PT1949893E - Derivados de quinazolina úteis para o tratamento da doença arterial periférica e como inibidores de fosfodiesterase - Google Patents

Description

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DESCRIÇÃO "DERIVADOS DE QUINAZOLINA ÚTEIS PARA O TRATAMENTO DE DOENÇA ARTERIAL PERIFÉRICA E COMO INIBIDORES DE FOSFODIESTERASE"

CAMPO DA INVENÇÃO A presente invenção diz respeito a compostos que são úteis para a inibição de fosfodiesterase. Mais especificamente, a presente invenção também proporciona compostos que são úteis para o tratamento ou para a prevenção da doença arterial periférica.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO A doença arterial periférica é caracterizada por um endurecimento das artérias, ou aterosclerose, que têm origem no depósito de gorduras, em particular, nos vasos sanguíneos das pernas. Esta patologia afecta mais de 10% da população adulta e principalmente pessoas com idades superiores a 55 anos. A claudicação intermitente constitui um sintoma da doença arterial periférica e é caracterizado por dor nas pernas ou nas nádegas durante o exercício físico. A claudicação intermitente constitui ainda uma necessidade médica por satisfazer para a qual o único outro tratamento principal parece ser, para além da intervenção cirúrgica por angioplastia com cateter balão, o tratamento com oxpentifilina e hexopal - os quais são agentes não específicos e antigos. A aterosclerose é uma outra designação para o "endurecimentos das artérias" e uma das causas da doença arterial periférica. É um processo de doença no qual o colesterol forma depósitos nas paredes das artérias. Estes depósitos de gordura restringem o fluxo 2 sanguíneo e diminuem o transporte de oxigénio e de nutrientes para diversos órgãos e tecidos do corpo humano. Quando a aterosclerose tem lugar nas artérias das pernas, pode dar origem a claudicação intermitente.

As fosfodiasterases são uma classe de enzimas intracelulares que estão implicadas no metabolismo da adenosina-monofosfato cíclica (cAMP) e de guanosina-monofosfato cíclica (cGMP), nucleótidos que funcionam como mensageiros secundários (ver, v.g., Doherty, 1997, "Oral, Transdermal and Transurethral Therapies for Erectile Dysfunction" em 'Male Infertility and Dysfunction', Hellstrom, ed., Capítulo 34, Springer-Verlag: New York). Foram já descritos diversos inibidores de fosfodiesterase na literatura para diversas utilizações terapêuticas, incluindo o tratamento de doença obstrutiva do pulmão, alergias, hipertensão, angina, insuficiência cardíaca congestiva e depressão (ver, v.g., Goodman e Gilman 'The Pharmacological Basis of Therapeutics', 1996, 9a edição, capítulo 34, McGraw-Hill: New York). A inibição de PDEIII está associada a vasodilatação periférica e efeitos anti-agregatórios e, por tal motivo, anti-trombóticos.

Um composto abrangido pela utilização de acordo com a presente invenção é a 3-hidroxianagrelida. Este composto é um metabolito de anagrelida (ver, por exemplo, o pedido de patente de invenção norte-americana com o número de série 10/762 566, publicado com o número U.S. 20040209907).

Foram já estudados diversos metabolitos de anagrelida na literatura: Erusalimsky et al. (2002) 'Is the platelet lowering activity of anagrelide mediated by its major metabolite 2-amino-5,6-dichloro-3,4-dihydroquinazoline (RL603)?', Exp Hematol. 30:625-7; Lane et al. (2001) 3 'Anagrelide metabolite induces thrombocytopenia in mice by inhibiting megakaryocyte maturation without inducing platelet aggregation'. Exp Hematol. 29:1417-241; e Gaver et al. (1981) 'Disposition of anagrelide, an inhibitor of platelet aggregation'. Clin Pharmacol Ther. 29:381-6.

Constitui um dos objectos da presente invenção proporcionar um tratamento alternativo para a doença arterial periférica, incluindo a claudicação intermitente, e proporcionar novos inibidores de fosfodiesterase.

DESCRIÇÃO ABREVIADA DA INVENÇÃO

De acordo com uma variante, a presente invenção proporciona um composto de fórmula estrutural (II)

H M

m uma sua forma de equilíbrio, um seu sal farmaceuticamente aceitável ou um sal farmaceuticamente aceitável de uma sua forma de equilíbrio, a um paciente que necessite de tal tratamento, em que os símbolos X, Y, Rl e R2 possuem as significações a seguir definidas, para utilização no tratamento da doença arterial periférica, aterosclerose, claudicação intermitente, insuficiência cardíaca congestiva, doenças associadas à vasodilatação ou disfunção sexual.

De acordo com uma variante, a presente invenção proporciona um composto de fórmula estrutural 4

uma sua forma de equilíbrio, um seu sal farmaceuticamente aceitável ou um sal farmaceuticamente aceitável de uma sua forma de equilíbrio, em que o símbolo Rl representa H, alquilo (Ci-C6), alcenilo (C2-C6) , alquinilo (C2-C6), alcoxi (Ci-Ce) ou arilo (C6-Ci0) ; o símbolo R2 representa

Q

0 símbolo R3 representa OH, halogéneo, SH, O-alquilo(Ci~Ce) ou NH2 e cada um dos símbolos X e Y representa independentemente H ou halogéneo, utilizáveis de acordo com a invenção.

Como compostos preferidos de acordo com o descrito antes refere-se os compostos em que os substituintes X e Y se encontram nas posições 5 e 6 do anel benzilo.

Os compostos da invenção podem ser utilizados em métodos para a inibição de uma enzima fosfodiesterase, para o tratamento ou para a prevenção da doença arterial 5 periférica, para a inibição da agregação de plaquetas e para o tratamento ou para a prevenção de insuficiência cardíaca congestiva, os quais compreendem a administração, a um paciente que necessite de tal tratamento, de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto que satisfaz as fórmulas estruturais (I) a (III) . A invenção também proporciona uma formulação farmacêutica que compreende o composto da invenção em combinação com um veículo um excipiente farmaceuticamente aceitável. A invenção também proporciona uma formulação farmacêutica que compreende pelo menos um composto que satisfaz as fórmulas estruturais (I) a (III) pelo menos com um outro agente terapêutico. A invenção também proporciona a utilização de um composto que satisfaz as fórmulas estruturais (I) a (III) para a preparação de um medicamento para o tratamento da doença arterial periférica.

DESCRIÇÃO MINUCIOSA DA INVENÇÃO

Salvo quando indicado de outro modo, todos os termos técnicos e científicos aqui utilizados possuem as significações habitualmente utilizadas pelos especialistas na matéria, na qual está incluída a presente invenção. Todos os artigos, pedidos de patente de invenção e outras referências aqui referidas consideram-se aqui incorporadas na sua totalidade por referência. No caso de um conflito, a presente memória descritiva, incluindo as definições, deverá prevalecer. Além do mais, os materiais, métodos e exemplos são meramente ilustrativos, não devendo ser considerados limitativos. 6

De acordo com uma variante da presente invenção, os compostos da presente invenção incluem os compostos que satisfazem as variantes seguintes, quer seja por si sós quer em combinação.

De acordo com uma variante, a presente invenção proporciona um composto de fórmula estrutural

uma sua forma de equilíbrio, um seu sal farmaceuticamente aceitável ou um sal farmaceuticamente aceitável de uma sua forma de equilíbrio, em que o simbolo Rl representa H, alquilo (Ci-C6), alcenilo (C2-C6) , alquinilo (C2-C6) , alcoxi(Ci-C6) ou arilo (C6-Cio) ; o símbolo R2 representa 7 % Η

ou nh2 e cada um dos símbolos X e Y representa independentemente H ou halogéneo.

Como variantes preferidas refere-se aquelas em que os substituintes X e Y se encontram nas posições 5 e 6 do anel benzilo.

De acordo com uma variante, o símbolo Rl representa H ou alquilo (Ci—C6) · De acordo com outra variante, o símbolo Rl representa H ou CH3. De acordo com uma variante preferida, o símbolo Rl representa H.

De acordo com uma variante, o símbolo R3 representa OH ou O-alquilo (C1-C6) . De acordo com outra variante, o símbolo R3 representa OH ou OCH3. De acordo com uma variante preferida, o símbolo R3 representa OH.

De acordo com uma variante, o símbolo X representa H ou halogéneo. De acordo com uma variante preferida, o símbolo X representa Cl. De acordo com outra variante, o símbolo Y representa H ou Cl. De acordo com uma variante preferida, o símbolo Y representa H. De acordo com outra variante preferida, o símbolo Y representa Cl.

Os compostos de acordo com a presente invenção incluem

Composto 1 que é N-(5,6-dicloro-3,4-di-hidroquinazolina-2-il)-2 oxoacetamida;

Composto 2 que é hidrato de N- (5,6-dicloro-3,4-di-hidroquinazolina-2 il)-2-oxoacetamida;

Composto 3 que é 6,7-dicloro-3-hidroxi-l,5-di-hidro-imidazo[2,1-b] quinazolin-2-ona;

H

que é 6,7-dicloro-3-hidroxy-l,5-di-hidro-imidazo[2,1-b] quinazolin-2-ona e 9

Composto 5 que é (6, 7-dicloro-l-hidroxi-3,5-di-hidro-imidazo[1,2-a]-quinazolin-2-ona).

De acordo com a presente invenção, os compostos são administrados ao paciente sob uma forma praticamente pura.

De acordo com a presente invenção, os compostos estão sob uma forma praticamente pura.

Tal como utilizada na presente memória descritiva, a expressão "forma praticamente pura" designa que os compostos são pelo menos 80% puros, de preferência pelo menos 85% puros, mais preferencialmente pelo menos 90% puros, ainda mais preferencialmente pelo menos 95% puros e muito mais preferencialmente pelo menos 99% puros, conforme determinado por métodos analíticos convencionais.

Sem estar ligado a qualquer teoria (a compreensão do mecanismo não é necessária para a prática da presente invenção, a presente invenção não está limitada por qualquer mecanismo particular), os inventores da presente invenção acreditam que os compostos da presente invenção se encontram sob formas de equilíbrio. As formas de equilíbrio dos compostos da presente invenção encontram-se ilustradas a seguir: 10

Tal como aqui utilizada, a expressão "forma de equilíbrio" abrange os tautómeros dos compostos de fórmulas estruturais (I) a (III).

As formas de equilíbrio dos compostos da invenção também podem ser representadas do modo seguinte:

Todas estas formas de equilíbrio estão abrangidas pelo âmbito da presente invenção. 11

Faz-se observar aos especialistas na matéria, que os compostos de fórmulas estruturais (I) a (III) podem existir sob a forma de tautómeros ou de isómeros ópticos. Todos os isómeros e tautómeros de equilíbrio de tais compostos estão abrangidos pelo âmbito da presente invenção. É possível obter o isómero óptico ou enantiómero individual por métodos bem conhecidos na especialidade, tais como HPLC quiral, resolução enzimática e auxiliares quirais ou então podem ser sintetizados estereosselectivamente. A invenção também proporciona sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos da presente invenção. A expressão "sais farmaceuticamente aceitáveis" dos compostos de fórmulas estruturais (I) a (III) designa os sais obtidos a partir de ácidos e bases inorgânicos ou orgânicos farmaceuticamente aceitáveis. como exemplos de ácidos adequados refere-se os ácidos clorídrico, bromídrico, sulfúrico, nítrico, perclórico, fumárico, maleico, fosfórico, glicólico, láctico, salicílico, succínico, tolueno-p-sulfónico, tartárico, acético, cítrico, metano-sulfónico, fórmico, benzóico, malónico, naftaleno-2-sulfónico e benzeno-sulfónico. Como outros ácidos, tais como o ácido oxálico, que embora não sejam eles próprios farmaceuticamente aceitáveis podem ser úteis enquanto intermediários para a preparação dos compostos da invenção e dos seus sais farmaceuticamente aceitáveis de adição de ácidos.

Como sais obtidos a partir de bases adequadas refere-se os sais de metais alcalinos (v.g., sódio), de metais alcalino-terrosos (v.g., magnésio), de amónio e de NR4+ (em que o símbolo R representa um grupo alquilo(C1-C4) ) . 12

Tal como utilizado na presente memória descritiva, o termo "alquilo" designa um radical hidrocarboneto, de cadeia linear, ramificada ou cíclico, não substituído ou substituído (com halogéneo, nitro, CONH2, COOH, 0-alquilo (Ci-C6) , alcenilo (C2-C6) , alquinilo (C2-C6) , hidroxilo, amino ou COOQ, em que o símbolo Q representa alquilo(Ci-C6) , alcenilo (C2-C6) ou alquinilo (C2-C6) (v.g., isopropilo, etilo, fluoro-hexilo ou ciclopropilo) . 0 termo alquilo também pretende designar os grupos alquilo em que um ou vários átomos de hidrogénio são substituídos por um halogéneo, e mais preferencialmente o halogéneo é flúor {v.g., -CF3 ou -CH2CF3) .

Tal como aqui utilizados, os termos "alcenilo" e "alquinilo" designam um grupo alquilo (tal como definido antes) que contém pelo menos um grupo insaturado {v.g., alilo) .

No caso de estar presente um átomo de enxofre, então o átomo de enxofre pode estar em níveis de oxidação diferentes: S, SO ou S02. Todos estes níveis de oxidação estão abrangidos pelo âmbito da presente invenção. 0 termo "halogéneo" designa um átomo de flúor, cloro, bromo e iodo. A memória descritiva proporciona ainda métodos para o tratamento de um paciente {v.g., mamífero e em particular seres humanos), os quais compreendem a administração, a um paciente que necessite de tal tratamento, de uma quantidade terapeuticamente eficaz pelo menos de um composto de fórmulas estruturais (I) a (III), uma sua formulação ou uma sua forma de dosagem, conforme aqui descritas. Os compostos de fórmulas estruturais (I) a (III) são utilizados para inibir a fosfodiesterase celular e, em particular, as 13 fosfodiesterases III e IV. Mais preferencialmente, os compostos de fórmulas estruturais (I) a (III) são utilizados para inibir a fosfodiesterase III. A utilização principal dos compostos de fórmulas estruturais (I) a (III) é a redução de claudicação intermitente em tais pacientes, sendo tipicamente manifestada por um aumento da distância de caminhada. Os compostos da presente invenção também podem ser utilizados para o tratamento de outras doenças associadas à vasodilatação, incluindo, por exemplo, apoplexia e efeitos anti-plaquetas. Tais ingredientes activos também podem aumentar o colesterol de lipoproteínas de elevada densidade e a apolipoproteina em pacientes que necessitem de tal tratamento, bem como ser utilizados para o tratamento de disfunção sexual.

Os termos "tratar" ou "tratamento" de uma doença, distúrbio ou patologia compreende: (1) prevenir ou retardar o aparecimento de sintomas clínicos da doença, distúrbio ou patologia em desenvolvimento no mamífero que pode estar afligido por, ou predisposto a, essa doença, distúrbio ou patologia, embora não tenha ainda experimentando ou apresentado sintomas clínicos ou subclínicos da doença, distúrbio ou patologia, (2) inibir a doença, distúrbio ou patologia, isto é, interromper, reduzir ou retardar o desenvolvimento da doença ou uma sua recaída (no caso de um tratamento de manutenção) ou pelo menos de um seu sintoma clínico ou subclínico ou (3) aliviar a doença, isto é, provocar a regressão da doença, distúrbio ou patologia ou pelo menos dos seus sintomas clínicos ou subclínicos. 14 A expressão "quantidade terapeuticamente eficaz" designa a quantidade de composto que no caso de ser administrada a um paciente para o tratamento de uma doença, distúrbio ou patologia seja suficiente para efectuar tal tratamento. A "quantidade terapeuticamente eficaz" irá depender do composto, da doença e da sua gravidade, e da idade, peso, estado fisico e resposta do paciente que se pretende tratar.

Um paciente que necessite de tal tratamento é um indivíduo, por exemplo, um ser humano ou um mamífero, que iria beneficiar da administração dos compostos da presente invenção.

Os benefícios para o paciente que se pretende tratar são estatisticamente significativos ou pelo menos perceptíveis pelo paciente ou pelo médico assistente.

Faz-se observar que a quantidade de um composto da invenção necessária para a utilização no tratamento irá variar não apenas com o composto particular escolhido, mas também com a via de administração, a natureza da patologia para a qual o tratamento é necessário, da idade e do estado físico do paciente e, em último lugar, do critério do médico assistente ou veterinário. No entanto, de um modo geral, uma dose adequada irá estar compreendida entre cerca de 0,001 e cerca de 50 mg/kg de massa corporal por dia, de preferência entre cerca de 0,001 e cerca de 5 mg/kg de massa corporal por dia, mais preferencialmente entre cerca de 0,001 e cerca de 0,5 mg/kg de massa corporal por dia e ainda mais preferencialmente entre cerca de 0,001 e cerca de 0,1 mg/kg de massa corporal por dia. De acordo com outras variantes, os intervalos estão compreendidos entre 15 cerca de 0,1 e cerca de 750 mg/kg de massa corporal por dia, entre 0,5 e 60 mg/kg/dia e entre 1 e 20 mg/kg/dia. A dose desejada pode ser convenientemente apresentada sob a forma de uma dose individual ou sob a forma de doses divididas, que são administradas em intervalos adequados, por exemplo, sob a forma de duas, três, quatro ou mais doses por dia. No caso de os compostos serem administrados por via transdérmica ou sob uma forma de libertação prolongada, então os compostos pode ser administrados numa dose uma vez ao dia ou inferior. O composto é convenientemente administrado numa forma de dosagem unitária, por exemplo, contendo entre 0,1 e 50 mg, de preferência entre 0,1 e 5 mg ou mais preferencialmente entre 0,1 e 5 mg de ingrediente activo por forma de dosagem unitária. De acordo com uma outra variante, o composto pode ser convenientemente administrado numa forma de dosagem unitária que contém, por exemplo, entre 10 e 1500 mg, de preferência entre 20 e 1000 mg e mais preferencialmente entre 50 e 700 mg de ingrediente activo por forma de dosagem unitária.

Idealmente, o ingrediente activo deverá ser administrado de modo a atingir concentrações de composto activo no plasma compreendidas entre cerca de 0,01 e cerca de 5 μΜ, entre cerca de 0,01 e cerca de 1 μΜ, entre cerca de 1 e cerca de 75 μΜ, entre cerca de 2 e cerca de 50 μΜ ou entre cerca de 3 e cerca de 30 μΜ. Tal pode ser alcançado, por exemplo, por meio de injecção intravenosa de uma solução entre 0,1% e 5% do ingrediente activo, facultativamente em soluto salino, ou por meio da administração por via oral de um bolus que contém entre cerca de 0,1 e cerca de 5 mg ou entre cerca de 1 e cerca de 16 500 mg de ingrediente activo. Os níveis no sangue desejados podem ser mantidos por meio de uma infusão contínua, proporcionando entre cerca de 0,0001 e cerca de 1,0 mg/kg/hora ou entre cerca de 0,0001 e cerca de 0, 5 mg/kg/hora, ou por meio de infusão intermitente que contém entre cerca de 0,4 e cerca de 15 mg/kg de ingrediente activo. Embora seja possível, para utilização em terapia, que um composto da presente invenção possa ser administrado como o produto químico não tratado, é preferível apresentar o ingrediente activo sob a forma de uma formulação farmacêutica. Assim, a invenção proporciona ainda uma formulação farmacêutica que compreende um composto de fórmulas estruturais (I) a (III), ou um seu análogo, em conjunto com um ou vários veículos farmaceuticamente aceitáveis e, facultativamente, outros ingredientes terapêuticos e/ou profilácticos. O veículo deverá ser "aceitável" no sentido de ser compatível com os outros ingredientes da formulação e não prejudicial para o seu recipiente.

As formulações farmacêuticas compreendem as formulações adequadas para administração por via oral, rectal, nasal, tópica (incluindo bucal e sublingual), transdérmica, vaginal ou parentérica (incluindo intramuscular, subcutânea e intravenosa) ou sob uma forma adequada para administração por inalação ou insuflação. Se adequado, as formulações podem ser convenientemente apresentadas em unidades de dosagem discretas e podem ser preparadas por qualquer método conhecido na especialidade farmacêutica. Todos os métodos compreendem o passo de fazer contactar o composto activo com veículos líquidos ou com veículos sólidos finamente divididos ou ambos, e, se 17 necessário, moldar o produto para se obter a formulação adequada.

Uma formulação farmacêutica adequada para administração por via oral pode ser convenientemente apresentada sob a forma de unidades discretas, tais como cápsulas, trociscos ou comprimidos (cada uma das quais contendo uma quantidade predeterminada do ingrediente activo); sob a forma de pós ou grânulos; ou sob a forma de uma solução, suspensão ou emulsão. 0 ingrediente activo também pode ser apresentado sob a forma de bolus, electuário ou pasta. Os comprimidos e as cápsulas para administração por via oral podem conter excipientes convencionais, tais como agentes aglutinantes, cargas, lubrificantes, desintegrantes ou agentes humectantes. Os comprimidos podem ser revestidos utilizando métodos bem conhecidos na especialidade. As preparações liquidas orais podem assumir uma forma, por exemplo, de suspensões, solução ou emulsões aquosas ou oleosa, xaropes ou elixires ou podem assumir uma forma de produto seco para preparação com água ou com outro veiculo adequado antes da sua utilização. Tais preparações liquidas podem conter aditivos convencionais, tais como agentes de suspensão, agentes de emulsão, veículos não aquosos (os quais podem incluir óleos comestíveis) ou conservantes.

Os compostos da invenção também podem ser formulados para administração por via parentérica (v.g., por injecção, por exemplo, por injecção de um bolus ou por infusão continua) e podem ser apresentados sob a forma de doses unitárias em ampolas, seringas pré-carregadas, infusões de volumes pequenos ou em recipientes multi-dose com a adição de um conservante. As composições podem assumir formas de 18 suspensões, soluções ou emulsões em veículos aquosos ou oleosos e podem conter agentes auxiliares de formulação, tais como agentes de suspensão, estabilizadores e/ou dispersantes. Em alternativa, o ingrediente activo pode estar sob a forma de um pó, obtido por isolamento asséptico do sólido estéril ou por liofilização a partir da solução, para reconstituição com um veículo adequado, v.g., água estéril isenta de pirogénio, antes da sua utilização.

Para a administração por via tópica à epiderme, os compostos da presente invenção podem ser formulados como unguentos, cremes ou loções ou sob a forma de pensos transdérmicos. Tais pensos transdérmicos podem conter potenciadores de penetração, tais como linalol, carvacrol, timol, citral, mentol ou t-anetole. Os unguentos e cremes podem ser formulados, por exemplo, com uma base aquosa ou oleosa e com a adição de agentes de espessamento e/ou gelificação adequados. As loções podem ser formuladas com uma base aquosa ou oleosa e deverão conter, normalmente, um ou vários agentes emulsionantes, agentes estabilizadores, agentes dispersantes, agentes de suspensão, agentes de espessamento ou corantes.

As formulações adequadas para administração por via tópica à boca incluem pastilhas que compreendem o ingrediente activo numa base aromatizada, normalmente sacarose e goma de acácia ou adragante; as pastilhas compreendem o ingrediente activo numa base inerte, tal como gelatina e glicerina ou sacarose e goma de acácia; e os elixires para a lavagem da boca compreendem o ingrediente activo num veículo líquido adequado.

As formulações farmacêuticas adequadas para administração por via rectal, em que o veículo é um sólido, 19 são preferencialmente apresentadas sob a forma de supositórios de dose unitária. Como veículos adequados refere-se manteiga de cacau e outros materiais normalmente utilizados na especialidade, sendo os supositórios convenientemente preparados por mistura do composto activo com o veículo fundido ou amolecido e subsequente arrefecimento e moldagem em moldes.

As formulações adequadas para administração por via vaginal podem assumir a forma de pessários, tampões, cremes, geles, pastas, espumas ou pulverizações que contêm, para além do ingrediente activo, veículos adequados do conhecimento dos especialistas na matéria.

Para a administração por via intra-nasal, os compostos da invenção podem ser utilizados sob a forma de pulverizações líquidas ou pós dispersáveis ou sob a forma de gotas. As gotas podem ser formuladas com uma base aquosa ou não aquosa que compreende um ou vários agentes de dispersão, agentes de solubilização ou agentes de suspensão. As pulverizações líquidas são convenientemente administradas recorrendo a embalagens pressurizadas.

Para a administração por inalação, os compostos da invenção são convenientemente administrados a partir de um insuflador, nebulizador ou de uma embalagem pressurizada ou com outros dispositivos adequados para a administração de uma pulverização em aerossol. As embalagens pressurizadas podem compreender um propulsor adequado, tal como diclorodifluorometano, triclorofluorometano, dicloro-tetrafluoroetano, dióxido de carbono ou outro gás adequado. No caso de um aerossol pressurizado, a unidade de dosagem pode ser determinada por meio de uma válvula para administrar uma quantidade predeterminada. 20

Em alternativa, para a administração por inalação ou insuflação, os compostos da invenção podem assumir a forma de uma composição de um pó seco, por exemplo, uma mistura de pó do composto e de uma base em pó adequada, tal como lactose ou amido. A composição de pó pode ser apresentada sob uma forma de dosagem unitária, por exemplo, em cápsulas ou carteiras, ou, por exemplo, embalagens de gelatina ou ampolas grandes a partir das quais é possível administrar o pó com o auxílio de um inalador ou insuflador.

Se desejado, as formulações descritas antes podem ser adaptadas para permitir uma libertação controlada do ingrediente activo.

De acordo com outra variante, a invenção proporciona uma combinação que compreende um composto de acordo com a presente invenção com um ou vários inibidores de fosfodiesterase. Há diversos compostos que são conhecidos enquanto inibidores de fosfodiesterease, tais como vinpocetina, milrinona, amrinona, pimobendano, cilostamida, enoximona, piroximona, vesnarinona, rolipramo, R020-1724, zaprinast, dipiridamole, pentoxifilina, citrato de sildenafilo (Viagra®), doxazosina, papaverina, prazosina, terazosina, trimazosina e hidralazina. Na publicação PCT n° WO 94/28902 encontra-se descrito um conjunto de inibidores de cGMP fosfodiesterase de pirazole[4,3-d]pirimidina-7-onas. Na publicação PCT n° WO 96/16644 também se encontram descritos diversos inibidores de cGMP fosfodiesterase, incluindo derivados do ácido griseólico, derivados de 2-fenilpurinona, derivados de fenilpurinona, pirimidinas fundidas e condensadas, um derivado de pirimdopirimidina, um composto de purina, um composto de quinazolina, um derivado de fenilpirimidona, um derivado de imidazo- 21 quinoxalinona ou seus análogos azo, um derivado de fenilpiridona e outros.

Os compostos da presente invenção também podem ser utilizados em combinação com cilostazol (Pletal™).

As combinações referidas antes podem ser apresentadas sob a forma de uma formulação farmacêutica, pelo que as formulações farmacêuticas que compreendem uma combinação tal como definida antes em conjunto com um veiculo farmaceuticamente aceitável constituem uma outra variante da invenção.

Os componentes individuais de tais combinações podem ser administrados sequencial ou simultaneamente em formulações farmacêuticas separadas ou combinadas.

No caso de um composto de fórmulas estruturais (I) a (III), ou um seu análogo, ser utilizado em combinação com um segundo agente terapêutico, então a dose de cada composto pode ser igual ou diferente da dose utilizada quando o composto é administrado por si só. As doses adequadas serão evidentes para os especialistas na matéria. A proporção entre os compostos da presente invenção e o segundo agente terapêutico serão evidentes para um especialista na matéria. Por exemplo, é possível utilizar uma proporção compreendida entre cerca de 1:5000 e cerca de 1:500, entre cerca de 1:500 e cerca de 1:100, entre cerca de 1:1 e cerca de 1:50, entre cerca de 1:1 e cerca de 1:30, entre cerca de 1:1 e cerca de 1:20, entre cerca de 1:1 e cerca de 1:15, entre cerca de 1:1 e cerca de 1:10, entre cerca de 1:1 e cerca de 1:5 ou entre cerca de 1:1 e cerca de 1:3 dos compostos da invenção:segundo agente terapêutico. No caso de se adicionar um outro agente 22 terapêutico, então as proporções serão ajustadas em conformidade.

Os exemplos seguintes são apresentados para ilustrar as diversas variantes da presente invenção e não deverão ser considerados como limitativos do seu âmbito.

Exemplo 1

Preparação do composto 1 da presente invenção

Sintetizou-se o composto 1, N-(5,6-dicloro-3,4-di-hidroquinazolina-2-il)-2-oxoacetamida (1) que possui um valor de m/z de 271. 0 composto 1 também pode existir sob a forma do seu hidrato (2) .

Preparação do composto 1

Esta abordagem para a preparação do aldeído (1) necessário implica a reacção de 2-amino-5,6-dicloro-3,4-di-hidroquinazolina (A) com o hidrato do ácido glioxálico (B) utilizando uma reacção de acoplamento do tipo diciclo-hexilcarbodiimida (DCC). A reacção de acoplamento do composto (A) e de ácido glioxálico (B) foi efectuada utilizando diciclo-hexil-carbodiimida (DCC), dimetilaminopiridina (DMAP) em 23 diclorometano (DCM). 0 produto (A) pode ser obtido por métodos conhecidos na especialidade (ver, por exemplo, a patente de invenção norte-americana n° 6 194 420, publicada a 27 de Fevereiro de 2001) . Adicionou-se uma pequena quantidade de dimetilformamida (DMF) para melhorar a solubilidade do produto (A). Quando se misturou este reagente no solvente diclorometano, deu-se a formação de um precipitado. Filtrou-se este precipitado e evaporou-se o solvente. Analisou-se esta mistura de reacção impura por LC-MS, que revelou que existia 90% do material de partida e 7% de material com uma massa de 271.

Esta reacção teve lugar numa escala de 150 mg. Recolheu-se o precipitado formado (170 mg) nesta reacção e analisou-se em conjunto com o conteúdo do filtrado. A análise por LC-MS indicou que o precipitado era constituído por dois componentes principais, o produto (A) (25% por área de pico) e o material com uma massa de 271 (66% por área de pico) ; no entanto, a análise por NMR do mesmo material indicou que o componente principal era, de facto, diciloureia (DCU), a forma que sofreu reacção do agente de acoplamento DCC. A tentativa de purificação deste material por HPLC deu origem à tremoção do DCU (conforme determinado por análise de NMR), obtendo-se no entanto uma mistura de composto (A) (18% por área de pico) e o material de massa 271 (73% por área de pico). No entanto, apenas foi observado no espectro de NMR um produto que continha um pico aromático. O composto 1 foi purificado com sucesso através de cromatografia de fase inversa. Utilizou-se uma eluição em gradiente desde água até metanol para se obter três fracções distintas: em primeiro lugar o composto (A), em 24 segundo o material de massa 271 e por último o DCU (conforme determinado por meio das análises de NMR e HPLC).

Tal como indicado antes, o composto 1 é uma forma em equilíbrio do composto 3 e do composto 4. Assim sendo, tal como referido antes, nas condições destes exemplos, crê-se que os compostos se estão a interconverter e que o composto 3 e o composto 4 (ambos designados por 3-hidroxianagrelida) também estão presentes. EXEMPLO 2 Síntese alternativa do composto 1

Passo 1

Esquema 1: material de partida (RL603)

α ϊ 0 composto RL603 pode ser acilado com segurança e com um rendimento entre modesto e bom, utilizando 2,2 equivalentes de hidreto de sódio e 1,1 equivalentes de glicerato de etil-2,3-isorpopilideno para se obter o produto B (esquema 1) . 0 anião de RL603 foi formado por aquecimento com hidreto de sódio em THF, a 50°C, durante 30 minutos e sob uma atmosfera inerte. Depois arrefeceu-se a mistura até à temperatura ambiente, adicionou-se o éster e agitou-se a mistura de reacção durante 3 dias. É preferível 25 purificar rapidamente e utilizar os produtos para evitar a formação de impurezas oxidadas fluorescentes. Efectuou-se a purificação por extracção aquosa normal e cromatografia através de gel de sílica (efectuando a eluição com 40% a 50% de acetato de etilo/60% a 50% de éter de petróleo). 25 Esquema 2: síntese ísopropllldeno de glicerato de etil-2,3-

EÍI ou ÊtjSQ,

Ό ΏΜΨ

°v X ,OB

v T

O

Preparou-se o glicerato de etil-2,3-isopropilideno. Tratou-se 1,2:5,6-di-isopropilideno-manitol com periodato de sódio ou periodato de tetra-butil-amónio e depois com permanganato de potássio para se obter isopropilideno-glicerato de potássio impuro, o qual pode ser purificado por recristalização a partir de etanol. Depois tratou-se preferencialmente com iodoetano ou sulfato de dietilo (a utilização deste último composto torna difícil a recuperação do produto) em DMF para se formar o éster etílico (esquema 2) . Se necessário, submete-se o éster a destilação. 26 PASSO 2

Esquema 3: hidrólise do composto B para se obter o composto C

Tratou-se o derivado B de RL603 acilado com acetal com HC1 0,1 M numa mistura a 50:50 de água:THF de um dia para o outro para se obter uma mistura praticamente igual de RL603 e do diol (C) desejado (esquema 3) . A utilização de uma mistura a 5:3 de água:ácido trifluoroacético durante uma hora permite obter, de uma forma simples e selectiva, o diol (C) desejado, não sendo necessária qualquer purificação para além da remoção dos solventes. PASSO 3

Conversão do composto (C) no composto 1 e subsequente HPLC A conversão do diol (C) no composto 1 foi efectuada por meio da utilização de periodato de sódio em metanol aquoso ou acetona. O diol era fracamente solúvel. Verificou-se a hidrólise novamente para RL603 e a formação do que parece ser um isómero do composto 1 (parece que este iso-composto 1 é obtido a partir de um modo alternativo de fecho do anel do aldeído intermediário formado a partir da clivagem de periodato ao diol (C) . A reacção de isomerização do composto 1 e o iso-composto 1 (um tautómero do composto 5) são apresentadas a seguir: 27

iso-composto 1

Exemplo 3 Síntese de 6,7-dicloro-3-hidroxi-l,5-di-hidro-imidazo[2,l-b]-quinazolin-2-ona (composto 3)

Reagentes e condições

Passo (i) : KMn04, KOH, água, temperatura ambiente (ta), 4 horas, filtração e evaporação, depois DMF, iodeto de etilo, temperatura ambiente, processamento aquoso de um dia para o outro, rendimento global de 56%.

Passo (ii): 2-amino-5,6-dicloro-3,4-dihidro-quinazolina

28

NaH, THF, 50°C, 30 minutos, depois temperatura ambiente, 48 horas, processamento aquoso e cromatografia em coluna, rendimento de 50%.

Passo (iii): CF3CO2H, água, temperatura ambiente, 1 hora, evaporação, liofilização e trituração com éter, rendimento de 100%.

Passo (iv) : NaI04, tampão pH 5 1, acetona, 10°C, 20 minutos, evaporação, liofilização e cromatografia em coluna, rendimento de 31%.

Purificação O isolamento cromatográfico do produto, resolução a partir do composto 5 isomérico (6,7-dicloro-l-hidroxi-3, 5-di-hidro-imidazo[1,2-a]quinazolin-2-ona), foi efectuado numa coluna de vidro normal através de gel de sílica, sob uma atmosfera de ar comprimido, efectuando a eluição em gradiente de 0%-10% de metanol/100%-90% de acetato de etilo. Analisou-se as fracções por TLC (cromatografia em camada fina), efectuando a eluição com thf (tetra-hidrofurano) que continha algumas gotas de amónia concentrada.

Dados analíticos NMR XH NMR (300 MHz, DMSO-D6) : 7,47 (1H, d, J = 8,7 Hz), 6,96 (1H, d, J = 8,7 Hz), 6,91 (1H, d, J= 8 7 Hz), 5,01 (1H, d, J = 6,7 Hz), 4,58 + 4,47 (2H, sistema AB, J = 14 6 Hz) 13C NMR (75 MHz, DMSO-D6) : 130, 00, 129, 49, 125, 32, 120, 41, 113,05, 81,29, 41,89 (amostra fraca, alguns sinais não estavam resolvidos). 29

Espectroscopia de infravermelhos IV (puro) : 1643, 1563, 1471 cm"1

Espectroscopia de massa (EI): 271 (M+, 100%), 214 (86%), 199 (34%) %), 199 (35%). Determinação do peso molecular MS de elevada resolução: calc. 270,991532; encontrado: 270,992371.

Ponto de fusão P.f.: 170°C (dec.)

Exemplo 4 Síntese química de (6,7-dicloro-l-hidroxi-3,5-di-hidro-imidazo[1,2-a]quinazolin-2-ona), composto 5

Reagentes e condições

Passo (i) : KMn04, KOH, água. temperatura ambiente, 4 horas, filtração e evaporação, depois DMF, iodeto de etilo, temperatura ambiente, de um dia para o outro, processamento aquoso, rendimento global de 56%. 30

Passo (ii): RL603, NaH, THF, 50°C, 30 minutos, depois temperatura ambiente, 48 horas, processamento aquoso e cromatografia em coluna, rendimento de 50%.

Passo (iii): CF3CO2H, água, temperatura ambiente, 1 hora, evaporação, liofilização e trituração com éter, rendimento de 100%.

Passo (iv) : NaI04, tampão acetona pH 10 8, 10°C, 20 minutos, evaporação, liofilização e cromatografia em coluna, rendimento de 57%.

Submeteu-se a cromatografia numa coluna de vidro normal através de gel de silica, sob uma atmosfera de ar comprimido, efectuando a eluição com um gradiente de 0%-20% de metanol/100%-80% de acetato de etilo, com incrementos de 2%, o composto 3 (6,7-dicloro-3-hidroxi-l,5-di-hidro-imidazo-[2,1—b]quinazolin-2-ona) eluiu em primeiro lugar seguindo-se o composto 5. Analisou-se as fracções por TLC (cromatografia em camada fina) efectuando a eluição com THF (tetra-hidrofurano) que continha algumas gotas de amónia concentrada. Faz-se observar que neste sistema de solventes, o composto 5 eluiu mais rapidamente do que o composto, isto é, a ordem inversa da observada na cromatografia em coluna.

Dados analíticos NMR XH NMR (300 MHz, DMSO-D6) : 9,40 (1H, s), 7,59 (1H, d, J = 8,8 Hz), 7,15 (1H, d, J = 9,2 Hz), 6,99 (1H, d, J= 8,8 Hz), 5,38 (1H, d, J = 9,2 Hz), 4,62 + 4,56 (2H, sistema AB, J = 16 8 Hz). 13C NMR (75 MHz, DMSO-D6) : 182, 90, 162, 97, 134,02, 129, 97, 129,26, 125,21, 118,89, 113,05, 79,87, 41,46. 31

Espectroscopia de infravermelhos IV (puro): 1653, 1472 cnf1

Espectroscopia de massa MS (EI): 271 (M+, 100%), 214 (87%), 199 (35%).

Determinação da massa molecular MS de elevada resolução: calo. 270,991532; encontrado: 270,991783.

Ponto de fusão P.f.: 190°C (dec.)

Exemplo 5

Avaliação do efeito dos compostos da presente invenção sobre fosfodiesterases

Analisou-se o perfil de actividade contra uma selecção de fosfodiesterases (I-VI). Os métodos utilizados para a avaliação da actividade biológica são bem conhecidos na especialidade. Veja-se, por exemplo, Weishaar et al; Biochem. Pharmacol., 35:787-800.

Efeito do composto 1 em diversas fosfodiesterases Composto de ensaio Concentração % inibição Compostos de referência ci50 (nH) Fosfodiesterase I 8-metoxi-IBMX Composto 1 10 μΜ 26 2,410 nM (1,1) Fosfodiesterase II (h) EHNA Composto 1 10 μΜ - 2,600 nM (0,7) 32

Fosfodiesterase III (h) milrinona Composto 1 10 μΜ 97 366 nM (0,9) Fosfodiesterase IV (h) rolipram Composto 1 10 μΜ 738 nM (1,0) Fosfodiesterase V (h) dipiridamole Composto 1 10 μΜ 64 1,080 nM (1,3) Fosfodiesterase VI (h) zaprinast Composto 1 10 μΜ 00 839 nM (0,8) Para os compostos de ensaio, os resultados são expressos sob a forma de percentagem de inibição da actividade do controlo (valores médios; n = 2) . 0 símbolo - indica uma inibição inferior a 10%.

Testou-se o composto 1, em duas ocasiões separadas, contra a PDEIII humana e concluiu-se que possuía um valor CI50 compreendido entre 0,69 e 1,1 nM (média de 0,9 nM). efeito do composto no ensaio farmacológico in vivo e valores de controlo para os compostos de referência Composto de ensaio CI50 Kl (nH) Composto de referência CI50 Kl (nH) Fosfodiesterase III (h) milrinona Composto 1 (ensaio 1) 0,69 nM (1,1) 267 nM (0,9) Composto 1 (ensaio 2) 1,1 nM (0,6) 312 nM (1,0) 33

Determinou-se o valor de CI50 contra PDEVI. Concluiu-se que era de 360 nM (ver infra).

Efeito do composto 1 contra PDEVI Composto de ensaio CI50 Kl (nH) Composto de referência 0 LO 1—1 O Kl (nH) Fosfodiesterase VI (h) zaprinast Composto 1 360 nM - (1,0) 1120 nM - (1,1)

Efeito do composto 1 contra PDEIII Composto de ensaio CI50 Kl (nH) Composto de referência 0 LO 1—1 CJ Kl (nH) Fosfodiesterase III (h) milrinona Composto 1 1,8E-07 - 0,4 6,9E-07 - 0, 6 34

REFERENCIAS CITADAS NA DESCRIÇÃO A presente listagem de referências citadas pelo requerente é apresentada meramente por razões de conveniência para o leitor. Não faz parte da patente de invenção europeia. Embora se tenha tomado todo o cuidado durante a compilação das referências, não é possível excluir a existência de erros ou omissões, pelos quais o IEP não assume nenhuma responsabilidade.

Patentes de invenção citadas na descrição • US 762566 A [0004] • US 20040209907 A [0004] • WO 9428902 A [0056] • WO 9616644 A [0056] • US 6194420 B [0066]

Literatura citada na descrição, para além das patentes de invenção • Oral, Transdermal and Transurethral Therapies for Erectile Dysfunction. Doherty. Male Infertility and Dysfunction. 1997 [0003] • Goodman; Gilman's. The Pharmacological Basis of Therapeutics, 1996 [0003] • ERUSALIMSKY et al. Is the platelet lowering activity of anagrelide mediated by its major metabolite 2-amino-5,6-dichloro-3,4-dihydroquinazoline (RL603). Exp Hematol, 2002, vol. 30, 625-7 [0005] • LANE et al. Anagrelide metabolite induces thrombo- cytopenia in mice by inhibiting megakaryocyte maturation without inducing platelet aggregation. Exp Hematol, 2001, vol. 29, 1417-241 [0005] 35 • GAVER et al. Disposition of anagrelide, an inhibitor of platelet aggregation. Clin Pharmacol Ther, 1981, vol. 29, 381-6 [0005] • WEISHAAR et al. Biochem. Pharmacol, vol. 35, 787-800 [0085]

Lisboa, 28/12/2010

Claims (16)

1 REIVINDICAÇÕES Composto de fórmula estrutural m o

xf í ; liγ ! m > n; V l· t RI uma sua forma de equilíbrio, um sal farmaceuticamente aceitável do composto ou da sua forma de equilíbrio, em que o símbolo Rl representa H, alquilo (Ci-C6), alcenilo (C2-C6) , alcinilo (C2-C6), alcoxi (Ci-C6) ou arilo (C6-Ci0) ; o símbolo R2 representa

0 símbolo R3 representa OH, halogéneo, SH, O-alquilo(Ci—Cê) ou NH2 e cada um dos símbolos X e Y representa independentemente H ou halogéneo, que se destina a ser utilizado para aumentar os níveis plasmáticos das lipoproteínas de elevada densidade e das apolipoproteínas ou para o tratamento da doença arterial periférica, aterosclerose, claudicação intermitente, insuficiência cardíaca congestiva, uma doença associada ao aumento da agregação de plaquetas, trombose, AVC ou disfunção sexual. 2

2. Composto utilizável de acordo com a reivindicação 1, em que o composto satisfaz a fórmula estrutural H

Y Rl

3. Composto utilizável de acordo com a reivindicação 1, em que o simbolo R2 representa 0

^0,·ιι.·ίϋϋ|ί|

4. Composto utilizável de acordo com a reivindicação 1, em que o simbolo Rl representa H ou alquilo(Ci-Cê) .

5. Composto utilizável de acordo com a reivindicação 1, em que o simbolo Rl representa H.

6. Composto utilizável de acordo com a reivindicação 1, em que o simbolo X representa H ou halogéneo.

7. Composto utilizável de acordo com a reivindicação 1, em que o simbolo Y representa H ou Cl.

8. Composto utilizável de acordo com a reivindicação 1, em que o simbolo X representa Cl. 3

9. Composto utilizável de acordo com a reivindicação 1, em que o símbolo Y representa Cl.

10. Composto utilizável de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é

o α õ

11. Composto de acordo com a reivindicação 1, utilizável para o tratamento da doença arterial periférica.

12. Composto de acordo com a reivindicação 1, utilizável para o tratamento da aterosclerose.

13. Composto de acordo com a reivindicação 1, utilizável para o tratamento da claudicação intermitente.

14. Composto de acordo com a reivindicação 1, utilizável para o tratamento da insuficiência cardíaca congestiva.

15. Composto de acordo com a reivindicação 1, utilizável para o tratamento de AVC.

16. para Composto de acordo com a reivindicação 1 o tratamento da disfunção sexual. , utilizável Lisboa, 28/12/2010