PT92007B

PT92007B - Processo para a preparacao de novos derivados de amino-cromanol

Info

Publication number: PT92007B
Application number: PT92007A
Authority: PT
Inventors: Gilbert Regnier; Jacques Duhault; Jean-Paul Vilaine; Alain Dhainaut; Nicole Villeneuve; Ghislaine Joly
Original assignee: Adir
Priority date: 1988-10-17
Filing date: 1989-10-16
Publication date: 1995-06-30
Also published as: PT92007A; FR2637896B1; JPH02149578A; AU620157B2; AU4287289A; EP0365416A1; IE893318L; ES2059802T3; US4999372A; NZ231029A; IE64369B1; ZA897821B; OA09430A; DK492089A; DE68909167D1; DK492089D0; DE68909167T2; JPH068296B2; FR2637896A1; CA2000743A1

Description

PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE NOVOS DERIVADOS DE AMINO-CROMANOL

A presente invenção diz respeito a um processo para a preparação de derivados de amino-cromanol de fórmula geral

na qual:

X representa um radical ciano, nitro, trifluorometilo, alcoxicarbonil no qual o grupo alcoxi comporta 1 a 5 átomos de carbono de cadeia linear ou ramificada, um radical carbamido, dialquilcarbamido, amino-sulfonilo, dialquilamino-sulfonilo, alquilsulfonilo ou alquilsulfonilami. no em que o grupo alquilo comporta 1 a 5 átomos de carbono, ou um radical acilo tal como, nor exem

pio,um radical acetilo, propionilo, benzoílo ou trifluoroacetilo;

o grupo de fórmula geral está fixado (na posição 5 do núcleo pirrolidinona) sobre um átomo de carbono de configuração R ou S, e

R representa:

a) ou um radical de fórmula geral -OR’ ou SR’ em que R' representa: um átomo de hidrogénio;

um radical alquilo até de cadeia linear ou ramificada, comportando eventualmente um ou vários átomos de oxigénio e/ou um radical hidroxi;

um radical alquilcarbonilo em que o grupo alquilo comporta até 5 átomos de carbono de cadeia linear ou ramificada;

/^R1 um resto de fórmula geral-(CH„) -N na qual n

n representa um número inteiro de 2 a 5 e R^ e R₂, iguais ou diferentes, representam, cada um:

. um átomo de hidrogénio, . um radical alquilo comportando até 5 átomos de carbono de cadeia linear ou ramificada, ou . R^ e R^ considerados conjuntamente formam com o átomo de azoto a que estão ligados um anel comportando 4 ou 5 átomos de carbono, comportan do eventualmente um outro heteroátomo tal como um átomo de oxigénio ou de enxofre, ou um grupo de fórmula geral -N-R₃ na qual R₃ representa /

'7' j *»

-3. um átomo de hidrogénio, . um radical alquilo comportando até 5 átomos de carbono de cadeia linear ou ramificada, ou . um resto de fórmula geral -AZ na qual A representa uma ligação simples ou uma cadeia hidrocarbonada de a comportando eventual mente uma ligação dupla, e Z representa . um radical hidroxi, . um radical benzidrilo, . um radical fenilo eventualmente substituído por um ou vários átomos de halogéneo, ou radicais trifluorometilo, alcoxi de a ou metilenodioxi, ou . um radical heterocíclico penta-ou hexagonal comportando um ou vários átomos de oxigénio, de azoto ou de enxofre tais como os radicais piridilo, tiazolilo, pirimidinilo, ou pirazinilo, cada um eventualmente substituído oor um ou vários átomos de halogéneo ou radicais alquilo ou alcoxi cada um de C. a C_r;

b) ou um radical de fórmula geral -Nna ^^R2 qual Rj. e têm os significados definidos antes.

O estado anterior da técnica mais próximo da presente invenção é ilustrado particularmente por:

- J.M. EVANS e colab. J. med. chem. 29 (II) 2194-2201 (1986); e

- no pedido de patente de invenção europeia publicado sob o n2 0076075, em 06.04.1983, que diz respeito a compostos derivados do benzopirano entre os quais o composto líder é o CR0Í4AKALIM correspondendo à fórmula:

a qual não contem nenhum substituinte sobre o núcleo pirro lidona.

Descobriu-se nos trabalhos da requerente que a introdução de um substituinte na posição do átomo de azoto do núcleo pirrolidona conduz aos derivados de fórmula geral I da presente invenção, os quais são diastereoisómeros puros que apresentam em relação ao derivado racémico que é o /

CROMAKALIM uma vantagem particularmente interessante no plano da aplicação terapêutica.

Com efeito, os derivados preparados pelo processo de acordo com a presente invenção - cujo perfil farmacoló gico é o do agonista potássico tendo uma aplicação particularmente no domínio cardiovascular - têm, de acordo com os derivados, uma actividade fisiológica comparável ou superior à do CROMAXALIM com uma duração de acção muito mais longa do que este último, e dai a sua maior vantagem para a sua utilização em terapêutica.

A presente invenção tem por objectivo um processo Para a preparação dos derivados de fórmula geral I, de acor do com o esquema reaccional A:

(III) (II) /

t

-6caracterizado pelo facto de se fazer reagir, em quantidade equimolecular, o derivado do cromano de fórmula geral II, na qual o símbolo X tem o significado definido antes, com o derivado quirálico, de configuração R ou S, da pirrolido na de fórmula geral III na qual o símbolo R tem o significado definido antes no estado de sal de sódio ou de litio.

E particularmente adequado efectuar a reacção no seio de um dissolvente aprótico, a uma temperatura compreendida entre 20° e 50°C.

Como dissolventes apróticos particularmente apropriados podem citar-se, por exemplo, o dimetilsulfóxido, a hexametilfosforotriamida, a dimetilformamida e a dimetilacetamida.

A pirrolidona de fórmula geral III pode-se transformar previamente em sal de sódio ou de lítio mediante reacção com hidreto de sódio ou butil-litio, no seio do dissolvente escolhido para efectuar a reacção.

Os derivados do cromano de fórmula geral II podem preparar-se de acordo com a técnica descrita por J.M.

EVANS e colab., J. med. chem. 26 (II) 1582-1589 (1983) e E.P. 0076.075.

Os derivados quirálicos de configuração R ou S da pirrolidona de fórmula geral III prepararam-se respectivamente a partir de ácidos piroglutâmicos naturais de configuração R ou S, de acordo com o seguinte esquema reaccio

-ΊΖ

0=1 J~COOH =L ‘Ν Η (IV)

Ν'

Η (V)

OOCH.

=ΓνΛ^^Η2-°^Η

Η (VI) descrito por S. SAIJO e colab

Chem. Pharm. Buli. 28, 1449 (1980).

piroglutaminol R ou S de fórmula VI pode servir de composto inicial para a preparação das pirrolidonas quirãlicas de fórmula geral III

- quer directamente, no caso em que R=0R', de acordo com o esquema reaccional C:

-OH

R' Z °=U_N ,-OR

H (VI)

H (III) representando Z um ãtomo de halogéneo tal como o bromo ou iodo, um ião sulfato ou arilsulfonato e R' tem o significado defenido antes;

sendo a reacção geralmente efectuada em ãgua ou no seio de um dissolvente aprótico polar na presença de uma base forte ou de uma amina terciária mediante utilização do agente de fixação do ãcido formado;

-8- quer após transformação, de acordo com métodos conhecidos, em derivado halogenado, de preferência clorado de fórmula:

que se faz reagir de acordo com o esquema reaccional D:

<H₂-CI H (VII) * HRCH₂-R

H (VIII) em que R representa quer um grupo de fórmula geral -OR' ou R, )R' quer -N;

, sendo a reacção geralmente efectuada de

R, acordo com métodos conhecidos no seio de um dissolvente aprótico polar, a partir de um derivado alcalino do compos to de fórmula geral R'OH ou na presença de um excesso de /

/ ί s

R amina de fórmula geral ou de uma base terciária ^R2 utilizando o agente de fixação do hidrácido formado.

No caso particular dos derivados de fórmula geral I na qual o símbolo R representa um grupo de fórmula geral OR· e o símbolo R* representa um átomo de hidrogénio, quer dizer para preparar os derivados de fórmula geral

é preferível efectuar a reacção de acordo com o esquema reaccional A dado anteriormente a partir de uma pirrolido na quirálica, de configuração R ou S, de fórmula geral

0=L _N J—ch₂-or' *

/

-So na qual R representa um resto lábil facilmente hidrolisável, que se pode preparar a partir do derivado de fórmula VI e do etilvinil - éter, de acordo com uma técnica descri, ta por S. SAIJO e colab. Chem. Pharm. Buli. 28, 1449 (1980).

Os derivados de fórmula geral I são substâncias quirálicas diastereoisoméricas.

processo de síntese de acordo com o esquema reaccional A fornece sempre amino-cromanóis de fórmula geral I na configuração trans por abertura da função epó xido, e a utilização da pirrolidona de fórmula geral III de configuração S ou R fornecerá._; (após separação median te cromatografia de coluna ou mediante formação de sais e cristalização destes últimos no caso em que o símbolo R comporta uma função básica) dois pares de diastereoisó meros puros de configuração 3S,4R,5'S e 3R,4S,5’S ou 3S,4R,5’R e 3R,4S,5'R.

A separação em coluna efectua-se por cromatografia rápida (flash), sob pressões de azoto compreendidas entre 0,5 e 1 bar, com sílica de 35-70 μ e sistemas de dissolventes tais como: cloreto de metileno/metanol ou cloreto de metileno/acetato de etilo.

A formação de sais pode efectuar-se a partir dos compostos de fórmula geral I na qual o símbolo R comporta uma função básica, e de ácidos inorgânicos ou orgânicos e /

I

-11recristalização destes sais no seio de um dissolvente apro priado. A preparação destes sais está igualmente incluída na presente invenção.

Os derivados de fórmula geral I e os seus sais fisiologicamente toleráveis possuem propriedades farmacológi^ cas e terapêuticas interessantes, particularmente propriedades moduladoras do potencial da membrana celular.

Estas substâncias activadoras de canais potássicos membranares aumentam uma corrente potássica, saindo e induzin do assim uma hiperpolarização membranar.

O mecanismo de acção desta nova classe farmacológ^ ca permite abordar de forma original as anomalias da regulação do potencial da membrana celular e da regulação ióni^ ca celular, incluindo a modulação dos movimentos cálcicos transmembranares e intra - celulares, além dos fluxos potássicos.

Estas anomalias estão implicadas em numerosos processos fisiopatológicos associados Particularmente a perturbações da regulação da contracção dos diferentes tipos de músculos lisos.

Os ensaios farmacológicos realizados in vitro de monstram que estes compostos, preparados pelo processo de acordo com a presente invenção, têm uma potente actividade relaxante vascular compatível com uma activação de canais potássicos membranares.

-12Ensaios in vivo sobre modelos de hipertensão arterial no rato e no cão,.estas substâncias administradas por via oral têm uma potente actividade antihiperten siva com uma duração muito nitidamente superior à de todos os compostos, actualmente descritos, possuindo um tal mecanismo de acção, em particular o CROMAKALIM, o composto mais próximo da técnica anterior.

Os estudos hemodinâmicos efectuados no cão indicam a potência e o tempo de duração do seu efeito vasodilatador periférico e coronário.

Estas propriedades permitem a utilização dos deri_ vados de fórmula geral I como medicamento, particularmente no domínio cardiovascular: a hipertensão arterial sistémica e pulmonar, a isquémia miocárdica, as doenças vasculares periféricas e a insuficiência cardíaca e mais geralmente o tratamento e a prevenção das perturbações liga das ao envelhecimento arterial e à aterosclerose. Podem igualmente ser utilizados nas patologias metabólicas cons tituindo um factor de risco cardiovascular tais como: a obesidade, a diabetes e as dislipidémias.

Além disso, a actividade destes compostos sobre os diferentes tipos de músculos lisos permite alargar o seu quadro terapêutico às afecções associadas a perturbações da contracção muscular lisa na esfera broncopulmonar (bron copneumopatia obstrutiva, asma), digestiva, urinária e ute rina.

Estas indicações terapêuticas não são limitativas na medida em que a alteração do potencial de membrana celular qualquer que seja a causa e a localização tecidular leva a uma disfunção celular, causa de fenómenos patológi^ cos, e pode constituir um alvo terapêutico principal dos compostos descritos.

Assim, numerosas situações de sofrimento tecidular que estejam ligadas ao envelhecimento, à isquêmia, à infla niação ou ao edema (em particular ao nivel cerebral) podem ser tratadas ou prevenidas pelos compostos de fórmula geral I.

A presente invenção tem igualmente por objectivo a preparação de composições farmacêuticas contendo como ingrediente activo um composto de fórmula geral I ou um dos seus sais fisiologicamente toleráveis, misturado ou associado a um excipiente aceitável sob o ponto de vista farma cêutico, como, por exemplo, água destilada, amido, talco, etilcelulose ou esterearato de magnésio.

As composições farmacêuticas assim obtidas apresen tam-se geralmente sob uma forma doseada e podem conter entre 0,05 e 50 mg de ingrediente activo. Podem apresentar-se, por exemplo, sob a forma de comprimidos, drageias, gélulas, supositórios, soluções injectáveis ou bebíveis, assim como as formas adaptadas para a administração por aerossol, e com portar, de acordo com os casos administrados por via oral, rectal ou parenteral, uma dose compreendida entre 0,05 e 50 mg, 1 a 2 vezes por dia.

Os exemplos seguintes ilustram o processo de acordo com a presente invenção, sem contudo o limitar de modo nenhum.

Exemplo 1

3R, 4S ou 3S, 4R trans 2,2-dimetil-3-hidroxi-4-(2-oxo-5S-hidroximetil-l-pirrolidinil)-6-ciano-cromano, (formas A e B)

A uma solução de 10,5 g de S-(l-etoxi-etoxi-5-metil)-2-pirrolidona em 20 ml de hexametil-fosforotriamida- adicio nam-se 39 ml de uma solução de butil-litio 1,6 M em hexano, a 15-20°C. Agita-se durante 30 minutos a 20°C e adicionam-se depois 14,1 g de 6-ciano-2,2-dimetil-3,4-epoxi-cromano, que funde (capilar) a 97-98°C. Aquece-se durante 20 horas a 35°C, arrefece-se e adicionam-se 3,7 ml de ácido acético agitando durante 30 minutos a 5-10°C. Dilui-se com 200 ml de água e

f /

i i

agita-se ainda durante 30 minutos a 5-10°C. Obtém-se deste modo um composto oleoso que se separa. Decanta-se a fase aquosa e retoma-se o óleo de novo com 150 ml de água. Forma-se então um precipitado. Adiciona-se cloreto de metileno, agita-se e decanta-se a camada orgânica. Após evaporação, obtêm-se 23 g de óleo bruto que se dissolve em 1OO ml de metanol. Agita-se a solução com 50 ml de ácido clorídr_i co O,1 N durante 2 horas para eliminar o grupo protector. Após evaporação do dissolvente ou cromatografia em coluna rápida (flash) através de 1 kg de sílica e o sistema cio

reto de metileno/metanol a 95:5 como eluente, obtêm-se duas fracções puras de Rf=0,46 e 0,49 correspondendo aos dois diastereoisômeros puros:
forma A	: 4,6 g P.F.	(cap)=152-153°C
	/0/-’	: -32°,7 (C = l EtOH)
forma B	: 3,8 g P.F.	(cap)=156-158°C
	A7^2O°'⁵ D	: -62°,9 (C = l EtOH)

Preparou-se a S-(l-etoxi-etoxi-5-meti 1)-2-pirrolio 5 dona inicial, óleo ' :+21°,8 (C = l EtOH) com um ren

D dimento de 96%, mediante adição de etilvinil - éter em

CHCI3, na presença de CF^COOH, à S-5-hidroximetil-2-pirrolidona, (óleo) :+33°,5 (C=3 EtOH).

D /

Exemplo 2

3S,4R ou 3R, 4S trans-2,2-dimetil-3-hidroxi-4-(2-oxo-5S-metoximetil-l-pirrolidinil)-6-ciano-cromano, (formas A e B)

As formas:

A , _: -69°,6 (C=l EtOH),ponto de fusão capilar

D

186-189°C ^B · /¾⁷²¹ : +1°,22 (C=l EtOH), ponto de fusão capilar D

142-145 C prepararam-se de acordo com o processo descrito no exemplo

1, a partir da S-5-metoximetil-2-OÍrrolidona (óleo), ela ✓

-17- / própria preparada a partir da S-5-hidroximetil-2-pirroli dona e do sulfato de dimetilo na presença de hidróxido de sódio, com um rendimento de 60%.

Exemplo 3

3R, 4S ou 3S, 4R trans-2,2-dimetil-3-hidroxi-4-(2-oxo-5s-dimetilaminometil-l-pirrolidinil)-6-ciano-cromano, (formas A e B)

MO

N

NC

As formas

o oxalato, P.F. (cap):

'⁵: 41°,1 (C=l DMSO)

D

preparam-se, de acordo com o processo descrito no exemplo 1, a partir da 5s-dimetilaminometil-2-pirrolidona (óleo) com 96% de pureza óptica (HPLC ), ela própria preparada mediante aquecimento a 100°C com um excesso de dimetilanii na em etanol, da 5S-clorometil-2-pirrolidona (óleo) com 94% de pureza óptica (HPLC, coluna quirálica).

Exemplos 4-30

Procedendo de acordo com o processo descrito no exemplo 1, ,a partir dos compostos iniciais apropriados, obtêm-se os compostos objectivo dos exemplos seguintes (sob as formas A e B):

η * £x	X	R
u	-CN	-O-CO-CHg
5	-CN	-O-(CH_)_-CH, 2 □ 3
6	-CN	-O-CH₂CH₂-O-CH₃
7	-CN	-O-(CH₂)₂-N(-CH₃)₂
8	-CN	-O(CH,)_-N(-C,H_)_ 2 2 2 5 2
9	-CN	-N(-C₀H_)_ 2 3 2
10	-CN	-O
11	-CN	-O
12	-CN	-N N-CH,
	>_t 3
13	-CN	-N N-CH(-<2>)₂
14	-CN
15	-CN	-N~-\-CH₂-CH«CH-^^
16	-CN	-O-©
17	-CN	£>-©
18	-CN	-Q-U
19	-CN	-N N-1*_K>-C1

η * Ex .	X	R
20	-CN	N-Λ
		\-/ \=Z_CF
		/—\ f<yocH'
2 1	-CN	-N N-kçAoCH,
		'—/ OCH₃ ³
22	-CN	-O-CH₂-CH₂-OH
23	-no₂	-OH
24	-C-0CH, !L ^J	-OH
25	0 -CN	-SH
26 -	-co-ch₃	-OH
27	-SO₂CH₃	-OH
	^CH
28	-SO-N	-OH
	² \ch₃
29	-cf₃	-OH
30	-NH-O₂S-CH₃	-OH

/ /

-21Exemplo 20

Estudo farmacológico in vitro¹¹, no domínio cardiovascular:

Ratos machos wistar (325-375g) são anestesiados por via intraperitoneal com pentobarbital sódico (300 mg/kg). Colhe-se a aorta torácica e a veia porta mesentérica. Disse ca-se a aorta em anéis de 3 mm de comprimento e elimina-se o endotélio mecanicamente. Solta-se a veia porta em 1 cm de comprimento e liga-se às suas extremidades.

Os orgãos são colocados numa cuba termostatizada de 20 ml contendo uma solução fisiológica constituída por (mM): NaCl 112 ; KC1 5 ; KH₂P0₄ 1 ; MgS0₄ 1,2 ; C_aCl₂ 2,5 ;

NaHC0₃ 25 ; glucose 11,5 ; EDTA 0,1 ; pH : 7,4 ; 37°C ;

95% O₂+5% C0₂.

A tensão inicial aplicada é de 2 g para a aorta e de 0,5 g para a veia porta.

As variações de tensão são medidas com um receotor STATHAM ligado a um amplificador transdutor (GOULD) e segui, das em continuo com um registador gráfico GOULD 2400.

Os protocolos experimentais são os seguintes:

Depois de um periodo de estabilização de 90 minutos, os anéis aórticos são submetidos a diferentes ensaios:

- despolarização potássica:

As preparações são submetidas a um meio hiperpotássico 30 mM ou 80 mM KC1 (e respectivamente 87 e 37 mM de /

NaCl); após 30 minutos de estabilização da contracção, adicionam-se concentrações cumulativas do composto a ensaiar de 15 em 15 minutos.

Os valores de relaxação obtidos permitem o cálculo das 1^C5q·

- Reactividade da 4-aminopiridina (4 AP)

Incuba-se o composto a ensaiar, com uma determinada concentração, ou o seu dissolvente, na solução fisiológica normal 15 minutos antes da adição da 4 AP (5 mM) .

Comparam-se as amplitudes máximas das respostas à 4 AP na presença do composto de acordo com a presente invenção ou do dissolvente.

A veia porta apresenta uma actividade rítmica espontânea estável em 60 minutos. Concentrações cumulativas do composto a ensaiar são adicionadas ao meio de 15 em 15 minutos; as variações de frequência e de amplitude dos pi_ cos são registadas.

Os compostos de acordo com a presente invenção são utilizados sob a forma de solução em água ou no dissolvente apropriado.

As concentrações expressas fazem referência às con centrações finais em termos de base nos banhos de órgãos isolados.

Os resultados obtidos estão reúnidos no quadro seguinte :

’ί }

-23- /

AORTA DE RATO

VEIA PORTA

Compostos ensaiados

% de inibição da resposta à 4AP de acordo com a concentração do composto (M)

Supressão da actividade rítmica (M) cromakalim

Ex.1 Forma A

Ex.l Forma B

Ex.2 Forma A

4.210 ⁷ >IO^-4

7.71O⁶ >10 ⁴

-7 -4

3.410 >10

-7 -4

2.810 >10

13%	(IO^-7
74%	(IO^-5
3 5%	(10“⁵
18%	(3.10
	, -5
77%	(10

) )

3.10

3.10 10 exame deste quadro mostra que:

Os compostos ensaiados apresentam uma potente actividade relaxante vascular em meio despolarizado para uma pequena concentração potássica (30 mM) desaparecendo para uma gran de concentração potássica (80 mM).

As contracções vasculares induzidas pela 4-amino-piri dina (antagonista de canais potássicos) são fortemente inibidas por estes compostos.

A actividade rítmica espontânea da veia oorta sensível às variações do potencial de membrana é profundamente alterada pelos compostos descritos.

conjunto destes resultados é compatível com um mecanismo de acção hiperpolarizante membranarmediante activação de canais potássicos.

A potência da actividade do composto do exemplo 1 forma B é comparável, em relação a estes ensaios, à do composto de referência mais potente conhecido : o CROMAKALIM.

Exemplo 21

Estudo farmacológico in vivo, no domínio cardiovascular:

A- Compreendendo os seguintes ensaios:

1- ESTUDO NO RATO ESPONTANEAMENTE HIPERTENSO (SHR)

1-1- METODOLOGIA

O estudo realiza-se em ratos machos SHR (Charles River) pesando entre 260 g e 330 g, com idades compreendidas entre 18 e 20 semanas. Coloca-se um cateter de polietji leno ao nível da aorta abdominal e tuneliza-se ao nível do pescoço sob anestesia (cloridrato de cetamida 150 mg/kg por via intraperitoneal). Os animais, colocados em gaiola de contenção, são ensaiados no estado acordado pelo menos 48 horas depois da intervenção. A pressão arterial, medida por um receptor de pressão STATHAM P23 ligado ao cateter abdomi_ nal, é recolhida em um registador GOULD 2400.

Os compostos de acordo com a presente invenção são administrados por via oral sob a forma de solução (água ou dissolvente apropriado) em um volume de 2,5 mg/kg. As doses administradas são expressas em mg/kg de base.

ι t

1-2- resultados

Os resultados obtidos com um certo número de compostos representativos da presente invenção e um composto de re. ferência, o CROMaKaLIM, estão reúnidos no quadro seguinte.

As variações de pressão arterial sistólica (PAS) e diastólica (PAD), apresentadas no tempo mais significativo depois do tratamento, são expressas em percentagem de variação em relação aos valores testemunhas.

Compostos testados

DOSE . mg/kg

VARIAÇÕES (%) EM FONÇÃO DO TEMPO DEPOIS DO TRATAMENTO

CROMAKALIM

Exemplo 1 forma B

Exemplo 2 forma A

VALORES

CONTROLO mmHg

1 1 30 mn 1 1
0,3	1 1 I 6	1 1 1 PAS	202+-9	1 1 1 1	-29+-2
	1 1 1	í PAD 1	129+-6	1 1 1	-34+-2
	1	1		J
1,0	1 1 6 1	1 PAS \|	211+-10	1 1 1	-34+-5
	1 1	J PAD	136+-8	1 1	-44+-4
0,3	1 1 \| 4	1 1 ί PAS	219+-7	1 1 1 1	-27+-5
	1 1 1 1	} PAD 1	146+-5	1 1 1	-34+-6
1,0	1 1 ! ⁴	1 1 { PAS	213+-5	1 1 1 1	-42+-2
	1 1 1	I PAD 1	135+-5	1 1 1	-48+-5
1,0	1 1 1 5 j	1 1 1 PAS í	192+-4	1 1 1 1 I	-11+-2
	1 1 1	J PAD 1	118+-3	1 1 1	-17+-3
3,0	1 1 ! ⁶	1 1 j PAS	203+-3	1 1 1 1	-24+-1
	1 1	1 PAD	130+-3	1 1	-35+-3

1 H	3 H \|	6 H \|
-21+-3	i 1 1-5+-4	i 1 1 -1+-2
-26+-3	J-7+-5 1	' -3+-1 1
-23+-4	1 1-19+-3 J	1 Í-15+-2 1
-33+-3	J-25+-4	J-20+-2
-27+-4	1 1 j-25+-3	1 1 !-29+-3
-36+-4	J-35+-4	J-40+-4
	1	I
-44+-1	1 1 {-40+-2	i 1 J-36+-3
-54+-2	\|-46+-6 1	\|-46+-4 1
-16+-3	1 1 1-12+-3 j	l 1 ! -9+-2 \|
-21+-4	J-19+-3 1	j-14+-2 1
-26+-2	1 1 [-25+-3	1 1 j-21+-3
-36+-3	ί-31+-3	1-27+-3

-261-3- CONCLUSÃO DO ESTUDO IN VITRO'^ EM_SHR

Os compostos de acordo com a presente invenção apre sentam uma notável actividade antihipertensiva no rato SHR após administração de pequenas doses por via oral.

A duração da acção dos compostos descritos é consideravelmente alongada em relação ao melhor composto de refe rência conhecido, o CROMaKaLIM, para uma actividade máxima com Parável e constitui uma importante vantagem terapêutica.

2- ESTUDO NO CÃO ACORDADO HIPERTENSO RENAL

2-1- METODOLOGIA

São utilizados cães bastardos com 20 a 25 kg. Um cateter em silastic introduzido sob anestesia (pentobarbital sódico 30 mg/kg IV) ao nivel da aorta abdominal, deixado em crónico, permite a medida ulterior da pressão arterial no animal acordado.

A hipertensão arterial é induzida por uma segunda in tervenção sob anestesia consistindo em uma constrição da artéria renal esquerda com a ajuda de um gancho, reduzindo o seu débito de cerca de 70%, o rim esquerdo está envolvido por uma cápsula de látex, o rim controlateral deixa-se no lu gar.

As pressões arteriais sistólica (PAS) e diastôlica (PAD) são medidas por intermédio de um receptor de pressão STATHAM P23 ligado ao cateter em silastic e ligado a um amplificador de pressão GOULD.

Λ* ί

Os compostos de acordo com a presente invenção são ensaiados nos animais tornados hipertensos, no estado acor dado, pelo menos uma semana depois da segunda intervenção.

A pressão arterial é seguida em contínuo., em um registador GOULD ES1OOO até 7 horas depois do tratamento e depois às 24 horas.

Os compostos a ensaiar são administrados por via digestiva após entubação gástrica sob a forma dissolvida em água ou no dissolvente apropriado.

As doses administradas são expressas em mg de base em relação ao peso do corpo.

2-2- RESULTADOS

Os compostos representativos da presente invenção foram comparados com o composto de referência (CROMAKALIM).

As variações das pressões arterial sistólica (PAS) e diastólica (PAD), apresentadas nos tempos mais significativos depois do tratamento, são expressas em percentagem de variação em relação aos valores testemunhas.

/

-28Compostos I DOSE VALORES VARIAÇÕES (%) EM FUNÇÃO DO TEMPO ensaiados j mg/kg CONTROLO DEPOIS DO TRATAMENTO mmHg

1 1 1	1 1 1		1 1	30 mn 1 t	1 H	3 H 1 I	1	7 H	1 \| _	24 H
1 1 CROMAKALIM j	1 1 0,1 J	PAS	1 1 189 \|	1 1 -50 j	-26	1 1 ί ” ⁹	1 1 1 1	+ 2	1 1 1 1	+ 9
1 1 1	1 1 1	PAD	93 1 1	-46 1 I	-23	1 - 9 1	1 1 1	- 5	1 1 1	+18
1 Exemplo 1 j	0,1 j	PAS	1 199 \|	⁰ ί	+ 2	1 j -55	1 1 1	-76	1 1 1	-24
forma B \| 1 1	1 1 1 1	PAD	99 \| 1 1	0 I 1 1	+ 5	i -50 1 1	1 1 1 1	-68	1 1 1 1	-27
1 Exemplo 2 1	1 0,11	PAS	1 181 1	1 -² 1	-12	1 1 -28 1	1 1 1	-41	1 1 1	- 2
forma A	1 L	PAD	93 J -L	-14 ! -L	-20	{ -32 -1-	1 1 -1-	-44	1 1 -1—	0

² -3 - CONCLUSÃO_DO_ESTUDO_2.IN_VIVO^_NO_CÃO_HIPERTENSO_RE nal

A potente actividade antihipertensiva e a longa duração da acção destes compostos, de acordo com a presente inven ção, é reencontrada no cão hipertenso renal.

A superioridade do composto do exemplo 1 forma B em termos de potência e de duração de acção é especialmente de sublinhar em relação ao CROMAKALIM.

3- ESTUDO HEMODINAMICO NO CÃO ANESTESIADO

3-1- metodologia

Efectuou-se um estudo hemodinâmico completo em cães bastardos com 25 a 30 kg, anestesiados com pentobarbital sódico 30 mg/kg IV, entubados e ventilados, submetidos a uma

-29-^—/^ r

toractomia ao 52 espaço intercostal esquerdo.

A medida dos débitos cardíaco e coronário médios realiza-se com a ajuda de argolas electromagnéticas, colocadas ao nível da aorta ascendente e da ramificação circun flexa da artéria coronária esquerda respectivamente e liga, dos a debitómetros electromagnéticos GOULD SP 2202. A pres. são aórtica é medida por uma sonda MILLAR introduzida por via arterial femoral.

Os valores de resistência vascular periférica total (TPR) e de resistência vascular coronária média (CVRM) são calculados em relação à pressão aórtica média e ao débito cardíaco médio e ao débito coronário médio, respectivamente.

Os compostos ensaiados foram injectados oor via venosa femoral sob a forma dissolvida em água ou em um dissol. vente apropriado.

3-2- RESULTADOS

Os resultados obtidos com os compostos de acordo com a presente invenção ensaiados são comparados ao composto de referência CROMAKALIM.

A evolução das resistências vasculares, expressas em percentagem de variação em relação aos valores testemunhas, é apresentada em função do tempo no quadro seguinte.

-30- /

Compostos ensaiados	DOSE ug/kg	PARÂMETRO	VARIAÇÕES (%) EM FUNÇÃO D0 TEMPO DEPOIS
1 mn	D0 TRATAMENTO 10 mn	1 30 mn \| 1_l
	10	CVRM	-69,0	-38,1	i i i -²⁷’⁴ i
CROMAKALIM		TPR	-26,8	-15,5	\| -7,8 j _J_1
Exemplo 1	10	CVRM	-69,4	-62,0.	T i ί -43,7 í
forma B		TPR	-45,9	-35,1	-35,1 ! 1 1 1 I
Exemplo 1	300	CVRM	-81,5	-50,3	1 1 í -34,9 i
forma A		TPR	-41,9	-17,2	1 -12,9 1
Exemplo 2	30	CVRM	-28,9	-20,2	-22,1 J
forma A		TPR	- 9,8	-11,8	-11,8 ! \|-1
Exemplo 2	100	CVRM	-54,7	-56,1	i i ί -50,5 ΐ 1 j
forma A		TPR	-15,8	-14,7	i -¹²’⁶ í

				•	1 i \| \|
Exemplo 3	3000	CVRM	+ 2,5	-38,5	! -49,0 j
forma A		TPR _	+ 1.7 _	- 6,8 —	ί - 8,5 ' 1 1 4-1

3-3- CONCLUSÃO DO ESTUDO HEMODINÂMICO NO CÃO

Administrados por via intravenosa em pequena dose, os compostos de acordo com a presente invenção têm uma potente actividade vasodilatadora periférica e coronária e melhor conservada do que o CROMAKALIM.

B- De um modo geral, o conjunto dos ensaios in vivo reali zados permite concluir que os derivados da presente inven/ i

f

-31- ( ção têm uma actividade comparável ou superior à do melhor composto de referência conhecido (CROMAKALXM), tendo uma duração de acção muito mais importante do que este último-o que constitui um trunfo maior em aplicação terapêuti ca.

Exemplo 22:

Estudo farmacológico no domínio broncopulmonar:

A actividade broncodilatadora foi estudada, na cobaia, pelo método descrito por Η. KONZETT e R. ROSSLER,

Arch. Exp. Path. U. Pharm. 195, 71 (1940). Observou-se assim que os derivados preparados pelo processo de acordo com a presente invenção, injectados por via intravenosa em doses que variam, de acordo com os derivados, entre 0,3 e 1 mg/Kg inibem notavelmente o broncoespasmo provocado pela administração intravenosa quer de histamina, quer de serotonina, quer de acetilcolina.

Por exemplo, o bronco-espasmo provocado pela administração intravenosa de histamina é inibido em 96% com o derivado do exemplo 1 forma B, na dose de 0,30 mg/kg intravenosa e de 100% com o derivado do exemplo 24 forma Β, na dose de 0,35 mg/kg intravenosa.

Submetidosao ensaio de A.K. ARMITaGE, Brit. J. Pharmacol.’', 17, 196 (1961), os derivados ensaiados, adminis trados por via oral ou sob a forma de aerossol em doses comf

preendidas entre 0,5 e 4 mg/kg de acordo com os compostos, inibem de 11 a 68% o efeito produzido na cobaia por um aerossol de histamina a 4%.

Exemplo 23

Composição farmacêutica:

Gélulas doseadas com 1 mg de ingrediente activo.

3R, 4S ou 3S, 4R trans-2,2-dimetil-3-hidroxi-4-(2-oxo-5s-hidroximetil-l-pirrolidinil) -6-ciano-cromano............ lmg

Amido de milho..................................... 15mg

Lactose..................... 25mg

Talco................ 5mg

Claims

1.- Processo para manol de fórmula geral a preparaçao de derivados de amino-cro- na qual:

. X representa um radical ciano, nitro, trifluorometilo, alcoxicarbonilo no qual o grupo alcoxi comporta 1 a 5 átomos de carbono de cadeia linear ou ramificada, um radical carbamido, dialquilcarbamido, aminosulfonilo, dialquilaminosulfonilo, alquilsulfonilo ou alquilsulfonilamino em que o grupo alquilo comporta 1 a 5 átomos de carbono, ou um radical acilo tal como por exemplo um radical acetilo, i

j

-34- / propionilo, benzoílo ou trifluoroacetilo;

CH2~R estã fixado (na posição 5 do núcleo pirrolidinona) sobre um átomo de carbono de configuração

R ou S e

R representa:

a) quer um radical de fórmula geral -OR' ou SR' em que R' representa:

um átomo de hidrogénio;

um radical alquilo até , de cadeia linear ou ramificada, comportando eventualmente um ou vários átomos de oxigénio e/ou radicais hidroxi;

um radical alquilcarbonilo no qual o grupo comporta até 5 átomos de carbono de cadeia ramificada;

alquilo linear ou um resto de formula geral (CH_) -br z n \ /^R1

R.

na qual n representa um número inteiro de 2 a 5 e R^ e R2 iguais ou diferentes representam, cada um:

. um átomo de hidrogénio, . um radical alquilo comportando até 5 átomos de carbono de cadeia linear ou ramificada, ou . R^ e R2 considerados em conjunto com o átomo de azoto a que estão ligados formam um ciclo com 4 ou 5 átomos de carbono, comportando eventualmente um outro heteroátomo tal como um átomo de oxigénio

-35ou de enxofre ou um grupo de fórmula geral -N-R^ na qual R^ representa um ãtomo de hidrogénio, um radical alquilo comportando até 5 átomos de carbono de cadeia linear ou ramificada, ou um resto de fórmula geral -AZ na qual A representa uma ligação simples ou uma cadeia hidro carbonada em a comportando eventualmente uma ligação dupla e Z representa . um radical hidroxi, um radical benzidrilo, . um radical fenilo eventualmente substituído por um ou vários átomos de halogénio, ou radicais trifluorometilo, alcoxi em a ou metilenodiõxido, ou . um radical heterocíclico penta- ou hexagonal comportando um ou vários átomos de oxigénio, de azoto ou de enxofre tais como os radicais piridilo, tiazolilo, pirimidinilo, ou pirazinilo, cada um eventualmente substituído por um ou vários átomos de halogéneo ou radicais alquilo ou alcoxi cada um em a ;

^R1

b) quer um radical de fórmula geral -N^ ^R2 na qual R^ e R^ tem os significados definidos antes;

e dos seus sais, no caso em que o símbolo R contêm uma função alcalina, com ácidos apropriados;

caracterizado pelo facto de se fazer reagir, em quantidade equimolecular, um derivado de cromano de fórmula geral na qual X tem os com um derivado quirálico de de fórmula geral significados definidos antes, configuração R ou S da pirrolidona

-O-/’

III na qual R tem o significado definido antes, no estado de sal de sódio ou de lítio.

2.- Processo de acordo com a reivindicação 1 caracterizado pelo facto de se efectuar a reacção no seio de um dissolvente aprótico a uma temperatura compreendida entre 20° e 50°C, /

-37RESUMO

Processo para a preparação de novos derivados de amino-cromanol

Descreve-se um processo para a preparação de derivados de amino-cromano1 de fórmula geral e dos seus sais, no caso em que o símbolo R comporta uma função alcalina, com ãcidos apropriados, caracterizado pelo facto de se fazer reagir, em quantidade equimolecular, um derivado de cromano de fórmula geral com um derivado quirãlico de configuração R ou S, da pirrolidona de fórmula geral

III

Η no estado de sal de sódio ou de lítio.

Os derivados de fórmula geral I e os seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico são utilizáveis em terapêutica, particularmente no tratamento das perturbações da regulação da contracção do músculo liso, nas esferas cardiovascular, broncopulmonar, digestiva, urinária e uterina.