PT644199E - Peptidos ciclicos antimicrobianos e sua preparacao - Google Patents

Description

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DESCRIÇÃO “PÉPTIDOS CÍCLICOS ANTIMICROBIANOS E SUA PREPARAÇÃO” A presente invenção refere-se a um novo composto polipeptidico e a um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Mais particularmente, a invenção diz respeito a um novo composto polipeptidico e a um seu sal farmaceuticamente aceitável que possuem actividade antimicrobiana (em especial actividade anti-fúngica) e actividade inibidora da β-l, 3-glucano-sintetase e que, para além disso, se prevê que sejam úteis para o tratamento ou para a prevenção de infecções provocadas por Pneumocystis carinii (por exemplo, Pneumocystis carinii pneumonia) em seres humanos e animais, a um processo para a preparação de tal composto, às composições farmacêuticas que os contêm e a um método para o tratamento ou para a prevenção de doenças infecciosas, incluindo a infecção provocada por Pneumocystis carinii (por exemplo, Pneumocystis carinii pneumonia) em seres humanos e em animais.

Sendo assim, constitui um objectó da presente invenção proporcionar o composto polipeptidico e um seu sal farmaceuticamente aceitável, os quais são muito activos no combate a diversos microrganismos patogénicos, prevendo-se que sejam úteis para o tratamento ou para a prevenção de infecções provocadas por Pneumocystis carinii (por exemplo, Pneumocystis carinii pneumonia) em seres humanos ou animais.

Constitui outro objecto da presente invenção proporcionar um processo para a preparação do composto polipeptidico e um seu sal.

Constitui também outro objecto da presente invenção proporcionar uma composição farmacêutica que incorpora como ingrediente activo o referido composto polipeptidico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Constitui ainda outro objecto da presente invenção proporcionar um método para o tratamento ou para a prevenção de doenças infecciosas, 1 1

incluindo as infecções provocadas por Pneumocystis carinii (por exemplo, Pneumocystis carinii pneumonia), provocadas por microrganismos patogénicos, o qual consiste em administrar o referido composto polipeptídico a seres humanos ou a animais. 0 composto polipeptídico que constitui o objectivo da presente invenção é novo e pode ser representado pela fórmula estrutural [I] seguinte:

R3 em que cada um dos símbolos R1, R2, R3, R4, R5 e R6 possui as significações definidas na reivindicação 1. 0 documento EP-A-0 462 531 descreve polipeptidos cíclicos com actividade antibiótica.

0 documento EP-A-0 448 354 também descreve lipopeptidos antibióticos. 0 composto polipeptídico de fórmula estrutural [1] da presente invenção pode ser preparado pelos procedimentos ilustrados nos esquemas seguintes. 2 1' ,; ; i \ 1 Procedimento 1.

Redução Η

3 1 Procedimento 2.

Η OH

4 t

Procedimento 3.

5

Procedimento 4

Reacção de substituição

Rl OH

6 c. ο r Γ\

Procedimento 5.

Acilação --►

em que cada um dos símbolos R1, R2, R3, R4, R5 e R6 possui as significações definidas antes, o símbolo R3a representa um grupo aciloxi, o símbolo R4a representa um grupo hidroxi-sulfoniloxi, 7

o símbolo Rsa representa um grupo alquilo (Ci-C6) que pode ter 1 a 3 substituintes adequados, tal como definidos para o símbolo R5, o símbolo R6a representa um grupo hidroxi òu acil-(alquil (Ci-C6) ) -tio, o símbolo R6b representa um grupo acil (alquil (Ci-C6))-tio, o símbolo R6c representa um grupo hidroxi.

Os sais farmaceuticamente aceitáveis do composto [I] da presente invenção são mono- ou di-sais não tóxicos convencionais e como exemplos é possível referir os sais de metais, tais como os sais de metais alcalinos (por exemplo, sal sódico, sal potássico, etc.) e os sais de metais alcalino-terrosos (por exemplo, sal de cálcio, sal de magnésio, etc.), os sais de amónia, os sais de bases orgânicas (por exemplo, sal de trimetilamina, sal de trietilamina, sal de piridina, sal de picolina, sal de diciclo-hexilamina, sal de N,N’~ -dibenziletilenodiamina, etc.), sais de adição de ácidos orgânicos (por exemplo, formato, acetato, trifluoroacetato, maleato, tartarato, metano-sulfonato, benzeno-sulfonato, tolueno-sulfonato, etc.), sais de adição de ácidos inorgânicos (por exemplo, cloridrato, bromidrato, iodidrato, sulfato, fosfato, etc.), sais com um aminoácido (por exemplo, sal de arginina, sal de ácido aspártico, sal de ácido glutâmico, etc.) e não só.

Nas descrições anterior e seguinte da presente memória descritiva são pormenorizadamente indicados exemplos adequados das diversas definições, tal como a seguir se descreve. 0 termo,“inferior” significa que possui entre 1 e 6 átomos de carbono e de preferência entre 1 e 4 átomos de carbono, salvo se indicado de outro modo. 0 termo “superior” significa que possui entre 7 e 20 átomos de carbono, de preferência entre 7 e 15 átomos de carbono e mais preferencialmente entre 7 e 10 átomos de carbono, salvo se indicado de outro modo.

As expressões “grupo acilo adequado” e “radical acilo” no termo “aciloxi” podem designar grupos acilo alifático, acilo aromático, acilo heterocíclico, acilo arilalifático e acilo heterocíclico- 8 Γ\ -alifático derivado de ácido carboxilico, ácido carbónico, ácido carbâmico, ácido sulfónico e semelhantes.

Como exemplos adequados do radical “acilo” assim definido é possivel indicar os grupos seleccionados entre: alcanoilo (Οχ-Οε) (por exemplo, formilo, acetilo, propionilo, butirilo, isobutirilo, valerilo, hexanoilo, pivaloílo, etc.) que pode ter 1 a 3 substituintes adequados seleccionados entre átomos de halogénio (por exemplo, flúor, cloro, bromo, iodo); arilo (por exemplo, fenilo, naftilo, antrilo, etc.) que pode ter 1 a 3 substituintes adequados seleccionados entre grupos hidroxi, grupos alcoxi (C7-C20) tal como adiante definidos, o grupo arilo referido antes e não só; alcoxi (Οχ-Οε) tal como adiante definido; amino; amino protegido, de preferência acil-amino, tal como (alcoxi inferior)-carbonilamino (por exemplo, metoxi-carbonilamino, etoxicarbonilamino, propoxicarbonilamino, pentiloxi-carbonilamino,. butoxicarbonilamino, t-butoxicarbonilamino, pentiloxi-carbonilamino, hexiloxicarbonilamino, etc.), ou semelhantes; di--(alquil inferior)-amino (por exemplo, dimetilamino, N-metiletil-amino, dietilámino, N-propilbutilamino, dipentilamino, di-hexilamino, etc.); (alcoxi inferior)-imino (por exemplo, metoxi-imino, etoxi--imino, propoxi-imino, butoxi-imino, t-butoxi-imino, pentiloxi-imino, hexiloxi-imino, etc.); ar(alcoxi inferior)-imino, tal como fenil-(alcoxi inferior)-imino (por exemplo, benziloxi-imino, fenetiloxi--imino, benzidriloxi-imino, etc.) que pode ter 1 a 3 substituintes adequados seleccionados entre grupos alcoxi tal como adiante definidos ou semelhantes; heterociclico-tio, de preferência piridiltio, que pode ter 1 a 3 substituintes adequados seleccionados entre grupos alquilo(C7-C20) (por exemplo, heptilo, octilo, 2-etil-hexilo, nonilo, decilo, 3,7-dimetiloctilo, undecilo, dodecilo, tridecilo, tetradecilo, pentadecilo, 3-metil-10-etildodecilo, hexadecilo, hepta-decilo, octadecilo, nonadecilo, icosilo, etc.) ou semelhantes; um grupo heteromonociclico (por exemplo, tienilo, imidazolilo, pirazolilo, furilo, tetrazolilo, tiadiazolilo, etc.) que pode ter entre 1 e 3 substituintes adequados seleccionados entre grupos amino, amino protegido referido antes, alquilo (C7-C20) referido antes ou semelhantes; e não só; 9

Γ\ \ \ alcanoílo (C7-C2o) (por exemplo, heptanoilo, octanoílo, nonanoílo, decanoílo, undecanoilo, lauroilo, tridecanoílo, miristoilo, penta-decanoílo, palmitoilo, 10,12-dimetiltetradecanoilo, heptadecanoilo, estearoilo, nonadecanoílo, icosanoílo, etc.); alcenoilo (C3-C6) (por exemplo, acriloílo, metacriloilo, crotonoílo, 3-pentenoilo, 5--hexenoílo, etc.) que pode ter 1 a 3 substituintes adequados se-leccionados entre o referido grupo arilo que pode ter entre 1 e 3 substituintes adequados seleccionados entre grupos alcoxi(C7-C20)/ tal como adiante definidos, ou semelhantes, e não só; alcenoilo (C7-C20) (por exemplo, 4-heptenoílo, 3-octenoílo, 3,6--decadienoílo, 3,7,ll-trimetil-2,6,10-dodecatrienoílo, 4,10-hepta-decadienoílo, etc.); (alcoxi(Ci-C6))-carbonilo (por exemplo, metoxicarbonilo, etoxi-carbonilo, propoxicarbonilo, butoxicarbonilo, t-butoxicarbonilo, pentiloxicarbonilo, hexiloxi carbonilo, etc.); (alcoxi (C7-C20)) -carbonilo (por exemplo, heptiloxicarbonilo, octiloxicarbonilo, 2-etil-hexiloxi-carbonilo, noniloxicarbonilo, deciloxicarbonilo, 3,7-dimetiloctiloxi-carbonilo, undeciloxicarbonilo, dodeciloxicarbonilo, trideciloxi-carbonilo, tetradeciloxicarbonilo, pentadeciloxicarbonilo, 3-metil--1O-etildodeciloxicarbonilo, hexadeciloxicarbonilo, heptadeciloxi-carbonilo, octadeciloxicarbonilo, nonadeciloxicarbonilo, icosiloxi-carbonilo, etc.); ariloxicarbonilo (por exemplo, fenoxicarbonilo, naftiloxi-carbonilo, etc.); arilglioxiloílo (por exemplo, fenilglioxiloilo, naftilglioxi-loílo, etc.); ar (alcoxi (Ci-C6))-carbonilo que pode ter entre 1 e 3 substituintes adequados seleccionados entre grupos fenil (alcoxi (Ci-C6) ) -carbonilo que pode conter radicais nitro ou alcoxi(C1-C6) (por exemplo, benzi-loxicarboniló, fenetiloxicarbonilo, p-nitrobenziloxicarbonilo, p--metoxibenziloxicarbonilo, etc.); (alquil (Ci-C6))-sulfonilo (por exemplo, metilsulfonilo, etil-sulfonilo, propilsulfonilo, isopropilsulfonilo, pentilsulfonilo, butilsulfoni.lo, etc.); 10

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arilsulfonilo (por exemplo, fenilsulfonilo, naftilsulfonilo, etc.) que podem ter entre 1 e 3 substituintes adequados seleccionados entre grupos alquilo(Ci-C6) tal como adiante definidos, grupos alcoxi (C7-C20) tal como adiante definidos, ou semelhantes; ar (alquil (Ci-C6))-sulfonilo, tal como fenil (alquil (C!-C6)) -sul-fonilo (por exemplo, benzilsulfonilo, fenetilsulfonilo, benzidril-sulfonilo, etc.) ou semelhantes; aroilo (por exemplo, benzoilo, naftoilo, antrilcarbonilo, etc.) que pode ter entre 1 e 5 substituintes adequados seleccionados èntre os átomos de halogénio referidos antes; grupos alquilo(Ci-C6) (por exemplo, metilo, etilo, propilo, butilo, t-butilo, pentilo, hexilo, etc.); grupos alquilo (C7-C20) referidos antes , grupos alcoxi(Ci-C6) (por exemplo, metoxi, etoxi, propoxi, butoxi, t-butoxi, pentiloxi, 4-metilpentiloxi, hexiloxi, etc.) que podem ter entre 1 e 10 substituintes adequados seleccionados entre os átomos de halogénio referidos antes e os grupos alcoxi(Ci-C6) definidos antes, arilo definidos antes ou semelhantes; grupos alcoxi(C7-C2o) (por exemplo, heptiloxi, octiloxi, 2-etil-hexiloxi, noniloxi, deciloxi, 3,7-dimetiloctiloxi, undeciloxi, dodeciloxi, trideciloxi, tetradeciloxi, pentadeciloxi, 3-metil-10-etildodeciloxi, hexadeciloxi, heptadeciloxi, octadeciloxi, nonadeciloxi, icosiloxi, etc.) que podem ter la 17 substituintes adequados seleccionados entre os átomos de halogénio referidos antes; grupos alceniloxi (C7-C20) (por exemplo, 3-hepteniloxi, 7-octeniloxi, 2,6-octadieniloxi, 5-noneniloxi, 1-deceniloxi, 3,7-dimetil-6-octeniloxi, 5-noneniloxi, 1-deceniloxi, 3.7- dimetil-6-octeniloxi, 3, 7-dimetil-2,6-octadieniloxi, 8-unde-ceniloxi, 3,6,8-dodecatrieniloxi, 5-trideceniloxi, 7-tetradeceniloxi, 1.8- pentadecadieniloxi, 15-hexadeceniloxi, 11-heptadeceniloxi, 7--octadeceniloxi, 10-nonadeceniloxi, 18-icoseniloxi, etc.); grupos carboxi; grupos arilo referidos antes que podem ter entre 1 e 3 substituintes adequados seleccionados entre os grupos alcoxi(C7-C20) referidos antes, arilo (por exemplo, fenoxi, naftiloxi, antriloxi, etc.) que pode ter 1 a 3 substituintes adequados seleccionados entre os grupos alcoxi(C7-C20) referidos antes ou semelhantes; e não só. 11 s'm \ "/

Como “grupo acilo” preferido refere-se o aroílo que pode ter entre 1 e 5 substituintes adequados seleccionados.entre i) grupos alcoxi (Ci-C6), ii) grupos alcoxi (C7-C20) ou iii) grupos arilo que podem ter entre 1 e 3 grupos alcoxi (Ci-C6) ou alcoxi (C7-C20); é mais preferido o grupo benzoilo ou naftoílo, podendo cada um destes ter 1 a 3 substituintes adequados seleccionados entre o conjunto constituído por grupos alcoxi (Ci-C6), alcoxi (C7-C2o) e fenilo que pode ter entre 1 e 3 grupos alcoxi (C7-C20) ou então fenilo que pode ter entre 1 e 3 grupos alcoxi (C5-Ci6); ou naftoílo que pode ter entre 1 e 3 grupos alcoxi (C7-Ci6) , sendo ainda mais preferido um grupo seleccionado entre 4-octiloxibenzoílo, 4-(4-heptiloxifenil)-benzoilo, 6-heptiloxi-2-naftoílo, 6-octiloxi-2-naftoílo, 4- (4-pentiloxifenil) --benzoilo, 4-(4-noniloxifenil)-benzoilo, 4-(4-metilpentiloxifenil)--benzoilo, 6-(4-metilpentiloxi)-2-naftoílo, 6-hexiloxi-2-naftoílo e 4-(4-hexiloxifenil)-benzoilo; e como exemplo de outro grupo preferido é possível referir um grupo alcanoílo superior, conforme definidos antes, sendo: mais preferido um grupo alcanoílo (C7-Ci7) e indo a preferência máxima para o grupo palmitoílo.

Como grupo “aciloxi” preferido é possível referir um grupo alcanoiloxi (Ci-C6) . #

Como radical “acilo” preferido para o grupo “acil (alquil (C1-C6)) --tio” é possível referir um grupo carboxi ou carboxi protegido, tal como carboxi esterificado [por exemplo, (alcoxi inferior)-carbonilo (v.g., metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, propoxicarbonilo, butoxi-carbonilo, t-butoxicarbonilo, pentiloxicarbonilo, hexiloxicarbonilo, etc.)/ etc.], sendo mais preferível o grupo carboxi.

Como radical “alquilo (Ci-C6)” adequado no grupo “acil (alquil (Ci~C6)) --tio é possível referir um dos que foram indicados como exemplo a propósito do grupo “alquilo(Ci-C6)” pertencente ao conjunto dos grupos “alquilo (Ci-C6) que pode ter entre 1 e 3 substituintes adequados”, conforme definido antes. 0 grupo "alquilo(C1-C6)" pertencente ao conjunto dos grupos "alquilo (Ci-C6) que pode ter entre 1 e 3 substituintes adequados” 12

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pode compreender grupos alquilo de cadeia linear ou ramificada que possuam entre 1 e 6 átomos de carbono , tais como metilo, etilo, propilo, butilo, t-butilo, pentilo, hexilo ou semelhantes, sendo mais preferidos os grupos alquilo (Ci-C6) e o mais preferido o grupo metilo.

Este grupo “alquilo (Ci-C6) ” pode ter entre 1 e 3 substituintes adequados seleccionados entre grupos hidroxi, acilo (por exemplo, carboxi, carboxi protegido [por exemplo, {alcoxi inferior}-carbonilo (v.g., metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, propoxicarbonilo, butoxi-carbonilo, t-butoxicarbonilo, pentiloxicarbonilo, hexiloxicarbonilo, etc.), etc.]), di(alquil inferior)-amino (por exemplo, dimetilamino, dietilamino, N-metiletilamino, dipropilamino, dibutilamino, N-t--butil-butilamino, dipentilamino, di-hexilamino, etc.), amino cíclico que pode conter os outros heteroátomos no seu elemento anelar (por exemplo, 1-pirrolidinilo, piperidinilo, 1-piperazinilo, morfolino, 1-piridilo, di-hidropiridina-l-ilo, etc.) ou semelhantes.

Como exemplos preferidos de grupos “alquilo (Ci-C6) que podem ter entre 1 e 3 substituintes adequados”, conforme definidos antes, é possível referir os grupos alquilo(Ci~C6) que possuem radicais hidroxi e carboxi, alquilo (Ca-C6) que possuem radicais di (alquil (Ci-Ce) ) --amino e alquilo (Ci-C6) que possui radicais amino cíclicos, sendo mais preferíveis os grupos alquilo (Ci-C4) que possuem radicais hidroxi e carboxi, alquilo (Ci-C4) que possuem radicais di (alquil (Ci-C4)-amino e alquilo (Ci-C4) que possui radicais piperidino, e sendo o mais preferido um grupo seleccionado entre 1-hidroxi-l-carboximetilo, dimetilaminometilo e piperidinometilo.

Entre os compostos de fórmula estrutural [I], tal como ante-riormente apresentado, (1) são preferíveis aqueles em que o símbolo R1 representa um átomo de hidrogénio o símbolo R2 representa um grupo aroílo que pode ter entre 1 e 5 substituintes adequados seleccionados entre o conjunto constituído por i) grupos alcoxi (Ci-Ce), ii) grupos alcoxi (C7-C20) ou iii) grupos arilo que 13 f\

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podem ter entre 1 e 3 grupos alcoxi (Οχ-Οε) ou alcoxi (C7-C20) ; ou alcanoílo (C7-C20) ; o símbolo R3 representa um grupo hidroxi ou aciloxi; o símbolo R4 representa um grupo hidroxi ou hidroxi-sulfoniloxi; o símbolo R5 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo (Ci~C6) que pode ter entre 1 e 3 substi-tuintes adequados seleccionados entre o conjunto constituído por grupos hidroxi, acilo, di-(alquil (Ci-C6) )-amino e amino cíclico, e o símbolo R6 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo hidroxi ou acil (alquil (Ci-C6) )-tio, e são mais preferíveis aqueles em que o símbolo R2 representa um grupo benzoílo ou naftoílo, podendo cada um deles ter entre 1 e 3 substituintes adequados seleccionados entre o conjunto constituído por grupos alcoxi (Ci-C6), alcoxi (C7-C20) e fenilo que pode ter entre 1 e 3 grupos alcoxi (C7-C2o) ; o símbolo R3 representa um grupo hidroxi; o símbolo R5 representa um átomo de hidrogénio; e o símbolo R6 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo hidroxi, cada um dos símbolos R1 e R4 possui as significações definidas antes, e (3) são muito mais preferíveis aqueles em que o símbolo R2 representa um grupo benzoílo que possui radicais alcoxi (C7-C20); benzoílo que possui radicais fenilo que possuem grupos alcoxi (C7-C20) , ou naftoílo que possui radicais alcoxi (C7-C2o); o símbolo R6 representa um átomo de hidrogénio, cada um dos símbolos R1, R3, R4 e R5 possui as significações definidas na alínea (2), e ainda mais preferíveis podem ser i) aqueles em que o símbolo R2 representa vim grupo benzoílo que possui radicais alcoxi (C7-C20) e 14 (4)

ί—-· ? / cada um dos símbolos R1, R3, R4, R5 e R6 possui as significações definidas na alínea (3), ou ii) aqueles em que o símbolo R2 representa um grupo benzoílo que possui radicais fenilo com grupos alcoxi (C7-C20) e cada um dos símbolos R1, R3, R4, R5 e R6 possui as significações definidas na alínea (3), ou

iii) aqueles em que o símbolo R2 representa um grupo naftoílo que possui radicais alcoxi (Ci-C6) e cada um dos símbolos R1, R3, R4, R5 e R6 possui as significações definidas na alínea (3), ou iv) aqueles em que o símbolo R2 representa um grupo naftoílo que possui radicais alcoxi (C7-C20) e cada um dos símbolos R1, R3, R4, R5 e R6 possui as signi-ficaçõés definidas na alínea (3), e são também muito mais preferíveis aqueles em que o símbolo R1 representa um átomo de hidrogénio, o símbolo R2 representa um grupo benzoílo que possui radicais alcoxi (C-?-C2o) ; benzoílo que possui radicais fenilo que possuem grupos alcoxi (C7-C20), naftoílo que possui radicais alcoxi(Cx~Ce) ou naftoílo que possui radicais alcoxi (C7-C20) , o símbolo R3 representa iam grupo hidroxi, (6) o símbolo R4 representa um grupo hidroxi ou hidroxi-sulfoniloxi, o símbolo R5 representa um átomo de hidrogénio, e o símbolo R6 representa um grupo hidroxi, e ainda muito mais preferíveis podem ser i) aqueles em que o símbolo R2 representa um grupo benzoílo que possui radicais alcoxi (C7-C20) e cada um dos símbolos R1, R3, R4, R5 e R6 possui as significações definidas na alínea (5), ou ii) aqueles em que o símbolo R2 representa um grupo benzoílo que possui radicais fenilo com grupos alcoxi (C7-C2o) e cada um dos símbolos R1, R3, R4, R5 e R6 possui as significações definidas na alínea (5), ou 15 iii) aqueles em que o símbolo R2 representa um grupo naftoílo que possui radicais alcoxi (Ci-C6) e cada um dos símbolos R1, R3, R4, R5 e R6 possui as significações definidas na alínea (5), ou iv) aqueles em que o símbolo R2 répresenta um grupo naftoílo que: possui radicais alcoxi (C7-C2o) e cada um dos símbolos R1, R3, R4, R5 e R6 possui as significações definidas na alínea (5).

Seguidamente irão ser apresentados, pormenorizadamente os procedimentos para a preparação do composto objectivo de fórmula estrutural [I] ou de um seu sal.

Procedimento 1. É possível preparar o composto objectivo de fórmula estrutural [I] ou um seu sal por redução de um composto de fórmula estrutural [II] ou de um seu sal.

Os sais adequados dos compostos de fórmulas estruturais [I] e [II] podem ser os mesmos que foram exemplificados a propósito do composto de fórmula estrutural [I]. É possível efectuar a reacção de um modo convencional, tal como por redução química ou por redução catalítica.

Como agentes redutores adequados utilizáveis na reacção de redução química refere-se uma combinação de um metal (por exemplo, estanho, zinco, ferro, etc.) ou um composto metálico (por exemplo, cloreto de crómio, acetato de crómio, etc.) com um ácido orgânico ou inorgânico (por exemplo, ácido fórmico, ácido acético, ácido propiónico, ácido trifluoroacético, ácido p-tolueno-sulfónico, ácido clorídrico, ácido bromídrico, reagente de transferência de hidreto, tal como um composto de hidreto de alumínio (por exemplo, hidreto de alumínio e lítio, hidreto de tri-t-butoxi-aluminato de lítio, etc.), composto de boro-hidreto (por exemplo, boro-hidreto de sódio, ciano-boro-hídreto de sódio, etc.) ou semelhantes.

Como catalisadores adequados para utilização na reacção de redução catalítica refere-se os convencionais, tais como o catalisador 16

de platina (por exemplo, placa de platina, esponja de platina, negro de platina, platina coloidal, óxido de platina, arame de platina, etc.)/ catalisador de paládio (por exemplo, esponja de paládio, negro de paládio, óxido de paládio, paládio sobre carvão, paládio coloidal, paládio sobre sulfato de bário, paládio sobre carbonato de bário, etc.), catalisador de níquel (por exemplo, níquel reduzido, óxido de níquel, níquel de Raney, etc.), catalisador de ferro (por exemplo, ferro reduzido, ferro de Raney, etc.), catalisador de cobre (por exemplo, cobre reduzido, cobre de Raney, çobre de Ullman, etc.) ou semelhantes.

Neste procedimento efectua-se a reacção normalmente num solvente, tal como água, um álcool (por exemplo, metanol, etanol, propanol, etc.), ácido acético, éter dietílico, dioxano, tetra--hidrofurano, cloreto de metileno, etc., ou uma mistura destes solventes.

De preferência efectua-se a reacção em condições ligeiramente mais suaves, por exemplo, entre arrefecimento e aquecimento ligeiro.

Está abrangido no âmbito da presente invenção o facto de o grupo “hidroxi” definido para o símbolo R6a poder ser reduzido a “hidrogénio” durante a reacção.

Procedimento 2. É possível preparar o composto objectivo [Ib], ou um seu sal, submetendo um composto [Ia], ou um seu sal, a uma reacção de redução. É possível efectuar esta reacção de uma forma praticamente idêntica à descrita no Procedimento 1 e sendo assim, quanto ao modo e às condições de reacção (por exemplo, solventes, temperatura de reacção, etc.) utilizados nesta reacção, há que reportar-se aos indicados no Procedimento 1.

Procedimento 3. É possível preparar o composto objectivo [id], ou um seu sal, submetendo um composto [Ic], ou um seu sal, a uma reacção de alquilação.

Como agentes adequados para. esta reacção de alquilação é possível referir: 17 Γ\

1) um alcanal (Ci-C6) (por exemplo, formaldeído, etanal, propanal, butanal, t-bufanal, pentanal, hexanal, etc.) que pode ter um ou vários (de preferência entre 1 e 3) substituintes adequados, tais como os exemplificados a propósito dos substituintes para o grupo “alquilo (Ci-Cs) que pode ter entre 1 e 3 substituintes adequados”, conforme definido antes; 2) um composto de fórmula estrutural R6\ Θ

(em que cada um dos símbolos R6 e R7 representa um grupo alquilo(Ci-C6) tal como exemplificado anteriormente), 3) um composto de fórmula estrutural ,Θ

(em que a fórmula estrutural

B representa um grupo amínio cíclico, o qual pode ter o outro ou os outros heteroátomos no seu membro anelar, por exemplo, pirro-lidínio, piperidínio, piperadínio, morfolínio, etc.) e semelhantes.

Esta reacção é efectuada normalmente num solvente convencional que não afecte prejudicialmente a reacção, tal como a água, um álcool (por exemplo, metanol, etanol, propanol, etc.), tetra-hidro-furano, dioxano, dimetilsulfóxido, Ν,Ν-dimetilformamida, acetona ou uma mistura destes solventes. A temperatura de reacção não é crítica, efectuando-se a reacção normalmentè em condições compreendidas entre o arrefecimento e o aquecimento.

Procedimento 4. É possível preparar o composto objectivo [If], ou um seu sal, submetendo um composto [Ie], ou um seu sal, a uma reacção de substituição com grupos acil(alquil(Ci~C6))-tiol. 18

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Esta reacção é efectuada normalmente num solvente, tal como a água, um álcool (por exemplo, metanol, etanol, etc.), benzeno, N,N-dimetilformamida, tetra-hidrofurano, tolueno, cloreto de metileno, dicloreto de etileno, clorofórmio, dioxano, éter dietílico ou qualquer outro solvente que não afecte prejudicialmente a reacção ou uma mistura destes solventes. A temperatura de reacção não é critica, efectuando-se a reacção normalmente em condições compreendidas entre o arrefecimento e o aquecimento.

Efectua-se a reacção normalmente na presença de um ácido, incluindo um ácido de Lewis.

Como ácido adequado é possível referir um ácido orgânico (por exemplo, ácido fórmico, ácido acético, ácido propiónico, ácido tricloroacético, ácido trifluoroacético, etc.) e um ácido inorgânico (por exemplo, ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, cloreto de hidrogénio, brometo de hidrogénio), um halogeneto de zinco (por exemplo, cloreto de zinco, brometo de zinco, etc.) e semelhantes.

No caso de o ácido e/ou o composto de partida estarem no estado líquido, então também podem ser utilizados como solvente.

Procedimento 5. É possível preparar o composto objectivo [Ih], ou um seu sal, submetendo um composto [Ig], ou um seu sal, a uma reacção de acilação.. 0 agente de acilação adequado para utilização na presente reacção de acilação pode compreende rum composto de fórmula geral R3b-OH [III] (em que o simbolo R3b representa um grupo alcanoilo (Ci-C6) ) ou um seu derivado reactivo ou um seu sal.

Como grupo “alcanoilo (C1-C6) ” adequado para o composto de fórmula estrutural [III] é possível referir os exemplificados para o resíduo “alcanoilo (Ci~C6)” a propósito do grupo alcanoiloxi (Ci-C6)” anterior. 19

0 derivado reactivo adequado no grupo carboxi do composto de fórmula [III] pode incluir um halogeneto de ácido, um anidrido de ácido, uma amida activada, um éster activado e semelhantes. Como exemplos adequados dos derivados reactivos é possível referir um cloreto de ácido; uma azida de ácido; um anidrido de ácido misto com um ácido, tal como ácido fosfórico substituído (por exemplo, ácido dialquilfosfórico, ácido fenilfosfórico, ácido difenilfosfórico, ácido dibenzilfosfórico, ácido fosfórico halogenado, etc.), ácido dialquilfosforoso, ácido sulfuroso, ácido tiossulfúrico, ácido sulfúrico, ácido sulfónico (por exemplo, ácido metano-sulfónico, etc.), ácido carboxílico alifático (por exemplo, ácido acético, ácido propiónico, ácido butírico, ácido isobutírico, ácido pivárico, ácido pentanóico, ácido isopentanóico, ácido 2-etilbutírico, ácido tricloroacético, etc.) ou ácido carboxílico aromático (por exemplo, ácido benzóico, etc.); um anidrido de ácido simétrico (por exemplo, anidrido acético, etc.); uma amida activada com imidazol, imidazol substituído em posição 4, dimetilpirazol, triazol, tetrazol ou 1--hidroxi-lH-bènzotriazol; ou um éster activado (por exemplo, éster cianometílico, éster metoximetílico, éster dimetil-imino-metilico [ (CH3) 2N+=CH-], éster vinílico, éster propargílico, éster p-nitro-fenilico, éster 2,4-dinitrofenilico, éster triclorofenílico, éster pentaclorofenílico, éster mesilfenílico, éster fenilazofenílico, tioéster fenílico, tioéster p-nitrofenílico, tioéster p-cresílico, tioéster carboximetílico, éster piranílico, éster piridílico, éster piperidílico, tioéster 8-quinoleílico, etc.) ou um éster com um composto N-hidroxi (por exemplo, Ν,Ν-dimetil-hidroxilamina, 1-hidroxi- -2-[lH]-piridona, N-hidroxi-succinimida, N-hidroxi ftalimida, 1-hidroxi--ΙΗ-benzotriazol, etc.) e semelhantes. Estes derivados reactivos podem ser sèleccionados facultativamente em função do tipo de composto [III] que se pretende utilizar.

Como sais adequados do composto [III] e do seu derivado reactivo é possível referir os que foram exemplificados antes para o composto 20 [I]· f\

o. A reacção é efectuada normalmente num solvente convencional, tal como a água, um álcool (por exemplo, metanol, etanol, etc.), acetona, dioxáno, acetonitrilo, clorofórmio, cloreto e metileno, cloreto de etileno, tetra-hidrofurano, acetato de etilo, N,N-dimetil-formamida, piridina ou qualquer outro solvente que não afecte prejudicialmente a reacção. Também é possível utilizar um tal solvente convencional em misturas com água.

No caso de o composto [III] se encontrar na sua forma de ácido livre ou na sua forma de sal, então efectua-se a reacção preferencialmente na presença de um agente de condensação convencional, por exemplo, seleccionado entre Ν,Ν’-diciclo-hexil-carbodiimida; N--ciclo-hexil-N’-morfolinoetilcarbodiimida; N-ciclo-hexil-N’- (4-dietil-aminociclo-hexil) -carbodiimida; Ν,Ν’-dietilcarbodiimida; N,N’-diiso-propilcarbodiimida; N-etil-N’- (3-dimetilaminopropil) -carbodiimida; Ν,Ν’-carbonil-bis- (2-metilimidazol) ; pentametilenocetena-N-ciclo--hexilimina; difenilcetena-N-ciclo-hexilimina; etoxiacetileno; 1--alcoxi-l-cloroetileno; fosfito de trialquilo; polifosfato de etilo; polifosfato de isopropilo; oxicloreto de fósforo (cloreto de fosforilo); tricloreto de fósforo; cloreto de tionilo; cloreto de oxalilo; haloformato de alquilo inferior (por exemplo, cloroformato de etilo, cloroformato de isopropilo, etc.); trifenilfosfina; sal de 2-etil-7-hidroxibenzisoxazólio; sal intramolecular de hidróxido de 2-etil-5- (m-sulfofenil) -isoxazólio; 1- (p-clorobenzeno-sulfoniloxi) --6-cloro-lH-bènzotriazol; o chamado reagente de Vilsmeier preparado por reacção de Ν,Ν-dimetilformamida com cloreto de tionilo; fosgénio; cloroformato de triclorometilo; oxicloreto de fósforo; cloreto de metano-sulfonilo, etc.; ou semelhantes.

Também é possível efectuar a reacção na presença de uma base inorgânica ou orgânica, tal como um carbonato de um metal alcalino, um bicarbonato de um metal alcalino, uma tri (alquil (Ci-Ce)) -amina (por exemplo, trietilamina, etc.), piridina, uma di (alquil (Ci~C6)) --aminopiridina (por exemplo, 4-dimetilaminopiridina, etc.), uma N-- (alquil (Ci-C6))-morfolina, uma N,N-di (alquil (Ci-C6)) -benzilamina ou semelhantes. 21

A temperatura de reacção não é critica, efectuando-se a reacção normalmente em condições compreendidas entre o arrefecimento e o aquecimento.

Os compostos de partida [II] podem ser preparados por procedimentos de fermentação e de síntese descritos no documento EP 0 462 531 e nas preparações da presente memória descritiva.

Foi depositada na instituição “Fermentation Research Institute Agency of Industrial Science and Technology” (1-3, Higashi 1 chome, Tsukuba-shi, IBARAKI 305 JAPÃO), a 26 de Outubro de 1989, uma cultura de Coleophoma sp. F-11899 que se utiliza no referido procedimento de fermentação, tendo-lhe sido atribuído o número FERM BP-2635.

Propriedades biológicas do composto polipeptídico IíL da presente invenção

Para demonstrar a utilizada do composto polipeptídico [I] da presente invenção são seguidamente apresentados os dados biológicos do composto representativo.

Ensaio A (actividadé antimicrobiana) A actividadé antimicrobiana in vitro do composto dò exemplo 19 (Compostos Principais), adiante apresentado, foi determinada pelo método de diluição dupla em placa de gelose a seguir descrito. Método de ensaio

Preparou-se uma risca de cultura, de um dia para o outro, de cada microrganismo de ensaio em caldo de Sabouraud contendo 2% de glicose (Í05 células viáveis por mL) sobre gelose de dextrose com base azotada de levedura (YNBDA: Yeast Nitrogen Base Dextrose Agar) contendo concentrações progressivas do composto [I], tendo a concentração inibidora mínima (CIM) sido expressa em termos de μg/InL após incubação a 30°C durante 24 horas. 22

Resultado do ensaio

Composto de ensaio: Composto do exemplo 19 (Composto Principal)

Organismo de ensaio: Candida albicans YU-1200 CIM ^g/mL) : 0,05 A partir deste resultado conclui-se que o composto polipeptídico [I] da presente invenção tem actividade antimicrobiana (especialmente actividade antifúngica). ' . A composição farmacêutica da presente invenção pode ser utilizada sob a forma de uma preparação farmacêutica, por exemplo, no estado sólido, semi-sólido ou líquido, que contém o composto polipeptídico [I], ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, enquanto ingrediente activo, misturado com um veículo ou excipiente orgânico ou inorgânico adequado para insuflação ou administração por via rectal, pulmonar (inalação nasal ou bucal), nasal, oftálmica, externa (tópica), oral ou parentérica (incluindo as vias subcutânea, intravenosa e intramuscular). O ingrediente activo pode constituir--se, por exemplo, com os veículos farmaceuticamente aceitáveis e não tóxicos convencionais para comprimidos, pílulas, pastilhas, cápsulas, supositórios, cremes, unguentos, aerossóis, pós para insuflação, soluções, emulsões, suspensões e qualquer outra forma adequada de utilização, podendo ainda, se necessário, ser utilizados outros agentes auxiliares, tais como estabilizadores, espessantes, corantes e perfumes. O composto polipeptídico [I], ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, é incorporado na composição farmacêutica numa quantidade suficiente para produzir o efeito antimicrobiano desejado sobre o processo ou as condições da doença. No caso dos seres humanos, é preferível aplicar a composição por insuflação ou administração por via intravenosa, intramuscular, pulmonar ou oral. Embora a dosagem da quantidade terapeuticamente eficaz do composto polipeptídico [I] possa variar em função da idade e do estado de saúde do paciente que se pretende tratar, de um modo geral, no caso da administração por via intravenosa, administra-se uma dose diária compreendida entre 0,01 mg e 20 mg de composto polipeptídico [I] por 23 kg de massa corporal do paciente, no caso da administração por via intramuscular, administra-se uma dose diária compreendida entre 0,1 mg e 20 mg de composto polipeptidico [I] por kg de massa corporal do paciente e no caso da administração por via oral, administra-se uma dose diária compreendida entre 0,5 mg e 50 mg de composto polipeptidico- [I] por kg de massa corporal do paciente, para o tratamento ou para a prevenção das doenças infecciosas.

Especialmente no caso do tratamento ou da prevenção da infecção provocada por Pneumocystis carinii, há que ter em conta o que a seguir se indica.

Para administração por inalação, os compostos da presente invenção assumem convenientemente a forma de pós formuláveis para pulverização em aerossol e as composições em pó podem ser inaladas com o auxilio de um dispositivo inalador de pó por insuflação. 0 sistema preferido de administração por inalação consiste de um aerossol dosificador para inalação, o qual pode ser formulado como uma suspensão ou solução do composto em agentes propulsores adequados, tais como fluorocarbonetos ou hidrocarbonetos.

Uma vez· que se pretende tratar directamente o pulmão e os brônquios, a administração em aerossol constitui um método de administração preferido, especialmente quando a infecção pode prolongar--se aos ouvidos e a outras cavidades corporais.

Em alternativa, é possível efectuar uma administração por via parentérica, recorrendo à administração intravenosa com gotejamento.

As preparações e os exemplos a seguir apresentados possuem o intuito de ilustrar mais pormenorizadamente a presente invenção.

Preparação 1; A uma solução de 0,82 mL de metiltriclorosilano em acetonitrilo adicionou-se 1 g de 1-etoximetilpiperidina, sob arrefecimento com gelo, e agitou-se durante 5 minutos à mesma temperatura. Juntou-se éter dietílico e recolheu-se por filtração o precipitado resultante para se obter 0,88 g de cloreto de 1-metileno-piperidinio. IV (nujol) : 3100, 2700, 1420, 1110, 920 cm"1 EM-IE: e/z = 133 (M+) 24

Preparação 2.

Preparou-se uma solução de 1,04 g de ácido 6-hidroxi-2-naftóico numa mistura constituída por 4,44 mL de uma solução aquosa de hidróxido de sódio a 10% e 18 mL de dimetilsulfóxido e depois agitou- -se durante 0,5 hora a 80°C. Em seguida adicionou-se 0, 872 mL de brometo de heptilo e agitou-se durante 5 horas à temperatura de 60°C. Juntou-se a mistura de reacção em 50 mL de água e ajustou-se o valor do pH para 3 utilizando ácido clorídrico concentrado. Recolheu-se por filtração o precipitado resultante e secou-se para se obter 1,39 g de ácido 6-heptiloxi-2-naftóico. IV (nujol) : 1660, 1620, 1210 cm-1 RMN (DMSO-dç, δ) : 0,88 (3H, t, J = 6,6 Hz); 1,2 - 1,6 (8H, m) ; 1,7 - 1,9 (2H, m); 4,10 (2H, t, J = 6,5 Hz); 7,18 (1H, dd, J = 8,9 Hz e 2,4 Hz); 7,35 (1H, d, J = 2,4 Hz); 7,79 (1H, d, J = 8,6 Hz); 7,9 --8,1 (2H, m); 8,45 (1H, s).

Preparação 3. 0 composto a seguir indicado foi obtido de um modo idêntico ao descrito na preparação 2. Ácido 4-(4-pentiloxifenil)-benzóico. IV (KBr) : 1678, 1605, 1200, 833 cm'1

Preparação 4. 0 composto a seguir indicado foi obtido de um modo idêntico ao descrito na preparação 2. Ácido 4-(4-noniloxifenil)-benzóico. IV (nujol) : 1686, 1604, 1203, 837 cm"1

Preparação 5. 0 composto a seguir indicado foi obtido de um modo idêntico ao descrito na preparação 2. Ácido 6-(4-metilpentiloxi)-naftóico. IV (KBr) : 1674, 1624, 1292, 1213 cm"1 RMN (CDC13, δ): 0,64 (6H, d, J = 6,6 Hz); 1,3 - 1,5 (2H, m) ; 1,65 (1H, m); 1,78 - 2,0 (2H, m) ; 4,08 (2H, t, J = 6,6 Hz); 7,15 25 (1Η, d, J = 2,3 Hz); 7,21 (1H,'dd, J = 2,3 e 8,9 Hz); 7,76 (1H, d, J = 8,7 Hz); 7,87 (1H, d, J * 8,9 Hz); 8,08 (1H, dd, J = 2,3 e 8,7 Hz) ; 8, 63 (1H, s).

Preparação 6.

A uma suspensão de 0,56 g de N-hidroxi-succinimida e 1,39 g de ácido 6-heptiloxi-2-naftóico em 42 mL de cloreto de metileno adicionou-se 1,21 g de cloridrato de l-etil-3- (3-dimetilaminopropil)--carbodiimida e agitou-se durante 3 horas à temperatura ambiente. Juntou-se a mistura de reacção em 100 mL de água. Separou-se a camada orgânica e secou-se sobre sulfato de magnésio. Separou-se o sulfato de magnésio por filtração e evaporou-se o filtrado sob pressão reduzida para se obter 1,48 g de succinimido-6-heptiloxi-2-naftoato. IV (nujol) : 1760, 1740, 1620 cm'1 RMN (CDCI3, Ô): 0,91 (3H, t, J = 6,6 Hz); 1,2 - 1,6 (8H, m) ; 1,7 - 2,0 (2H, m) ; 2,93 (4H, s) ; 4,10 (2H, t, J = 6,5 Hz); 7,1 --7,3 (2H, m) ,· 7,77 (1H, d, J = 8, 6 Hz); 7,84 (1H, d, J = 8,6 Hz); 8,03 (1H, dd, J = 8,9 e 2,4 Hz) ; 8,65 (1H,. s) .

Preparação 7. O composto a seguir indicado foi obtido de um modo idêntico ao descrito na preparação 6.

lH-benzotriazol-3-óxido de l-[4-(4-pentiloxifenil)-benzoilo]. IV (KBr) : 1776, 1605, 1194, 985 cm'1 RMN (CDCI3, δ): 0,96 (3H, t, J = 7,0 Hz); 1,3 - 1,6 (4H, m) ; 1,84 (2H, quint., J = 6,8 Hz); 4,03 (2H, t, J = 6,5 Hz); 7,03 (2H, d, J = 8,7 Hz); 7,35 - 7,68 (3H, m) ; 7,63 (2H, d, J = 8,7 Hz); 7,79 (2H, d, J = 8,4 Hz); 8,12 (1H, d, J = 8,2 Hz); 8,32 (2H, d, J = 8,4 Hz).

Preparação 8. O composto a seguir indicado foi obtido de um modo idêntico ao descrito na preparação 6. lH-benzotriazol-3-óxido de l-[4-(4-noniloxifenil)-benzoilo]. IV (KBr) : 1774, 1600 cm'1 26 -f" RMN (CDCla, δ): 0,89 (3H, t, J = 6,8 Hz); 1,1-1,6 (12H, m) ; 1,83 (2H, quint., J = 6,5 Hz); 4,03 (2H, t, J = 6,5 Hz); 7,03 (2H, d, J = 8,8 Hz); 7,35 - 7,68 (3H, m) ; 7,64 (2H, d, J = 6,8 Hz); 7,79 (2H-d, J = 6,8 Hz) ; 8,12 (1H, d, J = 9,2 Hz); 8,32 (2H, d, J = 6,8 Hz) .

Preparação 9. O composto a seguir indicado foi obtido de um modo idêntico ao descrito na preparação 6. lH-benzotriazol-3-óxido de 1—[6—(4-metilpentiloxi)-naftoilo]. IV (KBr) : 1784, 1628, 1196 cm-1

Os Compostos de Partida utilizados e os Compostos Objectivo obtidos nas preparações e exemplos seguintes estão agrupados no quadro a seguir ilustrado, no qual as fórmulas estruturais dos compostos de partida estão na coluna superior e as fórmulas estruturais dos compostos objectivo estão na coluna inferior, respectivamente.

27 3

r\ \ \

28 r Τ':

29 Γ\ \ \ η

Preparação η° Fórmula estrutural 12 HO OH . .H 2 y-v HO / ” 0H 8 /=ÍPm 0 HO HO OH HO ο /“Λ 1 V-MH / H3cV7 f-MH-C0O-O“O(CH,).CH Vh >0 , i>£ .A 2 oaC /"Y HO °H S Y» 0 HO 30

Γ\

Preparação η° Fórmula estrutural 13 HO OH Vn HN oh >>C .Λ, v o=r T-v BO o 0H o ° HO HO OH h°lV«M HjC^Y /-NH-C Ο-Ο^οΑΛζ VQ HN OH WT .Λ, 2 «<* ΤΛ. HO S /=? ^08 0 RO-S-O—u )) II \j7 ° HO 31 Γ\ ί'"\ \ \ r~'v

Preparação Fórmula estrutural η° 14 HaOjSO-/"^ HO Ηθχ OH viTL jry° (ch*)»chi hooc M3c~0t Clr OH KB“<KVC "C°" HaQjSO-^} 15 HO ;QH S-ίΓΛ /γ° (CH^CH, H2í«O^V>=0 HDt^ HO OH «VH ^0 (cw® N.OOC )—HMCO·^ /=** HO /}-< HO 0=< CH3 HO 32

-ο /

Preparação η° Fórmula estrutural 16 * %j-C fYY° (CHi)*CH3 KS » .ν3“Γ ίΎΎ° <CH!)sCH3 N.OOC ^-\ί OH>^°VC "Q" W )« (>-/ ch3 mo^ 17 » ,v3^T /yv° (CHOeCHa N.OOC ΟΗ>Η*ίνΓ "C« w )* o-/ ch3 rrv0 (cH*)eCH3 N.OOC V-HHCtrv)-3 "O* OH7 rA >—( WJ )« ch3 MO 33 V? /1t .> /

34

35

36

Exemplo n° Fórmula estrutural 4 HO OH H | VhM H3C't / 101 {-m-C0-O-O-° (CH*)«CH, \0 HN OH HiNCO-W^ w ΗΟ^\η 0 ^ CT3 HO ° 0H /==^^08 0 NaOjSO-/ λ HO OH a°L° /-( Η3ογΥ HnH-CO-Ο-Ο-Ο (CH^CH. H\.0 HH OH H^NCCK_/ >-( H0 ·< ° rv3 Ho 0H —) ^ OH 0 NaOjSO-^ jS HO 37 Γ\

Exemplo η° Fórmula estrutural 5 HO OH H]o M h3c^y" /-nh-co-Q-0-0(CH2)8ch3 νο HH OH HO =/ 0H —2~^°n 0 NaOjSO-A^^ HO OH -o ^ V^Sf '^»H-COO^O-0(CH2)8CH3 Vfl HN OH η,νοο-λ/^0 y-( Η0 0=Γ «-^3 HO SOH 0 NaO^O-/ \ HO 38

Exemplo n° Fórmula estrutural 6 HO OH h]° H Yv/y /-NH-C0-OO-°/VY Vq HN OH HíNCCH^/10 w HO^\h ^3 HO ° /-NH OH ^ OH 0 NaQjSO-Λ^ \ HO °H VVjT r-»H- CO-O-O-' VQ HH OH Η,ΝΟΟ-^/0 W HO^^jra 0< ch3 HO ° /-HH OH 0H ° NaOjSO-/ \ RO 39

\

40

Exemplo n° Fórmula estrutural 8 HO /0H ™ ^rCO^>0(CH.)!CH1 Vn HN OH η,νοο-λ/10 W H0 °< 0 r? HO / 0H 08 0 NaO,SO-/ \ RO /" 8jC'W >:Γ C°^>° (CHACH. Vq HN OH H0 - ·Α HO oa 0 NaO,SO-^ \ RO

41

~r"' Ar

42 r

43 r\

44 Γ\

45

Exemplo n° Fórmula estrutural 13 eo /°h - o f-KH-cO-0-(CH*),CH, 3 W >0 11 0 H0 Vo hh^oh 0 /-K o/"»J ·£νΙ>« j=Çm 0 H0-yj HO OH ' H<! Vnfi f-NH- C-O-0 - (CHz)7CH3 3 W >o 0 HO >0 Hil°H “ ·£νΐ>. r~C^0H ° Ά0Λμϊ HO 46 \ \

47

48

Exemplo n° Fórmula estrutural 16 HO HV/H HJCV7 f-NHCO0-0“°(CH^sCH3 Vn HN OH HíNCO—W HO7/1» °Λ™3 HO 0=^HH °« /={^OH 0 NaOjSO-^ ^ HO OH ?· /-( H3CV7^ e-NHC0-O^>~0CCHz)5CH3 V0 HN OH HíNCO-W^0 W H0 °H /x^08 ° NaOjSO-/ λ HO 49

Exemplo n° Fórmula estrutural 17 HO OH alV"H ) HjCvY” (-NH-c-©-0-O-CCHz)eCH3 \-h >o II 0 HO > ™ <* ° A>C o/l., HN Γ H—\ 3 /_/ 'oa o NaOaSO-^J) HO OH HjC f MH- C-^-O~0-(CHZ)BCH3 \-h II A^“C 0=/"1* IiN „/* η-λ. 3 rm-Y&~0H oa o NaO,SOV \ HO

\ ΰ' V,

51 \ ίλ

;'"V ,/Γ

Exemplo η° Fórmula estrutural

NaOaS1

nÇ-00· O(CH0eCKi O 19

NaOaS*

(Composto principal; o OH NaOsS1

(Composto minoritário) °(CH2)bCH3 52

Exemplo n° Fórmula estrutural 20 OH -(CHt)sCHa 0 H0>0 a^a ° H2N 0 =^'CH3 0H 0 NaOaSO-A b HO OH a°0 r{ 1 V-HH / Γ™' -(CH,),CH, 0 H0>0 ” ° Η,νΑ^ o=< ch3 /"sx° oh NaOOC N)—\ lf /=0" NaOlSO-fc A HO 53 \'N _ 0-

54

Exemplo n° Fórmula estrutural 22 OH * o r( K3C^/y~ f-HH-C.-O~O-0(CH,),CHa o HO \α «N OH A H2N^^/JPH 0=\™3 HO ° 0H OH 0 NaOaSO -/ \ RO OH H0 o r\ I V-NH / h3c^Y f-HK-c.-O-O-OtCHO.CHa V-H >0 JJ 0 HO Vo HNv O® U °Vhn^/>~C o-ra3 / o< f-Λ NaOOC HO ^ray*sAOH _7 ^OH 0 Na03S0-/^> RO 55

Preparação 10. A uma solução de 2,8 g de Composto de Partida e 1,46 g de succinimido-6-heptiloxi-2-naftoato em 28 mL de N,N-dimetilformamida adicionou-se 0,393 g de 4-(Ν,Ν-dimetilamino)-piridina e agitou-se durante 12 horas à temperatura ambiente. Pulverizou-se a mistura de reacção com 140 mL de acetato de etilo. Recolheu-se por filtração o precipitado resultante e secou-se sob pressão reduzida. Adicionou-se o pó assim obtido a 50 mL de água e submeteu-se a cromatografia em coluna de permuta iónica através de 30 mL de ‘DOWEX-50WX4’ (marca comercial, produto preparado por ‘Dow Chemical’), efectuando a eluição com água. Reuniu-se as fracções que continham o Composto Objectivo e submeteu-se a cromatografia em coluna através de gel ‘ODS YMC’ (ODS-AM S-50) (marca comercial, fornecida- por ‘Yamamura Chemical Labs’), efectuando a eluição com uma solução aquosa de metanol a 50%. Reuniu-se as fracções que continham o Composto Objectivo e evaporou-se sob pressão reduzida para eliminar o metanol. 0 resíduo foi então liofilizado para proporcionar 1,94 g do Composto Objectivo. IV (nujol) : 3300, 1620 cm'1 RMN (CD30D, Ô): 0,92 (3H, t, J = 6,6 Hz); 1,06 (3H, d, J = 6,8

Hz); 1,24 (3H, d, J = 6,1 Hz); 1,3 - 1,7 (8H, m) ; 1,7 - 2,3 (5H, m) ; 2,3 - 2,7 (3H, m); 2,8 - 2,9 (1H, m); 3,39 (1H, m) ; 3,7 - 4,7 (16H, m); 4,99 (1H, d, J = 2 Hz); 5,10 (1H, d, J = 3,7 Hz); 5,36 (1H, d, J = 2,9 Hz); 6,86 (1H, d, J = 8,3 Hz); 7,05 (1H, dd, J = 8,3 Hz e 2 Hz); 7,17 (1H, dd, J = 8,9 Hz e 1,9 Hz); 7,23 (1H, d, J = 2 Hz); 7,32 (1H, d, J = 1,9 Hz); 7,7 - 7,9 (3H, m); 8,31 (1H, s) . EM-BAR: e/z = 1249 (M+ + Na)

Preparação 11. 0 Composto Objectivo foi obtido de ima modo idêntico ao descrito na preparação 10. RMN (DMSO-de, δ): 0,91 (3H, t, J =6,6 Hz); 0,96 (3H, d, J = 7,2 Hz); 1,09 (3H, d, J = 5,5 Hz); 1,25 - 1,5 (4H, m) ; 1,6 - 2,6 (9H, m); 3,18 (1H, m) ; 3,6 - 4, 6 (15H, m) ; 4,7 - 5,4 (11H, m) ; 5,52 (1H, 56 ο, \ \ d, J = 5,8 Hz); 6,74 (1Η, d, J = 8,2 Hz); 6,83 (1H, d, J = 8,2 Hz); 6,86 (1H, s); 7,04 (2H, d, J = 8,7 Hz); 7,06 (1H, s) ; 7,2 - 7,5 (3H, m); 7,68 (2H, d, J = 8,7 Hz); 7,72 (2H, d, J = 8,4 Hz); 7,96 (2H, d, J = 8,4 Hz); 8,12 (1H, d, J = 7,9 Hz); 8,31 (1H, d, J = 7,1 Hz); 8,77 (1H, d, J = 7,1 Hz); 8,84 (1H, s) . EM-BAR: e/z = 1247 (M+ + Na)

Análise: Cale. para C53H69N8Na022S.H20 C: 47, 74 H: 6,12 N: 8,17 Encontrado: C: 47,98 H: 5,92 N: 8,41

Preparação 12. O Composto Objectivo foi obtido de um modo idêntico ao descrito na preparação 10. RMN (DMSO-de, δ): 0,85 (3H, t, J = 6,6 Hz); 0,97 (3H, d, J = 6.6 Hz); 1,08 (3H, d, J = 5,5 Hz); 1,2 - 1,55 (12H, m) ; 1,65 - 2,1 (5H, m) ; 2,1 - 2,8 (4H, m) ; 3, 65 - 4, 60 (15H, m) ; 4,7 - 5,2 (10H, m) ; 5,26 (1H, d, J = 4,4 Hz); 5,53 (1H, d, J = 5,8 Hz); 6,74 (1H,

d, J = 8,2); 6,83 (1H, d, J = 8,2 Hz); 6,86 (1H, s) ; 7,04 (2H, d, J = 8,7 Hz); 7,06 (1H, s) ; 7,23 - 7,55 (3H, m) ; 7,68 (2H, d, J = 8,7 Hz); 7,72 (2H, d, J = 8,4 Hz); 7,96 (2H, d, J = 8,4 Hz); 8,12 (1H, d, J = 7,9 Hz) ; 8,31 (1H, d, J = 7, 1 Hz) ; 8,77 (1H, d, J = 7, 1 Hz) ; 8, 84 (1H, s) . EM-BAR: e/z = 1304 (M* + Na)

Análise: Cale. para CsiI^NeNaC^S.5H20 C: 49,92 H: 6,39 N: 8,17 Encontrado: C: 49,96 H: 6,44 N: 8,23

Preparação 13. O Composto Objectivo foi obtido de um modo idêntico ao descrito na preparação 10. IV (KBr) : 3300, 1668, 1628, 1271, 1216 cm"1 RMN (DMSO-d6, δ): 0,91 (2H, d, J = 6, 6 Hz); 0,96 (3H, d, J = 6.7 Hz); 1,08 (3H, d, J = 5,5 Hz); 1,25 - 1,45 (2H, m) ; 1,5 - 2,7 (10H, m) ; 3,18 (1H, m) ; 3,72 (2H, m) ; 3,85 - 4,6 (13H, m) ; 4,73 - 57 (--^7

J - 5,23 (10H, m); 5,26 (1H, d, J = 4,5. Hz); 5,52 (1H, d, J = 5,9 Hz); 6,74 (1H, d, J = 8,1 Hz); 6,83 (1H, d, J = 8,1 Hz); 6,91 (1H, s) ; 7,05 (1H, s); 7,19 - 7,52 (5H, m) ; 7,84 (1H, d, J = 8,7 Hz); 7,9 - - 8,0 (2H, m); 8,13 (1H, d, J = 7,9 Hz); 8,33 (1H, d, J = 7,1 Hz); 8,44 (1H, s); 8,80 (1H, d, J = 7,1 Hz); 8,85 (1H, s) . EM-BAR: e/z = 1235 (M+ + Na)

Análise: Cale. para C52H69N8Na02iS.4H20 C: 48,59 H: 6,04 N: 8,72

Encontrado: C: 48,53 H: 6,15 N: 8,54

Preparação 14; A uma solução de 0,2 g do Composto de Partida numa mistura constituída por 2 mL de Ν,Ν-dimetilformamida e 2 mL de acetona, em presença de crivos moleculares de 4Ã, adicionou-se 0,155 g de ácido glioxilico à temperatura, ambiente. Agitou-se a mistura à mesma temperatura durante 5 horas. Pulverizou-se a mistura de reacção com 20 mL de acetato de etilo. Recolheu-se por filtração o precipitado e secou-se sob pressão reduzida para se obter 0,14 g do Composto Objectivo. RMN (CD30D, δ): 0,90 (3H, d, J =6,6 Hz) ; 1,05 (3H, d, J =

6,7 Hz); 1,24 (3H, d, J = 6,0 Hz); 1,2 - 1,6 (10H, m) ; 1,7 - 1,9 (2H, m); 1,9 - 2,2 (3H, m) ; 2,3 - 2,6 (3H, m) ; 2,7 - 2,9 (1H, m) ; 3,40 (1H, m); 3,7 - 4,7 (16H, m); 4,98 (1H, s) ; 5,09 (1H, s lr) ; 5,31 (1H, s lr) ; 5,40 (1H, s) ; 6,8 - 7,2 (4H, m) ; 7,33 (1H, s) ; 7,85 (2H, d, J = 8,4 Hz) . EM-BAR: e/z = 1287 (M* + Na)

Preparação 15. O Composto Objectivo foi obtido de um modo idêntico ao descrito na preparação 14. IV (nujol) : 3250, 1610 cm'1 RMN (CD30D, δ): 0,90 (3H, t, J = 6,6 Hz); 1,05 (3H, d, J = 6,7 Hz); 1,24 (3H, d, J = 6,1 Hz); 1,2 - 1,6 (10H, m); 1,7 - 1,9 (2H, m) ; 1,9 - 2,2 (3H, m); 2,3 - 2,6 (3H, m) ; 2,7 - 2,9 (1H, m) ; 3,42 (1H, 58

m); 3,7 - 4,7 (16H, m) ; 4,98 (1H, s) ; 5,09 (1H, d, J = 3,8 Hz); 5,31 (1H, d, J = 2,8 Hz); 5,44 (1H, s) ; 6,60 (1H, dd, J = 8,1 e 1,9 Hz); 6,72 (1H, d, J = 8,1); 6,82 (1H, d, J = 1,9 Hz); 6,95 (2H, d, J = 8,8 Hz) ; 7,84 (2H, d, J = 8,8 Hz) . EM-BAR: e/z = 1185 (M+ + Na)

Análise: Cale. para C52H-73N8Na022S. 7H20 C: 47, 63 H: 6,76 N: 8,54 Encontrado: C: 47,56 H: 6,66 N: 8,35

Preparação 16. O Composto Objectivo foi obtido de um modo idêntico ao descrito na preparação 14. RMN (DMSO-d6, δ) : 0,88 (3H, t, J = 6, 6 Hz ); 0,96 (3H, d, J = 6,7 Hz) ; 1 ,12 (3H, d, J = 5 ,9 Hz) ; 1,2 - 2, 0 (13H, m) ; 2,1 - - 2,7 (4H, m) ; 3 ,15 (1H, m) ; 3,15 (1H, m); 3,5 - 4 ,5 (18H, m) ; 4,7 - - 5,7 (1H, m) ; 6 ,74 (1H, d, J = 8, , 2 Hz) ; 6, 84 (1H, , d , J = 8,5 Hz) ; 7,03 (1H, s) ; 7 ,22 (1H, d, J = 8, 9 Hz); 7,36 (1H, s) ; 7,5 (1H, m) ; 7,83 (1H, d, J = '8 :, 8 Hz) ; 7,9 - 8,0 (2H, m) ; 8, 0 - - 8,3 (3H, m) ; 8,49 (1H, s); 8, , 65 (1H, m); 8, 85 (1H, s lr). EM-BAR: e/z = 1324 (M+ + Na)

Análise: Cale. para C55H72N8Na025S.7H20 C: 45,57 H: 5,98 N: 7,73 Encontrado: C: 45,72 H: 5,87 N: 7,69

Preparação 17. A uma solução de 3,15 g de Composto Objectivo em 32 mL de N,N-dimetilformamida adicionou-se uma mistura constituída por 0,37 mL de ácido trifluoroacético e 0,5 g de ácido p-tolueno-sulfónico*H20, à temperatura ambiente, e depois agitou-se durante 12 horas à mesma temperatura. Pulverizou-se a mistura de reacção com 300 mL de acetato de etilo. Recolheu-se por filtração o precipitado e secou--se sob pressão reduzida para se obter 3,3 g do produto impuro.

Adicionou-se o produto impuro a 100 mL de água e purificou-se por CLER preparativa, utilizando uma coluna Ci8 com resina μ ‘Bondapak’ 59 ίλ

CL f"?

(Waters Associates, Inc.), efectuando a eluição com um sistema de solventes constituído por acetonitrilo/tampão de fosfato pH 3 (38:62) com um débito de 80 mL/minuto, utilizando uma bomba de modelo ‘Shimadzu LC-8A’. A coluna foi controlada por meio de um detector de UV ajustado a 240 nm.

Reuniu-se as fracções que continham o componente principal com um tempo de retenção de 20,6 minutos e evaporou-se sob pressão reduzida para eliminar o acetonitrilo. Ajustou-se para 6,5 o valor do pH do resíduo, utilizando para tal uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio, e submeteu-se a cromatografia em coluna através de ODS (gel YMS ODS-AM S-50), efectuando a lavagem com água e a eluição com uma solução aquosa de metanol a 80%.

Reuniu-se as fracções que continham o Composto Objectivo e evaporou-se sob pressão reduzida para eliminar o metanol. Liofilizou-se o resíduo para se obter 147 mg do Composto Objectivo. IV (nujol) : 3300, 1620 cm-1 RMN (DMSO-de, δ): 0,88 (3H, t, J = 6,6 Hz); 0,94 (2H, t, J = 6,7 Hz); 1,09 (3H, d, J = 5,9 Hz); 1,2 - 2,0 (13H, m); 2,1 - 2,7 (4H, m) ; 3,20 (1H, m) ; 3,6 - 4,5 (18H, m); 4,7 - 5,2 (10H, m); 5,4 - 5,6 (2H, m); 6,44 (1H, d, J = 8,2 Hz); 6,6 (1H, d, J = 8,2 Hz); 6,70 (1H, s); 7,1 - 7,5 (3H, m); 7,7 - 8,2 (6H, m); 8,3 - 8,9 (5H, m) .

Exemplo 1. A uma solução de 1 g de Composto de Partida em 5 mL de ácido trifluoroacético, na presença de crivos moleculares de 4Á, adicionou--se 0,285 g de ciano-boro-hidreto de sódio à temperatura ambiente. Agitou-se a mistura durante 1 hora à mesma temperatura. Adicionou-se a mistura de reacção a 10 mL de água, sob arrefecimento com gelo, e ajustou-se o valor do pH para 7 com uma solução aquosa de hidróxido de sódio IN. Submeteu-se a solução a cromatografia em coluna de permuta iónica através de 30 mL de ‘DOWEX-50WX4’ (tipo Na+) , efectuando a eluição com água. Reuniu-se as fracções que continham o Composto Objectivo e purificou-se por CLER preparativa, utilizando uma coluna Çi8 com resina μ ‘Bondapak’ (Waters Associates, Inc.), 60

rt. R7 ^ N-lía--'? efectuando a eluição com um sistema de solventes constituído por acetonitrilo/tampão de fosfato pH 3 (39:61) com um débito de 80 mL/ /minuto, utilizando uma bomba de modelo ‘Shimadzu LC-8A’. A coluna foi controlada por meio de um detector de UV ajustado a 240 nm. Reuniu-se as fracções que continham o primeiro componente com um tempo de retenção de 17,1 minutos e evaporou-se sob pressão reduzida para eliminar o acetonitrilo. Submeteu-se o resíduo a cromatografia em coluna através de ODS (gel YMS ODS-AM S-50), efectuando a lavagem com água e a eluição com uma solução aquosa de metanol a 80%. Reuniu-se as fracções que continham o Composto Objectivo e evaporou-se sob pressão reduzida para eliminar o metanol. Liofilizou-se o resíduo para se obter 318 mg do Composto Objectivo 1. IV (nujol) : 3300, 1610, 1230 cm-1 RMN (DMSO-de, δ): 0;88 (3H, t, J = 6, 6 Hz); 0,95 (3H, d, J = 6,7 Hz); : L, 09 (3H, d, t J = 5,9 Hz); 1,2 - 2,0 (15H, m) ; 2,1 - 2, 6 (4H, m); 3,00 (1H, m) r 3, 19 (1H, m) ; 3,74 (2H, m) ; 3, ,8 - 4,5 ( 14H, m) ; 4,6 - 5,4 (10H, m) ; 6, 73 (1H, d, J = 8,2 Hz) ; 6, 80 (1H, s) ; 6, 84 (1H, dd, J = 8, 2 e 1, 9 Hz); 6,97 (2H, d, - J = 8,8 Hz) ; 7,06 (1H, d, J = 1, 9 Hz) ; 7 ,25 (1H, s) ; ' 7,44 (2H, m) ; 7,69 (1H, - m) ; 7,83 (2H, d, J = .8, r8 Hz); 8,09 (1H / d, ,J = 7 Hz) ; 8, 44 (1H, d, J = 7 Hz); 8,85 (1H, s lr) . EM-BAR: e/z = 1197 (M* + Na)

Análise elementar:

Cale. para C5oH7iN8Na02iS. 6H20 C: 46,79 H: 6,51 N: 8,73 Encontrado: C: 46,84 H: 6,27 N: 8,73 O segundo componente, eluído com um tempo de retenção de 20,2 minutos, foi obtido de um modo idêntico ao descrito a propósito do primeiro composto eluído, tendo sido obtidos 263 mg do Composto Objectivo 2. IV (nujol) : 3250, 1600, 1490, 1240 cm"1 RMN (DMSO-de, δ): 0,86 (3H, t, J = 6,6 Hz); 0,95 (3H, d, J = 6,7 Hz); 1,09 (3H, d, J = 5,9 Hz); 1,2 - 2,0 (15H, m) ; 2,1 - 2,6 61 (6Η, m) ; 2,96 (1H, m) ; 3,21 (1H, m) ; 3,60 -4,5 (16H, m) ; 4,6 - 5,4 (8H, m) ; 6,73 (1H, d, J = 8,2 Hz); 6,77 (1H, dd, J = 8,2 e 1,9 Hz) ; 6,81 (1H, s); 6,97 (2H, d, J = 8,8 Hz); 6,98 (1H, d, J = 1,9 Hz); 7,25 (1H, s); 7,39 (2H, m) ; 7,39 (1H, m) ; 7,74 (1H, m) ; 7,84 (2H, d, J = 8,8 Hz); 8,14 (1H, d, J = 7 Hz) ; 8,46 (1H, m) ; 8,72 (1H, s) . EM-BAR: e/z = 1181 (M+ + Na)

Análise elementar:

Cale. para C5oH7iN8Na02oS. 6H20 C: 47,38 H: 6,60 N: 8,84 Encontrado: C: 47,46 H: 6,62 N: 8,83

Exemplo 2. A uma suspensão de 10,4 g de Composto de Partida e 1,67 g de ciano-boro-hidreto de sódio em 52 mL de diclorometano adicionou-se gradualmente 104 mL de tetra-hidrofurano à temperatura de 5°C.

Agitou-se a mistura à temperatura de 40°C durante 1 hora. Evaporou--se a mistura de reacção sob pressão reduzida. Adicionou-se água ao resíduo, ajustou-se o valor do pH para 8,5 com hidróxido de sódio IN e submeteu-se a cromatografia em coluna através de ODS (gel YMC, ODS-AM S-50), efectuando a eluição com uma solução aquosa de acetonitrilo a 60%. Reuniu-se as fraeções que continham o produto impuro e evaporou-se sob pressão reduzida para eliminar o acetonitrilo. Liofilizou-se o resíduo para se obter 10,1 g de um pó impuro. Purificou-se o pó impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura a 4:1:1:1 de diclorometano/ácido acético/metanol/água. Reuniu-se as fraeções que continham o Composto Objectivo e evaporou-se sob pressão reduzida. Adicionou-se água ao resíduo, ajustou-se o valor do pH para 8,5 com hidróxido de sódio IN e submeteu-se a cromatograf ia em coluna através de ODS (gel YMS ODS-AM S-50), efectuando a eluição com uma solução aquosa de acetonitrilo a 60%. Reuniu-se as fraeções que continham o Composto Objectivo e evaporou-se sob pressão reduzida para eliminar o acetonitrilo. Liofilizou-se o resíduo para se obter 2,25 g do Composto Objectivo. 62

IV (nujol) : 3250, 1600, 1490, 1240 cm'1 RMN (DMSO-de, δ): 0,86 {3H, t, J = 6,6 Hz); 0,95 (3H, d, J = 6.7 Hz); 1,09 (3H, d, J = 5,9 Hz); 1,2 - 2,0 (15H, m) ; 2,1 - 2,6 (6H, m); 2,96 (1H, m) ; 3,21 (1H, m) ; 3,6 - 4,5 (16H, m) ; 4,6 - 5,4 (8H, m) ; 6,73 (1H, d, J = 8,2 Hz); 6,77 (1H, dd, J = 8,2 e 1,9 Hz); 6,81 (1H, s); 6,97 (2H, d, J = 8,8 Hz); 8,14 (1H, d, J = 7 Hz); 8,46 (1H, m) ; -8,72 (1H, s) . EM-BAR: e/z = 1181 (M* + Na)

Análise elementar:

Cale. para C5oH7iN8Na02oS.6H20 C: 47,38 H: 6,60 N: 8,84 Encontrado: C: 47,46 H: 6,62 N: 8,83

Exemplo 3. A uma suspensão de 1 g de Composto de Partida e 0,256 g de ciano-boro-hidreto de sódio em 10 mL de diclorometano adicionou-se gradualmente 5 mL de tetra-hidrofurano à temperatura de 5°C. Agitou--se a mistura à temperatura de 5°C durante 1,5 horas. Pulverizou-se a mistura de reacção com 200 mL de éter diisopropilico. Recolheu-se por filtração o precipitado resultante e secou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o pó por cromatografia em coluna através de gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura a 3:1:1:1 de diclorometano/ácido acético/metanol/água. Reuniu-se as fraeções que continham o Composto Objectivo e evaporou-se sob pressão reduzida. Adicionou-se água ao resíduo, ajustou-se o valor do pH para 8,5 com hidróxido de sódio IN e submeteu-se a cromatografia em coluna através de ODS (gel YMS ODS-AM S-50), efectuando a eluição com uma solução aquosa de acetonitrilo a 60%. Reuniu-se as fraeções que continham o Composto Objectivo e evaporou-se sob pressão reduzida para eliminar o acetonitrilo. Liofilizou-se o resíduo para se obter 0,21 g do Composto Objectivo. IV (nujol) : 3300, 1620, 1270 cm'1 RMN (DMSO-d6, δ): 0,88 (3H, t, J = 6,6 Hz); 0,96 (3H, d, J = 6.8 Hz); 1,12 (3H, d, J = 5,9 Hz); 1,2 - 1,55 (8H, m) ; 1,65 -2,6 63

(9Η, m); 2,97 (1H, m); 3,20 (1H, m); 3,26 - 3,52 (1H, m); 3,73 (2H, m) ; 3, 86 - 4, 63 (14H, m) ; 4,63 - 5, 36 (9H, m) ; 6,74 (1H, d, J = 8 Hz); 6,83 (1H, dd, J = 1,5 e 8 Hz); 6,92 (1H, s) ; 7,06 (1H, d, J = 1,5 Hz); 7,2 - 7,35 (2H, m) ; 7,35 - 7,6 <3H, m) ; 7,68 (1H, m) ; 7,8 -8,0 (3H, m) ; 8,09 (lh, d, J = 8 Hz); 8,42 (1H, s) ; 8,67 (1H, d, J = 6,9 Hz); 8,71 (1H, s). EM-BAR: e/z = 1233 (M+ + Na)

Análise elementar:

Cale. para C53H7iNgNa02iS. 6H2O C: 48,25 H: 6,34 N: 8,49

Encontrado: C: 48,06 H: 6,29 N: 8,31

Exemplo 4. O Composto Objectivo foi obtido de um modo idêntico ao descrito no exemplo 3 RMN (DHSO-de, δ): 0,9 - 1,1 (6H, m) ; 1,11 (3H, d, J = 5,8

Hz); 1,3 - 1,5 (4H, m) ; 1,7 - 2,1 (5H, m) ; 2,2 - 2,4 (4H, m) ; 2,9 - -3,1 (2H, m) ; 3,4 (1H, m) ; 3,7 - 4,5 (16H, m) ; 4,7 - 5,3 (9H, m) ; 6,7 - 7,1 (6H, m) ; 7,22 (1H, s) ; 7,41 (1H, d, J * 8,5 Hz); 7,6 - -7,8 (5H, m) ; 7,93 (2H, d, J = 8,2 Hz); 8,08 (lh, d, J = 8,5 Hz); 8, 60 (1H, d, J = 7,1 Hz) ; 8, 85 (1H, s) . EM-BAR: e/z = 1231 (M4 + Na)

Análise: Cale. para C53H69N8Na02iS.3,5H20 C: 50,04 H: 6,02 N: 8,87

Encontrado: C: 50,05 H: 6,25 N: 8,81

Exemplo 5. O Composto Objectivo foi obtido de um modo idêntico ao descrito no exemplo 3. IV (nujol): 3300, 1635, 1247, 1047 cm'1 RMN (DMSO-de, δ): 0,86 (3H, t, J = 6, 7 Hz) ; 0, 95 (3H, d, J = Hz) ; 1,10 (3H, d, J = 5,8 Hz) ; 1, 2-1,6 (12H, m) ; 1,6-2,6 (9H, m) ; 3,0: (1H, m) ; 3,2 (1H, m) ; 3,4 (1H, m) ; 3,74 (2H, m) ; 3,83 - 4,6 (14H, m); 4,65 - 5,4 (9H, m) ; 6,73 (1H, d, J = 8,2 Hz); 6,81 64 (1Η, dd, J = 1,7 e 8,2 Hz); 6,89 (1H, s) ; 7,03 (2H, d, J = 8,8 Hz); 7,05 (1H, d, J = 1,7 Hz); 7,23 (1H, s) ; 7,41 (2H, m) ; 7,6 - 7,8 (1H, m) ; 7,67 (2H, d, J = 8,8 Hz); 7,71 (2H, d, J = 8,5 Hz); 7,93 (2h, d, J = 8,, 5 Hz); 8,05 (1H, d, J = 8 Hz); 8,62 (1H, d, J = 6,7 Hz) ; 8, 84 (1H, s) . EM-BAR: e/z = 1287 (M+ + Na)

Análise: Cale. para C57H77N8Na02iS. 8H20 C: 48,57 H: 6,65 N: 7,95 Encontrado: C: 48,41 H: 6,26 N: 7,89

Exemplo 6. O Composto Objectivo foi obtido de um modo idêntico ao descrito no exemplo 3. IV (nujo,l) : 3300, 1633, 1247, 1047 cm'1 RMN (DMSO-d6, Ô): 0,90 (6H, d, J = 6,5 Hz); 0,95 (3H, d, J = 6,8 Hz); 1,10 (3H, d, J = 5,7 Hz); 1,31 (2H, q, J = 7,5 Hz); 1,45 --2,6 (12H, m) ; 2,97 (1H, m) ; 3,18 (1H, m) ; 3, 40 (1H, m) ; 3,74 (2H, m) ; 3, 83 - 5,4 (23H, m) ; 6,72 (1H, d, J = 8,2 Hz); 6,81 (1H, d, J = 8,2 Hz); 6,89 (1H, s) ; 7,03 (2H, d, J = 8,9 Hz); 7,06 (1H, s) ; 7,2 -7,6 (3H, m) ; 7,6 - 7,8 (1H, m) ; 7,67 (2H, d, J = 8,9 Hz); 7,71 (2H, d, J = 8,4 Hz); 7,93 (2h, d, J = 8,4 Hz); 8,05 (1H, m) ; 8,61 (1H, d, J = 6,7 Hz); 8,84 (1H, s). EM-BAR: e/z = 1245 (M+ + Na)

Análise: Cale. para Cs^iNeNaC^oS. 7H20 C: 48, 64 H: 6,43 N: 8,40

Encontrado: C: 48,72 H: 6,25 N: 8,26

Exemplo 7. O Composto Objectivo foi obtido de um modo idêntico ao descrito no exemplo 3. IV (nujol) : 3300, 1625 cm'1 RMN (DMSO-de, δ): 0,91 (6H, d, J = 6,6 Hz); 0,95 (3H, d, J = 6,7 Hz); 1,10 (3H, d, J = 5,4 Hz); 1,28 - 1,47 (2H, m) ; 1,5 -2,6 (10H, m) ; 2,97 (1H, m) ; 3,18 (1H, m) ; 3,40 (1H, m) ; 3,74 (2H, m) ; 65

3,87 - 5,45 (23Η, m) ; 6,71 (1H, d, J = 8,3 Hz); 6,79 (1H, d, J = 8,3 Hz); 6,91 (1H, s) ; 7,05 (1H, s) ; 7,18 - 7,58 (5H, m) ; 7,69 (1H, m) ; 7,8 - 8,0 (3H, m) ; 8,42 (1H, s) ; 8,60 (1H, d, J = 6,7 Hz). EM-BAR: e/z = 1219 (M* + Na)

Análise: Cale. para C52H69N8Na02iS.7H20 C: 47,20 H: 6,32 N: 8,47 Encontrado: C: 47,43 H: 6,37 N: 8,34

Exemplo 8. O Composto Objectivo foi obtido de um modo idêntico ao descrito no exemplo 3. IV (nujol): 3300, 1620, 1272 cm 1 RMN (DMSO-de, δ) : 0,89 (3H, d, J = 6, 7 Hz); 0, 95 (3H, d, J = 6,8 Hz) ; 1,11 (3H, d, J = 5, 8 Hz) ; 1, 25 - 1,6 (H, m) ; 1,65 - • 2, 6 (9H, m) ; 2,97 (1H, m) ; 3,20 (1H, m) ; 3,40 (1H, m) ; 3 ,74 (2H, m) ; 3,87 - 5, ,53 (23H, m) ; 6,73 (1H, d, J ' = = 8,2 Hz) ; 6,82 (1H, dd, J = 1,7 Hz e 8,2 Hz) ; 6 ,91 (1H, s); 7 ,04 (1H, d, , J = 1,7 Hz); 7,23 (1H, dd, J = 2 e 8,9 H2 :) ; 7,29 (1H, s) ; 7 ,37 I ;1H, d, J = 2 Hz) ; 7,47 (2H, m) ; 7,70 (1H, m) ; 7,8 - 8,0 (3H, m) ; 8,07 (1H, d , J = 8 Hz) ; 8,42 (1H, s) ; 8,64 (1H, d, J = 6,9 Hz); 8,85 (1H, s) . EM-BAR: e/z = 1219 (M+ + Na)

Análise: Cale. para CsaHggNgNaC^iS. 6H20 C: 47, 85 H: 6,25 N: 8,58 Encontrado: C: 48,03 H: 6,01 N: 8,39

Exemplo 9. O Composto Objectivo foi obtido de um modo idêntico ao descrito no exemplo 3. IV (nujol) : 3300, 1620, 1247, 1045 cm-1 RMN (DMSO-de, 5): 0,89 (3H, d, J = 6, 9 Hz); 0,96 (3H, d, J = 6,8 Hz); 1,11 (3H, d, J = 5,9 Hz); 1,2 - 1,55 (6H, m) ; 1,6 - 2,1 (5H, m); 2,1 - 2,6 (4H, m) ; 2,99 (1H, m) ; 3,19 (1H, m) ; 3,40 (1H, m); 3,74 (2H, m) ; 3,85 - 4,6 (14H, m) ; 4, 65 - 5,40 (9H, m) ; 6,74 (1H, d, J = 8,2 Hz); 6,83 (1H, dd, J = .1,7 Hz e 8,2 Hz); 6,89 (1H, 66 s); 7,03.(2H, d, J = 8,8 Hz); 7,06 (1H, d, J = 1,7 Hz); 7,23 (1H, s); 7,43 (2H, m) ; 7,6 - 7,8 (1H, m) ; 7,67 (2H, d, J = 8,8 Hz); 7,71 (2H, d, J = 8,4 Hz); 7,93 (2H, d, J = 8,4 Hz); 8,06 (1H, d, J = 8,0

Hz); 8,58 (1H, d, J = 6,7 Hz); 8,84 (1H, s) . EM-BAR: e/z = 1245 (M+ + Na)

Análise elementar:

Cale. para Cs^HviNsNaC^iS.5H2O C: 49,39 H: 6,22 N: 8,53 Encontrado: C: 49,51 H: 6,22 N: 8,53

Exemplo 10. O Composto Objectivo foi obtido de um modo idêntico ao descrito no exemplo 3. IV (KBr) : 3300, 1632, 1249, 1047 cm"1 RMN (DMSO-d6, 6): 0,85 (3H, t, J = 6,7 Hz); 0,94 (3H, d, J = 6,7 Hz); 1,03 (3H, d, J = 5,7 Hz); 1,1 - 2,6 (35H, m) ; 2,94 (1H, m) ; 3,17 (1H, m) ; 3,4 (1H, m) ; 3,72 (2H, m) ; 3,9 - 4,5 (12H, m) ; 4,6 - 5,35 (9H, m); 6,72 (1H, d, J = 8,2 Hz); 6,79 (1H, s); 6,81 (1H, d, J = 8,2 Hz); 7,04 (1H, s) ; 7,19 (1H, s) ; 7,34 (2H, m) ; 7,67 (1H, m); 8,05 (2H, m); 8,83 (1H, s). EM-BAR: e/z = 1203 (M+ + Na)

Análise elementar:

Cale. para C5iH8iN8Na02oS.4H20 C: 48,87 H: 7,16 N: 8,94 Encontrado: C: 49,17 H: 7,08 N: 8,81

Exemplo 11. A uma solução de 3 g de Composto de Partida em 30 mL de tetra--hidrofurano adicionou-se gradualmente 0,461 g de ciano-boro--hidreto de sódio à temperatura de 5°C. Agitou-se a mistura à temperatura de 40°C durante 1 hora. Pulverizou-se a mistura de reacção com 150 mL de éter diisopropilico. Recolheu-se por filtração o precipitado resultante e secou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o pó por cromatografia em coluna através de gel de sílica, 67 ΓΝ

1/ ? ρ>Α/χ ί-—+7

utilizando como eluente uma mistura a 3:1:1:1 de diclorometano/ /ácido acético/metanol/água. Reuniu-se as fracções que continham o Composto Objectivo e evaporou-se sob pressão reduzida. Adicionou--se água ao resíduo, ajustou-se o valor do pH para 8,5 com hidróxido de sódio IN e submeteu-se a cromatografia em coluna através de ODS (gel YMS ODS-AM S-50), efectuando a eluição com uma solução aquosa de acetonitrilo a 60%. Reuniu-se as fracções que continham o Composto Objectivo e evaporou-se sob pressão reduzida para eliminar o acetonitrilo. Liofilizou-se o resíduo para se obter 0,28 g do Composto Objectivo. RMN (DMS0-d6, Ô) : 0,88 (3H, t, J = 6,8 Hz); 0,97 (3H, d, J = 6,7 Hz); 1,10 (3H, d, J = 5,9 Hz); 1,2 - 1,55 (8H, m) ; 1,7 - 2,6 (10H, m); 2,98 (1H, m) ; 3,22 (1H, m) ; 3,46 (1H, m); 3,64 - 4,62 (15H, m); 4,7 - 5,5 (9H, m) ; 6,71 (1H, d, J = 8,2 Hz); 6,77 (1H, dd, J = 1,7 e 8,2 Hz); 6,91 (1H, s) ; 6,98 (1H, d, J = 1,7 Hz); 7,2 - 7,35 (2H, m) ; 7,35 - 7,52 (2H, m) ; 7,6 (1H, m) ; 7,74 (1H, m) ; 7, 82 - 8, 05 (3H, m); 8,18 (1H, d, J = 8 Hz); 8,43 (1H, s) ; 8,67 (1H, d, J = 6,9 Hz); 8,72 (1H, s) . EM-BAR: e/z = 1217 (M* + Na)

Análise elementar:

Cale. para C53H7iNeNaS02o·5H2O C: 49,53 H: 6,35 N: 8,72 Encontrado: C: 49,66 H: 6,51 N: 9,10

Exemplo 12. O Composto Objectivo foi obtido de um modo idêntico ao descrito no exemplo 11. RMN (DMSO-de, δ): 0,9 - 1,2 (9H, m); 1,3 - 1,5 (4H, m) ; 1,7 - -2,4 (10H, m); 2,9 - 3,4 (4H, m) ; 3,5 - 3,6 (1H, m) ; 3,7 - 4,1 (7H, m) ; 4,1 - 4,5 (8H, m) ; 4,7 - 4,8 (1H, m); 4,8 - 4,9 (2H, d, J = 6,4 Hz); 5,0 - 5,1 (1H, m) ; 5,1 - 5,3 (3H, m) ; 5,3 - 5,4 (1H, m) ; 6,7 - -7,1 (6H, m) ; 7,23 (1H, s) ; 7,45 (1H, d, J = 7,8 Hz); 7,5 - 7,8 (5H, m) ; 7,94 (2H, d, J = 8,6 Hz); 8,17 (1H, d, J = 7,8 Hz); 8,61 (1H, d, J = 6,4 Hz); 8,71 (1H, s) . EM-BAR: e/z = 1215 (M+ + Na) 68 ΓΝ

/

Exemplo 13.

A uma solução de 5,31 g de Composto de Partida em 100 mL de ácido trifluoroacético adicionou-se gradualmente 0,92 g de ciano--boro-hidreto de sódio à temperatura ambiente. Agitou-se a mistura durante 1 hora à mesma temperatura. Pulverizou-se a mistura de reacção com 750 mL de éter diisopropilico. Recolheu-se por filtração o precipitado resultante e secou-se sob pressão reduzida. Submeteu--se o pó a cromatografia em coluna através de gel de sílica (1 L) , utilizando cOmo eluente uma mistura a 3:1:1:1 de diclorometano/ /ácido acético/metanol/água. Reuniu-se as fracções que continham o Composto Objectivo e evaporou-se sob pressão reduzida para se obter 2,36 g do Composto Objectivo. IV (KBr) : 3300, 1628, 1201 cm-1 RMN (DMSO-de, δ): 0,86 (3H, t, J = 6, 6 Hz); 0,95 (3H, d, J = 6,7 Hz); 1,08 (3H, d, J = 5,9 Hz); 1,2 - 1,5 (10H, m) ; 1,58 - 2,6 (10H, m) ; 2,96 (1H, m) ; 3,0 - 3,6 (2H, m) ; 3, 65 - 4,53 (15H, m) ; 4,6 - 5,46 (9H, m) ; 6,40 (1H, d, J = 8,1 Hzj ; 6,59 (1H, s) ; 6,61 (1H, d, J = 8,1 Hz); 6,87 (1H, s) ; 6,96 (2H, d, J = 8,9 Hz); 7,15 -- 7,75 (3H, m); 7,84 (2H, d, J = 8,9 Hz); 8,12 (1H, m); 8,43 (1H, m). EM-BAR: e/z = 1079 (M+ + Na)

Exemplo 14.

A uma solução de 1,469 g de Compostò de Partida em 14,7 mL de ácido trifluoroacético adicionou-se gradualmente 0,452 g de ciano--boro-hidreto de sódio à temperatura ambiente. Agitou-se a mistura durante 1 hora à mesma temperatura. Pulverizou-se a mistura de reacção com 400 mL de éter dietílico. Recolheu-se por filtração o precipitado resultante e secou-se sob pressão reduzida. Juntou-se o pó assim obtido a 50 mL de água, ajustou-se o valor do pH para 7 com uma solução aquosa saturada de NaHC03 e submeteu-se a cromatografia em coluna através de ODS (gel YMS ODS-AM S-50), efectuando a eluição com uma solução aquosa de metanol a 60%. Reuniu-se as fracções que continham o Composto Objectivo e evaporou--se sob pressão reduzida para eliminar o metanol. Liofilizou-se o resíduo para se obter 0,85 g do Composto Objectivo. 69

V V Γ\

\, IV (nujol) : 3250, 1600, 1060 cm-1 RMN (DMSO-de, δ): 0,86 (3H, t, J = 6,7 Hz); 0,96 (3H, d, J = 6.6 Hz); 1,16 (3H, d, J = 5,7 Hz); 1,23 - 1, 63 (8H, m) ; 1,63 - 2,1 (5H, m); 2,1 - 2,67 (5H, m); 2,95 - 3,67 (3H, m) ; 3,67 - 4,78 (16H, m); 4,78 - 6,11 (1ΌΗ, m) ; 6,38 (1H, d, J = 7,9 Hz); 6,5 - 6,7 (2H, m) ; 7,1 - 7,7 (4H, m) ; 7,7 - 8,32 (5H, m) ; 8,32 -9,1 (5H, m) . EM-BAR: e/z = 1115,6 (M+-HCOCOOH + Na)

Análise elementar: Cale. para Cs5H73N8Na02o·5H20 C: 51,63 H: 6,53 N: 8,75 Encontrado: C: 51,86 H: 6,71 N: 8,86

Exemplo 15. 0 Composto Objectivo foi obtido de um modo idêntico ao descrito no exemplo 14. IV (nujol) : 3250, 1600, 1060 cm-1 RMN (DMSO-de, δ): 0,86 (3H, t, J = 6, 6 Hz); 0,95 (3H, d, J = 6.7 Hz); 1,09 (3H, d, J = 5,9 Hz); 1,2 - 1,53 (10H, m) ; 1,59 -2,1 (5H, m) ; 2,13 - 2,68 (4H, m) ; 2,96 (1H, m) ; 3,0 - 3,65 (2H, m) ; 3,7 - 4,55 (16H, m) ; 4,6 - 5,68 (10H, m) ; 6,40 (1H, d, J = 8,1 Hz); 6,59 (1H, s); 6,61 (1H, d, J = 8,1 Hz); 6,95 (2H, d, J = 8,8 Hz); 7,4 (1H, d, J = 7 Hz); 7,51 (1H, d, J = 8 Hz); 7,78 (s lr, 1H) ; 7,90 (2H, d, J =8,8 Hz); 8,13 (1H, d, J = 7 Hz) ; 8,35 -8,6 (2H, m); 8,68 (1H, s); 8,73 (1H, s).

EM-BAR: e/z = 1079 (M+ - H COOH + Na)

Exemplo 16. A uma suspensão de 1,0 g de Composto de Partida e 0,94 g de trietilsilano em, 5,0 mL de diclorometano adicionou-se gradualmente 10 mL de ácido trifluoroacético e agitou-se durante 30 minutos sob uma atmosfera de azoto. Evaporou-se a mistura de reacção sob pressão reduzida. Acrescentou-se tampão de fosfato pH 6,86 ao resíduo, ajustou-se o valor do pH para 8,5 com hidróxido de sódio IN e 70

submeteu-se a cromatografia em coluna através de ODS (gel YMS ODS-AM S-50), efectuando a eluição com uma solução aquosa de acetonitrilo a 30%. Reuniu-se as fracções que continham o Composto Objectivo e evaporou-se sob pressão reduzida para eliminar o acetonitrilo. Liofilizou-se o resíduo para se obter 0,61 g do Composto Objectivo. IV (KBr) : 3300, 1664, 1631, 1444, 1270, 1247, 1047 cm-1 RMN (DMSO-de, δ) : 0,89 (3H, t, J = 7,0 Hz); 0,96 (3H, d, J = 6,8 Hz); 1,09 (3H, d, J = 6,3 Hz); 1,3 - 1,5 (H, m) ; 1,6 - 2,4 (10H, m) ; 2,9 - 3,3 (2H, m) ; 3,4 - 3,5 (1H, m) ; 3,7 - 4,1 (7H, m) ; 4,1 - 5,6 (8H, m); 4,7 - 5,3 (7H, m) ; 5,40 (2H, d, J = 7,0 Hz); 6,7 -7,2 (7H, m); 7,23 (1H, s) ; 7,42 (1H, d, J = 8,5 Hz); 7,5 - 7,8 (6H, m) ; 7,94; (2H, d, J = 8,4 Hz); 8,10 (1H, d, J = 7,0 Hz); 8,64 (1H, d, J = 7,0 Hz); 8,72 (1H, s).. EM-BAR: e/z = 1229 (M* + Na)

Análise elementar:

Cale. para C54H7iN8Na02oS . 6H20 C: 49,31 H: 6,40 N: 8,61 Encontrado: C: 49,38 H: 6,36 N: 8,52

Exemplo 17. O Composto Objectivo foi obtido de um modo idêntico ao descrito no exemplo 11. RMN (EMSO-de, δ): 0,86 (3H, t, J = 6,8 Hz); 0,96 (3H, d, J = 6,7 Hz); 1,09' (3H, d, J = 6,0 Hz); 1,2 - 1,5 (12H, m); 1,6 - 2,5 (8H, m); 2,9 - 3,5 (4H, m) ; 3,7 - 4,1 (5H, m) ; 4,1 - 4,5 (8H, m) ; 4,7 --4,5 (7H, m) ; 6,7 - 7,1 (6H, m) ; 7,24 (1H, s) ; 7,40 (1H, d, J = 8,4 Hz); 7,5 - 7,8 (6H, m) ; 7,94 (2H, d, J = 8,4 Hz); 8,12 (1H, d, J = 8,4 Hz); 8,61 (1H, d, J= 7,7 Hz); 8,72 (1H, s). EM-BAR: e/z = 1271 (M+ + Na)

Análise elementar:

Cale. para C57H77NgNa02oS.7H20 C: 49,78 H: 6,67 N: 8,15 Encontrado: C: 49,94 H: 6,80 N: 8,16 71 4

Exemplo 18. O Composto Objectivo foi obtido de um modo idêntico ao descrito no exemplo 11. IV (KBr em grãos): 1631, 1537, 1515, 1494, 1440, 1245, 1045, 804 cm-1

RMN (DMSO-de, δ): 0, 88 - 1,07 (15H, m) ; 1,10 - 1,18 (4H, d, J = 6,3 Hz); 1,2 - 1,4 (2H, m) ; 1,5 - 1,9 (2H, m) ; 2,2 - 2,4 (2H, m) ; 2,9 - 3,1 (1H, m) ; 3,1 - 3,3 (2H, m); 3,7 - 3,9 (1H, m); 3,9 - 4,1 (6H, m) ; 4,2 - 4,6 (7H, m); 5,7 - 5,8 (1H, m) ; 4,90 (2H, d, J = 6,4

Hz); 5,0 - 5,1 (1H, m); 5,1 - 5,2 (4H, m); 5,3 - 5,4 (1H, m) ; 6,7 -

-6,8 (2H, m) ; 6,86 (1H, s) ; 6,99 (2H, s) ; 7,03 (2H, d, J = 8,8

Hz); 7,22 (1H, s); 7,4 - 7,5 (1H, m); 7,6 - 7,8 (6H, m); 7,95 (3H, d, J = 8,8 Hz); 8,2 (1H, m) ; 8,6 (1H, d, J = 8,2 Hz); 8,76 (1H, s) . EM-BAR: e/z = 1229 (M* + Na)

Análise elementar: Cale. para C57H7iN5Na02oS. 6H20 C: 49,31 H: 6,36 N: 8,52

Encontrado: C: 49,12 H: 6,22 N: 8,48

Exemplo 19.

A uma suspensão de 10 g de Composto de Partida e 1,25 g de ciano-boro-hidreto de sódio em 100 mL de diclorometano adicionou-se gradualmente 50 mL de tetra-hidrofurano à temperatura de 5°C. Agitou-se a mistura à temperatura de 5°C durante 1 hora. Evaporou-se a mistura de reacção sob pressão reduzida. Adicionou-se água ao resíduo, ajustou-se o valor do pH para 8,5 com hidróxido de sódio IN e submeteu-se a cromatografia em coluna através de ODS (gel YMS ODS-AM S-50) , efectuando a eluição com uma solução aquosa de acetonitrilo a 60%. Reuniu-se as fracções que continham o produto impuro e evaporou-se sob pressão reduzida para eliminar o acetonitrilo. Liofilizou-se o resíduo para se obter 9,7 g de um produto impuro. Purificou-se o produto impuro (1,5 g) por CLER preparativa, utilizando uma coluna Ci8 com resina μ ‘Bondapak’ (Waters Associates, Inc.), efectuando a eluição com um sistema de solventes constituído por acetonitrilo/tampão de fosfato pH 3 72 Γ\ ί-Α-7 ν./:.. (40:60) com um débito de 100 mL/minuto, utilizando uma bomba de modelo ‘Shimadzu LC-8A’. A coluna foi controlada por meio de um detector de UV ajustado a 240 nm. Reuniu-se as fracções que continham o componente principal com um tempo de retenção de 24,1 minutos e evaporou-se sob pressão reduzida para eliminar o acetonitrilo. Ajustou-se o valor do pH do resíduo para 8,5, utilizando para tal hidróxido de sódio IN, e submeteu-se a cromatografia em coluna através de ODS (gel YMS ODS-AM S-50) , efectuando a lavagem com água e a eluição com uma solução aquosa de acetonitrilo a 60%. Reuniu--se as fracções que continham o Composto Objectivo e evaporou-se sob pressão reduzida para eliminar o acetonitrilo. Liofilizou-se o residuo para se obter 0,77 g do Composto Objectivo principal. O Composto Objectivo minoritário (98 mg), com um tempo de retenção de 29,86 minutos, foi obtido de um modo idêntico ao descrito a propósito do Composto Objectivo principal.

Composto Objectivo (composto principal) RMN {DMSO-d6, δ): 0,88 (3H, t, J = 6,7 Hz); 0,96 (3H, d, J = 6,7 Hz); 1,11 (3H, d, J = 5,8 Hz); 1,2 - 1,6 (8H, m) ; 1,62 - 2,13 (5H, m) ; 2,13 - 2,62 (4H, m) ; 2,97 (1H, m) ; 3,18 (1H, m) ; 3,4 (1H, m) ; 3,74 (2H, m) ; 3, 83 - 4, 63 (14H, m) ; 4,63 - 5,40 (9H, m) ; 6,73 (1H, d, J = 8,2 Hz); 6,81 (1H, dd, J = 1,7 e 8,2 Hz); 6,89 (1H, s) ; 7,03 (2H, d, J= 8,9 Hz); 7,06 (1H, d, J = 1,7 Hz); 7,22 (1H, s) ; 7,41 (2H, m) ; 7,6 - 7,8 (1H, m) ; 7,67 (2H, d, J = 8,9 Hz); 7,71 (2H, d, J = 8,4 Hz); 7,93 (2H, d, J = 8,4 Hz); 8,05 (1H, d, J = 8

Hz); 8,61 (1H, d, J = 6,7 Hz); 8,84 (1H, s) . IV (nujol) : 3300, 1625, 1240, 1045 cm'1 EM-BAR: e/z = 1259 (M+ + Na)

Análise elementar:

Cale. para C5sH73N8Na02iS.6H2O C: 49,10 H: 6,37 N: 8,33 Encontrado: C: 49,02 H: 6,32 N: 8,34

Composto Objectivo (composto minoritário) IV (nujol) : 3300, 1620, 1245 cm'1 73 RMN (DMSO-de, δ): 0,88 (3H, t, J = 6,7 Hz); 0,97 (3H, d, J = 6,7 Hz); 1,09 (3H, d, J = 5,8 Hz); 1,18 - 1,52 (8H, m) ; 1,6 - 2,59 (10H, m); 2,97 (1H, m) ; 3,18 (1H, m) ; 3,40 (1H, m) ; 3,65 - 4,59 (15H, m) ; 4,65 - 5,45 (9H, m) ; 6,71 (1H, d, J = 8,1 Hz); 6,76 (1H, dd, J = 1,7 e 8,1 Hz); 6,87 (1H, s) ; 6,97 (1H, d, J = 1,7 Hz); 7,03 (2H, d, J = 8,8 Hz); 7,21 (1H, s) ; 7,41 (1H, d, J = 7,6 Hz); 7,60 (1H, m) ; 7,63 - 7,8 (1H, m) ; 7,67 (2H, d, J = 8,8 Hz); 7,71 <2H, d, J = 8,4 Hz); 7,94 (2H, d, J = 8,4 Hz); 8,10 (1H, d, J = 8 Hz); 8,59 (1H, d, J = 8 Hz); 8,72 (1H, s) . EM-BAR: e/z = 1243 (M+ + Na)

Análise elementar:

Cale. para C55H73N8NaO20S.7H20 C: 49, 03 H: 6,51 N: 8,32 Encontrado: C: 49,24 H: 6,25 N: 8,44

Exemplo 20. A uma mistura de 1 g de Composto de Partida e 290 μΐ, de ácido mercaptoacético adicionou-se 10 mL de ácido trifluoroacético e agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 16 horas, sob uma atmosfera de azoto. Evaporou-se a mistura de reacção sob pressão reduzida. Verteu-se o resíduo sobre 10 mL de água e filtrou-se. Submeteu-se o precipitado a cromatografia em coluna através de gel de silica, utilizando como eluente uma mistura a 3:1:1:1 de di-clorometano/ácido acético/metanol/água. Reuniu-se as fraeções que continham o Composto Objectivo e evaporou-se sob pressão reduzida. Ajustou-se para 8,0 o valor do pH do resíduo, utilizando para tal hidróxido de sódio IN, e submeteu-se a cromatografia em coluna através de ÒDS (gel YMS ODS-AM S-50), efectuando a eluição com CH3CN-H20 (60-40). Reuniu-se as fraeções que continham o Composto Objectivo e èvaporou-se sob pressão reduzida para eliminar o aceto-nitrilo. Liofilizou-se o resíduo para se obter 515 mg do Composto Objectivo principal. IV (nujol) : 3300, 1662, 1627, 1203 cm-1 EM-BAR: e/z = 1205 (M+) 74 V .7

Análise elementar: Cale. para C55H73N8NaOi9S. 5H20 C: 51,00 H: 6,46 N: 8,65 Encontrado: C: 51,15 H: 6,35 N: 8,56

Exemplo 21. O Composto Objectivo foi obtido de um modo idêntico ao descrito no exemplo 11. IV (nujol): 3300, 1672, 1658, 1629, 1530, 1438, 1270, 1214 cm-1 EM-BAR: e/z = 1220 (M+ + 1)

Análise elementar: Cale. para Cs5H73N8Na02oS.7H20

C: 50, 67 H: 6,61 N: 8,44 Encontrado: C: 50,67 H: 6,47 N: 8,38

Exemplo 22. A uma solução de 2 g de Composto de Partida em 20 mL de di- metilformamida, na presença de crivos moleculares de 4A, adicionou-

-se 0,744 g de ácido glioxílico à temperatura ambiente. Agitou-se a mistura durante 7 horas à mesma temperatura. Pulverizou-se a mistura de reacção com acetato de etilo. Recolheu-se por filtração o precipitado resultante e secou-se sob pressão reduzida. Adicionou--se água ao pó assim obtido e ajustou-se o valor do pH para 7,5. Submeteu-se a solução a cromatografia em coluna através de ODS (gel YMS ODS-AM S-50), efectuando a eluição com uma solução aquosa de acetonitrilo a 20%. Reuniu-se as fraeções que continham o Composto Objectivo e evaporou-se sob pressão reduzida para eliminar o acetonitrilo. Liofilizou-se o resíduo para se obter 1,26 g do Composto Objectivo. IV (KBr, em grãos) : 3350, 1658, 1631, 1248 cm'1 RMN (DMSO-dg, δ): 0,88 (3H, t, J = 6, 6 Hz); 0,95 (3H, d, J = 6,6 Hz); 1,18 (3H, d, J = 5,5 Hz); 1,23 - 1,55 (8H, m) ; 1,55 - 2,6 (9H, m) ; 3,09 (1H, m) ; 3,1 - 3,5 (2H, m) ; 3,6 - 5,8 (27H, m) ; 6,74 (1H, d, J = 8,2 Hz); 6,83 (1H, d, J = 8,2 Hz); 7,03 (2H, d, J = 8,8 Hz); 7,05 (1H, s) ; 7,23 - 7,55 (3H, m) ; 7,68 (2H, d, J = 8,7 Hz); 75 r\

7,72 (2H, d, j = 8,4 Hz); 7,96 (2H, d, J = 8,4 Hz); 8,0 - 8,2 (2H, m) ; 8,45 (1H, m) ; 8,84 (1H, s). EM-BAR: e/z = 1259 (M+ + Na)

Consequentemente, faz-se observar que o composto conhecido [A], que satisfaz à fórmula estrutural a seguir apresentada, ou um seu sal, pode ser convertido no composto [B], que satisfaz à fórmula estrutural a seguir apresentada, ou num seu sal, de um modo idêntico ao descrito nos procedimentos 1 e 5. R' R»

N 0 Vn HM OH NH- R*

cPc

Rd tA] ou um seu sal em que o símbolo Ra representa um grupo acilo, cada um dos símbolos Rb, Rc, Rf e Rg representa independentemente um átomo de hidrogénio ou um grupo hidroxi, o símbolo Rd representa um grupo hidroxi, aciloxi, fosforiloxi ou sulfoniloxi, o símbolo Re representa um átomo de hidrogénio ou um grupo metilo, o símbolo Rfi representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alcoxi inferior, e o símbolo Rh representa um grupo alquilo inferior que pode ter um ou vários substituintes adequados. 76 0 composto [A] já foi descrito, por exemplo, japonesas abertas à inspecção pública com os n- i-4-217694, 4-217695, 4-217696, 4-217697, 4-217698 e

Lisboa, 13 de Outubro de 2000 nas publicações 163179, 3-163096, 4-217699.

O AGENTE OFICIAL DA PROPRIEDADE INDUSTRIAL

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Claims (8)

1. \

   Λ

   REIVINDICAÇÕES 1. Composto polipeptidico que satisfaz à fórmula estrutural seguinte:

   r n em que o símbolo R1 representa um átomo de hidrogénio o símbolo R1 representa um grupo acilo, o símbolo R2 representa um grupo hidroxi ou aciloxi; o símbolo R3 representa um grupo hidroxi ou hidroxi-sulfoniloxi; o símbolo R4 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo

   alquilo (Ci~C6) que pode ter entre 1 e 3 substituintes adequados seleccionados entre o conjunto constituído por grupos hidroxi, acilo, di (alquil (Ci-C6) ) -amino e amino cíclico, e o símbolo R5 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo hidroxi ou acil (alquil (C1-C6) )-tio, e um seu sal farmaceuticamente aceitável. 1 1 Composto de acordo com a reivindicação 1, em que: 2 o símbolo R1 representa um grupo aroílo que pode ter entre 1 e 5 3 i) grupos alcoxi (Ci-Ce), ii) grupos alcoxi (C7-C20) ou iii) grupos arilo que podem ter entre 1 e 3 grupos alcoxi (Ci-C6) ou alcoxi (C7-C20); ou alca- 4 noí lo (C7-C20) ; e 5 o símbolo R4 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo(Ci-C6) que pode ter entre 1 e 3 substituintes Γ\ adequados seleccionados entre o conjunto constituído por grupos hidroxi, acilo, di (alquil (C1-Ce) ) -amino e amino cíclico.
2. 3. Composto de acordo com a reivindicação 2, em que: o símbolo R2 representa um grupo benzoílo ou naftoílo, podendo cada um deles ter entre 1 e 3 substituintes adequados seleccionados entre o conjunto constituído por grupos alcoxi (Ci~Ce), alcoxi (C7-C20) e fenilo que pode ter entre 1 e 3 grupos alcoxi (C7-C2o); o símbolo R3 representa um grupo hidroxi; o símbolo R5 representa um átomo de hidrogénio; e o símbolo R1 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo hidroxi.
3. 4. Composto de acordo com a reivindicação 3, em que: o símbolo R2 representa um grupo benzoílo que possui radicais alcoxi (C7-C20) / benzoílo que possui radicais fenilo que possuem grupos alcoxi (C7-C20) , naftoílo que possui radicais alcoxi(Ci-Cç) ou naftoílo que possui radicais alcoxi (C7-C20) o símbolo R1 representa um átomo de hidrogénio.
4. 5. Composto de acordo com a reivindicação 3, em que: o símbolo R2 representa um grupo benzoílo que possui radicais alcoxi (C7-C20), benzoílo que possui, radicais fenilo que possuem grupos alcoxi (C7-C20) , naftoílo que possui radicais alcoxi(Ci-C6) ou naftoílo que possui radicais alcoxi (C7-C20) o símbolo R4 representa um grupo hidroxi. 2 1 Processo para a preparação de um composto polipeptídico de acordo com a reivindicação 1, o qual compreende os passos que consistem em: (1) efectuar a redução de um composto de fórmula estrutural: HO OH

   em que cada um dos símbolos R2, R3, R4 e R5 possui as significações definidas antes e o símbolo R6a representa um grupo hidroxi ou acil (alquil (Ci-C6) ) --tio, ou de um seu sal, para se obter um composto [I] que satisfaz à fórmula estrutural:

   em que cada um dos símbolos R2, R3, R4, r5 e R6 possui as significações definidas antes, ou um seu sal, ou (2) efectuar a redução de um composto de fórmula estrutural: 3

   [ia] em que cada um dos símbolos R2, R3, R4 e R5 possui as signi ficações definidas antes, ou de um seu sal, para se obter um composto [Ib] que satisfaz à fórmula estrutural: OH

   [ib] em que cada um dos símbolos R2, R3, R4 e R5 possui as significações definidas antes, ou um seu sal, ou (3) submeter um composto de fórmula estrutural: 4 Γ Γ\

   ΟΗ R*

   3 ΟΗ [IC] NH-R2 HíNCO em que cada um dos símbolos R1, R2, R3, R4 e R6 possui as significações definidas antes, ou um seu sal, a uma reacção de alquilação para se obter um composto [Id] que satisfaz à fórmula estrutural:

   R* nn

   em que cada um dos símbolos R1, R2, R3, R4 e R5 possui as significações. definidas antes, o símbolò R5a representa um grupo alquilo (Ci-C6) que pode ter 1 a 3 substituintes adequados tal como definidos a propósito do símbolo R5, ou um seu sal, ou (4) submeter um composto de fórmula estrutural: 5

   em que cada um dos símbolos R1, R2, R3, R4 e R6 possui as significações definidas antes e o símbolo R6c representa um grupo hidroxi, ou um seu sal, a uma reacção de substituição para se obter um composto [If] que satisfaz à fórmula estrutural: Rl OH

   em que cada um dos símbolos R1, R2, R3, R4 e R5 possui as significações definidas antes e o símbolo R6b representa um grupo acil (alquil (Ci-C6))-tio, ou um seu sal, ou (5) submeter um composto de fórmula estrutural: 6 I

   em que cada um dos símbolos R1, R2 e R6 possui as significações definidas antes e o símbolo R4a representa um grupo hidroxi-sulfoniloxi, ou um seu sal, a uma reacção de acilação para se obter um composto [Ih] que satisfaz à fórmula estrutural:

   em que cada um dos símbolos R1, R3, R4a e R6 possui as significações definidas antes e o símbolo R3a representa um grupo aciloxi, ou um seu sal. 7 1
5. 7. Composição farmacêutica que incorpora como ingrediente activo um composto de acordo com a reivindicação 1, ou um seu sal far-maceuticamente aceitável, misturado com um veiculo ou excipiente aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.
6. 8. Utilização de um composto de acordo com a reivindicação 1, ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável, para a preparação de um medicamento, de preferência para o tratamento profiláctico e/ou terapêutico de doenças infecciosas provocadas por microrganismos patogénicos.
7. 9. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, utilizável como medicamento.
8. 10. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, utilizável para o tratamento profiláctico e/ou terapêutico de doenças infecciosas provocadas por microrganismos patogénicos.

   Lisboa, 13 de Outubro de 2000 O AGENTE OFICIAL DA PROPRIEDADE INDUSTRIAL

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