PT88150B

PT88150B - Processo para a preparacao de uma composicao farmaceutica combinada contendo um polissacarido sulfatado e um derivado de xantina

Info

Publication number: PT88150B
Application number: PT88150A
Authority: PT
Inventors: Elmar Schrinner; Christoph Meichsner; Irvin Winkler; Matthias Helsberg
Original assignee: Hoechst Ag
Priority date: 1987-08-01
Filing date: 1988-07-29
Publication date: 1995-03-01
Also published as: NZ225611A; HU204999B; KR890003383A; NO174834C; DK425288A; ATE81980T1; PT88150A; AU2017988A; GR3006992T3; CA1328404C; NO883375L; AU617115B2; DE3875674D1; IL87287A0; US5055457A; JPS6450821A; EP0305743A2; NO883375D0; NO174834B; ZA885577B

Description

Descrição da patente de invenção de HOECHST AKTIENGESELLSCHAFT, alemã, industrial e comercial, com sede em D-6230 Frankfurt am Main 80, República Federal Alemã, (inventores;

Dr. Elmar Schrinner, Dr. Irvin Winkler, Dr. Christoph Meichsner e Dr. Matthias Helsberg, residentes na Alemanha Ocidental), para PROCESSO PARA PREPARAÇÃO DE UMA COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA COMBINADA CONTENDO

UM POLISSACARIDO SULFATADO E

UM DERIVADO DE XANTINA

Descrição

GSP

A procura específica de compostos com actividade antiviral exige como condição primária a existência de processos metabólicos específicos dos virus no organismo infectado. Os retrovirus e com eles os HIV (Human Immuno D_eficiency Virus) carecem no decurso do ciclo infeccioso da actividade de uma DNA-polimerase dependente de RITA, a fim de transcrever a sua informação genética codificada sob a forma de um RNA num DNA que será integrado no genoma hospedeiro e transformado pelos respectivos enzimas hospedeiros em produtos genéticos eficazes. O enzima chamado reverse Transkriptase (RT) faz parte da partícula virai infectante

e não se encontra normalmente no organismo humano ou animal. Desta forma, a RT parece portanto constituir um ponto de ataque adequado para a quimio-terapeutica de doenças provocadas por retrovirus, e assim também do sindroma de imuno-deficiência adquirida (SIDA), que representa a consequência tardia de uma infecção pelo HIV.

S_abe-se que os polissacáridos sulfatados podem inibir a multiplicação dos retrovirus numa cultura celular (Klement & Nicolson, in Mormorosch & Koprowski,

Methds in Virology VI, 1977, 60-103). Estes compostos são inibidores altamente eficazes da RT. Um destes compostos é por exemplo o polissulfato de pentosana - um polímero de piranose com ligações 1,4 com até 2 grupos sulfato por unidade sacárida; ou seja, um composto com a seguinte fórmula:

n = número de unidades estruturais

Os efeitos secundários destes compostos são, entre outros, a inibição da coagulação sanguínea e a perturbação do crescimento do cabelo.

É também conhecida uma série de outros compostos que inibem diversos passos da reacção catalizada pela RT (De Cjerq & Balzarini: A_ntiviral Research Suppl.

(1985) 89-94). Destes compostos foram utilizados até agora em ensaios clínicos entre outros, a suramina, um composto

- 2 com a fórmula

o ácido poliantimónio-wolfrâmio ( (NH^) θ (NaW^^S^gOgg) ^7) · e o ácido fosfonofórmio ((OH) ₂ (O) PCOOH), gue obtiveram um êxito reduzido. SÓ o nucleósido sintático 3'-azido-3'-desóxi-timidina (AZT), um composto com a fórmula

produziu resultados terapêuticos assegurados em ensaios clínicos (Yarchoan et al.: The Lancet 575-530 (1986)), mas tem a desvantagem de apresentar graves efeitos secundários gue nâo permitem a terapêutica prolongada necessária de acordo co os actuais conhecimentos.

Surpreendentemente, descobriu-se agora que a eficácia dos polissacáridos sulfatados pode ser significativamente aumentada através da administração em simultâneo de pelo menos um derivado de xantina.

A xantina é um composto com a fórmula:

H

Graças à combinação com derivados de xantina, os polissacáridos sulfatados podem ser administrados em doses inferiores às necessárias sem os referidos derivados de xantina para obter os mesmos efeitos, Una tal forma de administração tem a vantagem de os efeitos secundários dos polissacáridos sulfatados serem correspondentesmente menores. A forma de administração referida é adequada a uma terepêutica prolongada.

Consequentemente, o objecto da presente invenção é uma composição farmacêutica combinada, caracterizada por conter como componente a) pelo menos um polissacárido sulfatado e como componente b) pelo menos um derivado de xantina, ou ser composts por estes componentes. O polissacárido sulfatado pode apres intar-se sob a forma de ácido livre, ou seja, com os grupos -O-SO^H, ou sob a forma de sal fisiologicamente tolerável, de preferência sob a forma de sal alcalino ou de amónia, ou seja, com os grupos -O-SO^A (A = amónia ou alcali) .

Em prmcipio pode utilizar-se qualquer polisacárido sulfatado como componente a) para a preparação

do objecto da presente invenção. São compostos preferidos o polissulfato de dextrano, polissulfato de laevano eu polissulfato de pentosana, em especial polissulfato de pentosana.

O peso molecular médio dos polissacaridos sulfatados pode abranger um largo intervalo. Dá-se preferência a um intervalo entre aprox. 1000 até 20000 Dalton, e em especial entre aprox. 5000 até 12000 Dalton, e muito especialmente de aprox. 6000 Dalton.

O grau de sulfatação dos grupos OH polissacáridos, ou seja, o número médio de radicais sulfato por unidade de monossacárido, pode variar dentro de limites alargados. 0 grau de sulfatação dos grupos OH polissacáridos situa-se de preferência entre aprox 20 e 100% dos grupos OH presentes, em especial entre aprox. 30 e 85%, e muito especial mente é de aprox. 90%.

Gomo componente b) das preparações farmacêuticas combinadas a que se refere a presente invenção podem ser utilizados em principio quaisquer derivados da xantina ou misturas dos mesmos. São derivados preferidos da xantina os que se incluem dentro do seguinte grupo de compostos :

bl) compostos da fórmula geral I

na qual um dos radicais RI e R3 representa um grupo alquilo, ( U/ -l)-oxo-alquilo ou ( U/ -1)-bidróxi-alquilo de cadeia li5

near com 3 a 8 átomos de carbono, e os outros dois radicais R2 e R3 ou R2 e RI representam grupos alquilo de cadeia linear ou ramificada com 1 a 8 átomos de carbono na posição de Rl e R3, e com 1 a 4 átomos de carbono na posição de R2_#não podendo a soma do número de átomos de carbono destes dois substituintes alquilo ultrapassar os 10 átomos de carbono ;

b2) Compostos da fórmula geral II

na qual R representa um radical alquilo com 1 a 4 átomos de carbono;

b3) compostos com a fórmula geral III

(III), na qual pelo menos um dos radicais R4 e R6 representa um grupo hidróxi-alquilo terciário com a fórmula geral

- (CH?) -C-CH₃ (Illa) t

OH na qual R7 representa um grupo alquilo com até 3 átomos de carbono e n representa um número inteiro de 2 a 5, e caso apenas um dos radicais R4 ou R6 represente um tal grupo hiroxi-alguilo terciário da fórmula geral Illa, o outro radical representa um átomo de hidrogénio ou um radical de hidrocarboneto R8 com até 6 átomos de carbono, cuja cadeia de carbono pode ser interrompida por até 2 átomos de oxigénio ou pode ser substituída com um grupo oxo ou com até dois grupos hidró xi (devendo o grupo oxo ou hidroxi presente no radical R8 estar separado de preferência por pelo menos 2 átomos de carbono do átomo de azoto), e R5 representa um grupo alquilo com 1 a 4 átomos de carbono;

b4) formas que libertam os compostos das fórmulas I a III nas condições fisiológicas e/ou b5) metabolitos dos compostos das fórmulas I a III.

D_e entre estes compostos dá-se por seu lado preferência aos compostos da fórmula geral I, que apresentam na posição Rl ou R3 um grupo hexilo, 5-oxohexilo ou 5-hidróxi-hexilo.

D_esses fazem parte em especial:

l-bexil-3,7-dimetil-xantina,

1-(5-hidróxihexil)-3,7-dimetil-xantina,

3,7-dimetil-l-(5-oxohexil)-xantina,

7-(5-hidróxihexil)-1,3-dimetil-xantina,

1, 3-dimetil-7-(5-oxohexil)-xantina,

1-(5-hidróxihexil)-3-metil-7-propil-xantina e

3-metil-l-(5-oxohexil)-7-propil-xantina.

em especial a 3,7-dimetil-l-(5-oxohexil)-xantina (=pentoxifilina) .

Os compostos especialmente preferidos da fórmula III são aqueles compostos, nos quais R5 representa um grupo metilo ou etilo. Igualmente preferidos são os compostos da fórmula III/ na qual um dos radicais R4 ou R6 representa o grupo hidróxi-alquilo terciário acima definido. Para além disso, dá-se preferência aos compostos nos quais R7 representa um grupo metilo e n representa um número inteiro entre 3 e 5, de modo que o radical hidróxi-alquilo terciário da fórmula Illa representa ( 'JJ -1)-hidroxi)- ( tP -1)-metil_7-pentilo, /_ ( (V -l)-hidróxi-( (V -l)-metil7-hexilo ou /” ( (Λ¹ -1)-hidroxi) - ( (jJ -1)-metil_7-heptilo, em especial os compostos nos quais R5 representa metilo ou etilo.

Para além disso, devem salientar-se em especial os compostos da fórmula III, na qual R4 represen ta o grupo hidróxi-alquilo terciário, e R6 representa um grupo alquilo, hidróxi-alquilo ou alcóxi-alquilo com respectivamente 1 a 4 átomos de carbono, como por exemplo a 7-etóximetil-1-(5-hidróxi-5-metilhexil)—3-metilxantina.

Uma outra forma de realização da presen te invenção consiste em não se utilizarem as oxo-alguil-xantinas das fórmulas I e II ou as hidróxialquil-xantinas das fórmulas I e III em si mesmas, mas sim formas que libertam esses compostos nas condições fisiológicas, a partir das quais só já no organismo são libertos através de biotransformações os compostos xantínicos terapeuticamente eficazes, com os substituintes definidos nas fórmulas I, II e III.

Como tais podem considerar-se por exemplo as oxoalquil-xantinas acetalizadas, nas quais os grupos carbonilo são substituidos pelo elemento estrutural da fórmula IV

em lugar da função hidroxi, representando R9 e RIO respectivamente um grupo alquilo com até 4 átomos de carbono ou em conjunto um grupo etileno, trimetileno ou tetrametileno, e Rll um radical alquilo com até 4 átomos de carbono ou um grupo fenilo ou piridilo eventualmente substituido.

A relação em peso do componente a) para o componente b) nas composições farmacêuticas combinadas a que se refere a presente invenção pode abranger uma larga escala. Dá-se preferencia a uma relação em peso do componente a) para o componentê b) de aprox. 1:100 a aprox. 100:1, em especial de aprox. 1:10 a aprox. 30:1.

As composições farmacêuticas combinadas a que se refere a presente invenção podem ser administradas sob diversas formas para o tratamento ou profilaxia de doenças provocadas por virus, em especial por retrovirus. P_odem por exemplo ser administradas por via intrevenosa, intramuscular, .intraperitonial, subcutânea, sob a forma de infusão prolongada ou por via oral. Nos estados patológicos agudos dá-se preferência à infusão prolongada, Para medicação permanente é indicada a administração por via oral.

A preparação das composições farmacêuticas combinadas a que se refere a presente invenção faz-se incorporando pelo menos um polissacárido sulfatado e pelo me9

nos um derivado de xantina, eventualmente com outros aditivos e/ou adjuvantes, numa formulação galênica adequada. Os aditivos e adjuvantes são excipientes, conservantes e outros adjuvantes usuais. Por exemplo, podem ser utilizados para as formulações galênicas de administração oral adjuvantes tais como amido, por exemplo amido de batata, milho ou trigo, celulose ou os seus derivados, em especial celulose microcristalina, dióxido de silício, diferentes açúcares tais como lactose, carbonato de magnésio e/ou fosfates de cálcio. Para além disso, é vantajoso adicionar às formas galênicas de administração oral outros adjuvantes que melhorem a tolerância ao medicamento, como por exemplo resinas e agentes geleficantes. A fim de melhorar a sua tolerância, as composições podem também ser administradas sob a forma de cápsulas indissolúveis no suco gástrico. Para além disso, pode ser vantajoso adicionar à formulação galênica ou a um dos componentes da composição farmacêutica combinada, um agente retardador, eventualmente sob a forma de membranas permeáveis, como por exemplo à base de celulose ou de resina poliestirólica, ou resinas de permuta iónica.

A posologia a administrar das composições farmacêuticas combinadas a que se refere a presente invenção depende de diversos factores, como a formulação galénica do medicamento, e o estado e peso do doente. No entanto, uma dose diária de aprox. 800 mg de polissacárido sulfatado e aprox. 800 mg de um derivado de xantina só deverão ser ultrapassadas durante muito pouco tempo. Da-se preferência a uma dose diária de aprox. 100 a 600 mg de polissacárido sulfatado e aprox. 75 a 600 mg de derivado de mantina. Para além disso é conveniente testar em ensaios tanto a composição como a posologia de cada combinação concreta de compostos acuivos. Estes ensaios podem ser realizados in vitro (ver por exemplo o E_nsaio de Eficácia I abaixo descrito), ou também in vivo (ver por exemplo o Ensaio de Eficácia II abaixo descrito).

Os ingredientes activos necessários para a preparação das composições farmacêuticas combinadas a

que se refere a presente invenção, podem ser preparados da seguinte forma.

1. P_olissacár±dos sulfatados do componente a):

Os polissacáridos sulfatados, que em parte são compostos comercializados (p.e.polissulfato de pentosana SP 54, peso molecular médio aprox. 6000 D_alton, grau de sulfatação aprox. 90%, fabricante: bene-Chemie GmbH, 8000 Munique 71, Herterichstrasse 1), podem ser preparados por exemplo da seguinte forma (R. L.Whistler, Meth. Carbohydr. Chem. IV, 426-429 (1972)): Em primeiro lugar prepara-se um complexo de DMSO-tr óxido de enxofre, adicionando gota a gota sob agitação, a aprox. 15°C -17°G, 4 vezes volume de DMSO e trióxido de enxofre. Em seguida adiciona-se um solvente, de preferencia cloreto de metileno (de preferência 4 vezes o volume do trióxido de enxofre). O complexo sólido que precipita pode ser separado através de filtração, e pode ser seco em seguida. 0 polissacárido a sulfatar (obtido por exemplo de acordo com Meth. Carbohyd. Chem. IV (1972) 1_74_/, 7_7) é dissolvido num solvente, por exemplo DMSO, e a uma temperatura de preferencia a 15° - 17°C junta-se o complexo acima obtido. A quantidade de complexo necessária para um determinado grau de sulfatação deverá ser estimada empiricamente para cada polissacárido. D_epois de adicionar água com gelo e de neutralizar a solução com hidróxido alcalino, o composto sulfatado pode ser precipitado por exemplo através da adição de metanol. G composto assim obtido deverá de preferência ser ainda purificado; processos de purificação especialmente vantajosos são a' ^separação cromatográfica e a filtração através de geles, que permite também uma separação de acordo com o grau de sulfatação e o peso molar.

2.

D_erivado da xantina do componente b):

A preparação dos derivados de xantina, que são em narté também produtos comercializados (por exemplo,

R.

Trental , composto activo pentoxif ilma, firma Hoechst AG, Frankfurt), pode ser feita por exemplo conforme é descrito para alguns compostos co eretos nas DE-B 1 233 405 ou DE-B 1 235 3 20.

Os seguintes exemplos de preparação destinam-se a melhor ilustrar a presente invenção:

EXEMPLO 1:

Os comprimidos adequados para administração oral e que contém os ingredientes abaixo indicados, são preparados por processos em si já conhecidos, granulando os ingredientes activos e os adjuvantes e comprimindo em seguida de modo a obter os comprimidos. Estes comprimidos são adequados para o tratamento antiviral numa dose de um comprimido 3-4 vezes ao dia.

Ingredientes (por comprimido) Peso

Polissulfato de pentosana, sal sódico, ICO mg peso molecular médio 6000 Dalton grau de sulfatação 90%

Pentoxifilina	50	mg
Lactose	150	mg
Arpido de milho	50	mg
T_alco	6	mg
D^óxido de silício. coloidal	6	mg
Estearato de magnésio	4	mg

EXEMPLO 2

As cápsulas adequadas para administração por via oral, e que contém os ingredientes abaixo indicados, podem ser preparados por processos em si já conhecidos, misturando os ingredientes activos e os adjuvantes e enchendo com a mistura cápsulas de gelatina. Estas cápsulas são adequadas para o tratamento antiviral numa dose de uma cápsula 2-4 vezes ao dia.

I_ngredientes (por cápsula)	Peso
P_olissulfato de pentosana, sal sódico peso molecular médio 6000 Dalton, grau de sulfatação 90%	150 mg
Pentoxifilina	7 5 mg
Lactose	200 mg
Talco	10 mg
Dióxido de silício coloidal	10 mg

EXEMPLO 3:

i

As soluções ingredientes activas gue são adequadas para injecções, contém os seguintes ingredientes; e podem ser preparados pelos processos já conhecidos, misturando os ingredientes entre si e enchendo com a mistura ampolas esterilizadas, que são fechadas com uma rolha de borracha. As soluções injectáveis são adequadas para o tratamento antiviral numa dose de 1-2 unidades injectáveis (1 unidade injectável = 1 ampola) por dia.

Ingredientes (por ampola)	Peso
P_olissulfato de pentosana, sal sódico	150	mg
peso molecular médio 6000 Dalton,
grau de sulfatação 90%
Pentoxifilina	25	mg
Cloreto de sódio	50	mg
Metil-parabeno	5	mg
Água esterilizada	5	g
ENSAIOS DE EFICÁCIA

i) Eficácia contra o Human Immuno Deficiency Virus (HIV) nas culturas celulares. Para determinação do efeito inibidor de diferentes composições farmacêuticas combinadas sobre a replicação do HIV foram isolados linfocitos de sangue humano fresco através de centrifugação com gradientes, que foram estimulados através da adição de f itohemaglutinina (composto activo à base de N-acetil-galactosamina, obtido a partir de Phaseolus vulgaris) em meio RPMI 1640 (substrato de cultura i celular, mistura de aminoácidos, vitaminas, sais minerais e compostos tampão, ver G.E.Moore et al., J.A.M.A. 199, 519 (1967))com 10% de soto fetal de vitelo, e em seguida cultivados em meio RPMI completo (meio RPMI completo = RPMI 1640 + soro de vitelo) com 20 Ul/ml de interleucina 2 recombinada (Kulitz et al., Drug Res. 35, 1607 (1985)) durante 3 dias a 37°C. Os linfocitos estimulados foram distribuídos em porções individuais e armeaer&ados em azoto líquido. Para os ensaios as células foram descongeladas e cultivadas durante três a quatro dias em meio RPMI completo com interleucina recombinante. Para a infecção, as células foram misturadas com o sobrenadante sem células de culturas celulares infectadas com HIV e incubadas durante 30 minutos. Depois de lavar uma vez, as células

infectadas foram retomadas com meio RPMI completo com interleucina 2, ao qual tinha sido adicionado o composto a testar numa concentração adequada, e semeadas em caixas Multiwell 24. Após 3 dias de incubação a 37°C retirou-se respectivamente metade do meio de cultura e substituiu-se por novo meio de cultura fresco, contendo composto activo. No quarto dia após a infecção procedeu-se à avaliação das culturas celulares através de observação ao microscópio. 0 grau de multiplicação do virus foi avaliado com base na número e dimensão dos sincícios. Na Tabela 1 é apresentada a concentração de cadaum dos compostos activos, sendo assinalada para cada composição se foi ou não observada uma inibição da formação de sincícios. T_al como se pode depreeip der da T_abela 1, é possível obter com todos os polissacáridos sulfatados estudados uma inibição da formação de sincícios, se for adicionada uma determinação quantidade de derivado de xantina a uma quantidade de polissacárido sulfatado não eficaz em caso de administração isolada. Desta forma, é comprovada a potenciação da eficácia dos polissacáridos sulfatados através da adição de um derivado da xantina.

BAD OFUGINAL

Concentração Componente B C_oncentração Inibição da formação

cn 'x.

cn l

•H

X 3 o c -P -H

C r-4 QJ -H Pt 44

QJ

		43		O	-H
				ra	43
		o	1-1	(0	'Φ
		-P	tO	ft	ε
	OJ	to	ra
	-P	4-1		*	Ρ
t—1	q	r~-1	*	0	Π5
	QJ	3	0	•rd	<—1
3	c	tn	c	43	d
i—1	0	ra	3	'0	o
0)	p.	Ή	>	ra	OJ
Λ	E	«-4	QJ		i—i
3	0	O	(0	0)	O
E-t	O	C4	r-4	43	ε

tn tn CM

I

	3 44
q	»—t
0	0
-P	m	O
r—1		O
<0	Φ	r4
Q	43
O	3	O !*0
O	fO	o-
O	L	fO
co	cn	-P

tn tn

CM

I •rd

X 3 o c -P Ή C M QJ -H CU m tn tn tn

N QJ QJ |

Í4 o q

Φ	Φ	i—1 3	O -P	I 3
43	43	O	r—t	-P
		Φ	(0	3
0	1—(	r—1	Q	44
-P	tO	Q		f-4
to	ra	£	O	3
44			O	m
1—4		O	O
3	o	ra	CO	Φ	O
ra	c	Φ		43	o
ra	to		O		r-d
•rd	>		Ή	3
»“d	Φ	*		3	O
o	(0	fO	'Φ	14	»0
C4	r-4	Z	ε	cn	O

O>

(O

C

-rd +J c

O o

(0 r-d (D

Λ (0

A

Concentração C_omponente B Concentração Inibição da formação co o

rd c

•r4 co o

Ό

Cn

O¹

s.

O O O #0 iro «3 c c c m m o cn O

I •H x n) o c P ’P C r-d 0) -rd CU CP ο ο ε o ra ra -H K0 C C m c

LD LD LD CN CN (N ο ο ε o ra ra -p ra q q w q tn m o O ™ o o i—I i—I

I r-d

1 -rd
•H	-P
X	CU
Ό	ε
ρ	1	1
Ό	m	r-d
Ή	1	-rd	3
h		CU	c
1	r-d	0	•rd
LTl	rd	Ci	-P
—	X	CU	c
1	cu	1	3
rd	r:	O-	X

O O O ip r-d r-d |

-P c

o c

o

	cu	Cd (0 r-d	c o	O ra o
CU	TJ	3	-P	3
Ό		O	r-d	-P
	1-f	CD	(0	3
o	(0		Q	cp
-P	cn	0		(—1
(0		ε	O	3
cp	X		O	co
1-1	o	0	O
3	c	co	CD	cu
co	to	cu		Ό
co	P	O.	O
•rd	-P		-rd	3
r-d	X	·»	Ό	3
O	(U	to	'3	P
cu	Ό	ss	E	CU

C

3	N>	o	O	o -P	1 3
n	cn	co	•H	r-d	-P
		3	Ό	3	3
o	CU	CU	'3	Q	cp
+j	CD		ε		r-d
3		*		O	3
cp	3	3	P	O	CO
<—1	c	S	3	O
3	3		1—d	co	3
CO	CO	3	3		Ό
co	O	Ό	O	O
-rd	•P		3	-P	3
1—d	c	r-d	r-d	Ό	3
O	3	3	0	'3	P
CU	CU	CO	ε	E	Ol

ção 90% o

ro d

c •H +>

C

O o

(0 rH (D h

ro

P·

Concentração Componente B Concentração Inibição da formação ro o

H

O 'Ή

O c

r-f ro ω

Ό ro

-P c

ro c

o £

o o

tn d

σ>

d s

i •H

X o

-P c

ro c

Ή

I~f

-H CU U-t

Lf) Lf) Lf) ro -a· t> m o

-P ro

IX w

o ro ro

CU '0) E d

ro ro

O cu ro ro ro c ro m o -P q ή ro ro cu cn o

•H

t)

Ct ro i—I d o ro

II) Eficácia de polissulfato de pentosana (SP 54) contra infecções a retrovius no ratinho.

TJrr,a vez que não existe nenhum modelo de infecção adequado com animais de laboratório para a infecções por HIV no ser humano. 0 ensaio da eficácia de quimio-terápicos contra as infecções tem de ser feita com base noutros retrovirus. Tal como a inibiçãoda replicação virai in vivo é estudada com base no bloqueio específico da actividade da RT, parece justificar-se a selecção de um modelo de substituição deste tipo. No presente caso foi escolhida a infecção do ratinho por virus Friend da leucemia.

Para tal foram infectados ratinhos de laboratorio normais (NMRI = Naval Medicai Research I_nstitute) através de injecção intravenosa com soro de ratinho contendo o virus F_riend. Nos animais de controlo não tratados desenvolveu-se ao longo de duas semanas, com o sintoma da infecção. um aumento de volume do baço e fígado. O tratamento prolongou-se por 10 dias, com início 48 horas após a infecção. No 143 5ia de ensaio, os animais foram sacrificados através de luxação da coluna cervical e abertos. O baço foi retirado e pesado. Como parâmetro de ensaio comparativo da eficácia terapêutica foi utilizada a relação entre o peso do baço dos animais tratados e dos animais de controle infectados e não tratados.

Enquanto que nos ratinhos de laboratório adultos não infectados (peso corporal 20-24 g) o baço pesava menos de 1% do seu peso corporal, nos animais infectados o baço atingiu no final do ensaio cerca de 10% do peso corporal. O tratamento com Suramin conduziu a uma redução do aumento de volume do baço, que do ponto de vista estatístico foi a melhor assegurada (p 0,05). T_ambém o polissulfato de pentosana, administrado por si só, revelou um efeito notório.

O polisulfato de dextrano, administrado por si só e em combinação com pentoxifilina, revelou-se igualmente eficaz no modelo animal estudado, não sendo no entanto possível uma compa19

-L.r-A.ur.wp,

ração com o polissulfato de pentosana devido ao reduzido número de animais em ensaio. A administração combinada de polissulfato de pentosana e pentoxifilina diminui o grau de esplenomegalia (aumento de volume do baço) relativamente ao tratamento só com polissulfato de pentosana. A pentoxifilina não teve qualquer efeito sobre a evolução da infecção.

A taxa de mortalidade relativamente elevada dos ratinhos em caso de administração de polissulfato de pentosana deveu-se a hemorragias em consequência das lesões resultantes da injecção dos medicamentos, o que sucede frequentemente em animais mais pequenos. Nos animais de experimentação maiores ou no ser humano, o perigo de hemorragias em consequência das lesões provocadas pela agulha é neglicenciável.

Eficácia terapêutica de polissulfato de pentosana (SP 54) em combinação com pentoxifilina

o p

b \ P m p o b o C b

Φ > o b iO > cn Φ c p O b ε ο b cn b co

O P O O to a b p

b	o
c	0 o
cu	b
•H	• 0
ρ	b cn
A	φ Φ
cn	ρ P
b	0 0
P	cn b
•H	φ
>	P^

P

O

P o

b c

•H b

CO ρ

o b

o

KO ε

ο

Ρ ο

cn

O

Q r\ rr\

ΓΡ r- Γ \ \ \

CN [~~ ΓΓ~ \

rω

4-4 c

Ή

CO	CO	b	Q	Lf)		<D
Γ-	cn	00			o	m
•	•	•	•	«	•	•
CN	o	CN	m	1	CM	CM
+ 1	+ 1	+ 1	+ 1	+1	+1	+ 1
CN	r-	co	CN	in	co
CN	CD	cO	co	m		o
•	•	•	•	•	•	•
cn		cn	cn	00	cn	cn

	P
P		P	ε	Ρ	Ρ
ε	Lf)	ε	•Ν’	ε	ε
o	CM	o	Ο	•Ν’	ο
•	«	•	•	•	«
Γ—í	o	i-H	ο	ο	ι—Η
X	X	X	X	X	X
o	o	o	ο	8	ο
rH	CN	CN	CN	CN

Φ b

cO (0 ro

ίϋ	Ο	O	10	c	C	C
C				b		b	C	b	b	b
	ο			(0		CO	CO	i—1	i—1	b
	κο			4-1	D	4-4	cn	b	b	b
r—1	Ρ	Φ	to	ι-Η	C	1—1	o	4-1	4-4	4-4
to	to	b	C	b	(0	b	b	b	b	b
b	Ρ	ο	b	cn	cn	cn	c	X	X	X
c	(0	Ρ	ε	cn	o	cn	φ	o	o	o
φ	Ρ	b	ίθ	b	b	b	P	b	b	b
ρ	Φ	C	Ρ	b	C	b		c	C	c
ε<	Ρ	Ο	b	O	Φ	O	φ	Φ	Φ	Φ
	Α	υ	co	A	A	A	b	A	A	A

CN + 1 r~

O •

cn p

E in

CN •

o

X ο Φ b C to to

4-i cn b O b b cn c

0) Φ b P b

O Φ

A b (continuação) ♦Η ο

c <0 ο

Ή

-Η

C σ

•Η ω

ο

	0. 0 Í4
«	σ
ο 4-1	ο
C	Ό
Φ >	ο
•Η	(Ο
>	ω
Ο	C
Í4	φ
Λ	ε
0	Ή
ϋ)	Ό

Ο	(0
σ	U
(0	Ο
χ	σ
Ο	14 Ο
Ό	υ
	0
»-4	ω
Φ	Φ
14	σ
Ο	ο
W	η
0) Ά	σ·»

ε ο

σ π3

ϋ)

Ο α

ο

	ro
C4	σ (Ο
(0	14
ι—1	ίθ
ω	a
X!	ω
(0	ί-ι
ε«	α.

r\

ΓΏ «

ί-Η + 1

σ.

η •

Γ4

σ	σ	σ
ε	ε	ε
•ν	tn	V
ο	CN	Ο
•	•	•
ο	ο	ο
X	X
a	ο C4	β

(0	(0
C	ο			C
•Η	4->			Ή
ι—1	ίθ			1—1
•Η	44	(0		•Η
44	ι—Η	C		44
•Η	0	(0		•Η
X	J1	W		X
ο	W	ο		Ο
4-·	τ4	4J		4->
C	1	C		C
ω	0	ω		Φ
cu	C4	a	+	C4

Claims

REIVINDICAÇÕES

- lâ Processo para preparaçao de uma composição farmacêutica combinada, caracterizado por se incorporarem como componentes:

a) pelo menos um polissacárido sulfatado e

b) pelo menos um derivado de xantina em conjunto com excipientes e adjuvantes numa formulação galénica adequada.

- 2^ Processo para preparação de uma composição farmacêutica combinada de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o componente a) conter pelo menos um polissacárido sulfatado de entre o grupo composto por polissulfato de dextrano, polissulfato de laevano e polissulfato de psntosana, em especial polissulfato de pentosana.

Processo para a preparação de uma composição farmacêutica combinada de acordo com as reivindicações 1 ou 2, caracterizado por os polissacáridos sulfatados do componente a) terem um peso molecular de cerca de 1000 a 200000 Dalton, de preferência cerca de 5000 a cerca de 12000 Dalton.

Processo para preparação de uma composição farmacêutica combinada de acordo com uma ou mais das reivindicações 1 a 3, caracterizado por os polissacáridos sulfatados do componente a) possuírem um grau de sulfatação dos grupos OH polissacáridicos de cerca de 20 a 100% de preferência de cerca de 50 a 95%, e em especial de cerca de 90%.

- 5ã _

Processo para preparação de uma composição farmacêutica combinada de acordo com uma ou mais das reivindicações 1 a 4, caracterizado por os derivados da xantina do componente b) serem escolhidos de entre o grupo dos seguintes compostos:

bl) compostos da fórmula geral I na qual um dos radicais R e R representa um grupo alquilo, ( [V -l)-oxoalquilo ou ( id -1)-hidróxi-alquilo de cadeia linear com 3 a 8 átomos de carbono e os outros dois radicais
2 3 2 1

R e R ou R e R representam grupos alquilo de cadeia linear ou ramificado com 1 a 8 átomos de carbono na posição de R e R e com 1 a 4 átomos de carbono na posição de R , não podendo a soma no número de átomos de carbono destes dois substituintes alquilo ultrapassar os 10 átomos de carbono;

b2) compostos da fórmula geral il (II) na qual R representa um radical alquilo com 1 a 4 átomos de carbono;

b3) compostos da fórmula geral III :m),

R

4 6 , na qual pelo menos um dos radicais R θ H representa um grupo hidroxi-alquilo terciário com a fórmula geral

R⁷ (CH,) -C-CH2 n . 3 (Illa)

OH

7 / _z na qual R representa um grupo alquilo com ate 3 átomos de carbono e n representa um número inteiro de 2 a 5, e caso 4 6 apenas um dos radicais R ou R representa um tal grupo hidroxi-alquilo terciário da fórmula geral Illa, o outro radical representa um átomo de hidrogénio ou um radical de hidrocarboneto alifático R° com até 6 átomos de carbono, cuja cadeia de carbono pode ser interrompida por até 2 átomos de oxigénio ou pode ser substituída com um grupo oxo ou com até dois grupos hidroxi, e R⁵ representa um grupo alquilo com 1 a 4 átomos de carbono;

b4) formas que libertam os compostos das fórmulas I a III nas condições fisiológicas e/ou

B5) metabolitos dos compostos das fórmulas I a III.

- Õ² Processo para preparação de uma composição farmacêutica combinada de acordo com uma ou mais das reivindicações 1 a 5, caracterizado por os derivados da xantina do componente b) serem seleccionados de entre o grupo dos seguintes compostos:

l-hexil-3,7-dimetil-xantina,

1-(5-hidroxihexil)-3,7-dimetil-xantina,
3,7-dimetil-l-(5-oxohexil)-xantina,
7-(5-hidróxihexil)-1,3-dimetil-xantina,

1,3-dimetil-7-(5-oxohexil)-xantina,

1-(5-hidróxihexil)-3-metil-7-propil-xantina,

3-metil-l-(5-oxohexil)-7-propil-xantina e/ou

7-etoximeti1-1-(5-hidróxi-5-metilhexil)-3-metil-xant ina, em especial 3,7-dimetil-l-(5-oxohexil)-xantina.

Processo para a preparação de uma composição farmacêutica combinada de acordo com a reivindicação

1, caracterizado por a relação em peso do componente a) para o componente b) se situar entre cerca de 1:10 e cerca de 100:1, de preferência entre cerca de 1:10 e cerca de 30:1.

dido desta mã em 1 de

A requerente declara que o primeiro pepatente foi apresentado na República Federal AlsAgosto de 1987, sob ο N2 P 37 25 554.1.