opciono supstituisane jednom sa C1-C4-alkoksi ili C3-C6-cikloalkilom i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
C3-C6-cikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa metilom i/ili jedan do tri puta sa halogenom, ili
C3-C6-cikloalkil-C1-C3-alkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
(C3-C6-cikloalkil)2-C1-C3-alkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
4- do 6-člani heterocikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0072] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<1>predstavlja C2-C6-hidroksialkil, pri čemu su navedene C2-C6-hidroksialkil grupe opciono supstituisane jednom sa C1-C2-alkoksi ili ciklopropilom i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
C4-C6-cikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa metilom i/ili jedan do tri puta sa halogenom, ili
C3-C6-cikloalkil-metil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
(C3-C6-cikloalkil)2-metil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
5- ili 6-člani heterocikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
2
[0073] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<1>predstavlja C2-C5-hidroksialkil, pri čemu su navedene C2-C5-hidroksialkil grupe opciono supstituisane jednom sa metoksi ili ciklopropilom i opciono jedan do tri puta sa fluorom, ili C4-C6-cikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa metilom i/ili jedan do dva puta sa fluorom, ili
C3-C4-cikloalkil-metil supstituisan jednom sa hidroksi, ili
5- ili 6-člani heterocikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi, navedeni heterocikloalkil sadrži jedan atom kiseonika;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0074] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<1>predstavlja C2-C5-hidroksialkil, pri čemu su navedene C2-C5-hidroksialkil grupe opciono supstituisane jednom sa metoksi ili ciklopropilom i opciono jedan do tri puta sa fluorom, ili C4-C6-cikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa metilom ili jedan do dva puta sa fluorom, ili
C3-C4-cikloalkil-metil supstituisan jednom sa hidroksi, ili
5- ili 6-člani heterocikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi, navedeni heterocikloalkil sadrži jedan atom kiseonika;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0075] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<2>predstavlja hloro, cijano, dimetilamino, metil, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, metoksi, difluorometoksi ili trifluorometoksi;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0076] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<2>predstavlja hloro, dimetilamino, metil, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, difluorometoksi ili trifluorometoksi;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0077] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<3>predstavlja vodonik, fluor, hlor ili metil;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0078] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<3>predstavlja vodonik ili fluor;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0079] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<3>predstavlja vodonik;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0080] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<4>predstavlja vodonik ili fluor;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0081] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<4>predstavlja vodonik;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0082] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<5>predstavlja monociklični heteroaril, koji je opciono supstituisan jedan do tri puta, nezavisno jedan od drugoga, sa R<6>;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0083] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<5>predstavlja grupu odabranu od:
pri čemu * označava tačku vezivanja pomenute grupe sa ostatkom molekula;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0084] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<5>predstavlja grupu odabranu od:
pri čemu * označava tačku vezivanja pomenute grupe sa ostatkom molekula;
2
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0085] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<5>predstavlja grupu odabranu od:
pri čemu * označava tačku vezivanja pomenute grupe sa ostatkom molekula;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0086] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<5>predstavlja grupu odabranu od:
pri čemu * označava tačku vezivanja pomenute grupe sa ostatkom molekula;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0087] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<6>predstavlja C1-C4-alkil, C1-C4-haloalkil, C3-C6-cikloalkil, C1-C4-alkoksi, halogen ili cijano; njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0088] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<6>predstavlja C1-C4-alkil, C3-C6-cikloalkil, C1-C4-alkoksi, halogen ili cijano;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0089] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<6>predstavlja metil, metoksi, halogen ili cijano;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0090] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<6a>predstavlja vodonik, metil, fluor ili hlor;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0091] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<10>predstavlja C1-C4-alkil;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0092] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<10>predstavlja metil;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0093] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<11>i R<12>su isti ili različiti i predstavljaju, nezavisno jedan od drugoga, vodonik ili C1-C3-alkil, ili
zajedno sa atomom azota za koji su vezani grade 4- do 6-člani heterociklični prsten koji sadrži azot, navedeni prsten opciono sadrži jedan dodatni heteroatom odabran od O, S, NH, NR<a>u kojoj R<a>predstavlja grupu C1-C4-alkil;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
2
[0094] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<11>i R<12>su isti ili različiti i predstavljaju, nezavisno jedan od drugoga, vodonik ili C1-C3-alkil, ili
zajedno sa atomom azota za koji su vezani grade 4- do 6-člani heterociklični prsten koji sadrži azot;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0095] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<11>i R<12>su isti ili različiti i predstavljaju, nezavisno jedan od drugoga, vodonik ili C1-C3-alkil; njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0096] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
R<11>i R<12>su isti ili različiti i predstavljaju, nezavisno jedan od drugoga, vodonik ili metil; njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0097] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
X predstavlja CH ili N;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
[0098] U skladu sa daljom realizacijom prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), gore, u kojoj:
X predstavlja CH;
njihove polimorfe, enantiomere, dijastereomere, racemate, tautomere, N-okside, hidrate i solvate, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
2
[0099] U posebnoj daljoj realizaciji prvog aspekta, ovaj pronalazak pokriva kombinacije dve ili više gore pomenutih realizacija pod naslovom „dalja ostvarenja prvog aspekta ovog pronalaska".
[0100] Predmetni pronalazak obuhvata bilo koju pod-kombinaciju unutar bilo koje od realizacija ili aspektu sadašnjeg pronalaska jedinjenja opšte formule (I), gore.
[0101] Predmetni pronalazak pokriva bilo koju podkombinaciju u bilo kojoj realizaciji ili aspektu ovog pronalaska intermedijarnih jedinjenja opšte formule (VII). Predmetni pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I) koja su otkrivena u odeljku primera u ovom tekstu, dole.
[0102] Jedinjenja prema pronalasku opšte formule (I) mogu se pripremiti prema sledećoj šemi 1. Šema i postupci opisani u nastavku ilustruju sintetičke puteve do jedinjenja opšte formule (I) prema pronalasku i nisu namenjeni da budu ograničavajući. Stručnjaku u ovoj oblasti je jasno da se redosled transformacija kao što je prikazano u šemi 1 može izmeniti na različite načine. Redosled transformacija prikazan u ovoj šemi, prema tome, nije ograničen. Pored toga, interkonverzija bilo kojeg od supstituenata R<1>, R<2>, R<3>, R<4>, R<5>ili R<6>može se postići pre i/ili posle prikazanih primera transformacija. Ove modifikacije mogu biti kao što su uvođenje zaštitnih grupa, cepanje zaštitnih grupa, redukcija ili oksidacija funkcionalnih grupa, halogeniranje, metaliranje, reakcije kuplovanja katalizovane sa metalom, supstitucije ili druge reakcije poznate stručnjaku u ovoj oblasti. Ove transformacije obuhvataju one koje uvode funkcionalnost koja omogućava dalju međusobnu konverziju supstituenata. Odgovarajuće zaštitne grupe i njihovo uvođenje i cepanje dobro su poznati stručnjaku u ovoj oblasti. Konkretni primeri su opisani u narednim pasusima.
[0103] Šema 1 pokazuje put za dobijanje jedinjenja opšte formule (I) u kojoj X, R<1>, R<2>, R<3>, R<4>, R<5>i R<6>imaju značenje kao što je dato za opštu formulu (I), gore. Ketomalonati predstavljeni kao intermedijari prema formuli (III) su u nekoliko slučajeva komercijalno dostupni ili se mogu sintetizovati iz alfa-halo-acetofenona (II) prema postupcima poznatim stručnjaku u ovoj oblasti. Srodni alfa-halo-acetofenoni su obično komercijalno dostupni. Konverzija takvih alfa-haloacetofenona sa estrima malonske kiseline u prisustvu odgovarajuće baze u pogodnom rastvaraču dovodi do stvaranja nekomercijalnih ketomalonata prema formuli (III). R u formuli (III), (V) i (VI) predstavlja pogodnu alkil grupu kao što je metil, etil, propil ili druge homologne grupe. Pogodan rastvarač može biti, ali nije ograničeno na, acetonitril, DMF, DMA, DMSO od THF, ili čak smeše ovih ili drugih rastvarača. Pogodna baza može biti, ali nije ograničena na, kalijum
2
karbonat, natrijum hidrid, cezijum karbonat kalijum heksametilendisilazana.
[0104] Obrazovanje dihidropiridazinona prema formuli (V) iz intermedijara (III) i pogodnih arilhidrazina (IV), koji su u mnogim slučajevima komercijalno dostupni, može se postići reakcijom ovih komponenata u pogodnom rastvaraču na povišenoj temperaturi. Pogodan rastvarač može biti, ali nije ograničeno, etanol ili sirćetna kiselina.
Šema 1: Ruta za dobivanje jedinjenja opšte formule (I) u kojoj X, R<1>, R<2>, R<3>, R<4>i R<5>imaju značenje dato za opštu formulu (I) gore i Hal predstavlja halogen i R predstavlja C1-C4-alkil.
[0105] Dihidropiridazinoni prema formuli (V) mogu se prevesti u piridazinon prema formuli (VI). Ovo se može postići upotrebom odgovarajućih reagensa kao što je bakar dihlorid na povišenoj temperaturi.
[0106] Dobijeni piridazinoni prema formuli (VI) sa estarskom funkcionalnom grupom mogu se pretvoriti postupcima poznatim stručnjaku, na primer baznom hidrolizom sa, na primer, vodenim hidroksidima alkalnih metala ili sa kiselom hidrolizom korišćenjem, na primer, vodonik hlorida u dioksanu ili trifluorosirćetnoj kiselini, u piridazinon karboksilne kiseline (VII).
2
[0107] Ove kiseline se mogu konvertovati kuplovanjem sa aminima formule (VIII) u kojoj R<1>je kao što je definisano za opštu formulu (I). Sredstva za kuplovanje i postupci za takve sinteze karboksamida iz karboksilnih kiselina i amina poznati su stručnjaku u ovoj oblasti. Primeri koji se ovde mogu pomenuti obuhvataju upotrebu HATU, HBTU, PyBOB ili T3P uz dodatak odgovarajuće baze. Konverzija karboksilnih kiselina u njihove amide opšte je opisana u referentnim knjigama.
Šema 2: Ruta za dobivanje jedinjenja opšte formule (I) u kojoj X, R<1>, R<2>, R<3>, R<4>i R<5>imaju značenje dato za opštu formulu (I) gore i Hal predstavlja halogen, R predstavlja C1-C4-alkil i R’ i R’’ predstavljaju istovremeno H ili C1-C4-alkil ili obrazuju zajedno grupu C2-C7-alkilen kao deo 1,2- ili 1,3-diol boronskog estra ili grupu –CO-CH2-(NCH3)-CH2-CO-
[0108] Ketomalonati predstavljeni kao intermedijeri u skladu sa formulom (III) su u nekoliko slučajeva komercijalno dostupni ili mogu biti sintetizovani sa alfa-halo-acetofenonima (II) prema postupcima poznatim stručnjaku u tehnici. Srodni alfa-halo-acetofenoni su obično komercijalno dostupni. Konverzija takvih alfa-halo-acteofenona sa estrima malonske kiseline u prisustvu odgovarajuće baze u pogodnom rastvaraču dovodi do stvaranja nekomercijalnih ketomalonata prema formuli (III). R u formuli (III), (IX), (X) i (VI) predstavlja pogodnu alkilnu grupu kao što je metil, etil, propil ili druge homologne grupe. Pogodan rastvarač može biti, ali
2
nije ograničen na, acetonitril, DMF, DMA, DMSO od THF, ili čak smeše ovih ili drugih rastvarača. Pogodna baza može biti, ali nije ograničena na, kalijum karbonat, natrijum hidrid, cezijum karbonat kalijum heksametilendisilazana.
[0109] Formiranje dihidropiridazinona prema formuli (IX) iz intermedijara (III) i hidrazina, može se postići reakcijom ovih komponenata u pogodnom rastvaraču na povišenoj temperaturi. Pogodan rastvarač može biti, ali nije ograničen na etanol ili sirćetnu kiselinu.
[0110] Dihidropiridazinoni prema formuli (IX) mogu se prevesti u piridazinone prema formuli (X). Ovo se može postići upotrebom odgovarajućeg reagensa. Pogodan reagens može biti, ali nije ograničen na, bakar dihlorid na povišenoj temperaturi.
[0111] Supstituisani piridazinoni prema formuli (VI) mogu se pripremiti Chan-Lam-ovim reakcijama kuplovanja piridazinona prema formuli (X) koristeći derivate bora kao borne kiseline, pinakolate borne kiseline i tetrafluoroborate sa pogodnim rastvaračima na sobnoj temperaturi ili povišenim temperaturama. Pogodan rastvarač može biti, ali nije ograničen na, acetonitril, dihlorometan, piridin ili DMF. Pogodan katalizator može biti, ali nije ograničen na bakar (II) acetat. Pogodni bazični aditivi mogu biti, ali nisu ograničeni na, trimetilamin, 2,2-bipiridin, natrijum karbonat ili cezijum karbonat.
[0112] Dobijeni supstituisani piridazinoni prema formuli (VI) sa estarskom funkcionalnom grupu mogu se konvertovati postupcima poznatim stručnjaku u tehnici, na primer baznom hidrolizom sa, na primer, vodenim hidroksidima alkalnih metala, ili od kiselom hidrolizom upotrebom, na primer, vodonik hlorida u dioksanu ili trifluorosirćetnoj kiselini, u piridazinon karboksilne kiseline (VII).
[0113] Ovi mogu da se konvertuju kuplovanjem sa aminima formule (VIII) u kojoj R<1>je definisan kao za opštu formulu (I). Sredstva za kuplovanje i postupci za takve sinteze karboksamida iz karboksilnih kiselina i amina poznati su stručnjaku u ovoj oblasti. Primeri koji se ovde mogu pomenuti obuhvataju upotrebu HATU, HBTU, PyBOB ili T3P uz dodatak odgovarajuće baze. Konverzija karboksilnih kiselina u njihove amide opšte je opisana u referentnim knjigama.
Šema 2a: Ruta za dobivanje intermedijera opšte formule (X) u kojoj X, R<1>, R<2>, R<3>i R<4>imaju značenje dato za opštu formulu (I) gore i R predstavlja C1-C4-alkil.
[0114] Jedinjenja opšte formule (IIa) su komercijalno dostupna i mogu da reaguju sa dialkil
ketomalonatom u kojoj R predstavlja C1-C4-alkil. Dietil ketomalonat kao reagens je
komercijalno dostupan. Dialkil ketomalonati se mogu pripremiti iz odgovarajućih dialkil
malonata sa tozilazidom i dioksiranom (videti npr.: Sinth. Commun.1994, 24, 695) ili ili bromom
i kalijum acetatom (videti npr.: J. Org. Chem.1981, 46, 2598). Acetofenoni opšte formule (IIa)
i dialkil ketomalonati zagrevaju se uredno na 95-100 °C ili sa rastvaračem, npr. piridinom, pod
refluksom na 120°C. Zatim, intermedijari formule (IIIa) reaguju sa hidrazin hidratom u sirćetnoj
kiselini pod refluksom ili hidrazinijum dihidrohloridom u etanolu pod refluksom dajući
intermedijere (X).
Šema 3: Dodatna ruta za dobivanje jedinjenja opšte formule (I) u kojoj X, R<1>, R<2>, R<3>, R<4>i R<5>imaju značenje dato za opštu formulu (I) gore, i R predstavlja C1-C4-alkil i R’ i R’’ predstavljaju istovremeno H ili C1-C4-alkil ili obrazuju zajedno grupu C2-C7-alkilen kao deo 1,2- ili 1,3-diol boronskog estra ili grupu –CO-CH2-(NCH3)-CH2-CO-.
1
[0115] Metil 6-hloro-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat [CAS 89581-64-6] je komercijalno dostupan. Konverzija metil 6-hloro-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilata sa organoboronskim derivatima (boronske kiseline, pinakolati borne kiseline, mida boronati, soli organotrifluoroborata) u prisustvu odgovarajućeg katalizatora paladijuma (0), pogodne baze i u pogodnom rastvaraču na sobnoj temperaturi ili povišenim temperaturama dovodi do obrazovanja 6-aril supstituisanih 3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilnih kiselina sa formulom (XI). Organoboronski derivati koji se koriste su komercijalno dostupni ili se mogu sintetizovati iz organohalogenida. Postupci za takve sinteze poznati su stručnjaku u ovoj oblasti. Pogodan katalizator može biti, ali nije ograničen na, paladijum-fosfinske komplekse kao Pd(PPh3)4, PdCl2(PPh3)2, ili paladijum katalizatore koji se mogu pripremiti in situ iz prekursora kao što je Pd(OAc)2ili Pd2(dba)3•CHCl3, sa odgovarajućim količinama fosfina ili paladacikličnih katalizatora kao npr. 2. generacija RuPhos prekatalizatora, hloro(2-dicikloheksilfosfino-2',6'-diizopropoksi-1,1'-bifenil)[2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladijum(II), RuPhos-Pd-G2. Pogodna baza može biti, ali nije ograničena na, kalijum fosfat, kalijum karbonat, kalijum tert.-butilat, cezijum karbonat i trietilamin. Pogodan rastvarač može biti, ali nije ograničeno na, dioksan, toluen, THF i dimetilformamid ili čak smeše ovih ili drugih rastvarača.
[0116] 3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline (XI) mogu se konvertovati u amide (XII) kuplovanjem sa aminima sa formulom (VIII). Agensi za kuplovanje i postupci za takve sinteze karboksamida iz karboksilnih kiselina i amina poznati su stručnjaku u ovoj oblasti. Primeri koji se ovde mogu pomenuti obuhvataju upotrebu HATU, HBTU, PyBOB ili T3P uz dodatak odgovarajuće baze. Konverzija karboksilnih kiselina u njihove amide opšte je opisana u referentnim knjigama.
[0117] Supstituisani piridazinoni formule (I) mogu se pripremiti Chan-Lam-ovim reakcijama kuplovanja koristeći derivate borne kiseline (boronske kiseline, pinakolati borne kiseline, mida boronati, soli organotrifluoroborata) u pogodnim rastvaračima na sobnoj temperaturi ili povišenim temperaturama. Pogodan rastvarač može biti, ali nije ograničen na, acetonitril, dihlorometan, piridin i DMF. Pogodan katalizator može biti, ali nije ograničen na, bakar (II) acetat. Pogodni bazični aditivi mogu biti, ali nisu ograničeni na, trimetilamin, 2,2-bipiridin, natrijum karbonat ili cezijum karbonat.
2
Šema 4: Dodatna ruta za dobivanje jedinjenja opšte formule (I) u kojoj X, R<1>, R<2>, R<3>, R<4>i R<5>imaju značenje dato za opštu formulu (I) gore, i R predstavlja C1-C4-alkil i R’ i R’’ predstavljaju istovremeno H ili C1-C4-alkil ili obrazuju zajedno grupu C2-C7-alkilen kao deo 1,2- ili 1,3-diol boronskog estra ili grupu –CO-CH2-(NCH3)-CH2-CO-.
[0118] 6-Hloro-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina [CAS 50681-26-0] je komercijalno dostupna i može se pretvoriti kuplovanjem sa aminima formule (VIII) u amide formule (XIII). Sredstva za kuplovanje i postupci za takve sinteze karboksamida iz karboksilnih kiselina i amina poznati su stručnjaku u ovoj oblasti. Primeri koji se ovde mogu pomenuti uključuju upotrebu HATU, HBTU, PyBOB ili T3P uz dodatak odgovarajuće baze.
[0119] 6-Hloro-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamidi (XIII) mogu se transformisati sa organoboronskim derivatima (boronske kiseline, pinakolati boronske kiseline, mida boronati, soli organotrifluoroborata) u prisustvu pogodnog paladijum (0) katalizatora, pogodne baze i u pogodnom rastvaraču na sobnoj temperaturi ili povišenim temperaturama u 6-aril supstituisane 3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamide sa formulom (XII). Organoboronski derivati koji se koriste su komercijalno dostupni ili se mogu sintetizovati iz organohalogenida. Postupci za takve sinteze poznati su stručnjaku u ovoj oblasti. Pogodan katalizator može biti, ali nije ograničen na na paladijum-fosfinske komplekse kao što su Pd(PPh3)4, PdCl2(PPh3)2ili paladijum katalizatore koji se mogu pripremiti in situ od prekursora kao što je Pd(OAc)2ili Pd2(dba)3•CHCl3, sa odgovarajućim količinama fosfina ili paladacikličnih katalizatora kao npr.2. generacija RuPhos prekatalizatora, hloro(2-dicikloheksilfosfino-2',6'-diizopropoksi-1,1'-bifenil)[2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladijum(II), RuPhos-Pd-G2. Pogodna baza može biti, ali nije ograničena na kalijum fosfat, kalijum karbonat, kalijum tert.-butilat, cezijum karbonat i trietilamin. Pogodan rastvarač može biti, ali nije ograničen na, dioksan, toluen, THF i dimetilformamid ili čak smeše ovih ili drugih rastvarača.
[0120] Supstituisani piridazinoni prema formuli (I) mogu se pripremiti sa Chan-Lam reakcijama kuplovanja 6-aril supstituisanih 3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida prema formuli (XII) koristeći derivate boronske kiseline (boronske kiseline, pinakolate boronske kiseline, mida boronate, soli organotrifluoroborata) sa pogodnim rastvaračima na sobnoj temperaturi ili povišenim temperaturama. Pogodan rastvarač može biti, ali nije ograničen na, acetonitril, dihlorometan, piridin i DMF. Pogodan katalizator može biti, ali nije ograničeno na bakar (II) acetat. Pogodni bazični aditivi mogu biti, ali nije ograničeno na, trimetilamin, 2,2-bipiridin, natrijum karbonat ili cezijum karbonat.
[0121] Jedinjenja su ili komercijalno dostupna ili se mogu pripremiti prema postupcima dostupnim iz javnog domena, kao što je razumljivo stručnjaku u ovoj oblasti. Konkretni primeri su opisani u eksperimentalnom delu opisa.
[0122] U skladu sa drugim aspektom, ovaj pronalazak pokriva postupke pripreme jedinjenja opšte formule (I) kako je definisano gore, pomenuti postupci sadrže korak omogućavanja da intermedijarno jedinjenje opšte formule (VII):
u kojoj
R<2>predstavlja hloro, cijano, dimetilamino, metil, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, metoksi, difluorometoksi ili trifluorometoksi;
R<3>predstavlja vodonik, fluor, hlor ili metil;
R<4>predstavlja vodonik ili fluor;
R<5>predstavlja monociklični heteroaril, koji je opciono supstituisan jedan do tri puta, nezavisno
4
jedan od drugoga, sa R<6>;
R<6>predstavlja C1-C4-alkil, C1-C4-haloalkil, C3-C6-cikloalkil, C1-C4-alkoksi, halogen ili cijano; X predstavlja CH ili N;
reaguje sa jedinjenjem opšte formule (VIII) :
H2N-R<1>(VIII),
u kojoj
R<1>predstavlja C2-C6-hidroksialkil, pri čemu su navedene C2-C6-hidroksialkil grupe opciono supstituisane jednom sa cijano, -COOR<10>, -CONR<11>R<12>, C1-C4-alkoksi ili C3-C6-cikloalkilom i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
C3-C6-cikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili C3-C6-cikloalkil-C1-C3-alkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
(C3-C6-cikloalkil)2-C1-C3-alkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
4- do 6-člani heterocikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom;
R<10>predstavlja C1-C4-alkil;
R<11>i R<12>su isti ili različiti i predstavljaju, nezavisno jedan od drugoga, vodonik ili C1-C3-alkil, ili
zajedno sa atomom azota za koji su vezani grade 4- do 6-člani heterociklični prsten koji sadrži azot, navedeni prsten opciono sadrži jedan dodatni heteroatom odabran od O, S, NH, NR<a>u kojoj R<a>predstavlja grupu C1-C4-alkil;
na taj način dajući jedinjenje opšte formule (I):
u kojoj X, R<1>, R<2>, R<3>, R<4>i R<5>su kako je definisano gore.
[0123] Ovaj pronalazak pokriva postupke za pripremanje jedinjenja iz sadašnjeg pronalaska opšte formule (I), pomenuti postupci sadrže korake opisane ovde u eksperimentalnom odeljku.
[0124] U skladu sa trećim aspektom, ovaj pronalazak pokriva intermedijerna jedinjenja koja su korisna za pripremu jedinjenja opšte formule (I), gore.
[0125] Naročito, pronalazak obuhvata intermedijerna jedinjenja opšte formule (VII) :
u kojoj
R<2>predstavlja hloro, cijano, dimetilamino, metil, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, metoksi, difluorometoksi ili trifluorometoksi;
R<3>predstavlja vodonik, fluor, hlor ili metil;
R<4>predstavlja vodonik ili fluor;
R<5>predstavlja monociklični heteroaril, koji je opciono supstituisan jedan do tri puta, nezavisno jedan od drugoga, sa R<6>;
R<6>predstavlja C1-C4-alkil, C1-C4-haloalkil, C3-C6-cikloalkil, C1-C4-alkoksi, halogen ili cijano; X predstavlja CH ili N;
[0126] U skladu sa četvrtim aspektom, ovaj pronalazak pokriva upotrebu pomenutih intermedijarnih jedinjenja za pripremu jedinjenja opšte formule (I) kako je definisano gore.
[0127] Naročito, pronalazak obuhvata korišćenje intermedijarnih jedinjenja opšte formule (VII):
u kojoj
R<2>predstavlja hloro, cijano, dimetilamino, metil, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, metoksi, difluorometoksi ili trifluorometoksi;
R<3>predstavlja vodonik, fluor, hlor ili metil;
R<4>predstavlja vodonik ili fluor;
R<5>predstavlja monociklični heteroaril, koji je opciono supstituisan jedan do tri puta, nezavisno jedan od drugoga, sa R<6>;
R<6>predstavlja C1-C4-alkil, C1-C4-haloalkil, C3-C6-cikloalkil, C1-C4-alkoksi, halogen ili cijano; X predstavlja CH ili N;
za pripremu jedinjenja opšte formule (I) kako je definisano gore.
[0128] U skladu sa petim aspektom, ovaj pronalazak obuhvata postupke pripreme jedinjenja opšte formule (I) kako je definisano gore, pomenuti postupci sadrže korak omogućavanja da intermedijarno jedinjenje opšte formule (XII):
u kojoj
R<1>predstavlja C2-C6-hidroksialkil, pri čemu su navedene C2-C6-hidroksialkil grupe opciono supstituisane jednom sa cijano, -COOR<10>, -CONR<11>R<12>, C1-C4-alkoksi ili C3-C6-cikloalkilom i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
C3-C6-cikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili C3-C6-cikloalkil-C1-C3-alkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
(C3-C6-cikloalkil)2-C1-C3-alkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
4- do 6-člani heterocikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom;
R<2>predstavlja hloro, cijano, dimetilamino, metil, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, metoksi, difluorometoksi ili trifluorometoksi;
R<3>predstavlja vodonik, fluor, hlor ili metil;
R<4>predstavlja vodonik ili fluor;
X predstavlja CH ili N;
R<10>predstavlja C1-C4-alkil;
R<11>i R<12>su isti ili različiti i predstavljaju, nezavisno jedan od drugoga, vodonik ili C1-C3-alkil, ili
zajedno sa atomom azota za koji su vezani grade 4- do 6-člani heterociklični prsten koji sadrži azot, navedeni prsten opciono sadrži jedan dodatni heteroatom odabran od O, S, NH, NR<a>u kojoj R<a>predstavlja grupu C1-C4-alkil;
reaguje sa jedinjenjem opšte formule (XIV):
u kojoj
R<5>predstavlja monociklični heteroaril, koji je opciono supstituisan jedan do tri puta, nezavisno jedan od drugoga, sa R<6>;
R<6>predstavlja C1-C4-alkil, C1-C4-haloalkil, C3-C6-cikloalkil, C1-C4-alkoksi, halogen ili cijano; R', R" predstavljaju istovremeno H ili C1-C4-alkil ili grade zajedno grupu C2-C7-alkilen kao deo 1,2- ili 1,3-diol boronskog estra ili grupu -CO-CH2-(NCH3)-CH2-CO-;
na taj način dajući jedinjenje opšte formule (I):
u kojoj su X, R<1>, R<2>, R<3>, R<4>i R<5>kako je definisano gore.
[0129] Ovaj pronalazak pokriva postupke za pripremanje jedinjenja sadašnjeg pronalaska opšte formule (I), navedeni postupci obuhvataju korake kako je ovde opisano u eksperimentalnom delu.
[0130] U skladu sa šestim aspektom, ovaj pronalazak pokriva intermedijerna jedinjenja koja su korisna za pripremu jedinjenja opšte formule (I), gore.
[0131] Naročito, pronalazak pokriva intermedijerna jedinjenja opšte formule (XII):
u kojoj
R<1>predstavlja C2-C6-hidroksialkil, pri čemu su navedene C2-C6-hidroksialkil grupe opciono supstituisane jednom sa cijano, -COOR<10>, -CONR<11>R<12>, C1-C4-alkoksi ili C3-C6-cikloalkilom i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
C3-C6-cikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili C3-C6-cikloalkil-C1-C3-alkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
(C3-C6-cikloalkil)2-C1-C3-alkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
4- do 6-člani heterocikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom;
R<2>predstavlja hloro, cijano, dimetilamino, metil, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, metoksi, difluorometoksi ili trifluorometoksi;
R<3>predstavlja vodonik, fluor, hlor ili metil;
R<4>predstavlja vodonik ili fluor;
X predstavlja CH ili N;
R<10>predstavlja C1-C4-alkil;
R<11>i R<12>su isti ili različiti i predstavljaju, nezavisno jedan od drugoga, vodonik ili C1-C3-alkil, ili
zajedno sa atomom azota za koji su vezani grade 4- do 6-člani heterociklični prsten koji sadrži azot, navedeni prsten opciono sadrži jedan dodatni heteroatom odabran od O, S, NH, NR<a>u kojoj R<a>predstavlja grupu C1-C4-alkil.
[0132] U skladu sa sedmim aspektom, ovaj pronalazak pokriva upotrebu pomenutih intermedijarnih jedinjenja za pripremu jedinjenja opšte formule (I) kako je definisano gore.
[0133] Naročito, pronalazak pokriva upotrebu intermedijarnih jedinjenja opšte formule (XII):
u kojoj
R<1>predstavlja C2-C6-hidroksialkil, pri čemu su navedene C2-C6-hidroksialkil grupe opciono supstituisane jednom sa cijano, -COOR<10>, -CONR<11>R<12>, C1-C4-alkoksi ili C3-C6-cikloalkilom i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
C3-C6-cikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili C3-C6-cikloalkil-C1-C3-alkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
(C3-C6-cikloalkil)2-C1-C3-alkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili
4- do 6-člani heterocikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom do tri puta sa halogenom;
R<2>predstavlja hloro, cijano, dimetilamino, metil, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, metoksi, difluorometoksi ili trifluorometoksi;
R<3>predstavlja vodonik, fluor, hlor ili metil;
R<4>predstavlja vodonik ili fluor;
X predstavlja CH ili N;
R<10>predstavlja C1-C4-alkil;
R<11>i R<12>su isti ili različiti i predstavljaju, nezavisno jedan od drugoga, vodonik ili C1-C3-alkil, ili
zajedno sa atomom azota za koji su vezani grade 4- do 6-člani heterociklični prsten koji sadrži azot, navedeni prsten opciono sadrži jedan dodatni heteroatom odabran od O, S, NH, NR<a>u kojoj R<a>predstavlja grupu C1-C4-alkil;
za pripremu jedinjenja opšte formule (I) kako je definisano gore.
[0134] Predmetni pronalazak pokriva intermedijerna jedinjenja koja su otkrivena u ovom tekstu u delu sa primerima, dole.
[0135] Predmetni pronalazak pokriva bilo koju podkombinaciju u bilo kojoj realizaciji ili aspektu predmetnog pronalaska intermedijarnih jedinjenja opšte formule (VII), gore.
4
[0136] Jedinjenja opšte formule (I) iz predmetnog pronalaska mogu se pretvoriti u bilo koju so, poželjno farmaceutski prihvatljive soli, kako je ovde opisano, bilo kojim postupkom koji je poznat stručnjaku u oblasti. Slično tome, bilo koja so jedinjenja opšte formule (I) iz predmetnog pronalaska može se pretvoriti u slobodno jedinjenje, bilo kojim postupkom koji je poznat stručnjaku.
[0137] Jedinjenja opšte formule (I) iz ovog pronalaska pokazuju dragocen farmakološki spektar delovanja, koji nije mogao da se predvidi. Iznenađujuće je pronađeno da jedinjenja iz ovog pronalaska efikasno inhibiraju AHR i stoga je moguće da se navedena jedinjenja koriste za lečenje ili profilaksu bolesti, poželjno raka ili stanja sa neregulisanim imunološkim odgovorima ili drugih poremećaja povezanih sa aberantnom AHR signalizacijom, kod ljudi i životinja.
[0138] Poremećaji i stanja naročito pogodna za tretman sa inhibitorom AHR iz predmetnog pronalaska su tečni i solidni tumori, kao što su kanceri dojke, respiratornog trakta, mozga, reproduktivnih organa, probavnog trakta, urinarnog trakta, očiju, jetre, kože , glave i vrata, štitaste žlezde, paratiroidne žlezde i njihove udaljene metastaze. Ovi poremećaji takođe obuhvataju limfome, sarkome i leukemije.
[0139] Primeri kancera dojke obuhvataju, ali nisu ograničeni na, trostruki negativni kancer dojke, invazivni duktalni karcinom, invazivni lobularni karcinom, duktalni karcinom in situ i lobularni karcinom in situ.
[0140] Primeri kancera respiratornog trakta obuhvataju, ali nisu ograničeni na, karcinom pluća malih i ne-malih ćelija, kao i bronhijalni adenom i pleuropulmonalni blastom.
[0141] Primeri kancera mozga obuhvataju, ali nisu ograničeni na, gliom moždanog stabla i hipoftalmički gliom, cerebelarni i cerebralni astrocitom, glioblastom, meduloblastom, ependimom, kao i neuroektodermalni i tumor epifize.
[0142] Tumori muških reproduktivnih organa obuhvataju, ali nisu ograničeni na, rak prostate i testisa.
[0143] Tumori ženskih reproduktivnih organa obuhvataju, ali nisu ograničeni na, kancer endometrijuma, grlića materice, jajnika, vagine i vulve, kao i sarkom materice.
[0144] Primeri kancera jajnika obuhvataju, ali nisu ograničeni na serozni tumor, endometrioidni tumor, mucinozni cistadenokarcinom, granulozaćelijski tumor, tumor Sertoli-Leidigovih ćelija i arhenoblastom.
[0145] Primeri kancera grlića materice obuhvataju, ali nisu ograničeni na karcinom skvamoznih ćelija, adenokarcinom, adenoskvamozni karcinom, karcinome malih ćelija, neuroendokrini tumora, karcinom staklastih ćelija i viloglandularni adenokarcinom.
[0146] Tumori digestivnog trakta obuhvataju, ali nisu ograničeni na, analni kancer, kancer debelog creva, kolorektalni, kancer jednjaka, kancer žučne kese, kancer želuca, pankreasa, rektuma, tankog creva i pljuvačne žlezde.
[0147] Primeri kancera jednjaka obuhvataju, ali nisu ograničeni na karcinome jednjaka i adenokarcinome, kao i karcinome skvamoznih ćelija, leiomiosarkom, maligni melanom, rabdomiosarkom i limfom.
[0148] Primeri karcinoma želuca obuhvataju, ali nisu ograničeni na intestinalni tip i adenokarcinom želuca difuznog tipa.
[0149] Primeri kancera pankreasa obuhvataju, ali nisu ograničeni na duktalni adenokarcinom, adenoskvamozne karcinome i endokrine tumore pankreasa.
[0150] Tumori urinarnog trakta obuhvataju, ali nisu ograničeni na, kancer bešike, penisa, bubrega, bubrežne karlice, uretera, uretre i humane papilarni kancere bubrega.
[0151] Primeri kancera bubrega obuhvataju, ali nisu ograničeni na karcinom bubrežnih ćelija, karcinom urotelijalnih ćelija, tumor jukstaglomerularnih ćelija (reninom), angiomiolipom, bubrežni onkocitom, karcinom Bellinijevog kanala, sarkom bistrih ćelija bubrega, mezoblastični nefrom i Wilmsov tumor. Primeri karcinoma bešike obuhvataju, ali nisu ograničeni na karcinom prelaznih ćelija, karcinom skvamoznih ćelija, adenokarcinom, sarkom i karcinom malih ćelija.
[0152] Kanceri oka obuhvataju, ali nisu ograničeni na, intraokularni melanom i retinoblastom.
[0153] Primeri karcinoma jetre obuhvataju, ali nisu ograničeni na, hepatocelularni karcinom (karcinomi ćelija jetre sa ili bez fibrolamelarne varijante), holangiokarcinom (karcinom intrahepatičnog žučnog kanala) i mešoviti hepatocelularni holangiokarcinom.
[0154] Kanceri kože obuhvataju, ali nisu ograničeni na, karcinom skvamoznih ćelija, Kaposijev sarkom, maligni melanom, karcinom kože Merkelovih ćelija i nemelanomski rak kože.
[0155] Kanceri glave i vrata obuhvataju, ali nisu ograničeni na, karcinom skvamoznih ćelija glave i vrata, kancer grkljana, hipofaringealni kancer, kancer nazofarinksa, orofaringealni kancer, kancer pljuvačne žlezde, kancer usne i usne duplje i skvamoznih ćelija.
[0156] Limfomi obuhvataju, ali nisu ograničeni na, limfom povezan sa AIDS-om, ne-Hodgkinov limfom, kožni limfom T-ćelija, Burkittov limfom, Hodgkinovu bolest i limfom centralnog nervnog sistema.
[0157] Sarkomi obuhvataju, ali nisu ograničeni na, sarkom mekog tkiva, osteosarkom, maligni fibrozni histiocitom, limfosarkom i rabdomiosarkom.
[0158] Leukemije obuhvataju, ali nisu ograničene na, akutnu mijeloidnu leukemiju, akutnu limfoblastnu leukemiju, hroničnu limfocitnu leukemiju, hroničnu mijelogenu leukemiju i leukemiju vlasastih ćelija.
[0159] Izraz "lečenje" ili "tretman" kako je navedeno u ovom dokumentu, koristi se konvencionalno, na primer za upravljanje ili negu subjekta u svrhu borbe, ublažavanja, smanjenja, ublažavanja, poboljšanja stanja bolesti ili poremećaja, kao što je karcinom.
[0160] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se koriste u terapiji i prevenciji, odnosno profilaksi, rasta tumora i metastaza, posebno kod solidnih tumora svih indikacija i fazama sa ili bez prethodnog tretmana rasta tumora.
[0161] Generalno, upotreba hemoterapeutskih sredstava i/ili sredstava protiv raka u kombinaciji sa jedinjenjem ili farmaceutskom kompozicijom ovog pronalaska služiće za:
1. dobivanje bolje efikasnosti u smanjenju rasta tumora ili čak uklanjanju tumora u
4
poređenju sa primenom bilo kog zasebnog sredstva,
2. obezbeđivanje primene manjih količina primenjenih hemoterapeutskih sredstava, 3. obezbeđivanje hemoterapijskog tretmana koji se dobro podnosi kod pacijenta sa manje štetnih farmakoloških komplikacija nego što se primećuje kod hemoterapije sa jednim sredstvom i određenih drugih kombinovanih terapija,
4. obezbeđivanje lečenja šireg spektra različitih vrsta karcinoma kod sisara, posebno ljudi, 5. obezbeđivanje veće stope odgovora kod lečenih pacijenata,
6. obezbeđivanje dužeg vremena preživljavanja kod lečenih pacijenata u poređenju sa standardnim hemoterapijskim tretmanima,
7. obezbeđivanje dužeg vremena za napredovanje tumora, i/ili
8. dobivanje rezultata efikasnosti i podnošljivosti koji su jednako dobri kao i oni kada se sredstva koriste sama, u poređenju sa poznatim slučajevima kada druge kombinacije sredstava za rak proizvode antagonističke efekte.
[0162] Pored toga, jedinjenja opšte formule (I) iz ovog pronalaska mogu se takođe koristiti u kombinaciji sa radioterapijom i/ili hirurškom intervencijom.
[0163] U daljoj realizaciji ovog pronalaska, jedinjenja opšte formule (I) iz predmetnog pronalaska mogu se koristiti za senzibilizaciju ćelije na zračenje, odnosno tretman ćelije jedinjenjem iz ovog pronalaska pre tretmana zračenjem ćelije čini ćeliju podložnijom oštećenju DNK i ćelijskoj smrti nego što bi bila u odsustvu bilo kakvog tretmana jedinjenjem iz predmetnog pronalaska. U jednom aspektu, ćelija je tretirana sa bar jednim jedinjenjem opšte formule (I) iz predmetnog pronalaska.
[0164] Dakle, ovaj pronalazak takođe obezbeđuje postupak za ubijanje ćelije, gde se ćeliji daje jedno ili više jedinjenja iz ovog pronalaska u kombinaciji sa konvencionalnom terapijom zračenjem.
[0165] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje postupak za stvaranje ćelije podložnijom ćelijskoj smrti, pri čemu se ćelija tretira sa jednim ili više jedinjenja opšte formule (I) iz ovog pronalaska pre tretmana ćelije da bi se izazvala ili indukovala ćelijska smrt. U jednom aspektu, nakon što je ćelija tretirana sa jednim ili više jedinjenja opšte formule (I) iz ovog pronalaska, ćelija je tretirana sa bar jednim jedinjenjem, ili bar jednim postupkom ili njihovom kombinacijom, da bi se izazvalo oštećenje DNK u svrhu inhibicije funkcije normalne ćelije ili ubijanja ćelije.
[0166] U drugim realizacijama ovog pronalaska, ćelija se ubija tretiranjem ćelije sa najmanje jednim sredstvom za oštećenje, tj. nakon tretiranja ćelije sa jednim ili više jedinjenja opšte formule (I) iz predmetnog pronalaska radi senzibilizacije ćelije na ćelijsku smrt, ćelija se tretira sa bar jednim sredstvom koje oštećuje DNK da bi ubila ćelija. Sredstva koja oštećuju DNK korisna u ovom pronalasku obuhvataju, ali nisu ograničena na, hemoterapeutska sredstva (npr. cis platina), jonizujuće zračenje (X-zrake, ultraljubičasto zračenje), kancerogena sredstva i mutagena sredstva.
[0167] U drugim realizacijama, ćelija se ubija tretiranjem ćelije sa najmanje jednim postupkom da bi se izazvalo ili izazvalo oštećenje DNK. Takvi postupci obuhvataju, ali nisu ograničeni na, aktivaciju ćelijskog signalnog puta koji rezultira oštećenjem DNK kada se put aktivira, inhibiranje ćelijskog signalnog puta koji rezultira oštećenjem DNK kada je put inhibiran i indukovanje biohemijske promene u ćeliji, pri čemu promena rezultira oštećenjem DNK. Kao ne ograničavajući primer, put popravljanja DNK u ćeliji može se inhibirati, sprečavajući na taj način popravljanje oštećenja DNK i rezultirajući abnormalnom akumulacijom oštećenja DNK u ćeliji.
[0168] U jednom aspektu pronalaska, jedinjenje opšte formule (I) iz predmetnog pronalaska daje se ćeliji pre zračenja ili druge indukcije oštećenja DNK u ćeliji. U drugom aspektu pronalaska, jedinjenje opšte formule (I) iz ovog pronalaska daje se ćeliji istovremeno sa zračenjem ili drugom indukcijom oštećenja DNK u ćeliji. U još jednom aspektu pronalaska, jedinjenje opšte formule (I) ovog pronalaska daje se ćeliji odmah nakon započinjanja zračenja ili drugog indukovanja oštećenja DNK u ćeliji.
[0169] u drugom aspektu, ćelija je in vitro. u drugoj realizaciji, ćelija je in vivo.
[0170] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se davati kao jedino farmaceutsko sredstvo ili u kombinaciji sa jednim ili više drugih farmaceutski aktivnih sastojaka gde kombinacija ne izaziva neprihvatljive neželjene efekte. Predmetni pronalazak takođe pokriva takve farmaceutske kombinacije. Na primer, jedinjenja iz predmetnog pronalaska mogu se kombinovati sa sastojcima koji obuhvataju: 131l-chTNT, abareliks, abirateron, aklarubicin, adalimumab, adotrastuzumab emtanzin, afatinib, aflibercept, aldesleukin, alektinib, alemtuzumab, alendronska kiselina, alitretinoin, altretamin, amifostin, aminoglutetimid, heksil aminolevulinat, amrubicin, amsakrin, anastrozol, ancestim, anetol ditioletion, anetumab ravtanzin, angiotenzin II,
4
antitrombin III, aprepitant, arkitumomab, arglabin, arsenov trioksid, asparaginaza, atezolizumab, aksitinib, azacitidin, baziliksimab, belotekan, bendamustin, bezilezomab, belinostat, bevacizumab, beksaroten, bikalutamid, bisantren, bleomicin, blinatumomab, bortezomib, buserelin, bosutinib, brentuksimab vedotin, busulfan, kabazitaksel, kabozantinib, kalcitonin, kalcijum folinat, kalcijum levofolinat, kapecitabin, kapromab, karbamazepin karboplatin, karbokvon, karfilzomib, karmofur, karmustin, katumaksomab, celekoksib, celmoleukin, ceritinib, cetuksimab, hlorambucil, hlormadinon, hlormetin, cidofovir, cinakalcet, cisplatin, kladribin, klodronska kiselina, klofarabin, kobimetinib, kopanlisib, krizantaspaza, krizotinib, ciklofosfamid, ciproteron, citarabin, dakarbazin, daktinomicin, daratumumab, darbepoetin alfa, dabrafenib, dasatinib, daunorubicin, decitabin, degareliks, denileukin diftitoks, denosumab, depreotid, dezlorelin, dianhidrogalaktitol, deksrazoksan, dibrospidijum hlorid, dianhidrogalaktitol, diklofenak, dinutuksimab, docetaksel, dolasetron, doksifluridin, doksorubicin, doksorubicin estron, dronabinol, ekulizumab, edrekolomab, eliptinijum acetat , elotuzumab, eltrombopag, endostatin, enocitabin, enzalutamid, epirubicin, epitiostanol, epoetin alfa, epoetin beta, epoetin zeta, eptaplatin, eribulin, erlotinib, esomeprazol, estradiol, estramustin, etinilestradiol, etopozid, everolimus, eksemestan, fadrozol, fentanil, filgrastim, fluoksimesteron, floksuridin, fludarabin, fluorouracil, flutamid, folinska kiselina, formestan, fosaprepitant, fotemustin, fulvestrant, gadobutrol, gadoteridol, gadoterna kiselina meglumin, gadoversetamid, gadoksetinska kiselina, galijum nitrat, ganireliks, gefitinib, gemcitabin, gemtuzumab, glukarpidaza, glutoksim, GM-CSF, goserelin, granisetron, faktor stimulisanja kolonije granulocita, histamin dihidrohlorid, histrelin, hidroksikarbamid, seme 1-125, lansoprazol, ibandronska kiselina, ibritumomab tiuksetan, ibrutinib, idarubicin, ifosfamid, imatinib, imikvimod, improsulfan, indisetron, inkadronska kiselina, ingenol mebutat, interferon alfa, interferon beta, interferon gama, jobitridol, jobengvan (1231), jomeprol, ipilimumab, irinotekan, itrakonazol, iksabepilon, iksazomib, lanreotid, lansoprazol, lapatinib, lazoholin, lenalidomid, lenvatinib, lenograstim, lentinan, letrozol, leuprorelin, levamizol, levonorgestrel, levotiroksin natrijum, lizurid, lobaplatin, lomustin, lonidamin, masoprokol, medroksiprogesteron, megestrol, melarsoprol, melfalan, mepitiostan, merkaptopurin, mesna, metadon, metotreksat, metoksalen, metilaminolevulinat, metilprednizolon, metiltestosteron, metirozin, mifamurtid, miltefozin, miriplatin, mitobronitol, mitogvazon, mitolaktol, mitomicin, mitotan, mitoksantron, mogamulizumab, molgramostim, mopidamol, morfin hidrohlorid, morfin sulfat, nabilon, nabiksimols, nafarelin, nalokson pentazocin, naltrekson, nartograstim, necitumumab, nedaplatin, nelarabin, neridronska kiselina, netupitant/palonosetron, nivolumab, pentetreotid, nilotinib, nilutamid, nimorazol, nimotuzumab, nimustin, nintedanib, nitrakrin, nivolumab,
4
obinutuzumab, oktreotid, ofatumumab, olaparib, olaratumab, omacetaksin mepesukcinat, omeprazol, ondansetron, oprelvekin, orgotein, orilotimod, osimertinib, oksaliplatin, oksikodon, oksimetolon, ozogamicin, p53 genska terapija, paklitaksel, palbociklib, palifermin, seme paladijum-103, palonosetron, pamidronska kiselina, panitumumab, panobinostat, pantoprazol, pazopanib, pegaspargaza, PEG-epoetin beta (metoksi PEG-epoetin beta), pembrolizumab, pegfilgrastim, peginterferon alfa-2b, pembrolizumab, pemetreksed, pentazocin, pentostatin, peplomicin, perflubutan, perfosfamid, pertuzumab, picibanil, pilokarpin, pirarubicin, piksantron, pleriksafor, plikamicin, poliglusam, poliestradiol fosfat, polivinilpirolidon natrijum hijaluronat, polisaharid-K, pomalidomid, ponatinib, porfimer natrijum, pralatreksat, prednimustin, prednizon, prokarbazin, prokodazol, propranolol, kvinagolid, rabeprazol, rakotumomab, radijum-223 hlorid, radotinib, raloksifen, raltitreksed, ramosetron, ramucirumab, ranimustin, rasburikaza, razoksan, refametinib, regorafenib, rizedronska kiselina, rhenium-186 etidronat, rituksimab, rolapitant, romidepsin, romiplostim, romurtid, roniciklib, samarijum (153Sm) leksidronam, sargramostim, satumomab, sekretin, siltuksimab, sipuleucel-T, sizofiran, sobuzoksan, natrijum glicididazol, sonidegib, sorafenib, stanozolol, streptozocin, sunitinib, talaporfin, talimogen laherparepvec, tamibaroten, tamoksifen, tapentadol, tasonermin, teceleukin, tehnecijum (99mTc) nofetumomab merpentan, 99mTc-HINIC-[Tyr3]-oktreotid, tegafur, tegafur gimeracil oteracil, temoporfin, temozolomid, temsirolimus, tenipozid, testosteron, tetrofosmin, talidomid, tiotepa, timalfasin, tirotropin alfa, tiogvanin, tocilizumab, topotekan, toremifen, tositumomab, trabektedin, trametinib, tramadol, trastuzumab, trastuzumab emtanzin, treosulfan, tretinoin, trifluridin tipiracil, trilostan, triptorelin, trametinib, trofosfamid, trombopoietin, triptofan, ubenimeks, valatinib , valrubicin, vandetanib, vapreotid, vemurafenib, vinblastin, vinkristin, vindesin, vinflunin, vinorelbin, vismodegib, vorinostat, vorozol, staklene mikrosfere itrijuma-90, zinostatin, zinostatin stimalamer, zoledronska kiselina, zorubicin.
[0171] Jedinjenja iz pronalaska mogu se dalje kombinovati sa drugim reagensima koji ciljaju imuni sistem, kao što su inhibitori imunih kontrolnih tačaka, npr. antagonisti ose aPD-1/-L1.
[0172] PD-1, zajedno sa svojim ligandima PD-L1 i PD-L2, funkcionišu kao negativni regulatori aktivacije T ćelija. AHR potiskuje funkciju imunih ćelija, istovremeno povećavajući proliferaciju i pokretljivost ćelija karcinoma. PD-L1 je prekomerno eksprimiran kod mnogih karcinoma, a prekomerna ekspresija PD-1 se često javlja istovremeno u T ćelijama koje infiltriraju tumor. Dakle, rezultat je slabljenje aktivacije T ćelija i izbegavanje imunološkog nadzora, što doprinosi oštećenju antitumorskih imunoloških odgovora. (Keir M E i sar. (2008)
4
Annu. Rev. Immunol.26:677).
[0173] Istovremeno ciljanje oba ose PD-1/-L1 i AHR pojačava antitumorske imune odgovore više nego na aditivan način, što dovodi do smanjenja rasta tumora koje je neočekivano.
[0174] Dakle, kompozicije koje sadrže antagonist ose PD-1/-L1 i antagonist AHR su iznenađujuće efikasni u jačanju imunološkog odgovora i u lečenju karcinoma.
[0175] Pored toga, inventivna jedinjenja se takođe mogu koristiti kao terapijska sredstva kod niza drugih poremećaja u kojima je uključen AHR kao što su kardiovaskularne i plućne bolesti.
[0176] Shodno tome, jedinjenja prema pronalasku su pogodna za lečenje i/ili profilaksu naročito kardiovaskularnih, inflamatornih i fibrotičnih poremećaja i bubrežnih poremećaja, konkretno akutne i hronične bubrežne insuficijencije, kao i akutnog i hroničnog zatajenja bubrega.
[0177] Shodno tome, jedinjenja prema pronalasku mogu se koristiti u lekovima za lečenje i/ili profilaksu kardiovaskularnih, inflamatornih i fibrotičnih poremećaja, bubrežnih poremećaja, naročito akutne i hronične bubrežne insuficijencije, i takođe akutnog i hroničnog zatajenja bubrega.
[0178] U svrhu ovog pronalaska izraz bubrežna insuficijencija obuhvata akutne i hronične manifestacije bubrežne insuficijencije, i kao i osnovne ili srodne bubrežne poremećaje kao što su dijabetičke i nedijabetičke nefropatije, hipertenzivne nefropatije, ishemične bubrežne poremećaje, renalna hipoperfuzija, intradialitička hipotenzija, opstruktivna uropatija, renalne stenoze, glomerulopatije, glomerulonefritis (kao što su, na primer, primarni glomerulonefritidi; glomerulonefritis sa minimalnom promenom (lipoidna nefroza); membranski glomerulonefritis; fokalna segmentna glomeruloskleroza (FSGS); membranski-proliferativni glomerulonefritis; brzoprogresivni glomerulonefritis; mezangioproliferativni glomerulonefritis (IgA nefritis, Bergerova bolest); post-infektivni glomerulonefritis; sekundarni glomerulonefritidi: dijabetes melitus, eritematozni lupus, amiloidoza, Goodpastureov sindrom, Wegenerova granulomatoza, Henoch-Schönleinova purpura, mikroskopski poliangiitis, akutni glomerulonefritis, pijelonefritis (na primer kao rezultat: urolitijaze, benigne hiperplazije prostate, dijabetesa, malformacija, zloupotrebe analgetika, Crohnove bolesti), glomeruloskleroza, arteriolonekroza bubrega, tubulointersticijske bolesti, nefropatski poremećaji poput primarnih i urođenih ili
4
stečenih bubrežnih poremećaja, Alportov sindrom, nefritis, imunološki poremećaji bubrega kao što su odbacivanje transplantata bubrega i bubrežni poremećaji izazvani imuno-kompleksom, nefropatija izazvana toksičnim supstancama, nefropatija izazvana kontrastnim sredstvima, dijabetička i ne dijabetička nefropatija, bubrežne ciste, nefroskleroza, hipertenzivna nefroskleroza i nefrotični sindrom koji mogu biti dijagnostički okarakterisani, na primer abnormalno smanjenim izlučivanjem kreatinina i/ili vode, abnormalno povišenim koncentracijama ureje, azota, kalijuma i/ili kreatinina, izmenjenom aktivnošću bubrežnih enzima, na primer glutamil sintetaze, izmenjenom osmolarnošću urina ili zapreminom urina, povišenom mikroalbuminurijom, makroalbuminurijom, lezijama na glomerulama i arteriolama, tubularna dilatacija, hiperfosfatemija i/ili potreba za dijalizom. Predmetni pronalazak takođe obuhvata upotrebu jedinjenja prema pronalasku za lečenje i/ili profilaksu posledica renalne insuficijencije, na primer plućnog edema, srčane insuficijencije, uremije, anemije, poremećaja elektrolita (na primer hiperkalemija, hiponatremija) i poremećaja u metabolizmu kostiju i metabolizmu ugljenih hidrata.
[0179] Ovaj pronalazak takođe obuhvata upotrebu jedinjenja prema pronalasku za lečenje i/ili prevenciju posledica renalne insuficijencije, na primer plućnog edema, srčane insuficijencije, uremije, anemije, poremećaja elektrolita (na primer hiperkalemija, hiponatremija) i poremećaja u metabolizmu kostiju i metabolizmu ugljenih hidrata.
[0180] Jedinjenja prema pronalasku su dalje pogodna za lečenje i/ili prevenciju policistične bolesti bubrega (PCKD) i sindroma neadekvatne sekrecije ADH (SIADH).
[0181] Dalje, jedinjenja prema pronalasku su takođe pogodna za lečenje i/ili profilaksu metaboličkog sindroma, hipertenzije, rezistentne hipertenzije, akutne i hronične srčane insuficijencije, koronarne bolesti srca, stabilne i nestabilne angine pektoris, perifernih i kardijalnih vaskularnih poremećaja, aritmija, atrijalnih i ventrikularnih aritmija i oštećene provodljivosti, na primer atrioventrikularni blokovi stepeni I-III (AB blok I-III), supraventrikularna tahiaritmija, atrijalna fibrilacija, atrijalno treperenje, ventrikularna fibrilacija, ventrikularno treperenje, ventrikularna tahiaritmija, Torsade de pointes tahikardija, atrijalni i ventrikularni ekstrasistoli, ekstrasistoli AV-čvora, sindrom bolesnog sinusa, sinkope, AV-nodalna tahikardija ponovnog ulaska, Wolff-Parkinson-White-ov sindrom, akutni koronarni sindrom (ACS), autoimunih srčanih poremećaja (perikarditis, endokarditis, valvolitis, aortitis, kardiomiopatije), šok kao što je kardiogeni šok, septički šok i anafilaktički šok, aneurizme,
4
bokserska kardiomiopatija (prevremena kontrakcija komore (PVC)), za lečenje i/ili profilaksu tromboembolijskih poremećaja i ishemija kao što su ishemija miokarda, infarkt miokarda, moždani udar, hipertrofija srca, prolazni i ishemijski napadi, preeklampsija, inflamatorni kardiovaskularni poremećaji, spazmi koronarnih arterija i perifernih arterija, formiranje edema, na primer plućnoj edema, cerebralnog edema, edema bubrega ili edema uzrokovanog srčanom insuficijencijom, poremećaji periferne cirkulacije, reperfuzijsko oštećenje, arterijske i venske tromboze, insuficijencija miokarda, endotelna disfunkcija, za sprečavanje restenoza, na primer posle trombolitičkih terapija, perkutanih transluminalnih angioplastika (PTA), perkutanih koronarnih transluminalnih angioplastika (PTCA), transplantacija srca i bajpas operacija, i takođe mikro- i makrovaskularnih oštećenja (vaskulitis), povećanih nivoa fibrinogena i lipoproteina male gustine (LDL) i povećanih koncentracija plazminogen aktivator inhibitora tip1 (PAI-1), i takođe za lečenje i/ili profilaksu erektilne disfunkcije i ženske seksualne disfunkcije.
[0182] Pored toga, jedinjenja prema pronalasku su takođe pogodna za lečenje i/ili profilaksu astmatičnih poremećaja, plućne arterijske hipertenzije (PAH) i drugih oblika plućne hipertenzije (PH), obuhvatajući bolesti levog srca, HIV, anemiju srpastih ćelija, tromboembolizme (CTEPH), sarkoidozu, HOBP ili plućnu hipertenziju povezanu sa plućnom fibrozom, hroničnu opstruktivnu bolest pluća (HOBP), sindrom akutnog respiratornog distresa (ARDS), akutnu povredu pluća (ALI), nedostatak alfa-1-antitripsina (AATD), plućnu fibrozu, plućni emfizem (na primer plućni emfizem izazvan cigaretnim dimom) i cističnu fibrozu (CF).
[0183] Jedinjenja opisana u ovom pronalasku su takođe aktivna jedinjenja za kontrolu poremećaja centralnog nervnog sistema koje karakterišu poremećaji NO/cGMP sistema. Oni su pogodni naročito za poboljšanje percepcije, koncentracije, učenja ili pamćenja nakon kognitivnih oštećenja poput onih koja se javljaju posebno u vezi sa situacijama / bolestima / sindromima kao što su blago kognitivno oštećenje, učenje povezano sa starenjem i oštećenja pamćenja, gubici memorije povezani sa godinama, vaskularna demencija, kraniocerebralna trauma, moždani udar, demencija koja se javlja nakon moždanih udara (demencija posle moždanog udara), posttraumatska kraniocerebralna trauma, opšta oštećenja koncentracije, poremećaji koncentracije kod dece sa problemima učenja i pamćenja, Alzheimerova bolest, demencija sa Lewijevim telima, demencija sa degeneracijom frontalnih režnjeva obuhvatajući Pikov sindrom, Parkinsonovu bolest, progresivnu demenciju sa kortikobazalnom degeneracijom, amiolateralnu sklerozu (ALS), Huntingtonovu bolest, demijelinizaciju, multiplu sklerozu, talamičku degeneraciju, Creutzfeld-Jacobovu demenciju, HIV demenciju, šizofreniju sa demencijom ili Korsakoffovu psihozu.
Takođe su pogodni za lečenje i/ili profilaksu poremećaja centralnog nervnog sistema kao što su stanja anksioznosti, napetosti i depresije, seksualnih disfunkcija povezanih sa CNS-om i poremećaja spavanja, i za kontrolu patoloških poremećaja unosa hrane, stimulansa i supstanci koje uzorkuju zavisnost.
[0184] Jedinjenja prema pronalasku su, takođe, pogodna za kontrolu cerebralnog krvotoka i na taj način predstavljaju efikasna sredstva za kontrolu migrena. Takođe su pogodna za profilaksu i kontrolu posledica moždanog infarkta (cerebralna apopleksija) kao što su moždani udar, cerebralna ishemija i kraniocerebralna trauma. Jedinjenja prema pronalasku se takođe mogu koristiti za kontrolu stanja bola i tinitusa.
[0185] Pored toga, jedinjenja prema pronalasku imaju antiinflamatorno dejstvo i stoga se mogu koristiti kao antiinflamatorna sredstva za lečenje i/ili profilaksu sepse (SIRS), otkazivanja više organa (MODS, MOF), inflamatornih poremećaja bubrega, hroničnih crevnih upala (IBD, Crohnove bolesti, UC), pankreatitisa, peritonitisa, reumatoidnih poremećaja, inflamatornih poremećaja kože i inflamatornih poremećaja oka.
[0186] Štaviše, jedinjenja prema pronalasku mogu se takođe koristiti za lečenje i/ili profilaksu autoimunih bolesti.
[0187] Jedinjenja prema pronalasku su takođe pogodna za lečenje i/ili profilaksu fibroznih oboljenja unutrašnjih organa, na primer pluća, srce, bubrega, kostne srži i posebno jetre, i takođe dermatoloških fibroza i fibrotičnih poremećaja oka. U kontekstu ovog pronalaska, izraz fibrotični poremećaji obuhvataju naročito sledeće pojmove: fibroza jetre, ciroza jetre, plućna fibroza, endomiokardijalna fibroza, nefropatija, glomerulonefritis, intersticijalna bubrežna fibroza, fibrotična oštećenja prouzrokovana dijabetesom, fibroza kostne srži i slični fibrotični poremećaji, sklerodermija, morfeja, keloidi, hipertrofično ožiljavanje (takođe nakon hirurških zahvata), mladeži, dijabetična retinopatija, proliferativna vitreoretinopatija i poremećaji vezivnog tkiva (na primer sarkoidoza).
[0188] Jedinjenja prema pronalasku su takođe pogodna za kontrolu postoperativnog ožiljaka, na primer kao rezultat operacija glaukoma.
[0189] Jedinjenja prema pronalasku mogu se takođe kozmetički koristiti kod starenja i
1
keratinizacije kože.
[0190] Štaviše, jedinjenja prema pronalasku su pogodna za lečenje i/ili profilaksu hepatitisa, neoplazme, osteoporoze, glaukoma i gastropareze.
[0191] Predmetni pronalazak dalje obezbeđuje upotrebu jedinjenja prema pronalasku za lečenje i/ili profilaksu poremećaja, posebno gore pomenutih poremećaja.
[0192] Predmetni pronalazak dalje obezbeđuje upotrebu jedinjenja prema pronalasku za lečenje i/ili profilaksu hroničnih bubrežnih poremećaja, akutne i hronične bubrežne insuficijencije, dijabetičkih, inflamatornih ili hipertenzivnih nefropatija, fibrotičnih poremećaja, srčane insuficijencije, angine pektoris, hipertenzije, plućne hipertenzije, ishemije, vaskularnih poremećaja, tromboembolijskih poremećaja, arterioskleroze, anemije srpastih ćelija, erektilne disfunkcije, benigne hiperplazije prostate, disurije povezane sa benignom hiperplazijom prostate, Huntingtonove bolesti, demencije, Alzheimerove bolesti i Creutzfeld-Jakobove bolesti.
[0193] Predmetni pronalazak dalje obezbeđuje postupak za lečenje i/ili profilaksu poremećaja, naročito gore pomenutih poremećaja, koristeći efikasnu količinu najmanje jednog od jedinjenja prema pronalasku..
[0194] Predmetni pronalazak dalje obezbeđuje postupak za lečenje i/ili profilaksu hroničnih bubrežnih poremećaja, akutne i hronične bubrežne insuficijencije, dijabetičkih, inflamatornih ili hipertenzivnih nefropatija, fibrotičnih poremećaja, srčane insuficijencije, angine pektoris, hipertenzije, plućne hipertenzije, ishemija, vaskularnih poremećaja, tromboembolijskih poremećaja, arterioskleroze, anemije srpastih ćelija, erektilne disfunkcije, benigne hiperplazije prostate, disurije povezane sa benignom hiperplazijom prostate, Huntingtonove bolesti, demencije, Alzheimerove bolesti i Creutzfeld-Jakobove bolesti.
[0195] U drugoj realizaciji, inventivna jedinjenja se takođe mogu koristiti za lečenje ili sprečavanje mioma materice (leiomioma materice ili mioma materice) kod žena.
[0196] Fibroidi materice su benigni tumori miometrijuma, glatkog mišićnog sloja materice. Fibroidi materice rastu sporo tokom života žene, a njihov rast zavisi od ženskih polnih hormona estradiola i progesterona [Kawaguchi K i sar. Imunohistohemijska analiza estrogenskih
2
receptora, progesteronskih receptora i Ki-67 u leiomiomu i miometrijumu tokom menstrualnog ciklusa i trudnoće Virchows Arch A Pathol Anat Histopathol. 1991;419(4):309-15.], dakle najveća prevalencija mioma materice sa približno 70% i> 80% kod belaca i kod afroamerikanki, pronađena je od 35. godine nadalje do menopauze, kada se smanjuju zbog smanjenog nivoa hormona [Baird DD i sar. Visoka kumulativna incidencija leiomioma materice kod crnih i belih žena: Ultrazvučni dokazi Am J Obstet Ginecol. 2003 Jan;188(1):100-7.]. Približno 30%, odnosno 45% belih i afroameričkih žena, redom, pokazuju klinički relevantne simptome zbog svojih mioma, koji su jaka menstrualna krvarenja i bol, koji je povezan sa menstrualnim ciklusom [David M i sar. Učestalost i intenzitet bola povezani sa miomom: retrospektivna procena 1548 pacijenata sa miomom. Eur J Obstet Ginecol Reprod Biol. 2016 Apr;199:137-40]. Jaka menstrualna krvarenja u ovom pogledu su definisana gubitkom krvi većim od 80 ml u periodu menstrualnog krvarenja [Fraser IS i sar. Preporuke FIGO o terminologiji i definicijama za normalno i abnormalno krvarenje iz materice, Semin Reprod Med 2011; 29(5): 383-390]. Izgleda da submukozni položaj mioma materice, npr. onih koji se nalaze direktno ispod endometrijuma, ima još ozbiljniji efekat na krvarenje iz materice, što može dovesti do anemije kod pogođenih žena [Yang JH i sar. Uticaj submukoznog mioma na težinu anemije. Fertil Steril.
2011 Apr;95(5):1769-72]. Dalje, miomi materice zbog svojih simptoma ozbiljno utiču na kvalitet života pogođenih žena [Downes E i sar. Teret mioma materice u pet evropskih zemalja. Eur J Obstet Ginecol Reprod Biol.2010 Sep;152(1):96-102].
[0197] Do sada nije razumljivo kako miomi materice izazivaju obilna menstrualna krvarenja. Neregulisani geni u miomima materice, u poređenju sa normalnim miometrijumom, mogu dati nagoveštaj za razumevanje osnovnih mehanizama. U objavljenim internim studijama pronašli smo TDO2, triptofan 2,3-dioksigenazu, koja je visoko regulisanu prema gore [Tsibris JC i sar. Uvid iz niza gena o razvoju i regulaciji rasta leiomioma materice. Fertil Steril. 2002 Jul;78(1):114-21.]. TDO2 metaboliše supstrat L-triptofan u L-kinurenin, koji se dalje može metabolizovati u kinurensku kiselinu. Oba, L-kinurenin i kinurenska kiselina su fiziološki ligandi i aktivatori aril ugljovodoničkog receptora AHR [Opitz CA i sar. Endogeni ligand za promociju tumora humanog aril ugljovodoničkog receptora Nature.2011 Oct 5;478(7368):197-203].
[0198] L-kinurenin kontroliše najmanje dva fiziološka procesa koji su neregulisani kod mioma materice. L-Kinurenin, sintetizovan regulacijom prema gore IDO (Indolamin-2,3-diokigenaze) ili TDO2, i deluje preko AHR receptora, potiskuje imuni sistem i tako sprečava imune ćelije da prepoznaju i očiste tumorske ćelije [Munn DH Blokiranje IDO aktivnosti za poboljšanje anti tumorskog imuniteta. Front Biosci (Elite Ed). 2012 Jan 1;4:734-45]. Dalje, regulacija L-kinurenina dovodi do vazodilatacije sudova, i samim tim može direktno povećati gubitak krvi i krvarenje [Wang Y i sar. Kinurenin je relaksirajući faktor izveden iz endotela, proizveden tokom inflamacije Nature Medicine 16, 279-285 (2010)].
[0199] Ukratko, čini se da regulacija L-kinurenina aktivacijom njegovog fiziološkog receptora AHR podržava rast mioma materice lokalnim potiskivanjem imunološkog sistema i može izazvati obilna menstrualna krvarenja vazodilatacijom sudova endometrijuma u blizini tumora.
[0200] Prema tome, sistemska ili lokalna primena jedinjenja iz ovog pronalaska koja inhibiraju aktivaciju AHR i na taj način blokiraju efekat L-kinurenina izvedenog iz mioma materice predstavlja novu i validnu opciju lečenja mioma materice.
[0201] Jedinjenja iz predmetnog pronalaska mogu se koristiti za inhibiranje, blokiranje, smanjenje ili snižavanje aktivacije AHR egzogenim i/ili endogenim ligandima za smanjenje rasta tumora i modulaciju poremećenih imunoloških odgovora, na primer za blokiranje imunosupresije i povećanje aktivacije imunih ćelija i infiltraciju u kontekstu kancera i imunoterapije kancera. Ovaj postupak obuhvata davanje sisaru kom je to potrebno, obuhvatajući čoveka, količinu jedinjenja iz ovog pronalaska ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, izomer, polimorf, metabolit, hidrat, solvat ili estar; koja je efikasna za lečenje poremećaja.
[0202] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje metode lečenja niza drugih poremećaja u koje je uključen AHR kao što su, ali bez ograničenja, upala, vakcinacija protiv infekcije i kancera, virusnih infekcija, gojaznost i gojaznost izazvana dijetom, gojaznost, metabolički poremećaji, hepatitička steatoza i miomi materice.
[0203] Ovi poremećaji su dobro okarakterisani kod ljudi, ali postoje i sa sličnom etiologijom kod drugih sisara, i mogu se lečiti davanjem farmaceutskih kompozicija iz ovog pronalaska.
[0204] Izraz "lečenje" ili "tretman" kako se koristi u ovom tekstu, koristi se konvencionalno, npr., za upravljanje ili negu subjekta u svrhu borbe, ublažavanja, smanjenja, ublažavanja, poboljšanja stanja bolesti ili poremećaj, kao što su tečni i solidni tumori.
[0205] U skladu sa daljim aspektom, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), kako
4
je gore opisano, ili njihove stereoizomere, tautomere, N-okside, hidrate, solvate i soli, posebno njihove farmaceutski prihvatljive soli, njihove smeše, za upotrebu u lečenju ili profilaksi bolesti, naročito kancera ili stanja sa poremećenim imunološkim odgovorima ili drugim poremećajima povezanim sa aberantnim AHR signaliziranjem.
[0206] Farmaceutska aktivnost jedinjenja prema pronalasku može se objasniti njihovom aktivnošću kao inhibitori AHR.
[0207] ] U skladu sa daljim aspektom, ovaj pronalazak pokriva upotrebu jedinjenja opšte formule (I), kao što je opisano gore, ili njihovih stereoizomera, tautomera, N-oksida, hidrata, solvata i soli, posebno njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, ili njihovih smeša, za lečenje ili profilaksu bolesti, posebno karcinoma ili stanja sa neregulisanim imunološkim odgovorima ili drugim poremećajima povezanim sa aberantnom AHR signalizacijom, posebno tečnih i solidnih tumora.
[0208] U skladu sa daljim aspektom, ovaj pronalazak pokriva upotrebu jedinjenja formule (I), opisanog gore, ili njegovog stereoizomera, tautomera, N-oksida, hidrata, solvata ili njegove soli, naročito njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili njihovih smeša, za profilaksu ili lečenje bolesti, naročito kancera ili stanja sa neregulisanim imunološkim odgovorima ili drugim poremećajima povezanim sa aberantnim AHR signaliziranjem, naročito tečnih i solidnih tumora.
[0209] U skladu sa daljim aspektom, ovaj pronalazak pokriva upotrebu jedinjenja opšte formule (I), kako je opisano gore, ili njihovih stereoizomera, tautomera, N-oksida, hidrata, solvata ili njihovih soli, naročito njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, ili njihovih smeša, u postupku lečenja ili profilakse bolesti, naročito karcinoma ili stanja sa neregulisanim imunološkim odgovorima ili drugim poremećajima povezanim sa aberantnom AHR signalizacijom, naročito tečnih i solidnih tumora.
[0210] U skladu sa daljim aspektom, ovaj pronalazak pokriva upotrebu jedinjenja opšte formule (I), kako je opisano gore, ili njihovih stereoizomera, tautomera, N-oksida, hidrata, solvata ili njihovih soli, naročito njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, ili njihovih smeša, za pripremu farmaceutske kompozicije, poželjno leka, za profilaksu ili lečenje bolesti, posebno kancera ili stanja sa poremećenim imunološkim odgovorima ili drugim poremećajima povezanim sa aberantnom AHR signalizacijom, posebno tečnih i solidnih tumora.
[0211] U skladu sa daljim aspektom, ovaj pronalazak postupak lečenja ili profilakse bolesti, posebno kancera ili stanja sa neregulisanim imunološkim odgovorima ili drugim poremećajima povezanim sa aberantnom AHR signalizacijom, naročito tečnih i solidnih tumora, primenom efikasne količine jedinjenja opšte formule (I), kako je opisano gore, ili njihovih stereoizomera, tautomera, N-oksida, hidrata, solvata ili njihovih soli, naročito njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, ili njihovih smeša.
[0212] U skladu sa daljim aspektom, ovaj pronalazak pokriva farmaceutske kompozicije, naročito lek, koji sadrži jedinjenje opšte formule (I), kako je opisano gore, ili stereoizomer, tautomer, N-oksid, hidrat, solvat, njegovu so, naročito farmaceutski prihvatljivu so, ili smešu istih, i jednog ili više pomoćnih sastojaka, naročito jednog ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenta. Mogu se koristiti uobičajeni postupci za pripremu takvih farmaceutskih kompozicija u odgovarajućim doznim oblicima.
[0213] Predmetni pronalazak dalje obuhvata farmaceutske kompozicije, naročito lekove, koji sadrže najmanje jedno jedinjenje prema pronalasku, konvencionalno, zajedno sa jednim ili više farmaceutski pogodnih ekscipijensa, i njihovu upotrebu u gore pomenute svrhe.
[0214] Moguće je da jedinjenja prema pronalasku imaju sistemsku i/ili lokalnu aktivnost. U tu svrhu mogu se primenjivati na pogodan način, kao što je, na primer, oralno, parenteralno, plućno, nazalno, sublingvalno, jezično, bukalno, rektalno, vaginalno, dermalno, transdermalno, konjunktivno, očno ili putem implantata ili stenta.
[0215] Za ove načine primene, moguće je da se jedinjenja prema pronalasku daju u pogodnim oblicima za davanje.
[0216] Za oralnu primenu, moguće je formulisati jedinjenja prema pronalasku u dozne oblike poznate u tehnici koji brzo i/ili na modifikovan način isporučuju jedinjenja prema pronalasku, kao što su, na primer, tablete (neobložene ili obložene tablete, na primer sa enteričkim premazima ili premazima sa kontrolisanim oslobađanjem koje se rastvaraju sa zakašnjenjem ili su nerastvorljivi), tablete za oralno raspadanje, filmovi/diskovi, filmovi/liofilizati, kapsule (na primer tvrde ili meke želatinske kapsule), tablete obložene šećerom, granule, pelete, praškovi, emulzije, suspenzije, aerosoli ili rastvori. Jedinjenja prema pronalasku je moguće ugraditi u kristalni i/ili amorfni i/ili rastvoreni oblik u navedene dozne oblike.
[0217] Parenteralno davanje se može sprovesti sa izbegavanjem koraka apsorpcije (na primer intravenozno, intraarterijski, intrakardijalno, intraspinalno ili intralumbalno) ili sa uključivanjem apsorpcije (na primer intramuskularno, subkutano, intrakutano, perkutano ili intraperitonealno). Oblici primene koji su pogodni za parenteralno davanje su, između ostalog, preparati za injekcije i infuzije u obliku rastvora, suspenzija, emulzija, liofilizata ili sterilnih prahova.
[0218] Primeri koji su pogodni za druge načine primene su farmaceutski oblici za inhalaciju [između ostalog inhalatori u prahu, nebulizatori], kapi za nos, nazalni rastvori, nazalni sprejevi; tablete/ filmovi / diskovi / kapsule za lingvalnu, sublingvalnu ili bukalnu primenu; supozitorije; kapi za oči, očne masti, kupke za oči, očni ulošci, kapi za uši, sprejevi za uši, prašci za uši, sredstva za ispiranje ušiju, ušni tamponi; vaginalne kapsule, vodene suspenzije (losioni, tečne smeše), lipofilne suspenzije, emulzije, masti, kreme, transdermalni terapijski sistemi (kao što su, na primer, flasteri), mleko, paste, pene, praškovi za prašenje, implantati ili stentovi.
[0219] Jedinjenja prema pronalasku mogu se ugraditi u navedene oblike primene. Ovo se može postići na način poznat sam po sebi mešanjem sa farmaceutski pogodnim ekscipijentima. Farmaceutski pogodne pomoćne supstance obuhvataju, između ostalog,
punila i nosače (na primer celuloza, mikrokristalna celuloza (kao što je, na primer, Avicel®), laktoza, manitol, skrob, kalcijum fosfat (kao što je, na primer, Di-Cafos®)),
baze za mast (na primer vazelin, parafini, trigliceridi, voskovi, vosak od vune, alkoholi od vunenog voska, lanolin, hidrofilna mast, polietilen glikoli),
baze za supozitorije (na primer polietilen glikoli, kakao puter, tvrda mast),
rastvarači (na primer voda, etanol, izopropanol, glicerol, propilen glikol, masna ulja triglicerida srednje dužine, tečni polietilen glikoli, parafini),
surfaktanti, emulgatori, disperzanti ili ovlaživači (na primer natrijum dodecil sulfat), lecitin, fosfolipidi, masni alkoholi (kao što je, na primer, Lanette®), estri sorbitana masnih kiselina (kao što je, na primer, Span®), estri polioksietilen sorbitan masne kiseline (kao što je, na primer, Tween®), gliceridi polioksietilen masne kiseline (kao što je, na primer, Cremophor®), estri polioksietilen masne kiseline, etri polioksietilen masnog alkohola, estri glicerola masne kiseline, poloksameri (kao što je, na primer, Pluronic®),
puferi, kiseline i baze (na primer fosfati, karbonati, limunska kiselina, sirćetna kiselina, hlorovodonična kiselina, rastvor natrijum hidroksida, amonijum karbonat, trometamol, trietanolamin),
sredstva za izotoničnost (na primer glukoza, natrijum hlorid),
adsorbenti (na primer visoko-disperzni silicijum-dioksidi),
agensi za povećanje viskoznosti, agensi za formiranje gela, zgušnjivači i/ili veziva (na primer polivinilpirolidon, metilceluloza, hidroksipropilmetilceluloza, hidroksipropilceluloza, karboksimetilceluloza-natrijum, skrob, karbomeri, poliakrilne kiseline (kao što je, na primer, Carbopol®); alginati, želatin),
dezintegranti (na primer modifikovani skrob, karboksimetilceluloza-natrijum, natrijum skrobglikolat (kao što je, na primer, Explotab®), umreženi polivinilpirolidon, kroskarmeloza-natrijum (kao što je, na primer, AcDiSol®)),
regulatori protoka, maziva, sredstva za klizanje i sredstva za oslobađanje iz kalupa (na primer magnezijum stearat, stearinska kiselina, talk, visoko-disperzni silicijum-dioksidi (kao što je, na primer, Aerosil®)),
materijali za oblaganje (na primer šećer, šelak) i forme za oblikovanje filma ili difuzijske membrane koje se rastvaraju brzo ili na modifikovan način (na primer polivinilpirolidoni (kao što je, na primer, Kollidon®), polivinil alkohol, hidroksipropilmetilceluloza, hidroksipropilceluloza, etilceluloza, hidroksipropilmetilceluloza ftalat, celuloza acetat, celuloza acetat ftalat, poliakrilati, polimetakrilati kao što je, na primer, Eudragit®)),
materijali za kapsule (na primer želatin, hidroksipropilmetilceluloza),
sintetički polimeri (na primer polilaktidi, poliglikolidi, poliakrilati, polimetakrilati (kao što je, na primer, Eudragit®), polivinilpirolidoni (kao što je, na primer, Kollidon®), polivinil alkoholi, polivinil acetati, polietilen oksidi, polietilen glikoli i njihovi kopolimeri blok-kopolimeri), plastifikatori (na primer polietilen glikoli, propilen glikol, glicerol, triacetin, triacetil citrat, dibutil ftalat),
pojačivači penetracije,
stabilizatori (na primer antioksidanti kao što je, na primer, askorbinska kiselina, askorbil palmitat, natrijum askorbat, butilhidroksianizol, butilhidroksitoluen, propil galat),
konzervansi (na primer parabeni, sorbinska kiselina, tiomersal, benzalkonijum hlorid, hlorheksidin acetat, natrijum benzoat),
bojila (na primer neorganski pigmenti kao što su, na primer, oksidi gvožđa, titanijum dioksid), arome, zaslađivači, agensi koji maskiraju arome i/ili mirise.
[0220] Ovaj pronalazak se dalje odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži najmanje jedno jedinjenje prema ovom pronalasku, konvencionalno zajedno sa jednim ili više farmaceutski pogodnih ekscipijenata i na njihovu upotrebu u skladu sa ovim pronalaskom.
[0221] U skladu sa drugim aspektom, ovaj pronalazak pokriva farmaceutske kombinacije, posebno lekove, koji sadrže bar jedno jedinjenje opšte formule (I) iz predmetnog pronalaska i najmanje jedan ili više daljih aktivnih sastojaka, naročito za lečenje i/ili profilaksu kancera ili stanja sa poremećenim imunološkim odgovorima ili drugim poremećajima povezanim sa poremećenim AHR signalnim poremećajima opšteg imena, posebno tečnih i solidnih tumora.
[0222] Izraz "kombinacija" u ovom pronalasku koristi se kao poznat stručnjacima, a moguće je da navedena kombinacija bude fiksna kombinacija, ne-fiksna kombinacija ili komplet delova.
[0223] "Fiksna kombinacija" u ovom pronalasku se koristi kao poznata stručnjacima u oblasti i definiše se kao kombinacija u kojoj, na primer, prvi aktivni sastojak, kao što je jedno ili više jedinjenja opšte formule (I) iz predmetnog pronalaska, i dalji aktivni sastojak su prisutni zajedno u jednoj jediničnoj dozi ili kao jedan entitet. Jedan primer "fiksne kombinacije" je farmaceutska kompozicija u kojoj su prvi aktivni sastojak i sledeći aktivni sastojak prisutni u smeši za istovremenu primenu, kao što je u formulaciji. Sledeći primer "fiksne kombinacije" je farmaceutska kombinacija u kojoj su prvi aktivni sastojak i sledeći aktivni sastojak prisutni u jednoj jedinici bez da su u smeši.
[0224] Ne-fiksna kombinacija ili „komplet delova“ u ovom pronalasku koristi se kao što je poznato stručnjacima i definiše se kao kombinacija u kojoj su prvi aktivni sastojak i sledeći aktivni sastojak prisutni u više od jedne jedinice. Jedan primer ne-fiksne kombinacije ili kompleta delova je kombinacija u kojoj su prvi aktivni sastojak i sledeći aktivni sastojak prisutni odvojeno. Moguće je da se komponente ne-fiksne kombinacije ili kompleta delova administriraju odvojeno, uzastopno, istovremeno, istovremeno ili hronološki raspoređene.
[0225] Na osnovu standardnih laboratorijskih tehnika poznatih za procenu jedinjenja korisnih za lečenje kancera ili stanja sa neregulisanim imunološkim odgovorima ili drugih poremećaja povezanim sa aberantnom AHR signalizacijom, standardnim testovima toksičnosti i standardnim farmakološkim testovima za određivanje lečenja gore identifikovanih stanja kod sisara, i upoređivanjem ovih rezultata sa rezultatima poznatih aktivnih sastojaka ili lekova koji se koriste za lečenje ovih stanja, efikasna doza jedinjenja ovog pronalaska može se lako odrediti za lečenje svake željene indikacije. Količina aktivnog sastojka koji se daje u lečenju jednog od ovih stanja može široko da varira u zavisnosti od određenog jedinjenja i dozne jedinice koja se koristi, načina primene, perioda lečenja, starosti i pola lečenog pacijenta, i prirodi i obimu lečenog stanja.
[0226] Ukupna količina aktivnog sastojka koja se primenjuje generalno će biti u opsegu od oko 0.001 mg/kg do oko 200 mg/kg telesne težine dnevno, i poželjno od oko 0.01 mg/kg do oko 20 mg/kg telesne težine dnevno. Klinički korisni rasponi doziranja kretaće se od jednog do tri puta dnevno do doziranja jednom u četiri nedelje. Pored toga, moguće je da "odmor od leka", u kojem se pacijentu određeno vreme ne dozira lek, bude koristan za ukupnu ravnotežu između farmakološkog efekta i podnošljivosti. Moguće je da jedinična doza sadrži od oko 0.5 mg do oko 1500 mg aktivnog sastojka, i može se primenjivati jedan ili više puta dnevno ili manje od jednom dnevno. Prosečna dnevna doza za davanje injekcijama, obuhvatajući intravenske, intramuskularne, potkožne i parenteralne injekcije, i upotreba infuzionih tehnika biti će poželjno od 0.01 do 200 mg/kg ukupne telesne težine. Prosečni dnevni rektalni režim doziranja će poželjno biti od 0.01 do 200 mg/kg ukupne telesne težine. Prosečni dnevni režim vaginalnog doziranja će poželjno biti od 0.01 do 200 mg/kg ukupne telesne težine. Prosečni dnevni režim lokalnog doziranja će poželjno biti od 0.1 do 200 mg primenjivan između jednog i četiri puta dnevno. Transdermalna koncentracija će poželjno biti ona potrebna za održavanje dnevne doze od 0.01 do 200 mg/kg. Prosečni dnevni režim doziranja inhalacijom biti će poželjno od 0.01 do 100 mg/kg ukupne telesne težine.
[0227] Naravno, specifični inicijalni i kontinuirani režim doziranja za svakog pacijenta variraće u zavisnosti od prirode i težine stanja kako ga određuje lekar dijagnostičar, aktivnosti određenog jedinjenja koje se koristi, starosti i opšteg stanja pacijenta, vremenu primene, načinu primene, brzini izlučivanja leka, kombinaciji lekova i slično. Željeni način lečenja i broj doza jedinjenja iz predmetnog pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili estra ili njegove kompozicije mogu da utvrde stručnjaci u praksi koristeći konvencionalne testove lečenja.
EKSPERIMENTALNI DEO
[0228] Oblici NMR vrhova su navedeni onako kako se pojavljuju u spektrima, mogući efekti višeg reda nisu uzeti u obzir. Višestrukosti su navedene prema obliku signala koji se pojavljuje u spektru, NMR-spektroskopski efekti višeg reda nisu uzeti u obzir. Višestrukost NMR signala: s = singlet, d = dublet, t = triplet, q = kvartet, quin = kvintet, br = širok signal, m = multiplet. NMR signali: pomak u [ppm]. Kombinacije višestrukosti mogu biti npr. dd = dublet od dubleta.
[0229] Hemijska imena su generisana korišćenjem softvera ACD/Name od kompanije ACD/Labs. U nekim slučajevima umesto imena koja generiše softver ACD/Name korišćena su opšteprihvaćena imena komercijalno dostupnih reagensa.
[0230] Tabela 1 navodi skraćenice korišćene u ovom pasusu i u odeljku sa Primerima, ukoliko nisu objašnjene u okviru teksta. Ostale skraćenice imaju svoja značenja koja su uobičajena za stručnu osobu.
Tabela 1: Skraćenice
1
[0231] Razni aspekti pronalaska opisani u ovoj prijavi ilustrovani su sledećim primerima koji nisu namenjeni ograničavanju pronalaska na bilo koji način.
[0232] Ovde opisani primeri eksperimenata za testiranje služe za ilustraciju ovog pronalaska i pronalazak nije ograničen na date primere.
EKSPERIMENTALNI DEO – OPŠTI DEO
[0233] Svi reagensi, za koje sinteza nije opisana u eksperimentalnom delu, su ili komercijalno dostupni ili su poznata jedinjenja ili se mogu obrazovati iz poznatih jedinjenja prema postupcima poznatim stručnjacima u tehnici.
[0234] Jedinjenjima i intermedijarima proizvedenim prema postupcima iz pronalaska može biti potrebno prečišćavanje. Prečišćavanje organskih jedinjenja je dobro poznato stručnjaku i može postojati nekoliko načina prečišćavanja istog jedinjenja. U nekim slučajevima možda neće biti potrebno prečišćavanje. U nekim slučajevima, jedinjenja se mogu prečistiti kristalizacijom. U nekim slučajevima nečistoće se mogu izbaciti mešanjem upotrebom pogodnog rastvarača. U nekim slučajevima, jedinjenja se mogu prečistiti hromatografijom, posebno fleš hromatografijom na koloni, koristeći na primer unapred upakovane patrone silika gela, npr. Biotage SNAP patrone KP-Sil® ili KP-NH® u kombinaciji sa Biotage sistemom za automatsko prečišćavanje (SP4® ili Isolera Four®) i eluente kao što su gradijenti heksana/etil acetata ili DCM/metanola. U nekim slučajevima, jedinjenja se mogu prečistiti preparativnom HPLC upotrebom na primer Waters auto-prečistača opremljenog detektorskim nizom dioda i/ili on-line elektrosprej jonizacionim masenim spektrometrom u kombinaciji sa odgovarajućom unapred
2
upakovanom kolonom reverzne faze i eluentima kao što su gradijenti vode i acetonitrila koji može sadržati aditive kao što su trifluorosirćetna kiselina, mravlja kiselina ili vodeni rastvor amonijaka.
[0235] U nekim slučajevima, gore opisani postupci prečišćavanja mogu dati ona jedinjenja predmetnog pronalaska koja imaju dovoljno bazičnu ili kiselu funkcionalnost u obliku soli, kao što je, u slučaju jedinjenja iz predmetnog pronalaska koje je dovoljno bazično, na primer trifluoroacetatna ili formatna so, ili, u slučaju jedinjenja iz ovog pronalaska koje je dovoljno kiselo, na primer amonijeva so. So ove vrste može se transformisati u slobodnu bazu ili u oblik slobodne kiseline, različitim postupcima poznatim stručnjaku, ili se može koristiti kao so u sledećim biološkim testovima. Podrazumeva se da specifični oblik (npr. so, slobodna baza itd.) jedinjenja iz predmetnog pronalaska kako je izolovan i kako je ovde opisan nije nužno jedini oblik u kom se navedeno jedinjenje može primeniti na biološki test u cilju kvantifikovanja specifične biološke aktivnosti.
EKSPERIMENTALNI DEO - INTERMEDIJARI
Intermedijar 1
Di-tert-butil 1-(1-metil-1H-pirazol-4-il)hidrazin-1,2-dikarboksilat
[0236]
[0237] U rastvor 1.5 g 4-bromo-1-metil-1H-pirazola u 30 mL tetrahidrofurana (30 mL) ohlađen na -78°C dodato je 1.7 mL n-butillitijuma (2M u THF). Posle mešanja na - 78°C tokom 30 minuta, dodat je kap po kap rastvor 2.1 g di-tert-butil azodikarboksilata u 10 mL tetrahidrofurana. Posle 1 h, reakciona smeša je zagrejana do -20°C i ugašena sa ledom. Posle zagrevanja na sobnu temperaturu, smeša je filtrirana i isprana tetrahidrofuranom. Dobijena čvrsta supstanca je prebačena u smešu dihlorometana i vode i smeša je odvojena na faze. Posle uparavanja u vakuumu, ostatak je podvrgnut kolonskoj hromatografiji (petrol etar / etil acetat 2:1) da se dobije 800 mg di-tert-butil 1-(1-metil-1H-pirazol-4-il)hidrazin-1,2-dikarboksilata.
<1>H-NMR: (300 MHz, 25°C, Metanol-d4): δ [ppm] = 1.44 (s, 18H); 3.77 (s, 3H); 7.17-7.28 (m, 1H); 7.61-7.67 (m, 1H); 9.60 (s, 1H).
Intermedijar 2
4-Hidrazinil-1-metil-1H-pirazol trifluoroacetat (1:1)
[0238]
[0239] Smeša 800 mg intermedijara 1 u 15 mL dihlorometana i 1 mL trifluorosirćetne kiseline je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata. Smeša je uparena do suva da bi se dobilo 750 mg (sirovog) proizvoda koji se može koristiti u sledećem koraku direktno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H-NMR: (300 MHz, 25°C, DMSO-de): δ [ppm] = 3.79 (s, 3H); 7.33 (s, 1H); 7.57 (s, 1H); 9.49 (br s, 3H).
Intermedijar 3
Dimetil [2-(4-metilfenil)-2-oksoetil]propandioat
[0240]
[0241] Rastvor 49.6 g 2-bromo-1-(4-metilfenil)etanona u 300 mL acetona dodat je kap po kap na sobnoj temperaturi u rastvor 10 g dimetil malonata u 120 mL acetona. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 sata. Zatim je rastvarač uklonjen u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (petrol etar / etil acetat 10 : 1) da se dobije 10.3 g dimetil [2-(4-metilfenil)-2-oksoetil]propandioata.
<1>H-NMR: (400 MHz, 25°C, DMSO-de): δ ]ppm] = 2.38 (s, 3H); 3.60 (d, 2H); 3.68 (s, 6H); 3.97 (t, 1H); 7.34 (d, 2H); 7.89 (d, 2H).
Intermedijar 4
Metil 6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-
4
karboksilat
[0242]
[0243] Smeša 818 mg intermedijara 3 i 700 mg intermedijara 2 u 20 mL etanola je mešana na 80°C tokom 2 sata. Zatim je rastvarač uklonjen u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (petrol etar / etil acetat 3:2) da se dobije 500 mg metil 6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilata.
<1>H-NMR: (400 MHz, 25°C, CDCl3): δ [ppm] = 2.41 (s, 3H); 3.14 (dd, 1H); 3.51 (dd, 1H); 3.76 (dd, 1H); 3.79 (s, 3H); 3.91 (s, 3H); 7.27 (d, 2H, signal delimično ispod CDCl3signala); 7.74 (d, 2H); 7.87 (s, 1H); 8.00 (s, 1H).
Intermedijar 5
Metil 6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0244]
[0245] Smeša 450 mg intermedijara 4 i 371 mg bakar(II) hlorida u 20 mL acetonitrila je mešana na 90°C tokom 2 sata. Posle uparavanja u vakuumu, ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (dihlorometan / metanol 20:1) da se dobije 380 mg metil 6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilata.
<1>H-NMR: (400 MHz, 25°C, DMSO-d6): δ [ppm] = 2.37 (s, 3H); 3.88 (s, 3H); 3.91 (s, 3H); 7.34 (d, 2H); 7.93 (d, 2H); 8.08 (s, 1H); 8.40 (s, 1H); 8.49 (s, 1H).
Intermedijar 6
6-(4-Metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0246]
[0247] Smeša 380 mg intermedijara 5 u 30 mL acetonitrila je tretirana sa 147 mg litijum hidroksida, rastvorenog u 2 mL vode. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata. Zatim je pH vrednost podešena na 5-6 sa hlorovodoničnom kiselinom (10%). Čvrste supstance su sakupljene filtracijom, isprane tri puta vodom i osušene u pećnici da se dobije 310 mg 6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline.
<1>H-NMR: (400 MHz, 25°C, DMSO-d6): δ [ppm] = 2.37 (s, 3H); 3.91 (s, 3H); 7.32 (d, 2H); 7.89 (d, 2H); 7.95 (s, 1H); 8.04 (s, 1H); 8.40 (s, 1H).
Intermedijar 7
6-(4-Metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karbonil hlorid [0248]
[0249] 110 mg oksalilhlorida je polako dodato u rastvor 180 mg intermedijara 6 u 10 mL dihlorometana i 0.1 mL N,N-dimetilformamida. Reakciona smeša je mešana na 0°C tokom 1 h. Smeša je uparena do suva da bi se dobilo 260 mg sirovog 6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karbonil hlorida koji je korišćen u sledećem koraku direktno bez daljeg prečišćavanja.
Intermedijar 8
Dimetil [2-(4-hlorofenil)-2-oksoetil]malonat
[0250]
[0251] 2-Hloro-1-(4-hlorofenil)etanon (25 g, 107.1 mmol) je rastvoren u acetonu (500 mL). Zatim su na sobnoj temperaturi dodati, dimetil malonat (31.1 g, 235.4 mmol) i kalijum karbonat (22.2 g, 160.6 mmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je redukovana pod vakuumom na polovinu svoje zapremine. Zatim je ostatak sipan u vodu. Slojevi su odvojeni i vodena faza je ekstrahovana dva puta sa etil acetatom. Kombinovani organski slojevi su isprani sa vodom i koncentrovanim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušeni iznad natrijum sulfata i koncentrovani. Sirovi proizvod je prečišćen sa fleš hromatografijom (gradijent silika gel, heksan / etil acetat) dajući 12.21 g (36%) naslovnog proizvoda.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.63 (d, 2H), 3.68 (s, 6H), 3.97 (t, 1H), 7.59 - 7.64 (m, 2H), 7.99 - 8.03 (m, 2H).
Intermedijar 9
Metil 6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilat
[0252]
[0253] Dimetil [2-(4-hlorofenil)-2-oksoetil]malonat (1360 mg, 4.78 mmol) i natrijum acetat (1037 mg, 12.65 mmol) su rastvoreni u sirćetnoj kiselini (40 mL). Zatim je u porcijama dodat, 4-hidrazino-1-metil-1H-pirazol dihidrohlorid (780 mg, 4.22 mmol). Ovo je mešano tokom 1 h na sobnoj temperaturi i 20 h na 50°C. Reakciona smeša je ohlađena i koncentrovana na rotacionom isparivaču pod sniženim pritiskom. Dodati su etil acetat i voda da bi se rastvorio ostatak. Dodat je koncentrovani vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata, faze su odvojene, i vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom (četiri puta sa 80 mL). Kombinovani organski slojevi su dva puta isprani sa vodom, osušeni iznad magnezijum sulfata i koncentrovani. Ostatak je prečišćen sa fleš hromatografijom (gradijent silika gel, heksan / etil acetat) da se dobije 530 mg (36%) naslovnog proizvoda.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.35 - 3.46 (m, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 4.03 (dd, 1H), 7.52 - 7.57 (m, 2H), 7.75 (d, 1H), 7.92 - 7.96 (m, 2H), 8.08 (s, 1H).
Intermedijar 10
Metil 6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0254]
[0255] Metil 6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilat (600 mg, 1.730 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (40 mL). Dodat je bakar dihlorid (698 mg, 5.191 mmol). Ovo je mešano tokom 4 h na 90°C. Ovo je ohlađeno i koncentrovano na rotacionom isparivaču. Dodata je voda, preostala čvrsta supstanca je filtrirana usisavanjem, isprana pet puta vodom i osušena pod vakuumom na 50°C da se dobije 741 mg naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.88 (s, 3H), 3.91 (s, 3H), 7.59 (d, 2H), 8.05 - 8.13 (m, 3H), 8.44 (s, 1H), 8.52 (br s, 1H).
Intermedijar 11
6-(4-Hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0256]
[0257] Metil 6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (600 mg, 1.74 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (60 mL). Dodat je rastvor litijum hidroksida (125 mg, 5.221 mmol) u vodi (1.90 mL) na sobnoj temperaturi. Ovo je mešano tokom 10 h na 40°C. Dodata je voda i pH je podešen na 4 sa 2N HCI. Talog je profiltriran sa odsisavanjem, ispran tri puta sa vodom i osušen pod vakuumom na 50°C dajući 520 mg (90%) naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.91 (s, 3H), 7.54 (br d, 2H), 7.78 (s, 1H), 8.00 - 8.07 (m, 3H), 8.41 (s, 1H).
Intermedijar 12
Metil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilat
[0258]
[0259] Dimetil [2-(4-hlorofenil)-2-oksoetil]malonat (16.30 g, 57.25 mmol) je rastvoren u sirćetnoj kiselini (203 mL). Dodat je rastvor hidrazina u THF (80 mL, 1.0M, 80 mmol) na sobnoj temperaturi. Ovo je mešano tokom 5.5 h na 75°C i na sobnoj temperaturi preko noći. Zatim je ovo mešano na 75°C. Posle 2.5 h dodat je rastvor hidrazina u THF (24 mL, 1.0M, 24 mmol) i mešanje na 75°C je nastavljeno tokom 1.5 sata. Reakciona smeša je ohlađena i dodata je voda (1 L). Talog je profiltriran sa odsisavanjem, ispran sa vodom i osušen pod vakuumom na 50°C dajući 12.14 g (80%) naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.16 (dd, 1H), 3.26 (dd, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.75 (dd, 1H), 7.47 - 7.52 (m, 2H), 7.75 - 7.79 (m, 2H), 11.31 (s, 1H).
Intermedijar 13
Metil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0260]
[0261] Metil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilat (4.97 g, 18.64 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (350 mL). Dodat je bakar dihlorid (6.26 g, 46.59 mmol) i ovo je mešano tokom 5.5 h na 70°C. Zatim je dodat dodatni bakar dihlorid (0.626 g, 4.66 mmol) i mešanje na 70°C je nastavljeno tokom 1 h. Reakciona smeša je ohlađena i koncentrovana na rotacionom isparivaču do polovine svoje zapremine. Dodata je voda (300 mL) i reakciona smeša je mešana tokom 10 min. Talog je filtriran usisavanjem, ispran tri puta sa vodom i osušen na 50°C pod vakuumom da se dobije 4.793 g (97%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.85 (s, 3H), 7.53 - 7.58 (m, 2H), 7.89 - 7.93 (m, 2H), 8.38 (s, 1H), 13.70 (s, 1H).
Intermedijar 14
Dimetil {2-okso-2-[4-(trifluorometil)fenil]etil}malonat
[0262]
[0263] Dimetil malonat (9.894 g, 74.89 mmol) i kalijum karbonat (7.763 g, 56.17 mmol) dodati su u aceton (140 mL). Pod hlađenjem (0-5°C) kap po kap je dodat rastvor 2-bromo-1-[4-(trifluorometil)fenil]etanona (10 g, 37.4 mmol) u acetonu (60 mL). Ovo je mešano 2 h na 0-5°C i na sobnoj temperaturi preko noći. Isparljiva jedinjenja su uklonjena na rotacionom uparivaču. Dodati su voda i etil acetat, slojevi su odvojeni i vodena faza je ekstrahovana dva puta sa etil acetatom. Kombinovani organski slojevi su isprani sa koncentrovanim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušeni iznad magnezijum sulfata i koncentrovani. Sirovi proizvod je prečišćen sa fleš hromatografijom (silika gel, gradijent heksan / etil acetat) dajući 8.03 g (67%) naslovnog proizvoda.
<1>H-NMR (400MHz, HLOROFORM-d3): δ [ppm] = 3.65 (d, 2H), 3.79 (s, 6H), 4.10 (t, 1H), 7.73 - 7.77 (m, 2H), 8.07 - 8.11 (m, 2H).
Intermedijar 15
Metil 3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilat [0264]
[0265] Dimetil {2-okso-2-[4-(trifluorometil)fenil]etil}malonat (5.68 g, 17.55 mmol) je rastvoren u sirćetnoj kiselini (64 mL). Dodat je rastvor hidrazina u THF (35 mL, 1.0M, 35 mmol) na sobnoj temperaturi. Ovo je mešano tokom 3.5 h na 75°C. Zatim je dodat, rastvor hidrazina u THF (3.5 mL, 1.0M, 3.5 mmol) i mešanje na 75°C je nastavljeno tokom 1 h. Reakciona smeša je ohlađena i dodata je voda (0.6 L). Talog je profiltriran sa odsisavanjem, ispran sa vodom i osušen pod vakuumom na 50°C dajući 4.06 g (76%) naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.23 (dd, 1H), 3.28 - 3.36 (m, 1H i signal vode), 3.68 (s, 3H), 3.79 (dd, 1H), 7.80 (d, 2H), 7.96 (d, 2H), 11.43 (s, 1H).
Intermedijar 16
Metil 3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0266]
1
[0267] Metil 3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilat (4.06 g, 13.52 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (180 mL). Dodat je bakar dihlorid (4.55 g, 33.81 mmol) i ovo je mešano tokom 2.5 h na 90°C. Reakciona smeša je ohlađena i koncentrovana na rotacionom isparivaču do polovine svoje zapremine. Dodata je voda (350 mL) i reakciona smeša je mešana tokom 10 min. Talog je filtriran usisavanjem, ispran tri puta sa vodom i osušen na 50°C pod vakuumom da se dobije 3.67 g (91%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.86 (s, 3H), 7.86 (d, 2H), 8.11 (d, 2H), 8.45 (s, 1H), 13.83 (s, 1H).
Intermedijar 17
Metil 2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0268]
[0269] Metil 3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (0.5 g, 1.68 mmol) je rastvoren u DMF (26.6 mL). Dodati su 1-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (698 mg, 3.53 mmol), 2,2'-bipiridin (655 mg, 4.19 mmol), cezijum vodonik karbonat (390 mg, 2.01 mmol), i anhidrovani bakar diacetat (380.7 mg, 2.10 mmol). Ovo je mešano tokom 21 h na sobnoj temperaturi. Dodat je 1-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (349 mg, 1.68 mmol) i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi preko noći. Dodata je voda (5 mL) i pH je podešen na 3 sa 2N HCl (3.5 mL). Talog je filtriran, ispran tri puta sa vodom, i osušen na 50°C pod vakuumom da se dobije 594 mg (63%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.89 (s, 3H), 3.92 (s, 3H), 7.88 (br d, 2H), 8.11 (s, 1H), 8.28 (br d, 2H), 8.52 (s, 1H), 8.52 (s, 1H).
Intermedijar 18
2
2-(1-Metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0270]
[0271] Metil 2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (590 mg, 1.56 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (54 mL). Dodat je rastvor litijum hidroksida (112 mg, 4.70 mmol) u vodi (1.7 mL) na sobnoj temperaturi. Ovo je mešano tokom 3 h na sobnoj temperaturi. Dodata je voda (100 mL) i pH je podešen na 6 sa 2N HCl. Talog je profiltriran sa odsisavanjem, ispran sa vodom i osušen pod vakuumom na 50°C dajući 345 mg (45%) naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.93 (br s, 3H), 7.47 - 8.39 (m, 7H).
Intermedijar 19
6-(4-Hlorofenil)-2-(1-ciklobutil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0272]
[0273] Korak 1: Metil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (0.5 g, 1.89 mmol) je rastvoren u DMF (15 mL). Dodati su 1-ciklobutil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (1406 mg, 5.67 mmol), 2,2'-bipiridin (737.7 mg, 4.72 mmol), natrijum hidrogen karbonat (318 mg, 3.78 mmol), i anhidrovani bakar diacetat (429 mg, 3.79 mmol). Ovo je mešano tokom 96 h na sobnoj temperaturi. Dodata je voda i pH je podešen na 3 sa 2N HCl. Talog je filtriran, ispran tri puta sa vodom, i osušen na 50°C pod vakuumom da se dobije 370 mg (36%) metil estra koji je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
[0274] Korak 2: Estar (293 mg, 0.76 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (16.7 mL). Dodat je rastvor litijum hidroksida (55 mg, 2.28 mmol) u vodi (0.65 mL) na sobnoj temperaturi. Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Dodata je voda i pH je podešen na 6 sa 2N HCl. Talog je profiltriran sa odsisavanjem, ispran sa vodom i osušen pod vakuumom na 50°C dajući 93 mg (33%) naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0275] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1 mm; eluent A: voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%), eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 0.64 min; MS (ESIpos): m/z = 371.3 [M+H]<+>
Intermedijar 20
Dimetil {2-okso-2-[4-(trifluorometoksi)fenil]etil}malonat
[0276]
[0277] 4.1 g dimetil malonata i 3.2 g kalijum karbonata dodati su u rastvor 4.4 g 2-bromo-1-[4-(trifluorometoksi)fenil]etan-1-ona u 110 mL acetona. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i zatim je ugašena sa vodom. Aceton je uparen i preostala vodena faza je ekstrahovana tri puta sa etil acetatom. Kombinovane organske faze su isprane sa fiziološkim rastvorom, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (gradijent heksan / etil acetat sa do 30% etil acetata) da se dobije 4.9 g dimetil {2-okso-2-[4-(trifluorometoksi)fenil]etil}malonata.
[0278] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH
4
C18 1.7 50x2.1 mm; eluent A: Voda 0.1vol. % mravlje kiseline (99%) eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 1.22 min; MS (ESIpos): m/z = 335 [M+H]<+>
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.33 (s, 6 H), 3.62 - 3.67 (m, 2 H), 3.99 (t, 1 H), 7.52 (dd, 2 H), 8.11 - 8.16 (m, 2 H).
Intermedijar 21
Metil 2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilat
[0279]
[0280] Smeša 954 mg dimetil {2-[4-(difluorometoksi)fenil]-2-oksoetil}malonata, 1111 mg 4-hidrazino-1-metil-1H-pirazol dihidrohlorida i 1053 mg natrijum acetata u 27 mL AcOH mešana je na sobnoj temperaturi tokom 14 h i 50°C tokom 6 h. Reakciona smeša je koncentrovana i ostatak je prebačen u vodu i etil acetat praćeno dodavanjem zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata. Faze su odvojene, a vodena faza je ekstrahovana tri puta sa etil acetatom. Kombinovane organske faze su isprane sa fiziološkim rastvorom, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane i uparene do suva. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (gradijent heksan / etil acetat sa do 80% etil acetata) da se dobije 559 mg metil 2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilata.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.40 - 3.43 (m, 2 H), 3.69 (s, 3 H), 3.85 (s, 3 H), 4.04 (t, 1 H), 7.48 (d, 2 H), 7.75 (s, 1 H), 8.04 (d, 2 H), 8.08 (s, 1 H).
Intermedijar 22
Metil 2-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0282] Smeša 686 mg metil 2-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilata i 698 mg bakar(II) hlorida u 23 mL acetonitrila je mešana na 50°C tokom 2 sata i 90°C tokom 3 h. Posle uparavanja u vakuumu, ostatak je suspendovan u vodi i talog je profiltriran da se dobije 528 mg metil 2-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilata.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.89 (s, 3 H), 3.92 (s, 3 H), 7.52 (d, 2 H), 8.09 (s, 1 H), 8.15 - 8.20 (m, 2 H), 8.46 (s, 1 H), 8.51 (s, 1 H).
Intermedijar 23
2-(1-Metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0283]
[0284] Smeša 528 mg metil 2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilata i 1.7 mL 2N vodenog rastvora natrijum hidroksida u 7 mL tetrahidrofurana mešana je na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je pH vrednost podešena na 3 sa 1M hlorovodonične kiseline i talog je odfiltriran, ispran sa vodom i osušen u vakuumu da se dobije 458 mg 2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.92 (s, 3 H), 7.51 (d, 2 H), 8.11 (s, 1 H), 8.17 - 8.24 (m, 2 H), 8.42 (s, 1 H), 8.52 (s, 1 H).
Intermedijar 24
Dimetil {2-[4-(difluorometil)fenil]-2-oksoetil}propandioat
[0285]
[0286] Smeša 2.5 g 2-bromo-1-[4-(difluorometil)fenil]etanona (CAS 1227004-73-0), 4.6 mL dimetil malonata i 2.1 g kalijum karbonata u 70 mL acetona mešana je na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Nakon potpune konverzije (TLC) reakciona smeša je sipana u vodu i aceton je uparen pod sniženim pritiskom. Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa etil acetatom tri puta, kombinovane organske faze su isprane sa vodom i fiziološkim rastvorom i rastvarač je uparen u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (gradijent heksani / etil acetat do 40% etil acetata) da se dobije 1.45 g dimetil {2-[4-(difluorometil)fenil]-2-oksoetil}propandioata.<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.64-3.70 (m, 8H); 4.00 (t, 1H); 7.15 (t, 1H); 7.74 (d, 2H); 8.12 (d, 2H).
Intermedijar 25
Metil 6-[4-(difluorometil)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilat
[0287]
[0288] Smeša 75 mg dimetil {2-[4-(difluorometil)fenil]-2-oksoetil}propandioata, 44 mg 4-hidrazino-1-metil-1H-pirazol dihidrohlorida i 53 mg natrijum acetata u 2.5 mL AcOH mešana je na sobnoj temperaturi tokom 1 h i 50°C tokom 24 h. Dodato je još 88 mg 4-hidrazino-1-metil-1H-pirazol dihidrohlorida i reakciona smeša je mešana na 50°C tokom 6 sati. Reakciona smeša je koncentrovana i ostatak je prebačen u vodu i etil acetat praćeno dodavanjem zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata. Faze su odvojene, a vodena faza je ekstrahovana tri puta sa etil acetatom. Kombinovane organske faze su isprane sa fiziološkim rastvorom, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane i uparene do suva. Ostatak je prečišćen sa HPLC (Instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 85% / B 15% → A 45% / B 55%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 24 mg metil 6-[4-(difluorometil)fenil]-2-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3,4,5-tetra-hidropiridazin-4-karboksilata.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.43 (dd, 2 H), 3.69 (s, 3 H), 3.85 (s, 3 H), 4.02 - 4.08 (m, 1 H), 7.11 (t, 1 H), 7.68 (d, 2 H), 7.76 (s, 1 H), 8.06 (d, 2 H), 8.09 (s, 1 H).
Intermedijar 26
Metil 6-[4-(difluorometil)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0289]
[0290] Smeša 495 mg metil 6-[4-(difluorometil)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3,4,5-tetra-hidropiridazin-4-karboksilata i 551 mg bakar(II) hlorida u 15 mL acetonitrila mešana je na 90°C tokom 2 sata. Posle uparavanja u vakuumu, ostatak je suspendovan u vodi i talog je profiltriran da se dobije 451 mg metil 6-[4-(difluorometil)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilata.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.89 (s, 3 H), 3.92 (s, 3 H), 7.13 (t, 1 H), 7.72 (d, 2 H), 8.11 (s, 1 H), 8.20 (d, 2 H), 8.48 (s, 1 H), 8.52 (s, 1 H).
Intermedijar 27
6-[4-(Difluorometil)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0291]
[0292] Smeša 451 mg metil 6-[4-(difluorometil)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilata i 6 mL 1N vodenog rastvora natrijum hidroksida u 19 mL tetrahidrofurana mešana je na sobnoj temperaturi tokom 48 sati. Zatim je pH vrednost podešena na 3 sa 1M hlorovodonične kiseline i talog je odfiltriran, ispran sa vodom i osušen u vakuumu da se dobije 190 mg 6-[4-(difluorometil)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.93 (s, 3 H), 7.13 (t, 1 H), 7.72 (d, 2 H), 8.13 (s, 1 H), 8.23 (d, 2 H), 8.49 (s, 1 H), 8.54 (s, 1 H).
Intermedijar 28
Dimetil {2-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-2-oksoetil}malonat
[0293]
[0294] Smeša 5 g 2-bromo-1-[6-(difluorometil)piridin-3-il]etanona, 4.5 mL dimetil malonata i 4.1 g kalijum karbonata u 140 mL acetona mešana je na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Nakon potpune konverzije (TLC) reakciona smeša je sipana u vodu i aceton je uparen pod sniženim pritiskom. Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa etil acetatom tri puta, kombinovane organske faze su isprane sa vodom i fiziološkim rastvorom i rastvarač je uparen u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (gradijent dihlorometan / metanol do 20% metanola) da se dobije 1.1 g dimetil {2-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-2-oksoetil}malonata.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.69 (s, 6 H), 3.74 (d, 2 H), 4.01 (t, 1 H), 7.07 (t, 1 H), 7.87 (d, 1 H), 8.53 (dd, 1 H), 9.24 (d, 1 H).
Intermedijar 29
Metil 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilat
[0295]
[0296] Smeša 424 mg dimetil {2-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-2-oksoetil}malonata, 549 mg 4-hidrazino-1-metil-1H-pirazol dihidrohlorida i 520 mg natrijum acetata u 13 mL AcOH mešana je na sobnoj temperaturi 1 sat i 50°C tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana i ostatak je prebačen u vodu i etil acetat praćeno dodavanjem zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata. Faze su odvojene, a vodena faza je ekstrahovana tri puta sa etil acetatom. Kombinovane organske faze su isprane sa fiziološkim rastvorom, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane i uparene do suva. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (gradijent dihlorometan / metanol do 8% metanola) da se dobije 240 mg metil 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilata.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.39 - 3.56 (m, 2 H), 3.70 (s, 3 H), 3.85 (s, 3 H), 4.05 - 4.12 (m, 1 H), 7.04 (t, 1 H), 7.77 - 7.83 (m, 2 H), 8.12 (s, 1 H), 8.49 (dd, 1 H), 9.19 (d, 1 H).
Intermedijar 30
Metil 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0298] Smeša 240 mg metil 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilata i 266 mg bakar(II) hlorida u 9 mL acetonitrila mešana je na 90°C tokom 2 sata. Posle uparavanja u vakuumu, ostatak je suspendovan u vodi i talog je profiltriran i osušen da se dobije 184 mg metil 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-2-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilata.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.89 (s, 3 H), 3.91 (s, 3 H), 7.05 (t, 1 H), 7.83 (d, 1 H), 8.13 (s, 1 H), 8.54 (d, 2 H), 8.63 (dd, 1 H), 9.33 (d, 1 H).
Intermedijar 31
6-[6-(Difluorometil)piridin-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0299]
[0300] Smeša 133 mg metil 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-2-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilata i 0.46 mL 2N vodenog rastvora natrijum hidroksida u 2 mL tetrahidrofurana mešana je na sobnoj temperaturi tokom 14 h. Zatim je pH vrednost podešena na 3 sa 1M hlorovodonične kiseline i talog je odfiltriran, ispran sa vodom i osušen u vakuumu da se dobije 103 mg 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline.
1
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.93 (s, 3 H), 6.91 - 7.21 (m, 1 H), 7.84 (d, 1 H), 8.16 (s, 1 H), 8.55 (d, 2 H), 8.66 (dd, 1 H), 9.36 (d, 1 H).
Intermedijar 32
5-Bromo-2-(difluorometil)piridin
[0301]
[0302] U 2000-ml tikvicu sa okruglim dnom sa 4 grla prebačen je rastvor 5-bromopiridin-2-karbaldehida (30 g, 161.29 mmol, 1.00 ekviv.) u dihlorometanu (800 mL). Ovo je praćeno sa dodavanjem kap po kap DAST (dietilaminosumpor trifluorida) (40 g, 1.08 mol, 6.69 ekviv.) uz mešanje na 0°C. Dobijeni rastvor je mešan tokom 12 sata na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena dodavanjem vode. Vrednost pH rastvora podešena je na 8 sa natrijum karbonatom (2 mol/L). Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa 3x500 mL dihlorometana i organski slojevi su kombinovani. Dobijena smeša je isprana sa 1x300 mL H2O. Dobijena smeša je isprana sa 1x300 mL fiziološkog rastvora. Smeša je osušena iznad anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je nanesen na kolonu silika gela sa gradijentom etil acetat /petrol etar (1:10). Ovo je rezultiralo sa 18 g (54%) 5-bromo-2-(difluorometil)piridina u vidu žutog ulja.
Intermedijar 33
1-[6-(difluorometil)piridin-3-il]etanon
[0303]
[0304] U tikvicu sa okruglim dnom s 4 grla od 500-mL, prebačen je rastvor 5-bromo-2-(difluorometil)piridina (18 g, 86.54 mmol, 1.00 ekviv.) u dioksanu (180 mL), tributil(1-etoksiethenil)stanan (35 g, 96.91 mmol, 1.12 ekviv.), tetrakis(trifenilfosfan) paladijum (3 g, 2.60 mmol, 0.03 ekviv.). Dobijeni rastvor je mešan tokom 2 h na 100°C. Reakciona smeša je ohlađena vodenim kupatilom. Reakcija je zatim ugašena dodavanjem 250 mL (2N) HCl. pH vrednost
2
rastvora podešena je na 8 sa natrijum karbonatom (2 mol/L). Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa 3x500 mL etil acetata i organski slojevi su kombinovani. Dobijena smeša je isprana sa 1x200 mL H2O. Dobijena smeša je isprana sa 1x200 mL fiziološkog rastvora. Smeša je osušena iznad anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je nanesen na kolonu silika gela sa etil acetatom /petrol etrom (1:10). Ovo je rezultiralo sa 10 g (68%) 1-[6-(difluorometil)piridin-3-il]etan-1-ona u vidu žutog ulja.
Intermedijar 34
Dietil {2-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-2-oksoetil}(hidroksi)malonat
[0305]
[0306] U tikvicu sa okruglim dnom od 100 ml, stavljeni su 1-[6-(difluorometil)piridin-3-il]etan-1-on (10 g, 58.43 mmol, 1.00 ekviv.) i 1,3-dietil 2-oksopropandioat (15 g, 86.13 mmol, 1.47 ekviv.). Dobijeni rastvor je mešan tokom 24 h na 130°C. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ovo je rezultiralo sa 24 g (sirovog) 1,3-dietil 2-[2-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-2-oksoetil]-2-hidroksipropandioata u vidu crvenog ulja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
Intermedijar 35
Etil 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0307]
[0308] U tikvicu sa okruglim dnom od 500 ml, prebačen je rastvor 1,3-dietil 2-[2-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-2-oksoetil]-2-hidroksipropandioata (24 g, 69.51 mmol, 1.00 ekviv.) u etanolu (200 mL) i hidrazinu (15 mL). Dobijeni rastvor je mešan tokom 12 h na 80°C. Reakcija je zatim ugašena dodavanjem vode. Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa 3x300 mL etil acetata i organski slojevi su kombinovani. Dobijena smeša je isprana sa 1x100 mL vode. Dobijena smeša je isprana sa 1x100 mL fiziološkog rastvora. Smeša je osušena iznad anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je nanesen na kolonu silika gela sa etil acetatom /petrol etrom (2:1). Ovo je rezultiralo sa 2.8 g (14%) etil 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilata u vidu žute čvrste supstance.
<1>H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 13.84 (s, 1H), 9.17 (s, 1H), 8.46 (m, 2H), 7.83 (m, 1H), 7.03 (t, 1H), 4.35 (m, 2H), 1.33 (t, 3H).
Intermedijar 36
Metil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilat [0309]
[0310] Dimetil [2-(4-hlorofenil)-2-oksoetil]malonat (1.88 g, 6.60 mmol) i natrijum acetat (3.25 g, 39.62 mmol) su rastvoreni u sirćetnoj kiselini (50 mL). Zatim je dodat u porcijama, 3-hidrazinopiridin hidrohlorid (1:1) (0.961 g, 6.60 mmol). Ovo je mešano tokom 24 h na sobnoj temperaturi. Dodato je još 3-hidrazinopiridin hidrohlorida (1:1) (0.961 g, 6.60 mmol) i mešanje je nastavljeno tokom 24 h na sobnoj temperaturi. Zatim je ponovno dodat, 3-hidrazinopiridin hidrohlorid (1:1) (0.961 g, 6.60 mmol) i ovo je mešano tokom 24 h na sobnoj temperaturi. Na kraju, ovo je mešano tokom 7 h na 80°C. Reakciona smeša je ohlađena i koncentrovana na rotacionom isparivaču pod sniženim pritiskom. Dodati su etil acetat i voda da bi se rastvorio ostatak. Dodat je koncentrovani vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata, faze su odvojene, i vodeni sloj je ekstrahovan tri puta sa etil acetatom. Kombinovani organski slojevi su isprani tri puta vodom, osušeni iznad magnezijum sulfata i koncentrovani. Ostatak je prečišćen sa RP-HPLC (kolona: YMC-Triart C185µm 100x50mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%)) / acetonitril) da se dobije 398 mg (18%) naslovnog proizvoda.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.43 (dd, 1H), 3.50 (dd, 1H), 3.71 (s, 3H), 4.11 (dd,
4
1H), 7.51 (ddd, 1H), 7.51 - 7.56 (m, 2H), 7.86 - 7.90 (m, 2H), 7.97 (ddd, 1H), 8.50 (dd, 1H), 8.77 (d, 1H).
Intermedijar 37
6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina [0311]
[0312] Korak 1: Metil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilat (1.0 g, 2.909 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (60 mL). Dodat je bakar dihlorid (1.173 g, 8.727 mmol). Ovo je mešano tokom 4 h na 90°C. Ovo je ohlađeno i koncentrovano na rotacionom isparivaču. Dodata je voda, preostala čvrsta supstanca je filtrirana usisavanjem, isprana pet puta vodom i osušena pod vakuumom na 50°C tokom 24 h dajući 1.262 g metil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilata koji je u sledećem koraku korišćen bez daljeg prečišćavanja.
[0313] Korak 2: Metil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (1.00 g, 2.93 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (100 mL). Dodat je rastvor litijum hidroksida (210 mg, 8.778 mmol) u vodi (3.2 mL) na sobnoj temperaturi. Ovo je mešano tokom 10 h na 40°C. Dodata je voda i pH je podešen na 6-7 sa 0.5N HCl. Talog je profiltriran sa odsisavanjem, ispran tri puta sa vodom i osušen pod vakuumom na 50°C dajući 910 mg (95%) naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.54 (br d, 2H), 7.59 (dd, 1H), 7.90 - 7.99 (m, 3H), 8.11 (br d, 1H), 8.63 (br d, 1H), 8.88 (br d, 1H).
Intermedijar 38
Dietil 2-(2-(4-hlorofenil)-2-oksoetil)-2-hidroksimalonat
[0314]
[0315] Smeša 4-hloro acetofenona (30 g, 194.8 mmol) i dietil ketomalonata (45 mL, 292.2 mmol) je zagrevana na 130°C tokom 48 h. Reakcija je praćena sa TLC i po završetku reakciona smeša je ohlađena i triturisana sa pentanom dajući dietil 2-(2-(4-hlorofenil)-2-oksoetil)-2-hidroksimalonat (50 g, 79%, LC-MS 98%) u vidu svetlo žute tečnosti.
Intermedijar 39
Etil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0316]
[0317] Smeša dietil 2-(2-(4-hlorofenil)-2-oksoetil)-2-hidroksimalonata (50 g, 152.43 mmol) i hidrazin dihidrohlorida (19.2 g, 182.9 mmol) u etanolu (500 mL) je zagrevana tokom 16 sati pod refluksom. Reakcija je praćena sa TLC. Po završetku, reakciona smeša je ohlađena i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Reakciona smeša je sipana u zasićeni rastvor natrijum bikarbonata (500 mL) i ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 600 mL). Kombinovani organski sloj je ispran sa vodom, fiziološkim rastvorom, osušen iznad Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, eluent EtOAc/ heksan 30:70) da se dobije etil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (21 g, 42%, LC-MS 95%) u vidu svetlo žute čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.31 (t, 3 H), 4.31 (q, 2 H), 7.53 - 7.60 (m, 2 H), 7.87 - 7.95 (m, 2 H), 8.34 (s, 1 H), 13.68 (br s, 1 H).
Intermedijar 40
Metil 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0319] Metil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (682.3 mg, 2.578 mmol) je rastvoren u DMF (27 mL). Dodati su 3-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin (1150 mg, 5.156 mmol), 2,2'-bipiridin (1007 mg, 6.445 mmol), natrijum karbonat (328 mg, 3.093 mmol), i anhidrovani bakar diacetat (585 mg, 3.222 mmol). Ovo je mešano tokom 5 h na 40°C. Reakciona smeša je ohlađena, dodata je voda i pH je podešen na 3 sa 2N HCl. Talog je filtriran, ispran sa vodom i osušen na 50°C pod vakuumom. Sirovi materijal je prečišćen sa fleš hromatografijom (silika gel, gradijent heksan / etil acetat) se dobije 174 mg (13%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.89 (s, 3H), 7.57 - 7.61 (m, 2H), 7.99 - 8.04 (m, 2H), 8.23 (ddd, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.72 (dd, 1H), 8.86 (br t, 1H).
Intermedijar 41
6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0320]
[0321] Metil 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (170 mg, 0.473 mmol) je rastvoren u THF (8 mL). Dodat je rastvor litijum hidroksida (34 mg, 1.418 mmol) u vodi (0.40 mL) na sobnoj temperaturi. Ovo je mešano tokom 24 h na sobnoj temperaturi. Dodata je voda i pH je podešen na 6 sa 2N HCl. Talog je profiltriran sa odsisavanjem, ispran sa vodom i osušen pod vakuumom na 50°C dajući 157 mg (96%) naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.56 - 7.60 (m, 2H), 8.01 - 8.06 (m, 2H), 8.24 (dt, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.73 (d, 1H), 8.87 (s, 1H).
Intermedijar 42
Metil 3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat [0322]
[0323] Metil 3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (2 g, 6.71 mmol) je rastvoren u DMF (90 mL). Dodati su 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin (2.75 g, 13.41 mmol), 2,2'-bipiridin (2.62 g, 16.77 mmol), natrijum karbonat (0.85 g, 8.02 mmol), i anhidrovani bakar diacetat (1.52 g, 8.37 mmol). Ovo je mešano tokom 3 h na 60°C. Reakciona smeša je ohlađena sa ledenim kupatilom, dodata je voda (240 mL) i pH je podešen na 3 sa 2N HCl (20 mL). Talog je filtriran, ispran sa vodom i osušen na 50°C pod vakuumom da se dobije 1.8 g (72%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.89 (s, 3H), 7.62 (dd, 1H), 7.88 (d, 2H), 8.15 - 8.21 (m, 3H), 8.60 (s, 1H), 8.68 (brd, 1H), 8.93 (br s, 1H).
Intermedijar 43
3-Okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0324]
[0325] Metil 3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (1.80 g, 4.80 mmol) je rastvoren u THF (28 mL). Dodat je rastvor litijum hidroksida (345 mg, 23.95 mmol) u vodi (5 mL) na sobnoj temperaturi. Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Dodata je voda (100 mL) i pH je podešen na 6 sa 2N HCl (4.5 mL). Reakcionoj smeši su dodati metilen hlorid (50 mL) i hloroform (50 mL) Organski sloj je odvojen i odbačen. Talog je profiltriran sa odsisavanjem, ispran sa vodom i osušen pod vakuumom na 50°C dajući 1036 mg (60%) naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.60 (dd, 1H), 7.84 (d, 2H), 8.02 (s, 1H), 8.10 - 8.18 (m, 3H), 8.64 (d, 1H), 8.89 (d, 1H).
Intermedijar 44
Dietil hidroksi{2-okso-2-[4-(trifluorometoksi)fenil]etil}malonat
[0326]
[0327] Smeša 1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etanona (20 g, 98.03 mmol) i dietil ketomalonata (23 mL, 147.02 mmol) zagrevana je na 130°C tokom 48 h i reakcija je praćena sa TLC. Po završetku, reakciona smeša je ohlađena na 0-5°C i triturisana sa pet-etrom da se dobije dietil 2-hidroksi-2-(2-okso-2-(4-(trifluorometoksi) fenil) etil) malonat 3 (35 g, 94%, LC-MS 98%) u vidu svetlo žute tečnosti.
Intermedijar 45
Etil 3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0329] Smeša dietil 2-hidroksi-2-(2-okso-2-(4-(trifluorometoksi) fenil) etil) malonata (35 g, 92.5 mmol) i hidrazin dihidrohlorida (10.6 g, 101.31 mmol) u etanolu (350 mL) je zagrevana 16 sati pod refluksom i reakcija je praćena pomoću TLC. Po završetku reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana pod sniženim pritiskom, pH je podešen na 7 primenom zas. vodenog rastvora natrijum bikarbonata (150 mL) i ekstrahovana u etil acetatu (3 x 350 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani sa vodom, fiziološkim rastvorom, osušeni iznad natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, eluent EtOAc/ heksan 30:70) da se dobije etil 3-okso-6-(4-(trifluorometoksi) fenil)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (12 g, 40%, LC-MS 97%) u vidu beličaste čvrste supstance.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.31 (t, 3 H), 4.31 (q, 2 H), 7.49 (d, 2 H), 7.97 -8.04 (m, 2 H), 8.35 (s, 1 H), 13.70 (br s, 1 H).
Intermedijar 46
3-Okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0330]
[0331] Etil 3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (2 g, 6.1 mmol) je rastvoren u DMF (80 mL). Dodati su piridin-3-il boronska kiselina (1.5 g, 12.2 mmol), 2,2'-bipiridin (4.76 g, 30.46 mmol), natrijum karbonat (0.775 g, 7.3 mmol), i anhidrovani bakar diacetat (2.76 g, 15.23 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 4 h na 80°C, ohlađena praćeno sa dodavanjem 6 mL vodenog 2N rastvora natrijum hidroksida. Dodata je voda i talog je profiltriran i osušen u vakuumu da se dobije 2.5 g naslovnog jedinjenja.
[0332] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1 mm; eluent A: voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%) eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 1.14 min; MS (ESIpos): m/z = 378.4 [M+H]<+>
Intermedijar 47
Metil 6-[4-(difluorometil)fenil]-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilat [0333]
[0334] Smeša 2.9 g dimetil {2-[4-(difluorometil)fenil]-2-oksoetil}propandioata i 13.5 mL hidrazina u THF (1M) u sirćetnoj kiselini je mešana na 70°C tokom 4 h. Dodato je dodatnih 10 mL hidrazina u THF (1M) i reakciona smeša je mešana na 70°C tokom 4 sata. Dodata je voda i dobijeni talog je odfiltriran i osušen u vakuumu da bi se dobilo 2.1 g naslovnog jedinjenja.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.15 - 3.32 (m, 2 H), 3.65 - 3.69 (m, 3 H), 3.77 (dd, 1 H), 7.08 (t, 1 H), 7.63 (d, 2 H), 7.89 (d, 2 H), 11.36 (s, 1 H).
Intermedijar 48
Metil 6-[4-(difluorometil)fenil]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0335]
[0336] Smeša 2089 mg metil 6-[4-(difluorometil)fenil]-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilata i 2487 mg bakar(II) hlorida u 215 mL acetonitrila je mešana na 50°C tokom 1 sata. Posle uparavanja u vakuumu, ostatak je suspendovan u vodi i talog je profiltriran da se dobije 1420 mg metil 6-[4-(difluorometil)fenil]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilata.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.85 (s, 3 H), 7.12 (t, 1 H), 7.69 (d, 2 H), 8.03 (d, 2
1
H), 8.42 (s, 1 H), 13.76 (s, 1H).
Intermedijar 49
6-[4-(Difluorometil)fenil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0337]
[0338] Metil 6-[4-(difluorometil)fenil]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (700 mg, 2.5 mmol) je rastvoren u DMF (32 mL). Dodati su piridin-3-il boronska kiselina (614 mg, 5 mmol), 2,2'-bipiridin (1.95 g, 12.5 mmol), natrijum karbonat (318 mg, 3 mmol), i anhidrovani bakar diacetat (1.13 g, 6.24 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 5 sati na 80°C, ohlađena praćeno dodavanjem vode. pH je podešen na 9 dodavanjem 1M vodenog rastvora natrijum hidroksida i talog je profiltriran i osušen u vakuumu da se dobije 481 mg naslovnog jedinjenja.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 7.10 (t, 1 H), 7.59 (br s, 1 H), 7.66 (d, 2 H), 7.76 (s, 1 H), 8.06 (d, 2 H), 8.13 (br d, 1 H), 8.63 (br s, 1 H), 8.91 (br s, 1 H).
Intermedijar 50
6-(4-Metilfenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0339]
[0340] Rastvor 500 mg etil 6-hloro-3-hidroksipiridazin-4-karboksilata i 436 mg 4-tolilboronske kiseline u 20 mL dioksana tretiran je sa trikalijum fosfatom (15 mL 0.5M rastvora u vodi) i drugom generacijom RuPhos Pd prekatalizatora (CAS No. [1375325-68-0]; 383 mg), zagrejan na 100°C i mešan tokom 4 sata. Reakciona smeša je ohlađena na sobnoj temperaturi, formirani
2
talog je filtriran, ispran sa 1,4-dioksanom (2 mL) i osušen. Dobijeni materijal je sipan u vodu i liofilizovan da bi se dobilo naslovno jedinjenje (406 mg) koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 2.35 (s, 3 H), 7.29 (d, 2 H), 7.89 (d, 2 H), 8.06 (s, 1 H).
Intermedijar 51
6-(4-Metilfenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina [0341]
[0342] 6-(4-Metilfenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg) je rastvorena u DMF (3 mL). Dodati su 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin (89 mg), 2,2'-bipiridin (170 mg), natrijum karbonat (28 mg), i anhidrovani bakar diacetat (99 mg). Reakciona smeša je mešana tokom 4 sata na 70°C. Reakciona smeša je filtrirana i prečišćena sa RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%), eluent B: acetonitril; gradijent: A 85% / B 15% → A 45% / B 55%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 17 mg 6-(4-metilfenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline.
[0343] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1 mm; eluent A: voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%), eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 0.58 min; MS (ESIpos): m/z = 308.5 [M+H]<+>
Intermedijar 52
Dietil [2-(4-hloro-2-fluorofenil)-2-oksoetil](hidroksi)malonat
[0345] U tikvicu sa okruglim dnom od 100 ml, prebačen je 1-(4-hloro-2-fluorofenil)etan-1-on (10 g, 57.94 mmol, 1.00 ekviv.) i 1,3-dietil 2-oksopropandioat (15 mL). Dobijeni rastvor je mešan tokom 24 sata na 130°C. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ovo je rezultiralo sa 24 g (sirovog) 1,3-dietil 2-[2-(4-hloro-2-fluorofenil)-2-oksoetil]-2-hidroksipropandioata u vidu crnog ulja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
Intermedijar 53
Etil 6-(4-hloro-2-fluorofenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0346]
[0347] U tikvicu sa okruglim dnom od 500 ml, prebačen je rastvor 1,3-dietil 2-[2-(4-hloro-2-fluorofenil)-2-oksoetil]-2-hidroksipropandioata (24 g, 69.22 mmol, 1.00 ekviv.) u etanolu (250 mL) i hidrazinu (15 mL). Dobijeni rastvor je mešan tokom 12 h na 80°C. Reakcija je zatim ugašena dodavanjem 200 mL vode. Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa 2x200 mL etil acetata i organski slojevi su kombinovani. Dobijena smeša je isprana sa 1x100 mL vode. Dobijena smeša je isprana sa 1x100 mL fiziološkog rastvora. Smeša je osušena iznad anhidrovanog natrijum sulfata, filtirirana i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je nanesen na kolonu silika gela sa etil acetatom /petrol etrom (2:1). Ovo je rezultiralo sa 2.9 g (14%) etil 6-(4-hloro-2-fluorofenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilata u vidu ružičaste čvrste supstance.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.29 (t, 3 H), 4.30 (q, 2 H), 7.44 (dd, 1 H), 7.63 (dd, 1 H), 7.74 (t, 1 H), 8.10 (d, 1 H), 13.84 (s, 1 H).
4
Intermedijar 54
6-(4-Hloro-2-fluorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0348]
[0349] Etil 6-(4-hloro-2-fluorofenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (500 mg) je rastvoren u DMF (22 mL). Dodati su 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin (691 mg), 2,2'-bipiridin (1.31 g), natrijum karbonat (214 mg), i anhidrovani bakar diacetat (765 mg). Reakciona smeša je mešana tokom 5 h na 80°C. Nakon hlađenja, dodat je 1M NaOH (1.7 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 48 sati. Dodato je 1M vodene otopine hlorovodonične kiseline dok se proizvod nije istaložio. Talog je profiltriran i osušen u vakuumu da se dobije 418 mg 6-(4-hloro-2-fluorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline koja je korišćena bez daljeg prečišćavanja.
[0350] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1 mm; eluent A: Voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%) eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 1.04 min; MS (ESIpos): m/z = 346.3 [M+H]<+>
Intermedijar 55
3-(4-Hlorofenil)-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksilna kiselina
[0351]
[0352] Etil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (500 mg) je rastvoren u DMF (23 mL). Dodati su 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridazin (739 mg), 2,2'-bipiridin (1.12 g), natrijum karbonat (228 mg), i anhidrovani bakar diacetat (815 mg). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 14 sati praćeno sa dodavanjem 1.8 mL vodenog 2N rastvora natrijum hidroksida. Dodata je voda i talog je profiltriran i osušen u vakuumu da se dobije 438 mg naslovnog jedinjenja.
[0353] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1 mm; eluent A: voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%) eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 0.90 min; MS (ESIpos): m/z = 329.2 [M+H]<+>
Intermedijar 56
3-Okso-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina [0354]
[0355] Rastvor etil 6-hloro-3-hidroksipiridazin-4-karboksilata (CAS No. [61404-41-9]; 450 mg, 2.22 mmol) i [6-(trifluorometil)piridin-3-il]boronske kiseline (CAS No. [868662-36-6]; 1.30 eq., 551 mg, 2.89 mmol) u 1,4-dioksanu (17 mL) tretiran je sa trikalijum fosfatom (3.00 eq, 6.7 mmol, 13.3 mL 0.5M rastvora u vodi) i drugom generacijom RuPhos Pd prekatalizatora (CAS No.
[1375325-68-0]; 0.20 eq, 345 mg, 444 µmol), zagrejan na 100°C i mešan tokom 4.5 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, formirani talog je filtriran, ispran sa 1,4-dioksanom (2 mL) i osušen. Dobijeni materijal je sipan u vodu i liofilizovan da bi se dobilo naslovno jedinjenje (555 mg) koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 7.98 (d, 1 H), 8.30 (s, 1 H), 8.68 (br d, 1 H), 9.39 (s, 1 H).
Intermedijar 57
N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0356]
[0357] Suspenzija sirove 3-okso-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline (486 mg, 0.852 mmol) u DMF (6 mL) tretirana je sa rastvorom (2S)-2-aminopropan-1-ola (CAS No. [2749-11-3]; 2.00 eq 128 mg, 1.70 mmol) u DMF (6 mL), N,N-diizopropil etilaminu (4.50 eq, 670 µL, 3.80 mmol) i 2,4,6-tripropil-1,3,5,2,4,6-trioksatrifosfinan 2,4,6-trioksidu (CAS No. [68957-94-8]; 1.50 eq, 1.28 mmol, 750 µL 50 mas.% rastvora u DMF) i mešana na sobnoj temperaturi nedelju dana. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i dobijeni ostatak je prečišćen preparativnom HPLC reverzne faze praćeno sa liofilizacijom dajući jedinjenje iz naslova (150 mg).<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.17 (d, 3H), 3.41 - 3.49 (m, 2H), 3.98 - 4.08 (m, 1H), 4.94 (br s, 1H), 8.03 (d, 1H), 8.59 (dd, 1H), 8.65 (s, 1H), 9.28 (d, 1H), 9.62 (br d, 1H), 13.82 (br s, 1H).
Intermedijar 58
Dietil [2-(4-cijanofenil)-2-oksoetil](hidroksi)malonat
[0358]
[0359] U tikvicu sa okruglim dnom od 100 ml, prebačen je 4-acetilbenzonitril (10 g, 68.89 mmol, 1.00 ekviv.) i 1,3-dietil 2-oksopropandioat (15 g, 86.13 mmol, 1.25 ekviv.). Dobijeni rastvor je mešan tokom 24 h na 130°C. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ovo je rezultiralo sa 25 g (114%) 1,3-dietil 2-[2-(4-cijanofenil)-2-oksoetil]-2-hidroksipropandioata u vidu crnog ulja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
Intermedijar 59
Etil 6-(4-cijanofenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0360]
[0361] U tikvicu sa okruglim dnom od 500 ml, prebačen je rastvor 1,3-dietil 2-[2-(4-cijanofenil)-2-oksoetil]-2-hidroksipropandioata (25 g, 78.29 mmol, 1.00 ekviv.) u etanolu (200 mL) i hidrazinu (15 mL). Dobijeni rastvor je mešan tokom 12 h na 80°C. Reakcija je zatim ugašena dodavanjem 200 mL vode. Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa 2x200 mL etil acetata i organski slojevi su kombinovani. Dobijena smeša je isprana sa 1x100 mL vode. Dobijena smeša je isprana sa 1x100 mL fiziološkog rastvora. Smeša je osušena iznad anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je nanesen na kolonu silika gela sa etil acetatom /petrol etrom (2:1). Ovo je rezultiralo sa 6 g (28%) etil 6-(4-cijanofenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilata u vidu žute čvrste supstance.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.31 (t, 3 H), 4.31 (q, 2 H), 7.92 - 8.00 (m, 2 H), 8.08 (d, 2 H), 8.42 (s, 1 H), 13.84 (s, 1 H).
Intermedijar 60
6-(4-Cijanofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina [0362]
[0363] Etil 6-(4-cijanofenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (500 mg) je rastvoren u DMF (24 mL). Dodati su 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin (762 mg), 2,2'-bipiridin (1.45 g), natrijum karbonat (236 mg), i anhidrovani bakar diacetat (843 mg). Reakciona smeša je mešana na 80°C tokom 5 h praćeno sa dodavanjem 1.8 mL vodenog 2N rastvora natrijum hidroksida. Dodata je voda i talog je profiltriran i osušen u vakuumu da se dobije 632 mg naslovnog jedinjenja.
[0364] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1 mm; eluent A: voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%) eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 0.81 min; MS (ESIpos): m/z = 319.3 [M+H]<+>
Intermedijar 61
Metil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(pirimidin-5-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat [0365]
[0366] Metil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (50 mg, 0.189 mmol) je rastvoren u DMF (3 mL). Dodati su 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirimidin (77.9 mg, 0.378 mmol), 2,2'-bipiridin (73.8 mg, 0.472 mmol), natrijum hidrogen karbonat (31.7 mg, 0.378 mmol), i anhidrovani bakar diacetat (42.9 mg, 0.236 mmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Dodata je voda i pH je podešen na 3 sa 2N HCl. Talog je filtriran, ispran sa vodom i osušen na 50°C pod vakuumom da se dobije 39.7 mg (61%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.89 (s, 3H), 7.59 (br d, 2H), 8.04 (br d, 2H), 8.57 (s, 1H), 9.20 - 9.33 (m, 3H).
Intermedijar 62
6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(pirimidin-5-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0367]
[0368] Metil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(pirimidin-5-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (275 mg, 0.802 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (13.6 mL). Dodat je rastvor litijum hidroksida (57.6 mg, 2.41 mmol) u vodi (0.45 mL) na sobnoj temperaturi. Ovo je mešano tokom 24 h na 40°C.
[0369] Dodata je voda i pH je podešen na 6 - 7 sa 0.5N HCl. Talog je profiltriran sa odsisavanjem, ispran tri puta sa vodom i osušen pod vakuumom na 50°C da se dobije 251 mg (95%) naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.54 (d, 2H), 7.87 (s, 1H), 7.99 (d, 2H), 9.23 (s, 2H), 9.29 (s, 1H).
Intermedijar 63
Metil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(1-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}-1H-pirazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0370]
[0371] Serija 1: Metil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (200 mg) je rastvoren u DMF (12 mL). Dodati su 4-(4,4,5,5-Tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}-1H-pirazol (490 mg), 2,2'-bipiridin (295 mg), cezijum karbonat (295 mg), i anhidrovani bakar diacetat (172 mg). Ovo je mešano tokom 5 h na sobnoj temperaturi. Dodata je voda i pH je podešen na 3 sa 2N HCl. Isparljive materije su uklonjene pod vakuumom na rotacionom uparivaču. Dodata je voda i vodena faza je ekstrahovana tri puta sa hloroformom.
1
Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad magnezijum sulfata i koncentrovani dajući 265 mg sirovog proizvoda koji je prečišćen zajedno sa drugom serijom.
[0372] Serija 2: Metil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (544 mg) je rastvoren u acetonitrilu (5.4 mL). Dodati su 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}-1H-pirazol (1 g), piridin (333 µL), N,N-dietiletanamin (573 µL), anhidrovani bakar diacetat (747 mg), i molekulska sita (544 mg, 0.4 nm, veličina čestica: <50 µm). Ovo je mešano jedan dan na sobnoj temperaturi. Dodat je 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}-1H-pirazol (320 mg) i mešanje je nastavljeno još jedan dan na sobnoj temperaturi. Dodat je Kieselgel i isparljive materije su uklonjene pod vakuumom. Ovo je prečišćeno sa fleš hromatografijom (silika gel, gradijent heksan / etil acetat) da se dobije 427 mg proizvoda koji je kombinovan sa prvom serijom i prečišćen sa fleš hromatografijom (silika gel, heksan / etil acetat 7:3) dajući 220 mg naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = -0.04 (s, 9H), 0.83 - 0.88 (m, 2H), 3.55 - 3.61 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 5.49 (s, 2H), 7.57 - 7.61 (m, 2H), 8.07 - 8.12 (m, 2H), 8.21 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.69 (s, 1H).
Intermedijar 64
6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(1-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil)-1H-pirazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0373]
[0374] Metil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(1-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}-1H-pirazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (50 mg) je rastvoren u acetonitrilu (1 mL) i THF (1 mL). Dodati su litijum hidroksid (7.8 mg) i voda (0.118 mL) i ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana do polovine njezine zapremine i dodata je voda (150 mL). pH je podešen na 3 sa 2N HCl (7.5 mL). Talog je profiltriran sa odsisavanjem, ispran sa
1 1
vodom i osušen pod vakuumom na 50°C dajući 36 mg naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = -0.04 (s, 9H), 0.83 - 0.89 (m, 2H), 3.56 - 3.61 (m, 2H), 5.50 (s, 2H), 7.57 - 7.61 (m, 2H), 8.10 - 8.15 (m, 2H), 8.23 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 13.86 (br s, 1H).
Intermedijar 65
6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(1H-pirazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina [0375]
[0376] Proces 1, korak 1: Metil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(1-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}-1H-pirazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (220 mg) je rastvoren u etanolu (1.85 mL). Dodata je hlorovodonična kiselina u dioksanu (1.85 mL, 4M u dioksanu) i ovo je mešano tokom 2 h na 70°C. Reakciona smeša je ostavljena da dostigne sobnu temperaturu i koncentrovana do suva da bi se dobilo 169 mg metil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(1H-pirazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilata. Ovaj materijal je korišćen bez daljeg prečišćavanja u sledećem koraku.
[0377] Proces 2, korak 1: 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(1-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}-1H-pirazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (34 mg) je rastvorena u etanolu (0.29 mL). Dodata je hlorovodonična kiselina u dioksanu (0.29 mL, 4M u dioksanu) i ovo je mešano tokom 2 h na 70°C. Reakciona smeša je ostavljena da dostigne sobnu temperaturu i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana do suva da bi se dobilo 27 mg smeše etil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(1H-pirazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilata i 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(1H-pirazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline. Ovaj materijal je korišćen bez daljeg prečišćavanja u sledećem koraku.
[0378] Korak 2: Sirovi materijali iz procesa 1 i procesa 2 su kombinovani u acetonitrilu (5 mL).
1 2
Dodati su litijum hidroksid (80 mg) i voda (0.6 mL) i mešani su na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Dodata je voda (5 mL) i pH je podešen na 3 sa 2N HCl (1.2 mL). Talog je profiltriran sa odsisavanjem, ispran sa vodom i osušen pod vakuumom na 50°C dajući 186 mg naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.56 - 7.61 (m, 2H), 8.09 - 8.14 (m, 2H), 8.34 (br s, 2H), 8.44 (s, 1H), 13.45 (br s, 2H).
Intermedijar 66
6-[4-(Dimetilamino)fenil]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0379]
[0380] Rastvor etil 6-hloro-3-hidroksipiridazin-4-karboksilata (200 mg) i 4-(dimetilamino)-benzolboronske kiseline (212 mg) u 1,4-dioksanu (8 mL) tretiran je sa trikalijum fosfatom (6 mL 0.5M rastvora u vodi) i drugom generacijom RuPhos Pd prekatalizatora (153 mg), zagrejanog na 75°C i mešanog tokom 6 h. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, tretirana sa vodom i pH je podešen na 3 sa dodavanjem 1M HCl. Nastali talog je odfiltriran, ispran sa vodom. Talog je rastvoren u etil acetatu i filtrat je ekstrahovan tri puta sa etil acetatom. Kombinovane organske faze su isprane sa fiziološkim rastvorom, odvojene, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane i etil acetat je uparen. Ostatak je podvrgnut RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1 % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 85% / B 15% → A 45% / B 55%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 59 mg 6-[4-(dimetilamino)fenil]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 2.98 (s, 6 H), 6.79 (d, 2 H), 7.77 (d, 2 H), 8.44 (s, 1 H).
Intermedijar 67
6-[4-(Dimetilamino)fenil]-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-
1
karboksamid
[0381]
[0382] Rastvor 59 mg intermedijara 6-[4-(dimetilamino)fenil]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 34 mg (2S)-2-amino-1-propanola, 174 mg HATU, 0.16 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 3 mL DMF mešan je na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1 % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 85% / B 15% → A 45% / B 55%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 11 mg 6-[4-(dimetilamino)fenil]-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
[0383] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1mm; eluent A: Voda 0.1vol. % mravlje kiseline (99%) eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 0.84 min; MS (ESIpos): m/z = 317.3 [M+H]<+>
Intermedijar 68
Metil 6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilat
[0384]
1 4
[0385] Dimetil [2-(4-hlorofenil)-2-oksoetil]malonat (200 mg) i natrijum acetat (259 mg) su rastvoreni u sirćetnoj kiselini (7 mL). Zatim je u porcijama dodat, 3-hidrazinil-1-metil-1H-pirazol trihidrohlorid (327 mg). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći i tokom 1 h na 50°C. Reakciona smeša je ohlađena, tretirana sa vodom i liofilizovana. Ostatak je podvrgnut RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1 % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 85% / B 15% → A 45% / B 55%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 119 mg metil 6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilata.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.37 - 3.46 (m, 2 H), 3.69 (s, 3 H), 3.83 (s, 3 H), 3.99 - 4.06 (m, 1 H), 6.30 (d, 1 H), 7.49 - 7.56 (m, 2 H), 7.71 (d, 1 H), 7.78 - 7.83 (m, 2 H).
Intermedijar 69
Metil 6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0386]
[0387] Metil 6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilat (119 mg) je rastvoren u acetonitrilu (5 mL). Dodat je bakar dihlorid (138 mg). Ovo je mešano tokom 1 h na 90°C. Reakciona smeša je ohlađena, prebačena u vodu i ekstrahovana tri puta sa etil acetatom. Kombinovane organske faze su isprane sa fiziološkim rastvorom, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane i uparene do suva da se dobije 112 mg naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.87 (s, 3 H), 3.90 (s, 3 H), 6.56 (d, 1 H), 7.55 - 7.60 (m, 2 H), 7.83 (d, 1 H), 7.92 - 7.96 (m, 2 H), 8.48 (s, 1 H).
Intermedijar 70
1
6-(4-Hlorofenil)-2-(1-metil-1 H-pirazol-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0388]
[0389] Metil 6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (112 mg) je rastvoren u tetrahidrofuranu (5 mL). Dodat je rastvor natrijum hidroksida (65 mg) u vodi (0.8 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 14 h. Dodata je voda i pH je podešen na 3 sa 2N HCl. Talog je profiltriran sa odsisavanjem, ispran tri puta sa vodom i osušen sa liofilizacijom dajući 94 mg naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 3.91 (s, 3 H), 6.57 (d, 1 H), 7.57 (d, 2 H), 7.84 (d, 1 H), 7.96 (d, 2 H), 8.48 (s, 1 H).
Intermedijar 71
Metil 6-(4-hlorofenil)-2-(3-metil-1H-pirazol-5-il)-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilat
[0390]
[0391] Dimetil [2-(4-hlorofenil)-2-oksoetil]malonat (200 mg) i natrijum acetat (259 mg) su rastvoreni u sirćetnoj kiselini (7 mL). Zatim je u porcijama dodat, 5-hidrazinil-3-metil-1H-pirazol hidrohlorid (220 mg). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći i tokom 1 h na 50°C. Reakciona smeša je ohlađena, tretirana sa vodom i liofilizovana. Ostatak je podvrgnut RP-
1
HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1 % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 85% / B 15% → A 45% / B 55%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 126 mg metil 6-(4-hlorofenil)-2-(3-metil-1H-pirazol-5-il)-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilata.
[0392] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1mm; eluent A: voda 0.1vol. % mravlje kiseline (99%) eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 1.07 min; MS (ESIpos): m/z = 347.3 [M+H]<+>
Intermedijar 72
Metil 6-(4-hlorofenil)-2-(3-metil-1H-pirazol-5-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0393]
[0394] Metil 6-(4-hlorofenil)-2-(3-metil-1H-pirazol-5-il)-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilat (126 mg) je rastvoren u acetonitrilu (5 mL). Dodat je bakar dihlorid (146 mg). Ovo je mešano tokom 1 h na 90°C. Reakciona smeša je ohlađena, tretirana sa vodom i nastali talog je profiltriran, ispran vodom i osušen liofilizacijom da bi se dobilo 132 mg naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0395] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1mm; eluent A: voda 0.1vol. % mravlje kiseline (99%) eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 1.08 min; MS (ESIpos): m/z = 345.3 [M+H]<+>
1
Intermedijar 73
6-(4-Hlorofenil)-2-(3-metil-1H-pirazol-5-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0396]
[0397] Metil 6-(4-hlorofenil)-2-(3-metil-1H-pirazol-5-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (132 mg) je rastvoren u tetrahidrofuranu (6 mL). Dodat je rastvor natrijum hidroksida (76 mg) u vodi (0.96 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 14 h. Dodata je voda i pH je podešen na 3 sa 2N HCl. Talog je profiltriran sa odsisavanjem, ispran tri puta vodom i osušen sa liofilizacijom dajući 80 mg naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 2.30 (s, 3 H), 6.35 (br s, 1 H), 7.57 (d, 2 H), 7.97 (br d, 2 H), 8.48 (br s, 1 H)
Intermedijar 74
Metil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat [0398]
[0399] Metil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (500 mg) je obezbeđen u acetonitrilu (5 mL). Dodati su molekulsko sito u prahu (500 mg, 4 A, 50 µm), 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,2-tiazol (483 mg), piridin (153 µL), trietilamin (263 µL), i anhidrovani bakar diacetat (343 mg). Ovo je mešano tokom 3 h na sobnoj temperaturi. Dodati su 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,2-tiazol (211.1 mg), piridin (104 µL), trietilamin (179 µL), i anhidrovani bakar diacetat (343 mg). Ovo je mešano tokom 16 h na sobnoj
1
temperaturi. Dodat je silika gel i isparljive materije su uklonjene pod vakuumom. Ovo je prečišćeno sa fleš hromatografijom (silika gel, gradijent heksan / etil acetat) da se dobije 317 mg naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.89 (s, 3H), 7.57 - 7.62 (m, 2H), 8.05 - 8.10 (m, 2H), 8.52 (s, 1H), 9.14 (s, 1H), 9.58 (s, 1H).
Intermedijar 75
6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina [0400]
[0401] Metil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (423 mg) je suspendovan u acetonitrilu (11 mL). Dodat je litijum hidroksid (87 mg) rastvoren u vodi (1.31 mL). Određen je pH (pH = 4) i ponovno je dodat litijum hidroksid (87 mg). Ovo je mešano tokom 1 h na sobnoj temperaturi. Dodata je voda (5 mL) i pH je podešen na 3 sa 2N HCl (1.2 mL). Talog je profiltriran sa odsisavanjem, ispran sa vodom i osušen pod vakuumom na 50°C dajući 340 mg naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.58 (d, 2H), 8.08 (d, 2H), 8.41 (br s, 1H), 9.15 (br s, 1H), 9.59 (br s, 1H).
Intermedijar 76
Dietil hidroksi{2-okso-2-[4-(trifluorometil)fenil]etil}malonat
[0402]
1
[0403] 1-[4-(Trifluorometil)fenil]etanon (50 g, 0.266 mol) i dietil oksomalonat (66.0 g, 0.379 mol) su mešani na 120°C tokom 48 h. Reakciona smeša je ohlađena na sobnoj temperaturi i čvrsta supstanca je filtrirana i isprana sa petrol etrom (300 mL) dajući 70 g (73%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.19 (t, 6H), 3.76 (s, 2H), 4.18 (q, 4H), 6.47 (s, 1H), 7.91 (d, 2H), 8.15 (d, 2H).
Intermedijar 77
Etil 3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0404]
[0405] Dietil hidroksi{2-okso-2-[4-(trifluorometil)fenil]etil}malonat (70 g, 0.193 mol) i hidrazin dihidrohlorid (22.3 g, 0.212 mol) u etanolu (600 mL) zagrevani su na 70°C tokom 24 h. Po završetku, reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, heksan / etil acetat 50%) da se dobije 35.0 g (58%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.31 (t, 3H), 4.32 (q, 2H), 7.86 (d, 2H), 8.11 (d, 2H), 8.42 (s, 1H), 13.81 (s, 1H).
Intermedijar 78
Etil 3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat [0406]
11
[0407] Etil 3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (1.20 g, 3.84 mmol) je suspendovan u acetonitrilu (24 mL). Dodati su 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,2-tiazol (1.05 g, 5.00 mmol), piridin (622 µL, 7.69 mmol), N,N-dietiletanamin (1.07 mL, 7.69 mmol), i anhidrovani bakar diacetat (907 mg, 5.00 mmol). Ovo je mešano tokom 28 h na sobnoj temperaturi. Dodata je voda i pH je podešen na 3 sa 2N HCl. Talog je filtriran, ispran tri puta sa vodom i osušen na 50°C pod vakuumom da se dobije 1.915 g naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.34 (t, 3H), 4.37 (q, 2H), 7.90 (d, 2H), 8.27 (d, 2H), 8.56 (s, 1H), 9.15 (s, 1H), 9.60 (s, 1H).
Intermedijar 79 3-Okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0408]
[0409] U etil 3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (1.91 g, 3.88 mmol) u acetonitrilu (35 mL) dodat je litijum hidroksid (278 mg, 11.63 mmol) u vodi (4.2 mL). Ovo je mešano 2 sata na sobnoj temperaturi. Dodata je voda (5 mL) i pH je podešen na 3 sa hlorovodoničnom kiselinom (3 mL, 2N). Talog je filtriran, ispran sa vodom i osušen pod vakuumom na 50°C dajući 1.3 g naslovnog jedinjenja i početni materijal.
[0410] Talog (465 mg) je mešan na 60°C u vodenom rastvoru natrijum hidroksida. Čvrsti materijal je toplo filtriran i ispran vodom. Ostatak je osušen, suspendovan u vodi (20 mL) i pH je podešen na 3 sa 2M hlorovodonične kiseline. Čvrsti materijal je sakupljen, ispran sa vodom i osušen pod vakuumom na 50°C dajući 195 mg (11%) naslovnog jedinjenja. Prvi filtrat je zakišeljen sa 2M hlorovodoničnom kiselinom do pH 4, talog je sakupljen, ispran sa vodom i osušen pod vakuumom na 50°C da bi se dobilo 180 mg (10%) naslovnog jedinjenja.
[0411] Preostali nečisti materijal (720 mg) mešan je u vodenom rastvoru natrijum hidroksida tokom 1 h na sobnoj temperaturi. pH je podešen na 3 sa hlorovodoničnom kiselinom (2 mL, 2M) i ovo je mešano tokom 0.5 h na sobnoj temperaturi. Čvrsta supstanca je filtrirana, isprana tri puta sa vodom, osušena pod vakuumom na 50°C da bi se dobilo 660 mg (37%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.88 (br d, 2H), 8.28 (br d, 2H), 8.59 (br s, 1H), 9.16 (br s, 1H), 9.62 (br s, 1H), 13.94 (br s, 1H).
Intermedijar 80
Etil 3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2-(1-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}-1H-pirazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0412]
[0413] Etil 3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (1.00 g, 3.20 mmol) je suspendovan u acetonitrilu (10 mL). Dodati su 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}-1H-pirazol (1.35 g, 4.16 mmol), piridin (0.52 mL, 6.41 mmol), N,N-dietiletanamin (0.893 mL, 6.41 mmol), i anhidrovani bakar diacetat (756 mg, 4.16 mmol). Ovo je mešano tokom 4 dana na sobnoj temperaturi, dodat je 1 ekvivalent 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}-1H-pirazola. Ovo je mešano tokom 1 dan na sobnoj temperaturi, 1 dan na 50°C, 8 h na 60°C i preko noći na 50°C. Reakciona smeša je ohlađena i prečišćena hromatografijom na koloni (silika gel, heksan / etil acetat 75:25) da se dobije 1.44 g (88%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = -0.04 (s, 9H), 0.83 - 0.89 (m, 2H), 1.34 (t, 3H), 3.55 - 3.63 (m, 2H), 4.36 (q, 2H), 5.50 (s, 2H), 7.89 (d, 2H), 8.23 (s, 1H), 8.29 (d, 2H), 8.51 (s, 1H), 8.72 (s, 1H).
Intermedijar 81
3-Okso-2-(1H-pirazol-4-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0414]
[0415] Korak 1: Etil 3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2-(1-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}-1H-pirazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (1.38 g, 3.20 mmol) je suspendovan u etanolu (11.3 mL). Dodat je hidrohlorid u dioksanu (11.3 mL, 4M) i mešan tokom 5 h na 70°C. Ovo je mešano preko noći na sobnoj temperaturi i zatim tokom 5 h na 70°C. Reakciona smeša je ohlađena i koncentrovana do suva dajući 1.01 g proizvoda koji je u sledećem koraku korišćen bez daljeg prečišćavanja.
[0416] Korak 2: Intermedijar (1.01 g) iz koraka 1 je suspendovan u acetonitrilu (24 mL). Dodat je litijum hidroksid (192 mg, 8.01 mmol) u vodi (6 mL) i ovo je mešano tokom 3 h na sobnoj temperaturi. Dodata je voda (5 mL) i pH je podešen na 3 sa hlorovodoničnom kiselinom (1.2 mL, 2N). Talog je filtriran, ispran sa vodom i osušen pod vakuumom na 50°C dajući 695 mg (73%) naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.87 (d, 2H), 8.27 - 8.43 (m, 5H), 13.38 (br s, 2H).
Intermedijar 82
2-[1-(Difluorometil)-1H-pirazol-4-il]-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0417]
11
[0418] Korak 1: Metil 3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (0.40 g, 1.34 mmol) je suspendovan u acetonitrilu (7 mL). Dodata su molekulska sita (400 mg, 0.4 nm, veličina čestica: <50 µm), 1-(difluorometil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (491 mg, 2.01 mmol), piridin (0.217 mL, 2.68 mmol), N,N-dietiletanamin (0.374 mL, 2.68 mmol), i anhidrovani bakar diacetat (487 mg, 2.68 mmol). Ovo je mešano tokom 24 h na sobnoj temperaturi. Dodat je 1-(difluorometil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (300 mg, 1.23 mmol) i reakcija je mešana tokom 3 dana na sobnoj temperaturi. Razblažena je sa vodom i zakišeljena sa hlorovodoničnom kiselinom (2N). Čvrsti materijal je filtriran i osušen pod vakuumom na 50°C dajući 1.21 g intermedijara 1 sa molekulskim sitima koji je u sledećem koraku korišćen bez daljeg prečišćavanja.
[0419] Korak 2: Intermedijar (1.01 g) iz koraka 1 je suspendovan u acetonitrilu (30 mL). Dodat je litijum hidroksid (96.2 mg, 4.02 mmol) u vodi (2 mL) i ovo je mešano tokom 20 h na 40°C. Reakciona smeša je razblažena sa vodom (30 mL) i filtrirana preko dijatomejske zemlje. Filtrat je podešen na pH 4 sa hlorovodoničnom kiselinom (2N). Talog je filtriran, ispran sa vodom tri puta i osušen pod vakuumom na 50°C dajući 380 mg (71%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.89 (d, 2H), 7.93 (t, 1H), 8.34 (d, 2H), 8.48 - 8.57 (m, 2H), 9.01 (s, 1H), 13.88 (br s, 1H).
Intermedijar 83
6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoro-2-tienil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0420]
[0421] Korak 1: Metil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (0.20 g, 0.756 mmol) je suspendovan u acetonitrilu (8 mL). Dodati su 2-(5-fluoro-2-tienil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (569 mg, 2.49 mmol), piridin (0.122 mL, 1.51 mmol), N,N-dietiletanamin (0.211 mL, 1.51 mmol), i anhidrovani bakar diacetat (275 mg, 1.51 mmol). Ovo je mešano tokom 5 h na sobnoj temperaturi tokom 120 h na 50°C. Reakciona smeša je razblažena puferskim rastvorom (15 mL, pH 7), mešana i talog je filtriran, isprana tri puta sa vodom i osušena pod vakuumom na 50°C da bi se dobilo 446 mg sirovog materijala koji je u sledećem koraku korišćen bez daljeg prečišćavanja.
[0422] Korak 2: Intermedijar (446 mg) iz koraka 1 je suspendovan u acetonitrilu (13 mL). Dodat je litijum hidroksid (146 mg, 6.11 mmol) u vodi (2.5 mL) i ovo je mešano tokom 24 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa vodom (30 mL), pH je podešen na 3 sa hlorovodoničnom kiselinom (2N), i talog je filtriran, ispran sa vodom tri puta i osušen pod vakuumom na 50°C dajući 335 mg sirovog materijala koji je u sledećem koraku korišćen bez daljeg prečišćavanja.
[0423] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1 mm; eluent A: voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%), eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 0.73 min; MS (ESIpos): m/z = 351.2 [M+H]<+>
Intermedijar 84
Metil 6-(4-hlorofenil)-2-(5-metil-3-tienil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat [0424]
11
[0425] Metil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (0.10 g, 0.378 mmol) je suspendovan u acetonitrilu (2 mL). Dodati su 4,4,5,5-tetrametil-2-(5-metil-3-tienil)-1,3,2-dioksaborolan (127 mg, 0.567 mmol), piridin (0.061 mL, 0.756 mmol), N,N-dietiletanamin (0.105 mL, 0.756 mmol), i anhidrovani bakar diacetat (137 mg, 0.756 mmol). Ovo je mešano tokom 5 h na sobnoj temperaturi i 23 h na 50°C. Druga serija sintetizovana pod analognim uslovima - ali mešana 24 sata na 50 °C - kombinovana je sa ovom šaržom i zatim sipana u puferski rastvor pH 7. Ovo je mešano tokom kratkog perioda, talog je filtriran, ispran dva puta sa vodom i osušen pod vakuumom na 50°C dajući 460 mg naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.88 (s, 3H), 7.37 (s, 1H), 7.59 (d, 2H), 7.71 (d, 1H), 8.03 (d, 2H), 8.45 (s, 1H).
Intermedijar 85
6-(4-Hlorofenil)-2-(5-metil-3-tienil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina [0426]
[0427] Metil 6-(4-hlorofenil)-2-(5-metil-3-tienil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (272 mg, 0.754 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (6.8 mL). Dodat je litijum hidroksid (54.2 mg, 2.262 mmol) u vodi (1.36 mL) i ovo je mešano tokom 24 h na 50°C. Reakciona smeša je ohlađena, razblažena sa vodom (15 mL), pH je podešen na 3 sa hlorovodoničnom kiselinom (2N), i talog je filtriran, ispran sa vodom dva puta i osušen pod vakuumom na 50°C dajući 225 mg (86%)
11
sirovog materijala koji je u sledećem koraku korišćen bez daljeg prečišćavanja.
[0428] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1mm; eluent A: voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%), eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 0.78 min; MS (ESIpos): m/z = 347.2 [M+H]<+>
Intermedijar 86
Metil 6-(4-hlorofenil)-2-(5-hloro-3-tienil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat [0429]
[0430] Metil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (0.20 g, 0.756 mmol) je suspendovan u acetonitrilu (6 mL). Dodati su 2-(5-hloro-3-tienil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (277 mg, 1.133 mmol), piridin (0.122 mL, 1.511 mmol), N,N-dietiletanamin (0.211 mL, 1.511 mmol), i anhidrovani bakar diacetat (275 mg, 1.511 mmol). Ovo je mešano tokom 24 h na 50°C. Reakciona smeša je ohlađena i dodat je puferski rastvor pH 7 (10 mL). Ovo je mešano tokom kratkog perioda vremena, talog je filtriran, ispran dva puta sa vodom i osušen pod vakuumom na 50°C dajući 520 mg naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja. 70 mg ove serije je prečišćeno pomoću HPLC da bi se dobilo 25 mg naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.88 (s, 3H), 7.57 - 7.61 (m, 2H), 7.69 (d, 1H), 8.03 - 8.07 (m, 2H), 8.10 (d, 1H), 8.47 (s, 1H).
Intermedijar 87
6-(4-Hlorofenil)-2-(5-hloro-3-tienil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina [0431]
11
[0432] Metil 6-(4-hlorofenil)-2-(5-hloro-3-tienil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (288 mg, 0.755 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (8.3 mL). Dodat je litijum hidroksid (54.3 mg, 2.266 mmol) u vodi (1.60 mL) i ovo je mešano tokom 4 h na 50°C. Reakciona smeša je ohlađena, razblažena sa vodom (15 mL), pH je podešen na 3 sa hlorovodoničnom kiselinom (2N), i talog je filtriran, ispran sa vodom dva puta i osušen pod vakuumom na 45°C dajući 300 mg sirovog materijala koji je u sledećem koraku korišćen bez daljeg prečišćavanja.
[0433] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1 mm; eluent A: voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%), eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 0.75 min; MS (ESIpos): m/z = 367.2 [M+H]<+>
Intermedijar 88
Metil 6-(4-hlorofenil)-2-[1-(difluorometil)-1H-pirazol-4-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0434]
[0435] Metil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (0.10 g, 0.378 mmol) je
11
suspendovan u acetonitrilu (1 mL). Dodata su molekulska sita (100 mg, 0.4 nm, veličina čestica: <50 µm), 1-(difluorometil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (138 mg, 0.567 mmol), piridin (0.061 mL, 0.756 mmol), N,N-dietiletanamin (0.105 mL, 0.756 mmol), i anhidrovani bakar diacetat (137 mg, 0.756 mmol). Ovo je mešano tokom 48 h na sobnoj temperaturi, dodat je 1-(difluorometil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (100 mg, 0.410 mmol), i mešan tokom 72 h na sobnoj temperaturi. Razblažen je sa vodom i blago zakišeljen. Talog je filtriran i osušen pod vakuumom na 50°C dajući 315 mg naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.89 (s, 3H), 7.58 - 7.62 (m, 2H), 7.91 (t, 1H), 8.11 -8.15 (m, 2H), 8.50 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.98 (s, 1H).
Intermedijar 89
6-(4-Hlorofenil)-2-[1-(difluorometil)-1H-pirazol-4-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0436]
[0437] Metil 6-(4-hlorofenil)-2-[1-(difluorometil)-1H-pirazol-4-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (646 mg, 1.697 mmol) je suspendovan u acetonitrilu (35 mL). Dodat je litijum hidroksid (122 mg, 5.09 mmol) u vodi (2 mL) i mešan tokom 20 h na 40°C. Reakciona smeša je ohlađena, razblažena sa vodom (30 mL), i filtrirana preko dijatomejske zemlje. Filtrat je podešen na pH 4 sa hlorovodoničnom kiselinom (2N), a talog je filtriran, ispran tri puta sa vodom i osušen pod vakuumom na 50°C da se dobije 360 mg sirovog materijala koji je u sledećem koraku korišćen bez daljeg prečišćavanja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.57 - 7.62 (m, 2H), 7.92 (t, 1H), 8.12 - 8.17 (m, 2H), 8.47 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.99 (s, 1H), 13.86 (br s, 1H).
Intermedijar 90
11
Di-tert-butil 1-(1,2-oksazol-4-il)hidrazin-1,2-dikarboksilat
[0438]
[0439] U rastvor dietil etra (30 mL) na -78°C dodat je kap po kap n-butillitijum (2.5 M u heksanu, 21.6 mL, 54 mmol). Dodat je 4-bromo-1,2-oksazol (4.00 g, 27.0 mmol), i smeša je mešana tokom 30 minuta. Dodat je kap po kap rastvor di-tert-butil (E)-diazen-1,2-dikarboksilata, (9.33 g, 40.6 mmol), u dietil etru (30 mL) i smeša je mešana tokom 1 sata na -78°C. Reakciona smeša je dodata u vodu (200 mL) i ekstrahovana sa dihlorometanom (dva puta po 200 mL). Kombinovane organske faze su osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane. Sirovi ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni (silika gel, heptan / etil acetat 4:1 do 11:9) da bi se dobilo 1.99 g (16%) naslovnog proizvoda.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 1.40-1.60 (m, 18H), 6.68 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.63 (s, 1H).
Intermedijar 91
4-Hidrazino-1,2-oksazol hidrohlorid
[0440]
[0441] Hlorovodonična kiselina (4 M u 1,4-dioksanu, 10.0 mL, 40.0 mmol) dodata je u rastvor di-tert-butil 1-(1,2-oksazol-4-il)hidrazin-1,2-dikarboksilata (2.64 g, 8.82 mmol), u 1,4-dioksanu (10 mL) i smeša je zagrevana na 50°C tokom 5 sati. Smeša je koncentrovana pod vakuumom da se dobije 863 mg (76%) naslovnog jedinjenja.
<1>H NMR (400 MHz, MeOD-d3): δ [ppm] = 8.42 (s, 1H), 8.63 (s, 1H).
12
Intermedijar 92
Metil 6-(4-hlorofenil)-2-(1,2-oksazol-4-il)-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilat [0442]
[0443] Smeša dimetil [2-(4-hlorofenil)-2-oksoetil]malonata (494 mg, 1.74 mmol), 4-hidrazino-1,2-oksazol hidrohlorida (588 mg, 3.47 mmol), i natrijum acetata, (641 mg, 7.81 mmol), u sirćetnoj kiselini (11.8 mL) je mešana na sobnoj temperaturi 96 sati. Reakciona smeša je koncentrovana i dodata u vodu (200 mL). Čvrste supstance su sakupljene filtracijom i osušene pod vakuumom da se dobije 567 mg (98%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.34 - 3.49 (m, 2H), 3.67 (s, 3H), 4.06 - 4.13 (m, 1H), 7.53 (d, 2H), 7.99 (d, 2H), 9.07 (s, 1H), 9.32 (s, 1H).
Intermedijar 93
Metil 6-(4-hlorofenil)-2-(1,2-oksazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat [0444]
[0445] U rastvor metil 6-(4-hlorofenil)-2-(1,2-oksazol-4-il)-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilata (586 mg, 1.76 mmol), u acetonitrilu (10.5 mL) dodat je bakar(II) hlorid (1.18 g, 8.78 mmol) i smeša je zagrevana na 50°C tokom 2 sata. Smeša je ohlađena na sobnoj temperaturi i ostavljena da stoji 16 sati. Smeša je zagrevana na 50°C tokom 16 sati. Smeša je koncentrovana i dodata u vodu. Čvrste supstance su sakupljene filtracijom i osušene da bi se dobilo 563 mg (97%) naslovnog jedinjenja.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.61 (s, 3H), 7.56 (d, 2H), 8.12 (d, 2H), 8.50 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 9.72 (s, 1H).
Intermedijar 94
6-(4-Hlorofenil)-2-(1,2-oksazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina [0446]
[0447] U rastvor metil 6-(4-hlorofenil)-2-(1,2-oksazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilata (383 mg, 1.16 mmol) u 1,4-dioksanu (10 mL) dodata je hlorovodonična kiselina (2 M u vodi, 10.0 mL, 20.0 mmol), i smeša je zagrevana na 100°C tokom 48 sati. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, a čvrste supstance su sakupljene filtracijom i osušene pod vakuumom da se dobije 246 mg (67%) naslovnog jedinjenja koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.56 (d, 2H), 8.14 (d, 2H), 8.46 (br s, 1H), 9.38 (s, 1H), 9.72 (br s, 1H).
Intermedijar 95
Etil 3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0448]
[0449] Etil 3-okso-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (475 mg, 1.52 mmol) je suspendovan u acetonitrilu (10 mL). Dodati su 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2dioksaborolan-2-il)-1,2-tiazol (480 mg, 2.28 mmol), piridin (0.245 mL, 3.03 mmol), N,N-dietiletanamin (0.423 mL, 3.03 mmol), i anhidrovani bakar diacetat (358 mg, 1.97 mmol). Ovo je mešano tokom 24 h na sobnoj temperaturi. Dodat je 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,2-tiazol (100 mg, 0.474 mmol) i mešan tokom 24 h na sobnoj temperaturi. Dodan je puferski rastvor pH 7 (50 mL) i mešan je kratak vremenski period. Talog je filtriran, ispran dva puta sa vodom i osušen pod vakuumom na 45°C dajući 630 mg naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.34 (t, 3H), 4.38 (q, 2H), 8.07 (d, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.73 (dd, 1H), 9.19 (s, 1H), 9.42 (d, 1H), 9.64 (s, 1H).
Intermedijar 96
3-Okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0450]
[0451] Etil 3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (625 mg, 1.58 mmol) je suspendovan u THF (19 mL). Dodat je litijum hidroksid (113 mg, 4.73 mmol) u vodi (2.3 ml) i mešan na sobnoj temperaturi tokom 24 h. Dodata je voda (100 mL) i pH je podešen na 4 sa hlorovodoničnom kiselinom (0.5N). Ovo je mešano tokom kratkog vremenskog perioda, talog je filtriran, ispran tri puta sa vodom i osušen na 45°C pod vakuumom da bi se dobilo 585 mg naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.99 (br s, 1H), 8.47 (br s, 1H), 9.14 (br s, 1H).
[0452] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1 mm; eluent A: voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%), eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 0.59 min; MS (ESIpos): m/z =
12
369.1 [M+H]<+>
Intermedijar 97
Dimetil {2-[4-(fluorometil)fenil]-2-oksoetil}malonat
[0453]
[0454] 2-Bromo-1-[4-(fluorometil)fenil]etanon (5.5 g, 23.80 mmol) je rastvoren u acetonu (120 mL). Dodati su dimetil malonat (6.94 g, 52.50 mmol) i kalijum karbonat (5.0 g, 36.18 mmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Zapremina je smanjena za polovinu pod vakuumom na rotacionom uparivaču. Zatim je sipana u vodu (550 ml) koja sadrži malo fiziološkog rastvora. Slojevi su odvojeni i vodena faza je ekstrahovana tri puta sa etil acetatom (200 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani sa vodom i koncentrovanim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušeni iznad magnezijum sulfata i koncentrovani. Dodata je druga serija pripremljena pod analognim uslovima (0.5 g polaznog materijala bromidoketona) i isparljive materije su uklonjene pod visokim vakuumom na 70°C. Sirovi proizvod je prečišćen sa fleš hromatografijom (heksan / etil acetat) dajući 5.59 g (76%) naslovnog proizvoda.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.65 (d, 2H), 3.68 (s, 6H), 3.99 (t, 1H), 5.54 (d, 2H), 7.56 (d, 2H), 8.04 (d, 2H).
Intermedijar 98
Metil 6-[4-(fluorometil)fenil]-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilat
[0455]
[0456] Dimetil {2-[4-(fluorometil)fenil]-2-oksoetil}malonat (2.50 g, 8.86 mmol) je rastvoren u sirćetnoj kiselini (31.4 mL). Dodat je rastvor hidrazina u THF (14 mL, 1.0M, 14 mmol) na sobnoj temperaturi. Zatim je ovo mešano na 85°C preko noći. Reakciona smeša je ohlađena i dodat je rastvor hidrazina u THF (2.1 mL, 1.0M, 2.1 mmol). Ovo je mešano na 75°C tokom 3 h i na sobnoj temperaturi tokom 120 h. Dodata je voda (150 mL) i ovo je mešano neko vreme. Talog je profiltriran sa odsisavanjem, ispran tri puta sa vodom i osušen pod vakuumom na 50°C dajući 1.781 g (76%) naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.19 (dd, 1H), 3.29 (dd, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.75 (dd, 1H), 5.45 (d, 2H), 7.47 (dd, 2H), 7.78 - 7.82 (m, 2H), 11.29 (s, 1H).
Intermedijar 99
Metil 6-[4-(fluorometil)fenil]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0457]
[0458] Metil 6-[4-(fluorometil)fenil]-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilat (1.00 g, 3.78 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (20 mL). Dodat je bakar dihlorid (1.60 g, 11.90 mmol) i ovo je mešano tokom 1 h na 90°C. Reakciona smeša je ohlađena i sipana u vodu (150 mL). Ovo je mešano tokom 10 min. Talog je filtriran usisavanjem, ispran tri puta sa vodom i osušen na 50°C pod vakuumom da se dobije 1.02 g naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.85 (s, 3H), 5.48 (d, 2H), 7.53 (br d, 2H), 7.93 (br d, 2H), 8.39 (s, 1H), 13.69 (br s, 1H).
Intermedijar 100
Metil 6-[4-(fluorometil)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0459]
12
[0460] Metil 6-[4-(fluorometil)fenil]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (0.940 g, 3.58 mmol) je suspendovan u acetonitrilu (10 mL). Dodati su anhidrovani natrijum sulfat (0.950 g, 6.68 mmol), 1-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (1.2 g, 5.77 mmol), piridin (0.58 mL, 7.17 mmol), N,N-dietiletanamin (1 mL, 7.17 mmol), i anhidrovani bakar diacetat (1.3 g, 7.17 mmol). Mešani su na sobnoj temperaturi tokom 2 dana. Dodati su 1-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (0.522 g, 2.51 mmol) i anhidrovani bakar diacetat (651 mg, 3.58 mmol) i mešani na sobnoj temperaturi tokom 4 dana. Ovo je razblaženo sa dihlorometanom i dodat je silika gel. Isparljive materije su uklonjene pod vakuumom. Ostatak je prečišćen sa fleš hromatografijom (silika gel, dihlorometan / etanol 95:5) dajući 1.05 g (85%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.89 (s, 3H), 3.92 (s, 3H), 5.51 (d, 2H), 7.54 - 7.59 (m, 2H), 8.07 - 8.12 (m, 3H), 8.45 (s, 1H), 8.51 (s, 1H).
Intermedijar 101
6-[4-(Fluorometil)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0461]
[0462] Metil 6-[4-(fluorometil)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (1.05 g, 3.07 mmol) je suspendovan u THF (50.5 mL). Dodat je litijum hidroksid (221 mg, 9.20 mmol) u vodi (2.5 mL) i mešan na sobnoj temperaturi tokom 1 h. pH je podešen
12
na 3 sa hlorovodoničnom kiselinom (4 mL, 2N). Talog je filtriran, ispran tri puta sa vodom i osušen pod vakuumom na 50°C dajući 352 mg (35%) naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.93 (s, 3H), 5.51 (d, 2H), 7.55 - 7.59 (m, 2H), 8.11 - 8.15 (m, 3H), 8.46 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 13.88 (br s, 1H).
Intermedijar 102
Metil 6-[4-(fluorometil)fenil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat [0463]
[0464] Metil 6-[4-(fluorometil)fenil]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (0.725 g, 2.77 mmol) je suspendovan u acetonitrilu (7.4 mL). Dodati su anhidrovani natrijum sulfat (0.725 g, 5.10 mmol), 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin (851 mg, 4.15 mmol), piridin (448 µL, 5.53 mmol), N,N-dietiletanamin (771 µL, 5.53 mmol), i anhidrovani bakar diacetat (1.004 g, 5.53 mmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. pH je podešen na 3 sa hlorovodoničnom kiselinom (2N). Talog je filtriran, ispran tri puta sa vodom (1 mL) i osušen pod vakuumom na 50°C preko noći. Čvrste supstance su triturisane sa dihlorometanom / metanolom 1:1, filtrirane i osušene pod vakuumom na 50°C dajući 942 mg naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.88 (s, 3H), 5.50 (d, 2H), 7.56 (br d, 2H), 8.00 (br d, 2H), 8.40 - 8.69 (m, 1H).
Intermedijar 103
6-[4-(Fluorometil)fenil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0465]
12
[0466] Metil 6-[4-(fluorometil)fenil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (915 mg, 2.70 mmol) je suspendovan u acetonitrilu (24 mL). Dodat je litijum hidroksid (194 mg, 8.09 mmol) u vodi (2.91 mL). Dodata je dodatna količina vode (3 mL). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa vodom (30 mL), mešana tokom 30 minuta i zatim je pH podešen na 3 sa hlorovodoničnom kiselinom (4 mL, 2N). Talog je filtriran, ispran sa vodom i osušen pod vakuumom na 50°C da se dobije 728 mg (78%) naslovnog jedinjenja koje je u sledećem koraku korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0467] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1mm; eluent A: voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%), eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 0.53 min; MS (ESIpos): m/z = 326.4 [M+H]<+>
Intermedijar 104
6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-(4,4,4-trifluoro-3-hidroksibutan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0468]
[0469] 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (245 mg, 0.75 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (10 mL). Sukcesivno su dodavani 3-amino-
12
1,1,1-trifluorobutan-2-ol hidrohlorid 1:1 (174.5 mg, 0.97 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.59 mL, 3.36 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 0.71 g, 50% u DMF, 1.12 mmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.1vol. % mravlje kiseline (99%)) / acetonitril) da se dobije 52.8 mg (16%) naslovnog jedinjenja.
[0470] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1mm; eluent A: voda 0.1vol. % mravlje kiseline (99%), eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 1.22 min; MS (ESIpos): m/z = 454.3 [M+H]<+>
Intermedijar 105
6-(4-Hlorofenil)-2-(5-hloropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina [0471]
[0472] Etil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (250 mg, 0.9 mmol) je rastvoren u DMF (12 mL). Dodati su (5-hloropiridin-3-il)boronska kiselina (282 mg, 1.79 mmol), 2,2'-bipiridin (700.5 mg, 4.48 mmol), natrijum karbonat (0.114 g, 1.076 mmol), i anhidrovani bakar diacetat (407 mg, 2.24 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 4 h na 80°C, ohlađena praćeno sa dodavanjem 2.7 mL vodenog 2N rastvora natrijum hidroksida. Ovo je mešano preko noći, dodata je voda i talog je profiltriran i osušen u vakuumu da se dobije 402 mg naslovnog jedinjenja.
[0473] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1mm; eluent A: voda 0.1vol. % mravlje kiseline (99%), eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C;
12
ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 1.25 min; MS (ESIpos): m/z = 364.0 [M+H]<+>
Intermedijar 106
6-(4-Hlorofenil)-2-(5-metilpiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina [0474]
[0475] Etil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (250 mg, 0.9 mmol) je rastvoren u DMF (12 mL). Dodati su 5-metilpiridin-3-boronska kiselina (245.7 mg, 1.79 mmol), 2,2'-bipiridin (700.5 mg, 4.48 mmol), natrijum karbonat (0.114 g, 1.076 mmol), i anhidrovani bakar diacetat (407 mg, 2.24 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 4 h na 80°C, ohlađena uz dodavanje 2.7 mL vodenog 2N rastvora natrijum hidroksida. Ovo je mešano preko noći, dodata je voda i talog je profiltriran i osušen u vakuumu da se dobije 317 mg naslovnog jedinjenja.
[0476] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1 mm; eluent A: voda 0.1vol. % mravlje kiseline (99%) eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 1.12 min; MS (ESIpos): m/z = 342.2 [M+H]<+>
Intermedijar 107
Dimetil {2-[4-(difluorometoksi)fenil]-2-oksoetil}malonat
[0477]
1
[0478] 4.5 g dimetil malonata i 3.6 g kalijum karbonata dodati su u rastvor 4.8 g 2-bromo-1-[4-(difluorometoksi)fenil]etan-1-ona u 120 mL acetona. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i zatim je ugašena sa vodom. Aceton je uparen i preostala vodena faza je ekstrahovana tri puta sa etil acetatom. Kombinovane organske faze su isprane sa fiziološkim rastvorom, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (gradijent heksan / etil acetat sa do 40% etil acetata) da se dobije 4.3 g dimetil {2-[4-(difluorometoksi)fenil]-2-oksoetil}malonata.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 3.60 - 3.65 (m, 2 H), 3.68 (s, 6 H), 3.98 (t, 1 H), 7.22 -7.66 (m, 3 H), 8.05 - 8.11 (m, 2 H).
Intermedijar 108
Metil 6-[4-(difluorometoksi)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilat
[0479]
[0480] Smeša dimetil {2-[4-(difluorometoksi)fenil]-2-oksoetil}malonata (1 g, 3.16 mmol), 4-hidrazino-1-metil-1H-pirazol dihidrohlorida (1.23 g, 6.32 mmol) i natrijum acetata (1.17 g, 14.23 mmol) u 30 mL sirćetne kiseline je mešana na 45°C tokom 3 h i na sobnoj temperaturi preko noći. Dodato je još 4-hidrazino-1-metil-1H-pirazol dihidrohlorida (1 g, 3.16 mmol) i reakciona smeša je mešana na 45°C tokom 2 sata. Zatim je reakciona smeša rastvorena u vodi, talog je profiltriran i osušen u vakuumu da se dobije 1.05 g (88%) naslovnog jedinjenja.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 3.35 - 3.45 (m, 2 H), 3.68 (s, 3 H), 3.85 (s, 3 H), 3.99 - 4.05 (m, 1 H), 7.24 - 7.30 (m, 2 H), 7.36 (t, 1H), 7.75 (d, 1 H), 7.94 - 8.03 (m, 2 H), 8.08 (s, 1 H).
Intermedijar 109
Metil 6-[4-(difluorometoksi)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-
1 1
4-karboksilat
[0481]
[0482] Smeša metil 6-[4-(difluorometoksi)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilata (1.05 g, 2.77 mmol) i bakar(II) hlorida (1.12 g, 8.3 mmol) u 37.5 mL acetonitrila mešana je na 90°C tokom 3 sata. Reakciona smeša je rastvorena u vodi i talog je profiltriran da se dobije 1.08 g (kvant.) naslovnog jedinjenja.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 3.88 (s, 3 H), 3.92 (s, 3 H), 7.29 - 7.34 (m, 2 H), 7.38 (t, 1 H), 8.08 - 8.10 (m, 1 H), 8.10 - 8.14 (m, 2 H), 8.44 (s, 1 H), 8.50 (s, 1 H).
Intermedijar 110
6-[4-(Difluorometoksi)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0483]
[0484] Metil 6-[4-(difluorometoksi)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (3.8 g, 10.1 mmol) je rastvoren u THF (50 mL). Dodat je 2M rastvor natrijum hidroksida (12.6 mL, 25.2 mmol) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana preko noći, razblažena sa vodom i tretirana sa 1M HCl. pH je podešen na 3 i talog je profiltriran sa odsisavanjem, ispran tri puta sa vodom i osušen pod vakuumom da se dobije 276 mg (50%) naslovnog jedinjenja.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 3.92 (s, 3 H), 7.38 (t, 1 H), 7.29 - 7.34 (m, 2 H), 8.09
1 2
- 8.18 (m, 3 H), 8.43 - 8.48 (m, 1 H), 8.50 - 8.55 (m, 1 H).
Intermedijar 111
6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0485]
[0486] Etil 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (2.0 g, 7.2 mmol) je rastvoren u THF (37 mL). Dodat je 2M rastvor natrijum hidroksida (9 mL, 18 mmol) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana preko noći, razblažena sa vodom i tretirana sa 2M HCl. pH je podešen na 3 i talog je profiltriran sa odsisavanjem, ispran tri puta sa vodom i osušen pod vakuumom da se dobije 1.79 g (99%) naslovnog jedinjenja.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 7.55 - 7.59 (d, 2 H), 7.95 - 7.99 (d, 2 H), 8.50 (s, 1 H), 14.1 (br s, 2 H).
Intermedijar 112
6-(4-Hlorofenil)-N-[(2R)-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0487]
[0488] 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (1425 mg, 5.68 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (30 mL). Sukcesivno su dodavani (3R)-3-amino-2-metil-butan-2-ol hidrohlorid 1:1 (1191 mg, 8.53 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (4.46 mL, 25.6 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 5.43 g, 50% u DMF, 8.53 mmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći praćeno dodavanjem vode i zasićenog rastvora amonijum hlorida. Novo formirani talog je filtriran, ispran vodom i osušen u vakuumu da bi se
1
dobilo 626 mg (33%) naslovnog jedinjenja.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 1.09 - 1.11 (m, 3 H), 1.13 (d, 3 H), 1.15 (s, 3 H), 3.85 - 3.97 (m, 1 H), 4.65 (br s, 1H), 7.57 (d, 2 H), 7.93 (d, 2 H), 8.53 (s, 1 H), 9.73 (s, 1 H), 13.86 (br s, 1H).
Intermedijar 113
3-Okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina [0489]
[0490] Sinteza je izvedena analogno kao za intermedijar 111 iz etil 3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilata.
[0491] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1mm; eluent A: voda 0.1vol. % mravlje kiseline (99%) eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 1.07 min; MS (ESIpos): m/z = 301.2 [M+H]<+>
Intermedijar 114
N-[(2R)-3-Hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0492]
1 4
[0493] Sinteza je izvedena analogno kao za intermedijar 112 iz 3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 1.10 (s, 3 H), 1.13 (d, 3 H), 1.15 (s, 3 H), 3.85 - 3.97 (m, 1 H), 4.64 (s, 1 H), 7.42 - 7.56 (m, 2 H), 7.97 - 8.09 (m, 2 H), 8.55 (s, 1 H), 9.75 (br d, 1 H), 14.02 (br s, 1 H).
Intermedijar 115
Dimetil {2-[4-(dimetilamino)fenil]-2-oksoetil}malonat
[0494]
[0495] Dimetil malonat (5.45 g, 41.3 mmol) i kalijum karbonat (4.3 g, 31 mmol) dodati su u rastvor 4-(dimetilamino)fenacil bromida (5.0 g, 20.6 mmol) u 145 mL acetona. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i zatim je ugašena sa vodom. Talog je odfiltriran, ispran sa vodom i osušen u vakuumu da se dobije 4.66 g (77%) naslovnog jedinjenja.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 3.02 (s, 6 H), 3.48 (d, 2 H), 3.67 (s, 6 H), 3.93 (t, 1 H), 6.72 (d, 2 H), 7.81 (d, 2 H).
Intermedijar 116
Metil 6-[4-(dimetilamino)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilat
[0496]
1
[0497] Smeša dimetil {2-[4-(dimetilamino)fenil]-2-oksoetil}malonata (500 mg, 1.7 mmol), 4-hidrazino-1-metil-1H-pirazol dihidrohlorida (336 mg, 2.2 mmol) i natrijum acetata (629 mg, 7.6 mmol) u 14 mL AcOH je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, a zatim tokom 1 sat na 50 °C. Dodato je još 4-hidrazino-1-metil-1H-pirazol dihidrohlorida (258 mg, 1.7 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, a zatim na 50 °C tokom 5 sati. Zatim je reakciona smeša prebačena u vodu i smeša je ekstrahovana tri puta sa etil acetatom. Kombinovane organske faze su isprane sa fiziološkim rastvorom, filtrirane (MN 617 WA filter papir) i koncentrovane u vakuumu da bi se dobilo 516 mg (85%) naslovnog jedinjenja.
[0498] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1mm; eluent A: voda 0.1vol. % mravlje kiseline (99%) eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 1.05 min; MS (ESIpos): m/z = 356.5 [M+H]<+>
Intermedijar 117
Metil 6-[4-(dimetilamino)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0499]
[0500] Smeša metil 6-[4-(dimetilamino)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilata (516 mg, 1.45 mmol) i joda (737 mg, 2.9 mmol) u 11 mL sirćetne kiseline mešana je na sobnoj temperaturi tokom 48 sati. Dodat je dodatni jod (368.5 mg, 1.45 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 24 h. Reakciona smeša je obrađena zasićenim rastvorom natrijum tiosulfata i etil acetatom. Faze su odvojene i organska faza je isprana zasićenim rastvorom natrijum tiosulfata i fiziološkim rastvorom, filtrirana (MN 617 WA filter papir) i koncentrovana u vakuumu da se dobije 936 mg (čistoća 55%) naslovnog jedinjenja.
1
[0501] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1 mm; eluent A: voda 0.1vol. % mravlje kiseline (99%) eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 1.7 min; MS (ESIpos): m/z = 354.4 [M+H]<+>
Intermedijar 118
6-[4-(Dimetilamino)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0502]
[0503] Metil 6-[4-(dimetilamino)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (936 mg, 1.45 mmol, 55%) je rastvoren u THF (5 mL). Dodat je 2M rastvor natrijum hidroksida (1.5 mL, 3.0 mmol) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana preko noći, razblažena sa vodom i tretirana sa 1M HCl. pH je podešen na 3, a zatim je dodat etil acetat. Faze su odvojene, a vodena faza je ekstrahovana tri puta sa etil acetatom. Kombinovane organske faze su isprane sa fiziološkim rastvorom, filtrirane (MN 617 WA filter papir) i koncentrovane u vakuumu da bi se dobilo 99 mg (20%) naslovnog jedinjenja.
[0504] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1mm; eluent A: voda 0.1vol. % mravlje kiseline (99%) eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 1.11 min; MS (ESIpos): m/z = 340.3 [M+H]<+>
Intermedijar 119
1
Etil 3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0505]
[0506] Etil 3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (207 mg, 0.63 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (6 mL) praćeno sa dodavanjem molekulskih sita (4 Å, prah, 0.176 g), 4-(tetrametil-1,3,2-dioksoborolan-2-il)-1,2-tiazola (200 mg, 0.95 mmol), trietilamina (0.18 mL, 1.26 mmol), piridina (0.10 mL, 1.26 mmol) i anhidrovanog bakar diacetata (229.5 mg, 1.26 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 4 h na 80°C, filtrirana kroz celit, koncentrovana i prečišćena hromatografijom na koloni (gradijent heksan / etil acetat sa do 50% etil acetata) da se dobije 95 mg (36%) naslovnog jedinjenja.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 1.34 (t, 3 H), 4.36 (q, 2 H), 7.53 (dd, 2 H), 8.18 (d, 2 H), 8.51 (s, 1 H), 9.14 (s, 1 H), 9.59 (s, 1 H).
Intermedijar 120
3-Okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0507]
[0508] Etil 3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (90 mg, 0.22 mmol) je rastvoren u THF (2 mL). Dodat je 2M rastvor natrijum
1
hidroksida (0.33 mL, 0.66 mmol) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana preko noći, razblažena sa vodom i tretirana sa 1M HCl. pH je podešen na 3 i talog je odfiltriran, ispran sa vodom i osušen u vakuumu da se dobije 74 mg (88%) naslovnog jedinjenja.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 7.48 - 7.55 (m, 2 H), 8.20 (d, 2 H), 8.50 (s, 1 H), 9.15 (s, 1 H), 9.60 (s, 1 H).
Intermedijar 121
Metil 6-[4-(difluorometoksi)fenil]-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-karboksilat [0509]
[0510] Smeša dimetil {2-[4-(difluorometoksi)fenil]-2-oksoetil}malonata (709 mg, 2.24 mmol), hidrazina u THF (1 M, 4.5 mL, 4.5 mmol) i natrijum acetata (828 mg, 10.1 mmol) u 21 mL AcOH je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, zatim 6 h na 50°C. Dodato je još hidrazina u THF (1 M, 6.7 mL, 6.7 mmol) i reakciona smeša je mešana na 80°C tokom 3 sata. Zatim je reakciona smeša rastvorena u vodi, talog je profiltriran i osušen u vakuumu da se dobije 334 mg (50%) naslovnog jedinjenja.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 3.13 - 3.30 (m, 2 H), 3.67 (s, 3 H), 3.71 - 3.77 (m, 1 H), 7.20 - 7.25 (m, 2 H), 7.31 (t, 1 H), 7.81 (d, 2 H), 11.27 (s, 1 H).
Intermedijar 122
Metil 6-[4-(difluorometoksi)fenil]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0511]
[0512] Smeša metil 6-[4-(difluorometoksi)fenil]-3-okso-2,3,4,5-tetrahidropiridazin-4-
1
karboksilata (1.3 g, 4.4 mmol) i bakar(II) hlorida (1.77 g, 13.2 mmol) u 60 mL acetonitrila je mešana na 90°C tokom 4 sata. Reakciona smeša je prebačena u vodu i talog je profiltriran da se dobije 1.13 g (87%) naslovnog jedinjenja.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 3.85 (s, 3 H), 7.29 (br d, 2 H), 7.34 (t, 1 H), 7.94 (d, 2 H), 8.37 (s, 1 H), 13.66 (s, 1 H).
Intermedijar 123
6-[4-(Difluorometoksi)fenil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0513]
[0514] Metil 6-[4-(difluorometoksi)fenil]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (550 mg, 1.86 mmol) je rastvoren u DMF (12 mL) praćeno sa dodavanjem piridin-3-ilboronske kiseline (456 mg, 3.7 mmol), 2,2'-bipiridina (1.45 g, 9.3 mmol), natrijum karbonata (236 mg, 2.23 mmol) i anhidrovanog bakar diacetata (843.1 mg, 4.6 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 4 h na 80°C, a zatim 48 h na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat 2M rastvor natrijum hidroksida (1.86, 3.7 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h praćeno dodavanjem vode. Nastali talog je filtriran, ispran sa vodom i osušen u vakuumu da bi se dobilo 610 mg (91%) naslovnog jedinjenja.
[0515] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1mm; eluent A: voda 0.1vol. % mravlje kiseline (99%) eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 1.07 min; MS (ESIpos): m/z = 360.2 [M+H]<+>
Intermedijar 124
14
Dietil hidroksi{2-okso-2-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]etil}malonat
[0516]
[0517] U tikvicu sa okruglim dnom od 100 ml, prebačen je 1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]etanon (10 g, 52.87 mmol) i 1,3-dietil 2-oksopropandioat (15.65 g, 89.9 mmol). Dobijeni rastvor je mešan tokom 24 h na 130°C praćeno sa dodavanjem još 1,3-dietil 2-oksopropandioata (13.81 g, 79.30 mmol) i zagrevanjem još 13 h na 130°C. Dobijena smeša je ohlađena do sobne temperature i sipana u pentan. Talog je profiltriran, ispran sa pentanom i vodom dajući 22.6 g (sirovog) dietil hidroksi{2-okso-2-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]etil}malonata koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja.
Intermedijar 125
Etil 3-okso-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat [0518]
[0519] U rastvor dietil hidroksi{2-okso-2-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]etil}malonata (22.6 g, 62.2 mmol) u etanolu (255 mL) dodat je hidrazin hidrohlorid (7.2 g, 68.5 mmol). Dobijeni rastvor je mešan tokom 24 h na 80°C. Reakcija je zatim ugašena dodavanjem vode. Dobijeni talog je odfiltriran i osušen u vakuumu dajući 13.26 g (68%) etil 3-okso-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilata.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 1.32 (t, 3 H), 4.33 (q, 2 H), 8.01 - 8.06 (m, 1 H), 8.47 - 8.51 (m, 1 H), 8.52 - 8.57 (m, 1 H), 9.23 - 9.26 (m, 1 H), 13.92 (s, 1H).
Intermedijar 126
Etil 2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat
[0520]
[0521] Etil 3-okso-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (5 g, 15.96 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (141 mL) praćeno sa dodavanjem (5-fluoropiridin-3-il)boronske kiseline (3.37 g, 23.94 mmol), trietilamina (4.45 mL, 31.9 mmol), piridina (2.58 mL, 31.9 mmol) i anhidrovanog bakar diacetata (7.25 g, 39.9 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 3 h na 80°C praćeno dodavanjem vode. Rastvor je podešen na pH 3 dodavanjem 1 M vodenog rastvora hlorovodonične kiseline, praćeno ekstrakcijom sa etil acetatom tri puta. Kombinovane organske faze su isprane sa fiziološkim rastvorom, osušene iznad natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane da bi se dobilo 5.6 g (86%) naslovnog jedinjenja.
[0522] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1mm; eluent A: Voda 0.1vol. % mravlje kiseline (99%) eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 1.15 min; MS (ESIpos): m/z = 409.2 [M+H]<+>
Intermedijar 127
2-(5-Fluoropiridin-3-il)-3-okso-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina
[0523]
[0524] Etil 2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat (5.6 g, 13.7 mmol) je rastvoren u tetrahidrofuranu (100 mL) praćeno sa dodavanjem 20.5 mL (41.1 mmol) vodenog 2N rastvora natrijum hidroksida. Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu dodata je voda i pH je podešen na pH 3 sa 1M vodenog rastvora hlorovodonične kiseline. Talog je profiltriran i osušen u vakuumu da se dobije 3.19 g (70%) naslovnog jedinjenja.
[0525] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1 mm; eluent A: Voda 0.1vol. % mravlje kiseline (99%) eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 1.00 min; MS (ESIpos): m/z = 381.6 [M+H]<+>
Intermedijar 128
Dietil hidroksi{2-okso-2-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]etil}malonat
[0526]
[0527] 1-[5-(Trifluorometil)piridin-2-il]etanon (3.8 g, 20.1 mmol) i dietil ketomalonat (7.0 g, 40.2 mmol) su pomešani i mešani na 130°C tokom 24 h. Posle hlađenja do sobne temperature, smeša je prebačena u etil acetat i vodu. Faze su odvojene, a vodena faza je ekstrahovana tri puta sa etil acetatom. Kombinovane organske faze su isprane sa fiziološkim rastvorom, filtrirane (MN
14
617 WA filter papir) i koncentrovane. Sirovi proizvod je prečišćen sa fleš hromatografijom (silika gel, gradijent heksan / etil acetat) da se dobije 4.64 g (64%) naslovnog jedinjenja.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 1.18 (t, 6 H), 3.91 (q, 2 H), 4.17 (q, 4 H), 6.50 (s, 1 H), 8.12 (d, 1 H), 8.42 - 8.47 (m, 1 H), 9.17 (dd, 1 H).
Intermedijar 129
Etil 3-okso-6-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilat [0528]
[0529] Dietil hidroksi{2-okso-2-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]etil}malonat (4.6 g, 12.66 mmol) i hidrazin dihidrohlorid (1.79, 17.1 mmol) su rastvoreni u etanolu (52 mL) i mešani na refluksu tokom 9 h. Posle dodavanja vode, formiran je talog, koji je odfiltriran, ispran sa vodom i osušen u vakuumu da se dobije 3.19 g (81 %) naslovnog jedinjenja.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.31 (t, 3 H), 4.32 (q, 2 H), 8.24 - 8.29 (m, 1 H), 8.35 (dd, 1 H), 8.67 (s, 1 H), 9.07 - 9.11 (m, 1 H), 13.94 (s, 1 H).
Intermedijar 130
3-Okso-6-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina [0530]
[0531] 3.0 g sirove smeše koja sadrži nepoznatu količinu etil 3-okso-6-[5-(trifluorometil)-piridin-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilata je rastvoreno u tetrahidrofuranu (50 mL) praćeno sa dodavanjem 9.2 mL (18.4 mmol) vodenog 2N rastvora natrijum hidroksida. Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. U reakcionu smešu dodata je voda i pH je podešen na pH 3 sa 1M vodenog rastvora hlorovodonične kiseline. Talog je profiltriran i osušen u vakuumu da se dobije 1.05 g sirove smeše koja sadrži naslovno jedinjenje.
[0532] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1mm; eluent A: Voda 0.1vol. % mravlje kiseline (99%) eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 1.04 min; MS (ESIpos): m/z = 286.1 [M+H]<+>
Intermedijar 131
N-[(2S)-1-Hidroksipropan-2-il]-3-okso-6-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0533]
[0534] 1.051 g sirove smeše koja sadrži nepoznatu količinu 3-okso-6-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline i 312 mg (4.15 mmol) alaninola je rastvoreno u 16 mL DMF i tretirano sa HATU (2.1 g, 5.54 mmol), N,N-diizopropiletilaminom (1.07 g, 8.3 mmol) i 4-dimetilaminopiridinom (16.9 mg, 0.14 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći i stavljena u vodu i etil acetat. Faze su odvojene i organska faza je isprana sa fiziološkim rastvorom, filtrirana (MN 617 WA filter papir) i koncentrovana. Sirovi proizvod je prečišćen sa fleš hromatografijom (silika gel, gradijent heksan / etil acetat) da se dobije 383 mg naslovnog jedinjenja.
[0535] LC-MS (Instrument: Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001; kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1mm; eluent A: Voda 0.1vol. % mravlje kiseline (99%) eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 mL/min; temperatura: 60°C; ubrizgavanje: 2 µL; DAD sken: 210-400 nm; ELSD): Rt= 0.93 min; MS (ESIpos): m/z = 343.5 [M+H]<+>
EKSPERIMENTALNI DEO - PRIMERI
14
[0536] Sledeći primeri opisuju realizaciju ovog pronalaska, ne ograničavajući pronalazak samo na ove primere.
Primer 1
N-(1-Hidroksi-3-metilbutan-2-il)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0537]
[0538] Rastvor 100 mg intermedijara 6, 33.2 mg 2-amino-3-metilbutan-1-ola, 184 mg HATU i 125 mg etildiizopropilamina u 5 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Zatim je reakcija ugašena vodom i smeša je ekstrahovana sa etil acetatom. Organska faza je osušena iznad natrijum sulfata i uparena do suva. Ostatak je podvrgnut RP-HPLC ((kolona: X-Bridge C18 5µm 100x30 mm, mobilna faza: gradijent acetonitril / voda (0.1 vol. % mravlje kiseline))) da se dobije 25.3 mg N-(1-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H-NMR: (400 MHz, 25°C, Metanol-d4): δ [ppm] = 1.00-1.07 (m, 6H); 2.02-2.13 (m, 1H); 2.41 (s, 3H); 3.67-3.75 (m, 2H); 3.95-4.01 (m+s, 4H); 7.34 (d, 2H); 7.88 (d, 2H); 8.15 (s, 1H); 8.49 (s, 1H); 8.64 (s, 1H).
Primer 2
N-(1-Hidroksi-3-metilbutan-2-il)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 1
[0539]
14
[0540] HPLC-odvajanje 24 mg N-(1-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 1) na hiralnoj koloni (Chiralpak IB 5 µm 250x30 mm, eluent: heksani / etanol gradijent sa 20-50% etanol, protok 40 mL/min) dalo je 6 mg N-(1-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 1.
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 0.90-0.96 (m, 6H); 1.95-2.03 (m, 1H); 2.39 (s, 3H); 3.43-3.50 (m, 1H); 3.53-3.60 (m, 1H); 3.81-3.90 (m, 1H); 3.93 (s, 3H); 4.82 (t, 1H); 7.36 (d, 2H); 7.95 (d, 2H); 8.10 (s, 1H); 8.56 (s, 1H); 8.57 (s, 1H); 9.55 (d, 1H).
Hiralna HPLC: Rt = 3.65 min
Instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IB 3 µm 100x4.6 mm; eluent: heksani / etanol 50:50, protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD sken: 254 nm
Primer 3
N-(1-Hidroksi-3-metilbutan-2-il)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 2
[0541]
[0542] Odvajanje 24 mg primera 1, prema primeru 2, dodatno daje 6 mg N-(1-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-
14
karboksamida, enantiomer 2.
<1>H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 0.90-0.96 (m, 6H); 1.95-2.03 (m, 1H); 2.39 (s, 3H); 3.43-3.50 (m, 1H); 3.53-3.60 (m, 1H); 3.81-3.90 (m, 1H); 3.93 (s, 3H); 4.82 (t, 1H); 7.36 (d, 2H); 7.95 (d, 2H); 8.10 (s, 1H); 8.56 (s, 1H); 8.57 (s, 1H); 9.55 (d, 1H).
Hiralna HPLC: Rt = 6.15 min
Instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IB 3 µm 100x4.6 mm; eluent: heksani / etanol 50:50, protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD sken: 254 nm
Primer 4
N-(1-Hidroksibutan-2-il)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0543]
[0544] Rastvor 100 mg intermedijara 7, 40.7 mg 2-aminobutan-1-ola i 85 µL trietilamina u 10 mL dihlorometana mešan je 10 minuta u kupatilu sa ledenom vodom. Zatim je reakcija ugašena vodom i smeša je ekstrahovana sa dihlorometanom. Organska faza je osušena iznad natrijum sulfata filtrirana i uparena do suva. Ostatak je podvrgnut fleš hromatografiji (etil acetat / petrol etar 1:2) da se dobije 34 mg N-(1-hidroksibutan-2-il)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H-NMR: (400 MHz, 25°C, Metanol-d4): δ [ppm] = 1.02 (t, 3H); 1.59-1.83 (m, 2H); 2.41 (s, 3H); 3.68 (d, 2H); 3.96 (s, 3H); 4.01-4.07 (m, 1H); 7.34 (d, 2H); 7.87 (d, 2H); 8.15 (s, 1H); 8.48 (s, 1H); 8.62 (s, 1H).
Primer 5
N-(1-Hidroksibutan-2-il)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 1
[0545]
14
[0546] HPLC-odvajanje 33 mg N-(1-hidroksibutan-2-il)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 4) na hiralnoj koloni (Chiralpak IC 5 µm 250x30 mm, eluent: heksani (0.1 % dietilamin) / (etanol/metanol 50:50) gradijent sa 20-50% (etanol/metanol 50:50), protok 40 mL/min) dalo je 8 mg N-(1-hidroksibutan-2-il)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 1.
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 0.91 (t, 3H); 1.47-1.56 (m, 1H); 1.64-1.72 (m, 1H); 2.39 (s, 3H); 3.34-3.49 (m, 1H); 3.51-3.56 (m, 1H); 3.87-3.95 (m+s, 4H); 4.89 (t, 1H); 7.36 (d, 2H); 7.95 (d, 2H); 8.11 (s, 1H); 8.56 (s, 2H); 9.51 (d, 1H).
Hiralna HPLC: Rt = 4.68 min
Instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IC 3 µm 100x4.6 mm; eluent: heksani (0.1 % dietilamin) / (etanol/metanol 50:50) gradijent sa 20-50% (etanol/metanol 50:50), protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD sken: 254 nm
Primer 6
N-(1-Hidroksibutan-2-il)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 2
[0547]
14
[0548] Odvajanje 33 mg primera 4, prema primeru 5, dodatno daje 8 mg N-(1-hidroksibutan-2-il)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 2.
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 0.91 (t, 3H); 1.47-1.56 (m, 1H); 1.64-1.72 (m, 1H); 2.39 (s, 3H); 3.34-3.49 (m, 1H); 3.51-3.56 (m, 1H); 3.87-3.95 (m+s, 4H); 4.89 (t, 1H); 7.36 (d, 2H); 7.95 (d, 2H); 8.11 (s, 1H); 8.56 (s, 2H); 9.51 (d, 1H).
Hiralna HPLC: Rt = 6.25 min
Instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IC 3 µm 100x4.6 mm; eluent: heksani (0.1 % dietilamin) / (etanol/metanol 50:50) gradijent sa 20-50% (etanol/metanol 50:50), protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD sken: 254 nm
Primer 7
N-(1-Hidroksipropan-2-il)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0549]
[0550] Rastvor 100 mg intermedijara 7, 34.3 mg 2-aminopropan-1-ol i 85 µL trietilamin u 10 mL dihlorometana mešan je 10 minuta u kupatilu sa ledenom vodom. Zatim je reakcija ugašena sa vodom, i smeša je ekstrahovana dihlorometanom. Organska faza je osušena iznad natrijum sulfata filtrirana i uparena do suva. Ostatak je podvrgnut fleš hromatografiji (etil acetat / petrol etar 1:2) da se dobije 40.8 mg N-(1-hidroksipropan-2-il)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid.
<1>H-NMR: (400 MHz, 25°C, Metanol-d4): δ [ppm] = 1.30 (d, 3H); 2.41 (s, 3H); 3.61-3.69 (m, 2H); 3.95 (s, 3H); 4.15-4.23 (m, 1H); 7.33 (d, 2H); 7.85 (d, 2H); 8.13 (s, 1H); 8.46 (s, 1H); 8.60 (s, 1H).
Primer 8
1
N-[(2S)-1-Hidroksipropan-2-il]-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0551]
A: Rastvor 80 mg intermedijara 6, 38 mg (2S)-2-aminopropan-1-ola, 147 mg HATU i 0.135 mL etildiizopropilamina u 5 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakcija ugašena sa vodom, i smeša je ekstrahovana dva puta sa dihlorometanom. Kombinovane organske faze su osušene iznad natrijum sulfata i uparene do suva. Ostatak je podvrgnut fleš hromatografiji (gradijent dihlorormetan / metanol sa do 3% metanol) da se dobije 20 mg N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
B: HPLC-odvajanje 39 mg N-(1-hidroksipropan-2-il)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 7) na hiralnoj koloni (Chiralpak IC 5 µm 250x30 mm, eluent: heksani (0.1 % dietilamin) / (etanol/metanol 50:50) gradijent sa 20-50% (etanol/metanol 50:50), protok 40 mL/min) dalo je 9 mg N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 1.34 (d, 3H); 2.43 (s, 3H); 2.85 (dd, 1H); 3.70 (ddd, 1H); 3.80 (ddd, 1H); 3.98 (s, 3H); 4.26-4.34 (m, 1H); 7.32 (d, 2H); 7.82 (d, 2H); 8.14 (s, 1H); 8.33 (s, 1H); 8.71 (s, 1H); 9.87 (d, 1H).
Hiralna HPLC: Rt = 5.28 min
Instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IC 3 µm 100x4.6 mm; eluent: heksani (0.1 % dietilamin) / (etanol/metanol 50:50) gradijent sa 20-50% (etanol/metanol 50:50), protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD sken: 254 nm
Primer 9
N-[(2R)-1-Hidroksipropan-2-il]-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0552]
1 1
[0553] Odvajanje 39 mg primera 7, prema primeru 8, procedura B, dodatno daje 13 mg N-[(2R)-1-hidroksipropan-2-il]-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 1.34 (d, 3H); 2.43 (s, 3H); 2.85 (dd, 1H); 3.70 (ddd, 1H); 3.80 (ddd, 1H); 3.98 (s, 3H); 4.26-4.34 (m, 1H); 7.32 (d, 2H); 7.82 (d, 2H); 8.14 (s, 1H); 8.33 (s, 1H); 8.71 (s, 1H); 9.87 (d, 1H).
Hiralna HPLC: Rt = 7.07 min
Instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IC 3 µm 100x4.6 mm; eluent: heksani (0.1 % dietilamin) / (etanol/metanol 50:50) gradijent sa 20-50% (etanol/metanol 50:50), protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD sken: 254 nm.
Primer 10
6-(4-Metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0554]
[0555] Rastvor 100 mg intermedijara 6, 83.2 mg 3-amino-1,1,1-trifluoropropan-2-ola, 184 mg HATU i 0.17 mL etildiizopropilamina u 5 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakcija ugašena sa vodom, i smeša je ekstrahovana dva puta sa dihlorometanom.
1 2
Kombinovane organske faze su osušene iznad natrijum sulfata i uparene do suva. Ostatak je podvrgnut fleš hromatografiji (gradijent dihlorometan / metanol sa do 2% metanola) da se dobije 65 mg 6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 2.44 (s, 3H); 3.78 (ddd, 1H); 3.90 (ddd, 1H); 3.99 (s, 3H); 4.18-4.27 (m, 1H); 4.56 (d, 1H); 7.33 (d, 2H); 7.82 (d, 2H); 8.16 (s, 1H); 8.33 (s, 1H); 8.71 (s, 1H); 10.24 (bt, 1H).
Primer 11
(-)-6-(4-Metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 1
[0556]
[0557] HPLC-odvajanje 63 mg 6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 10) na hiralnoj koloni (Chiralpak IA 5 µm 250x30 mm, eluent: metanol (0.1 % dietilamin) / etanol 50:50, protok 30 mL/min) dalo je 29 mg (-)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 1.
<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 2.44 (s, 3H); 3.78 (ddd, 1H); 3.90 (ddd, 1H); 3.99 (s, 3H); 4.18-4.27 (m, 1H); 4.56 (d, 1H); 7.33 (d, 2H); 7.82 (d, 2H); 8.16 (s, 1H); 8.33 (s, 1H); 8.71 (s, 1H); 10.24 (bt, 1H).
Hiralna HPLC: Rt = 2.69 min
Instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IC 3 µm 100x4.6 mm; eluent: metanol (0.1 % dietilamin) / etanol 50:50, protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD sken: 254 nm Optička rotacija: [α]D<20>= -6.7° /- 0.62° (c=1.00, metanol).
1
Primer 12
(+)-6-(4-Metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 2
[0558]
[0559] Odvajanje 63 mg primera 10, prema primeru 11, dodatno daje 29 mg (+)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 2.
<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 2.44 (s, 3H); 3.78 (ddd, 1H); 3.90 (ddd, 1H); 3.99 (s, 3H); 4.18-4.27 (m, 1H); 4.56 (d, 1H); 7.33 (d, 2H); 7.82 (d, 2H); 8.16 (s, 1H); 8.33 (s, 1H); 8.71 (s, 1H); 10.24 (bt, 1H).
Hiralna HPLC: Rt = 3.11 min
Instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IC 3 µm 100x4.6 mm; eluent: metanol (0.1 % dietilamin) / etanol 50:50, protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD sken: 254 nm Optička rotacija: [α]D<20>= 5.6° /- 0.47° (c=1.00, metanol).
Primer 13
N-(3,3-Difluoro-2-hidroksipropil)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0560]
1 4
[0561] Rastvor 100 mg intermedijara 6, 71.6 mg 3-amino-1,1-difluoropropan-2-ola, 184 mg HATU i 0.17 mL etildiizopropilamina u 5 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakcija ugašena sa vodom, i smeša je ekstrahovana dva puta sa dihlorometanom. Kombinovane organske faze su osušene iznad natrijum sulfata i uparene do suva. Ostatak je podvrgnut fleš hromatografiji (gradijent dihlorometan / metanol sa do 2% metanola) da se dobije 55 mg N-(3,3-difluoro-2-hidroksipropil)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 2.43 (s, 3H); 3.67-3.77 (m, 1H); 3.84 (ddd, 1H); 3.95-4.09 (m+s, 4H); 4.11 (d, 1H); 5.79 (dt, 1H); 7.32 (d, 2H); 7.82 (d, 2H); 8.14 (s, 1H); 8.33 (s, 1H); 8.70 (s, 1H); 10.16 (bt, 1H).
Primer 14
N-(3,3-Difluoro-2-hidroksipropil)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 1
[0562]
[0563] HPLC-odvajanje 53 mg N-(3,3-difluoro-2-hidroksipropil)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 13) na hiralnoj koloni
1
(Chiralpak IA 5 µm 250x30 mm, eluent: metanol (0.1 % dietilamin) / etanol 50:50, protok 30 mL/min) dalo je 24 mg N-(3,3-difluoro-2-hidroksipropil)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 1.
<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 2.43 (s, 3H); 3.67-3.77 (m, 1H); 3.84 (ddd, 1H); 3.95-4.09 (m+s, 4H); 4.11 (d, 1H); 5.79 (dt, 1H); 7.32 (d, 2H); 7.82 (d, 2H); 8.14 (s, 1H); 8.33 (s, 1H); 8.70 (s, 1H); 10.16 (bt, 1H).
Hiralna HPLC: Rt = 3.92 min
Instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IA 3 µm 100x4.6 mm; eluent: metanol (0.1 % dietilamin) / etanol 50:50, protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD sken: 254 nm
Primer 15
N-(3,3-Difluoro-2-hidroksipropil)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 2
[0564]
[0565] Odvajanje 53 mg primera 13, prema primeru 14, dodatno daje 24 mg N-(3,3-difluoro-2-hidroksipropil)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 2.
<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 2.43 (s, 3H); 3.67-3.77 (m, 1H); 3.84 (ddd, 1H); 3.95-4.09 (m+s, 4H); 4.11 (d, 1H); 5.79 (dt, 1H); 7.32 (d, 2H); 7.82 (d, 2H); 8.14 (s, 1H); 8.33 (s, 1H); 8.70 (s, 1H); 10.16 (bt, 1H).
Hiralna HPLC: Rt = 4.78 min
Instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IA 3 µm 100x4.6 mm; eluent: metanol (0.1 % dietilamin) / etanol 50:50, protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD sken: 254 nm
Primer 16
1
6-(4-Hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0566]
[0567] Rastvor 80 mg intermedijara 11, 49.9 mg (2S)-2-amino-3-metilbutan-1-ola, 138 mg HATU i 0.13 mL etildiizopropilamina u 5 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakcija ugašena sa vodom, i smeša je ekstrahovana dva puta sa dihlorometanom. Kombinovane organske faze su osušene iznad natrijum sulfata i uparene do suva. Ostatak je podvrgnut RP-HPLC ((kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: acetonitril / voda (0.1 vol. % mravlje kiseline)-gradijent)) da se dobije 45 mg 6-(4-hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 1.05 (d, 3H), 1.06 (d, 3H), 2.01 - 2.14 (m, 1H), 2.79 (t, 1H), 3.75 - 3.82 (m, 1H), 3.83 - 3.89 (m, 1H), 3.96 - 4.06 (m, 4H), 7.46 - 7.51 (m, 2H), 7.85-7.90 (m, 2H), 8.11 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 8.69 (s, 1H), 9.93 (br d, 1H).
Primer 17
6-(4-Hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0568]
1
[0569] Rastvor 80 mg intermedijara 11, 29.1 mg (2S)-2-aminopropan-1-ola, 110 mg HATU i 0.1 mL etildiizopropilamina u 5 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakcija ugašena sa vodom, i smeša je ekstrahovana dva puta sa dihlorometanom. Kombinovane organske faze su osušene iznad natrijum sulfata i uparene do suva. Ostatak je podvrgnut RP-HPLC ((kolona: X-Bridge C18 5µm 100x30 mm, mobilna faza: acetonitril / voda (0.1 vol. % mravlje kiseline)-gradijent)) da se dobije 50 mg 6-(4-hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida
<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 1.34 (d, 3H); 2.73-2.82 (m, 1H); 3.66-3.73 (m, 1H); 3.77-3.84 (m, 1H); 3.98 (s, 3H); 4.26-4.36 (m, 1H); 7.49 (d, 2H); 7.87 (d, 2H); 8.12 (s, 1H); 8.33 (s, 1H); 8.69 (s, 1H); 9.82 (bd, 1H).
Primer 18
6-(4-Hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0570]
[0571] Rastvor 130 mg intermedijara 11, 101 mg 3-amino-1,1,1-trifluoropropan-2-ola, 224 mg HATU i 0.21 mL etildiizopropilamina u 10 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakcija ugašena sa vodom, i smeša je ekstrahovana dva puta sa dihlorometanom. Kombinovane organske faze su osušene iznad natrijum sulfata i uparene do suva. Ostatak je podvrgnut fleš hromatografiji (gradijent dihlorometan / metanol sa do 2% metanola) da se dobije 160 mg 6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 3.70-3.79 (m, 1H); 3.93 (ddd, 1H); 3.98 (s, 3H); 4.21-4.28 (m, 1H); 4.64 (br s, 1H); 7.49 (d, 2H); 7.85 (d, 2H); 8.11 (s, 1H); 8.31 (s, 1H); 8.66 (s, 1H); 10.15 (bt, 1H).
1
Primer 19
(-)-6-(4-Hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0572]
[0573] HPLC-odvajanje 158 mg 6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 18) na hiralnoj koloni (Chiralpak IA 5 µm 250x30 mm, eluent: CO2/ 2-propanol 77:23, protok 100 mL/min, p = 150 bar, T = 40°C) dalo je 50 mg (-)-6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 3.70-3.79 (m, 1H); 3.93 (ddd, 1H); 3.98 (s, 3H); 4.21-4.28 (m, 1H); 4.64 (br s, 1H); 7.49 (d, 2H); 7.85 (d, 2H); 8.11 (s, 1H); 8.31 (s, 1H); 8.66 (s, 1H); 10.15 (bt, 1H).
Hiralna HPLC: Rt = 2.76 min
Instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IA 3 µm 100x4.6 mm; eluent: CO2/ 2-propanol 77:23, protok 4 mL/min, p = 100 bar, T = 37.5°C; DAD sken: 254 nm
Optička rotacija: [α]D<20>= -5.2° /- 0.35° (c=1.00, metanol).
Primer 20
(+)-6-(4-Hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0574]
1
[0575] Odvajanje 158 mg primera 18, prema primeru 19, dodatno daje 55 mg (+)-6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 3.70-3.79 (m, 1H); 3.93 (ddd, 1H); 3.98 (s, 3H); 4.21-4.28 (m, 1H); 4.64 (br s, 1H); 7.49 (d, 2H); 7.85 (d, 2H); 8.11 (s, 1H); 8.31 (s, 1H); 8.66 (s, 1H); 10.15 (bt, 1H).
Hiralna HPLC: Rt = 3.75 min
Instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IA 3 µm 100x4.6 mm; eluent: CO2/ 2-propanol 77:23, protok 4 mL/min, p = 100 bar, T = 37.5°C; DAD sken: 254 nm
Optička rotacija:
[α]D<20>= -6.9° /- 0.23° (c=1.00, metanol).
Primer 21
6-(4-Hlorofenil)-N-(3,3-difluoro-2-hidroksipropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0576]
1
[0577] Rastvor 110 mg intermedijara 11, 59.1 mg 3-amino-1,1-difluoropropan-2-ola, 152 mg HATU i 0.14 mL etildiizopropilamina u 5 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakcija ugašena sa vodom, i smeša je ekstrahovana dva puta sa dihlorometanom. Kombinovane organske faze su osušene iznad natrijum sulfata i uparene do suva. Ostatak je podvrgnut RP-HPLC ((kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: acetonitril / voda (0.1 vol. % mravlje kiseline)-gradijent)) da se dobije 65 mg 6-(4-hlorofenil)-N-(3,3-difluoro-2-hidroksipropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 3.68-3.77 (m, 1H); 3.85 (ddd, 1H); 3.96-4.08 (m+s, 5H); 5.79 (dt, 1H); 7.49 (d, 2H); 7.86 (d, 2H); 8.12 (s, 1H); 8.32 (s, 1H); 8.67 (s, 1H); 10.10 (bt, 1H).
Primer 22
(-)-6-(4-Hlorofenil)-N-(3,3-difluoro-2-hidroksipropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0578]
[0579] HPLC-odvajanje 63 mg 6-(4-hlorofenil)-N-(3,3-difluoro-2-hidroksipropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 21) na hiralnoj koloni (Chiralpak IA 5 µm 250x30 mm, eluent: CO2/ 2-propanol 71:29, protok 100 mL/min, p = 150 bar, T = 40°C) dalo je 15 mg (-)-6-(4-hlorofenil)-N-(3,3-difluoro-2-hidroksipropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 3.68-3.77 (m, 1H); 3.85 (ddd, 1H); 3.96-4.08 (m+s, 5H); 5.79 (dt, 1H); 7.49 (d, 2H); 7.86 (d, 2H); 8.12 (s, 1H); 8.32 (s, 1H); 8.67 (s, 1H); 10.10 (bt, 1H). Hiralna HPLC: Rt = 2.50 min
Instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IA 3 µm 100x4.6 mm; eluent: CO2/ 2-propanol 71:29, protok 4 mL/min, p = 100 bar, T = 37.5°C; DAD sken: 254 nm
Optička rotacija: [α]D<20>= -6.6° /- 0.41° (c=1.00, metanol).
1 1
Primer 23
(+)-6-(4-Hlorofenil)-N-(3,3-difluoro-2-hidroksipropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0580]
[0581] Odvajanje 63 mg primera 21, prema primeru 22, dodatno daje 20 mg (+)-6-(4-hlorofenil)-N-(3,3-difluoro-2-hidroksipropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 3.68-3.77 (m, 1H); 3.85 (ddd, 1H); 3.96-4.08 (m+s, 5H); 5.79 (dt, 1H); 7.49 (d, 2H); 7.86 (d, 2H); 8.12 (s, 1H); 8.32 (s, 1H); 8.67 (s, 1H); 10.10 (bt, 1H). Hiralna HPLC: Rt = 4.12 min
Instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IA 3 µm 100x4.6 mm; eluent: CO2/ 2-propanol 71:29, protok 4 mL/min, p = 100 bar, T = 37.5°C; DAD sken: 254 nm
Optička rotacija: [α]D<20>= 8.4° /- 0.32° (c=1.00, metanol).
Primer 24
6-(4-Hlorofenil)-N-(2-hidroksi-3-metoksipropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0582]
1 2
[0583] Rastvor 110 mg intermedijara 11, 55.9 mg 1-amino-3-metoksipropan-2-ola, 152 mg HATU i 0.14 mL etildiizopropilamina u 5 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakcija ugašena sa vodom, i smeša je ekstrahovana dva puta sa dihlorometanom. Kombinovane organske faze su osušene iznad natrijum sulfata i uparene do suva. Ostatak je podvrgnut RP-HPLC ((kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: acetonitril / voda (0.1 vol. % mravlje kiseline)-gradijent)) da se dobije 40 mg 6-(4-hlorofenil)-N-(2-hidroksi-3-metoksipropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 3.06 (d, 1H); 3.40-3.46 (m+s, 4H); 3.47-3.60 (m, 2H); 3.74 (ddd, 1H); 3.98 (s, 3H); 4.01-4.08 (m, 1H); 7.49 (d, 2H); 7.88 (d, 2H); 8.13 (s, 1H); 8.37 (s, 1H); 8.69 (s, 1H); 9.97 (bt, 1H).
Primer 25
(-)-6-(4-Hlorofenil)-N-(2-hidroksi-3-metoksipropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0584]
[0585] HPLC-odvajanje 38 mg 6-(4-hlorofenil)-N-(2-hidroksi-3-metoksipropil)-2-(1-metil-1H-
1
pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 24) na hiralnoj koloni (Chiralpak AD-H 5 µm 250x30 mm, eluent: acetonitril (0.1vol% dietilamin) / etanol 90:10, protok 50 mL/min) dalo je 18 mg (-)-6-(4-hlorofenil)-N-(2-hidroksi-3-metoksipropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 3.06 (d, 1H); 3.40-3.46 (m+s, 4H); 3.47-3.60 (m, 2H); 3.74 (ddd, 1H); 3.98 (s, 3H); 4.01-4.08 (m, 1H); 7.49 (d, 2H); 7.88 (d, 2H); 8.13 (s, 1H); 8.37 (s, 1H); 8.69 (s, 1H); 9.97 (bt, 1H).
Hiralna HPLC: Rt = 3.83 min
Instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak AD-H 3 µm 100x4.6 mm; eluent: acetonitril (0.1vol% dietilamin) / etanol 90:10" protok 1.4 mL/min, DAD sken: 254 nm
Optička rotacija: [α]D<20>= -5.2° /- 0.44° (c=1.00, metanol).
Primer 26
(+)-6-(4-Hlorofenil)-N-(2-hidroksi-3-metoksipropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0586]
[0587] Odvajanje 38 mg primera 24, prema primeru 25, dodatno daje 15 mg (+)-6-(4-hlorofenil)-N-(2-hidroksi-3-metoksipropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 3.06 (d, 1H); 3.40-3.46 (m+s, 4H); 3.47-3.60 (m, 2H); 3.74 (ddd, 1H); 3.98 (s, 3H); 4.01-4.08 (m, 1H); 7.49 (d, 2H); 7.88 (d, 2H); 8.13 (s, 1H); 8.37 (s, 1H); 8.69 (s, 1H); 9.97 (bt, 1H).
Hiralna HPLC: Rt = 4.88 min
Instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak AD-H 3 µm 100x4.6 mm; eluent: acetonitril (0.1vol% dietilamin) / etanol 90:10, protok 1.4 mL/min, DAD sken: 254 nm
1 4
Optička rotacija: [α]D<20>= 6.2° /- 0.31° (c=1.00, metanol).
Primer 27
6-(4-Hlorofenil)-N-[(2S)-2,3-dihidroksipropil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0588]
[0589] 6-(4-Hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.15 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.1 mL). (2S)-3-Aminopropan-1,2-diol (27.5 mg, 0.30 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.118 mL, 0.68 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 132 µL, 50% u DMF, 227 µmol) su sukcesivno dodavani. Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 21.5 mg (35%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.20 - 3.30 (m, 1H), 3.30 - 3.36 (m, 1H i signal vode), 3.38 - 3.44 (m, 1H), 3.58 - 3.67 (m, 2H), 3.93 (s, 3H), 4.70 (t, 1H), 5.03 (d, 1H), 7.58-7.62 (m, 2H), 8.08 - 8.13 (m, 3H), 8.55 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 9.63 (t, 1H).
[α]D<20>= -5.5° (c = 1.00, DMSO).
Primer 28
6-(4-Hlorofenil)-N-[(2R)-2,3-dihidroksipropil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0590]
1
[0591] 6-(4-Hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.15 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.1 mL). Sukcesivno su dodavani (2R)-3-aminopropan-1,2-diol (27.5 mg, 0.30 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.118 mL, 0.68 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 132 µL, 50% u DMF, 227 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 17.5 mg (29%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.21 - 3.30 (m, 1H), 3.30 - 3.36 (m, 1H i signal vode), 3.38 - 3.44 (m, 1H), 3.58 - 3.67 (m, 2H), 3.93 (s, 3H), 4.70 (t, 1H), 5.03 (d, 1H), 7.58-7.62 (m, 2H), 8.08 - 8.13 (m, 3H), 8.55 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 9.63 (t, 1H).
[α]D<20>= 14.3° (c = 1.00, DMSO).
Primer 29
6-(4-Hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksi-3-metoksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0592]
[0593] 6-(4-Hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.15 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.1 mL). Sukcesivno su
1
dodavani (2S)-2-Amino-3-metoksipropan-1-ol (31.8 mg, 0.30 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.118 mL, 0.68 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 132 µL, 50% u DMF, 227 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 33 mg (52%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.30 (s, 3H), 3.44 - 3.61 (m, 4H), 3.93 (s, 3H), 4.10-4.19 (m, 1H), 4.99 (t, 1H), 7.58 - 7.62 (m, 2H), 8.08 - 8.12 (m, 3H), 8.56 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 9.64 (d, 1H).
Primer 30
6-(4-Hlorofenil)-N-[(2R)-1-hidroksi-3-metoksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0594]
[0595] 6-(4-Hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.15 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.1 mL). Sukcesivno su dodavani (2R)-2-amino-3-metoksipropan-1-ol (31.8 mg, 0.30 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.118 mL, 0.68 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 132 µL, 50% u DMF, 227 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 26 mg (41%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.30 (s, 3H), 3.44 - 3.61 (m, 4H), 3.93 (s, 3H), 4.10-4.19 (m, 1H), 4.99 (t, 1H), 7.58 - 7.62 (m, 2H), 8.08 - 8.12 (m, 3H), 8.56 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 9.64 (d, 1H).
1
Primer 31
6-(4-Hlorofenil)-N-(1,3-dihidroksipropan-2-il)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0596]
[0597] 6-(4-Hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.15 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.1 mL). Sukcesivno su dodavani 2-Aminopropan-1,3-diol (27.5 mg, 0.30 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.118 mL, 0.68 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 132 µL, 50% u DMF, 227 µmol. Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 29 mg (48%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.47 - 3.54 (m, 2H), 3.57 - 3.63 (m, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.94 - 4.02 (m, 1H), 4.89 (t, 2H), 7.58 - 7.62 (m, 2H), 8.07 - 8.13 (m, 3H), 8.57 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 9.63 (d, 1H).
Primer 32
6-(4-Hlorofenil)-N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0598]
1
[0599] 6-(4-Hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.15 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.1 mL). Sukcesivno su dodavani 1-amino-2-metilpropan-2-ol (27 mg, 0.30 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.118 mL, 0.68 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 132 µL, 50% u DMF, 227 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 20 mg (33%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.15 (s, 6H), 3.32 - 3.35 (m, 2H i signal vode), 3.93 (s, 3H), 4.70 (s, 1H), 7.58 - 7.62 (m, 2H), 8.07 - 8.13 (m, 3H), 8.56 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 9.65 (t, 1H).
Primer 33
6-(4-Hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-[(2RS)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0600]
[0601] 6-(4-Hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (100 mg, 0.30 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (2.3 mL). Sukcesivno su dodavani (2RS)-2-amino-3,3,3-trifluoropropan-1-ol hidrohlorid (1:1) (100 mg, 0.61 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (342 µL, 1.97 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 265 µL, 50% u DMF, 454 µmol). Ovo je mešano tokom 48 h na sobnoj temperaturi. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 35 mg (26%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.68 - 3.76 (m, 1H), 3.81 - 3.88 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 4.81 - 4.93 (m, 1H), 5.45 - 5.49 (m, 1H), 7.58 - 7.63 (m, 2H), 8.10 - 8.14 (m, 3H), 8.59 (s, 1H),
1
8.65 (s, 1H), 10.12 (d, 1H).
Primer 34
(-)-6-(4-Hlorofenil)-2-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-3-okso-N-[(2S)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0602]
[0603] 6-(4-Hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-[(2RS)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid (27.7 mg) je odvojen sa hiralnom HPLC (kolona: Chiralpak IB 5µ 250x30 mm, mobilna faza: izokratski (82:18) ugljen-dioksida / 2-propanola, 100 mL/min, temperatura 40°C, BPR: 150 bar, UV: 254 nm) da se dobije 14 mg (51%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.68 - 3.76 (m, 1H), 3.81 - 3.88 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 4.81 - 4.93 (m, 1H), 5.47 (br s, 1H), 7.57 - 7.63 (m, 2H), 8.09 - 8.15 (m, 3H), 8.59 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 10.12 (d, 1H).
Hiralna HPLC: Rt = 2.54 min
Instrument: Agilent HPLC 1260: Chiralpak IB 5µ 100x4.6 mm; eluent: ugljen-dioksid / 2-propanol, izokratski: 82:18, protok: 4 mL/min, temperatura: 37.5°C, BPR: 100 bar, UV: 254 nm.
[α]D<20>= -34.5° (c = 1.00, metanol).
Primer 35
(+)-6-(4-Hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0604]
1
[0605] 6-(4-Hlorofenil)-2-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-3-okso-N-[(2RS)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid (27.7 mg) je odvojen sa hiralnom HPLC (kolona: Chiralpak IB 5µ 250x30 mm, mobilna faza: izokratski (82:18) ugljen-dioksida / 2-propanola, 100 mL/min, temperatura 40°C, BPR: 150 bar, UV: 254 nm) da se dobije 14 mg (51%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.68 - 3.76 (m, 1H), 3.84 (dt, 1H), 3.93 (s, 3H), 4.81-4.94 (m, 1H), 5.47 (t, 1H), 7.58 - 7.63 (m, 2H), 8.10 - 8.15 (m, 3H), 8.60 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 10.12 (d, 1H).
Hiralna HPLC: Rt = 3.61 min
Instrument: Agilent HPLC 1260: Chiralpak IB 5µ 100x4.6 mm; eluent: ugljen-dioksid / 2-propanol, izokratski: 82:18, protok: 4 mL/min, temperatura: 37.5°C, BPR: 100 bar, UV: 254 nm.
[α]D<20>= 40.1° (c = 1.00, metanol).
Primer 36
2-(1-Metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0606]
[0607] 2-(1-Metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-
1 1
karboksilna kiselina (50 mg, 0.137 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.5 mL). Sukcesivno su dodavani (2R)-2-amino-3,3,3-trifluoropropan-1-ol hidrohlorid (1:1) (35.5 mg, 0.215 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.108 mL, 0.62 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 121 µL, 50% u DMF, 207 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril, dva puta) da se dobije 10.9 mg (17%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.69 - 3.77 (m, 1H), 3.82 - 3.88 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 4.88 (dt, 1H), 5.48 (s, 1H), 7.90 (d, 2H), 8.15 (s, 1H), 8.32 (d, 2H), 8.61 (s, 1H), 8.71 (s, 1H), 10.10 (d, 1H).
Primer 37
2-(1-Metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0608]
[0609] 2-(1-Metil-1 H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.137 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.5 mL). Sukcesivno su dodavani (2S)-3-amino-1,1,1-trifluoropropan-2-ol (35.5 mg, 0.262 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.108 mL, 0.62 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 121 µL, 50% u DMF, 207 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C18 5µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril, dva puta) da se dobije 12.7 mg (19%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.46 - 3.54 (m, 1H), 3.74 - 3.82 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 4.19 - 4.30 (m, 1H), 6.71 (s, 1H), 7.90 (d, 2H), 8.14 (s, 1H), 8.30 (d, 2H), 8.56 (s, 1H), 8.67 (s,
1 2
1H), 9.72 (t, 1H).
[α]D<20>= -4.1° (c = 1.00, metanol).
Primer 38
(-)-N-[(2R)-1-Hidroksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0610]
[0611] 2-(1-Metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.137 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.5 mL). Sukcesivno su dodavani (2R)-2-aminopropan-1-ol (21 mg, 0.28 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.108 mL, 0.62 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 121 µL, 50% u DMF, 207 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C18 5µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril, dva puta) da se dobije 12.5 mg (21%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.19 (d, 3H), 3.43 - 3.52 (m, 2H), 3.93 (s, 3H), 4.01-4.11 (m, 1H), 4.97 (t, 1H), 7.90 (d, 2H), 8.13 (s, 1H), 8.30 (d, 2H), 8.58 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 9.52 (d, 1H).
[α]D<20>= -14.0° (c = 1.00, metanol).
Primer 39
(+)-N-[(2S)-1-Hidroksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0612]
1
[0613] 2-(1-Metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (45 mg, 0.124 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.5 mL). Sukcesivno su dodavani (2S)-2-aminopropan-1-ol (18.6 mg, 0.25 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.097 mL, 0.56 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 108 µL, 50% u DMF, 185 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C18 5µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril, dva puta) da se dobije 10 mg (19%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.19 (d, 3H), 3.43 - 3.53 (m, 2H), 4.01 - 4.11 (m, 1H), 4.97 (t, 1H), 7.90 (d, 2H), 8.13 (s, 1H), 8.30 (d, 2H), 8.59 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 9.52 (d, 1H). [α]D<20>= 30.0° (c = 1.00, metanol).
Primer 40
6-(4-Hlorofenil)-2-(1-ciklobutil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0614]
[0615] 6-(4-Hlorofenil)-2-(1-ciklobutil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.135 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.5 mL).
1 4
Sukcesivno su dodavani (2S)-3-amino-1,1,1-trifluoropropan-2-ol (35 mg, 0.27 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.106 mL, 0.61 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 118 µL, 50% u DMF, 202 µmol). Ovo je mešano tokom 1 h na sobnoj temperaturi. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C18 5µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril, dva puta) da se dobije 23 mg (35%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.75 - 1.86 (m, 2H), 2.36 - 2.46 (m, 2H), 2.46 - 2.58 (m, 2H i DMSO signal), 3.49 (ddd, 1H), 3.77 (ddd, 1H), 4.19 - 4.24 (m, 1H), 4.91 - 5.01 (m, 1H), 6.69 (s, 1H), 7.58 - 7.63 (m, 2H), 8.08 - 8.13 (m, 2H), 8.18 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 9.73 (t, 1H).
[α]D<20>= -2.7° (c = 1.00, metanol).
Primer 41
6-(4-Hlorofenil)-2-(1-ciklobutil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0616]
[0617] 6-(4-Hlorofenil)-2-(1-ciklobutil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (45 mg, 0.121 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.5 mL). Sukcesivno su dodavani (2R)-2-amino-3,3,3-trifluoropropan-1-ol hidrohlorid (1:1) (40 mg, 0.24 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.137 mL, 0.79 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 106 µL, 50% u DMF, 182 µmol). Ovo je mešano tokom 1 h na sobnoj temperaturi. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C18 5µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril, dva puta) da se dobije 22 mg (38%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.75 - 1.88 (m, 2H), 2.36 - 2.45 (m, 2H), 2.46 - 2.60
1
(m, 2H i DMSO signal), 3.67 - 3.75 (m, 1H), 3.85 (dt, 1H), 4.81 - 5.02 (m, 2H), 5.47 (t, 1H), 7.58 - 7.64 (m, 2H), 8.10 - 8.15 (m, 2H), 8.18 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 10.09 (d, 1H).
[α]D<20>= 36.7° (c = 1.00, metanol).
Primer 42
6-(4-Hlorofenil)-2-(1-ciklobutil-1H-pirazol-4-il)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0618]
[0619] 6-(4-Hlorofenil)-2-(1-ciklobutil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (47 mg, 0.127 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.5 mL). Sukcesivno su dodavani (2S)-2-Aminopropan-1-ol (19 mg, 0.25 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (99.3 µL, 0.57 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 111 µL, 50% u DMF, 190 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom i prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%)) / acetonitril, DAD: 210-400 nm) da se dobije 15.5 mg (29%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.18 (d, 3H), 1.75 - 1.89 (m, 2H), 2.36 - 2.45 (m, 2H), 2.46 - 2.59 (m, 2H i DMSO signal), 3.42 - 3.52 (m, 2H), 4.00 - 4.11 (m, 1H), 4.90 - 5.00 (m, 2H), 7.58 - 7.63 (m, 2H), 8.08 - 8.12 (m, 2H), 8.16 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 9.52 (d, 1H).
[α]D<20>= 20.5° (c = 1.00, metanol).
Primer 43
6-(4-Hlorofenil)-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0620]
1
[0621] Rastvor 150 mg intermedijara 6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 126,6 mg cis-4-aminotetrahidro-3-furanol hidrohlorida (1:1), 344,9 mg HATU, 0.32 mL etildiizopropilamina i 4 mg 4-dimetilaminopiridina u 3.1 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (Instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 85% / B 15% → A 45% / B 55%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 127 mg naslovnog jedinjenja.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.47 (t, 1 H), 3.64 (dd, 1 H), 3.93 (s, 3 H), 3.94 - 3.98 (m, 1 H), 4.01 (dd, 1 H), 4.26 - 4.33 (m, 1 H), 4.34 - 4.44 (m, 1 H), 5.70 (d, 1 H), 7.57 - 7.63 (m, 2 H), 8.06 - 8.11 (m, 2 H), 8.11 (s, 1 H), 8.55 (s, 1 H), 8.61 (s, 1 H), 9.90 (d, 1 H).
Primer 44
6-(4-Hlorofenil)-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 1
[0622]
[0623] HPLC-odvajanje 127 mg 6-(4-hlorofenil)-N-(4-hidroksitetrahidrofuran-3-il)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 43) na hiralnoj koloni (instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000, kolona:
1
Chiralpak IE 5µ 250x30 mm; eluent A: tert.-butil metil etar; eluent B: metanol; izokratski: 50%A+50%B; protok 50.0 mL/min; UV 280 nm) dalo je 48 mg naslovnog jedinjenja.
Hiralna HPLC: Rt = 2.46 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IE 3µ 100x4,6 mm; eluent A: tert.-butil metil etar 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: metanol; izokratski: 50%A+50%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 280 nm)
Primer 45
6-(4-Hlorofenil)-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 2
[0624]
[0625] Odvajanje 127 mg 6-(4-hlorofenil)-N-(4-hidroksitetrahidrofuran-3-il)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 43), prema primeru 44, dodatno daje 46 mg naslovnog jedinjenja.
Hiralna HPLC: Rt = 2.02 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IE 3µ 100x4,6 mm; eluent A: tert.-butil metil etar 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: metanol; izokratski: 50%A+50%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 280 nm).
Primer 46
N-[(1S,2R)-2-Hidroksicikloheksil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0626]
1
[0627] Rastvor 75 mg intermedijara 2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 63 mg (1R,2S)-2-aminocikloheksanol hidrohlorida (1:1), 150 mg HATU, 0.14 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 1.5 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (Instrument: Waters Autopurification MS SingleQuad; Kolona: Waters XBrigde C185µ 100x30 mm; eluent A: voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%), eluent B: acetonitril; gradijent: 0-5.5 min 5-100% B; protok 70 mL/min; temperatura: 25°C; DAD sken: 210-400 nm) da se dobije 42 mg N-[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.27 - 1.40 (m, 2 H), 1.49 - 1.76 (m, 6 H), 3.76 - 3.84 (m, 1 H), 3.93 (m, 4 H), 4.90 (d, 1 H), 7.47 - 7.58 (m, 2 H), 8.12 (d, 1 H), 8.17 - 8.22 (m, 2 H), 8.56 (s, 1 H), 8.61 (s, 1 H), 9.72 (d, 1 H).
Primer 47
2-(1-Metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0628]
1
[0629] Rastvor 75 mg intermedijara 2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 65.3 mg (2R)-2-amino-3,3,3-trifluoropropan-1-ol hidrohlorida (1:1), 150 mg HATU, 0.14 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 1.5 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (Instrument: Waters Autopurification MS SingleQuad; Kolona: Waters XBrigde C185µ 100x30 mm; eluent A: voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%), eluent B: acetonitril; gradijent: 0-5.5 min 5-100% B; protok 70 mL/min; temperatura: 25°C; DAD sken: 210-400 nm) da se dobije 56 mg 2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.65 - 3.77 (m, 1 H), 3.85 (m, 1 H), 3.93 (s, 3 H), 4.81 - 4.96 (m, 1 H), 5.47 (t, 1 H), 7.36 - 7.54 (m, 2 H), 8.13 (d, 1 H), 8.17 - 8.31 (m, 2 H), 8.60 (s, 1 H), 8.66 (s, 1 H), 10.12 (d, 1 H).
Primer 48
6-(4-Hlorofenil)-N-[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0630]
[0631] Rastvor 75 mg intermedijara 6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 44 mg (1R,2S)-2-aminocikloheksanol hidrohlorida (1:1), 105 mg HATU, 0.14 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 1 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (Instrument: Waters Autopurification MS SingleQuad; Kolona: Waters XBrigde C185µ 100x30 mm; eluent A: voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%), eluent B: acetonitril; gradijent: 0-5.5 min 5-100% B; protok 70 mL/min; temperatura: 25°C; DAD sken: 210-400 nm) da se dobije 43 mg naslovnog jedinjenja.
1
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.28 - 1.41 (m, 2 H), 1.49 - 1.76 (m, 6 H), 3.80 (br s, 1 H), 3.93 (s, 4 H), 4.90 (br d, 1 H), 7.57 - 7.63 (m, 2 H), 8.06 - 8.10 (m, 2 H), 8.11 (s, 1 H), 8.55 (s, 1 H), 8.59 (s, 1 H), 9.72 (d, 1 H).
Primer 49
6-(4-Hlorofenil)-N-[(1S,2S)-2-hidroksiciklopentil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0632]
[0633] Rastvor 128 mg intermedijara 6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline (46%), 50 mg (1S,2S)-2-aminociklopentanol hidrohlorida (1:1), 135 mg HATU, 0.13 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 1 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 3 mg 6-(4-hlorofenil)-N-[(1S,2S)-2-hidroksiciklopentil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.38 - 1.58 (m, 2 H), 1.60 - 1.79 (m, 2 H), 1.80 -1.89 (m, 1 H), 2.03 - 2.18 (m, 1 H), 3.93 (s, 3 H), 3.94 - 3.99 (m, 1 H), 3.99 - 4.07 (m, 1 H), 4.97 (d, 1 H), 7.55 - 7.65 (m, 2 H), 8.07 - 8.14 (m, 3 H), 8.52 - 8.60 (m, 2 H), 9.44 (d, 1 H).
Primer 50
6-(4-Hlorofenil)-N-[(1S,2R)-2-hidroksiciklopentil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0634]
1 1
[0635] Rastvor 75 mg intermedijara 6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline (61%), 38.5 mg (1R,2S)-2-aminociklopentanol hidrohlorida (1:1), 105 mg HATU, 0.1 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 1 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Waters Autopurification MS SingleQuad; Kolona: Waters XBrigde C18 5µ 100x30 mm; eluent A: voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%), eluent B: acetonitril; gradijent: 0-5.5 min 5-100% B; protok 70 mL/min; temperatura: 25°C; DAD sken: 210-400 nm) da se dobije 16 mg 6-(4-hlorofenil)-N-[(1S,2R)-2-hidroksiciklopentil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.50 - 1.67 (m, 3 H), 1.71 - 1.89 (m, 2 H), 1.92 - 2.04 (m, 1 H), 3.93 (s, 3 H), 4.02 - 4.15 (m, 2 H), 5.05 (br s, 1 H), 7.56 - 7.64 (m, 2 H), 8.07 - 8.13 (m, 3 H), 8.55 - 8.58 (m, 1 H), 8.60 (s, 1 H), 9.77 (d, 1 H).
Primer 51
6-(4-Hlorofenil)-N-[(trans)-2-hidroksiciklopentil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0636]
[0637] Rastvor 65 mg intermedijara 6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 56 mg (trans)-2-aminociklopentanol hidrohlorida (1:1),
1 2
149.5 mg HATU, 0.14 mL etildiizopropilamina i 1.2 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Waters Autopurification MS SingleQuad; Kolona: Waters XBrigde C18 5µ 100x30 mm; eluent A: voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%), eluent B: acetonitril; gradijent: 0-5.5 min 5-100% B; protok 70 mL/min; temperatura: 25°C; DAD sken: 210-400 nm) da se dobije 56 mg 6-(4-hlorofenil)-N-[(trans)-2-hidroksiciklopentil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.41 - 1.57 (m, 2 H), 1.61 - 1.78 (m, 2 H), 1.80 - 1.91 (m, 1 H), 2.04 - 2.16 (m, 1 H), 3.93 (s, 3 H), 3.94 - 3.99 (m, 1 H), 4.00 - 4.08 (m, 1 H), 4.97 (d, 1 H), 7.56 - 7.64 (m, 2 H), 8.08 - 8.13 (m, 3 H), 8.53 - 8.58 (m, 2 H), 9.44 (d, 1 H).
Primer 52
6-[4-(Difluorometil)fenil]-N-[(trans)-2-hidroksiciklopentil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0638]
[0639] Rastvor 47 mg intermedijara 6-[4-(difluorometil)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 37.4 mg (trans)-2-aminociklopentanol hidrohlorida (1:1), 103 mg HATU, 0.1 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 1 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 41 mg 6-[4-(difluorometil)fenil]-N-[(trans)-2-hidroksiciklopentil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.42 - 1.57 (m, 2 H), 1.61 - 1.80 (m, 2 H), 1.81 - 1.92
1
(m, 1 H), 2.05 - 2.18 (m, 1 H), 3.93 (s, 3 H), 3.94 - 3.99 (m, 1 H), 4.00 - 4.08 (m, 1 H), 4.97 (d, 1 H), 7.14 (t, 1 H), 7.74 (d, 2 H), 8.13 (s, 1 H), 8.22 (d, 2 H), 8.57 (s, 1 H), 8.60 (s, 1 H), 9.44 (d, 1 H).
Primer 53
N-[(2S)-1-Hidroksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0640]
[0641] Rastvor 75 mg intermedijara 2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 65.3 mg (S)-(+)-2-amino-1-propanola, 150 mg HATU, 0.1 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 1.5 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (Instrument: Waters Autopurification MS SingleQuad; Kolona: Waters XBrigde C18 5µ 100x30 mm; eluent A: voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%), eluent B: acetonitril; gradijent: 0-5.5 min 5-100% B; protok 70 mL/min; temperatura: 25°C; DAD sken: 210-400 nm) da se dobije 53 mg N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.19 (d, 3 H), 3.42 - 3.51 (m, 2 H), 3.93 (s, 3 H), 4.00 - 4.13 (m, 1 H), 4.96 (t, 1 H), 7.53 (d, 2 H), 8.12 (s, 1 H), 8.16 - 8.24 (m, 2 H), 8.57 (s, 1 H), 8.60 (s, 1 H), 9.53 (d, 1 H).
Primer 54
6-[6-(Difluorometil)piridin-3-il]-N-[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0642]
1 4
[0643] Rastvor 55 mg intermedijara 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 50.5 mg (1R,2S)-2-aminocikloheksanol hidrohlorida (1:1), 120 mg HATU, 0.11 mL etildiizopropilamina i 1.5 mg 4-dimetilaminopiridina u 1 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (Instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 85% / B 15% → A 45% / B 55%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 39 mg 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-N-[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.35 (br d, 2 H), 1.51 - 1.75 (m, 6 H), 3.81 (br s, 1 H), 3.93 (m, 4 H), 4.92 (d, 1 H), 7.07 (t, 1 H), 7.85 (d, 1 H), 8.17 (s, 1 H), 8.59 (s, 1 H), 8.66 (dd, 1 H), 8.70 (s, 1 H), 9.36 (d, 1 H), 9.70 (d, 1 H).
Primer 55
N-[(cis)-4-Hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0644]
1
[0645] Rastvor 153 mg intermedijara 2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 112,3 mg cis-4-aminotetrahidro-3-furanol hidrohlorida (1:1), 306 mg HATU, 0.28 mL etildiizopropilamina i 4 mg 4-dimetilaminopiridina u 3 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (Instrument: Waters Autopurification MS SingleQuad; Kolona: Waters XBrigde C185µ 100x30 mm; eluent A: voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%), eluent B: acetonitril; gradijent: 0-5.5 min 5-100% B; protok 70 mL/min; temperatura: 25°C; DAD sken: 210-400 nm) da se dobije 120 mg N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.48 (t, 1 H), 3.65 (dd, 1 H), 3.93 (s, 3 H), 3.94 - 3.98 (m, 1 H), 4.01 (t, 1 H), 4.26 - 4.33 (m, 1 H), 4.34 - 4.44 (m, 1 H), 5.70 (d, 1 H), 7.53 (d, 2 H), 8.12 (s, 1 H), 8.17 - 8.23 (m, 2 H), 8.56 (s, 1 H), 8.63 (s, 1 H), 9.90 (d, 1 H).
Primer 56
N-[(cis)-4-Hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 1
[0646]
[0647] HPLC-odvajanje 115 mg rac-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 55) na hiralnoj koloni (instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000, kolona: Chiralpak IE 5µ 250x30 mm; eluent A: tert.-butil metil etar; eluent B: metanol; izokratski: 50%A+50%B; protok 50.0 mL/min; UV 280 nm) dalo je 42 mg N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 1.
Hiralna HPLC: Rt = 1.76 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IE 3µ 100x4,6
1
mm; eluent A: tert.-butil metil etar 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: metanol; izokratski: 50%A+50%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 280 nm)
Primer 57
N-[(cis)-4-Hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 2
[0648]
[0649] HPLC-odvajanje 115 mg N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 55) na hiralnoj koloni (instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000, kolona: Chiralpak IE 5µ 250x30 mm; eluent A: tert.-butil metil etar; eluent B: metanol; izokratski: 50%A+50%B; protok 50.0 mL/min; UV 280 nm) dalo je 42 mg N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 2.
Hiralna HPLC: Rt = 2.19 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IE 3µ 100x4,6 mm; eluent A: tert.-butil metil etar 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: metanol; izokratski: 50%A+50%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 280 nm).
Primer 58
6-[4-(Difluorometil)fenil]-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0650]
1
[0651] Rastvor 47 mg intermedijara 6-[4-(difluorometil)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 20.4 mg (2S)-2-aminopropan-1-ol, 103 mg HATU, 0.1 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 1 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Dodato je još 50 mg HATU, 0.05 mL etildiizopropilamina, 1 mg 4-dimetilaminopiridina i 10 mg (2S)-2-aminopropan-1-ola praćeno sa mešanjem na 50°C tokom 3 h. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (Instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%), eluent B: acetonitril; gradijent: A 85% / B 15% → A 45% / B 55%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 41 mg 6-[4-(difluorometil)fenil]-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.19 (d, 3 H), 3.42 - 3.52 (m, 2 H), 3.93 (s, 3 H), 3.99 - 4.12 (m, 1 H), 4.96 (t, 1 H), 7.14 (t, 1 H), 7.74 (d, 2 H), 8.13 (s, 1 H), 8.22 (d, 2 H), 8.58 (s, 1 H), 8.63 (s, 1 H), 9.53 (d, 1 H).
Primer 59
N-(2-Hidroksi-2-metilpropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0652]
1
[0653] Rastvor 75 mg intermedijara 2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 51 mg 1-amino-2-metilpropan-2-ol hidrohlorida (1:1), 150 mg HATU, 0.14 mL etildiizopropilamina i 1.2 mg 4-dimetilaminopiridina u 1.5 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (Instrument: Waters Autopurification MS SingleQuad; Kolona: Waters XBrigde C185µ 100x30 mm; eluent A: voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%), eluent B: acetonitril; gradijent: 0-5.5 min 5-100% B; protok 70 mL/min; temperatura: 25°C; DAD sken: 210-400 nm) da se dobije 56 mg N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.15 (s, 6 H), 3.33 (d, 2 H), 3.93 (s, 3 H), 4.70 (s, 1 H), 7.48 - 7.55 (m, 2 H), 8.12 (d, 1 H), 8.16 - 8.23 (m, 2 H), 8.56 (s, 1 H), 8.61 (s, 1 H), 9.65 (t, 1 H).
Primer 60
6-[4-(Difluorometil)fenil]-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0654]
[0655] Rastvor 47 mg intermedijara 6-[4-(difluorometil)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 38 mg cis-4-aminotetrahidro-3-furanol hidrohlorida (1:1), 103 mg HATU, 0.1 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 1 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (Instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 85% / B 15% → A 45% / B 55%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 38 mg 6-[4-(difluorometil)fenil]-
1
N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.48 (t, 1 H), 3.65 (dd, 1 H), 3.94 (s, 3 H), 3.94 -3.98 (m, 1 H), 4.02 (t, 1 H), 4.27 - 4.33 (m, 1 H), 4.34 - 4.43 (m, 1 H), 5.71 (d, 1 H), 7.13 (t, 1 H), 7.74 (d, 2 H), 8.13 (s, 1 H), 8.21 (d, 2 H), 8.56 (s, 1 H), 8.65 (s, 1 H), 9.90 (d, 1 H).
Primer 61
1,5-Anhidro-2-({[6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-il]karbonil}amino)-2,4-dideoksi-D-eritro-pentitol
[0656]
[0657] Rastvor 95 mg intermedijara 6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 56 mg (3S,4R)-3-aminooksan-4-ol hidrohlorida (1:1), 133.3 mg HATU, 0.12 mL etildiizopropilamina i 1.6 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Waters Autopurification MS SingleQuad; Kolona: Waters XBrigde C18 5µ 100x30 mm; eluent A: voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%), eluent B: acetonitril; gradijent: 0-5.5 min 5-100% B; protok 70 mL/min; temperatura: 25°C; DAD sken: 210-400 nm) da se dobije 30 mg 1,5-anhidro-2-({[6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-il]karbonil}amino)-2,4-dideoksi-D-eritro-pentitola.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.60 - 1.71 (m, 1 H), 1.73 - 1.85 (m, 1 H), 3.48 - 3.60 (m, 3 H), 3.68 - 3.77 (m, 1 H), 3.93 (s, 3 H), 3.94 - 3.98 (m, 1 H), 4.05 - 4.13 (m, 1 H), 5.24 (d, 1 H), 7.56 - 7.63 (m, 2 H), 8.07 - 8.13 (m, 3 H), 8.55 (s, 1 H), 8.60 (s, 1 H), 9.76 (d, 1 H).
Primer 62
6-[4-(Difluorometil)fenil]-N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
1
[0659] Rastvor 47 mg intermedijara 6-[4-(difluorometil)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 24 mg 1-amino-2-metil propan-2-ola, 103 mg HATU, 0.1 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 1 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (Instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%), eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 27 mg 6-[4-(difluorometil)fenil]-N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, dihlorometan-d2) δ [ppm] = 1.13 (s, 6H), 3.91 (s, 3H), 4.68 (s, 1H), 7.11 (t, 1H), 7.71 (d, 2H), 8.11 (s, 1H), 8.19 (d, 2H), 8.54 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 9.62 (t, 1H).
Primer 63
N-[(trans)-4-Hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0660]
[0661] Rastvor 122 mg intermedijara 2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-
1 1
(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 89.6 mg trans-4-aminotetrahidro-3-furanol hidrohlorida (1:1), 244 mg HATU, 0.22 mL etildiizopropilamina i 3 mg 4-dimetilaminopiridina u 3 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (Instrument: Waters Autopurification MS SingleQuad; Kolona: Waters XBrigde C185µ 100x30 mm; eluent A: voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%), eluent B: acetonitril; gradijent: 0-5.5 min 5-100% B; protok 70 mL/min; temperatura: 25°C; DAD sken: 210-400 nm) da se dobije 41 mg N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.56 (dd, 1 H), 3.68 (dd, 1 H), 3.90 - 3.95 (m, 4 H), 3.99 (dd, 1 H), 4.15 - 4.22 (m, 1 H), 4.23 - 4.29 (m, 1 H), 5.51 (d, 1 H), 7.53 (d, 2 H), 8.12 (s, 1 H), 8.17 - 8.23 (m, 2 H), 8.56 - 8.59 (m, 2 H), 9.56 (d, 1 H).
Primer 64
N-[(trans)-4-Hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 1
[0662]
[0663] HPLC-odvajanje 39 mg N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 63) na hiralnoj koloni (instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000, kolona: Chiralpak IE 5µ 250x30 mm; eluent A: tert.-butil metil etar; eluent B: metanol; izokratski: 50%A+50%B; protok 50.0 mL/min; UV 280 nm) dalo je 16 mg N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil] -2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 1.
Hiralna HPLC: Rt = 1.91 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IE 3µ 100x4,6 mm; eluent A: tert.-butil metil etar 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: metanol; izokratski:
1 2
50%A+50%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 280 nm)
Primer 65
N-[(trans)-4-Hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 2
[0664]
[0665] Odvajanje 38 mg N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 63), prema primeru 64, dodatno daje 15 mg N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 2.
Hiralna HPLC: Rt = 2.33 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IE 3µ 100x4,6 mm; eluent A: tert.-butil metil etar 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: metanol; izokratski: 50%A+50%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 280 nm).
Primer 66
6-[6-(Difluorometil)piridin-3-il]-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0666]
1
[0667] Rastvor 55 mg intermedijara 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 23.8 mg (S)-(+)-2-amino-1-propanola, 120 mg HATU, 0.11 mL etildiizopropilamina i 1.5 mg 4-dimetilaminopiridina u 1 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (Instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%), eluent B: acetonitril; gradijent: A 90% / B 10% → A 50% / B 50%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 22 mg 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.19 (d, 3 H), 3.43 - 3.51 (m, 2 H i signal vode), 3.93 (s, 3 H), 4.00 - 4.11 (m, 1 H), 5.00 (t, 1 H), 7.06 (t, 1 H), 7.85 (d, 1 H), 8.17 (s, 1 H), 8.60 (s, 1 H), 8.66 (dd, 1 H), 8.69 (s, 1 H), 9.35 (d, 1 H), 9.50 (d, 1 H).
Primer 67
N-(2-Hidroksi-2-metilpropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0668]
[0669] 2-(1-Metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-
1 4
karboksilna kiselina (50 mg, 0.137 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.5 mL). Sukcesivno su dodavani 1-amino-2-metilpropan-2-ol (24.5 mg, 0.28 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.108 mL, 0.62 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 121 µL, 50% u DMF, 207 µmol). Posle mešanja tokom 5.5 h na sobnoj temperaturi sukcesivno su dodavani 1-amino-2-metilpropan-2-ol (12.5 mg, 0.14 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (72 µL, 0.41 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 80 µL, 50% u DMF, 137 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C18 5µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril, dva puta) da se dobije 8 mg (13%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.15 (s, 6H), 3.31 - 3.36 (m, 2H i signal vode), 3.94 (s, 3H), 4.71 (s, 1H), 7.89 (d, 2H), 8.14 (s, 1H), 8.30 (d, 2H), 8.58 (s, 1H), 8.66 (s, 1H), 9.63 (t, 1H).
Primer 68
6-(4-Hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0670]
[0671] 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (70 mg, 0.21 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.6 mL). Sukcesivno su dodavani (2S)-2-aminopropan-1-ol (32.1 mg, 0.43 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.167 mL, 0.96 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 187 µL, 50% u DMF, 320 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 31 mg (38%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.16 (d, 3H), 3.39 - 3.49 (m, 2H), 3.98 - 4.09 (m, 1H), 4.94 (t, 1H), 7.57 - 7.61 (m, 2H), 7.63 (ddd, 1H), 7.99 - 8.03 (m, 2H), 8.16 (ddd, 1H), 8.67 (s,
1
1H), 8.69 (dd, 1H), 8.91 (d, 1H), 9.41 (d, 1H).
[α]D<20>= 13.8° (c = 1.00, DMSO).
Primer 69
6-(4-Hlorofenil)-N-[(2R)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0672]
[0673] 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (70 mg, 0.21 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.6 mL). Sukcesivno su dodavani (2R)-2-aminopropan-1-ol (32.1 mg, 0.43 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.167 mL, 0.96 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 187 µL, 50% u DMF, 320 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 29 mg (35%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.16 (d, 3H), 3.40 - 3.49 (m, 2H), 3.98 - 4.09 (m, 1H), 4.94 (t, 1H), 7.57 - 7.61 (m, 2H), 7.63 (dd, 1H), 7.99 - 8.03 (m, 2H), 8.16 (ddd, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.69 (br d, 1H), 8.91 (br s, 1H), 9.41 (d, 1H).
[α]D<20>= -5.5° (c = 1.00, DMSO).
Primer 70
6-(4-Hlorofenil)-N-(1,3-dihidroksipropan-2-il)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0674]
1
[0675] 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (70 mg, 0.21 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.6 mL). Sukcesivno su dodavani 2-aminopropan-1,3-diol (38.9 mg, 0.43 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.167 mL, 0.96 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 187 µL, 50% u DMF, 320 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 39 mg (46%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.44 - 3.52 (m, 2H), 3.54 - 3.61 (m, 2H), 3.92 - 4.00 (m, 1H), 4.87 (t, 2H), 7.57 - 7.61 (m, 2H), 7.63 (dd, 1H), 7.99 - 8.03 (m, 2H), 8.16 (ddd, 1H), 8.66 - 8.73 (m, 2H), 8.91 (br s, 1H), 9.51 (d, 1H).
Primer 71
6-(4-Hlorofenil)-N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0676]
[0677] 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (70 mg, 0.21 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.6 mL). Sukcesivno su dodavani 1-Amino-2-metilpropan-2-ol (38.1 mg, 0.43 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.167 mL, 0.96 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 187 µL, 50% u DMF, 320 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC
1
(kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 27 mg (32%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.13 (s, 6H), 3.31 (d, 2H), 4.67 (s, 1H), 7.56 - 7.61 (m, 2H), 7.63 (ddd, 1H), 7.99 - 8.03 (m, 2H), 8.17 (ddd, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.69 (dd, 1H), 8.92 (d, 1H), 9.52 (t, 1H).
Primer 72
(-)-6-(4-Hlorofenil)-N-[(2S)-2,3-dihidroksipropil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0678]
[0679] 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (70 mg, 0.21 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.6 mL). Sukcesivno su dodavani (2S)-3-aminopropan-1,2-diol (38.9 mg, 0.43 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.167 mL, 0.96 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 187 µL, 50% u DMF, 320 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 34 mg (40%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.19 - 3.32 (m, 2H), 3.36 - 3.43 (m, 1H), 3.55 - 3.64 (m, 2H), 4.69 (t, 1H), 5.00 (d, 1H), 7.56 - 7.61 (m, 2H), 7.63 (dd, 1H), 8.01 (d, 2H), 8.14 - 8.19 (m, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.69 (br s, 1H), 8.92 (br s, 1H), 9.51 (t, 1H).
[α]D<20>= -10.0° (c = 1.00, DMSO).
Primer 73
(+)-6-(4-Hlorofenil)-N-[(2R)-2,3-dihidroksipropil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0680]
1
[0681] 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (70 mg, 0.21 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.6 mL). Sukcesivno su dodavani (2R)-3-aminopropan-1,2-diol (38.9 mg, 0.43 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.167 mL, 0.96 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 187 µL, 50% u DMF, 320 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 26 mg (30%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.19 - 3.32 (m, 2H), 3.36 - 3.42 (m, 1H), 3.56 - 3.64 (m, 2H), 4.69 (t, 1H), 5.00 (d, 1H), 7.57 - 7.61 (m, 2H), 7.63 (ddd, 1H), 7.99 - 8.03 (m, 2H), 8.17 (ddd, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.69 (dd, 1H), 8.92 (d, 1H), 9.51 (t, 1H).
[α]D<20>= 20.2° (c = 1.00, DMSO).
Primer 74
(+)-6-(4-Hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksi-3-metoksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0682]
[0683] 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (70 mg, 0.21 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.6 mL). Sukcesivno su dodavani (2S)-2-amino-3-metoksipropan-1-ol (44.9 mg, 0.43 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.167 mL, 0.96 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 187 µL, 50% u DMF, 320 µmol).
1
Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 40 mg (30%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.28 (s, 3H), 3.41 - 3.58 (m, 4H), 4.08 - 4.17 (m, 1H), 4.97 (t, 1H), 7.57 - 7.61 (m, 2H), 7.63 (dd, 1H), 7.99 - 8.03 (m, 2H), 8.16 (ddd, 1H), 8.66 - 8.73 (m, 2H), 8.91 (brs, 1H), 9.51 (d, 1H).
[α]D<20>= 2.2° (c = 1.00, DMSO).
Primer 75
(-)-6-(4-Hlorofenil)-N-[(2R)-1-hidroksi-3-metoksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0684]
[0685] 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (70 mg, 0.21 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.6 mL). Sukcesivno su dodavani (2R)-2-amino-3-metoksipropan-1-ol (44.9 mg, 0.43 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.167 mL, 0.96 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 187 µL, 50% u DMF, 320 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 40 mg (30%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.28 (s, 3H), 3.41 - 3.59 (m, 4H), 4.08 - 4.17 (m, 1H), 4.97 (t, 1H), 7.56 - 7.61 (m, 2H), 7.63 (br dd, 1H), 7.98 - 8.03 (m, 2H), 8.16 (br d, 1H), 8.66 -8.75 (m, 2H), 8.91 (br s, 1H), 9.51 (d, 1H).
[α]D<20>= -6.1° (c = 1.00, DMSO).
Primer 76
6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2RS)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
2
[0687] 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (100 mg, 0.31 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (2.3 mL). Sukcesivno su dodavani (2RS)-2-amino-3,3,3-trifluoropropan-1-ol hidrohlorid (1:1) (101 mg, 0.61 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.345 mL, 1.98 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 267 µL, 50% u DMF, 458 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C18 5µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 33 mg (25%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.65 - 3.73 (m, 1H), 3.78 - 3.86 (m, 1H), 4.79 - 4.92 (m, 1H), 5.43 (t, 1H), 7.59 (d, 2H), 7.64 (br dd, 1H), 8.03 (d, 2H), 8.18 (br d, 1H), 8.63 - 8.79 (s, 2H), 8.93 (br s, 1H), 9.97 (d, 1H).
Primer 77
6-(4-Hlorofenil)-N-[(1RS)-1-ciklopropil-2-hidroksietil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0688]
[0689] 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (100 mg, 0.31 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (2.3 mL). Sukcesivno su dodavani (2RS)-2-amino-2-ciklopropiletanol hidrohlorid (1:1) (84 mg, 0.61 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-
2 1
amin (0.345 mL, 1.98 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 267 µL, 50% u DMF, 458 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 37.5 mg (30%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 0.26 - 0.50 (m, 4H), 1.03 - 1.13 (m, 1H), 3.40 - 3.47 (m, 1H), 3.52 - 3.62 (m, 2H), 4.92 (t, 1H), 7.56 - 7.61 (m, 2H), 7.63 (dd, 1H), 7.99 - 8.03 (m, 2H), 8.17 (ddd, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.70 (br d, 1H), 8.92 (br s, 1H), 9.53 (d, 1H).
Primer 78
6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2RS)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0690]
[0691] 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (100 mg, 0.31 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (2.3 mL). Sukcesivno su dodavani (2RS)-3-amino-1,1,1-trifluoropropan-2-ol (78.8 mg, 0.61 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.239 mL, 1.37 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 267 µL, 50% u DMF, 458 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 23 mg (23%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.43 - 3.52 (m, 1H), 3.71 - 3.79 (m, 1H), 4.17 - 4.28 (m, 1H), 6.66 (d, 1H), 7.57 - 7.61 (m, 2H), 7.64 (dd, 1H), 7.99 - 8.04 (m, 2H), 8.17 (ddd, 1H), 8.66 - 8.73 (m, 2H), 8.92 (br s, 1H), 9.61 (t, 1H).
Primer 79
6-(4-Hlorofenil)-N-[(2RS)-3,3-difluoro-2-hidroksipropil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
2 2
[0693] 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (100 mg, 0.31 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (2.3 mL). Sukcesivno su dodavani (2RS)-3-amino-1,1-difluoropropan-2-ol hidrohlorid (1:1) (90 mg, 0.61 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.345 mL, 1.98 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 267 µL, 50% u DMF, 458 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C18 5µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 28.3 mg (22%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.36 - 3.43 (m, 1H), 3.66 (dt, 1H), 3.78 - 3.91 (m, 1H), 5.94 (d, 1H), 5.99 (d, 1H), 7.59 (d, 2H), 7.64 (br dd, 1H), 8.02 (d, 2H), 8.17 (br d, 1H), 8.64 - 8.75 (m, 2H), 8.93 (br s, 1H), 9.54 (t, 1H).
Primer 80
6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0694]
[0695] 6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.15 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.5 mL). Sukcesivno su dodavani (2S)-2-aminopropan-1-ol (18 mg, 0.25 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin
2
(0.113 mL, 0.65 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 127 µL, 50% u DMF, 217 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 31 mg (51%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.16 (d, 3H), 3.40 - 3.50 (m, 2H), 3.99 - 4.09 (m, 1H), 4.95 (t, 1H), 7.57 - 7.61 (m, 2H), 8.01 - 8.05 (m, 2H), 8.25 (dt, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.76 (d, 1H), 8.85 (t, 1H), 9.34 (d, 1H).
[α]D<20>= 9.5° (c = 1.00, metanol).
Primer 81
6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(2R)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0696]
[0697] 6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.15 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.5 mL). Sukcesivno su dodavani (2R)-2-aminopropan-1-ol (18 mg, 0.25 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.113 mL, 0.65 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 127 µL, 50% u DMF, 217 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 27 mg (46%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.17 (d, 3H), 3.40 - 3.50 (m, 2H), 3.99 - 4.09 (m, 1H), 4.95 (t, 1H), 7.57 - 7.61 (m, 2H), 8.01 - 8.05 (m, 2H), 8.25 (dt, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.76 (d, 1H), 8.85 (t, 1H), 9.34 (d, 1H).
[α]D<20>= -8.9° (c = 1.00, metanol).
Primer 82
6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-3-okso-2,3-
2 4
dihidropiridazin-4-karboksamid
[0698]
[0699] 6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.15 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.5 mL). Sukcesivno su dodavani 1-amino-2-metilpropan-2-ol (22 mg, 0.25 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.113 mL, 0.65 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 127 µL, 50% u DMF, 217 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 35 mg (58%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.13 (s, 6H), 3.32 (d, 2H), 4.68 (s, 1H), 7.57 - 7.61 (m, 2H), 8.01 - 8.06 (m, 2H), 8.25 (dt, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.76 (d, 1H), 8.87 (t, 1H), 9.45 (t, 1H).
Primer 83
6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(2S)-1-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0700]
[0701] 6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.15 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.5 mL). Sukcesivno su dodavani (2S)-2-amino-3-metilbutan-1-ol (25 mg, 0.25 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.113 mL, 0.65 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 127 µL, 50% u DMF,
2
217 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 33 mg (53%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 0.89 (d, 3H), 0.93 (d, 3H), 1.91 - 2.03 (m, 1H), 3.41 - 3.48 (m, 1H), 3.52 - 3.59 (m, 1H), 3.81 - 3.89 (m, 1H), 4.82 (t, 1H), 7.57 - 7.62 (m, 2H), 8.01 -8.05 (m, 2H), 8.26 (dt, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.76 (d, 1H), 8.86 (t, 1H), 9.30 (d, 1H).
[α]D<20>= -20.2° (c = 1.00, metanol).
Primer 84
6-(4-Hlorofenil)-N-(1,3-dihidroksipropan-2-il)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0702]
[0703] 6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.15 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.5 mL). Sukcesivno su dodavani 2-aminopropan-1,3-diol (22 mg, 0.25 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.113 mL, 0.65 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 127 µL, 50% u DMF, 217 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 45 mg (74%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.44 - 3.52 (m, 2H), 3.55 - 3.62 (m, 2H), 3.92 - 4.01 (m, 1H), 4.88 (t, 2H), 7.57 - 7.62 (m, 2H), 8.01 - 8.05 (m, 2H), 8.25 (br d, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.79 (br s, 1H), 8.87 (br s, 1H), 9.45 (d, 1H).
Primer 85
6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(2R)-1-hidroksi-3-metoksipropan-2-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
2
[0705] 6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.15 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.5 mL). Sukcesivno su dodavani (2R)-2-amino-3-metoksipropan-1-ol (26 mg, 0.25 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.113 mL, 0.65 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 127 µL, 50% u DMF, 217 µmol). Ovo je mešano 2 sata na sobnoj temperaturi. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da bi se dobilo 40 mg (64%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.28 (s, 3H), 3.42 - 3.58 (m, 4H), 4.09 - 4.17 (m, 1H), 4.98 (t, 1H), 7.57 - 7.62 (m, 2H), 8.01 - 8.05 (m, 2H), 8.25 (ddd, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.76 (d, 1H), 8.85 (t, 1H), 9.44 (d, 1H).
[α]D<20>= -0.94° (c = 1.00, metanol).
Primer 86
6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(2S)-1-hidroksi-3-metoksipropan-2-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0706]
2
[0707] 6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.15 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.5 mL). Sukcesivno su dodavani (2S)-2-amino-3-metoksipropan-1-ol (26 mg, 0.25 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.113 mL, 0.65 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 127 µL, 50% u DMF, 217 µmol). Ovo je mešano tokom 1 h na sobnoj temperaturi. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da bi se dobilo 41 mg (65%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.28 (s, 3H), 3.42 - 3.59 (m, 4H), 4.09 - 4.17 (m, 1H), 4.98 (t, 1H), 7.57 - 7.62 (m, 2H), 8.01 - 8.05 (m, 2H), 8.25 (dt, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.76 (d, 1H), 8.85 (t, 1H), 9.44 (d, 1H).
[α]D<20>= 0.47° (c = 1.00, metanol).
Primer 87
(-)-6-(4-Hlorofenil)-N-(3,3-difluoro-2-hidroksipropil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksam ide
[0708]
[0709] 6-(4-Hlorofenil)-N-[(2RS)-3,3-difluoro-2-hidroksipropil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid (23.7 mg) je odvojen sa hiralnom HPLC (kolona: YMC Amilose SA 5µ 250x30 mm, mobilna faza: izokratski (1:1) metanol / etanol, 40 mL/min, UV: 254 nm) da se dobije 9.4 mg (40%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.35 - 3.41 (m, 1H), 3.62 - 3.69 (m, 1H), 3.78 - 3.91 (m, 1H), 5.94 (dt, 1H), 6.00 (d, 1H), 7.57 - 7.61 (m, 2H), 7.64 (ddd, 1H), 7.99 - 8.04 (m, 2H), 8.17 (ddd, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.69 (dd, 1H), 8.92 (d, 1H), 9.54 (t, 1H).
Hiralna HPLC: Rt = 3.34 min
Instrument: Agilent HPLC 1260: YMC Amilose SA 3µ 100x4.6 mm; eluent: (A: metanol 0.1 vol% dietilamin (99%)) / B: etanol, izokratski: 1:1, protok: 1.4 mL/min, temperatura: 25°C, UV:
2
254 nm.
[α]D<20>= -11.8° (c = 1.00, metanol).
Primer 88
(+)-6-(4-Hlorofenil)-N-(3,3-difluoro-2-hidroksipropil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0710]
[0711] 6-(4-Hlorofenil)-N-[(2RS)-3,3-difluoro-2-hidroksipropil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid (23.7 mg) je odvojen sa hiralnom HPLC (kolona: YMC Amilose SA 5µ 250x30 mm, mobilna faza: metanol / etanol, izokratski: 1:1, 40 mL/min, UV: 254 nm) da se dobije 9.4 mg (40%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.35 - 3.41 (m, 1H), 3.62 - 3.69 (m, 1H), 3.78 - 3.91 (m, 1H), 5.94 (dt, 1H), 6.00 (br d, 1H), 7.57 - 7.61 (m, 2H), 7.64 (ddd, 1H), 7.99 - 8.04 (m, 2H), 8.17 (ddd, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.69 (dd, 1H), 8.92 (d, 1H), 9.54 (t, 1H).
Hiralna HPLC: Rt = 4.33 min
Instrument: Agilent HPLC 1260: YMC Amilose SA 3µ 100x4.6 mm; eluent: (A: metanol 0.1 vol% dietilamin (99%)) / B: etanol, izokratski: 1:1, protok: 1.4 mL/min, temperatura: 25°C, UV: 254 nm.
[α]D<20>= 11.0° (c = 1.00, metanol).
Primer 89
(-)-6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0712]
2
[0713] 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2RS)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid (19.3 mg) je odvojen sa hiralnom HPLC (kolona: YMC Amilose SA 5µ 250x30 mm, mobilna faza: metanol / etanol, izokratski: 1:1, 40 mL/min, UV: 254 nm) da se dobije 7.3 mg (38%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.48 (ddd, 1H), 3.75 (ddd, 1H), 4.17 - 4.28 (m, 1H), 6.67 (br s, 1H), 7.57 - 7.61 (m, 2H), 7.64 (ddd, 1H), 7.99 - 8.04 (m, 2H), 8.17 (ddd, 1H), 8.67 -8.71 (m, 2H), 8.92 (d, 1H), 9.61 (t, 1H).
Hiralna HPLC: Rt = 2.23 min
Instrument: Agilent HPLC 1260: YMC Amilose SA 3µ 100x4.6 mm; eluent: (A: metanol 0.1 vol% dietilamin (99%)) / B: etanol, izokratski: 1:1, protok: 1.4 mL/min, temperatura: 25°C, UV: 254 nm.
[α]D<20>= -13.2° (c = 1.00, metanol).
Primer 90
(+)-6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0714]
[0715] 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2RS)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid (19.3 mg) je odvojen sa hiralnom HPLC (kolona: YMC Amilose SA 5µ 250x30 mm, mobilna faza: metanol / etanol, izokratski: 1:1, 40 mL/min, UV: 254 nm) da
21
se dobije 7.5 mg (39%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.48 (ddd, 1H), 3.75 (ddd, 1H), 4.28 - 4.18 (m, 1H), 6.67 (br d, 1H), 7.57 - 7.61 (m, 2H), 7.64 (ddd, 1H), 7.99 - 8.04 (m, 2H), 8.17 (ddd, 1H), 8.67 -8.72 (m, 2H), 8.92 (d, 1H), 9.61 (t, 1H).
Hiralna HPLC: Rt = 3.70 min
Instrument: Agilent HPLC 1260: YMC Amilose SA 3µ 100x4.6 mm; eluent: (A: metanol 0.1 vol% dietilamin (99%)) / B: etanol, izokratski: 1:1, protok: 1.4 mL/min, temperatura: 25°C, UV: 254 nm.
[α]D<20>= 12.7° (c = 1.00, metanol).
Primer 91
(+)-6-(4-Hlorofenil)-N-(1-ciklopropil-2-hidroksietil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0716]
[0717] 6-(4-Hlorofenil)-N-[(1RS)-1-ciklopropil-2-hidroksietil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid (32 mg) je odvojen sa hiralnom HPLC (kolona: Cellulose SC 5µ 250x30 mm, mobilna faza: metanol / etanol, izokratski: 1:1, 30 mL/min, UV: 280 nm) da se dobije 14 mg (47%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 0.25 - 0.50 (m, 4H), 1.03 - 1.11 (m, 1H), 3.40 - 3.48 (m, 1H), 3.63 (ddd, 2H), 4.93 (t, 1H), 7.56 - 7.61 (m, 2H), 7.61 - 7.65 (m, 1H), 7.99 - 8.03 (m, 2H), 8.17 (ddd, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.70 (dd, 1H), 8.91 (d, 1H), 9.53 (d, 1H).
Hiralna HPLC: Rt = 1.75 min
Instrument: Agilent HPLC 1260: Cellulose SC 3µ 100x4.6 mm; eluent: (A: metanol 0.1 vol% dietilamin (99%)) / B: etanol, izokratski: 1:1, protok: 1.4 mL/min, temperatura: 25°C, UV: 280 nm.
[α]D<20>= 29.2° (c = 1.00, metanol).
Primer 92
(-)-6-(4-Hlorofenil)-N-(1-ciklopropil-2-hidroksietil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0718]
[0719] 6-(4-Hlorofenil)-N-[(1RS)-1-ciklopropil-2-hidroksietil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid (32 mg) je odvojen sa hiralnom HPLC (kolona: Cellulose SC 5µ 250x30 mm, mobilna faza: metanol / etanol, izokratski: 1:1, 30 mL/min, UV: 280 nm) da se dobije 13 mg (41%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 0.26 - 0.50 (m, 4H), 1.03 - 1.11 (m, 1H), 3.40 - 3.48 (m, 1H), 3.52 - 3.62 (m, 2H), 4.93 (t, 1H), 7.56 - 7.61 (m, 2H), 7.63 (ddd, 1H), 7.99 - 8.03 (m, 2H), 8.17 (ddd, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.70 (dd, 1H), 8.91 (d, 1H), 9.53 (d, 1H).
Hiralna HPLC: Rt = 2.75 min
Instrument: Agilent HPLC 1260: Cellulose SC 3µ 100x4.6 mm; eluent: (A: metanol 0.1 vol% dietilamin (99%)) / B: etanol, izokratski: 1:1, protok: 1.4 mL/min, temperatura: 25°C, UV: 280 nm.
[α]D<20>= -26.7° (c = 1.00, metanol).
Primer 93
(+)-6-(4-Hlorofenil)-N-[(2R)-1-fluoro-3-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0720]
[0721] 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.15 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.5 mL). Sukcesivno su dodavani (2R)-2-amino-3-fluoropropan-1-ol hidrohlorid (1:1) (36 mg, 0.28 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (167 µL, 0.96 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 134 µL, 50% u DMF, 229 µmol). Ovo je mešano tokom 1 h na sobnoj temperaturi. Sirova reakciona smeša je prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) i RP-HPLC (kolona: X-Bridge C18 5µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%)) / acetonitril) da se dobije 3 mg (5%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.48 - 3.56 (m, 1H), 3.57 - 3.64 (m, 1H), 4.18 - 4.32 (m, 1H), 4.46 - 4.55 (m, 1H), 4.58 - 4.67 (m, 1H), 5.16 (t, 1H), 7.57 - 7.61 (m, 2H), 7.63 (ddd, 1H), 7.99 - 8.04 (m, 2H), 8.16 (ddd, 1H), 8.67 - 8.71 (m, 2H), 8.91 (dd, 1H), 9.59 (d, 1H).
[α]D<20>= 10.0° (c = 1.00, metanol).
Primer 94
N-[(1S)-1-Ciklopropil-2-hidroksietil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0722]
[0723] 3-Okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna
21
kiselina (150 mg, 0.42 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (3.0 mL). Sukcesivno su dodavani (2S)-2-amino-2-ciklopropiletanol hidrohlorid (1:1) (114 mg, 0.83 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (470 µL, 2.70 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 364 µL, 50% u DMF, 624 µmol). Ovo je mešano 2 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom i prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C18 5µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) dajući ulje kome je dodat tert-butil metil etar. Smeša je tretirana 10 minuta sa ultrazvukom da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom, čvrsta supstanca je osušena pod vakuumom na 50°C preko noći dajući 84 mg (46%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 0.26 - 0.50 (m, 4H), 1.04 - 1.13 (m, 1H), 3.41 - 3.49 (m, 1H), 3.53 - 3.62 (m, 2H), 4.93 (t, 1H), 7.64 (ddd, 1H), 7.88 (d, 2H), 8.16 - 8.24 (m, 3H), 8.71 (dd, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.93 (d, 1H), 9.52 (d, 1H).
[α]D<20>= 30.4 (c = 1.00, metanol).
Primer 95
(-)-6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2S)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0724]
[0725] 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2RS)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid (29 mg) je odvojen sa hiralnom HPLC (kolona: Chiralpak IB 5µ 250x30 mm, mobilna faza: izokratski (80:20) ugljen-dioksida / 2-propanola, 80 mL/min, temperatura 40°C, BPR: 150 bar, UV: 254 nm) da se dobije 12.3 mg (42%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.66 - 3.73 (m, 1H), 3.82 (dt, 1H), 4.80 - 4.91 (m, 1H), 5.43 (t, 1H), 7.57 - 7.61 (m, 2H), 7.64 (ddd, 1H), 8.01 - 8.05 (m, 2H), 8.18 (ddd, 1H), 8.70 (dd, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.92 (dd, 1H), 9.97 (d, 1H).
Hiralna HPLC: Rt = 2.54 min
Instrument: Agilent HPLC 1260: Chiralpak IB 5µ 100x4.6 mm; eluent: ugljen-dioksid / 2-propanol, izokratski: 80:20, protok: 4 mL/min, temperatura: 37.5°C, BPR: 100 bar, UV: 254 nm.
[α]D<20>= -8.5° (c = 1.00, metanol).
Primer 96
(+)-6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0726]
[0727] 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2RS)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid (29 mg) je odvojen sa hiralnom HPLC (kolona: Chiralpak IB 5µ 250x30 mm, mobilna faza: izokratski (80:20) ugljen-dioksid / 2-propanol, 80 mL/min, temperatura 40°C, BPR: 150 bar, UV: 254 nm) da se dobije 11.5 mg (40%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.65 - 3.73 (m, 1H), 3.82 (dt, 1H), 4.80 - 4.91 (m, 1H), 5.44 (t, 1H), 7.57 - 7.62 (m, 2H), 7.64 (ddd, 1H), 8.01 - 8.06 (m, 2H), 8.18 (ddd, 1H), 8.70 (dd, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.92 (dd, 1H), 9.97 (d, 1H).
Hiralna HPLC: Rt = 3.40 min
Instrument: Agilent HPLC 1260: Chiralpak IB 5µ 100x4.6 mm; eluent: ugljen-dioksid / 2-propanol, izokratski: 80:20, protok: 4 mL/min, temperatura: 37.5°C, BPR: 100 bar, UV: 254 nm.
[α]D<20>= 14.4° (c = 1.00, metanol).
Primer 97
6-(4-Hlorofenil)-N-[(1RS)-1-ciklopropil-2-hidroksietil]-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0728]
21
[0729] 6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (100 mg, 0.29 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (2.2 mL). Sukcesivno su dodavani (2RS)-2-amino-2-ciklopropiletanol hidrohlorid (1:1) (80 mg, 0.58 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (328 µL, 1.88 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 254 µL, 50% u DMF, 434 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa metanolom i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%)) / acetonitril) da se dobije 43.8 mg (35%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 0.26 - 0.50 (m, 4H), 1.03 - 1.13 (m, 1H), 3.40 - 3.47 (m, 1H), 3.52 - 3.63 (m, 2H), 4.93 (t, 1H), 7.57 - 7.61 (m, 2H), 8.01 - 8.06 (m, 2H), 8.26 (ddd, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.77 (d, 1H), 8.86 (d, 1H), 9.47 (t, 1H).
Primer 98
6-(4-Hlorofenil)-N-[(2R)-2,3-dihidroksipropil]-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0730]
[0731] 6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.145 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.1 mL). Sukcesivno su dodavani (2R)-3-aminopropan-1,2-diol (26.4 mg, 0.29 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (164 µL, 0.94 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 127 µL, 50% u DMF, 217 µmol).
21
Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa metanolom i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%)) / acetonitril) da bi se dobilo 19.2 mg (32%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.19 - 3.43 (m, 3H i signal vode), 3.55 - 3.64 (m, 2H), 4.69 (br s, 1H), 5.00 (br s, 1H), 7.57 - 7.62 (m, 2H), 8.01 - 8.06 (m, 2H), 8.25 (ddd, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.76 (d, 1H), 8.86 (t, 1H), 9.44 (t, 1H).
[α]D<20>= 13.4° (c = 1.00, metanol).
Primer 99
6-(4-Hlorofenil)-N-[(2S)-2,3-dihidroksipropil]-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0732]
[0733] 6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.145 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.1 mL). Sukcesivno su dodavani (2S)-3-aminopropan-1,2-diol (26.4 mg, 0.29 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (164 µL, 0.94 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 127 µL, 50% u DMF, 217 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa metanolom i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%)) / acetonitril) da se dobije 9.2 mg (15%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.20 - 3.43 (m, 3H i signal vode), 3.56 - 3.64 (m, 2H), 4.69 (br t, 1H), 5.01 (br d, 1H), 7.57 - 7.62 (m, 2H), 8.02 - 8.06 (m, 2H), 8.25 (ddd, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.76 (d, 1H), 8.86 (s, 1H), 9.44 (t, 1H).
[α]D<20>= -8.4° (c = 1.00, metanol).
Primer 100
21
6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0734]
[0735] 6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.145 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.1 mL). Sukcesivno su dodavani (2R)-2-amino-3,3,3-trifluoropropan-1-ol hidrohlorid (1:1) (47.9 mg, 0.29 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (164 µL, 0.94 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 127 µL, 50% u DMF, 217 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa metanolom i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%)) / acetonitril) da se dobije 27.9 mg (42%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.66 - 3.73 (m, 1H), 3.79 - 3.86 (m, 1H), 4.80 - 4.92 (m, 1H), 5.45 (br s, 1H), 7.58 - 7.62 (m, 2H), 8.03 - 8.07 (m, 2H), 8.26 (ddd, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.77 (d, 1H), 8.86 (t, 1H), 9.90 (d, 1H).
[α]D<20>= 11.0° (c = 1.00, metanol).
Primer 101
N-[(2RS)-3,3-Difluoro-2-hidroksipropil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0736]
21
[0737] 3-Okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (100 mg, 0.277 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (2.1 mL). Sukcesivno su dodavani (2RS)-3-amino-1,1-difluoropropan-2-ol hidrohlorid (1:1) (81.7 mg, 0.55 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (314 µL, 1.80 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 243 µL, 50% u DMF, 415 µmol). Ovo je mešano 2 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa metanolom i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 90.1 mg (72%) naslovnog jedinjenja.<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.36 - 3.44 (m, 1H), 3.66 (dt, 1H), 3.79 - 3.91 (m, 1H), 5.94 (dt, 1H), 6.00 (d, 1H), 7.65 (dd, 1H), 7.89 (d, 2H), 8.16 - 8.25 (m, 3H), 8.71 (dd, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.93 (d, 1H), 9.53 (t, 1H).
Primer 102
N-[(1S,2S)-2-Hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0738]
[0739] 3-Okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.138 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.05 mL). Sukcesivno su dodavani (1S,2S)-2-aminociklopentanol hidrohlorid (1:1) (38 mg, 0.28 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (157 µL, 0.90 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 122 µL, 50% u DMF, 208 µmol). Ovo je mešano 2 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa metanolom i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 22.2 mg (36%) naslovnog jedinjenja.<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.41 - 1.56 (m, 2H), 1.57 - 1.87 (m, 3H), 2.04 - 2.14 (m, 1H), 3.94 (quin, 1H), 3.99 - 4.07 (m, 1H), 4.95 (d, 1H), 7.64 (dd, 1H), 7.89 (d, 2H), 8.17
21
(ddd, 1H), 8.21 (d, 2H), 8.69 - 8.73 (m, 2H), 8.92 (d, 1H), 9.29 (d, 1H).
[α]D<20>= 40.1° (c = 1.00, metanol).
Primer 103
N-[(1R,2S)-2-Hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0740]
[0741] 3-Okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.138 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.05 mL). Sukcesivno su dodavani (1S,2R)-2-aminociklopentanol hidrohlorid (1:1) (38 mg, 0.28 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (157 µL, 0.90 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 122 µL, 50% u DMF, 208 µmol). Ovo je mešano 2 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa metanolom i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 36.5 mg (59%) naslovnog jedinjenja.<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.46 - 1.65 (m, 3H), 1.70 - 1.88 (m, 2H), 1.92 - 2.04 (m, 1H), 3.99 - 4.12 (m, 2H), 5.05 (d, 1H), 7.64 (ddd, 1H), 7.89 (d, 2H), 8.18 (ddd, 1H), 8.21 (d, 2H), 8.70 (dd, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.92 (d, 1H), 9.66 (d, 1H).
[α]D<20>= -2.1° (c = 1.00, metanol).
Primer 104
N-[(1R,2R)-2-Hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0742]
22
[0743] 3-Okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.138 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.05 mL). Sukcesivno su dodavani (1R,2R)-2-aminociklopentanol hidrohlorid (1:1) (38 mg, 0.28 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (157 µL, 0.90 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 122 µL, 50% u DMF, 208 µmol). Ovo je mešano 2 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa metanolom i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 19 mg (31%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.41 - 1.56 (m, 2H), 1.57 - 1.87 (m, 3H), 2.04 - 2.14 (m, 1H), 3.91 - 3.97 (m, 1H), 3.99 - 4.06 (m, 1H), 4.95 (d, 1H), 7.64 (ddd, 1H), 7.89 (d, 2H), 8.18 (ddd, 1H), 8.21 (d, 2H), 8.69 - 8.72 (m, 2H), 8.92 (d, 1H), 9.29 (d, 1H).
[α]D<20>= -32.6° (c = 1.00, metanol).
Primer 105
N-[(1S,2R)-2-Hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0744]
[0745] 3-Okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.138 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.05 mL). Sukcesivno su dodavani (1R,2S)-2-aminociklopentanol hidrohlorid (1:1) (38 mg, 0.28 mmol), N-etil-Nizopropilpropan-2-amin (157 µL, 0.90 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 122 µL, 50% u DMF, 208 µmol). Ovo je mešano 2 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa metanolom i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 19 mg (31%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.47 - 1.64 (m, 3H), 1.70 - 1.88 (m, 2H), 1.93 - 2.03 (m, 1H), 3.99 -4.12 (m, 2H), 5.05 (d, 1H), 7.64 (ddd, 1H), 7.89 (d, 2H), 8.17 (ddd, 1H), 8.21 (d, 2H), 8.70 (dd, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.92 (d, 1H), 9.66 (d, 1H).
[α]D<20>= 3.7° (c = 1.00, metanol).
Primer 106
N-[(1S,2R)-2-Hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0746]
[0747] 3-Okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.138 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.05 mL). Sukcesivno su dodavani (1R,2S)-2-aminocikloheksanol hidrohlorid (1:1) (44.2 mg, 0.28 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (157 µL, 0.90 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 122 µL, 50% u DMF, 208 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći.
[0748] Reakciona smeša je razblažena sa dihlorometanom i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C18 5µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) dajući 30.1 mg (47%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.25 - 1.38 (m, 2H), 1.48 - 1.69 (m, 6H), 3.75 - 3.80 (m, 1H), 3.88 - 3.96 (m, 1H), 4.88 (d, 1H), 7.64 (ddd, 1H), 7.88 (d, 2H), 8.16 - 8.23 (m, 3H), 8.71 (dd, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.92 (dd, 1H), 9.60 (d, 1H).
[α]D<20>= 5.0° (c = 1.00, metanol).
Primer 107
N-[(3RS,4RS)-4-Hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0749]
[0750] 3-Okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (100 mg, 0.277 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (2.1 mL). Sukcesivno su dodavani (3RS,4RS)-4-aminotetrahidrofuran-3-ol hidrohlorid (1:1) (77.3 mg, 0.55 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (314 µL, 1.80 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 243 µL, 50% u DMF, 415 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći.
[0751] Reakciona smeša je razblažena sa dihlorometanom i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C18 5µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 70.2 mg (57%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.46 (t, 1H), 3.61 (dd, 1H), 3.93 (dd, 1H), 4.01 (dd, 1H), 4.25 - 4.31 (m, 1H), 4.32 - 4.40 (m, 1H), 5.70 (br s, 1H), 7.65 (ddd, 1H), 7.89 (d, 2H), 8.18 (ddd, 1H), 8.21 (d, 2H), 8.71 (dd, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.92 (d, 1H), 9.80 (d, 1H).
Primer 108
3-Okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2RS)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0752]
22
[0753] 3-Okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (100 mg, 0.277 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (2.1 mL). Sukcesivno su dodavani (2RS)-3-amino-1,1,1-trifluoropropan-2-ol (71.5 mg, 0.55 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (314 µL, 1.80 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 243 µL, 50% u DMF, 415 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa dihlorometanom i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) dajući 57.3 mg (44%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.49 (ddd, 1H), 3.76 (ddd, 1H), 4.18 - 4.29 (m, 1H), 6.68 (br s, 1H), 7.65 (ddd, 1H), 7.89 (d, 2H), 8.18 (ddd, 1H), 8.22 (d, 2H), 8.71 (dd, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.93 (d, 1H), 9.59 (t, 1H).
Primer 109
N-[(1RS)-1-Ciklopropil-2-hidroksietil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0754]
[0755] 3-Okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (100 mg, 0.277 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (2.1 mL). Sukcesivno su dodavani (2RS)-2-amino-2-ciklopropiletanol hidrohlorid (1:1) (76.2 mg, 0.55 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (314 µL, 1.80 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 243 µL, 50% u DMF, 415 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa dihlorometanom i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) dajući 52.5 mg (43%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 0.26 - 0.50 (m, 4H), 1.03 - 1.13 (m, 1H), 3.41 - 3.49 (m, 1H), 3.52 - 3.68 (m, 2H), 4.94 (t, 1H), 7.64 (ddd, 1H), 7.88 (d, 2H), 8.16 - 8.24 (m, 3H), 8.71 (dd, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.93 (d, 1H), 9.52 (d, 1H).
Primer 110
3-Okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2RS)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0756]
[0757] 3-Okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (100 mg, 0.277 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (2.1 mL). Sukcesivno su dodavani (2RS)-2-amino-3,3,3-trifluoropropan-1-ol (71.5 mg, 0.55 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (217 µL, 1.25 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 243 µL, 50% u DMF, 415 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa dihlorometanom i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) dajući 64.4 mg (49%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.66 - 3.75 (m, 1H), 3.83 (dd, 1H), 4.81 - 4.91 (m, 1H), 5.43 (br s, 1H), 7.65 (ddd, 1H), 7.89 (d, 2H), 8.19 (ddd, 1H), 8.23 (d, 2H), 8.72 (dd, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.93 (d, 1H), 9.96 (d, 1H).
Primer 111
N-[(2S)-1-Hidroksi-3-metoksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-
22
(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0758]
[0759] 3-Okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.138 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.05 mL). Sukcesivno su dodavani (2S)-2-amino-3-metoksipropan-1-ol (29.1 mg, 0.28 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (109 µL, 0.62 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 122 µL, 50% u DMF, 208 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa dihlorometanom i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%)) / acetonitril) dajući 26 mg (42%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.28 (s, 3H), 3.42 - 3.59 (m, 4H), 4.09 - 4.18 (m, 1H), 4.98 (t, 1H), 7.64 (ddd, 1H), 7.89 (d, 2H), 8.18 (ddd, 1H), 8.21 (d, 2H), 8.71 (dd, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.92 (dd, 1H), 9.50 (d, 1H).
[α]D<20>= 15.1° (c = 1.00, metanol).
Primer 112
3-Okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0760]
22
[0761] 3-Okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.138 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.05 mL). Sukcesivno su dodavani (2R)-2-amino-3,3,3-trifluoropropan-1-ol hidrohlorid (1:1) (45.8 mg, 0.28 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (108.5 µL, 0.62 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 121.2 µL, 50% u DMF, 208 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa dihlorometanom i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da bi se dobilo 17 mg (26%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.66 - 3.74 (m, 1H), 3.79 - 3.86 (m, 1H), 4.81 - 4.92 (m, 1H), 5.45 (br t, 1H), 7.65 (ddd, 1H), 7.89 (d, 2H), 8.19 (ddd, 1H), 8.23 (d, 2H), 8.72 (dd, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.93 (d, 1H), 9.96 (d, 1H).
[α]D<20>= 13.2° (c = 1.00, metanol).
Primer 113
N-[(2R)-2,3-Dihidroksipropil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0762]
[0763] 3-Okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.138 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.05 mL). Sukcesivno su dodavani (2R)-3-aminopropan-1,2-diol (25.2 mg, 0.28 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (108.5 µL, 0.62 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 121.2 µL, 50% u DMF, 208 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa dihlorometanom i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C18 5µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da bi se dobilo 24.5 mg (41%) naslovnog jedinjenja.
22
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.20 - 3.32 (m, 2H), 3.37 - 3.43 (m, 1H), 3.56 - 3.65 (m, 2H), 4.70 (t, 1H), 5.01 (d, 1H), 7.64 (ddd, 1H), 7.89 (d, 2H), 8.18 (ddd, 1H), 8.21 (d, 2H), 8.70 (dd, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.93 (dd, 1H), 9.50 (t, 1H).
[α]D<20>= 0.6° (c = 1.00, metanol).
Primer 114
N-[(2S)-2,3-Dihidroksipropil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0764]
[0765] 3-Okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.138 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.05 mL). Sukcesivno su dodavani (2S)-3-aminopropan-1,2-diol (25.2 mg, 0.28 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (109 µL, 0.62 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 122 µL, 50% u DMF, 208 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa dihlorometanom i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C18 5µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da bi se dobilo 17.3 mg (29%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.20 - 3.30 (m, 2H), 3.36 - 3.43 (m, 1H), 3.56 - 3.65 (m, 2H), 4.70 (br t, 1H), 5.01 (br d, 1H), 7.64 (ddd, 1H), 7.89 (d, 2H), 8.18 (ddd, 1H), 8.21 (d, 2H), 8.70 (dd, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.93 (dd, 1H), 9.50 (t, 1H).
[α]D<20>= -9.7° (c = 1.00, metanol).
Primer 115
N-(2-Hidroksi-2-metilpropil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0766]
22
[0767] 3-Okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.138 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.5 mL). Sukcesivno su dodavani 1-amino-2-metilpropan-2-ol (21 mg, 0.24 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (108 µL, 0.62 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 121 µL, 50% u DMF, 208 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je prečišćena pomoću RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril i kolona: X-Bridge C18 5µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%)) / acetonitril) da bi se dobilo 25 mg (42%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.13 (s, 6H), 3.31 - 3.33 (m, 2H i signal vode), 4.68 (s, 1H), 7.65 (ddd, 1H), 7.88 (d, 2H), 8.17 - 8.24 (m, 3H), 8.70 (dd, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.93 (d, 1H), 9.50 (t, 1H).
Primer 116
N-(1,3-Dihidroksipropan-2-il)-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0768]
[0769] 3-Okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.138 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.5 mL). Sukcesivno su dodavani 2-aminopropan-1,3-diol (21 mg, 0.24 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (108
22
µL, 0.62 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 121 µL, 50% u DMF, 208 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je prečišćena pomoću RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 33 mg (55%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.45 - 3.52 (m, 2H), 3.55 - 3.62 (m, 2H), 3.93 - 4.01 (m, 1H), 4.89 (t, 2H), 7.64 (dd, 1H), 7.89 (d, 2H), 8.17 (ddd, 1H), 8.21 (d, 2H), 8.70 (dd, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.92 (d, 1H), 9.50 (d, 1H).
Primer 117
3-Okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0770]
[0771] 3-Okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.138 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.5 mL). Sukcesivno su dodavani (2S)-3-amino-1,1,1-trifluoropropan-2-ol (30 mg, 0.24 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (108 µL, 0.62 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 121 µL, 50% u DMF, 208 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je prečišćena pomoću RP-HPLC (kolona: X-Bridge C18 5µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 32 mg (49%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 3.49 (ddd, 1H), 3.72 - 3.80 (m, 1H), 4.18 - 4.29 (m, 1H), 6.67 (d, 1H), 7.65 (ddd, 1H), 7.89 (d, 2H), 8.18 (ddd, 1H), 8.22 (d, 2H), 8.71 (dd, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.93 (d, 1H), 9.59 (t, 1H).
[α]D<20>= -12.3° (c = 1.00, metanol).
Primer 118
N-[(2R)-1-Hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-
2
dihidropiridazin-4-karboksamid
[0772]
[0773] 3-Okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.138 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.5 mL). Sukcesivno su dodavani (2R)-2-aminopropan-1-ol (18 mg, 0.24 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (108 µL, 0.62 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 121 µL, 50% u DMF, 208 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je prečišćena pomoću RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril i kolona: X-Bridge C18 5µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%)) / acetonitril) da se dobije 22 mg (38%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.17 (d, 3H), 3.40 - 3.50 (m, 2H), 3.99 - 4.10 (m, 1H), 4.95 (t, 1H), 7.64 (ddd, 1H), 7.89 (d, 2H), 8.18 (ddd, 1H), 8.21 (d, 2H), 8.70 (dd, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.92 (d, 1H), 9.39 (d, 1H).
[α]D<20>= -8.9° (c = 1.00, metanol).
Primer 119
N-[(2S)-1-Hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0774]
2 1
[0775] 3-Okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (50 mg, 0.138 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.5 mL). Sukcesivno su dodavani (2S)-2-aminopropan-1-ol (18 mg, 0.24 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (108 µL, 0.62 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 121 µL, 50% u DMF, 208 µmol). Ovo je mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je prečišćena pomoću RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril i kolona: X-Bridge C18 5µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%)) / acetonitril) da se dobije 25 mg (43%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.17 (d, 3H), 3.40 - 3.50 (m, 2H), 4.00 - 4.09 (m, 1H), 4.95 (t, 1H), 7.64 (ddd, 1H), 7.89 (d, 2H), 8.18 (ddd, 1H), 8.21 (d, 2H), 8.70 (dd, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.92 (d, 1H), 9.39 (d, 1H).
[α]D<20>= 12.1 (c = 1.00, metanol).
Primer 120
6-(4-Hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(pirimidin-5-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0776]
[0777] 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(pirimidin-5-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (60 mg, 0.183 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (1.4 mL). Sukcesivno su dodavani (2S)-2-aminopropan-1-ol (27.4 mg, 0.37 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (143 µL, 0.82 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 160 µL, 50% u DMF, 274 µmol). Ovo je mešano tokom 24 h na 55°C. Reakciona smeša je prečišćena pomoću RP-HPLC (kolona: X-Bridge C18 5µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril i kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%)) / acetonitril) da se dobije 5.3 mg (8%) naslovnog jedinjenja.
2 2
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.17 (d, 3H), 3.40 - 3.50 (m, 2H), 3.99 - 4.10 (m, 1H), 4.96 (t, 1H), 7.58 - 7.62 (m, 2H), 8.03 - 8.07 (m, 2H), 8.68 (s, 1H), 9.25 (s, 2H), 9.29 - 9.32 (m, 2H).
[α]D<20>= 1.1 (c = 1.00, metanol).
Primer 121
6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0778]
[0779] Rastvor 150 mg intermedijara 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 177 mg 3-amino-4,4,4-trifluoro-2-metilbutan-2-ol hidrohlorida (1:1), 348 mg HATU, 0.32 mL etildiizopropilamina i 4 mg 4-dimetilaminopiridina u 3 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 98 mg naslovnog jedinjenja.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.19 (s, 3 H), 1.34 (s, 3 H), 4.66 (quin, 1 H), 5.21 (s, 1 H), 7.56 - 7.61 (m, 2 H), 7.64 (dd, 1 H), 8.00 - 8.06 (m, 2 H), 8.16 - 8.22 (m, 1 H), 8.70 (dd, 1 H), 8.74 (s, 1 H), 8.93 (d, 1 H), 10.01 (d, 1 H).
Primer 122
6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 1
[0780]
2
[0781] HPLC-odvajanje 92 mg 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 121) na hiralnoj koloni (instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000, kolona: Chiralpak IA 5µ 250x30 mm; eluent A: metanol; eluent B: etanol; izokratski: 50%A+50%B; protok 40.0 mL/min; UV 254 nm) dalo je 36 mg 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 1.
Hiralna HPLC: Rt = 1.74 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IA 3µ 100x4,6 mm; eluent A: metanol 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 50%A+50%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 254 nm).
Primer 123
6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 2
[0782]
[0783] HPLC-odvajanje 92 mg 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 121) na hiralnoj koloni (instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000, kolona: Chiralpak IA 5µ 250x30 mm; eluent A: metanol; eluent B: etanol; izokratski: 50%A+50%B;
2 4
protok 40.0 mL/min; UV 254 nm) dalo je 37.5 mg 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 2.
Hiralna HPLC: Rt = 2.27 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IA 3µ 100x4,6 mm; eluent A: metanol 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 50%A+50%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 254 nm).
Primer 124
6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0784]
[0785] Rastvor 75 mg intermedijara 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 66 mg (1R,2S)-2-aminocikloheksanol hidrohlorida (1:1), 165 mg HATU, 0.11 mL etildiizopropilamina i 1.5 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 12 mg 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.33 (br d, 2 H), 1.47 - 1.70 (m, 6 H), 3.77 (br d, 1 H), 3.86 - 3.95 (m, 1 H), 4.89 (d, 1 H), 7.55 - 7.62 (m, 2 H), 7.99 - 8.05 (m, 2 H), 8.22 - 8.28 (m, 1 H), 8.68 (s, 1 H), 8.76 (d, 1 H), 8.85 (t, 1 H), 9.55 (d, 1 H).
Primer 125
2
6-(4-Hlorofenil)-N-[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0786]
[0787] Rastvor 75 mg intermedijara 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 69 mg (1R,2S)-2-aminocikloheksanol hidrohlorida (1:1), 165 mg HATU, 0.16 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 31 mg 6-(4-hlorofenil)-N-[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.24 - 1.38 (m, 2 H), 1.47 - 1.70 (m, 6 H), 3.77 (br s, 1 H), 3.87 - 3.96 (m, 1 H), 4.87 (d, 1 H), 7.58 (d, 2 H), 7.63 (dd, 1 H), 8.00 (d, 2 H), 8.13 - 8.19 (m, 1 H), 8.67 (s, 1 H), 8.69 (br d, 1 H), 8.91 (s, 1 H), 9.62 (d, 1 H).
Primer 126
N-[(1S,2R)-2-Hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0788]
2
[0789] Rastvor 75 mg intermedijara 3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 60 mg (1R,2S)-2-aminocikloheksanol hidrohlorida (1:1), 151 mg HATU, 0.14 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 17 mg N-[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.32 (br s, 2 H), 1.46 - 1.69 (m, 6 H), 3.77 (br s, 1 H), 3.87 - 3.98 (m, 1 H), 4.88 (d, 1 H), 7.51 (d, 2 H), 7.63 (dd, 1 H), 8.08 - 8.13 (m, 2 H), 8.14 - 8.19 (m, 1 H), 8.67 - 8.72 (m, 2 H), 8.91 (d, 1 H), 9.62 (d, 1 H).
Primer 127
6-[4-(Difluorometil)fenil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0790]
[0791] Rastvor 65 mg intermedijara 6-[4-(difluorometil)fenil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 60 mg (2R)-2-amino-3,3,3-trifluoropropan-1-ol hidrohlorida (1:1), 144 mg HATU, 0.1 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 37 mg 6-[4-(difluorometil)fenil]-
2
3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.65 - 3.75 (m, 1 H), 3.83 (dt, 1 H), 4.81 - 4.92 (m, 1 H), 5.44 (t, 1 H), 7.13 (t, 1 H), 7.65 (dd, 1 H), 7.73 (d, 2 H), 8.15 (d, 2 H), 8.17 - 8.22 (m, 1 H), 8.69 - 8.74 (m, 1 H), 8.78 (s, 1 H), 8.93 (d, 1 H), 9.97 (d, 1 H).
Primer 128
6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0792]
[0793] Rastvor 75 mg intermedijara 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 56 mg (2S)-3-amino-1,1,1-trifluoropropan-2-ola, 165 mg HATU, 0.11 mL etildiizopropilamina i 1.5 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 14 mg 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.48 (ddd, 1 H), 3.69 - 3.80 (m, 1 H), 4.23 (br s, 1 H), 6.67 (d, 1 H), 7.55 - 7.63 (m, 2 H), 8.00 - 8.07 (m, 2 H), 8.23 - 8.27 (m, 1 H), 8.69 (s, 1 H), 8.77 (d, 1 H), 8.87 (d, 1 H), 9.54 (t, 1 H).
Primer 129
6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(1S,2R)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0794]
2
[0795] Rastvor 75 mg intermedijara 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 60 mg (1R,2S)-2-aminociklopentanol hidrohlorida (1:1), 165 mg HATU, 0.11 mL etildiizopropilamina i 1.5 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 18 mg 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(1S,2R)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.47 - 1.64 (m, 3 H), 1.70 - 1.89 (m, 2 H), 1.93 - 2.04 (m, 1 H), 3.99 - 4.12 (m, 2 H), 5.06 (d, 1 H), 7.56 - 7.61 (m, 2 H), 7.99 - 8.06 (m, 2 H), 8.24 (dt, 1 H), 8.68 (s, 1 H), 8.76 (d, 1 H), 8.85 (t, 1 H), 9.62 (d, 1 H).
Primer 130
6-(4-Hlorofenil)-N-[(1S,2S)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0796]
[0797] Rastvor 75 mg intermedijara 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 62 mg (1S,2S)-2-aminociklopentanol hidrohlorida (1:1),
2
174 mg HATU, 0.16 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 31 mg 6-(4-hlorofenil)-N-[(1S,2S)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.39 - 1.55 (m, 2 H), 1.58 - 1.76 (m, 2 H), 1.77 - 1.88 (m, 1 H), 2.03 - 2.14 (m, 1 H), 3.90 - 3.96 (m, 1 H), 3.98 - 4.06 (m, 1 H), 4.94 (d, 1 H), 7.56 -7.61 (m, 2 H), 7.63 (dd, 1 H), 7.98 - 8.03 (m, 2 H), 8.16 (ddd, 1 H), 8.65 (s, 1 H), 8.69 (dd, 1 H), 8.91 (d, 1 H), 9.31 (d, 1 H).
[α]D<20>= 34.5 (c = 1.00, DMSO).
Primer 131
3-Okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0798]
[0799] Rastvor 75 mg intermedijara 3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 51 mg (2S)-3-amino-1,1,1-trifluoropropan-2-ola, 151 mg HATU, 0.14 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 24 mg 3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
24
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.48 (ddd, 1 H), 3.72 - 3.80 (m, 1 H), 4.18 - 4.28 (m, 1 H), 6.66 (d, 1 H), 7.52 (d, 2 H), 7.64 (dd, 1 H), 8.08 - 8.15 (m, 2 H), 8.15 - 8.20 (m, 1 H), 8.67 - 8.72 (m, 2 H), 8.93 (d, 1 H), 9.61 (t, 1 H).
Hiralna HPLC: Rt = 1.74 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: YMC Amilose SA 3µ 100x4,6 mm; eluent A: metanol 0.1 Vol-% dietilamina (99%), eluent B: etanol; izokratski: 50%A+50%B; protok 1.4 ml/min; temperatura: 25 °C; DAD 254 nm.
[α]D<20>= - 8.4 (c = 1.00, DMSO).
Primer 132
N-[(1S,2S)-2-Hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0800]
[0801] Rastvor 150 mg intermedijara 3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 109 mg (1S,2S)-2-amino-ciklopentanola, 302 mg HATU, 0.28 mL etildiizopropilamina i 2 mg 4-dimetilaminopiridina u 3 mL DMF je mešan na 40°C tokom 3 sata. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 75 mg N-[(1S,2S)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.39 - 1.55 (m, 2 H), 1.57 - 1.67 (m, 1 H), 1.67 - 1.76 (m, 1 H), 1.77 - 1.87 (m, 1 H), 2.03 - 2.14 (m, 1 H), 3.90 - 3.97 (m, 1 H), 3.98 - 4.06 (m, 1 H), 4.95 (d, 1 H), 7.51 (d, 2 H), 7.63 (dd, 1 H), 8.09 - 8.13 (m, 2 H), 8.14 - 8.19 (m, 1 H), 8.66 (s, 1 H), 8.69 (d, 1 H), 8.91 (d, 1 H), 9.31 (d, 1 H).
Primer 133
6-(4-Hlorofenil)-N-[(cis)-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0802]
[0803] Rastvor 75 mg intermedijara 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 69 mg cis-2-amino-1-cikloheksanol hidrohlorida (1:1), 174 mg HATU, 0.16 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 48 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 39 mg 6-(4-hlorofenil)-N-[(cis)-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.26 - 1.37 (m, 2 H), 1.46 - 1.69 (m, 6 H), 3.77 (m, 1 H), 3.86 - 3.97 (m, 1 H), 4.88 (d, 1 H), 7.55 - 7.60 (m, 2 H), 7.63 (dd, 1 H), 7.97 - 8.03 (m, 2 H), 8.13 - 8.19 (m, 1 H), 8.67 (s, 1 H), 8.69 (dd, 1 H), 8.91 (d, 1 H), 9.62 (d, 1 H).
Primer 134
3-Okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0804]
[0805] Rastvor 52 mg intermedijara 3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 46.6 mg (2R)-2-amino-3,3,3-trifluoropropan-1-ol hidrohlorida (1:1), 105 mg HATU, 0.07 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 1 mL DMF je mešan na 40°C tokom 3 sata. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%), eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 24 mg 3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-6-[4-(trifluoro-metoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.65 - 3.74 (m, 1 H), 3.82 (dt, 1 H), 4.80 - 4.91 (m, 1 H), 5.44 (t, 1 H), 7.52 (d, 2 H), 7.64 (dd, 1 H), 8.10 - 8.16 (m, 2 H), 8.16 - 8.21 (m, 1 H), 8.71 (dd, 1 H), 8.75 (s, 1 H), 8.92 (d, 1 H), 9.98 (d, 1 H).
[α]D<20>= 10.2° (c = 1.00, DMSO).
Primer 135
3-Okso-2-(piridin-3-il)-N-[1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0806]
24
[0807] Rastvor 150 mg intermedijara 3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 154 mg 3-amino-4,4,4-trifluoro-2-metilbutan-2-ol hidrohlorida (1:1), 302 mg HATU, 0.3 mL etildiizopropilamina i 4 mg 4-dimetilaminopiridina u 3 mL DMF mešani su na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%), eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 63 mg 3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.20 (s, 3 H), 1.34 (s, 3 H), 4.67 (quin, 1 H), 5.22 (s, 1 H), 7.51 (d, 2 H), 7.61 - 7.67 (m, 1 H), 8.11 - 8.15 (m, 2 H), 8.19 (ddd, 1 H), 8.70 (dd, 1 H), 8.75 (s, 1 H), 8.93 (d, 1 H), 10.02 (d, 1 H).
Primer 136
3-Okso-2-(piridin-3-il)-N-[1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 1
[0808]
[0809] HPLC-odvajanje 58 mg 3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 135) na hiralnoj koloni (instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000, kolona: Chiralpak IB 5µ 250x30 mm; eluent A: metil tert.-butiletar 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 90%A+10%B; protok 50.0 mL/min; UV 254 nm) dalo je 23 mg 3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-6-[4(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 1.
Hiralna HPLC: Rt = 1.57 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IB 3µ 100x4,6 mm; eluent A: metil tert.-butiletar 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 90%A+10%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 254 nm).
Primer 137
3-Okso-2-(piridin-3-il)-N-[1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 2
[0810]
[0811] HPLC-odvajanje 58 mg 3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 135) na hiralnoj koloni (instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000, kolona: Chiralpak IB 5µ 250x30 mm; eluent A: metil tert.-butiletar 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 90%A+10%B; protok 50.0 mL/min; UV 254 nm) dalo je 20 mg 3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 2.
Hiralna HPLC: Rt = 3.29 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IB 3µ 100x4,6 mm; eluent A: metil tert.-butiletar 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 90%A+10%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 254 nm).
Primer 138
6-(4-Hlorofenil)-N-[(1R,2S)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0812]
24
[0813] Rastvor 75 mg intermedijara 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 63 mg (1S,2R)-2-aminociklopentanol hidrohlorida (1:1), 174 mg HATU, 0.16 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 90 min. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1 vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 35 mg 6-(4-hlorofenil)-N-[(1R,2S)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.46 - 1.64 (m, 3 H), 1.70 - 1.88 (m, 2 H), 1.92 - 2.03 (m, 1 H), 3.99 - 4.12 (m, 2 H), 5.04 (d, 1 H), 7.56 - 7.61 (m, 2 H), 7.61 - 7.66 (m, 1 H), 7.97 -8.03 (m, 2 H), 8.16 (ddd, 1 H), 8.66 - 8.70 (m, 2 H), 8.91 (d, 1 H), 9.67 (d, 1 H).
Primer 139
6-[4-(Difluorometil)fenil]-N-[(1S,2S)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0814]
[0815] Rastvor 65 mg intermedijara 6-[4-(difluorometil)fenil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 60 mg (1S,2S)-2-aminociklopentanol hidrohlorida (1:1), 144 mg HATU, 0.1 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF je
24
mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 85% / B 15% → A 45% / B 55%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 13 mg 6-[4-(difluorometil)fenil]-N-[(1S,2S)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.39 - 1.56 (m, 2 H), 1.58 - 1.76 (m, 2 H), 1.77 - 1.87 (m, 1 H), 2.04 - 2.14 (m, 1 H), 3.94 (br d, 1 H), 3.98 - 4.07 (m, 1 H), 4.95 (br d, 1 H), 7.13 (t, 1 H), 7.64 (dd, 1 H), 7.72 (d, 2 H), 8.13 (d, 2 H), 8.15 - 8.20 (m, 1 H), 8.66 - 8.72 (m, 2 H), 8.92 (d, 1 H), 9.31 (d, 1 H).
Primer 140
N-[(trans)-3,3-Difluoro-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0817] Rastvor 150 mg intermedijara 3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 149 mg trans-6-amino-2,2-difluorocikloheksan-1-ol hidrohlorida (1:1), 302 mg HATU, 0.3 mL etildiizopropilamina i 4 mg 4-dimetilaminopiridina u 3 mL DMF mešan je na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%), eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 66 mg N-[(trans)-3,3-difluoro-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.40 - 1.54 (m, 2 H), 1.66 (br s, 1 H), 1.72 - 1.90 (m, 1 H), 1.94 - 2.11 (m, 2 H), 3.69 - 3.82 (m, 1 H), 3.97 (br s, 1 H), 5.78 (d, 1 H), 7.52 (d, 2 H), 7.64
24
(dd, 1 H), 8.08 - 8.14 (m, 2 H), 8.15 - 8.20 (m, 1 H), 8.68 - 8.72 (m, 2 H), 8.92 (d, 1 H), 9.52 (d, 1 H).
Primer 141
N-[(trans)-3,3-Difluoro-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 1
[0818]
[0819] HPLC-odvajanje 58 mg N-[(trans)-3,3-difluoro-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 140) na hiralnoj koloni (instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000, kolona: Chiralpak IA 5µ 250x30 mm; eluent A: etanol 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: metanol; izokratski: 50%A+50%B; protok 40.0 mL/min; UV 254 nm) dalo je 21 mg N-[(trans)-3,3-difluoro-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 1.
Hiralna HPLC: Rt = 1.48 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IA 3µ 100x4,6 mm; eluent A: etanol 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 90%A+10%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 254 nm).
Primer 142
N-[(trans)-3,3-Difluoro-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 2
[0820]
24
[0821] HPLC-odvajanje 58 mg N-[(trans)-3,3-difluoro-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 140) na hiralnoj koloni (instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000, kolona: Chiralpak IA 5µ 250x30 mm; eluent A: etanol 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: metanol; izokratski: 50%A+50%B; protok 40.0 mL/min; UV 254 nm) dalo je 23 mg N-[(trans)-3,3-difluoro-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 2.
Hiralna HPLC: Rt = 1.78 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IA 3µ 100x4,6 mm; eluent A: etanol 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 90%A+10%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 254 nm).
Primer 143
6-(4-Hlorofenil)-N-[(trans)-3,3-difluoro-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0822]
[0823] Rastvor 150 mg intermedijara 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 172 mg (trans)-6-amino-2,2-difluorocikloheksan-1-ol hidrohlorida (1:1), 348 mg HATU, 0.3 mL etildiizopropilamina i 4 mg 4-dimetilaminopiridina u 3 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i
24
podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 66 mg rac-6-(4-Hlorofenil)-N-[(trans)-3,3-difluoro-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.40 - 1.53 (m, 2 H), 1.66 (br s, 1 H), 1.72 - 1.89 (m, 1 H), 1.92 - 2.11 (m, 2 H), 3.69 - 3.80 (m, 1 H), 3.96 (br s, 1 H), 5.77 (d, 1 H), 7.56 - 7.61 (m, 2 H), 7.63 (dd, 1 H), 7.98 - 8.02 (m, 2 H), 8.14 - 8.18 (m, 1 H), 8.67 (s, 1 H), 8.70 (dd, 1 H), 8.91 (d, 1 H), 9.51 (d, 1 H).
Primer 144
6-(4-Hlorofenil)-N-[(trans)-3,3-difluoro-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 1
[0824]
[0825] HPLC-odvajanje 58 mg 6-(4-hlorofenil)-N-[(trans)-3,3-difluoro-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 143) na hiralnoj koloni (instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000, kolona: YMC Cellulose SC 5µ 250x30 mm; eluent A: metanol; Eluent B: etanol; izokratski: 50%A+10%B; protok 40.0 mL/min; UV 254 nm) dalo je 20 mg 6-(4-hlorofenil)-N-[(trans)-3,3-difluoro-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 1.
Hiralna HPLC: Rt = 1.74 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: YMC Cellulose SC 3µ 100x4,6 mm; eluent A: metanol 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 50%A+50%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 254 nm).
Primer 145
2
6-(4-Hlorofenil)-N-[(trans)-3,3-difluoro-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 2
[0826]
[0827] HPLC-odvajanje 58 mg 6-(4-hlorofenil)-N-[(trans)-3,3-difluoro-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 143) na hiralnoj koloni (instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000, kolona: YMC Cellulose SC 5µ 250x30 mm; eluent A: metanol; Eluent B: etanol; izokratski: 50%A+10%B; protok 40.0 mL/min; UV 254 nm) dalo je 19 mg 6-(4-hlorofenil)-N-[(trans)-3,3-difluoro-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 2.
Hiralna HPLC: Rt = 2.29 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: YMC Cellulose SC 3µ 100x4,6 mm; eluent A: metanol 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 50%A+50%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 254 nm).
Primer 146
3-Okso-2-(piridin-3-il)-N-[3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0828]
[0829] Rastvor 50 mg intermedijara 3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 34 mg 3-amino-1,1,1-trifluoro-2-propanola, 101 mg
2 1
HATU, 0.1 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 1 mL DMF mešan je na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%), eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 8 mg rac-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.48 (ddd, 1 H), 3.70 - 3.79 (m, 1 H), 4.16 - 4.29 (m, 1 H), 6.66 (d, 1 H), 7.52 (d, 2 H), 7.64 (dd, 1 H), 8.09 - 8.14 (m, 2 H), 8.15 - 8.20 (m, 1 H), 8.67 - 8.72 (m, 2 H), 8.93 (d, 1 H), 9.61 (t, 1 H).
Primer 147
N-[(1S,2R)-2-Hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0830]
[0831] Rastvor 75 mg intermedijara 3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 54 mg (1R,2S)-2-aminociklopentanol hidrohlorida (1:1), 151 mg HATU, 0.14 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF mešan je na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 19 mg N-[(1S,2R)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
2 2
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.46 - 1.64 (m, 3 H), 1.69 - 1.88 (m, 2 H), 1.92 - 2.02 (m, 1 H), 3.99 - 4.09 (m, 2 H), 5.04 (d, 1 H), 7.51 (d, 2 H), 7.60 - 7.66 (m, 1 H), 8.07 - 8.14 (m, 2 H), 8.17 (ddd, 1 H), 8.67 - 8.71 (m, 2 H), 8.91 (d, 1 H), 9.68 (d, 1 H).
Primer 148
6-(4-Hlorofenil)-N-[(trans)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0832]
[0833] Rastvor 75 mg intermedijara 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 63 mg trans-2-aminociklopentanol hidrohlorida (1:1), 174 mg HATU, 0.16 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF mešan je na sobnoj temperaturi tokom 48 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 26 mg 6-(4-hlorofenil)-N-[(trans)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.39 - 1.56 (m, 2 H), 1.59 - 1.67 (m, 1 H), 1.67 - 1.75 (m, 1 H), 1.77 - 1.86 (m, 1 H), 2.03 - 2.13 (m, 1 H), 3.93 (quin, 1 H), 3.98 - 4.06 (m, 1 H), 4.94 (d, 1 H), 7.56 - 7.60 (m, 2 H), 7.63 (dd, 1 H), 7.98 - 8.03 (m, 2 H), 8.16 (ddd, 1 H), 8.65 (s, 1 H), 8.69 (dd, 1 H), 8.91 (d, 1 H), 9.31 (d, 1 H).
Primer 149
3-Okso-2-(piridin-3-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0834]
2
[0835] Rastvor 75 mg intermedijara 3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 68 mg 2-amino-3,3,3-trifluoropropan-1-ol hidrohlorida (1:1), 151 mg HATU, 0.14 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF mešani su na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Waters Autopurification MS SingleQuad; Kolona: Waters XBrigde C18 5µ 100x30 mm; eluent A: voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%), eluent B: acetonitril; gradijent: 0-5.5 min 5-100% B; protok 70 mL/min; temperatura: 25°C; DAD sken: 210-400 nm) da se dobije 46 mg 3-okso-2-(piridin-3-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 3.66 - 3.74 (m, 1 H), 3.79 - 3.85 (m, 1 H), 4.86 (dt, 1 H), 5.44 (t, 1 H), 7.52 (d, 2 H), 7.64 (dd, 1 H), 8.11 - 8.16 (m, 2 H), 8.16 - 8.21 (m, 1 H), 8.68 -8.72 (m, 1 H), 8.75 (s, 1 H), 8.92 (d, 1 H), 9.98 (d, 1 H).
Primer 150
N-[(1S)-1-Ciklopropil-2-hidroksietil]-6-[4-(difluorometil)fenil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0836]
[0837] Rastvor 85 mg intermedijara 6-[4-(difluorometil)fenil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 69 mg (2S)-2-aminociklopropiletan-1-ol hidrohlorida
2 4
(1:1), 190 mg HATU, 0.17 mL etildiizopropilamina i 1.5 mg 4-dimetilaminopiridina u 3 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 43 mg N-[(1S)-1-ciklopropil-2-hidroksietil]-6-[4-(difluorometil)fenil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 0.25 - 0.32 (m, 1 H), 0.32 - 0.39 (m, 1 H), 0.40 - 0.50 (m, 2 H), 1.03 - 1.13 (m, 1 H), 3.45 (tt, 1 H), 3.58 (tq, 2 H), 4.93 (t, 1 H), 7.13 (t, 1 H), 7.61 -7.66 (m, 1 H), 7.72 (d, 2 H), 8.13 (d, 2 H), 8.16 - 8.21 (m, 1 H), 8.70 (dd, 1 H), 8.72 (s, 1 H), 8.93 (d, 1 H), 9.53 (d, 1 H).
Primer 151
6-[4-(Difluorometil)fenil]-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0838]
[0839] Rastvor 65 mg intermedijara 6-[4-(difluorometil)fenil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 28 mg (2S)-2-amino-1-propanola, 144 mg HATU, 0.1 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 85% / B 15% → A 45% / B 55%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 14 mg 6-[4-(difluorometil)fenil]-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
2
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.17 (d, 3 H), 3.41 - 3.49 (m, 2 H), 3.99 - 4.09 (m, 1 H), 4.94 (t, 1 H), 7.13 (t, 1 H), 7.61 - 7.66 (m, 1 H), 7.72 (d, 2 H), 8.13 (d, 2 H), 8.15 - 8.19 (m, 1 H), 8.68 - 8.72 (m, 2 H), 8.92 (d, 1 H), 9.41 (d, 1 H).
Primer 152
N-[(2S)-1-Hidroksipropan-2-il]-6-(4-metilfenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0840]
[0841] Rastvor 17 mg intermedijara 6-(4-metilfenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 28 mg (2S)-2-amino-1-propanola, 43 mg HATU, 0.03 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 0.5 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%), eluent B: acetonitril; gradijent: A 85% / B 15% → A 45% / B 55%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 14 mg N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-6-(4-metilfenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.16 (d, 3 H), 2.37 (s, 3 H), 3.40 - 3.49 (m, 2 H), 3.99 - 4.08 (m, 1 H), 4.94 (t, 1 H), 7.34 (d, 2 H), 7.60 - 7.65 (m, 1 H), 7.86 (d, 2 H), 8.16 (ddd, 1 H), 8.64 (s, 1 H), 8.68 (dd, 1 H), 8.90 (d, 1 H), 9.44 (d, 1 H).
Primer 153
N-[(2S)-1-Hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0842]
2
[0843] Rastvor 75 mg intermedijara 3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 30 mg (S)-(+)-2-amino-1-propanola, 151 mg HATU, 0.14 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF mešani su na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Waters Autopurification MS SingleQuad; Kolona: Waters XBrigde C185µ 100x30 mm; eluent A: voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%), eluent B: acetonitril; gradijent: 0-5.5 min 5-100% B; protok 70 mL/min; temperatura: 25°C; DAD sken: 210-400 nm) da se dobije 54 mg N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.16 (d, 3 H), 3.42 - 3.50 (m, 2 H), 3.99 - 4.09 (m, 1 H), 4.95 (t, 1 H), 7.51 (d, 2 H), 7.63 (dd, 1 H), 8.09 - 8.14 (m, 2 H), 8.17 (ddd, 1 H), 8.67 - 8.71 (m, 2 H), 8.91 (d, 1 H), 9.41 (d, 1 H).
Primer 154
6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0844]
[0845] Rastvor 150 mg intermedijara 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 124 mg trans-4-aminotetrahidro-3-furanol hidrohlorida (1:1), 330 mg HATU, 0.23 mL etildiizopropilamina i 2.6 mg 4-dimetilaminopiridina u 3 mL
2
DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 48 sati. Zatim je dodata voda i talog je podvrgnut RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 55 mg 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.54 (dd, 1 H), 3.65 (dd, 1 H), 3.90 (dd, 1 H), 3.98 (dd, 1 H), 4.18 (dt, 1 H), 4.25 (td, 1 H), 5.49 (d, 1 H), 7.58 - 7.61 (m, 2 H), 8.01 - 8.06 (m, 2 H), 8.22 - 8.27 (m, 1 H), 8.65 (s, 1 H), 8.76 (d, 1 H), 8.85 (s, 1 H), 9.34 (d, 1 H).
Primer 155
6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 1
[0846]
[0847] HPLC-odvajanje 49 mg 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 154) na hiralnoj koloni (instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000, kolona: Chiralpak IB 5µ 250x30 mm; eluent A: metil tert.-butiletar 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 90%A+10%B; protok 40.0 mL/min; UV 254 nm) dalo je 14 mg 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 1.
Hiralna HPLC: Rt = 2.36 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IB 3µ 100x4,6 mm; eluent A: metil tert.-butiletar 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 90%A+10%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 254 nm).
[α]D<20>= - 21.2° (c = 1.00, DMSO).
2
Primer 156
6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 2
[0848]
[0849] HPLC-odvajanje 49 mg 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 154) na hiralnoj koloni (instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000, kolona: Chiralpak IB 5µ 250x30 mm; eluent A: metil tert.-butiletar 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 90%A+10%B; protok 40.0 mL/min; UV 254 nm) dalo je 11 mg 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 2.
Hiralna HPLC: Rt = 2.72 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IB 3µ 100x4,6 mm; eluent A: metil tert.-butiletar 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 90%A+10%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 254 nm).
[α]D<20>= 27.2° (c = 1.00, DMSO).
Primer 157
N-[(cis)-4-Hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0850]
2
[0851] Rastvor 200 mg intermedijara 3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 148 mg cis-4-aminotetrahidro-3-furanol hidrohlorida (1:1), 403 mg HATU, 0.37 mL etildiizopropilamina i 3 mg 4-dimetilaminopiridina u 4 mL DMF mešani su na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (HPLC (Instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 89 mg N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.45 (dd, 1 H), 3.61 (dd, 1 H), 3.93 (dd, 1 H), 4.01 (dd, 1 H), 4.24 - 4.31 (m, 1 H), 4.31 - 4.40 (m, 1 H), 5.69 (d, 1 H), 7.48 - 7.54 (m, 2 H), 7.64 (br dd, 1 H), 8.09 - 8.14 (m, 2 H), 8.17 (br d, 1 H), 8.71 (m, 2 H), 8.93 (br s, 1 H), 9.81 (d, 1 H).
Primer 158
N-[(cis)-4-Hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 1
[0852]
[0853] HPLC-odvajanje 89 mg N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 157) na hiralnoj koloni (instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000, kolona: Chiralpak ID 5µ 250x30 mm; eluent A: tert.-butil metil etar 0.1 vol-% dietilamina (99%); Eluent B: metanol; izokratski: 50%A 50%B; protok 50.0 mL/min; UV 254 nm) dalo je 18 mg N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 1.
Hiralna HPLC: Rt = 1.73 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak ID 3µ
2
100x4,6 mm; eluent A: tert.-butil metil etar 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: metanol; izokratski: 90%A+10%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 254 nm).
Primer 159
N-[(cis)-4-Hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 2
[0854]
[0855] HPLC-odvajanje 89 mg N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 157) na hiralnoj koloni (instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000, kolona: Chiralpak ID 5µ 250x30 mm; eluent A: tert.-butil metil etar 0.1 vol-% dietilamina (99%); Eluent B: metanol; izokratski: 50%A 50%B; protok 50.0 mL/min; UV 254 nm) dalo je 18 mg N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 2.
Hiralna HPLC: Rt = 2.58 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak ID 3µ 100x4,6 mm; eluent A: tert.-butil metil etar 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: metanol; izokratski: 90%A+10%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 254 nm).
Primer 160
N-[(trans)-4-Hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0856]
2 1
[0857] Rastvor 150 mg intermedijara 3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 113 mg trans-4-aminotetrahidro-3-furanol hidrohlorida (1:1), 302 mg HATU, 0.2 mL etildiizopropilamina i 2.5 mg 4-dimetilaminopiridina u 3 mL DMF mešani su na sobnoj temperaturi tokom 48 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (HPLC (Instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 56 mg N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.54 (dd, 1 H), 3.65 (dd, 1 H), 3.89 (dd, 1 H), 3.98 (dd, 1 H), 4.18 (br s, 1 H), 4.25 (td, 1 H), 5.50 (d, 1 H), 7.51 (d, 2 H), 7.63 (dd, 1 H), 8.08 - 8.14 (m, 2 H), 8.15 - 8.19 (m, 1 H), 8.66 (s, 1 H), 8.70 (br d, 1 H), 8.92 (br s, 1 H), 9.42 (d, 1 H).
Primer 161
N-[(trans)-4-Hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 1
[0858]
[0859] HPLC-odvajanje 49 mg N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-
2 2
il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 160) na hiralnoj koloni (instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000, kolona: Chiralpak IB 5µ 250x30 mm; eluent A: metil tert.-butiletar 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 90%A+10%B; protok 40.0 mL/min; UV 254 nm) dalo je 20 mg N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 1.
Hiralna HPLC: Rt = 2.37 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IB 3µ 100x4,6 mm; eluent A: tert.-butil metil etar 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 90%A+10%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 254 nm).
[α]D<20>= -30.1° (c = 1.00, MeOH).
Primer 162
N-[(trans)-4-Hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 2
[0860]
[0861] HPLC-odvajanje 49 mg N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 160) na hiralnoj koloni (instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000, kolona: Chiralpak IB 5µ 250x30 mm; eluent A: metil tert.-butiletar 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 90%A+10%B; protok 40.0 mL/min; UV 254 nm) dalo je 20 mg N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 2.
Hiralna HPLC: Rt = 2.94 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IB 3µ 100x4,6 mm; eluent A: tert.-butil metil etar 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 90%A+10%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 254 nm).
[α]D<20>= 30.5° (c = 1.00, MeOH).
2
Primer 163
6-(4-Hloro-2-fluorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0862]
[0863] Rastvor 75 mg intermedijara 6-(4-hloro-2-fluorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 32.5 mg (2S)-2-amino-1-propanola, 164 mg HATU, 0.15 mL etildiizopropilamina i 1.5 mg 4-dimetilaminopiridina u 3 mL DMF je mešan na 40°C tokom 4 sata. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 43 mg 6-(4-hloro-2-fluorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.15 (d, 3 H), 3.44 (br d, 2 H), 3.97 - 4.08 (m, 1 H), 7.45 (dd, 1 H), 7.63 (dd, 1 H), 7.69 (dd, 1 H), 7.86 (t, 1 H), 8.16 (dt, 1 H), 8.51 (d, 1 H), 8.69 (dd, 1 H), 8.91 (d, 1 H), 9.39 (d, 1 H).
Primer 164
3-(4-Hlorofenil)-N-[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksamid
[0864]
2 4
[0865] Rastvor 80 mg intermedijara 3-(4-hlorofenil)-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksilne kiseline, 66 mg (1R,2S)-2-aminocikloheksanol hidrohlorida (1:1), 185 mg HATU, 0.17 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 12 mg 3-(4-hlorofenil)-N-[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.34 (br d, 2 H), 1.48 - 1.73 (m, 6 H), 3.78 (br d, 1 H), 3.87 - 3.95 (m, 1 H), 4.91 (d, 1 H), 7.59 - 7.63 (m, 2 H), 8.04 - 8.10 (m, 2 H), 8.21 (dd, 1 H), 8.67 (s, 1 H), 9.45 (d, 1 H), 9.48 (dd, 1 H), 9.74 (dd, 1 H).
Primer 165
6-[6-(Difluorometil)piridin-3-il]-N-[(1S,2S)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0866]
[0867] Rastvor 75 mg intermedijara 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 60 mg (1S,2S)-2-aminociklopentanol hidrohlorida (1:1), 166 mg HATU, 0.15 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF
2
mešani su na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 85% / B 15% → A 45% / B 55%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 54 mg 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-N-[(1S,2S)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.39 - 1.56 (m, 2 H), 1.58 - 1.67 (m, 1 H), 1.67 - 1.76 (m, 1 H), 1.77 - 1.87 (m, 1 H), 2.03 - 2.15 (m, 1 H), 3.94 (quin, 1 H), 3.98 - 4.07 (m, 1 H), 4.95 (d, 1 H), 7.06 (t, 1 H), 7.62 - 7.67 (m, 1 H), 7.84 (d, 1 H), 8.19 (ddd, 1 H), 8.58 (dd, 1 H), 8.70 (dd, 1 H), 8.76 (s, 1 H), 8.94 (d, 1 H), 9.24 - 9.29 (m, 2 H).
Primer 166
N-[(2S)-1-Hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0868]
[0869] Rastvor N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (48 mg, 140 µmol) i 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridina (CAS No. [329214-79-1]; 2.0 eq, 57 mg, 279 µmol) u DMF (5 mL) pod argonom je tretiran sa 2,2'-bipiridinom (CAS No. [366-18-7]; 2.5 eq, 55 mg, 349 µmol), natrijum hidrogen karbonatom (2.0 eq, 30 mg, 279 µmol) i bakar acetatom (1.3 eq, 32 mg, 175 µmol) i mešan na sobnoj temperaturi tri dana. Reakciona smeša je razblažena sa vodom (2 mL), podešena na pH 3 sa 2 M vodenom rastvorom hlorovodonične kiseline i podvrgnuta preparativnoj HPLC reverzne faze praćeno sa liofilizacijom dajući jedinjenje iz naslova (7 mg).
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.17 (d, 3H), 3.42 - 3.49 (m, 2H), 4.00 - 4.10 (m, 1H), 4.95 (br s, 1H), 7.65 (dd, 1H), 8.05 (d, 1H), 8.20 (ddd, 1H), 8.67 (dd, 1H), 8.71 (dd, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.95 (d, 1H), 9.35 - 9.37 (m, 2H).
2
Primer 167
3-(4-Hlorofenil)-N-[(1S,2R)-2-hidroksicydopenty)]-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksamid
[0870]
[0871] Rastvor 65 mg intermedijara 3-(4-hlorofenil)-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksilne kiseline, 54 mg (1R,2S)-2-aminociklopentanol-hidrohlorida (1:1), 150 mg HATU, 0.14 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 12 mg 3-(4-hlorofenil)-N-[(1S,2R)-2-hidroksiciklopentil]-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.47 - 1.66 (m, 3 H), 1.70 - 1.89 (m, 2 H), 1.94 - 2.04 (m, 1 H), 4.00 - 4.12 (m, 2 H), 5.08 (d, 1 H), 7.58 - 7.63 (m, 2 H), 8.06 - 8.10 (m, 2 H), 8.21 (dd, 1 H), 8.68 (s, 1 H), 9.48 (dd, 1 H), 9.53 (d, 1 H), 9.74 (dd, 1 H).
Primer 168
6-(4-Hlorofenil)-N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0872]
2
[0873] Rastvor 150 mg intermedijara 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 130 mg trans-4-aminotetrahidro-3-furanol hidrohlorida (1:1), 348 mg HATU, 0.24 mL etildiizopropilamina i 2.8 mg 4-dimetilaminopiridina u 3.5 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 48 sati. Zatim je dodata voda i talog je podvrgnut RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 85% / B 15% → A 45% / B 55%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 68 mg 6-(4-hlorofenil)-N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.54 (dd, 1 H), 3.64 (dd, 1 H), 3.89 (dd, 1 H), 3.98 (dd, 1 H), 4.17 (tt, 1 H), 4.25 (tt, 1 H), 5.49 (d, 1 H), 7.56 - 7.61 (m, 2 H), 7.61 - 7.65 (m, 1 H), 7.99 - 8.03 (m, 2 H), 8.16 (ddd, 1 H), 8.65 (s, 1 H), 8.69 (dd, 1 H), 8.91 (d, 1 H), 9.42 (d, 1 H).
Primer 169
6-(4-Hlorofenil)-N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 1
[0874]
[0875] HPLC-odvajanje 61 mg rac-6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 168) na hiralnoj koloni (instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario
2
4000, kolona: Chiralpak IB 5µ 250x30 mm; eluent A: metil tert.-butiletar 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 90%A+10%B; protok 50.0 mL/min; UV 254 nm) dalo je 19 mg 6-(4-hlorofenil)-N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 1.
Hiralna HPLC: Rt = 2.36 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IB 3µ 100x4,6 mm; eluent A: metil tert.-butiletar 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 90%A+10%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 254 nm).
[α]D<20>= - 29.4° (c = 1.00, MeOH).
Primer 170
6-(4-Hlorofenil)-N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 2
[0876]
[0877] HPLC-odvajanje 49 mg rac-6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 168) na hiralnoj koloni (instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000, kolona: Chiralpak IB 5µ 250x30 mm; eluent A: metil tert.-butiletar 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 90%A+10%B; protok 50.0 mL/min; UV 254 nm) dalo je 20 mg 6-(4-hlorofenil)-N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 2.
Hiralna HPLC: Rt = 2.72 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IB 3µ 100x4,6 mm; eluent A: metil tert.-butiletar 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 90%A+10%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 254 nm).
[α]D<20>= 30.2° (c = 1.00, MeOH).
Primer 171
6-(4-Hlorofenil)-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-
2
dihidropiridazin-4-karboksamid
[0878]
[0879] Rastvor 75 mg intermedijara 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 64 mg cis-4-aminotetrahidro-3-furanol hidrohlorida (1:1), 174 mg HATU, 0.16 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 48 sati. Zatim je dodata voda i talog je podvrgnut RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 31 mg 6-(4-hlorofenil)-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.45 (t, 1 H), 3.61 (dd, 1 H), 3.93 (dd, 1 H), 4.01 (dd, 1 H), 4.24 - 4.29 (m, 1 H), 4.31 - 4.40 (m, 1 H), 5.68 (d, 1 H), 7.57 - 7.61 (m, 2 H), 7.61 - 7.65 (m, 1 H), 8.00 - 8.03 (m, 2 H), 8.15 - 8.18 (m, 1 H), 8.67 - 8.73 (m, 2 H), 8.91 (d, 1 H), 9.81 (d, 1 H).
Primer 172
6-(4-Hlorofenil)-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 1
[0880]
2
[0881] HPLC-odvajanje 25 mg rac-6-(4-hlorofenil)-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 171) na hiralnoj koloni (instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000, kolona: Chiralpak IA 5µ 250x30 mm; eluent A: acetonitril 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 90%A+10%B; protok 50.0 mL/min; UV 254 nm) dalo je 5 mg 6-(4-hlorofenil)-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 1.
Hiralna HPLC: Rt = 2.46 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IA 3µ 100x4,6 mm; eluent A: acetonitril 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 90%A+10%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 254 nm).
Primer 173
6-(4-Hlorofenil)-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 2
[0882]
[0883] HPLC-odvajanje 25 mg 6-(4-hlorofenil)-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 171) na hiralnoj koloni (instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000, kolona: Chiralpak IA 5µ 250x30 mm; eluent A: acetonitril 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 90%A+10%B; protok 50.0 mL/min; UV 254 nm) dalo je 5 mg 6-(4-hlorofenil)-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 2.
Hiralna HPLC: Rt = 3.63 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IA 3µ 100x4,6 mm; eluent A: acetonitril 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: etanol; izokratski: 90%A+10%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 254 nm).
Primer 174
2 1
3-(4-Hlorofenil)-N-[(1S,2S)-2-hidroksiciklopentil]-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksamid
[0884]
[0885] Rastvor 65 mg intermedijara 3-(4-hlorofenil)-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksilne kiseline, 54 mg (1S,2S)-2-aminociklopentanol hidrohlorida (1:1), 150 mg HATU, 0.14 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 85% / B 15% → A 45% / B 55%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 14 mg 3-(4-hlorofenil)-N-[(1S,2S)-2-hidroksiciklopentil]-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.41 - 1.57 (m, 2 H), 1.60 - 1.76 (m, 2 H), 1.79 - 1.88 (m, 1 H), 2.07 - 2.14 (m, 1 H), 3.90 - 3.98 (m, 1 H), 3.98 - 4.06 (m, 1 H), 4.95 (d, 1 H), 7.59 -7.64 (m, 2 H), 8.05 - 8.11 (m, 2 H), 8.22 (dd, 1 H), 8.63 (s, 1 H), 9.10 (d, 1 H), 9.48 (dd, 1 H), 9.75 (dd, 1 H).
Primer 175
1,5-Anhidro-2-({[6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-il]karbonil}amino)-2,4-dideoksi-D-eritro-pentitol
[0886]
2 2
[0887] Rastvor 75 mg intermedijara 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 73 mg (3S,4R)-3-aminooksan-4-ol hidrohlorida (1:1), 174 mg HATU, 0.16 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je dodata voda i talog je podvrgnut RP-HPLC (instrument: Waters Autopurification MS SingleQuad; Kolona: Waters XBrigde C185µ 100x30 mm; eluent A: voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%), eluent B: acetonitril; gradijent: 0-5.5 min 5-100% B; protok 70 mL/min; temperatura: 25°C; DAD sken: 210-400 nm) da se dobije 43 mg 1,5-anhidro-2-({[6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-il]karbonil} amino)-2,4-dideoksi-D-eritro-pentitola.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.57 - 1.65 (m, 1 H), 1.72 - 1.81 (m, 1 H), 3.47 - 3.54 (m, 1 H), 3.56 (d, 2 H), 3.64 - 3.73 (m, 1 H), 3.88 - 3.95 (m, 1 H), 4.02 - 4.12 (m, 1 H), 5.23 (br s, 1 H), 7.56 - 7.61 (m, 2 H), 7.64 (dd, 1 H), 7.98 - 8.03 (m, 2 H), 8.14 - 8.19 (m, 1 H), 8.68 -8.71 (m, 2 H), 8.91 (s, 1 H), 9.66 (d, 1 H).
[α]D<20>= 41.9° (c = 1.00, DMSO).
Primer 176
1,5-Anhidro-2,4-dideoksi-2-[({3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-il}karbonil)amino]-D-eritro-pentitol
[0888]
[0889] Rastvor 75 mg intermedijara 3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 64 mg (3S,4R)-3-aminooksan-4-ol hidrohlorida (1:1), 151 mg HATU, 0.1 mL etildiizopropilamina i 2 mg 4-dimetilaminopiridina u 1.5 mL DMF mešani su na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (HPLC (Instrument: Waters Autopurification MS SingleQuad; Kolona: Waters XBrigde C18 5µ 100x30 mm; eluent A: voda 0.1 vol. % mravlje kiseline (99%), eluent B:
2
acetonitril; gradijent: 0-5.5 min 5-100% B; protok 70 mL/min; temperatura: 25°C; DAD sken: 210-400 nm) da se dobije 26 mg 1,5-anhidro-2,4-dideoksi-2-[({3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-il}karbonil)amino]-D-eritro-pentitola.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.57 - 1.66 (m, 1 H), 1.77 (td, 1 H), 3.47 - 3.53 (m, 1 H), 3.56 (d, 2 H), 3.65 - 3.73 (m, 1 H), 3.92 (dq, 1 H), 4.03 - 4.11 (m, 1 H), 5.23 (d, 1 H), 7.51 (d, 2 H), 7.64 (dd, 1 H), 8.08 - 8.13 (m, 2 H), 8.15 - 8.19 (m, 1 H), 8.67 - 8.72 (m, 2 H), 8.91 (s, 1 H), 9.66 (d, 1 H).
Primer 177
3-(4-Hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksamid
[0890]
[0891] Rastvor 65 mg intermedijara 3-(4-hlorofenil)-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksilne kiseline, 30 mg (2S)-2-aminopropan-1-ola, 150 mg HATU, 0.14 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati i na 50°C tokom 1 h. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 85% / B 15% → A 45% / B 55%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 4 mg 3-(4-hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.17 (d, 3 H), 3.42 - 3.50 (m, 2 H), 3.99 - 4.09 (m, 1 H), 4.96 (t, 1 H), 7.58 - 7.64 (m, 2 H), 8.07 - 8.11 (m, 2 H), 8.22 (dd, 1 H), 8.66 (s, 1 H), 9.23 (d, 1 H), 9.48 (dd, 1 H), 9.75 (dd, 1 H).
Primer 178
3-(4-Hlorofenil)-N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksamid
2 4
[0893] Rastvor 80 mg intermedijara 3-(4-hlorofenil)-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksilne kiseline, 43 mg 1-amino-2-metilpropan-2-ola, 185 mg HATU, 0.17 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 2 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati i na 50°C tokom 1 h. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 85% / B 15% → A 45% / B 55%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 28 mg 3-(4-hlorofenil)-N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.14 (s, 6 H), 3.32 (s, 2 H), 4.70 (s, 1 H), 7.58 - 7.63 (m, 2 H), 8.06 - 8.11 (m, 2 H), 8.22 (dd, 1 H), 8.68 (s, 1 H), 9.34 (t, 1 H), 9.48 (dd, 1 H), 9.75 (dd, 1 H).
Primer 179
6-(4-Cijanofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0894]
[0895] Rastvor 150 mg intermedijara 6-(4-cijanofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 71 mg (2S)-2-aminopropan-1-ola, 358 mg HATU, 0.33
2
mL etildiizopropilamina i 3 mg 4-dimetilaminopiridina u 6 mL DMF je mešan na 40°C tokom 4 sata. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 85% / B 15% → A 45% / B 55%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 15 mg 6-(4-cijanofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.16 (d, 3 H), 3.41 - 3.50 (m, 2 H), 3.99 - 4.09 (m, 1 H), 4.94 (t, 1 H), 7.61 - 7.66 (m, 1 H), 7.97 - 8.01 (m, 2 H), 8.16 - 8.22 (m, 3 H), 8.70 (dd, 1 H), 8.73 (s, 1 H), 8.92 (d, 1 H), 9.37 (d, 1 H).
Primer 180
6-[6-(Difluorometil)piridin-3-il]-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0896]
[0897] Rastvor 85 mg intermedijara 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 37 mg (2S)-2-aminopropan-1-ola, 188 mg HATU, 0.17 mL etildiizopropilamina i 1.5 mg 4-dimetilaminopiridina u 3 mL DMF mešani su na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18 125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 85% / B 15% → A 45% / B 55%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 40 mg 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.17 (d, 3 H), 3.40 - 3.50 (m, 2 H), 3.99 - 4.10 (m, 1 H), 4.95 (t, 1 H), 7.06 (t, 1 H), 7.61 - 7.66 (m, 1 H), 7.84 (d, 1 H), 8.16 - 8.21 (m, 1 H), 8.58 (dd, 1 H), 8.70 (dd, 1 H), 8.78 (s, 1 H), 8.94 (d, 1 H), 9.27 (d, 1 H), 9.37 (d, 1 H).
2
Primer 181
3-(4-Hlorofenil)-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksamid
[0898]
[0899] Rastvor 125 mg intermedijara 3-(4-hlorofenil)-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksilne kiseline, 106 mg cis-4-aminotetrahidro-3-furanol hidrohlorida, 289 mg HATU, 0.19 mL etildiizopropilamina i 3 mg 4-dimetilaminopiridina u 3 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati i na 50°C tokom 1 h. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1 % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 85% / B 15% → A 45% / B 55%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 17 mg 3-(4-hlorofenil)-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.47 (dd, 1 H), 3.63 (dd, 1 H), 3.94 (dd, 1 H), 4.02 (dd, 1 H), 4.29 (ddt, 1 H), 4.32 - 4.41 (m, 1 H), 5.73 (d, 1 H), 7.58 - 7.63 (m, 2 H), 8.05 - 8.10 (m, 2 H), 8.22 (dd, 1 H), 8.70 (s, 1 H), 9.48 (dd, 1 H), 9.66 (d, 1 H), 9.74 (dd, 1 H).
Primer 182
6-[6-(Difluorometil)piridin-3-il]-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0900]
2
[0901] Rastvor 125 mg intermedijara 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 101 mg cis-4-aminotetrahidro-3-furanol hidrohlorida (1:1), 276 mg HATU, 0.25 mL etildiizopropilamina i 2 mg 4-dimetilaminopiridina u 3 mL DMF mešani su na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%), eluent B: acetonitril; gradijent: A 85% / B 15% → A 45% / B 55%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 86 mg 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 3.46 (t, 1 H), 3.61 (dd, 1 H), 3.93 (dd, 1 H), 4.02 (dd, 1 H), 4.25 - 4.31 (m, 1 H), 4.32 - 4.40 (m, 1 H), 5.70 (d, 1 H), 7.06 (t, 1 H), 7.62 - 7.67 (m, 1 H), 7.84 (d, 1 H), 8.19 (ddd, 1 H), 8.58 (dd, 1 H), 8.71 (dd, 1 H), 8.81 (s, 1 H), 8.94 (d, 1 H), 9.28 (d, 1 H), 9.78 (d, 1 H).
Primer 183
6-[6-(Difluorometil)piridin-3-il]-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 1
[0902]
[0903] HPLC-odvajanje 81 mg 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-N-[(cis)-4-
2
hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 182) na hiralnoj koloni (instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000, kolona: Amilose SA 5µ 250x30 mm; eluent A: acetonitril 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: metanol 0.1 vol-% dietilamina (99%); izokratski: 50%A+50%B; protok 50.0 mL/min; UV 254 nm) dalo je 35 mg 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 1.
Hiralna HPLC: Rt = 1.33 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Amilose SA 3µ 100x4,6 mm; eluent A: acetonitril 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: metanol; izokratski: 50%A+50%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 254 nm).
Primer 184
6-[6-(Difluorometil)piridin-3-il]-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 2
[0904]
[0905] HPLC-odvajanje 81 mg 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 182) na hiralnoj koloni (instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000, kolona: Amilose SA 5µ 250x30 mm; eluent A: acetonitril 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: metanol 0.1 vol-% dietilamina (99%); izokratski: 50%A+50%B; protok 50.0 mL/min; UV 254 nm) dalo je 35 mg 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 2.
Hiralna HPLC: Rt = 1.74 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Amilose SA 3µ 100x4,6 mm; eluent A: acetonitril 0.1 vol-% dietilamina (99%); eluent B: metanol; izokratski: 50%A+50%B; protok 1.4 mL/min; temperatura: 25°C; DAD 254 nm).
2
Primer 185
6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(pirimidin-5-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0906]
[0907] Rastvor 130 mg intermedijara 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(pirimidin-5-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 153 mg 3-amino-4,4,4-trifluoro-2-metilbutan-2-ol hidrohlorida, 301 mg HATU, 0.21 mL etildiizopropilamina i 3.6 mg 4-dimetilaminopiridina u 3 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1vol. % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 85% / B 15% → A 45% / B 55%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 20 mg 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(pirimidin-5-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.19 (s, 3 H), 1.35 (s, 3 H), 4.60 - 4.73 (m, 1 H), 5.23 (s, 1 H), 7.57 - 7.63 (m, 2 H), 8.08 (d, 2 H), 8.75 (s, 1 H), 9.26 (s, 2 H), 9.31 (s, 1 H), 9.90 (d, 1 H).
Primer 186
6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(pirimidin-5-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 1
[0908]
2
[0909] HPLC-odvajanje 17 mg 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(pirimidin-5-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 185) na hiralnoj koloni (instrument: Sepiatec: Prep SFC100; kolona: Chiralpak IB 5µm 250x30 mm; eluent A: CO2, eluent B: izopropanol; izokratski: 30%B; protok 100.0 mL/min; temperatura: 40°C; BPR: 150bar; MWD @ 254 nm) dalo je 4 mg 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(pirimidin-5-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 1. Hiralna HPLC: Rt = 1.62 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IB 5µm 100x4.6 mm; eluent A: CO2; eluent B: etanol; izokratski: 80%A+20%B; protok 4.0 mL/min; temperatura: 37.5°C; BPR: 100 bar; MWD @ 254 nm).
Primer 187
6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(pirimidin-5-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 2
[0910]
[0911] HPLC-odvajanje 17 mg 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(pirimidin-5-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida (primer 185) na hiralnoj koloni (instrument: Sepiatec: Prep SFC100; kolona: Chiralpak IB 5µm 250x30 mm; eluent A: CO2, eluent B: izopropanol; izokratski: 30%B; protok 100.0 mL/min; temperatura: 40°C; BPR: 150bar; MWD @ 254 nm) dalo je 4 mg 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(pirimidin-5-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida, enantiomer 2. Hiralna HPLC:
2 1
Rt = 3.68 min (instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IB 5µm 100x4.6 mm; eluent A: CO2; eluent B: etanol; izokratski: 80%A+20%B; protok 4.0 mL/min; temperatura: 37.5°C; BPR: 100 bar; MWD @ 254 nm).
Primer 188
N-[(1-Hidroksiciklopropil)metil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0912]
[0913] 3-Okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (100 mg, 0.28 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (2.0 mL). Sukcesivno su dodavani 1-(aminometil)ciklopropanol (48.2 mg, 0.55 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (217 µL, 1.25 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 243 µL, 50% u DMF, 416 µmol). Ovo je mešano tokom 3 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom i prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) dajući 67 mg (51%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 0.52 - 0.57 (m, 2H), 0.59 - 0.64 (m, 2H), 3.47 (d, 2H), 5.52 (s, 1H), 7.65 (ddd, 1H), 7.89 (d, 2H), 8.17 - 8.24 (m, 3H), 8.71 (dd, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.94 (dd, 1H), 9.58 (t, 1H).
Primer 189
N-[(1-Hidroksiciklobutil)metil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0914]
2 2
[0915] 3-Okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (100 mg, 0.28 mmol) je rastvorena u anhidrovanom DMF (2.0 mL). Sukcesivno su dodavani 1-(Aminometil)ciklobutanol (59.0 mg, 0.55 mmol), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (217 µL, 1.25 mmol), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 243 µL, 50% u DMF, 416 µmol). Ovo je mešano tokom 3 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom i prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C185µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) dajući 81 mg (66%) naslovnog jedinjenja.
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.44 - 1.57 (m, 1H), 1.59 - 1.68 (m, 1H), 1.92 - 2.00 (m, 4H), 3.49 (d, 2H), 5.41 (s, 1H), 7.64 (ddd, 1H), 7.89 (d, 2H), 8.16 - 8.24 (m, 3H), 8.70 (dd, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.92 (d, 1H), 9.49 (t, 1H).
Primer 190
(+)-6-(4-Hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(1H-pirazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0916]
[0917] 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(1H-pirazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (75 mg) je rastvorena u anhidrovanom DMF (2 mL). Sukcesivno su dodavani (2S)-2-aminopropan-1-ol (36 mg), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.186 mL), i anhidrid propan
2
fosfonske kiseline (T3P, 207 µL, 50% u DMF). Ovo je mešano 1 h na sobnoj temperaturi.
[0918] Sirova reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C18 5µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 46 mg naslovnog jedinjenja
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.19 (d, 3H), 3.42 - 3.52 (m, 2H), 4.00 - 4.11 (m, 1H), 4.96 (br s, 1H), 7.57 - 7.62 (m, 2H), 8.07 - 8.13 (m, 2H), 8.14 - 8.55 (m, 2H), 8.59 (s, 1H), 9.52 (d, 1H), 13.24 (br s, 1H).
[α]D<20>= 18.4° (c = 1.00, metanol).
Primer 191
6-[4-(Dimetilamino)fenil]-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0919]
[0920] 6-[4-(Dimetilamino)fenil]-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid (14 mg) je rastvoren u DMF (0.6 mL). Dodati su piridin-3-il boronska kiselina (11 mg), 2,2'-bipiridin (35 mg), natrijum karbonat (5.6 mg), i anhidrovani bakar diacetat (20 mg). Reakciona smeša je mešana tokom 14 h na 80°C, ohlađena i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1 % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 85% / B 15% → A 45% / B 55%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 5 mg 6-[4-(dimetilamino)fenil]-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.16 (d, 3 H), 2.98 (s, 6 H), 3.39 - 3.49 (m, 2 H), 3.97 - 4.09 (m, 1 H), 4.93 (t, 1 H), 6.78 - 6.83 (m, 2 H), 7.58 - 7.64 (m, 1 H), 7.75 - 7.81 (m, 2 H), 8.14 (ddd, 1 H), 8.59 (s, 1 H), 8.67 (dd, 1 H), 8.89 (d, 1 H), 9.49 (d, 1 H).
2 4
Primer 192
6-(4-Hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0921]
[0922] Rastvor 94 mg intermedijara 6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 43 mg (2S)-2-amino-1-propanola, 216 mg HATU, 0.20 mL etildiizopropilamina i 2 mg 4-dimetilaminopiridina u 4 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1 % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 70% / B 30% → A 30% / B 70%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 62 mg 6-(4-hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 1.16 (d, 3 H), 3.40 - 3.48 (m, 2 H), 3.91 (s, 3 H), 3.98 - 4.08 (m, 1 H), 4.93 (t, 1 H), 6.57 (d, 1 H), 7.55 - 7.60 (m, 2 H), 7.86 (d, 1 H), 7.92 - 7.98 (m, 2 H), 8.62 (s, 1 H), 9.41 (d, 1 H).
Primer 193
6-(4-Hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-2-(3-metil-1H-pirazol-5-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0923]
2
[0924] Rastvor 75 mg intermedijara 6-(4-hlorofenil)-2-(3-metil-1H-pirazol-5-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilne kiseline, 34 mg (2S)-2-amino-1-propanola, 172 mg HATU, 0.16 mL etildiizopropilamina i 1 mg 4-dimetilaminopiridina u 4 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Zatim je reakciona smeša filtrirana i podvrgnuta RP-HPLC (instrument: Labomatic HD-3000 HPLC gradijent pumpa, Labomatic Labocol Vario-2000 sakupljač frakcija; kolona: Chromatorex C-18125 mm x 30 mm, eluent A: 0.1 % mravlje kiseline u vodi, eluent B: acetonitril; gradijent: A 85% / B 15% → A 45% / B 55%; protok: 150 mL/min; UV detekcija: 254 nm) da se dobije 44 mg 6-(4-hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-2-(3-metil-1H-pirazol-5-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamida.
δ [ppm] = 1.16 (d, 3H), 2.31 (s, 3H), 3.40 - 3.49 (m, 2H), 3.97 -<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): 4.08 (m, 1H), 4.93 (t, 1H), 6.33 (d, 1H), 7.55 - 7.60 (m, 2H), 7.95 (d, 2H), 8.61 (s, 1H), 9.45 (d, 1H), 12.85 (s, 1H).
Primer 194
(+)-6-(4-Hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid
[0925]
[0926] 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksilna kiselina (70 mg) je rastvorena u anhidrovanom DMF (2 mL). Sukcesivno su dodavani (2S)-2-aminopropan-1-ol (31.5 mg), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.164 mL), i anhidrid propan fosfonske kiseline (T3P, 184 µL, 50% u DMF). Ovo je mešano 2 sata na sobnoj temperaturi.
[0927] Sirova reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i prečišćena sa RP-HPLC (kolona: X-Bridge C18 5µm 100x30 mm, mobilna faza: (gradijent voda 0.2 vol. % vodenog rastvora amonijaka (32%)) / acetonitril) da se dobije 47 mg naslovnog jedinjenja
<1>H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1.18 (d, 3H), 3.42 - 3.52 (m, 2H), 3.99 - 4.10 (m, 1H),
2
4.97 (t, 1H), 7.58 - 7.63 (m, 2H), 8.07 - 8.12 (m, 2H), 8.64 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 9.39 (d, 1H), 9.61 (s, 1H).
[α]D<20>= 9.55° (c = 1.00, DMSO).
[0928] Sledeći primeri su pripremljeni od polaznih materijala navedenih u tabeli primenom postupka opisanog u primeru 107 ili 127. Enantiomeri su odvojeni od njihovih racemata hiralnom HPLC korišćenjem navedenih kolona i rastvarača.
Tabela 2: Primeri 195 - 345
2
2
2
2
21
22
2
24
2
2
2
2
2
1
2
4
1
11
12
1
14
1
1
1
1
1
2
21
22
2
24
2
2
2
2
2
1
2
4
Opis slika
[0929]
Fig. 1 opisuje spisak sekvenci lakog lanca TPP-3911 antitela (anti-PD-L1-mlgG1 Kappa_RG7446chimera|light_chain|pTT5-anti-PD-L1-huVH-mulgG1-CH1-CH3-kapa-himera) Fig. 2 opisuje spisak sekvenci teškog lanca TPP-3911 antitela (anti-PD-L1-mlgG1Kappa_RG7446chimera|heavy_chain|pTT5-anti-PD-L1-huVH-mulgG1-CH1-CH3-kapa-himera
EKPERIMENTALNI DEO - BIOLOŠKI TESTOVI
[0930] Primeri su testirani u odabranim biološkim testovima jedan ili više puta. Kada se testiraju više puta, podaci se prikazuju ili kao prosečne vrednosti ili kao srednje vrednosti, pri čemu prosečna vrednost, koja se naziva i aritmetička srednja vrednost, predstavlja zbir dobijenih vrednosti podeljen brojem testiranih puta, i medijalna vrednost predstavlja srednji broj grupe vrednosti kada je rangirana u rastućem ili opadajućem redosledu. Ako je broj vrednosti u skupu podataka neparan, medijana je srednja vrednost. Ako je broj vrednosti u skupu podataka paran, medijana je aritmetička sredina dve srednje vrednosti.
[0931] Primeri su sintetizovani jedan ili više puta. Kada se sintetišu više puta, podaci iz bioloških testova predstavljaju prosečne vrednosti ili srednje vrednosti izračunate pomoću skupova podataka dobijenih ispitivanjem jedne ili više sintetičkih serija.
[0932] In vitro aktivnost jedinjenja iz predmetnog pronalaska može se pokazati u sledećim testovima:
Analiza transaktivacije u ljudskoj ćelijskoj liniji (in vitro testovi 1 i 2)
[0933] Analize transaktivacije su izvedene u ćelijama glioblastoma U87 (ATCC) koje endogeno eksprimiraju AHR. Pored toga, ćelije su stabilno transfektovane sa AHR inducibilnim genskim konstruktorom luciferaze svitca koji nosi AHR vezujuća mesta (DRE) u svom promotoru i genskim konstruktom renilnog reportera sa konstitutivno aktivnim promotorom. Kinurenska kiselina je endogeni AHR aktivirajući ligand i korišćen je za pred stimulaciju testiranih ćelija pre ispitivanja antagonističkih karakteristika jedinjenja.
In vitro test 1: Antagonizam u ljudskoj ćelijskoj liniji
[0934] Ćelije u medijumu (RPMI bez triptofana, 1% FCS, 2mM glutamina) dopunjene sa 150uM
4
kinurenske kiseline, gajene su 20 sati u odsustvu (negativna kontrola) ili u prisustvu rastućih koncentracija ispitivanih jedinjenja (tipična razblaženja: 72 pmol/L, 0.25 nmol/L, 0.89 nmol/L; 3.1 nmol/L, 11 nmol/L, 38 nmol/L, 130 nmol/L, 470 nmol/L, 1.6 µmol/L, 5.7 µmol/L i 20 µmol/L u duplikatima). Kako su pozitivne inhibicije kontrolnih ćelija dopunjene sa 150 µM kinurenske kiseline inkubirane u prisustvu 5 µM Staurosporina. Normalizacija je vršena sa pozitivnom i negativnom kontrolom.
[0935] Aktivnost luciferaze svitca i renila određena je sistemom za ispitivanje luciferaze DualGlo (Promega, #2920). Aktivnost renila korišćena je za procenu toksičnih efekata jedinjenja.
In vitro test 2: Agonizam u ljudskoj ćelijskoj liniji
[0936] Ćelije u medijumu (RPMI bez triptofana, 1% FCS, 2mM glutamina) su gajene 20 sati u odsustvu (negativna kontrola) ili u prisustvu rastućih koncentracija ispitivanih jedinjenja (tipična razblaženja: 72 pmol/L, 0.25 nmol/L, 0.89 nmol/L; 3.1 nmol/L, 11 nmol/L, 38 nmol/L, 130 nmol/L, 470 nmol/L, 1.6 µmol/L, 5.7 µmol/L i 20 µmol/L u duplikatima). Kako su pozitivne aktivacije kontrolnih ćelija inkubirane sa 300 µM kinurenske kiseline. Normalizacija je vršena sa pozitivnom i negativnom kontrolom.
[0937] Aktivnost luciferaze svica određena je pomoću sistema za ispitivanje luciferaze SteadyGlo (Promega, #2520).
In vitro test 3: AHR-regulisana ekspresija CYP1A1 u ljudskoj ćelijskoj liniji
[0938] Da bi se procenila AHR inhibitorna aktivnost supstanci opisanih u ovoj prijavi, kvantifikovana je njihova sposobnost da se antagonizuje ligandom indukovana regulacija AHR gena na način koji zavisi od doze. U tu svrhu korišćena je kvantitativna PCR analiza za određivanje ekspresije AHR regulisanog gena CIP1A1 u ljudskoj monocitnoj ćelijskoj liniji U937 nakon stimulacije sa 200 uM KA u prisustvu i odsustvu AHR inhibitora. Ćelije U937 su posejane u koncentraciji od 2x10<5>ćelija/bunariću u 100 µl medijuma za rast (RPMI 1640, 20%FCS) u mikrotitarske ploče sa 96 bunarića. Ekspresija CIP1A1 je indukovana sa 200 uM KA (pozitivna kontrola) u prisustvu ili odsustvu supstanci tokom 6 sati. Ljudske ćelije U937 su obično inkubirane sa osam različitih koncentracija supstanci (1 nM, 3 nM, 10 nM, 30 nM, 100 nM, 300 nM, 1 uM i 3 uM) i analizirane u duplikatu na istoj mikrotitarskoj ploči. Posle stimulacije, ćelije su lizirane rastvorom za liziranje nukleinske kiseline (# 4305895, Applied Biosystems) i RNA je izolovana upotrebom 6100 stanice za pripremu nukleinske kiseline
41
(Applied Biosystems) i reverzno transkribovane u cDNK pomoću SuperScript VILO cDNK kompleta za sintezu (# 11754-250, Invitrogen). Nestimulisane ćelije su korišćene kao negativna kontrola. Takmanove sonde za humani CYP1A1 (Hs01054797_g1) i humani HPRT (Hs02800695_m1) korišćene su za analizu ekspresije CYP1A1 od HPRT. Kvantifikacija je izvršena na Takman SDS7900HT.
Tabela 3: IC50 vrednosti za Primere u in vitro testovima 1 - 3
42
4
44
4
4
4
4
4
1
2
In vitro test 4: Spasavanje proizvodnje TNFα iz ljudskih primarnih monocita
[0939] Utvrđena je sposobnost supstanci da pojačavaju aktivnost imunih ćelija. Supstance su testirane na njihovu sposobnost da preokrenu inhibiciju stvaranja TNFα izazvanu sa KA pomoću LPS-stimulisanih ljudskih monocita. Ljudski monociti su prečišćeni negativnom selekcijom od donatorskih PBMC, koristeći Miltenyi zrnca i posejana u količini 2x10<5>ćelija/bunariću u potpunom medijumu za rast (RPMI 1640, 10% FCS). Monociti su inkubirani sa 10 ng/mL LPS (O127:B8, #L4516, Sigma) i 200uM KA (#3375, Sigma) i supstance su dodate u koncentracijama od 1 uM, 0.3 uM i 0.1 uM i kultivisane tokom 18 sati. Sam LPS je služio kao pozitivna kontrola. Proizvodnja TNFα u supernatantu izmerena je imunološkim testom Meso Scale Discovery i sposobnost supstanci da spase proizvodnju TNFα izračunata je kao procenat LPS stimulacije i inhibicije indukovane sa KA i normalizovana na odgovor specifičan za donore sa referentnim jedinjenjem antagonista AHR GNF-351 (Smith i sar., J Pharmacol Exp Ther, 2011, 338(1):318-27). Tabela 4 prikazuje najveći procenat spasavanja TNFα u poređenju sa najvećim procentom spasavanja sa GNF-351 (primećen pretežno na 0.3 i 0.1uM) i koncentraciji pri kojoj je primećeno najveće spasavanje sa ispitivanim jedinjenjem.
Table 4: Ljudski monociti: efikasnost izabranih primera u in vitro testu 4
4
In vivo test: efikasnost kompozicija koje sadrže primer jedinjenja i antagonist ose PD-1/-L1
[0940] Životinje su naručene iz Charles River Sulzfelda, Nemačka i dodeljene su studiji u dobi od 7 nedelja. Briga, ishrana i zdravstveni uslovi bili su u skladu sa smernicama za dobrobit životinja. B16F10-OVA ćelije su ćelije melanoma miša B16F10 koje su viralno transdukovane da eksprimiraju ovalbumin. B16F10-OVA ćelije su kultivisane sa RPMI 1640 sa 10% FCS 2,5 µg/ml blasticidina i podeljene bar 3 puta pre inokulacije. Antibiotik blasticidin uklonjen je 1 put pre inokulacije. Ženski miševi C57/BL6N inokulirani su sa 100000 tumorskih ćelija u 50% medijuma /50% matrigela supkutano u bok. Posle 5 dana životinje su randomizirane i započet je terapijski tretman. Antagonist AhR rastvoren je u etanolu / Solutolu /vodi (10/40/50) i dat je u dozi od 30 mg/kg, QD, p.o. Anti-PD-L1 antitelo (TPP-3911) dozirano je u dozi od 10 mg/kg, q3d, i.p. Kontrola izotipa mlgG1 data je u dozi od 10 mg/kg q3d (TPP-3267), i.p. Anti-PD-L1 antitelo je himera promenljivog domena atezolizumaba sa mišjim IgG1 CH1, 2 i 3 domenima. TPP-3911. Izotipsko antitelo je mišji IgG1 (klon MOPC-21, BioXCell BE0083).
[0941] Veličina tumora je izmerena pomoću čeljusti određujući dužinu (a) i širinu (b). Zapremina tumora izračunata je prema:
[0942] Na osnovu zapremine tumora efikasnost se izračunava podelom zapremine tumora dotične tretirane grupe sa zapreminom tumora kontrolne grupe (T/C).
In vivo test: efikasnost kompozicija koje sadrže primer jedinjenja i antagonist ose CTLA4
[0943] Životinje su naručene iz Charles River Sulzfelda, Nemačka i dodeljene su studiji u dobi od 8 nedelja. Briga, ishrana i zdravstveni uslovi bili su u skladu sa smernicama za dobrobit životinja. B16F10-OVA ćelije su ćelije melanoma B16F10 miša koje su viralno transdukovane da eksprimiraju ovalbumin. B16F10-OVA ćelije su kultivisane sa RPMI 1640 sa 10% FCS 2,5µg/ml blasticidina i podeljene bar 3 puta pre inokulacije. Antibiotik blasticidin uklonjen je 1 put pre inokulacije. Ženkama miševa C57/BL6J inokulirano je 10000 ćelija tumora B16F10-OVA u 50% medijuma / 50% matrigela supkutano u bok. Posle 7 dana životinje su randomizirane i terapijski tretman je započeo 8. dan. AhR antagonisti su rastvoreni u etanolu /Solutolu /vodi (10/40/50) i dat je u dozi od 30 mg/kg, QD, p.o. Anti-CTLA4 antitelo je dozirano u dozi od 1 mg/kg, q3d , i.p. Anti-CTLA4 antitelo je mišje-specifično sa izotipom IgG1 sirijskog hrčka (Klon: 9H10 (anti mišje CTLA4), Fa. BioXCell BE0131). Izotipsko antitelo je IgG1 sirijskog hrčka (TPP-9833).
[0944] Veličina tumora je izmerena pomoću čeljusti određujući dužinu (a) i širinu (b).
Zapremina tumora izračunata je prema:
[0945] Na osnovu zapremine tumora efikasnost se izračunava podelom zapremine tumora dotične grupe za lečenje sa zapreminom tumora kontrolne grupe (T/C).
[0946] Klonovi MOPC-21 i 9H10 (anti mišji CTLA4), na primer, mogu se kupiti preko kompanije Bio X Cell, 10 Technology Dr., Apartman 2B, Zapadni Libanon, NH 03784-1671 USA (Katalog#:BE0083 (invivoMab kvalitet) #BP0083 (in vivo Plus kvalitet), redom Katalog#: BE0131).

Claims (18)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje opšte formule (I):
    u kojoj R<1>predstavlja C2-C6-hidroksialkil, pri čemu su navedene C2-C6-hidroksialkil grupe opciono supstituisane jednom sa cijano, -COOR<10>, -CONR<11>R<12>, C1-C4-alkoksi ili C3-C6-cikloalkil i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili C3-C6-cikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa C1-C3-alkil i/ili jedan do tri puta sa halogenom, ili C3-C6-cikloalkil-C1-C3-alkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa C1-C3-alkil i/ili jedan do tri puta sa halogenom, ili (C3-C6-cikloalkil)2-C1-C3-alkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa C1-C3-alkil i/ili jedan do tri puta sa halogenom, ili 4- do 6-člani heterocikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa C1-C3-alkil i/ili jedan do tri puta sa halogenom; R<2>predstavlja hloro, cijano, dimetilamino, metil, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, metoksi, difluorometoksi ili trifluorometoksi; R<3>predstavlja vodonik, fluor, hlor ili metil; R<4>predstavlja vodonik ili fluor; R<5>predstavlja monociklični heteroaril, koji je opciono supstituisan jedan do tri puta, nezavisno jedan od drugoga, sa R<6>; R<6>predstavlja C1-C4-alkil, C1-C4-haloalkil, C3-C6-cikloalkil, C1-C4-alkoksi, halogen ili cijano; X predstavlja CH ili N; R<10>predstavlja C1-C4-alkil; R<11>i R<12>su isti ili različiti i predstavljaju, nezavisno jedan od drugoga, vodonik ili C1-C3-alkil, ili zajedno sa atomom azota za koji su vezani grade 4- do 6-člani heterociklični prsten koji sadrži azot, navedeni prsten opciono sadrži jedan dodatni heteroatom odabran od O, S, NH, NR<a>u kojoj R<a>predstavlja grupu C1-C4-alkil; njihovi polimorfi, enantiomeri, dijastereomeri, racemati, tautomeri, N-oksidi, hidrati i solvati, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
  2. 2. Jedinjenje prema zahtevu 1, pri čemu: R<1>predstavlja C2-C6-hidroksialkil, pri čemu navedene C2-C6-hidroksialkil grupe su opciono supstituisane jednom sa cijano, -COOR<10>, -CONR<11>R<12>, C1-C2-alkoksi ili ciklopropilom i opciono jednom do tri puta sa halogenom, ili C4-C6-cikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa C1-C3-alkil i/ili jedan do tri puta sa halogenom, ili C3-C6-cikloalkil-metil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa C1-C3-alkil i/ili jedan do tri puta sa halogenom, ili (C3-C6-cikloalkil)2-metil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa C1-C3-alkil i/ili jedan do tri puta sa halogenom, ili 5- ili 6-člani heterocikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa C1-C3-alkil i/ili jedan do tri puta sa halogenom; R<2>predstavlja hloro, cijano, dimetilamino, metil, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, metoksi, difluorometoksi ili trifluorometoksi; R<3>predstavlja vodonik ili fluor; R<4>predstavlja vodonik ili fluor; R<5>predstavlja monociklični heteroaril, koji je opciono supstituisan jedan do tri puta, nezavisno jedan od drugoga, sa R<6>; R<6>predstavlja metil, difluorometil, metoksi, halogen ili cijano; X predstavlja CH ili N; R<10>predstavlja C1-C4-alkil; R<11>i R<12>su isti ili različiti i predstavljaju, nezavisno jedan od drugoga, vodonik ili C1-C3-alkil, ili zajedno sa atomom azota za koji su vezani grade 4- do 6-člani heterociklični prsten koji sadrži azot, navedeni prsten opciono sadrži jedan dodatni heteroatom odabran od O, S, NH, NR<a>u kojoj R<a>predstavlja grupu C1-C4-alkil; njihovi polimorfi, enantiomeri, dijastereomeri, racemati, tautomeri, N-oksidi, hidrati i solvati, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
  3. 3. Jedinjenje prema zahtevu 1, pri čemu: 1 R<1>predstavlja C2-C5-hidroksialkil, pri čemu navedene C2-C5-hidroksialkil grupe su opciono supstituisane jednom sa cijano, -COOCH3, -CONH2, metoksi ili ciklopropilom i opciono jedan do tri puta sa fluorom, ili C4-C6-cikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi i opciono jednom sa metilom i/ili jedan do dva puta sa fluorom, ili C3-C4-cikloalkil-metil supstituisan jednom sa hidroksi, ili 5- ili 6-člani heterocikloalkil supstituisan jednom sa hidroksi, navedeni heterocikloalkil sadrži jedan atom kiseonika; R<2>predstavlja hloro, dimetilamino, metil, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, difluorometoksi ili trifluorometoksi; R<3>predstavlja vodonik; R<4>predstavlja vodonik ili fluor; R<5>predstavlja grupu odabranu od:
    pri čemu * označava tačku vezivanja pomenute grupe sa ostatkom molekula; R<6a>predstavlja vodonik, metil, fluor ili hlor; X predstavlja CH ili N; njihovi polimorfi, enantiomeri, dijastereomeri, racemati, tautomeri, N-oksidi, hidrati i solvati, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
  4. 4. Jedinjenje prema zahtevu 1, 2 ili 3 koje je izabrano iz grupe koju čine: N-(1-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(2R)-1-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 2 N-[(2S)-1-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-(1-hidroksibutan-2-il)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(2R)-1-hidroksibutan-2-il]-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(2S)-1-hidroksibutan-2-il]-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-(1-hidroksipropan-2-il)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(2R)-1-hidroksipropan-2-il]-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-3-okso-N-[(2R)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-3-okso-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-(3,3-difluoro-2-hidroksipropil)-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(2R)-3,3-difluoro-2-hidroksipropil]-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(2S)-3,3-difluoro-2-hidroksipropil]-6-(4-metilfenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-(1-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-(1-hidroksipropan-2-il)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-3-okso-N-[(2R)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-(3,3-difluoro-2-hidroksipropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2R)-3,3-difluoro-2-hidroksipropil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2S)-3,3-difluoro-2-hidroksipropil]-2-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-(2-hidroksi-3-metoksipropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2R)-2-hidroksi-3-metoksipropil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2S)-2-hidroksi-3-metoksipropil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-(2,3-dihidroksipropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2R)-2,3-dihidroksipropil]-2-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2S)-2,3-dihidroksipropil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-(1-hidroksi-3-metoksipropan-2-il)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2R)-1-hidroksi-3-metoksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksi-3-metoksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-(1,3-dihidroksipropan-2-il)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 4 6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-[(2S)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-(1-hidroksipropan-2-il)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(2R)-1 -hidroksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(2S)-1 -hidroksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(1-ciklobutil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(1-ciklobutil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(1-ciklobutil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(1-ciklobutil-1 H-pirazol-4-il)-3-okso-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(1-ciklobutil-1H-pirazol-4-il)-N-(1-hidroksipropan-2-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(1-ciklobutil-1H-pirazol-4-il)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(3R,4R)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(3S,4S)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(cis)-2-hidroksicikloheksil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(cis)-2-hidroksicikloheksil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(trans)-2-hidroksiciklopentil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(1S,2S)-2-hidroksiciklopentil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(cis)-2-hidroksiciklopentil]-2-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(1S,2R)-2-hidroksiciklopentil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-[4-(difluorometil)fenil]-N-[(trans)-2-hidroksiciklopentil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-(1-hidroksipropan-2-il)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-N-[(cis)-2-hidroksicikloheksil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-N-[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1 -metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(3R,4R)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(3S,4S)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-[4-(difluorometil)fenil]-N-(1-hidroksipropan-2-il)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-[4-(difluorometil)fenil]-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-[4-(difluorometil)fenil]-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 1,5-anhidro-2-({[6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-il]karbonil}amino)-2,4-dideoksi-D-eritro-pentitol; 6-[4-(difluorometil)fenil]-N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(3R,4S)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(3S,4R)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-N-(1-hidroksipropan-2-il)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-(1-hidroksipropan-2-il)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2R)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-(1,3-dihidroksipropan-2-il)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-(2,3-dihidroksipropil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2R)-2,3-dihidroksipropil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2S)-2,3-dihidroksipropil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-(1-hidroksi-3-metoksipropan-2-il)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2R)-1-hidroksi-3-metoksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksi-3-metoksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2S)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-(1-ciklopropil-2-hidroksietil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(1R)-1-ciklopropil-2-hidroksietil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(1S)-1-ciklopropil-2-hidroksietil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2R)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-(3,3-difluoro-2-hidroksipropil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2R)-3,3-difluoro-2-hidroksipropil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2S)-3,3-difluoro-2-hidroksipropil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-(1-hidroksipropan-2-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(2R)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-(1-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(2S)-1-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-(1,3-dihidroksipropan-2-il)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-(1-hidroksi-3-metoksipropan-2-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(2R)-1-hidroksi-3-metoksipropan-2-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(2S)-1-hidroksi-3-metoksipropan-2-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-(1-fluoro-3-hidroksipropan-2-il)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2R)-1-fluoro-3-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-(1-ciklopropil-2-hidroksietil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(1S)-1-ciklopropil-2-hidroksietil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-(1-ciklopropil-2-hidroksietil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-(2,3-dihidroksipropil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2R)-2,3-dihidroksipropil]-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2S)-2,3-dihidroksipropil]-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-(3,3-difluoro-2-hidroksipropil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-(2-hidroksiciklopentil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(1S,2S)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(1R,2R)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(1R,2S)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(1S,2R)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(cis)-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 3-okso-2-(piridin-3-il)-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 3-okso-2-(piridin-3-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 3-okso-2-(piridin-3-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-(1-hidroksi-3-metoksipropan-2-il)-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(2S)-1-hidroksi-3-metoksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-(2,3-dihidroksipropil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(2R)-2,3-dihidroksipropil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(2S)-2,3-dihidroksipropil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-(1,3-dihidroksipropan-2-il)-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-(1-hidroksipropan-2-il)-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(2R)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-(1-hidroksipropan-2-il)-3-okso-2-(pirimidin-5-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(pirimidin-5-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-(1 ,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 1 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2S)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(cis)-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(cis)-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(cis)-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-[4-(difluorometil)fenil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-[4-(difluorometil)fenil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(cis)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(1S,2R)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(trans)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(1S,2S)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 3-okso-2-(piridin-3-il)-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 2 3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(trans)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(1S,2S)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(cis)-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 3-okso-2-(piridin-3-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 3-okso-2-(piridin-3-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2S)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(cis)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(1R,2S)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-[4-(difluorometil)fenil]-N-[(trans)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-[4-(difluorometil)fenil]-N-[(1S,2S)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(trans)-3,3-difluoro-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(1S,2R)-3,3-difluoro-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(1R,2S)-3,3-difluoro-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(trans)-3,3-difluoro-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(1S,2R)-3,3-difluoro-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(1R,2S)-3,3-difluoro-2-hidroksicikloheksil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(cis)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(1S,2R)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-(1-ciklopropil-2-hidroksietil)-6-[4-(difluorometil)fenil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(1S)-1-ciklopropil-2-hidroksietil]-6-[4-(difluorometil)fenil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-[4-(difluorometil)fenil]-N-(1-hidroksipropan-2-il)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-[4-(difluorometil)fenil]-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-(1-hidroksipropan-2-il)-6-(4-metilfenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-6-(4-metilfenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-(1-hidroksipropan-2-il)-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(3S,4R)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(3R,4S)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(3S,4S)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 4 N-[(3R,4R)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(3S,4R)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(3R,4S)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hloro-2-fluorofenil)-N-(1-hidroksipropan-2-il)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hloro-2-fluorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 3-(4-hlorofenil)-N-[(cis)-2-hidroksicikloheksil]-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksamid; 3-(4-hlorofenil)-N-[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksamid; 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-N-[(trans)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-N-[(1S,2S)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-(1-hidroksipropan-2-il)-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 3-(4-hlorofenil)-N-[(cis)-2-hidroksiciklopentil]-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksamid; 3-(4-hlorofenil)-N-[(1S,2R)-2-hidroksiciklopentil]-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(trans)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(3S,4R)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(3R,4S)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(3R,4R)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(3S,4S)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 3-(4-hlorofenil)-N-[(trans)-2-hidroksiciklopentil]-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksamid; 3-(4-hlorofenil)-N-[(1S,2S)-2-hidroksiciklopentil]-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksamid; 1,5-anhidro-2-({[6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-il]karbonil}amino)-2,4-dideoksi-cis-pentitol; 1,5-anhidro-2-({[6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-il]karbonil}amino)-2,4-dideoksi-D-eritro-pentitol; 1,5-anhidro-2,4-dideoksi-2-[(f3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-il}karbonil)amino]-cis-pentitol; 1,5-anhidro-2,4-dideoksi-2-[({3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-il}karbonil)amino]-D-eritro-pentitol; 3-(4-hlorofenil)-N-(1-hidroksipropan-2-il)-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksamid; 3-(4-hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksamid; 3-(4-hlorofenil)-N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksamid; 6-(4-cijanofenil)-N-(1-hidroksipropan-2-il)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-cijanofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-N-(1-hidroksipropan-2-il)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 3-(4-hlorofenil)-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-6-okso-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksamid; 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-N-[(cis)-4-metiltetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-N-[(3R,4S)-4-metiltetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-[6-(difluorometil)piridin-3-il]-N-[(3S,4R)-4-metiltetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(pirimidin-5-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(pirimidin-5-il)-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(pirimidin-5-il)-N-[(2S)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(1-hidroksiciklopropil)metil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(1-hidroksiciklobutil)metil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-(1-hidroksipropan-2-il)-3-okso-2-(1 H-pirazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(1 H-pirazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-[4-(dimetilamino)fenil]-N-(1-hidroksipropan-2-il)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-[4-(dimetilamino)fenil]-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-(1-hidroksipropan-2-il)-2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-(1-hidroksipropan-2-il)-2-(3-metil-1H-pirazol-5-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-2-(3-metil-1H-pirazol-5-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-(1-hidroksipropan-2-il)-3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; 6-(4-hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; N-[(1-Hidroksiciklobutil)metil]-3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(2S)-3-Hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid (+)-3-Okso-2-(piridin-3-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid enantiomer 2 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2,3dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-N-[(1-hidroksiciklobutil)metil]-3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-N-[(2R)-1-fluoro-3-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(2R)-3-Hidroksi-3-metilbutan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(2R)-1-Fluoro-3-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(1S,2R)-2-Hidroksiciklopentil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, N-[(2S)-1-Hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(2S)-3-Hidroksi-3-metilbutan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, N-[(1S)-1-Ciklopropil-2-hidroksietil]-3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-(2-Hidroksi-2-metilpropil)-3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-N-[(2S)-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(1S,2S)-2-Hidroksiciklopentil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(2R)-1-Fluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 3-Okso-2-(1H-pirazol-4-il)-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 3-Okso-2-(piridin-3-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 2-[1-(Difluorometil)-1H-pirazol-4-il]-3-okso-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-cis-4-Hidroksitetrahidrofuran-3-il-2-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 3-Okso-2-(1 H-pirazol-4-il)-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid (+)-N-cis-2-Hidroksiciklobutil-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid enantiomer 1 (+)-N-cis-4-Hidroksitetrahidrofuran-3-il-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid enantiomer 2 N-[(2S)-3,3-Difluoro-2-hidroksipropil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoro-2-tienil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(2R)-1-Fluoro-3-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 2-[1-(Difluorometil)-1 H-pirazol-4-il]-3-okso-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-cis-2-Hidroksiciklobutil-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-2-(5-metil-3-tienil)-3-okso-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(2S)-3-Hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-N-[(1S)-1-cijano-2-hidroksietil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 2-[1-(Difluorometil)-1 H-pirazol-4-il]-N-[(2S)-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid (+)-N-cis-4-Hidroksitetrahidrofuran-3-il-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid enantiomer 1 (-)-N-(3,3-Difluoro-2-hidroksipropil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid enantiomer 2 (-)-N-cis-4-Hidroksitetrahidrofuran-3-il-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid enantiomer 1 6-(4-Hlorofenil)-2-(5-hloro-3-tienil)-3-okso-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,3dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(2S)-3-Hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(2R)-3-Hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-2-(1,2-oksazol-4-il)-3-okso-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 2-[1-(Difluorometil)-1 H-pirazol-4-il]-3-okso-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(pirimidin-5-il)-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(1S)-1-Ciklopropil-2-hidroksietil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(1R,2S)-2-Hidroksiciklopentil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-(2-Hidroksi-2-metilpropil)-3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid (-)-3-Okso-2-(piridin-3-il)-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid enantiomer 1 6-(4-Hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-2-(5-metil-3-tienil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-2-(5-hloro-3-tienil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(2S)-1-Hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(1 H-pirazol-4-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(2S)-3-Fluoro-2-hidroksipropil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-2-(5-metil-3-tienil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-(3,3-Difluoro-2-hidroksipropil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid enantiomer 1 N-[(1R,2R)-2-Hidroksiciklopentil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid (+)-6-(4-Hlorofenil)-N-cis-2-hidroksiciklobutil-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4karboksamid enantiomer 1 6-(4-Hlorofenil)-2-(5-hloro-3-tienil)-N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(2S)-1-Hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid (-)-N-cis-4-Hidroksitetrahidrofuran-3-il-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 2 6-(4-Hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-2-(1,2-oksazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-N-[(1S)-1-cijano-2-hidroksietil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(2S)-3-Fluoro-2-hidroksipropil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-2-[1-(difluorometil)-1 H-pirazol-4-il]-3-okso-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(2R)-1-Hidroksi-3-metoksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-N-cis-2-hidroksiciklobutil-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-N-[(1S)-1-ciklopropil-2-hidroksietil]-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(2S)-3-Hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-2-(1H-pirazol-4-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 2-[1-(Difluorometil)-1H-pirazol-4-il]-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 2-[1-(Difluorometil)-1H-pirazol-4-il]-N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-3-okso-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-N-[(1-hidroksiciklopropil)metil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-2-[1-(difluorometil)-1 H-pirazol-4-il]-N-[(2S)-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-N-[(2R)-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-2-(pirimidin-5-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-(2-Hidroksi-2-metilpropil)-3-okso-2-(1H-pirazol-4-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3- 1 dihidropiridazin-4-karboksamid Metil N-{[6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-il]karbonil}-D-serinat (-)-N-cis-2-Hidroksiciklobutil-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid enantiomer 2 6-(4-Hlorofenil)-N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-2-(1,2-oksazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-N-[(2S)-3-fluoro-2-hidroksipropil]-2-(1 -metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(pirimidin-5-il)-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-2-[1-(difluorometil)-1H-pirazol-4-il]-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-N-[(1S)-1-ciklopropil-2-hidroksietil]-3-okso-2-(pirimidin-5-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid Metil N-{[6-(4-hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-il]karbonil}-D-serinat 6-[4-(Fluorometil)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-N-[(2S)-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-2-(1H-pirazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-3-okso-2-(pirimidin-5-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-2-[1-(difluorometil)-1H-pirazol-4-il]-N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-N-[(2R)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(pirimidin-5-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-[4-(Fluorometil)fenil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid (-)-6-(4-Hlorofenil)-N-cis-2-hidroksiciklobutil-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 2 6-[4-(Fluorometil)fenil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2R)-1,1,1-trifluoro-3-hidroksipropan-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-[4-(Fluorometil)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 2 6-[4-(Fluorometil)fenil]-N-[(2S)-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-[4-(Fluorometil)fenil]-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-[4-(Fluorometil)fenil]-N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-[4-(Fluorometil)fenil]-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-[4-(Fluorometil)fenil]-N-[(2S)-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(2R)-1-Amino-3-hidroksi-1-oksopropan-2-il]-6-(4-hlorofenil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-cis-4-Hidroksitetrahidrotiofen-3-il-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid (-)-N-cis-4-Hidroksitetrahidrotiofen-3-il-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, enantiomer 2 N-(2-Hidroksi-2-metilpropil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 3-Okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2R)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(2R)-3-Hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(2S)-3,3-Difluoro-2-hidroksipropil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(2S)-3-Fluoro-2-hidroksipropil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-(4,4,4-trifluoro-3-hidroksibutan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid Izomer 1 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-(4,4,4-trifluoro-3-hidroksibutan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid Izomer 2 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-(4,4,4-trifluoro-3-hidroksibutan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid Izomer 3 6-(4-Hlorofenil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-(4,4,4-trifluoro-3-hidroksibutan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid Izomer 4 6-(4-Hlorofenil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-N-[(2R)-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-2-(5-hloropiridin-3-il)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-2-(5-metilpiridin-3-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-[4-(Difluorometoksi)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-[4-(Difluorometoksi)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid Izomer 1 6-[4-(Difluorometoksi)fenil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-N-(1,1,1-trifluoro-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid Izomer 2 6-[4-(Difluorometoksi)fenil]-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-[4-(Difluorometoksi)fenil]-N-[(2S)-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-[4-(Dimetilamino)fenil]-N-[(2S)-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-[4-(Dimetilamino)fenil]-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(2S)-3-Hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-[4-(Difluorometil)fenil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-[4-(Difluorometoksi)fenil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-[4-(Difluorometil)fenil]-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid Izomer 1 6-(4-Hlorofenil)-N-[(2S)-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-N-(2-hidroksi-2-metilciklopentil)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 4 6-[4-(Difluorometil)fenil]-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid Izomer 1 6-[4-(Difluorometil)fenil]-N-[(2S)-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-[4-(Difluorometil)fenil]-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid Izomer 2 3-(4-Hlorofenil)-6-okso-N-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-6H-1,4'-bipiridazin-5-karboksamid 6-[4-(Difluorometil)fenil]-N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-[4-(Difluorometil)fenil]-N-[(cis)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid Izomer 2 6-(4-Hlorofenil)-N-[(2R)-1-hidroksipropan-2-il]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-N-[(2R)-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-2-(1H-pirazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-Hlorofenil)-N-[(2R)-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(2R)-3-Hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-2-(1,2-tiazol-4-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(cis)-2-hidroksi-2-metilciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(cis)-2-hidroksi-2-metilciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, izomer 1 N-[(cis)-2-hidroksi-2-metilciklopentil]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid, izomer 2 6-[4-(difluorometoksi)fenil]-N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-[4-(difluorometoksi)fenil]-N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-[4-(difluorometoksi)fenil]-N-[(2S)-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-[4-(difluorometoksi)fenil]-N-[(2S,3S)-3-hidroksibutan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 6-(4-hlorofenil)-N-[(cis)-2-hidroksi-2-metilciklopentil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; izomer 1 6-(4-Hlorofenil)-N-[(cis)-2-hidroksi-2-metilciklopentil]-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid; Izomer 2 2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(2S)-1-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(1S,2R)-2-hidroksiciklopentil]-3-okso-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(1S)-1-ciklopropil-2-hidroksietil]-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(2S)-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(1S)-1-cijano-2-hidroksietil]-2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-[(2R)-3-hidroksi-3-metilbutan-2-il]-3-okso-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid 1,5-anhidro-2,4-dideoksi-2-[({2-(5-fluoropiridin-3-il)-3-okso-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-il}karbonil)amino]-D-eritro-pentitol 2-(5-fluoropiridin-3-il)-N-(2-hidroksi-2-metilpropil)-3-okso-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid N-[(2S)-1-hidroksipropan-2-il]-3-okso-2-(piridin-3-il)-6-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamid njihovi polimorfi, enantiomeri, dijastereomeri, racemati, tautomeri, N-oksidi, hidrati i solvati, kao i njihove fiziološki prihvatljive soli i solvati ovih soli, kao i smeše istih.
  5. 5. Postupak pripreme jedinjenja opšte formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 4, pomenuti postupak obuhvata korak omogućavanja da intermedijarno jedinjenje opšte formule (VII):
    u kojoj su X, R<2>, R<3>, R<4>i R<5>kako je definisano za jedinjenje opšte formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 3, reaguje sa jedinjenjem opšte formule (VIII): H2N-R<1>(VIII), u kojoj R<1>je kako je definisano za jedinjenje opšte formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 3, na taj način dajući jedinjenje opšte formule (I):
    u kojoj su X, R<1>, R<2>, R<3>, R<4>i R<5>kako je definisano za jedinjenje opšte formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 3.
  6. 6. Postupak pripreme jedinjenje opšte formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 4, pomenuti postupak obuhvata korak omogućavanja da intermedijarno jedinjenje opšte formule (XII):
    u kojoj su X, R<1>, R<2>, R<3>i R<4>kako je definisano za jedinjenje opšte formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 3, reaguje sa jedinjenjem opšte formule (XIV):
    u kojoj R<5>je kako je definisano za jedinjenje opšte formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 3 i R' i R" predstavljaju istovremeno H ili C1-C4-alkil ili grade zajedno grupu C2-C7-alkilen as kao deo 1,2- ili 1,3-diol boronskog estra ili grupu -CO-CH2-(NCH3)-CH2-CO-; na taj način dajući jedinjenje opšte formule (I):
    u kojoj su X, R<1>, R<2>, R<3>, R<4>i R<5>kako je definisano za jedinjenje opšte formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 3.
  7. 7. Jedinjenje opšte formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 4 za upotrebu u lečenju ili profilaksi bolesti.
  8. 8. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje opšte formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 4 i jedan ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenata.
  9. 9. Farmaceutska kombinacija naznačena time što sadrži: • jedan ili više prvih aktivnih sastojaka, posebno jedinjenja opšte formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 4, i • jedno ili više farmaceutski aktivnih jedinjenja protiv raka ili • jedan ili više farmaceutski aktivnih inhibitora imunološke kontrolne tačke.
  10. 10. Farmaceutska kombinacija prema zahtevu 9, naznačena time što je farmaceutski aktivni inhibitor imunološke kontrolne tačke antitelo.
  11. 11. Farmaceutska kombinacija prema zahtevu 9 i 10, naznačena time što je farmaceutski aktivni inhibitor imunološke kontrolne tačke antitelo TPP-3911.
  12. 12. Jedinjenje za upotrebu prema opštoj formuli (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 4 za lečenje ili profilaksu bolesti.
  13. 13. Upotreba jedinjenja opšte formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 4 za pripremu leka za lečenje ili profilaksu bolesti.
  14. 14. Jedinjenje za upotrebu prema zahtevu 12 ili 13, naznačeno time što je bolest rak ili stanja sa poremećenim imunološkim odgovorima ili drugi poremećaji povezani sa aberantnom AHR signalizacijom, kao što su tečni i solidni tumori.
  15. 15. Jedinjenje opšte formule (VII):
    u kojoj su X, R<2>, R<3>, R<4>i R<5>kako je definisano za jedinjenje opšte formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 3.
  16. 16. Upotreba jedinjenja opšte formule (VII)
    u kojoj su X, R<2>, R<3>, R<4>i R<5>kako je definisano za jedinjenje opšte formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 3, za pripremu jedinjenja opšte formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 4.
  17. 17. Jedinjenje opšte formule (XII):
    u kojoj su X, R<1>, R<2>, R<3>i R<4>kako je definisano za jedinjenje opšte formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 3.
  18. 18. Upotreba jedinjenja opšte formule (XII)
    u kojoj su X, R<1>, R<2>, R<3>i R<4>kako je definisano za jedinjenje opšte formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 3, za pripremu jedinjenja opšte formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 4.
RS20210096A 2017-02-09 2018-02-02 2-heteroaril-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamidi za lečenje raka RS61401B1 (sr)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP17155406 2017-02-09
EP17202882 2017-11-21
PCT/EP2018/052627 WO2018146010A1 (en) 2017-02-09 2018-02-02 2-heteroaryl-3-oxo-2,3-dihydropyridazine-4-carboxamides for the treatment of cancer
EP18703958.1A EP3580211B1 (en) 2017-02-09 2018-02-02 2-heteroaryl-3-oxo-2,3-dihydropyridazine-4-carboxamides for the treatment of cancer

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS61401B1 true RS61401B1 (sr) 2021-02-26

Family

ID=61188789

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20210096A RS61401B1 (sr) 2017-02-09 2018-02-02 2-heteroaril-3-okso-2,3-dihidropiridazin-4-karboksamidi za lečenje raka

Country Status (39)

Country Link
US (2) US12522594B2 (sr)
EP (1) EP3580211B1 (sr)
JP (1) JP7128826B2 (sr)
KR (1) KR102627266B1 (sr)
CN (3) CN116531380B (sr)
AU (1) AU2018217860B2 (sr)
BR (1) BR112019016497A2 (sr)
CA (1) CA3052718A1 (sr)
CL (1) CL2019002255A1 (sr)
CO (1) CO2019008684A2 (sr)
CR (1) CR20190364A (sr)
CU (1) CU24564B1 (sr)
CY (1) CY1124484T1 (sr)
DK (1) DK3580211T3 (sr)
DO (1) DOP2019000206A (sr)
EC (1) ECSP19057713A (sr)
ES (1) ES2847162T3 (sr)
GE (2) GEAP202115183A (sr)
HR (1) HRP20210143T1 (sr)
HU (1) HUE053191T2 (sr)
IL (1) IL268469B (sr)
JO (1) JOP20190193A1 (sr)
LT (1) LT3580211T (sr)
MA (1) MA47447B1 (sr)
MX (1) MX2019009571A (sr)
MY (1) MY198510A (sr)
NI (1) NI201900085A (sr)
PE (1) PE20191496A1 (sr)
PH (1) PH12019501846A1 (sr)
PL (1) PL3580211T3 (sr)
RS (1) RS61401B1 (sr)
SA (1) SA519402422B1 (sr)
SG (1) SG11201907232XA (sr)
SI (1) SI3580211T1 (sr)
TW (1) TWI770113B (sr)
UA (1) UA124507C2 (sr)
UY (1) UY37606A (sr)
WO (1) WO2018146010A1 (sr)
ZA (1) ZA201905902B (sr)

Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6964096B2 (ja) * 2016-05-25 2021-11-10 バイエル ファーマ アクチエンゲゼルシャフト ３−オキソ−２，６−ジフェニル−２，３−ジヒドロピリダジン−４−カルボキサミド類
JOP20190193A1 (ar) 2017-02-09 2019-08-08 Bayer Pharma AG ممركبات 2-أريل غير متجانس-3-أكسو-2، 3-ثنائي هيدرو بيريدازين-4-كربوكساميد لمعالجة السرطان
CN109813913B (zh) * 2019-01-31 2021-11-09 中国医学科学院肿瘤医院 芳烃受体(AhR)在预测免疫治疗效果中的应用
EP3715471A1 (en) 2019-03-29 2020-09-30 Deutsches Krebsforschungszentrum, Stiftung des öffentlichen Rechts Ahr signature marker set
EP3721894A1 (en) 2019-04-10 2020-10-14 Deutsches Krebsforschungszentrum, Stiftung des öffentlichen Rechts Interleukin-4-induced gene 1 (il4i1) as a biomarker and uses thereof
CN112724256B (zh) * 2019-10-28 2022-09-16 中国农业大学 一种高稳定性的磺胺类药物抗体hAb 4D11及其应用
EP3835432A1 (en) 2019-12-10 2021-06-16 Deutsches Krebsforschungszentrum, Stiftung des öffentlichen Rechts Interleukin-4-induced gene 1 (il4i1) and respective metabolites as biomarkers for cancer
US20230084899A1 (en) * 2019-12-16 2023-03-16 Bayer Aktiengesellschaft Combination of an ahr-inhibitor and an pd1-inhibitor antibody and its use in the treatment of cancer
WO2021173082A1 (en) 2020-02-26 2021-09-02 Jaguahr Therapeutics Pte Ltd Pyridopyrimidine derivatives useful in modulation of ahr signalling
JP7651590B2 (ja) * 2020-03-27 2025-03-26 ドン－ア エスティ カンパニー リミテッド アミノピリミジン誘導体およびアリール炭化水素受容体モジュレーターとしてのその使用
US12570638B2 (en) 2020-05-20 2026-03-10 Sail Biomedicines, Inc. Fused imidazole derivatives as AHR antagonists
CN114181212B (zh) * 2020-09-15 2023-06-06 山东轩竹医药科技有限公司 哒嗪酮类AhR抑制剂
WO2022078356A1 (zh) * 2020-10-15 2022-04-21 山东轩竹医药科技有限公司 杂芳环类AhR抑制剂
CN114539221A (zh) * 2020-11-27 2022-05-27 苏州泽璟生物制药股份有限公司 氘代2-芳杂环-3-氧-2,3-二氢哒嗪-4-甲酰胺类抑制剂及其制备方法和应用
CN114685426A (zh) * 2020-12-28 2022-07-01 苏州泽璟生物制药股份有限公司 磺酰胺类抑制剂及其制备方法和应用
CN114835687B (zh) * 2021-04-02 2023-09-05 北京华森英诺生物科技有限公司 AhR抑制剂
EP4402130A1 (en) * 2021-09-14 2024-07-24 Allianthera (Suzhou) Biopharmaceutical Co., Ltd. 2-aryl or heteroaryl-3-oxo-4-carbamide-6-cyclic-dihydropyrazine aryl hydrocarbon receptor modulators and their use in the treatment of diseases and disorders
EP4419679A1 (en) 2021-10-20 2024-08-28 University of Rochester Methods and compositions for rejuvenating cns glial populations by suppression of transcription factors
CN119948035A (zh) 2022-10-03 2025-05-06 捷豹治疗有限公司 可用于调节AhR信号传导的化合物

Family Cites Families (36)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE4134467A1 (de) 1991-10-18 1993-04-22 Thomae Gmbh Dr K Heterobiarylderivate, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und verfahren zu ihrer herstellung
JP2000119257A (ja) 1998-08-14 2000-04-25 Nippon Nohyaku Co Ltd ピリダジノン誘導体
AU756275B2 (en) * 1998-08-14 2003-01-09 Nihon Nohyaku Co., Ltd. Pyridazinone derivatives
US6358964B1 (en) 2000-07-26 2002-03-19 King Pharmaceuticals Research And Development, Inc. Adenosine, A3 receptor modulators
CA2742411A1 (en) 2000-09-18 2002-03-21 Eisai R&D Management Co., Ltd. Pyridazinone and triazinone compounds and use thereof as pharmaceutical preparations
FR2847253B1 (fr) 2002-11-19 2007-05-18 Aventis Pharma Sa Nouveaux derives de pyridazinones a titre de medicaments et compositions pharmaceutiques les renfermant
DE102004055998A1 (de) 2004-11-19 2006-05-24 Rheinische Friedrich-Wilhelms-Universität Bonn Niedermolekulare Inhibitoren von Guaninnucleotid-Austauschfaktoren der Cytohesin-Familie
WO2007040565A2 (en) 2004-11-22 2007-04-12 King Pharmaceuticals Research & Development, Inc. Enhancing treatment of cancer and hif-1 mediated disoders with adenosine a3 receptor antagonists
WO2006082952A1 (ja) 2005-02-01 2006-08-10 Takeda Pharmaceutical Company Limited アミド化合物
US20060178388A1 (en) 2005-02-04 2006-08-10 Wrobleski Stephen T Phenyl-substituted pyrimidine compounds useful as kinase inhibitors
WO2007058392A1 (ja) 2005-11-21 2007-05-24 Japan Tobacco Inc. ヘテロ環化合物およびその医薬用途
EP2023910B1 (en) 2006-05-03 2013-06-19 Symrise AG Ah receptor antagonists
GB0614579D0 (en) 2006-07-21 2006-08-30 Black James Foundation Pyrimidine derivatives
DE102006054205A1 (de) 2006-11-15 2008-05-29 Rheinische Friedrich-Wilhelms Universität Verwendung von Cytohesin-Inhibitoren zur chemischen Induktion von Langlebigkeit
AU2007336781C1 (en) * 2006-12-21 2014-10-09 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Pyridazinones and furan-containing compounds
JP4729133B2 (ja) 2007-11-29 2011-07-20 アクテリオン ファーマシューティカルズ リミテッド ホスホン酸誘導体及びｐ２ｙ１２受容体拮抗剤としてのそれらの使用
EP2328586A2 (en) 2008-05-20 2011-06-08 Cephalon, Inc. Substituted pyridazinone derivatives as histamine-3 (h3) receptor ligands
PE20100362A1 (es) 2008-10-30 2010-05-27 Irm Llc Derivados de purina que expanden las celulas madre hematopoyeticas
EP2358371B1 (en) 2008-10-31 2015-02-11 Merck Sharp & Dohme Corp. P2x3, receptor antagonists for treatment of pain
US20130338201A1 (en) 2009-11-02 2013-12-19 Ahr Pharmaceuticals, Inc. Method of Cancer Treatment with 2-(1H-Indole-3-Carbonyl)-Thiazole-4-Carboxylic Acid Methyl Ester
CA2807199C (en) 2010-07-27 2020-07-07 Northeastern University Flavonoid-derived aryl hydrocarbon receptor modulators useful in the treatment of cancer
US9567569B2 (en) 2012-07-23 2017-02-14 Gamida Cell Ltd. Methods of culturing and expanding mesenchymal stem cells
WO2015143164A1 (en) 2014-03-19 2015-09-24 President And Fellows Of Harvard College Antimicrobial agents and screening methods
JP6964096B2 (ja) * 2016-05-25 2021-11-10 バイエル ファーマ アクチエンゲゼルシャフト ３−オキソ−２，６−ジフェニル−２，３−ジヒドロピリダジン−４−カルボキサミド類
JOP20190193A1 (ar) 2017-02-09 2019-08-08 Bayer Pharma AG ممركبات 2-أريل غير متجانس-3-أكسو-2، 3-ثنائي هيدرو بيريدازين-4-كربوكساميد لمعالجة السرطان
KR102808367B1 (ko) 2017-11-06 2025-05-14 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 Hpk1 억제제로서 유용한 이소푸라논 화합물
EP3713922A1 (en) 2017-11-21 2020-09-30 Bayer Aktiengesellschaft Sulphur substituted 3-oxo-2,3-dihydropyridazine-4-carboxamides
WO2019101647A1 (en) 2017-11-21 2019-05-31 Bayer Aktiengesellschaft 2-phenylpyrimidine-4-carboxamides as ahr inhibitors
CA3082855A1 (en) 2017-11-21 2019-05-31 Bayer Aktiengesellschaft 2-hetarylpyrimidine-4-carboxamides as aryl hydrocarbon receptor anatgonists
CA3082857A1 (en) 2017-11-21 2019-05-31 Bayer Aktiengesellschaft 3-oxo-6-heteroaryl-2-phenyl-2,3-dihydropyridazine-4-carboxamides
JP7486478B2 (ja) 2018-09-19 2024-05-17 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト スピロ環状２，３－ジヒドロ－７－アザインドール化合物およびその使用
MX2021005662A (es) 2018-11-14 2021-10-13 Broad Inst Inc Compuestos activadores del receptor de aril hidrocarburo (ahr) como agentes terapéuticos para el cáncer.
GEP20247611B (en) 2019-08-12 2024-03-11 Bayer Pharma AG [1,2,4]triazolo[1,5-c]quinazolin-5-amines
WO2021074279A1 (en) 2019-10-16 2021-04-22 Bayer Aktiengesellschaft Spiro-fused tricyclic map4k1 inhibitors
WO2021249913A1 (en) 2020-06-09 2021-12-16 Bayer Aktiengesellschaft 2'-(quinolin-3-yl)-5',6'-dihydrospiro[azetidine-3,4'-pyrrolo[1,2-b]pyrazole]-1-carboxylate derivatives and related compounds as map4k1 (hpk1) inhibitors for the treatment of cancer
WO2022167627A1 (en) 2021-02-05 2022-08-11 Bayer Aktiengesellschaft Map4k1 inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
TW201840549A (zh) 2018-11-16
UY37606A (es) 2018-09-28
CY1124484T1 (el) 2022-07-22
JOP20190193A1 (ar) 2019-08-08
GEAP202115183A (en) 2021-04-12
GEP20217281B (en) 2021-08-10
DK3580211T3 (da) 2021-01-25
CU20190073A7 (es) 2020-03-04
CR20190364A (es) 2019-09-27
UA124507C2 (uk) 2021-09-29
TWI770113B (zh) 2022-07-11
ZA201905902B (en) 2021-05-26
CA3052718A1 (en) 2018-08-16
KR102627266B1 (ko) 2024-01-24
MA47447A (fr) 2019-12-18
NI201900085A (es) 2019-11-15
PL3580211T3 (pl) 2021-04-19
SG11201907232XA (en) 2019-09-27
SA519402422B1 (ar) 2021-11-14
SI3580211T1 (sl) 2021-06-30
MY198510A (en) 2023-09-01
HRP20210143T1 (hr) 2021-03-19
ECSP19057713A (es) 2019-08-30
CN110678459B (zh) 2023-04-04
MX2019009571A (es) 2020-01-20
MA47447B1 (fr) 2021-02-26
US20240294505A1 (en) 2024-09-05
US12522594B2 (en) 2026-01-13
AU2018217860B2 (en) 2021-07-08
LT3580211T (lt) 2021-02-25
CN110678459A (zh) 2020-01-10
CL2019002255A1 (es) 2020-01-03
CN116531380B (zh) 2025-11-07
KR20190115460A (ko) 2019-10-11
CN116554152A (zh) 2023-08-08
US20230121195A1 (en) 2023-04-20
CO2019008684A2 (es) 2019-08-20
EP3580211A1 (en) 2019-12-18
IL268469A (en) 2019-09-26
JP7128826B2 (ja) 2022-08-31
BR112019016497A2 (pt) 2022-05-10
IL268469B (en) 2022-04-01
WO2018146010A1 (en) 2018-08-16
PE20191496A1 (es) 2019-10-21
EP3580211B1 (en) 2020-12-02
HUE053191T2 (hu) 2021-06-28
CU24564B1 (es) 2022-01-13
ES2847162T3 (es) 2021-08-02
US11795164B2 (en) 2023-10-24
DOP2019000206A (es) 2019-09-30
JP2020506946A (ja) 2020-03-05
AU2018217860A1 (en) 2019-08-22
CN116531380A (zh) 2023-08-04
PH12019501846A1 (en) 2020-03-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11795164B2 (en) 2-heteroaryl-3-oxo-2,3-dihydropyridazine-4-carboxamides for the treatment of cancer
EP3713926B1 (en) 2-hetarylpyrimidine-4-carboxamides as aryl hydrocarbon receptor anatgonists
US11040035B2 (en) 3-oxo-2,6-diphenyl-2,3-dihydropyridazine-4-carboxamides
US11591311B2 (en) 3-oxo-6-heteroaryl-2-phenyl-2,3-dihydropyridazine-4-carboxamides
EP3713923B1 (en) 2-phenylpyrimidine-4-carboxamides as ahr inhibitors
CA3082856A1 (en) Sulphur substituted 3-oxo-2,3-dihydropyridazine-4-carboxamides
HK40097687A (zh) 用於治疗癌症的2-杂芳基-3-氧代-2 ,3-二氢哒嗪-4-甲酰胺
HK40098354A (zh) 用於治疗癌症的2-杂芳基-3-氧代-2，3-二氢哒嗪-4-甲酰胺
EA037978B1 (ru) 2-гетероарил-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-карбоксамиды для лечения злокачественного новообразования