PT595467E

PT595467E - Processo para preparar derivados de antifolato de 4-hidroxipirrolo¬2,3-d|pirimidina

Info

Publication number: PT595467E
Application number: PT93307594T
Authority: PT
Inventors: Charles Jackson Barnett; Thomas Michael Wilson
Original assignee: Lilly Co Eli
Priority date: 1992-09-25
Filing date: 1993-09-24
Publication date: 2000-12-29
Also published as: EP0595467A2; US5278307A; GR3034636T3; ATE194840T1; DK0595467T3; JPH06211863A; DE69329052T2; DE69329052D1; ES2148206T3; CA2106716A1; EP0595467B1; EP0595467A3

Description

DESCRICÁO "PROCESSO PARA PREPARAR DERIVADOS DE ANTIFOLATO DE 4-HIDROXIPIRROLO [2,3-d]PIRIMIDINA "

Este invento refere-se aos domínios farmacêuticos e de química orgânica, e proporciona um novo processo para a síntese de 4-hidroxipirro1o[2,3-d]pirimidinas que são úteis como antimetabolitos do tipo antifolato, e a intermediários para esse fim.

Os antimetabolitos têm sido usados durante um certo número de anos como agentes quimioterapêuticos no tratamento do cancro. Uma droga dessas, o metotrexate, é agora uma das drogas anticancerígenas mais largamente usadas; e muitos outros compostos da família do ácido fólico têm sido sintetizados, testados e discutidos na literatura química e médica. Os compostos possuem várias actividades a nível enzimático; estes inibem enzimas tais como di-hidrofolato reductase, folato poliglutamato sintetase, glucinamida ribonu-cleótido formiltransferase, e timidilato sintetase.

Mais recentemente, foi descrita uma série de derivados do ácido 4-hidroxipirrolo[2,3-d]pirimidina-L-glutâmico como sendo drogas do tipo antifolato úteis. Ver, por exemplo, as patentes U.S. 4,996,206; 5,106,974; e 4,997,838. Contudo, as vias sintéticas aí descritas variam grandemente e são frequentemente inadequadas e complexas. O Journal of Organic Chemistiy, vol. 43, n° 20, 1978, pág. 3937-3941 descreve a formação de anel da 2,6-diaminopirimid-4-ona com a- -2- halocetonas para formar pirrolo[2,3-d]pirimidinas e furo[2,3-d]pirimidinas. O presente invento proporciona um processo melhorado para a síntese de intermediários que são úteis para a síntese de compostos antifolatos à base de 4-hidroxipirrolo[2,3-d]pirimidina. O processo do presente invento é também útil para a síntese de compostos antifolato que são empregues como agentes antineoplásicos.

Embora os compostos intermédios sintetizados pelo processo deste invento sejam principalmente úteis para a síntese de derivados do ácido glutâmico antineoplásico, um perito nas artes química e farmacêutica saberá ver que a utilidade destes intermediários não está limitada à síntese dos agentes neoplásicos atrás referidos. O presente invento proporciona um método para a preparação de 4-hidroxipinOlo[2,3-d]pirimidinas de fórmula

em que R é NHC*H(COOR1)CH2CH2COOR1 ou OR1; R1 é H ou um grupo protector de carboxilo; a configuração do átomo de carbono designado por * é L; n é 0 ou 1; e A é um grupo arilo; ou um sal deste, que pode ser substituído; que compreende \ «SSS6**53 -3-

(a) a halogenação de um composto de fórmula II \ «SSS6**53 -3-!o

A

COR R e A são definidos como atrás; j é 0 a 1; e (b) reacção da 2,4-diamino-6-hidroxipirimidina; ou um sal desta, com o produto da reacção do passo (a), na presença de um solvente polar.

Este invento refere-se a um processo para a síntese de 4-hidroxipirTolo[2,3-d]pirimidinas que são úteis como antimetabolitos do tipo antifolato, e intermediários para esse fim.

Os compostos de fórmula I existem em equilíbrio tautomérico com os compostos 4(3H)-oxo correspondentes. Com fins ilustrativos, o equilíbrio do sistema de anel de pirrolopirimidina, e a numeração deste, são mostrados a seguir:

Por conveniência, a forma 4-hidroxi é representada pela fórmula I, e a nomenclatura correspondente é usada ao longo desta descrição. Contudo, entende-se que tais representações incluem as formas tautoméricas 4(3H)-oxo -4- correspondentes. A estrutura em anel identificada como A nas fórmulas I, II e IV é um grupo arilo com 5 ou 6 membros. O termo "arilo" refere-se a um resíduo aromático substituído ou não substituído, incluindo grupos heterocíclicos que podem possuir até três heteroátomos (p.e. N, O e S) em si contidos tais como por exemplo, fenilo, tienilo, piridilo, furilo e outros do género.

Para além do substituinte COR, o grupo arilo representado por A nas fórmulas I, II e IV pode possuir um ou dois substituintes, seleccionados de halo, hidroxi, alquilo C1-C4 , alcoxi C1-C4 . O termo "halo" refere-se a bromo, cloro, flúor e iodo. O termo "alquilo C1-C4" refere-se a cadeias alifáticas lineares ou ramificadas de 1-4 átomos de carbono, incluindo metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo e terc-butilo. O termo "alcoxi C1-C4" representa um grupo alquilo C1-C4 ligado através de uma ponte de oxigénio, tal como, por exemplo, metoxi, etoxi, n-propoxi, isopropoxi e outros do género. O grupo de protecção de carboxilo de R1, em que R1 não é H, refere-se a um grupo que geralmente não se encontra em compostos terapêuticos finais mas que é intencionalmente introduzido durante uma parte do processo sintético para proteger um grupo, que de outro modo podia reagir no decurso de manipulações químicas, e é então removido num passo de síntese ulterior. Uma vez que os compostos que têm um tal grupo protector são sobretudo importantes como intermediários químicos (embora alguns derivados também apresentem actividade biológica), a sua estrutura precisa não é crítica. Numerosas reacções para a formação e remoção de tais grupos protectores são descritos num certo número de trabalhos de referência incluindo, por exemplo, "Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, (Londres e Nova Iorque, 1973); Greene, Th. W., "Protective Groups in Organic Synthesis", Wiley, (Nova Iorque, 1981); e "The Peptides", Vol. I, Schrooder e Lubke, Academic Press, (Londres e Nova Iorque, 1965).

Um grupo carboxilo pode ser protegido como um grupo éster que é selectivamente removível sob condições suficientemente suaves de modo a não degradar a estrutura desejada da molécula. Especialmente preferido é um éster alquílico de cadeia curta tal como metilo ou etilo. Outros ésteres alquílicos de cadeia curta incluem os que são ramificados na posição 1 tais como o t-butilo, e os que são substituídos nas posições 1 ou 2 com (i) um alcóxido de cadeia curta, tais como metoximetilo, 1-metoxietilo, etoximetilo e outros do género; (ii) alquiltio de cadeia curta, tais como metiltiometilo, 1-etiltioetilo e outros do género; (iii) halogénio, tais como 2,2,2-tricloroetilo, 2-bromoetilo, 2-iodoetoxicarbonilo e outros do género; (iv) 1 a 3 grupos fenilo, cada um dos quais pode ser não substituído ou mono, di ou tri-substituido com, por exemplo, um alquilo de cadeia curta tal como o t-butilo, um alcóxido de cadeia curta tal como metoxi, hidroxi, halo tal como cloro, e nitro tal como 4-nitrobenzilo; ou (v) aroilo, tal como o fenacilo.

Os materiais de partida representados pelos compostos de fórmula II podem ser preparados tal como mostrado abaixo no esquema I.

-6- Esquema I

Pd(0)

COR j é 0 ou 1; A é um grupo arilo que pode ser substituído X é bromo ou iodo; R é NHC*H(COOR1)CH2CH2COOR1 ou OR1; R1 é H ou um grupo protector de carboxilo; a configuração do átomo de carbono designado por * é L.

Os métodos de preparação de compostos de fórmula II, através de acoplamento catalisado por paládio, são usualmente conhecidos pelos químicos orgânicos. Ver, p.e.. Larok, et al„ Tetrahedron Letters. 30: 2603-2606 (1989); Larok et al„ J. Ore. Chem.. 55: 407-408 (1990).

Os compostos de fórmula IV preferidos são aqueles em que A é um grupo arilo com 5 membros, preferencialmente tiofeno que é substituído com bromo ou iodo na posição 2, e ainda substituído na posição 5 com o grupo COR. Tal como descrito atrás, R é NHC*H(COOR1)CH2CH2COOR1 ou OR1; R1 é H ou -7- um grupo protector de carboxilo; e a configuração do átomo de carbono designado por * é L (ácido L-glutâmico, em que R1 é H).

Os compostos de fórmula IV especialmente preferidos são aqueles em que A é um grupo arilo com 6 membros, preferencialmente fenilo substituído com bromo ou iodo na posição 4, em relação ao grupo COR. Deste modo, os substituintes requeridos localizados nos grupos arilo de 5 membros (representados abaixo por tiofeno-2,5-ileno) e grupos arilo de 6 membros (representados abaixo por fenil-l,4-ileno) são os seguintes:

em que Z é bromo ou iodo. Com certeza que os grupos arilo de 5 membros ou de 6 membros podem ainda ser mais substituídos tal como descrito atrás. O segundo reagente mostrado no Esquema I, o composto de fórmula III, é um anel não substituído tendo oxigénio com 5 ou 6 membros (o "anel B"). Os compostos de fórmula III estão ou comercialmente disponíveis ou são preparados por metodologias padrão bem conhecidas pelos peritos na matéria. Os compostos de fórmula III preferidos são o oxaciclopent-2-eno (2,3-di-hidro-lH-furano) e oxaciclo-hexa-5-eno (2,3-di-hidro-4H-pirano).

Tal como representado no Esquema II abaixo, o composto de fórmula III seleccionado como reagente no Esquema I dita o comprimento da ponte de carbono entre a porção pirrolo[2,3-d]pirimidina e o grupo cíclico divalente dos compostos de fórmula I. O uso de compostos de fórmula III de 5 membros resulta numa ponte de dois átomos de carbono, enquanto que o uso de compostos de fórmula III de 6 membros resulta numa ponte de três átomos de carbono. Por outras palavras, quando j na fórmula II é 0, n na fórmula I será 0. -8-

Do mesmo modo, quando j é 1, n será 1. Assim, o processo deste invento proporciona uma flexibilidade substancial quando é usado para sintetizar intermediários de 4-hidroxipirrolo[2,3-d]pirimidina ou compostos antifolato activos.

Para além disso, as condições reaccionais suaves usadas neste invento permitem que o substituinte COR, localizado no grupo cíclico divalente (fórmula IV) seja seleccionado e estabelecido antes do início deste processo, e de permanecer como tal, sem modificação, ao longo do processo. O processo do presente invento é mostrado abaixo no Esquema II.

Esquema II

COR

II

passo (a): halogenação de compostos de formula II anel B halogenado passo (b): ciclização

I -9- em que A, j, n e COR são tal como definidos atrás. O processo deste invento é realizado através de (a) halogenação de um composto de fórmula II; e (b) reacção da 2,4-diamino-6-hidroxipirimidina com o produto reaccional do passo (a), na presença de um solvente polar. Este processo pode ser efectuado em dois passos independentes ou, preferencialmente realizado, in si tu. como um processo único, em que o passo (b) é efectuado imediatamente após o passo (a) se ter completado, sem separar o produto reaccional do passo (a).

No passo (a), são empregues agentes de halogenação geralmente conhecidos. Particularmente úteis são os agentes de bromação tais como o bromo elementar, a N-bromosuccinimida, a N-bromoacetamida e a N-bromofitalimida. Destes o bromo elementar é o preferido. Também de uso particular são os agentes de cloração tais como o cloro elementar, a N-clorosuccinimida e a N-cloroftalimida.

Os compostos de fórmula I são então formados pelo processo de ciclização mostrado no passo (b). No passo (b), a ciclização do sistema em anel 4-hidroxipirido[2,3-d]pirimidina é conseguida fazendo reagir a 2,4-diamino-6-hidroxipirimidina com o produto da reacção do passo (a), na presença de um solvente polar. Exemplos de solventes polares adequados incluem a dimetilformamida (DMF), sulfóxido de dimetilo (DMSO), acetona, acetonitrilo e álcoois, água e mistura destes. Destas, a mistura de acetonitrilo com água é a preferida.

Tipicamente o passo (b) pode ser conseguido tal como descrito acima, mas, preferencialmente, o solvente polar conterá um sal de um ácido fraco (p.e. agente tampão), com o fim de reagir com o hidro-halogeneto formado durante o passo (b) de ciclização. O acetato de sódio é um agente tampão preferido. O passo (b) deste processo é preferencialmente operado numa gama de temperaturas de 65 °C a cerca de 85 °C. Com certeza que a temperatura de operação óptima para uma dada reacção é facilmente encontrada de acordo com a experiência do químico orgânico.

Os tempos de reacção necessários para os passos (a) e (b) variarão, dependendo dos materiais de partida usados e das condições operacionais, tais como a temperatura. O tempo de reacção óptimo para um dado processo é, como sempre, um compromisso entre os vários factores que levam a tempos de reacção curtos, e o rendimento máximo que é favorecido pelos tempos de reacção longos.

Os compostos de fórmula I obtidos do produto deste invento são facilmente isolados através de procedimentos ordinários. Por exemplo, a mistura previamente aquecida do passo (b) é arrefecida até à temperatura ambiente e o precipitado que se forma durante este passo é filtrado e seco. Quando os compostos de fórmula I são usados como intermediários, o produto recolhido não necessita de mais purificação. Quando o produto recolhido é para ser usado como composto terapeuticamente activo, o produto pode ser ainda purificado por métodos usualmente utilizados na arte química orgânica.

Os compostos de fórmula I em que R é OR1 e R1 é quer H ou um grupo protector de carboxilo são geralmente intermediários que são úteis para preparar novos ou conhecidos derivados do ácido 4-hidroxipirrolo[2,3-d]pirimidina-L-glutâmico, ou para preparar outros intermediários que são úteis - 11 - para sintetizar tais derivados do ácido glutâmico. Numerosos derivados do ácido 4-hidroxipirrolo[2,3-d]pirimidina-L-glutâmico são conhecidos por possuírem actividade antimetabólica de folatos e são úteis inter alia como agentes antineoplásicos. Ver p.e. as Patentes U.S. N°s 4,996,206, 4,997,838 e 5,106,974. Contudo, o uso de compostos de fórmula I preparados através do processo deste invento não são limitados por estes exemplos para tais usos. A conversão dos compostos intermédios de fórmula I, em que R de COR é OR1 e R1 é quer H ou um grupo protector de carboxilo em agentes antineoplásicos activos, é conseguida por métodos bem conhecidos dos peritos na matéria. Tipicamente um derivado protegido do ácido L-glutâmico de fórmula 8 NHaCHCHaCHjC-OR1

C—OR1 V li

O em que R1 é um grupo protector de carboxilo e a configuração do átomo de carbono designado por * é L, está ligado ao composto intermediário de fórmula I da maneira descrita na patente U.S. N° 4,684,653, usando técnicas de condensação convencionais para formar ligações de péptidos, mas substituindo a apropriada pirrolo[2,3-d]pirimidina pela pirido[2,3-d]pirimidina aqui descrita. A 4-hidroxipirrolo[2,3-d]pirimidina resultante é então sujeita a hidrólise para remover os grupos R1 protectores de carboxilo.

Altemativamente, um derivado do ácido glutâmico protegido de fórmula V pode ser ligado ao grupo carboxilo ligado a um anel A de fórmula II antes de sujeitar o composto de fórmula II ao processo deste invento, usando a - 12- técnica de acoplamento atrás mencionada. O derivado do ácido L-glutâmico protegido pode então ser usado no processo deste invento, resultando num intermediáriò de fórmula I que, por hidrólise dos grupos R1 protectores de carboxilo, é um agente antineoplásico activo de 4-hidroxipirrolo[2,3-d]pirimi-dina.

Altemativamente, um composto de fórmula II, em que R é NHC*H(COOR1)CH2CH2COORi, R1 é H ou um grupo protector de carboxilo e a designação é tal como definida atrás, pode ser usado directamente no processo deste invento, dando origem a um agente antineoplásico activo de 4-hidroxipirrolo[2,3-d]pirimidina. Ver p.e. o Exemplo 4. Para além disso, o substituinte 9-hidroxilo pode então ser removido por métodos convencionais tais como a hidrogenólise catalítica, e os produtos resultantes são também antimetabolitos de folato que possuem actividade antineoplásica. Ver p.e. as patentes U.S. N°s 4,996,206, 4,997,838 e 5,106,974.

Os exemplos seguintes ilustram mais o processo de acordo com o presente invento. Os exemplos não pretendem limitar o domínio do invento, em qualquer modo, e não devem ser considerados como tal.

Exemplo 1 4-(2,3-di-hidrofurano-2-iI)benzoato de metilo A uma mistura de 269 mg (1,20 mmol) de acetato de paládio (II), 3,14 mg (1,20 mmol) de trifenilfosfina, 15,3 g (150 mmol) de acetato de lítio di-hidratado, e 13,9 g (50 mmol) de cloreto de tetrabutilamónio em 100 ml de dimetilformamida (DMF), que foi desgasifícada sob vácuo, foi adicionado 13,10 g (50 mmol) de 4-iodobenzoato de metilo e 17,50 g (150 mmol) de 2,3-di-hidrofurano. A mistura foi aquecida com agitação sob atmosfera de azoto até cerca de 80 °C durante 4 h quando se obteve conversão completa (TLC - sílica, hexano - acetato de etilo 8:2). A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente e diluída com 200 ml de éter metil t-butílico (MTBE) e 200 ml de água. As camadas foram separadas e a fase orgânica foi lavada com 2 x 100 ml de água. As fases aquosas combinadas foram ainda extractadas com 100 ml de MTBE. As fases orgânicas foram combinadas e tratadas com 3 g de carvão activado. O carvão foi filtrado e o filtrado foi lavado com 2 x 100 ml de água, e seco (Na2S04). A evaporação do solvente deu origem a 9,29 g do produto em bruto sob a forma de um óleo castanho. Cromatografia rápida em sílica-gel (hexano -acetato de etilo 8:2) e uma destilação pequena das fracções reunidas originaram 5,5 g (54 %) de produto purificado, pe 165 °C (0,35 torr), sob a forma de um sólido de baixo ponto de fusão (pf de cerca de 25 °C), ‘H RMN (CDCI3) δ 2,56 (m, 1H), 3,12 (m, 1H), 3,91 (s, 3H), 4,97 (q, J = 2,6 Hz, 1H), 5,57 (dd, J = 2,7, 8,2 Hz, 1H), 6,47 (q, J = 2,7 Hz, 1H), 7,42 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 8,03 (d, J = 8,4 Hz, 2H); 13C RMN (CDC13) δ 37,9, 52,0, 81,6, 99,0, 125,4, 129,3, 129,8, 145,3, 148,2, 166,7; IV (CHC13) 3026, 2954, 1720, 1620, 1612, 1284, 1114, 1050 cm'1; UV (EtOH) 235 (ε 12 483); EM (FD) m/z 204 (M+). Anal. Cale. Para C12H1203: C, 70,58; H, 5,92. Verificado: C, 70,33; H, 5,98.

Exemplo 2 Éster metílico do ácido 4-(l-hidroxi-2-[2-amino-4-hidroxipirrolopirimidin-5-il]-etil)benzóico A uma mistura vigorosamente agitada de 2,04 g (10 mmol) de 4-(2,3-di-hidrofurano-2-il)benzoato de metilo em 15 ml de acetonitrilo e 20 ml de água arrefecida a -10 °C adicionou-se gota a gota uma solução de 1,60 g (10 - 14- mmol) de bromo em 5 ml de acetonitrilo. A mistura foi agitada durante 15 minutos após a adição se ter completado. Adicionou-se então 1,26 g (10 mmol) de 2,4-diamino-6-hidroxipirimidina e 2,46 g (30 mmol) de acetato de sódio e a mistura foi aquecida até cerca de 75 °C durante 2 h. Após cerca de 20 minutos o produto começou a precipitar. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente e adicionou-se 20 ml de água. O produto foi filtrado e seco, dando origem a 2,3 g do produto em bruto. O material em bruto foi purificado por mistura em DMF (140 °C), arrefecimento, filtração e novamente mistura em éter. A filtração da suspensão de éter originou 1,54 g (47 %) do produto sob a forma de um pó branco, pf > 260 °C. 'H RMN (DMSO-d6) δ 2,88 (m, 2H), 3,81 (s, 3H), 4,95 (m, 1H), 5,71 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 6,03 (s, 2H), 6,21 (br d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,86 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 10,28 (s, 1H), 10,64 (br s, 1H); EM (FD) m/z 328 (M+). Anal. Cale. Para Ci6H16N404: C, 58,37; H, 5,04; N, 17,29. Verificado: C, 58,53; H, 4,91; N, 17,06.

Exemplo 3 Éster dietílico do ácido N-4-(2,3-di-hidrofuran-2-il)benzoil-L-glutâmico

Uma mistura de 21,7 g (50 mmol) de ácido 4-iodobenzoil-L-glutâmico, 0,314 g (1,2 mmol) de trifenilfosfina, 15,3 g (150 mmol) de acetato de lítio, e 10,2 g (50 mmol) de cloreto de tetrabutilamónio em 100 ml de DMF foi Λ desgaseificada sob vácuo e coberta com uma atmosfera .de azoto. A mistura adicionou-se 269 mg (1,20 mmol) de acetato de paládio (II) e 17,5 g (250 mmol) de di-hidrofurano. A mistura foi aquecida a 75-80 °C com agitação durante 22 horas, tempo após o qual se verificou que a reacção se tinha completado por análise de HPLC de uma aliquota. A mistura reaccional arrefecida foi deitada em 500 ml de água e a suspensão resultante foi extractada com 3 x 200 ml de acetato - 15- de etilo. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com 4 x 200 ml de água, 200 ml de uma solução saturada de NaCl, e seco (Na2SC>4). A evaporação do solvente deu origem a 20,38 g do produto em bruto sob a forma de um óleo. Cromatografia rápida de uma porção de 6,0 g (sílica acetato de etilo - hexano 1:1) deu origem a 1,42 g de éster dietílico do ácido N-4-(2,3-di-hidrofuran-2-il)benzoil-L-glutâmico, pf 81-82 °C. *H RMN (CDCI3) δ 1,22 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,30 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 2,14 (m, 1H), 2,32 (m, 1H), 2,50 (m, 3H), 3,11 (m, 1H), 4,10 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 4,23 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 4,79 (m, 1H), 4,96 (q, J = 2,5 Hz, 1H), 5,55 (m, 1H), 6,46 (q, J = 2,4 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,82 (d, J = 8,2 Hz, 2H; IV (CHC13) 3420, 3012, 1732, 1662, 1622, 1613, 1523, 1496, 1377, 1050 cm'1; UV (EtOH) 202 nm (ε 26 740) 203 nm ((ε 14 900) ; EM (FD) m/z 375 (M+). Anal. Cale. Para C2oH25N06: C, 63,99; H, 6,71; N, 3,73. Verificado: C, 63,84; H, 6,76; N, 3,99. Foi obtido l,6g de produto adiciona] (48% puro por HPLC) por reunião de fraeções adicionais.

Exemplo 4 Éster dietílico do ácido N-4-(l-hidroxi-2-[2-amino-4- hidroxipirrolopirimidin-5-il]etil)benzoil-L-glutâmico A uma mistura de 350 mg (0,93 mmol) de éster dietílico do ácido N-4-(2,3-di-hidrofuran-2-il)benzoil-L-glutâmico, 3,0 ml de acetonitrilo e 3,0 ml de água à temperatura ambiente foi adicionada gota a gota, com agitação, uma solução de 140 mg (0,93 mmol) de bromo em 1 ml de acetonitrilo até que a cor amarela persistisse na mistura. A mistura adicionou-se 229 mg (0,93 mmol) de acetato de sódio e 117 mg de 2,4-diamino-6-hidroxipirimidina e a temperatura foi aumentada até 60 °C. Após 5 h 0 produto começou a precipitar na mistura reaccional. Após 7 h a reacção foi considerada completa através de análise por - 16- HPLC. Adicionou-se água (3 ml) e a mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente e filtrada. O produto foi seco sob vácuo a 50 °C até peso constante. Obteve-se 348 mg (75 %) de éster dietílico do ácido N-4-(l-hidroxi-2-[2-amino-4-hidroxipirrolopirimidin-5-il]etil)benzoil-L-glutâmico sob a forma de um sólido branco. Verificou-se que o material assim obtido era idêntico ao produto obtido no Exemplo 2 por análise de HPLC e RMN. O material foi ainda caracterizado sob a forma do sal p-toluenossulfonato, pf 221-224 °C. Anal. Cale. Para C3iH37N5O10S: C, 55,43; H, 5,55; N, 10,43. Verificado: C, 55,46; H, 5,78; N, 10,15.

Lisboa, 2 de Outubro de 2000

JORGE CRUZ

Agente Oficial da Propriedade Industrial

RUA VICTOR CORDON, 14 1200 LISBOA

Claims

REIVINDICAÇÕES 1. Processo para preparar um derivado da 4-hidroxipirrolo[2,3-d]pirimidina de fórmula

I em que R é NHC*H(COOR1)CH2CH2COOR1 ou OR1; R1 é H ou um grupo protector de carboxilo; a configuração do átomo de carbono designado por * é L; n é 0 ou 1; e A é um grupo arilo que pode ser substituído; ou um sal deste, que compreende (a) a halogenação de um composto de fórmula

COR II em que R e A e * são definidos como atrás; -2- Ί3»ΚΗ£ΠΕ5ν (b) a reacção da 2,4-diamino-6-hidroxipirimidina, ou um sal desta, com o produto da reacção do passo (a), na presença de um solvente polar; (c) opcionalmente hidrolisar o produto da reacção do passo (b) quando R do referido produto reaccional é NHC*H(COOR1)CH2CH2COOR1 e R1 é um grupo protector de carboxilo; e (d) opcionalmente salificação do produto da reacção do passo (b), quando R do referido produto reaccional é NHC*H(COOR1)CH2CH2COOR1 e R1 é H, ou do passo (c).
2. Processo de acordo com a reivindicação 1, em que a referida halogenação se faz usando bromo elementar ou cloro elementar.
3. Processo de acordo com a reivindicação 1, em que R é OR1, R1 ser H ou um grupo protector de carboxilo, A é fenil-l,4-ileno, e j é 0.
4. Processo de acordo com a reivindicação 3, em que R1 é um grupo protector de carboxilo.
5. Processo de acordo com a reivindicação 4, em que R1 é etilo.
6. Processo de acordo com a reivindicação 3, em que R1 é H.
7. Processo de acordo com a reivindicação 1, en que R é NHC*H(COOR1)CH2CH2COOR1 , R1 é H ou um grupo protector de carboxilo, A é fenil-l,4-ileno, e j é 0.
8. Processo de acordo com a reivindicação 4, em que R1 é um -3 - grupo protector de carboxilo.
9. Processo de acordo com a reivindicação 8, em que o referido grupo protector de carboxilo é etilo.
10. Processo de acordo com a reivindicação 7, em que R1 é H. Lisboa, 2 de Outubro de 2000

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