PT651652E

PT651652E - Tratamento para dentes sensiveis

Info

Publication number: PT651652E
Application number: PT93912469T
Authority: PT
Inventors: Eric Charles Reynolds
Original assignee: Univ Melbourne; Victorian Dairy Ind
Priority date: 1992-06-29
Filing date: 1993-06-29
Publication date: 2000-07-31
Also published as: EP0651652B1; JP2005336211A; KR950702123A; US5981475A; GR3033246T3; JP3762426B2; CA2138991A1; EP0651652A1; KR100238551B1; DE69327845T2; EP0651652A4; ES2144458T3; DK0651652T3; WO1994000146A1; NZ252959A; DE69327845D1; JPH07509224A; CA2138991C; ATE189606T1

Description

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DESCRICÂO "Tratamento para dentes sensíveis"

CAMPO DO INVENTO O presente invento refere-se a um método para o tratamento de dentes sensíveis com uma composição oral, contendo fosfoproteínas e fosfopéptidos específicos, e a composições orais adequadas para esse propósito.

ANTECEDENTES E ARTE RELACIONADA A sensibilidade dos dentes (hipersensibilidade da dentina) é uma resposta dolorosa a estímulos físicos, químicos ou térmicos e pode afectar um em sete adultos dentados. Ainda que os aspectos clínicos da hipersensibilidade da dentina estejam bem descritos, os mecanismos fisiológicos não são tão bem compreendidos. A teoria mais genericamente aceite sugere que os túbulos da dentina actuam como canais que permitem que os diferentes estímulos atinjam a polpa e induzam a dor. Os compostos usados no tratamento da dentina hipersensitiva incluem formalina e nitrato de prata, glicerina, cloreto de estrôncio, fosfato dicálcico, nitrato de potássio, fluoreto de sódio, citrato de sódio, hidróxido de cálcio, resinas, oxalato de potássio, fluoreto estanoso e cianoacrilato. Crê-se que a maioria dos agentes anteriores reduzem a hipersensibilidade da dentina quer por mineralização, quer por precipitação, na entrada dos túbulos da dentina bloqueando desse modo os estímulos.

SUMÁRIO DO INVENTO O presente invento proporciona uma composição oral utilizada para tratar a hipersensibilidade da dentina, contendo a referida composição uma quantidade redutora ou aliviadora da hipersensibilidade da dentina, de um ou mais componente(s) activo(s) seleccionado(s) de entre uma caseína, um componente de caseína (as-caseína ou β-caseína), uma fosfoproteína, e um fosfopéptido ou seus sais que contém uma sequência de resíduos aminoacilo -A-B-C- onde A, B e C são, independentemente, fosfo-serina, fosfotreonina, fosfotirosina, fosfo-histidina ou fosfolisina, num transportador farmaceuticamente ou fisiologicamente aceitável.

Uma sequência preferida é -Ser(P)-Ser(P)-Ser(P)-, onde Ser(P) é fosfo-

84 763 ΕΡ Ο 651 652/ΡΤ 2 serina. Esta sequência é encontrada na fosfoproteína caseína e em alguns péptidos derivados da caseína.

Os fosfopéptidos de caseína preferidos contêm de 3 a 40 resíduos aminoacilo e incluem a sequência -Ser(P)-Ser(P)-Ser(P)-, onde Ser(P) é fosfo-serina. A composição oral pode estar na forma de um dentífrico líquido, colutório, pasta de dentes, gel, pastilha, comprimido, pó ou outro veículo farmaceuticamente aceitável adequado para utilização no tratamento da hipersensibilidade da dentina.

As composições orais preferidas podem também conter uma quantidade eficaz de inibidor de fosfatase ou de agente de estabilização de fosfopéptido (tal como um fluoreto, carragenano, β-glicerofosfato, vanadato ou polímero aniónico) (polímero de carboxilato tal como Belsperse 161®, polímeros de viniléter e ácido maleico, polímeros de sulfonato ou polímeros de fosfonato ou polifosfatos ou suas misturas). As composições podem também conter agentes que melhorem a actividade de dessensibilização do(s) componente(s) activo(s) da composição por estabilização do(s) componente(s) activo(s) intraoralmente ou por melhoria directa da dessensibilização. Estes agentes incluem iões de metal tais como Fe (III), Zn(ll) e Al(lll), fosfato de cálcio (CP), fluorofosfato de cálcio (CFP). O presente invento proporciona também um método para tratamento da hipersensibilidade da dentina compreendendo o contacto da dentina exposta de um dente com uma composição oral contendo uma quantidade redutora ou aliviadora da hipersensibilidade da dentina de um componente activo, seleccionado de entre uma caseína, um componente de caseína (as-caseína ou β-caseína), uma fosfoproteína, e um fosfopéptido ou seus sais que contém uma sequência de resíduos aminoacilo -A-B-C- onde A, B e C são, independentemente, fosfo-serina, fosfotreonina, fosfotirosina, fosfo-histidina ou fosfolisina, num transportador farmaceuticamente ou fisiologicamente aceitável.

DESCRICÃO DAS CONCRETIZAÇÕES PREFERIDAS DO INVENTO

De acordo com o presente invento, no método para tratamento da hipersensibilidade da dentina é essencial a utilização de caseína, dos seus componentes as-caseína ou β-caseína, de uma fosfoproteína ou de um fosfopéptido e/ou de seus sais. Os fosfopéptidos de caseína específicos preferidos

84 763 ΕΡ Ο 651 652/ΡΤ 3 contêm de 3 a 40 aminoácidos incluindo a sequência -Ser(P)-Ser(P)-Ser(P)-, onde -Ser(P) é fosfo-serina.

No método do presente invento, pode-se usar uma mistura de fosfopétidos de caseína (CPP) e/ou os seus sais. Neste caso, prefere-se que predominem aqueles contendo a sequência -Ser(P)-Ser(P)-Ser(P)- anterior. Os fosfopéptidos de caseína ou misturas de CPP estão, de preferência, substancialmente puros pelo menos numa extensão em que não contenham impurezas desagradáveis ao paladar. Verificou-se que os fosfopéptidos de caseína identificados como SEQ.ID NO:1, SEQ.ID NO:2,SEQ.ID NO:3, SEQ.ID NO:4, SEQ.ID NO:5, SEQ.ID NO:6, SEQ.ID NO:7, SEQ.ID NO:8, SEQ.ID NO:9 na "Listagem de Sequências" a seguir apresentada são particularmente úteis nas composições do presente invento.

Os fosfopéptidos de caseína preferidos podem ser simplesmente extraídos a partir de um digerido de caseína, podendo esta digestão ser química ou enzimática com enzimas proteóliticas. Prefere-se digerir a caseína com uma enzima proteólitica, por exemplo, subtilisina (alcalase), pancreatina, tripsina, quimotripsina, pepsina, papaina, termolisina ou pronase. A pancreatina ou a alcalase são as enzimas preferidas. A caseína digerida pode depois ser fraccionada em fosfopéptidos contendo a sequência -Ser(P)-Ser(P)-Ser(P)- e noutros péptidos fosforilados e não fosforilidos. Os fosfopéptidos de caseína preferidos podem ser purificados usando o método de precipitação selectiva descrito no nosso Pedido de Patente Internacional PCT/AU92/00175 na forma de um sal de cálcio. Alternativamente, em vez de usar CaCI2 para agregar os fosfopéptidos preferidos, podem-se usar outros iões de metal divalentes ou trivalentes (tais como FeCI3, ZnS04, CaHP04) para formar agregados de CPP [tais como FeCPP, ZnCPP, fosfato de cálcio-CPP (CPP-CP), fluorofosfato de cálcio-CPP (CPP-CFP)] que podem depois ser precipitados selectivamente por etanol. O sal de sódio dos péptidos pode ser formado por permuta iónica dos sais de cálcio ou de zinco ou, alternativamente, por cromatografia de permuta aniónica tal com se descreve na nossa Patente dos Estados Unidos 5 015 628. Pode-se usar ultrafiltração para separar os complexos CaCPP, FeCPP, ZnCPP, CPP-CP ou CPP-CFP do restante dos péptidos de caseína não activos como a seguir se descreve. A caseína foi preparada por acidificação de leite com HCI 0,1 M até pH 4,7 e o precipitado foi removido por centrifugação. A caseína foi convertida no sal caseínato de sódio solúvel em água por neutralização da caseína, em suspensão, com NaOH até pH 7,0. Preparou-se uma solução de caseínato de sódio a 10% p/v 4 84 763 ΕΡ Ο 651 652/ΡΤ e ajustou-se até ρΗ 8,0. Adicionou-se pancreatina até 0,2% p/v e deixou-se prosseguir a hidrólise até estar completa, a 37°C, com ajustamento a pH 8,0 por adição constante de NaOH. Depois, ajustou-se o pH da solução a pH 4,7 com HCI 5 M e removeu-se o precipitado. Ajustou-se o sobrenadante até pH 7,0 com NaOH e adicionou-se CaCI2 até um nível de 1,0% p/v. Depois, diafiltrou-se esta solução através de uma membrana Amicon YM10 com CaCI2 a 1,0%. Lavou-se o retentado com um volume de água desionisada. Os péptidos individuais da preparação de CPP foram analisados após separação por FPLC de permuta aniónica e HPLC de fase inversa, como se descreve na nossa Patente dos Estados Unidos da América 5 015 628. A identificação dos péptidos envolveu a análise da composição e da sequência de aminoácidos após conversão dos resíduos fosfo-serilo em resíduos S-etilcisteinilo. Uma preparação de CaCPP típica obtida por ultrafiltração a partir de um digerido pancreático de caseínato de sódio contém SEQ.ID NO:1, 22,3% p/p; SEQ.ID NO:2, 21,4% p/p; SEQ.ID NO:3, 17,9% p/p; SEQ.ID NO:4, 6,8% p/p; SEQ.ID NO:5, 6,3% p/p; SEQ.ID NO:6, 6,4% p/p; SEQ.ID NO:7, 5,7% p/p; SEQ.ID NO:8, 0,8%; SEQ.ID NO:9, 3,3% p/p e péptidos não activos 9,1% p/p. É importante notar que condições mais rigorosas de hidrólise (tais como temperaturas elevadas, extremos de pH e proteases "não do tipo tripsina") resultarão em péptidos desamidados e/ou desfosforilados e/ou mais curtos do que os detalhados na "Listagem de Sequências". Estes péptidos mais curtos e/ou desamidados possuirão ainda actividade de dessensibilização se contiverem a sequência -Ser(P)-Ser(P)-Ser(P)-. Contudo, prefere-se controlar a hidrólise para minimizar a quebra do CPP e deste modo maximizar a actividade específica. O sal de cálcio, férrico ou de zinco do CPP pode ser convertido num sal de sódio por acidificação de uma solução a 10% p/v do CPP até um pH de cerca de 2,0 e os iões de metal di- e trivalentes são removidos por diafiltração através de um filtro com um limite de exclusão de massa molecular de 1000. O retentado é depois neutralizado até pH 7,0 com NaOH e depois diafiltrado com água. Alternativamente, os iões de metal di- e trivalentes podem ser removidos por permuta iónica. O caseinato ou o CPP podem ser usados como tal, ou na forma dos seus sais de metal alcalino, de metal alcalino-terroso ou de metal de transição. Exemplos típicos são os sais de sódio, os sais de cálcio, os sais de fosfato de cálcio, os sais de fluorofosfato de cálcio, os sais férricos, os sais de zinco, cobre, alumínio, potássio, estrôncio, magnésio e níquel. Os sais de sódio, cálcio, fosfato de cálcio, fluorofosfato de cálcio, férrico e de zinco são os mais preferidos. Deste

84 763 ΕΡ Ο 651 652/ΡΤ 5 modo, é contemplado que o presente invento não está limitado aos sais específicos aqui mencionados e que se podem formar e utilizar outros sais de metais catiónicos do CPP, particularmente, sais de metais de transição catiónicos para os propósitos aqui descritos. É também possível e está no âmbito do presente invento ter combinações físicas de compostos da arte anterior (tais como nitrato de potássio, SrCI2, oxalato de potássio) que são conhecidos para dessensibilizar a dentina exposta ou um ou mais de entre caseína e/ou o CPP. Estas composições podem exercer um efeito sinergístico ou aditivo em termos de dessensibilização. O método do presente invento envolve a aplicação aos dentes de uma composição compreendendo caseína, componentes de caseína ou um CPP específico. Uma tal composição contém usualmente de cerca de 0,01 a cerca de 60% em peso de caseína ou de CPP, preferivelmente, de cerca de 0,1 a 20% e, muito preferivelmente, de 1,0 a 5,0%. Estas composições podem ser uma solução ou dispersão aquosa, em água-álcool ou em álcool, de caseína ou de CPP na forma de um colutório, dentífrico, pasta de dentes, pó para dentes, gel, pastilha, comprimido, pastilha elástica ou qualquer outra forma adequada de uma composição oral. O pH destas preparações deverá estar entre 2 e 10. Preferivelmente, o pH deverá estar entre 5 e 9. A actividade de dessensibilização de caseína e do CPP pode ser destruída por desfosforilação das fosfo-serinas pela acção da actividade de fosfatase da placa bacteriana intra-oral. Deste modo, é desejável estabilizar o CPP contra a actividade de fosfatase e de peptidase. Exemplos de agentes estabilizantes a serem usados em conjunto com o CPP, para prevenir ou inibir a desfosforilação, são os iões fluoreto, carragenano, β-glicerofosfato, vanadato, polímeros aniónicos e iões de metal agregante bivalentes e trivalentes [tais como Fe(lll), Ca(ll), Zn(ll)]. Os iões de cálcio, férrico e de zinco agregam o CPP produzindo complexos. Este agregado ou complexo de Fe(lll) e de CPP é designado por FeCPP. Tem sido mostrado que o FeCPP pode ser estabilizado contra a actividade de fosfatase e de peptidase intra-oral e tem também sido mostrado que possui uma retenção oral aumentada, quando comparada com a do NaCPP, e uma actividade de dessensibilização aumentada. Os polímeros aniónicos estabilizantes podem ser seleccionados de entre o grupo consistindo em um polímero de carboxilato, um polímero de sulfonato, um polímero possuindo ambas as porções sulfonato e carboxilato, um polímero de carboxilato contendo grupos fosfonato, polímeros contendo grupos fosfonato, polifosfatos e suas misturas. Um exemplo de polímeros aniónicos estabilizantes que são particularmente activos são os carboxilatos 6 84 763 ΕΡ Ο 651 652/ΡΤ poliméricos Belsperse 161®, obtidos da Ciba-Geigy, e polímeros de viniléter e ácido maleíco, tais como "gantrez".

Os CPP estabilizam o fosfato de cálcio, especificamente, ligam-se a agregados, que se formam espontaneamente, de fosfato de cálcio amorfo e de fluorofosfato de cálcio amorfo para produzir complexos de fosfato de cálcio-CPP e de fluorofosfato de cálcio-CPP ou CPP-CP e CPP-CFP, respectivamente. O CPP pode ligar até 25 iões cálcio, 15 iões fosfato e 5 iões fluoreto por molécula. Tem sido mostrado que estes complexos são particularmente úteis como agentes de dessensibilização na medida em que promovem a mineralização da dentina. Usando péptidos sintéticos, tem sido mostrado que o centro activo do CPP, envolvido na ligação à dentina, é a sequência -Ser(P)-Ser(P)-Ser(P)-.

As composições orais preferidas do presente invento estão na forma de pasta de dentes, cremes ou geles, ou de colutórios. Os ingredientes tipicamente incluídos em pastas de dentes e em geles podem ser usados nas composições em pasta de dentes e em gel de acordo com o invento. Ingredientes adequados incluem materiais de polimento abrasivos, agentes espumantes, agentes aromatizantes, humectantes, aglutinantes, agentes edulcorantes e água. Os abrasivos que podem ser usados nas composições do invento incluem alumina e seus hidratos, tais como tri-hidrato de alfa-alumina, tri-silicato de magnésio, carbonato de magnésio, alumino-silicato, tal como silicato de alumínio calcinado e silicato de alumínio, carbonato de cálcio, silicato de zircónio, poli(metacrilato de metilo), polietileno em pó, xerogeles, hidrogeles e aerogeles de sílica e similares. São também adequados como agentes abrasivos pirofosfato de cálcio, metafosfato de sódio insolúvel, carbonato de cálcio, ortofosfato de cálcio, hidroxiapatite na forma de partículas e similares. Dependendo da forma que a composição oral tomará, o abrasivo pode estar presente numa quantidade de 0 a 70% em peso, preferivelmente, de 1 a 70% em peso, mais preferivelmente, de 10 a 70% em peso, particularmente para pastas de dentes.

Os humectantes contemplados para utilização nos componentes orais preferidos incluem glicerol, poliol, sorbitol, polietilenoglicóis, propilienoglicol, polissacáridos hidrogenados parcialmente hidrolisados e similares. Os humectantes estão geralmente presentes em quantidades de 0 a 80%, preferivelmente, de 5 a 70% em peso, particularmente para pastas de dentes. Os espessantes adequados para utilização no invento incluem sílica. Os espessantes podem estar presentes em cremes e geles dentífricos em quantidades de 0,1 a 20% em peso. 7 84 763 ΕΡ Ο 651 652/ΡΤ

Aglutinantes adequados para utilização nas composições do invento incluem hidroxietilcelulose (Natrosol®) e hidroxipropilcelulose (Klucel®), bem como gomas de xantano, musgo de Iris e goma de tragacanto. Os aglutinantes podem estar presente na pasta de dentes do invento até um teor de 0,01 a 10%. Os edulcorantes adequados para utilização no presente dentífrico, preferivelmente em níveis de cerca de 0,1% a 5%, incluem sacarina.

As fontes de fluoreto usadas em pasta de dentes tais como fluoreto de sódio fluoreto estanoso, monofluorofosfato de sódio, fluoreto de amónio-zinco, fluoreto de amónio-estanho, fluoreto de cálcio e fluoreto de amónio-cobalto podem ser, e preferivelmente são, incluídos para proporcionar efeitos anti-cárie. As composições preferidas do invento incluem a fonte de fluoreto. Os iões fluoreto são proporcionados tipicamente num nível de 0 a 1500 ppm, preferivelmente, de 50 a 1500 ppm, ainda que se possam utilizar níveis até cerca de 3000 ppm.

Os tensioactivos, tais como um sabão, aniónicos, não iónicos, catiónicos, anfotéricos e/ou "zwitteriónicos", podem estar presentes na gama de 0 a 15%, preferivelmente, de 0,1 a 15%, mais preferivelmente de 0,25 a 10% em peso. Os tensioactivos aniónicos são os mais preferidos, tais como o dodecilsulfato de sódio, o laurilsarcosinato de sódio e o dodecilbenzenossulfonato de sódio. Os aromas são usualmente incluídos em pastas de dentes em quantidades baixas, tais como de 0,01 a cerca de 5% em peso, especialmente de 0,1% a 5%.

Os ingredientes acima mencionados como adequados para pastas de dentes são geralmente adequados para geles, como será evidente para um perito na arte da formulação das pastas de dentes e de geles. Deste modo, excepto onde se indicar de outro modo, as referências a pastas de dentes devem ser entendidas como aplicando-se também a geles. Tipicamente, os colutórios compreendem uma solução de água/álcool, aroma, humectante, edulcorante, agente espumante e corante. Os compostos correspondentes acima mencionados que são usados em pastas de dentes, são também geralmente adequados nas gamas anteriores para colutórios. O colutório pode incluir etanol num nível de 0 a 60%, preferivelmente, de 5 a 30% em peso.

Os agente anti-bacterianos, por exemplo fenólicos tais como o Irgasan DP300 (ex. Ciba-Geigy) e as salicilamidas (incluindo salicilanilidas) e fontes de certos iões metálicos, tais como zinco, cobre, prata e estanhoso (tais como cloreto 84 763 ΕΡ Ο 651 652/ΡΤ 8

de zinco, de cobre e estanhoso,, e nitrato de prata) podem também ser, e preferivelmente são, incluídos. Nos dentífricos do invento, podem também ser utilizados pigmentos/corantes adequados para dentífricos, isto é FD & C Blue #1, FD & C Yellow #10, FD & C Red #40, etc.. Nas composições do invento, podem-se também incluir vários outros ingredientes opcionais, tais como conservantes, vitaminas tais como vitamina C e E, e outros agentes anti-placa tais como sais estanosos, sais de cobre, sais de estrôncio e sais de magnésio. Podem também estar incluídos agentes de ajustamento de pH, agentes anti-cárie tais como ureia, glicerofosfato de cálcio, trimetafosfato de sódio, compostos anti-mancha tais como polímeros de silicone, extractos de plantas e suas misturas. Adicionalmente, podem ser incluídos polímeros, particularmente polímeros aniónicos, tais como policarboxilatos ou polissulfonatos, ou polímeros contendo ambas as porções carboxilato e sulfonato, polímeros de fosfonato ou polifosfatos.

Os Exemplos seguintes ilustram adicionalmente várias concretizações preferidas do invento. (Seguem Exemplos)

84 763 ΕΡ Ο 651 652/ΡΤ 9 EXEMPLO 1 A formulação típica para um colutório contendo caseinato ou vários sais de CPP de acordo com o invento é a seguinte:

Formulação de Colutório Ingredientes % em peso da composição final A B C D Etanol 12,5 12,5 12,5 12,5 Sorbitol a 70% 7 7 7 7 Caseinato de sódio - - 5 - NaCPP - 5 - - ZnCPP 5 - - - CPP-CFP - - - 5 Polímero aniónico 0-5 0-5 0-5 0-5 Tween 20 0,55 0,55 0,55 0,55 Conservantes* 0,2 0,2 0,2 0,2 Aroma 0,1 0,1 0,1 0,1 Corante <0,01 <0,01 <0,01 <0,01 Sacarinato de sódio 0,065 0,065 0,065 0,065 Cloreto de sódio 0,05 0,05 0,05 0,05 Acetato de Na 0,015 0,015 0,015 0,015 Ácido acético 0,015 0,015 0,015 0,015 H20 até 100 até 100 até 100 até 100 PH 6,5 6,5 6,5 6,5 * Metilparabeno a 0,1%

Verificou-se que as formulações anteriores exibem propriedades de alívio da hipersensibilidade.

84 763 ΕΡ Ο 651 652/ΡΤ 10 EXEMPLO 2

As formulações de pasta de dentes típicas, contendo caseinato ou vários sais de CPP são as seguintes:

Formulação de Pasta de Dentes pH 6-9

Composição Final (% p/p) A B C D

Sorbitol a 70% 64 39 64 39 Sílica abrasiva 10 10 10 10 Sílica espessante 9 10 9 10 NaCPP, ZnCPP ou CPP-CFP - - 5 5 Polietilenoglicol (PEG 32®) 5 5 5 5 Caseinato de sódio 5 5 - - Polímero aniónico 5 5 5 5 Laurilsulfato de sódio 1,5 1,5 1,5 1,5 Aroma 1 1 1 1 Sacarinato de sódio 0,3 0,2 0,3 0,2 Fluoreto de Na 0,24 0,24 0,24 0,24 Conservante (Benzoato de Na) 0,08 0,08 0,08 0,08 Pigmento <0,01 - <0,01 - Óxido de titânio - 1 - 1 Goma de xantano 0,15 0,6 0,15 0,6 H20 até 100 até 100 até 100 até 100

Verificou-se que as formulações anteriores exibem propriedades de alívio da hipersensibilidade superiores a pastas de dentes para a sensibilidade dentária comerciais correntes, tais como aquelas contendo cloreto de estrôncio. 84 763 ΕΡ Ο 651 652/ΡΤ 11

EXEMPLO 3

Uma formulação para aplicação directa a dentes sensíveis contém o 30% p/v de ZnCPP ou 30% de NaCPP, 5% de CPP-CFP ou 5% de caseinato de sódio em água. Esta formulação exibe propriedades de alivio da hipersensibilidade superiores aos tratamentos profissionais conhecidos tais como o oxalato de potássio. (Segue Listagem de Sequências) 12 84 763 ΕΡ Ο 651 652/ΡΤ

LISTAGEM DE SEQUÊNCIAS (1) INFORMAÇÃO GERAL: (i) REQUERENTE: (A) NOME: The University of Melbourne (B) RUA: Grattan Street (C) CIDADE: Parkville (D) ESTADO: Victoria (E) PAÍS: Austrália (F) CÓDIGO POSTAL: 3052 (A) NOME: The Victorian Dairy Industry Authority (B) RUA: Victoria Street (C) CIDADE: Abbotsford (D) ESTADO: Victoria (E) PAÍS: Austrália (F) CÓDIGO POSTAL: 3067 (i) TÍTULO DO INVENTO: Tratamento para dentes sensíveis. (ii) NÚMERO DAS SEQUÊNCIAS: 9 (iii) FORMA LEGÍVEL EM COMPUTADOR: (A) TIPO DE MEIO: Disquete (B) COMPUTADOR: IBM PC compatível

(C) SISTEMA OPERATIVO: PC DOS/MS-DOS

(D) SOFTWARE: WORD (1) INFORMAÇÃO PARA SEQ ID NO:1: (i) CARACTERÍSTICAS DA SEQUÊNCIA: (A) COMPRIMENTO: 25 (B) TIPO: aminoácido (C) TOPOLOGIA: linear (ii) TIPO DE MOLÉCULA: péptido (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina 84 763 ΕΡ Ο 651 652/ΡΤ 13

(IX) IX) (ÍX) (Β) LOCALIZAÇÃO: 15 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada posf-tradução CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 17 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada post-tradução CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 18 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada posf-tradução CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 19 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada posf-tradução (xi) DESCRIÇÃO DA SEQUÊNCIA:SEQ ID NO:1: Arg Glu Leu Glu Glu Leu Asn Vai Pro Gly Glu lie 1 5 10 Glu Xaa Leu Xaa Xaa Xaa Glu Glu Ser lie Thr Arg 15 20 25 (2) INFORMAÇÃO PARA SEQ ID NO:2: (I) CARACTERÍSTICAS DA SEQUÊNCIA: (A) COMPRIMENTO: 21 (B) TIPO: aminoácido (C) TOPOLOGIA: linear (ii) TIPO DE MOLÉCULA: péptido CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: piroglutamato (B) LOCALIZAÇÃO: 1

V 14 84 763 ΕΡ Ο 651 652/ΡΤ (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: uma certa quantidade existirá nesta forma (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 6 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada post-tradução (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 8 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada post-tradução (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 9 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada posf-tradução (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 10 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada post-tradução (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 17 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada post-tradução (xi) DESCRIÇÃO DA SEQUÊNCIA:SEQ ID NO:2: Xaa Met Glu Ala Glu Xaa lie Xaa Xaa Xaa Glu Glu lie 1 5 10 Vai Pro Asn Xaa Vai Glu Gin Lys 15 20

84 763 ΕΡ Ο 651 652/ΡΤ 15 (2) INFORMAÇÃO PARA SEQ ID NO:3: (i) CARACTERÍSTICAS DA SEQUÊNCIA: (A) COMPRIMENTO: 24 (B) TIPO: aminoácido (C) TOPOLOGIA: linear (ii) TIPO DE MOLÉCULA: péptido (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 14 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada post-tradução (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 16 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada post-tradução (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 17 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada posf-tradução (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 18 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada posf-tradução (xi) DESCRIÇÃO DA SEQUÊNCIA:SEQ ID NO:3: Glu Leu Glu Glu Leu Asn Vai Pro Gly Glu lie Vai Glu 1 5 10 Xaa Leu Xaa Xaa Xaa Glu Glu Ser lie Thr Arg 15 20 i 16 84 763 ΕΡ Ο 651 652/ΡΤ (2) INFORMAÇÃO PARA SEQ ID NO:4: (i) CARACTERÍSTICAS DA SEQUÊNCIA: (A) COMPRIMENTO: 25 (B) TIPO: aminoácido (C) TOPOLOGIA: linear (ii) TIPO DE MOLÉCULA: péptido (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 11 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada post-tradução (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 12 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada post-tradução (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 13 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada post-tradução (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 16 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada posf-tradução (xi) DESCRIÇÃO DA SEQUÊNCIA.SEQ ID NO:4:

Asn Ala Asn Glu Glu Glu Tyr Ser lie Gly Xaa Xaa Xaa 1 5 10 Glu Glu Xaa Ala Glu Vai Ala Thr Glu Glu Vai Lys 15 20 25 17 84 763 ΕΡ Ο 651 652/ΡΤ (2) INFORMAÇÃO PARA SEQ ID NO:5: (I) CARACTERÍSTICAS DA SEQUÊNCIA: (A) COMPRIMENTO: 21 (B) (C) TIPO: aminoácido TOPOLOGIA: linear (H) TIPO DE MOLÉCULA: péptido (ix) (A) (B) (C) CARACTERIZAÇÃO: NOME/CHAVE: fosfo-serina LOCALIZAÇÃO: 6 OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada posf-tradução (ix) (A) (B) (C) CARACTERIZAÇÃO: NOME/CHAVE: fosfo-serina LOCALIZAÇÃO: 8 OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada post-tradução (ix) (A) (B) (C) CARACTERIZAÇÃO: NOME/CHAVE: fosfo-serina LOCALIZAÇÃO: 9 OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada post-tradução (ix) (A) (B) (C) CARACTERIZAÇÃO: NOME/CHAVE: fosfo-serina LOCALIZAÇÃO: 10 OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada posf-tradução (ix) (A) (B) (C) CARACTERIZAÇÃO: NOME/CHAVE: fosfo-serina LOCALIZAÇÃO: 17 OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada posf-tradução

84 763 ΕΡ Ο 651 652/ΡΤ 18 (xi) DESCRIÇÃO DA SEQUÊNCIA:SEQ ID NO:5:

Gin Met Glu Ala Glu Xaa lie Xaa Xaa Xaa Glu Glu He 1 5 10 Vai Pro Asp Xaa Vai Glu Gin Lys 15 20 (2) INFORMAÇÃO PARA SEQ ID NO:6: (I) CARACTERÍSTICAS DA SEQUÊNCIA: (A) COMPRIMENTO: 21 (B) TIPO: aminoácido (C) TOPOLOGIA: linear (ix) (ix) (ii) (ix) (A) (B) (C) (A) (B) (C) (A) (B) (C) TIPO DE MOLÉCULA: péptido CARACTERIZAÇÃO: NOME/CHAVE: fosfo-serina LOCALIZAÇÃO: 6 OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada post-tradução CARACTERIZAÇÃO: NOME/CHAVE: fosfo-serina LOCALIZAÇÃO: 8 OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada posf-tradução CARACTERIZAÇÃO: NOME/CHAVE: fosfo-serina LOCALIZAÇÃO: 9 OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada posf-tradução (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 10 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada posf-tradução 19 84 763 ΕΡ Ο 651 652/ΡΤ (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 17 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada post-tradução (xi) DESCRIÇÃO DA SEQUÊNCIA:SEQ ID NO:6:

Gln Met Glu Ala Glu Xaa lie Xaa Xaa Xaa Glu Glu lie 1 5 10 Vai Pro Asp Xaa Vai Glu Glu Lys 15 20 (2) INFORMAÇÃO PARA SEQ ID NO:7: (I) CARACTERÍSTICAS DA SEQUÊNCIA: (A) COMPRIMENTO: 20 (B) TIPO: aminoácido (C) TOPOLOGIA: linear (ii) TIPO DE MOLÉCULA: péptido (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 7 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada post-tradução (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 8 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada posf-tradução (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 9 20 84 763 ΕΡ Ο 651 652/ΡΤ (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada post-tradução (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 15 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada posf-tradução (xi) DESCRIÇÃO DA SEQUÊNCIA:SEQ ID NO:7:

Asn Thr Met Glu His Vai Xaa Xaa Xaa Glu Glu Ser lie 1 5 10 lie Xaa Gln Glu Thr Tyr Lys 15 20 (2) INFORMAÇÃO PARA SEQ ID NO:8: (I) CARACTERÍSTICAS DA SEQUÊNCIA: (B) COMPRIMENTO: 21 (C) TIPO: aminoácido (D) TOPOLOGIA: linear (ii) TIPO DE MOLÉCULA: péptido (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 8 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada posf-tradução (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 9 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada posf-tradução (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 10 21 84 763 ΕΡ Ο 651 652/ΡΤ (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada post-tradução (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 16 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada posf-tradução (xi) DESCRIÇÃO DA SEQUÊNCIA:SEQ ID NO:8:

Lys Asn Thr Met Glu His Vai Xaa Xaa Xaa Glu Glu Ser 1 5 10 lie lie Xaa Gin Glu Thr Tyr Lys 15 20 (2) INFORMAÇÃO PARA SEQ ID NO:9: (I) CARACTERÍSTICAS DA SEQUÊNCIA: (A) COMPRIMENTO: 37 (B) TIPO: aminoácido (C) TOPOLOGIA: linear (ii) TIPO DE MOLÉCULA: péptido (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 4 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada posf-tradução (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 6 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada posf-tradução (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 22 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada post-tradução 22 84 763 ΕΡ Ο 651 652/ΡΤ (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (Β) LOCALIZAÇÃO: 24 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada post-tradução (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 25 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada posf-tradução (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) (B) (C) NOME/CHAVE: fosfo-serina LOCALIZAÇÃO: 26 OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada post-tradução (ix) CARACTERIZAÇÃO: (A) NOME/CHAVE: fosfo-serina (B) LOCALIZAÇÃO: 33 (C) OUTRAS INFORMAÇÕES: serina fosforilada post-tradução (xi) DESCRIÇÃO DA SEQUÊNCIA:SEQ ID NO:9: Asp lie Gly Xaa Glu Xaa Thr Glu Asp Gin Ala Met Glu 1 5 10 Asp lie Lys Gin Met Glu Ala Glu Xaa He Xaa Xaa Xaa 15 20 25 Glu Glu lie Vai Pro Asn Xaa Vai Glu Gin Lys 30 35

Lisboa, -8. m 2000

Por THE UNIVERSITY OF MELBOURNE e THE VICTORIAN DAIRY INDUSTRY AUTHORITHY - O AGENTE OFICIAL -

O ADJOSTO

WS^AMTÔNI® JOÃO DA CUNHA FERREIRA Ag. Of. Pr. Ind. Iub das Flores, 74 - 4.· 1ΒΘΟ LISBOA

Claims

84 763 ΕΡ Ο 651 652/ΡΤ 1/2 REIVINDICAÇÕES 1. Utilização de uma composição contendo uma quantidade redutora ou aliviadora da hipersensibilidade da dentina de um ou mais componente(s) activo(s) seleccionado(s) de entre’ uma caseína, um componente de caseína (as-caseína ou β-caseína), uma fosfoproteína, e um fosfopéptido ou seus sais que contém uma sequência de resíduos aminoacilo -A-B-C onde A, B e C são, independentemente, fosfo-serina, fosfotreonina, fosfotirosina, fosfo-histidina ou fosfolisina, num transportador farmaceuticamente ou fisiologicamente aceitável contendo adicionalmente uma quantidade eficaz de um inibidor de fosfatase ou de peptidase para o fabrico de um medicamento para o tratamento da hipersensibilidade da dentina.
2. Utilização de acordo com a reivindicação 1, onde a referida sequência de resíduos aminoacilo é -Ser(P)-Ser(P)-Ser(P)- onde -Ser(P) é fosfo-serina.
3. Utilização de acordo com a reivindicação 1 ou 2, onde o material compreende um ou mais fosfopéptidos de caseína e/ou os seus sais contendo de 3 a 40 resíduos aminoacilo incluindo a sequência -Ser(P)-Ser(P)-Ser(P)- onde -Ser(P) é fosfo-serina.
4. Utilização de acordo com a reivindicação 3, onde os referidos fosfopéptidos de caseína são seleccionados de entre um ou mais dos fosfopéptidos de caseína aqui identificados com as Seq. Id.No: 1 a Seq. Id No: 9.
5. Utilização de acordo com a reivindicação 4, onde os fosfopéptidos de caseína (CPP) estão na forma de complexos com um ião de metal divalente ou trivalente.
6. Utilização de acordo com a reivindicação 5, onde os complexos são seleccionados de entre CaCPP, FeCPP, ZnCPP, fosfato de cálcio-CPP e fluorofosfato de cálcio-CPP.
7. Utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 3 a 6, onde os referidos fosfopéptidos de caseína e/ou os seus sais estão substancialmente puros.
8. Utilização de de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, contendo adicionalmente uma quantidade eficaz de um agente estabilizante de 84 763 ΕΡ Ο 651 652/ΡΤ 2/2 fosfopéptidos.
9. Utilização de acordo com as reivindicações 1 ou 8, onde o inibidor ou agente estabilizante é seleccionado de entre um ou mais de um fluoreto, carragenano, β-glicerofosfato, vanadato, polímeros aniónicos, polímeros de carboxilato, polímeros de sulfonato, polímeros possuindo ambas as porções sulfonato e carboxilato, polímeros de carboxilato contendo grupos fosfonato, polímeros contendo grupos fosfonato ou polifosfatos ou misturas, Belsperse 161®, polímeros de viniléter e ácido maleico, iões de metal tais como Fe(lll), Zn(ll) e Al(lll), fosfato de cálcio (CP) e fluorofosfato de cálcio (CFP).
10. Utilização de uma composição contendo uma quantidade redutora ou aliviadora da hipersensibilidade da dentina de um ou mais componente(s) activo(s) seleccionado(s) de entre uma caseína, um componente de caseína (<xs-caseína ou β-caseína), uma fosfoproteína ou seus sais que contém um sequência de resíduos aminoacilo -A-B-C- onde A, B e C são, independentemente, fosfo-serina, fosfotreonina, fosfotirosina, fosfo-histidina ou fosfolisina, num transportador farmaceuticamente ou fisiologicamente aceitável para o fabrico de um medicamento para tratamento da hipersensibilidade da dentina. Lisboa, -8. MM 2000 Por THE UNIVERSITY OF MELBOURNE e THE VICTORIAN DAIRY INDUSTRY AUTHORITHY - O AGENTE OFICIAL -

ESJG.· ANTÓNIO MG DA CUNHA FERREIRA Ag. Of. Pr. Ind. Rue das Fieres, 74 - 4.* ieoo LISBOA