PT741128E

PT741128E - Esteres de acido sulfurico de alcoois de acucar para inibir a migracao e a proliferacao celulas de musculatura lisa da parede dos vasos sanguineos

Info

Publication number: PT741128E
Application number: PT96106471T
Authority: PT
Inventors: Hans Peter Marki; Gerard Schmid; Niggi Iberg; Rita Muller; Hans Peter Wessel; Alexander Chucholowski; Jurgen Fingerle; Michael Pech; Marianne Rouge; Thomas Tschopp
Original assignee: Hoffmann La Roche
Priority date: 1995-05-05
Filing date: 1996-04-24
Publication date: 2001-11-30
Also published as: EP0741128A3; GR3036660T3; EP0741128B1; CN1150589A; US5830920A; CA2174583A1; BR9602148A; MX9601521A; EP0741128A2; DK0741128T3; ES2160190T3; JP2881752B2; JPH08301839A; DE59607115D1; TR199600329A2; AR003945A1; ATE202339T1

Description

1 '7ciÁ-Á79 7%

Descrição “Ésteres de ácido sulfúrico de álcoois de açúcar para inibir a migração e a proliferação de células de musculatura lisa da parede, dos vasos sanguíneo^” A presente invenção refere-se a novos ésteres de ácido sulfurico de álcoois de açúcar e de compostos semelhantes ao álcool de açúcar que contêm pelo menos três radicais de álcoois de açúcar ou de compostos semelhantes a álcool de açúcar das fórmulas gerais Ia e Ib (Ai-Xi)mi-(Yi-X2.)Bi-(Qi-X3‘0I„?-(Y2-X‘‘)a2-(.Zi-XS.)níj.CY3.X6)Il3 /

D

Ia (A2-X7)nfl-(Y‘i.X8.)n4.(Q2.X9.)m5.(Y5.X10)n5.(.Z2-Xll.)m6.(Y6.X12)n6 (A 1-X1)ml-(Y l-X2-)nl-(Ql-X3.)I^-CY2-X4)n2-(-Zl-X5-)na-(Y3-X6)n3 ^ (AS-XTj^-CY^XS-j^-Cqs.xs.j^-CYS-Xioj^q.ZZ-XH^^-CYS.xi’)^. •\v

Ib

(A3-X13)rn7.(Y7-X14.)n7.(Q3.Xlõ.)d5.(Y8.X16)nS.(.Z3.Xl7.)^.(Y9.XlS)nS em que n'-n9 independentemente uns dos outros são 0 ou 1; e ml-m9 independentemente uns dos outros são 0 ou 1, embora com a condição de que pelo menos um dos símbolos m1, m2 e m3, pelo menos um dos símbolos m4, mf e m6 e, no caso de estarem presentes, pelo menos um dos símbolos m7, m8 e m9 seja 1; e em que

Xl-X8 independentemente uns dos outros representam -O-, -CONR1-, -NR^CO-, -NR1-, R1 é hidrogénio ou CrC7 alquilo; W representa um radical benzénico ou um radical de s-triazina; Y!-Y9 independentemente uns dos outros, significam sistemas de anéis aromáticos; 2

A1-A3 independentemente uns dos outros, significam um radical de um álcool de açúcar diminuído do grupo 1-hidroxi ou de um seu derivado, um radical de um ácido de açúcar diminuído do grupo 1-carboxi ou de um seu derivado ou o radical tris-(hidroximetil)-metilo; D representa o di-radical de um álcool de açúcar diminuído de 2 grupos hidroxi ou de um seu derivado ou o di-radical de um ácido dicarboxílico de açúcar diminuído de 2 grupos carboxi ou de um seu derivado; Q!-Q3 e Z'-Z3 independentemente uns dos outros, representam o di-radical de um álcool de açúcar diminuído de 2 grupos hidroxi ou de um seu derivado ou o di-radical de um ácido dicarboxílico de açúcar diminuído de 2 grupos carboxi ou de um seu derivado ou um radical de didesoxiglicopiranósido ou de um seu derivado, em que pelo menos um grupo hidroxi dos radicais A!-A3, D, Q'-Q3 e Z’-Z3 é esterificado com ácido sulfurico; derivados do álcool de açúcar são álcoois de açúcar uma vez ou várias vezes desoxigenados, um correspondente éter no Cj ou um composto da fórmula

HO OH derivados de ácidos monocarboxílicos de açúcar e de ácidos dicarboxílicos de açícar são ácidos de açúcar, cujas funções hidroxi livres ou protegidas por acetonidos, metilenoacetais, éteres anlmetílicos, ésteres de alquilo ou de arilo, são fechadas com posições de desoxi para obtenção de anéis de oxirano ou com funções de ácido carboxílico de modo obterem-se lactonas pentagonais ou hexagonais; derivados do radical didesoxiglicopiranósido são os correspondentes éteres em C i; 3

e os seus sais farmaceuticamente utilizáveis. EP 0504656 descreve a utilização de compostos da fórmula (I)

ROCH, RO

CH^OR OR OR' (I) na qual R é hidrogénio ou um radical -SO3M; M é um catiao; R’ e R” são hidrogénio ou um radical de monossacárido ou de dissacárido sulfatado ligado a-glicosidicamente; e em que em média está presente menos um grupo -S03M por unidade monossacárido, para a preparação de composições farmacêuticas para a prevenção e/ou o tratamento de doenças arterioescleróticas e para evitar a restenosização depois de operações cirúrgicas de vasos e depois da transplantação de órgãos. EP 0479093 refere-se a derivados sulfatados de oligossacáridos de fórmula (I)

(I) em que R, R’ e R” têm as significações mencionadas na descrição que podem ser utilizados como medicamentos especialmente para o tratamento de doenças arterioescleróticas. 4

ΕΡ 0312086 descreve poliésteres de ácido sulfurico de bis-amidas de ácidos aldónicos em que os ácidos aldónicos de base podem ser acoplados glicosidicamente na posição 3, 4 ou 6 com um radical galactopiranosilo, manopiranosilo, glucopiranosilo ou oligopiranosilo. EP 0663391 refere-se a ésteres de ácido sulfurico de álcoois de açúcar e de compostos semelhantes a álcoois de açúcar da fórmula geral (I) A-X-(CH2)mA-X-CCH2)p/"

(I) na qual A é um radical de um álcool de açúcar diminuído de um grupo 1 -hidroxi ou de um seu derivado, ou um radical tris-(hidroximetil)-metilo, em que pelo menos um grupo hidroxi do radical A é esterificado com ácido sulfurico; X significa -NR’CO-; -NHCONH-; -NHCSNH-; -NHS02; -NR1- ou -0-; m e p independentemente um do outro, são 0 ou 1; R1 é hidrogénio, alquilo inferior ou hidroxi-alquilo inferior; e B é um sistema de ligações múltiplas polivalentes conjugadas; e os seus sais.

Um átomo de carbono que não fica num sistema de anel, o qual possui um grupo hidroxi livre ou esterificado com ácido sulfurico, não deve ser directamente ligado a um outro heteroátomo. A invenção refere-se ainda a composições farmacêuticas que contêm um composto da fórmula geral Ia ou Ib ou os seus sais; à utilização dos compostos das fórmulas gerais Ia e Ib e os seus sais como fármaco, especialmente para o tratamento

e/ou a profilaxia de doenças que se caracterizam por proliferação excessiva ou destrutiva de células de musculatura lisa assim como por alterações da parede dos vasos arterioescleróticos, por exemplo para evitar a restenose depois de angiosplastia coronária ou periférica ou depois de operações de desvio da corrente sanguínea ou para a preparação de medicamentos para as indicações mencionadas; assim como a um processo para a preparação dos compostos das fórmulas gerais Ia e Ib e os seus sais.

Nas fórmulas gerais Ia e Ib podem-se diferenciar os seguintes elementos estruturais: a) mono-radicais de álcoois de açúcar ou de ácidos de açúcar que são acoplados por meio de um grupo funcional apropriado, por exemplo A]-X!, A2-X7 etc. b) di-radicaís de álcoois de açúcar ou de ácidos de açúcar ou de didesoxiglicopiranósidos, que estão acoplados por intermédio de dois grupos funcionais apropriados, por exemplo X6-D-X12, X2-Q'-X3, X4-Z'-X5 etc. c) unidades aromáticas que estão acopladas por meio de dois grupos funcionais apropriados, por exemplo Χ^Υ'-Χ2, X3-Y2-X4, etc. d) unidades aromáticas que estão acopladas por meio de três grupos funcionais apropriados, por exemplo X6

I .w X18

Por acoplamento destes elementos estruturais podem-se construir compostos com tamanhos diferentes das moléculas. Μ A característica comum dos compostos de acordo com a presente invenção é o facto de que contêm pelo menos três radicais que derivam de um álcool de açúcar, de um ácido de açúcar ou de um glicopiranósido. São preferidos compostos das fórmulas gerais Ia e Ib em que as duas ou três cadeias laterais são iguais.

Nas unidades aromáticas que são acopladas por meio de três grupos funcionais apropriados, preferem-se compostos da fórmula Ib, em que m2, m3, m5, ___6 & 9 2 3 5· „6 8 9 ~ r\ m , m ? m en5n,n,n?n5n saou.

Exemplos de álcoois de açúcar de que derivam os radicais A'-A3, D, Q‘-Q3, Z'-Z3 são hexitóis como glucitol, galactitol, manitol e gulitol; pentitóis, como arabinitol, ribitol e xilitol; tetritóís como treitol e eritritol ou o radical glicerol. Derivados desses álcoois de açúcar podem ser álcoois de açúcar desoxigenados uma vez ou várias vezes, como L-ramnitol.

Exemplos de ácidos carboxílicos de açúcar de que derivam os radicais A1-A3 são ácido ribónico, ácido glucónico, ácido gulónico.

Exemplos de ácidos dicarboxílícos de açúcar de que derivam os radicais D, Q'-Q3, Z‘-Z3 são ácido tartárico, ácido galactárico, ácido glucárico.

Estes álcoois de açúcares e ácidos carboxílicos de açúcares podem encontrar--se na forma D ou L ou como racemato em que se prefere a forma existente naturalmente ou a forma que corresponde ao açúcar de base existente naturalmente. O radical A'-A3 deriva preferivelmente de glucitol, arabinitol, glicerol ou de tris-(hidroximetil)-metano.

Um derivado de um álcool de açúcar é por exemplo um correspondente éter no Ci ou um composto cíclico da fórmula 7

Um derivado de um radical de didesoxiglicopiranósido é por exemplo um correspondente éter em Ci. São exemplos de sistemas de anel aromáticos Y*-Y9 nas fórmulas Ia e Ib significam radicais das fórmulas a-h.

em que R2 significa hidrogénio, halogéneo, nitro, alquilo inferior, alcoxi inferior, aralcoxi inferior, carbamoílo ou o radical glicerol, em que grupos hidroxi eventualmente existentes podem também ser sulfatados, G1 e G2 significam alquileno, alcenileno inferior, alcinileno inferior ou alquilenoxi inferior; 8 < E significa uma ligação carbono-carbono; -O-, -CO, -CH2-, -CH2-CH2-, -CH=CH-, -C=C-, -NR3-CO-, -CO-NR3-; e R3 significa hidrogénio ou alquilo inferior.

As expressões “Alquilo inferior” e “alquileno inferior” abrangem radicais hidrocarboneto saturados de cadeia linear ou ramificada com até 7, preferivelmente com até 4 átomo de carbono, como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-buplo, isobutilo, terc-butilo, e semelhantes.

De maneira análoga, as expressões “alcenilo inferior”, “alcenileno inferior” e “alcinilo inferior”, “alcinileno inferior”, abrangem radicais hidrocarboneto não saturados que contêm uma ligação dupla ou uma ligação tripla com até 7, preferivelmente com até 4 átomos de carbono, como vinilo, etinilo, alilo, propargilo, e semelhantes.

As expressões “alcoxi inferior”, “alquilenoxi inferior” abrangem grupos alquiloxi e grupos alquilenoxi no sentido da inclusão dos termos “alquilo inferior” ou “alquileno inferior”. O termo “aralcoxi” abrange grupos alcoxi substituídos por fenilo ou radicais bifenilo. O termo “halogéneo” abrange flúor, cloro, bromo e iodo, dos quais é preferido bromo.

Radicais fenilo das fórmulas a-c são de preferência radicais 1,4-fenileno.

Nas fórmulas f e g, as ligações a partir dos anéis estão de preferência na posição p uma em relação à outra.

Exemplos de sais de compostos da fórmula geral Ia e Ib são sais de metais alcalinos como sais de Na ou K, sais de amónio e sais de aminas terciárias como 9 trietilamina ou sais de piridínio ou de imidazólio, ou sais de amónio quaternário como dodecil-trimetilmetilamónio, etilpiridínio e benzetónio, assim como sais de metais alcalino-terrosos como sais de Ca ou Mg. São compostos preferidos da fórmula I. sal de tetradecassódio de l,6-bis-0-[6-metoxi-3-(2,374,576-penta-0-sulfo--D-glucit-l-ilcarbamoil)-naftalen-2-il]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol (Exemplo 20);

(pHOR)4-CH2 CH2OR

— CH2 ~(<pHOR)4 CH2OR R=S03Na sal de tetradecassódio de l,6-bis-0-[8-metoxi-3-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo- -D-glucit-1 -ilcarbamoil)-naftalen-2-il]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-ga!actitoI (Exemplo 21); CH3-0

0-CH3

(pHOR)4-CH2-NH-C CH2OR O

O-CHr (CHOR)4-CHrO 'C_NR-CH2-(<fHOR)4 o ch2or _R=S03Na sal de octadecassódio de l,6-bis-0-[4-[4-0-[3-(2,3,4,576-penta-0-sulfo-D- -glucit-l-ilcarbamoil)-naftalin-2-il]-2,3-di-0-sulfo-L-treit-l-iloxí]-fenil]-2,3,4,5-te-tra-O-sulfo-galactitol (Exemplo 50); 10 O - CHj- (CHOR)4-cH2'°

CH2-0— (ÇHOR)2

(<JHOR}4 ch2or (CHOR)2 çh2

ch2or R=S03Na sal de octadecassódio de l,6-bis-0-[3-[4-0-[3-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D- -gluCit-l-ilcarbamoil)-naftalin-2-il]-2,3-di-0-sulfo-L-treit-l-iloxi]-naftalin-2-il]-2,3, 4,5-tetra-O-sulfo-galactitol (Exemplo 54);

ÇH2-0 0-CH2-{CH0R)5-CH2-0 O —çh2 (CHOR)2 (ÇHOR)2

ch2or ch2or R=S03Na sal de octadecassódio de l,6-bis-0-[4-[(E)-2-[benzil-2,6-didesoxi-6- -(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-gluconoilamino)-3,4-di-0-a-D-glucopiranosid-2-ilcar-bamoil]-vinil]-fenil]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol (Exemplo 57); 11

°Η2-(ΟΗΟΒ)4-^Η2 ch2 or -ο NH<í=o (CHQR)4 ch2or

CH:CH I c=a I

(CHOR)4 ch2or

Bz = Benzilo R=S03Na São compostos da fórmula geral I especialmente preferidos: sal de tetradecassódio de ΐ36-όΪ5-0-[4-[2-[3-(2,3,4,5,ό-ρ6ηί3-0-5υ1ίο-0- -glucit-1 -ilcarbamoil)-etil]-fenil]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol (Exemplo 6); HN-C— (CH;^· CH2 r (<JHQR)4 ch2or - C Hz- (CHOR)r- CH2-0 ·

O (CH2)z-C-yH CH? (9HOR)4 ch2or u

R=S03Na sal de tetradecassódio de l,6-bis-0-[4-[2-[4-[3-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfò- -D-glucit-1 -ilcarbamoil)-fenil]-etil]-fenil]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol (Exemplo ii);

ch2or ch2or sal de tetradecassódio de l,6-bis-0-[3-(2,3,4,5,6-penta-O-sulfo-D-glucit--1 -ilcarbamoil)-naftalen-2-il]-2,3,4,5-tetra-O-sulfo-galactitol (Exemplo 14), 12 7>f

(CHOR)4-CH2-NH-C 0-CHr(CH0R)4-CH2-0 Ç-NH-CHítfHOR)*

CH2OR o ch2or R=S03Na sal de tetradecassódio de l,6-bis-0-[6-[3-(2,3,4,5,6-penía-O-sulfo-D-glucit-1 -ilcarbamoil)-naftalen-2-il]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol (Exemplo 16);

«JHORU ch2or (ÇMQR)4 ch2or R=S03Na sal de tetradecassódio de l,6-bis-0-[3-bifenil-4-ilmetoxi-5-(2,3,4,5,6--penta-0-sulfo-D-glucit-l-ilcarbamoil)-fenil]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol (Exemplo 17);

(CHOR)4 ch2or CH2-^CHOR)4“ CH2-0 R=S03Níl

ch2or sal de octadecassódio de l,6-bis-0-[6-[(S)-2,3-bis-sulfoxi-propoxi]-3- -(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-l-ilcarbamoil)-naftalen-2-il]-2,3,4,5-tetra-0-sul-fo-galactitol (Exemplo 22); 13

OR

(pHOR)4-CH2-NH-C O CH2OR O

CHjriCHORJ^CHz-O

OR

p-CHg-C-CHz-OR 2-«j!HOR)4 CH2OR R=S03Na sal de dodecassódio de l,6-bis-0-[3-(2,3,4,5-tetra-0-sulfo-D-arabmit-l- -iloxi)-naftalen-2-il]- 2,3,4,5-tetra-O-sulfo-galactitol (Exemplo 40); /Λ M yy (ÇH0R)4-CH2-0 a-CHjrtCHORJ^CHr-o'' O-CHg-tCHORJ* ch2or ch2or R=S03Na sal de dodecassódio de 2,3,4,5-tetra-0-sulfo-l,6-bis-0-[4-[4-(2,3,4,5-tetra--0-sulfo-D-arabinit-l-iloxi)-benzil]-fenil]-D-manitol (Exemplo 43); CH2

cH2-£>

0-CH2-(CHOR)rCHrO

(CHQR)a ch2or R=S03Na (ÇHOR)3 ch2or sal de dodecanossódio de l,6-didesoxi-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-l,6-bis-[3- -(2,3,4,5-tetra-0-sulfo-D-arabixiit-l-iloxi)-naftalen-2-ilcarbonilamino]-galactitol (Exemplo 45); 14

O C-NH-CH2-(CHOR)4-CHrNH-CH2 Ο

(ÇHORh R=S03Na (ÇHOR)3 ch2or ch2or sal de octadecassódio de l,6-bis-0-[4-[4-0-[(E)-2-(2,3,4,5,6-penta-0--sul fo-D-glucit-1 -ilcarbamoil')-vmil]-fenil]-2,3 -di-O-sulfo-D-treit-1 -i loxi] -fenil] -2,3, -4,5-tetra-O-sulfo-galactitol (Exemplo 48); -/ Vo-CH2-(CHOR)2-CH2 X=z/ λ

fH2- (CHOR)? CHr O-^^-O-CHt- (CHOR^CHrO O

CH CH II IJ CH CH 1 9=0 9=o NH NH r çh2 9h2 (<JHOR)4 R=S03Na. (ÇHOR)4 ch2or CH2OR sal de octadecassódio de 1,6-bis-0-[4-[4-0-[4-[(E)-2-(2,3,4,5,6-penta-O- -sulfo-D-glucit-l-ilcarbamoil]-vinil]-fenil]-2,3-di-0-sulfo-D-treit-l-iIoxi]-fenil]-2,3, -4,5-tetra-O-sulfo-galactitol (Exemplo 52); 15

CH

(I

CH C=0 1 N.-CH3 ch2 i (CHOR)4 ch2or

C=0 I n-ch3

Ch2 R=S03Na

I (CHOR)4 ch2or sal de octadecassódio de l,6-bis-0-[3-[benzil-2,6-didesoxi-6-(2,3,4,5,6--penta-0-sulfo-D-gluconoilamino)-3,4-di-0-sulfo-a-D-glicopiranosid-2-ilcarba-moilj-naftalen-l-il]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol (Exemplo 56);

Bz Bz ' \ o* 0 Λ ° 0 0 }~°\ HN-CH2— Vnh-c /C-NH Λ >CHrNH c=o V 1 OR (CHOR>4 \ / OR "Y -0-CH2-(CHOR)4CH2-O-^ \ W ç=o 0R 0R (Ahor)4 ch2or J çy 1 ch2or R=SOsNa Bz = Benzilo sal de octadecassódio de l,6-bis-0-[4-[2-[benzil-2,6-didesoxi-6-(2,3,4,5,6--penta-0-sulfo-D-gluconoilamino)-3,4-di-0-sulfo-a-D-glucopiranosid-2-ilcarba-moil]-etil]-fenil]- 2,3,4,5-tetra-O-sulfo-galactitol (Exemplo 58); 16 fH2-CH2

-CH — (CHOR^CHf-O

ch2-çh2c=o i C=0 i

OR CH2OR

(ÇHOR)4 ch2or R=S03Na

Bz = Benzilo sal de octadecassódio de l,6-bis-0-[6-[benzil-2,6-didesoxi-2-[3-nitro-4- -(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo4D-glucit-l-ilamino)4)enzoilarmno]-3,4-di-0-sulfo-a-D- -glucopiranosid-6-ilcarbamoil]-naftalen-2-il]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol (Exemplo 59),

0-CH2*(CHORhCHrO

02N

NH CHr(^HOR)4 ch2or R=S03Na

Bz N02

Bz = Benzilo CHj~(CHOR}4 ch2or sal de octadecassódio de l,6-bis-0-[4-[(E)-2-[benzil-2,6-didesoxi-2-[4--(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-l-illamino)-3-nitro-benzoilamino]-3,4-di-0-sul-fo-(X-D-glucopiranosid-6-ilcarbamoil]-vinil]-fenil]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol (Exemplo 61);

17 Ο ljlN-C*CH=CH

O-CHg—(CHOR^Hg-O

II

C=0 X no2 NH CH2 (ÇHOR)4 ch2or

CH=CH-C-NH

(ÇHOR)4 ch2or R=S03Na Bz = Benzil»

Os compostos definidos antes podem preparar-se fazendo reagir o correspondente composto não sulfatado com um agente de sulfatação. A sulfatação de acordo com a presente invenção pode realizar-se por meio de métodos que são em si conhecidos para a sulfatação de grupos hidroxi. Exemplos de agentes de sulfatação são complexos de S03 como S03-piridina, SCVtrimetilamina, SC>3-dioxano e S03*dimetilformamida. Outros exemplos de agentes de sulfatação são ácido clorossulfónico, misturas de ácido clorossulfónico e ácido sulfurico; e sulfato de N-piperidina. A reacção realiza-se convenientemente no seio de um dissolvente apropriado, especialmente um dissolvente polar, por exemplo dimetilformamida, dimetilsulfóxido ou hexametilfosforotriamida. A reacção pode realizar-se à temperatura ambiente ou a temperatura elevada, por exemplo a 20-70°C, em que por variação da duração da reacção e da temperatura da reacção, o grau de sulfatação pode ser influenciado. O grau de sulfatação respectivamente atingido pode ser avaliado por HPLC. Numa forma de realização preferida, mediante escolha apropriada da duração da reacção e da temperatura de realização da reacção, sulfatam-se todos ou praticamente todos os grupos hidroxi livres. O processamento da mistura reaccional ou o isolamento do produto da reacção pode realizar-se de acordo com métodos em si conhecidos, por exemplo, por filtração através de gel ou ultrafiltração. Convénientemente, a mistura reaccional antes do processamento é misturada com um dos compostos suficientemente básicos capaz de reagir para a formação de sais com os grupos de ácido sulfónico definidos antes, por exemplo, com um acetato de metal alcalino como acetato de sódio e isola-se o composto com a fórmula Ia e Ib sob a forma de sal, por exemplo sob a forma de sal de sódio.

As substâncias de partida para o processo de acordo com a presente invenção, isto é, os compostos não sulfatados que correspondem aos compostos das fórmulas Ia e Ib, podem preparar-se como se descreve nos exemplos a seguir mencionados ou em analogia com eles. As diferentes fases intermédias por meio das quais se preparam substâncias das fórmulas Ia e Ib podem geralmente preparar-se inicialmente por meio de compostos de base conhecidos ou em analogia com compostos de base facilmente obteníveis conhecidos gradualmente como se refere seguidamente.

Radicais de álcoois de açúcar, didesoxiglicopiranósidos ou o radical tris--(hidroximetil)-metilo assim como derivados de ácidos monocarboxílicos e dicarboxílicos de açúcar, as suas funções hidroxi livres ou protegidas por grupos de protecção usuais como acetonidos, metilenoacetais, éteres arilmetílicos, ésteres de alquilo ou de arilo, etc. com posições desoxidadas com a obtenção de anéis de oxirano ou com funções de ácido carboxílico podem ser fechados até obtenção de lactonas pentagonais ou hexagonais e possuir um respectivamente dois grupos funcionais apropriados para a sequência reaccional, podem ser acoplados de acordo com diferentes modalidades de acoplamento e em sequências variáveis por simultânea formação de um ou mais novos compostos por fase reaccional com unidades aromáticas funcionalizadas igualmente apropriadas Υ'-Υ9 ou com os grupos aromáticos W ou, no caso da sua falta, com outros derivados monofuncionais ou difuncionais de polióis apropriados. Antes da repetição da reacção de acoplamento, devem ser previamente preparados os grupos funcionais respectivamente necessários para a reacção de acoplamento por eliminação de um grupo de protecção como também pela redução dum grupo nitro ou por introdução de uma função de activação apropriada para a subsequente reacção de acoplamento, isto é fazem-se reagir compostos bifuncionais apenas selectivamente numa posição da função. Por repetição da reacção de acoplamento é pelo menos já obtido um composto mais complexo das unidades a acoplar que possui não só derivados de polióis mas também unidades secundárias aromáticas; eventualmente pode realizar--se a nova reacção de acoplamento também entre duas unidades secundárias aromáticas. Depois de terminar a construção do esqueleto obtêm-se os compostos prévios das fórmulas Ia e Ib, não sulfatados depois da eliminação dos grupos de protecção.

Se a reacção de acoplamento for a formação de uma ligação de amida, então esta pode formar-se fazendo reagir um componente com a função amino livre com o segundo componente com a forma de um éster alifático, de lactona, de um cloreto de ácido ou de uma função ácida activada de acordo com métodos conhecidos da química dos péptidos (anidndo misturado ou éster activo).

Se a reacção de acoplamento for a formação de uma função éter, então podem-se acoplar funções hidroxi livres num primeiro radical de açúcar com um fenol ou com um álcool benzílico ou alílico de acordo com métodos conhecidos ou sem prévia activação da função álcool de acordo com Mitsunobu (O. Mitsunobu, Synthesis 12, 1 (1981)), ou depois da activação da função álcool. Uma tal activação pode realizar-se por transformação em halogenetos ou sulfonatos de alquilo respectivamente de arilo ou por formação de um epóxido com uma função hidroxi vizinha.

Se a reacção de acoplamento for a formação de uma arilamina, então estas podem obter-se por métodos conhecidos por reacção de aminoglicitóis com compostos aromáticos activados. A construção de radicais aromáticos com sintonas que já contêm derivados de polióis - eventualmente nas funções hidroxi protegidas - pode também realizar--se por utilização de reacções que formam ligações C-C. Utilizam-se nesse caso de preferência reacções que podem realizar-se sob condições reaccionais suaves, como por meio de reacções de vinilação e de acetilenação catalisadas por compostos de paládio do tipo da reacção de “Heck” (R. F. Heck, Organic Reactions 27, 345 (1982)). A eliminação dos grupos de protecção ainda existentes em todos os casos depois da formação da cadeia realiza-se de acordo com os métodos usais gerais

Para a constituição de compostos assimétricos é especialmente apropriada a tecnologia das reacções num suporte sólido. Neste caso, liga-se uma primeira unidade de síntese por meio de uma fase lábil, por exemplo uma função amida Iábil, a uma resina convenientemente fúncionalizada. Depois da subsequente libertação de um grupo funcional apropriado por eliminação de um grupo de protecção em todos existente, pode realizar-se agora não só com uma sintona monofimcional mas também com uma sintona bifuncional em excesso selectivamente uma monorreacção. Neste caso, no composto que constitui a resina obtém-se um grupo funcional e pode seguir-se imediatamente uma outra reacção com uma segunda unidade bifuncional. Este processo pode repetir-se várias vezes. Finalmente, pode utilizar-se um derivado monofuncional de um poliol para a interrupção da cadeia. Uma reacção de acoplamento possível em que se pode utilizar este princípio é a formação de funções éter. Neste caso, podem-se utilizar as condições reaccionais mencionadas antes para a preparação de ligações de éter. Finalmente, o composto formado na resina pode ser separado por uma reacção de separação específica, por exemplo sob condições ácidas, da resina; assim, em todos os casos depois da eliminação dos grupos de protecção ainda existentes obtém-se um composto prévio não sulfatado dos compostos definidos inicialmente.

Os compostos de acordo com a presente invenção inibem a migração e a proliferação das células musculares lisas da parede dos vasos. Assim, podem ser utilizados para o tratamento e/ou para a profilaxia de doenças que se caracterizam por uma excessiva ou destrutiva proliferação das células da musculatura lisa, assim como de alterações nas paredes dos vasos provocadas por arteriosclerose, especialmente para evitar a restenose depois da angioplastia coronária ou periférica ou depois de operações de desvio (by pass). Em princípio, estas substâncias podem ser utilizadas para o tratamento e/ou a profilaxia de todas as doenças em que a migração ou a proliferação de células de músculos lisos desempenham um papel importante. 22

Ao contrário da heparina, estes compostos não têm actividade ATnt (antitrombma III) e portanto não têm qualquer efeito inibidor sobre os factores de coagulação lia e Xa. Por consequência, a sua actividade de inibição da coagulação do sangue é muito menor do que o da heparina e, por consequência, é mínimo o risco de hemorragia na terapia com estas substâncias.

Porque as proteínas que ligam heparina em diversas doenças desempenham um papel importante, as substâncias semelhantes a heparina como os compostos de acordo com a presente invenção, podem também ser utilizados adicionalmente para o tratamento destas doenças, por exemplo, por meio destas substâncias inibe-se a invasão do organismo por diferentes vírus (Herpes, HIV), a trombose arterial (vWF, adesão de plaquetas) é inibida por estas substâncias, a activação do sistema do complemento (por exemplo, no caso da reperfusão) pode ser evitada e podem ser inibidos diferentes factores de crescimento ou citoquinas (por exemplo, bFGF em tumores).

As actividades farmacológicas dos compostos de acordo com a presente invenção podem ser demonstradas por meio dos ensaios que se descrevem seguidamente:

Actividade Antiprolíferativa A actividade antiprolíferativa de uma substância é expressa por meio do valor do índice q que constitui um valor de comparação com a correspondente actividade de heparina e foi determinado nas células de cultura da seguinte maneira: células do músculo liso da ratazana foram colocadas numa chapa de cultura de células com uma densidade de 8x103 células/godé, meio: DMEM (meio de Dulbecco modificado por Eagle) com 10% de FCS (“fetal calf serum” = soro de feto de vitela); cultura a 23

37°C e 5% de C02. Depois de 4 horas, determinou-se o número de células aderidas e adicionou-se à substância a ensaiar (100 pg/ml, dissolvida em H20). Como controlo serviram a) células a que não se efectuou qualquer adição e b) células que foram misturadas com heparina (100 pg/ml). Em seguida, incubaram-se as células durante 48 h e depois determinou-se de novo o número de células. A partir destes valores determinou-se a inibição i do crescimento de células, isto é, a diminuição das taxas de crescimento das células em percentagem em comparação com o controlo. i = loo-^toc!i.100 pControlo em que a taxa de crescimento μ foi calculada como μ:

At = ϊη- [d] ^(φ [d1] em que Z é o número de células e d o tempo expresso em dias.

Finalmente calculou-se q - a actividade inibitória relativa - que é a actividade de uma substância (a 100 pg/ml) em comparação com a actividade de heparina na mesma concentração e na mesma experiência: r. = i i 1 Substância

Heparina

Inibição da coagulação do sangue A actividade de inibição de coagulação do sangue foi determinada da seguinte maneira:

Inibição da Trombina ou de Factor Xa no Ensaio do Substrato de

Cromoaénio (Teien et al. Thrombosis Research 10. 399-410 (19771): A 24

determinação realizou-se no Espectrofotómetro Automático Centrífugo Cobas-Bio. A solução tampão utilizada consistiu em 50 mM de tampão Tris, 180 mM de NaCl, 7,5 mM de EDTA-Na2, 1% de PEG 6000 e 0,02% de Tween-80, pH 8,4. A solução de ensaio consistiu em 50 μΐ de tampão, 30 μΐ de antitrombina III (lU/ml, Kabi-Diagnostica) e 20 μΐ de plasma, que continha diversas concentrações dos compostos de ensaio. Num dispositivo automático de análise, colocaram-se 30 μΐ de solução de amostra e 20 μΐ de água com 180 μΐ de trombina (lU/ml, Reagente de Trombina de Roche, Basileia) na cuvete de ensaio. Depois de 240 segundos de incubação a 37°C, adicionaram-se 60 μΐ de S-2238 (H-D-Phe-Pip-Arg-NH.pNA, Kabi Diagnostica, Mondai, Suécia, 0,75 mM em água) e 20 μΐ de água. Seguiu-se a libertação de pNA (p-nitro-anilina) durante 60 segundos a 405 nm em intervalos de 10 segundos em comparação com água como valor do branco. A acção de inibição é expressa como CIjo, isto é, como a concentração [pg/ml] à qual a actividade amidolítica de trombina dia é diluída de 50% em relação ao valor de controlo do plasma.

De igual maneira mediu-se a inibição de Factor Xa, em que se utilizou uma solução de Factor Xa (2,8 ncat/ml) e 2 mM de S-2222 (Bz-CO-Ile-Glu-Arg--NH.pNA, Kabi Diagnostica) em água em vez de trombina ou de respectivamente S--2238.

No seguinte Quadro estão indicados os dados da actividade obtidos nos ensaios descritos antes com um número representativo de compostos da fórmula I: 25

Exemplo Actividade Antiprol i ferati va Ri Actividade Antiproliferativa CI50 fUR/m1] Trombina Factor Xa 6 0,7 > 1000 > 1000 11 2,2 > 1000 > 1000 14 1,5 > 1000 >1000 16 2,1 > 1000 > 1000 17 1,5 > 1000 > 1000 22 2,1 > 1000 > 1000 40 1,4 > 1000 > 1000 43 1,3 > 1000 > 1000 45 1,4 > 1000 > 1000 48 2,7 > 1000 > 1000 52 0,8 > 1000 > 1000 56 1,7 > 1000 > 1000 58 1,8 > 1000 > 1000 59 1,8 > 1000 > 1000 61 2,4 > 1000 > 1000 Heparina 1,0 1,9 2,7

Ensaio In Vivo para a Determinação da Actividade Antiproliferativa dos Compostos de acordo com a Presente Invenção em Carótidas Feridas de Ratazanas As carótidas esquerdas de ratazanas Wistar Kyoto do sexo masculino (300 - 400g) foram feridas com um catéter de embolectomia 2F, depois de realizada a narcose, em que o catéter foi puxado três vezes através do vaso no estado cheio com ar. Depois da formação da ferida, os animais foram mantidos aos pares com alimentação usual e água ad libitum.

Os compostos foram aplicados em concentrações de 0,3 - 1 mg/kg/h i.v. Para o efeito, durante a narcose, nos animais foi implantada sob a pel das costas uma minibomba osmótica que foi ligada com a Vena jugularis. Assim os compostos puderam ser administrados constantemente durante toda a duração do ensaio de 14 dias. 26 ,/

Depois de 14 dias tinha-se formado tecido proliferativo (Neointima), cujo tamanho se determinou morfometricamente em cortes histológicos. Para isso mataram-se as ratazanas e fixaram-se por períúsão com glutaraldeído.

Area da Neointima (χΙΟ^μπη 2) 120-3

Placebo Heparina Exemplo 6 mg/Kz/h i.v. 0,3 0,3 inibição (%) 54 47 A superfície da secção transversal da Neointima em carótidas de ratazanas 14 dias depois da balonização, depois da aplicação i.v. de compostos do Exemplo 6 (0,3 mg/kg/h), estava significativamente reduzida (p<0,01, t-Teste). Com isso, o composto do o Exemplo 6 atingiu um efeito comparável ao conseguido com heparina de igual concentração (o número dos animais n é indicado na figura; valores médios ± SEM (erros quadrático padrão médio).

Os resultados dos ensaios mostram que os compostos de acordo com a presente invenção apresentam uma actividade antiproliferativa que corresponde à da heparina (ou se aproxima) ou é maior; ao contrário da heparina no entanto não apresentam nenhuma actividade anticoagulação ou então uma actividade anticoagulativa muito pequena.

Os medicamentos à base dos compostos de acordo com a presente invenção podem ser administrados entericamente, por exemplo, por via oral sob a forma de comprimidos, comprimidos revestidos, cápsulas de gelatina dura e macia, soluções, emulsões ou suspensões, ou por via reactal, por exemplo, sob a forma de supositórios. No entanto, a administração realiza-se preferentemente por via parentéruca, por exemplo, sob a forma de soluções para injecção.

Para a preparação de comprimidos, comprimidos revestidos, drageias e cápsulas de gelatina dura, a substância activa pode ser misturada com excipientes farmaceuticamente inertes, inorgânicos ou orgânicos. Como tais excipientes pode-se utilizar para comprimidos, drageias e cápsulas de gelatina dura, por exemplo, lactose, amido de milho ou os seus derivados, talco, ácido esteárico ou os seus sais. Para cápsulas de gelatina macia são apropriados como excipientes, por exemplo, óleos vegetais, ceras, gorduras, polióis semi-sólidos e líquidos; de acordo com a natureza da substância activa não são no entanto necessários excipientes principalmente nas cápsulas de gelatina macia. Para a preparação de soluções e xaropes, são apropriados como excipientes por exemplo água, polióis, sacarose, açúcar invertido e glucose, para soluções para injecções são apropriados por exemplo, água, álcoois, polióis, glicerina e óleos vegetais e para supositórios são por 28

exemplo apropriados óleos naturais ou endurecidos, ceras, gorduras e políóis semilíquidos ou líquidos.

As composições farmacêuticas podem além disso, conter ainda agentes conservantes, agentes auxiliares de dissolução, agentes estabilizantes, agente molhantes, agentes emulsionantes, agentes edulcorantes, agentes corantes, agentes aromatizantes, sais para a alteração da pressão osmótica, tampões, agentes de revestimento ou agentes antioxidantes. No caso da administração entérica, a ressorção da substância activa pode ser aumentada com o auxílio de liposomas. A dosagem da substância activa pode variar dentro de largos limites e é naturalmente escolhida de maneira a adaptar-se em cada caso particular às realidades individuais. Em geral, no caso da administração parentérica, é necessário administrar uma dose de cerca de 0,1 a 100 mg/kg, de preferência de cerca de 1,5 a 15 mg/kg, por dia para os adultos mas, em todos os casos, podem-se ultrapassar também os limites superiores acabados de referir se isto for considerado como necessário. A invenção é esclarecida mais completamente por meio dos seguintes exemplos.

Exemplo 1 A. Suspenderam-se 1,024 g de sal de dissódio do ácido 4,4’-dioxo-5,5’-(2--hidroxi-propano-l,3-diildioxi)-di-4H-l-benzopirano-2-carboxílico) (pedido de patente holandesa NL 6 603 997, Preparação de derivados de dicromamlo, Fisons Pharmaceuticals Ltd., 26 de Setembro de 1966, CA 67:100002d) em 15 ml de acetonitrilo e 5 ml de dimetilformamida e, em seguida, foram misturados com 0,5 ml de 4-metilmorfolina sob exclusão de humidade a 0-5°C e agitou-se intensamente durante 10 minutos. Em seguida, adicionou-se 0,704 g de 2-cloro-4,6-dimetoxi- -1,3,5-triazma sólida e agitou-se a 0-5°C durante mais duas horas. Em seguida, adicionou-se 0,73 g de D-glucamina seguido por 10 ml de dimetilformamida e agitou-se à temperatura ambiente durante mais 18 horas. Em seguida, diluiu-se a mistura reaccional várias vezes com água e evaporou-se à secura várias vezes sob pressão reduzida a 40-50°C e misturou-se o resíduo com 20 ml de piridina e 20 ml de anidrido acético e agitou-se à temperatura ambiente durante mais 60 horas. Em seguida, concentrou-se novamente esta mistura reaccional, misturou-se com água gelada e ácido clorídrico 1 N e extraiu-se com cloreto de metileno. As fases de cloreto de metileno foram secas sobre sulfato de magnésio depois de reunidas, concentradas e cromatografadas com acetato de etilo em gel de sílica. A fracção que contém o produto assim obtida foi dissolvida em 11 ml de metanol e 3 ml de tetra-hidrofurano e misturada com 0,75 ml de solução de metilato de sódio 1 molar em metanol. Agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante 2 horas. Separou-se por filtração o precipitado assim formado, lavou-se com metanol e éter e secou-se. Obteve-se assim D-glucit-l-ilamida do ácido 5-[2-hidroxi-3-[2-(D-glucit--1 -ilcarbamoil)-4-oxo-4H-1 -benzopiran-5-iloxi]-propoxi]-4-oxo-4H-1 -benzopirano-2-carboxílico sob a forma de pó incolor, MS: m/z 795,4 ([M+H]"). B. Agitou-se a 70°C durante 18 horas uma suspensão de 3,2 g D-glucit-1--ilamida de ácido 5-[2-hidroxi-3-[2-(D-glucit-l-ilcarbamoil)-4-oxo-4H-l-benzopira-no-5-iloxi]-propoxi]-4-oxo-4H-l-benzopirano-2-carboxílico e 12,0 g de complexo trióxido de enxofre-trietilamina em 40 ml de dimetilformamida absoluta. Depois de se arrefecer, misturou-se com 10 g de acetato de sódio e 50 ml de água, evaporou-se à secura, evaporou-se várias vezes com água e evaporou-se novamente. O resíduo assim obtido foi suspenso em 300 ml de metanol absoluto e misturou-se 30

intensamente. Separou-se por filtração o resíduo insolúvel, secou-se em vácuo, depois retomou-se em água e cromatografou-se em SP Sephadex® C-25. As fracções do produto isentas de sulfato de sódio foram liofilizadas e obteve-se o sal de undecasódio da 2,3,4,5,6-penta-O-sulfo-D-glucit-l-ilamida do ácido 4-oxo-5-[3--[4-oxo-2-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-l-ilcarbamoil)-4H-l-benzopiran-5-ilo-xi]-2-sulfoxi-propoxi]-4H-l-benzopirano-2-car-boxílico, [a]p -4,8° (c 0,6; água).

Exemplo 2 A. Agitaram-se 184 mg de cloreto de cianurato, 543,5 mg de D-glucamina e 450 mg de carbonato de potássio em 10 ml de água à temperatura ambiente durante 3 dias. O produto bruto assim obtido foi em seguida cromatografado em gel de sílica LiChroprep RP-18 com água e em seguida com água com uma proporção crescente de metanol. Liofilizaram-se as fracções relevantes; obteve-se assim N,N’,N”-(1,3,5--triazino-2,4,6-triil)-tns-(l-amino-l-desoxí-D-glucitol) como pó incolor, MS: mz 619,2 ([M+H]'). B. De maneira análoga à descrita no Exemplo l.B. fez-se reagir ο Ν,Ν’,Ν”--(l,3,5-triazino-2,4,6-triil)-tns-(l-amino-l-desoxi-D-glucitol) de maneira a obter-se o sal de pentadecassódio de N,N,,N”-(l,3,5-triazino-2,4,6-triil)-tris-(l-amino-l--desoxi-2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucitol), [α]ο°-1,40 (c 0,9; água), MS: mz 2126,0 (M reconstruído), (sal de tetradecassódio do ácido monossulfónico).

Exemplo 3 A. Suspenderam-se em 30 ml de dimetilformamida 2,5 g de 2,3:4,5-di-0--isopropilideno-l,6-bis-0-(4-metil-fenilsulfonil)-galactitol (E.P. 56575 Al, Bayer AG/CA 98(7) (1982):54399d), 2,4 g de (E)-3-(4-hidroxi-fenil)-acrilato de metilo e 31 1,85 g de carbonato de potássio isento de água finamente moído e sob atmosfera de árgon agitou-se durante 18 horas a 130°C. Em seguida, diluiu-se a mistura reaccional com água. Separaram-se por filtração os cristais formados e, em seguida, cromatografou-se com 5% de éter em cloreto de metileno, em gel de sílica. Obteve--se assim 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-1,6-bis-0-[(E)-4-(2-metoxicarbonil-vinil)--fenilj-galactitol com a forma de cristais incolores. MS: m/z 582 ([ΜΓ). B. Aqueceram-se a refluxo a 110°C durante 18 horas 1,89 g de 2,3:4,5-di-0--isopropilideno-l,6-bis-0-[(E)-4-(2-metoxicarbonil-vinil)-fenil]-galactitol, 30 ml de metanol e 30 ml de solução aquosa concentrada de hidróxido de sódio. Em seguida, destilou-se a maior parte do metanol sob pressão reduzida. Diluiu-se o resíduo com água com gelo e acidulou-se com ácido clorídrico aquoso IN. Separaram-se por filtração os cristais assim formados e obteve-se l,6-bis-0-[4-[(E)-2-carboxi-vinil]--fenil]-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galactitol com a forma de cristais incolores, MS: m/z 554 ([M]“). C. Sob exclusão de humidade, a 0-5°C, misturou-se 0,28 g de l,6,-bis-0-[4--[(E)-2-carboxi-vinil]-fenil]-2,3,4,5-di-0-isopropilideno-galactitol em 5 ml de dimetilformamida com 0,1 ml de 4-metilmorfolina e agitou-se intensamente duraqte 10 minutos. Em seguida, adicionou-se 0,20 g de 2-cloro-4,6-dimetoxi-l,3,5-triazina sólida e agitou-se a 0-5°C durante mais 2 horas. Em seguida, adicionou-se 0,19 g de D-glucamina e agitou-se à temperatura ambiente durante mais 18 horas. Em seguida, diluiu-se a mistura reaccional várias vezes com água e evaporou-se sob pressêjo reduzida a 40-50°C, misturou-se com 6 ml de água e 0,5 ml de trietilamina, aqueceu-se e filtrou-se; nestas condições, obteve-se l,6-bis-[4-[(E)-2-D-glucit-l- 0 32 -ilcarbamoil-vinil]-fenil]-2,3;4,5-di-0-isopropilideno-galactitol como pó incolor, MS: mz 619,2 ([M+HD- D. Suspendeu-se 1,0 g de l,6-bis-[4-[(E)-D-glucit-l-ilcarbamoil-vinil]-fenil--2,3,4,5-di-O-isopropilideno-galactitoI em 17 ml de dioxano, 2 ml de ácido trifluoracético e 5 ml de água e aqueceu-se a 110°C sob refluxo durante 4 horas. Concentrou-se a mistura reaccíonal à secura; nestas condições resultou l,6-bis-[(E)--4-(2-D-glucit-l-ilcarbamoil-vinil)-fenil]-galactitoI como sólido incolor, que foi utilizado directamente na fase operatória seguinte. E. Analogamente ao Exemplo I.B., fez-se reagir l,6-bis-[(E)-4-(2-D-glucit-l--ilcarbamoil-vinil)-fenil]-galactitol obtido na fase operacional anterior, de maneira a obter-se o de sal de tetradecassódio de I,6-bis-[4-[(E)-2-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D--glucit-l-ilcarbamoil)-vinil]-fenil]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol, [a]^0 -1,7° (c 0,7; água), MS: mz 2229,0 (M reconstruída).

Exemplo 4 A. Misturaram-se 0,69 g de 4,-hidroxi-bifenil-4-carboxilato de metilo e 0,44 g de carbonato de potássio finamente moído em 2,5 ml de dimetilformamida com 0,54 g de 3,4-0-metoximetileno-2,5-0-metileno-l ,6,-bis-0-(4-metil-fenilsulfonil)--D-manitol (B. Lamm et al., Acta Chem. Scand. B 41, 202 (1987). Agitou-se a mistura reaccíonal a 130°C durante 18 horas sob atmosfera de árgon. Em seguida, despejou-se a mistura reaccíonal em água. Separou-se por filtração o precipitado formado e cromatografou-se com cloreto de metileno/metanol em gel de sílica, Resultou assim 1,6-bis-0-(4’-metoxicarbonil-bifenil-4-il)-3,4-0-metoxi-metileno--2,5-O-metileno-D-manitol como sólido incolor, MS: m z 656 ([M]"). 33 7% Β.

Misturou-se 1,0 g de l,6-bis-0-(4’-metoxicarbonil-bifenil-4-il)-3,4-O--metoxi-metileno-2,5-0-metileno-D-manitol, dissolvido em 20 ml de metanol, com 6 ml de ácido sulfurico concentrado e aqueceu-se sob refluxo durante 16 horas. Em seguida, despejou-se a mistura reaccional sobre água e separou-se por filtração os cristais precipitados. Resultou dessa forma I,6-bis-0-(4’-metoxicarbonil-bifenil-4--il)-2,5-0-metileno-D-manitol como sólido incolor, MS: miz 614 ([M]*). C. Em 15 ml de solução concentrada de hidróxido de sódio e 15 ml de metanol, aqueceu-se a refluxo durante 16 horas 0,67 g de l,6-bis-0-(4’-metoxicarbonil--bifeniI-4-il)-2,5-0-metileno-D-manitol; em seguida, evaporou-se à secura, acidulou-se com ácido clorídrico diluído. O precipitado assim formado de 1,6-bis-O--(4,-carboxi-bifenil-4-il)-2,5-0-metileno-D-manitol foi separado por filtração, dissolvido em 5 ml de anidrido acético e 5 ml de piridina e agitou-se à temperatura ambiente durante 16 horas. Então foi novamente evaporado à secura, despejado em ácido clorídrico diluído e filtrado; resultou assim 3,4-di-0-acetilo-l,6-bis-0-(4’--carboxi-bifenil-4-il)-2,5-0-metileno-D-manitol com a forma de cristais incolores, MS: m z 669,4 ([M-H]'). D. Sob exclusão de humidade, misturou-se 0,78 g de 3,4-di-O-acetilo-l ,6-bis-O--(4’-carboxi-bifenil-4-il)-2,5-0-metileno-D-manitol em 15 ml de dimetilformamida a 0-5°C com 0,26 ml de 4-metilmorfolina e agitou-se intensamente durante 10 minutos. Em seguida adicionou-se 0,47 g de 2-cloro-4,6-dimetoxi-3,5-triazina e agitou-se a mistura reaccional durante mais 2 horas a 0-5°C. Em seguida, adicionou--se 0,49 g de D-glucamina e agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante mais 18 horas. Em seguida, diluiu-se várias vezes com água e evaporou-se a 40-50°C sob pressão diminuída, misturou-se com 15 ml de piridina e 15 ml de 34

anidrído acético e agitou-se durante mais 18 horas. Em seguida, concentrou-se de novo a mistura reaccional, misturou-se com água com gelo e ácido clorídrico I N. Separou-se por filtração o precipitado assim obtido, dissolveu-se em cloreto de metileno, lavou-se com água, secou-se sobre sulfato de magnésio, concentrou-se e cromatografou-se em gel de sílica com cloreto de metileno/metanol. Resultou assim 3,4-di-0-acetil-l,6-bis-[4’-(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-D-glucit-l-ilcarbamoil)-bifenil--4-il]-2,5-0-metileno-D-manitol como sólido incolor, MS: mz 1417,4 ([M+H]~). E. Dissolveram-se 1,2 g de 3,4-di-0-acetil-l,6-bis-[4’-(2,3,4,5,6-penta-0-acetil--D-glucit-l-ilcarbamoil)-bifenil-4-il]-2,5-0-metileno-D-manitol em 25 ml de metanol e 5 ml de tetra-hidrofurano e misturaram-se com 1,2 ml de solução de metilato de sódio 1 molar em metanol. Agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante 2,5 horas. Separou-se por filtração o precipitado assim formado e lavou-se com metanol. Obteve-se assim l,6-bis-0-(4’-D-glucit-l-ilcarbamoil--bifenil-4-il)-2,5-0-metileno-D-manitol com a forma de cristais incolores e utilizou--se directamente na fase reaccional seguinte. F. O 1,6-bis-0-(4,-D-glucit-l-ilcarbamoil-bifenil-4-il)-2,5-0-metileno-D-mani-tol obtido na fase operacional anterior foi feito reagir analogamente ao Exemplo 1 B. para se obter um sal de dodecanossódio de 1,6-bis-[4’-(2,3,4,5,6-penta-O-sulfo-D--glucit-1 -ilcarbamoil)-bifeml-4-il]-2,5-0-metileno-3,4-di-0-sulfo-D-mamtol, [a]p -7,6° (c 0,7; água), MS: mz 2137,0 (M reconstruído).

Exemplo 5 A. Misturaram-se 2,92 g de 4,-hidroxi-bifenil-4-carboxilato de metilo e 1,77 g de carbonato de potássio finamente moído, suspensos em 25 ml de dimetilformamida, com 2,0 g de 2,3-0-isopropílideno-l,4-bis-0-(4-metil-fenilsulfo- 35

nil)-L-treitol. Agitou-se a mistura reaccional a 130°C durante 18 horas sob atmosfera de árgon. Em seguida, despejou-se a solução reaccional em água com gelo, separou-se por filtração o precipitado formado e cromatografou-se em gel de sílica com cloreto de metileno/metanol. Resultou assim 2,3-0-isopropilideno-l,4-bis-0-(4’-metoxicarbo-nil-bifenil-4-il)-L-treitol como sólido incolor, MS: m z 582 mn B. Aqueceram-se a refluxo durante 18 horas 1,77 g de 2,3-0-isopropilideno-l,4--bis-0-(4’-metoxicarbonil-bifenil-4-il)-L-treitol em 40 ml de metanol e 40 ml de solução concentrada de hidróxido de sódio. Em seguida, eliminou-se o metanol por destilação. O resíduo foi misturado com água com gelo, acidulou-se e separou-se por filtração o precipitado formado; obteve-se assim l,4-bis-0-(4’-carboxi-bifenil-4-il)--2,3-O-isopropilideno-L-treitol como sólido incolor, MS: m/z 554 ([M]~). C. Sob exclusão de humidade, misturaram-se 1,5 g de l,4-bis-0-(4’-carboxi--bifenil-4-il)-2,3-0-isopropilideno-L-treitol em 30 ml de dimetilformamida com 0,6 ml de 4-metilmorfolina a 0-5°C e agitou-se intensamente durante 10 minutos. Em seguida, adicionaram-se 1,04 g de 2-cloro-4,6-dimetoxi-l,3,5-triazina sólida e agitou-se a 0-5°C durante mais 2 horas. Em seguida, adicionaram-se 1,07 g de D-glucamina e agitou-se à temperatura ambiente durante mais 18 horas. Diluiu-se a mistura reaccional com água várias vezes e evaporou-se à secura a 40-50°C sob pressão reduzida, misturou-se com 1 ml de trietilamina e 5 ml de água, aqueceu-se à ebulição durante um curto intervalo de tempo e separou-se por filtração o precipitado insolúvel. Nestas condições, resultou l,4-bis-0~(4’-D-glucit-l--ilcarbamoil-bifenil-4-il)-2,3-0-isopropilideno-L-treitol como sólido incolor, MS: m.jr 881,2 (JM+H]'). D. Suspendeu-se 1,0 g de l,4-bis-0-(4’-D-glucit-l-ilcarbamoil-bifenil-4-il)-2,3--O-isopropilideno-L-treitol em 15 ml de dioxano, 1,5 ml de ácido trifluoracético e 5 ml de água e aqueceu-se a refluxo a 110°C durante 4 horas. Em seguida, concentrou--se a mistura reaccional à secura. Nestas condições resultou l,4-bis-0-(4’-D-glucit--l-ilcarbamoil-bifenil-4-il)-L-treitol como sólido incolor, MS: m z 841,2 ([M+H]'). E. O l,4-bis-0-(4,-D-glucit-l-ilcarbamoil-bifenil-4-il)-L-treitol, obtido como se mencionou na alínea anterior, foi transformado analogamente ao Exemplo l.B. no sal de dodecassódio de l,4-bis-0-[4-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-l-ilcarba-moil)-bifenil-4-il]-2,3-di-0-sulfo-L-treitol, [a)^° +0,85° (c 0,7; água), MS: mz 2065,0 (M reconstruído).

Exemplo 6 A. Hidrogenou-se completamente 0,6 g de sal de tetradecassódio de 1,6-bis-O--[4-[(E)-2-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-gIucit-l-ilcarbamoil)-vinil]-feniI]-2,3,4,5-te-tra-O-sulfo-galactitol (Exemplo 3.E.) em 9 ml de água destilada com adição de 80 mg de paládio sobre carvão (10%) numa atmosfera de hidrogénio. Em seguida filtrou-se a mistura reaccional através de um filtrou de celulose de 0,8 μ e liofilizou--se o filtrado; nestas condições, obteve-se o sal de tetradeca-sódio de I,6-bis-0-[4--[2-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-l-ilcarbamoil)-etil]-fenil]-2,3,4,5-tetra-O-sul- fo-galactitol, [a]^ -3,2° (c 0,7; água), MS: m z 2233,0 (M reconstruído).

Exemplo 7 A. Em 30 ml de dimetilformamida suspenderam-se 2,0 g de 2,3-0--isopropilideno-l,4-bis-0-(4-metil-fenilsulfonil)-L-treitol, 2,3 g de (E)-3-(4-hidroxi--fenil)-acrilato de metilo e 1,77 g de carbonato de potássio isento de água fmamente 37

moído. Agitou-se a mistura reaccional durante 18 horas a 130°C sob atmosfera de árgon. Em seguida diluiu-se a mistura reaccional com água e extraiu-se com cloreto i de metileno. Secaram-se sobre sulfato de magnésio as fases de cloreto de metileno depois de reunidas e concentraram-se. Cromatografou-se o resíduo com 5% de éter em cloreto de metileno em gel de sílica. Obteve-se assim 2,3-0-isopropilideno-l,4--bis-[4-[(E)-2-metoxicarbonil-vinil]-fenil]-L-treitol sob a forma de cristais incolores, MS: m z 483 ([M]T). B. Agitaram-se à temperatura ambiente durante 70 horas 0,24 g de 2,3-0--isopropilideno-l,4-bis-[4-[(E)-2-metoxicarbonil-vinil]-fenil]-L-treitol em 2 ml de acetonitrilo e 3 ml de solução de hidróxido de sódio 2 N. Em seguida, destilou-se o acetonitrilo. Misturou-se o resíduo com água com gelo, acidulou-se e separou-se por filtração o precipitado formado. Nessas condições, obteve-se l,4-0-bis-[4-[(E)-2--carboxi-vmil]-fenil]-2,3-0-isopropilideno-L-treitol sob a forma de um sólido incolor, MS: m/z 454 ([M]~). C. Sob exclusão de humidade a 0-5°C misturou-se 1,0 g de 1,4-0-bis-[4-(E)-2--carboxi-vinil]-fenil]-2,3-0-isopropilideno-L-treitol em 20 ml de dimetilformamida com 0,5 ml de 4-metilmorfolina durante 10 minutos adicionou-se 0,85 g de 2-cloro--4,6-dimetoxi-l,3,5-triazina sólida e agitou-se a 0-5°C durante mais 2 horas. Em seguida, adicionou-se 0,87 g de D-glucamina e agitou-se à temperatura ambiepte durante mais 18 horas. Em seguida, a mistura reaccional foi diluída várias vezes com água e evaporada sob pressão reduzida a 40-50°C, misturou-se com 17 ml de í piridina e 17 ml de anidrido acético e agitou-se durante mais 18 horas. Em seguida, concentrou-se novamente à secura a mistura reaccional, místurou-se com água com gelo e ácido clorídrico 1 N e extraiu-se com cloreto de metileno. As fases de cloreto 38 7% de metileno depois de reunidas foram secas sobre sulfato de magnésio, concentradas e cromatografadas em gel de sílica com cloreto de metileno/metanol. A fracção que continha o produto foi dissolvida em 30 ml de metanol e 7 ml de tetra-hidrofurano, misturada com 2 ml de solução 1 molar de metilato de sódio e agitou-se à temperatura ambiente durante 18 horas. 0 precipitado assim formado foi separado por filtração após adição de um pequeno volume de ácido acético e destilação parcial do metanol. Resultou dessa forma l,4-bis-0-[4-[(E)-2-D-glucit-l--ilcarbamoil-vinil]-fenil]-2,3-0-isopropilideno-L-treitol como sólido incolor, MS: mz 781,5 ([Μ+ΗΓ). D. Suspendeu-se 0,33 g de l,4-bis-0-[4-[(E)-2-D-glucit-l-ilcarbamoil-vmil]--fenil]-2,3-0-isopropilideno-L-treitol em 5 ml de dioxano, 1 ml de ácido trifluoracético e 1,5 ml de água e aqueceu-se durante 1,5 horas a 110°C sob refluxo.

Em seguida, concentrou-se a mistura reaccional à secura Nestas condições, resultou l,4-bis-0-[4-[(E)-2-D-glucit-l-ilcarbamoil-vinil]-fenil]-L-treitol como sólido incolor, MS: m z 741,6 ([M+Hf). E. Fez-se reagir l,4-bis-0-[4-[(E)-2-D-glucit-l-ilcarbamoil-viníl]-fenil]-L-trei-tol de maneira análoga à descrita no Exemplo l.B. com a obtenção do sal de dodecassódio de 1,4-bis-0-[4-[(E)-2-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-1 -ílcarba- moil)-vinil]-fenil]-2,3-di-0-sulfo-L-treitol, [a]^° -0,86° (c 0,7; água), MS: mz 1966,0 (M reconstruído).

Exemplo 8 A. 0,2 g de sal de dodecassódio de 1,4-bis-0-[4-[(E)-2-(2,3,4,5,6-penta-O-suIfo- D-glucit-1 -ilcarbamoil-vinil]-fenil]-2,3-di-0-sulfo-L-treitol foi hidrogenado completamente em 10 ml de água destilada sob adição de 40 mg de paládio sobre 39

carvão (10%) numa atmosfera de hidrogénio. Em seguida, filtrou-se a mistura reaccional através de um filtro de celulose de 0,8 μ e liofilizou-se o filtrado; nestas condições, obteve-se o sal de dodecassódio de l,4-bis-0-[4-[2-(2,3,4,5,6-penta-O--sulfo-D-glucit-l-ilcarbamoíl)-etil]-fenil]-di-0-sulfo-L-treitol, [a]“-0,17° (c 0,6; água), MS: m z 1970,0 (M reconstruído).

Exemplo 9 A. Misturou-se uma solução de 4,91 g de brometo de (4-metoxicarbonil-benzil)--trifenil-fosfónio em 50 ml de tetra-hidrofurano sob exclusão de humidade e sob atmosfera de árgon a 0-5°C com 1,91 g de 4-benziloxi-benzaldeído e, em seguida, misturou-se lentamente com 10 ml de solução de metilato de sódio 1 N em metanol. Depois de 30 minutos de agitação à temperatura ambiente, filtrou-se a mistura reaccional através de Dicalit, concentrou-se e cromatografou-se em gel de sílica com hexano/acetato de etilo (3:1. Obteve-se assim (Z)-4-[2-(4-benziloxi-fenil)-vinil]--benzoato de metilo como um sólido amarelado, MS: m z 344 ([M]’). B. Hidrogenaram-se completamente 1,5 g de (Z)-4-[2-[(2-benziloxi-fenil)-- vinil]-benzoato de metilo em 20 ml de metanol e 20 ml de acetato de etilo com adição de 150 mg de paládio sobre carvão (10%) numa atmosfera de hidrogénio. Em seguida filtrou-se a mistura reaccional através de um filtro de celulose de 0,8 μ e concentrou-se o filtrado; obteve-se assim 4-[2-(4-hidroxi-fenil)-etil]-benzoato de metilo como sólido incolor, MS: m z 256 ([M]~). C. Suspendeu-se 0,71 g de 2,3-0-isopropilideno-l,4-bis-0-(4-metil-fenilsulfo-nil)-L-treitol, 1,0 g de 4-[2-(4-hidroxi-fenil)-etil]-benzoato de metilo e 0,54 g de carbonato de potássio isento de água finamente moído em 20 ml de dimetilformamida e agitou-se durante 18 horas a 130°C sob atmosfera de árgon. Em seguida, diluiu-se a mistura reaccional com água e extraiu-se com acetato de etilo. Secaram-se sobre sulfato de magnésio as fases de acetato de etilo depois de reunidas e concentrou-se. Cromatografou-se o resíduo em gel de sílica com 5% de éter em cloreto de metileno. Obteve-se assim 2,3-0-isopropilideno-l,4-bis-0-[4-[2-(4--metoxicarbonil-fenil)-etil]-fenil]-L-treitol sob a forma de cristais incolores, MS: m/z 638 ([Μ]'). D. Agitou-se a refluxo durante 18 horas 0,7 g de 2,3-0-isopropilideno-l,4-bis--0-[4-[2-(4-metoxicarbonil-fenil)-etil]-fenil]-L-treitol em 20 ml de metanol e 20 ml de solução concentrada de hidróxido de sódio. Em seguida, separou-se o metanol por destilação. Misturou-se o resíduo com água com gelo, acidulou-se com ácido clorídrico diluído e separou-se o filtrado por filtração; obteve-se assim l,4-bis-0-[4--[2-(4-carboxi-fenil)-etil]-fenil]-2,3-0-isopropilideno-L-treitol como sólido incolor, MS: m z 609,4 ([Μ-ψ). E. Sob exclusão de humidade, a 0-5°C misturou-se 0,52 g de 1,4-bis-0-[4-[2-(4--carboxi-fenil)-etil]-fenil]-2,3-0-isopropilideno-L-treitol em 10 ml de dimetilformamida com 0,21 ml de 4-metilmorfolina e agitou-se intensamente durante 10 minutos. Em seguida, adicionou-se 0,33 g de 2-cloro-4,6-dimetoxi-l,3,5-triazina sólida e agitou-se a 0-5°C durante mais 2 horas. Em seguida, adicionou-se 0,34 g de D--glucamina e agitou-se à temperatura ambiente durante mais 18 horas. Em seguida, diluiu-se a mistura reaccional com água concentrou-se, misturou-se com 10 ml de água e 0,5 ml de trietilamina, aqueceu-se à ebulição durante um curto intervalo de tempo e filtrou-se. O resíduo assim obtido foi agitado em 20 ml de metanol e 20 ml de cloreto de metileno e novamente filtrado. Resultou assim l,4-bis-0-[4-[2-(4-D- 41

-glucit-1 -ilcarbamoil-fenil)-etil]-fenil]-2,3-isopropilideno-L-treitoI como sólido incolor, MS: m z 959,6 ([M+Na]"). F. Suspendeu-se 0,52 g de l,4-bis-0-[4-[2-(4-D-glucit-l-ilcarbamoil-fenil)--etil]-2,3-0-isopropilideno-L-treitol em 7 ml de dioxano, 2 ml de ácido trifluoracético e 3 ml de água e aqueceu-se a refluxo a 110°C durante 18 horas. Em seguida, concentrou-se a mistura reaccional à secura, misturou-se com 6 ml de anidrido acético e 6 ml de piridina e agitou-se à temperatura ambiente durante 18 horas. Em seguida, concentrou-se novamente a mistura reaccional à secura e misturou-se com água com gelo e ácido clorídrico 1 N. Separou-se por filtração o precipitado assim formado e cromatografou-se em gel de sílica com cloreto de metileno/metanol. Nestas condições, resultou 2,3-di-0-acetil-l,4-bis-0-[4-[2-[4--(2,3,4,5,6-penta-O-acetil-D-glucit-1 -ilcarbamoil-fenil]-etil]-fenil]-L-treitol como sólido incolor, MS: mz 1424,9 ([M+Na]+). G. Dissolveu-se 0,36 g de 2,3-di-0-acetíl-l,4-bis-0-[4-[2-[4-(2,3,4,5,6-penta--0-acetil-D-glucit-l-ilcarbamoil)-fenil]-etil]-fenil-L-treitol em 5 ml de metanol e 5 ml de tetra-hidrofiirano, misturou-se com 0,4 ml de solução 1 molar de metilato de sódio em metanol e agitou-se à temperatura ambiente durante 18 horas. Separou-se por filtração o precipitado assim formado. Resultou l,4-bis-0-[4-[2-(4-D-glucit-l--ilcarbamoil-fenil)-etil]-fenil-L-treitol como sólido incolor, MS: mz 919,3 ([M+Na]'). H. De maneira análoga ao Exemplo I.B., fez-se reagir o l,4-bis-0-[4-[2-(4-D- -glucit-l-ilcarbamoil-fenil)-etil]-fenil]-L-treitol de maneira a obter-se o sal de dodecassódio de 1,4-bis-0-[4-[4-[4-(2,3,4,5,6-penta-O-sulfo-D-glucit-1 -ilcarba-moil)-fenil]-etil]-fenil]-2,3-di-0-sulfo-L-treitol, [a]^° -0,57° (c 0,7; água). 42

Exemplo 10 A. Analogamente ao Exemplo 5. A. -D., a partir de 4’-hidroxi-bifeniI-4- carboxi-lato de metilo e de 2,3-0-isopropilideno-l,4-bis-0-(4-metil-fenil-sulfoniI)-D-treitol em vez de 2,3-0-isopropilideno-l,4-bis-0-(4-metil-feniIsulfonil)-L-treitol obtevç-se passando pelos seguintes produtos intermediários 2.3- O-isopropilídeno-l ,4-bis-0-(4’-metoxicarbonil-bifenil-4-il)-D-treitol, sólido incolor, MS: m z 582 ([M]~); 1.4- bis-0-(4’-carboxi-fenil-4-il)-2,3-0-isopropilideno-D-treitol, sólido incolor, MS: mz 553,5 ([M-H]'); 1.4- bis-0-(4’-D-glucit-ilcarbamoil-bifenil-4-il)-2,3-0-isopropilideno-D-treitol, sólido incolor, MS: m z 881,5 ([M+H]’); 1.4- bis-0-(4’-D-glucit-í-ilcarbamoil-bifenil-4-il)-D-treitol como sólido incolor, MS: m z 864,6 ([M+Na]'). B. Analogamente ao Exemplo I.B., fez-se reagir 1,4-bis-0-(4’-D-glucit-1 -ilcar-bamoil-bifenil-4-il)-D-treitol de modo a obter-se o sal de dodecassódio de 1,4-bis-O--[4-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-l-ilcarbamoil)-bifenil-4-il]-2,3-di-0-sulfo-D--treitol, [α]ρ -9,8° (c 0,8; água), MS: m z 2066,0 (M reconstruído).

Exemplo 11 A. De maneira análoga ao Exemplo 9.C. - 9.G., a partir de 4-[2-(4-hidroxi--fenil)-etil]-benzoato de metilo e de 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis-0-(4-metil-fenilsulfonil)-galactiol em vez de 2,3-0-isopropilideno-l,4-bis-O-(4-metíl-fenilsulfonil)-L-treitol obteve-se passando pelas seguintes fases operacionais intermediárias: 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis-0-[4-[2-(4-metoxicarbonil-fenil)-etil]-fenil]-ga-lactitol, sólido incolor, MS: m/z 738 ([M]*); 1.6- bis-0-[4-[2-(4-carboxi-fenil)-etil]-fenil]-2,3,4,5-di-0-isopropilideno-galactitol, sólido incolor, MS: m/z 709,4 ([M-H]'); 1.6- bis-0-[4-[2-(4-D-glucit-ilcarbamoil-fenil)-etil]-feniI]-2,3,4,5-di-0-isopropílide-no-galactitol, sólido incolor, MS: m/z 1037,6 ([M+H]~); 2,3,4,5-tetra-O-acetil-1,6-bis-0-[4-[2-[4-(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-D-glucit-1-ilcar-bamoil)-fenil]-etil]-fenil]-galactitol, sólido incolor MS: m z 773,8 ([M+2H]2’); 1.6- bis-0-[4-[2-(4-D-glucit-l-ilcarbamoil-fenil)-etil]-fenil]-galactitol como sólido incolor, MS: m z 979,5 ([M+Na]"). B. Analogamente ao Exemplo I.B., fez-se reagir o l,6-bis-0-[4-[2-(4-D-glucit--l-ilcarbamoil-fenil)-etíl]-fenil]-galactitol obtido na fase anterior de maneira a obter--se o sal de tetradecassódio de l,6-bis-0-[4-[2-[4-(2,3,4,5,6-penta-O-sulfo-D--glucit-l-ilcarbamoil)-fenil]-etil]-fenil]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-gaIactitol, [a]jj0 -3,3° (c 0,6; água), MS: m/z 2385,0 (M reconstruído).

Exemplo 12 A. Suspenderam-se 1,33 g de 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis-0-(4-metiI- -fenilsulfonil)-galactitol, 1,6 g de 4,-hidroxi-bifenil-4-carboxilato de metilo e 0,97 g de carbonato de potássio isento de água finamente moído em 20 ml de dimetilformamida e agitou-se a 130°C sob atmosfera de árgon durante 18 horas. Em seguida, diluiu-se a mistura reaccional com água e separaram-se por filtração os cristais assim formados. Obteve-se assim 2,3:4,5-di-O-isopropilideno- Uó-bis^--metoxicarbonil-bifenil-4-il)-galactitoI sob a forma de cristais incolores, MS. m z B. Aqueceu-se a refluxo a 110°C durante 18 horas 1,2 g de 2,3,4,5-di-O-isopropilideno-l,6-bis-(4’-metoxicarbonil-bifenil-4-il)-galactitol, 25 ml de metanol e 25 ml de lixívia aquosa de hidróxido de sódio concentrada. Em seguida, separou-se por filtração a maior parte do metanol sob pressão reduzida, diluiu-se o resíduo com água gelada, acidulou-se com ácido clorídrico aquoso e separaram-se por filtração os cristais assim formados. Obteve-se assim I,6-bis-(4’-carboxi-bifenil-4-il)-2,3:4,5-di--O-isopropilideno-galactitol com a forma de cristais incolores, MS: m z 653,5 ([M-H]-)- C. Suspendeu-se 1,0 g de l,6-bis-(4’-carboxi-bifenil-4-il)-2,3:4,5-di-0-isopropi-lideno-galactitol em 17 ml de dioxano, 4 ml de ácido trifluoracético e 5 ml de água e aqueceu-se a refluxo a 110°C durante 17 horas. Em seguida, concentrou-se a mistura reaccional, misturou-se com metanol e filtrou-se. Nestas condições, resultou 1,6-bis--(4,-carboxi-bifenil-4-il)-galactitol com a forma de sólido incolor, análise elementar calculada para C32H3oOioxO,31H20: C=66,25%, H=5,32%; determinada: C=66,12%, H=5,24%. D. Agitou-se a 100°C durante 5 horas 0,8 g de l,6-bis-(4’-carboxi-bifenil-4-il)-galactitol numa mistura de 20 ml de anidrido acético e 20 ml de piridina. Em seguida, concentrou-se a mistura reaccional à secura, misturou-se com água com gelo e ácido clorídrico diluído e separou-se por filtração precipitado assim formado. Dessa forma, resultou 2,3,4,5-tetra-0-acetil-l,6-bis-0-(4’-carboxi-bifenil-4-il)-galactitol sob a forma de sólido incolor, MS: m z 741,4 ([M-H]'). E. Sob exclusão de humidade, misturou-se 0,84 g de 2,3,4,5-tetra-0-acetil-l,6--bis-0-(4,-carboxi-bifenil-4-il)-galactitol em 20 ml de dimetilformamida a 0-5°C com 0,3 ml de 4-metilmorfolína e agitou-se intensamente durante 10 minutos. Em seguida, adicionou-se 0,44 g de 2-cloro-4,6-dimetoxi-l,3,5-triazina sólida e agitou--se a 0-5°C durante mais 2 horas. Em seguida, adicionou-se 0,45 g de D-glucamina e agitou-se à temperatura ambiente durante mais 18 horas. Em seguida, diluiu-se a mistura reaccional várias vezes com água e evaporou-se sob pressão reduzida a 40-50°C, misturou-se com 12 ml de água e 0,5 ml de trietilamina, aqueceu-se e fíltrou--se. O 2,3,4,5-tetra-O-acetil-1,6-bis-0-(4 ’-D-glucit-1 -ilcarbamoil-bifenil-4-il)- galactitol bruto assim obtido, para posterior purificação foi misturado com 10 ml de piridina e 10 ml de anidrido acético e agitou-se à temperatura ambiente durante 24 horas. Em seguida, concentrou-se à secura esta mistura reaccional, misturou-se com água com gelo e ácido clorídrico 1 N e extraiu-se com cloreto de metileno. As fases de solução de cloreto de metileno depois de reunidas foram secas sobre sulfato de magnésio, concentrou-se e cromatografou-se com cloreto de metileno/metanol em gel de sílica. Obteve-se assim 2,3,4,5-tetra-0-acetil-l,6-bis-0-[4’-(2,3,4,5,6-penta--0-acetil-D-glucit-l-ilcarbamoil)-bifenil-4-íl]-galactitol sob a forma de sólido incolor, MS: m z 1489,4 ([M+H]~). F. Dissolveu-se 0,6 g de 2,3,4,5-tetra-0-acetil-l,6-bis-0-[4’-(2,3,4,5,6-penta-0--acetil-D-glucit-l-ilcarbamoil)-bifenil-4-il]-galactitol em 5 ml de metanol e 5 ml de tetra-hidrofurano, misturou-se com 0,4 ml de solução 1 molar de metilato de sódio em metanol e agitou-se durante 2 horas a 60°C e durante 18 horas à temperatura ambiente. Separou-se por filtração o precipitado assim formado. Resultou 1,6-bis-O--(4’-D-glucit-l-ilcarbamoil-bifenil-4-il)-galactitol sólido incolor, MS: mz 923,2 ([M+Naf). G. Fez-se reagir o l,6-bis-0-(4’-D-glucit-l-ilcarbamoil-bifenil-4-il)-galactitol acima obtido de maneira análoga ao Exemplo l .B. de maneira a obter-se o sal de 46 tetradeca-sódio de 1,6-bis-0-[4’-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-1 -ilcarbamoil)--bifeml-4-il]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol, [a]^° -2,4° (c 0,7; água), MS: mz 2330,0 (M reconstruído).

Exemplo 13 A. De maneira análoga ao Exemplo 5. A. - D. a partir de 3-hidroxi-naftaleno-2--carboxilato de metilo e de 2,3-0-isopropilideno-l,4-bis-0-(4-metil-fenilsulfonil)-L-treitol obteve-se passando pelos seguintes compostos intermediários: 2.3- 0-isopropilideno-l,4-bis-0-(3-metoxicarbonil-naftalen-2-il)-L-treitol, sólido incolor, MS: m z 530 ([M]~); 1.4- bis-0-(3-carboxi-naftalen-2-il)-2,3-0-isopropilideno-L-treitol, sólido incolor, MS: m z 501,4 ([M-N]'); 1.4- bis-0-(3-D-glucit-1 -ilcarbamoil-naftalen-2-il)-2,3-0-isopropilideno-L-treitol, sólido incolor, MS: m z 830,0 ([M+H]~); 1.4- bis-0-(3-D-glucit-l-ilcarbamoil-naftalen-2-il)-L-treitol sólido incolor, MS. m z 789,7 {[M+Hf). B. O l,4-bis-0-(3-D-glucit-l-ilcarbamoil-naítalen-2-il)-L-treitol obtido antes foi feito reagir analogamente ao Exemplo l .B. para se obter o sal de dodecassódio de 1.4- bis-0-[3-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-1 -iIcarbamoil)-naftalen-2-il]-2,3-di-O-sulfo-L-treitol, [a]^0 -3,9° (c 0,7; água), MS: m z 2013,5 (M reconstruído).

Exemplo 14 A. Analogamente ao Exemplo 12.A. - F., a partir de 3-hidroxi-naftaleno-2--carboxilato de metilo e de 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis-0-(4-metil--fenilsulfonil)-galactitol, obteve-se passando pelos seguintes produtos 47 intermediários: 2.3.4.5- di-0-isopropilideno-l,6-bis-0-(2-metoxicarbonil-naftalen-2-il)-galactitol, sólido amarelado, MS: m z 630 ([M]~); 1.6- bis-0-(3-carboxi-naftalen-2-il)-2,3,4,5-di-0-isopropilideno-galactitol, sólido incolor, MS: mz 601,3 ([M-H[]'); 1.6- bis-0-(3-carboxi-nafíalen-2-il)-galactitol, sólido incolor, MS: mz 545,3 ([M+NaD; 2.3.4.5- tetra-0-acetil-l,6-bis-0-(3-carboxi-naftalen-2-il)-galactitol, sólido incolor, MS: m/z 713,4 ([M+NaD; 2.3.4.5- tetra-O-acetil-1,6-bis-0-(3-D-glucit-1 -ilcarbamoil-naftalen-2-il)-galactitol, sólido incolor, MS: m/z 1017,6 ([M+FTf); 1.6- bis-0-(3-D-glucit-l-ílcarbamoil-naftalen-2-il)-galactitol, sólido incolor, MS: m z 849,7 ([Μ+ΗΓ). B. Fez-se reagir o l,6-bis-0-(3-D-glucit-l-ilcarbamoil-naftalen-2-il)-galactitol de maneira análoga ao Exemplo 1 .B. para se obter o sal de tetradecassódio de 1,6--bis-0-[3-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-l-ilcarbamoil)-naftalen-2-il]-2,3,4,5-tetra-O-sulfo-galactitol, [a]^0 -6,3° (c 0,7; água), MS: m z 2277,5 (M reconstruído).

Exemplo 15 A. Sob atmosfera de árgon, misturou-se 0,4 g de bis-(4-hidroxi-fenil)-metano em 8 ml de acetonitrilo com 0,3 g de carbonato de potássio pulverizado e 0,4 g de bromoacetato de terc-butilo e agitou-se à temperatura ambiente durante 2,5 horas. Em seguida, adicionou-se ainda mais 0,13 g de bromoacetato de terc-butilo e agitou--se à temperatura ambiente durante 70 horas. Em seguida, concentrou-se a mistura reaccional e cromatografou-se o resíduo em gel de sílica com cloreto de 48 7>f metileno/éter (95:5). Desta forma obteve-se 4-(4-hidroxi-benzil)-fenoxiacetato de terc-butilo como sólido incolor, MS: m/z 314 ([M]~). B. De maneira análoga ao Exemplo 12.A. - F., a partir 4-(4-hidroxi-benzil)--fenoxi-acetato de terc-butilo e de 2,3-0-isopropilideno-l,4-di-0-(4-metil-fenil-sulfonil)-L-treítol, obteve-se passando pelos seguintes produtos intermediários: 1.4- bis-0-[4-(4-terc.-butoxicarbonilmetoxi-benzil)-fenil]-2,3-0-isopropilideno-L--treitol, sólido incolor que sem qualquer posterior caracterização foi processado em seguida; 1.4- bis-0-[4-(4-carboximetoxi-benzil)-fenil)-2,3-0-isopropilideno-L-treitol, sólido incolor, MS: m/z 660,5 ([M+NH4]'); 1.4- bis-0-[4-(4-carboximetoxi-benzil)-fenil]-L-treitol, sólido incolor, MS: m/z 625,5 ([M+Na]'); 2.3- di-O-acetil-1,4-bis-0-[4-(4-carboximetoxi-benzil)-fenil]-L-treitol, sólido amorfo acastanhado, MS: m/z 685,4 ([M-H]'); 2.3- di-O-acetil-1,4-bis-0-[4-[4-(2,3,4,5,6-penta-0-acetilD-glucit-1 -ilcarbamoilmeto-xi)-benzil]-L-treitol, sólido amorfo incolor, MS: mz 1456,8 ([M+Na]*); 1.4- bis-0-[4-(4-D-glucit-1 -ilcarbamoilmetoxi-benzil)-fenil]-L-treitol sólido incolor, MS: mz 952,4 ([M+Na]'). C. O l,4-bis-0-[4-(4-D-gIucit-l -ilcarbamoilmetoxi-benzil)-fenil]-L-treitol obtido antes foi feito reagir de maneira análoga ao Exemplo l.B. para se obter o sal de dodecassódio 1,4-bis-0-[4-[4-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-1 -ilcarbamoilme-toxi)-benzil]-fenil]-2,3-di-0-sulfo-L-treitol, [a)^-0,50° (c 0,6; água), MS: mz 2154,0 (M reconstruído). 49

Exemplo 16 A. Analogamente ao Exemplo 3.A. - D., obteve-se a partir de 6-hidroxi--naftaleno-2-carboxilato de metilo e de 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis-0-(4-metil-fenilsulfonil)-galactitol passando pelos seguintes produtos intermediários: 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-1,6-bis-0-(6-metoxicarbonil-naftalen-2-il)-galactitol, sólido incolor, MS: m/z 630 ([M]"); 1.6- bis-0-(6-carboxi-naftalen-2-il)-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galactitol, sólido incolor, MS: m/z 601,3 ([M-N]'); 1.6- bis-0-(6-D-glucit-l-ilcarbamoil-naftalen-2-il)-2,3,4,5-di-O-isopropilideno-galac-titol, sólido incolor, MS: m/z 929,7 ([M+H]~); 1.6- bis-0-(5-D-glucit-l-ilcarbamoil-naftalen-2-il)-galactitol sólido incolor, MS. m z 87U ([M+Na]'). B. Fez-se reagir o l,6-bis-0-(6-D-glucit-l-ilcarbamoil-naftalen-2-il)-galactitol analogamente ao Exemplo l .B. de maneira a obter-se o sal de tetradecassódio de 1.6- bis-0-[6-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-1 -ilcarbamoil)-naftalen-2-il]-2,3,4,5--tetra-O-sulfo-galactitol, [α]“ -4,1° (c 0,7; água).

Exemplo 17 A. A 16,82 g de 3,5-di-hidroxi-benzoato de metilo, dissolvido em 120 ml de metanol, adicionou-se sob agitação e sob exclusão de humidade 100 ml de solução de metilato de sódio em metanol (preparada com 2,6 g de sódio) seguida por 22,29 g de 4-clorometil-bifenilo e agitou-se a 90°C durante 4 horas. Depois concentrou-se a mistura reaccional, distribuiu-se entre cloreto de metileno e ácido clorídrico diluído. As fases de cloreto de metileno depois de reunidas foram secas sobre sulfato de magnésio, concentradas e cromatografadas em gel de sílica com cloreto de 50

metileno/metanol. A fracção que contém o produto assim obtida foi recristalizada em cloreto de metileno. Obteve-se 3-bifenil-4-ilmetoxi-5-hidroxi-benzoato de metilo sob a forma de cristais incolores, MS: m z 334 ([M] ). B. Analogamente ao Exemplo 3.A. - C., obteve-se a partir de 3-bifenil-4--ilmetoxi-5-hidroxi-benzoato de metilo e de 2,3:4,5-di-O-isopropilideno-l,6-bis-0--(4-metil-fenilsulfonil)-galactitol, passando pelos seguintes produtos intermediários: 1.6- bis-0-(3-bifenil-4-ilmetoxi-5-metoxicarbonil-fenil)-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galactitol, sólido incolor, que foi processado posteriormente sem qualquer caracterização; 1.6- bis-0-(3-bifenil-4-ilmetoxi-5-carboxi-fenil)-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galacti-tol, sólido incolor, MS: m z 865,2 ([M-H]'); 1.6- bis-0-(3-bifenil-4-ilrnetoxi-5-D-glucit-l-ilcarbamoil-fenil)-2,3,4,5-di-0-isopro-pilideno-galactitol, sob a forma de cristais incolores, MS: mz 1215,3 {[M+Na]’); C. Suspendeu-se 0,2 g de I,6-bis-0-(3-bifenil-4-ilmetoxi-5-D-glucit-l-ilcarbamoil-fenil)-2,3,4,5-di-0-isopropilideno-galactitol em 2 ml de dioxano, 0,5 ml de ácido trifluoracético e 0,7 ml de água e agitou-se à temperatura ambiente durante 72 horas. Em seguida, concentrou-se à secura a mistura reaccional, misturou-se com metanol e filtrou-se. Assim, resultou l,6-bis-0-(3-bifenil-4-ilmetoxi-5-D-glucit-l--ilcarbamoil-fenil)-galactitol como sólido incolor, MS: m z 1114,4 ([M+H]~). D. O l,6-bis-0-(3-bifenil-4-ilmetoxi-5-D-glucit-l-ilcarbamoil-fenil)-galactitpl obtido antes foi, analogamente ao Exemplo I.B., feito reagir de maneira a obter-se o sal de tetradeca-sódio de l,6-bis-0-[3-bifenil-4-ilmetoxi-5-(2,3,4,5,6-penta-O-sulfo--D-glucit-!-ilcarbamoil)-fenil]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol, [a]„0-2,4° (c 0,7; água), MS: m z 2512,0 ([Μ-Na] reconstruído). 51

Exemplo 18 A. Analogamente ao Exemplo 3. A. - D., a partir de 4-hidroxi-benzoato de metilo e de 2,3-0-isopropilideno-l,4-bis-0-(4-metil-fenilsulfonil)-L-treitol, obteve-se passando pelos seguintes compostos intermediários: 2.3- O-isopropilideno-1,4-bis-0-(4-metoxicarboml-feml)-L-treitol, sólido incolor, MS: m z 430 ([MD; 1.4- bis-0-(4-carboxi-fenil)-2,3-0-isopropilideno-L-treitol, sólido incolor, MS: mz 402 ([MD; 1.4- bis-0-(4-D-glucit-l-ilcarbamoil-fenil)-2,3-0-isopropilideno-L-treitol, sólido incolor, MS: m z 729,4 ([M+H]T); 1.4- bis-0-(4-D-glucit-l-ilcarbamoil-fenil)-L-treitol como sólido incolor, MS: mz 689,3 ([M+HD. B. Analogamente ao Exemplo I.B., o l,4-bis-0-(4-D-glucit-l-ilcarbamoiI-fenil)-L-treítol obtido antes foi feito reagir para se obter o sal de dodecassódio de 1.4- bis-0-[4-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-l-ilcarbamoil)-fenil]-2,3-di-0-su]fo--L-treitol, [a]^0 -3,1° (c 0,7; água), MS: m z 1913,5 (M reconstruído).

Exemplo 19 A. Analogamente ao Exemplo 3.A. - D., obteve-se a partir de 4-hidroxi--nafíalieno-2-carboxilato de etilo e de 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis-0-(4-metil-fenilsulfonil)-galactitol passando pelos seguintes produtos intermediários: 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-1,6-bis-0-(3-etoxicarboml-naftalen-1 -il)-galactitol, sólido incolor, MS: m z 658 ([MD; l,6-bis-0-(3-carboxi-naftalen-l-il)-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galactitol, sólido incolor, MS: m z 602 ([MD; _ ? 1.6- bis-0-(3-D-glucit-l -ilcarbamoil-naftaiin-1 -il)-2,3,4,5-di-0-isopropilideno-D-ga-Iactitol, sólido incolor, MS: mz 951,8 ([M+Na]~); 1.6- bis-0-(3-D-glucit-l-ilcarbamoiI-naftalin-l-il)-galactitol sob a forma de sólido incolor, MS: mz 872,4 ([M+Na]'). B. Analogamente ao Exemplo l.B. o l,6-bis-0-(3-D-glucit-l-ilcarbamoil--naftalen-l-il)-galactitol foi feito reagir para se obter o sal de tetradeca-sódio de 1,6--bis-0-[3-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-1 -ilcarbamoilj-naftalin-1 -il]-2,3:4,5-te-tra-O-sulfo-galactitoI, [a]^0 -1,2° (c 0,5; água), MS: m z 2277,0 (M reconstmído).

Exemplo 20 A. Dissolveram-se 6,55 g de ácido 3-hidroxi-7-metoxi-naítaleno-2-carboxílico em 20 ml de dimetilformamida, misturou-se com 5,5 g de hidrogenocarbonato de sódio e 4,0 ml de sulfato de dimetilo e agitou-se sob atmosfera de árgon a 90°C durante 10 minutos. Em seguida, despejou-se a mistura reaccional sobre gelo com água e extraiu-se com éter. Lavaram-se as fases etéreas com água depois de reunidas e secaram-se sobre sulfato de magnésio e concentraram-se. Recristalizou-se o resíduo assim obtido em acetato de etilo/hexano. Obteve-se assim 3-hidroxi-7--metoxi-naftaleno-2-carboxilato de metilo com o ponto de fusão de 138°C. B. Analogamente ao Exemplo 12.A. - F. a partir de 3-hidroxi-7-metoxi--naftaleno-2-carboxilato de metilo e de 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis-0-(4--metil-femlsulfonil)-galactitol, obteve-se passando pelos seguintes produtos intermediários: 1.6- bis-0-(6-metoxi-3-metoxicarbonil-naftalen-2-il)-2,3,4,5-di-0-isopropilideno-galactitol, sólido incolor, MS: m z 690 ([M]~); 1.6- bis-0-(3-carboxi-6-metoxi-naftalen-2-iI)-2,3,4,5-di-0-isopropiIideno-gaIactitol, sólido incolor, MS: m/z 661,2 ([M-H]‘); 1.6- bis-0-(3-carboxi-6-metoxi-naftalen-2-il)-galactitol, sólido incolor, MS: mz 581,2 ([M-HD; 2.3.4.5- tetra-0-acetil-l,6-bis-0-(3-carboxi-6-metoxi-naftalen-2-il)-galactitol, sólido incolor, MS: m z 749,1 ([M-H]'); 2.3.4.5- tetra-O-acetil-1,6-bis-0-(3 -D-glucit-1 -iIcarbamoil-6-metoxi-naftalen-2-il)-galactitol, sólido incolor, MS: m z 1077,4 ([M+H]'); 1.6- bis-0-(3-D-glucit-l-ilcarbamoil-6-metoxi-naftalen-2-il)-galactitol como sólido incolor, MS: m z 909,3 ([M+H]"). C. Analogamente ao Exemplo I.B., fez-se reagir l,6-bis-0-(3-D-glucit-]--ilcarbamoil-6-metoxi-nafitalen-2-il)-galactitol obtido antes, de maneira a preparar-se sal de tetradecassódio de l,6-bis-0-[6—metoxi-3-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit--1 -ilcarbamoil)-naflalen-2-il]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol, [α]β -5,7° (c 0,6; água), MS: m z 2337,5 (M reconstruído).

Exemplo 21 A. Analogamente ao Exemplo 20.A., a partir de ácido 3-hidroxi-5-metoxi--naftaleno-2-carboxílico, obtever-se 3-hidroxi-5-metoxi-naftaleno-2-carboxilato de metilo com o ponto de fusão de 182°C. B. Analogamente ao Exemplo 12.A. - F., obteve-se a partir de 3-hidroxi-5--metoxi-naftaleno-2-carboxilato de metilo e de 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis-0-(4-metil-fenilsulfonil)-galactitol passando pelos seguintes intermediários: 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis-0-(8-metoxi-3-metoxicarbonil-naftalen-2-il)--galactitol, sólido incolor, MS: m z 690 ([MJr); 1.6- bis-0-(3-carboxi-8-metoxi-naftalen-2-il)-2,3,4,5-di-0-isopropilideno-galactitol, MS: m z 661,1 ([M-H]'); 1.6- bis-0-(3-carboxi-8-metoxi-naftalen-2-il)-galactitol, sólido incolor, MS: mz 581,2 ([M-H]-); 2.3.4.5- tetra-O-acetil-1,6-bis-0-(3-carboxi-5-metoxi-naftalen-2-il)-galactitol, sólido incolor, MS: m z 749,1 ([M-H]"); 2.3.4.5- tetra-0-acetil-l,6-bis-0-[8-metoxi-3-(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-D-glucit-l-il-carbamoil)-naftalen-2-il]-galactitol, sólido incolor, MS: m z 1497,2 ([M+H]”); 1.6- bis-0-(3-D-glucit-l-ilcarbamoil-8-metoxi-naftalin-2-il)-galactitol como sólido incolor, MS: m z 909,2 ([M+H]"). C. Analogamente ao Exemplo l.B. fez-se reagir o l,6-bis-0-(3-D-glucit-l-ilcarbamoil-8-metoxi-naftalin-2-il)-galactitol de modo a obter-se o sal de tetradecas-sódio de 1,6-bis-0-[8-metoxi-3-(2,3,4,5,6-penta-O-sulfo-D-glucit-l -ilcarbamoil)--naítalen-2-il]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol, [α]ο°-9,3° (c 0,7; água), MS: mz 2337,0 (M reconstruído).

Exemplo 22 A. Dissolveram-se 25,0 g de ácido 3,7-di-hidroxi-naftaleno-2-carboxílico e 22,5 g de hidrogenocarbonato de sódio em 125 ml de dimetilformamida, misturou-se com 16,5 ml de sulfato de metilo e agitou-se a 85°C durante 20 minutos. Em seguida, despejou-se a mistura reaccional em água com gelo. Separaram-se por filtração os cristais formados; dessa forma obteve-se 3,7-di-hidroxi-naftaleno-2-carboxilato de metilo sob a forma de sólido amarelado, MS: mz 218 ([M]~). B.

Agitaram-se a 80°C durante 60 horas 6,5 g de 3,7-di-hidroxi-naftaleno-2- 55 -carboxilato de metilo e 11,3 g de tolueno-4-sulfonato de (R)-2,2,-dimetil-[l,3]--dioxolan-4-ilmetilo no seio de 50 ml de acetonitrilo com adição de 5,4 g de carbonato de potássio. Despejou-se a mistura reaccional em água com gelo e extraiu--se com éter. Lavaram-se com água as fases etéreas depois de reunidas, secaram-se sobre sulfato de magnésio, filtrou-se e evaporou-se à secura; cromatografou-se o resíduo assim obtido em gel de sílica com hexano/éter tendo-se obtido 7-[(S)-2,2--dimetil-[l,3]dioxolan-4-ilmetoxi]-3-hidroxi-naftaleno-2-carboxilato de metilo, sob a forma de sólido amarelado, MS: m/z 332 ([M]'). C. Analogamente ao Exemplo 3.A. - D., a partir de 7-[(S)-2,2-dimetil-[l,3--dioxolan-4-ilmetoxi]-3-hidroxi-naftaleno-2-carboxilato de metilo e de 2,3:4,5-di-0--isopropilideno-l,6-bis-0-(4-metil-fenilsulfonil)-galactitol passando pelos seguintes intermediários obteve-se: 1.6- bis-0-[6-[(S)-2,2-dimetil-[l,3]-dioxoian-4-ilmetoxi]-3-metoxicarbonil-naftalen--2-il]-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galactitol, sólido incolor, MS: mz 891,3 ([M+HJ-); 1.6- bis-0-[3-carboxi-6-[(S)-2,2-dimetil-[l,3]dioxolan-4-il]-nafíalen-2-il]-2,3:4,5-di--O-isopropilideno-galactitol, sólido incolor, MS: m z 861,4 ([M-H]'); 1.6- bis-0-[6-[(S)-2,2-dimetil-[ 1,3]dioxolan-4-il]-3-D-glucit-l -ilcarbamoil-naftalen-2-il]-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galactitol, sólido incolor, MS: mz 1211,6 ([M+NaD; 1.6- bis-0-[6-[(R)-2,3-di-hidroxi-propoxi]-3-D-glucit-l-ilcarbamoil-nafíalen-2-il]--galactitol como sólido incolor, MS: m z 1051,3 ([M+Na]"). D. Fez-se reagir o l,6-bis-0-[6-(R)-2,3-di-hidroxi-propoxi]-3-D-glucit-l--ilcarbamoil-naftalen-2-il]-galactitol obtido antes, de maneira análoga ao Exemplo 56 Ι.Β., de maneira a obter-se o sal octadecanossódio de l,6-bis-0-[(S)-2,3-bis-sulfoxi--propoxi]-3-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-l-ilcarbamoil)-naftalen-2-il]-2,3,4,5- -tetra-O-sulfo-galactitol, [a]^° -4,6° (c 0,7; água), MS: m z 2864,0 (M reconstruído).

Exemplo 23 A. Analogamente ao Exemplo 22.A., obteve-se a partir do ácido 7-bromo-3--hidroxi-nafitaleno-2-carboxílíco (R.A. Murphy et al., J. Med. Chem. 33, 171 (1990)) 7-bromo-3-hidroxi-naftaleno-2-carboxilato de metilo sob a forma de sódio amarelado, MS: m z 280,282 ((M]~). B. Analogamente ao Exemplo 3.A. - D., obteve-se a partir de 7-bromo-3--hidroxi-naftaleno-2-carboxilato de metilo e de 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis--0-(4-metil-fenilsulfoniI)-galactitol passando através dos seguintes produtos intermediários: 1.6- bis-0-(6-bromo-3-metoxicarbonil-nafíalen-2-iI)-2,3:4,5-di-0-isopropilidep> galactitol, sólido incolor, MS: m z 773 ([M-CH3]-), 1.6- bis-0-(bromo-3-carboxi-naftalen-2-il)-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galactitol, sólido incolor, MS: m/z 783,2 ([M+Na]~); 1.6- bis-0-(6-bromo-3-D-glucit-l-ilcarbamoil-naftalen-2-il)-2,3:4,5-di-0-isopropili-deno-galactitol, sólido incolor que foi processado sem purificação; 1.6- bis-0-(6-bromo-3-D-glucit-l-ilcarbamoil-naftalen-2-il)-galactitol, sólido incolor, MS: m z 1029,1 ([M+Na]'). C. Analogamente ao Exemplo I.B., fez-se reagir o l,6-bis-0-(6-bromo-3-D--glucit-l-ilcarbamoil-naftalen-2-il)-galactitol obtido antes, de maneira a obter o sal de tetradecassódio de l,6-bis-0-[6-bromo-3-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-l- -ilcarbamoil)-naftalen-2-il]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol, [α]“ -15,4° (c 0,7; água).

Exemplo 24 A. Aqueceu-se a refluxo durante 6 dias uma suspensão de 1,78 g de L-tartarato de dimetilo e 4,85 g de tris-hidroximetil-metilamina em 50 ml de metanol e epi seguida concentrou-se à secura. Purificou-se o resíduo cromatograficamente sobre gel de sílica com acetato de etilo/metanol/água como eluente e obteve-se Ν,Ν’-bis--(2-hidroxi-l,l-bis-hidroximetil-etil)-L-tartaramida, [a]^0+101,0° (c 0,4; sulfóxido de dimetilo), MS: mz 357,3 ([M+H]’). B. Agitou-se a 70°C durante 24 horas uma suspensão de 0,36 g de N,N’-bis-(2--hidroxi-l,I-bís-hidroximetil-etil)-L-tartaramida e 2,23 g de complexo trióxido de enxofre-trimetilamina em 10 ml de dimetilformamida absoluta. Depois de se arrefecer misturou-se com 2,63 g de acetato de sódio em 50 ml de metanol. Separqu--se por filtração sob sucção o precipitado, lavou-se com metanol e secou-se. Retomou-se o resíduo em água e cromatografou-se em Sephadex® LH20 e SP Sepjadex® C-25. Liofílizaram-se as fracções que continham o produto e obteve-se sal de octassódio de 2,3-di-0-sulfo-N,N,-bis-(2-sulfoxi-l,I-bis-sulfoximetíl-etil)-L- tartaramida, [a]^ +31,2° (c 0,5; água), MS: m z 1172 (M reconstruído).

Exemplo 25 A. Uma suspensão de 2,0 g de D-tartarato de dimetilo e 4,47 g de D-glucamipa foi aquecida a refluxo durante 8 dias, filtrada sob sucção e lavada com metanol. Secou-se o material filtrado e acetilou-se com 110 ml de anidrido acético em 220 ml de piridina durante 18 horas à temperatura ambiente. Concentrou-se o produto da 58

reacção, precipitou-se em água, secou-se e obteve-se 2,3-di-0-acetil-N,N’-bis-D--glucit-l-il-amida do ácido L-tartárico, [a]p +52,0° (c 0,5; sulfóxido de dimetilo), MS: m z 477,6 ((M+H]_). B. Agitou-se uma suspensão de 0,48 g de N,N’-bis-D-glucit-l-il-amida de ácido L-tartárico e 3,34 g de complexo de trióxido de enxofre-trimetilamina em 15 ml de dimetilformamida absoluta durante 18 horas a 70°C. Depois de se arrefecer, decantou-se a fase superior. O resíduo foi misturado com 1,97 g de acetato de sódio e 20 ml de água e evaporou-se e, em seguida, retomou-se várias vezes em água e evaporou-se. O resíduo assim obtido foi retomado em água e cromatografado em Sephadex® LH20 e SP Sephadex® C-25. Liofilizaram-se as fracções que continham produto e obteve-se o sal de dodecasódio de N,N’-bis-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D--glucit-l-il)-di-0-sulfo-L-tartaramida, [a]™+18,6° (c 0,5; água), MS: m/z 1705 (M reconstruído).

Exemplo 26 A. Aqueceu-se a refluxo durante 8 dias uma suspensão de 2,0 g de D-tartarato de dimetilo e 4,47 g de D-glucamina em 50 ml de metanol, separou-se por filtração sob sucção e lavou-se com metanol. O material separado por filtração sob sucção foi seco e acetilado com 110 ml de anidrido acético em 220 ml de piridina durante \ 8 horas à temperatura ambiente. Concentrou-se à secura o produto da reacção, precipitou-se em água, secou-se e obteve-se 2,3-di-0-acetil-N,N’-bis-(2,3,4,5,6- -penta-0-acetil-D-glucit-l-il)-D-tartaramída, [α]ο+10,4° (c 0,5, sulfóxido de dimetilo), MS: m/z 1003,5 ([M+Na]'). B. Misturou-se uma solução de 4,8 g de 2,3-di-0-acetil-N,N’-bis-(2,3,4,5,6--penta-0-acetil-D-glucit-l-il)-D-tartaramida em 50 ml de metanol e 50 ml de tetra- 59 -hidrofurano com 4,8 ml de uma solução metanólica a 2% de metanolato de sódio e agitou-se à temperatura ambiente durante 8 horas. Separou-se sob sucção o precipitado obtido, lavou-se com metanol, secou-se a 60°C em vácuo e obteve-se Ν,Ν’-di-D-glucit-l-il-D-tartaramida, MS: m z 499,6 ([M+Na]~). C. Agitou-se a 45°C durante 20 horas uma suspensão de 1,0 g de Ν,Ν’-di-D--glucit-l-il-D-tartaramida e 9,07 g de complexo de trióxido de enxofre-trietilamina em 50 ml de dimetilformamida absoluta. Depois de se arrefecer, concentrou-se em alto vácuo e misturou-se o resíduo com uma solução de 8,2 g de acetato de sódio em 90 ml de água, evaporou-se à secura, misturou-se várias vezes com água e evaporou--se à secura de novo. Retomou-se o resíduo assim obtido em água e cromatografou-se em Sephadex® LH20 e SP Sephadex® C-25. Liofilizaram-se as ffacções que continham o produto e obteve-se o sal de dodecassódio de N,N’-bis-(2,3,4,5,6--penta-0-sulfo-D-glucit-l-il)-2,3-di-0-sulfo-D-tartaramida, [a]“ -28,8° (c 0,5; água), MS: m z 1700,5 (M reconstruído).

Exemplo 27 A. A reacção de meso-tartarato de dimetilo e D-glucamina como se descrevçu no Exemplo 26.A. originou 2,3-di-0-acetil-N,N’-bis-(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-D- -glucit-1-il)-meso-tar-taramida, [α]π+6,2° (c 0,5, sulfóxido de dimetilo), MS: m z 1003,8 ((M+NaD. B. A desacetilação de 2,3-di-0-acetil-N,N’-bis-(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-p--glucit-l-il)-meso-tartaramida como se descreveu no Exemplo 26.B. originou N,N’--di-D-glucit-1-il-meso-tartaramida, MS: m z 499,4 ([M+Na]"). C. A sulfatação de N,N’-di-D-glucit-l-il-meso-tartaramida como se descreveu no Exemplo 26.C. originou o sal de dodecassódio de N,N’-bis-(2,3,4,5,6-penta-O--sulfo-D-glucit-1 -il)-2,3-di-0-sulfo-meso-tartaramida, [a]™-4,6° (c 0,5; água), MS: m z 1700,5 (M reconstruído).

Exemplo 28 A. A reacção de galactarato de dimetilo e de tris-hidroximetil-metilamina como se descreveu no Exemplo 25.A. originou N,N’-bis-(2-hidroxi-l,l-bis-hidroximetil--etil)-galactaramida, MS: m/z 417,1 ([M+H]'). B. A sulfatação de N,N’-bis-(2-hidroxi-l,l-bis-hidroximetil-etil)-galactaramida como se descreveu no Exemplo 25.B. originou 2,3,4,5-tetra-0-sulfo-N,N’-bis-(2--sulfoxi-l,l-bis-sulfoximetil-etil)-galactaramida, MS: mz 1436,0 (M reconstruído).

Exemplo 29 A. A reacção de galactarato de dimetilo e D-glucamina como se descreveu no Exemplo 25. A. originou Ν,Ν’-di-D-glucit-1 -il-galactaramida, [α]^° -14,4° (c 0,5; água), MS: m z 537,2 ([M+H]'). B. A sulfatação de Ν,Ν’-di-D-glucit-l-il-galactaramida como se descreveu po Exemplo 25.B. originou o sal de tetradecassódio de N,N’-bis-(2,3,4,5,6-penta-0--sulfo-D-glucit-l-il)-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactaramida, MS: mz 1963,0 (M reconstruído).

Exemplo 30 A. Dissolveram-se 15 g de 4-aminometil-benzilamina em 600 ml de cloreto de metilo e dentro de 2,5 horas misturou-se com uma solução de 8,0 g dicarbonato de de di-terc-butilo em 80 ml de cloreto de metileno. Em seguida, separou-se por filtração o precipitado formado, rejeitou-se, evaporou-se à secura a lixívia mãe e 61

cromatografou-se o resíduo assim obtido em gel de sílica com hexano/acetato de etilo/metanol; obteve-se assim o (4-aminometil-benziI)-carbamato de terc-butilo, MS: mz 179 ([M-terc-butilo]*). B. Dissolveram-se em 20 ml de etanol 0,6 ml de D-tartarato de dietilo e 1,81 g de (4-aminometil-benzil)-carbamato de terc-butilo e aqueceu-se a refluxo durante 44 horas a 85°C. Depois de se arrefecer a 0°C separaram-se por filtração os cristais precipitados e secaram-se em alto vácuo; dessa forma, obteve-se N,N’-bis-(4-terc -butoxivarbonilammomelil-benzil)-D-:tartaramida, MS: mz 587,1 ([M+H]~). C. Dissolveu-se 0,594 g de N,N,-bis-(4-terc-butoxicarbonilaminometil-benzil)--D-tartaramida a 0°C em 0,8 ml de ácido trifluoracético e em seguida agitou-se à temperatura ambiente durante 5 horas; em seguida, evaporou-se à secura e misturou--se com cloreto de metileno/éter (1:1). Separou-se por filtração o precipitado formado. Obteve-se assim di-(trifluoracetato) de N,N’-bis-(4-aminometil-benzil)-D--tartaramida, MS: m z 387,4 ([M+I-Tp. D. Dissolveu-se em 40 ml de etanol 0,69 g de di-(trifluoracetato) de Ν,Ν’-bis--(4-aminometil-benzil)-D-tartaramida, misturou-se com 0,47 ml de trietilamina e 0,48 g de δ-lactona do ácido D-glucónico e agitou-se a 85°C durante 16 horas. Depois de se arrefecer, separou-se por filtração o precipitado formado, lavou-se com éter e secou-se em alto vácuo. Obteve-se assim N,N’-bis-(4-D-glucit-l--ilcarbamoilmetil-benzil)-D-tartaramida, MS: m z 743,4 ([M+H]~). E. De maneira análoga ao Exemplo 1 .B., fez-se reagir a N,jST-bis-(4-D-glucit-l-ilcarbamoilmetil-benzil)-D-tartaramida obtida antes de maneira a obter-se o sal de dodecassódio de N,N’-bis-[4-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-gIucit-l -ilcarbamoilmetil)-benzil]-di-0-sulfo-D-tartaramida, MS: m Z 1967,0 (M reconstruído). 62

Exemplo 31 A. Dissolveram-se 0,97 g de l-0-(4-amino-feml)-2,3,4,5-di-0-isopropilidenp--D-arabinitol (preparado como se descreve no pedido de Patente Europeia 95 100 180.9 de 9.1.95) e 0,27 g de tricloreto de ácido benzeno-l,3,5-tricarboxílico em 22 ml de cloreto de metileno, misturou-se a 5°C com 1,0 ml de trietilamina e agitou-se à temperatura ambiente durante 60 horas. Depois de se concentrar, cromatografou-se o produto bruto em gel de sílica com cloreto de metileno e metanol. Obteve-se tris-[4-(2,3,4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinit-l -iloxi)-fenilami-da] do ácido benzeno-l,3,5-tricarboxílico, MS: m z 1127 ([M+H]~). B. Dissolveu-se 0,95 g de tris-[4-(2,3,4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinit-I--iloxi)-fenilamida] do ácido benzeno-l,3,5-tricarboxílico em 20 ml de dioxano, misturou-se com 3 ml de ácido trifluoracético (a 35%) e agitou-se a refluxo durante 7 horas. Em seguida, adicionaram-se 50 ml de tolueno duas vezes e concentrou-$e respectivamente em vácuo produzido por trompa de água. O resíduo assim obtido foi seco durante 4 horas em vácuo elevado à temperatura ambiente sobre pentóxido de sódio. Nestas condições, obteve-se tris-(4-D-arabinit-l-iloxi-fenilamida) de ácido benzeno-l,3,5-tricarboxílico, que foi utilizada directamente na fase operatória seguinte. C. Fez-se reagir 0,98 g de tris-(4-D-arabinit-l-iloxi-fenilamida) de ácido benzeno-l,3,5-tricarboxílico com o complexo de trióxido de enxofre-trietilamina em analogia com o Exemplo l.B. Nestas condições, obteve-se o sal de dodecassódio de tris-[4-(2,3,4,5-tetra-0-sulfo-D-arabinit-l-iloxi)-fenilamida] de ácido benzeno-1,3,5- -tricarboxílico, MS: m/z 2110,0 (M reconstruído). 63 7%

Exemplo 32 A. Agitaram-se a refluxo durante 18 horas 18,2 g de ácido 5-hidroxi-isoftáIiço em 300 ml de metanol com a adição de 5 ml de ácido sulfurico (a 96%). Depois de se arrefecer até 5°C, regulou-se a pH 8 com uma solução saturada de bicarbonato de sódio, depois separou-se por destilação o metanol em vácuo de trompa de água. A fase aquosa heterogénea foi extraída completamente com cloreto de metileno; a fase orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada à secura. Obteve--se 5-hidroxi-isoftalato de dimetilo que foi recristalizado em cloreto de metilo/n--hexano, ponto de fusão 159-161°C. B. Agitaram-se a refluxo durante 3 horas 2,1 g de 5-hidroxi-isoftalato de dimetilo e 2,9 g de tolueno-4-sulfonato de (R)-2,2-dimetil-[l,3]dioxoIan-4-ilmetilo em 120 ml de dimetilformamida com adição de 6,9 g de carbonato de potássio. Despejou-se reacional sobre água com gelo, extraiu-se com cloreto de metileno, as fases de cloreto de metileno depois de reunidas foram lavadas com água, secas sobre sulfato de magnésio, filtradas e evaporadas à secura. Obteve-se (S)-5-(2,2-dimetil--[l,3]dioxolan-4-ilmetoxi)-isoftalato de dimetilo, MS: m/z324 f[M]+). C. Agitaram-se à temperatura ambiente durante 16 horas 1,40 g de (S)-5-(2,2--dimetil-[l,3]dioxolan-4-ilmetoxi)-isoftalato de dimetilo com 4 ml de lixívia de soda cáustica (a 28%) em 50 ml de metanol. Depois da neutralização com ácido clorídrico 6N, destilou-se o metanol em vácuo produzido por trompa de água. Despejou-se o resíduo sobre água com gelo, extraiu-se com cloreto de metileno, lavaram-se com água as fases de cloreto de metileno depois de reunidas, secou-se sobre sulfato de magnésio, filtrou-se e evaporou-se. Obteve-se ácido (S )-5-(2,2-dimetil--[l,3]dioxolan-4-ilmetoxi)-isoftálico, MS: m z 296 ([M]*). 64 ά' * D. Sob exclusão de humidade misturou-se 0,59 g de ácido (S)-5-(2,2-dimetil--[l,3]dioxolan-4-ilmetoxi)-isoftálico, dissolvido em 10 ml de acetonitrilo, a 0-5°C, com 0,44 ml de 4-metilmorfolina e agitou-se intensamente durante 10 minutos. Em seguida, adicionou-se 0,70 g de 2-cloro-4,6-dimetoxi-l,3,5-triazina sólida e agitou-se durante mais 2 horas a 0-5°C. Em seguida, adicionaram-se 1,29 g de 1-0-(4--amino-fenil)-2,3,4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinitol, dissolvido em 30 ml de acetonitrilo/dimetilformamida (2:1), e agitou-se à temperatura ambiente durante mais 18 horas. Depois de se destilar o dissolvente em alto vácuo, cromatografou-se o resíduo em gel de sílica com cloreto de metileno e metanol. Obteve-se (S)-N,N’--bis-[4-(2,3,4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinit-l-iloxi)-fenil]-5-(2,2-dimetil-[l,3]-dioxolan-4-ilmetoxi)-isoftalamida, MS: m z 907 ([M+H]+). E. Dissolveram-se 2,05 g de (S)-N,N’-bis[4-(2,3,4,5-di-0-ísopropilideno-D--arabinit-1 -iloxi)-fenil]-5-(2,2-dimetil-[ 1,3]dioxolan-4-ilmetoxi)-isoftaIamida em 50 ml de dioxano, misturou-se com 15 ml de ácido trifluoracético (a 70% em água) e agitou-se a refluxo durante 12 horas. Em seguida, adicionaram-se 50 ml de tolueno por duas vezes e concentrou-se respectivamente em vácuo produzido por trompa de água. O resíduo assim obtido foi seco durante 4 horas em alto vácuo à temperatura ambiente sobre pentóxido de fósforo. Obteve-se (R)-N,N’-bis-(4-D-arabinit-l-iloxi--fenil)-5-(2,3-di-hidroxipropoxi)-isoftalamida, MS: mz 707 ([M+H]~). F. Em analogia com o Exemplo I.B., fizeram-se reagir 1,05 g de (R)-N,N’-bis--(4-D-arabinit-l-íloxi-feniI)-5-(2,3-di-hidroxi-propoxi)-isoftalamida com o complexo de trióxido de enxoffe-amina. Nestas circunstâncias, obteve-se o sal çle decassódio de (S)-N,N,-bis-[4-(2,3,4,5-tetra-0-sulfo-D-arabinit-iloxi)-fenil]-5-(2,3--bis-sulfoxi-propoxi)-isoftalamida, MS: m z 1727,0 (M reconstruído). 65

& *

Exemplo 33 A. Aqueceram-se a refluxo durante 3 horas 2,35 g de 2,3-O-isopropilideno-1,4--di-0-(4-metil-fenilsulfonil)-L-treitol e 1,52 g de 4-hidroxi-benzoato de metilo em 75 ml de dimetilformamida com a adição de 3,46 g de carbonato de potássio. Despejou-se a mistura reaccional sobre água com gelo, extraiu-se com cloreto de metileno, as fases de cloreto de metileno depois de reunidas foram lavadas com água, secas sobre sulfato de magnésio, filtradas e evaporadas à secura. Cromatografou-se o produto bruto em gel de sílica com cloreto de metileno e metanol. Obteve-se 2,3-O-isopropilideno-1,4-bis-0-(4-metoxicarbonil-fenil)-L--treitol, MS: mz 430 ([M]~) B. Agitaram-se a 50°C durante 20 horas 1,81 g de 2,3-0-isopropilideno-l,4-bis--0-(4-metoxicarbonil-fenil)-L-treitol em 50 ml de metanol sob adição de 5 ml de lixívia de hidróxido de sódio (a 28%). Em seguida, arrefeceu-se a mistura reaccional a 10°C, regulou-se a um valor de pH igual a 2 com ácido clorídrico e destilou-se o metanol em vácuo produzido por trompa de água. Ao resíduo adicionaram-se 100 ml de água, agitou-se em banho de gelo durante 1 hora, em seguida filtrou-se e secou--se. Obteve-se l,4-bis-0-(4-carboxi-fenil)-L-treitol, MS: mz 361 ([M-H]'). C. Agitaram-se durante 20 horas à temperatura ambiente 1,33 g de l,4-bis-0-(4--carboxi-fenil)-L-treitol em 20 ml de piridina com 3,8 ml de anidrido acético. Despejou-se a mistura reaccional sobre água com gelo, extraiu-se com cloreto de metileno, lavaram-se com água as fases de cloreto de metileno depois de reunidas, secou-se sobre sulfato de magnésio, filtrou-se e evaporou-se até à secura. Obteve-se 2,3-di-0-acetil-l,4-bis-0-(4-carboxi-fenil)-L-treitol, que se recristalizou em meta-nol/cloreto de metileno, MS: m z 387 ([M-AcO]’)· D. Sob exclusão de humidade, misturou-se 0,89 g de 2,3-di-0-acetil-l,4-bis-0--(4-carboxi-fenil)-L-treitol, dissolvido em 10 ml de acetonitrilo, a 0-5°C, com 0,44 ml de 4-metilmorfolina e agitou-se intensamente durante 10 minutos. Em seguida, adicionou-se 0,70 g de 2-cloro-4,6-dimetoxi-l,3,5-triazina sólida e agitou-se a 0-5°C durante mais 2 horas. Em seguida, adicionou-se 1,29 g de 1-0-(4-amino-feniI)--2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinitoI, dissolvido em 30 ml de acetomtri-lo/dimetilformamida (2:1) e agitou-se à temperatura ambiente durante mais 18. Depois de se destilar o dissolvente em alto vácuo, cromatografou-se o resíduo em gel de sílica com cloreto de metileno e metanol. Obteve-se 2,3-di-0-acetil-l,4--bis-0-[4-[4-(2,3,4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinit-l-iloxi)-fenilcarbamoil]-fenil]--L-treitol, MS: mz 1057 ([M+Hf). E. Dissolveram-se 2,9 g de 2,3-di-0-acetil-l,4-bis-0-[4-[4-(2,3,4,5-di-Q--isopropilideno-D-arabmit-l-iloxi)-femlcarbamoil]-fenil]-L-treitol em 40 ml de dioxano, misturou-se com 2,8 ml de ácido trifluoracético e 5,6 ml de água destilada e agitou-se a refluxo durante 3 horas; em seguida, adicionou-se 100 ml de tolueno por duas vezes e concentrou-se à secura respectivamente em vácuo produzido por trompa de água. Secou-se o resíduo assim obtido durante 4 horas em alto vácuo à temperatura ambiente sobre pentóxido de fósforo. Obteve-se desta forma 2,3-di-O--acetil-1,4-bis-0-[4-(4-D-arabinit-1 -iloxí-fenilcarbamoil)-fenil)-L-treitol, que foi utilizado directamente na fase operacional seguinte. F. Agitou-se à temperatura ambiente durante 18 horas 2,08 g de 2,3-di-O-acetil--l,4-bis-0-[4-(4-D-arabinit-l-iloxi-fenilcarbamoil)-fenií]-L-treitol em 50 ml de metanol com 1,0 g de carbonato de potássio sob adição de 15 ml de água/dimetilformamida (2:1). Destilou-se o dissolvente em alto vácuo, depois 67 retomou-se o resíduo em 50 ml de água, filtrou-se e secou-se. Obteve-se 1,4-bis-O-[4-(4-D-arabinit-l-iloxi-fenilcarbamoil)-fenil]-L-treitol. Análise elementar calculada para C^R^NzOiô: C = 59,11%. H = 5,95%, N = 3,45%; determinada: C = 58,69%, H = 6,07%, N = 3,10%. G. Em analogia com o Exemplo I.B., fizeram-se reagir 1,20 g de 1,4-bis-0-[4-(4-D-arabinit-l-iloxi-fenilcarbamoil)-fenil]-L-treitol com complexo de trióxido de enxofre-trimetilamina. Obteve-se assim sal de decassódio de l,4-bis-0-[4-[4--(2,3,4,5-tetra-O-sulfo-D-arabinit-1 -iloxi)-fenil-carbamoil]-fenil]-2,3 -di-O-sulfo-L--treitol, MS: m z 1833,0 (M reconstruído).

Exemplo 34 A. Sob atmosfera de árgon, agitaram-se à temperatura ambiente durante }6 horas 16,7 g de 2,5-0-metileno-l,6-bis-0-(4-metil-feniIsulfonil)-D-manitol (B. Lamm et al., Acta Chem. Scand. B 41. 202 (1987)) sob adição de 0,1 g de ácido p-tolueno-sulfónico em 80 ml de ortoformiato de trimetilo. Depois da neutralização com carbonato de potássio e subsequente filtração, concentrou-se o filtradp. Recristalizou-se o resíduo em metanol. Obteve-se 3,4-0-metoximetíleno-2,5-0--metileno-l,6-bis-0-(4-metil-fenilsulfonil)-D-manitol, MS: m/z 545 ([M+H]')· B. Em analogia com o Exemplo 33.A., fizeram-se reagir 4,36 g de 3,4-0--metoximetileno-2,5-0-metileno-1,6-bis-0-(4-metil-fenilsulfonil)-D-manitol com 2,44 g de 4-hidroxi-benzoato de metilo e processou-se. Cromatografou-se o produfo bruto em gel de sílica com cloreto de metileno e metanol. Obteve-se 1,6-bis-0-(4--metoxicarbonil-fenil)-3,4-0-metoximetileno-2,5-0-metileno-D-manitol, MS: m z 504 ([Mf). c.

Em 100 ml de metanol, agitaram-se a refluxo durante 6 horas 3,12 g de 1,6- -bis-0-(4-metoxicarbonil-fenil)-3,4-0-metoximetileno-2,5-0-metileno-D-mamtoI com 6 ml de lixívia de hidróxido de sódio (a 28%). Depois de se arrefecer a 10°C regulou-se o valor do pH da mistura reaccional para pH 2 com ácido clorídriço diluído, depois destilou-se o metanol em vácuo produzido por trompa de água. Ao resíduo adicionaram-se 100 ml de água, agitou-se em banho de gelo durante 1 hor^, depois filtrou-se e secou-se o resíduo. Obteve-se assim l,6-bis-0-(4-carboxi-fenil)--2,5-O-metileno-D-manitol, MS: mz 433 ([M-H]'). D. Agitaram-se à temperatura ambiente durante 18 horas 2,05 g de l,6-bis-0-(4--carboxi-fenil)-2,5-0-metileno-D-manitol em 55 ml de ácido sulfúrico a 20% em metanol. Em seguida, depois de se arrefecer até à temperatura ambiente, adicionaram-se 50 ml de água com gelo e destilou-se o metanol em vácuo produzido por trompa de água. Filtrou-se a fase aquosa heterogénea restante e secou-se o resíduo. Obteve-se l,6-bis-0-(4-metoxicarbonil-fenil)-D-manitol, MS: mz 449 ([M-H]’). E. Em analogia com o Exemplo 34.C. fizeram-se reagir 2,33 g de l,6-bis-0-(4--metoxicarbonil-fenil)-D-manitol e processou-se. Obteve-se l,6-bis-0-(4-carboxi--fenil)-D-manitol, MS: m.'zA2\ ([M-H]'). F. Agitaram-se à temperatura ambiente 2,10 g de l,6-bis-0-(4-carboxi-fenil)-D--manitol em 30 ml de piridina com 5,1 ml de anidrido acético durante 20 horas. Processou-se a mistura reaccional com água com gelo e cloreto de metileno de maneira a efectuar a extracção. Secou-se a fase orgânica sobre sulfato de magnésio, filtrou-se e concentrou-se. O resíduo foi recristalizado em metanol e cloreto de 69

metileno. Obteve-se 2,3,4,5-tetra-O-acetil-l ,6-bis-0-(4-carboxi-fenil)-D-manitol, MS: m z 589 ([M-Ifl'). G. Em analogia com o Exemplo 33.D., fizeram-se reagir 1,18 g de 2,3,4,5-tetra--0-acetil-l,6-bis-0-(4-carboxi-fenil)-D-manitol com l-0-(4-amino-fenil)-2,3:4,5-di--O-isopropilideno-D-arabinitol. Cromatografou-se o produto bruto em gel de sílica com cloreto de metileno e metanol. Obteve-se 2,3,4,5-tetra-0-acetil-l,6-bis-0-[4-[4--(2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinit-l-iloxi)-fenilcarbamoil]-fenil]-D-manitol, MS: m z 1201 (fM+H]'). H. Agitaram-se à temperatura ambiente durante 18 horas 2,28 g de 2,3,4,5-tetra--O-acetil-1,6-bis-0-[4-[4-(2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabimt-1 -iloxi)-femlcar-bamoil]-fenil]-D-manitol com 2,0 g de carbonato de potássio em 60 ml de metanol sob adição de 10 ml de água. Destilou-se o metanol em vácuo produzido por trompa de água, ao resíduo adicionaram-se 50 ml de água e filtrou-se. Depois da secagem sobre pentóxido de fósforo, obteve-se l,6-0-bis-[4-[4-(2,3:4,5-di-0-isopropilideno--D-arabinit-l-iloxi)-fenilcarbamoil]-fenil]-D-manitol, MS: m z 1033 ([M+H]"). I. Dissolveram-se 1,67 g de l,6-bis-0-[4-[4-(2,3,4,5-di-0-isopropilideno-D--arabinit-l-iloxi)-fenilcarbamoil]-fenil]-D-manitol em 50 ml de dioxano, misturaram-se com 15 ml de ácido trifluoracético (a 70% em água) e agitou-se a refluxo durante 3 horas. Em seguida, adicionou-se por duas vezes 50 ml de tolueno e concentrou-se respectivamente em vácuo produzido por trompa de água. Secou-se o resíduo assim obtido durante 4 horas em alto vácuo à temperatura ambiente sobre pentóxido de fósforo. Nestas condições, obteve-se l,6-0-bis-[4-(4-D-arabinit-l--iloxi-fenilcarbamoil)-fenil]-D-manitol, IV: (KJBr, cm'1): 3307, 1638, 1607, 1538, 1249, 1076, 826. 70 70

Ο Κ. Em analogia ao Exemplo l.B. fizeram-se reagir 1,31 g de l,6-bis-0-[4-(4-D--arabinit-l-iloxi-fenilcarbamoil)-fenil]-D-manitoí com complexo de trióxido de enxofre-trimetilamina. Nestas condições, obteve-se o sal de dodecassódio de 1,6-bis--0-[4-[4-(2,3,4,5-tetra-0-suIfo-D-arabinit-l-iloxi)-fenilcarbamoil]-fenil]-2,3,4,5--tetra-O-sulfo-D-manitol, MS: m z 2097,0 (M reconstruído).

Exemplo 35 A. Sob atmosfera de árgon, agitou-se a refluxo durante 15 minutos 10,01 g de ácido meso-tartárico mono-hidratado em 35 ml de anidrido acético sob adição de 0,3 ml de ácido sulfurico concentrado; depois de arrefecer a mistura reaccional a 5°C adicionaram-se sob agitação 150 ml de éter dietílico, depois filtrou-se e concentrou--se o filtrado. Obteve-se assim anidrido di-O-acetil-meso-tartárico, MS: m z 235,2 ([M+H]-) (= ácido dicarboxílico), IV: (KBr, cm'1): 1800, 1752, 1214. B. Agitaram-se 2,16 g de anidrido di-O-acetil-meso-tartáruco e 2,60 g de I-O--(4-amino-fenil)-2,3,4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinitol em 120 ml de cloreto de metileno durante 16 horas à temperatura ambiente. Depois de destilar o dissolvente, cromatografou-se o produto em gel de sílica com cloreto de metileno em metanol. Obteve-se assim uma mistura de ácido (2R,3S)- e ácido (2S,3R)-di-0-acetil-N-[4--(2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinit-l-iloxi)-fenil]-meso-tartáricos, MS: m z 538,4 ([Μ-H]'). C. Fez-se reagir 0,54 g de mistura de ácido (2R,3S)- e ácido (2S,3R),-di-0--acetil-N-[4-(2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinit-l-iloxi)-fenil]-meso-tartárico em 15 ml de cloreto de metileno com 0,10 ml de cloreto de oxalilo sob adição de uma gota de dimetilformamida a -20°C; depois de 2 horas adicionou-se gota a gota em primeiro lugar 0,28 ml de trietilamina, depois 0,32 g de I -0-(4-amino-fenil)- -2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinitol dissolvido em 5 ml de cloreto de metileno a -25°C. Depois de deixar aquecer até à temperatura ambiente, destilou-se o dissolvente e cromatografou-se o resíduo em gel de sílica com cloreto de metileno e metanol. Obteve-se di-0-acetil-N,N’-bis-[4-(2,3,4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinit--l-iloxi)-fenil]-meso-tartaramida, MS: m z 845,6 ([M+H]~). D. Em analogia com o Exemplo 34.H. agitaram-se 2,32 g de di-0-acetil-N,N’--bis-[4-(2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinit-1 -iloxi)-fenil]-meso-tartaramida com 2,78 g de carbonato de potássio em metanol/água durante 3 horas à temperatura ambiente. Processou-se a mistura reaccional com água e acetato de etilo de maneira a extrair. Cromatografou-se o produto bruto em gel de sílica com cloreto de metileno e acetonitrilo. Obteve-se N,N’-bis-[4-(2,3;4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinit-l--iloxi)-fenil}-meso-tartaramida, MS: m z 761,3 ([M+H]~). E. Dissolveram-se 1,40 g de N,N’-bis-[4-(2,3,4,5-di-0-isopropilideno-D- -arabinit-l-iloxi)-fenil]-meso-tartaramida em 45 ml de dioxano, misturou-se com 15 ml de ácido trifluoracético (a 70% em água) e agitou-se a refluxo durante 3 horas. Em seguida, adicionou-se duas vezes 50 ml de tolueno e respectivamente concentrou-se em vácuo produzido por trompa de água. Secou-se o resíduo assim obtido durante 16 horas em alto vácuo a 50°C sobre pentóxido de fósforo. Obteve-se N,N’-bis-(4-D-arabinit-l-iloxi-fenil)-meso-tartaramida, IV: (KBr, cm'1): 3390, 3304, 1661, 1604, 1539, 1513, 1241, 1077, 1042, 824. F. Fez-se reagir 0,90 g de N,N,-bis-(4-D-arabinit-I-iloxi-feniI)-meso- tartaramida com complexo de hidróxido de enxofre-trimetilamida em analogia ao Exemplo I .B.. Nestas condições, obteve-se o sal de decassódio de di-O-sulfo-Ν,Ν’- -bis-[4-(2,3,4,5-tetra-0-sulfo-D-arabinit-l-iIoxi)-fenil]-meso-tartaramida, MS: m z 1621,0 (M reconstruído).

Exemplo 36 A. Fizeram-se reagir 14,6 g de 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinitol (pedido de patente europeia 247721 Al, 21 de Abnl de 1987, DOW CHEMICAL COMPANY) em 55 ml de piridina com 12,7 g de cloreto de p-tolueno-sulfonilo sob adição de 0,05 g de 4-(N,N-dimetilamino)-pindina. Depois de se destilar o dissolvente processou-se a mistura reaccional com ácido clorídrico/gelo e acetato de etilo de maneira a extrair. Obteve-se 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l-0-(4-metil--femlsulfonil)-D-arabinitol, que se recnstalizou em acetato de etilo/n-hexano, análise elementar calculada para CigH2c07S: C = 55,94%, H = 6,78%; determinada: C = 56,02%, H = 6,77%. B. Em analogia com o Exemplo 33.A., fízeram-se reagir 11,60 g de 2,3:4,5-φ--0-isopropilideno-l-0-(4~metil-fenilsulfonil)-D-arabinitol com 8,50 g de 4’--benziloxi-bifenil-4-ol (H-Kapitza & Zentel, Makromol. Chem. 192, 1859 (1991)) e 20,7 g de carbonato de potássio no seio de 350 ml de Ν,Ν-dimetilformamida. Depois de se destilar o dissolvente, cromatografou-se o produto bruto em gel de sílica com cloreto de metileno e metanol. Obteve-se l-0-(4,-benziloxi-bifenil-4-il)-2,3:4,5-di--O-isopropilideno-D-arabinitol, MS: /wjt490 ([M] ). C. Desbenzilaram-se 9,80 g de l-0-(4’-benziloxi-bifenil-4-il)-2,3,4,5-di-p--isopropilideno-D-arabinitol por hidrogenaçao catalítica com 2,5 g de Pd-carvão (10%) no seio de acetato de etilo. Obteve-se l-0-(4’-hidroxi-bifeml-4-il)-2,3,4,5-cji--O-isopropilideno-D-arabinitol, análise elementar calculada para C23H2806: C =; 68,98%, H = 7,05%; determinada: C 68,76%, H = 7,10%. D. Fizeram-se reagir como se descreveu no Exemplo 33.A., 2,00 g de 1-0(4’--hidroxi-bifeniI-4-il)-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinitol e 1,18 g de 2,3--isopropilideno-1,4-bis-0-(4-metil-fenilsulfonil)-L-treítol. Cromatografou-se o produto bruto em gel de sílica com n-hexano, cloreto de metileno e acetonitrilo. Obteve-se 1,4-bis-0-[4’-(2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinit-1 -iloxi)-bifenil-4--il]-2,3-0-isopropilideno-L-treitol, MS. m/z 927,4 ([M+H]~). E. Dissolveram-se 1,63 g de l,4-bis-0-[4’-(2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D--arabinit-l-iloxi)-bifenil-4-iI]-2,3-0-isoropiIideno-L-treitol em 50 ml de dioxano, misturou-se com 15 ml de ácido trifluoracético (a 70% em água) e agitou-se a refluxo durante 3 horas. Depois de arrefecer até à temperatura ambiente, concentrou--se à secura, misturou-se o resíduo por duas vezes com 50 ml de tolueno e destilou-se azeotropicamente. Tomou-se o resíduo assim obtido em 50 ml de água, agitou-se à temperatura ambiente durante 1 hora, depois arrefeceu-se a I0°C e filtrou-se. Depois de secar sobre pentóxido de fósforo a 50°C obteve-se l,4-bis-0-(4’-D--arabinit-l-iloxi-bifenil-4-il)-L-treitol, análise elementar calculada para C38H46Oi4: C = 62,80%, H = 6,38%; determinada: C 63,12%, H = 6,21%. F. Em analogia com o Exemplo I.B., fizeram-se reagir 1,09 g de l,4-bis-0-(^’--D-arabmit-l-iloxi-bifenil-4-il)-L-treitol com complexo de trióxido de enxofre--trimetilamina. Nestas condições obteve-se sal de decassódio de 2,3-di-0-sulfo-l,4--bis-0-[4,-(2,3,4,5-tetra-0-sulfo-D-arabinit-l-iloxi)-bifenil-4-il]-L-treitol, MS: m z 1746,0 (M reconstruícfo).

Exemplo 37 A. Em analogia com o Exemplo 33. A., fizeram-se reagir 1,37 g de 2,3:4,5-di-0--isopropilideno-l,6-bis-0-(4-metil-fenilsulfonil)-galactitoI e 1,96 g de 1-0(4’- -hidroxi-bifenil-4-il)-2,3,4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinitol (Exemplo 36.C). O produto bruto foi cromatografo em gel de sílica com n-hexano e cloreto de metilenp. Obteve-se 1,6-bis-0-[4’-(2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinit-1 -iloxi)-bifenil-4--il]-2,3,4,5-di-0-isopropilídeno-galactitol, MS: m/z 1026,5 ([M]"). B. Em analogia com o Exemplo 35.E., fizeram-se reagir 1,70 g de l,6-bis-0-[4’--(2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinit-1 -iloxi)-bifenil-4-il]-2,3,4,5-di-O-isopropi-lideno-galactitol com ácido trifluoracético (a 75%) em dioxano e processou-se analogamente. Obteve-se l,4-bis-0-(4’-arabinit-l -iIoxi-bifenil-4-iI)-galactitol, análise elementar calculada para C40H50O16: C = 61,06%, H = 6,41%, determinada: C 60,99%, H = 6,50%. C. Em analogia com o Exemplo I.B., fizeram-se reagir 1,10 g de l,4-bis-0-(4’--D-arabinit-l-iloxi-bifenil-4-il)-galactitol com complexo de trióxido de enxofre--trimetilamina. Obteve-se assim sal de dodecassódio de 2,3,4,5-tetra-0-sulfo-l,6--bis-0-[4,-(2,3,4,5-tetra-0-sulfo-D-arabinit-I-iloxi)-bifenil-4-iI]-galactitol, MS: m z 2011,0 (M reconstruícjo).

Exemplo 38 A. Agitou-se a 100°C durante 6 horas 1,96 g de l-0-(4’-hidroxi-bifenil-4-il)--2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinitol (Exemplo 36.C.) e 0,56 g de 1,2:5,6--dianidro-3,4-0-isopropilideno-D-manitol (Y. Le Merrer et al., Heterocycles 25, 541 (1987)) em 130 ml de dimetilformamida com adição de 4,15 g de carbonato de potássio. Despejou-se a mistura reaccional em água com gelo, extraiu-se com cloreto de metileno, lavaram-se com água as fases de cloreto de metileno depois de reunidas, secou-se sobre sulfato de magnésio, filtrou-se e evaporou-se à secura. Cromatografou-se o produto bruto assim obtido em gel de sílica com hexano e 75 acetato de etilo. Obteve-se l,6-bis-0-[4’-(2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinit-l--iloxi)-bifend-4-il]-3,4-0-isopropibdeno-D-manitol, MS: m/z 1010,6 ([M+Na]'). B. Em analogia com o Exemplo 35.E., fizeram-se reagir 1,60 g de l,6-bis-0-[4’--(2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinit-1 -iloxi)-bifeniI-4-il]-2,4-0-isopropilideno--D-manitoI com ácido trifluoracético (a 50%) em dioxano. Obteve-se 1,6-bis-0-(4’--D-arabinit-l-iloxi-bifenil-4-il)-D-manitol, IV: (KBr, cm'1): 3381, 1607, 1499, 1242, 1176, 1045,823. C. Fizeram-se reagir 1,18 g de l,6-bis-0-(4’-D-arabinit-l-iloxi-bifeml-4-il)-P--manitol com complexo de trióxido de enxofre-trimetilamina, em analogia com o Exemplo I.B.. Obteve-se assim o sal de dodecassódio de 2,3,4,5-tetra-0-sulfo-l,6--bis-0-[4’-(2,3,4,5-tetra-0-sulfo-D-arabinit-1 -iloxi)-bifenil-4-il]-D-manitol, MS: m z 2011,0 (M reconstruído).

Exemplo 39 A. Sob árgon fizeram-se reagir 30,1 g de anisol e 26,0 g de l,l-dicloro-2,2--dietoxi-etano em 56 ml de ácido acético glacial com adição de 42 ml de ácido sulfurico concentrado a 5°C. Despejou-se a mistura reaccional sobre 350 ml de água com gelo e em seguida filtrou-se sob sucção; lavou-se a pasta de cristais com água e secou-se. Recristalizou-se o produto bruto assim obtido em cloreto de metileno e n-hexano. Obteve-se 4,4’-dimetoxi-l,r-(2,2-dicIoro-etilideno)-dibenzeno, ponto de fusão: 113-116°C. B. Aqueceram-se a 190°C 6,0 g de 4,4’-dimetoxi-l,l’-(2,2-dicloro-etUideno)--dibenzeno com 9,7 g de terc-butilato de potássio. Depois de se adicionar água com gelo filtrou-se, lavou-se com água e recristalizou-se em cloreto de metileno e n- -hexano. Obteve-se 4,4,dimetoxi-l,l ’-etmodiil-dibenzeno, ponto de fusão: 140-142°C. C. Sob atmosfera de árgon fizeram-se reagir 16,4 g de 4,4’-dimetoxi-I,r--etinodiil-dibenzeno em 240 ml de cloreto de metileno, a -75°C, com 12,6 ml de tribrometo de boro. Depois da hidrólise, isolou-se o produto por extracção com éter. Secou-se a fase orgânica sobre sulfato de magnésio, filtrou-se e concentrou-se à secura. Cromatografou-se o produto em gel de sílica com n-hexano e acetato de etilo. Nestas condições obteve-se 4,4’-etinodiil-difenol, MS: m z 210,0 ([M]~). D. 2,56 g de 4,4’-etinodiil-difenol e 4,71 g de 2,3,4,5-di-O-isopropilideno-l-O--(4-metil-fenilsulfonil)-D-arabinitol (Exemplo 36.A.) em 500 ml de dimetilformamida com adição de 8,43 g de carbonato de potássio. Em seguida, despejou-se a mistura reaccional em água com gelo, extraiu-se com cloreto de metileno, lavaram-se com água as fases de cloreto de metileno depois de reunidas, secou-se sobre sulfato de magnésio, filtrou-se e concentrou-se à secura. Cromatografou-se o produto bruto assim obtido em gel de sílica com cloreto de metileno e acetonitrilo. Obteve-se l-0-[4-(4-hidroxi-feniletinil)-fenil]-2,3:4,5-di-0--isopropilideno-D-arabinitol, MS: m z 424,0 ([M]~). E. Fizeram-se reagir em analogia com o Exemplo 33.A. 2,12 g de l-0-[4-(4- -hidroxi-feniletinil)-fenil]-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinitol e 1,43 g de 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l ,6-bis-0-(4-metil-fenilsulfonil)-galactitol sob adição de 1,73 g de carbonato de potássio e processou-se a mistura reaccional. Cromatografou-se o produto bruto em gel de sílica com n-hexano e cloreto de metileno. Obteve-se 1,6-bis-0-[4-[4-(2,3,4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinít-1 - 77

-iloxi)-fenilsulfonil]-fenil]-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galactitol, IV: (KBr, çm'1): 2230, 1608, 1516, 1246, 1173, 1064, 1025, 836. F. Em analogia com o Exemplo 35.E., fizeram-se reagir a refluxo durante 7 horas 1,80 g de l,6-bis-0-[4-[4-(2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinit-l-iloxi)--feniletinil]-fenil]-2,3,4,5-di-0-isopropilideno-galactitol e em seguida processou-se de maneira análoga. Obteve-se l,6-bis-0-[4-(4-D-arabinit-l-iloxi-feniletinil)-fenil]--galactitol que se utilizou dírectamente na fase seguinte do processo. G. Em analogia com o Exemplo I.B., fez-se reagir 1,40 g de 1,6-bis-0-[4-(4-D--arabinit-l-iloxi-feniletinil)-feniI]-galactitol com um complexo de trióxido de enxofre-trimetilamina. Nestas condições, obteve-se o sal de dodecassódio de 2,3:4,5-tetra-0-sulfo-l ,6-bis-0-[4-[4-(2,3:4,5-tetra-0-sulfo-D-arabinit-1 -iloxi)-fenil--etinil]-fenil]-galactitol, MS: m 'z 2060,0 (M reconstruído).

Exemplo 40 A. Misturaram-se 9,61 g de 2,3-di-hidroxi-naftalino em 70 ml de solução 0,95 M de etilato de sódio em etanol, com 6,92 ml de cloreto de benzilo e agitou-se a refluxo durante 4 horas. Depois de se arrefecer até à temperatura ambiente, processou-se com água, ácido clorídrico diluído e cloreto de metileno de maneira a realizar a extracção. Cromatografou-se o produto bruto em gel de sílica com n-hexano e cloreto de metileno. Nestas condições, obteve-se 3-benziloxi-naftaIen-2--ol, MS: m.z 250,0 ([ΜΓ). B. Em analogia com o Exemplo 33.A., a 100°C fizeram-se reagir 2,80 g de 3-benziloxi-naftalen-2-ol e 4,33 g de 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l-0-(4-metil--fenilsulfonil)-D-arabinitol (Exemplo 36.A.) e processou-se de maneira análoga. Cromatografou-se o produto bruto assim obtido em gel de sílica com cloreto de

metileno. O produto foi recristalizado em n-hexano. Obteve-se l-0-(3-benziloxi--naftalen-2-il)-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinitol, MS: mz 464,0 ([M]'). C. Hidrogenaram-se à temperatura ambiente e sob a pressão normal durante 5 horas 4,80 g de l-0-(3-benziloxi-naftalen-2-il)-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D--arabinitol com 1,0 g de Pd-carvão (10%) como catalisador no seio de metanol. Depois de se separar o catalisador por filtração, destilou-se o dissolvente em vácuo produzido por trompa de água e cromatografou-se o resíduo em gel de sílica com cloreto de metileno e metanol. Obteve-se l-0-(3-hidroxi-nafíalen-2-il)-2,3:4,5-dí-O--isopropilideno-D-arabinitol, MS: m z 374,0 ([M]~). D. Em analogia com o Exemplo 33.A. fizeram-se reagir 1,10 g de 1-0-(3--hidroxi-naftalen-2-il)-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinitol e 0,84 g de 2,3:4,5--di-0-isopropilideno-l,6-bis-0-(4-metil-fenilsulfonil)-galactitol a 100°C durante 6 horas e processou-se de maneira análoga. Cromatografou-se o produto bruto em gel de sílica com n-hexano e acetato de etilo. Nestas condições, obteve-se l,6-bis-0-[3--(2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinit-l-iloxi)-naftalen-2-il]-2,3:4,5-di-0-isopro-pilideno-galactitol, IY: (Eelicula, cm'1): 1628, 1510, L256, 1216, 1176, 1096, 1017, 747. E. Em analogia com o Exemplo 35.E. fez-se reagir 0,90 g de l,6-bis-0-[3--(2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinit-l -iloxi)-naftalen-2-il]-2,3:4,5-di-0-isopro-pilideno-galactitol com 10 ml de ácido trifluoracético (a 70% em água) em 25 ml cje dioxano. Depois do processamento, obteve-se l,6-bis-0-(3-D-arabinit-l-iloxi--naftalen-2-il)-galactitol que foi utilizado directamente na operação seguinte. F. Em analogia com o Exemplo l.B. fez-se reagir 0,83 g de l,6-bis-0-(3-D--arabinit-l-iloxi-naftalen-2-il)-galactitol com o complexo de trióxido de enxofre- 79 -trimetilamina. Nestas condições obteve-se o sal de dodecassódio de l,6-bis-0-[3--(2,3,4,5-tetra-0-sulfo-D-arabinit-l-iloxi)-naftaIen-2-iI]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galac-titol, MS: m/z 1960,0 (M reconstruído).

Exemplo 41 A. De maneira análoga ao Exemplo 33.A., agitaram-se 1,53 g de 1-0(3--hidroxi-naftalen-2-il)-2,3:4,5-di-isopropilideno-D-arabinitol (Exemplo 40.C.) e 0,97 g de 2,3-0-isopropilideno-l,4-di-0-(4-metil-fenilsulfonil)-L-treitol durante 21 horas a 100°C e processou-se de forma análoga. Cromatografou-se o produto bruto em gel de sílica com tolueno e acetato de etilo. Assim, obteve-se l,4-bis-0-[3--(2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinit-l-iloxi)-nafíaIen-2-il]-2,3-0-isopropilide-no-L-treitol, que foi utilizado directamente na fase seguinte. B. Em analogia com o Exemplo 35.E., agitou-se a refluxo durante 7 horas 0,65 g de l,4-bis-0-[3-(2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinit-l-iloxi)-naftalen-2-il]-2,3--O-isopropilideno-L-treitol e processou-se analogamente. Obteve-se l,4-bis-0-(3-D--arabinit-l-iloxi-naftalen-2-il)-L-treitol, que foi utilizado directamente na fase segujnte. C. Em. analogia com o Exemplo I.B., fez-se reagir 0,50 g de I,4-bis-0-(3-D--arabinit-l-iloxi-naftalen-2-il)-L-treitol com o complexo de trióxido de enxofre--trimetilamina. Nestas condições, obteve-se sal de tetrassódio de 2,3-di-0-sulfo-l,4--bis-0-[3-(2,3,4,5-tetra-0-sulfo-D-arabinit-l-iloxi)-naftalen-2-il]-L-treitol, MS: m z 1695,0 (M reconstruído).

Exemplo 42

Sob a pressão normal hidrogenou-se 0,50 g do sal de dodecassódio de 2,3,4,5-tetra--0-sulfo-l,6-bis-0-[4-[4-(2,3,4,5-tetra-0-sulfo-D-arabinit-l-iloxi)-feniletinil]-fenil]-

Opiznpojd ΟΠ3ΒΑ UI3 3[U3A[0SSip O ss-nopíssp ‘OEÔBXqy: JO(^ iOpBSI[B}B3 op OBÒBIBdsS Bp Siodaa O[U3 3P 0}B}33B 3p [UI 093 UI3 (%ç) OBAJEO 3iqOS OIpB[Bd 3p 8 Q‘Z ap opóipE qos jopuBui-Q-ouspiiidojdosi-o-t7‘£;-[nu3j-(iizu3q-ixopzu3q-t7)-t7]-o-siq--g‘ | ap g £o‘9 as-uiBiBuagojprq 3}u3iquiE BiTUBisduiai b 3 [Buuou opsssjd γ j '(.ΡΉΜ+ΙΜ]) P‘P8L zw S1A1 ‘ioiiuBui-Q-ou3piiidojdosi-o-t7‘C-[liu3j-(iizu3q-ix°iizu3q-.^.^]_Q_siq-9£ i bulioj ejsap 3S-3.\3iqo ouBxsq-u 3 opp sp o[B}3ob uis oind O^tipOid O 3S-nOZI[B}SlJ33g 0[I}3 Sp OJBJ33B 3 OUBX3q-U UIOO BDIJIS 3p [38 UI3 opuq cqn.po.id o 3s-n0jE.1S0jBU10.13 bSojbub bjisubui sp ss-nosssooid 3 SBaoq /,[ sjuBirtp [joOOl 3 Iou3j-(iizu3q-ixo[izu3q-t7)-i7 sp § oí% 3 [ojiuBui-Q-ouspqidoidosi-o--[/£-o.ipniBip-9£ç:££i sp g ss-uojiSb !·γ·^ cqduraxg o uioo biSojbub uig g LM]) 0‘063 2. w :sn £[0U3j-([izu3q-ix0[tzu3q-^)-

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08 81

por trompa de água e cromatografou-se o resíduo em gel de sílica com cloreto de metileno e metanol. Obteve-se l,6-bis-0-[4-(4-hidroxi-benzil)-fenil]-3,4-0--isopropilideno-D-manitol, MS: mz 604,4 ([M+NH*]'). D. Analogamente ao Exemplo 33. A., agitaram-se durante 21 horas a 100°C 1,20 g de l,6-bis-0-[4-(4-hidroxi-benzil)-fenil]-3,4-0-isopropilideno-D-manitoI e 1,58 g de 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l-0-(4-metiI-feniI-sulfonil)-D-arabinitoI (Exemplo 36.A.) e processou-se analogamente. Cromatografou-se o produto bruto em gel de sílica com cloreto de metileno e metanol. Obteve-se assim l,6-bis-0-[4-[4-(2,3:4,5--di-0-isopropilideno-D-arabinit-l-iloxi)-benzil]-fenil]-3,4-0-isopropilideno-D-ma-nitol, MS: m z 1032,5 ([M+NU,]')· E. Analogamente ao Exemplo 35.E., agitaram-se a refluxo durante 3 horas 1,30 g de l,6-bis-0-[4-[4-(2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinit-l-iloxi)-benzil]-fenil]--3,4-O-isopropilideno-D-manitol. Depois de se arrefecer até à temperatura ambiente, separaram-se por filtração sob sucção os cristais precipitados e secaram-se em alto vácuo a 50°C sobre pentóxido de fósforo. Obteve-se assim I,6-bis-0-[4-(4-D--arabinit-l-iIoxi-benzil)-fenil]-D-manitoI, MS: m z 832,4 ([M+NH4]"). F. Em analogia com o Exemplo I .B., fez-se reagir 0,81 g de 1,6-bis-0-[4-(4-D--arabínit-l-iloxi-benzil)-fenil]-D-manitol com complexo de trióxido de enxoffe--trímetilamina. Obteve-se assim o sal de dodecassódio de 2,3,4,5-tetra-0-sulfo-l,6-bis-0-[4-[4-(2,3,4,5-tetra-0-sulfo-D-arabinit-l-iloxi)-benzil]-fenil]-D-manitol, MS: m z 2039,0 (M reconstruído).

Exemplo 44 A. Analogamente ao Exemplo 33.A. fizeram-se reagir 3,65 g de 4-hidroxi--benzoato de metilo e 7,73 g de 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l-0-(4-metil- 52 -fenilsulfonil)-D-arabinitol (Exemplo 36.A.) sob adição de 13,82 g de carbonato de potássio no seio de 300 ml de dimetilformamida e processou-se. Cromatografou-se o produto em gel de sílica com cloreto de metileno e metanol. Obteve-se assim 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l-0-(4-metoxicarbonil-feniI)-D-arabinitol, MS: m z 366,0 (JMT). B. Agitaram-se a 50°C durante 16 horas 7,37 g de 2,3,4,5-di-O-isopropilideno--l-0-(4-metoxicarbonil-fenil)-D-arabinitol em 20 ml de lixívia de soda (a 28%) em 300 ml de metanol. Depois da neutralização com ácido clorídrico 6N, destilou-se o metanol em vácuo produzido por trompa de água. Despejou-se o resíduo sobre água com gelo, extraiu-se com cloreto de metileno, lavaram-se com água as fases de cloreto de metileno depois de reunidas, secou-se sobre sulfato de magnésio, filtrou--se e evaporou-se à secura. Cromatografou-se o produto bruto em gel de sílica com cloreto de metileno e metanol. Obteve-se assim l-0-(4-carboxi-fenil)-2,3:4,5-di-O--isopropilideno-D-arabinitol, MS: m 'z 352,0 ([M]-). C. Agitaram-se a 100°C durante 1 hora 17,60 g de 2,3:4,5-di-0-isopropilideno--l,6-bis-0-(4-metil-fenilsulfonil)-galactitol e 16,00 g de azida de sódio em 300 ml de dimetilformamida. Processou-se em seguida a mistura reaccional com água gelada e acetato de etilo de maneira a extrair. Recristalizou-se o produto bruto assim obtido em cloreto de metileno e n-hexano. Obteve-se assim l,6-diazido-l,6--didesoxi-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galactitol, MS: m z 297,0 ([M-CH3] ). D. À temperatura ambiente e sob a pressão normal, hidrogenaram-se 9,20 g de l,6-diazido-l,6-didesoxi-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galacitol sob adição de 2,50 g de paládio-carvão (10%) em 250 ml de metanol. Depois de se filtrar o catalisador, destilou-se o dissolvente em vácuo produzido por trompa de água. Tomou-se o 83

resíduo em etanol. Adicionaram-se dois equivalentes de ácido clorídrico (em etanol), concentrou-se à secura mais uma vez e recristalizou-se o produto em metanol e éter. Obteve-se assim di-hidrocíoreto de l,6-diamino-l,6-didesoxi-2,3:4,5-di-0--ísopropilideno-galactitol, MS: m z 245,0 ([M-CH3]'). E. Agitaram-se a 0-5°C durante 2 horas 1,41 g de l-0-(4-carboxi-fenil)-2,3:4,5--di-O-isopropilideno-D-arabinitol e 0,70 g de 2-cloro-4,6-dimetoxi-l,3,5-triazina com adição de 0,88 ml de 4-metil-morfolina em 40 ml de acetonitrilo/dimetilforma-mida(3:l). Em seguida, adicionou-se 0,67 g de l,6-diamino-l,6-didesoxi-2,3:4,5-di--O-isopropilideno-galactitol e agitou-se à temperatura ambiente durante mais 18 horas. Processou-se com água gelada e cloreto de metileno de maneira a extrair. Cromatografou-se o produto bruto em gel de sílica com cloreto de metileno e metanol. Por recristalização em cloreto de metileno e n-hexano obteve-se 1,6--didesoxi-2,3,4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis-[4-(2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D--arabinit-l-iloxi)-benzoilamino]-galactitol, MS: m z 929,3 ([M+H]-). F. Agitou-se durante 4 horas a 100°C 1,32 g de l,6-didesoxi-2,3:4,5-di-0--isopropilideno-l,6-bis-[4-(2,3,4,5-di-0-isopropilideno-D-arabimt-l-iloxi)-benzoilq-mino]-galactitol em 21 ml de ácido acético glacial/água 2:1. Depois de se arrefecer até à temperatura ambiente, adicionaram-se 30 ml de água e filtrou-se. Lavou-se o produto por duas vezes com 5 ml de água de cada vez, e depois secou-se em alto vácuo durante 3 horas a 50°C sobre pentóxido de fósforo. Obteve-se assim 1,6-bis--(4-D-arabinit-l-iloxi-benzoilamino)-l,6-didesoxi-galactitol, MS: mz 711,6 ([M+Naj~). G. Fez-se reagir 0,90 g de l,6-bis-(4-D-arabinit-l-iloxi-benzoilamino)-l,6--didesoxi-galactitol com complexo de trióxido de enxofre-trimetílamina. Assim, 84 obteve-se sal de dodecassódio de l,6-didesoxi-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-l,6-bis-[4--(2,3,4,5-tetra-0-sulfo-D-arabinit-l-iloxi)-benzoilamino]-galactitol, MS: mz 1912,0 (M reconstruído).

Exemplo 45 A. Analogamente ao Exemplo 33.A. fizeram-se reagir durante 4 horas a 100°C 4,85 g de 3-hidroxi-2-naftaleno-2-carboxiIato de metilo e 7,73 g de 2,3:4,5-di-0--isopropilideno-l-0-(4-metil-fenilsulfonil)-D-arabinitol (Exemplo 36.A.) sob adição de 13,82 g de carbonato de potássio no seio de 300 ml de dimetilformamida e processou-se a mistura reactiva. Cromatografou-se o produto bruto em gel de sílica com cloreto de metileno e metanol. Nestas condições obteve-se 2,3:4,5-di-0--isopropilideno-l-0-(3-metoxicarbonil-naftaleno-2-il)-D-arabinitol, MS: mz 416,0 ([MD. B. Agitaram-se 6,00 g de 2,3,4,5-di-0-isopropilideno-l-0-(3-metoxicarbonij--naftalen-2-il)-D-arabmitol com 14,4 ml de lixívia de soda cáustica (28%) em 250 ml de metanol durante 16 horas à temperatura ambiente. Depois da neutralização com ácido clorídrico 6N destilou-se o metanol em vácuo produzido por trompa de água. Despejou-se o resíduo em água com gelo, extraiu-se com cloreto de metileno, lavaram-se com água as fases de cloreto de metileno depois de reunidas, secaram-se sobre sulfato de magnésio, filtrou-se e vaporizou-se. Cromatografou-se o produto bruto em gel de sílica com cloreto de metileno e metanol. Obteve-se assim 1-0-(3--carboxi-naftaien-2-il)-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinitol, MS: mz 402,0 ([MD- C. Analogamente ao Exemplo 44.E., fízeram-se reagir 1,61 g de 1-0-(3-carboxj--naftalen-2-il)-2,3,4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinitol e 0,70 g de 2-cloro-4,6- $5

-dimetoxi-l,3,5-triazina com 0,67 g de dicloridrato de l,6-diamino-l,6-didesoxi--2,3:4,5-di-0-ísopropilideno-galactitol sob adição de 0,88 ml de 4-metil-morfolin^ e processou-se a mistura reaccíonal. O produto bruto foi cromatografado em gel de sílica com cloreto de metileno e metanol. Obteve-se assim l,6-didesoxi-2,3,4,5-di--0-isopropilideno-l,6-bis-[3-(2,3,4,5-di-0-isopropilideno-D-arabmit-l-iloxi)-nafta-len-2-i 1carbomlamino]-galactitoL, MS: mz 1028,8 ([MJ~). D. Analogamente ao Exemplo 44.F., fizeram-se reagir 1,95 g de 1,6-didespxi- -2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis-[3-(2,3,4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinit-I--iloxi)-naftalen-2-ilcarbonilamino]-galactitol e processou-se a mistura reaccional. Obteve-se 1,6-bis-(3-D-arabinit-1 -iloxi-naftalen-2-ilcarbonilamino)-1,6-didesoxi- -galactitol, MS: m/z 788,8 ([M]"). E. Em analogia com o Exemplo l.B. fizeram-se reagir 1,11 g de l,6-bis-(3-D--arabinit-1 -iloxi-naftalin-2-ilcarbonilamino)-1,6-didesoxi-galactitol com complexo de trióxido de enxofre-trimeti lamina. Nestas condições, obteve-se o sal cje dodecassódio de l,6-didesoxi-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-l,6-bis-[3-(2,3,4,5-tetra-0-sulfo--D-arabinit-l-iloxi)-naftaIen-2-ilcarboniIamino]-galactitol, MS: m'z 2013,0 (M reconstruído).

Exemplo 46

A. Agitaram-se a refluxo durante 2 horas 27,75 g de 3,4-di-O-isopropilideno-D--manitol e 65,25 g de óxido de dibutil-estanho no seio de 2,5 1 de benzeno com a utilização de um separador de água. Depois disso concentrou-se em vácuo produzido por trompa de água até um volume total de 700 ml. Em seguida adicionou-se à temperatura ambiente 46,25 g de iodeto de tetrabutilamónio, adicionou-se gota a gota 37,50 ml de 3-bromo-propin-l-ina e agitou-se a mistura reaccional a 70°C 86 durante 7 horas. Depois de se concentrar em vácuo produzido por jacto de água, cromatografou-se o produto bruto em gel de sílica com n-hexano e acetato de etilo. Obteve-se assim l,6-di-0-prop-2-inil-3,4-0-isopropilideno-D-manítol, MS: mz 298,0 ([M]~). B. Agitaram-se a 100°C durante 3 horas 21,20 g de l,6-di-0-prop-2-inil-3,4-0--isopropilideno-D-manitol em 300 ml de ácido acético glacial/água 2:1. Concentrou--se a mistura reaccional em vácuo produzido por jacto de água. Com adição por duas vezes de 50 ml de tolueno, destilou-se azeotropicamente a água. O resíduo foi seco durante 18 horas em alto vácuo sobre pentóxido de fósforo. Obteve-se assim 1,6-bis--O-prop-2-mil-D-manitol, que foi utilizado directamente na fase seguinte do processo. C. Dissolveram-se 27,00 g de 1,6-bis-0-prop-2-inii-D-manitol em 300 ml de piridina, misturou-se à temperatura ambiente sob atmosfera de árgon com 100 ml de anidrido acético e agitou-se durante 4 horas. Em seguida, processou-se com água e acetato de etilo por extracção. Cromatografou-se o produto bruto assim obtido em gel de sílica com cloreto de metileno e metanol. Nestas circunstâncias, obtevç-se 2,3,4,5-tetra-0-acetil-I,6-bis-0-prop-2-iniI-D-manitoI, MS: m z 367,0 ([M-QAc]~). D. Sob adição de 56,00 g de carbonato de potássio, fizeram-se reagir 9,80 g de 4-iodo-fenol e 15,80 g de 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l-0-(4-metil-fenilsulfonil)-P--arabinitol (Exemplo 36.A.) em 500 ml de dimetilformamida durante 6 horas a 100°C e processou-se de maneira análoga ao Exemplo 33.A.. Cromatografou-se o produto bruto em gel de sílica com hexano e acetato de etilo. Obteve-se assim, 1 -O--(4-iodo-fenil)-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabimtol, MS: m/z 434,0 {[M]~). 87 E. Fizeram-se reagir 14,90 g de l-0-(4-iodo-fenil)-2,3:4,5-di-0-isopropilideno--D-arabinitol de maneira análoga ao Exemplo 46.B. e processou-se. O produto bruto foi suspenso em éter, filtrado e seco em alto vácuo a 50°C durante 16 horas sobre pentóxido de fósforo. O l-0-(4-iodo-fenil)-D-arabinitol assim obtido foi utilizado directamente na fase seguinte do processo. F. Analogamente ao Exemplo 46.C., fizeram-se reagir 12,85 g de l-0-(4-iodo--fenil)-D-arabinitol e processou-se. Recristalizou-se o produto bruto em acetato de etilo e hexano. Obteve-se assim 2,3,4,5-tetra-0-acetil-l-0-(4-iod-fenil)-D-arabinitol, MS: m. z 522,0 ([Mf). G. Sob atmosfera de árgon, agitaram-se 2,61 g de 2,3,4,5-tetra-0-acetil-l-0-(4--iodo-fenil)-D-arabinitol, 0,58 g de paládio(0)-tetraquis-trifenilfosfina e 0,19 g de iodeto de cobre (I) no seio de 25 ml de diisopropilamina/dimetil formam ida (1:1) durante 45 minutos à temperatura ambiente. Em seguida, adicionou-se gota a gota uma solução de 1,07 g de 2,3,4,5-tetra-0-acetil-I,6-bis-0-prop-2-inil-D-manitol em 10 ml de diisopropil-amina/dimetilformamida (1:1) e agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante 70 horas. Sob adição de 100 ml de tolueno, concentrou-se a mistura reaccional e depois destilou-se a dimetilformamida em alto vácuo. O produto bruto assim obtido foi cromatografado em gel de sílica com cloreto de metileno e metanol. Nestas condições obteve-se 2,3,4,5-tetra-0-acetil-l,6--bis-0-[3-[4-(2,3,4,5-tetra-0-acetil-D-arabinit-l-iloxi)-fenil]-prop-2-inil]-D-manitol, que foi utilizado directamente na fase seguinte do processo. H. Dissolveram-se 3,42 g de 2,3,4,5-tetra-0-acetil-I,6-bis-0-[3-[4-(2,3,4,5--tetra-0-acetil-D-arabinit-l-iloxi)-fenil]-prop-2-inil]-D-manitol em 100 ml de metanol, misturou-se com 10 ml de solução de metilato de sódio (5,4 molar) e 88

agitou-se à temperatura ambiente durante 16 horas. Regulou-se a solução reaccional para pH 2-3 com ácido clorídrico aquoso e concentrou-se à secura. Suspendeu-se o resíduo em água, fíltrou-se, lavou-se duas vezes com 10 ml de água de cada vez e secou-se em alto vácuo durante cinco horas sobre pentóxido de fósforo. Obteve-se nestas condições 1,6-bis-0-[3-(4-D-arabinit-1 -iloxi-fenil)-prop-2-inil]-D-manitol, MS: m z 733,6 ([M+Naf). I. Em analogia com o Exemplo l.B. fizeram-se reagir 1,70 g de l,6-bis-0-[3--(4-arabinit-l-iloxi-fenil)-prop-2-inil]-D-manitol com o complexo de trióxido de enxofre-trímetilamina. Nestas condições, obteve-se o sal de decassódio de 2,3,4,5--tetra-O-sulfo-1,6-bis-0-[3-[4-(2,3,4,5-tetra-0-sulfo-D-arabinit-1 iloxi)-fenil]-prop--2-inil]-D-manitol, MS: mz 1934,0 (M reconstruídas).

Exemplo 47 A. Dissolveram-se 14,10 g de 2,3-0-isopropilideno-l,4-bis-0-(4-metil--femlsulfonil)-L-treitol e 6,00 g de 4-benziloxi-fenol em 300 ml de dimetilformamida, misturou-se com 20,70 g de carbonato de potássio e agitou-se a 100°C durante 6 horas. Processou-se a mistura reaccional com água gelada e cloreto de metileno de maneira a extrair. Em seguida, cromatografou-se o produto bruto em gel de sílica com n-hexano e cloreto de metileno. Obteve-se assim l-0-(4-benziloxi--fenil)-2,3-0-isopropilideno-4-0-(4-metil-fenilsulfonil)-L-treitol, MS: mz 498,0 B. De maneira análoga ao Exemplo 47.A. fizeram-se reagir 5,81 g de 4-(^--benziloxi-benzil)-fenol (Exemplo 43.A.) e 7,73 g de 2,3:4,5-di-0-isopropilídeno-l--0-(4-metil-fenilsulfonil)-D-arabinitol (Exemplo 36.A.) e processou-se de maneira análoga. Cromatografou-se o produto bruto em gel de sílica com n-hexano e cloreto 89

de metilo. Obteve-se assim l-0-[4-(4-benziloxi-benzil)-feníl]-2,3:4,5-di-0--isopropilideno-D-arabinitol, MS: mz 504,0 ([M]'). C. Hidrogenaram-se 8,30 g de l-0-[4-(4-benziloxi-benzil)-fenil]-2,3:4,5-di-0--isopropilideno-D-arabinitol em 85 ml de tetra-hiffodurano com adição de 1,60 g de paládio sobre carvão (10%) à pressão normal e à temperatura ambiente. Depois de se separar o catalisador por filtração, o filtrado foi concentrado à secura. Obteve-se assim l-0-[4-(4-hidroxi-benzil)-fenil]-2,3,4,5-di-0-isopropiIideno-D-arabinitol, MS: m/z 414,0 ([M]+). D. Fizeram-se reagir a 100°C 1,66 g de l-0-[4-(4-hidroxi-benzil)-fenil]-2,3:4,5--di-O-isopropilideno-D-arabinitol e 1,99 g de l-0-(4-benziIoxi-fenil)-2,3-0--isopropilideno-4-0-(4-metil-fenilsulfonil)-L-treitol de maneira análoga ao Exemplo 47.A. no seio de dimetilformamida e processou-se de maneira análoga. Cromatografou-se o produto bruto em gel de sílica com n-hexano e cloreto de metileno. Obteve-se assim l-0-(4-benziloxi-fenil)-4-0[4-[4-(2,3,4,5-di-0--isopropilideno-D-arabinit-l-iloxi)-benzil]-fenil]-L-treitol, MS: m z 740,0 ([M]~). E. Analogamente ao Exemplo 47.C., hidrogenaram-se 2,50 g de 1-0-(4--benziloxi-fenil)-4-0-[4-[4-(2,3.4,5-di-O-isopropilideno-D-arabinit-1 -iloxi)-benzil]--fenil]-L-treitol e processou-se. Obteve-se assim l-0-(4-hidroxi-fenil)-4-0-[4-[4--(2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinit-l-iloxi)-benzil]-fenilj-L-treitol, MS: m z 650,0 ([M]"). F. Em analogia com o Exemplo 47.A., fizeram-se reagir a refluxo durante 3 horas 1,80 g de l-0-(4-hidroxi-fenil)-4-0-[4-[4-(2,3:4,5-di-0-isopropilideno-D--arabinit-l-iloxi)-benzil]-fenil]-L-treitol e 0,79 g de 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l,6--bis-0-(4-metil-fenilsulfonil)-galactitoI em 20 ml de dimetilformamida e processou- -se de maneira análoga. Cromatografou-se o produto bruto em gel de sílica com tolueno e acetato de etilo. Obteve-se 1,6-bis-0-[4-[4-0-[4-[4-(2,3:4,5-di-0--isopropilideno-D-arabinit-1 -iloxi)-benzil]-fenil]-2,3-di-0-isopropilideno-L-treit-1 --iloxi]-fenil]-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galactitol, que foi utilizado directamente na fase seguinte do processo. G. Em analogia com o Exemplo 35.E., agitou-se a refluxo durante 3 horas 0,35 g de l,6-bis-0-[4-[4-0-[4-[4-(2,3,4,5-di-0-isopropilideno-D-arabinit-l-iloxi)-benzil]--fenil]-2,3-di-0-isopropilideno-L-treit-1 -iloxi]-fenil]-2,3:4,5-di-0-isopropilideno--galactitol e processou-se de maneira análoga. Obteve-se 1,6-bis-0-[4-[4-0-[4-[4--(D-arabinit-l-iloxi)-benzil]-fenil]-L-treit-l-iloxi]-feniI]-galactitol, que foi directamente utilizado na fase operacional seguinte. H. Em analogia com o Exemplo I.D., fez-se reagir 0,27 g de 1,6-bis-0-[4-[4-0--[4-[4-(D-arabinit-l-iloxi)-benzil]-fenil]-L-treit-l-iloxi]-fenil]-galactitol com complexo de trióxido de enxofre-trimetilamina. Nestas condições, obteve-se o sal de hexadecassódio de 2,3,4,5-tetra-0-sulfo-1,6-bis-0-[4-[4-0-[4-[4-(2,3,4,5-tetra-0--sulfo-D-arabinit-l-iloxi)-benzil]-fenil]-2,3-di-0-sulfo-L-treit-l-iloxi-fenil]-galacti-tol, MS: m z 2840,0 (M reconstruído).

Exemplo 48 A. Em 60 ml de dimetilformamida suspenderam-se 5,0 g de 2,3:4,5-di-0--isopropilideno-l,6-bis-0-(4-metil-fenilsulfoniI)-galactitol, 5,26 g de 4-benziloxi--fenol e 3,6 g de carbonato de potássio isento de água fínamente moído e aqueceu-se sob atmosfera de árgon a 130°C durante 18 horas. Em seguida, diluiu-se a mistura reaccional com água e separaram-se por filtração os cristais assim formados Obteve- -se l,6-bis-0-(4-benziloxi-fenil)-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galactitol com a forma de cristais incolores, MS: m/z 625 ([M-H]'). B. Numa atmosfera de hidrogénio, hidrogenaram-se completamente 4,0 g de 1.6- bis-O-(4-benziloxi-fenil)-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galactitol em 150 ml de tetra-hidrofiirano sob adição de 0,5 g de paládio sobre carvão (10%). Em seguida, filtrou-se a mistura reaccional através de um filtro de celulose com 0,8 μ. Concentrou-se o filtrado e cristalizou-se o resíduo em éter; nestas condições obteve--se l,6-bis-0-(4-hidroxi-fenil)-2,3,4,5-di-0-isopropilideno-galactitol como sólido incolor, MS: m/z 446 ([M]-). C. Em 25 ml de dimetilformamida suspenderam-se 1,78 g de l,6-bis-0-(4--hidroxi-fenil)-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galactítol, 3,2 g de l-0-benzil-2,3-0--isopropílideno-4-0-(4-metiI-fenilsulfoniI)-D-treitoI (E. Hungerbiihler & D. Seebach, Helvetica Chimica Acta 64, 687 (1981)) e 1,2 g de carbonato de potássio isento de água finamente moído e agitou-se sob atmosfera de árgon a 130°C durante 24 horas. Em seguida, diluíu-se a mistura reaccional com água e extraiu-se a fase aquosa com éter. As fases etéreas depois de diluídas foram secas sobre sulfato de magnésio e concentradas à secura. Cromatografou-se o produto bruto assim obtido em gel de sílica com 5% de éter em cloreto de metileno. Nessas condições, obteve--se l,6-bis-0-[4-(4-0-benzil-2,3-0-isopropilideno-D-treit-l-iloxi)-fenil]-2,3,4,5-di--O-isopropilideno-galactitol sob a forma de cristais incolores, MS: m z 932,6 ([Μ+ΝΗ4Γ). D. Numa atmosfera de hidrogénio, hidrogenaram-se completamente 2,3 g de 1.6- bis-0-[4-(4-0-benzil-2,3-0-isopropilideno-D-treit-1 -iloxi)-fenil]-2,3,4,5-di-0--isopropilideno-galactitol em 20 ml de tetra-hidrofurano sob adição de 0,2 g de paládio sobre carvão (10%). Em seguida, filtrou-se a mistura reaccional através de um filtro de celulose de 0,8 μ e concentrou-se à secura; obteve-se assim 2,3:4,5-di--O-isopropilideno-1,6-bis-0-[4-(2,3-0-isopropilideno-D-treit-1 -iloxi)-feníl]-galacti-tol como óleo incolor, MS: mz 734 ([M]~). E. A 0°C misturaram-se 1,74 g de 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis-0-[4--(2,3-0-isopropilideno-D-treit-l-iloxi)-fenil]-galactitol, dissolvido em 15 ml de piridina, com uma solução de 1,35 g de cloreto de p-toluenossulfonilo em 5 ml de piridina à temperatura ambiente durante 60 horas. Depois disto, misturou-se a mistura reaccional com água com gelo, agitou-se à temperatura ambiente durante 1,5 horas e extraiu-se com éter. Lavaram-se as fase etéreas, depois de diluídas, com ácido clorídrico IN e água, secou-se sobre sulfato de magnésio e concentrou-se. O produto assim obtido foi cromatografado em gel de sílica com 5% de éter em cloreto de metileno, Obteve-se, nestas condições, 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis-0-[4--[2,3-0-isopropilideno-4-0-(4-metil-fenil-sulfonil)-D-treit-l-iloxi]-fenil]-galactitol sob a forma de óleo incolor, MS: m z 870 ([M-TosOH]'). F. Suspenderam-se 2,21 g de 2,3,4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis-0-[4-[2,3-Ç>--isopropilideno-4-0-(4-metil-fenil-sulfoníl)-D-treit-1 -iloxi]-fenil]-galactitol, 1,13 g de (E)-3-(4-hidroxi-fenil)-acrilato de metilo e 0,87 g de carbonato de potássio isento de água finamente moído em 10 ml de dimetilformamida e, sob atmosfera de árgon, agitou-se a 130°C durante 20 horas. Em seguida, concentrou-se a mistura reaccional, diluiu-se com água e extraiu-se com cloreto de metileno. As fases de cloreto de metileno depois de reunidas foram lavadas com solução de hidróxido de sódio lb( e com água, secas sobre sulfato de magnésio e concentradas à secura. O produto bruto 2,3,4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis-0-[4-[2,3-0-isopropilideno-4-0[4-[(E)-2-meto- 93 &

xicarbonil-vinil]-fenil]-D-treit-l-iloxi]-fenil]-galactitol foi dissolvido em 30 ml de metanol, misturado com 3 ml de solução de hidróxido de sódio concentrada e 3 qil de água e aqueceu-se a refluxo durante 3 horas. Em seguida, sob arrefecimento com gelo, acidulou-se com ácido clorídrico IN e separou-se por filtração o precipitado assim obtido. Nestas circunstâncias resultou I,6-bis-0-[4-[4-0-[4-[(E)-2-carboxi--vinil]-fenil]-2,3-0-isopropilideno-D-treit-1 -iloxi]-fenil]-2,3:4,5-di-0-isopropilide-no-galactitol sob a forma de cristais incolores, MS: m z 1025,4 ([M-H]'). G. Sob exclusão de humidade, misturou-se 1,02 g de l,6-bis-0-[4-[4-0-[4-[(E)--2-carboxi-vinil]-fenil]-2,3-0-isopropilideno-D-treit-1 -iloxi]-fenil]-2,3:4,5-di-0-iso-propilideno-galactitol, dissolvido em 5 ml de dimetilformamida, a 0-5°C, com 0,3 ml de 4-metilmorfolina e agitou-se intensamente durante 10 minutos. Em seguida, adicionou-se 0,40 g de 2-cloro-4,6-dimetoxi-l,3,5-triazina sólida e agitou-se a 0-5°C durante mais 2 horas. Em seguida, adicionou-se 0,40 g de D-glucamina e agitou-se à temperatura ambiente durante mais 18 horas. Em seguida, diluiu-se a mistura reaccional com água, concentrou-se, misturou-se novamente com água, aqueceu-se à ebulição durante um curto intervalo de tempo e fíltrou-se. Nestas condições, resultpu l,6-bis-0-[4-[4-0-[4-[(E)-2-D-glucit-l-ilcarbamoil-vinil]-fenil]-2,3-0-isopropilide-no-D-treit-l-iloxi]-fenil-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galactitol como sólido acastanhado, MS: m/z 1353,6 ([M+H]~). no-galactitol em 3 ml de dioxano, 0,5 ml de ácido trifluoracético e 0,7 ml de água e aqueceu-se a refluxo a 95°C durante 18 horas. Em seguida, concentrou-se a mistura reaccional até à secura; nestas condições resultou l,6-bis-0-[4-[4-0-[4-(E)-2-D- 94 94

-glucit-1 -ilcarbamoil-vinil}-feml]-D-treit-l-iloxi]-fenil]-galactitol com a forma de sólido incolor, MS: m/z 1215,9 ([M+NaJ"). I. Analogamente ao Exemplo I.B., fez-se reagir l,6-bis-0-[4-[4-0-[4-[(E)-2-P--glucit-l-iIcarbamoil-vinil]-fenil]-D-treit-I-iloxi]-fenil]-galactitol de maneira a obter-se o sal de octadecassódio de 1,6-bis-0-[4-[4-0-[4-(E)-2-(2,3,4,5,6-penta-O--sulfo-D-glucit-l-ilcarbamoil-vinil]-fenil]-2,3-di-0-D-treit-l-iloxi]-fenil]-2,3,4,5-te-tra-O-sulfo-galactitol, [aj,° -3,6° (c 0,7; água).

Exemplo 49 A. Numa atmosfera de hidrogénio, hidrogenou-se completamente 0,15 g de 1,6--bis-0-[4-[4-0-[4-[(E)-2-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-l-ilcarbamoil-viniI]-fe-ml]-2,3-di-0-sulfo-treit-l-iloxi]-fenil]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol no seio de 5 ml de água destilada com adição de 100 mg de paládio sobre carvão (10%). Em seguida, filtrou-se a mistura reaccional através de um filtro de celulose de 0,8 μ e liofilizou-se o filtrado; nestas condições obteve-se o sal de octadecassódio de 1,6--bis-0-[4-[4-0-[4-[2-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-l-ilcarbamoil)-etil]-fenil]--2,3-di-0-sulfo-D-treit'l-iloxi]-feml]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol, [a£°-3,4° (c 0,5; água).

Exemplo 50 A. Suspenderam-se 37,6 g de 2,3-0-isopropilideno-l,4-di-0-(4-metil--fenilsulfonil)-L-treitol, 16,0 g de 3-hidroxi-naftaleno-2-carboxilato de metilo e 13 g de carbonato de potássio isento de água finamente moído e agitou-se a 100°C sob atmosfera de árgon durante 60 horas. Em seguida, diluiu-se a mistura reaccional com água e extraiu-se a fase aquosa com éter. Secaram-se as fases etéreas depois de reunidas, sobre sulfato de magnésio e concentrou-se à secura. Cromatografou-se o produto bruto assim obtido em gel de sílica com éter em cloreto de metileno. Nestgs condições obteve-se 2,3-O-isopropilideno-l -0-(3-metoxicarbonil-naftalin-2-il)-4-0--(4-metil-fenilsulfonil)-L-treitol. Dissolveu-se este em 100 ml de dimetilformamida e, depois de se adicionar 15,6 g de 4-benziloxi-fenol e 15,6 g de carbonato de potássio isento de água finamente moído, agitou-se sob atmosfera de árgon a 130°p durante 18 horas. Em seguida, diluiu-se a mistura reaccional com água, extraiu-se a fase aquosa com éter. Secaram-se as fases etéreas depois reunidas sobre sulfato de magnésio e concentrou-se. Cromatografou-se o produto bruto assim obtido em gel de sílica com éter e cloreto de metileno Nestas condições, obteve-se 1-0-(4--benziloxi-fenil)-2,3-0-isopropilideno-4-0-(3-metoxicarbonil-naftalen-2-il)-L-treitol sob a forma de óleo incolor, MS: m z 528 ([M]-). B. Numa atmosfera de hidrogénio, hidrogenaram-se completamente 1,72 g de 1--0-(4-benziloxi-fenil)-2,3-0-isopropilideno-4-0-(3-metoxi-carbonil-naftalen-2-il)--L-treitol em 40 ml de tetra-hidrofurano sob adição de 0,2 g de paládio sobre carvão (10%). Em seguida, filtrou-se a mistura reaccional através de um filtro de celulose de 0,8 μ e concentrou-se o filtrado; nestas condições obteve-se 1-0-(4-hidroxi--feml)-2,3-0-isopropilideno-4-0-(3-metoxicarbonil-naftalen-2-il)-L-treitol como óleo incolor, MS: m z 438 ([M]*). C. 0,57 g de 2,3,4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis-0-(4-metiI-fenilsulfonil)--galactitol, 0,95 g de l-0-(4-hidroxi-fenil)-2,3-0-isopropilideno-4-0-(3--metoxicarbonil-naftaIen-2-il)-L-treitol e 0,3 g de carbonato de potássio isento de água fínamente moído foram suspensos em 10 ml de acetonitrilo e agitou-se sob atmosfera de árgon a 130°C durante 100 horas. Em seguida, diluiu-se a mistura 96 ρ reaccíonal com água, extraiu-se a fase aquosa com cloreto de metileno. As fases de cloreto de metileno depois de reunidas foram secas sobre sulfato de magnésio e concentradas. O produto bruto assim obtido foi cromatografado em gel de sílica com éter em cloreto de metileno. Obteve-se assim 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis-0--[4-[2,3-0-isopropilideno-4-0-(3-metoxicarbonil-naftalen-2-il)-L-treit-l-iloxi]-fe-nil]-galactiíol como sólido incolor, MS: mz 1120,4 ([M+NRJ'). D. Dissolveu-se 0,58 g de 2,3,4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis-0-[4-[2,3-0--isopropilideno-4-0-(3-0-isopropilideno-4-0-(3-metoxicarbonil-naftalen-2-il)-L--treit-l-iloxi-fenilj-galactitol em 5 ml de metoxietanol, misturou-se com 5 ml çle solução de hidróxido de sódio concentrada e aqueceu-se a refluxo durante 5 horas. Depois acidulou-se, sob arrefecimento com gelo, com ácido clorídrico IN, extraiu-se com cloreto de metileno, secaram-se sobre sulfato de magnésio as fases de cloreto de metileno depois de reunidas e concentrou-se. Cromatografou-se o produto bruto assim obtido em gel de sílica com etanol em cloreto de metileno. Obteve-se assim como sólido incolor 1,6-bis-0-[4-[4-O-(3-carboxi-naftalin-2-il)-2,3-0-isopropilide-no-L-treit-l-iloxi]-fenil]-2,3,4,5-di-0-isopropilideno-galactitol, MS: mz 1073,2 ([M-H]). E. Sob exclusão de humidade, a 0-5°C, misturou-se 0,30 g de l,6-bis-0-[4-[4--0-(3-carboxi-naftalen-2-il)-2,3-0-isopropilideno-L-treit-L-iloxi]-fenil]-2,3.4,5,-di--O-isopropilideno-galactitol, dissolvido em 3 ml de dimetilformamida com 0,7 ml de 4-metiImorfolina e agitou-se intensamente durante 10 minutos. Em seguida, adicionou-se 0,105 g de 2-cloro-4,6-dimetoxi-I,3,5-triazina e agitou-se a 0-5°C durante mais 2 horas. Em seguida, adicionou-se 0,109 g de D-glucamina e agitou-se à temperatura ambiente durante mais 18 horas. Em seguida, diluiu-se a mistura 97

reaccional com água, evaporou-se à secura, retomou-se novamente com água, aqueceu-se à ebulição durante um curto intervalo de tempo e filtrou-se. Resultou dessa forma 1,6-bis-0-[4-[4-0-(3-D-glucit-l -ilcarbamoil-naftalen-2-il)-2,3-0--isopropilideno-L-treit-l-iloxi]-fenil]-2,3,4,5-di-0-isopropilideno-galactitol como sólido incolor, MS: mz 1401,7 ([M+H]~). F. Suspendeu-se 0,34 g de l,6-bis-0-[4-[4-0-(3-glucit-l-ilcarbamoil-naftalen-2--il)-2,3-0-isopropilideno-L-treit-l-iloxi]-fenil]-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galacti-tol em 4 ml de dioxano, 0,5 ml de ácido trifluoracético e 0,3 ml de água e aqueceu-se a refluxo a 110°C durante 18 horas. Em seguida, concentrou-se a mistura reaccional à secura; nessas condições, resultou l,6-bis-0-[4-[4-0-(3-D-glucit-l--ilcarbamoil-naftaIen-2-il)-L-treit-l-iloxi]-fenil]-galactitol como sólido incolor, MS: mz 1242,7 ([M+Hf). G. Analogamente ao Exemplo I.B., fez-se reagir l,6-bis-0-[4-[4-0-(3-D-glucit--l-ilcarbamoil-naftalen-2-il)-L-treit-l-iloxi]-fenil]-gaíactitol obtido antes, de maneira a obter-se o sal de octadecassódio de l,6-bis-0-[4-[4-0-[3-(2,3,4,5,6-penta--0-sulfo-D-glucit-l-ilcarbamoil)-naftalen-2-il]-2,3-di-0-sulfo-L-treit-l-iloxi]-fenil]--2,3,4,5-tetra-O-sulfo-galactitol, [a£° +2,3° (c 0,6; água), MS: mz 3075,0 (M reconstruído).

Exemplo 51 A. Dissolveram-se 5,0 g de bis-(4-hidroxi-fenil)-metano em 40 ml de etanol, adicionaram-se 33 ml de solução de etanolato de sódio 1 molar em etanol e, em seguida, 3,6 ml de cloreto benzilo e aqueceu-se a mistura reaccional a refluxo durante 4 horas sob exclusão de humidade. Em seguida, acidulou-se com ácitjo clorídrico IN sob arrefecimento com gelo, extraiu-se com cloreto de metileno, 98

secaram-se as fases de cloreto de metileno depois reunidas sobre sulfato de magnésio e concentraram-se. Cromatografou-se o produto bruto assim obtido em gel de sílica com éter em cloreto de metileno. Obteve-se assim 4-(4-benziloxi-benzil)--fenol sob a forma de cristais incolores, MS: m z 290 ({M] ) B. Em 100 ml de acetonitrilo suspenderam-se 6,0 g de 2,3-O-isopropilideno-l ,4--di-0-(4-metil-fenilsulfonil)-L-treitol, 2,13 g de 4-hidroxibenzoato de metilo e 1,94 g de carbonato de potássio isento de água finamente moído e agitou-se a 100°C sob atmosfera de árgon durante 18 horas. Em seguida, diluiu-se a mistura reaccional com água, extraiu-se com cloreto de metileno, secaram-se as fases de cloreto de metileno sobre sulfato de magnésio depois de reunidas e concentrou-se. Cromatografou-se o resíduo com 5% de éter em cloreto de metileno em gel de sílica. Obteve-se assim 2,3-O-isopropilideno-l-0-(4-metoxicarbonil-fenil)-4-0-(4-metil--fenilsulfonil)-L-treitol como óleo incolor, MS: m z 450 ([M]^). C. Em 10 ml de dimetilformamida suspenderam-se 2,54 g de 2,3-0--isopropilideno-l-0-(4-metoxicarbonil-fenil)-4-0-(4-metil-feniIsulfonil)-L-treitol, 1,80 g de 4-(4-benziloxi-benzil)-fenol e 0,86 g de carbonato de potássio isento de água finamente moído e agitou-se sob atmosfera de árgon a 130°C durante 18 horas. Em seguida, diluiu-se a mistura reaccional com água e extraiu-se com cloreto de metileno. Secaram-se sobre sulfato de magnésio as fases de cloreto de metileno depois de reunidas, concentrou-se e cromatografou-se o resíduo com cloreto de metileno em gel de sílica. Obteve-se assim l-0-[4-(4-benziloxi-benzil)-fenil]-2,3-0--ísopropilideno-4-0-(4-metoxicarbonil-fenil)-L-treitol como sólido incolor, MS: (ir z 568 ([M]"). D. Hidrogenaram-se completamente 2,1 g de l-0-[4-(4-benziloxi-benzil)-fenil]--2,3-0-isopropilideno-4-0-(4-metoxicarbonil-fenil)-L-treitol em 40 ml de tetra--hidrofurano sob adição de 0,2 g de paládio sobre carvão (10%) numa atmosfera de hidrogénio. Em seguida, filtrou-se a mistura reaccional através de um filtro de celulose de 0,8 μ, concentrou-se o filtrado e cromatografou-se com 5% de éter em cloreto de metileno; nessas condições obteve-se l-0-[4-(4-hidroxi-benzil)-fenil]-2,3--0-ísopropilideno-4-0-(4-metoxicarbonil-fenil)-L-treitol como sólido incolor, MS: m z 478 ([M]"). E. Em 10 ml de acetonitrilo suspenderam-se 0,8 g de 2,3:4,5-di-0--isopropilideno-l,6-bis-0-(4-metil-fenilsulfonil)-gaIactitol, 1,47 g de l-0-[4-(4--hidroxi-benzil)-fenil]-2,3-0-isopropilideno-4-0-(4-metoxicarbonil-fenil)-L-treitol e 0,42 g de carbonato de potássio isento de água finamente moído e agitou-se sob refluxo e sob atmosfera de árgon durante 100 horas. Em seguida, diluiu-se a mistura reaccional com água, extraiu-se com cloreto de metileno, secaram-se as fases de cloreto de metileno, depois de reunidas, sobre sulfato de magnésio, concentrou-se. Cromatografou-se o resíduo em gel de sílica com 7% de éter em cloreto de metileno. Obteve-se assim 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-1,6-bis-0-[4-[4-[4-0-(4-metoxicarbo--nil-fenil)-2,3-0-isopropilideno-L-treit-l-iloxi]-benzil]-galactitol sob a forma de cristais incolores, MS: m z 1207,1 ([M+Na]-). F. Dissolveram-se 1,05 g de 2,3,4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis-0-[4-[4-[4-0--(4-metoxicarbonil-fenil)-2,3-0-isopropilideno-L-treit-l-iloxi]-benzil]-fenil]-galacti-tol em 10 ml de 2-metoxietanol, misturou-se com 1 ml de solução de hidróxido de sódio concentrada e 5 ml de água e aqueceu-se a refluxo durante 5 horas. Em seguida, acidulou-se com ácido clorídrico IN sob arrefecimento com gelo e separou- 100

-se por filtração o precipitado formado. Obteve-se assim l,6-bis-0-[4-[4-[4-0-(4-carboxi-fenil)-2,3-0-isopropilideno-L-treit-l-iloxi]-benzil]-fenil]-2,3:4,5-dí-0-iso-propilideno-galactitol sob a forma de sólido incolor, MS: mz 1178,1 ([M+Na]'). G. Sob exclusão de humidade, a 0-5°C, misturou-se 0,6 g de l,6-bis-0-[4-[4-[4--0-(4-carboxi-feniI)-2,3-0-isopropolideno-L-treit-l-iloxi]-benzil]-fenil]-2,3:4,5-di--O-isopropilideno-galactitol, dissolvido em 5 ml de dimetilformamida com 0,13 ml de 4-metilmorfolina e agitou-se intensamente durante 10 minutos. Em seguida, adicionou-se 0,20 g de 2-cloro-4,6-dimetoxi-l,3,5-triazina durante mais 2 horas. Em seguida, adicionou-se 0,21 g de D-glucamina e agitou-se à temperatura ambiente durante mais 18 horas. Em seguida, diluiu-se a mistura reaccional com água, concentrou-se, misturou-se novamente com água, aqueceu-se à ebulição durante um curto intervalo de tempo e filtrou-se. Nestas condições, resultou l,6-bis-0-[4-[4-[4--0-(4-D-glucit-1 -ilcarbamoil-feniI)-2,3-0-isopropilideno-L-treit-1 -iloxi]-benzil]-fe-nil]-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galactitol como sólido incolor, MS: mz 1481,0 ([MD- H. Suspendeu-se 0,7 g de l,6-bis-0-[4-[4-[4-0-(4-D-glucit-l-ilcarbamoil-fenil)--2,3-0-isopropilideno-L-treit-l-iloxi]-benzil]-fenil]-2,3:4,5-di-0-isopropilideno em 5 ml de dioxano, 1 ml de ácido trifluoracético e 1 ml de água e aqueceu-se a refluxo a 110°C durante 18 horas. Em seguida, concentrou-se a mistura reaccional até à secura, suspendeu-se em água e filtrou-se; dessa forma, resultou 1,6-bis-0-[4-[4-[4--0-(4-D-glucit-l -iIcarbamoil-feniI)-L-treit-1 -iloxi]-benzil]-fenil]-galactitol como sólido incolor, MS: m z 1344,3 ([M+Na]"). I. Analogamente ao Exemplo I.B., fez-se reagir o l,6-bis-0-[4-[4-[4-0-(4-D--glucit-1-ilcarbamoil-fenil)-L-treit-l-iloxi]-benzil]-fenil]-galactitol obtido antes de maneira a obter-se o sal de octadecassódio de l,6-bis-0-[4-[4-[4-0-[4-(2,3,4,5,6--penta-0-sulfo-D-glucit-l-iIcarbamoil)-fenil]-2,3-di-0-sulfo-L-treit-l-iloxi]-benzil]--fenil]-2,3:4,5-tetra-0-sulfo-galactitol, [aj^° 0,0° (c 0,6; água), MS: mz 3158,0 (M reconstruído).

Exemplo 52 A. Sob exclusão de humidade, a 0-5°C misturou-se 0,50 g de l,6-bis-0-[4-[4-0--[4-[(E)-2-carboxi-vinil]-fenil]-2,3-0-isopropilídeno-D-treit-l-iloxi]-fenil]-2,3:4,5--di-O-isopropilideno-galactitol (Exemplo 48. F.), dissolvido em 5 ml de dimetilformamida com 0,11 ml de 4-metilmorfolina e agitou-se intensamente durante 10 minutos. Em seguida, adicionou-se 0,18 g de 2-cloro-4,6-dimetoxi-1,3,5--triazina sólida e agitou-se a 0-5°C durante mais 2 horas. Em seguida, adicionou-se 0,21 g de N-metil-D-glucamina e agitou-se à temperatura ambiente durante mais 18 horas. Em seguida, diluiu-se a mistura reaccional com água, concentrou-se à secura, misturou-se novamente com água, aqueceu-se à ebulição durante um curto intervalo de tempo e filtrou-se. Nestas condições resultou l,6-bis-0-[4-[4-0-[4-[(E)-2-(D--glucit-l-il-metil-carbamoil)-vinil]-fenil]-2,3-0-isopropilideno-D-treit-l-iloxi]--fenil]-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galactitol como sólido incolor, MS: m z 1403,7 ([M+NaD. B. Suspendeu-se 0,64 g de l,6-bis-0-[4-[4-0-[4-[(E)-2-(D-gIucit-l-il-mçtil--carbamoil)-vinil]-fenil]-2,3-0-isopropilideno-D-treit-l-iloxi]-fenil]-2,3:4,5-di-0--isopropilideno-galactitol em 4 ml de dioxano, 1 ml de ácido trifluoracético e 1 ml de água e aqueceu-se a refluxo a 110°C durante 18 horas. Em seguida, concentrou-se a mistura reaccional até à secura, misturou-se com 10 ml de água e 0,2 ml de 102 trietilamina e fíltrou-se; dissolveu-se o resíduo assim obtido em 10 ml de anidrido acético e 10 ml de piridina e agitou-se à temperatura ambiente durante 18 horas. Em seguida, diluiu-se a mistura reaccional com água, extraiu-se a fase aquosa com cloreto de meti leno e secaram-se sobre sulfato de magnésio as fases de cloreto de metileno depois de reunidas e concentrou-se. Cromatografou-se o produto bruto assim obtido em gel de sílica com 5% de isopropanol em cloreto de metilenp. Obteve-se nestas condições 2,3,4,5-tetra-0-acetil-l,6-bis-0-[4-[2,3-di-0-acetil-4-0--[4-[(E)-2-[(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-D-glucit-l-il)-metil-carbamoil]-vinil]-fenil]-D--treit-l-iloxi]-fenil]-galactitol como sólido incolor, MS: m z 1978,6 ([M+H]~). C. Dissolveu-se 0,34 g de 2,3,4,5-tetra-0-acetil-l,6-bis-0-[4-[2,3-di-0-acetil-4--0-[4-[(E)-2-[(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-D-glucit-l-il)-metil-carbamoil]-vinil]-feniI]--D-treit-l-iloxí]-fenil]-galactitol em 4 ml de metanol e 4 ml de tetra-hidrofurano, misturou-se com 0,3 ml de solução de metilato de sódio 1 molar em metanol e agitou-se à temperatura ambiente durante 18 horas. Separou-se por filtração o precipitado assim formado e lavou-se com metanol. Nestas condições, resultou 1,6--bis-0-[4-[4-0-[4-[(E)-2-(D-glucit-l-il-metil-carbamoil)-vinil]-fenil]-galactitol como sólido incolor, MS: m/z 1244,0 ([M+Na]"). D. De maneira análoga ao Exemplo I.B., fez-se reagir l,6-bis-0-[4-[4-0-[4--[(E)-2-(D-glucit-l-il-metil-carbamoil)-vinil]-fenil]-D-treit-l-iloxi]-fenil]-galactitol de maneira a obter-se o sal de octadecassódio de l,6-bis-0-[4-[4-0-[4-[(E)-2-[metil-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-l-il)-carbamoíl]-vinil]-fenil]-2,3-di-0-sulfo-D--treit-l-iloxi]-fenil]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol, [aj,0 +2,4° (c 0,8; água). 103

Exemplo 53 A. Numa atmosfera de hidrogénio hidrogenou-se completamente 0,23 g de sal de octadecassódio de l,6-bis-0-[4-[4-0-[4-[(E)-2-[metiI-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo--glucit-1 -il)-carbamoil]-vinil]-fenil]-2,3-di-0-suIfo-D-treit-1 -iloxi]-fenil]-2,3,4,5-te-tra-O-sulfo-galactitol (Exemplo 52.D.) em 5 ml de água destilada com adição de 50 mg de paládio sobre carvão (10%) e, em seguida, filtrou-se a mistura reaccional através de um filtro de celulose de 0,8 μ e liofilizou-se o filtrado. Nestas condições, obteve-se o sal de octadecassódio de l,6-bis-0-[4-[4-0-[4-[2-[metil-(2,3,4,5,6--penta-0-sulfo-D-glucit-l-il)-carbamoil]-etil]-fenil]-2,3-di-0-sulfo-D-treit-l-íloxi]--fenil]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol, [a]^0 -2,5° (c 0,6; água), MS: m z 3060,5 (M reconstruído).

Exemplo 54 A. Suspenderam-se 1,42 g de 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis-0-(4-metil--femlsulfonil)-galactitol, 1,25 g de 3-benziloxi-naftalen-2-iol (E. Weber et al., Chem. Ber. 122. 959 (1989)) e 1,40 g de carbonato de potássio isento de água finamente moído e, sob atmosfera de árgon, agitou-se a 100°C durante 16 horas. Em seguida, diluiu-se a mistura reaccional com água e gelo, separou-se por filtração o precipitado formado e dissolveu-se em cloreto de metileno. Secou-se a fase de cloreto de metileno sobre sulfato de magnésio e concentrou-se. Obteve-se assim 1,6--bis-0-(3-benziloxi-naftalen-2-il)-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galactitol sob a fqrma de cristais incolores, MS. m z 726 ([M]'). B. Hidrogenaram-se completamente 1,4 g de l,6-bis-0-(3-benziloxi-naftalen-2--il)-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galactitol em 50 ml de acetato de etilo com adição de 0,25 g de paládio sobre carvão (10%) numa atmosfera de hidrogénio. Em seguida, filtrou-se a mistura reaccional através de um filtro de celulose de 0,8 μ, concentrou-se o filtrado e recristalizou-se em éter/hexano; nestas condições obteve--se 1,6-bis-0-(3-hidroxi-naftalin-2-il)-2,3,4,5-di-0-isopropilideno-galactitol como sólido incolor, MS: m.z 546 ([ΜΓ) C. Em 50 ml de acetonitrilo suspenderam-se 3,76 g de 2,3-0-isopropilideno-l,4--bis-0-(4-metil-fenilsulfonil)-L-treitol, 1,60 g de 3-hidroxi-naftalin-2-carboxilato de metilo e 1,3 g de carbonato de potássio isento de água finamente moído e agitou-se sobre refluxo e sob atmosfera de árgon durante 60 horas. Em seguida diluiu-se a mistura reaccional com água e extraiu-se com cloreto de metileno. Secaram-se sobre sulfato de magnésio as fases de cloreto de metileno depois de reunidas, concentrou--se e cromatografou-se o resíduo em gel de sílica com 5% de éter em cloreto de metileno. Obteve-se assim 2,3-0-isopropilideno-l-0-(3-metoxicarbonil-naftalen-2--il)-4-0-(4-metil-fenilsulfonil)-L-treitol como óleo incolor, MS: m z 500 ([M]'). D. Em 20 ml de dimetilformamida suspenderam-se 1,3 g de 2,3-0--isopropilideno-l-0-(3-metoxicarbonil-naftalen-2-il)-4-0-(4-metil-fenilsulfonil)-L--treitol, 0,62 g de l,6-bis-0-(3-hidroxi-naftalen-2-il)-2,3:4,5-di-0-isopropilideno--galactitol e 0,48 g de carbonato de potássio isento de água finamente moído e agitou-se sob atmosfera de árgon a 100°C durante 8 horas. Em seguida, diluiu-se a mistura reaccional com água e extraiu-se com cloreto de metileno. Secaram-se sobre sulfato de magnésio as fases de cloreto de metileno depois de reunidas e concentraram-se e cromatografou-se o resíduo com 5% de éter em cloreto de metileno. Obteve-se assim 2,3,4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis-0-[3-[2,3-0- -isopropilideno-4-0-(3-metoxicar-bonil-nafíalen-2-il)-L-treit-l-iloxi]-naftalen-2-il]--galactitol sob a forma de sólido incolor, MS: mz 1220,5 ([Μ+ΝΉ4]*). E. Dissolveu-se 0,9 g de 2,3,4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis-0-[3-[2,3-0- -isopropilideno-4-0-(3-metoxicarbonil-naftalen-2-il)-L-treit-l-iloxi]-naftalen-2-il]-galactitol em 10 ml de 2-metoxietanol, misturou-se com 1,5 ml de solução concentrada de hidróxido de sódio e 2 ml de água e aqueceu-se a refluxo durante 16 horas. Depois, acidulou-se com ácido clorídrico IN sob arrefecimento com gelo e separou-se por filtração o precipitado formado. Obteve-se assim l,6-bis-0-[3-[4-0--(3-carboxi-nafialen-2-il)-2,3-isopropilideno-L-treit-l -iloxi]-naftalen-2-il]-2,3,4,5--dí-O-ísopropilideno-galactitol sob a forma de um sólido incolor, MS. mz 1173,2 ([M-H]'). F. Suspendeu-se 0,9 g de l,6-bis-0-[3-[4-0-(3-carboxi-naftalen-2-il)-2,3-0- -isopropilideno-l-treit-l-iloxi]-naftalen-2-il]-2,3,4,5-di-0-isopropilideno-galactitol em 16 ml de dioxano, 2 ml de ácido trifluoracético e 2 ml de água e aqueceu-se a refluxo a 110°C durante 18 horas. Em seguida, concentrou-se a mistura reaccional até à secura, suspendeu-se em água e filtrou-se; nestas condições, obteve-se corrjo resultado 1,6-bis-Q-[3-[4-(3 -carboxi-naftalen-2-il)-L-treit-1 -iloxi]-naftalen-2-il]-ga-lactitol sob a forma de sólido incolor, MS: m z 1013,0 ([M-H]'). G. Dissolveu-se 0,75 g de l,6-bís-0-[3-[4-(3-carboxi-naftalen-2-il)-L-treit-l- -iloxi]-naftalen-2-il]-galactitol em 10 ml de anidrido acético e 10 ml de piridina e agitou-se à temperatura ambiente durante 24 horas. Em seguida diluiu-se a mistura reaccional com água e separou-se por filtração o precipitado formado nessas condições. Obteve-se assim 2,3,4,5-tetra-0-acetil-l,6-bis-0-[3-[2,3-di-0-acetil-4-0- 106

-(3-carboxi-naftaIen-2-iI)-L-treit-l-iIoxi]-naftaIen-2-il]-gaIactitoI com a forma de sólido incolor, MS: m/z 1349,2 ([M-H]'). H. Misturou-se 0,96 g de 2,3,4,5-tetra-0-acetil-l,6-bis-0-[3-[2,3-di-0-acetil-4--0-(3-carboxi-naftalen-2-il)-L-treit-l-iloxi]-naftalen-2-il]-galactitol, dissolvido em 7 ml de dimetilformamida com 0,19 ml de 4-metilmorfolina, sob exclusão de humidade e a 0-5°C e agitou-se intensamente durante 10 minutos. Em seguida, adicionou-se 2-cloro-4,6-dimetoxi-l,3,5-triazina sólida e agitou-se durante mais 2 horas a 0-5°C. Em seguida, adicionou-se 0,31 g de D-glucamina e agitou-se à temperatura ambiente durante mais 18 horas. Em seguida, diluiu-se a mistura reaccional com água, concentrou-se, misturou-se novamente com água, aqueceu-se à ebulição durante urq curto intervalo de tempo e fíltrou-se. Nestas condições, resultou 2,3,4,5-tetra-O-acetil-1,6-bis-0-[3-[2,3-di-0-acetil-4-0-(3-D-glucit-l -ilcarbamoil--naftalen-2-il)-L-treit-l-iloxi]-nafialen-2-il]-galactitol como sólido incolor, MS: m/z 1678 ([Μ+ΗΓ). I. Dissolveu-se 0,50 g de 2,3,4,5-tetra-0-acetil-l,6-bis-0-[3-[2,3-di-0-acetil-4--0-(3-D-glucit-l-ilcarbamoil-naftalen-2-il)-L-treit-l-iloxi]-naftalen-2-il]-galactitol em 8 ml de metanol e 8 ml de tetra-hidrofurano, misturou-se com 0,6 ml de solução de metilato de sódio 1 molar em metanol e agitou-se a mistura reaccional durante 18 horas à temperatura ambiente. Separou-se por filtração o precipitado formado nestas condições e lavou-se com metanol. Nestas condições, resultou l,6-bis-O-[3-[4-0-(3--D-glucit-1 -ilcarbamoil-naftalen-2-il)-L-treit-1 -iloxi]-naftalen-2-il]-galactitol cpmo sólido incolor, MS: m/z 1341,2 ([M+H]l. K. Analogamente ao Exemplo I.B., fez-se reagir l,6-bis-0-[3-[4-0-(3-D-glucit--l-ilcarbamoil-naftalen-2-iI)-L-treit-l-iloxi]-naftaIen-2-il]-galactitoI, obtido antes, de 107

maneira a obter-se o sal de octadecassódio de l,6-bis-0-[3-[4-0-[3-(2,3,4,5,6-penta--0-sulfo-D-glucit-l-ilcarbamoil)-naftalen-2-il]-2,3-di-0-sulfo-L-treit-l-iloxi]-nafía-len-2-il]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitoL, [a£>° +6,1° (c 0,9; água).

Exemplo 55 A. Fizeram-se reagir a 100°C durante 6 horas 9,5 g de 2,3-0-isopropilideno-l,4--bis-0-(4-metil-fenilsulfonil)-L-treitol e 5,86 g de 4-(4-benziloxi-benzil)-fenol (Exemplo 51.A.) sob adição de 27,9 g de carbonato de potássio em 300 ml de dimetilformamida. Em seguida, processou-se a mistura reaccional com água com gelo e cloreto de metileno de maneira a extrair. Cromatografou-se o produto bruto em gel de sílica com n-hexano/acetato .de etilo. Obteve-se assim l-0-[4-(4--benziloxi-benzil)-fenil]-2,3-0-isopropilideno-4-0-(4-metil~fenilsulfonil)-L-trçitol como óleo incolor, MS: mlz 588,0 ([M]~). B. Em 30 ml de dimetilformamida suspenderam-se 3,0 g de l-0-[4-(4--benziloxi-benzil)-fenil]-2,3-0-isopropilideno-4-0-(4-metiI-fenilsulfonil)-L-treitol, 1,0 g de l,6-bis-0-4-(4-hidroxi-fenil)-2,3,4,5-di-0-isopropilideno-galactitol (Exemplo 48.B.) e 0,93 g de carbonato de potássio isento de água finamente moído e agitou-se a 100°C sob atmosfera de árgon durante 48 horas. Em seguida, diluiu-se a mistura reaccional com água e extraiu-se com éter. Secaram-se sobre sulfato de magnésio as fases etéreas depois de reunidas, concentrou-se e cromatografou-se o resíduo em gel de sílica com 5% de éter em cloreto de metileno. Obteve-se assim l,6-bis-0-[4-[4-0-[4-(4-benziloxi-benzil)-fenil]-2,3-0-isopropilideno-L-treitol-l-il-oxi]-fenil]-2,3,4,5-di-0-isopropilideno-galactitol como óleo amarelado, MS: miz 1296,4 ([Μ+ΝΗ+Γ). 108 108 c.

Numa atmosfera de hidrogénio, hidrogenou-se completamente 0,5 g de 1,6--bis-0-[4-[4-0-[4-(4-benziloxi-benzil)-fenilJ-2,3-0-isopropilideno-L-treitol-l-iloxij--fenil]-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galactitol em 10 ml de tetra-hidrofurano com adição de 0,1 g de paládio sobre carvão (10%). Em seguida, filtrou-se a mistura reaccional através dum filtro de celulose de 0,8 μ e concentrou-se o filtrado; oteve--se assim 1,6-bis-0-[4-[4-0-(4-hidroxi-benzil)-fenil]-2,3-0-isopropilideno-L-treitol--l-iloxi]-fenil]-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galactitol como sólido incolor, MS: míz 1097,2 ([M-H]·). D. Em 3 ml de dimetilformamida suspendeu-se 1,0 g de l,6-bis-0-[4-[4-0-[4--(4-hidroxi-benzil)-fenil]-2,3-0-isopropilideno-L-treitol-1 -iloxi]-fenil]-2,3:4,5-di-0--isopropilideno-galactitol, 0,9 g de 2,3-0-isopropilideno-l-0-(4-metoxicarbonil--fenil)-4-0-(4-metil-fenil-sulfonil)-L-treitol (Exemplo 51.B.) e 1,0 g de carbonato de potássio isento de água finamente moído e agitou-se a 100°C sob atmosfera de árgon durante 18 horas. Em seguida, diluiu-se a mistura reaccional com água e extraiu-se com éter, secaram-se sobre sulfato de magnésio as fases etéreas depois de reunidas e concentrou-se. Cromatografou-se o resíduo em gel de sílica com 2%-5% de éter em cloreto de metileno. Obteve-se assim 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis-0-[4-[2,3--0-isopropilideno-4-0-[4-[4-[2,3-0-isopropilideno-4-0-(4-metoxi-carbonil-fenil)--L-treitol-l-iloxi]-benzil]-fenil]-L-treit-l-iloxi-fenil]-galactitol como sólido incolor, MS: m/z 1673,8 ([M+NH4]"). E. Dissolveu-se 0,428 g de 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis-0-[4-[2,3-0--isopropilideno-4-0-[4-[2,3-0-isopropilideno-4-0-(4-metoxicarbonil-fenil)-L-treit--l-iloxi]-benzil]-fenil]-L-treit-l-iIoxi]-fenil]-galactitol em 5 ml de 2-metoxietanol, misturou-se com 1 ml de solução concentrada de hidróxido de sódio e 0,5 ml de 109 & água e aqueceu-se a refluxo durante 3 horas. Em seguida, sob arrefecimento com gelo, acidulou-se com ácido clorídrico 1 N e separou-se por filtração o precipitado formado. Obteve-se assim l,6-bis-0-[4-[4-0-[4-[4-[4-0-(4-carboxi-fenil)-2,3-0--isopropilideno-L-treitol-1 -iloxi]-benzil]-feniI]-2,3-0-isopropilideno-L-treit-1 -ilo-xi]-fenil]-2,3,4,5-di-0-isopropilideno-galactitol como sólido incolor, MS: m/z 1626,5 ([M-H]')· F. Dissolveu-se 0,345 g de l,6-bis-0-[4-[4-0-[4-[4-[4-0-(4-carboxi-feniI)-2,3--O-isopropilideno-L-treitoI-1 -iloxi]-benzil]-fenil]-2,3-0-isopropilideno-L-treit-1 -ilo-xi]-fenil]-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galactitol em 2 ml de dimetilformamida, sob exclusão de humidade misturou-se a 0-5°C com 0,1 ml de 4-metilmorfolina e agitou-se intensamente durante 10 minutos. Em seguida, adicionou-se 0,08 g de 2-cloro-4,6-dimetoxi-l,3,5-triazina sólida e agitou-se a 0-5°C durante mais 2 horas. Em seguida, adicionou-se 0,085 g de D-glucamina e agitou-se à temperatura ambiente durante mais 18 horas. Em seguida, diluiu-se a mistura reaccional com água, concentrou.-se, misturou-se novamente com água, aqueceu-se à ebulição durante um curto intervalo de tempo e filtrou-se. Nestas condições, resultou 1,6-bis--0-[4-[4-0-[4-[4-[4-O-(4-D-glucit-l-ilcarbamoiI-fenil)-2,3-O-isopropilideno-L-trei-tol-1 -iloxi]-benzil]-fenil]-2,3-0-isopropilideno-L-treit-1 -iloxi]-fenil]-2,3:4,5-di-0--isopropilideno-galactitol como sólido incolor, MS: mtx 1953,4 ([M+H]*). G. Suspendeu-se 0,38 g de l,6-bis-0-[4-[4-0-[4-[4-[4-0-(4-D-glucit-I--iIcarbamoil-fenil)-2,3-0-isopropilideno-L-treitol-l-iloxi]-benzil]-fenil]-2,3-0-iso-propilideno-L-treit-l-iloxi]-fenil]-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galactitol em 9 ml de dioxano, 1,6 ml de ácido trifluoracético e 3 ml de água e aqueceu-se a refluxo a 110°C durante 18 horas. Em seguida, concentrou-se a mistura reaccional até à 110 secura, suspendeu-se em água e fíltrou-se; nestas condições, resultou l,6-bis-0-[4--[4-0-[4-[4-[4-0-(4-D-glucit-1 -ilcarbamoil-fenil)-L-treit-1 -iloxi]-benzil]-fenil]-L--treit-l-iloxi]-fenil]-galactitol como sólido incolor, MS: mz 1737,8 ([M+Na]'). H. Analogamente ao Exemplo l.B. fez-se reagir l,6-bis-0-[4-[4-0-[4-[4-[4-0--(4-D-glucit-1 -ilcarbamoil-fenil)-L-treit-1 -iloxi]-benziI]-feniI]-L-treit-1 -iloxij-femlj--galactitol de maneira a obter-se o sal de docosassódio de l,6-bis-0-[4-[4-0-[4-[4--[4-0-[4-(2,3,4,5-penta-0-sulfo-D-glucit-l-ilcarbamoil)-fenil]-2,3-di-0-sulfo-L--treit-1 -iloxi]-benzil]-fenil]-2,3-di-0-sulfo-L-treit-1 -iloxi]~fenil]-2,3:4,5-tetra-0-sul-fo-galactitol, [a£° +4,7° (c 0,6; água), MS: m z 3959,0 (M reconstruído).

Exemplo 56 A. Suspenderam-se 1,2 g de l,6-bis-0-(3-carboxi-naftalen-l-il)-2,3:4,5-di-0--isopropilideno-galactitol (Exemplo 19.A.) em 15 ml de dioxano, 5 ml de ácido trifluroacético e 5 ml de água e aqueceu-se a refluxo a 110°C durante 17 horas. Em seguida, concentrou-se s mistura reaccional, misturou-se com água e filtrou-se. Resultou assim l,6-bis-0-(3-carboxi-naftalen-l-il)-galactitol como sólido incolor, MS: m z 521,2 ([M-tf]). B. À temperatura ambiente agitou-se durante 18 horas 0,96 g de l,6-bis-0-(3--carboxi-naftalen-l-il)-galactitol numa mistura de 6 ml de anidrido acético e 11 ml de piridina. Em seguida, concentrou-se a mistura reaccional, misturou-se com água gelada e com ácido clorídrico diluído e separou-se por filtração o precipitado assim formado. Nessas condições, resultou 2,3,4,5-tetra-0-acetil-l,6-bis-0-(3-carboxi--naftalen-I-il)-gaIactitol como sólido incolor, MS: m z 689,2 ([M-H]').

C

A 0°C misturou-se uma solução de 30 g de benzil-2-benziloxicarbonilamino- -2-desoxi-a-D-glucopiranosid (Heyns e Paulsen, Chem. Ber. 88, 188 (1955)) em 116 ml de piridina com uma solução 19,85 g de cloreto de p-tolilsulfonilo em 30 ml de diclorometano e agitou-se à temperatura ambiente durante 4 horas. Em seguida, despejou-se em ácido sulfunco 2 n arrefecido com gelo e extraiu-se cqm diclorometano. Lavaram-se as fases orgânicas com solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio, secou-se sobre sulfato de magnésio e concentrou-se. Cromatografou-se o resíduo com hexano/etilo em gel de sílica e obteve-se benzil-2--benziloxicarbonilamino-2-desoxi-6-0-(p-toliIsulfonil)-a-D-glucopiranósido, [a£° +101,8° (c 0,5, dioxano), MS: mz 580 ([M+Na]"). D. A temperatura, ambiente misturou-se uma solução de 32,14 g de benzil-2--benziloxicarbonilamino-2-desoxi-6-0-(p-tolil-sulfonil)-a-D-glucopiranósido em 75 ml de sulfóxido de dimetilo com 7,5 g de azida de sódio e agitou-se a 90°C durante 3 horas. Em seguida, despejou-se sobre gelo/água. Separaram-se por filtração sob sucção os cristais formados, lavou-se com água e secou-se. Obteve-se benzil-6--azido-2-benziloxicarbonilamino-2,6-didesoxi-a-D-glucopiranósido, [•E +119,6° (c 0,5; dioxano), MS: m/z 428 ([M+H]-). E. Misturou-se uma solução de 1,1 g de benzil-6-azido-2-benziloxicarbonilami-no-2,6-desoxi-a-D-glucopíranósido em 7,5 ml de tetra-hidrofurano e 69 μΐ de água com 674 mg de trifenilfosfina e agitou-se durante 24 horas. Em seguida, adicionou--se 1 ml de água à pasta espessa, agitou-se de novo durante 30 minutos e concentrou-se. Cristalizou-se o resíduo em metanol e obteve-se benzil-6-azido-2--benziloxicarbonilamino-2,6-didesoxi-a-D-glucopiranósido, [a]^°+124,2° (c 0,6; acetona), MS: m z 403 ([M+H]'). F.

Solubilizou-se a 80°C uma suspensão de 3,0 g de benzil-6-amino-2- -benziloxicarbonilamino-2,6-desoxi-a-D-glucopiranósido e 1,33 g de γ-lactona do ácido D-glucónico em 60 ml de dioxano e manteve a esta temperatura durante mais 18 horas. Separou-se por filtração sob sucção o produto precipitado, lavou-se copi dioxano, secou-se e obteve-se (benzil-2-benziloxicarbonilamino-2,6-didesoxi-a-D--glucopiranosid-6-il)-amida do ácido D-glucónico, [aj^° +120,0° (c 0,2; dioxano), MS: mfz 603,2 ([M+Na]~). . G. A temperatura ambiente acetilou-se uma solução de 1,4 g de (benzil-2--benziloxicarbonilamino-2,6-desoxi-a-D-glucopiranosid-6-il)-amida do ácido D-glucónico em 5 ml de piridina com 2 ml de anidrido acético durante 18 horas, concentrou-se e obteve-se (benzil-3,4-di-0-acetil-2-benziloxicarbonilamino-2,6--didesoxi-a-D-glucopiranosid-6-il)-amida do ácido 2,3,4,5,6-penta-O-acetil-D--glucónico, [aj>° +84,0° (c 0,2; dioxano), MS: mz 897,3 ([M+Na]”). H. À temperatura ambiente hidrogenou-se uma solução de 250 mg de (benzil--3,4-di-0-acetil-2-benziloxicarbonilamino-2,6-desoxi-a-D-glucopiranosid-6-il)-ami-da do ácido 2,3,4,5,6-penta-acetil-D-glucónico em 20 ml de dioxano e 2 ml de água em presença de paládio sobre carvão (10%). Depois de 2 horas, filtrou-se o catalisador sobre um auxiliar de filtração e concentrou-se. Cnstalizou-se o resíduo em acetato de etilo/éter e obteve-se (benzil-3,4-di-0-acetil-2-ammo-2,6-didesoxi-pc--D-glucopiranosid-6-il)-amida do ácido 2,3,4,5,6-penta-O-acetil-D-glucónico, [aj° +96,0° (c 0,2; dioxano), MS: mz 741,1 ([M+H]~). I. Sob exclusão de humidade, a 0-5°C, misturou-se uma solução de 0,60 g de 2,3,4,5-tetra-0-acetil-l,6-bís-0-(3-carboxi-naftahn-l-il)-galactitol em 8 ml de 113

dimetilformamida com 0,21 ml de 4-metilmorfolina e agitou-se intensamente durante 10 minutos. Em seguida, adicionou-se 0,31 g de 2-cloro-4,6-dimetoxi-1,3,5--triazina sólida e agitou-se a 0-5°C durante mais 2 horas. Em seguida, adicionou-se 1,27 g de (benzil-3,4-di-0-acetil-2-amino-2,6-desoxi-a-D-gIucopiranosid-6-il)--amida do ácido 2,3,4,5,6-penta-O-acetil-D-glucónico e agitou-se à temperatura ambiente durante mais 18 horas. Em seguida, diluiu-se a mistura reaccional com água várias vezes e evaporou-se a 40-50°C sob pressão diminuída e distribuiu-se entre água/metanol e cloreto de metileno. Secaram-se sobre sulfato de magnésio as fases de cloreto de metileno depois de reunidas, filtrou-se, concentrou-se e cromatografou-se o resíduo assim obtido em gel de sílica com cloreto de metileno/metanol; nestas condições, obteve-se l,6-bis-0-[3-[benzil-2,6-didesoxí-6--(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-D-gluconoilamino)-3,4-di-0-acetil-a-D-glucopiranosid-2--ilcarbamoil]-naftalen-l-il]-2,3,4,5-tetra-0-acetiI-galactitol como sólido incolor, MS: mz 2157,4 ([M+NaT). K. Dissolveu-se 0,71 g de l,6-bis-0-[3-[benzil-2,6-didesoxi-6-(2,3,4,5,6-penta--0-acetil-D-gluconoilamino)-3,4-di-0-acetil-a-D-glucopiranosid-2-ilcarbamoil]--naftalen-l-il]-2,3,4,5-tetra-0-acetil-galactitol em 8 ml de metanol e 8 ml de tetrç--hidrofurano, misturou-se com 0,3 ml de solução de metilato de sódio 1 molar em metanol e agitou-se à temperatura ambiente durante 18 horas. Separou-se por filtração o precipitado assim formado. Resultou então l,6-bis-0-[3-(benzil-2,6--didesoxi-6-D-gluconoilamino-a-D-glucopiranosid-2-ilcarbamoil)-naftalen-l-il]-ga-lactitol como sólido incolor, MS; mz 1401,7 ([M+Na]~). L.

Analogamente ao Exemplo I.B., fez-se reagir l,6-bis-0[3-(benzil-2,6- 114

-didesoxi-6-D-gluconoilamino-a-D-glucopiranosid-2-ilcarbamoil)-naftalen-l-il]-ga~ lactitol assim obtido, de maneira a obter-se o sal de octadecassódio de l,6-bis-0-[3--[benzil-2,6-didesoxi-6-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-gluconoiIamino)-3,4-di-0-sulfo--a-D-glucopiranosid-2-ilcarbamoil]-naftaIen-l-il]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol, [a£° +60,9° (c 0,7; água), MS: mz 3216,5 (M reconstruído).

Exemplo 57 A. Suspenderam-se 5,3 g de 2,3:4,5-di-0-isopropilideno-l,6-bis-0-[(E)-4-(2--metoxicarbonil-vinil)-fenil]-galactitol (Exemplo 3. A.) em 120 ml de dioxano, 15 ml de ácido trifluoracético e 30 ml de água e aqueceu-se a refluxo a 110°C durante 4 horas. Em seguida, concentrou-se a mistura reaccional, misturou-se com água e filtrou-se. Resultou assim 1,6-bis-0-[4-[(E)-2-metoxicarbonil-vinil]-feniI]-galactitol sob a forma de sólido incolor, MS: m z 502 ([M]“). B. Aqueceram-se a refluxo a 110°C durante 24 horas 4,5 g de 1,6-bis-0-[4-[(E)--2-metoxicarboml-vinil]-fenil]-galactitol, 50 ml de metanol e 40 ml de lixívia aquosa concentrada de hidróxido de sódio. Em seguida, separou-se por destilação a maior parte do metanol sob pressão reduzida, diluiu-se o resíduo com água com gelo, acidulou-se com ácido clorídrico aquoso diluído e separaram-se por filtração os cristais formados. Obteve-se assim I,6-bis-0-[4-[(E)-2-carboxi-vinil]-fenil]--galactitol sob a forma de cristais incolores, MS: m z 473,4 ([M-H]'). C. Agitaram-se à temperatura ambiente durante 18 horas 4,23 g de l,6-bis-0-[4--[(E)-2-carboxi-vinil)-fenil]-galactitol numa mistura de 25 ml de amdrido acético e 50 ml de piridina. Em seguida, concentrou-se a mistura reaccional e misturou-se com água/gelo e ácido clorídrico diluído. Separou-se por filtração o precipitado assim formado, dissolveu-se em 95 ml de dioxano, misturou-se com 50 ml de piridina e 15 ml de água e agitou-se à temperatura ambiente durante mais 3 horas; em seguida, concentrou-se e misturou-se novamente com água/gelo e ácido clorídrico diluído e separou-se por filtração o precipitado assim formado. Nestas condições resultou 2,3,4,5-tetra-O-acetil-l ,6-bis-0-[4-[(E)-2-carboxi-vinil]-fenil]--galactitol como sólido incolor, MS: m z 641,2 ([M-H]'). D. Sob exclusão de humidade, a 0-5°C, misturou-se 0,55 g de 2,3,4,5-tetra-O--acetil-l,6-bis-0-[4-[(E)-2-carboxi-vinil)-fenil]-galactitol em 8 ml de dimetilforma-mida, com 0,21 ml de 4-metilmorfolina e agitou-se intensamente durante 10 minutos. Em seguida, adicionou-se 0,31 g de 2-cloro-4,6-dimetoxi-l,3,5-triazina sólida e agitou-se a 0-5°C durante mais 2 horas. Em seguida, adicionaram-se 1,27 g de (benzil-3,4-di-0-acetil-2-amino-2,6-didesoxi-a-D-gIucopiranosid-6-il)-amida do ácido 2,3,4,5,6-penta-O-acetil-D-glucónico (Exemplo 56.H.) e agitou-se à temperatura ambiente durante mais 18 horas. Em seguida, diluiu-se a mistura reaccional várias vezes com água e evaporou-se sob pressão reduzida a 40-50°C e distnbuiu-se entre água/metanol e cloreto de metileno. Secaram-se sobre sulfato de magnésio as fases de cloreto de metileno depois de reunidas, filtrou-se, concentrou--se e cromatografou-se o resíduo assim obtido em gel de sílica com cloreto çle metileno/metanol. Nestas condições, obteve-se 2,3,4,5-tetra-0-acetil-l,6-bis-0-[4--[(E)-2-[benzil-3,4-di-0-acetil-2,6-didesoxi-6-(2,3,4,5,6-penta-O-acetil-D-gIuconoi-lamino)-cc-D-glucopiranosid-2-ilcarbamoil]-vinil]-fenil]-galactitol sob a forma de sólido incolor, MS: m z 2088,4 ([M+H] ). E. Dissolveu-se 0,44 g de 2,3,4,5-tetra-0-acetiI-l,6-bis-0-[4-[(E)-2-[benzil-3,4- 116

-di-0-acetiI-2,6-didesoxi-6-(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-D-gIuconoílamino)-a-D-gluco-piranosid-2-ilcarbamoil]-vinil]-fenil]-galactitol em 5 ml de metanol e 5 ml de tetra--hidrofurano, misturou-se com 0,2 ml de solução 1 molar de metilato de sódio em metanol e agitou-se à temperatura ambiente durante 18 horas. Separou-se por filtração o precipitado assim formado. Resultou assim l,6-bis-0-[4-[(E)~2-(benzil--2,6-didesoxi-6-D-gIuconoiIamino-a-D-glucopiranosid-2-ilcarbamoil)-vinil]-fenil]--galactitol como sólido incolor, MS: m z 1354,4 ([M+Na]~). F. Fez-se reagir l,6-bis-0-[4-[(E)-2-(benzil-2,6-didesoxi-6-D-gluconoilamino- -a-D-glucopiranosid-2-ilcarbamoil)-vinil]-fenil]-galactitol de maneira análoga ao Exemplo l.B. de maneira a obter-se o sal de octadecasódio de l,6-bis-0-[4-[(E)-2--[benzil-2,6-didesoxi-6-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-gluconoilamino)-3,4-di-0-sulfo--a-D-glucopiranosid-2-ilcarbamoil)-vinil]-fenil]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol, [a£° +45,6° (c 0,7; água), MS: m z 3167,5 (M reconstruído).

Exemplo 58 A. Hidrogenou-se completamente 0,88 g de 2,3,4,5-tetra-O-acetil-l,6-bis-0-[4- -[(E)-2-[benzil-3,4-di-0-acetil-2,6-didesoxi-6-(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-D-gluconoi-lamino)-a-D-glucopiranosid-2-ilcarbamoil] - vinil] -fenil] -gal actitol (E xemplo 5 7. D.) em 20 ml de tetra-hidrofurano sob adição de 350 mg de paládio sobre carvão (10%). Em seguida, filtrou-se a mistura reaccional através de um filtro de celulose de 0,8 μ e concentrou-se. Cromatografou-se o resíduo assim obtido em gel de sílica com cloreto de metileno/metanol; nestas condições, obteve-se 2,3,4,5-tetra-0-acetil-l,6--bis-0-[4-[(E)-[2-[benzil-3,4-di-0-acetil-2,6-didesoxi-6-(2,3,4,5,6-penta-O-acetil- -gluconoilamino)-a-D-glucopiranosid-2-ilcarbamoil]-etil]-feml]-galactitol como 117

óleo incolor, MS: mz 2114,5 ([M+Na] ). B. Dissolveu-se 0,24 g de 2,3,4,5-tetra-0-acetil-l,6-bis-0-[4-[2-[benzil-3,4-di--0-acetil-2,6-didesoxi-6-(2,3,4,5,6-penta-O-acetil- D-gl uconoilamino)-a- D-gl ucop i -ranosid-2-ilcarbamoil]-viníl]-fenil]-galactitol em 2 ml de metanol e 2 ml de tetra-hidrofiirano, misturou-se com 0,15 ml de solução 1 molar de metilato de sódio em metanol e agitou-se à temperatura ambiente durante 18 horas. Separou-se por filtração o precipietado assim formado. Resultou assim 1,6-bis-0-[4-[2-(benzil-2,6--didesoxi-6-gluconoilamino-a-D-glucopiranosid-2-ilcarbamoil)-etil]-fenil]-galactitol como sólido incolor, MS. m z 1357,4 ([M+Na] ). C. De maneira análoga ao Exemplo I.B., fez-se reagir 1,6-bis-0-[4-[2-(benzil--2,6-didesoxi-6-gluconoilamino)-a-D-glucopiranosid-2-ilcarbamoil)-etil]-fenil]-ga-lactitol assim obtido de maneira a obter-se o sal de octadecassódio de l,6-bis-Q-[4--[2-[benzil-2,6-didesoxÍ-6-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D~ gluconoilamino)-3,4-dí-0--sulfo-a-D-glucopiranosid-2-ilcarbamoil]-etil]-fenil]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol, [a]^° +48,8° (c 0,5, água), MS: m/z 3172,5 (M reconstruídas).

Exemplo 59 A. Misturou-se uma solução de 7,4 g de 4-fluor-3-nitro-benzóico em 100 ml de dimetilformamida com 16,0 g de D-glucamina e agitou-se à temperatura ambiente durante 4 horas. Depois da adição de 6 ml de trietilamina continuou-se a agitar a 40°C durante 16 horas. Evaporou-se à secura a solução reaccional. Agitou-se o resíduo com 400 ml de piridina e 200 ml de ácido acético à temperatura ambiente durante 5 horas. Depois de se concentrar, misturou-se o resíduo obtido com água e acidulou-se a pH = 2-3 com uma solução de ácido clorídrico a 5% e extraiu-se com 18 ? acetato de etilo. Lavaram-se os extractos orgânicos com água/gelo e solução saturada de ácido clorídrico, secou-se sobre sulfato de magnésio e evaporou-se à secura. Cromatografou-se o resíduo com acetato de etilo sobre gel de sílica. Concentraram-se as ffacçÕes que continham produto, cristalizaram-se em éter e obteve-se ácido 4-(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-D-glucit-1 -ilamino)-3-nitro-benzóico sob a forma de cristais amarelos, [a£° -23,0° (c 0,5; DMSO), MS: m z 579,7 ([M+Na]'). B. A uma solução de 27,8 g de ácido 4-(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-D-glucit-l--ilamino)-3-nitro-benzóico e 5,32 g de 4-metilmorfolina em 150 ml de dimetilformamida absoluta adicionaram-se 8,78 g de 2-cloro-2,4-dimetoxi-1,3,5--triazina absoluta a 0°C. Agitou-se a mistura reaccional a esta temperatura durante 2 horas e, em seguida, misturou-se com 14,0 g de benzil-2-amino-2-desoxi-a-P--glucopiranósido (Meyer zu Reckendorf, Chem. Ber. 107, 869 (1974)). A mistura foi agitada durante 18 horas e em seguida concentrada em vácuo. O xarope assim obtido foi purificado por cromatografia em gel de sílica com cloreto de metileno/isopropanol e originou benzil-2-desoxi-2-[3-nitro-4-(2,3,4,5,6-penta-O--acetil-D-glucit-l-ilamino)-benzoilamino]-a-D-glucopiranósido, [a]^0 +33,6° (c 0,5; DMSO), MS: m z 808,4 ([Μ+Η]~). C. A uma solução de 30,0 g de benzil-2-desoxi-2-[3-nitro-4-(2,3,4,5,6-penta-Q--acetil-D-glucit-l-ilamino]-a-D-glucopiranósido em 250 ml de piridina absoluta adicionaram-se em várias porções 10,9 g de cloreto de p-tolueno-sulfonilo. Depois de terminada a adição, agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente depois de 7 horas e depois concentrou-se à secura. Retomou-se o resíduo em acetato de etilo e extraiu-se com água. Lavaram-se as fases orgânicas com ácido sulfurico diluído, água e solução saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre sulfato de magnésio e evaporou-se à secura. Cromatografou-se o resíduo com cloreto de metileno/isopropanol em gel de sílica e obteve-se benzií-2-didesoxi-2-[3-nitro-4--(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-D-glucit-l-ilamino)-benzoilamino]-6-0-(p-tolilsulfonil)--α-D-glucopiranósido, Ja£° +31,4° (c 0,5; DMSO), MS: /«4:984,7 ([M+K] )· D. A uma solução de 31,0 g de benzil-2-desoxi-2-[3-nitro-4-(2,3,4,5,6-penta-O--acetil-D-glucit-l-ilamino)-benzoilamino]-6-0-(p-tolilsulfonil)-a-D-glucopiranósido em 250 ml de dimetilformamida absoluta adicionram-se 6,5 g de azida de sódio. Agitou-se a mistura reaccional a 65°C durante 6 horas e depois concentrou-se à secura. Despejou-se o resíduo em água/gelo e extraiu-se com acetato de etilo. Lavaram-se as fases orgânicas com água e solução de cloreto de sódio saturada, secou-se sobre sulfato de magnésio e concentrou-se à secura. Cromatografou-se o resíduo em gel de sílica com cloreto de metileno/isopropanol e obteve-se benzil-6--azido-2,6-didesoxi-2-[3-nitro-4-(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-D-glucit-l-ilamino)-ben-zoiIamino]-a-D-gIucopiranósido, [aj^°+30,2° (c 0,5; DMSO), MS: mz 855.6 ([M+Na]'). E. A uma solução de 4,16 g de benzil-6-azido-2,6-didesoxi-2-[3-nitro-4--(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-D-glucit-l-ilamino)-benzoilamino]-a-D-glucopiranósido em 50 ml de tetra-hidrofurano e 1,8 ml de água adicionaram-se 2,15 g de trifenilfosfma, agitou-se à temperatura ambiente durante 20 horas e, em seguida, concentrou-se à secura. Cromatografou-se o resíduo em gel de sílica com acetato de etilo/metanol e obteve-se benzil-6-amino-2,6-didesoxi-2-[3-nitro-4-(2,3,4,5,6-penta- -0-acetil-D-glucit-l-ilamino)-benzoilamino}-a-D-glucopíranósido, [a]^ +37,4° (c 0,5; DMSO), MS: mz 829,7 ([M+Na]+). F. A uma solução de 301 mg de l,6-bis-0-(6-carboxi-naftalen-2-il)-2,3,4,5-di- -O-isopropilideno-galactitol (Exemplo 16.A.) e 137 mg de N-metilmorfolina em 3 ml de dimetilformamida absoluta adicionou-se a 0°C 2-cloro-2,4-dimetoxi-l,3,5--triazina. Agitou-se a mistura reaccional a esta temperatura durante 2 horas e, em seguida, misturou-se com 1,21 g de benzil-6-amino-2-,6-didesoxi-2-[3-nitro-4--(2,3,4,5,6-penta-O-acetil-D-glucit-1-ilamino)-benzoil amino]-α-D-glucop iranó sido. Agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante 20 horas e, em seguida, concentrou-se à secura. Acetilou-se o resíduo com 20 ml de anidrido acético em 30 ml de pirimidina e concentrou-se à temperatura ambiente durante 5 horas, em seguida retomou-se em acetato de etilo e extraiu-se com água. Lavaram-se as fases orgânicas com ácido sulfúrico diluído, água e solução saturada de bicarbonato de sódio, secou-se sobre sulfato de magnésio e evaporou-se à secura. Cromatografou-se o resíduo com acetato de etilo/metanol em gel de sílica e obteve--se 1,6-bis-O-[6-[benzil-3,4-di-0-acetil-2,6-didesoxi-2-[3-nitro-4-(2,3,4,5,6-penta- -0-acetil-D-glucit-l-ilamino)-benzoilamino]-a-D-glucopiranosid-6-ilcarbamoil]--naftalen-2-il]-2,3,4,5-di-0-isopropilideno-galactitol, [ajj° +43,6° (c 0,5; clorofórmio), MS: mz2370,9 ([M+Na]"). G. Aqueceu-se em banho de vapor durante 3 horas uma solução de 1,0 g de 1,6--bis-0-[6-[benzil-3,4-di-0-acetil-2,6-didesoxi-2-[3-nitro-4-(2,3,4,5,6-penta-O-acetil--D-glucit-l-ilamino)-benzoilamino]-a-D-glucopiranosid-6-ilcarbamoil]-naftalen-2--il]-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-galactitol em 100 ml de ácido acético a 80% e, em 121 "7 c" (? /y±

Seguida, concentrou-se à secura. Acetilou-se o resíduo com 20 ml de anidrido acético em 30 ml de piridina e concentrou-se à secura depois de 18 horas, em seguida retomou-se em acetato de etilo e extraiu-se com água. As fases orgânicas foram lavadas com ácido sulfurico diluído, solução saturada de bicarbonato de sódio e solução saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre sulfato de magnésio e vaporizou-se à secura. Cromatografou-se o resíduo em gel de sílica com cloreto de metileno/isopropanol e obteve-se 2,3.4,5-tetra-O-acetil- l,6-bis-0-[6-[benzil-3,4-di--0-acetil-2,6-didesoxi-2-[3 -nitro-4-(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-D-glucit-1 -ilamino)--benzoilamino]-a-D-glucopiranosid-6-ilcarbamoil]-naftalen-2-il]-galactitol, [a|° +44,6° (c’ 0,5; clorofórmio), MS: m z 2358,9 ([M+Naf). H. Misturou-se uma solução de 820 mg de 2,3,4,5-tetra-0-acetil-I,6-bis-0-[6--[benzil-3,4-di-0-acetil-2,6-didesoxi-2-[3-nitro-4-(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-D-glucit--l-ilamino)-benzoilamino]-a-D-glucopiranosid-6-ilcarbamoil]-naftalen-2-iI]-gaIac-titol em 24 ml de metanol e 6 ml de dimetoxietano com 1 ml de uma solução metanólica de metanolato de sódio a 2% e agitou-se à temperatura ambiente durante 6 horas. Separou-se por filtração sob sucção o precipitado assim obtido, lavou-se com metanol, secou-se em vácuo a 60°C e obteve-se l,6-bis-0-[6-[benzil-2,6--didesoxi-2-(4-D-glucit-l-ilamino-3-nitro-benzoilamino)-a-D-glucopiranosid-6-il-carbamoil]-naftalen-2-il]-galactitol, [aj™ +33,5° (c 0,5; sulfóxido de dimetilo), MS: 1701,8 ([M+NaD. I. A sulfatação de l,6-bis-0-[6-[benzil-2,6-didesoxi-2-(4-D-glucit-l-ilamino-3--nitro-benzoilamino)-a-D-glucopiranosid-6-ilcarbamoil]-naftalen-2-il]-galactitol como se descreveu no Exemplo 26.C. originou o sal de octadecassódio de 1,6-bis-O- 122 -[6-[benzil-2,6-didesoxi-2-[3-nitro-4-(2,3,4,5,6-penta-O-acetil-D-glucit-l -ilamino)--benzoilamino]-3,4-di-0-sulfo-a-D-glucopiranosid-6-ilcarbamoil]-naftalen-2-il]--2,3,4,5-tetra-O-sulfo-galactitol, [aj>°+43,2° (c 0,5, água), MS: mz 3515 (M reconstruído).

Exemplo 60 A. A reacção de benzil-6-amino-2,6-didesoxi-2-[3-nitro-4-(2,3,4,5,6-penta-O--acetil-D-glucit-1 -ilamino)-benzoilamíno]-a-D-glucopiranósido (Exemplo 59.E.) com ácido 4,4’-dioxo-5,5’-(2-acetoxi-propano-l,3-diildioxi)-di-4H-l-benzopirano--2-carboxílico (preparado a partir de ácido 4,4’-dioxo-5,5’-(2-hidroxi-propano-l,3--diildioxi)-di-4H-l-benzopirano-2-carboxilico de maneira análoga ao Exemplo 57.C.) como descreveu no Exemplo 59.F., originou N,N’-bis-[benziI-3,4-di-0--acetil-2,6-didesoxi-2-[4-(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-D-glucit-l-ilamino)-3-nitro-ben-zoi!amino]-a-D-glucopiranosid-6-il]-amida] do ácido 4,4’-dioxo-5,5’-(2-acetoxi--propano-l,3-diiIdi.oxi)-di-4H-l-benzopirano-2-carboxílico, [a +80,0° (c 0,5; clorofórmio), MS: m z 23-70,9 ([M+Naf). B. A desacetilação de N,N’-bis-[benzil-3,4-di-0-acetil-2,6-didesoxi-2-[4--(2,3,4,5,6-penta-O-acetil-D-glucit-l-ilamino)-3-nitro-benzoilamino]-a-D-glucopi-ranosid-6-il]-amida] do ácido 4,4’dioxo-5,5’-(2-acetoxi-propano-l,3-diiIdioxi)-di--4H-l-benzopirano-2-carboxílico, como se descreveu no Exemplo 59. H. originou N,N’-bis-[[benzil-2,6-didesoxi-2-(4-D-glucit-l-ilamino-3-nitro-benzoilamino)-a-D--glucopiranosid-6-il]-amida] do ácido 4,4’-dioxo-5,5,-(2-hidroxi-propano-l,3--diildioxi)-di-4H-1 -benzopirano-2-carboxílico, [a]^0 +47,0° (c 0,5; sulfóxido de dimetilo), MS: m z 1648,8 ([M+Na]"). C. A sulfatação de N,N’-bis-[[benzil-2,6-didesoxi-2-(4-D-glucit-l-ilamino)-3--nito-benzoilamino)-a-D-glucopiranosid-6-il]-amida] do ácido 4,4’dioxo-5,5’-(2--hidroxi-propano-1,3-diildioxi)-di-4H-1 -benzopirano-2-carboxílico, como se descreveu no Exemplo 59.1., originou o sal de pentadecassódio de N,N’-bis-[[benzil--2,6-didesoxi-2-[4-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-l-ilamino)-3-nitro-benzoilami-no]-3,4-di-0-sulfo-a-D-glucopiranosid-6-il]-amida] do ácido 4,4’-dioxo-5,5’-(2--sulfoxi-propano-l,3-diildioxi)-di-4H-l-benzopirano-2-carboxílico, fa£° +87,0° (c 0,2; água), MS: m ir 3156,5 (M reconstruído).

Exemplo 61 A. A reacção de benzil-6-amino-2,6-didesoxi-2-[3-nitro-(2,3,4,5,6-penta-O--acetil-D-glucit-1 -ilamino)-benzoilamino]-a-D-glucopiranósido (Exemplo 59.E.) com 2,3,4,5-tetra-0-acetil-l,6-bis-0-[4-((E-2-carboxi-vinil)-fenil]-galatitol (Exemplo 57.C.) como se descreveu no Exemplo 59.F. originou 2,3,4,5-tetra-0-acetil-l,6--bis-0-[4-[(E)-2-[benzil-3,4-di-0-acetil-2,6-didesoxi-2-[4-(2,3,4,5,6-penta-O-acetiI--D-glucit-l-ilamino)-3-nitro-benzoilamino]-a-D-glucopiranosid-6-ilcarbamoil]-vi-nil]-fenil]-galactitol, [a£° +42,4° (c 0,5; clorofórmio), MS: m/z 2411,9 ([M+Na]~). B. A desacetilaçao de 2,3,4,5-tetra-0-acetil-l,6-bis-0-[4-[(E)-2-[benzil-3,4-di--O-acetil-2,6-didesoxi-2-[4-(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-D-glucit-l-ilamino)-3-mtro--benzoilamino]-a-D-glucopiranosid-6-ilcarbamoilJ-vinil]-fenil]-galactitol como se descreveu no Exemplo 26.C. originou l,6-bis-0-[4-[(E)-2-[benzil-2,6-didesoxi-2-(4--D-glucit-l-ilamino-3-nitro-benzoilamino)-a-D-glucopiranosid-6-ilcarbamoil]-vi-nilj-fenilj-galactitol, [a^,°+45,6° (c 0,5; sulfóxido de dimetilo), MS: m z 1654,8 {[M-f-Na]'). 124 C. A sulfatação de l,6-bis-0-[4-[(E)-2-[benzil-2,6-didesoxi-2-(4-D-glucit-l--ilamino)-3-nitro-benzoilamino)-a-D-glucopiranosid-6-ilcarbamoil]-viníI]-feniI]-ga-lactitol como se descreveu no Exemplo 26.C. originou o sal de octadecasódio 1,6--bis-0-[4-[(E)-2-[benzil-2,6-didesoxi-2-[4-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-l-ila-mino)-3-nitro-benzoilamino]-3,4-di-0-sulfo-a-D-glucopiranosid-6-ilcarbamoil]--vinil]-fenil]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol, [ajj° +40,2° (c 0,2, água), MS: m z 3469,0 (M reconstruído).

Exemplo 62 A. A reacção de benzil-6-amino-2,6-didesoxi-2-[3-nitro-4-(2,3,4,5,6-penta-O--acetil-D-glucit-l-ilamino)-benzoilamino]-a-D-glucopiranósido (Exemplo 59.E.) com 1,4-bis-0-[3-carboxi-nafíalen-2-il)-2,3-0-isopropilideno-L-treitol (Exemplo 13.A.) como se descreveu no Exemplo 59.F. originou l,4-bis-0-[3-[benzil-3,4-di-0--acetil-2,6-didesoxi-2-[4-(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-D-glucit-l-ilamino)-3-nitro-ben-zoilamino]-a-D-glucopiranosid-6-iIcarbamoíl]-naftalen-2-iI]-2,3-0-isopropilideno--L-treitol, [a]^0 +63,4° (c 0,5; clorofórmio), MS: m z 2271,0 ([M+Na]~). B. A reacção de l,4-bis-0-[3-[benzil-3,4-di-0-acetil-2,6-didesoxi-2-[4--(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-D-glucit-l-ilamino)-3-nitro-benzoilamino]-a-D-glucopi-ranosid-6-ilcarbamoil]-naftalin-2-il]-2,3-0-isopropilideno-L-treitol como se descreveu no Exemplo 59.G. originou 2,3-di-0-acetil-l,4-bis-0-[3-[benzil-3,4-di-0-acetiI--2,6-didesoxi-2-[4-(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-D-glucit-l-ilamino)-3-nitro-benzoilami-no]-a-D-glucopiranosid-6-iIcarbamoil]-naftalen-2-il]-L-treitol, [aj,0 +62,4° (c 0,5; clorofórmio), MS: m z 2315,9 ([M+Na]-). C. A desacetilação de 2,3-di-0-acetil-l,4-bis-0-[3-[benzil-3,4-di-0~acetil-2,6--didesoxi-2-[4-(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-D-glucit-l-ilamino)-3-nitro-benzoilamino]--a-D-glucopiranosid-6-ilcarbamoil]-naftalen-2-il]-L-treitol como se descreveu no Exemplo 59.H. originou l,4-bis-0-[3-[benzil-2,6-didesoxi-2-(4-D-glucit-l-ilamino)--3-mtro-benzoilamino)-a-D-glucopiranosid-ó-ilcarbamoil]-naftalen-2-il]-L-treitol, [a|j0 +68,8° (c 0,5; sulfóxido de dimetilo), MS: mz 1642,3 ([M+Na]+). D. A sulfatação de l,4-bis-0-[3-[benzil-2,6-didesoxi-2-(4-glucit-l-ilamino)-3--nitro-benzoilamino)-a-D-glucopiranosid-6-ilcarbamoil]-naftalin-2-il]-L-trietol como se descreveu no Exemplo 26.C. originou o sal de pentadecassódio de 1,4-bis--0-[3-[benzil-2,6-didesoxi-2-[4-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-l-ilamino)-3-ni-tro-benzoilamino]-3,4-di-0-sulfo-a-D-glucopiranosid-6-ilcarbamoil]-naftalin-2-il]--2,3-di-O-sulfo-L-treitol, [a^° +49,6° (c 0,5; água), MS: mz 3252,5 (M reconstruído).

Exemplo 63 A. Por reacção de benzil-6-amino-2,6-didesoxi-2-[3-nitro-4-(2,3,4,5,6-penta-O- -acetil-D-glucit-1 -ilamino)-benzoílamino]-a-D-glucopiranósido (Exemplo 59. E.) com 1,6-bis-0-(4 ’ -carboxi-bifenil-4-il)-2,3,4,5 -di-O-i sopropi lideno-galactitol (Exemplo 12.B.) como se descreveu no Exemplo 59.F. obteve-se l,6-bis-0-[4’--[benzil-3,4-di-0-acetil-2,6-didesoxi-2-[3-nitro-4-(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-D-glu-cit-l-ilamino)-benzoilamino]-a-D-glucopiranosid-6-ilcarbamoil]-bifenil-4-il]-2,3:4, 5-di-0-isopropilideno-galactitol, MS: m z 2422,8 ([M+Na]~). B. Por reacção de l,6-bis-0-[4’-[benzil-3,4,-di-0-acetil-2,6-didesoxi-2-[3-nitro--4-(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-D-glucit-3-ilamino)-benzoilamino]-a-D-glucopiranosid- 126 -6-ilcarbamoil]-bifenil-4-il]-2,3,4,5-di-0-isopropilideno-galactitol como se descreveu no Exemplo 59.G. obteve-se 2,3,4,5-tetra-0-acetiI-I,6-bis-0-[4’-[benzil-3,4-di--0-acetil-2,6-didesoxi-2-[3-nitr o-4-(2,3,4,5,6-penta-O-acetil-D-glucit-l -ilamino)--benzoiIamino]-a-D-glucopiranosid-6-iIcarbamoil]-bifenil-4-il]-galactitol, [a]^0 +49,8° (c 0,5; clorofórmio), MS: m z 2510,8 ([M+Na]"). C. A desacetilação de 2,3,4,5-tetra-0-acetil-l,6-bis-0-[4’-[benziI-3,4-di-0--acetil-2,6-didesoxi-2-[3-nitro-4-(2,3,4,5,6-penta-0-acetil-D-glucit-l-ilamino)-ben-zoilamino]-a-D-glucopiranosid-6-iIcarbamoil]-bifenil-4-il]-galactitol como se descreveu no Exemplo 59.H. originou l,6-bis-0-[4’-[benzil-2,6-didesoxi-2-(4-D--glucit-I-ilammo-3-nitro-benzoilamino)-a-D-glucopiranosid-6-ilcarbamoil]-bifeni]--4-il]-galactitol, [a£° +32,0° (e 0,5; sulfóxido de dimetiio). D. A sulfatação de 1,6-bis-0-[4’-[benzil-2,6-didesoxi-2-(4-D-giucit-1 -ílamino--3-nitro-benzoilamino)-a-D-glucopiranosid-6-ilcarbamoil]-bifenil-4-il]-galactitol como se descreveu no Exemplo 26.C. originou o sal de octadecassódio de l,6-bi§-0--[4’-[benzil-2,6-didesoxi-2-[3-nitro-4-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-l-ilamino)--benzoilamino]-3,4-di-0-sulfo-ct-D-glucopiranosid-6-ilcarbamoil]-bifenil-4-il]- -2,3,4,5-tetra-O-sulfo-galactitol, [a]^0 +41,5o (c 0,5; água), MS: m z 3269,0 (M reconstruído).

Exemplo 64 A. Sob atmosfera de árgon e à temperatura ambiente, agitaram-se 13,80 g de ácido 4-hidroxi-benzóico e 45,20 g de terc-butil-dimetilclorossilano com adição de 40,80 g de imidazol em 500 ml de dimetilformamida durante 18 horas. Destilou-se o dissolvente em vácuo produzido por trompa de água e processou-se o resíduo com 127

água/gelo e cloreto de metileno mediante extracção. Cromatografou-se o produto bruto assim obtido em gel de sílica com cloreto de metileno e acetonitrilo. Obteve-se assim ácido 4-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-benzóico, análise elementar calculada para C13H20O3SÍ: C = 61,87%, H = 7,99%; determinada: C = 61,71%, H = 8,00%. B. Agitaram-se à temperatura ambiente durante 30 minutos 15,60 g de Fmoc--2,4-dimetoxi-4’-(carboximetiloxi)-benzidrilamina ligada a resina de aminometjl--poliestireno (0,55 mMol/g, Bachem AG, Bubendorf, Suíça; N.° D-1675) com 20 ml de piperidina em 80 ml de dimetilformamida e em seguida filtrou-se. Lavou-se a resina duas vezes com 20 ml de dimetilformamida de cada vez e secou-se em alto vácuo durante 15 minutos. Suspendeu-se a resina assim obtida em 80 ml de dimetilformamida, adicionaram-se 4,42 g de ácido 4-(terc.-butil-dimetil-silaniloxi)--benzóico, 5,20 g de tetrafluorborato de 2-(oxo-2H-piridin-l-il)-1,1,3,3-tetrametjl--urónio e 7,53 ml de etil-diisopropil-amina e agitou-se à temperatura ambiente durante 1 hora; depois da filtração da mistura reagente lavou-se a resina sucessivamente com água, isopropanol e cloreto de metileno e secou-se a 40°C durante 18 horas em vácuo produzido por trompa de água. C. Misturaram-se 14,50 g de resina 64.B. em 50 ml de tetra-hidrofurano com 50 ml de solução de fluoreto de tetrabutil-amónio (1 molar em tetra-hidrofurano) e agitou-se à temperatura ambiente durante 1 hora. Depois da filtração e da lavagem da resina com tetra-hidrofurano, secou-se a resina durante 6 horas a 40°C em vácuo produzido por trompa de água. D. 28,40 g de resina 64.C. e 47,00 g de 2,3-0-isopropilideno-l,4-di-0-(4-metil- -fenilsulfonil)-L-treitol foram agitados a 100°C durante 6 horas sob adição de 34,80 g de carbonato de potássio em 100 ml de dimetilformamida. Depois de se arrefecer até à temperatura ambiente, filtrou-se e lavou-se sucessivamente com água, isopropanol e cloreto de metileno e secou-se a 40°C durante 18 horas em vácuo produzido por trompa de água. E. Sob adição de 34,80 g de carbonato de potássio, agitaram-se a 100°C durante 6 horas 23,00 g de resina 64.D. e 24,65 g de bis-(4-hidroxi-fenil)-metano em 100 ml de dimetilformamida e processou-se analogamente ao Exemplo 64. D. F. Analogamente ao Exemplo 64.D., fizeram-se reagir 22,00 g de resina 64.E. e processaram-se. G. Analogamente ao Exemplo 64.E. fizeram-se reagir 23,40 g de resina 64.F. e processaram-se. H. Sob adição de 33,40 g de carbonato de potássio em 100 ml de dimetilformamida fizeram-se reagir 22,85 g de resina 64.G. com 32,93 g de tolueno--4-sulfonato de (R)-2,2-dimetil-[l,3]dioxolan-4-ilmetil a 140°C durante 6 horas e processou-se de maneira análoga ao Exemplo 64.D. I. Agitaram-se 24,60 g de resina 64.H. em 250 ml de ácido trifluoracético aquoso a 95% durante 1 hora à temperatura ambiente; em seguida, filtrou-se e concentrou-se o filtrado. Dissolveu-se o resíduo assim obtido em 75 ml de piridirja com 25 ml de anidrido acético e agitou-se à temperatura ambiente durante 16 horas. Em seguida, processou-se a mistura reaccional com gelo/água e cloreto de metileno de maneira a extrair e cromatografou-se o produto bruto em gel de sílica com cloreto de metileno e metanol. Obteve-se assim (S)-2,2’,3,3’-tetra-0-acetil-4-0-[4-[4-(2,3--bis-acetoxi-propoxi)-benzil]-fenil]-4’-0-(4-carbamoil-fenil)-l, 1 ’-(4,4’-metileno-di-fenileno)-di-L-treitol, MS: m z 1058,8 ([M+Na]“). 129 K. Misturaram-se 1,50 g de (S)-2,2’,3,3’-tetra-0-acetiI-4-0-[4-[4-(2,3-bis--acetoxi-propoxi) -benzil] -fen il] -4 ’ -0-(4-carbamoil-fenil)-1, Γ -(4,4 ’ -meti leno-di feni-leno)-di-L-treitol em 50 ml de metanol com 1 ml de solução de metilato de sódio (5,4 molar em metanol) e agitou-se à temperatura ambiente durante 22 horas. Regulou-se a mistura reaccional a pH 4-5 com ácido clorídrico e concentrou-se. Secou-se o (R)-4’-0-(4-carbamoil-fenil)-4-0[4-[4-(2,3-di-hidroxi-propoxi)-benziI]--fenil]-l,r-(4,4’-metileno-difenileno)-di-L-treitol assim obtido durante 4 horas em alto vácuo à temperatura ambiente e utilizou-se directamente na fase operacional seguinte. L. Em analogia com o Exemplo I.B., fez-se reagir 1,00 g de (R)-4’-0-(4--carbamoil-fenil)-4-0-[4-[4-(2,3-di-hidroxi-propoxi)-benzil]-fenil]-l,r-(4,4,-metile-no-difenileno)-dí-L-treitol com complexo trióxido de enxofre-trimetilamina. Obteve-se assim o sal de hexassódio de (S)-4-0-[4-[4-(2,3-bis-suIfoxi-propoxi)--benzil]-feniI]-4’-0-(4-carbamoil-feniI)-2,2’3,3,-tetra-0-sulfo-l,r-(4,4,-metileno--difenileno)-di-L-treitol, MS: m z 1396,0 (M reconstruído).

Exemplo A

Comprimido: 1 Composto da fórmula Ia ou Ib 500 mg 2 Lactose, isenta de água 150 mg 3 Celulose microcristalina 150 mg 4 Polivinilpirrolidona 40 mg 5 Talco 50 mg 6 Estearato de magnésio 10 ma Peso do comprimido 900 mg 130

Peneiram-se e misturam-se os componentes 1-4. Granula-se esta mistura com água desmineralizada e mistura-se o granulado seco com os componentes 5 e 6. Comprimem-se para obtenção de comprimidos de forma apropriada.

Exemplo B

Grânulos: 1 1 '1 1 Composto da fórmula Ia ou Ib 500 mg 2 Celulose microcristalina 200 mg 3 PRIMO JEL 70 mg 4 Aromatizante em pó 10 mg 5 Talco 20 mg

Humedecem-se suficientemente com água desmineralizada os componentes 1-3 misturados e peneirados e comprimem-se por meio de uma máquina extrusofa através de um disco com orifício apropriado. O material extrudido é transferido para um disco de puletização, arredondado para obtenção de pequenas esferas e em seguida seco. Mistura-se com os componentes 4 e 5 peneirados e embala-se em saqueias de papel (ou semelhantes).

Exemplo C

Solução para injecções:

Para a preparação de uma solução para injecções, dissolvem-se 50 mg do composto da fórmula Ia ou Ib assim como 0,5 g de tampão de tris em água apropriada para injecção até perfazer 1 ml e regula-se o valor de pH para 7,4. A solução é filtrada para esterilizar e, depois da embalagem em ampolas, é tratada em autoclave.

Lisboa, 10 de Setembro de 2001

JOSÉ DE SAMPAIO A.O.P.I.

Rua do Salitre, 195, r/c-Drt. 1269-063 LISBOA

Claims

1 Reivindicações 1. Compostos que contêm pelo menos três radicais de álcoois de açúcar ou compostos semelhantes a álcool de açúcar das fórmulas gerais Ia e Ib (Al-Xl)ml-(Yl-X2.)nl-(Ql-X3-)m2-(Y2-X4}n2.(.Zl.X5.)m3.(Y3.X6)n3 / Ia (A2-X7)ntí.CY4-X8-)n4-(Q2-X9-)m5-{YS-X10)„5-(-Z2-Xll-)m6-(Y6-X12)n6 CA l-Xl)ml-(Yl-X2-)nl-(Q^X3-)lrí2-CY2.X4)n2.{.Zl.X5.)^.(Y3.X6)n3 (A2-X7)m4-(Y4-X8-)n4-(Q2.X9-)^.(Y5.X10)a5.(.22.Xn.)^.(Y6.X12)n6. — W (A3-X13)m7.CY7.X14.)n7.CQ3.X15.)d5.(Y8.X16)n8.(.Z3.X17.)^.(Y9.XlS)íJ^ em que n'-n9 independentemente uns dos outros são 0 ou 1; e m'-m9 independentemente uns dos outros são 0 ou 1, embora com a condição de que pelo menos um dos símbolos ml, m2 e m3, pelo menos um dos símbolos m4, m5 e m6 e, no caso de estarem presentes, pelo menos um dos símbolos m7, m8 e m9 seja 1; e em que X'-X18 independentemente uns dos outros, representam -O-, -CONR1-, -NR'CO-, -NR1-, R1 é hidrogénio ou CpC? alquilo; W representa um radical benzénico ou um radical de s-triazina; Yl-Y9 independentemente uns dos outros, significam sistemas de anéis aromáticos; A1-A3 independentemente, uns- dos outros, significam um radical de um álcool de açúcar diminuído do grupo 1 -hidroxi ou de um seu derivado, um radical de um ácido de açúcar diminuído do grupo 1-carboxi ou de um seu derivado ou o radical tris--(hidroximetil)-metilo; 2

D representa o di-radical de um álcool de açúcar diminuído de 2 grupos hidroxi ou de um seu derivado ou o di-radical de um ácido dicarboxílico de açúcar diminuído de 2 grupos carboxi ou de um seu derivado; Ç^-Q3 e Z'-Z3 independentemente uns dos outros, representam o di-radical de um álcool de açúcar diminuído de 2 grupos hidroxi ou de um seu derivado ou o di--radical de um ácido dicarboxílico de açúcar diminuído de 2 grupos carboxi ou de um seu derivado ou um radical de didesoxiglicopiranósido ou de um seu derivado, em que pelo menos um grupo hidroxi dos radicais A]-A3, D, Q'-Q3 e Z'-Z3 é esterificado com ácido sulfúrico; derivados do álcool de açúcar são álcoois de açúcar uma vez ou várias vçzes desoxigenados, um correspondente éter em Ct ou um composto da fórmula ho-h5c· CHj-OH HO OH derivados de ácidos monocarboxílicos de açúcar e de ácidos dicarboxílicos de açúcar são ácidos de açúcar, cujas funções hidroxi livres ou protegidas por acetomdos, metilenacetais, éteres arilmetílicos, ésteres de alquilo ou de arilo, são fechadas com posições de desoxi para obtenção de anéis de oxirano ou com funções de ácido carboxílico de modo obterem-se lactonas pentagonais ou hexagonais; derivados do radical didesoxiglicopiranósido são os correspondentes éteres em Cg e os seus sais farmaceuticamente utilizáveis.

2. Compostos de acordo com a reivindicação 1, em que os sistema? de anel aromáticos Y*-Y9 nas fórmulas Ia e Ib significam radicais da fórmula a-h.

em que R2 significa hidrogénio, halogéneo, nitro, CrC7-alquilo, Ci-C7-alcoxi, CrC7-alcoxi inferior, que é substituído por radicais fenilo e bifenilo, carbamoílo ou o radiçal glicerol, em que grupos hidroxi eventualmente existentes podem também ser sulfatados, G1 e G2 significam Ci-C7-alquileno, C2-C7-alcenileno, C2-C7-alcinileno inferior ou Ci-C7-alcenilenoxi; E significa uma ligação carbono-carbono; -O-, -CO, -CH2-, -CH2-CH2-, -CH=CH-, -C=C-, -NR3-CO-, -CO-NR3-; e R3 significa hidrogénio ou alquilo inferior.

3. Compostos de acordo da reivindicação 1 ou 2, em que as cadeias laterais que saem de D ou W são iguais.

4 Compostos de acordo com uma das reivindicações 1-3, em que na fórmula Ib m2, m3, m5, m6, m8, m9 e n2, n3, n5, n6, n8, n9 são 0.

5. Compostos de acordo com uma das reivindicações 1-4, em que os radicais A1-A3, D, Q’-Q3, Z’-Z3 derivam de um hexitol, como glucitol, galactitol, manitol e gulitol, de um pentitol como arabinitol, ribitol e xilitol, de um tetritol como treitol e eritritol, de glicerol ou de tris-(hidroximetil)-metano.

6. Compostos de acordo com uma das reivindicações 1-4, em que os radicais A1-A3 derivam de ácido ribónico, ácido glucónico ou ácido gulónico.

7. Compostos de acordo com uma das reivindicações 1-3, em que os radicais D, Q’-Q3, Z'-Z3 derivam de ácido tartárico, ácido galactárico ou ácido glutárico.

8. Compostos de acordo com uma das reivindicações 1-3, em que os radicais Q'-Q3, Z’-Z3 derivam de um glicopiranósido.

9. Sal de tetradecassódio de l,6-bis-0-[4-[2-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D--glucit-l-ilcarbamoil)-etil]-fenil]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol, sal de tetradecassódio de l,6-bis-0-[4-[2-[4-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D--glucit-l-ilcarbamoil)-fenil]-etil]-fenil]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol, sal de tetradecassódio de l,6-bis-0-[3-(2,3,4,5,6-penta-O-sulfo-D-glucit-1--ilcarbamoil)-naftalen-2-il]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol, sal de tetradecassódio de l,6-bis-0-[6-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-l--ilcarbamoil)-naftalen-2-il]-2,3,4,5-tetra-0-suIfo-galactitol, sal de tetradecassódio de l,6-bis-0-[3-bifenil-4-ilmetoxi-5-(2,3,4,5,6-penta--0-sulfo-D-glucit-l-ilcarbamoil)-fenil]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol, 5

sal de octadecassódio de l,6-bis-0-[6-(S)-2,3-bis-suIfoxi-propoxi]-3--(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-l-ilcarbamoil)-naftalen-2-il]-2,3,4,5-tetra-0-sul-fo-galactitol, sal de dodecassódio de l,6-bis-0-[3-(2,3,4,5,6-tetra-0-sulfo-D-arabinit-l--iloxi)-naftalen-2]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol, sal de dodecassódio de 2,3,4,5-tetra-0-sulfo-I,6-bis-0-[4-[4-(2,3,4,5-tetra-0--sulfo-D-arabinit-1 -iloxi)-benzil]-fenil]-D-manitol, sal de dodecassódio de l,6-didesoxi-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-l,6-bis-G-[3--(2,3,4,5-tetra-0-sulfo-D-arabinit-l-iloxi)-naftalen-2-ilcarbonilamino]-galactitol, sal de octadecassódio de l,6-bis-0-[4-[4-0-[(E)-2-(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo--D-glucit-l-ilcarbamoil)-vinil]-fenil]-2,3-di-0-sulfo-D-treit-l-iloxi]-fenil]-2,3,4,5--tetra-0-sulfo-galacti|ol, sal de octadecassódio de l,6-bis-0-[4-[4-0-[4-(E)-[metil-(2,3,4,5,6-penta-0--sulfo-D-glucit-l-il)-carbamoil]-vinil]-fenil]-2,3-di-0-sulfo-D-treit-l-iIoxi]-fenil]--2,3,4,5-tetra-O-sulfo-galactitoI, sal de octadecassódio de l,6-bis-0-[3-[benzil-2,6-didesoxi-6-(2,3,4,5,6--penta-0-sulfo-D-gluconoilamino)-3,4-di-0-sulfo-a-glucopiranosid-2-ilcarbamoil]--naftalen-l-il]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol, sal de octadecassódio de l,6-bis-0-[4-[2-[benzil-2,6-didesoxi-6-(2,3,4,5,6--penta-0-sulfo-D-gluconoilamino)-3,4-di-0-sulfo-a-D-glucopiranosid-2-ilcarba-moíl]-etil]-fenil]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol, sal de octadecassódio de l,6-bis-0-[6-[benzil-2,6-didesoxi-2-[3-(2,3,4,5,6--penta-0-sulfo-D-glucit-l-ilamino)-benzoilamino]-3,4-di-0-sulfo-a-D-glucopirano-sid-6-ilcarbamoil]-naftalen-2-il]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol, 6 sal de octadecassódio de l,6-bis-0-[4-(E)-2-[benzil-2,6-didesoxi-2-[4--(2,3,4,5,6-penta-0-sulfo-D-glucit-l-ilamino)-3-mtro-benzoilamino]-3,4-di-0-sulfo--D-glucopiranosid~6-ilcarbamoil]-vinil]-fenil]-2,3,4,5-tetra-0-sulfo-galactitol.

10. Medicamento, especialmente para o tratamento e/ou a profilaxia de doenças que se caracterizam por proliferação excessiva ou destrutiva de células de musculatura lisa assim como de alterações arterioscleróticas das paredes dos vasos, que contêm um composto de acordo com uma das reivindicações 1 -9 ou um seu sal farmaceuticamente utilizável e um veículo terapeuticamente inerte.

11. Processo para a preparação de compostos de acordo com uma das reivindicações 1-9, caracterizado pelo facto de se fazer reagir um correspondente composto não sulfatado Ia ou Ib com um agente sulfatante.

12. Compostos de acordo com uma das reivindicações 1-9, para utilização como substâncias activas terapêuticas, especialmente para o tratamento e/ou a profilaxia de doenças que se caracterizam por proliferação excessiva ou destrutiva de células de musculatura lisa assim como alterações arterioescleróticas das paredes dos vasos.

13. Utilização de compostos de acordo com uma das reivindicações 1-9, ou dos seus sais para a preparação de um medicamente especialmente para o tratamento e/ou a profilaxia de doenças que se caracterizam por proliferação excessiva ou destrutiva de células de musculatura lisa assim como alterações arterioesclóticas das paredes dos vasos. Lisboa, 10 de Setembro de 2001 O Agant© Qnciai aa Hrcgrjêqade-indualaa^ JOSÉ DE SAMPAIO A.O.P.I. Rua do Salitre, 195, r/c-Dft. 1269-063 LISBOA