PT99733B

PT99733B - Processo para a preparacao de novos esteres e derivados de aminoacidos n-iodopropargiloxicarbonilicos e de composicoes microbicidas que os contem

Info

Publication number: PT99733B
Application number: PT99733A
Authority: PT
Inventors: Barry Clifford Lange; Margaret Marie Bowers-Daines
Original assignee: Rohm & Haas
Priority date: 1990-12-10
Filing date: 1991-12-09
Publication date: 1999-05-31
Also published as: IL100289A0; IL100289A; ATE112762T1; FI915783A0; IE914269A1; EP0490566A1; AU8891091A; ES2063452T3; EP0490566B1; DE69104593D1; JPH0592949A; DK0490566T3; DE69104593T2; CA2055353A1; US5209930A; HUT60237A; HU913883D0; PT99733A; KR920012015A; FI915783A

Description

PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE NOVOS ÉSTERES E DERIVADOS DE AMINOÁCIDOS N-IODOPROPARGILOXICARBONÍLICOS E DE

COMPOSIÇÕES MICROBICIDAS QUE OS CONTÊM

A presente invenção diz respeito a agentes anti-microbianos e em particular a compostos novos que apresentam actividade microbicida.

Slager, descreve, no pedido de patente de invenção norte-americana 3 923 870, oxicarbamatos de iodopropargil que apresentam como N-substituintes grupos alquilo, arilo ou alquilarilo com actividade anti-fúngica.

pedido de patente de invenção alemã N2 2 515 091, de 1975, da Ciba Geigy AG, descreve anilidas microbicidas que são acilanilidas com um grupo aminoácido e um fragmento de iodopropargilo, em que o ponto de ligação do radical de iodopropargilo não se faz directamente na porção do aminoácido da molécula. Estes compostos são anidas ácidas de N-iodopropargiloxi.

A Kokai Tokkyo Koho, na patente de invenção japonesa 54/125614, de 1979, do Shigaken Pharmaceutical Co., Ltd., descreve derivados da amida do ácido iodopropargiloxi anti-micro bianos, uteis como bactericidas e fungicidas para a agricultura.

pedido de patente de invenção norte-americana 4 535 088-A, requerido por Shionogi e Co., apresenta derivados de 2-(3-iodo)-propinil-amino-tiazol que são úteis como agentes antimicrobianos, isto é, anti-bactericidas e antifúngicos.

A publicação Peptides : Synthesis, Structure and Function; Proc. Am. Pept. Symposium, 7 Q, (1981) nas páginas 101 - 104 descreve a síntese de C-iodopropargil-glicina. Não existe referência à actividade antifúngica ou anti-bacteriana.

Muitos dos produtos anti-microbianos anteriores apresentam toxicidade e/ou problemas de ambiente. Constitui um objectivo da presente invenção, proporcionar novos compostos anti-microbianos com perfis de toxicidade melhorados e que não são agressivos para o ambiente.

Esses objectivos e outros tornar-se-ao evidentes através da descrição que se segue, sendo alcançados pela presente invenção, que inclui, em um dos seus aspectos, os compostos de fórmula geral.

na qual í

R^ representa um átomo de hidrogénio, ou um grupo alquilo inferior ou alquil-arilo ou um grupo de fórmula geral CE^OR, CE^SR ou CEKCHpOR, em que representa um átomos de hidrogénio ou um grupo alquilo arilo aril-alquilo alcarilo ^e ou

B-2 ^e Rg têm os significados definidos antes para o símbolo R.

Descobriu-se, inesperadamente, que os compostos da presente invenção, são agentes antimicrobianos eficazes. Os compostos são designados para biodegradação, para componentes de aminoácidos nao tóxicos.

Alguns compostos representativos incluem os seguintes :

Número do Composto

QUADRO DE COMPOSTOS (ϊ£ = Η)

Rn

R,

H

H ch₃ ch₃ ch₃

CH₂Ph

CH₂Ph ch₃ ^C8^H17 ch₂-c C-l

H ch₃ ^C8^H17

A presente invenção também abrange no seu âmbito compo sições que contêm um dos compostos como definido anteriormente, conjuntamente com um veículo aceitável do ponto de vista agronómico, um agente cosmético, um óleo de corte, um sabao ou um detergente sintético, um agente estabilizante ou um material-que forma uma película, de preferência, estando presente o composto referido numa quantidade compreendida entre 0,0001 e 50 Z com maior preferência entre 0,0001 e 10 Z em peso. Um outro aspecto da presente invenção, consiste na aplicação de um composto, tal como definido antes, como agente microbicida e ainda um outro aspecto inclui um método para a prevenção ou inibição de um crescimento de bactérias, fungos ou algas nos sítios susceptíveis ou submetidos a estas, que consiste na incorporação nesses sítios de uma contidade eficaz de um composto ou uma composição como definida anteriormente, de forma a afectar de forma adversa esse desenvolvimento.

Os compostos da presente invenção podem preparar-se por conversão de um cloridrato de um éster de um D- ou Laminoácido apropriado, no correspondente éster alquílico de

2-isocianato. Faz-se reagir o isocianato resultante com um álcool iodopropargílico para se obter o éster do aminoácido N-iodopropargiloxicarbonílico pretendido. Preparam-se os aminoácidos de N-iodopropargiloxicarbonilo livres através da hidrólise alcalina do éster correspondente. Preparam-se outros ésteres de aminoácidos de N-iodopropargiloxicarbonilo por esteri ficação do aminoácido de N-iodopropargiloxicarbonilo livre com um álcool ou um halogeneto de alquilo apropriados aplicando-se métodos convencionais.

Pode preparar-se um álcool iodopropargílico pelo processo descrito no Ando, T., Shioi, S., Nakagawa, M.,

-6χ»'.

Bulletin of the Chemical Society of Japan, 45, 1972; p. 2611.

Os ésteres partir do cloridrato um processo adaptado de 2-isocianato de alquilo obtêm-se a do éster do aminoácido correspondente por da preparação do cloreto de 3-isocíanatopropanoílo, como descrito em Organic Synthesis; Collective Volume VI, 715, 1988.

Como referido anteriormente, as composições que contêm um composto de acordo com a formula geral I e um veículo aceitável do ponto de vista agronómico, um agente cosmético, um óleo de corte, um sabão ou um detergente sintético, um agente estabilizante ou um material que forma uma película ou materiais semelhantes, tem uma grande gama de aplicações para protecção ou controlo de microorganismos de uma grande variedade de classes que incluem fungos, bactérias., algas, vírus e leveduras. As aplicações preferidas das composições são a protecção de madeira, pinturas, adesivos, gomas, papel, têxteis, cabedal, plástico, cartao, lubrificantes, cosméticos, alimentos, material de calaftagem, forragem, água para arrefecimento industrial, contra microorganismos.

As indústrias específicas estão listadas em seguida, assim como as aplicações dos compostos ou composições :

Indústria

Aplicação

Adesivos, vedantes

- adesivos

- material de calafetagem

- vedantes

Agricultura/alimentos i

- conservação de adjuvantes

- componentes activos para a

- agricultura

- conservantes químicos para a agricultura

- conservação de composiçoes para a agricultura

- conservação de forragem

- químicos para lacticínios

- conservação de fertilizantes

- conservação de alimentos

- produtos químicos para trata mento de alimentos

- conservação de sementes

- protecção de produções após colheita

- tratamento do açúcar tabaco

Produtos de construção

- asfalto/cimento

- modificadores de cimento

Cosméticos e Artigos de Toillete

Desinfectantes, anti-sépticos

Emulsões, dispersões

Produtos industriais e de consumo em formulações

- produtos de construção

- mastiques para telhados

- estuque sintético

- mastiques para paredes

- cimento para junções

- cosméticos

- matérias-primas para cosméticos

- artigos de toillete

- anti-sépticos

- desinfectantes

- dispersões aquosas

- pigmentos dispersos

- latex

- emulsões para fotografia

- pastas para pigmentos

- latexes poliméricos

- ambientadores de ar

- amaciadores para tecidos

- produtos para limpeza das maos

- folhas e tecidos para polimento do chão, mobílias, sapatos

- amida em spray

- ceras

Vários produtos para tratamentos industriais

- conservação de líquidos para limpeza a seco

- pintura por electrodeposição, banhos, lavagens

- pré-tratamento de electrodepo siçao apos lavagem

- conservação de fluidos industriais

- banhos para pasteurização

- conservação de auxiliares de processamento

Tratamento de água industrial - limpezas de ar

- torres de arrefecimento

- água de arrefecimento

- arrefecimento por água

Lavandaria - produtos para lavagem caseira

- mercadorias lavadas

- ãgua para lavagens de lavandaria

- pré-lavagens

- higiene-lavandaria

Couro e produtos em couro

Lubrificantes e auxiliares hidráulicos

Artigos médicos

Metalurgia e acessórios relacionados

- produtos para remoção de manchas e corantes.

- cabedal e couro

- cabedal e produtos para tratar o couro

- lufrificantes e líquidos para automóveis

- lufrificantes para sistemas transportadores

- lubrificantes fluidos hidráulicos

- óleos hidráulicos

- massas lubrificantes

- enzimas de diagnóstico

- conjuntos para diagnóstico

- material médico.

- óleos de corte

- limpa metais

- fluidos para trabalhos de metalurgia.

Controlo de odores condicionadores de ar

(componente activo)	- colchões para animais - camas para gatos - preparações de artigos químicos de toillete - desodorizantes - humidificadores - desodorizantes industriais - composições desinfectantes - desodorizante para casas de banho.
Tintas e revestimentos	- emulsões de revestimentos - tintas
Papel e pasta de madeira e	- materiais absorventes de pasta
seus produtos	de madeira e pasta de papel - materiais de embalagem de pasta de papel e pasta de madeira - papel - produtos de papel - tratamento de papéis - coberturas para sabonetes - pasta de madeira - produtos de pasta de madeira

-12( ίί *

Fábricas de papel	- lamas das fábricas de papel - lamas de polpa e pasta de papel
Combustíveis provenientes	- combustíveis de aviação (jet
da refinação de petróleo	fuel e av gas - combustíveis para queimadores, motores a diesel e turbinas - pastas de carvão - aditivos para gasóleo - gasóleo - combustíveis - gasolina - óleos de aquecimento - hidrocarbonetos - petróleo iluminante - gases de petróleo liquefeitos - matéria-prima para a petroquímica - transporte, produção e armazenagem de produtos de petróleo, - produtos do petróleo reciclados - fuelóleo residual - óleos para turbinas
Medicamentos	- antifúngico tópico e anti-

-bacteriano

-13Químicos para fotografia e processos fotográficos

- tratamento de fotografia - águas para lavagens

- produtos químicos para tratamento de chapas fotográficas (reveladores, estabilizantes, etc.)

Impressão

- soluções de origem (impressão)

- componentes de tinta (pigmentos, resinas, dissolventes, etc.)

- tintas

Dezinfectantes (activo) desinfectantes

Sabões, detergentes e produtos de limpeza

- desinfectantes para lacticínios

- desinfectantes dentais

- desinfectantes para fermentação

- desinfectantes para preparações de alimentos

- desinfectantes para tratamento de alimentos

- desinfectantes médicos

- desinfectantes para veterinária

- produtos de limpeza

- detergentes e produtos para lavagens manuais e automáticas

-14- outros produtos de limpeza domésticos

- produtos de limpeza industriais

- sabões líquidos, produtos para lavagens de mãos, lavagem de louças

- removedor de oleos e de massas lubrificantes

- sabões em pó

- matérias-primas para produtos de limpeza

- sabões

- agentes tensioactivos

Têxteis e produtos para têxteis

- tecidos aparelhados

- estopas

- telas

- mercadorias para telas

- alcatifas

- forros para alcatifas

- roupas

- tecidos revestidos

- cortinas

- tepeçarias

- têxteis sintéticos

- fibras

- geotexteis

- mercadorias feitas com tecidos

- malhas

- redes

- cordame “ ms/núcis

- acessórios para têxteis

- produtos para têxteis

- têxteis

- estofos

- tecidos de tecelagem

- fios

Tratamento de têxteis fixadores de corantes

- corantes

- lubrificantes para fibras

- modificadores manuais

- vernizes

- fluidos para tratamento de têxteis

Agentes terapêuticos (activos ou conservantes) saude animal/veterinária

- aquacultura dentes

- saúde humana

- farmácia/terapêutica

-16Tratamento

X, de águas - pérolas de carvão

- resinas de desionização

- filtros

- membranas

- membranas para osmose inversa

- ultrafiltros

- purificação de águas

- condutas de purificação de águas, tubagens

Aplicações

Diversos para madeiras - corantes para madeira

- madeira

- produtos de madeira

- álcoois

- produtos para incorporação de ãgua ou geles

- cerâmica

- estojos para lavagem de lentes de contacto

- circuitos electrónicos

- produtos químicos para electrõnica

- produção de enzimas para alimentos enzimas industriais

- enchimentos de geles

- reagentes para laboratório

- anti-incrustantes para marinhos

- agentes anti-míldio

- aplicações em minas

- borracha natural

- aplicações para campos de petróleo

- condutas

- plásticos

- sistemas polimêricos

- polímeros e resinas (sintéticos e naturais)

- conservação de reagentes

- borracha

- produtos para borracha

- dissolventes para couro

- películas protectoras sólidas/decorativas

- piscinas

- tratamentos de resíduos

- acondicionamento de desperdícios

As quantidades do composto a utilizar dependem da aplicação. As quantidades úteis para uma aplicação particular são idênticas às quantidades utilizadas para outros compostos microbicidas.

Os compostos podem ser utilizados em associações com outros agentes microbicidas. A designação microbicida consideί ra-se equivalente à antimicrobiana tal como aqui se aplica.

Os métodos apropriados para aplicação dos compostos de fórmula geral I para o controlo de fungos, bactérias, algas, vírus, leveduras, etc. são, quer em quantidades quer nos veículos, matéria convencional conhecida.

Os exemplos seguintes apresentam-se para ilustrar alguns aspectos da presente invenção, mas não se consideram limitativos.

EXEMPLO 1

Preparação do éster metílico de N-iodopropargiloxicarbonilo-glicina

Λ.;.

o

Adicionaram-se 18,00 ml (149,2 mmole) de cloroformato de triclorometilo a uma pasta do cloridrato do éster metílico de glicina, 12,56 g (100,0 mmole), em 200 ml de 1,4-dioxano anidro e submeteram-se a refluxo durante 5 horas agitando-se em seguida à temperatura ambiente durante 16 horas. Eliminou-se o excesso de cloroformato de triclorometilo e de 1,4-dioxano na mistura reaccional por meio de destilação a pressão ligeiramente reduzida. O resíduo resultante foi destilado para se obter o produto intermédio desejado, 10,02 g (rendimento 87,1 Z) do éster metílico do ácido 2-isocianatoacético, sob a forma de um líquido incolor.

P.E. 67°-68° C (15-20 mmHg); ^H-RMN (200 MHz, CDCl₃)d_ppm = 3,84, s, 3H (-0¾), 3,97, s, 2H (-N-CH₂-C).

Dissolveram-se 10,02 g (87,06 mmole) do éster metílico do ácido 2-isocianatoacético em 100 ml de tolueno anidro e trataram-se com uma solução contendo 15,84 g (87,05 mmole) de álcool iodopropargílico em 50 ml de tolueno anidro, seguida de 6 gotas de dilaurato de di-n-butil-estanho. Aqueceu-se a mistura reaccional até á temperatura de 85° C durante 17,5 horas, arrefeceu-se para a temperatura ambiente e diluiu-se a mistura reaccional heterogénea com acetato de etilo. Lavou-se a solução por três vezes com 60 ml de água, 3 x 60 ml de hidrogenossulfato de potássio aquoso a 10 Z, 3 x 60 ml de uma solução aquosa saturada de carbonato de hidrogénio e sódio, 60 ml de uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre

sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se a pressão reduzida pàra se obterem 25,5 g (rendimento bruto 94,7 %) de um sólido cristalino amarelo. A recristalização no seio de cloreto de metileno/hexano forneceu 12,97 g do éster metílico de N-iodopropargiloxicarbonil-glicina (composto 2) sob a forma de um sólido cristalino branco com um ponto de fusão 93,5°-95,0° C.

^-RMN (200 MHz, CDClJd = 3,78, s, 3H (-OCH3), 4,01, d, 2H i o ppm (-CH₂-NH-), 4,86, s, 3H (-CH₂-), 5,33, s largo, 1H, (NH). Concen trou-se o líquido mae do composto 2 a pressão reduzida, submeteu-se o resíduo a cromatografia sobre 200 g de gel de sílica e aluíu-se com uma mistura a 6:1 de cloreto de metileno a 25 2 em hexano e acetato de etilo, para se obterem 8,43 g do éster metílico de N-iodopropargiloxicarbonil-glicina (composto 2) sob a forma de um sólido cristalino branco. Esta segunda colheita de material apresentou um ponto de fusão de 88°-92° C. 0 rendimento total desta reaeção foi de 82,8

EXEMPLO 2

Preparação de N-iodopropargiloxicarbonilo-glicina

H .0

-21Dissolveram-se 8,03 g (27,03 mmole), do composto 2, o éster metílico de N-iodopropargiloxicarbonilo-glicina, em 100 ml de tetra-hidrofurano, arrefeceu-se para a temperatura de 0° C em banho de gelo e tratou-se durante 15 minutos com 30,5 ml de hidróxido de lítio aquoso 1 M. Agitou-se a mistura reaccional à temperatura de 0° C durante 45 minutos ou até que o material inicial não se encontrasse presente. O progresso da reacção foi i

controlado por cromatografia em camada fina (gel de sílica, cloreto de metileno/ácido acético a 90:10). Após a reacção estar completa, acidificou-se a solução aquosa para pH 2 com 100 ml de uma solução de hidrogenossulfato de potássio aquoso a 10 % e ml de cloreto de hidrogénio aquoso 3 N. Extraíu-se esta mistura várias vezes com éter dietílico. Reuniram-se as camadas etéreas, lavaram-se com água, secaram-se sobre sulfato de magnésio, filtraram-se e concentraram-se a pressão reduzida para se obter o Composto 1, a N-iodopropargiloxicarbonil-glicina sob a forma de um óleo cor ambar claro que cristalizou após repouso, fornecendo 6,63 g (rendimento de 86,7 2 após secagem em vácuo e sobre Ρ₉Ο_ς). P.F. 108°-110° C. ^H-RMN (200MHz., DMSOd,)d z 5 o ppm =3,67., d, 2H, (-NH-CH₂-), 4,76, s, 2H (C-CH₂-O), 7,66, t, ÍH (NH).

EXEMPLQ 3

Preparação do éster N-octílico de N-iodopropargiloxicarbonil-glicina ίίΎ

Hl

ο.

Ca^Hi7

ODissolveram-se 6,50 g (22,97 mmole) de composto 1, a N-iodopropargiloxicarbonil-glicina em 100 ml de acetonitrilo anidro, trataram-se com 3,5 ml (23,40 mmole) de 1,8-diazabiciclo-[5.4.0]undec.-7-eno e agitaram-se â temperatura ambiente durante 5 minutos. Adicionaram-se 4,0 ml (23,16 mmole) de brometo de n-octilo e agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante 17 horas aquecendo-se ã temperatura de refluxo durante 6 horas. Concentrou-se a mistura reaccional a pressão reduzida e dissolveu-se o resíduo resultante em acetato de etilo. Lavou-se a solução de acetato de etilo com água, ácido cítrico aquoso a 5 %, solução aquosa saturada de carbonato de hidrogénio e sódio, solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre cloreto de magnésio, filtrou-se e concentrou-se a pressão reduzida. O resíduo resultante purificou-se aplicando-se a uma coluna cromatográfica de gel de sílica, 200 g, eluin do-se com uma mistura de acetato de etilo/hexano a 1:10 para se o composto 3, ο éster n-octílico de N-íodopropargiloxicarbonil-glicina, sob a forma de um líquido transparente incolor que cristalizou por repouso.

P.F. 43°-46° C. Análise elementar: C^H₂₂NO^I: Cale'. C: 42,55,

H 5,61, N: 3,54. Determ: C: 43,73, H: 5,62, N: 3,54. (Presente

0,5 mole 7„ de acetato de etilo). (200 MHz, CDCl_Q)d = ppm = 0,89, m, 3H (-CH^), 1,30, m, 10H (-CH^-CH-j) , 1,64, m, 2H (-CH₂-), 4,0, d, J=3,4 Hz., 2H (-N-CHp, 4,1-4,2, m, 2H (-CH₂-), 4,86, s, 2H (C-CH₂-0), 5,32, m, ^XH (-NH-). IV (neat) 3460, 2920, 2850, 2200, 1740, 1560, 1480, 1400, 1360, 1200, 1060, 980 cm¹.

EXEMPLO 4

Preparação do éster iodopropargílico de N-iodopropargiloxicarbonil-glicina

O

Dissolveram-se 4,96 g (17,52 mmole) do composto 1, N-iodopropargiloxicarbonil-glicina em uma mistura de 450 ml de cloreto de metileno com 20 ml de 1,4-dioxano e arrefeceu-se para a temperatura de 0° C em banho de gelo.

Adicionaram-se 3,51 g (19,29 mmole) de álcool iodopropargílico seguido de 0,22 g (1,80 mmole) de 4-dimetilaminopiridina e 4,17 g (21,75 mmoles) de cloridrato de N-(dimetilaminopropil)-Ν'-etilcarbodi-imida. Agitou-se a mistura reaccional ã temperatura de 4° C durante 17 horas. Após aquecimento para a temperatura ambiente, diluiu-se a mistura reaccional com cloreto de metileno, lavou-se com água, uma solução aquosa de hidrogenojs i

sulfato de potássio a 10 l, uma solução aquosa saturada de carbonato de hidrogénio e sódio, uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre sulfato de magnésio, filtrou-se e concentrou-se a pressão reduzida para se obterem 8,26 g de composto 4, o éster iodopropargílico de N-iodopropargiloxicarbonil-glicina, sob a forma de um sólido cristalino branco.

P.F.: 86°-88° C; ^-RMN (200 MHz, CDClOd = 4,05, d, J=5,6 Hz, o ppm

2H (NH-CH₂~), 4,89, d, J=10,2 Hz, 4H (C-CH₂-0), 5,32, m, 1H (-NH-).

EXEMPLO 5

Preparação do éster metílico de N-iodopropargiloxicarbonil-alanina

Preparou-se uma pasta de 6,0 g (42,99 mmole) do cloridrato do éster metílico de L-alanina em 125 ml de 1,4-dioxano anidro, tratou-se com 7,8 ml (64,66 mmole) de cloroformato de triclorometilo e aqueceu-se até a temperatura de 55° C durante 20 horas e 30 minutos. Eliminou-se o excesso de cloroformato de triclorometilo e de 1,4-dioxano da mistura reaccional por destilação a pressão ligeiramente reduzida. Submeteu-se o resíduo i

resultante a uma destilação para se obter o produto intermédio pretendido, 4,64 g (rendimento de 83,6 %) do éster metílico do ácido 2-isocianatopropionico, sob a forma de um liquido transparente incolor. P.F. 58° C (15-20 mmHg). ^H-RMN (200 MHz, CDCl₃)d_ppm = 1,54, d, J=8Hz, 3H (-CH₃), 3,87, s, 3H (-OCHp, 4,13, q, J=8Hz, 1H(-CH-CH₃), IV (neat) 3000, 2960, 2270, 1745, 1455, 1445, 1385, 1305, 1230, 1110 cm'¹.

Adicionou-se uma solução constituída por 6,60 g (36,27 mmole) de álcool iodopropargílico em 30 ml de tolueno anidro, a uma solução de 4,64 g (35,94 mmole) do éster metílico do ácido 2-isocianatopropiónico em 40 ml de solução anidra e agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante 2 horas e 30 minutos, em seguida a 70° C durante 17 horas. Após arrefecimento, diluiu-se a mistura reaccional com tolueno e lavou-se com água, hidrogenossulfato de potássio aquoso a 10 Z, água, solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre sulfato de magnésio, filtrou-se e concentrou-se a pressão

reduzida para se obterem 9,55 g (rendimento de 85,4 Z de produto impuro) de um sólido cristalino amarelo, após filtração e concentração a pressão reduzida. Recristalizou-se o material impuro no seio de acetato de etilo/hexano para se obterem 5,85 g de composto 6, o éster metílico de N-iodopropargiloxicarbonil-alanina, sob a forma de um sólido cristalino branco. P.F.: 100°-102°i C; ^H-RMN (200 MHz, CDCl₃)d_ppm = 1,43, d, J=8Hz,

3H (-CH₃), 3,77, s, 3H (-OCHp, 4,38, m, 1H (-CH-CHp , 4,85, d, J=2,7 Hz, 2H (-C-CH₂-O), 5,39, m, ΙΗ (-NH-). IV (CHCl·^ 3450, 2970,’2210,'I735,i1515,i1469,i1350,i1080 cm¹.

EXEMPLO 6

Preparação de N-iodopropargiloxicarbonil-alanina

O CH₃ ^H o

Dissolveram-se 4,00 g (12,86 mmole) de composto 6, o éster metílico de N-iodopropargiloxicarbonil-alanina, em 100 ml de uma mistura de tetra-hidrofurano e ãgua a 3:1, e arrefeceu-se para a temperatura de 0° C com um banho de gelo. Adicionaram-se 0,35 g (14,61 mmole) de hidróxido de lítio e agitou-se a mistura reaccional por um período de 2 horas. Filtrou-se a mistura reaccional, concentrou-se a pressão reduzida, redissolveu-se com água e acidificou-se com uma solução aquosa de hidrogenossulfato de potássio a 10 Z. Extraiu-se a mistura aquosa por várias vezes com cloreto de metileno. As fases de cloreto de metileno

-27reuniram-se, lavaram-se com agua, secaram-se sobre sulfato de magnésio, filtraram-se e concentraram-se a pressão reduzida, para se obterem 2,72 g (rendimento de 71,2 Z) do composto 5, N-iodopropargiloxicarbonil-alanina, sob a forma de um sólido cristalino branco.

P.F.: 95°-99° C; -'H-RMN (200 MHz, DMSOd,)d = 1,28, d, J=8 Hz, o ppm

3H (-CH-CH-p·, 4,00, m, ÍH (-CH-CH₃), 4,75, s, 2H (-CH₂-O), 7,7, d, J=8Hz, ΙΗ (-NH-), 12,57, s, ÍH (-COOH). IV (KBr) 3500-2000, 2200, 1670-1715, 1530, 1450, 1335, 1250, 1075, 1050 cm^-1.

EXEMPLO 7

Preparação do éster n-octílo de N-iodopropargiloxicarbonil-alanina ch₃ ⁼'0^Ν^?γ^θ,θβΗΐ7 ^H O

Dissolveram-se 0,95 g (3,20 mmole) do composto 5, N-iodopropargiloxicarbonil-alanina, em 15 ml de N,N-dimetilformamida anidra e trataram-se com o seguinte: 0,60 ml (3,81 mmole) de n-octanol, 0,68 g (4,07 mmole) de cloridrato de N-(dimetilaminopropil)-Ν'-etilcarbodi-imida e 0,041 g

(0,336 mmole) de 4-dimetilaminopiridina. Agitou-se a mistura reaccional ã temperatura ambiente durante 10 minutos e em seguida manteve-se à temperatura de 4° C durante 17 horas. Diluiu-se a mistura reaccional com acetato de etilo e lavou-se com água, solução aquosa a 10 % de hidrogenossulfato de potássio ãgua, solução aquosa saturada de carbonato de sódio,“ãgua, solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre sulfato de magnésio, filtrou-se e concentrou-se a pressão reduzida para se obter um óleo. Submeteu-se o óleo a cromatografia sobre 50 g de gel de sílica e eluiu-se com hexano/acetato de etilo a 9:1, obtendo-se 0,97 g (rendimento de 74 X) do composto 7, o éster n-octílico de N-iodopropargiloxicarbonil-alanina, sob a forma de um óleo incolor.

’-Η-ΕΜΝ (200 MHz, CDCl_q)d _ = 0,93, m, 3H (-CH₉-CH_Q), 1,34, m, 10H (-(CH₂)₅-CH₃), 1,47, d, J=8Hz, 3H (-CH-CHg), 1,7, m, 2H (-CH₂-), 4,18 t, J=8Hz, 2H (-O-CH₂-CH₂), 4,4, m, IH (-CH-CHg), 4,87, s, 2H (-C-CH₂-O), 5,42. m, IH (-NH-).IV (CHClg) 3440,

2940, 2870, 2210, 1745, 1505, 1455, 1340, 1070 cm¹. IV (neat)

3350, 2930, 2860, 2200, 1740, 1515, 1445, 1070 cm¹.

EXEMPLO 8

Preparaçao do éster metílico de N-iodopropargiloxicarbonil-fenilalanina .O.

CH<

Preparou-se uma pasta com 6,0 g (27,82 mrnole) de cloridrato do éster metílico de L-fenilalanina em 125 ml de l, 4-dioxano anidro. Tratou-se com 5,05 ml (41,86 mrnole) de cloro formato de triclorometilo e aqueceu-se à temperatura de 55° C durante 17 horas e 30 minutos. Eliminou-se da mistura reaccional por destilação, a pressão ligeiramente reduzida, o excesso de cloroformato de triclorometil e de 1,4-dioxano. Submeteu-se o resíduo resultante a uma destilação em alto vácuo para se obterem 4,78 g (rendimento de 84 Z) do produto intermédio desejado, o éster metílico do ãcido 2-isocianato-3-fenilpropiónico, com um ponto de ebulição de 83° -85° C (100 m Hg) sob a forma de um líquido transparente incolor. ^H-RMN (200 MHz, CDCl^d = 3,12, dd, J=8,5 Hz, 2H (-CH₂-Ph), 3,83, s, 3H (-GOOG^), 4,28, m, 1H (-GH-CH₂-), 7,15-7,4, m, 5H (Ar-H).

Adicionou-se uma solução de 4,66 g (25,61 mrnole) de álcool iodopropargílico em 50 ml de tolueno anidro a uma solução constituída por 4,78 g (23,29 mrnole) de éster metílico do ãcido 2-isocianato-3-fenilpropiónico em 50 ml de tolueno anidro, contendo 5 gotas de dilaurato de di-n-butil-estanho e agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante 17 horas.

Após arrefecimento, diluiu-se a mistura reaccional com tolueno e lavou-se com ãgua, solução aquosa a 10 Z de hidrogenossulfato de potássio, ãgua, solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre sulfato de magnésio, filtrou-se e concentrou-se a pressão reduzida para se obterem 8,87 g (rendimento de 98,3 X) de composto 9, o éster metílico de N-iodopropargiloxicarbonil-fenil-alanina, sob a forma de um sólido cristalino branco.

P.F. 100°-103° C; ^H-RMN (200 MHz, CDCl_q)d =3,13, m, 2H 3 ppm (-CH₂-Ph), 3,75, s, 3H (COOCH₃), 4,65, m, IH (-CH-), 4,83, s, 2H (C-CH₂-O), 5,25, m, IH (-NH-), 7,05-7,4, m, 5H (Ar-H).

EXEMPLO 9

Preparação de N-iodopropargiloxicarbonil-fenil-alanina

Ph

O

H

O.

Dissolveram-se 7,05 g (18,21 mmole) de composto 9, o éster metílico de N-iodopropargiloxicarbonil-fenilalanina em 100 ml de uma mistura de tetra-hidrofurano e ãgua a 3:1, e arrefeceu-se para a temperatura de 0° C em banho de gelo. Adicio naram-se 0,483 g de hidróxido de lítio (20,17 mmole) e agitou-se a mistura reaccional durante 1 hora e 30 minutos. Adicionaram-se mais 45 mg de hidróxido de lítio à mistura reaccional e continuou-se a agitação durante 30 minutos. Concentrou-se a mistura reaccional a pressão reduzida para eliminar o tetra-hidrofurano, redissolveu-se com água e acidificou-se com uma solução aqiosa a 10 Z de hidrogenossulfato de potássio. 0 precipitado branco resultante isolou-se por filtração. Dissolveu-se i

o sólido em éter dietílico e lavou-se com água, solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre sulfato de magnésio, filtrou-se e concentrou-se a pressão reduzida para se obterem 5,97 g de composto 8, N-iodopropargiloxicarbonil-fenilalanina (rendimento de 87,8 %), sob a forma de um sólido branco. ^XH-RMN (200 MHz, DMS0d.)d = 2,95, dd, J=4,16 Hz, 2H (-CH₉-Ph),

W [Τ' ir ““

4,15, m, 1H (-CH-CH₂-), 4,7, s, 2H (-C-CH₂-O), 7,3, m, 5H (Ar-H), 7,75, d, J=8Hz, 1H (-NH-), 12,8, m, 1H (COOH). IV (CHC1₃) 3600-2400, 3420, 2200, 1730, 1500, 1065 cm¹.

EXEMPLO 10

Preparação de éster n-octílico de N-iodopropargiloxicarbonil-fenilalanina.

Ph

O.

C„H

8^r17

Dissolveram-se 2,00 g de composto 8, o N-iodopropargiloxicarbonil-fenilalanina (5,36 mmole) em 20 ml de 1,4-dioxano anidro e trataram-se com o seguinte: 0,95 ml (6,03 mmole) de n-octanol, 1,08 g (6,47 mmole) de cloridrato de N-(dimetilaminopropil)-N’-etilcarbodi-imida e 0,073 g (0,598 mmole) de 4-dimetil aminopiridina. Adicionaram-se, 5,00 ml de N,N-dimetilf ormamida a esta mistura reaccional heterogénea para se obter uma solução homogénea. Agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante 10 minutos e em seguida manteve-se por um período de 17 horas à temperatura de 4° C. Concentrou-se a mistura reaccional a pressão reduzida para se obter o

1,4-dioxano, diluiu-se com cloreto de metileno e lavou-se com água, solução aquosa saturada de hidrogenossulfato de potássio, ãgua, solução aquosa saturada de carbonato de sódio, ãgua, solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre sulfato de magnésio, filtrou-se e concentrou-se a pressão reduzida para se obter um óleo amarelo pálido viscoso que solidificou por repouso. Submeteu-se o óleo a cromatografai sobre 70 g de gel de sílica e eluiu-se com uma mistura de hexano/acetato de etilo a 9:1, obtendo-se 1,98 g do composto 10, o éster n-octílico de N-iodopropargiloxicarbonil-fenilalanina (rendimento de

76,2 X) sob a forma de um sólido cristalino branco.

(200 MHz, CDCl₃)d_ppm = 0,9, m, 3H (-¾). 1,3, m, 10H (-(CH₂)₅-CH₃), 1,58, m, 2H (-CH₂-), 3,13, d, J=5Hz, 2H (-CH₂-Ph), 4,1, t, J=5Hz, 2H (-O-CH₂-CH₂-), 4,63, m, 1H (-CH-CH₂-), 4,72, s, 2H (C-CH₂-O), 5,27, d, J=8Hz, 1H (-NH-), 7,1-7,35, m, 5H (Ar-H). IV (CHC1₃) 3440, 2940, 2870, 1730, 1505, 1355, 1120 cm^-1.

EXEMPLO 11 - Actividade Biológica

A. ACTIVIDADE BIOLÕGICA :

Realizaram-se avaliações biocídicas, isto é, bactericida, algicida e fungicida.

Obteve-se a concentração inibidora mínima (CIM) , utilizando um caldo num teste de diluição de duas séries da seguinte forma: uma solução armazenada ou uma dispersão do composto a ensaiar, normalmente com uma concentração a 1 Z, foi preparada em uma solução de dissolventes a 5:3:2 constituída por acetona, metanol e água. Distribuiu-se um volume da solução armazenada em meio de cultura para se obter uma concentração de teste inicial de 50 ppm de composto.

Quando o ensaio estava pronto, cada recipiente das séries de diluição, excepto o primeiro, continha um volume igual de caldo isento de composto. O primeiro recipiente continha duas vezes o volume de caldo com uma concentração inicial do composto em ensaio. Metade do caldo do primeiro recipiente foi transferido para um segundo recipiente. Após mistura, metade do volume resultante foi retirado do segundo recipiente e transferido para um terceiro. Repetiu-se o ciclo completo suficientemente para se obter uma série de concentrações de 500, 250, 125, 63, 31, 16, 8 e 4 ppm (ou 100, 50, 25, 12,5, 6,2, 3,1, 1,6 e 0,8), respectivamente .

Em seguida, inoculou-se cada recipiente com uma suspensão de células do organismo para o teste apropriado. Desen volveram-se bactérias no caldo, e fungos em agar inclinado durante um período e a uma temperatura apropriados à espécie a ensaiar e algas, uma mistura de bactérias de algas verdes e algas azuis, em meio nutriente. No fim do período de desenvolvimento, ao caso de cada bactéria, o caldo foi submetido a i

agitação em vortex para dispersão das células. No caso dos fungos, recolheram-se os esporos por pipetagem de ãgua sobre os poros de plano inclinado e desalojados por meio de uma ansa estéril. A suspensão de células/esporos foi normalizada por controle do tempo de incubaçao, da temperatura e volume do diluente. Em seguida, utilizou-se a suspensão para inocular os recipientes que continham o composto em caldo.

A cultura de algas, continha bactérias de algas verdes e algas azuis, tendo sido obtida numa torre de arrefecimento em Spring House, Pensilvânia. A cultura de algas desenvolveu-se em meio de Allen num agitador rotativo sob luz fluorescente. Esta cultura foi depois diluída em meio de Allen e, em seguida, adicionada ao recipiente de ensaio.

Os recipientes incubaram-se a uma temperatura apropriada. Após a incubação, examinaram-se os recipientes relativamente ao crescimento. Definiu-se a concentração inibidora mínima (CIM) como a menor concentração do composto que resulta

numa inibição total do desenvolvimento do organismo em ensaio.

Os organismos ensaiados que demonstraram actividade biocida incluem :

BACTÉRIAS :

Pseudomonas fluorescens (PSFL), gram negativo

Pseudomonas aerugenosa (PSAE), gram negativo

Escherichia coli (ECOL), gram negativo

Staphylococcus aureus (SAUR), gram negativo.

FUNGOS :

Aspergillus niger (ANIG)

Aureobasidium pullulans (APUL)

Os resultados dos ensaios para determinação da concentração inibidora mínima (CIM) dos compostos da presente invenção, apresentam-se no Quadro I face aos microorganismos apresentados no Quadro II.

-36QUADRO I

RESULTADOS DO TESTE GIM PARA BIOCIDAS SECUNDÁRIOS

com sais	Estes compostos e glucose).	foram analisados	em M9G	(meio mínimo
Composto	(G-)	(G-)	(G-)	(G+)	(F)	(F)
	PSFL	PSAE	ECOL	SAUR	ANIC	APUL ALGAE
1	250	500	250	250	500	500
2	16	32	32	16	4	4
3	8	500	500	8	4	4
4	32	125	125	32	0,	12 0,12 12,.
5	125	500	125	250	125	32
6	4	32	4	16	4	4
7	8	125	4	63	4	63
8	63	250	4	125	250	250
9	125	500	500	125	4	4
10	32	63	4	32	125	125

QUADRO II

MICROORGANISMOS UTILIZADOS NOS ENSAIOS DE BIOCIDAS

DESIGNAÇÃO

BACTÉRIAS

1. Pseudomonas aeruginosa

2. Staphylococcus aureus

3. Escherichia coli

4. Pseudomonas fluorescens

FUNGOS

5. Aspergillus niger

6. Aureobasidium pullulans

GRAM ATCC NQ	Abreviatura Utilizada
(-)	15442	PSAE
(+)	6538	SAUR
(-)	11229	ECOL
(-)	948	PSFL

6275 ANIG

9348 APUL

mula geral

Claims

Processo para a preparação de compostos de Sor

0 R,

R(r)

-39na qual

R^ representa um átomo de hidrogénio, um grupo al_ quilo inferior ₄ ou alquil-arilo ou um grupo de fórmula geral Cí^SR ou CKÍCK^JOR em que

R representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C^_₄, arilo Cg_^_Q, aril-alquilo Cg_₁₄ ou alcarilo C_r--.; e 6 14

R₂ e R^ têm os significados definidos antes, para o símbolo R;

caracterizado pelo facto (a) de se converter o cloridrato de um éster de um D- ou L-aminoácido no correspondente éster alquílico de um 2-isocianato; de. se fazer reagir o isocianato resultante com álcool iodopropargílico para se. obter o éster pretendido do aminoácido

N—iodopropargiloxicarbonílico; e de se submeter, eventualmente, o éster obtido antes a hidrólise alcalina-para se obter o aminoácido N-iodopropargiloxicarbonílico livre correspondente; ou (b) de se esterificar um aminoácido N-iodopropargiloxicarbonílico livre com um álcool ou um halogeneto de alquilo apropriado utilizando técnicas convencionais.
2,- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de éster metílico da N-iodopropargiloxicarbonil-glicina;

N-iodODrooargiloxicarbonil-clicina;

-40- ΛΧ éster n-octílico da N-iodopropargiloxicarbonil-glicina; éster iodopropargílico da N-iodopropargiloxicarbonil-glicina; éster metílico da N-iodopropargiloxicarbonil-alanina; N-iodopropargiloxicarbonil-alanina;

éster n-octílico da N-iodopropargilQXicarbonil-alanina; éster metílico da N-iodopropargiloxicarbonil-fenilalanina; N-iodopropargiloxicarbonil-fenilalanina; ou éster n-octílico da.N-iodopropargiloxicarbonil-fenilalanina; caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais corraspondantemente substituídos.
3. - Processo para a preparação de composições micro bicidas apropriadas para múltiplas utilizações industriais, ca racterizado pelo facto de se misturar, como ingrediente activo, uma quantidade eficaz, compreendida entre 0,0001 e 50% em peso da composição., de preferência entre 0,001 e 10%, de um composto de fórmula geral I preparado pelo processo de acordo com as reivindicações 1 ou 2 e com acção antimicrobiana, com um veículo aceitável em agronomia, um cosmético, um óleo solúvel de corte, um sabão ou detergente de síntese, um agente estabilizante ou um agente capaz de formar películas.
4. - Método para impedir ou inibir o crescimento de bactérias, fungos ou algas em um local susceptível ou sujeita ao desenvolvimento desses microrganismos como, por exemplo, ma deiras, tintas, adesivos, colas, oaoéis, têxteis, couros, cias f

ticos, cartões, lubrificantes, cosméticos, alimentos, materiais para calafetagem, água potável ou água para fins industriais, caracterizado pelo facto de se incorporar, no locai que se pretende proteger, uma quantidade eficaz relativamente ao desenvol vimento de microrganismos citado antes, por exemplo igual a 500 ppm, de um composto de fórmula geral I ou uma composição preparados pelo processo de acordo com as reivindicações 1 a 3 .