PT88390B

PT88390B - Processo de preparacao de derivados do pirrolo{1,2-a}imidazolo e de imidazo{1,2-a}piridina e de composicoes farmaceuticas que os contem

Info

Publication number: PT88390B
Application number: PT88390A
Authority: PT
Inventors: Jerry Leroy Adams; Paul Elliot Bender; John Gerald Gleason; Nabil Hanna; John Frederich Newton Jr; Carl David Perchonock; Kazys Razgaitis
Original assignee: Smithkline Beckman Corp
Priority date: 1987-09-02
Filing date: 1988-08-31
Publication date: 1992-10-30
Also published as: FI884017A; HUT50475A; NZ225967A; EP0306300A2; DE3853704D1; DK483288D0; NO883882L; EP0306300B1; ATE122044T1; AU621308B2; AU2174488A; PT88390A; FI884017A0; NO883882D0; JPS6471876A; IL87604A0; EP0306300A3; MY103766A; DK483288A; AU1815092A

Description

presente invento refere-se ao processo de preparação de

>

FORMULA (I) ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável, o qual compreende quando apropriado:

A. a reacção de um composto com a Fórmula (E)

FORMULA (E)

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-2SKB CASE 14285-CIP 2 em piridina, com um halogeneto de aroílo, um éster halofojç mato de arilalquilo ou um éster haloformato de alquilo ou com o sal de acilpiridlnio pré-formado para se obter um composto com a Fórmula (F)

FORMULA (F) seguida por desacilação/oxidação deste composto; ou

B. a desmetilação de um composto metoxifenilo com as Fórmulas (E) ou (I) com HBr em ácido acético ou BBr^ em diclorometa no; ou

C. a 0-alquilação do composto hidroxi de Fórmula (I) ou (E) quando um de R^ e R para (i), ou X para (E), é fenilo subs tituído com pelo menos um hidroxi, para se obter o correspondente composto com as Fórmulas (i) ou (E); ou

D. a acilação de um composto aminofenilo ou (alquil C^__^ amino)fenilo de Fórmula (i) com o halogeneto ou anidrido de acilo correspondentemente substituído em piridina para se obter o composto N-(alquil C^_^)-(alcanamido C^ ^fenilo de Fórmula (i); ou

E. a alquilação de um composto (alcanamido C^_^)fenilo de Fó.r mulas (I) ou (E) com um agente de alquilação na presença de uma base para dar o correspondente composto de Fórmulas (I) ou (E)j ou

F. a hidrólise de um composto (alcanamido Cj^) fenilo ou N-(alquil ^-(alcanamido C^^^)fenilo de Fórmulas (i) ou (E) qu de Fórmula (G)

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SKB CASE 14285-CIP 2

-3c.:

Á/_r &

para dar o correspondente composto de Fórmulas (I) ou (E); ou

G. a oxidação de um composto de Fórmula (i) onde um de entre R¹ e R ê fenilo substituído com um ou mais grupos alquil(C^ ptio, alquil(C^_g)sulfinilo, alcenil(C^_^)tio, ou aci. loxialquiltio, com um agente oxidante, para se obter o com posto correspondente de Fórmula (I); ou

H. a reduç3o de um composto de Fórmulas (E) ou (i), onde X da Fórmula (E), ou um de R e R^ da Fórmula (l), é fenilo monoou dissubstituído contendo um grupo nitro, com hidrogénio gasoso num catalisador, para se obter o composto correspori dente de Fórmulas (i) ou (E); ou

I. a cicloalquilação de um composto de Fórmulas (i) ou (E) ori de um de entre R¹ e R da Fórmula (I) ou X da Fórmula (E), é aminofenilo, com di-halobutano ou di-halopentano, na prje sença de uma base, para se obter o composto correspondente de Fórmula (i) ou (E); ou

3. a redução dos compostos de alcanamido correspondentes com borano ou com complexo de dimetilsulfureto de borano, em tetra-hidrofurano; ou

K. a redução dos compostos N-(alquil C^_^)-(alcanamido correspondentes, com borano ou com complexo de dimetilsulfureto de borano, em tetra-hidrofurano; ou

L. (i) a reacção de um composto de Fórmulas (E) ou (G), com um reagente de alquil(C₁_₅)lítio para se obter o reagente de litio correspondente por metalação ou interpermuta de lítio-halogéneo respectivamente;

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C-, >'/ // /Γ- /4

M.

-4(ii) a adição de um excesso de eterato de halogeneto de magnésio ao reagente de lítio para se obter o reja gente de Grignard correspondente por transmetalação;

(iii) a adição do reagente de Grignard a um sal de N-acilpiridio para se obter o composto correspondente com a Fórmula (F);

(iv) a desacilação/oxidação do composto de Fórmula (F); ou o tratamento do derivado 3-lítio de um composto de Fórmulas (E) ou (G) com cloreto de trialquilestanho para se obter um composto de Fórmula (3) 'ini

10' 3

N.

O.

P.

Q.

e a reacção deste composto com uma mistura de um halogeneto ou triflato de arilo ou heteroarilo e tetraquis(trifosfina)paládio numa mistura de tetra-hidrofurano e hexametilfosforamidaj ou o tratamento do composto fenilo, substituido com fluoro, correspondente de Fórmula (i) com um sal de metal de um aX quilmercaptano num solvente polar aprótico; ou o tratamento de um composto de Fórmula (i), onde é feni lo substituído com pelo menos um alquilsulfinilo, com um anidrido de ácido alcanóico; ou a hidrólise do produto de 0; ou o tratamento do produto do P com um halogeneto de acilo, anidrido de ácido alcanóico, halogeneto de tioacilo, anidri do de ácido ditioalcanóico, halogeneto de dialquilcarbamilo

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R.

Ξ.

T.

ou halogeneto de dialquiltiocarbamilo na presença de uma base tal como piridina; ou a alquilação de um composto de Fórmula (i) onde um de R^ ou R ê fenilo substituído com pslo menos um grupo sulfidri lo, com um halogeneto de alcenilo apropriadamente substituído; ou

i) o tratamento do produto mercapto de P com uma base forte para se obter o composto de sal de mercaptoreto de metal, ii) o tratamento do composto de i) com cloreto de trialquilsililmetilo, para se obter um composto de Fórmula (i) onde o fenilo tem pelo menos um substituinte sulfureto de trialquilsililmetilo, iii) o tratamento do composto de ii) num solvente aprótico, com um reagente de litiação seguido pelo aldeído ou cetona alifáticos, apropriados; ou a desacilação e aromatização de um composto de Fórmula (L)

FORMULA (L) ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável, com enxofre em deca lina, tetralina, £-cimeno ou xileno refluxantes com oxigénio gas£ so, durante 15 minutos.

invento diz ainda respeito ao processo de preparação das composiçSes farmacêuticas e dos intermediários dos compostos de fórmula (I).

Os compostos preparados pelo presente invento são úteis ca mo inibidores do percurso da 5-lipoxigenase.

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-6MEMORIA DESCRITIVA

Antecedentes da invenção presente invento refere-se ao processo de preparação de novos compostos, de composições farmacêuticas e a métodos de inibição do percurso da 5-lipoxigenase do metabolismo do ácido araquidónico, num animal que dela necessite, que compreendem a administração a esse animal, de uma quantidade eficaz, inibidora do percurso da 5-lipoxigenase, de um 2(3)-(piridil)-3(2)-(fenil subs tituído)-6,7-di-hidro-/~5H_7-pirrol /~l,2-a_7imidazolo, de uma 2(5)-(piridil)-3(2)-(fenil substituido)-5,6,7,8-tetra-hidro-mida zo^”l,2-a_7piridina ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Devidson et al., Patente dos E.U.A. n9. 4 507 481, publicai da em 26 de Março de 1985, descrevem compostos com a fórmula:

onde

X ê 0 ou S(0)_n; n é 0, 1 ou 2;

R^ ê H, alquilo de cadeia curta, fenilo, benzilo ou be_n zilo substituído com alquilamino de cadeia curta, dialquil. amino de cadeia curta, nitro, halo, hidroxi ou alcoxi de cadeia curta;

R² é H ou XR¹;

A é CH„ ou CHCH_X;

2 5

Rj e R^ são independentemente seleccionados entre A, aJL quilo de cadeia curta, arilo, arilo substituído com alquilo de cadeia curta, amino, alquilamino de cadeia curta, ni tro, alcoxi de cadeia curta, hidroxi ou halo; desde que p.e

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ΞΚΒ CASE 14285-CIP 2 &'i <X'

-Ί-

lo menos um dos grupos R^ e R^ seja arilo ou arilo substituído; e

R₅ e R₆ são cada um, H ou juntam-se para formar uma ligação dupla na posição 2,3.

Davison et al. descrevemtambêm que estes compostos são imu noestimulantes ou iminossupressores, com base (a) na sua activida de inibidora ou estimulante num ensaio de quimiotaxia que mede a capacidade de uma droga em influenciar o movimento de macrofagos murinos que respondem ao complemento; (b) na sua actividade imunossupressora ou activante, num teste de placa de Kennedy, no qual se deprime um sistema imunológico humoral de animal, artificialmeji te, com 6-mercaptopurina. Nem o ensaio de quimiotaxia nem o teste de placa de Kennedy são de qualquer utilidade conhecida na detecção ou na sugestão de compostos que sejam inibidores do percurso da 5-liposigenase. Davidson et al., descrevem também que estes compostos têm actividade anti-inflamatória tal como ê determinado pelo teste do edema das patas induzido por carragenano em ratazanas. Tal como anteriormente se referiu, este teste não tem qualquer utilidade conhecida na detecção ou sugestão de compostos que sejam inibidores do percurso da 5-lipoxigenase. Davidson et al. descrevem também que estes compostos têm actividade antiviral em ratinhos com hepatite; mas esta actividade não é de qualquer uti Iidade conhecida na detecção ou sugestão de compostos que sejam inibidores do percurso da 5-lipoxigenase.

Sumário da invenção presente invento refere-se ao processo de preparação de um composto com a fórmula (i)

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SKB CASE 14285-CIP 2

onde

1) um dos grupos R ou R^ tem de ser piridilo substituído por alquilo e o outro á seleccionado entre:

(a) fenilo monossubstituído onde o referido substituijn te é seleccionado entre H, halo, hidroxi, alcoxi C^_^, alquil(C^ ^)tio, alquilo alquil(C^^^)sulfinilo, alquil(C-^psulfonila, alquil(C₁___;5)amino, dialquil(C₁__₃)amino, CF^, N-(alquil C₁__;?)-N-(alcanamidQ C ₁_₃), N-pirrolidino, N-piperidino, prop-2-eno-l-oxi ou 2,2,2-tri-haloetoxi;

(b) fenilo dissubstituído onde os referidos substituir^ tes são iguais e são seleccionados entre halo, alcoxi alquilíC^^jJamino, dialquil ( amino, N-pirrolidino, N-piperidino, 2,2,2-tri-haloetoxi, prop-2-eno-l-oxi ou hidro xi ou os dois substituintes formam juntos um grupo metilenodioxi ;

(c) fenilo dissubstituído onde os referidos substituijn tes não são iguais e são independentemente seleccionados entre halo, alquilamino, nitro, N-(alquil ^)-N-(alcanamido dialquil(C₁_₃)amino, amino, N-pirrolidino ou N-piperidinoJ (d) fenilo dissubstituído onde um dos referidos substi.

tuintes tem de ser alcoxi C^ hidroxi, 2,2,2-tri-haloeto xi ou prop-2-eno-l-oxi e 0 outro substituinte é independer) temente seleccionado entre halo, alquil (C^^) amino, N-(alquil C₁_₅)-N-(alcanamido dialquil(C₁_₃)amino, amino,

N-pirrolidino ou N-piperidino; ou (e) fenilo dissubstituído onde um substituinte ê seleç. cionado entre alquiltio, alquil(C^_^)sulfinilo e alquil(C^ ^sulfonilo e 0 outro é seleccionado entre alcoxi nitro, halo, amino, alquil(C^__>^)amino ou dialquil(Ci-^)amino; ou

2) um dos grupos R ou R¹ é 2-piridilo ou 3-piridilo e o ou, tro é seleccionado entre:

(a) fenilo monossubstituído onde 0 referido substituir) te ê seleccionado entre alquil(C^ .^tio, alquil (Cj^) sulf i.

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SKB CASE 14285-CIP 2 c . Ç'·'

nilo, alquil(C^ .^sulfonilo, alcoxi ou hidroxi;

(b) fenilo dissubstituído onde um substituinte ê seleç. cionado entre alquil(C₁_₃)tio, alquil(C₁_₃)sulfinilo ou al. quil(C^_₃)sulfonilo e o outro ê seleccionado entre alcoxi C_{1 3}, nitro, halo, amino, alquil(C^_^)amino ou dialquil(C^ ₃)amino; ou

3) Ré 4-piridilo e R ê seleccionado entre:

(a) fenilo monossubstituído onde o referido substituin te é seleccionado entre alquil(C^_^)tio, alquil(C_{3 3})sulfj. nilo, alquil(C^_₃)sulfonilo ou hidroxi; ou (b) fenilo dissubstituído onde um substituinte é seleç cionado entre alquil(C^^^)tio, alquil(C^_₃)sulfinilo ou al, quil(C₁_₃)sulfonilo e o outro é seleccionado entre alcoxi ^C2_j» nitro, halo, amino, alquil amino, ou dialquil(C|_j)amino; ou

4) r! é 4-piridilo e R ê seleccionado entre:

(a) fenilo monossubstituído onde o referido substituin te ê seleccionado entre alquilíC^^)tio, alquil(C^_₃)sulfi. nilo, alquil(C^^₃)sulfonilo, hidroxi ou alcoxi C₂ ou al. cenil(C₂_^)tio ou alcenil(C₂_^)sulfinilo, lineares ou rami ficados; ou (b) fenilo dissubstituído onde um substituinte é seleç: cionado entre alquil(C^ ₃)tio, alquil(C^ -j)sulfinilo ou al. quilfC^^ psulfonilo e o outro ê seleccionado entre alcoxi C₂_₃, nitro, halo, amino, alquil(C^_₃)amino, ou dialquil(C₁_₃)amino ou, alceniltio ou alcenil(C₂_,_)sulfinilo, lineares ou ramificados; ou

5) um dos grupos R ou R é piridilo ou piridilo substituído com alquilo e o outro ê seleccionado entre fenilo monos, substituído ou dissubstituído, onde o referido substituinte é seleccionado entre tiol /~HS-_T, aciltio ^~AC(0)S-_7, ditioacilo /~AC(S)S-__7, dialquiltiocarbamilo 0)S-_7, dialquilditiocarbamilo /~A₂NC(S)S-_7, alquilcarbonilalquil tio /~AC(θ)CH₂3-_7, carbalcoxialquiltio /~AQC(o)CH₂S-_7 ou aciloxialquiltio onde o CH₂ está facultati.

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SKB CASE 14285-CIP 2

-10vamente substituído com alquilo C e A é alquilo C^_^:

e R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R^A R⁹ são H, ou um ou dois de R², R³, R⁴, 5 6 7 8 9

R , R , R , R e R são independentemente seleccionados entre H ou alquilo C^ %» e n é 0 ou 1;

ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável.

termo N-(alquil C^_₃)-N-(alcanamido ê aqui usado em todos os casos para designar um dos grupos seguintes:

alquil

1-2

CN/ alquil ou '1-3

II

HCN alquil

presente invento refere-se também a uma composição farma cèutica compreendendo um transportador ou diluente, farmaceuticamente aceitável, e uma quantidade eficaz, não tóxica, inibidora do percurso da 5-lipoxigenase, de um composto com a fórmula (I), definida como anteriormente, ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável.

presente invento refere-se também a um método de tratamento de doenças, mediadas pelo percurso da 5-lipoxigenase, que compreende a administração a um animal que o necessite, de uma quantidade eficaz, não tóxica, inibidora do percurso da 5-lipoxigenase, de um composto com a fórmula (i) definida como anteriormente, ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável.

presente invento refere-se também ao processo de prepara ção de compostos intermediários, usados na preparação de um compos. to com a Fórmula (i), com a seguinte Fórmula estrutural (3):

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SKB CASE 14285-CIP 2 ^- -

-11^íob

onde n ê 0 ou 1;

R², r\ R^, R⁶, R⁷, r⁸ θ r^ _sg_{0 ou Ufn ou} d_Oi_s> de

R², R·⁵, r\ R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ e R⁹ são independentemente seleccionados entre H ou alquilo

R·*·⁸ é alquilo C^_^; e χΐ ê seleccionado entre (a) fenilo ou fenilo monossubstituído onde o referido substituinte ê seleccionado entre H, fluoro» cloro, alcoxi C.^ .j, alquilo dialquil(C₁_^)amino, CF^, alquil(C₁_^)amino, N-pirrolidino, N-piperidino, prop-2-eno-l-oxi ou

2,2,2-tri-haloetoxi;

(b) fenilo dissubstituído onde os referidos substituin tes são iguais e são seleccionados entre fluoro, cloro, al. coxi dialquil(C^_j)amino, N-pirrolidino, N-piperidino, 2,2,2-tri-haloetoxi, prop-2-eno-l-oxi, ou dois substituintes formam juntos um grupo metilenodioxi» (c) fenilo dissubstituído onde os referidos substituin tes não são iguais e são independentemente seleccionados entre fluoro, cloro, alquil(C^_j)amino, dialquil (C^pamino, N-pirrolidino ou N-piperidino;

(d) fenilo dissubstituído onde um dos substituintes tem de ser alcoxi C^_^, 2,2,2-tri-haloetoxi ou prop-2-eno-1-oxi e 0 outro substituinte é independentemente seleccig

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SKB CASE 14285-CIP 2

ίϊί

C'..,

-12nados entre fluoro, cloro, alquil(C^_^)amino, dialquil(C^ ₃)amino, N-pirrolidino ou N-piperidino5 ou (e) piridilo ou piridilo substituído com alquilo;

ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Descrição detalhada da invenção presente invento refere-se ao processo de preparação de compostos com a Fórmula (l), descrita como anteriormente, ao processo de preparação de eomposiçães farmacêuticas compreendendo um transportador ou diluente farmaceuticamente aceitável e um compos. to com a Fórmula (I), a métodos de tratamento de doenças mediadas pelo percurso da 5-lipoxigenase, compreendendo a administração de um composto com a Fórmula (i) ou de uma composição farmacêutica contendo um composto com a Fórmula (i), e ao processo de preparação de compostos com a Fórmula (□) descrita como anteriormente.

Todos os compostos com a Fórmula (i) são úteis na inibição do percurso da 5-lipoxigenase do metabolismo do ácido arãquidónico, num animal que dela necessite.

Os compostos com a Fórmula (i) podem ser preparados de acordo com a seguinte via sintética:

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'Lt yt.

+

χ O FÓRMULA (D) ⁰ »n

FORMULA (H)

R * formula (j)

FORMULA (L ) ,·//

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SKB CASE 14285-CIP 2

O· /·;

-14Todos os compostos com a Fórmula (E), Fórmula (F), Fórmula (G) e Fórmula (H) são úteis como intermediários na preparação de compostos com a Fórmula (i). Todos os compostos necessários com a Fórmula (A), Fórmula (B), Fórmula (C) e Fórmula (D) podem ser obtidos a partir de fontes comerciais ou podem ser preparados por técnicas convencionais tais como as que aqui se descrevem.

Os compostos com a Fórmula (e) têm a seguinte estrutura:

onde n é 0 ou 1;

R²,

R³,

R\

R⁴,

R⁴, >

R⁶,

R⁶, l R⁷,

8 9 : , R e R são H, ou um ou dois de 8 9

R e R são independentemente sele£ cionados entre H ou alquilo ^_2’

X é seleccionado entre (a) piridilo j (b) fenilo monossubstituído, onde o referido substituinte é seleccionado entre halo, alcoxi amino, hidroxi, alquiltio, alquilo alquil(C^ ^Jarnino, dia/ quil(C₁_₃)amino, CF^, N-(alcanamido ^c1_₃), N-(alquil ^c1_₃)-N-(alcanamido C^^), N-pirrolidino, N-piperidino, prop-2-eno-l-oxi ou 2,2,2-tri-haloetoxi;

(c) fenilo dissubstituído onde os referidos substituin tes são iguais e são seleccionados entre halo, alcoxi alquil(amino, dialquil (C^^) amino, amino, N-pirrolid/ no, N-piperidino, 2,2,2-tri-haloetoxi, prop-2-eno-l-oxi, hidroxi, ou os dois substituintes formam juntos um grupo

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5KB CASE 14285-CIP 2

-15ZS 7/Z metilenodioxi;

(d) fenilo dissubstituído onde os referidos substituir} tes não são iguais e são independentamente seleccionados entre halo, alquil(C₁__>3)amino, nitro, N-(alcanamido N-(alquil C^_^)-N-(alcanamido C^_^), dialquil(C^_^)amino, amino, N-pirrolidino ou N-piperidino; ou

(e) fenilo dissubstituído onde um dos referidos substituintes tem de ser alcoxi hidroxi, alquil(C^ptio,

2,2,2-tri-haloetoxi ou prop-2-eno-l-oxi e o outro substittj inte é independentemente seleccionado entre halo, alquil(Ci-^)amino, nitro, N-(alquil C^_^)-N-(alcanamido C^_^), dialquil(C^_^)amino, amino, N-pirrolidino ou N-piperidino5 desde que quando n é 1, e R^, R^, R⁴, R^, R^, R?, R& e X seja diferente de 2,4-dimetoxifenilo ou 4-aminofenilo;

ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Um outro composto intermediário, usado na preparação de um composto com a Fórmula (I), ê um composto com a fórmula:

FORMULA (F) onde n é 0 ou 1;

R^, r\ R⁴, j r⁷, r8 e r⁹ sg_o todos H ou um ou dois de R^, R , R⁴, Fp, r⁷, r® θ r⁹ _sg₀ independentemente seleccionados entre H ou alquilo C^

X é 4—(l,4-di-hidro)piridilo substituído com N-(alcanoíloCj^g), N-(alcoxi(C₁_g)carbonilo), N-(benzoílo), N-(fe noxicarbonilq), N-(fenilacetilo) ou N-(benziloxicarbonilo) ;

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SKB CASE 14285-CIP 2

-16X^· é seleccionado entre:

(a) fenilo monossubstituído onde o referido substituiri te é seleccionado entre H, halo, alcoxi C^^^, hidroxi, alquil(C^_^)tio, alquilo C.^^, N-(alquil C₁_₃)-N-(alcanamido C^ ^), dialquil(C^ ^)amino, CF^, N-pirrolidino, N-piperidi, no, prop-2-eno-l-oxi ou 2,2,2-tri-haloetoxi» (b) fenilo dissubstituído onde os referidos substituin tes são iguais e são seleccionados entre halo, alcoxi dialquil(C^ ^)amino, N-pirrolidino, N-piperidino, 2,2,2-tri-haloetoxi ou prop-2-eno-l-cxi, ou os dois substituintes formam juntos um grupo metilenodioxi5 (c) fenilo dissubstituído onde os referidos substitui_n tes não são iguais e são independentemente seleccionados entre halo, nitro, hidroxi, N-(alquil ^)-N-(alcanamido *1-3^, dialquil(C^__^)amino, N-pirrolidino, ou N-piperidino ou (d) fenilo dissubstituído onde um dos referidos substi tuintes tem de ser alcoxi C^^^, hidroxi, alquil(C^ j)tio,

2,2,2-tri-haloetoxi ou prop-2-eno-l-oxi, e o outro substituinte ê independentemente seleccionado entre halo, alquil. (C^_^)amino, nitro, N-(alquil C^__x)-N-(alcanamido C^ ^), dialquil(C^ ^)amino, amino, N-pirrolidino ou N-piperidino5 ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Um outro composto intermediário usado na preparação de um composto com a Fórmula (i) á um composto com a fórmula:

R

X

R⁴ R⁵FORMULA (G)

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onde n é 0 ou 1;

R², r\ R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ _e R⁹ são todos H, ou um ou dois de R², R⁵, R⁴, R⁹, R⁶, R⁷, R⁸ e R⁹ são independentemente seleccionados entre H ou alquilo 5 ^e

X é seleccionado entre (a) fenilo monossubstituído onde o referido substituin te é seleccionado entre H, fluoro, cloro, alcoxi alquilo ^Cj.-4’ ^di^alP^uil(^C]._3)^amino> ^3» alquil (C^p amino, N-pirrolidino, N-piperidino, prop-2-eno-l-oxi ou 2,2,2-tri. -haloetoxi;

(b) fenilo dissubstituído onde os referidos substituijn tes são iguais e são seleccionados entre fluoro, cloro, aJL coxi dialquil(C^_^)amino, N-pirrolidino, N-piperidino, 2,2,2-tri-haloetoxi, prop-2-eno-l-oxi, ou os dois subs. tituintes formam juntos um grupo metilenodioxi;

(c) fenilo dissubstituído onde os referidos substituir? tes não são iguais e são independentemente seleccionados entre fluoro, cloro, alquil(C^ ₃)amino, dialquilíC^ ₃)amino, N-pirrolidino ou N-piperidino;

(d) fenilo dissubstituído onde um dos referidos substi. tuintes tem de ser alcoxi C^_₃> 2,2,2-tri-haloetoxi ou prop-2-eno-l-oxi e o outro substituinte é independentemente seleccionado entre fluoro, cloro, alquilíC^ ₃)amino, di, alquil(C^_₃)amino, N-pirrolidino ou N-piperidinoj ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Um outro composto intermediário usado na preparação de um composto com a Fórmula (i) ê um composto com a fórmula:

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SKB CASE 14285-CIP 2

onde

n ê 0 ou 1;

_d7 ηθ n

R , R e R ou alquilo entre:

R são H, ou um ou dois de são independentemente seleccionados entre H

X é seleccionado (a) piridilo;

(b) fenilo monossubstituído onde o referido substituin te é seleccionado entre H, halo, alcoxi C^ alquil(C^ tio, alquilo N-(alcanamido C^__^), dialquil(C^_^)amino, CF.j, N-pirrolidino, ou N-piperidino;

(c) fenilo dissubstituído onde os. referidos substituin tes são iguais e são seleccionados entre halo, alcoxi C^ N-(alcanamido C^j), dialquilCC-^^amino, N-pirrolidino ou N-piperidino ou os dois substituintes formam juntos um gru. po metilenodioxi;

(d) fenilo dissubstituído onde os referidos substituin tes não são iguais e são independentemente seleccionados entre halo, nitro, N-(alcanamido C^_^), alcoxi C^ dialquilíC^pamino, N-pirrolidino, ou N-piperidino; ou (e) fenilo dissubstituído onde um dos referidos substi tuintes tem de ser alcoxi C^ alquil(C^ ^)tio, hidroxi,

2,2,2-tri-haloetoxi ou prop-2-eno-l-oxi e o outro substitu inte é independentemente seleccionado entre halo, nitro, N-(alquil C^_^)-N-(alcanamido C^_^), dialquil(C^ ^)amino, N-pirrolidino ou N-piperidino;

ou um seu sal farmaceuticamente aceitável

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á'

Um outro composto intermediário usado na preparação de um composto com a Fórmula (l) ê um composto com a fórmula:

onde n é 0 ou 1;

r2, R³, R⁴, R⁵, R⁶, R?, R⁸ e R^ são todos H, ou um ou dois de R^, r\ R⁴, R^, R^, R?, R⁸ e R^ são independentemente seleccionados entre H ou alquilo ^cj_2’

2 um dos grupos Y ou Y é independentemente seleccionado entre 4-/”l»2-di-hidro-2-(alquil C^_^)__7piridilo substituí do com N-(alcanoilo C₁__g), W-(alcoxi(C₁_₈)carbonilo), N-(benzoílo), N-(fenoxicarbonilo), N-(fenilacetilo), ou N-(benziloxicarbonilo);

e o outro é seleccionado entre (a) fenilo monossubstituído onde o referido substituin te é seleccionado entre H, halo, alcoxi C^ alquil(C^ ^)tio, alquilo C.^^, N-(alquil C^ ^)-N-(alcanamido C^ ^), dialquil(C^_^)amino, CF^, W-pirrolidino, W-piperidino, prop-2-eno-l-oxi ou 2,2,2-tri-haloetoxi;

(b) fenilo dissubstituído onde os referidos substituin tes são iguais e são seleccionados entre halo, alcoxi C^ dialquil(C₁__₃)amino, N-pirrolidino, N-piperidino, 2,2,2-tri -haloetoxi, ou prop-2-eno-l-oxi, ou os dois substituintes formam juntos um grupo metilenodioxi;

(c) fenilo dissubstituído onde os referidos substitui^ tes não são iguais e são independentemente seleccionados

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-20entre halo, N-(alquil C^_^)-N-(alcanamido Cj,_p, dialquil(C^ j)amino, N-pirrolidino ou N-piperidino; ou (d) fenilo dissubstituído onde um dos referidos substi. tuintes tem de ser alcoxi alquil(tio, 2,2,2-tri

-haloetoxi ou prop-2-eno-l-oxi e o outro substituinte é in dependentemente seleccionado entre halo, alquil(C^_^)amino, N-(alquil C^ ^)-N-(alcanamido C^_^), dialquil(C^^^)amino, N-pirrolidino ou N-piperidino;

ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Os compostos com a Fórmula B, onde n, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶,

8 9

R , R e R são definidos como anteriormente, podem ser preparados por 0-alquilação da piperidona-2 ou da pirrolidona-2 correspondentes com a Fórmula (A), onde n, R², R³, r\ r^, r^ , R⁷, r® _e

R , são definidos como anteriormente, com um agente de alquilação, tal como o sulfato de dimetilo, de acordo com o método de Wick et al., Helv. Chim Acta, 54, 513 (l97l). Os compostos necessários com a Fórmula (A) estão comercialmente disponíveis ou são prepara dos por técnicas conhecidas. Os compostos com a Fórmula (c) onde 2345678 9 n, R , R , R , R , R , R , R e R são definidos como anteriormeri te, podem ser preparados por tratamento do composto correspondente com a Fórmula (B), com amónia ou com um sal de amónio, tal como cloreto de amónio, em etanol absoluto, de acordo com o método de Etienne et al., Compt. Rend., 259, 2660 (1964). Os compostos com a Fórmula (C) onde n é 1 ou 2 e R², R³, r\ R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ e 9

R são H são preferivelmente preparados como se descreve no método de Moriconia e Cevasco, 2· Oro. Chem., 33, 2109 (1968) na forma dos seus sais de hidro-halogeneto e libertados como bases, com NaOH aquoso concentrado, ou preferivelmente, com um equivalente molar de metóxido de sódio num solvente alcoólico. Os compostos com a Fórmula (d), onde X³ é Br e X é definida como anteriormente, estão comercialmente disponíveis ou são preparados por tratamento da acetofenona correspondentemente substituída em C^Clg, CHCl^, ácido acético ou em ácido bromídrico a 48%, com um equivalente de bromo /~^ver» Langley, Org. Syn, Coll., 2» 127 (1944); Comper et al., Org. Syn. Coll., 2.» 480 (1943)? e L orenzin, et al., 3, Org. Chem., 32, 4008 (1967)_7, ou alternativamente, por reacção em cio rafórmio-acetato de etilo, com uma suspensão de brometo de cobre

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-21(II) pelo método de King e Ostrum, 3. Org. Chem

29, 3459 (1964).

As acetofenonas necessárias estão comercialmente disponíveis ou podem ser preparadas por técnicas conhecidas. Alternativamente, os compostos com a Fórmula D, onde X é cloro e X é (a) fenilo 4-monossubstituIdo onde o substituinte é seleccionado entre H, halo, alquilo C₁_^, alquil (Cj^) tio, alcoxi C^^ ou (b) fenilo 3,4-dissubstituído onde os substituintes são iguais e são seleccionados entre alcoxi C^ metilenodioxi, ou onde os substi, tuintes são seleccionados independentemente de entre halo ou alco xi Cjl-3’ P°dem ser preparados por acilação do benzeno mono- ou dissubstituído correspondente, por uma reacção de Friedel-Crafts com cloreto de 2-cloroacetilo e AlCl^, pelo método de 3oshi et al., 3, Heterocyclic Chem., 16, 1141 (1979).

Os compostos com a Fórmula (E) servem como intermediários na preparação dos compostos com a Fórmula (i). Preferivelmente, os compostos com a Fórmula (E) são preparados a partir dos seus compostos correspondentes com a Fórmula (H). Os compostos com a Fórmula (H) servem como intermediários na preparação de compostos com a Fórmula (E). Os compostos Gom a Fórmula (H) são preparados por tratamento de uma solução de um composto com a Fórmula (d) substituído, tal como uma 2-haloacetofenona ou uma 2-bromoacetil-2,3 ou 4-piridina, que são descritas por Taurins et al,, 3. Heterocyclic Chem., (7, 1137 (1970) num solvente neutro, pref erivelmejn te não polar, com um equivalente molar do composto correspondente com a Fórmula (C), mantendo a temperatura a 25SC ou inferior. Os sais de hidro-halogeneto com a Fórmula (H) resultantes são conver. tidos em compostos com a Fórmula (e) por refluxo em água. Alternativamente, os compostos com a Fórmula (E) são preparados por tratamento de uma solução da 2-iminopirrolidina ou da 2-iminopipe, ridina com uma 2-bromoacetofenona substituída, com a Fórmula (D), quer num solvente orgânico polar, tal como DMF ou etanol, quer num hidrocarboneto clorado não polar, seguido da remoção de todo ou da maior parte do solvente, e de refluxo do resíduo em solução aquoso. Qs compostos com a Fórmula (E), onde X é um piridilo facultativamente substituído com um grupo alquilo C^ são prepara dos por tratamento de uma mistura de uma bromoacetilpiridina e de

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r.

c/'

-222-iminopirrolidina ou dos seus sais de hidro-halogeneto, num solvente polar aprótico, tal como dimetilformamida, com 2 a 5 equivalentes de uma base, tal como um sal de carbonato de metal.

Os compostos com a Fórmula (i) onde R ê fenilo ou fenilo substituido, e R^ é 4-piridilo, são preferivelmente preparados, em dois passos, por uma modificação do método de Lantos et al,, Pedido de Patente Europeia nS. 203 787 publicada em 12 de Março de 1986. No primeira passo, o composto correspondente com a Fórmula (E) é tratado, preferivelmente a 20-259C, com piridina e com um halogeneto de acilo, um halogeneto de arollo, um ester de halo, formato de arilalquilo, ou um éster de haloformato de alquilo, tais como brometo de acetilo, cloreto de benzoilo, cloroformato de benzilo, ou preferivelmente, cloroformato de etilo, num solvente no qual os reagentes são solúveis e inertes, para formar o composto com a Fórmula (F). Alternativamente o sal de acilpiridínio pode ser prê-formado e adicionado à solução do composto com a Fórmula (E). Os compostos com a fórmula (F) servem como in termediários na preparação dos compostos com a Fórmula (i). No segundo passo, o composto com a Fórmula (F), um produto de 1,4-di. -hidropiridina, é desacilado e aromatizado com enxofre em decalina, tetralina, p-cimeno ou xileno refluxante ou preferivelmente com ter-butóxido de potássio em ter-butanol, com 0g gasoso, ao re fluxo durante 15 minutos, por forma a obter-se o composto correspondente com a Fórmula (l).

Os compostos com a Fórmula (i) onde R ou R¹ é piridilo subs. tituído com alquilo, podem ser preparados por um processo similar a partir de compostos com a Fórmula (L). 0 composta com a Fórmula (L) é desacilado e aromatizado com enxofre em decalina, tetralina, p-cimeno ou xileno, ou com ter-butóxido de potássio em ter-butanol, com oxigénio gasoso, ao refluxo durante 15 minutos, por forma a obter-se o composto correspondente com a Fórmula (i). Os compostos com a Fórmula (L) são preparados por tratamento do composto com a Fórmula (i) com um halogeneto de acilo, halogeneto de aroílo, éster haloformato de arilalquilo ou com um éster haloformato de alquilo, e com um reagente de ^Grignard de alquilo usando o processo de Comins, D.L., e Abdullah, A.H., 3. Org, Chem.. Vol. 47, p. 4315 (1982).

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-2 3Os mesmos compostos com a Fórmula (E) que se usam para pre parar os compostos 4-piridilo com a Fórmula (l), são utilizados para preparar compostos 2-piridilo e 3-piridilo com a Fórmula (I).

tratamento dos compostos com a Fórmula (E) com bromo pelo proce dimento de Kano, Yakuqaku Zasshi, 92, 51 (1972), resulta numa bro mação na posição 3 obtendo-se os compostos 3-bromo-2-(fenilo subs. tituído)-6,7-di-hidro-(5H)-pirrolo(l,2-a)imidazolos e as 3-bromo-2-(fenil substituido)-5,6,7,8-tetra-hidroimidazo(l,2-a)piridinas com a Fórmula (G). Os compostos com a Fórmula (g) servem como in termediárics na preparação dos compostos com a Fórmula (i). Os com postos com a Fórmula (E) ou com a Fórmula (G) são tratados com n-butil-litio (n-BuLi) em tetra-hidrofurano por forma a obterem-se os seus derivados de 3-lítio, por metalação por permuta halogéneo -metal. A transmetalação dos compostos 3-lítio com MgB^ ou ZnC^ nos compostos correspondentes de magnésio ou zinco, de acordo com o método de Negishi et al., 3, Org. Chem., 42, 1821, (1977), fornece um bom acoplamento à 2- ou à 3-bromopiridina na presença do catalisador PdCl₂(l,4-bis(difenilfosfino)butano), um catalisador bidentado de Pd (li), usando o método de Kumada et al., Tetrahedron Letters, 22, 5319 (1981). Alternativamente os compostos com a Fórmula (G) podem ser acoplados à piridina, metalada na posição 2 ou 3, utilizando este catalisador bidentado de Pd (II) ou o catalisador correspondente Ni(ll) 012(1,2-bis(difenilfosfina)etano /ver Pridgen, 3. Oro, Chem., 47, 4319 (l982)_J7· Por qualquer destas vias obtêm-se compostos com a Fórmula (I) onde R¹ ê 2-piridilo ou 3-piridilo.

Os compostos com a Fórmula (l) podem também ser preparados a partir dos compostos com a Fórmula (E) por preparação do deriva do de trialquilestanho com a Fórmula (E), designado pela Fórmula (3). 0 composto com a Fórmula (3) é preparado por tratamento do derivado 3-lítio com a Fórmula (E), com cloreto de trialquilestanho. Faz-se reagir o composto com a Fórmula (3) com uma mistura de um halogeneto de arilo ou de heteroarilo, preferivelmente iodje to ou triflato e de tetraquis(trifenilfosfina)paládio numa mistura de THF (tetra-hidrofurano) e de HMPA (hexametilfosforamida) obtendo-se um composto com a Fórmula (I). Os compostos com a Fójç mula (i) onde um ou ambos os grupos R e R^ são 2-piridilo, 3-piri

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/y

-24dilo ou onde R é 2-piridilo, 3-piridilo ou 4-piridilo são preferi, velmente preparados por esta via. Alternativamente, os compostos com a Fórmula (I) podem ser preparados pela reacção análoga de um composto trialquilestanho de arilo ou de heteroarilo, com uma mis. tura de um composto com a Fórmula (g) e de tetraquis(trifenilfosfina)paládio, sob condições similares.

Os regioisómeros dos compostos com a Fórmula (I) onde R^ é fenilo substituido, ou 2,3 ou 4-piridilo e R é 2, 3, e 4-piridilo, são obtidos a partir de compostos com a Fórmula (E) onde X á 2, 3 ou 4-piridilo. Os compostos com a Fórmula (E) onde X ê 2, 3 ou 4-piridilo são preparados por tratamento de um sal de hidrobrometo de 2, 3 ou 4-bromoacetilpiridina com a Fórmula (D), onde R é 2, 3 ou 4-piridilo /preparado como se descreve em Tauris et al., 3.

Het Chem.. 7, 1137 (197O)_J com 2-3 equivalentes da 2-iminopirrolidina ou da 2-iminopiperidina, pelo procedimento usado para preparar os outros compostos com a Fórmula (E) anteriormente descrito. Por bromação na posição 3 pelo procedimento de Kano anterior, mente citado, obtêm-se os compostos correspondentes com a Fórmula (G). Por metalação dos compostos com a Fórmula (E) com n-BuLi ou por interpermuta halogeno-metal dos compostos com a Fórmula (G) com n-BuLi, seguida por transmetalação com MgB^ e acoplamento ao halobenzeno substituído, preferivelmente iodobenzeno ou à 2, 3 ou

4-halopiridina, preferivelmente onde halo é iodo, na presença do complexo bidentado de fosfina-paládio ou níquel, descrito como ajn teriormente, obtêm-se os regioisómeros desejados com a Fórmula (l) e os compostos de bis(piridilo) com a Fórmula (I). Alternati vamente, podem acoplar-se a piridina ou o benzeno substituído metalados, a compostos com a Fórmula (G) usando os catalisadores co mo anteriormente se descreveu.

Alternativamente, os compostos com as Fórmulas (I) e (E) onde R ou R^é um fenilo mono- ou dissubstituído com pelo menos um substituinte fluoro, podem ser convertidos nos compostos correspondentes com as Fórmulas (I) ou (E) com um grupo fenilo substituído com um grupo alquiltio. 0 composto com a Fórmula (i) ou (e) de fenilo substituído com fluoro ê tratado com 1,2 equivalentes do sal de sódio do alquilmercaptano num solvente polar apróti co, preferivelmente dimetilformamida.

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fi’: fi~ fi/

-25Os compostos com a Fórmula (l) onde R ou R¹ é um fenilo mono- ou dissubstituído com pelo menos um substituinte alquil(C^^)sulfinilo, alquil(C^ ^sulfonilo, aciloxialquilsulfinilo ou alcenil(C^_^)sulfinilo são preparados por tratamento de um ou mais equivalentes do composto correspondente com a Fórmula (I), onde R ou R¹ são alquil(C^ ^)tiofenilo, alquil(C^ ^)sulfinilfenilo, aciloxialquiltiofenilo ou alceniltiofenilo, com um ou mais equivalen, tes de um agente oxidante (tal como ácido 3-cloroperbenzóico num solvente inerte, ou periodato de sódio num solvente polar, tal cg mo metanol aquoso, contendo um ácido mineral tal como ácido clorí. drico) por função mercapto, num solvente inerte. Os compostos com a Fórmula (I) onde R ou R¹ são fenilo substituído com alquil(C^ ^)sulfonilo, são preparados por .tratamento de um equivalente do composto de alquil(C₁ ^)sulfinilo correspondente com a Fórmula (i) com 2/3 equivalentes de KMnO^ por função sulfinilo, numa solu. ção aquosa ácida, pelo método de Chatteruiay et al., J, Chem. Soc. 1352 (1930) ou alternativamente, com um equivalente de um perácido.

As acetofenonas substituídas com um fenilo mono- ou dissubs. tituído com pelo menos um N-(alcanamido C^ ou N-(alquil C^ ^)-N-(alcanamido C^_^), e, em alguns casos, os compostos com a Fórmu. la (E) e com a Fórmula (I), são preparadas por acilação dos compos. tos correspondentes de amino e de ^-(alquilíC^^jJamino) com 0 ani drido ou cloreto de ácido alcanóico em piridina. Outra preparação alternativa dos compostos com a Fórmula (E) e com a Fórmula (i) de fenilo substituído com N-(alquil C^ ^)-N-(alcanamido C^ ^), consiste na alquilação dos compostos substituidos com N-(alcanamido correspondentes, com hidrato de sódio e com um brometo ou iodeto de alquilo em dimetilformamida.

Os compostos com a Fórmula (E) e com a Fórmula (i) contendo um fenilo mono- ou dissubstituído com pelo menos um substituin te amino, são preparados, quer por hidrólise dos compostos de N-(alcanamido C₁_^) correspondentes em ácido mineral 6 W refluxante quer por redução catalítica dos compostos nitro correspondentes.

Os compostos com a Fórmula (E), Fórmula (G) e Fórmula (i)

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-26contendo um fenilo mono- ou dissubstituído com pelo menos um sub£ tituinte N-(alquil(C₁_₃)amino) são preferivelmente preparados por hidrólise, catalisada por ácido, dos compostas de W-(alquil C^_^)-N-(alcanamida correspondentes, com a Fórmula (E), Fórmula (G) e Fórmula (i), respectivamente, preparados como anteriormente se descreve para os compostos substituídos com aminofenilo ou, al_ ternativamente, quer por (a) redução dos compostos de N-(alcanami do C^_^) correspondentes, com borano ou com complexo de dimetilsulfureto de borano em THF, pelo método de Brouin, Organic Synthe sis via Boranes”, John Wiley and Sons, (1975), quer por (b) clivai gem dos compostos com a Fórmula (E) e com a Fórmula (i) substitui dos com N,N-(dialquil(C^ amino)fenilo correspondentes, com brometo de cianogênio na reacção de um Braun /ver, Hageman Org. Reactions, Vol, 7, 198 (1955)_/.

Os compostos com a Fórmula (E) e com a Fórmula (I) contendo um fenilo mono- ou dissubstituído com pelo menos um substituin te N,N-(dialquil(C^ ^)amino) são alternativamente preparados, quer por redução dos compostos de N-(alquil C^_^)-N-(alcanamido C^_^) correspondentes, com a Fórmula (E) e com a Fórmula (i), com borano, tal como anteriormente se descreve para os compostos substituídos com W-(alquil(C^__^)amino), quer por deslocamento do brometo por uma N,N-dialquilamina nos compostos de 4-bromo-3-nitrof eni, lo correspondentes com a Fórmula (E) e com a Fórmula (l), por aquecimento a 1402C com a W,N-dialquilamina e com carbonato de p£ tássio num solvente inerte.

Os compostos com a Fórmula (E) e com a Fórmula (i) contendo um fenilo mono- ou dissubstituído com pelo menos um substituin te N-pirrolidino ou N-piperidino são alternativamente preparados por ciclodialquilação dos compostos de aminofenilo correspondentes com dibromobutano ou dibromopentano e carbonato de potássio anidro, num solvente inerte tal como dimetilformamida.

Os compostos com a Fórmula (E) onde R é fenilo mono- ou dissubstituído com pelo menos um substituinte 2,2,2-tri-haloetoxi ou prop-2-eno-l-oxi, são preparados por alquilação dos fenóis apropriadas com a Fórmula (Ε), com éster de 2,2,2-trifluoroetilo do ácido trifluorometilsulfónico ou com brometo de alilo, respec68 079

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-27tivamente, tal como descrevem Bender et al. , 0. Med. Chem., 28, 1169 (1985), para a preparação dos compostos nSs. 23 e 33 que aí se descrevem. Os compostos de mono- e di-hidroxifenilo ou de fenilo dissubstituído, onde um substituinte ê hidroxi, com a Fórmula (E) e com a Fórmula (i), são obtidos por tratamento dos seus derivados de metoxi respectivos, correspondentemente substituídos com HBr em ácido acético, ou preferivelmente com BBr^ em pelo método descrito por Bender et al., 3. Med. Chem.. 28, 1169 (1985), para a preparação do composto ηδ. 14 que aí se descreve.

Os compostos cam a Fórmula (l) onde R é fenilo mono- cu dissubstituído com alcoxi C^ são preparados por alquilação dos compostos de hidroxifenilo apropriadamente substituídos, com o ha logeneto de alquilo C. , correspondente na presença de uma base j. — o forte, tal como hidreto de sódio, num solvente orgânico aprótico, tal como dimetilformamida.

Os compostos com a Fórmula (i) onde R ou R'' ê fenilo substituído com um grupo aciloxialquiltio, onde o alquilo está facultativamente substituído com alquilo C^ são preparados por tratamento de um composto com a Fórmula (i), onde R^ é fenilo substi. tuido com pelo menos um grupo alquilsulfinilo, com um anidrido de ácido alcanóico. Por hidrólise dos compostos de aciloxialquiltio resultantes obtêm-se compostos com a Fórmula (I) onde um dos grupos R ou R ê fenilo substituído com uma função sulfidrilo. Os compostos substituídos com sulfidrilo podem ser tratados com um anidrido de ácido alcanóico ou com um anidrido de ácido ditioalca noico, em piridina, para preparar compostos com a Fórmula (i) onde um dos grupos R¹ ou R ê fenilo substituído com um ou mais grupos aciltio ou ditioacilo.

Os compostos com a Fórmula (i) onde R ou R é fenilo substituído com um grupo alceniltio, onde um átomo de carbono separa o enxofre do carbono com a ligação dupla, podem ser preparados por alquilação de um composto com a Fórmula (i), onde um dos gru1 pos R ou R ê fenilo substituído com pelo menos um grupo sulfidri lo, com um halogeneto de alcenilo apropriadamente substituído, tal como brometo de alilo.

Os compostos com a Fórmula (I) onde R¹ ou R é fenilo subs68 079

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-28tituído com um grupo alquilcarbonilalquiltio ou carbalcoxialquiltio são preparados por tratamento dos compostos correspondentes substituídos com sulfidrilo, com um halogeneto de alquilcarbonilalquilo, tal como bromoacetona, ou com um halogeneto de carbalcoxialquilo, tal como bromoacetato de etilo.

Os compostos com a Fórmula (i) onde R ou R é fenilo substituído com um grupo alceniltio, onde o enxofre está ligado ao carbono com a ligação dupla, são preparados a partir dos compostos correspondentes onde o fenilo está substituído com um grupo mercapto. 0 composto substituído com mercapto é convertido num sal de metal, num solvente polar, com uma base forte tal como um hidreto de metal, um alcóxido de metal ou dietilamida de lítio. 0 sal msrcapteto de metal ê tratado com cloreto de trialquilsililme tilo obtendo-se um composto intermediário com a Fórmula (i) onde R ou r! é fenilo substituido com pelo menos um grupo trialquilsililmetilsulfureto. Trata-se este intermediário num solvente apró tico, tal como tetra-hidrofurano, a uma temperatura reduzida com um reagente de litiação, tal como dietilamida de lítio, seguindo-se um tratamento com um aldeído ou cetona alifáticos apropriados, para preparar os compostos com a Fórmula (l) onde R ou R^ é fenilo substituído com um ou mais grupos alceniltio.

Os sais farmaceuticamente aceitáveis, bem como o seu processo de preparação, são bem conhecidos dos peritos em produtos farmacêuticos. Os sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos com a Fórmula (I) que são úteis no presente inventa incluem, mas não estão limitados a, sais de maleato, fumarato, lactato, oxat lato, metanossulfonato, etanossulfonato, benzenossulfonato, tarta. rato, citrato, hidrocloreto, hidrobrometo, sulfato e fosfato. Os sais farmaceuticamente aceitáveis preferidos, dos compostos com a Fórmula (I) incluem, os sais de hidrocloreto e de hidrobrometo, e estes sais podem ser preparados por técnicas conhecidas, tais como, pelo método de Bender et al., Patente dos E.U.A, ns. 4 175 127, cuja descrição é aqui, por isso, incorporada como referência.

Verificou-se agora que os compostos com a Fórmula (i) são úteis no tratamento de estados de doença mediados pelo percurso da

5-lipoxigenase do metabolismo do ácido araquidónico num animal, incluindo os mamíferos, que dele necessite. A verificação de que

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-29os compostos com a Fórmula (i) são inibidores do percurso da 5-1 Jl poxigenase é baseada nos efeitos dos compostos com a Fórmula (i) na inflamação de tecido in vivo e na produção de produtos da 5-li poxigenase por células inflamatórias em testes in vitro, alguns dos quais aqui depois se descrevem. Resumidamente, estes ensaios revelam que os compostos com a Fórmula (i) apresentam actividade anti-inflamatória, no modelo de inflamação, induzida pelo ácido araquidónico, no ouvido do ratinho. 0 inibidor da ciclooxigenase, a indometacina, não reduziu a inflamação nestes testes. A acção inibidora do percurso da 5-lipoxigenase dos compostos com a Fórmu la (I) foi confirmada mostrando que estes compostos prejudicam a produção de produtos da 5-lipoxigenase tais como o leucotrieno (di-HETE) e a produção de 5-HETE, por células RBL-1.

papel patofisiológico dos metabolitos do ãcido araquidónico tem sido o centro de estudos recentes intensivos. Adicional, mente à actividade floglstica bem conhecida (i.e. actividade inflamatória geral) das prostaglandinas, a descrição mais recente de actividade similar para os icosanoides tem alargado o interesse destes produtos como mediadores de inflamação ver, 0'Flaherty, Lab. Invest., 47, 514-329 (1982)_/. A constatação publicada da potente actividade quemotactica e algésica potente do LTB^ ^verSmith, Gen. Pharmacol., 12, 211-216 (1981) e Levine et al., Science, 225, 743-745 (l984)_7, conjuntamente com o aumento confre eido, mediado por LTC^ e LTD^, na permeabilidade capilar /”^verSimmons et al., Biochem. Pharmacol., 52, 1353-1359 (1983), Veno et al., Prostaqlandins, 21, 637-647 (l98l) e Camp et al., Br. 3. Pharmacol., 80, 497-502 (l983)_7 tem conduzido à sua consideração como alvos para intervenção farmacológica em ambas as fases, flui da e celular, das doenças inflamatórias.

A farmacologia de vários sistemas de modelos inflamatórios tem atestado a eficácia dos corticoesteróides na redução da infil tração celular. Estes resultados, e a observação de que os corti coesteróides inibem a produção dos produtos da ciclooxigenase e da lipoxigenase, sugerem que estes inibidores duais podem efectivamente reduzir ambas as fases fluida e celular da resposta inflama tória, uma vez que os inibidores selectivos da ciclooxigenase não inibem com confiança o influxo de células nos centros inflamatóri

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-30..-rj os /”ver, Vinegar et al., Fed. Proc., 35, 2447-2456 (1976), Higgs et al., Brit. Buli., 59, 265-270 (19B3), e Higgs et al*, Prostaqlandins, Leukotrienes and Medicine» 13, 89-92 (1984)J. As observações realçadas anteriormente argumentam convincentemente que um inibidor dual do metabolismo do ácido araquidónico seria um agente anti-inflamatório mais eficaz do que um inibidor apenas da ciclooxigenase. Sob condições óptimas é provável que um agente com actividade inibidora da lipoxigenase, preferencial, não partilhe a responsabilidade ulcerogénica dos inibidores da ciclooxigenase ou -a toxicidade dos corticoesteróides.

Dados clínicos recentes suportam também o entusiasmo pelos inibidores do percurso da 5-lipoxigenase, numa variedade de doenças inflamatórias, nas quais, a infiltração de granulócitos e/ou de monócitos é proeminente. A demonstração publicada de níveis elevados de LTB^ em fluído da articulação artrítica reumatóide /~v8r, Davidson et al., Ann. Rheum. Dis., 42, 677-679 (1983)J s.u gere também um papel contribuinte para os metabolitos do ácido araquidónico na artrite reumatóide. A observação preliminar de eficácia recentemente noticiada, incluindo a remissão, noticiada com tratamento de sulfasalazina de pacientes artríticos reumatóides /~ver Neumann et al., Brit. Med» 3., 287, 1099-1102 (1983)_/ ilustra a utilidade dos inibidores do percurso da 5-lipoxigenase na artrite reumatóide.

A sulfasalazina, que é usada para o tratamento da colite ulcerosa, tem sido noticiada como inibindo a produção in vitro do LTB^ e do 5-HETE /~ver, Stenson et al,, 3. Clin. Invest,, 69, 494-497 (1982)_/. ^Lsta observação, conjuntamente com o facto noticiado, de que a mucosa gastrintestinal inflamada de pacientes com a doença inflamatónia do intestino mostrou uma maior produção de LTB^ /ver, Sharon et al., Gastroenterol., 84, 1306 (l983)_7, sugere que a sulfasalazina possa ser eficaz pela inibição da produção de icosanóides quemotácticos (tal como o produto do percurso da 5-lipoxigenase conhecido como LTB^). As observações servem para sublinhar a utilidade dos inibidores do percurso da 5-liposj. genase na doença inflamatória do intestino.

Outra área de utilidade para um inibidor do percurso da 5-lipoxigenase consiste no tratamento da psorlase. Demonstrou-se

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O ÍL-51£//

C~ - - — ,-//.- “· que a pele psoriâtiea envolvida tinha níveis elevados de LTB^ /^-ver, Brain et al., JLançet, 19, 19 de Fevereiro de 1983_J7. 0 efeito promissor do benoxaprofeno na psoríase /ver, Allen et al., Brit. 0. Dermatol., 109, 126-129 (l983)_7 dm composto com actividade inibidora da lipoxigenase, in vitro, na psoríase, apoia o conceito de que os inibidores do percurso da 5-lipoxigenase podem ser úteis no tratamento da psoríase.

Os produtos da lipoxigenase têm sido identificados em flui dos de exudacLo de pacientes gotosos. Esta perturbação é caracterizada pela infiltração maciça de neutrófilos durante as fases in flamatórias agudas da doença. Uma vez que um produto principal da 5-lipoxigenase, o LTB^, á produzido por neutrofilos, conclui-se que a inibição da síntese do LTB^ pode bloquear um mecanismo de amplificação na gota.

Uma outra área na qual os inibidores do produto da 5-lipoxigenase podem ter utilidade ê a do enfarte do miocârdio. Estudos em cães com o inibidor dual, BW755-C, demonstraram que a área do enfarte após a oclusão coronária foi reduzida, e esta redução foi atribuída à inibição da infiltração de leucócitos no tecido isqué mico /ver Mollane et al., 3. Pharmacol. Exp, Therap., 228, 510-522 (1984)_7·

Ainda uma outra área de utilidade para os inibidores do percurso da 5-lipoxigenase á a área da prevenção de rejeição de transplantes de órgãos /ver, p.e., Foegh et al., Adv. Prostaglandin, Thromboxane, and Leukotriene Research, 15, 209-217 (1983)_7·

Ainda uma outra utilidade para os inibidores do percurso da 5-lipoxigenase é no tratamento do trauma de tecidos Tver, p.e., Denzlinger et al. Science, 250 (4723), 330-332 (l985)_7·

Para além destas, outra área de utilidade para os inibido, res do percurso da 5-lipoxigenase ê no tratamento da reacção inflamatória no sistema nervoso central, incluindo a esclerose múltipla £~ver, p.e., Mackay et al., Clin. Exp. Immunoloqy, 15, 471-482 (1973)_7.

Adicionalmente, outra área de utilidade para os inibidores do percurso da 5-lipoxigenase é no tratamento da asma. p.

e., Ford-Hutchinscn, 3. Allerqy Clin. Immunol., 74, 437-440 (1984)_7

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Os compostos farmaceuticamente eficazes do presente invento são administrados em formas de dosagem convencionais, preferidas por combinação de um composto com a Fórmula (i) (ingrediente activo), numa quantidade suficiente para produzir actividade ini. bidora do percurso da 5-lipoxigenase, com transportadores farmacêuticos padrão, de acordo com procedimentos convencionais. Estes procedimentos podem envolver mistura, granulação e compressão ou dissolução dos ingredientes, conforme apropriado para a preparação desejada.

transportador farmacêutico utilizado pode ser, por exemplo, quer um sólido quer um líquido. Exemplos de transportadores sólidos são lactose, terra alba, sacarose, talco, gelatina, ágar, pectina, acácia, estearato de magnésio, ácido esteárico e similares. Exemplos de transportadores líquidos são xarope, óleo de amendoim, azeite, água e similares. Similarmente, o transportador ou diluente pode incluir material retardador bem conhecido na técnica, tal como monoestearato de glicerilo ou diestearato de glj. cerilo, sozinho ou conjuntamente com uma cera.

Pode utilizar-se uma grande variedade de formas farmacêuti cas. Assim, se se usa um transportador sólido, a preparação pode ser comprimida, colocada numa cápsula de gelatina dura, na forma de pó ou de pelotas, ou na forma de um rebuçado ou pastilha. A quantidade de transportador sólido pode variar grandemente mas es. tará preferivelmente entre cerca de 25 mg e cerca de 1 g. Se se usa um transportador líquido a preparação estará na forma de um xarope, emulsão, cápsula de gelatina mole, líquido estéril injectável, tal como uma âmpola ou suspensão em líquido não aquoso.

Para obter uma forma de dosagem, solúvel em água, estável, dissolve-se um sal farmaceuticamente aceitável de um composto com a Fórmula (i) numa solução aquosa de um ácido orgânico ou inorgânico, tal como uma solução 0,3 M de ácido succinico, ou, preferivelmente, de ácido cítrico.

Preferivelmente, cada unidade de dosagem parentêrica conte rá o ingrediente activo /i.e., o composto com a Fórmula (I)_/ nu ma quantidade de cerca de 50 mg a cerca de 500 mg. Preferivelmeri te, cada unidade de dosagem oral conterá o ingrediente activo nu-33100 mg a cerca de 1000 mg.

Fórmula (i) podem também ser administra

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SKB CASE 14285-CIP 2 ma quantidade de cerca de

Os compostos com a dos localmente a um mamífero que necessite da inibição do percurso da 5-lipoxigenase do metabolismo do ácido araquidónico. Assim os compostos com a Fórmula (i) podem ser administrados localmente no tratamento ou profilaxia de inflamação num animal, incluindo o homem e outros mamíferos, e podem ser usados no alivio ou profila xia de doenças mediadas pelo percurso da 5-lipoxigenase tais como artrite reumatóide, espondilite reumatóide, osteoartrite, artrite gotosa, e outras condiçães artríticas juntas inflamadas, eczema, psoríase e outras condições inflamatórias da pele tais como queimaduras solares; condições inflamatórias do olho incluindo a coji juntiuite; pirése, dor e outras condições associadas a inflamação.

A quantidade de um composto com a Fórmula (i) (aqui depois designado por ingrediente activo) necessária para o efeito terapêutico por administração local, variará, como é óbvio, com o com posto escolhido, com a natureza e gravidade da condição inflamatói ria e com o animal que está a ser tratada, e dependerá finalmente do discernimento do médico. Uma dose anti-inflamatória adequada de um ingrediente activo é de 1,5 gug a 500 mg de base para administração local, sendo a dosagem mais preferida de 1 ^g a 1000^.g por exemplo, de 5 a 25yx.g, administradas duas ou três vezes ao dia.

Por administração local pretende-se designar a administração não sistémica e inclui a aplicação de um composto com a Fórmu. la (I) externamente na epiderme, na cavidade bucal e a instilação de um tal composto no ouvido, no olho e no nariz e onde o composto não entre significativamente na corrente sanguínea. Por administração sistémica pretende-se designar a administração, ora-1, intravenosa, intraperitoneal e intramuscular.

Embora seja possível para um ingrediente activo ser administrado sozinho, na forma do produto químico em bruto, é preferível apresentá-lo na forma de um formulação farmacêutica. 0 ingrediente activo pode compreender, para administração local, de 0,001/ a 10/ p/p, p.e., de l/ a 2/ em peso de formulação, ainda

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-34que possa compreender tanto quanto 10$ p/p, mas preferivelmente, não mais do que 5$ p/p e, mais preferivelmente, de 0,1$ a 1% p/p da formulação.

As formulações do presente invento, tanto para uso veterinário, como para uso em medicina humana, compreendem um ingrediejn te activo conjuntamente com um, ou mais, transportadores farmacêij ticos adequadas e, facultativamente, com quaisquer outros ingredX entes terapêuticos. 0 transportador tem de ser aceitável no sentido de que tem de ser compatível com os outros ingredientes da formulação e não prejudicial para o seu recipiente.

Formulações adequadas para administração local incluem pre, parações liquidas ou semi-líquidas, adequadas para penetração atra vés da pele, até ao local da inflamação, tais como: linimentos, loções, cremes, pomadas ou pastas e gotas adequadas para administração ao olho, ouvido ou nariz.

As gotas de acordo com o presente invento podem compreender soluções ou suspensões estéreis, aquosas ou oleosas e podem ser preparadas por dissolução do ingrediente activo numa solução aquo sa adequada de um agente bactericida, e/ou, fungicida, e/ou, de qualquer outro conservante adequado e, preferivelmente, incluindo um agente tensio-activo. A solução resultante pode depois ser clarificada por filtração, transferida para um recipiente adequado que é depois fechado e esterilizado em autoclave ou mantendo-o a 98-1Q09C durante meia hora. Alternativamente a solução pode ser esterilizada por filtração e transferida para o recipiente por uma técnica asséptica. Exemplos de agentes bactericidas e fungicidas adequados para inclusão nas gotas são o nitrato ou o acetato fenilmercúrio (0,002%), o cloreto de benzalcónio (0,01$) e o acetato de cloro-hexidina (0,01$). Solventes adequados para a prepara, ção de uma solução oleosa incluem o glicerol, álcool diluído e propileno-glicol.

As loções de acordo com o presente invento incluem as loções adequadas para aplicação à pele ou ao olho. Uma loção para os olhos pode compreender uma solução aquosa estéril, contendo fa cultativamente um bactericida e pode ser preparada por métodos s_i milares aos utilizados na preparação de gotas. As loções ou lini

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-35mentos para aplicação na pele podem também incluir um agente para apressar a secagem e para arrefecer a pele, tal como um álcool ou acetona e/ou um humedecedor tal como o glicerol ou um óleo tal co mo óleo de castor ou o óleo de amendoim.

Os cremes, pomadas ou pastas de acordo com o presente inuento são formulações semi-sólidas do ingrediente activo para aplicação externa. Podem ser preparadas por mistura do ingredieri te activo, numa forma finamente dividida ou em pó, sozinho ou em solução ou suspensão num fluido aquoso ou não aquoso, com o auxílio de maquinaria adequada, com uma base gordurosa ou não gorduro sa. A base pode compreender hidrocarbonetos, tais como parafina dura, mole ou liquida, glicerol, cera de abelha, um sabão metálico; uma mucilagem; um óleo de origem natural tal como óleo de amêndoa, milho, amendoim, castor ou azeite; lanolina ou os seus derivados, ou um ácido gordo tal como ácido esteárico ou ácido oleico conjuntamente com um álcool tal como propileno-glicol ou macrogois. A formulação pode incorporar qualquer agente tensio-activo adequado, tal como um surfactante aniónico, catiónico ou não iónico tais como ésteres de sorbitano ou seus derivados de polioxietileno. Podem também incluir-se agentes de suspensão tais como gomas naturais, derivados de celulose ou materiais ino.r gânicos, tais como silicas silicosas e outros ingredientes, tais como lanolina.

Os compostos com a Fórmula (i) podem também ser administra, dos por inalação. Por inalação entende-se a administração intranasal e a administração oral, por inalação. As formas de dosa, gem apropriadas para este modo de administração, tais como uma formulação de aerossol ou um inalador de dose controlada, podem ser preparadas por técnicas convencionais. A quantidade de dosagem diária preferida, de um composto com a fórmula (I), administra, da por inalação, é de cerca de 10 mg a cerca de 100 mg por dia.

presente invento refere-se também a um método de tratameri to de um estado de doença mediado pelo percurso da 5-lipoxigenase, num animal que o necessite, incluindo os humanos e outros mamíferos, que compreende a administração a um tal animal, de uma quantidade eficaz, inibidora do percurso da 5-lipoxigenase, de um co_m

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SKB CASE 14285-CIP 2 £ ,/í^^

-36posto com a Fórmula (I). Pelo termo tratamento entende-se a te rapia, quer profilática, quer terapêutica. 0 termo mediado significa provocado por, ou exacerbado por. Este composto com a Fórmula (i) pode ser administrado a um tal animal numa forma de dosagem convencional, preparada combinando o composto com a Fórmu la (I) com um transportador ou diluente farmaceuticamente aceitável, convencional, de acordo com técnicas conhecidas. Como será reconhecido por um perito na arte, a forma e o carácter do transportador ou diluente farmaceuticamente aceitável são ditados pela quantidade de ingrediente activo com o qual se vai combinar, pela via de administração e por outras variáveis bem conhecidas. D composto com a Fórmula (I) é administrado a um animal que necessi. te de inibição do percurso da 5-lipoxigenase numa quantidade sufi ciente para inibir o percurso da 5-lipoxigenase. A via de administração pode ser oral, parentérica, por inalação ou local. 0 termo parentêrico, tal como ê aqui utilizado inclui a administração intravenosa, intramuscular, subcutânea, intra-iectal, intravaginal ou intraperitcneal. Preferem-se geralmente as formas subcu tânea e intramuscular de administração parentérica. 0 regime diário de dosagem parentérica será preferivelmente de cerca de 50 mg a cerca de 1000 mg por dia, 0 regime diário de dosagem oral será preferivelmente de cerca de 150 mg a cerca de 2000 mg por dia. Co mo será reconhecido por um perito na arte, a quantidade e o espaçamento óptimos das dosagens individuais de um composto com a Fór. mula (i), serão determinadas pela natureza e extensão da condição a ser tratada, pela forma, via e local de administração, e pelo animal particular a ser tratado e estes óptimos podem ser determi nados por técnicas convencionais. Como também será notado por um perito na arte, o decurso óptimo do tratamento, i.e., o número de doses do composto com a Fórmula (I) a administrar por dia durante um número definido de dias, pode ser determinado pelos peritos na arte usando testes convencionais de determinação do decurso do tratamento.

Nos testes usados para determinar a actividade dos compostos do presente invento como inibidores do percurso da 5-lipoxiqe nase, usaram-se ratinhos Balb/c machos (20-28 g). Todos os ratinhos foram obtidos no Charles River Breeding Laboratories, Kings68 079

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ton, N.Y. Numa única experiência os ratinhos foram agrupados por idades.

Os reagentes foram utilizados como se segue;

Cada um dos compostos com a Fórmula (l) foram usados na forma da base livre. Os compostos foram homogeneizados em tragacanto a 0,5$. Os compostos foram administrados por lavagem, na dose indicada, num volume final de 10 ml/kg.

Para os ensaios in vitro dissolveram-se os compostos em etanol, nas concentrações apropriadas (concentração final 1,0$), e diluiram-se depois nas concentrações finais usando os tampões indicados no texto.

Inflamação do ouvido do ratinho induzida pelo ãcido araquidónico

Aplicou-se o ácido araquidónico em acetona (2 mg/20^w.l) à superfície interior do ouvido esquerdo. Uma hora após o tratameri to, mediu-se então a espessura de ambos os ouvidos com um micrame. tro indicador e exprimiram-se os resultados como a variação de es. psssura (l0“^ cm) entre os ouvidos tratados e não tratados.

Os compostos teste foram administrados oralmente em ácido/ /solução salina, as vezes indicadas no texto, antes da aplicação do ácido araquidónico.

Teste de actividades de 5-lipoxiqenase

Testaram-se as actividades destas enzimas em extractos de células RBL-1 usando o método de Oakschik e Lee, Nature, 287, 51-52 (1980). As células RBL-1 foram obtidas no American Type Cul ture Collection (#CRL 1578) e cultivaram-se a 372C (5$ de CO^ em ar) em cultura sob vortex em MEM suplementado com 10$ de soro de vitelo fetal inactivado por calor. Lavaram-se as células cultiva, das, com tampão de fosfato de sódio 50 mM, pH 7,0, contendo EDTA 1 mM e 0,1$ de gelatina, ressuspenderam-se em tampão fresco (5 x 10 células/ml) e lisaram-se por cavitação de azoto, usando a bomba Parr a 51 atm durante 10 minutos. Centrifugou-se depois o extracto de células lisadas a 10 000 x g durante 20 minutos e centrifugou-se o sobrenadante a 100 000 x g durante 60 minutos. Pré-incubaram-se aliquotas (0,25 ml) do sobrenadante, com ou sem

J

079 ..7

SKB CASE 14285-CIP 2 (C-38drogas, durante 10 minutos, adicionaram-se depois lO^ixl de CaC]^ (2 mM) e iniciou-se a reacção com 2,5de ácido araquidónico-1-^⁴C 2,5 mM (concentração final 25yuMj actividade específica 20 000 dpm/nmole). Após incubação durante 5 minutos a 372C, terminou-se a reacção por adição de 2 volumes (0,5 ml) de acetona aj? refecida em gelo e deixou-se a amostra desproteinizar-se, em gelo durante 10 minutos, antes da centrifugação a 1000 χ g durante 10 minutos. Ajustou-se o sobrenadante desproteinizado a pH 3,5 com ácido fórmico 2 N e extractou-se com 2 volumes de acetato de etilo arrefecido em gelo. Secaram-se as amostras extractadas sob argon, redissolveram-se em acetato de etilo e aplicaram-se a placas de cromatografia de camada fina (TLC) Whatman LK5D que foram desenvolvidas usando o sistema de solventes A-9 /~fase orgânica de acetato de etilo:2,2,5-trimetilpentanoíácido acéticoságua (110:50:20:1O)_J7 descrito por Hamberg e Samuelsson, 3. Biol, Chem., 241, 257-263 (1966). Quantificaram-se o ácido araquidónico, o 5-HETE, o LTB^ e o PGD2 com um auto-analisador Berthold LB 2832.

Sob estas condiçães apenas foram detectados os metabolitos do percurso da 5-lipoxigenase. 0 5-HETE e os di-HETEs formaram-se a uma velocidade linear e utilizaram-se quantidades substan14 ciais ds substrato ácido araquidónico-1- C.

0s efeitos induzidos pela droga nas actividades da enzima são representados pela concentração de droga que provoca uma inibição de 50% sintese de metabolite (ΐΟ^θ).

Produção de LTC-4 por monócitos Humanos

Os monócitos humanos foram preparados a partir de sangue completo fornecido pela Cruz Vermelha Americana. Fraccionou-se o sangue por um procedimento em dois passos, utilizando sedimentação em Ficoll seguida de sedimentação em Percoll. A fracção de células mononucleares recuperada era constituída por 80-90% de mo nócitos enquanto que as células restantes eram predominantemente linfócitos. Colocaram-se os monócitos em placas com 1 x 10^ células por cavidade numa placa de cultura de tecidos de 24 cavidades Costar e deixou-se os monócitos aderirem durante 1 hora a 3720. Removeram-se as células não aderentes, por lavagem, e quando se testaram as drogas estimularam-se as células com ionóforo de cálcio

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A23183 1 durante 3 horas a 37SC, para induzir a produção de LTC-4. Adicionaram-se as drogas às células 30 minutos antes do A23187. Recolheram-se os sobrenadantes, clarificaram-se por centrifugação e armazenaram-se, congelados a -209C, até ao ensaio. Determinou-se o teor em LTC-4 usando um conjunto de análise RIA Neui England Nuclear Leukotriene C-4 ( H) de acordo com as instruções.

Inibição da Produção de Icosanéide após o Estimulo com lonóforo de Cálcio (óQ/M-M) em sangue humano completo

Os icosanóides que incluem os produtos da 5-lipoxigenase, LTB^, transLTB^, 20-hidroxiLTB^, 5-HETE e o produto da 12-lipoxigenase, foram extractados do sangue completo após o estimulo com ionófcro de cálcio A23187. Separaram-se os extractos por cromato grafia liquida de alta pressão de fase inversa e quantificaram-se por métodos de absorvância.

Colheu-se sangue humano venoso para tubos de polipropileno contendo heparina a 1%. Dividiu-se depois o sangue em volumes de

4.5 ml e pré-incubou-se a 372C durante 10 minutos, em tubos de pç lipropileno (de 15 ml). Adicionou-se composto ou transportador (50yAl de dimetilsulfóxido), 5 minutos antes do estimulo. Adiciç nou-se ionáforo de cálcio (0,5 ml) e incubou-se o sangue durante 10 minutos. Adicionou-se prostaglandina B₂ (l nmole) e extractoç -se o sangue como a seguir se descreve.

Centrifugaram-se as amostras a 1000 χ g durante 15 minutos a 55C. Recolheu-se o plasma, e adicionou-se um volume de metanol ao plasma. Centrifugou-se depois esta suspensão a 1000 χ g duraç te dez minutos a 52C. Recolheu-se o sobrenadante e diluiu-se com

1.5 volumes de solução aquosa arrefecida de 1% de ãcido fórmico: ;l/3 de trietilamina. Carregou-se esta mistura num cartucho pré-coç dicionado 0. T. Baker C18 SPE (Phillipsburg, NO) com um caudal de 1-2 ml/minuto. (0 cartucho foi pré-condicionado de acordo com as recomendações do fabricante). Lavou-se a amostra absorvida com 3 ml de cada uma das soluções pela seguinte ordem: (i) ácido fórmi co aquoso a 1%: trietilamina a 1%; (ii) éter de petróleo; e (iii) acetonitrilo a 20%; trietilamina a 1%.

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-40Eluiram-se os icosanóides em 3 ml de acetonitrilo a 70$: ‘.trietilamina a 1$. Removeu-se o solvente sob vácuo. Ressuspendeu-se a amostra em 200^ul de metanol a 50$ tamponado com acetato de amónio.

Carregou-se a amostra (l75yu.l) numa -coluna WATERS (Milbord, MA) RCM NOVA PAK C18 (100 x 8 mm) com a fase móvel inicial consti tuída por 90$ de A (A = acetonitrilo a 10$ tamponado com acetato de amónio 30 mM, a pH 6,8) e por 10$ de B (B = acetonitrolo a 90$ tamponado com acetato de amónio 30 mM a pH 6,8). 0 caudal para a separação foi de 2,5 ml/minuto. Ao minuto aumentou-se a 1$ de B até 27$ num único passo. Aos 12 minutos a $ B tinha aumentado de acordo com uma função hiperbólica côncava (curva 9) atê 40$ e aumentou depois linearmente até 60$ em 22 minutos. Sob estas condi, ções de desenvolvimento os tempos de retenção para os icosanóides foram os seguintes: 20-hidroxiLTB^, 4,6 minutos; transLTB^, 10 minutos; LTB^, 10,5 minutos; 12-HETE, 10,4 minutos; 5-HETE, 21 minutos. 0 sistema de HPLC era constituído por bombas WATERS 510, controlador 840, injector WISP e detector 990.

0s icosanóides nas amostras foram confirmados pelos seus tempos de retenção e pelos seus espectros de absorvância de U.V.. Os picos foram quantificados em relação ao padrão interno e a sua resposta de absorvância, em relação ao comprimento de onda do seu máximo de absorvância.

efeito dos. Compostos com a Fórmula (i) na Inflamação induzida pelo ácido araquidónico

A elucidação da actividade anti-inflamatória dos compostos com a Fórmula (i) foi. conseguida num modelo de edema, induzido pe, lo ácido araquidónico, em ratinhos. A resposta edematosa do ouv.i do do ratinho ao ácido araquidónico tem mostrado ser sensível a agentes que inibem os mediadores gerados pela lipoxigenase e pela ciclooxigenase ou que inibem selectivamente a actividade enzimática da lipoxigenase, mas não da ciclo-oxigenase, Av er Young et al., 3. Invest. Dermatol., 82, 367-371 (l984)_/. 0s compostos com a Fórmula (i) produziram uma inibição marcada da resposta edematg sa normalmente observada, 1 hora após a aplicação de 2 mg de ácido araquidónico ao ouvido (Tabela l). Os inibidores de óiclooxigena

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-41se, indometacina (10 mg/kg, p.o.), ibuprofeno (250 mg/kg, p.o.) e naproxeno (100 mg/kg, p.o.) não exibem neste ensaio qualquer a£ tividade anti-inflamatória detectável.

Estes resultados indicam que os compostos com a Fórmula (i) são potentes inibidores de ambas as respostas celular eedematosa da inflamação em ratinhos. Estas respostas inflamatórias fo ram também inibidas por agentes que inibem a actividade da lipoxi. genase, mas não por inibidores selectivos da ciclooxigenase.

z efeito dos Compostos com a Fórmula (l) no Metabolismo do Acido

Araquidónico

Experiências usando uma preparação de extracto solúvel de células RBL-1, contendo apenas actividade de lipoxigenase, confi£ maram os efeitos inibidores dos compostos com a Fórmula (I) na produção de LTB^ (Tabela II). A indometacina foi inactiva em con centraçães até 10 ⁴M. Os dados apresentados na Tabela II indicam que os compostos com a Fórmula (I) são inibidores do percurso da 5-lipoxigenase, tal como é confirmado pela sua capacidade em inibir o LTB^, um produto do percurso da 5-lipoxigenase. ' Os dados apresentados na Tabela III indicam que os compostos com a Fórmula (i) são inibidores do percurso da 5-lipoxigenase, tal como é confirmado pela sua capacidade em inibirem o 5-HETE, um produto do percurso da 5-lipoxigenase.

Teste de Inibição do LTC^

Tal como se mostra na Tabela IU, os compostos com a Fórmula (i) foram eficazes na inibição da produção de LTC^, um produto do percurso da 5-lipoxigenase, por monócitos humanos. Estes dados confirmam a capacidade dos compostos com a Fórmula (i) em ini birem o percurso da 5-lipoxigenase.

Inibição da Produção de icosanóide

Tal como se mostra na Tabela V, os compostos com a Fórmula (I) foram eficazes na inibição da produção de vários produtos do percurso da 5-lipoxigenase no sangue humano. Estes resultados de. monstram que os compostos com a Fórmula (l) inibem o percurso de 5-lipoxigenase.

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TABELA III (continuação)

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SKB CASE 14285-CIP 2

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TABELA IU efeito de compostos de Fórmula (i) na actividade da 5-lipoxigenase (produção de LTC x K 0

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SKB CASE 14285-CIP 2

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TABELA IV (continuação

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•P	ra		o	-P	ra	ra		c	-P
+5	g		-P	rp	rp	X		•P	ra
ra	•P	rp	ra rp	P	•P	P	rp	ε	ra
o	P	•P	Ο ·Ρ	-P	-P	a	•P	P	-P
a	P	c	a c	ra	ra	o	c	m
1	1	ra	ι ra	1	1	\|	ra	-P	o
•3·	<r	Cp	•3· ti-	•V		<í	Cp	ra	ao
								n	c
								α	II
								ro
>—1	CM		ro	o·	ro	VO		CJ	1—
rp	rp		rp	rp	rp	rp		IP	s
								a	.o

079

SKB CASE 14285-CIP 2

J

-49Jl

X| <í

	o ι o CN	cc 1— _j 1
		Ld 1—
	-O	bJ X I CN rP bJ t—
	·*	bJ
	G3	X
		\|
	5	tn
0)	a	o- m
T3	tn	H
Ή	t_3
o	l-l
c ta	λ
to	o	03
o		h—
o	1	_J
•P	tn	P

Q

ΙΛ

O

N3

O

ΓΛ

O

ΙΛ

O

ΓΛ

O

CO

O

CO

O

CO

-o

0\ c| ο α

TABELA

O QC OC

Ή □

ε

Ρ

Ό

σ\

Χ| I

CCJ I I ο

C| I X

Ν3

CK| X X ιη £Κ| X X £Τ| X X ω

το ω

ο

Ρ to □

α.

ε ο

ο ω

Ό ο

+>

•Ρ ^η I ce, χ χ

CN

QC| X X ι-J —I •Ρ ·Ρ

ΤΟ Ό r-ί Ή Ή

0C| Ρ Ρ

Ή ·Ρ

D. Q.

I I <

em sangue humano estimulado com ionóforo de cálcio.

0)	o	O
C\|_	Ol	rp\|i—1	T0	TO
(D	*p4	3 ·Ρ	KJ	KJ
	+3	to C	c
O	cc\| η	r-j 03	•P	co
	•f-J	•P Cu	E	03
	-P l-l	-P r-i	P	+5
	ra -p	G3 -P	0)
	E c	ε c	4J	O
	ι o	1 -P	0)	«a
	0-	<í Cu	T3	c

Ο ιι (Λ

Ο Η

col ι
C3 '3
Q. C	O
E	P
O □	03
t_3 -P	ε

CN £9

-Ο

079

SKB CASE 14285-CIP 2

J

Inibição da 5-LO relativa ao composto C

Actividade CMS adversa		AAEE
Inibição	(ratinho)
(Log D) (li.	de p-450	^ED50
pofilicidade)	^50^/^	mg/kg(po)

+++	0,6	27
(2,19)

(1,20)	5,0	20
++ + (2,14)	21,4	28
(2,68)	43,7	20
	866	44

(0,85) x 0 sinal mais indica a presença e o sinal menos a ausência

079 &

-51SKB CASE 14285-CIP 2

TABELA UII

Toxicidade CMS em ratinhos

— R° n^_R9 ^RR^f

			1		Dose	uma	24
⁹ l\iõ.	jn	X	R¹	R	mq/kq po	hora	horas
j^XX	0	so	4-piridil	4-metoxifenil	200
2	0	s	4-piridil	4-fluorofenil	250	-	-
3	0	c	4-piridil	4-fluorofenil	200	+	+
4	0	c	4-piridil	4-metoxifenil	200	+	+
5	1	c	4-piridil	4-metoxifenil	200	-Ϊ-	+
6	0	c	4-piridil	4-(l-etoxi)fe	200	+
				nil
7	0	c	4-piridil	4-metiltiofenil	200	+	-
8	0	c	4-piridil	4-metilsulfinil	250
				fenil
9	0	c	4-piridil	4-metilsulfonil	>500	**
r				fenil
0	c	4-piridil	4-etiltiofenil	200	-	—
11	0	c	4-piridil	4-etilsulfinil	250
				fenil
12	0	c	4-piridil	4-acetoximetil	250	kw
				tiofenil
13	0	c	H	4-piridil	200	-	-
14	0	c	4-metiltio	4-piridil	200	+	+
			fenil
15	0	c	4-metilsulfi	4-piridil	200		«B
			nilfenil
16	0	c	4-(2-metil)-	4-metiltiofenil	200
			piridil
17	0	c	4-(2-metil)~	4-metilsulfinil	200
			piridil	fenil
18	0	c	4-(2-metil)-	4-metoxifenil	200	•m	+

xx sinal menos

Este composto vulsões piridil indica ausência e o sinal mais a presença de convulsões metaboliza—se no sulfureto correspondente que provoca ci

079

SKB CASE

-5214285-CIP 2

TABELA VIII

NS,	X	R¹	R	^IC50 X
1	S	4-piridil	4-metoxifenil	12,5
2	SO	4-piridil	4-metoxifenil	>100*
3	^S°2	4-piridil	4-metoxifenil	26,2
4	S	4-piridil	4-fluorofenil	0,9
5	S0₂	4-piridil	4-fluorofenil	21,4
6	c	4-fluorofenil	4-piridil	0,5
7	c	4-piridil	4-(l-etoxi)fenil	8,4
8	c	4-piridil	4-(l-propoxi)fenil	62,7
9	c	4-piridil	4-(2-propoxi)fenil	2,5
10	c	4-N-metilpiridil	4-metoxifenil	108
11	c	4-piridil	4-metiltiofenil	43,7
12	c	4-piridil	4-metilsulfinilfenil	866
13	c	4-piridil	4-metilsulfonilfenil	>100
14	c	4-piridil	4-etiltiofenil	28,1
15	c	4-piridil	4-etilsulfinilfenil	>100
16	c	2-piridil	4-metoxifenil	>100
17	c	3-piridil	4-metoxifenil	>100
1B	c	H	4-piridil	80,1
19	c	4-metiltiofenil	4-piridil	5,2
20	c	4-metilsulfinilfenil	4-piridil	13,7
21	c	4-(2-metil)piridil	4-metiltiofenil	57,5
22	c	4-(2-metil)piridil	4-metilsulfinilfenil	>1000
23	c	4-(2-metil)piridil	4-metoxifenil	56,6

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Verificou-se agora que os compostos do presente invento têm propriedades superiores em relação aos compostos anteriormente cç) nhecidos, tal como se resume nos resultados da Tabela VI. 0 Com posto A, o 5-(4-piridil)-6-(4-fluorofenil)-2,3-di-hidro-imidazo/~2 ,l-b_/tiazolo, e o composto Β, o óxido de 5-(4-piridil)-6-(4-fluorofenil)-2,3-di-hidro-imidazo/~2,l-b_7tiazolo, são representativos dos compostas que se descrevem na Patente dos E.U. n^a.

175 127 publicada em 20 de Novembro de 1979. 0 Composto C, o

2-(4-metoxifenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/ 5H_7-pirrolo/~1,2-a_7imidazolo ê especificamente descrito no Pedido de Patente Europeia n^a» 231 622 publicado em 12 de Agosto de 1987. 0 composto

D, o 2-(4-metiltiofenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidrc-/~5H_7-pirrolo/~l,2-a_7imidazolo e o composto Ε, o 2-(4-metilsulfinilfenil)-3-(4-piridil)-6 ,T-di-bidro-^C^H^-pirrolo/” 1 ,2-a__7imidazolo são representativos do presente invento.

As modificações estruturais que se descrevem neste pedido de patente tem reduzido a gravidade, quando comparada com a de compostos de artes anteriores, de dois efeitos colaterais indesejáveis: l) a toxicidade CNS; e 2) inibição das actividades enzimáticas dependentes do citocromo P-450 que ê uma deficiência que poderia resultar em interacções da droga, clinicamente relevantes. Piais especificamente, a eliminação do enxofre no núcleo de anel bicíclico, fundido, dos compostos e a substituição do flúor com um grupo metoxilo reduziu a inibição das enzimas dependentes do citocromo P-450, mas não eliminou a presença de actividade adversa no sistema nervoso central (CNS). Isto pode-se obsejr var por comparação entre de os resultados da Tabela VI para o com posto C e para os compostos A e B. Acreditou-se que os efeitos CNS estavam relacionados com a capacidade de um composto para penetrar no CNS, e assim, com a lipofilicidade. Os compostos A e C são ambos altamente lipofílicos e demonstram efeitos CNS simila res. 0 log D que se mostra na Tabela VI é uma medida da lipofili cidade, determinada por cromatografia líquida de alta pressão. Ve, rificou-se contudo que a introdução de polaridade no anel de feni. lo, no anel de piridilo ou no anel fundido bicíclico, reduziu a actividade de inibição da 5-lipoxigenase. Uma comparação entre os compostos D e E na Tabela VI demonstra este efeito, para intro.

079

SKB CASE 14285-CIP 2

dução de polaridade no anel de fenilo e a comparação entre os com postos A e B demonstra este efeito para o anel bicíclico fundido.

Uma comparação entre os compostos A e B demonstra uma redtJ ção na actividade CMS indesejável. Quando se comparam os compostos D e E do presente invento observa-se um efeito similar. Por incorporação de polaridade em A obteve-se o composto B e uma toxi, cidade CMS reduzida. Por incorporação de polaridade no composto D obteve-se o composto E, e uma toxicidade CNS reduzida. Adicionalmente o composto E ê metabolizado in vivo no composto D. Deste modo, a conversão in vivo de uma pró-droga, polar mas inactiva (E), no seu metabolito (D), reduz a toxicidade CNS. Adicionalmejn te o composto D tem menos toxicidade CNS do que o composto A de artes anteriores. Assim os compostos D e E do presente invento têm uma inibição reduzida das enzimas dependentes do citocromo P-450 e uma actividade CNS adversa reduzida. Esta conclusão á adi. cionalmente suportada pelos resultados seguintes.

Determinação do LOG D procedimento usado para determinar os valores do log D indicados na Tabela VI foi o seguinte: injectou-se uma amostra de 20^ul numa coluna Shandon Hypersil ODS, (100 mm x 4,6 mm de Dl) e eluiu-se usando uma fase móvel de 65:35 de ΜθΟΗίΗ^Ο (A parte aquosa era 0,01 M em KHjPO^ e ajustou-se o pH a 7,4 com KOH após mistura do MeOH), com um caudal de 2 ml por minuto. 0s picos de eluição foram detectados por absorvência de UV para 0,01 mg/ml. Todas as amostras foram perfeitas atê 0,1 mg/ml. (As retenções foram idênticas a 0,01 mg/ml).

Os resultados foram analisados por determinação da regressão linear correspondente ao log k' vs. log P da literatura dos padrões de referência (ver Unger, S.H. et al., 0. Pharm. Sei., 67 1364 (1978). 0 log P (log D) foi depois determinado, para a amos, tra teste, a partir do seu log k’ nesta linha. A reprodutibilida de foi usualmente superior a 0,5/.

0s padrões de referência e os seus valores de log P da literatura incluíram NaN0₂, 0,0; acetanileto, 1,16; acetofenona, 1,66; anisolo, 2,08; clorobenzeno, 2,84; benzofenona, 3,18; aj} traceno, 4,45; e pentaclorobenzeno, 5,12.

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-55c>’

3'

Actividade CUS

Os efeitos no sistema nervoso central (CKS) dos compostos reivindicados e de artes anteriores foram demonstrados em macacos cinomolgus.

A administração oral de 90 mg/kg/dia do composto A da Tabe la VI, o 5-(4-piridil)-6-(4-fluorofenil)-2,3-di-hidro-imidazo/~2,1-b_7tiazolo a dois macacos cinomolgus (l fêmea, 1 macho), durante dois dias, consecutivos, induziu tremores no corpo em ambos os ma cacos e convulsões, graves e recorrentes, no animal macho. A admi nistração de 30 mg/kg/dia do composto A da Tabela VI a dois macacos cinomolgus (l fêmea, 1 macho) durante 5 ou 6 dias consecuticos esteve associada a emese e a ulceração gástrica em ambos os macacos, mas sem qualquer evidência de convulsões ou tremores do corpo. Após se ter administrado uma segunda dose de 90 mg/kg do ccmposto A os macacos morreram com convulsões nas 1 a 5 horas após a administraçao da dose.

Uma única’dose oral de 90 mg/kg do composto C da Tabela VI, c 2-(4-metoxifenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro- Ζ~5Η^-ρί rrolo/” 1,2-a_7imidazolo, a 1 macaco fêmea e a 1 macaco macho, resultou na morte de ambos os animais. 0 macho ficou sedado , perdeu a consciência e morreu 1,5 horas após a administração da dose; a fêmea mostrou uma menor actividade motora e convulsões antes da morte que ocorreu 3,5 horas após a administração da dose. Uma única dose oral de 60 mg/kg a dois outros macacos resultou na anestesia, perda de consciência e morte de um (macho) 1 hora após administração da dose. Outros macacos toleraram doses repetidas de 45 mg/kg ou de 30 mg/kg e um animal tolerou um esquema de doses crescentes de 30-90-120 mg/kg.

composto E, o 2-(4-metilsulfinilfenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/~5H_7-pirrolo/~l,2-a_7imidazolo foi administrado a dois macacos (l fêmea, 1 macho) numa dose de 90 mg/kg e não se observa, ram quaisquer efeitos clínicos. Administraram-se oralmente 200,

400 ou 800 mg/kg de composto E, a outros macacos, para determinar a dose limitante e os efeitos tóxicos. Ambos os macacos que rece. beram 800 mg/kg morreram, a fêmea 2 horas após a administração da dose e c macho entre 12-24 horas após a administração da dose.

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5677Γ'

C.- tiNão se observaram convulsões nestes animais.

Aos dois macacos, aos quais se administraram 400 mg/kg, administrou-se repetidamente esta dose durante 7 dias consecutivos; cada animal experimentou ernese 1 a 5 horas após a 1§, 3§ e 4- dose, enquanto que apenas a fêmea experimentou ernese após as 5?, 63 e 73 doses. Uma necropsia completa, análise química clínica do soro e exames hematológico e histológico, foi realizada gm ambos os macacos. Não se observou evidência de modificações relacionadas com a droga. A ernese foi o único efeito observado nos macacos aos quais se administraram 400 mg/kg/dia do composto E durante 7 dias consecutivos.

Resumindo, os compostos A e C provocaram, cada um, convulsões s morte, respectivamente, após a administração de duas ou de uma dose de 90 mg/kg, enquanto que o composto E, administrado na mesma dosagem, não provocou quaisquer efeitos clínicos observáveis. 0 composto E administrado durante 7 dias numa dose de 400 mg/kg/dia provocou apenas ernese. 0 composto E não tem assim os efeitos CMS adversos demonstrados pelos compostos A e C de artes anteriores.

Qs efeitos no sistema nervosa central, dos compostos do presente invento e de artes anteriores, foram também demonstrados em ratinhos, tal como se mostra pelos resultados da Tabela VII. Para os compostas 1 a 5, representativos de compostos previamente conhecidos, ocorreram convulsões nos ratinhos, uma e 24 horas após a administração de três dos cinco compostos. Para os compostos 6 a 12 representando o presente invento, apenas para dois dos sete compostos ocorreram convulsões após a administração. Estes resul. tados indicam uma melhoria geral na redução da actividade CUS para os compostos do presente invento.

Inibição do citócromo P-450 efeito inibidor de vários compostos na actividade da oxi. dase de função mista, dependente do citócromo hepático P-450, foi avaliado, in vitro, em microssomas de ratazana, usando o substrato prototípico, a etoxicumarina, como se segue.

Animais: a ratazanas Sprague-Datuley macho, com 9-10 semanas de

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7/ :

tftf

-57tf tf tf tf

idade e pesando 300-340 g administrou-se, diariamente durante três dias, Na-fenobarbital, i.p. (l ml/kg em H₂0 ultrapura), numa dose de 80 mg/kg/dia. Mataram-se os animais por deslocamento cer vical, 24 horas após a última dose, e prepararam-se microssomas hepáticos em fase líquida, por centrifugação diferencial. Os microssomas foram armazenados a -80SC.

Estudos enzimáticos in vitro: determinaram-se os efeitos inibido, res possíveis de vários compostos indicados na Tabela VIII, na aç. tividade da oxidase de função mista, dependente do citócromo hep.á tico P-450, usando a actividade da etoxicumarina-O-desetilase (ECOD). A desetilação do substrato, a 7-etóxicumarina, é detecta da por medição da fluorescência da 7-hidroxicumarina de acordo com o método de Lee N.H. et al., Toxicologist, 5., 164 (1985). Pre, pararam-se incubações microssomais de 15yul, de microssomas induzidos por Na-fenobarbital (aprox. 0,3 mg de proteína microssomal por ml) e de 875^u-1 de mistura reaccional de 7-etoxicumarina 0,45 mM, glucose-6-fosfato 5 mM, 0,5 unidades/ml de desidrogenase de glucose-6-fosfato e MgCl₂ 5 mM em ácido Ν-2-hidroxifenilpiperazina-N'-2-etanossulfónico 0,1 M, pH 7,8. Adicionaram-se, directamente às incubações, concentrações variáveis dos compostos teste, dissolvidos numa pequena quantidade de dimetilsulf óxido (lOyid.). Incubaram-se os controlos de solvente na presença de dimetilsulfó xido. Após uma pré-incubação de dois minutos a 37SC, iniciou-se a reacção de desetilação por adição de 100 tf de fosfato de dinucleótido de B-nicotinamida-adenina 0,74 mM/dinucleótido de B-ni. cotinamida-adenina 0,74 mM. Após incubação durante 10 minutos a 37SC, parou-se a reacção pela adição de 2,5 ml de MeOH básico, pH 9,0. Agitaram-se as amostras com 2500 rotações por minuto durante 15 minutos. Transferiram-se dois ml do sobrenadante para célu. las de fluorescência descartáveis e mediu-se a fluorescência de cada amostra no comprimento de onda de excitação de 390 nm e no comprimento de onda de emissão de 454 nm. Usou-se o procedimento PROBIT para calcular os valores de IC^g de acordo com SAS Institu. te Inc., SAS User's guide: Statistics, 1982 Edition, Cary NC:

SAS Institute Inc. 1982, 287 pp.

Os resultados estão resumidos na Tabela VIII e demonstram que os compostos do presente invento têm uma menor inibição da ejç

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/'tf-58zima P-450 quando comparada com a de compostos previamente conhecidos. Os compostos 1 a 6 representam compostos previamente conhecidos. 0 valor de IC^g, que ê a concentração para a qual a ac, tividade da enzima é inibida em 50/, foi inferior a 30/*M para ca. da um destes compostos excepto para o composto 2* Os compostos 7 a 17 representam os compostos do presente invento. A maioria des, tes compostos tem um valor de IC^g superior a 30^/λΜ. Será de esperar que os compostos do presente invento, devido à reduzida ini bição das enzimas dependentes do citócromo P-450, tenham, em rela ção aos compostos de artes anteriores, interseções de droga clini camente relevantes, significativamente inferiores.

Os exemplos seguintes são meramente ilustrativos e em nenhum caso devem ser entendidos como limitativos do campo da inveji ção.

A temperatura está em graus centígrados (sC).

EXEMPLO 1

2-(4-Fluo ref enil)-6,7-di-hidro-/” 5H_J7-pirrolo/~ 1 ,2-a_7 imidazol o (Composto com a Fórmula (E))

Método A

Tratou-se uma solução agitada de 15 g (87 mmoles) de 2-clo ro-4-fluoroacetofenona, em 75 ml da álcool SD 30, a 259C, com 10,65 g (104 mmole) de 2-iminopirrolidina, resultando um aumento exotérmico de temperatura para 409C. Após agitação durante uma hora (h), adicionaram-se aproximadamente 75 ml de acetato de etilo, e extractou-se a mistura com HCl diluído para dissolver o pre cipitado. Separou-se o extracto ácido aquoso da fase orgânica, ajustou-se a um pH entre 4 e 5, eaqueceu-se num banho de vapor djj rante 24 h. Ajustou-se a solução a pH 2, extractou-se com éter, alcalinizou-se até pH 8, s extractou-se com diclorometano. Cromai tografou-se a fase orgânica básica em silica, por eluição com 4/ de metanol em diclorometano. Recristalizou-se o resíduo, obtido por concentração das fracções recolhidas, a partir de CCl^, ponto de fusão (pf) 137,5-13990.

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Método B (a) Hidrocloreto de l-(4-fluorofenil)-2-(2-iminàPÍrrolidino-l-il)etanona (Composto com a Fórmula (H))

Tratou-se uma solução agitada de 37,3 g (216 mmole) de 2-cloro-1-(4-fluorofenil)etanona (preparada como se descreve em Ooshi et al., 3. Heterocyclic Chem. 16, 1141 (1979)) em 70 ml de clorofórmio, arrefecida num banho de metanol-gelo a 15-182C, com uma solução de 20 g (238 mmole) de 2-iminopirrolidina em 50 ml de clorofórmio, a uma velocidade de modo a manter a temperatura da mistura reaccional. Após 2 horas adicionais, triturou-se a mistu, ra com 300 ml ds EtgO, filtrou-se, e lavaram-se os cristais com éter, e recristalizaram-se a partir de álcool, obtendo-se agulhas brancas do referido composto com a Fórmula (H), ponto de fusão, 207-2082C.

Análise Calculada para C^₂H^^ClEN₂0: C, 56,15; H, 5,50; N, 10,91. Encontrada: C, 56,14; H, 5,50; N, 10,90.

(b) 2-(4-fluorofenil)-6,7-di-hidro-/^-5Η_7-ρΐΓΓο1ο/~1,2-a_/ imidazolo (Composto com a Fórmula (E))

Aqueceu-se uma solução aquosa de 31 g (0,12 mole) do referi, do composto com a Fórmula (H) do Método B, parte (a) anterior, em 300 ml de água, num banho de vapor durante 8 horas. Ajustou-se a solução a pH 6,5, e filtrou-se o precipitado resultante, secou-se sob vácuo e recristalizou-se a partir de CCl^, obtendo-se o referido composto com a Fórmula (E), ponto de fusão 137,5-1399C.

Análise calculada para C-^H^Ff^: ?1’27; H, 5,48; l\!, 13,85.

Encontrada: C, 71,00; H, 5,61; N, 13,73.

EXEMPLO 2

2-(4-Fluorofenil)-3-(4-pirldil)-6,7-di-hidro-/~5H_7-pirrolo/~1,2imidazolo

Tratou-se uma solução agitada de 13,1 g (0,065 mole) de 2-(4-fluorofenil)-6,7-di-hidro-/~ 5H_7-pirrolo/~1,2-a_7imidazolo, preparado como se descreve no Exemplo 1, e de 51,4 g (0,065 mole) de piridina anidra em 17 ml de diclorometano anidro, a 22-252C,

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SKB CASE 1485-CIP 2

-60durante 1,5 horas (h), com 35,3 g (0,325 mmole) de cloroformato de etilo. Agitou-se a solução a 25SC, de um dia para o outro, e repetiu-se o tratamento, com piridina e cloroformato de etilo, co mo anteriormente, seguindo-se um período de agitação de 24 h.

Após mais 3 tratamentos, tal como anteriormente se descreveu, removeu-se o solvente in vacuo. Dissolveu-se o resíduo em NaHCO^ aquoso a 5/ e extractou-se para diclorometano. Lavou-se a fase orgânica com NaHCO^ aquoso a 5/ e secou-se com anidro. Removeram-se os solventes voláteis, in vacuo, e extractou-se o resí. duo para diclorometano. Extractou-se repetiaamente a fase orgâni ca, com HC1 0,2 M, atê se removerem os vestígios do material de partida, lavou-se depois com solução de Na₂C0^ a 5/, secou-se com K₂CC^ (anidro) e evaporou-se o solvente in vacuo. Cristalizou-se o resíduo a partir de tolueno-hexano obtendo-se o composto com a Fórmula (F) conhecido como o 3-(l\l-etoxicarbonil-l,4-di-hidro-4-pi. ridil )-2-( 4-fluor of enil)-6,7-di-hidro-/^- 5H_7-pirrolo/ 1,2-a_7imidazolo, 146-147QC.

Método A. Aqueceram-se 0,5 g (l,4 mmole) do produto com a Fórmula (F), descrito nc· Exemplo 2, com agitação em 5 ml de decalina sob argon. Após atingir uma temperatura de 80SC, adicionaram-se 0,06 g (l,8 mmole) de enxofre, e aqueceu-se a mistura a 1659C atê o material de partida ter sido consumido. Filtrou-se a mistura arrefecida e lavou-se o sólido com êter de petróleo e dis. solveu-se em clorofórmio-acetato de etilo (l:l). Descolorou-se esta solução com Darco e cromatografou-se em sílica. Por eluição com 20/ de metanol em clorofórmio-acetato de etilo (l:l) obteve-se uma fracção que foi concentrada in vacuo e recristalizada a partir de tetracloreto de carbono, obtendo-se o produto do título, do Exemplo II, desejado, ponto de fusão 163-164,520.

Método B. A uma solução agitada de 28,6 g (255 mmole) de ter-butoxido de potássio, dissolvido em ter-butanol (250 ml), na qual se fazia borbulhar Qg, adicionaram-se 15,0 g (42,4 mmole) de um composto com a Fórmula (F), i.e., o 3-(f\l-etoxicarbonil-l,4-di-hidro-4-piridil)-2-(4-fluorofenil)-6,7-di-hidro-/^-5H_7~pirrolo2fl,2-a_7i midazolo preparado como anteriormente se descreveu. Aquecsu-se a solução ao refluxo durante 15 minutos e removeu-se depois o solvente in vacuo. Extractou-se o produto sólido com di

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SKB CASE 14285-CIP 2

y yy • 61clorometano, lavcu-se com água e extractou-se depois para HC1 3 l\l aquoso. Alcalinizcu-se esta fase aquosa, ácida, com hidróxido de sódio aquoso a 10$, arrefecido, e extractou-se com diclorometano. Secou-se a fase orgânica resultante com i^CQ^ anidro e removeu-ss o solvente in vacuo. Por duas recristalizações, a partir de tolueno, obteve-se o produto do titulo do Exemplo II, ponto de fu são 165-16690. Análise calculada para C^^H^FN^: C, 73,10; H, 5,05; N, 15,04. Encontrado: C, 73,31; H, 5,11;

'9 í > jlU j

I, 15,08.

EXEMPLO 3

2-(4-Metiltiofenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/~5H_7-pirrolo/~1

2-a_/imidazolo

Tratou-se uma solução agitada de 5,5 g (19,7 mmole) de 2-(ώ-Fluorofenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/”5H_7-pirrolo/”1,2-a_7imidazolo, preparado como se descreve no Exemplo 2, em 75 ml de dimetilformamida anidra (peneiro), com 1,65 g (23,6 mmole) de tiometilato de sódio, sob uma atmosfera de argon. Aqueceu-se a mistura reaccional, de um dia para o outro a 7590, seguindo-se mais 2 horas a 9590, adicionou-se a água fria e extractou-se duas vezes com acetato de etilo. Lavou-se a fase orgânica, três vezes com água, secou-se com carbonato de potássio anidro, e evaporou-se in vacuo. Recristalizou-se o resíduo, duas vezes a partir de acetato de etilo, obtendo-se o composto do título, ponto de fusão 171-17290. Análise calculada para 70,33; H, 5,57

N, 13,67; S, 10,43. Encontrada: C, 69,93; H, 5,40; N, 13,76; S, 10,75.

EXEMPLO 4

2-(4-metilsulfinilfenil)-3-(4-plridil)-6,7-di-hidro-/-5H_/-p i r r o lo/” 1,2-a_/imidazolo

A uma solução agitada de 5,0 g (16,3 mmole) de 2-(4-metiltiofenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/-5H_/-pirrolo/”l ,2-a_7iniida zolo do Exemplo 3, dissolvido em 75 ml de clorofórmio, arrefecida num banho de gelo, adicionou-se gota a gota uma solução de 3,30 g (16,3 mmole) de 85$ de ácido 3-cloroperbenzóico em clorofórmio. Após agitação, a 2590 de um dia para o outro, lavou-se a mistura reaccional com carbonato de sódio a 5$, secou-se com carbonato de

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7/ //

potássio anidro e evaporou-se in vacuo. 0 residuo foi sujeito a cromatografia flash em sílica por eluição com 5 a 10/ de metanol em diclorometano:propanol-2 (9:l). Removeu-se o solvente in vacuo e recristalizou-se o residuo a partir de acetato de etilo obtendo-se o composto do título desejado, ponto de fusão 163,5-165,5°C. (360 MHz, CDClj) £ 8,62 (2H,d), 7,68 (2H,d),

7,57 (2H,d), 7,25 (2H,d), 4,05 (2H,t), 3,02 (2H,t), 2,72 (s) sobreposto com 2,69 (m) (total 5H). Massa específica (Cl) (M+H)

324 (PM = 323).

EXEMPLO 5

2-(4-Metilsulfonilfenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/~5H_7-pirroΙοΖΊ.,2 -a_7imidazolo

Tratou-se uma-solução agitada de 0,64 g (1,98 mmole) de 2-(4-metilsulfinilfenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/^-5H_7-pirrol£ /~l,2-a_7i midazolo, do Exemplo 4, em água, gota a gota durante 45 minutos, com uma solução aquosa de 0,209 g (l,32 mmole) de perma_n ganato de potássio. Após agitação de um dia para o outro, extrac. tou-se a suspensão com diclorometano. Secou-se a fase orgânica com carbonato de potássio anidro e evaporou-se in vacuo. 0 resíduo foi sujeito a cromatografia flash em sílica por eluição com 2 a 4/ de metanol em clorofórmio. Removeu-se o solvente in vacuo e recris talizou-se o resíduo a partir de acetato de etilo obtendo, -se o composto do título desejado, ponto de fusão 222,5-224SC. RMN-¹H (250 MHz, CDCl^) & 8,62 (2H,d), 7,85 (2H,d), 7,72 (2H,d), 7,26 (2H,d), 4,05 (2H,t), 3,05(s) sobreposto com 3,03(t) (total 5H), 2,70 (2H,p).

EXEMPLO 6

2-(4-Metoxifenil)-6,7-di-hidro- L -pirrolo/^-1,2-a_7imidazol-3-il-tri-n-butilestanho

a) 2-(4-Me toxi fenil )-6,7-di-hidro-/^- 5 H_JZ-pirrolo/^-1,2-a_/ imidazolo (Composto com a Fórmula (e))

A uma solução de 6,8 g (29,7 mmoles) de 2-bromo-4’-metoxiacetofenona, em 50 ml de CHCl^, adicionou-se uma solução de 5 g (59,4 mmole) de 2-iminopirrolidina em 30 ml de CHCl^ com arrefeci

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-63mento. Após 4 horas de agitação a 252C removeu-se o solvente in vacuo. Dissolveu-se o resíduo em água, ajustou-se o pH a 2,5 e aqueceu-se a solução num banho de vapor, sob uma atmosfera de á_r gon, durante 8 horas, Ajustou-se a solução arrefecida a pH 6. Filtrou-se o precipitado resultante, lavou-se com água e secou-se in vacuo, obtendo-se o composto do título, ponto de fusão 116-117,590.

b) 2-(4-Metoxifenil)-6,7-di-hidro-/~5H_/-pirrolo/~1,2-a_/ imidazol-3-il-tri-n-butilestanho

A uma solução arrefecida em gelo (09C) de /~16,8 g, 0,078 mole_7 2-(4-metoxifenil)-6,7-di-hidro- Γ5Η^7-ρχ rrolo/” 1,2-a_/imidazolo em 200 ml de tetra-hidrofurano sob árgon, adicionaram-se, gota a gota durante 20 minutos, 35 ml (0,0858 mole) de uma solução de n-butil-lítio 2,5 M em hexano. Após a adição estar completa, agitcu-se a solução encarnado forte, arrefecida, durante cinco minutos e adicionou-se depois uma solução de cloreto de tributilestanho (26,4 mg, 0,0975 mole), em 50 ml de tetra-hidrofurano, durante 20 minutos. Agitou-se a mistura reaccional, a temperaturas do banho de gelo, durante 1,5 horas e adicionou-se depois solução saturada de cloreto de amónio. Agitaram-se as fases e sepa raram-se e lavou-se o extracto orgânico mais uma vez com solução saturada de cloreto de amónio e secou-se depois com carbonato de potássio anidro. Removeu-se o solvente, in vacuo, obtendo-se 50 g de um óleo em bruto que foi retomado duas vezes com hexano frio removendo de cada vez, por filtração, o 2-(4-metoxifenil)-6,7-di-hidro-/~5H_/-pirrolo/”l ,2-a_7imidazolo. Purificou-se o produto numa coluna de sílica, por eluição com acetato de etilo/hexano 1:1, na presença de 1% de dietilamina, obtendo-se 19,2 g (49%) de um óleo amarelo. Análise calculada para ^25^40^¹¹ ^0: C, 59,66, H, 8,01; N, 5,57. Encontrada: C, 59,32; H, 8,01; N, 5,41.

EXEMPLO 7

2-(4-Metoxifenil)-3-(2-piridil)-6,7-di-hidro-/-5H_/-pirrolo/~ 1,2-a_/imidazolo

Desoxigenou-se uma solução de 2-bromopiridina (0,948 g,

0,006 mole) em 2 ml de hexametilfosforamida e 10 ml de tetra-hi68 079

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drofurano, com argon durante 30 minutos, no escuro. A esta solução adicionaram-se 70 mg de tetraquis (trifenilfosfina)paládio; aqueceu-se a mistura reaccional a 5060 durante 15 minutos e depois, cleixou-se atingir de novo a temperatura ambiente. Adicionou-se de. pois, gota a gota, uma solução do intermediário de estanho com a Fórmula (3), preparado como no Exemplo 6, em 10 ml de tetra-hidro furano anidro. Aqueceu-se a mistura reaccional ao refluxo durante 24 horas e trabalhou-se depois adicionando acetato de etilo, agitando duas vezes o extracto orgânico com solução de fluoreto de potássio a 10$, lavando duas vezes com água e secando depois com solução saturada de cloreto de sódio e com sulfato de magnésio anidro. Concentrou-se o extracto orgânico in vacuo obtendo-se um óleo que foi purificado por cromatografia flash em sílica, por eluição com 20-50$ de isopropanol em hexano. Recristalizou-se o sólido resultante a partir de acetato de etilo, ponto de fusão 142,5-14550;

RMN (CDC1₃) S : 8,55 (d, IH), 7,45 (d, 2H),

7,4-6,9 (m, 3H), 6,8 (d, 2H),

4,25 (t, 2H), 3,8(3, 3H)

2,9 (t, 2H), 2,6 (m, 2H)

Massa Espec. (Cl)(M+H) 292 (PM=29l).

EXEMPLO 8

2-(4-Metoxifenil)-3-(3-piridil)-6,7-di-hidro-/~~ 5H_/-pirrolo/~ 1,2-a_7imidazolo

A reacção foi realizada como se descreve no Exemplo 7 para a 2-bromopiridina. Na síntese do composta anteriormente referido usou-se 3-bromopiridina comercial. As quantidades molares foram também as mesmas. 0 produto em bruto foi purificado por cromatografia em- sílica por eluição com 20-30$ de isopropanol em hexano.

produto foi recristalizado a partir de acetato de etilo, ponto de fusão 164-16590.

RMN (CDC1₃) £ : 8,6 (m 2H), 7,65 (m, IH),

7,45 (d, 2H), 7,3 (m, IH) ,

6.8 (d, 2H), 4,0 (t, 2H),

3.8 (s, 3H), 3,0 (t, 2H),

2,65 (m, 2H)

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-65Massa Espec. (Cl)(M ·:- H)⁴ = 292 (PM=29l).

EXEMPLO 9

2-(4-Matoxifenil )-3-(2,6-dimetil-4-piridil) -6,7-di-hidro-/~5H__7-

-pirrolOj/^-! ,2-a_7imidazolo

A 4-bromo-2,6-lutidina, usada na reacção de acoplamento ca talisada por paládio, foi sintetizada a partir de N-óxido de 2,6-lutidina comercial, tal como se descreve na literatura /~0.0.C., 27, 1665 (1962), R. F. Evans e H.C. Bromn_7· A reacção de acopla mento fci realizada como anteriormente se descreveu no Exemplo 6. 0 produtc foi purificado por cromatografia flash em sílica por eluição com 20-50% de isopropanol em hexano.

Rí.r.’(CDCl₃) %: 7,4 (d, 2H), 7,2(s,2H)

6.8 (d, 2H), 4,2 (t, 2H),

3.8 (s, 3H), 2,9 (s, 2H)

2,65 (m, 2H), 2,55 (s, 6H)

EXEMPLO 10

Di-hidrobrometo de 2-(4-hidroxifenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro5H 7-pirrolo/~ 1,2-a 7imidazolo

a) 2- (4-Metoxif enil )-6,7-di-hidro-/~ 5H__7-pirrolo/~1, 2-a_/ imidazolo (Composto com a Fórmula (e))

A uma solução de 6,8 g (29,7 mmole) de 2-bromo-4’-metoxiacetofenona em 50 ml de CHCl^, adicionou-se, com arrefecimento, uma solução de 5 g (59,4 mmole) de 2-iminopirrolidina em 30 ml de CHClj. Após 4 horas de agitação a 259C, removeu-se o solvente in vacuo. Dissolveu-se o resíduo em água, ajustou-se o pH a 2,5 e aqueceu-se a solução num banho de vapor, sob uma atmosfera de ãrgc-n, durante 8 horas. Ajustou-se a solução arrefecida a pH 6. Filtrou-se o precipitado resultante, lavou-se com água e secou-se in vacuo, obtendo-se o composto do título, ponto de fusão 116-117SC.

b) 3-(N-Etiloxicarbonil-1,4-di-hidrc-4-piridil)-2-(4-meto xifenil)-6,7-di-hidro-/” 5H_7-pirrolo/~ 1,2-a__7imidazolo

Tratou-se uma solução agitada de 2,8 g (13,1 mmole) de 2I 68 079

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-66-(4-metoxifenil)-6,7-di-hidro-/^-5H_7-pirrolo/~1,2-a_7imidazolo, preparado como anteriormente se descreveu, e de 6,2 g (78,4 mmole) de piridina anidra em 30 ml de Ch^C^, gota a gota, durante 1 hora a 5QC, sob uma atmosfera de árgon, com 4,25 g (30,2 mmole) de cloroformato de etilo. Após agitação durante 1 hora adicionaram-se mais 3,1 g (39,2 mmole) de piridina,a que se seguiu a adição de 2,15 g (19,8 mmole) de cloroformato de etilo durante 2 horas. Agitou-se a mistura, de um dia para o outro a 25SC, adicionou-se depois a água gelada alcalinizada com h^CO^ e extractou-se com CF^Clz· Lavou-se a fase orgânica, sequencialmente, com HCl 0,2 N, água e solução aquosa de ^CO^, secou-se com NagSO^ e evaporou-se in vacuo obtendo-se 0 composto do título na forma de uma resina ambar.

c) 2-(4-Metoxifenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/^-5H_/-pirrolo/~l,2-a_7imidazolo (Composto com a Fórmula (i))

Aqueceram-se com agitação 4,1 g (ll,2 mmole) do composto descrito na Parte b) anterior, em 25 ml de decalina sob árgon.

Após atingir 859C 0 sólido dissolveu-se e adicionaram-se 0,468 g (14,6 mmole) de enxofre. Aqueceu-se a mistura a 1659C e adicionai ram-se mais 0,235 g (7,3 mmole) de enxofre. Após outros 45 minutos 0 material de partida tinha sido consumido e diluíu-se a mistura reaccional arrefecida, com 25 ml de éter de petróleo, e filtrou-se. Lavou-se 0 sólido filtrado com mais éter de petróleo, dissolveu-se em CHCl^-EtOAc e cromatografou-se em sílica. Concen. trou-se c material, eluido com 8 a 25$ de metanol em CHCl^-EtOAc (l:l), in vacuo, e recristalizou-se a partir de tolueno-ciclo-hexano obtendo-se o produto desejado, ponto de fusão 157,5-158,59C;

análise calculada para C^gH^N^O: C, 74,20; H, 5,88; N, 14,42. Encontrada: C, 74,09; H, 5,88; Ν, 14,45.

d) Di-hidrobrometo de 2-(4-hidroxifenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/~5H_JZ-pirrolo/~ 1,2-a_/imidazolo

Tratou-se uma solução agitada de 3 g (10,3 mmole) de 2-(4-metoxif enil)-3-(4-piridil )-6,7-di-hidro-/^-5H_/Z-pirrol o/l,2-aJ7imidazolo, da Parte c) anterior, em 150 ml de diclorometano anidro, gota a gota a -809C, com uma solução de 17,7 g (30,9 mmole) de tribrometo de boro em diclorometano e deixou-se aquecer, de um

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JI tf íl

-67dia para o outro à temperatura ambiente. Arrefeceu-se a mistura reaccional num banho de gelo, adicionaram-se 5 a 10 ml de água e removeu-se o solvente in vacuo. Recristalizou-se o resíduo a pa£ tir de água quente contenda 0,5 ml de ácido bromídrico a 48% e s_e cou-se in vacuo, obtendo-se o composto do título na forma de cris. tais amarelo brilhante, ponto de fusão 257-2589C. Análise Calculada para C^H^Í^O^HBr.l/^Í^O: C, 45,87; H, 4,00; N, 9,44. Encontrada: C, 45,66; H, 3,69; N, 9,67.

EXEMPLO 11

2-(4~Etoxifenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/~ 5H_7-pirrolo/~1,2-a_7imidazolo

Tratou-se uma solução agitada de 1,2 g (2,7 mmole) de di-hidrobrometo de 2-(4-hidroxifenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/ 5H_7-pirrolo/l,2-a_7imidazolo do Exemplo 10 em 25 ml de dimetilformamida anidra, arrefecida num banho de gelo, com 360 mg (9,0 mmole) de uma dispersão de hidreto de sódio a 60% e deixou-s aquecer até à temperatura ambiente. Adicionou-se, gota a gota, uma solução de 420 mg (2,7 mmole) de iodeto de etilo em 2 ml de dimetilformamida, e duas horas depois, adicionaram-se mais 105 mg (0,67 mmole) de iodeto de etilo seguindo-se a adição de outras 90 mg (2,25 mmole) de suspensão de hidreto de sódio a 60%. Após se ter agitado de um dia para o outro, adicionou-se a mistura a 10 volumes de água gelada e extractou-se três vezes com acetato de etilo, Lavou-se a fase orgânica com água, secou-se com carbonato de potássio anidro e concentrou-se in vacuo. Sujeitou-se o resíduo a cromatografia flash em sílica e combinaram-se as fracções eluídas com 4 a 6% de metanol em clorofórmio, concentraram-se in vacuo e recristalizou-se o resíduo a partir de acetato de etilo obtendo-se o composto do título, ponto de fusão, 133-1352C. Análise Calculada para C, 74,73, H, 6,27; N, 13,76. Eri contrado: C, 74,23; H, 6,01; N, 13,74.

EXEMPLO 12

2-(4-(l-propoxi)fenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/~*5H_7-pi r r o 1 o /71,2-a__7imidazolo

Tratou-se uma solução agitada de 1,2 g (2,7 mmole) de di68 079

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-68-hidrobrometo de 2-(4-hidroxifenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidropirrolo/”l»2-a_7imidazolo do Exemplo 10 em 20 ml de dimetilformamida anidra, arrefecida num banho de gelo, com 360 mg (9,0 mmole) de dispersão de hidreto de sódio a 60/ e deixou-se aquecer até à temperatura ambiente. Adicionaram-se 450 mg (2,7 mmole) de iodeto de potássio em pó, seguindo-se a adição, gota a gota, de uma solução de 332 mg (2,7 mmole) de brometo de 1-propilo em 2 ml de dimetilformamida. Duas horas depois adicionaram-se mais 83 mg (0,67 mmole) de brometo de 1-propilo seguindo-se outras 90 mg (2,25 mmole) de suspensão de hidreto de sódio a 60/ e aqueceu-se a mistura a 65SC durante 2,5 horas. Após agitação de um dia para o outro, adicionou-se a mistura a 10 volumes de água gelada e extractou-se três vezes com acetato de etilo. Lavou-se a fase orgânica com água, secou-se com carbonato de potássio anidro e concentrou-se in vacuo. Sujeitou-se o resíduo a cromatografia flash em sílica e combinaram-se as fracções eluídas com 3 a 6% de metanol em clorofórmio, concentraram-se in vacuo e recristalizou-se o residuo a partir de acetato de etilo obtendo-se o compos^ to do título, ponto de fusão 148,5-15030. Análise calculada para ^20^R21^3^R: C» 75,21; H, 6,63; N, 13,16. Encontrada; C, 74,95;

H, 6,59; N, 13,17.

EXEMPLO 13

2-(4-(2-Propoxi) fenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/~5H__7^r-pirrolo1,2-a 7imidazolo

Tratou-se uma solução agitada de 0,90 g (2,0 mmole) de di-hidrobrometo de 2-(4-hidroxifenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/~5H_7-pirrola/~l,2-a_7imidazolo do Exemplo 10, em 20 ml de dimje tilformamida anidra, arrefecida num banho de gelo, com 267 mg (6,67 mmole) de dispersão de hidreto de sódio a 60/ e deixou-se aquecer até à temperatura ambiente. Adicionou-se gota a gota uma solução de 374 mg (2,22 mmole) de iodeto de 2-propilo em 2 ml de dimetilformamida e aqueceu-se a mistura reaccional a 100QC durante 4 horas. Adicionaram-se outras 35 mg (0,88 mmole) de suspensão de hidreto de sódio a 60/, à temperatura ambiente, seguindo-se 113 mg (0,67 mmole) de iodeto de 2-propilo e aqueceu-se a mis tura a 1Q0SC durante mais 3 horas. Após agitação de um dia para

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o outro, adicionou-se a mistura a 10 volumes de água gelada e extractou-se três vezes com acetato de etilo. Lavou-se a fase orgâ. nica com água, secou-se com carbonato de potássio anidro e concej} trou-se in vacuo. Sujeitou-se o resíduo a cromatografia flash em sílica e concentrou-se a fracção eluida com 2% de metanol em clorofórmio, in vacuo, e recristalizou-se o residuo a partir de acetato de etilo obtendo-se o composto do título, ponto de fusão 148-150SC. Análise Calculada para ^20^21^3^ ^C’ 75,21; H, 6,63; N, 13,16. Encontrada: C, 75,38; H, 6,58; N, 13,26.

EXEMPLO 14

2-(4-Etiltiofenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/ 5H_7-pirrolo/7 1,2-

-a_7imidazolo

Adicionou-se hidreto de sódio (60/ò) (0,75 g, 19 mmole) a uma solução de etanotiol (2,1 ml, 1,7 g, 28 mmole) em N,N-dimetil formamida (15 ml) a 09C sob uma atmosfera de árgon. Após agitação durante 0,5 horas, adicionou-se 2-(4-fluorofenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/~5H_T'-pirrolo/^-l ,2-a_/imidazolo (3,5 g, 12,5 mmole) do Exemplo 2 e aqueceu-se a solução resultante a 95^aC durante 6 horas. Evaporou-se a mistura reaccional, arrefecida, sob pressão reduzida e repartiu-se o resíduo entre hidróxido de sódio aquoso 1 N e diclorometano. Lavou-se sucessivamente a fase orgânica com água e salmoura, secou-se (sulfato de magnésio) e conceji trou-se. Cromatografou-se o residuo em sílica por eluição com clorofórmio/metanol 25:1. Combinaram-se as fracções contendo o produto, evaporou-se o solvente e recristalizou-se o resíduo a partir de acetato de etilo obtendo-se o composto do título; ponto de fusão 124-1259C. Análise Calculada para ^9^9^3^: C, 70,99; H, 5,96; N, 13,08; S, 9,97. Encontrada: C, 70,99; H, 5,92; N, 13,07; S, 9,81.

EXEMPLO 15

2-(4-Etilsulfinilfenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-2á~5H_/-pirrolo/“l,2-a_7i midazolo composto do titulo foi preparado a partir do-6,7-di-hidro-2-(4-etiltiof enil)-3- (4-piridil)-/™ 5H_7-pirrolo/~ 1,2-a_7imid.a zalo do Exemplo 14 pelo procedimento da Exemplo 4, ponto de fusão

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SKB CASE 14285-CIP 2

-70108-ll0aC. RMN-¹H (250 MHz, CDCl^) &8,61 (2H, d), 7,65 (2H, d), 7,53 (2H, d), 7,24 (2H, d), 4,05 (2H, t), 3,02 (2H, t), 2,86 (2H, m), 2,69 (2H, m), 1,23 (3H, t).

EXEMPLO 16

2-(4-Mercaptofenil)-5-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/~~5H_7-pirrolo/”1,2-a_/imidazolo

A uma solução de 5 g (15,5 mmole) de 2-(4-metilsulfinilfenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/~5H_7-pirrolo/~1,2-a_7imidazolo, preparado como no Exemplo 4, dissolvido em 100 ml de diclorometano, arrefecida a 0°C, adicionaram-se 9,7 g (46,4 mmole, 6,5 ml) de anidrido trifluoroacético em 25 ml de diclorometano. Aqueceu-se a mistura ao refluxo durante uma hora. Evaporou-se a mistura reaccional no rotoevaporador, tratou-se depois com água e extractou-se com diclorometano. Lavou-se o extracto com NaHCO^ 3N e com solução saturada de NaCl, tratou-se com Na₂S0^ e depois evapo. rou-se, obtendo-se 5,1 g de produto bruto. Dissolveu-se este material em metanol anidro (50 ml) e tratou-se com uma solução de 25/0 de NaOCHj em MeOH (5 ml, 23 mmole). Agitou-se esta mistura à temperatura ambiente durante 3 horas, adicionou-se depois a água gelada e neutralizou-se com NaHCQ^ 3 N. Após remover a maior par. te do metanol no rotoevaporador, repartiu-se o resíduo entre diclorometano e água. Lavou-se a fase orgânica com água e com solju ção saturada de NaCl, tratou-se com Na₂S0₄ e evaporou-se. Sujeitou-se o resíduo a cromatografia flash, numa coluna de sílica gel, usando um gradiente de 1 a 5% de MeOH em diclorometano obtejn do-se 3,1 g (10,5 mmole) do composto do título.

EXEMPLO 17

2-(4-Trimetilacetiltiofenil)-3~(4-piridil)-6,7-di-hidro-/^- 5H_7-pirrolo/^-1,2-a_7imidazolo

A uma solução de 1,0 g (3,4 mmole) de 2-(4-mercaptofenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/~5H_7-pirrolo/~ 1,2-a_7imidazolo, pre parado como no Exemplo 16, em diclorometano a 02C, adicionou-se uma solução de 0,3 g (3,7 mmole, 0,26 ml) de cloreto de trimetilacetilo em 10 ml de CH₂C1₂ por um período de 10 minutos. Deixou-se a mistura reaccional atingir a temperatura ambiente e agitou68 079

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-71-se durante 30 minutos. Diluiu-se depois a mistura com diclorome tano e lavou-se com NaHCO^ 3 N, com solução saturada de NaCl, tra tou-se com Na₂S0^, evaporou-se e sujeitou-se depois o resíduo a cromatografia flash, em sílica, com diolorometano contendo 1 a 5/ de MeOH. Recristalizou-se o material isolado, a partir de ace. tato de etilo, obtendo-se 0,43 g do composto do título, com 33,5/ de rendimento, ponto de fusão 216-217,5SC. ⁸22^23^3°⁹’ C^al^cul^ad°j C; 70,00, H: 6,14, N: 11,13; Encontrado, C: 70,01, H: 6,20, N: 10,99.

EXEMPLO 18

2-(4-Acetiltiofenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/~5H_y-pirrolo1,2-a 7imidazolo fi 1,0 g (3,4 mmole) de 2-(4-mercaptofenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/^_5H_7-pirrolo/^_l,2-a_7i_midazolo, preparado como no Exemplo 16, dissolvido em 50 ml de diclorometano, a 02C, adicionou, -se uma solução de 0,3 g (3,7 mmole, 0,26 ml) de cloreto de aceti. lo em 10 ml de CH₂C1₂, durante um período de 10 minutos. Deixou-se a mistura reaccional atingir a temperatura ambiente e agitou-se durante 30 minutos. Diluiu-se depois a mistura com diclorome. tano e lavou-se com NaHCO^ 3 N, com solução saturada de NaCl, tra tou-se com NagSO^, evaporou-se, e sujeitou-se depois a cromatogra. fia flash, em sílica, com diclorometano contendo 1 a 5/ de MeOH. Recristalizou-se o material isolado, duas vezes a partir de aceta to de etilo, obtendo-se 0,20 g do composto do título. Rendimento 17,6/i, ponto de fusão 152-542C. C^^H^N^OS, Calculado, C: 68,03, H: 5,11, Ní 12,53; Encontrado, C: 68,25, H: 5,40, N: 12,14.

EXEMPLO 19

2-(4-Piridil )-6, 7-di-hid ro-^SH/Z-pirrolo/ 1,2-a_/imida ζ o 1 o

Tratou-se uma suspensão agitada de 10 g (35,6 mmole) de hi drobrcmeto de 4-(bromoacetil)piridina e de 12,9 g (107 mmole) de hidrocloreto de 2-iminopirrolidina em 100 ml de dimetilformamida anidra, com 18,9 g (178 mmole) de carbonato de sódio anidro. Aque ceu-se esta suspensão a 802C, num banho de óleo, de um dia para o outro. Removeu-se o solvente in vacuo, dissolveu-se o resíduo em água e extractou-se com clorofórmio. Lavou-se a fase orgânica,

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SKB CASE 14285-CIP 2

-72trâs vezes com água, secou-se com carbonato de potássio anidro e evaporou-se in vacuo. Cromatografou-se o residuo em sílica por eluição com 10-15% de metanol em diclorometano:acetona (85:15). Evaporou-se esta fracção in vacuo e recristalizou-se o resíduo só. lido, duas vezes a partir de acetato de etilo, obtendo-se o composto do título desejado, ponto de fusão 140-1412C, RMN-^H (250 MHz, CDC1₃) 8 8,62 (2H,d), 7,60 (2H,d), 7,34(lH,s), 4,04(2H,t), 2,95 (2H,t), 2,64(2H,p).

EXEMPLO 20

2<4-(2 -metilpropeniltio)fenil_y-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/” 5H_/-pirrolo/~ 1,2-a_7imidazolo

Tratou-se uma solução de 5 g (17 mmole) de 2-(4-mercaptofe nil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/^- 5H_7-pirrolo/” 1,2-a_7imidazolo, em tetra-hidrofurano anidro a -202C, com uma solução de 17 mmole de dietilamida cie lítio a partir de 6,8 ml de n-butil-lítio 2,5 M.

Após aquecimento adicionou-se, gota a gota, uma solução 1,57 g (17 mmole) de cloreto de trimetilsililmetilo em tetra-hidrofurano.

Após a reacção estar completa imergiu-se a mistura num banho de gelo e adicionou-se uma segunda solução (17 mmole) de dietilamida ds lítio. Após agitação durante 15 minutos adicionou-se uma solu ção de 0,99 g (17 mmole) de acetona em tetra-hidrofurano e agitou, -se a mistura 15 minutos a Q2C e 15 minutos a 252C. Adicionou-se a mistura a água, extractou-se com diclorometano e secou-se a fase orgânica, cromatografou-se em sílica obtendo-se o composto do título desejado.

EXEMPLO 21

3-(4-metilsulfinilfenil)-2-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/” 5H_J7-pirrolo/~1,2-a_/imidazolo

a) 2-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/~5Η_/-ρΪΓΓθ1ο/~ 1,2-a_7 i m i dazolo-3-il-tri-n-butilestanho (Composto com a Fórmula

A uma solução arrefecida (-5 a OSC) de 0,5 g (2,7 mmole) de 2-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/”SH^-pirrolo/”1,2-a_7imidazolo, preparado como no Exemplo 19, em 20 ml de tetra-hidrofurano anidro

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SKB CASE 14285-CIP 2

-73sob árgon, adicionaram-se 1,08 ml (2,7 mmole) de uma solução 2,5 M de n-butil-lítio em hexano, gota a gota durante 20 minutos. Aqi tou-se a mistura reaccional durante 1,5 horas e adicionou-se depois, gota a gota, uma solução de 1,0 g (3,07 mmole) de cloreto de tri-n-butilestanho em 2 ml de tetra-hidrofurano anidro. Tratou-se depois a mistura reaccional com uma solução aquosa saturada de cloreto de amónio. Extractou-se a fase orgânica uma segunda vez com solução saturada de cloreto de amónio e secou-se depois com carbonato de potássio anidro. Removeu-se o solvente in vacuo e extractou-se o resíduo duas vezes com hexano. Concentrou, -se o extracto e purificou-se por cromatografia em sílica por eluição com 5-8$ de metanol em hexano: acetato de etilo (l:l), cori tendo 1$ de dietilamina, obtendo-se o composto do título na forma de um óleo. RMN-¹H (250MH_z, CDCl^) £ : 8,52 (2H,d), 7,47 (2H,d), 3,97 (2H,t), 2,95 (2H,t), 2,64(2H,q), 1,42 (6H,m), 1,27 (6H,m), 1,08 (6H,m), 0,84(6H,t).

b) 3-(4-me til tio fenil )-2-( 4-piridil)-6,7-di-hi d ro-/ 5H_/-p ir rol o/ 1,2-a__T'imidazolo

Purgou-se uma solução de 2,69 g (10,9 mmole) de 1-metiltiq -4-iodobenzeno em 6,8 ml de hexametilfosforamida e 68 ml de tetra, -hidrofurano anidro, fazendo borbulhar árgon, através da solução, durante 15 minutos, e tratou-se depois com 240 mg de tetraquis(tri. fenilfosfina)paládio. Aqueceu-se a mistura a 50SC durante 15 minutos e tratou-se depois, gota a gota, com uma solução de 1,7 g (3,57 mmole) do composto a) anterior em 15 ml de tetra-hidrofurano anidro. Levou-se a mistura ao refluxo num banho de óleo, a 80SC de um dia para o outro, depois arrefeceu-se, adicionou-se acetato de etilo, e lavou-se duas vezes com solução aquosa de fluoreto de sódio a 10$, três vezes com água e extractou-se para HC1 3 N frio. Lavou-se a fase aquosa duas vezes com diclorometano, alcalinizou-se com hidróxido de sódio a 10$ e extractou-se o produto com diclorometano e secou-se com carbonato de potássio ani. dro. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia flash, em sílica, por eluição com 2-3$ de metanol numa solução de 66$ de diclorometano e 33$ de acetona, contendo 2$ de água. Recristalizou-se o resíduo a partir de etanol-acetato de etilo e secou-se

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SKB CASE 14285-CIP 2

-ΊΑin vacuo obtsndo-se o composto do titulo na forma de cristais ama relos, ponto de fusão 174-175,52C.

c) 3-(4-metilsulfinilfenil)-2-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/ 5H_7-pirrolo/~l,2-a_7imidazolo

Tratou-se uma solução de 0,345 g (l,12 mmole) do composto b) anterior, em 5 ml de água contendo 0,75 ml de ácido clorídrico 3 N, gota a gota a 5SC durante 1,5 horas, com uma solução de 0,267 g (l,24 mmole) de periodato de sódio em 5 ml de água. Deixou-se a mistura reaccional a esta temperatura de um dia para o outro, aqueceu-se depois a 2O0C, extractou-se duas vezes com diclorometano, ajustou-se a pH 4 e extractou-se 4 vezes com dicloro metano, ajustou-se depois a pH 10 com carbonato de sódio aquoso e extractou-se com diclorometano. Secou-se a fase orgânica com car bonato de potássio anidro e concentrou-se in vacuo. Dissolveu-se o resíduo em acetato de etilo quente, cristalizou-se e secou-se in vacuo obtendo-se o composto do título, ponto de fusão 179,5-181,52C.

EXEMPLO 22

2-(4-metilsulfinilfenil)-3-/~4-(2-metil)piridil_7-6,7-di-hidro“Z~ 3H_/-pirrolo/~ 1,2-a_7imidazolo

a) 2-(4-fluorofenil)-3-/ 4-(2-metil-l,2-di-hidropiridil_7-6,7-di-hidro-/^-5H_7-pirrolo^~ 1,2-a__7imidazolo

A uma solução de 3,3 g (ll,9 mmole) de 2-(4-fluorof enil)-3· -(4-piridil)-D,7-di-hiaro-/~5H_7^r-pirrolo/^_l,2-»a_7'imidazolo em tetra-hidrofurano anidro a -202C adicionaram-se 1,84 g (23,8 mmole) de cloreto de acetilo. Agitou-se a mistura reaccional a -20SC dú. rante 10 minutos e adicionaram-se depois 8,81 ml de brometo de me tilmagnêsio 2,7 M (20mmole). Agitou-se a mistura reaccional durante mais 15 minutos e aqueceu-se depois à temperatura ambiente durante 30 minutos. Extinguiu-se a reacção com NH^Cl aquoso, ajustou-se a pH 7,5 com bicarbonato e extractou-se repetidamente com diclorometano. Secaram-se os extractos orgânicos combinados com sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se in vacuo obtendo, -se a di-hidropiridina em bruto.

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SKB CfiSE 14285-CIP 2 „ // /;/ / 7'

b) 2-(4-fluorofenil-3-/^-4-(2-metil)piridil_7-6,7-di-hidro-/~5H_7 -pirrolo/^-1,2-a_7imidazolo

Aromatizou-se a di-hidropiridina em bruto, por aquecimento a 1903C durante 1 hora, numa solução composta de 150 ml de decali. ra, 15 ml de diglima e 1,0 g de enxofre sublimado* Filtrou-se a mistura reaccional, diluiu-se com éter de petróleo e arrefeceu-se Recolheu-se o sólido resultante e purificou-se por cromatografia flash em sílica gel e cristalizou-se a partir de acetato de eti. lo obtendo-se o 2-(4-fluorofenil)-3-/~4-(2-metil)piridil_7-6,7- di-hidr o-/^- 5H_7-pirrolo/ 1,2-a_7imidazolo.

c) 2-(4-metiltiofenil)-3- Z~4 -(2-metil)piridil J7-6,7-di-hidro-/^-5H_7-pirrolo/^—1,2-a_7imidazolo

Aqueceu-se uma solução agitada de 0,55 g do composto b) a_n terior e de 0,16 g de tiometilato de sódio em 7,5 ml de dimetilformamida anidra, sob uma atmosfera de árgon, de um dia para o ou. tro a 120SC. Adicionou-se a mistura reaccional a água fria e extractou-se duas vezes com acetato de etilo. Filtrou-se a fase οχ gãnica, lavou-se três vezes com água, secou-se com carbonato de potássio anidro e evaporou-se in vacuo. Recristalizou-se o resíduo a partir de acetato de etilo obtendo-se o composto do título. RMN 250MHz (CDCl^) : 8,5 (d, IH), 7,45 (d, 2H), 7,15 (d, 2H) , 7,14-7,1 (m, 2H), 4,01 (t, 2H), 3,0 (t, 2H), 2,62 (m, 2H), 2,51 (s, 3H), 2,47 (s, 3H). Ponto de fusão 131-132QC.

d) 2-(4-metilsulfinilfenil)-3-/^4-(2-metil)piridil_7-6,7-di-hidro-/^-5H_7-pirrolo/~1,2-a_7imidazolo

Tratou-se uma solução de 200 mg do composto c) anterior, dissolvido em 1,5 ml de água contendo 1 ml de HC1 1,2 N, gota a gota a 5^0 durante 1,5 horas, com uma solução de 1,19 mg de perio date de sódio em 1,5 ml de água. Tratou-se a mistura reaccional como no Exemplo 21 (c) obtendo-se o composto do título. Ponto de fusão 128-1319C, RMN 250MHz (CDCl^) S: 8,5(d, IH), 7,7(d, 2H), 7,55(d, 2H), 7,15-7,D5(m, 2H), 4,05(t, 2H), 3,05(t, 2H), 2,75(s, 3H), 2,68(m, 2H).

De uma forma análoga ao processo do Exemplo 22 (a) e (b), preparou-se a 2-(4-metoxifenil)-3- /4-(2 -metil)piridil__7-6,7-di68 079

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-76-hidro- -pirrolo/”1,2-a_J7imidazolo, ponto de fusão 158-160SC.

EXEMPLO 23

2-(4-Carbetoximetiltiofenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/^- 5H_/_

-pirrolo/^-1,2-a_7irnidazolo

A 1,0 g (3,4 mmole) de 2-(4-mercaptofenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/^-5H_7-pirrolo/~l ,2-a__/imidazolo em 50 ml de dicloro metano a 02C adicionou-se, durante 10 minutos, uma solução de 0,63 g (3,7 mmole, 0,43 ml) de bromoacetato de etilo em 10 ml de CH₂C1₂. Deixou-se a mistura reaccional atingir a temperatura ambiente e agitou-se durante 30 minutos. Diluiu-se depois a mistura com diclorometano, e lavou-se com NaHCO^ 3 N, NaCl saturado, tratou-se com Na^O^, evaporou-se e sujeitou-se o resíduo a croma toçrafia flash, em sílica, com diclorometano contendo 1 a 5% de MeOH. Recristalizou-se o material isolado a partir de acetato de etilo obtendo-se 0,35 g do produto do título. Rendimento 27,2%, ponto de fusão 102-103SC, Análise para ^21^21^3^2^’ Calculada, C: 66,47, H; 5,58, N; 11,07; Encontrada, C: 66,39, H: 5,52, N: 10,97

EXEMPLO 24

2-(4-Acetoximetiltiofenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/”5H/Z-pirrolo/ 1,2-a__7imidazolo

A 1 g (3,1 mmole) de 2-(4-metilsulfinilfenil)-3-(4-piridil)-6,7-di-hidro-/”5H_7 -pirrolo/” 1,2-a_7imidazolo adicionaram-se 25 ml de anidrido acético. Aqueceu-se a mistura ao refluxo durante 1 hora. Evaporou-se a mistura reaccional no rotoevaporador, tratou-se depois com água e extractou-se com diclorometano. Lavou-se o extracto, com NaHCO^ 3 N e com solução saturada de NaCl, e tratou-se com Na^O^, e evaporou-se depois obtendo-se 1,1 g do produto em bruto. Sujeitou-se então este material em bruto a cromatografia flash, numa coluna de sílica gel, usando um gra diante de 1 a 5/ de MeOH em diclorometano obtendo-se, após recris. talização a partir de acetato de etilo, 0,80 g (2,2 mmole) do pro duto do titulo. Rendimento, 71/, ponto de fusão 125,5-126,5. Aná lise para C^H^gN^O^, Calculada, C: 65,73, H; 5,24, N; 11,50; Eji contrada, C: 66,03, H: 5,26, N;ll,30.

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7//

-77EXEMPLO 25 - COMPOSIÇÃO EM CAPSULAS

Uma composição farmacêutica do presente invento na forma de uma cápsula é preparada por enchimento de uma cápsula de gelatina dura, de duas peças, convencional, com 50 mg de um composto com a Fórmula (ϊ), na forma de pó, 110 mg de lactose, 32 mg de talco e 8 mg de estearato de magnésio.

EXEMPLO 26 - COMPOSIÇÃO PARENTERAL INJECTAVEL

Uma composição farmacêutica do presente invento, numa forma adequada para administração por injecção, é preparada agitando 1,5% em peso de um composto com a Fórmula (l) em 10%, em volume, de propileno-glicol e água. A solução ê esterilizada por filtração.

EXEMPLO 27 - COMPOSIÇÃO EM POMADA

Composto com a Fórmula (i) 1,0 g

Parafina mole branca até 100,0 g

Dispersa-se o composto com a Fórmula (i) num pequeno volume do veículo e incorpora-se gradualmente esta dispersão no grosso do veículo para produzir um produto homogéneo macio que se usa para encher tubos metálicos maleáveis.

EXEMPLO 28 - COMPOSIÇÃO EM CREME PARA USO LOCAL

Composto com a Fórmula (I) 1,0 g

Polatuax GP 200 20,0 g

Lanolina Anidra 2,0 g

Cera de abelha branca 2,5 g

Hidroxibenzoato ds metilo 0,1 g z

Agua destilada até 100,0 g

Aquecem-se a polatuax, a cera de abelha e a lanolina, conjuntamente, até 60SC e adicionam-se a uma solução de hidroxibenzoato de metilo. Consegue-se a homogeneização usando agitação de alta velocidade e deixa-se a temperatura cair atê aos 50SC. Adiciona-se o composto com a Fórmula (i), e dispersa-se na mistura e deixa-se a composição arrefecer com agitação de baixa velocidade.

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-78EXEMPLO 29 - COMPOSIÇÃO EM LOÇÃO PARA USO LOCAL

Composto com a Fórmula (I)	1,0	9
Monolaurato de sorbitano	0,6	9
Polisorbato 20	0,6	9
Álcool cetoestearílico	1,2	9
Glicerina	6,0	9
Hidroxibenzoato de metilo	0,2	9
Agua purificada B.P. até	100,00 ml

Dissolvem-se o hidroxibenzoato de metilo e a glicerina em 70 ml da água a 752C. Fundem-se conjuntamente o monolaurato de sorbitano, o polisorbato 20 e o álcool cetoestearílico a 752C, e adicionam-se à solução aquosa. Homogeneiza-se a emulsão resulta_n te, deixa-se arrefecer com agitação contínua e adiciona-se o composto com a Fórmula (i), na forma de uma suspensão na restante água. Agita-se toda a suspensão até estar homogénea.

EXEMPLO 50 - COMPOSIÇÃO EM GOTAS PARA OS OLHOS

Composto com a Fórmula (I) Hidroxibenzoato de metilo Hidroxibenzoato de propilo z

Agua purificada B.P. até

0,5 g 0,01 g 0,04 g

100,00 ml

Dissolvem-se os hidroxibenzoatos de metilo e de propilo em 70 ml de égua purificada a 752C e deixa-se a solução resultante arrefecer. Adiciona-se então o composto com a Fórmula (I) e perfaz-se o volume da solução a 100 ml com água purificada. Esteriliza-se a solução por filtração, através de um filtro de membrana (0,22yum de dimensão de poro), e coloca-se assepticamente em reci pientes esterilizados adequados.

EXEMPLO 31 - COMPOSIÇÃO PARA ADMINISTRAÇÃO POR INALAÇÃO

Para um recipiente de aerossol com uma capacidade de 15-20 ml: misturam-se 10 mg de um composto com a Fórmula (i) com 0,1-0,2% de um agente lubrificante, tal como Span 85 ou ácido oleico e dispersa-se esta mistura num propulsor (c.a.) tal como fréon, preferivelmente uma combinação de fréon 114 e fréon 12, e coloca-se num recipiente de aerossol apropriado, adaptado para administração por inalação quer intranasal quer oral.

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EXEMPLO 32 - COMPOSIÇÃO PARA ADMINISTRAÇÃO POR INALAÇÃO c>

-Ί9Para um recipiente de aerossol com uma capacidade de 15-20 ml: dissolvem-se 10 mg de um composto com a Fórmula (i) em etanol (6-8 ml), adicionam-se 0,1-0,2% de um agente lubrificante tal como Span 85 ou ácido oleico, e dispersa-se, por exemplo, num propulsor (c.a.), tal como fráon, preferivelmente uma combinação de frácn 144 e frêon 12, e coloca-se num recipiente de aerossol apro priado, adaptado para administração por inalação quer intranasal quer oral.

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Claims

-80REIVINDICAÇ0ES

1 - Processo de preparação de um composto com a fórmula onde

l) um de R ou R tem de ser piridilo substituido por alqui lo e o outro ê seleccionado entrei (a) fenilo monossubstituído onde o referido substituiu te ê seleccionado entre H, halo, hidroxi, alcoxi alquil(C₁_^)tio, alquilo alquil(C^_^)sulfinilo, alquil (C^_^)sulfonilo, alquil(C^_^)amino, dialquil(C^ ^)amino, CF^, N-(alquil C₁_₃)-N-(alcanamido N-pirrolidino,

N-pipsridino, prop-2-eno-l-oxi ou 2,2,2-tri-haloetoxi5 (b) fenilo dissubstituído onde os referidos substituin tes são iguais e são seleccionados de entre halo, alcoxi C^_^, alquil(C^ ^)amino, dialquil(C^ ₅)amino, N-pirrolidino, N-piperidino, 2,2,2-tri-haloetoxi, prop-2-eno-oxi, ou hidroxi ou os dissubstituintes formam juntos um grupo metilenodioxi;

(c) fenilo dissubstituído onde os referidos substituin tes não são iguais e são seleccionados independentemente entre halo, alquil(C^_^)amino, nitro, N-(alquil ^)-N-(alcanamido ^), dialquil(C^ ^)amino, amino, N-pirrolidino ou N-piperidinoj (d) fenilo dissubstituído onde um dos referidos substi tuintes tem de ser alcoxi hidroxi, 2,2,2-tri-haloeto

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-81xi ou prop-2-eno-oxi e o outro substituinte ê independente mente seleccionado entre halo, alquil(C₁_₃)amino, N-(alquil C^ ₃)-N-(alcanamido C^ ^), dialquil(C^_₃)amino, amino, N-pirrolidino ou N-piperidino; ou (e) fenilo dissubstituído onde um substituinte é seleç cionado entre alquil(C^_₃)tio, alquil(C^_₃)sulfinilo, e alquil(C^_₃)sulfonilo e o outro ê seleccionado entre alcoxi C.^ ₃, nitro, halo, amino, alquil(C₁_₃)amino ou dialquil(Ci_₃)aminoí ou
2) um dos grupos R ou ê 2-piridilo ou 3-piridilo e o ou tro é seleccionado entre:

(a) fenilo monossubstituído onde o referido substituir) te é seleccionado entre alquil(C₁_₃)tio, alquil(C₁_₃)sulfi. nilo, alquil(C^_₃)sulfonilo, alcoxi ou hidroxi; ou (b) fenilo dissubstituído onde ura substituinte ê seleç cionado entre alquil(C^_₃)tio, alquil(C^_,₃)sulfinilo, ou alquilíC^ ₃)sulfonilo e o outro é seleccionado entre alcoxi nitro, halo, amino, alquil(C^_₃)amino ou dialquil.

(Cj^pamino; ou
3) Ré 4-piridilo e R^ é seleccionado entre:

(a) fenilo monossubstituído onde o referido substituiu te ê seleccionado entre alquil(C^ ₃)tio, alquil(C^ ₃)sulfi nilo, alquil(C^_₃)sulfonilo ou hidroxi; ou (b) fenilo dissubstituído onde um substituinte ê seleç. cionado entre alquil(C₁_₃)tio, alquil(C₁_₃)sulfinilo ou al. quil(C^_₃)sulfonilo e o outro é seleccionado entre alcoxi C>2_3» nitro, halo, amino, alquil(C^ ₃)amino, ou dialquil(C^_₃)amino; ou
4) r! é 4-piridilo e R ê seleccionado entre:

(a) fenilo monossubstituído onde o referido substituin te é seleccionado entre alquil(C^ ₃)tio, alquil(C^ ₃)sulfi nilo, alquil(C₁__₃)sulfonilo, hidroxi, alcoxi C₂_₃, ou um alcenil(C₂_₃)tio ou um alcenil(C_{2 3})sulfinilo, ramificados ou não ramificados; ou

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SKB CASE 14285-CIP 2 c

r-/·' fi

-82(b) fenilo dissubstituído onde um substituinte ê selec. cionado entre alquil(C^_^)tio, alquil(C^_^)sulfinilo, ou alquil(C₁_₃)sulfonilo, e o outro é seleccionado entre alco xi C^ nitro, halo, amino, alquil(C^^,)amino, dialquil(C^pamino, ou um alcenil(Ε_2-^)tio ou alcenil(C2_<_5)sulfinilo, ramificados ou não ramificados; ou
5) um de R·¹· ou R ê piridilo ou piridilo substituído por al.

quilo e o outro á seleccionado entre fenilo monossubstitui do ou dissubstituído onde 0 referido substituinte é seleccionado entre tiol /~HS-_7, aciltio /~AC(0)S-_7, ditioacilo /~AC(S)S-__7, dialquiltiocarbamilo /~A2NC(0)S-_7, dialquilditiocarbamilo /~A2NC(s)S-_7 , alquilcarbonilalquiltio /~AC(0)CH2S-_7, carbalcoxialquiltio /*A0C(0)CH2S-_7 ou aciloxialquiltio /~’AC(Q)0CH₂S-_7, onde 0 CH₂ é facultativamente substituído com alquilo ^e & & alquilo C^ e R², R·³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ e R⁹ são H;

2345678 9 ou um ou dois deR,R,R,R,R,R,R eR são seleccionados independentemente entre H ou alquilo ^cj_₂ ’ s n ê 0 ou 1;

ou de um seu sal compreender:

farmaceuticamente aceitável, caracterizado por

A. quando se pretende preparar um composto com a Fórmula (I) onde r! é 4-piridilo, e R ê diferente de piridilo, a reacção de um composto com a Fórmula (E) representada pela estrutura onde

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V c.

-83R^, r\ r^, R^, r^ _} ^7* ^8 θ ^9 _gg_o η* _{QU um ou} jjQj.3 de R^, R^, r\ R⁵, R⁶, r7, r8 _e r^ _sg₀ seleccionados independentemeri te entre H ou alquilo ^-2’

X é seleccionado entre:

(a) fenilo monossubstituído, onde o referido substituinte é seleccionado entre halo, alcoxi 0^ amino, hidroxi, alquil. (C^ j)tio, alquilo N-(alquil C^_^)-(alcanamido C^p, N-alcanamido ^c1_j» alquil (C^j) amino, dialquil(C₁_^)amino, CF-^, N-pirrolidino, N-piperidino, prop-2-eno-l-oxi ou 2,2,2-tri-ha loetoxi ?

(b) fenilo dissubstituído onde os referidos substituíntes são iguais e são seleccionados entre halo, alcoxi alquil.

amino, dialquil(C^_j)amino, amino, N-pirrolidino, N-pipe. ridino, 2,2,2-tri-haloetoxi, prop-2-eno-l-oxi, hidroxi ou os dissubstituintes formam juntos um grupo metilenodioxi?

(c) fenilo dissubstituído onde os referidos substituíntes não são iguais e são seleccionados independentemente entre ha. lo, alquil(Cj_^)amino, dialquil(C^_₃)amino, amino, N-pirrolidino, N-piperidino, nitro, alcanamido ou N-(alquil 0^ ^)-(alcanamido ^-3)» ou (d) fenilo dissubstituído onde um dos referidos substituintes tem de ser alcoxi hidroxi, 2,2,2-tri-haloetoxi, ou prop-2-eno-l-oxi e 0 outro substituinte ê independentemente seleccionado entre halo, alquil(C^_^)amino, nitro, N-(alquil C^_j)-(alcanamido , dialquil(C^_^)amino, amino, N-pirrolidino ou N-piperidino?

em piridina com um halogeneto de aroílo, um éster haloformato de arilalquilo ou um éster haloformato de alquilo, ou com 0 sal de acilpiridinio prê-formado, para se obter um composto com a fórmula (F) representada pela estrutura:

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FORMULA (F) onde n ê 0 ou 1;

R², R³, R⁴, R^, R⁶, R⁷, R⁸ e R⁹ são H, ou um ou dois de

2 3 4 5 6 7 8 9 entre n, R , R% R , R , R , R e R são seleccionados ijn dependentemente entre H ou alquilo C^_₂;

X^· é seleccionado entre (a) fenilo ou fenilo monossubstituído onde o referi do substituinte ê seleccionado entre halo, alcoxi C₁_₃, hidroxi, alquil(C^_₃)tio, alquilo C^_^, N-(alquil C^_₃)-(alcanamido C^p, dialquil(C₁_₃)amino, CF^, N-pirrolidino, N-piperidino, prop-2-eno-l-oxi ou 2,2,2-tri-haloetoxi;

(b) fenilo dissubstituído onde os referidos substituintes são iguais e são seleccionados entre halo, alco xi dialquil(C^ ₃)amino, N-pirrolidino, N-piperid.i no, 2,2,2-tri-haloetoxi ou prop-2-eno-l-oxi ou os dissubstituintes formam juntos um grupo metilenodioxi;

(c) fenilo dissubstituído onde os referidos substituintes não são iguais e são seleccionados independente mente entre halo, nitro, hidroxi, dialquilíC^ ₃)amino ou N-(alquil C^_₃)-(alcanamido C^_^), N-pirrolidino ou N-piperidino; ou (d) fenilo dissubstituído onde um dos referidos substituintes tem de ser alcoxi hidroxi, 2,2,2-tri-haloetoxi ou prop-2-eno-l-oxi e o outro substituin te é seleccionado independentemente de entre halo, al68 079

SKB CASE 14285-CIP 2

-85quil(C^ j)amino, nitro, N-(alquil C^_^)-(alcanamido C_JL ^), hidroxi, dialquil(C₁_₃)amino, amino ou N-pirrolidino ou N-piperidino; e k ê 4-(l,4-di-hidro)piridilo substituído com N-(alcanoílo C^_g), N-(alcoxi(C^_g)carbonilo), N-(benzoílo); N-(fenoxicarbonilo), N-(fenilacetilo) ou N-(benziloxicarbonilo);

seguida por desacilação/oxidação de um composto com a Fórmula (F) para se obter um composto com a Fórmula (i); ou

B. quando se pretende preparar um composto de hidroxi com as

Fórmulas (i) ou (E), a desmetilação de um composto de meto, xifenilo com as Fórmulas (E), ou (i), onde a Fórmula (E) é definida como anteriormente e a Fórmula (I) ê representada pela estrutura:

FORMULA (I) onde n ê 0 ou 1J

R², R³, r\ fp, R^, r⁷, r8 θ r^ _sg₀ seleccionados, inde, pendentemente, de entre H ou alquilo C^ ₂;

um de entre R^ e R ê piridilo ou piridilo substituída com alquilo e o outro é seleccionado entre (a) fenilo monossubstituído onde o referido substituin te é seleccionado entre alcoxi C?

(b) fenilo dissubstituído onde um dos substituintes ê alcoxi ^{e 0 ou}^^ro substituinte é seleccionado entre hi droxi, nitro, amino, halo, alquil(C^ ^)amino, dialquil68 079

SKB CASE 14285-CIP 2 y F (C₁_₃)amino, N-pirrolidino, N-piperidino, 2,2,2-tri-haloeto xi, prop-2-eno-l-oxi, ou N-(alquil C₁_₅)-(alcanamido C^_-j), ou os dissubstituintes formam juntos um grupo metilenodioxi; ou (c) 3,4,5-trimetoxifenilo;

ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável;

com HBr em ácido acética ou com BBr^ em diclorometano, para se obterem os correspondentes compostos de hidroxi com as fórmulas (i) ou (E); ou

C. a O-alquilação do composto de hidroxi com a Fórmula (i), ou (E) definidas como anteriormente quando um de entre R^ e R para (I), ou X para (E), ê um grupo fenilo substituido com pelo menos um hidroxi, para se obter o correspondente composto com as Fórmulas (i) ou (E) substituido com alcoxi (Ci_₃)fenilo, 2,2,2-tri-haloetoxifenilo ou prop-2-eno-l-ox.i fenilo; ou

D. a acilação de um composto de aminofenilo ou de (alquil amino)fenilo com a Fórmula (I) com o halogeneto ou anidrido de acilo correspondentemente substituído, em piridina, para se obter o composto de N-(alquil C_{1 3})-(alcanamido ^)fenilo correspondente com a Fórmula (l); ou

E. a alquilação de um composto de (alcanamido ^)fenilo com as Fórmulas (I) ou (E) definidas como anteriormente, com um agente de alquilação, na presença de uma base, para se obter o composto de N-(alcanamido ^)fenilo ou N-(alquil C^_₃)-(alcanamido fenilo correspondente com as Fórmulas (i) ou (E); ou

F. a hidrólise de um composto de (alcanamido ₃)fenilo ou N-(alquil C^^)-/alcanamido C^^^)fenilo com as Fórmulas (i) ou (Ε), definidas como anteriormente, ou com a fórmula (G) representada pela estrutura:

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J .-77

FORMULA (G) onde n é 0 ou 1;

R², r\ r\ r5* r6, r7* r8 θ r9 sgo ou o(j dois de entre R², r\ r\ R⁹, r^ , R⁷, R⁸ 8 R^ são seleccionados in dependentemente de entre H ou alquilo C₁_₂;

X¹ é seleccionado entre (a) fenilo monossubstituído onde o referido substituinte ê seleccionado entre fluoro, cloro, alcoxi C₁_₃, alquilo C^ dialquil(C^ ^)amino, CFalquil(C^ ^)amino, N-pirrolidino, N-piperidino, prop-2-eno-l-oxi ou 2,2,2-tri-haloetoxi;

(b) fenilo dissubstituído onde os referidos substituintes são iguais e são seleccionados entre fluoro, cloro, alcoxi C₁_₃, dialquil(C₁_₃)amino, N-pirrolidino, N-piperidino, 2,2,2-tri-haloetoxi, ou prop-2-eno-l-oxi ou os dissubstituintes formam juntos um grupo metilenodioxi ;

(c) fenilo dissubstituído onde os referidos substituintes não são iguais e são seleccionados independente mente, de entre fluoro, cloro, alquil(C^_^)amino, dialquil(C^^j)amino, N-pirrolidino ou N-pipsridino; ou (d) fenilo dissubstituído onde um dos referidos substituintes tem de ser alcoxi 2,2,2-tri-haloetq xi ou prop-2-eno-l-oxi e o outro substituinte ê selecci onado, independentemente, de entre fluoro, cloro, alquil. (C^_^)amino, dialquil (C^p amino, N-pirrolidino ou N-pi.

-8868 079

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ÉL

G.

I.

J

0.

K.

peridino;

para se obter o composto de aminofenilo ou de (alquil amino)fenilo correspondente com as Fórmulas (I) ou (E); ou a oxidação de um composto com a Fórmula (I) onde um de entre R^e R é fenilo substituido com um ou mais grupos alquil(C₁ j)tio, alquil(C₁_₃)sulfinilo, alcenil(C^_₅)tio, ou aciloxialquiltio, com um agente oxidante, para se obter o composto de alquil(C^ ^)sulfinilo, alquil(C^_^)sulfonilo, aciloxialquilsulfinilo ou alcenil(C₁_^)sulfinilo correspojn dente com a Fórmula (l); ou a redução de um composto com as Fórmulas (E) ou (l) defini, das como anteriormente, onde X da Fórmula (E), ou um de eri tre R e R^ da Fórmula (I) ê fenilo mono- ou dissubstituído contendo um grupo nitro, com hidrogénio gasoso num catalisador, para se obter o composto de aminofenilo correspondente com as Fórmulas (I) ou (E); ou a cicloalquilação de um composto com as Fórmulas (i), ou (E) definidas como anteriormente onde um de entre R¹ e R da Fórmula (i) ou X da Fórmula (E), ê aminofenilo, com di-halobutano ou di-halopentano, conforme for apropriado, na presença de uma base, para se obter o composto de N-piperi dino ou de N-pirrolidino correspondente com a Fórmula (i) ou (E); ou quando se pretende preparar compostos com as Fórmulas (I) ou (E) definidas como anteriormente, onde R¹ e R da Fórmula (I), ou X da Fórmula (E), são (alquil amino)fenilo a redução dos compostos de alcanamido correspondentes com borano ou com complexo de dimetilsulfureto de borano, em tetra-hidrofurano, para se obterem os compostos desejados com as Fórmulas (i) ou (E); ou quando se pretende preparar compostos com as Fórmulas (i) ou (E), definidas como anteriormente, onde um de entre R¹e R da Fórmula (l), ou X da Fórmula (E), é (dialquil amino)fenilo, a redução dos compostos de N-(alquil ^)-(alcanamido C^_^) correspondentes, com borano ou com com68 079

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J

L.

M.

y ' ; >

Cz /7,- -89plexo de dimetilsulfureto de borano, em tetra-hidrofurano, para se obterem os compostos desejados com as Fórmulas (I) ou (E); ou (i) a reacção de um composto com as Fórmulas (E) ou (G), com um reagente de alquil(C^ ^Jlltio para se obter o reagente de lítio correspondente por meta lação ou interpermuta de lítio-halogêneo respecti vamente;

(ii) a adição de um excesso de eterato de halogeneto de magnésio ao reagente de lítio para se obter o reagente de Grignard correspondente por transmeta lação;

(iii) a adição do reagente de Grignard a um sal ds N-acilpxrldio para se obter o composto correspondente com a Fórmula (F) definida como anteriormeri te 5 (iv) a desacilação/oxidação do composto com a Fórmula (Γ) para se obter o composto correspondente com a Fórmula (i); ou o tratamento do derivado de 3-lItio de um composto com as Fórmulas (E) ou (G), cada uma definida como anteriormente com cloreto de trialquilestanho para se obter um composto com a Fórmula (3) com a seguinte estrutura