PT1960398E

PT1960398E - Derivados de ácido e de ésteres arilacéticos e suas utilizações como anti-inflamatórios

Info

Publication number: PT1960398E
Application number: PT06819000T
Authority: PT
Inventors: Catherine Leblanc; David Andrew Sandham; Lyndon Nigel Brown; Harinder Pal Singh
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 2005-12-09
Filing date: 2006-12-07
Publication date: 2010-11-26
Also published as: RU2008127439A; CN101326185A; CA2630611A1; BRPI0619529A2; AU2006322206A1; EP1960398B1; AR056887A1; TW200732337A; ATE482957T1; AU2006322206B2; US20080312229A1; DE602006017256D1; JP2009518343A; EP1960398A1; WO2007065683A1; PE20071035A1; GB0525144D0; KR20080065699A

Description

ΡΕ1960398 ι DESCRIÇÃO "DERIVADOS DE ÁCIDO E DE ÉSTERES ARILACÉTICOS E SUAS UTILIZAÇÕES COMO ANTI-INFLAMATÓRIOS" A presente invenção relaciona-se com os compostos orgânicos, suas preparações, e suas utilizações como fár-macos. O WO 2004/069782 descreve o composto ácido 1-iso-propil-2-metil-lH-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il-acético utilizado como um agente anti-inflamatório.

Num primeiro aspecto, a presente invenção proporciona os compostos de fórmula (I)

na forma livre ou de sal, em que R6 é H, Ci-C8-alquilo opcionalmente substituído pelo grupo C3-C15 carbocíclico; W é um grupo carbocíclico C6-Ci5-aromático, um grupo C3-C15-carbocilico, ou uma ligação; 2 ΡΕ1960398 X é uma ligação, C2-C6-alcileno, ou Ci-C8-alcilenooxi ou, quando W é fenilo, X é C2-C8-alcileno ou Ci-C8-alcilenooxi; em que cada grupo C3-Ci5-carbocíclico, grupo carbocíclico aromático de C8-Ci5-membros e cada grupo heterocíclico de 4 até 14 membros, salvo especificação em contrário está independentemente opcionalmente substituído por um ou mais grupos seleccionados a partir de halogéneo, oxo, hidroxi, ciano, amino, nitro, carboxi, Ci-C8-alquilo, halogeno-Ci-C8-alquilo, Ci-C8-alcoxi, Ci-C8-alquilcarbonilo, Ci-C8-alquil-sulfonilo, -S02NH2, (Ci-C8-alquilamino)-sulf onilo, di(Ci-C8-alquil)aminossulfonilo, aminocarbonilo, Ci-C8-alquilamino-carbonilo e di (Ci-C8-alquil) aminocarbonilo, um grupo C3-C15-carbocíclico, um grupo carbocíclico de C6-Ci5 membros, um grupo heterocíclico de 4 até 14 membros, ciano-Ci-C8-al-quilo, hidroxi-Ci-C8-alquilo, Ci-C8-halogenoalquilo, amino-Ci-C8-alquilo, amino (hidroxi) Ci-C8-alquilo, e Ci-C8-alcoxi, opcionalmente substituído por aminocarbonilo; m e n são cada um, independentemente, um número inteiro a partir de 0-3; o grupo e

A

3 ΡΕ1960398

De acordo com a fórmula (I), R1 e R2 são ambos adequadamente H.

De acordo com a fórmula (I), R3 é adequadamente Ci-Cs-alquilo, preferencialmente metilo,

De acordo com a fórmula (I), R4 adequadamente não está presente.

De acordo com a fórmula (I), R5 não está adequadamente presente ou representa um ou dois grupos independentemente seleccionados a partir de halogéneo e.g. cloro, Ci-C8-halogenoalquilo, e.g. trifluorometilo, Ci-C8-alquil-sulfonilo, e.g. metilsulfonilo ou etilsulfonilo.

De acordo com a fórmula (I), R5 é também adequadamente -S02N (R5a) RSb, em que RSa e R5b são adequadamente independentemente seleccionados a partir de Ci-C8-alquilo, e.g. metilo e um grupo C3-Ci5-carbociclico, e.g. ciclo- c - cu r hexilo ou R e R ambos com o atomo de azoto ao qual eles estão ligados adequadamente formam um grupo heterociclico de 4 até 14 membros e.g. 4-morfolinilo. Mais adequadamente, RSa e R5b ambos representam metilo e ciclo-hexilo ou ambos formam um grupo 4-morfolinilo.

De acordo com a fórmula (I), quando W representa fenilo e R5 é Ci-C8-alquilsulfonilo, ou -S02N (R5a)R5b, R5 está mais preferencialmente na posição 4-fenilo. 4 ΡΕ1960398 W é adequadamente um grupo carbocíclico C6-C15-aromático, e.g. fenilo ou um grupo C3-Ci5-carbocíclico e.g. indanilo. Onde W é fenilo, está adequadamente não substituído, 4-substítuido ou 2,4-substítuido por R5.

Quando W é fenilo, X é adequadamente C2-C8-alci-leno, e.g. etileno, 1-propileno, 2-propileno, 3-propileno, ou Ci-Cs-alcilenooxi, e.g. etilenooxi.

Quando W é indanilo (1, 2 ou 3 indanilo), X é adequadamente uma ligação.

Uma forma de realização preferida da presente invenção proporciona os compostos de fórmula (Ia)

na forma livre ou de sal, onde: W representa fenilo e X representa C2-C8-alci-leno, ou Ci-C8-alcilenooxi, ou W representa indanilo e X representa uma ligação; R5 não está presente ou representa um ou dois grupos independentemente seleccionados a partir de halogé-neo, Ci-C8-halogenoalquilo, Ci-C8-alquilsulf onilo, -SO2N- 5 ΡΕ1960398 (R5a)R5b, onde R5a e RSb são independentemente seleccionados a partir de Ci-Cg-alquilo, e um grupo C3-Ci5-carbociclico, C * Cl·, ^ ou R e R ambos com o atomo de azoto ao qual eles estão ligados formam um grupo heterociclico de 4 até 14 membros, e.g. o 4-morfolinilo.

Os termos utilizados na especificação têm os significados seguintes: "Opcionalmente substituído", tal como aqui utilizado, significa o referido grupo poder estar substituído numa ou mais posições por qualquer uma ou qualquer combinação dos radicais enumerados aqui a seguir. "Halogéneo" pode ser flúor, cloro, bromo ou iodo. "Ci-C8-alquilo" representa um Ci-C8-alquilo de cadeia linear ou ramificada, que pode ser, e.g., metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo, pentilo ramificado ou linear, hexilo ramificado ou linear, heptilo ramificado ou linear, ou octilo ramificado ou linear. "Grupo C3-Ci5-carbocíclico", tal como aqui utilizado, representa um grupo carbocíclico com anel de 3- até 15- de átomos de carbono que está saturado ou parcialmente saturado, tal como um C3-C8-cicloalquilo. Os exemplos de grupos C3-Ci5-carbocíclicos compreendem mas não estão limitados a ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclo- 6 ΡΕ1960398 hexilo, ciclo-heptilo, ciclooctilo, ou um grupo bicíclico, tais como o biciclooctilo, o biciclononilo que compreendem o indanilo e indenilo, e biciclodecilo. "Grupo carbocíclico C6-Ci5-aromático", tal como aqui utilizado, representa um grupo aromático com anel de 6 até 15 átomos de carbono. Os exemplos de grupo carbocíclico C6-Ci 5-Aromático compreendem mas não estão limitados ao fenilo, fenileno, benzenotriilo, naftilo, naftileno, nafta-lenotriilo ou antrileno. "Ci-C8-alcoxi", representa o Ci-C8-alcoxi de cadeia linear ou ramificada que pode ser, e.g. metoxi, etoxi, n-propoxi, isopropoxi, n-butoxi, isobutoxi, isobutoxi, sec-butoxi, terc-butoxi, pentoxi ramificado ou linear, hexiloxi ramificado ou linear, heptiloxi ramificado ou linear, octiloxi ramificado ou linear. Preferencialmente, o Ci-C8-alcoxi é o Ci-C4-alcoxi. "Ci-C8-halogenoalquilo", e o Ci-C8-"halogenoalco-xi" representa o Ci-C8-alquilo e o Ci-C8-alcoxi tal como aqui definido anteriormente substituído por um ou mais átomos de halogéneo, preferencialmente um, dois ou três, preferencialmente átomos de flúor, bromo ou cloro. Preferencialmente, o Ci-C8-halogenoalquilo é o Ci-C4-alquilo substituído por um, dois ou três átomos de flúor, bromo ou cloro.

Ci-C8-alquilsulfonilo", tal como aqui utilizado 7 ΡΕ1960398 representa o Ci-C8-alquilo tal como aqui definido anterior-mente ligado ao -SO2-. "Ci-Cs-alquilsulf inilo", tal como aqui utilizado representa o Ci-C8-alquilo tal como aqui definido anterior- mente ligado ao -WO-. "Amino-Ci-C8-alquilo", e "amino-Ci-C8-alcoxi" representa o grupo amino ligado por um átomo de azoto ao Ci-Cg-alquilo, e.g., NH2-(Ci-C8)-, ou ao Ci-C8-alcoxi, e.g. NH2-(Ci-Cs)-O-, respectivamente, tal como aqui definido ante-riormente. "Amino-(hidroxi)-Ci-Cg-alquilo", representa o grupo amino ligado por um átomo de azoto ao Ci-C8-alquilo e o grupo hidroxi ligado por um átomo de oxigénio ao mesmo Ci-Cg-alquilo. "Carboxi-Ci-Cg-alquilo" e "carboxi-Ci-Cg-alcoxi" representa o grupo carboxi ligado por um átomo de carbono a um Ci-Cg-alquilo ou Ci-Cg-alcoxi, respectivamente, tal como aqui definido anteriormente. "Ci-Cg-alquilcarbonilo", "Ci-C8-alcoxicarbonilo" e "Ci-C8-halogenoalquilcarbonilo", representam o Ci-C8-alqui-lo, o Ci-Cg-alcoxi ou o Ci-Cg-halogenoalquilo, respectivamente, tal como aqui definido anteriormente ligado por um átomo de carbono a um grupo carbonilo. "Ci-Cg-alcoxicarbo-nilo" representa o Ci-C8-alcoxi tal como aqui definido ΡΕ1960398 anteriormente em que o átomo de oxigénio do grupo alcoxi está ligado ao átomo de carbono do carbonilo. "Ci-C8-alquilamino" e "di (Ci-Cg-alquil) amino representam o Ci-Cg-alquilo tal como aqui definido anteriormente ligado por um átomo de carbono a um grupo amino. Os grupos Ci-Cg-alquilo em di-(Ci-C8-alquil) amino podem ser iguais ou diferentes. "Ci-Cg-alquilaminocarbonilo" e "di (Ci-Cg-alquil) -aminocarbonilo" representam o Ci-Cg-alquilamino e o di(Ci-Cg-alquil)amino, respectivamente, tal como aqui definido anteriormente ligado por um átomo de azoto a um átomo de carbono de um grupo carbonilo. "Di (Ci-Cg-alquil) amino-Ci-Cg-alquilo" e "di(Ci-C8-alquil)amino-Ci-Cg-alcoxi" representam o di(Ci-C8-alquil) -amino tal como aqui definido anteriormente ligado por um átomo de azoto a um átomo de carbono de um grupo Ci-C8-alquilo ou um Ci-Cg-alcoxi, respectivamente. "Grupo heterocíclico de 4 até 14 membros" refere-se a um anel heterocíclico que contém pelo menos um heteroátomo no anel seleccionado a partir do grupo que consiste em azoto, oxigénio, e enxofre, que pode estar saturado parcialmente ou insaturado (aromático). Os exemplos de grupos heterocíclicos de 4 até 14 membros compreendem mas não estão limitados a furano, azetidina, pirrole, pirrolidina, pirazole, imidazole, triazole, iso- 9 ΡΕ1960398 triazole, tetrazole, tiadiazole, isotiazole, oxadiazole, piridina, piperidina, pirazina, oxazole, isoxazole, pira-zina, piridazina, pirimidina, piperazina, pirrolidina, pir-rolidinona, morfolina, triazina, oxazina, tetra-hidrofura-no, tetra-hidrotiofeno, tetra-hidrotiopirano, tetra-hidro-pirano, 1,4-dioxano, 1,4-oxatiano, indazole, quinolina, indazole, indole ou tiazole. O grupo heterocíclico de 4 até 14 membros pode ser substituído ou não-substituído. Os substituintes preferidos compreendem halogéneo, ciano, hi-droxi, carboxi, nitro, Ci-C8-alquilo, Ci-C8-alquilcarbonilo, ciano-Ci-C8-alquilo, hidroxi-Ci-C8-alquilo, Ci-C8-halogeno-alquilo, amino-Ci-C8-alquilo, amino (hidroxi) Ci-CB-alquilo e Ci-C8-alcoxi opcionalmente substituído por aminocarbonilo. Os substituintes especialmente preferidos compreendem halogéneo, oxo, Ci-C4-alquilo, Ci-C4-alquilcarbonilo, hidroxi-Ci-C4-alquilo, C4-C4-halogenoalquilo, amino-Ci-C4-alquilo e amino(hidroxi)C4-C4-alquilo.

Através desta especificação e nas reivindicações que se seguem, salvo o contexto requeira indicação em contrário, a palavra "compreendem" ou variações, tais como "compreende" ou "que compreende", deverá ser entendido implicar a inclusão de um número inteiro determinado ou passo ou grupo de números inteiros ou passos mas não a exclusão de qualquer outro número inteiro ou passo ou grupo de números inteiros ou passos.

Quando na fórmula (I), m ou n são 2, os dois substituintes podem ser iguais ou diferentes. Onde m ou n 10 ΡΕ1960398 são 3, dois dos substituintes ou todos podem ser iguais ou os três podem ser diferentes.

Ainda num outro aspecto, a presente invenção proporciona a utilização de um composto de fórmula (I) em qualquer das formas de realização supracitadas, na forma livre ou de sal, para a produção de um medicamento para o tratamento de um estado patológico inflamatório ou alérgico, especialmente para uma doença de inflamação ou obstrução das vias aéreas respiratórias.

Sais e isómeros

Muitos dos compostos representados pela fórmula (I) são capazes de formar sais de adição de ácido, especialmente sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis. Os sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis do composto de fórmula (I) compreende os de ácidos inorgânicos, e.g., ácido halidricos, tais como o ácido clorídrico ou o ácido bromídrico; o ácido nítrico, o ácido sulfúrico, o ácido fosfórico; e os ácidos orgânicos, e.g., os ácidos monocarboxílicos alifáticos, tais como o ácido fórmico, o ácido acético, o ácido difenilacético, o ácido trifenilacético, o ácido caprílico, o ácido diclo-roacético, o ácido trifluorocloroacético, o ácido hipúrico, o ácido propiónico, e o ácido butírico; os ácidos hidro-xialifáticos, tais como o ácido láctico, o ácido cítrico, o ácido glucónico, o ácido mandélico, o ácido tartárico ou o ácido málico; os ácidos dicarboxílicos, tais como o ácido 11 ΡΕ1960398 adipico, o ácido aspártico, o ácido fumárico, o ácido glu-tâmico, o ácido maleico, o ácido malónico, o ácido sebá-cico, ou o ácido succínico; os ácidos carboxilicos aromáticos, tais como o ácido benzóico, o ácido p-cloro-benzóico, ou o ácido nicotínico; os hidroxiácidos aromáticos tais como o ácido o-hidroxibenzóico, o ácido p-hidroxibenzóico, o ácido l-hidroxinaftaleno-2-carboxílico ou o ácido 3-hidroxinaftaleno-2-carboxílico; e os ácidos sulfónicos, tais como o ácido etanossulfónico, o ácido etano-1,2-dissulfónico, o ácido 2-hidroxietano-sulfónico, o ácido metanossulfónico, o ácido (+)-cânfor-10-sulfónico, o ácido benzenossulfónico, o ácido naftaleno-2-sulfónico, o ácido naftaleno-1,5-disssulfónico ou o ácido p-toluenos-sulfónico. Estes sais podem ser preparados a partir de compostos de fórmula (I) por procedimentos de formação de sais conhecidos.

Os compostos de fórmula (I) que contêm grupos acidicos, e.g., grupos carboxilo, também são capazes de formar sais com as bases, em especial, as bases farmaceu-ticamente aceitáveis, tais como as bem conhecidas na matéria; estes sais adequados compreendem os sais de metais, especialmente, os sais de metais alcalinos ou de metais alcalino-terrosos, tais como os sais de sódio, de potássio, de magnésio, de cálcio, de zinco; ou sais com amónia ou com aminas orgânicas ou bases heterocíclicas farmaceuticamente aceitáveis, tais como a benetamina, a arginina, a benza-tina, a dietanolamina, a 4-(2-hidroxi-etil)morfolina, a 1-(2-hidroxietil)pirrolidina, a N-metil-glucamina, a pipera- 12 ΡΕ1960398 zina, a trietanolamina ou a trometamina. Estes sais podem ser preparados a partir dos compostos de fórmula (I) por procedimentos de formação de sais conhecidos.

Nestes compostos em que existe um carbono assimétrico ou um eixo de quiralidade os compostos existem nas formas isoméricas opticamente activas individuais ou como suas misturas. A presente invenção engloba ambos os isómeros opticamente activos R e S individuais, bem como as misturas, e.g., as respectivas misturas racémicas ou diastereiosómericas.

Os compostos preferidos específicos de fórmula (I) estão descritos em seguida nos Exemplos. A invenção também proporciona um processo para a preparação de compostos de fórmula (I), na forma livre ou de sal, que compreende os passos de: (I) (A) para a preparação de compostos de fórmula (I), em que R6 é H, clivando o grupo éster -COOR6 num composto de fórmula (I),

(í) 13 ΡΕ1960398 em que R6 é Ci-C8-alquilo opcionalmente substituído por um grupo C3-C15 carbocíclico ou um grupo C3-C15 carbocíclico e R1, R2, R4, R5, A, D, W, X, m e n são tal como definidos anteriormente; ou (B) para a preparação de compostos de fórmula (I), em que R6 é Ci-C8-alquilo opcionalmente substituído por um grupo C3-Ci5 carbocíclico ou um grupo C3-C15 carbocíclico, que reage com um composto de fórmula (II),

em que R6 é Ci-Cs-alquilo opcionalmente substituído por um grupo C3-C15 carbocíclico ou um grupo C3-Ci5 carbocíclico e R1, R2, R4, A, D, e n são tal como definidos anteriormente com um composto de fórmula (III), G-X-W-(R5) n (III) em que G é uma unidade de saída, e.g., um átomo de halogéneo; R5, W, X e n são tal como definidos anteriormente; e (ii) recuperação do composto resultante de fórmula (I) na forma livre ou de sal. A variante do processo (A) pode ser realizada 14 ΡΕ1960398 utilizando os métodos conhecidos (ou analogamente tal como a seguir descrito nos Exemplos) para a clivagem dos grupos carboxilico éster e pode ser realizado in situ após a preparação de um composto de fórmula (I) em que R6 é o Ci-C8-alquilo opcionalmente substituído por um grupo C3-C15-carbociclico ou um grupo C3-Ci5-carbociclico, I. Por exemplo, o composto de fórmula (I) em que R6 é Ci-C8-alquilo opcionalmente substituído pelo grupo C3-Ci5-carbociclico ou um grupo C3-Ci5-carbocíclico, que está convenientemente em solução num solvente orgânico polar ou uma sua mistura com água, pode reagir com uma base inorgânica aquosa, tal como o NaOH para hidrolisar o grupo éster; quando a base é o NaOH, a reacção pode ser realizada a uma temperatura de 10-40°C, convenientemente à temperatura ambiente. A variante do processo (B) pode ser realizada utilizando os procedimentos conhecidos ou analogamente tais como a seguir descritos nos Exemplos. Por exemplo, 0 composto de fórmula (II) pode reagir com um halogeneto de alquilo de fórmula (III), em que G é o halogéneo; e R5, W, X e n estão definidos tal como anteriormente, na presença de uma base, tal como o NaH; a reacção pode ser realizada num solvente orgânico, e.g., um solvente polar aprótico, tal como a N, N-dimetilf ormamida (DMF) e pode ser realizada a 10-40°C, convenientemente à temperatura ambiente .

Os compostos de fórmula (II) são conhecidos ou tal como podem ser obtidos por métodos conhecidos, e.g., 15 ΡΕ1960398 descrito no U.S. Patent No. 3 320 268, ou analogamente como a seguir descrito nos Exemplos. Os compostos de fórmula (III) são conhecidos ou podem ser obtidos por métodos conhecidos ou analogamente como a seguir descritos nos Exemplos.

Os compostos de fórmula (I) na forma livre podem ser convertidos na forma de sal, e vice-versa, de um modo convencional. Os compostos na forma livre ou de sal podem ser obtidos na forma de hidratos ou solvatos que contêm um solvente utilizado para a cristalização. Os compostos de fórmulas (I) e (II) podem ser recolhidos a partir das misturas reaccionais e purificados de um modo convencional. Os isómeros, tais como os enantiómeros, podem ser obtidos de um modo convencional, e.g., por cristalização fraccio-nada, resolução quiral por HPLC ou sintese assimétrica a partir de materiais de partida correspondentemente e assi-metricamente substituídos, e.g., opticamente activos.

Ensaio e Utilização Farmacêuticos

Os compostos de fórmula (I) e (II) e os respec-tivos sais farmaceuticamente aceitáveis, aqui a seguir mencionados como alternativos como os "agentes da invenção" são úteis como fármacos. Em especial, os compostos têm boa actividade moduladora de receptores de CRTh2 e podem ser ensaiados nos ensaios seguintes. 16 ΡΕ1960398

Protocolo de ensaio de ligação por filtração.

Determinou-se a ligação de moduladores CRTh2 utilizando as membranas preparadas a partir de células de Ovary Hamster Chinese (CHO.Kl-CRTh2) que expressam o CRTh2 do ser humano. Para produzir a membrana celular (CHO.Kl-CRTh2) recolheram-se as células cultivadas em frascos cilíndricos utilizando o tampão de dissociação de células (Invitrogen). As células foram peletizadas por centrifugação (167 g, 5 min) . Incubou-se o pelete de células em tampão hipotónico (Tris-OH 15 mM, MgCl2 2 mM, EDTA 0,3 mM, EGTA 1 mM, 1 x Complete™ tablet) a 4°C durante 30 min. Homogeneizaram-se as células a 4°C utilizando uma Polytrone® (IKA Ultra Turrax T25) durante 5 disparos de 1 segundo. Centrifugou-se o homogeneizado (Beckman Óptima TM TL Ultra-centrifuge, 48000 g, 30 min a 4°C). Retirou-se o sobrena-dante e ressuspendeu-se o pelete de membrana em tampão de homogeneização (Tris-OH 75 mM, MgCl2 12,5 mM, EDTA 0,3 mM, EGTA lmM, 250 mM de Sacarose, Complete™ tablet) . Recolheram-se as alíquotas das preparações de membrana e guardaram-se a 80°C. Estimou-se o conteúdo da proteína utilizando o Bradford Protein Assay Dye (Bio Rad).

Determinou-se a ligação de [3H]-PGD2 (157 Ci/mmol) às membranas CHO.Kl-CRTh2 na ausência (ligação total) e na presença (ligação não específica) de PGD2 não marcado (ΙμΜ). A subtracção do cpm (contagens por minuto) de ligação de [3H]-PGD2 na presença de excesso de PGD2 não marcado a partir do que é observado na ausência de excesso 17 ΡΕ1960398 de PGD2 não marcado é definido como ligação especifica. Os moduladores CRTh2 activos podem competir com [3H]-PGD2 para a ligação ao receptor de CRTh2 e são identificados numa diminuição do número cpm de ligações.

Realizou-se o ensaio em placas de 96 poços Greiner U-bottomed, num volume final de 100 μύ por poço. As membranas CHO.Kl-CRTh2 foram diluidas num tampão de ensaio (HEPES-KOH 10 mM (pH 7,4), EDTA 1 mM e MnCl2 10 mM) e adicionaram-se 10 pg a cada poço. Diluiu-se o [3H]-PGD2 num tampão de ensaio e adicionou-se a cada poço até uma concentração final de 2,5 nM. Para determinar a ligação não especifica, a ligação de [3H]-PGD2 ao receptor de CRTh2 competiu com a utilização de PGD2 não-marcado numa concentração de poço final de 1 μΜ. Fez-se a experiência em triplicado, com reagentes adicionados tal como se segue: - 25 μΐϋ de tampão de ensaio para a ligação total ou 25 μύ de PGD2 para determinar a ligação não-especifica - 25 μΐ, de [3H]-PGD2 - 50 μύ de membranas - 25 pL do composto de ensaio em DMSO/tampão de ensaio.

Incubaram-se as placas à temperatura ambiente num shaker durante 1 hora, e depois recolheram-se (Tomtec Harvester 9600) em placas de filtro GF/C utilizando o tampão de lavagem (HEPES-KOH 10 mM, pH 7,4). Secou-se a 18 ΡΕ1960398 placa durante 2 horas, antes da adição de Micro-Scint 20™ (50 μΐΟ e selou-se com TopSeal-S™. Depois fez-se a contagem das placas utilizando um instrumento Packard Top Count. Leram-se as placas no Packard Topcount com o programa de 3H Scintillation (1 min por poço).

Registaram-se os valores de Ki (constante de dissociação para a inibição) para os moduladores de CRTh2. Determinaram-se os valores de Ki utilizando o software Sigma Plot™, que utiliza a equação de Cheng-Prussoff.

Ki = IC50/l+[S]/Kd em que S é a concentração do radioliqando e Kd é a constante de dissociação.

Protocolo de ensaio funcional de CRTH2cAMP

Realizou-se este ensaio em células CHO.Kl-CRTh2. Gerou-se o cAMP na célula por estimulação das células com a forscolina 5 μΜ, um activador adenilato ciclase. Adicionou-se o PGD2 para activar o receptor de CRTh2 que resulta numa atenuação da acumulação de cAMP induzido pela forscolina. Ensaiaram-se os antagonistas de CRTh2 potenciais relativamente à sua capacidade para inibir a atenuação PGD2-me-diada da acumulação de cAMP nas células CHO.Kl-CRTh2 induzida pela forscolina.

Para cada valor da concentração na curva de dose- 19 ΡΕ1960398 resposta, prepararam-se os compostos ensaiados, em tampão de ensaio de estimulação (HBSS, HEPES 5 mM, IBMX 10 μΜ ± 0,1% de albumina de soro humano) que contém o DMSO (3% vol/vol) e adicionou-se a uma placa de ensaio 5 μΕ/poço (384 poços em optiplate branco).

As CHO.Kl-CRTh2 cultivadas em frascos de cultura de tecidos foram lavadas com pbs e recolhidas com o tampão de dissociação. Lavaram-se as células com PBS e ressus-penderam-se no tampão de estimulação numa concentração de 0,4 x 108/mL e adicionaram-se à placa de ensaio (10 μΙ/poço).

Incubou-se a placa de ensaio à temperatura ambiente num shaker durante 15 minutos.

Preparou-se uma mistura de agonistas (Prostaglan-dinas D2 10 mM) e forscolina 5 μΜ em tampão de ensaio de estimulação e adicionou-se à placa de ensaio (5 μΙ/poço).

Adicionalmente, diluiu-se em série um padrão de cAMP em tampão de ensaio de estimulação e adicionou-se para separar os poços vazios na placa de ensaio (20 pL/poço) . O padrão de cAMP permite a quantificação de cAMP gerado nas células CHO.Kl-CRTh2. incubou-se a placa de ensaio à temperatura ambiente num shaker durante 60 minutos. 20 ΡΕ1960398

Adicionou-se um tampão de lise de células (tampão de lise: Milli-Q H20, HEPES 5 mM, 0,3% de Tween-20, 0,1% de albumina de soro humano) a uma mistura de gotas (contendo gotas de receptor Alphascreen™ anti-cAMP 0,06 unidades^L, Alphascreen™ gotas de dador revestido de streptavidin 0,06 unidades/pL, cAMP biotinado 0,06/pL, IBMX 10 μΜ) preparado em condições de ausência de luz 60 minutos antes da adição à placa de ensaio. Adicionou-se a mistura de lise resultante a todos os poços da placa de ensaio (40 pL/poço) .

Selou-se a placa de ensaio com Topseal-S™ e incubou-se às escuras à temperatura ambiente num shaker durante 45 minutos. Depois fez-se a contagem da placa

TM utilizando um instrumento Packard Fusion .

As contagens por minuto resultantes foram convertidas em cAMP nM por utilização da curva padrão de cAMP preparada. Depois determinaram-se os valores de IC50 (concentração de antagonista de CRTh2 requerida para inibir 50% da atenuação mediada por PGD2 da acumulação de cAMP induzida pela forscolina nas células de CHO.Kl-CRTh2) utilizando o software Prism . 0(s) composto(s) do(s) Exemplo(s) daqui em diante têm valores de Ki no ensaio de ligação SPA geralmente abaixo de 1 μΜ. Por exemplo, o composto do Exemplo 1 tem um valor de Ki de 0,716 μΜ. 21 ΡΕ1960398

Os compostos de fórmulas (I) e (II), na forma livre ou de sal, são moduladores, do quimioatractor de proteína-G-acoplada do receptor de CRTh2, expressos em células Th2, eosinófilos e basófilos. O PGD2 é o ligando natural para CRTh2. Assim, os moduladores que inibem a ligação de CRTh2 e PGD2 são úteis no tratamento de estados alérgicos e anti-inflamatórios. O tratamento de acordo com a invenção pode ser sintomático ou profiláctico. Os "moduladores" tais como aqui utilizados pretendem englobar os antagonistas, agonistas, antagonistas parciais, e/ou agonistas parciais. Preferencialmente, os moduladores são antagonistas. Em conformidade, os agentes da invenção são úteis no tratamento de doenças de inflamação ou obstrução das vias aéreas respiratórias, que resultam e.g., na redução de danos nos tecidos, da inflamação das vias aéreas respiratórias, da hiper-reactividade brônquica, da progressão da doença ou da recaída. As doenças de inflamação ou obstrução das vias aéreas respiratórias para as quais é aplicável a presente invenção compreendem a asma qualquer que seja o tipo ou a génese, que compreende quer a asma intrínseca (não-alérgica) ou a asma extrínseca (alérgica), asma benigna, asma moderada, asma aguda, bronquite asmática, asma induzida por exercício físico, asma ocupacional e a asma induzida no seguimento de infecção bacteriana. 0 tratamento da asma é também para ser entendido como englobando o tratamento de sujeitos, e.g., com menos de 4 ou 5 anos de idade, que demonstram os sintomas ofegantes e diagnosticados ou de provável diagnóstico de "crianças ofegantes", uma categoria de doentes considerada 22 ΡΕ1960398 de maior preocupação médica e actualmente identificadas como estando numa fase incipiente ou precoce de asmáticos. (Por conveniência este estado asmático em especial é referido como "síndrome de criança ofegante"). A eficiência profilática no tratamento da asma será evidenciada pela frequência reduzida ou gravidade dos sintomas do ataque, e.g., de ataque broncoconstritor ou asmático agudo, da melhoria da função pulmonar ou melhoria da hiper-reactividade das vias respiratórias. Pode ainda ser evidenciado por condições reduzidas para outras, terapias sintomáticas, í.e., terapia para ou com vista a restringir ou abortar o ataque sintomático quando ele ocorre, e.g., anti-inflamatório (e.g., corticosteróides) ou bronco-dilatador. O beneficio profiláctico na asma pode, em particular, ser evidente nos sujeitos prostrados propensos à "prostração matinal". A "prostração matinal" é reconhecida como um sindrome asmático, comum a uma percentagem substancial de asmáticos e caracterizado pelo ataque de asma, e.g., cerca de entre as 4-6 horas a.m. í.e., a um tempo normalmente substancialmente afastado de qualquer terapia de asma sintomática previamente administrada.

As outras doenças e estados patológicos inflamatórios ou obstrutivos das vias respiratórias para os quais a presente invenção é aplicável compreendem a doença pulmonar grave (DPG), o sindrome de dificuldade respiratória no adulto (SDRA), a doença de obstrução pulmonar crónica, doenças pulmonares ou doença das vias respiratórias (DPOC, 23 ΡΕ1960398 DP ou DVR) que compreendem a bronquite crónica ou a dispneia a elas associada, o enfisema, bem como a exacerbação da hiper-reactividade das vias aéreas respiratórias consequente da terapia com outros fármacos, em especial, outra terapia com fármacos inalados. A invenção também é aplicável ao tratamento da bronquite de qualquer tipo ou génese que compreende e.g., a bronquite aguda, "arachidic", catarral, de garrotilho, tisica ou crónica. As outras doenças das vias aéreas respiratórias obstruídas ou inflamatórias para as quais a presente invenção é aplicável compreendem a pneumoconiose (uma doença dos pulmões inflamatória, vulgarmente ocupacional, frequentemente acompanhada por obstrução das vias aéreas respiratórias, quer crónica quer aguda, e ocasionada por inalação repetida de poeiras) ou de qualquer tipo ou génese que compreendem e.g., a aluminose, antracose, asbestose, calicose, ptilose, siderose, silicose, tabacose e bissinose.

Dando conta da sua actividade anti-inflamatória, em especial, relativamente à inibição da activação dos eosinófilos, os agentes da invenção também são úteis no tratamento de doenças relacionadas com a inibição da activação de eosinófilos, em especial, doenças das vias aéreas respiratórias relacionadas com a eosinofilia, e.g., que envolvem a infiltração eosinofilica mórbida de tecidos pulmonares que compreendem a hiper-eosinofilia dado que afecta os pulmões e/ou as vias aéreas respiratórias, bem como e.g., as doenças das vias aéreas respiratórias, relacionadas com os eosinófilos em consequência ou concomitan- 24 ΡΕ1960398 temente com o síndrome de Lõffer; pneumonia eosinofílica; parasitária, em especial, metazoário, infestação que compreende a eosinofilia tropical, a aspergilose broncopul-monar; a poliartrite nodosa que compreende o sindrome de Chung-Strauss; o granuloma eosinofilico; e as doenças que afectam as vias aéreas respiratórias ocasionadas por reacções aos fármacos.

Os agentes da invenção também são úteis no tratamento de estados alérgicos ou inflamatórios da pele, e.g., psoríase, dermatite de contacto, dermatite atópica, alope-cia areata, eritema multiforme, dermatite herpetiforme, escleroderma, vitiligo, angeite de hipersensibilidade, urticária, penfigóide boloso, lúpus eritematoso, pênfigo, epidermólise bolosa adquirida e outros estados inflamatórios ou alérgicos da pele.

Os agentes da invenção também podem ser utilizados para o tratamento de outras doenças ou estados patológicos, em especial, doenças ou estados patológicos com uma componente inflamatória, e.g., tratamento de doenças ou estados patológicos do olho, tal como a conjuntivite, a queratoconjuntivite sicca e a conjuntivite vernal; as doenças que afectam o nariz que compreendem a rinite alérgica; e a doença inflamatória, na qual estão implicadas as reacções autoimunes ou com uma componente autoimune ou etiologia, que compreende as doenças hematológicas autoimunes, e.g., anemia hemolitica, anemia aplástica, anemia pura de glóbulos vermelhos e trombocitopenia; lúpus eritematoso 25 ΡΕ1960398 sistémico; policondrite; esclerodoma; granulomatose Wege-ner; dermatomiosite; hepatite crónica activa; miastenia grave; sindrome de Steven-Johnson; esprue; doença do intestino inflamado, e.g., colite ulcerosa e doença de Crohn's; oftalmopatia endócrina; doença de Grave; sarcoidose; alve-olite; pneumonite de hipersensibilidade crónica; esclerose múltipla; cirrose biliar primária; uveíte (anterior e posterior); queratoconjuntivite sicca e a conjuntivite vernal; fibrose pulmonar intersticial; artrite psoriática; e glomerulonefrite, com e sem sindrome nefrótico, e.g., que compreendem o sindrome nefrótico idiopático ou a nefropatia de variação minai.

As outras doenças ou estados patológicos que podem ser tratados com os agentes da invenção compreendem o choque séptico; a artrite reumatóide; a osteoartrite; as doenças proliferativas, tais como o cancro, a mastocitose, a aterosclerose, a rejeição de aloenxerto seguinte ao transplante; o ataque cardíaco, a obesidade, a restenose; a diabetes mellitus tipo I (diabetes juvenil) e a diabetes mellitus tipo II; doenças com diarreia; danos da isquémia/reperfusão; retinopatia ou retinopatia induzida por oxigénio hiperbárico; e os estados patológicos carac-terizados por pressão intra-ocular ou por secreção de humor aquoso ocular, tal como o glaucoma. As outras doenças ou estados patológicos que podem ser tratados com os agentes da invenção compreendem a dor neuropática tal como descrito no WO 05/102 338. 26 ΡΕ1960398 A eficácia de um agente da invenção na inibição de estados patológicos inflamatórios e.g., nas doenças inflamatórias das vias aéreas respiratórias, pode ser demonstrada num modelo animal, e.g., um modelo de murganho ou de rato; da inflamação das vias aéreas respiratórias e outros estados patológicos, e.g., tal como descrito por Szarka et al., J Immunol Methods, Vol 202, pp 49-57 (1997); Renzi et al, Am Rev Respir Dis, Vol. 148, pp 932-939 (1993); Tsuyuki et al., J Clin Invest, Vol 96, pp. 2924-2931 (1995); Cernadas et al., Am J. Respir Cell Mol Biol, Vol 20, pp. 1-8(1999); and Williams and Galli, J Exp Med, Vol 192, pp 455-452 (2000).

Os agentes da invenção também são úteis como agentes co-terapêuticos para utilizar em combinação com outros fármacos, tais como os fármacos anti-inflamatórios, bronco-dilatadores ou anti-histamínicos, particularmente no tratamento de doenças inflamatórias ou obstrutivas das vias aéreas respiratórias, tais como as anteriormente mencionadas, e.g., como potenciadores da actividade terapêutica destes fármacos ou como um meio de redução da dosagem requerida ou como uma redução de efeitos colaterais destes fármacos. Um agente da invenção pode ser misturado com outra substância farmacêutica numa composição farmacêutica fixa ou pode ser administrado separadamente, antes, simultaneamente, com ou após a outra substância farmacêutica. Em conformidade a invenção compreende uma combinação de um agente da invenção tal como anteriormente descrito, com uma substância fármaco anti-inflamatória, bronco-dilatadora, 27 ΡΕ1960398 anti-histamínica ou anti-tússica, agente esse da invenção e fármaco esse, que estão na mesma ou diferente composição farmacêutica.

Estes fármacos anti-inflamatórios compreendem os

esteróides, em especial, os glucocorticosteróides, tais como a budesonida, o dipropionato de beclametasona, o propionato de fluticasona, a ciclesonida ou o furoato de mometasona; ou os esteróides, descritos no WO 02/88167, WO 02/12266, WO 02/100879, WO 02/00679 /especialmente os dos Exemplos 3, 11, 14, 17, 19, 26, 34, 37, 39, 51, 60, 67, 72, 73, 90, 99 e 101), WO 03/035668, WO 03/048181, WO 03/062259, WO 03/064445, e WO 03/072592; os agonistas de receptores glucocorticóides não esteróides, tais como os descritos no WO 00/00531, WO 02/10143, WO 03/082280, WO 03/082787, WO 03/104195 e WO 04/005229; os antagonistas de LTB4, tais como os descritos no U.S. Patent No. 5 451 700; os antagonistas de LTD4, tais como o montelucaste e zafirlucaste; os inibidores de PDE4, tais como o cilomilaste /Ariflo® GlaxoSmithKline), Roflumilast (Byk Gulden), V-11294A (Napp), BAY19-8004 (Bayer), SCH-351591 (Schering-Plough), Arofyline (Almirall Prodesfarma), PD189659 (Parke-Davis); AWD-12-281 (Asta Medica) CDC-801 (Celgene); SelCID(TM) CC-10004 (Celgene); KW-4490 (Kyowa Hakko Kogyo), WO 03/104204, WO 03/104205, WO 04/000814, WO 04/000839 e WO 04/005258 (Merck), bem como as descritas em WO 98/18796 e WO 03/39544; agonistas de A2a, tais como os descritos no EP 1052264, EP 1241176, EP 409595A2, WO 94/17090, WO 96/02543; WO 96/02553; WO 96/28319; WO ΡΕ1960398 - 28 -

99/24449, WO 99124450; WO 99/24451; WO 99/38877; WO 99/41267; WO 99/67263, WO 99/67264, WO 99/67265, WO 99/67266, WO 00/23457, WO 00/77018, WO 00/78774, WO 01/23399, WO 01/27130, WO 01/27131, WO 01/60835, WO 01/94368, WO 02/00676, WO 02/22630, WO 02/96462 e WO 03/086408; antagonistas de A2b, tais como os descritos em WO 02/42298; e os agonistas de beta (β)-2-adrenoceptores, tais como o albuterol (salbutamol), metaproterenol, terbu-talina, salmeterol, fenoterol, procaterol, e especialmente o formoterol e os respectivos sais farmaceuticamente aceitáveis, e os compostos (na forma livre, de sal ou sol-vato)de fórmula (I) de WO 00/75114, preferencialmente os compostos dos respectivos Exemplos, especialmente um composto de fórmula

e os respectivos sais farmaceuticamente aceitáveis, bem como os compostos (na forma livre, de sal ou solvato) de fórmula (I) de WO 04/16601. Adicionalmente os agonistas de (β)-2-adrenoreceptores, compreendem os compostos tais como os descritos em WO 99/64035, WO 01/83462, WO 02/066422, WO 02/070490, WO 02/076933, WO 2004/011416 e US 2002/0055651.

Estes fármacos bronco-dilatadores compreendem os 29 ΡΕ1960398 agentes anti-colinérgicos ou anti-muscarinicos, em especial, brometo de ipratrópio, brometo de oxitrópio, sais de tiotrópio e CHF 4226 (Chiesi), mas também os descritos no WO 01/04118, WO 02/51841, WO 02/53564, WO 03/00840, WO 03/87094, WO 04/05285, WO 02/00652, WO 03/33495, WO 03/53966, EP 0424021, US 5171744, E US 3714357.

Estas substâncias fármacos anti-histaminicas co-terapêuticas compreendem o cloreto de cetrizina, o aceta-minofeno, o fumarato de clemastina, a prometazina, a lora-tidina, a desloratidina, a difenidramina, e o cloreto de fexofenadina.

As combinações de agentes da invenção e este-róides, agonistas de (β)-2, inibidores de PDE4 ou antagonistas de LTD4 podem ser utilizadas, e.g., no tratamento de DPOC ou, especialmente da asma. As combinações de agentes da invenção e agentes anticolinérgicos e antimuscarínicos, inibidores da PDE4, agonistas de receptores de dopamina ou antagonistas de LTD4 podem ser utilizadas e.g., no tratamento de asma ou, especialmente, de DPOC.

Outras combinações de agentes da invenção com fármacos anti-inflamatórios são as que com os antagonistas de receptores de quimiocinas, e.g. CCR-1, CCR-2, CCR-3, CCR-5, CCR-6, CCR-7, CCR-8, CCR-9, CCR-10, CXCRl, CXCR2, CXCR3, CXCR4 e CXCR5; especialmente úteis são os antagonistas de CCR-3, tais como os descritos em WO 2002/026723, especialmente a 4-{3-[(S)-4-(3, 4-diclorobenzil)-morfolin-2- 30 ΡΕ1960398 ilmetil]-ureidometil}benzamida e os descritos no WO 2003/077907, WO 2003/007939, WO 2002/102775.

Também especialmente úteis são os antagonistas de CCR-5, tais como os antagonistas SC-351125, SCH-55700 e SCH-D de Schering-Plough; antagonistas Takeda, tais como o N- [ [4- [ [ [6,7-di-hidro-2- (4-metilfenil) -5£f-benzo-ciclo-hepten-8-il]carbonil]amino]fenil]-metil]tetra-hidro-N, N-dimetil-2ff-piran-4-aminiocloro (TAK-770); e os antagonistas de CCR-5, descritos no US 6166037, WO 00/66558 e WO 00/66559.

Os agentes da invenção podem ser administrados por qualquer via apropriada, e.g., oralmente, e.g., na forma de uma comprimido ou cápsula; parentericamente, e.g. intravenosamente; por inalação, e.g., no tratamento de doença inflamatória ou obstrutiva das vias aéreas respiratórias; por via intra-nasal, e.g., no tratamento da rini-te alérgica; topicamente na pele, e.g., no tratamento da dermatite atópica; ou por via rectal, no tratamento de doenças inflamatórias do intestino. A presente invenção também proporciona uma composição farmacêutica que compreende um composto de fórmula (I) na forma livre ou na forma de um sal farmaceuticamente aceitável, opcionalmente em conjunto com um diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável. A composição pode conter um agente co-terapêutico, tal como um fármaco anti- 31 ΡΕ1960398 inflamatório, bronco-dilatador ou anti-histamínico tal como anteriormente aqui descrito. Estas composições podem ser preparadas utilizando os diluentes ou os excipientes convencionais e as técnicas conhecidas na arte galénica. Por isso as formas de dosagem orais podem compreender os comprimidos ou as cápsulas. As formulações para a administração tópica podem tomar a forma de cremes, pomadas, geles, ou sistemas de transferência transdérmica, e.g. adesivos "patches". As composições para inalação podem compreender o aerossol ou outras formulações atomizáveis ou formulações de pó seco.

Quando a composição compreende uma formulação aerossol, esta preferencialmente contém, e.g., um propulsor (HFA) hidro-flúor-alcano, tal como o HFAl34a ou HFA227 ou uma mistura destes, e pode conter um ou mais co-solventes conhecidos na matéria, tais como o etanol, (até 20% em peso); e/ou um ou mais tensioactivos, tais como o ácido oleico ou trioleato de sorbitol; e/ou um ou mais agentes de volume, tais como a lactose. Quando a composição compreende uma formulação de pó seco, esta preferencialmente contém, e.g., o composto de fórmula (I) com um diâmetro de partícula até 10 mícrons, opcionalmente em conjunto com um diluente ou veículo, tal como a lactose, com a distribuição de tamanho de partículas desejada, e um composto que ajuda a proteger contra a performance de deterioração do produto devida à humidade. Quando a composição compreende uma formulação de nebulizador, ela preferencialmente contém, 32 ΡΕ1960398 e.g., o composto de fórmula (I) quer dissolvido, quer suspendido, num veiculo que contém água, um co-solvente, tal como o etanol ou propilenoglicol e um estabilizador, que pode ser um tensioactivo. A invenção compreende: (a) um agente da invenção na forma inalante, e.g., um aerossol ou outra composição atomizada ou em particulado inalante, e.g., na forma micronizada; (b) um medicamento inalante que compreende um agente da invenção na forma inalante; (c) um produto farmacêutico que compreende um tal agente da invenção na forma inalante em associação com um dispositivo de inalação; e (d) um dispositivo de inalação que contém um agente da invenção na forma inalante.

As dosagens dos agentes da invenção utilizadas na prática da presente invenção obviamente variarão dependendo, e.g., do estado a ser tratado, do efeito desejado e do modo de administração. Em geral, as dosagens diárias adequadas para a administração oral são da ordem de 0,01-100 mg/kg. A invenção está ilustrada pelos Exemplos seguintes: 33 ΡΕ1960398

EXEMPLOS

Condições gerais

Os dados de LCMS são obtidos num sistema LC

Agilent 1100 com uma coluna 5 μΜ 4,6 x 100 MS C18 Waters Xterra, que elui com 5-95% de bicarbonato de amónio aquoso 10 mM em acetonitrilo durante 2,5 minutos, com a ionização por electrospray de ião negativo ou 5-95% de água +0,1 TFA em acetonitrilo com a ionização por electrospray de ião positivo. [M+ H]+ refere-se aos pesos moleculares mono- isotópicos. Abreviaturas CH2C12 diclorometano MgS04 sulfato de magnésio aq aquoso DMF N,N-dimetilformamida EtOAc acetato de etilo HC1 ácido clorídrico MeCN acetonitrilo HPLC cromatografia líquida de alta eficiência NaH hidreto de sódio NaOH hidróxido de sódio TFA ácido trifluoroacético Et3N trietilamina MeOH metanol PS-DIEA polistireno-diisopropiletilamina 34 ΡΕ1960398

Exemplo 1

Preparação de ácido (2-Metil-l-fenetil-lH-pirrolo[2,3-b]-piridina-3-il)-acético: a) Éster metilico de ácido (2-Metil-l-fenetil-lH-pirrolo-[2,3-b]piridina-3-il)-acético:

Adicionou-se a uma solução agitada de éster metilico de ácido (2-Metil-lH-indol-3-il)-acético (0,1 g, 0,49 mmol) e Nal (0,073 g, 0,49 mmol) em DMF seco (2 mL) à temperatura ambiente porções de NaH a 95% (0,012 g, 0,49 mmol). Agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante 15 minutos. Depois misturou-se com agitação uma solução obtida no mercado de (2-bromo-etil)-benzeno (0,91 g, 0,49 mmol) em DMF seco (1 mL) com PS-DIEA durante 15 minutos e depois adicionou-se à mistura reaccional. Agitou-se a mistura reaccional a 60°C durante 2 h. Evaporou-se a mistura reaccional in vacuo. A purificação por cromatografia flash em carteiras IST isolute™ C18 leva a um óleo incolor. A purificação adicional por cromatografia flash em sílica gel que utiliza 1:1 iso-hexano: EtOAc, dá o produto desejado; [M+H]+ 309. A uma solução agitada de éster metilico do ácido (2-metil-l-fenetil-lH-pirrolo[2,3 —b]piridina-3-il) (10 mg, 0,032 mmol) em MeOH (0,5 mL) à temperatura ambiente, adicionou-se NaOH(aq) IN (0,5 mL) . Agitou-se a mistura 35 ΡΕ1960398 reaccional à temperatura ambiente durante 1,5 h. Evaporou-se a mistura reaccional in vacuo, diluiu-se com água e acidificou-se até pH ácido com HCL aq., 2N. Adicionou-se CH2C12 e separou-se a fase orgânica. A evaporação in vacuo leva ao produto puro como um sólido branco. [M+H]+ 295.

Exemplo 2

Preparação de ácido [2-Metil-l-(3-fenil-propil)-lH-pirrolo[2,3-b]piridina-3-il]acético:

Preparou-se o composto em epígrafe analogamente ao Exemplo 1 por substituição de (2-bromo-etil)benzeno por (3-bromo-propil)benzeno para dar o ácido [2-Metil-l-(3-fenil-propil)-lH-pirrolo[2,3-b]piridina-3-il]acético; [M+H]+ 309.

Exemplo 3

Preparação de ácido [2-Metil-l-(2-fenoxi-etil)-lH-pirrolo[2,3-b]piridina-3-il]acético:

Preparou-se o composto em epígrafe analogamente ao Exemplo 1 por substituição de (2-bromo-etil)benzeno por (2-bromo-etoxi)benzeno para dar o ácido[2-metil-l-(2-fenoxi-etil)-lH-pirrolo[2, 3-b]piridina-3-il]acético PS. [M+H]+ 311. 36 ΡΕ1960398

Exemplo 7

Preparação de ácido {1-[2-(4-metanossulfonil-fe-nil)-2-oxo-etil-2-metil-lH-pirrolo[2,3-b]piridina-3-il]acético: a) Éster metílico de ácido {1-[2-(4-metanossulfonil-fenil)-2-oxo-etil]-2-metil-lH-pirrolo[2,3-b]piridina-3-il]acético: A uma solução agitada de éster metílico do ácido (2-metil-lH-indol-3-il)acético (1,0 g, 4,9 mmol) e Nal (0,73 g, 4,9 mmol) em DMF seco (10 mL) à temperatura ambiente, adicionou-se aos poucos NaH 95% (0,12 g, 4,9 mmol). Agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante 15 minutos. Depois misturou-se com agitação uma solução de 2-bromo-l-(4-metanossulfonil-fenil)etanona (1,36 g, 4,9 mmol) disponível no mercado em DMF seco com PS-DIEA durante 15 minutos e em seguida adicionou-se à mistura reaccional. Agitou-se a mistura reaccional a 55°C durante 2 h. Diluiu-se a mistura reaccional com água (150 mL) e extraiu-se com diclorometano (2x 60 mL). Combinaram-se e concentraram-se os extractos orgânicos até à secura in vacuo. Realizou-se a trituração a partir de acetato de etilo seguida da adição de iso-hexano para precipitar as impurezas sólidas que se retiraram por filtração. Concentrou-se o filtrado até à secura in vacuo e recristalizou-se a partir de metanol para dar o produto desejado como um sólido branco; [M+H]+ 401. 37 ΡΕ1960398 b) Éster metílico de ácido {1-[2-hidroxi-2-(4-metanossul-fonil-fenil)-etil]-2-metil-lH-pirrolo[2,3-b]piridina-3- il]acético: A uma suspensão agitada de éster metílico de ácido {1-[2-Hidroxi-2-(4-metanossulfonil-fenil)-etil]-2-me-til-lH-pirrolo[2,3-b]piridina-3-il]acético (60 mg, 0,15 mmol) em MeOH seco (4 mL) a 10°C adicionou-se o borohidreto de sódio (12 mg, 0,32 mmol). Agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante 1 h. Evaporou-se a mistura reaccional in vacuo para remover o metanol e em seguida desactivou-se com água (10 mL) e extraiu-se com dicloro-metano (2 x 20 mL). Os extractos orgânicos foram combinados e concentrados à secura in vacuo. Deram o produto desejado como uma espuma branca; [M+H]+ 403. c) Éster metílico de ácido {1-[2-Iodo-2-(4-metanossulfonil-fenil )-etil]-2-metil-lH-pirrolo[2,3-b]piridina-3-il]acético: A uma solução agitada de trifenilfosfina (39 mg, 0,14 mmol) em diclorometano seco (2 mL) à temperatura ambiente adicionou-se iodo (28 mg, 0,11 mmol). Agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante 15 min. Após este tempo, adicionou-se o imidazole (11 mg, 0,16 mmol) seguido da adição de éster metílico de ácido {1— [2— Hidroxi-2-(4-metanossulfonil-fenil)-etil]-2-metil-lH-pirro-lo[2,3-b]piridina-3-il]acético (40 mg, 0,10 mmol) como uma solução em diclorometano seco (1 mL) . Agitou-se a mistura 38 ΡΕ1960398 reaccional à temperatura ambiente durante 2 h. Concentrou-se a mistura reaccional até à secura in vacuo a temperatura ambiente e depois repartiu-se entre diclorometano/água (20 mL:10 mL) . Concentrou-se a fase orgânica até à secura in vacuo à temperatura ambiente para dar o produto em bruto; [M+H]+ 513. d) Éster metílico de ácido {1-[2-(4-Metanossulfonil-fenil)-2-oxo-etil]-2-metil-lH-pirrolo[2,3-b]piridina-3-il]acético: A uma solução agitada de éster metilico de ácido {1-[2-Iodo-2-(4-metanossulfonil-fenil)-etil]-2-metil-lH-pirrolo[2,3—b]piridina-3-il]acético (52 mg, 0,10 mmol) em DMSO seco (2 mL) adicionou-se à temperatura ambiente borohidreto de sódio (8 mg, 0,20 mmol). Agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante 16 h. Desactivou-se a mistura reaccional com água (20 mL) e extraída com diclorometano (2 x 40 mL). Combinaram-se as fases orgânicas e evaporaram-se in vacuo. A purificação por cromatografia flash em IST isolute™ cartucho C18 utilizando o TFA 0,1% em água/MeCN, deu o produto desejado; [M+H]+ 387. e) Ácido {1-[2-(4-metanossulfonil-fenil)-2-oxo-etil]-2-metil-lH-pirrolo[2,3-b]piridina-3-il]acético: A uma solução agitada de éster metílico de ácido {1-[2-(4-Metanossulfonil-fenil)-2-oxo-etil]-2-metil-lH-pirrolo [2,3—b]piridina-3-il]acético (10 mg, 0,026 mmol) em MeOH (0,5 mL) à temperatura ambiente, adicionou-se NaOH aq 39 ΡΕ1960398 IN (0,5 mL) . Agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante 1 h. Diluiu-se a mistura reaccional com água (10 mL) e extraiu-se com diclorometano (20 mL) . A purificação por cromatografia flash em IST isolute™ cartucho C18 que utiliza o TFA 0,1% em água/MeCN deu o produto desejado; [M+H]+ 373.

Os exemplos seguintes foram preparados utilizando os processos aqui descritos. Prepararam-se os intermediários pelos métodos conhecidos pelos especialistas na

Exemplo R 1 CT' 2 3 4 CH, 5 Cr 6 Oo- 40 ΡΕ1960398 (continuação)

Exemplo R 7 ch.^AA 0 0 8 /Τ' 0 :Q 9 :S”iO CH/'\S " Ô 10 Ow ' b © 0 11 b o © 12 Í3í,v_ * '§ -~·· έϊ ·νψ © o 13 ÍA-^S, $ © 14 ÍM/^sAAq jsuy © â 15 m © © 16 //'ft © e 17 ^ íV^'· ULXA Ã, o a 18 i% ΡΕ1960398 41 (continuação)

ΡΕ1960398 42 (continuação)

43 ΡΕ1960398 (continuação)

Exemplo R 43 ϋ <ϊ

Lisboa, 18 de Novembro de 2010

Claims

ΡΕ1960398 1 REIVINDICAÇÕES 1. Composto de fórmula (I)

na forma livre ou de sal, em que

I D é

Rs R1 e R2 são H; R3 é Ci-C8-alquilo; R5 é um ou dois grupos independentemente seleccionados a partir de halogéneo, Ci-Cg-halogenoalquilo; Ci-Cs-alquilsul-fonilo ou R5 é -S02N(R5a)R5b, em que R5a e R5b estão independentemente seleccionados a partir Ci-Cg-alquilo, e um grupo C3-Ci5-carbocíclico, ou R5a e R5b ambos com o átomo de azoto ao qual estão ligados formam um grupo heterocíclico de 4- até 14-membros; W é uma ligação, grupo carbociclico Cê-Cis-aromático, ou um grupo C3-Ci5-carbocíclico; 2 ΡΕ1960398 X é uma ligação, C2-C8-alcileno ou Ci-C8-alcilenooxi ou, quando W é fenilo, X é C2-C8-alcileno ou Ci-C8-alcilenooxi; n é 0-3; R6 é H ou Ci-C8-alquilo opcionalmente substituído por um grupo carbocíclico C3-C15; e em que cada grupo C3-C15-carbocíclico, grupo carbocíclico aromático de C8-Ci5 membros e cada grupo heterocíclico de 4 até 14 membros, salvo especificação em contrário está independentemente opcionalmente substituído por um ou mais grupos seleccionados a partir de halogéneo, oxo, hidroxi, ciano, amino, nitro, carboxi, Ci-C8-alquilo, halogeno-Ci-C8-alquilo, Ci-C8-alcoxi, Ci-C8-al-quilcarbonilo, Ci-C8-alquilsulfonilo, -S02NH2, (Ci-C8-alquil-amino)-sulfonilo, di(Ci-C8-alquilo)aminossulfonilo, amino-carbonilo, Ci-C8-alquilaminocarbonilo e di (Ci-C8-alquil)ami-nocarbonilo, um grupo C3-Ci5-carbocíclico, um grupo carbocíclico aromático de C6-Ci5 membros, um grupo heterocíclico de 4 até 14 membros, ciano-Ci-C8-alquilo, hidroxi-Ci-C8-alquilo, Ci-C8-halogenoalquilo, amino-Ci-C8-alquilo, amino-(hidroxi) Ci-C8-alquilo, e Ci-C8-alcoxi, opcionalmente substituído por aminocarbonilo.
2. Composto de fórmula (I) de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é de fórmula (Ia)

m 3 ΡΕ1960398 na forma livre ou de sal, em que: W é fenilo ou indanilo; X é uma ligação quando W é indanilo e, quando W é fenilo, X é C2-Cs-alcileno ou Ci-C8-alcilenooxi; R5 não está presente ou é um ou dois grupos independentemente seleccionados a partir de halogéneo, Ci-C8-halo-genoalquilo, Ci-C8-alquilsulfonilo, -S02N(R5a)R5b, em que R5a e R5b estão independentemente seleccionados a partir de Ci-C8-alquilo e um grupo C3-Ci5-carbociclico ou R5a e R5b ambos com o átomo de azoto ao qual eles estão ligados formam um grupo heterocíclico de 4- até 14- membros.
3. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2 com a fórmula

em que R é Exemplo R 1 2 3 4 KjF CH, ΡΕ1960398 4 (continuação)
4. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 até 3 para utilização como um fármaco.
5. Composições farmacêuticas que compreendem um composto de acordo com qualquer uma das Reivindicações 1 até 3.

5 ΡΕ1960398 (continuação) Exemplo R 17 Λ Λ*'—'··. CUJ . 0 9 18 9 IT"‘ 19 <5f* ¢: 0 20 * o $ 21 '(3 /¾ 22 23 /γ4ν·''- //¾ ' Ο ΰ 24 ΑΛ^'· kAsJLJ Λ 25 φγγ·^, "A 26 íY^' O 0 27 Jt% © © 28 Q Cf 29 fYY %,A/J *** vV o © 30 Λ 6 ΡΕ1960398 (continuação) Exemplo R 31 coce. ** a a 32 A e o 33 ct* jT Jv "Irt, Λ 34 © © 35 e^jQO* Í3 9 36 fi, Λ 37 «K. A 9 O 38 f*. ιΐ'ί^γΛν··"' ti i j *> Õ ά 39 CM, M //« © © 40 saí, n 41 CM, 0' O 7 ΡΕ1960398 (continuação) Exemplo R 42 n 43 XO- A Ô 0
6. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 até 3 para o tratamento da dor neuro-pática.
7. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 até 3 para o tratamento de um estado patológico inflamatório ou alérgico, especialmente uma doença de inflamação ou obstrução das vias aéreas respiratórias .
8. Processo de preparação de compostos de fórmula (I) tal como definido na Reivindicação 1, na forma livre ou de sal, que compreende os passos de: ΡΕ1960398 i)(A) para a preparação de compostos de fórmula (I), em que R6 é H, com a clivagem do grupo éster -C00R8 num composto de fórmula (I),

em que R6 é Ci-Cs-alquilo opcionalmente substituído por um grupo carbocíclico C3-C15 e R1, R2, R4, R5, A, D, W, X, m e n estão definidos como anteriormente; ou (B) para a preparação de compostos de fórmula (I), em que R6 é Ci-Ce-alquilo opcionalmente substituído por um grupo carbocíclico C3-C15 que reage com um composto de fórmula (II),

em que R é Ci-C8-alquilo opcionalmente substituído por um grupo carbocíclico C3-C15 e R1, R2, R4, A, D, e m estão definidos como anteriormente com um composto de fórmula (III) (III) G-X-W-(R5) n
9 ΡΕ1960398 em que G é uma unidade de saída; R5, W, X e n estão definidos como anteriormente; e (ii) recuperação do composto resultante de fórmula (I) na forma livre ou de sal. Lisboa, 18 de Novembro de 2010