PT97437B

PT97437B - Processo de preparacao de derivados de hidrato de carbono e de composicoes farmaceuticas que os contem

Info

Publication number: PT97437B
Application number: PT97437A
Authority: PT
Inventors: Constant Adriaan Anton Boeckel; Maurice Petitou
Original assignee: Akzo Nv; Sanofi Sa
Priority date: 1990-04-23
Filing date: 1991-04-22
Publication date: 1998-08-31
Also published as: AU7525591A; CA2040905A1; HU911346D0; ZA912951B; BR1100979A; PT97437A; DE69100275D1; IL97904A; FI101541B; IE911277A1; FI911942A0; DK0454220T3; EP0454220A1; FI101541B1; DE69100275T2; EP0454220B1; IL97904A0; IE64378B1; HK1002319A1; HU211506A9

Description

MEMÓRIA DESCRITIVA presente invento refere-se a um derivado de hidrato de carbono que compreende uma unidade de trissacárido com a fórmula geral I coo“

J-0 oso₃—o (I)

0.

OQ \ / coo

Λ_ο-Λ^οκ

oso₃ oso₃ na qual R é alquilo, arilo, ou aralquilo; Q é alquilo, arilo, aralquilo, ou SO^; A e B são, independentemente um do outro, seleccionados de entre hidrogénio, alquilo, arilo, aralquilo, ou um grupo de hidrato de carbono;

e as porções carregadas sao compensadas por contra-iões.

presente invento refere-se também a um processo de preparação do derivado de hidrato de carbono mencionado, bem como às composições farmacêuticas que o contêm.

Os derivados de hidrato de carbono deste invento possuem uma actividade anti-trombótica, e têm especialmente uma actividade anti-xa potente sem a actívaçao da trombina via anti-trombina-III (ΑΤ-III) e inibem a proliferação das células do músculo liso.

No pedido de patente Europeia 0.301.618, referem-se hidratos de carbono relacionados. Os compostos aí descritos são pentassacáridos sulfatados DEFGH (código de letras de acordo com a EP 0.301.618). A unidade de trissacárido dos presentes compostos corresponde à parte EFG dos compostos da arte anterior, mas difere destes no que diz respeito aos grupos hidroxilo livres dos ãcidos urónicos E e G que são alquilados, arilados, ou aralquílados.

Verificou-se agora que os compostos deste invento possuem uma melhor afinidade de ligação à anti-trombina III, o que origina um melhor perfil farmacocinético, tempos de semi-vida mais

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-4longos, maior especificidade e dosagens terapêuticas menores e, consequentemente, menos efeitos secundários. Além disso, os compostos deste invento possuem uma melhor actividade anti-trombina mediada pelo cofactor de heparina II (HCII) e são, por isso, mais eficazes como inibidores da produção de trombina do que os compostos da arte anterior. A inclusão de ácidos urónicos funcionalizados com alquilo, arilo ou aralquilo dá também uma importante vantagem sintética sobre os compostos da arte anterior. Com a funcionalização dos grupos hidroxilo por grupos alquilo, arilo, ou aralquilo, na maior parte dos casos, a preparação de hidratos de carbono protegidos temporariamente é redundante, o que torna o caminho sintético consideravelmente mais curto e mais simples, ao passo que a substituição da unidade glucosamina F por uma unidade glucose também simplifica significativamente a síntese da unidade de trissacãrido. Além disso, uma vantagem adicional da síntese dos compostos deste invento consiste a natureza dos grupos protectores temporários, que são necessários para a protecção dos grupos hidroxilo a serem sulfatados, não ser crítica. Relacionado com este facto é de interesse notar que as actividades biológicas dos compostos em que Q é alquilo, arilo, ou aralquilo e em que Q é S0₃~, são mais ou menos iguais, tornando-se assim menos crítico usar e. g. protecção de benzilo ou acilo na posição 2 do resíduo de ácido glucurónico. São frequentemente preferidos compostos de fórmula (I) em que Θ é S0₃ ^-, porque a protecção do 2-acilo do ácido glucurónico facilita o acoplamento β deste resíduo a uma unidade glucose. 0 grupo alquilo na definição de R, Q, A, e B é um grupo alquilo ramificado ou não ramificado com 1-20 átomos de carbono. Os grupos alquilo para grupos R diferentes poderão ser diferentes. Como exemplos temos o metilo, etilo, ísopropilo, butilo, sec-butilo, pentilo, neopentilo, hexilo, octilo, decilo, undecilo, dodecilo, tridecilo, tetradeeilo, pentadecilo, hexadecilo, octadecilo, e icosilo. Preferem-se os grupos alquilo com 1-6 átomos de carbono. Mais preferidos sao os grupos alquilo com 1-4 átomos de carbono e o mais preferido é um grupo metilo. 0 grupo Q preferido é o metilo ou S0₃~.

termo arilo na definição de R, Q, A e B significa um grupo

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tf .-'+-^:' aromático, de preferência fenilo, que pode estar substitíúído òom OH, alquilo com 1-4 ãtomos de carbono, alcoxi com 1-4 ãtomos de carbono, halogêneo (de preferência flúor, cloro, ou bromo), ou NR’R’’, onde R’ e R’’ sao seleccionadas independentemente um do outro de entre hidrogénio, alquilo com 1-4 átomos de carbono, CF₃, benziloxicarbonilo, carboxilo, e S0₃~.

termo aralquilo significa um grupo aralquilo no qual a porção alquilo é um grupo alquilo com 1-4 ãtomos de carbono e a porção arilo é um grupo arilo como o previamente definido.

grupo alquilo com 1-4 ãtomos de carbono é metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, sec-butilo, ou terc-butilo,e a porção alquilo do grupo alcoxi com 1-4 átomos de carbono tem o mesmo significado.

termo grupo hidrato de carbono na definição de A e 8, significa um mono- ou dissacárido, que pode estar opcionalmente sulfatado, ou pode estar protegido por grupos alquilo, arilo ou aralquilo como os definidos anteriormente. Os grupos hidrato de carbono adequados são, por exemplo, os derivados de glucose livres, sulfatados, alquilados, arilados, ou aralquilados, manose, galactose, glucosamina, galactosamina, ãcido glucurónico, ácido idurónico, xilose, arabinose ou seus dissacáridos. De preferência, A representa um derivado da glucose com a estrutura II:

(II) representa um derivado da glucose com a estrutura III:

OSO3

(III)

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OS/3619-598 ''•'«-Λίο

-6na qual R-^, R₂, Rg, R4, ε R₅ são seleccionados independentemerf^e uns dos outros de entre hidrogénio,alquilo, arilo, aralquilo, ou SO3-, atendendo a que o alquilo, arilo e aralquilo têm significados dados previamente, ou seus derivados, nos quais as porções carregadas sao compensadas por contra-iões. Derivados II e III muito adequados sao aqueles em que R^, R₂, e R3 sao metilo, R4 e R₅ são S0₃-, e 0R₃ adopta, preferencialmente, a configuração

a. Outro grupo A adequado tem a estrutura II no qual o R-^ é metilo e R₂ é S0₃“ e um outro grupo 8 adequado tem a estrutura III na qual R₄ e R₅ sao S0₃~ e R₃ é um grupo alquilo com 6-20 átomos de carbono.

Geralmente, acredita-se que as interacções polares multipontuais chave são de importância essencial em toda a biologia molecular, para assegurar uma alta selectividade nas associações moleculares não covalentes e a substituição de apenas um dos grupos hidroxilo chave de um oligossácarido por um grupo hidrofóbico (e, invariavelmente, um número de grupos hidroxilo revela-se essencial para a formação do complexo) pode resultar na perda total da afinidade pela proteína. Notavelmente, no entanto, os compostos preferidos deste invento que possuem grupos 0-alquilo e O-sulfato, sem grupos hidroxilo livres, ainda mostram uma actividade completa.

Os contra-iões que compensam as porções carregadas são contra-iões farmaceuticamente aceitáveis, como hidrogénio ou mais preferivelmente iões de metais alcalinos ou de alcalino-terrosos, como o sódio ou o cálcio.

Os hidratos de carbono de acordo com este invento podem ser preparados de acordo com processos bem conhecidos, descritos e usados para a síntese de polissacãridos. Neste contexto, é feita uma particular referência à patente Europeia 0.301.618, previamente referida, na qual são descritos processos para a síntese de polissacá ridos.

É possivel uma condensação por passos dos monossácaridos e dos grupos A e B. No entanto, geralmente, os blocos de construção

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que compreendem D-glucose, L-idose, ácido D-glucurónico, ou ácido L-idurónico, funcionalizados adequadamente com os grupos alquilo, arilo ou aralquilo necessários ou com grupos protectorss temporários, são condensados em conjunto na ordem desejada. Desta forma, pode ser preparada a unidade de trissacárido (protegida), que pode ser acoplada com A e B, ou os seus derivados protegidos. É também possível condensar uma parte da unidade de trissacárido com B ou um seu derivado protegido, sendo, a seguir o composto obtido acoplado com a parte restante do trissacárido, que pode ter já o grupo A ou um seu derivado protegido. Se A nao estiver ainda ligado á parte restante do trissacárido, o sacárido condensado obtido pode ser acoplado a A (ou a um seu derivado protegido) de uma forma conhecida per se. Do mesmo modo, uma parte da unidade de trissacárido (protegida) contendo A, pode ser acoplada com a outra parte, que deve ter B (ou um seu derivado protegido), após o que, se B não estiver presente, o produto da acoplaçao é condensado com B ou com um seu derivado protegido. Os grupos protectores adequados são bem conhecidos na química dos hidratos de carbono. Os grupos proteotores preferidos incluem grupos benzilo e acetilo para grupos hidroxilo e metilo e benzilo para o grupo carboxilato dos ácidos urónicos. Podem ser usados com igual sucesso outros grupos proteotores como o levulinoílo, cloroacetilo, tritilo, benzoílo, etc-.. 0 acoplamento dos sacáridos realiza-se de uma forma conhecida na arte, e. g. desprotecção da posição 1 do doador de glicosilo, activação dessa posição (e. g. fazendo um derivado de brometo, pentenilo, fluoreto, ou tricloacetamida) e acoplamento do doador de glicosilo activado com um receptor de glicosilo opcionalmente protegido.

Este processo de síntese por passos ou por blocos de construção proporciona um derivado de hidrato de carbono protegido que compreende uma unidade de trissacárido com a fórmula ge-

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0S/3Ó19-598 w·*

-8na qual R é alquilo, arilo, ou aralquilo definidos como anteriormente, é um grupo protector de ácido (de preferência metilo ou benzilo), Pg é um grupo protector de hidroxilo (de preferência benzilo ou acetilo), P₃ é um grupo protector de hidroxilo ou o grupo alquilo, arilo, ou aralquilo necessário e A’e B’ são, respectivamente, A e B, ou seus derivados protegidos . 0 derivado de hidrato de carbono IV pode ser desprotegido e sulfatado de uma forma idêntica à descrita na EP 0. 301. 618, anteriormente referida, de modo a se obter o derivado de hidrato de carbono de acordo com a fórmula I. Os processos de desprotecçao adequados são, por exemplo, a hidrólise básica para os ésteres acetílicos e metílicos, e a hidrogenólise para os ésteres benzilicos. A sulfatação pode realizar-se com sucesso com complexos de trióxido de enxofre com bases como a trimetilamina, trietilamina ou piridina num solvente adequado.

Para o tratamento da trombose venosa ou para a inibição da proliferação das células do músculo liso, deve-se administrar os compostos do invento entericamente ou parentericamente, e nos humanos de preferência numa dosagem diária de 0,00l-10mg por kg de peso corporal. Os compostos misturados com auxiliares farmacêuticamente adequados, podem ser comprimidos em unidades de dosagem sólidas tais como pílulas, comprimidos, ou podem ser processados em cápsulas ou em supositórios. Através de líquidos farmacêuticamente adequados os compostos podem, também, ser aplicados como uma preparação para injecção na forma de uma solução, suspensão, emulsão, ou como um pulverizador, e. g. um pulverizador nasal.

invento é ilustrado adicionalmente pelos exemplos seguintes.

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-9EXEMPLQ 1 ff*··

Sal undecaquis-sódio de Q-3,4-dí-Q-metil-2.6-dí-Q-sulfo-a-D-qlucopiranosil-(l74)-Q-2,3-dí-0-metil-B-D-qlucopiranuronosil-fl74)-0-2.3.6-tri-Q-sulfo-q-D-glucopiranosil-(174)-Q-3-Q-metil~

-2-Q-sulfo-α-L-idopi ranu ronosil-(194)-0-2,5,6-tri-O-sulfo-a-D-glucopiranósido de metilo.

a, 0 6-0-acetil-3,4-di-0-metil-2-0-fenilmetil-a-D-glucopiranosil-(174)-0-(2, 3-di-0-metil-β-D-glucopi ranosilu ronato de metilo) -(174)-0-3,ó-dí-0-acetil-2-0-fenilmeti1-a-D-glucopiranosil-(174)-0-(2-0-acetil-3-0~metil-q-L-idopiranosiluronato de metílo)-(174)-0-2,3,6-tri-0-acetil-a-D-glueopiranósido de metilo (0,061 mmole; preparado de acordo com os processos descritos na EP 84 999) foi dissolvido em 4,2 ml de clorofórmio e adicionado a uma mistura de 3 ml de clorofórmio, 18 ml de metanol e 3,7 ml de hidróxido de sódio 4N. A mistura foi agitada durante 20h, à temperatura ambiente, e depois de neutralizada com uma solução aquosa, diluida de ácido clorídrico foi evaporada até à secura. 0 resíduo foi tratado com metanol e os sais insolúveis foram filtrados, 0 filtrado foi evaporado até à secura para se obter o sal de dissódio de 0-3,4-di-0-metil-2-0-fenilmetil-g-D-glucopiranosil-(194)-0-2,3-di-0-metiΙ-β-D-glucopiranuronosil- (174) -0-2-0-feni lmeti 1-a-D-glucopiranosil- (174)-0-2-0-fenilmetil-g-D-glucopiranosil-(l74)-0-3-0-metil-α-L-ídopiranuronosil-(l74)-0-α-D-glucopiranosido de metilo.

b. 0 sal de dissódio de 0-3,4-di-0-metil-2-0-fenilmetil-q~D-glucopiranosil-(174)-0-2,3-di-0-metil-β-D-glucopiranuronosil-(174)-0-2-0-fenilmetil-a-D-glucopiranosi1-(174)0-3-0~metil-a-L-idopiranuronosil-(174)-0-a-D-glucopiranosído de metilo em bruto foi dissolvido numa mistura de 3 ml de água e 1 ml de metanol e adicionou-se 50 mg de Pd/C a 10%. A mistura foi agitada sob uma atmosfera de hidrogénio durante 24 h à temperatura ambiente. Após filtração, o filtrado foi evaporado até à secura, dissolvido em água e dessalifiçado em Sephadex G-25. As fracções combinadas contendo o pentassacárido foram evaporadas até à secura para se obter o sal de dissódio de 3,4-di-0-metil-a-D-glucopiranosi1-(174)-0-2,3-di-0-metil-β-D-glucopiranuronosil-(174)-0-a-D-glu72 505

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-10•X copiranosil-(l94)-0-3-0-metil-a-L-idopiranu ronosil-(l-d4)-0-a-D-glucopiranósido de metilo.

c. 0 sal de dissódio de Q-3,4-dI~Q-metil-a-D-glucapiranosil -(l-Μ )-0-2,3-di-0-metil-R-D-glucopiranuronosil-(194)-O-a-D-glucopiranosil-(l94)-0-3-0-metil-£i-L-idopiranu ronosíl-(194)-0-<2-D-glucopiranósido de metilo foi dissolvido numa mistura de 2,5 ml de dimetilformamida seca e 1,4 mmole de complexo de trióxido de enxofre-trietilamina. A mistura foi agitada durante 20 h a 50°C, após o que foi arrefecida até à temperatura ambiente e adicionou-se uma mistura de 500 g de hidrogenocarbonato de sódio em 7 ml de ãgua, A mistura foi agitada durante trinta minutos e depois evaporada até à secura. 0 resíduo foi dissolvido em água, dessalifiçado em Sephadex G-25, após o que as fraeções combinadas foram criodessecadas para dar o sal u ndecaqu is-sód i o de 0-3,4-dÍ-0-metil-2,6-di-0-sulfo-a-D-glucopiranosil-( l->4)-0-2,3-di -0-metil-B-D-glucopiranuronosil-(l94)-0-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glucopiranosil-(l94)~0-3-0-metil-2-0-sulfo-a-L-idopiranuronosil-(194)-0-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glucopiranósido de metilo, amorfo.

[a]_D ²⁰ - + 51,3° (c 0,4; água). Desvio químico dos protões anoméricos: 4,68; 5,14; 5,25; 5,28; e 5,40 ppm.

EXEMPLO 2

De uma forma semelhante à descrita no exemplo 1 podem ser preparados:

Sal tridecaquis-sódio de 0-2,3,4,6-tetra-0-sulfo-a-D--glucopíranosíl-(l94)-0-2,3-di-0-metil-fê-D-glucopiranuronosil-(l94)-0-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glucopiranosil-(194)-0-3-0-metil-2-0-sul~ fo-α-L-idopiranuronosi1-(194)-0-2,3,6-tri-O-sulfo-a-D-glucopiranósido de metilo.

[a]D²⁰ = + 44,5° (c 1; água). Desvio químico dos protões anoméricos: 4,52; 4,79; 4,97; 5,36; e 5,48 ppm.

Sal de tetradecaquis-sódio de 0-2,3,4,6-tetra-0-sulfo-a-D-glucopiranosil-(194)-0-3-0-metil-2-0-sulfo-B-D-glucopiranurono72 505

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-11:< , lí sil- (1->4) -0-2,3,6-tri-0-sulfο-α-D-glucopi ranosil- (l-í4)-0-3-0-metil-2-0-sulfo-a-L-idopiranu ronosil-(1*4 )-0-2,3,6- tri-O-sulfo-a-D-glupiranósido de metilo.

[a]_D ²⁰ - + 45,1° (c 1; água). Desvio químico dos protões anoméricos: 4,76; 5,14; 5,15; 5,48; e 5,64 ppm.

Sal undecaquis-sódio de 0-3,4-di-0-tetradecil-2,ó-di-0” -sulfo-a-D-glucopiranosil-(l-?4)-0-2,3-di-0-metil-B-D-glucopiranu~ ronosil-(D»4)-0-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glucopiranosil-(l->4)-0-3-0-meti1-2-0-sulfo-a-L-idopiranu ronosil-(l-»4 )-0-2,3,6-tri-O-sulf o -α-D-glucopiranósido de metilo. [a]_D ²⁰ = + 39,0° (c 1; água). Desvio químico dos protSes anoméricos: 4,66; 5,09; 5,24; 5,47; e 5,57 ppm.

Sal undecaquis-sódio de 0-3,4-di-0-n-hexil-2,6-dí-0-sulfo-a -D-glucopiranosil-(l-*4)~0-2,3-di-0-metil-B-D-glucopiranuronosii-(b?»-4)-0-2,3,6-tri-0~sulf o-a-D-glucopiranosil- (1^4)-0-3~0-Γηβίΐ1-2-0-sulf o-a- L-idopiranu ronosil-(l->4 )-0-2,3,6- tri-O-sulfo-a-D-glucopiranósido de metilo. [a]_D ²⁰ = + 40,8° (c 1; ãgua). Desvio químico dos protões anoméricos: 4,68; 5,14; 5,16; 5,52; e 5,56 ppm.

Sal dodecaquis-sódio de 0-3,4-di-0-metil-2,6-di-0-sulfo-a-D -glucopiranosil-(l-*4)-0-3-0-metil-2-0-sulf ο-β-D-glicopiranu ronosi 1-(1+-4 )-0-2,3,6-tri-0-sulfo~-ú-D-glucopiranosil-( l-*4)~0-30-meti1-2-0-sulfo-a-L-idopiranu ranosil-(l->4 )-0-2,3,6-tri-O-sulf o-a-D-glucopiranósido de metilo. [αΐ^θ = + 38,5° (c 1; água). Desvio químico dos protões anoméricos: 5,13; 5,14; 5,31; e 5,56 ppm.

Sal dodecaquis-sódio de 0~[(4-fenilmetoxicarbonilamíno)fenil]-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glucopiranosil-(l-*4)-0-2,3-di-0-metil-B-D-glucopiranuronosil-(l-»4)-0-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glucopiranosil-(l->4)-0-3-0-metil-2-0-sulf o-a-L-idopiranu ronosil-(1^4)-0-2,3,6-tri-O-sulfo-a-D-glucopiranósido de metilo. [a]_D ²⁰ =

- + 56,0° (c 1; água). Desvio químico dos protões anoméricos: 4,69; 5,16; 5,54; e 5,67 ppm.

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-12Sal dodecaquis-sódio de 0-(4-aminofenil)-2,3,6-tri-0-sulfo-α-D-glucopi ranosil-(1+4)-0-2,3-di-0-metil-B-D-glucopi ranu ronosil -(1+4)-0-2,3,6- tri-O-sulf ο-α-D-glucopiranosil-(l+4)-0-3-0-me til-2-0-sulfo-a-L-idopiranuronosil-(1+4)-0-2,3,6-tri-O-sulfo-a-D-

químico dos protões anoméricos: 4,69; 5,14; 5,16; 5,52; e 5,65 ppm.

Sal tridecaquis-sódio de 0-(4-sulfonaminofenil)-2,3,6~tri-0 -sulfo-a-D-glucapiranosil-(l+4)-0-2,3-di~0-metil“B~D~glucopiranuronosil-(l+4)-0-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glucopíranosil-(l+4)-0-3-0-metil-2-0-sulfo-α-L-idopiranuronosil-(1*4)-0-2,3,6-tri-O-sulfo-a -D-glucopiranósido de metilo. [α]^²⁰ - + 57,0° (c 1; ãgua). Desvio químico dos protões anoméricos: 4,69; 5,13; 5,13; 5,53; e 5,67 ppm.

EXEMPLO 3

Sal undecaquis-sódio de 0-3,4-di-0-metil-2,6-di-0-sulfo-g-D-glucopi ranosil-(1+4)-0-2,3-di-0-metil-B-D-glucopi ranu ronosil-(l-»4)-0-2,3,6-tri-O-sulf o-g-D-glucopi ranosil- (l+4)-0-3-0-octil-2-0-sulfo-α-L-idopiranuronosil-(1+4)-0-2,3,6-tri-Q-sulfo-a-D-glucopiranósido de metilo.

a. 0 0-6-0-acetil-3,4-di-0-metil-2-0-fenilmetil-g-D-glucopiranosil-(l*4)-0-(2,3-di-0-metil~e-D-glucopiranuronosiluronato de fenilmetilo)-(1+4)-0-3,6-di-0-aceti1-2-0-feniImeti1-a-D-glucopiranosil- (1+4 )-0-(2-0-benzoí1-3-0-octil-α-L-idopiranuronosiluronato de fenilmetilo)-(1+4)-0-2,3,6-tri-O-benzoíΙ-α-D-glucopiranósido de metilo (0,051 mmole) foi dissolvido em metanol e adicionou-se o catalisador (Pd/C a 10%). A mistura foi agitada sob uma atmosfera de hidrogénio durante 2 dias, à temperatura ambiente, depois, após filtração o solvente foi evaporado até à secura para se obter o 0-6-0-acetil-3,4-di-0-metil-a-D-glucopiranosil-(l*4)-0-2,3-di-0-met.i Ι-β-D-glucopi ranu rona to-(l->4 )-0-3,6-di-0-aceti Ι-αD-glucopi ranosil-(1+4)-0-2-0-benzoíl-3-0-octil-a-L-idopi ranu ronato-(l+4)-0-2,3,6-tri-O-benzoíl-a-D-glucopiranósido de metilo.

b. 0 0-6-0-acetil-3,4-di-0-metil-a-D-glucopiranosil-(l+4)-072 505

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«t

-13-2,3-di-0-metil-B-D-glucopi ranu ronato- (l->4 )-0-3,6-di-O-acetil-a-D -glucopiranosil-(l->4)-0-2-0-benzoíl-3-0-octil-a-L-idopi ranu ronato -(1^4)-0-2,3,6-tri-0-benzoíl-a-D-glucopiranósido de metilo foi dissolvido em metanol (8 ml) e adicionou-se hidróxido de sódio (solução 5N) (0,9 ml). Após 15 minutos à temperatura ambiente a solução foi neutralizada com uma resina Dowex-50-H⁺, foi filtrada e evaporada até à secura para se obter o 0-3,4-di-0-metil-a-D-glucopi ranosil- (1^4)-0-2,3-di-0-metil-B-D-glucopi ranu ronato- (1-4-4) -Ο-α-D-glucopiranosil-( l->4 )-0-3-0-octil-α- L-idopi ranu ronato- (1-M)-Ο-α-D-glucopiranosido de metilo (48 mg).

c. 0 0-3,4-di-0-metil-tt-D-glucopiranosil-(l->4)-0-2,3-di-0-metil-B-D-glucopiranuronato-(l-44)-0-a-D-glucopi ranosil-(1^4 )-0-3 -0-octil-a-L-idopiranuronato-(l->4)-0-a-D-glucopiranósido de metilo (48 mg) foi dissolvido em dímetilformamida (1,4 ml) e adicionou-se um complexo de trioxido de enxofre-trietilamina (1,8 mmole). Após uma noite a 55°C, a mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente e foi-lhe adicionada uma mistura de hidrogénocarbonato de sódio (500 mg) e água (2 ml). Após evaporação o resíduo foi posto em camadas no topo de uma coluna Sephadex G25 e eluído com água. As fracções apropriadas foram combinadas e crio dessecadas para se obter o sal undecaquis-sódio de 3,4-di-0-metil-2,6-di-O-sulfo-a-D-glucopi ranosil-(1-44 )-0-2,3-di-0-me til-β-D-glucopi ranu ronosil- (1-44)-0-2,3,6-tri-O-sulfο-α-D-glucopi ranosi 1- (1-44)-0-3-0-octil-2-0-sulf o-α-L-isopi ranu ronosi 1-(1-44 )-0-2,3,6-tri-O-sulf ο-α-D-glucopi ranosido de metilo. [α]θ^0 - ₊ 4θ®

1,2; água). Desvio químico dos protões anoméricos: 4,68; 5,12; 5,13; 5,52; e 5,53 ppm.

EXEMPLO 4

De uma forma semelhante ao descrito no Exemplo 3, foram preparados:

Sal undecaquis-sódio de 0-3,4-di-0-metil-2,6-di-0-sulfo-a-D -glucopiranosil-(l44)-0-2,3-di-0-metil-B-D-glucopiranuronosil-(l44)-0-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glucopiranosil-(144)-0-3-0-butil-2-0-sulf o-a-L-idopí ranu ronosi 1-(1-44 )-0-2,3,6-0-sulf o-a-D-glucopiranósido de metilo. [α]^θ - + 40° (_c o,86; água).

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0S/3619-598

-14Pl-5 sal undecaquis-sódía de 0-3,4-di-0-metil-2,6-di-0-sulfo-a -D-glucopiranosil-(l+4)-0-2,3-di-0-butil-e-D-glucopiranuranosil-(l-4)-0-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glucopiranosil-(l+4)-0-3-0-octil-2-0-sulf o-ct-L-idopi ranuronosi 1-(1+4 )-0-2,3,6-tri-O-sulfo-a-D-glucopiranósido de metilo. - + 38° (c 0,95; água).

sal undecaquis-sódio de 0-3,4-di-0-metil-2,6-di-0-sulfo-(Çt -D-glucopiranosil-(l+4)-0-2,3-di-0-butil-B-D-glucopiranuronosil-(l+4)-0-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glucopiranosil-(l+4)-0~3-0-metil-2-0-sulfo-a-L-idopiranuronosil-(1+4)-0-2,3,6-tri-O-sulfo-a-D-glucopiranósido de metilo. [ce]q20 - + 43^o (_c o,92; água)

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OS/3619-598

Claims

1 - Processo de preparação de um derivado de hidrato de carbono que compreende uma unidade de trissacãrido com a fórmula geral I coo

J-o oso.

A- 0.

A - O^AOR

OSQj

COO

OR

OQ oso₃ oso₃ na qual R é alquilo, arilo ou aralquilo; Q é alquilo, arilo, aralquilo, ou S0₃~; A e B são seleccionados, índependentemente um do outro, de entre hidrogénio, alquilo, arilo, aralquilo, ou um grupo hidrato de carbono; e as porções com carga são compensadas por contra-iões, caracterizado por compreender a desprotecção e sulfataçao de um derivado de hidrato de carbono protegido compreendendo uma unidade de trissacãrido com a fórmula geral:

na qual R é alquilo, arilo ou araquilo, é um grupo proteetor de ácido, P2 é um grupo proteetor de hidroxi, P₃ é um grupo protector de hidroxi ou um grupo alquilo, arilo ou aralquilo, ε A’ e B’ são A e B respectivamente, ou seus derivados protegidos.

2 - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por R representar metilo e Q representar metilo.

3 - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por R representar metilo e Q representar S0₃ ^-.

4 - Processo de acordo com a reivindicação 2 ou 3, caracterizado por A representar:

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-16(XI) (III) onde R^, R₂, Rg, R4 e R₅, são seleccionados, independentemente uns dos outros, de entre hidrogénio, alquilo, arilo, aralquilo ou SO3-.

5 - Processo de acordo com a reivindicação 4, caracterizado por R^, R₂ e Rg serem metilo, R₄ e R₅ serem SOg“ e 0R₃ ter a configuração a.

6 - Processo de preparação de uma composição farmacêutica caracterizado por compreender a mistura do derivado de hidrato de carbono preparado de acordo com a reivindicação 1, com agentes auxiliares farmacêuticamente aceitáveis.