PT667166E

PT667166E - Composicao de emulsao de 1alfa,24-(oh)2 vitamina d3

Info

Publication number: PT667166E
Application number: PT94925612T
Authority: PT
Inventors: Yuji Makino; Hideo Matugi; Yoshiki Suzuki
Original assignee: Teijin Ltd
Priority date: 1993-09-01
Filing date: 1994-09-01
Publication date: 2001-02-28
Also published as: PL308748A1; NO951639D0; EP0667166A1; DE69425552T2; SG52313A1; CZ113295A3; CN1082818C; PL175492B1; EP0667166B1; US5612327A; DE69425552D1; WO1995006482A1; ES2148340T3; CN1114824A; CA2148109A1; CZ284261B6; CA2148109C; ATE195431T1; SK279913B6; KR100221045B1

Description

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DESCRIÇÃO

Composição de emulsão de lcx,24-(OH)2 vitamina D3 A presente invenção refere-se a uma nova composição de creme à base de la,24-(01¾ vitamina D3. Mais especifícamente, a presente invenção refere-se a uma nova composição de creme à base de la,24-(OH)2-V.D3 que possui uma boa permeabilidade na pele do ingrediente activo à base de la,24-(OH)2-V.D3. Ainda mais especifícamente, a presente invenção refere-se a uma nova composição de creme à base de la,24-(OH)2--V.D3 que tem uma boa permeabilidade na pele do ingrediente activo à base de la,24--(OH)2-V.D3, com uma estabilidade química do ingrediente activo à base de la,2 4--(OH)2-V.D3 aumentada, superior em estabilidade química como composição de creme, e superior em termos de sensação no momento da aplicação na pele.

TÉCNICA ANTERIOR A la,25-(OH)2-V.D3 (la,25-di-hidroxilcolecalciferol), la,24-(OH)2-V.D3 (la,24-di--hidroxilcolecalciferol), etc., exibem uma acção reguladora da Ca-homeostase, que é conhecida como uma acção biológica da V.D3 e, por isso, são denominadas V.D3 do tipo activo. As acções biológicas da V.D3 do tipo activo são diversas. Além da acção de regulação da Ca-homeostase acima mencionada, pode mencionar-se a acção na formação dos ossos, uma acção de indução de diferenciação das células, uma acção de supressão da secreção da hormona da para-tiróide, etc. Entre estas, relativamente à acção de regulação da Ca-homeostase, as substâncias acima já estão a ser clinicamente administradas como formulações orais no tratamento da osteoporose, da osteomalacia e outras denominadas osteopenias, sendo reconhecidas por terem um efeito terapêutico superior. Por outro lado, foi estudada a aplicação clínica relativamente à acção na indução da diferenciação das células, embora mais tarde do que em relação à acção de regulação da Ca-homeostase. Em particular, uma vez que se considera que a doença da psoríase da pele, difícil de curar, é causada pela não-diferenciação incompleta e pela proliferação acelerada das células epidérmicas, foi estudada a aplicação das V.D3 do 2 2

tipo activo. Uma vez que a psoríase é uma doença da epiderme, de camada exterior da pele, a administração local na área afectada da pele é mais vantajosa do que a administração oral, a injecção e outras administrações em geral, em termos de biodisponibilidade, permitindo também a prevenção dos efeitos secundários em geral, sendo por isso considerada como o melhor método de administração.

As formas de dosagem para a administração local na pele incluem os unguentos, cremes e outros agentes semi-sólidos, agentes em fita, cataplasmas, agentes em pó, etc., mas quando se consideram os sintomas da psoríase, são melhores os agentes semi-sólidos. Como unguento de lct,24-(OH)2-V.D3, os inventores da presente invenção já revelaram uma fórmula para um unguento isento de água (veja-se a memória da Publicação da Patente Japonesa Examinada (Kokoku) N° 3-68009). Foram relatados bons efeitos terapêuticos por este unguento isento de água, mas uma vez que a base do unguento é petrolatum branco, não é possível evitar uma sensação oleosa, pegajosa, depois da aplicação. Assim, tem-se sentido a necessidade de uma formulação externa melhor em termos de sensação quando aplicada sobre a superfície, etc.

As composições de creme incluem grandes quantidades de água e, por isso, não são pegajosas como os unguentos, tendo sido usadas durante longo tempo como agentes externos. São classificadas por composição, em dois tipos de composições de creme do tipo emulsão, quer dizer, tipos de óleo em água (O/A) ou tipos de água em óleo (A/O), bem como composições de creme do tipo gel aquoso. Uma comparação destes três tipos pelo estado quando friccionadas na pele revela que as composições de creme do tipo gel aquoso sofrem do problema da precipitação do polímero à base de gel sobre a pele, enquanto que as composições de creme de emulsão do tipo água em óleo (A/O) sofrem do problema de a cor branca e outras cores externas não desaparecerem facilmente. Em oposição a isto, as composições de creme de emulsão do tipo óleo em água (O/A) são vantajosas no sentido de a cor branca e outras cores externas desaparecerem facilmente.

Contudo, no caso da psoríase, em particular, uma vez que ocorre na maior parte das vezes na cara, é desejada uma composição de creme à base de emulsão do tipo óleo em água que não apenas permita o desaparecimento da cor exterior mas também que não

ο sobressaia no local de aplicação, em particular, não brilhe no local de aplicação e, por isso, se sinta bem depois da aplicação.

As composições de creme de emulsão do tipo óleo em água são compostas por uma fase oleosa que consiste num componente de óleo sólido, que é em geral principalmente sólido ou semi-sólido à temperatura normal e um componente de óleo líquido que é líquido à temperatura normal, uma fase aquosa que inclui propileno glicol ou glicerina ou outro humidificante, etc., um agente tensioactivo, etc. (relativamente à tecnologia em geral sobre estas composições de creme, veja-se, por exemplo, “Shin Keshohingaku” (New Cosmetic Science), editada pela Takeo Mitsui, 1993, Nanzando.)

Como componente de óleo sólido acima mencionado, usa-se normalmente petrolatum branco, parafina sólida e outros hidrocarbonetos; álcool cetílico, álcool estearílico e outros álcoois superiores; ácido palmítico e outros ácidos gordos superiores; cera de abelha, cera de carnaúba, e outras ceras (ésteres); e lanolina e outros ésteres de esterol, e como componente de óleo líquido acima mencionado, parafina líquida, esqualano e outros hidrocarbonetos; trigliceridos de ácidos gordos de comprimento de cadeia médio, óleo de amêndoas, azeite, adipato diisopropílico e outros ésteres, etc. (Dermatological Formulation: B. W. Barry, Mareei Dekker Co., 1983).

Além disso, como agente tensioactivo acima mencionado, são usados muitos agentes tensioactivos não-iónicos e iónicos sozinhos ou em combinação com dois tipos ou mais. Para emulsificação de uma emulsão do tipo óleo em água, o índice de HLB do agente tensioactivo é, em geral, o que se situe apropriadamente na gama entre aproximadamente 8 e aproximadamente 18. (Por exemplo, veja-se “Bunsan Nyukakei no Kagaku” (Chemistry of Dispersions and Emulsions), Kitahara et al., 1988 Kogaku Tosho, p. 63.) Já foram reveladas várias técnicas anteriores para as composições de creme de V.D3 do tipo activo.

Por exemplo, a memória da EP-A-0 129 003 descreve uma composição de cremêà^ase de I0C-OH-V.D3 ou la,25-(OH)2-V.D3 e descreve uma fórmula da composição de creme constituída por 20 partes em peso de cera de abelhas como componente de óleo sólido, 40 partes em peso de parafina líquida e 1 parte em peso de óleo de amêndoas como componente de óleo líquido. Além disso, a memória da Publicação da Patente Japonesa Não Examinada (Kokai) N° 60-174705 descreve uma composição de creme à base de la,25-(OH)2-V.D3 e uma fórmula da composição de creme que inclui um componente de óleo sólido que compreende petrolatum, cera de abelhas, ácidos gordos superiores, etc., e um componente de óleo líquido que compreende parafina líquida, esqualano, etc.

Ainda, a memória da Publicação da Patente Japonesa Não Examinada (Kokai) N° 4--210903 descreve uma composição medicinal de administração local do tipo emulsão de lcc,25-(OH)2-V.D3, uma fórmula da composição de creme que inclui álcool cetílico, álcool estearílico, e outros componentes em óleo sólidos (NOTA: a memória descreve--os como ajustadores da viscosidade), parafina líquida e outros componentes de óleo líquidos (NOTA: a memória descreve-os como solubilizantes liofílicos), etc., e refere que a estabilidade química da la,25-(OH)2-V.D3 na composição de emulsão de la,25--(OH)2-V.D3 é atingida ajustando-se o pH entre aproximadamente 6,5 e aproximadamente 7,5.

Além disso, a memória da WO92/01454 e a memória da WO91/1280 descreve composições de creme de recalcipotriol ou um derivado de 20(R)-22-oxa-V.D3 e descreve uma fórmula de composição de creme que inclui um componente de óleo sólido que compreende petrolatum branco, álcool estearílico e do género, e um componente de óleo líquido que compreende parafina líquida.

Estas composições de creme ou composições em emulsão ilustradas compreendem componentes usados nas preparações de composições de creme normais. (Por exemplo, veja-se 0 livro de Barry acima mencionado.) Como característica dos componentes ou proporções que necessitem de uma menção especial, foi referido na memória da Publicação a Patente Japonesa Não Examinada (Kokai) N° 4-210903 que 0 pH deveria ser controlado para um valor entre aproximadamente 6,5 e aproximadamente 7,5 para a 5

VjLA^T^ / estabilização do ingrediente activo, não se tendo dado qualquer outra referência. Quer ( dizer, não se observou nada em particular relativamente aos componentes que formam a fase oleosa ou os componentes do agente tensioactivo.

Os inventores da presente invenção, contudo, envolvidos em estudos intensos de vários tipos de composições de creme preparadas de acordo com a tecnologia descrita acima, com a intenção de produzirem uma composição de creme à base de la,24-(OH)2-V.D3, que é uma de V.D3 do tipo activo, como resultado, defrontaram-se com problemas do tipo (1) na técnica anterior não era possível obter-se uma permeabilidade suficiente na pele do ingrediente activo à base de la,24-(OH)2-V.D3 ou atingir um efeito farmacológico superior em testes animais (em particular, estes eram piores do que o unguento dos presentes inventores (veja-se a memória da Publicação da Patente Japonesa Examinada (Kokoku) N° 3-68009), (2) na técnica anterior, havia a possibilidade de melhoramento da estabilidade química do ingrediente activo à base de lcc,24-(OH)2-V.D3, (3) descobriu-se que algumas das composições de creme preparadas pela tecnologia anteriormente descrita eram insuficientes em termos de estabilidade física, e (4) descobriu-se que algumas das composições de creme preparadas pela tecnologia anteriormente descrita eram insuficientes em termos de sensação, tal como a pegajosidade após a aplicação na pele ou brilho do local de aplicação.

Nomeadamente, nas composições de creme à base de la,24-(OH)2-V.D3 preparadas usando la,24-(OH)2-V.D3 como ingrediente activo, de acordo com as fórmulas descritas na memória da EP-A-0 129 003, na memória da Publicação da Patente Japonesa Não-Examinada (Kokai) N° 60-174705, na memória da Publicação da Patente Japonesa Não-Examinada (Kokai) N° 4-210903, e nas memórias das WO92/01454 e W091/1280, quer a permeabilidade da pele, quero efeito farmacológico da la,24--(OH)2-V.D3 eram inferiores ao unguento dos inventores da presente invenção (veja-se a memória da Publicação da Patente Japonesa Examinada (Kokoku) N° 3-68009) havendo também lugar para o melhoramento da estabilidade química,

Além disso, as fórmulas descritas na memória da EP-A-0 129 003 e na memória da Publicação da Patente Japonesa Não-Examinada (Kokai) N° 60-174705 tinham 6 \JJ^4 problemas de viscosidade no momento do revestimento, de brilho no local de aplicação, e de estabilidade física, isto é, fácil separação da fase oleosa e da fase aquosa sob aquecimento ou sob centrifugação.

Ainda, nas fórmulas descritas na memória da Publicação da Patente Japonesa Não--Examinada (Kokai) N° 4-210903, havia o problema da estabilidade física, isto é, a fácil separação da fase oleosa e da fase aquosa sob aquecimento ou centrifugação. Nas fórmulas ilustradas na WO92/01454 e 91/1280, o brilho do local de aplicação não podia ser eliminado.

Quer dizer, enquanto que esta técnica anterior descrita deu vários exemplos de fórmulas de composições de emulsão de V.D3 do tipo activo (por exemplo, composições de creme), a permeabilidade na pele, a actividade farmacológica e a estabilidade química da lct,24-(OH)2-V.D3 eram insuficientes e a estabilidade física da composição de creme bem como a sensação depois da aplicação não eram necessariamente também satisfatórias.

DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO O problema a ser resolvido pela presente invenção consiste em proporcionar uma composição de creme à base de la,24-(OH)2-V.D3 tendo uma permeabilidade na pele melhorada do ingrediente activo à base de la,24-(OH)2-V.D3 e, como resultado, exibindo um efeito farmacológico suficiente e uma melhor estabilidade química. Além disso, consiste em proporcionar simultaneamente uma composição de creme à base de la,24-(OH)2-V.D3 tendo uma estabilidade física melhorada e uma melhor sensação depois da aplicação.

Os inventores da presente invenção estiveram envolvidos numa pesquisa intensiva para resolver 0 problema acima mencionado e, como resultado, mostraram pela primeira vez que a permeabilidade na pele do ingrediente activo à base de la,24-(OH)2-V.D3 está dependente dos componentes da composição de creme, mais particularmente dos tipos e 7 7

proporções do componente da fase oleosa, e que a estabilidade -(OH)2-V.D3 na composição de creme está largamente dependente dos tipos e proporções dos agentes tensioactivos, e descobriram que a estabilidade física da composição de creme está dependente da proporção do componente de óleo sólido para o componente de óleo líquido na fase oleosa e que a sensação no momento da aplicação está intimamente relacionada com o tipo de componente de óleo líquido em particular e, por este meio, completaram a presente invenção. O fundamento que leva às descobertas acima e o conceito técnico da invenção serão explicados abaixo:

Relativamente à primeira característica da permeabilidade da pele, em geral, para aumentar a permeabilidade da pele do ingrediente activo numa composição de creme, toma-se desejável incluir o ingrediente activo na composição de creme numa concentração tão próxima da solubilidade saturada quanto possível, mas a la,24-(OH)2--V.D3 é quimicamente instável e não se dissolve muito bem num dissolvente não-polar e, por isso, quando se segue a fórmula para uma composição de creme normal, toma-se extremamente difícil assegurar a presença estável de la,24-(OH)2-V.D3 numa concentração próxima da saturação.

Por outro lado, é conhecido usar como componente de óleo sólido da composição de creme, por exemplo, uma mistura de álcool cetílico, álcool estearílico ou álcool cetoestearílico ou outros álcoois superiores e hidrocarbonetos.

Contudo, surpreendentemente, os inventores da presente invenção descobriram que, quando se usa uma mistura de álcoois superiores consistindo em álcool estearílico e álcool cetílico e petrolatum branco como componente de óleo sólido e esqualano como componente de óleo líquido, a permeabilidade da pele da la,24-(OH)2-V.D3 estava notoriamente dependente da composição. Quer dizer, os inventores da presente invenção descobriram que a permeabilidade da pele do ingrediente activo à base de la,24-(OH)2-V.D3 depende dos tipos e proporções do componente em fase oleosa e que, por exemplo, quando a proporção em peso do álcool estearílico para 0 álcool cetílico era alterada para comparar a permeabilidade da pele do la,24-(OH)2-V.D3, a permeabilidade aumentava de repente quando a proporção de álcool estearílico chegava 8 Μ a aproximadamente 70%. Além disso, os inventores da presente invenção descobriram que o aumento da permeabilidade da pele se reflectia também no efeito farmacológico da 1oc,24-(OH)2-V.D3 no modelo de psoríase de animais e que quando a proporção de álcool estearílico chegava a aproximadamente 65%, em particular aproximadamente 70%, era exibido um efeito farmacológico equivalente ao unguento livre de água anteriormente proposto e comercializado pelos presentes inventores.

Segundo, relativamente aos factores por trás da estabilidade química do ingrediente activo à base de la,24-(OH)2-V.D3, os presentes inventores descobriram que era importante ter tanto de la,24-(OH)2-V.D3 distribuído na fase oleosa, quanto possível em termos de estabilidade química a longo prazo e que, por isso, os tipos e proporções dos agentes tensioactivos eram importantes como factores que governavam a taxa de distribuição nas fases oleosa e aquosa da loc,24-(OH)2-V.D3 além dos tipos e proporções do componente da fase oleosa.

Quer dizer, descobriram que tendo, pelo menos, 50% em peso ou mais dos agentes tensioactivos, a constituir 2,5 a 7,5 partes em peso da composição de creme da presente invenção, são necessários os agentes tensioactivos com um índice de HLB de cerca de 5 ou menos em que o índice de HLB dos agentes tensioactivos seja no total de aproximadamente 8 a aproximadamente 18, mais preferencialmente de aproximadamente 8 a aproximadamente 12, para uma elevada distribuição da la,24--(OH)2-V.D3 na fase oleosa e, por sua vez, para a estabilidade química do loc,24-(OH)2--V.D3.

Terceiro, relativamente aos factores por trás da estabilidade física da composição de creme, em particular, da separação da fase oleosa e da fase aquosa sob aquecimento (ou sob uma carga de calor) ou sob uma carga de centrifugação, os inventores descobriram que era importante a composição do componente de óleo sólido e do componente de óleo líquido que constituem a fase oleosa. Quer dizer, descobriram que, para manter a composição de creme num estado em creme, mesmo quando colocada em condições difíceis, a proporção do componente de óleo sólido para o componente de óleo líquido 9 vjuô na fase oleosa (isto é, o componente de óleo sólido/componente de óleo líquido: , proporção em peso) tem de ser aproximadamente 2 ou mais.

Em geral, por exemplo, para assegurar uma boa sensação depois da aplicação na pele, por exemplo, para reduzir a pegajosidade, tem sido muitas vezes usado o método de aumentar a proporção do componente de óleo líquido. Os inventores descobriram, surpreendentemente, que aumentando a proporção do componente de óleo sólido, em particular fazendo a proporção em peso do componente de óleo sólido para o componente de óleo líquido de aproximadamente 2 ou mais, aumenta a estabilidade física da composição de creme.

Olhando para a técnica anterior deste ponto de vista, o componente de óleo sólido na fórmula para uma composição de creme descrita na memória da EP-A- 0 129 003 compreendendo 20 partes em peso de cera de abelhas e o componente de óleo líquido consistindo em 40 partes em peso de parafina líquida e 1 parte em peso de óleo de amêndoas, para um total de 41 partes em peso e, por isso, a proporção em peso do componente de óleo sólido para o componente de óleo líquido era de 0,5 ou menos. Além disso, o componente de óleo sólido na fórmula para uma composição de creme descrita na memória da Publicação da Patente Japonesa Não-Examinada (Kokai) N° 60--174705 consistia em 10 partes em peso de petrolatum branco, 4 partes em peso de parafina sólida, 3 partes em peso de cera de abelhas e 2 partes em peso de ácido esteárico, para um total de 19 partes em peso, e o componente de óleo líquido consistia em 25 partes em peso de parafina líquida e 5 partes em peso de azeite, para um total de 30 partes em peso e, por isso, a proporção em peso do componente de óleo sólido para o componente de óleo líquido era aproximadamente de 0,63. Ainda, o componente de óleo sólido na fórmula para uma composição local do tipo emulsão descrita na memória da Publicação da Patente Japonesa Não-Examinada (Kokai) N° 4-210903 consistia em 1,5 partes em peso de álcool cetílico e 2,5 partes em peso de álcool estearílico, para um total de 4 partes em peso, e o componente de óleo líquido consistia em 4 partes em peso de parafina líquida e, por isso, a proporção em peso do componente de óleo sólido para o componente de óleo líquido era de 1. 10

Por outro lado, o componente de óleo sólido nas fórmulas das composições de creme descritas nas memórias das WO92/0I454 e WO91/1280 consistiam em 17 partes em peso de petrolatum branco e 6 partes em peso de álcool cetoestearílico, para um total de 23 partes em peso, enquanto que o componente de óleo líquido consistia em 5 partes em peso de parafina líquida e, por isso, a proporção em peso do componente de óleo sólido para o componente de óleo líquido era de 4,6.

Quarto, relativamente às causas da sensação da composição de creme depois da aplicação, em geral, para manter baixa a pegajosidade da composição de creme, a prática consiste em manter a proporção da fase oleosa tão pequena quanto possível e seleccionar um componente de óleo líquido com uma boa sensação como o componente em fase líquida. No caso da composição de creme à base de la,24-(OH)2-V.D3 da presente invenção, contudo, é necessário que o componente de óleo líquido seja 1/3 ou menos do componente em fase oleosa do ponto de vista da estabilidade física, tal como se mencionou acima e, por isso, é difícil usar a técnica geral acima.

Por outro lado, em geral, como componente de óleo líquido, usam-se muitos hidrocarbonetos e ésteres, tal como se mencionou acima. Surpreendentemente, contudo, os presentes inventores descobriram que, quando se usa esqualano como componente de óleo líquido, obtém-se uma sensação superior depois da aplicação em comparação com o caso em que se usa, por exemplo, parafina líquida tal como usada na técnica anterior, por exemplo, a pegajosidade no momento da aplicação diminui e verificou-se muito menos brilho do local de aplicação.

Consequentemente, de acordo com a presente invenção, proporcionam-se uma composição de creme à base de la,24-(OH)2-V.D3 que compreende (a) uma quantidade terapeuticamente efectiva de la,24-(OH)2-V.D3, (b) um componente em fase oleosa que inclui (i) um componente de óleo sólido que compreende 5 a 20 partes em peso de petrolatum branco e 5 a 20 partes em peso de uma mistura de álcoois superiores consistindo em álcool estearílico e álcool cetílico. 11 11

(ii) um componente de óleo líquido que compreende 3 a-10 partes em peso esqualano, (c) um componente em fase aquosa, e (d) 2,5 a 7,5 partes em peso de, pelo menos, dois agentes tensioactivos, em que a composição de creme à base de la,24-(OH)2-V.D3 tem uma proporção em peso do componente de óleo sólido para o componente de óleo líquido, (isto é, componente de óleo sólido/componente de óleo líquido) de, pelo menos 2, a proporção em peso do álcool estearílico para a mistura de álcoois superiores é de 0,65 a 0,9, pelo menos 50% em peso dos agentes tensioactivos é, pelo menos, um agente tensioactivo tendo um índice de HLB de 5 ou menos, e o índice de HLB dos agentes tensioactivos como um todo é 8 a 18 e uma preparação farmacêutica para o tratamento da psoríase que compreende essa composição de creme.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS A presente invenção será agora descrita em mais pormenor, com referência ao desenho da Figura 1, que mostra um aparelho de ensaio usado no Teste de Referência 4.

MELHOR MODO DE REALIZAÇÃO DA INVENÇÃO O componente em fase oleosa que constitui a composição de creme à base de la,24--(OH)2-V.D3 da presente invenção é composto por um componente de óleo sólido que compreende 5 a 20 partes em peso de petrolatum branco e 5 a 15 partes em peso de uma mistura de álcoois superiores consistindo em álcool estearílico e álcool cetílico e o componente de óleo líquido compreende 3 a 10 partes em peso de esqualano. O petrolatum branco da presente invenção é um petrolatum obtido lixiviando e refinando uma mistura de hidrocarbonetos obtida de óleo. Para as especificações, são usadas as especificações referidas, por exemplo, na Farmacopeia Japonesa. Em 12 \JU£ particular, é desejável uma que seja de elevada pureza em termos de estabilidade da la,24-(OH)2-V.D3. Por exemplo, é desejável uma que tenha um valor de peróxido de 0,5 ou menos. Os álcoois superiores de acordo com a presente invenção são misturas de álcool cetílico e álcool estearílico. A proporção em peso do álcool estearílico na mistura, como um todo, é de aproximadamente 0,65 a aproximadamente 0,9. Particularmente preferido, é a gama entre aproximadamente 0,7 e aproximadamente 0,9, em particular, de preferência aproximadamente 0,70 e aproximadamente 0,85. A permeabilidade na pele tende a aumentar juntamente com o aumento gradual do álcool estearílico do álcool cetílico sozinho. Quando a proporção em peso do álcool estearílico excede aproximadamente 0,7, a permeabilidade da pele aumente repentinamente. Toma--se máxima com o álcool estearílico sozinho. Contudo, quando a proporção excede aproximadamente 0,9, verifica-se uma tendência para deterioração da estabilidade física da emulsão, em particular, a estabilidade física sob aquecimento. O álcool cetílico e o álcool estearílico normalmente comercializados, por vezes, não são produtos puros. Por exemplo, o que se chama álcool cetílico é por vezes uma mistura de aproximadamente 0,7 de álcool cetílico e aproximadamente 0,3 de álcool estearílico. Além disso, o que se chama álcool cetoestearílico, por vezes, é uma mistura de aproximadamente 0,6 a aproximadamente 0,3 de álcool cetílico e aproximadamente 0,4 a aproximadamente 0,7 de álcool estearílico. O álcool cetílico e o álcool estearílico na presente invenção indicam os produtos puros. As proporções de mistura dos mesmos são calculadas com base nestas.

Além disso, o esqualano da presente invenção é um hidrocarboneto saturado obtido reduzindo hidrocarbonetos obtidos do óleo de fígado de, por exemplo, tubarões das profundidades. As especificações usadas são aquelas, por exemplo, estabelecidas nos Padrões dos Ingredientes Cosméticos.

Para o componente em fase oleosa da presente invenção, além do petrolatum branco acima mencionado, dos álcoois superiores e do esqualano, é possível adicionar outros componentes em óleo sólidos e componentes em óleo líquidos. As quantidades adicionadas deverão ser aquelas em que se mantenha um dos objectos da presente 13

“VJUC invenção, por exemplo, a estabilidade física. É preferível uma quantidade não superior a 1/10 partes em peso do componente de óleo sólido da presente invenção, uma vez que permite manter uma dureza apropriada da composição de creme. Como componentes em óleo líquido, podem mencionar-se os trigliceridos de ácidos gordos de comprimento de cadeia média, adipato de diisopropilo, miristato de isopropilo, e outros ésteres. As quantidades destes componentes em óleo líquidos adicionadas deverão situar-se na gama em que é mantido um dos objectos da presente invenção, por exemplo, a permeabilidade da pele do la,24-(OH)2-V.D3. É preferível uma quantidade não superior a 3/10 partes em peso do esqualano, uma vez que permite. manter uma boa permeabilidade na pele da la,24-(OH)2-V.D3.

Os agentes tensioactivos da presente invenção compreendem dois ou mais tipos de agentes tensioactivos, cujo total seja de 2,5 a 7,5 partes em peso da composição de creme como um todo. Além disso, pelo menos 50% em peso dos agentes tensioactivos são, pelo menos, um agente tensioactivo com um índice de HLB de aproximadamente 5 ou menos. Os índices de HLB dos agentes tensioactivos como no total é de aproximadamente 8 a aproximadamente 18. Mais preferencialmente, é de aproximadamente 8 a aproximadamente 12.

Como agente tensioactivo tendo um índice de HLB de aproximadamente 5 ou menos, constituindo pelo menos 50% em peso dos agentes tensioactivos usados na presente invenção, pode mencionar-se pelo menos um agente tensioactivo seleccionado do grupo que compreende, por exemplo, monooleato de sorbitano, monoestearato de sorbitano, sesquioleato de sorbitano, trioleato de sorbitano, monoestearato de glicerilo, monooleato de glicerilo, monoestearato de propileno glicol, etc. Os restantes agentes tensioactivos não estão particularmente limitados, desde que o índice de HLB total seja aproximadamente 8 a aproximadamente 18, mais preferencialmente aproximadamente 8 a aproximadamente 12, mas, por exemplo, pode mencionar-se pelo menos um agente tensioactivo seleccionado do grupo que compreende tetraoleato de polioxietileno (30 ou 40 ou 60) sorbitano, óleo de rícino de polioxietileno (60) endurecido, monolaurato de sorbitano, monopalmitato de sorbitano, monolaurato de polioxietileno (20) sorbitano, monopalmitato de polioxietileno (20) sorbitano, monoestearato de polioxietileno (20) 14 ——\ju: sorbitano, monooleaato de polioxietileno (20) sorbitano, monolaurato de polioxietileno (10), éster de polioxietileno (23 ou 25 ou 30) cetilo, etc.

Pode adicionar-se um antioxidante ao componente em fase oleosa da composição de creme da presente invenção. Como antioxidante, adiciona-se butil-hidroxitolueno, butil--hidroxianisol, di-a-tocoferol, etc., mais preferencialmente, di-a-tocoferol. A quantidade adicionada é normalmente de 0,001 a 5,0 partes em peso, mais apropriadamente 0,01 a 3,0 partes em peso.

Pode ser adicionado um agente humidifícante, um agente preservante, um agente quelante, um tampão, etc. ao componente de fase aquosa da composição de creme à base de la,24-(OH)2-V.D3 da presente invenção. Como agente humidifícante, pode mencionar-se o propileno glicol, glicerina, sorbito, etc. A quantidade adicionada é de 1 para 20 partes em peso, mais preferencialmente 2 a 15 partes em peso. Como agente preservante, pode mencionar-se o hidroxibenzoato de metilo, hidroxibenzoato de propilo, misturas dos mesmos, e outros hidroxibenzoatos; clorobutanol; monotioglicerol; ácido sórbico, sorbato de potássio; álcool benzílico, etc. A quantidade adicionada é de 0,001 a 10,0 partes em peso, mais preferencialmente 0,01 a 5,0 partes em peso. Como agente quelante, pode mencionar-se o ácido cítrico, citrato de sódio; edetato de sódio, etc. A quantidade adicionada é de 0,001 a 5,0 partes em peso, mais preferencialmente 0,01 a 3,0 partes em peso. Como tampão, pode mencionar-se o hidrogenofosfato de di-sódio, di-hidrogenofosfato de sódio, etc. Estes são adicionados na proporção em peso necessária para ajustar o pH dos componentes da fase aquosa entre 6,5 e 8,0.

Como a la,24-(OH)2-V.D3 do ingrediente activo da presente invenção, de entre a la,24(R)-(OH)2-D3 e a la,24(S)-(OH)2-V.D3, é preferível a la,24(R)-(OH)2-D3 devido à sua superioridade na actividade farmacológica. Além disso, entre os tipos de la,24(R)-(OH)2-V.D3, são preferíveis os cristais em termos da pureza. Por exemplo, pode usar-se a ona-hidrato dos mesmos. 15 15

A quantidade de la,24-(OH)2-V.D3 incluída na composição de creme à base de la,24--(OH)2-V.D3 da presente invenção é a quantidade terapeuticamente efectiva para a doença de pele à qual é aplicado. Situa-se usualmente na gama entre aproximadamente 0,00005 a aproximadamente 0,01% em peso em termos de concentração na composição de creme. A composição de creme à base de la,24-(OH)2-V.D3 da presente invenção é produzida pelo método normal de aquecimento e dissolução da quantidade necessária de ingrediente activo à base de la,24-(OH)2-V.D3 juntamente com o agente tensioactivo no componente em fase oleosa, mistura dos mesmos com o componente de fase aquosa aquecido num emulsionante, depois emulsifícação dos componentes para se obter uma emulsão homogénea que depois é arrefecida. A composição de creme à base de loc,24-(OH)2-V.D3 da presente invenção pode ser usada para o tratamento, por exemplo, da psoríase vulgar, da psoríase pústular, da psoríase guttata, da psoríase eritrodérmica, da psoríase artropática, da psoríase inveterata, e vários outros tipos de psoríase. A quantidade administrada difere de acordo com o grau de gravidade da doença, etc., mas é de preferência aplicada uma composição de creme que tenha uma concentração de la,24-(OH)2-V.D3 de 100 pg a 0,1 pg/g, uma a várias vezes ao dia.

Por isso, faz-se uma composição de creme à base de la,24-(OH)2-V.D3 que tenha um ingrediente activo de la,24-(OH)2-V.D3 com uma excelente permeabilidade da pele e uma estabilidade química aumentada e, ainda, que seja superior em estabilidade física como uma composição de creme e excelente na sensação depois da aplicação na pele. A presente invenção é extremamente significativa no sentido de que proporciona o uso clínico de uma composição de creme à base de la,24-(OH)2-V.D3 que é equivalente em actividade farmacológica ao unguento isento de água do mesmo teor. Ainda, é extremamente significativa no sentido de proporcionar, no uso clínico, uma composição de creme à base de la,24-(OH)2-V.D3 que não é apenas excelente na permeabilidade da pele e na actividade farmacológica, mas também é excelente na sensação no momento 16 16

da aplicação na pele, superior na estabilidade física como uma emulsão e excelente na estabilidade química do ingrediente activo à base de la,24-(OH)2-V.D3.

EXEMPLOS A presente invenção será agora explicada ainda com referência aos Exemplos, embora a presente invenção não se limite a estes Exemplos. Primeiro, far-se-á uma explanação dos vários tipos de métodos de ensaio usados nos Exemplos. 1. Método de Ensaio Sobre a Sensação Depois da Aplicação

Revestiram-se amostras da composição de creme no antebraço de cinco sujeitos saudáveis, pelos próprios sujeitos. Depois, os sujeitos avaliaram cada uma das características seguintes: (1) pegajosidade no momento do revestimento; (2) facilidade de desaparecimento da brancura; e (3) pegajosidade e brilho depois da aplicação - dando-lhe cinco classificações. A quantidade da composição de creme aplicada foi de 50 mg. Esta foi aplicada numa porção de 3 cm x 3 cm quadrados do antebraço. Na avaliação de cinco classificações, foi dada uma maior classificação para a melhor avaliação. 2. Método de Ensaio Sobre a Estabilidade Física da Composição de Creme 2-1. Ensaio Sob Centrifugação

Retirou-se uma amostra de 1 g da composição de creme num tubo de centrifugação, agitou-se num centrifugador a aproximadamente 4000 rpm durante 3 horas, depois retirou-se e observou-se relativamente ao aspecto exterior da composição de creme, para determinar se a fase oleosa e a fase aquosa se tinham separado. 17 17 «s*.

\JLA 2-2. Ensaio Sob Carga de Calor (Ensaio de Aquecimento)

Retirou-se uma amostra de 1 g da composição de creme numa proveta de vidro que depois foi hermeticamente selada e armazenada num tanque a uma temperatura constante de 60° C. Observou-se o aspecto exterior da composição de creme durante algum tempo, para verificar a separação das fases oleosa e aquosa. 3. Método de Ensaio para Comparar a Permeabilidade da Pele de la,24-(OETh--V.Dt da Composição de Creme

Para este ensaio, usou-se o aparelho de ensaio mostrado na Fig. 1. Na figura, 1 mostra pele cortada, 2 uma amostra da composição de creme, 3 um canal de amostragem, 4 uma solução de reservatório e 5 uma célula. Para a pele, usou-se pele cortada de um rato Wistar delapidado (toda a pele = incluindo o stratum comeum, a epiderme e a derme). Para a solução de reservatório, um tampão de Hanks (pH = 7,4) mais 10% de soro de feto de boi. Manteve-se a célula a 37° C, aplicou-se a amostra da composição de creme sob a parte superior da superfície da pele a 5 mg/cm2, fez-se uma amostragem da solução de reservatório a partir do canal de amostragem depois de um tempo constante e testou-se por HPLC a la,24-(OH)2-V.D3 na solução de reservatório. (Para o método de ensaio, veja-se abaixo.)

De notar que o teste foi realizado com a concentração de 50 pg/g da la,24-(OH)2--V.D3 na composição de creme. 18 18

A la,24-(OH)2-V.D3 na composição de creme foi ensaiada pelo método abaixo descrito.

Retirou-se uma quantidade de 400 mg da composição num tubo de centrifugação. Adicionaram-se ao mesmo 30 mel de uma solução padrão interna (130 mcg prednisolon/etanol ml), 3 ml de diclorometano e 0,5 ml de uma solução salina saturada. Agitou-se a mistura durante 10 minutos e depois centrifugou-se durante 10 minutos a 3000 rpm, enquanto se arrefecia para 5o C. A camada do fundo, ou camada de diclorometano foi retirada e parte foi vazada para dentro de uma coluna de HPLC para ensaiar a la,24-(OH)2-V.D3. As condições de HPLC foram conforme se descreve abaixo:

Coluna: Inertsil 508 4,6* 250 mm Temperatura da coluna: 40° C Eluente: n-hexano/EtOH (89/11)

Caudal: 1,2 ml/min 5. Método de Ensaio Sobre a Actividade Farmacológica da Composição de Creme à base de la,24-(OHW.D^

Para o modelo animal de psoríase, avaliou-se a actividade da la,24-(OH)2-V.D3 na supressão do crescimento das células usando a actividade ODC (omitina dicarboxilase) como marcador da actividade do crescimento das células. Quer dizer, tratou-se a pele de ratinhos sem pêlo com TPA (12-O-tetradecanoilforbol--13-acetato) para acelerar o crescimento das células epidérmicas. Administrou-se uma composição de creme à base de la,24-(OH)2-V.D3 ao mesmo e avaliou-se a supressão do crescimento medindo a actividade de ODC. Explicando isto em mais pormenor, primeiro, aplicaram-se 10 nmoles de TPA a uma secção de 3 x 3 cm2 19

-“VJUO do dorso do ratinho sem pêlos para acelerar o crescimento das células epidérmicas. Depois, aplicaram-se 50 mg da amostra do teste (composição de creme) ao mesmo local, no caso do grupo de ensaio (não se aplicou nada para o grupo de controlo). Depois de 5 horas, cortou-se a pele do local administrado e mediu-se a actividade de ODC pelo método de Chiba, K., et al. (Câncer Res., 44: 1387 a 1391 (1984)). Encontrou-se a proporção da actividade de ODC do grupo em ensaio em relação à do grupo de controlo e usou-se como taxa de supressão. Esta foi usada como indicador da actividade farmacológica da composição de creme à base de la,24-(OH)2-V.D3. 6. Medição da Taxa de Distribuição da la,24-(OHW.Di na Composição de Creme nas Fases Oleosa e Aquosa

Retirou-se uma quantidade de 10 g da composição de creme e separou-se por centrifugação (15000 g x 240 min) para a fase oleosa e a fase aquosa. Ensaiou-se a la,24-(OH)2-V.D3 na fase aquosa pelo método de acordo com a secção 4 acima mencionada e calculou-se a taxa de distribuição nas fases oleosa e aquosa da la,24-(OH)2-V.D3.

Exemplo 1

Retiraram-se e misturaram-se o componente de óleo sólido (componente 2 a 4), o componente de óleo líquido (componente 5), os agentes tensioactivos (componente 6 a 8), o antioxidante (componente 10) e o agente preservante (componente 12), tal como se mostra na Tabela 1 seguinte, depois aqueceram-se para 80° C para formar uma solução homogénea. A esta solução adicionou-se o componente 1 para formar uma solução homogénea (solução A). Por outro lado, adicionaram-se à água (componente 15) um agente humidifícante (componente 9), um agente preservante (componente 11) e tampões (componente 13, 14) para formar uma solução homogénea (solução B). Aqueceu-se esta a 80° C. Misturaram-se a solução A e a solução B e emulsionaram-se 20

20 “VjU

num emulsionador a vácuo (feito por Mizuho) para formar uma composição emulsionada homogénea que depois foi arrefecida para a temperatura ambiente, para se obter um creme branco (Exemplo 1).

Tabela 1

Ingrediente activo 1. 1 a,24-(OH)2-V.D3 0,0002 partes em peso Componente de óleo sólido 2. Petrolatum branco 3. Álcool estearílico 4. Álcool cetílico 10 partes em peso 8 partes em peso 2 partes em peso Componente de óleo líquido 5. Esqualano 5 partes em peso Agente tensioactivo 6. Monoestearato de glicerílo 7. Óleo de rícino de polioxietileno (60) endurecido 8. Éter polioxietileno (23) cetílico 2,4 partes em peso 0,8 partes em peso 0,8 partes em peso Agente humidifícante 9. Propileno glicol 10 partes em peso Antioxidante 10. di-a-tocoferol 0,02 partes em peso Agente preservante 11. Hidroxibenzoato de metilo 12. Hidroxibenzoato de propilo 0,1 partes em peso 0,05 partes em peso Tampão 13. Hidrogenofosfato de di-sódio 14. Di-hidrogenofosfato de sódio 15. Água esterilizada q.b. (pH = 7,2) q.b. (pH = 7,2) q.b. Total 100 partes em peso

Exemplo de Controlo 1

De acordo coma fórmula descrita naEP-A-0 129 003, dissolveu-se la, 24(R)-(OH)2--V.D3 numa mistura de 40 partes em peso de parafina líquida e 1 parte em peso de óleo 21 de amêndoas e manteve-se a mistura a 80° C. Adicionou-se a esta 20 partes em peso dê cera de abelhas auto-emulsificante juntamente com 40 partes em peso de água a 80° C. Emulsionou-se a mistura e arrefeceu-se para se obter uma composição de creme à base de la,24-(OH)2-V.D3 (Exemplo de Controlo 1).

Exemplo de Controlo 2

Obteve-se uma composição de creme à base de la,24-(OH)2-V.D3 da fórmula seguinte, de acordo com o método descrito na memória da Publicação da Patente Japonesa Não-Examinada (Kokai) N° 60-174705 (Exemplo de Controlo 2):

Aditivo Comp. n° Nome do componente Proporção (partes em peso) Ingrediente activo 1 la,24(RMOH)2-V.D3 0,0002 Componente em 2 Petrolatum branco 10 óleo sólido 3 Parafina sólida 4 4 Cera de abelhas 3 5 Ácido esteárico 2 Componente em 6 Parafina líquida 25 óleo líquido 7 Azeite 5 Agente 8 Éter polioxietileno cetílico 2 tensioactivo 9 Monoestearato de sorbitano 1 Agente 10 Polietileno glicol 1500 2 humidifí cante 11 Agente preservante q.b. Outros 12 Água esterilizada 45

Total 100

Exemplo de Controlo 3

Produziu-se uma composição de creme à base de la,24-(OH)2-V.D3 (Exemplo de Controlo 3) da fórmula seguinte descrita na memória da Publicação da Patente Japonesa Não-Examinada (Kokai) N° 4-210903, de acordo com a descrição da memória:

Aditivo Comp. n° Nome do componente Proporção (partes em peso) Ingrediente activo 1 1 cc,24(R)-(OH)2-V.D3 0,0002 Componente em 2 Álcool cetílico 1,5 Óleo sólido 3 Álcool estearílico 2,5 Componente em óleo líquido 4 Parafina líquida 4 Agente 5 Monoestearato de sorbitano 2,0 tensioactivo 6 Aracel 165 (marca registada) 4,0 7 Poli-sorbato 60 (marca registada) 1,0 Agente 8 Propileno glicol 5 humidifícante 9 Solução de sorbitol 2 Antioxidante 10 Butil-hidroxianisol 0,05 Estabilizante 11 Edetato de di-sódio 0,01 Agente 12 Hidroxibenzoato de propilo 0,05 preservante 13 Hidroxibenzoato de metilo 0,18 Outros 14 Água esterilizada q.b. Total 100

Exemplo de Controlo 4

Preparou-se uma composição de creme à base de la,24-(OH)2-V.D3 (Exemplo de Controlo 4) da fórmula seguinte descrita nas memórias da Publicação da WO92/01454 e 91/1280, de acordo com a descrição dessa memória: 23 (

Aditivo Comp. n° Nome do componente Proporção (partes em peso) Ingrediente activo 1 lcc,24(R)-(OH)2-V.D3 0,0002 Componente em 2 Petrolatum branco 17 óleo sólido 3 Álcool cetostearílico 6 Componente em óleo líquido 4 Parafina líquida 5 Agente tensioactivo 5 Cetomacrogol 3 Agente humidificante 6 Propileno glicol 3 Agente preservante 7 Cloreto de cloroalil-hexaminio 0,05 Tampão 8 Hidrogenofosfato de di-sódio 0,2 9 Di-hidrogenofosfato de sódio 0,01 Outros 10 Água esterilizada q.b. Total 100

Exemplo de Controlo 5

Obteve-se um unguento isento de água de la,24-(OH)2-V.D3 (Exemplo de Controlo 5) da fórmula seguinte de acordo com o método descrito na memória da Publicação da Patente Japonesa Examinada (Kokoku) N° 3-68009. 24

Aditivo Comp. n° Nome do componente Proporção (partes em peso) Ingrediente 1 la,24(R)-(OH)2-V.D3 0,0002 activo Substracto 2 Petrolatum branco 95 3 Parafina líquida 4,5 Dissolvente 4 Adipato de diisopropilo 0,5 Total 100

Teste de Referência 1

Teste Sobre a Estabilidade Química de la,24-(QHW.Pi na Composição de Creme do Exemplo 1

Usaram-se as composições de creme do Exemplo 1 e dos Exemplos de Controlo 1 e 2, e usou-se a composição de creme do Exemplo 1, mas com cera de abelhas em vez de petrolatum branco (Exemplo de Controlo 6), usou-se a composição de creme do Exemplo 1, mas com ácido esteárico em vez de petrolatum branco (Exemplo de Controlo 7), usou-se a composição de creme do Exemplo 1, mas com lanolina em vez de petrolatum branco (Exemplo de Controlo 8), e usou-se a composição de creme do Exemplo 1, mas com ácido esteárico em vez dos álcoois superiores do Exemplo 1 (Exemplo de Controlo 9). Embalaram-se as composições de creme em tubos de alumínio e armazenaram-se a 40° C durante seis meses e depois encontrou-se a taxa residual de la,24-(OH)2-V.D3 relativamente à taxa inicial (%) pelo Método do Teste 4. Os resultados são referidos na Tabela 2. 25

Tabela 2

Amostra (componentes do componente de óleo sólido) Proporção residual de la,24-(OH)2-V.D3 (%) Exemplo 1 (petrolatum branco, álcool estearílico, álcool cetílico) 96 Exemplo de Controlo 1 (cera de abelhas) 73 Exemplo de Controlo 2 (petrolatum branco, parafina sólida, cera 62 de abelhas, ácido esteárico) Exemplo de Controlo 6 (cera de abelhas, álcool estearílico, álcool 75 cetílico) Exemplo de Controlo 7 (ácido esteárico, álcool estearílico, álcool 51 cetílico) Exemplo de Controlo 8 (lanolina, álcool estearílico, álcool 68 cetílico) Exemplo de Controlo 9 (petrolatum branco, ácido esteárico) 57

Os resultados acima mostram que as ceras (Exemplos de Controlo 1, 2 e 6), a lanolina (Exemplo de Controlo 8), e os outros componentes naturalmente derivados, provavelmente devido às impurezas, e os ácidos gordos superiores (Exemplos de Controlo 7 e 9), provavelmente devido à sua acidez, não são apropriados em termos de estabilidade da la,24-(OH)2-V.D3. Como resultado, verifica-se que o petrolatum branco e os álcoois superiores são apropriados como componentes em óleo sólido para uma composição de creme à base de la,24-(OH)2-V.D3.

Teste de Referência 2

Teste Sobre a Sensação da Composição de Creme do Exemplo 1 Depois da Aplicação na Pele

Seguiu-se o Método de Ensaio 1 usando cinco sujeitos de ensaio para comparar a sensação e o aspecto da composição de creme depois da aplicação. Para a amostra, usaram-se as composições de creme de Exemplo 1 e dos Exemplos de Controlo 1,2, B e 4 e um agente compreendido no Exemplo 1, com excepção de se usar parafina líquida em vez de esqualano (Exemplo de Controlo 10) e um agente compreendido no Exemplo 1, com excepção de se usar triglicerido do ácido gordo de comprimento de cadeia médio em vez de esqualano (Exemplo de Controlo 11). Os resultados estão referidos na Tabela 3.

Tabela 3

Amostra (componentes do componente de óleo líquido) Pegajosidade depois da aplicação Desaparecimento da brancura Brilho depois da aplicação Exemplo 1 (esqualano) 5 5 5 Exemplo de Controlo 1 (parafina líquida, óleo de amêndoas) 1 1 1 Exemplo de Controlo 2 (parafina líquida, azeite) 3 2 1 Exemplo de Controlo 3 (parafina líquida) 5 4,5 4,5 Exemplo de Controlo 4 (parafina líquida) 4,5 5 4,5 Exemplo de Controlo 10 (parafina líquida) 4,5 5 4 Exemplo de Controlo 11 (triglicerido de ácido gordo neutro) 5 5 5

Nota: Os números são médias para cinco sujeitos.

Da Tabela 3, verifica-se que as composições de creme dos Exemplos de Controlo 1 e 2, que incluem grandes quantidades de parafina líquida como componente de óleo líquido, não desaparecem facilmente quando as composições de creme brancas são aplicadas na 27

< pele, sendo ambas pegajosas e brilhantes no momento da aplicação, pelo que a sensaçã e o aspecto no momento da aplicação são notoriamente inferiores.

Em oposição a isto, em comparação com os Exemplos de Controlo 1 e 2, as composições de creme dos Exemplos de Controlo 3, 4 e 10, que incluem parafina líquida, são relativamente melhores em termos de pegajosidade depois da aplicação, desaparecimento da brancura e do brilho depois da aplicação, mas ainda não são suficientes relativamente a este aspecto. Por outro lado, esses problemas são resolvidos quando a parafina líquida é substituída por esqualano ou triglicerido de ácido gordo de comprimento de cadeia médio (Exemplo 1, Exemplo de Controlo 11).

Teste de Referência 3

Teste Sobre a Estabilidade Física da Composição de Creme do Exemplo 1

Efectuou-se um ensaio sobre a estabilidade física da composição de creme sob centrifugação e aquecimento, de acordo com o Método de Ensaio 2. Para as amostras, usaram-se as composições de creme do Exemplo 1, dos Exemplos de Controlo 1, 2, 3 e 4, as composições de creme do Exemplo 1, mas com as 5 partes em peso de esqualano fizeram 10 partes em peso (Exemplo 2), a composição de creme do Exemplo 1, mas com 10 partes em peso de petrolatum branco, 8 partes em peso de álcool estearílico, 2 partes em peso de álcool cetílico, e 5 partes em peso de esqualano fizeram 7 partes em peso, 4 partes em peso, 1 parte em peso, e 4 partes em peso (Exemplo 3), a composição de creme do Exemplo 1, mas com 5 partes em peso de esqualano fizeram 13 partes em peso (Exemplo de Controlo 12), a composição de creme do Exemplo 1, mas com 10 partes em peso de petrolatum branco, 8 partes em peso de álcool estearílico, 2 partes em peso de álcool cetílico, 5 partes em peso de esqualano fizeram 6 partes em peso, 4 partes em peso, 1 parte em peso, e 10 partes em peso (Exemplo de Controlo 13), e a composição de creme do Exemplo 1, mas com 8 partes em peso de álcool estearílico e 2 partes em peso de álcool cetílico fizeram 10 partes em peso e 0 partes em peso (Exemplo de Controlo 14). Para a avaliação sob centrifugação, determinou-se se as 28 fases oleosa e aquosa se tinham separado depois das amostras serem retiradas e, para a avaliação sob aquecimento, mediu-se o número de dias até à separação das fases oleosa e aquosa. Os resultados são referidos na Tabela 4.

Da Tabela 4, verifica-se que, quando se considera a relação entre a proporção em peso do componente de óleo sólido e do componente de óleo líquido nas amostras com estabilidade física, é preferível em termos de estabilidade física, que a proporção seja, pelo menos, 2. Mesmo apesar de a proporção ser 2 ou mais, contudo, o Exemplo de Controlo 14, que inclui álcoois superiores como componente de óleo sólido, foi um pouco inferior em termos de estabilidade física sob aquecimento. 29

(

Tabela 4

1 30 ---)

Teste de Referência 4

Teste Sobre a Permeabilidade da Pele de la.24-(OHV>-V.D3 a partir da Composição de Creme do Exemplo 1

Realizou-se um teste sobre a permeabilidade da pele da la,24-(OH)2-V.D3 a partir da composição de creme, de acordo com o Método de Ensaio 3. A Tabela 6 mostra a taxa relativa de permeação (%) de amostras usando como 100 a quantidade de la,24-(OH)2--V.D3 que passa do unguento menos aquoso do Exemplo de Controlo 5 para um reservatório lateral depois de três horas.

Tabela 5

Amostra Composição de álcoois superiores da amostra Álcool estearílico Álcool cetílico (partes em peso) (partes em peso) Exemplo 4 9 1 Exemplo 5 7 3 Exemplo de Controlo 14 10 0 Exemplo de Controlo 15 6 4 Exemplo de Controlo 16 5 5 Exemplo de Controlo 17 4 6 Exemplo de Controlo 18 3 7 Exemplo de Controlo 19 2 8 Exemplo de Controlo 20 1 9 Exemplo de Controlo 21 0 10

Note-se que para as amostras, se usaram as composições de creme do Exemplo 1 e dos Exemplos de Controlo 1 a 4 e, também, as composições de creme dos Exemplos de Controlo 10 e 11 (veja-se Teste de Referência 2) e os Exemplos 4 e 5 e os Exemplos de Controlo 14 a 21 compreendendo 0 Exemplo 1, mas com as proporções em peso de álcool estearílico e álcool cetílico alteradas, tal como se mostra na Tabela 5. Além disso, 31

Tabela 6

Proporção em peso de álcool estearílico/álcoois superiores de entre álcoois superiores do componente de óleo sólido Taxa relativa de permeação (%) Exemplo de Controlo 5 (-) 100 Exemplo 1 (0,8) 98 Exemplo 4 (0,9) 98 Exemplo 5 (0,7) 96 Exemplo de Controlo 1 (-) 25 Exemplo de Controlo 2 (-) 47 Exemplo de Controlo 3 (0,625) 44 Exemplo de Controlo 4 (0,5) 51 Exemplo de Controlo 10 (0,8)1 97 Exemplo de Controlo 11 (0,8)2 63 Exemplo de Controlo 14 (1,0) 98 Exemplo de Controlo 15 (0,6) 76 Exemplo de Controlo 16 (0,5) 51 Exemplo de Controlo 17 (0,4) 44 Exemplo de Controlo 18 (0,3) 39 Exemplo de Controlo 19 (0,2) 40 Exemplo de Controlo 20 (0,1) 33 Exemplo de Controlo 21 (0) 29 1

Uso de parafina líquida como componente de óleo líquido. 2

Uso de triglicerido de ácido gordo de comprimento de cadeia médio como componente de óleo líquido. 32

A partir destes resultados, verifica-se que a composição de creme da presente invenção, tal como se mostra no Exemplo 1, era superior relativamente à permeabilidade da pele em comparação com as composições de creme de V.D3 activa descritas no passado, tal como se mostra nos Exemplos de Controlo 1 a 4, e que a permeabilidade na pele de la,24-(OH)2-V.D3 na composição de creme da presente invenção está dependente da composição do álcool superior e aumenta notoriamente quando a proporção de álcool estearílico no total é, pelo menos, cerca de 0,7. Note-se que, enquanto que a composição de creme do Exemplo de Controlo 14 é superior em termos de permeabilidade na pele, é insuficiente em termos de estabilidade física como composição de creme, tal como se explica no Ensaio de Referência 3. Além disso, a composição de creme do Exemplo de Controlo 10 é inferior à composição de creme da presente invenção em termos de sensação e aspecto (veja-se Teste de Referência 2, Tabela 3), mas é suficientemente superior em permeabilidade, enquanto que o Exemplo de Controlo 11 é igual à composição de creme da presente invenção em termos de sensação e aspecto (veja-se Teste de Referência 2, Tabela 3), mas é muito mais inferior em termos de permeabilidade na pele.

Teste de Referência 5

Teste Sobre a actividade Farmacológica da Composição de Creme do Exemplo 1 A Tabela 7 mostra o resultado dos testes comparativos na actividade farmacológica das amostras, tal como 0 Teste de Referência 4, quer dizer, os cremes (mas com um teor da base na composição de creme constituído por 2 pg/g) e unguentes (mas com um teor da base no unguento constituído por 2 pg/g), de acordo com o Método de Ensaio 5. Estes são mostrados pelas taxas relativas de inibição (%), usando como 100 a taxa de inibição da actividade de ODC do unguento isento de água do Exemplo de Controlo 5. <

Tabela 7

Amostra Taxa relativa de inibição (%) Exemplo de Controlo 5 100 Exemplo 1 102 Exemplo 4 105 Exemplo 5 96 Exemplo de Controlo 1 12 Exemplo de Controlo 2 15 Exemplo de Controlo 3 9 Exemplo de Controlo 4 23 Exemplo de Controlo 10 101 Exemplo de Controlo 11 29 Exemplo de Controlo 14 103 Exemplo de Controlo 15 66 Exemplo de Controlo 16 60 Exemplo de Controlo 17 48 Exemplo de Controlo 18 41 Exemplo de Controlo 19 43 Exemplo de Controlo 20 41 Exemplo de Controlo 21 39

Da Tabela 7, verifica-se que num modelo animal de psoríase, a composição de creme da presente invenção (Exemplos l,4e5) exibe uma actividade farmacológica de la,24--(OH)2-V.D3 equivalente ao unguento livre de água do Exemplo de Controlo 5. Além disso, estes resultados mostram que a composição de creme da presente invenção está dependente da permeabilidade da pele mostrada no Teste de Referência 4 e é também superior em termos de actividade farmacológica. 34 34

Teste de Referência 6

Teste Sobre a Taxa de Distribuição nas Fases Oleosa e Aquosa da la,24-(OHV· -V.Di na Composição de Creme do Exemplo 1

Encontrou-se a taxa de distribuição nas fases oleosa e aquosa da la,24-(OH)2-V.D3 na composição de creme, de acordo com o Método de Ensaio 6. Como amostras, usaram-se as composições de creme dos Exemplos 1,2, 3,4 e 5 e dos Exemplos de Controlo 2,3 e 4 e, também, as amostras do Exemplo 1 com os agentes tensioactivos alterados, tal como se mostra na Tabela 8. 35

Amostra Agentes tensioactivos índice de Partes HLB em peso Ex. 6 Monoestearato de sorbitano 3 2 Óleo de rícino de polioxietileno (60) 14 1 hidrogenado Éter polioxietileno (23) cetílico 18 1 Ex. 7 Monoestearato de sorbitano 5 2,4 Óleo de rícino de polioxietileno (60) 14 0,8 hidrogenado Éter polioxietileno (23) cetílico 18 0,8 Ex. 8 Monoestearato de sorbitano 4,3 1,2 Monooleato de glicerilo 3 1,2 Óleo de rícino de polioxietileno (60) 14 0,8 hidrogenado Éter polioxietileno (23) cetílico 18 0,8 Ex. Cont. 22 Monoestearato de sorbitano 3 1,6 Óleo de rícino de polioxietileno (60) 14 1,2 hidrogenado Éter polioxietileno (23) cetílico 18 1,2 Ex. Cont. 23 Monoestearato de sorbitano 3 1 Óleo de rícino de polioxietileno (60) 14 1,5 hidrogenado Éter polioxietileno (23) cetílico 18 1,5 Ex. Cont. 24 Éter polioxietileno (23) cetílico 18 5 Ex. Cont. 25 Monooleato de polioxietileno (20) sorbitano 15 6 Ex. Cont. 26 Monooleato de polioxietileno (20) sorbitano 15 4 Monoleato de glicerilo 3 2 A Tabela 9 mostra as taxas de distribuição na fase aquosa (%) destas amostras e asTa^a residuais (%) da la,24-(OH)2-V.D3 quando as amostras são embaladas em tubos de alumínio e armazenadas a 40° C durante 6 meses.

Tabela 9

Amostras [Agente tensioactivo de HLB 5 ou inferior/agente tensioactivo total (partes em peso)] Taxa de distribuição na fase aquosa (%) Taxa residual de la,24-(OH)2- v.d3 (%) Ex. 1 (60%) 0,8 96 2 (60%) 0,9 95 (60%) 0,8 94 4 (60%) 1,0 93 5 (60%) 0,7 94 6 (50%) 1,2 92 7 (60%) U 93 8 (60%) 1,0 92 Ex. de Cont. 2 (cerca de 33%) 1,8 62 Λ (cerca de 85%) 0,9 88 4 (0%) 1,7 84 22 (40%) 1,7 75 23 (20%) 1,6 81 24 (0%) 2,3 79 25 (0%) 2,0 84 26 (cerca de 33%) 1,5 87

Da Tabela 9, é claro que sendo, pelo menos, 50% em peso dos agentes tensioactivos, agentes tensioactivos lipofílicos, com um índice de HLB inferior a aproximadamente 5, isto contribui para uma maior distribuição da la,24-(OH)2-V.D3 na composição de 37

creme em relação à fase oleosa e, como resultado, contribui para a estabilidade da 1<x,24-(OH)2-V.D3.

Exemplo de Referência 7

Exemplos que Revelam os Limites da Quantidades em fase oleosa e Agentes Tensioactivos oa Composição de Creme

As composições de creme dos Exemplos 9 e 10 seguintes foram preparadas alterando as quantidades da fase oleosa e os agentes tensioactivos do Exemplo 1. As propriedades destes composições de creme são mostradas na Tabela 10. Em ambos os casos, obtiveram-se composições de creme excelentes, tal como no Exemplo 1. 38

Exemplo 9

Aditivo Comp. N° Nome do componente Quantidade (partes em peso) Ingrediente 1 la,24-(OH)2-V.D3 0,0002 activo Componente em 2 Petrolatum branco 5 óleo sólido n J Álcool estearílico 4 4 Álcool cetílico 1 Componente de 5 Esqualano 3 óleo líquido Agente 6 Monoestearato de glicerilo 1,5 tensioactivo 7 Óleo de rícino de polioxietileno (60) 0,5 hidrogenado 8 Éter polioxietileno cetílico 0,5 Agente 9 Propileno glicol 10 humídifícante Antioxidante 10 Di-a-tocoferol 0,02 Agente 11 Hidroxibenzoato de metilo 0,1 preservante 12 Hidroxibenzoato de propilo 0,05 Tampão 13 Hidrogenofosfato di-sódio q.b. (pH = 7,2) 14 Di-hidrogenofosfato de sódio 15 Água esterilizada q.b. Total 100 39

Exemplo 10

Aditivo Comp. N° Nome do componente Quantidade (partes em peso) Ingrediente 1 la,24-(OH)2-V.D3 0,0002 activo Componente em 2 Petrolatum branco 20 óleo sólido 3 Álcool estearílico 12 4 Álcool cetílico ·*> _> Componente de 5 Esqualano 10 óleo líquido Agente 6 Monoestearato de glicerilo 4 tensioactivo 7 Óleo de rícino de polioxietileno (60) 1,5 hidrogenado 8 Éter polioxietileno cetílico 2,0 Agente 9 Propileno glicol 10 humidifí cante Antioxidante 10 di-a-tocoferol 0,02 Agente 11 Hidroxibenzoato de metilo 0,1 preservante 12 Hidroxibenzoato de propilo 0,05 Tampão 13 Hidrogenofosfato di-sódio q.b. (pH = 7,2) 14 Di-hidrogenofosfato de sódio 15 Água esterilizada q.b. Total 100 40 40

Tabela 10

Ex. 9 Ex. 10 Ex. 1 Sensação depois da aplicação Igual à do Ex. 1 Igual à do Ex. 1 Estabilidade física (Sob centrifugação) (Sob aquecimento) Sem separação Separação depois de 4 dias Sem separação Separação depois de 4 dias Sem separação Separação depois de 4 dias Permeabilidade da pele (taxa relativa de permeação) 98% 98% 98% Actividade farmacológica (taxa relativa de inibição) 101% 97% 105% Taxa de distribuição na fase aquosa 1,0% 0,9% 0,8% Estabilidade química (taxa residual de la,24-(OH)2-V.D3) 96% 96% 96%

Teste de Referência 8

Prepararam-se composições de creme compreendendo o Exemplo 1, mas incluindo 0,00005 partes em peso (Exemplo 11) e 0,01 partes em peso (Exemplo 12) de loc,24--(OH)2-V.D3 em vez de 0,0002 partes em peso. Comparou-se a permeabilidade da pele com a do unguento isento de água (a mesma fórmula que a do Exemplo de Controlo 5) da mesma concentração, de acordo com o Método de Ensaio 3, depois do que se descobriu que a permeabilidade da pele era de aproximadamente 99%. 41 41

Teste da Adição do Componente de Óleo Líquido

Prepararam-se composições de creme, em que foram adicionadas 1, 1,5 e 2 partes em peso de adipato de diisopropilo a 5 partes em peso do componente de óleo líquido do esqualano do Exemplo 1 (Exemplo 13, Exemplo 14 e Exemplo de Controlo 27). As propriedades das composições de creme dos Exemplos 13 e 14 (sensação e aspecto, estabilidade física, permeabilidade da pele, actividade farmacológica, proporção da distribuição nas fases oleosa e aquosa, estabilidade química, etc.) eram substancialmente iguais às da composição de creme do Exemplo 1, mas quando se comparou a permeabilidade da pele do Exemplo de Controlo 27 com a composição de creme do Exemplo 1 pelo Método de Ensaio 3, descobriu-se que tinha uma permeação relativa inferior de 80%. É possível adicionar ésteres além do esqualano como componente de óleo líquido, mas se a solubilidade da la,24-(OH)2-V.D3 subir demasiado, a permeabilidade da pele cai, pelo que se estima que a quantidade seja limitada a cerca de 30% do esqualano.

Teste de Referência 10

Efeito na Proporção da Mistura de Álcoois Superiores na Permeabilidade da Pele Quando se Usa Acetato de Hidrocortisona como Base

Testaram-se pelo Método de Ensaio 3 composições de creme incluindo 0,25 partes em peso de acetato de hidrocortisona e componentes além da base, da mesma forma que nos Exemplos 1, 4 e 5 e Exemplos de Controlo 14 a 21, a fim de comparar as permeabilidades da pele do acetato de hidrocortisona. Ao contrário do caso de la,24--(OH)2-V.D3, a permeabilidade esteve quase completamente não-relacionada com a proporção em peso do álcool estearílico e do álcool cetílico. A descoberta da presente invenção de que a permeabilidade da pele de la,24-(OH)2-V.D3 está largamente dependente das componentes e das proporções do álcool superior foi possível pelo facto 42

de o teor aqui ser extremamente baixo. Os cremes esteroides convencionalmente conhecidos revelariam provavelmente que algo como o presente teste seria impossível.

APLICABILIDADE INDUSTRIAL

Tal como se explicou acima, a composição de creme da presente invenção não apenas é superior em termos de permeabilidade na pele da lcc,24-(OH)2-V.D3 contida, mas também é excelente em termos de estabilidade química do ingrediente activo, excelente na sensação no momento de aplicação na pele, e excelente na estabilidade física como emulsão e, por isso, permite a aplicação efectiva da la,24-(OH)2-V.D3 como composição de creme na pele, etc.

Lisboa, i 4 NOV. 2000

ANA SILVA CARVALHO

Dra. Maria SiMna Fferreira Agente Ofieiol de Propriedode Industrial R. Castilho, 201-3.° E- 1070-051 LISBOA Telefe. 213 851339 - 213 854 613

Claims

REIVINDICAÇÕES 1. Composição de creme à base de la,24-(OH)2-vitamina D3 que compreende (a) uma quantidade terapeuticamente efectiva de la,24-(OH)2-vitamina D3, (b) um componente em fase oleosa que compreende (i) um componente de óleo sólido compreendendo 5 a 20 partes em peso de petrolatum branco e 5 a 15 partes em peso de uma mistura de álcoois superiores consistindo em álcool estearílico e álcool cetílico, e (ii) um componente de óleo líquido compreendendo 3 a 10 partes em peso de esqualano, (c) um componente em fase aquosa, e (d) 2,5 a 7,5 partes em peso de, pelo menos, dois agentes tensioactivos, em que a proporção em peso do componente de óleo sólido para o componente de óleo líquido (componente de óleo sólido/componente de óleo líquido) é de, pelo menos, 2, a proporção em peso do álcool estearílico para a mistura de álcoois superiores é 0,65 a 0,9, pelo menos 50 % em peso dos agentes tensioactivos é, pelo menos, um agente tensioactivo tendo um índice de HLB de 5 ou menor, e o índice de HLB dos agentes tensioactivos no total de 8 a 18.
2. Composição de creme à base de 1 a,24-(OH)2-vitamina D3, de acordo com a reivindicação 1, em que, pelo menos, o referido agente tensioactivo que tem um índice de HLB de 5 ou menor é, pelo menos, um agente tensioactivo seleccionado do grupo que consiste em monooleato de sorbitano, monoestearato de sorbitano, 2

sesquiolato de sorbitano, trioleato de sorbitano, monoestearato de glicerilo, monooleato de glicerilo e monoestearato de propileno glicol.
3. Composição de creme à base de 1 a,24-(OH)2-vitamina D3, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, que compreende la,24-(OH)2-vitamina D3 numa quantidade de 0,00005 a 0,01% (proporção em peso).
4. Preparação farmacêutica para o tratamento da psoríase, que compreende a composição de creme à base de la,24-(OH)2-vitamina Dj, tal como reivindicada na reivindicação 1. Lisboa, 1 4 Npv. 2000 Dra. Maria Silvina Fferreira ana silva carvalho Adjunto Agente Ofieial de Propriedade Industrial R. Castilho, 201-3.° E -1070-051 LISBOA Telets. 213 851339 - 213 854613