PT87734B

PT87734B - Processo para a preparacao de novos tripeptidos com estrutura policiclica azotada e de composicoes farmaceuticas que os contem

Info

Publication number: PT87734B
Application number: PT87734A
Authority: PT
Inventors: Michel Vincent; Georges Remond; Bernard Portevin; Claude Cudennec
Original assignee: Adir
Priority date: 1987-06-16
Filing date: 1988-06-15
Publication date: 1992-10-30
Also published as: JPH0637518B2; DK330588A; CA1336349C; AU612657B2; DE3869223D1; JPS6419096A; EP0296059B1; DK330588D0; ZA884276B; ES2032985T3; FR2616663B1; PT87734A; FR2616663A1; OA08881A; IE66224B1; GR3004851T3; AU1774188A; ATE73822T1; US5047400A; NZ225043A

Description

ADIR ET CCMPAGNIE

PROCESSO PARA A PREPARARÃO DE NOVOS TRIPEPTIDCS COM ESTRUTURA POLICICLICA AZOTADA E DE COMPO

SIRÕES FARMACÊUTICAS QUE OS CONTEM

A presente invenção diz respeito a um processo para a preparação de novos tripéptidos com estrutura pollcíclica azotada.

E conhecido um grande número de péptidos naturais ou sintétlces, modificadores da resposta biológica e particularmente a tuftsina, tetrapéptldo natural de fórmula Thr-Lys-Pro-Arg.

Um análogo da tuftsina em que a treonina é substituída por um radical oxazolidinona carboxi foi descrito por Y. STABINSKY e colab. ( Int. J. Peptide, Protein Research, 1978₅12. 130-138)· Contudo, este derivado apenas retém metade da actividade da tuftsina.

pedido de patente europeia N^s 0.190.058 descreve análogos da tuftsina em qúe a prolina é substituída por uma estru tura policíclica azotada.

Contudo, todos estes compostos, de acordo com trabalhos recentes (V. A. NAJJAR; Annals of the New York Academy of Science, Volume Ql9 - Antineoplastic, immunogenic and other effects of the tetrapetide tuftsine, New York Academy of Sciences, New York - 1983) possuem 0 inconveniente de aumentar a acção de uma aminopeptidase específica que cinde a tuftsina ou seus análogos;

- por um lado num radical treonilo,

- por outro lado num tripéptido (Lys-Pro-Arg, no caso da tuftsina) que é um inibldor da actividade do tetrapéptido inicial.

Esta aminopeptidase torna muito rapidamente inactivos a tuftsina e seus derivados.

Contudo, esta aminopeptidase apenas pode agir sobre compostos apresentando simultâneamente um grupo aminado em do grupo carbonilo da liga_yão peptídica implicando o grupo ami nado da lisina, quer dizer a estrutura seguinte:

- C - C - Nfí - (a) i ii NH 0 í

A requerente descobriu agora um processo para a prepa ração de novos compostos em que o nível da actividade é superior ao da triftsina mas que não possuem a estrutura tetrapóp tídica, sendo portanto desprovidos da estrutura de fórmula (a) ; com efeito a treonina foi substituída por uma estrutura que não é um 06 aminoácido, a qual é inserida sobre um resto lisilo. Estes novos tripéptidos obtidos de acorde com o processo da presente invenção apresentam então a característica particularmente vantajosa de possuir um alto nível de actividade sendo insensíveis à acção da aminopeptidase e ror conseguinte, de possuir uma actividade menos fugaz e portanto mais compatível com uma utilização terapêutica; isto traduz-se, por outro lado, possibilidades de utilização em terapêutica com uma posologia mais fraca, com administrações sucessivas mais espadadas.

L·,·Mais especificamente, a presente invenção dis respeite a um processo para a prepara_yão dos derivados de fórmula reral

R - CH - C - Lys - N - CH - CO - Arg - OH (I)

II \ / y à A na qual λ representa ou um átomo de oxigénio, ou dois átomos de hidrogénio,

Y representa ou um átomo de hidrogénio, ou um grupo hidroxilo.

ou

Y representa um grupo amino na condição de o símbolo X representar dois átomos de hidrogénio.

R representa um átomo de hidrogénio, um radical alquilo de 1 a 6 átomos de carbono em cadeia linear ou ramificada eventualmente substituída ror um ou vários grupos hidroxi, amino, mercapto, metiltio, carboxi ou arilo tal como nilo, piridilo ou tienilo.

Lys e Arg representam respectivamente, os restos lisilo e arginilo associados nas ligações peptídicas,

N - CH representam y

uma estrutura bicíclica de fórmula geral,

-N·

-CH \ (CH (ch₂)„

E_a-C-(CH₂)_p-Ç.K_b

2^n

na qual

- m representa um número igual a 1 ou zero,

- n e p representam, cada um, um número igual a zero, ou 2,

- e R^ representam, cada um, um átomo de hidrogénio ou considerados em conjunto podem formar uma liga ção directa quando p=0,

- B representa:

uma cadeia alquilénica de fórmula geral (CH-) na '“A qual q representa um número igual a 2, 3 ou ou * uma estrutura insaturada (-CH=CK-)_O quando p=0 e R_ee R^ considerados em conjunto formam uma ligação, com a condição de a soma de m, η, p e q ser um nú mero compreendido entre 3 θ 6, ou * a 1, 2, 3, 4-betacarbolina, seus enantiómeros, epímercs e diastereoisómeros, assim como dos seus sais de adição com um ácido ou uma base aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se condensar um derivado de fórmula geral (Z,)R - C - C - R’ (II) ¹ /\ II

J K X na qual * R e X têm os significados definidos antes, * R’ representa :

- ou um átomo de hidrogénio, ou um grupo hidroxi, ϊ

quando o símbolo X representa um átomo de oxigénio,

- ou um átomo de halogéneo, preferencialmente um átomo de bromo, com a condirão de o símbolo X represen tar dois átomos de hidrogénio,

J representa um átomo de hidrogénio ou um grupo hidroxi lo com a condição de o símbolo K representar um átomo de hidrogénio, ou então,

J e K considerados em conjunto representam um átomo de oxigénio com a condição de o símbolo X representar dois átomos de hidrogénio, * (Z^) representa um grupo protector sos eventuais substi tuintes aminados do radical representado pelo símbolo R e em particular o grupo benziloxicarbonilo, com um derivado de fórmula geral

Lys (Z) - OtBu (III) na qual:

(Z) representa um grupo protector do substituinte aminado da lisina e em particular o grupo benziloxi carbonilo e tBu representa um grupo protector do grupo carboxilo e em particular o radical butilo-terc., na presença de um agente redutor como por exemplo um hidreto misto de metal alcalino, como por exemplo um boro-hidreto de metal alcalino ou então um cianoboro-hidreto de metal alcalino quando o símbolo R’ representar um átomo de hidrogénio,

- de um agente de ligação peptídica usual, tal como a diciclohexilcarbodiimida na presença de hidroxibenzo triazol , quando o símbolo R’ representar um grupo hidroxilo,

- de um agente básico como por exemplo um sal de metal alcalino, como por exemplo um carbonato de metal alcalino tal como o carbonato de sódio quando o símbolo R‘ representar um átomo de halogéneo, para se obter um derivado de fórmula geral (ZJR - C - C - Lys -(Z) . OtBu (IV) ¹ /\ II

J K λ na qual

R e λ têm os significados definidos antes na fórmula geral I, J, K e (Z^) têm os significados definidos antes na fórmula geral II e (Z) e tBu têm os significados defidos antes na fórmula geral III, que se desprotege em meio ácido ao nível da função ácido carboxílico da lislna para se obter um derivado de ^órmula geral (ZJR - C - C - Lys (Z) - OH (V) ¹ z\ II

J K λ na qual R e λ têm os significados definidos antes na fór mula geral I, J, £ e (Z^) têm os significados definidos antes na fórmula -oral II θ (Z) tem o significado definido antes para a fórmula geral III, que, em seguida, se condensa com um derivado de fórmula geral

HN - CH - CO - Arg (NOg) OCH^H^ (W na qpal A considerado juntamente com os átomos de carbono e de azoto a que está ligado, tem os significados definidos antes para a fórmula geral I, ele mesmo obtido mediante condensação de um derivado de fórmu la geral tBoc - N - CH - COOH (VII) na qual A considerado juntamente com os átomos de carbono e de azoto a que está ligado, tem os significados definidos antes para a fórmula geral I e tBoc representa o radical butoxi-terc-carbonilo obtido de acordo com o processo descrito no pedido de patente europeia N® 0.190.058, com o N_w - nitroarginato de benzilo (H - Arg (NO^) - OCH^C^H^) para se obter um derivado de fórmu la geral tBoc - N - CH - CO - Arg (N0„) OCH^CzH^ (VIII) < j ² 2 6 5 ^KA na qual A juntamente com os átomos de carbono e de azoto a que está ligado tem os significados definidos antes para a fórmula geral I, que se desprotege, em seguida, com o ácido trifluoroacêtico de acordo com o método descrito por B. GUTTE e K. B. MERRIFIELD (J. Am. Chem. Soc. 1969, 91. 501), para se obter um derivado fi

de fórmula geral II, a condensação do derivado de fórmula geral V com o derivado de fórmula geral VI permite a obtenção de um derivado de fórmula geral (2^ - R - C - C - Lys (Z) - N - CH - CO - Arg (NOg) OCH^^ ¹ ' ' (IX) na qual A juntamente com os átomos de carbono e de azo to a que está ligado, R e X têm os significados definidos antes para a fórmula geral I, J e K e (Z^) têm os significados definidos antes para a fórmula geral II e (Z) tem o significado definido antes para a fórmula geral III, que, quando os símbolos J e K representarem em conjunto um áto mo de oxigénio, se faz reagir com um hidreto misto de metal alcalino tal como o boro-hidreto de sódio, podendo o composto assim obtido, eventualmente, separar-se nos seus isómeros de acordo com uma técnica de separação como a cromatografia em coluna de sílica, para se obter um composto de fórmula geral IXa, caso particular dos derivados de fórmula geral IX, na qual o símbolo A considerado em conjunto com os átomos de carbono e de azoto a que está ligado, os símbolos R, X (Z^) e (Z) têm os significados definidos antes para a fórmula geral IX, o símbolo _tT representa um grupo hidroxi e o símbolo K representa um átomo de hidrogénio, derivado de fórmula geral IX ou IXa que se desprotege mediante hidrogenólise, no seio de um dissolvente polar ácido na presen ça de um catalisador de hidrogenação para se obter um derivado de fórmula geral I, que, eventualmente, se pode:

- ou salificar com um ácido ou uma base aceitável sob o ponto de vista farmacêutico,

- ou separar nos seus lsómeros e, depois, se necessário, salificar com um ácido ou uma base aceitável sob o pon to de vista farmacêutico· processo de síntese permite a obtenção dos derivados de fórmula geral Iá e iÁa, é novo e faz parte da presente invenção do mesmo modo que o processo para a síntese dos deriva dos de fórmula geral I, visto que os derivados de fórmula geral IÁ e IÁa constituem os intermediários para a síntese dos derivados de fórmula geral I.

Actualmente, entre os compostos de fórmula geral I pre parados pelo processo de acordo com a presente invenção, prefe re-se aqueles em que a estrutura cíclica N - CH representa a lndolina, a isoindolina, a tetrahidroquinoleína, a tetrahidroisoquinoleína, o perhidroindol , o nerhidroisoindol , a per hidroquinoleína, a perhidrolsoquinoleína, o perhidrociclorenta /b J pirrol, o 2-azo-biciclo-/'2,2,2_7-octano, c 2-azo-biciclo-Z2,2,l_/-heptano, a l,2,3,H--tetrahidro-betacarbolina.

Entre os ácidos que podem ser adicionados aos compostos de fórmula geral I para formar um sal de adição, pode-se, citar a título de exemplo, os ácidos clorídrico, sulfúrico, fos fórico, tartárico, málico, maleico, fumárico, oxálico, metano-sulfónico, etano-sulfónico, canfórico, cítrico, etc.

Como bases que podem salificar os compostos de fórmula gerai X, pode-se utilizar hidróxidos de sódio, potássio, cálcio

ou de alumínio, carbonatos de metais alcalinos ou slcalinoter rosos ou bases orgânicas como a trietilamina, a benzilamina, s dietanolamina a buti1-terc-amina, a diclclchexilamina, a arginina, etc...

Os compostos de fórmula geral I preparados pelo processo de acordo com a presente invenção são dotados de interessan tes propriedades farmacológicas.

Em particular, encontra-se, nestes derivados,com um ní vel superior cu, pelo menos comparável, as principais propriedades dos compostos de acordo com o pedido de patente europeia Ns C.190.058.

Particularmente, estes derivados aumentam a actividades das células N. K. '‘Assassinas espontâneas. Administrados a murganho-fêmea portadora de um melanoma, inibem de modo Impor tante o crescimento desse melanoma. Asseguram uma promoção das defesas imunitárias nos animais infectados, com estirpes bacte rianas patogénicas.

Estas actividades estão ligadas as propriedades imunomoduladoras dos compostos de acordo com a presente invenção que encontram a sua aplicação, em terapêutica animal ou humana, no tratamento dos cancros, das afecções de origem virai, bacte riana ou fúngica, das doenças autoimunes como o lupus eritematoso ou a artrite reumatólde e, de um modo mais geral nas doenças que resultam de uma diminuição ou de uma perturbação das respostas imunitárias naturais do organismo animal ou humano.

A presente invenção tem igualmente por objectivo a pre paração de composições farmacêuticas que contenham pelo menos um composto de fórmula geral I; ou um dos seus sais de adição com um ácido ou uma base aceitável sob o ponto de vista farma cêutlco, só ou em associação com um ou vários excipientes cu veículos inertes, não tóxicos, aceitáveis sob o ponto de vis ta farmacêutico.

Entre as composições farmacêuticas preparadas de acor do com a presente invenção, pode-se citar mais particularmente as que são convenientes para a administração oral, parenteral, per ou tranacutânea, nasal, rectal, perlingual, ocular ou respiratória e, em especial as composições Injectáveis, os aerossóis, as gotas oculares ou nasais, os comprimidos, os comprimi dos sublinguais, as glossetas, as gálulas, as cápsulas, as tabletes, os supositórios, os cremes, pomadas, geles dármicos, etc.

A posologia útil varia de acordo com a idade e o peso do paciente, a via de administração, a natureza da indicação terapêutica e dos tratamentos eventualmente associados e está compreendida entre 1 mierograma e 1 grama por dose cu por apli cação.

Os exemplos seguintes ilustram o processo de acordo com a presente Invenção e não a limitam de modo nenhum.

Os compostos Iniciais são conhecidos da literatura.

Os pontos de fusão indicados são medidos de acordo com a técnica de micro-KÕfler.

Exemplo 1:

(2S, 3ít) AHPá - (S) Lys - (S) PKI - (S) Arg CH aHPA: Acido 2-hidroxi-3-^aniino-ⁱ+-fenIl-butanóico (S)PHI-OH: Acido perhldroindol (2S, 3^3, 7aS)-2-carbo xílico

ESTÁDIO A : tBoc (S) PHI - (S) Arg (NCg) 0CH₂

De acordo com o processo descrito por W. KONIG e R. GEIGER, (Ber., 1970, 103. 788) Combina-se ¢,00½ mole de tBoc PHI - OH, descrito no pedido de patente europeia Ns 0.190.058, com 0,00½ mole de (S) Nw - nitroarginato de benzilo utilizando a dimetilformamida anidra como dissolvente.

Obtém-se deste modo a tBoc (S) PHI - (S) Arg (NO^)OCH^C^H^ que se utiliza tal e qual no estádio seguinte

ESTÁDIO B : (S) PHI - (S) Arg (NOg) OCHg C^

Utilizando 0 processo de desprotecção com ácido triflueroacático em cloreto de metileno anidro, descrito por B.GUTTE e R. B. MERRIFIELD (”J. Am. Chem. Soc.,W50W%9), obtám-se quan titativamente, a partir de tBoc (S) PHI - (S) Arg (ΝΟ,ρ OCH^H^ preparado no estádio anterior, o (S) PHI - (S) Arg (N0_n)-00^3^ sob a forma de trifíuoroacetato.

ESTÁDIO C : (Z) - (2S, 3R) AHFA - (S) Lys (Z) OtBu

Condensa-se o (Z) (2S, 3R) AHPA, descrito por ?. NISHIZAWA e colab. (”J. Med Chem., 20, U, 5lC-5l5, 1977) com o derivado (S) Lys (Z) - OtBu de acordo com 0 processo descrito por W. KONIG e GEIGER (Chem. Ber., 1970, 103. 788) para se obter o (Z) (2S, 3R) AHPA - (S) Lys (Z) OtBu que se utiliza tal e qual no estádio seguinte.

ESTÁDIO D : (Z) - (2S, 3R) AHPA - (S) Lys (Z) - OH

Desprotege-se o grupo carbonilo terminal do (Z) - (2S,

3R) - AHPA - (S) Lys (Z) OtBu com ácido trifluoroacético.

Após secagem e concretizarão em éter etílico obtém-se o (Z) ▼

- (2S, 3R) AHPA - (S) Lys (Z),0H

ESTÁDIO Ε ; (Z) - (2S, 3*0 AHPA - (S) Lys (Z) - (S) PHI - (S)Arg (N0₂) 0CH₂ C₆H^

Combina-se, o (Z) - (2S, 3R) AHPA - (S) Lys (Z) - OH obtido no estádio anterior, de acordo com o processo descrito no estádio A, com o (S) PHI - (S) Arg (NO^) 0CE₂ C^H^ obtido no estádio B.

Purifica-se o (Z) - (2S, 3R) AHPA - (S) Lys (Z) - (S)

PHI - (S) Arg (N0₂) 0CH₂ C^H^ assim obtido mediante cromatogra fia em gel de sílica (eluente, cloreto de metileno 95, metanol:

5, Rf : 0,15)

ESTÁDIO F : (2S, 3*0 AHPA - (S) Lys - (S) PHI - (S) Arg OH

Dissolve-se 650 mg de (Z) (2S, 3R) AHPA - (S) Lys (Z) - (S) Arg (NO₂)OCK₂ C^H^ obtido no estádio anterior em 100 cm3 de ácido acético, adiciona-se 200 mg de carvão paladiado a 10$ e submete-se a uma hidrcgençào durante 20 horas sob uma pressão de 3 Kg/cm2. Após filtração do catalisador e evaporação do ácido acético, dissolve-se o resíduo em 50 ml de água, filtra-se e lloflliza-se depois. Obtém-se deste modo o (2S, 3R) AHPA- (S) Lys -(S) PHI - (S) Arg 0H (360 mg) sob a forma de diacetato.

Espectrometria de massa: /Espectro DCI (NH^5,7

M/Z : 571 : /Μ + Η - H₂0 - HN = . = NH ζ

12¹¼ ί

122 : C_ÓH_? - CH₂ - CH₂ - NH^⁺

11^ : /Arg + H - H₂C - NH = . = NH ./

Exemplo 2 (2R, 3R) AHPA - (S) Lys - (S) PHI - (S) Arg OH

De acordo com o processo descrito no exemplo 1 a partir do (Z) (2R, 3R) AHPA (”J. Med. Chem.’’, 20, 5lO-5l?, 1977), obtém -se sucessivamente:

(Z) (2R, 3R) AHPA - (S) Lys (Z) - OtBu (Z) (2R, 3R) AHPA - (S) - Lys (Z) - OH (Z) (2R, 3R) AHPA - (S) Lys (Z) - (S) PHI - (S) Arg (N0₂>

och₂c₆h^ (2R, 3R) AHPA - (S) Lys - (S) - PHI - (S) Arg OH sob a forma de diacetato.

Espectrometria de massa : zf espectro DCI (NH^)J M/Z : 571 : / Μ + H - H₂0 - HN = . = NH J ⁺

124 :

//

N + H

115 : Ζ Arg + H - K₂0 - Hw = . = NH J

Exemplo 3 (2S, 3S) AHPA - (S) Lys - (S) PHI - (S) ArgOH

De acordo com o processo descrito no exemplo 1 a partir do (Z) - (2S, 3S) AHPA (J. Med. Chem.”, 20, 510-51^, 1977), obtém-se sucessivamente:

(Z) (2S, 3S) AHPA - (S) Lys (Z) - OtBu (Z) (2S, 3S) AHPA - (S) Lys (Z) - OH

I (Z) (2S, 3S) AHPA - CS) Lys (Z)-(S)PHI-(S)A_rg (ΝΟ^ΟΟΗ,,^ (2S, 3S) AHPA - (Ξ) Lys - (S) PHI - (S) Arg OH sob a forma de diacetato.

Espectrometrla de massa: £ espectro DCI (NHj)J M/Z j 613 : Z Μ + H - H₂0 7 ⁺

589: Zm+h-hn- . - NH 7 ⁺ | 571 i £ Μ + H - H₂0 - HN = . = NH J ⁺

Exemplo 4 (2R, 3 S) AHPA - (S) Lys - (S) PHI - (S) Arg OH

De acordo com o processo descrito no exemplo 1 a partir do (Z) - (2R, 3S) AHPA (J. Med. Chem.”,20, 4-, 5lO-5l5,

1977) obtém-se sucessivamente:

(Z) (2R, 3S) AHPA - (S) (Z) (2R, 3S) AHPA - (s) (Z) (2R, 3S) AHPA - (S) - ^OCH2^CS^H5· (2R, 3S) AHPA - (S) Iy_S

Iys	(z) .	- tBu
Iys	(Z) .	- OH
Lys	(Z) -	. (S) PHI - (S) Arg (N0₂) -

- (8) PHI - (3) A_rg OH sob a forma de diaoetato

Espectrometria de massa : [ espectro PCI (NH^) J

M/Z : 571 : / Μ + Η - H^O - HN = . = NH J ⁺

124

115 [ Arg + Η - H 0

- HN = . = NH_7 ⁺

Exemplo 5 (2S, 3R) AHPA - (S) Iy_S - (S) ABO - (S) A_rg OH

ABO - OH : acido 2-aza - [ 2,2,2 /-biciclo-octano-3“G^arz boxilico.

Pe acordo com o processo descrito no exemplo 1 e substituindo no estádio A 0 tBoc - (3) PHI-OH pelo tBoc (S) ABO - OH descrito no pedido de patente europeia N° O.19O.O58 obtém-se sucessivamente:

ESTÁDIO A : tBoc (S) ABO - (S) Arg (N0₂) -OCH^^ ···

ESTÁDIO Β : (S) ABO - (S) Arg (N0₂) - OCH^Hç.

que se condensa com o (2) - (2S, 3R) AHPA - (S) Lys (2) - OH obtido no exemplo 1 para se obter sucessivamente ;

(2) (2S, JR) AHPA - (S) Lys (Z) - (S) ABO - (S) Arg (N0₂) - OCH₂C₆H_? (2S, 3R) AHPA - (S) Lys - (S) ABO - (S) Arg OH sob a for ma de diacetato.

Espectrometria de massa : /* espectro DCI : (NH^) J

M/Z í 575 · /* Μ + Η - KN = . = NH 7 ⁺

557 : ζΓ Μ + H - H₂0 - HN = . = NH J ⁺

120 : ΖΌ₆Η_? - CH₂ - CH = NH₂J ⁺

Exemplos 6 e 7

N - £ 2 (S) - Hidroxi-3(H) - amino-butiril7-( S) Lys - (S) ABO - (S) Arg - OH (isómero oC) e

N- Γ 2(R) Hidroxi~3(B.) - amino-butiril7 - (S) Lys - (S) ABO - (S) Arg - OH (isómero^ ).

ESTÁDIO A :

Substituindo no exemplo 1 os estádios A e Β o (Z) - (2S, 3R) AHPA pelo ácido hidroxi-2 (R,S) (Z) - 3 (R) - araino-butírico descrito por R, NISHIZAWA, T. SAINO (J. Med. Chem, 20, M·, 5lO-5l5, 1977) obtám-se sucesslvamente:

N / 2 (R,S) Hidroxi - (Z) - 3(R)-amino-butiril JM S) Lys (Z) - OtBu depois

N f2(R,S) Hidroxi - (Z) - 3(R) -amino-butirllJ-(S) Lys (Z) - OH

ESTÁDIO B :

N C 2(3) Hidroxi - (Z) - 3(^R) - amino-butiril_7 - (S) - Lys (Z)- (S) ABO - (S) Arg NO₂ “ ^OCH2^C6^H5»

N / 2(R) - Hidroxi - (Z) - 3(R) - amino-butiril J - (S) Lys (Z) aBO - (S) Arg (NCg) - OCH^H^

Combina-se o N-/*2(R,S) Hidroxi - (Z) - 3(R) - amino-butiril_7- (S) Lys (Z) - OH obtido no estádio anterior de acordo com a técnica utilizada no exemplo 1 estádio E cora o (S) ABO - (S) Arg (N0₂) - OCII^C^H^ (ver esxemplo 5) pera se obter oN-/’2(R,S) hidroxi-(Z) - 3(R)-butiril_7-(S) Lys (Z) - (3) ABO - (S) (N0₂) - 0CH₂C₆H^. Os dois Isómeros são separados mediante cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de cloreto de metileno/metanol (96/4),

Cromatografia em camada fina: suporte: sílica Si 60 ? 254.

Dissolvente: acetato de etilo

Isómero <%Rf: 0,19

Isómero Rf: 0,12

ESTÁDIO C ;

N - /“ 2(S) - Hidroxi - 3(R) - amino -butirilj⁷

- (S) - Lys - (S) ABO - (S) Arg - CH

N - C 2(R) - Hidroxi - 3(R) - amino-butiril J7- (S) Lys - (S) ABO - (S) Arg - OH

Trata-se cada um dos isámeros obtidos no estádio anterior, de acordo com o processo descrito no exemplo 1 estádio F, para se obter:

Exemplo 6

N - 2(S) - Hidroxi - 3(R) - amino-butirilJ- (S) Lys (S) ABO - (S) Arg - CH , liofilizado sob forma de diacetato

Exemplo 7

N - £ 2R) - Hidroxi - 3(R) - amino-butirilJ - (S) - Lys - (S) ABO - (S) Arg - CH , liofilizado sob a forma de diacetato.

Para os dois isámeros :

Cromatografia de camada fina : Suporte : Sílica Si 6C F25^

Dissolvente :

Acetato de etilo piridina

Agua ácido acático

Rf : 0,17

M/Z : 563 : ΓΜ + Na 7 ⁺541 : £M + Hj ⁺

(Og espectros de massa FAB dos 2 isomeros sao idênticos).

Exemplo 8 (3S, 4S) Sta - (S) lys - (S) ABO - (S) A_rg OH Sta » estatina = ácido 3-hidroxi-4-amino-6-metil-heptanoico

ESTÁDIO A : (Z) - (3S, 4S) Sta.

A (3S, 4S) estatina preparada de acordo com 0 processo descrito por D.H. RICH, E. T. SUN, A. S. BOPÀRAI (j. 0. C., 43, 18, 3624-3626, 1978) é transformada em (Z) - (3S, 4S) estatina utilizando a técnica de M. BERGMANN e D. ZERVÀS (Ber. 1932, 65. 1192).

ESTÁDIO B :

Substituindo nos exemplos 6 e 7 0 acido 2 (R,S) hidroxi- (Z) - 3(R)-amino-butírico pelo (3S,4S) Sta, obtém-se sucessiva mente:

- (Z) -	- (3S,	4S) ·	- Sta -(S)	lys	(Z) OtBu
- (Z) -	- (3S,	4S) .	- Sta -(S)	lys	(Z) OH
- (Z) -	- (3S,	4S) -	- Sta -(S)	lys	(Z) - (S) ABO - (S) Arg

(N0₂) OCH^H

- (3S,4S) Sta-(S)Iys-(S) ABO-(S)Arg-OH sobaformadg diacetato

110 :

Exemplo 9 :

(R,S) GABOB - (S) Lys - (S) ABO - (S) Arg OH

GABOB : Acido 3-hidroxi-¹+-amino-but:frico

Substituindo no exemplo 8 a (3S₉M-S) estatlna relo GABOB obtém-se sucessivamente:

- (Z) - (R,S) GABOB

- (Z) - (R,S) GABOB - (S) Lys (Z) O-fcbu

- (4) - (R,S)-GAB0B - (S) Lys (Z) OH

- (Z) - (R,S) - GABOB - (S) Lys (Z) - ABO - (S) Arg (NO,,)- 0CH₂C₆H_?

- (R,S) GABOB - (S) Lys - (S) ABC - (S) Arg OH liofilizado sob a forma de diacetato.

M/Z : 563 / M + Na 7 ⁺

HN

/

11C

NH +

Bxemplo 10 (3-Fenil-2(S)-amino-propil)-(S) Lys-(S) ABO - (S) Arg - OH

SSTÀDIO A : (3-^ηΙ1-(Ζ)- 2(S)-amino-nropil)- (S) Lys (Z) - OtBu

Submete-se o (Z) (S) Lenilalanlnal obtido de acordo com o processo descrito por R. NISHIZA^A, T. SAINO (J. Med. Cbem., 20, 5lO-5l5, 1977) a uma aminação redutiva na presença de cianoboro-bldreto de sódio com o (S) Lys (Z) - OtBu de acordo com o processo descrito por J. Martinez (”J. Med. Cbem.”, 2£, 187^-3879, 1985). Obtém-se o ( 3-^^11 (Z) - 2(S)-amino-propil) - (S) Lys (Z) - OtBu - purificado mediante cromatografia em gel de sílica C eluente, cloreto de metileno/etanol (95/5)J com um rendimento de 7*+ %·

Caracteristicas espectrais :

Infra-vermelho ; ís NH : 3320 cm”¹ís CO : 1720 cm”¹

SSTÂDIO B :(3-Fenil-(Z)-2(S)-amino-propil)-(S)Iys (Z)-OH

Faz-se reagir 15 g de (3-fenil (Z) - 2(S)-amino-proril)- (S) Lys (Z) - OtBu obtido no estádio anterior, com uma solução 2N de ácido clorídrico em acetato de etilo, durante 18 horas h η

temperatura ambiente. Apos secagem, retoma-se com eter, filtra-se e lava-se com acetato de etilo para se obter o (5~fenil -(Z)-2(S) -amino-propil)- (S) Lys (Z) - OH sob a forma de cloridrato com um rendimento de 66 %.

Oaracterísticas espectrais:

Infra-verme lho: ? (C = 0) : 173θ θ 1680 cm^-\

ESTÁDIO C : (3-Penil-(Z)-2(s)-amino-propil)-(S) Eys-(S) ABO - (S) Arg - OH.

Substituindo no exemplo 5 o (23, 3&) AHPA - (S) Lys (Z) (Z) - OH pelo (3“fenil(Z)-2(S)-aminopropil)-(S)Iys(Z)-OH obtido no estádio anterior obtem-se sucessivamente:

* (3-Fenil-(Z) - 2(S)-amino-propil)-(S)Iys (Z) - (S) ABO-(S) ABO - (S) Arg (N0₂) ΟΟΗ^ΟθΗ * (3-Fenil-2(S)-amino-propil) - S Lys - (S) Arg - OH liofilizado sob a forma de triacetato.

Características espectrais:

Espectrometria de massa:

Espectro PAB⁺ [ Μ + H ] ⁺ M/Z : 573 Espectro FAB” [ Μ - H J w/Z : 571

Exemplo 11 (2(S)Hídroxi - 3(S)-amino-4-fenil-butil)-(S) Lys - (S)

ABO - (S) Arg - OH (isomero 06 ) e

Exem-

Exemplo 12 (2(R) Hidroxi-3(S)-amino-4-fenil-butil)-(S) Lys-(S) ABC (S) Arg - OH (isómero p ).

ESTÀDIC A : 3(S) Benziloxicarbonilamino-4-fenil-2-oxo-1-bromo-butano.

Prepara-se o anidrido misto entre a (Z)-(S) ^enilalani na e o cloroformiato de isobutilo de acordo com o processo descrito por H. BOCANSZKY, Á. BODANSZKY - /“The practice of pepti de syntesls”, p. 109 Springer Verlag (198^)_7, obtém-se deste modo uma solução de 25 mmole deste anidrido misto em 50 ml de THF.

A esta solução arrefecida a C°C, adiciona-se, em 1 hora, uma solução etérea de diazometano (1,3 g em 250 ml), agita-se durante 3 horas e 30 minutos a 20°C e retira-se depois o excesso de diazometano com uma corrente de azoto. Transforma-se a diazo cetona obtida (cromatografia em camada fina: suporte sílica Si 6CF254, dissolvente tolueno, acetato de etilo 75/25, Rf, - C,25) em 3(S) benzÍloxicarbonllamino-4-fenil-2-oxo-l-bromobutano de acordo com a técnica de IH. HALL, L. F. LOSFFLER (F. Yed. Chem., 23, 275-278} 1980) com um rendimento de 68 Cromatografia em camada fina suporte sílica Si 60F254, dissolvente tolueno, acetato de etilo 75/25, Rf. : 0,45.

Características espectrais :

Ja NH : 3320 cm’¹ ^s CO : (carbamato): 17^0 cm”^ ^s CC : (cetona ) : 169C cm^-^

ESTÁDIO Β : N z3(S) BenzIloxIcarbonilamino-4-fenil-2-oxo-butil_7-(S) Lys (2) CH

Dissolve-se 2C mmoles de (S)3-benziloxicarbonilamino-4-fenil-2-oxo-1-bromo-butano obtidas no estádio anterior, numa mistura de 9θ ml de tetrahidrofurano e 10 ml d® dimetilformamida. Adiciona-se 2 mmoles de trifluoroacetato de (S) Lys-(Zj-CtBu (comercial; e 4 mmoles de carbonato de sódio e leva-se depois a refluxo durante 3 horas. Evapora-se até ã secura e redissolve-se em ICO ml de acetato de etilo; lava-se com uma solução saturada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfa to de magnésio e evapora-se. Purifica-se o N /*3(S) benziloxi carbonllamino-é-fenll-f-cxo-butll_/-(S; Lys (Z) - OtBu mediante cromatografia em gel de sílica (dissolvente cloreto de meti leno/metanol a 95 Σ 5) θ dissolve-se em 5C ml de uma solução 2N de ácido clorídrico em acetato de etilo. Após 18 horas a 20°C, evapora-se até à secura e concretiza-se em éter sob forma de cloridrato o N 3( S) benzllcxicarbonllamino-^l+-f9nil-2-oxo-butil_7- (S) Lys (S) - CH que se utiliza tal e qual no estádio seguinte,

ESTÁDIO C : N /“(S) Benziloxicarbonilamlno-¹f-fenIl-2-oxo-butilJ-(S) Lys (Z) - (S) ABO-(S) Arg (N0₂) -OCH₂C₆H^

Substituindo no exemplo 5 o (2S, 3R) AHPA-(f) Lys (Z)-OH pelo N /”3(S) benzilcxicarbonilaminc-ⁱ+--^penil-2-cxo-butll_7-(S) Lys (Z)-OH obtido no estádio anterior obtém-se o M Z~3(S) benziloxlcarbonilamlno-M-fenIl-2-oxo-butil_7-(S) Lys (Z)-(S) ABO-(S) Arg (N0₂)-0CH₂C^H^, purificado mediante cromatografia

em gel de sílica (dissolvente cloreto de metileno/metanol a 90 : 10, Rf. : 0,65).

ESTÁDIO D : (2(S)-Hidroxi-(Z)-3(S)-amino-Wenilbutil)-(S) Lys (Z)-(S) ABO-(S) Arg (NO^-OCÍ^C^ (Isómero õt ).

(2(R) Eidroxi-(Z)-3(S)-amino-4-fenilbutil)-(S) Lys-(Z)-(S) a30-(S) Arg (NO^-OCÍ^C^ (isómero β )

Reduz-se^ a função cetona do N f 3(3) benziloxicarbonilamino-¹+-fenil-2-oxo-butil7-(S) Lys (Z)-(S) ABO-(S) Arg (NC^)-OCH^C^H^ obtido no estádio anterior, em álcool por acção do bo ro-hidreto de sódio em metanol. Os dois diastereoisómeros são separados mediante cromatografia em gel de sílica (dissolvente: CH₂Cl/etanol a 90 : 10) .

ESTÁDIO E : (2(S)-Hidroxi-3(S)-amino-^;+-^renilbutil)-(S) Lys-(S) ABO-(S) Arg - CH (isómero «5 )

I (2(R)-Hidroxi-3(S)-amino-e-fenil-butil)-(S) Lys-(S) aB0-(S) Arg - CH (isómero β )

Trata-se cada um dos lsómeros, obtidos no estádio anterior, de acordo com a técnica utilizada no exemple 1 no estádio F para se obter:

Exemplo 11_£ (2(S) Hldroxi-SCSj-amino-e-fenilbutilj-CB) Lys-(S) ABO-(S) Arg - 0H (Isómero oú ) liofilizado sob a forma de triacetato.

Exemplo 12 (2(R)-Kldroxi-3(S)-amino-4-fenilbutil)-(S) Lys - (S) ABO-(S)- Arg - CH (isómero β ) liofilizado sob a forma de triacetato.

Espectrometrla de massa : 7espectro DCI (NH^) J Para os dois isómeros:

M/Z : $85 : Γ Μ + H - H₂0 7 ⁺

5*+3 : 7 M + R - H O - HN = . = NH J ⁺

Exemplo 13 e lk (2(S) Hidroxi - 3(R) amino-4-fenilbutil) - (S) Lys - (S) aBO - (S) Arg - OH (isómero e

(2(R) Hidroxi - 3(H) amino-á-fenilbutil)- (S) Lys - (S)-ABO-(S) Arg - OH (isómero β )

Substituindo no processo descrito nos exemplos 11 e 12 a Z(S) fenilalanina pela Z(R) fenilalanina, obtém-se sucee slvamente:

3(R) Benziloxicarbonilamino-4-feni1-2-oxo-1-bromo-butano.

N 7 3(R) Benziloxicarboni lamino-¹*-fenil-2-oxo-butil7(S) Lys (Z) - OH

N 7 3(H) Benziloxicarbonilamino-¹+-fenil-2-oxo-butil J(S) Lys (Z) - (S) ABC - (S) Arg (NCp) CCH^C^ f

depois £ 2(S)-Hidroxi-(Z)- 3(R) - amino-4-fenilbuti1,7-(S) Lys (Z)-(S) ABO - (S) Arg (N0₂) OCH^Eg, (isómero ) o

£ 2(R)-Hidroxi-(Z)-3(R) * amino-4-fenilbutilJ-(S) Lys (S) ABC - (S) Arg (ΝΟ_?) OCH^H^ (isómero β ) depois

Exemplo 13 :

» ----( 2(S) Hidroxi - 3(R) ’ amino-4-fenilbutil )-(S) Lys-(S) ABO-(S) Arg OH (isómero <* ) liofilizado sob a forma de triaoetato.

Exemplo l4 :

( 2(R) Hidroxi - 3(R) amino-4-fenilbutil )-(S) Lys -(S) ABO-(S) Arg CH (isómero β ) liofilizado sob a forma de triaoetato.

I

Exemplos 15 a 24

De acordo com o processo descrito no exemplo 1 mas subs tituindo no estádio A o tBoc (S) PHI OH pela ;

-l-t-butoxicarbonil-2-carboxi-indolina ou t.Boc (S) IND-OH (exemplo l5)

- 2-t-butoxicarbonil-l-carboxi-isoindclina ou tBoc (S)

ISI - OH (exemplo 16)

2-t-butoxicarbonil-2-azo-3-carboxi-biciclo £ 2,2,1 7-

X heptano ou tBoc (S) ABH - CH (exemplo 17)

- 2-t-butoxicarbonil-3-carboxl- 1,2,3>⁴” tetrahidro-betacarbollna ou tBoc-(S) THC-OH (exemplo 18)

- 2-t-butoxicarbonil-l-carboxi-per-hldroisoindol ou tBoe - PHII - OH (exemplo 19)

- l-t-butoxicarbonil-2-carboxi-per-hidroquinoleína ou tBoc - PHQ - OE (exemplo 2C)

I

- 2-t-butoxicarbonil-3“Carboxi-per-hidroisoisoquinolsína ou tBoc - PHIQ - OH (exemplo 21) l-t-butoxicarbonil-2-carboxi-2-per-hidrcciclorenta- Z”b/ - plrrol ou tBoc - PCP - OH (exemplo 22)

- l-t-butoxicarbonil-2-carboxi - 1,2,3,4-tetrahidroquinoleína ou tBoc TH^ - OH (exemplo 23)

- 2-t-butoxicarbonil-3-carboxi-l,2,3,^l+-tetrahidroisoquinoleína ou tBoc (S) THIQ - OH (exemplo 2*+), obtém-se respectivamente :

Exemplo 15 (2S, 3R) AHPA - (S) Lys - (S) IND - (S) Arg - OH lioflllzado sob a forma de diacetato.

Exemplo 16 (2S, 3R) AHPA - (S) Lys - (S) ISI - (S) Arg - CH Lioflllzado sob a forma de diacetato.

Exemplo 17 (2S, 3R) AHPA - (S) Lys - (S) ABH - (S) Arg - OH Liofillzado sob a forma de diacetato.

Exemplo 18 (2S, 3R) AHPA - (S) Lys - (S) THC - (S) Arg - OH Liofillzado sob a forma de diacetato.

»

Exemplo 19 (2S, 3R) AHPA- (S) Lys - PHTI - (S) Arg - OH Liofillzado sob a forma de diacetato.

Exemplo 20 (2S, JR) AHPA - (S) Lys - PHQ - (S) Arg - OH Liofillzado sob a forma de diacetato.

Exemplo 21 (2S, 3R) - (S) Lys - PHI^ - (S) Arg - CH Liofillzado sob a forma de diacetato.

Exemplo 22 (2S, 3 R) AHPA - (S) Lys - PCP - (S) Arg - OH Liofillzado sob a forma de diacetato.

Exem-

Exemplo 23 (2S, 3R) AHPA - (S) Lys - THQ - (S) Arg - OH Liofilizado sob a forma de diacetato.

Exemplo 2¹* (2S, 3*O AHPA - (S) Lys - (5) THIQ - (S) Arg - OH Liofilizado sob a forma de acetato.

»

ESTUDO FAnMACOLOGICO DOS COMPOSTOS PREPARADOS PELO PROCESSO DE ACORDO COM A PRESENTE INVENÇÃO

A capacidade dos compostos preparados pelo processo de acordo com a presente invenção de estimularem a actividade das células imunocompetentes foi verificada ”in vitro e In vi vo.

Exemplo 25 >

Estimulação da fagocltose in vitro

In vitro, utilizou-se a técnica descrita por DESCAMPS B., 1980 ( Ann Immunol. Inst. Past.» 131 C, Ne 2, p. 10) para medir a estimulação das capacidades fagocitárias de maerófagos pelos compostos de acordo com a presente invenção: semeou-se maerófagos peritoneais de murganho (estirpe

If.

B^DgF ) em caixas de Petri à razão de 10 células por caixa. Após a ligação da cultura ao meio, adicionou-se os compostos de acordo com a presente invenção em solução aquosa, numa concentração 25 micromolar por caixa; Introduziu-se depois globu-

los vermelhos de carneiro opsonizados por imunoglobulinas específicas. Após uma hora de contacto, lavou-se as culturas econtou-se os macrófagos que ingeriram mais de 2 glóbulos vermelhos.

Os compostos preparados pelo processo de acordo com a presente invenção aumentam cerca de 25 % o poder farocitário dos macrófagos em relação a culturas testemunhas. Nas mesmas condições o poder de activação da tuftsina é de 15

I

Exemplo 26

Promoção da actividade Ν. K.

Os compostos preparados pelo processo de acordo com a presente invenção foram igualmente ensaiados para avaliação do seu poder promotor da actividade assassina espontânea (Natural Klller). As células dotadas deste poder constituem a primeira linha de defesa do organismo face à invasão séptica, virai ou tumoral.

B Para apreciar o seu poder estimulante os compostos de acordo com a presente invenção foram estudados de acordo com a técnica descrita por REYNCLCS e colab. ζ J. Imraunol. 127. 282, (1981)7·

Os compostos de acordo com a presente invenção são injectados por via intravenosa na dose compreendida entre 20 e 50^g/kg a murganhos de estirpe B^D^F^.

Três dias após o tratamento, os animais são sacrificados, o baço é colhido e dissociado nas suas células constituin tes que são semeadas em cultura na presença de células tunorais

YAC-l previamente marcadas com crómio radioactivo. Uma vez terminada a incpbação , mede-se o poder destruidor dos compos tos preparados pelo processo de acordo com a presente invenção, pela quantidade de crómio libertado.

Os compostos preparados pelo processo de acordo com a presente Invenção na dose de 25 jug/kg, induzem um aumento, em relação à testemunha, da libertação de crómio na ordem de l5 enquanto que a tuftsina, na dose de 4Cyjg/kg, apenas provoca uma libertação de 10 %.

Exemplo 27

Inibição do crescimento do melanoma 3 16

Os melanomas são tumores cancerosos sensíveis à reac ção do sistema imunitário do doente. Constituem portanto um modelo de escolha para apreciar toda a estimulação da defesa antitumoral.

Cs compostos preparados pelo processo de acordo com a presente invenção, mostraram-se capazes de retardar de Uc % o crescimento do melanoma 3 16 do murganho, quando os compostos são administrados h razão de 20jng/kg, 3 vezee por semana, por via intraperitoneal. Nas mesmas condições, a tuftsina mostrou-se incapaz de favorecer o retardamente do crescimento do tumor enxertado.

Exemplo 28

Aumento da resistência dos animais h infecção.

Certas estirpes bacterianas patogónicas são capazes de

3½ / mater o hospedeiro sem serem inoculadas. E o caso por exemplo, de Klebslella pneumonlae, agente responsável pela pneumonia zfParant, M. e colab Proc. Natl.Acad Sei, USA, 75, N« 7, 3395, (1978)7Os compostos preparados pelo processo de acordo com a presente invenção são capazes, na dose de 60yxg por animal, de proteger da morte por infecção todos os murganhos Swiss, fêmeas, de 20 a 25 g, às quais se inoculou a estirpe ”Klebsiella pneumoniae 7823 por via intraperítoneal, quando administrados à-8 horas antes da infecção. Nas mesmas condições, a tuftsina apenas é capaz de salvar 20 % dos animais.

Exemplo 29

Aumento da resposta linfocitária aos mitogénos

As lectinas estraídas de plantas são capazes de se substituir in vitro” à estimulação da proliferação dos linfócitos normalmente assegurada por antigénios específicos. Estes agentes agentes são mitogénios linfocitários.

Após coloção dos linfócitos em contacto com esse mitogénio, pode-se medir a intensidade da proliferação e igualmente a reactividade Imunoprotectora dos animais tratados com um composto de acordo com a presente invenção (Daguillard, F. Med. Clin.North Am.», £6, 293).

Deste modo, linfócitos esplénicos de murganhos tratados com 0,5 mg Por kg de compostos de acordo com a presente invenção, expostos à concanavallna A numa concentração de 0,5 mg/ral respondem com uma proliferação igual a 1,8 vezes à dos

linfócitos de animais não tratados

Exemplo 3C

Composições farmacêuticas

Solução injectável (2S, 3R) AHPA-(S) Lys - (S) PHI-(S) Arg - OH C,020 g água para preparação injectável q_#b_#p· 1,5 ml

I

Comprimido

Fórmula para a preparação de 1000 comprimidos:

(2S, 3R) AHPA-(S) Lys-(S) PHI-(S) Arg OH 25 g Hidroxi propilcelulose 7 g Amido de milho 10 g Lactose 100 g Estearato de magnésio 2 g Talco 2 g.

Claims

Reivindicações

Processo para a preparação de compostos de formula geral R-CH-C-Lys-N-CH-CO-Arg-OH (I) na qual

X representa:

- ou um ãtomo de oxigénio,

- ou dois átomos de hidrogénio,

Y representa:

- ou um ãtomo de hidrogénio,

- ou um grupo hidroxilo, ou

Y representa um grupo amino com a condição de o símbolo X repre sentar dois átomos de hidrogénio;

R representa um ãtomo de hidrogénio ou um radical alquilo com 1 a 6 átomos de carbono, de cadeia linear ou ramificada, eventual mente substituído por um ou vários grupos hidroxi, amino, mercapto, metiltio, carboxi, ou arilo tal como fenilo, piridilo ou tienilo;

Lys e Arg representam, respectivamente, os restos lisilo e arginilo associados nas ligações peptídicas;

N-CH representa A^ * uma estrutura bicíclica de fórmula geral

-N-CH(CH^)
2 Π (CH.)

2 n

Ra.C, (CH.) .C.R, ² Ρ ι b na qual

- m representa um número igual a 1 ou zero,

- n e p representam, cada um, um número igual a zero, 1 ou 2,

- Ra e Rb representam, cada um um átomo de hidrogénio ou considerados em conjunto podem formar uma ligação directa quando p=0,

- B representa:

* uma cadeia alquilénica de fórmula geral (.C^)^ na qual q representa um número igual a 2,3 ou 4, * ou uma estrutura insaturada (-CH=CH-)2 quando p=0 e Ra e Rb considerados em conjunto formam uma ligação,

-38lf' com a condição de a soma de m, n, p e q ser um número inteiro compreendido entre 3 e 6, ou * a 1,2,3,4-tetrahidro-betacarbolina, dos seus enantiómeros, epímeros e diastereoisómeros, assim como dos seus sais de adição com um ãcido ou uma base aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se condensar um derivado de formula geral

CZ. )R-C-C-R' (.II) ¹ /\ II jk x na qual * R e X tem os significados definidos antes, * R' representa:

- ou um ãtomo de hidrogénio, ou um grupo hidroxi, quando o símbolo X representa um ãtomo de oxigénio,

- ou um ãtomo de halogéneo e preferencialmente um ãtomo de bromo, com a condição de neste caso o símbolo X representar dois átomos de hidrogénio, * J representa um ãtomo de hidrogénio, ou um grupo hidroxi com a condição de o símbolo K representar um ãtomo de hidrogénio, ou então

J representa um grupo benziloxicarbonilamino com a condição dupla de os símbolos K e R¹ representarem, cada um, um ãtomo de hidrogénio, ou então

J e K considerados em conjunto representam um ãtomo de oxigénio com a condição de o símbolo X representar dois ãtomos de hidro génio, * (zp representa um grupo protector dos eventuais substituintes aminados do radical representado pelo símbolo R e em parti cular o grupo benziloxicarbonilo, com um derivado de fórmula geral

Lys(Z)-OtBu (.111) na qual:

(Z) representa um grupo protector do substituinte Ui-arainado e em particular o grupo benziloxicarbonilo, e tBu representa um grupo protector do grupo carboxilo e em particular o radical butilo-terc,, na presença:

- de um agente redutor como por exemplo um hidreto misto de metal alcalino, como por exemplo um borohidreto de metal alcalino ou então um cianoborohidreto de metal alcalino quando o símbolo R' representar um átomo de hidrogénio,

- de um agente de ligação peptídica usual, tal como a diciclohexilcarbodiimida na presença de hidroxibenzotriazol, quando o símbolo R' representar um grupo hidroxi,

- de um agente básico como por exemplo um sal de metal alcalino, como por exemplo um carbonato de metal alcalino tal como o carbonato de sódio quando o símbolo R' representar um átomo de halogéneo, para se obter um derivado de fórmula geral (Ζ_Ί)R-C-C-Lys-(Ζ)-OtBu ¹ Μ II

JKX (IV) na qual

R e X têm os significados definidos antes para a fórmula geral I, j, K e (ZjJ têm os significados definidos antes para a fórmula geral II e (Z) e tBu têm os significados definidos antes para a fórmula geral III, que se desprotege em meio acido ao nível da junção ácido carboxílico da lisina, para se obter um derivado de fórmula geral (Z.) R-C-C-Lys CZ)-OH (V) ¹ Λ II

JKX na qual

R e X têm os significados definidos antes para a fórmula geral I, J,K e (zp têm os significados definidos antes para a fórmula geral II e (Z) tem o significado definido antes para a fórmula geral III, que, em seguida, se condensa com um derivado de fórmula geral

HN-CH-CO-Arg(NO₂)OCH₂CgH₅ (VI) na qual A, considerado conjuntamente com os átomos de carbono e de azoto a que está ligado, tem os significados definidos antes para a fórmula geral I, ele mesmo obtido mediante condensação de um derivado de fórmula geral tBoc-N-CH-COOH (VII) na qual A, considerado conjuntamente com os átomos de carbono e de azoto a que está ligado, tem os significados definidos antes para a fórmula geral I e tBoc representa o radical butoxi terc.-carbonilo, com o N LO -nitroarginato de benzilo / H-Arg (N0₂) -OCí^CgHj. J para se obter um derivado de fórmula geral tBoc-N-CH-CO-Arg (N0_o).0CH_oC_cH_c (VIII) í \ 2 zoo

V na qual A, considerado conjuntamente com os átomos de carbono _e de azoto a que está ligado, tem os significados definidos antes para a fórmula geral I, que se desprotege, em seguida, com ácido trifluoroacético, para se obter um derivado de fórmula geral VI, permitindo a condensação do composto de fórmula geral V com o composto de fórmula geral VI a obtenção de um derivado de fórmula geral (Z.)R-C-C-Lys(Z)-N-CH-COArg (N0_o)-OCH-C.Hr (IX) ¹ ,\ II u ^{2 2 6 5}

JK X ^XA^Z na qual A, considerado conjuntamente com os átomos de carbono e de azoto a que está ligado, R e X têm os dignificados definidos antes para a fórmula geral I, J,K e (Z^) têm os significados definidos antes para a fórmula geral II e (Z) tem o significado definido antes para a fórmula geral III, que, quando os símbolos J e K representarem em conjunto um átomo de oxigénio, se faz reagir com um hidreto misto de metal alcalino, tal como o borohidreto de sódio, podendo o composto assim obtido ser eventualmente separado nos seus isõmeros de acordo com uma técnica clássica de separação como a cromatografia em coluna de sílica,para se obter um composto de fórmula geral IXa, caso particular dos derivados de fórmula geral IX, na qual o símbolo A juntamente com os átomos de carbono e de azoto a que está ligado, os símbolos R,X, (Z^) e (Z) têm os significados definidos antes para a fórmula geral IX, o símbolo J representa um grupo hidroxi e o símbolo K representa um átomo de hidrogénio, derivado de fórmula geral IX ou IXa que se desprotege mediante hidrogenólise no seio de um dissolvente polar ãcido na presença de um catalisador de hidrogenação, para se obter um derivado de fórmula geral I que, eventualmente,se pode:

- ou salificar com um ãcido ou uma base aceitável sob o ponto de vista farmacêutico,

- ou separar nos seus isõmeros e, depois, se necessário, sali ficar com um ãcido ou uma base aceitável sob o ponto de vis ta farmacêutico.

2,- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral I, na qual a estrutura cíclica -N-CH representa a indolina, a isoindolina, a tetrahidroquinoV leína, a tetrahidroisoquinoleína, o perhidroindol, o perhidroisoin

Ol, a perhidroquinoleína, a perhidroisoquinoleína, o perhidrocilopenta £ b J pirrol, o 2-azo-biciclo £ 2.2.2 y-octano, o 2-azabiciclo /'2.2.1_7-heptano, a 1,2,3,4—tetrahidro-betacarbolina, os seus isomeros, epímeros e diastereoisomeros, assim como dos eus sais de adição com um ácido ou uma base aceitável sob o ponto e vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar ^postos iniciais correspondentemente substituídos.
3. - Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações . ou 2, para a preparação de compostos de fórmula geral I, na qual t estrutura cíclica -N-CH representa o perhidroindol ou o azaA-) •biciclo /2.2.2 J octano, dos seus enantiómeros, epímeros e dias;ereoisõmeros, assim como dos seus sais de adição com um ácido ou ima base aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizalo pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemensubstituídos.
4, - Processo de acordo com uma das reivindicações 1 a 3, para a preparação do AHPA-(S)Lys-(S)PHI-(S)Arg-OH, dos seus isómeros e dos seus sais de adição com um ácido ou uma base aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
5.- Processo de acordo com uma das reivindicações 1 a 3, para a preparação do (2S,3R)AHPA-(S)Lys-(S5PHI-(S)Arg-OH e dos seus sais de adição com um ácido ou uma base aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar com postos iniciais correspondentemente substituídos.
6.- Processo de acordo com uma das reivindicações 1 a 3, para a preparação de AHPA-(.S) Lys-CS) ABO-(.S) Arg-OH, dos seus isómeros e dos seus sais de adição com um ácido ou uma base aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
7.- Processo de acordo com uma das reivindicações 1 a 3, para a preparação do N-/ 2-hidroxi-3(R)-amino-butiril_7-(S)Lys—(S)ABO-(S)Arg-OH, dos seus isómeros e dos seus sais de adição com um ácido ou uma base aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
8.- Processo de acordo com uma das reivindicações 1 a 3, para a preparação do 3-fenil-2CS)amino-propilJ-(S)Lys-(S)ABO— (S)Arg-OH, e dos seus sais de adição com um ácido ou uma base aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substi tuídos.
9,- Processo de acordo com uma das reivindicações 1 a 3, para a preparação do /” 2-hidroxi-3(S)-amino-4-feni1-butilJ-(S) Lys-(S)ABO-(S)Arg-OH, dos seus isõmeros e dos seus sais de adição com um ácido ou uma base aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
10.- Processo de acordo com uma das reivindicações 1 a 3, para a preparação do £ 2-hidroxi-3(R)-amino-4-fenil-butilJ-(S) Lys-(S)ABO-(S)Arg-OH, dos seus isómeros e dos seus sais de adição com um ácido ou uma base aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
11.- Processo para a preparação de composições farmacêuticas, caracterizado pelo facto de se misturar uma quantidade efectiva de um composto de fórmula geral I, preparado pelo processo de acordo com uma das reivindicações 1 a 10, como ingrediente activo, com um ou vários excipientes ou veículos inertes não-tóxicos, aceitáveis sob o ponto de vista fermacêutico,