PT1641460E - ¿composições farmacêuticas estáveis de 5,10-metilenotetrahidrofolato - Google Patents

Description

1

Descrição "Composições farmacêuticas estáveis de 5,10-metileno- tetrahidrofolato"

Esta invenção diz respeito a composições farmacêuticas estáveis de 5,10-metileno-(6R) , — (6 S)—, ou -(6R,S)- tetrahidrofolato.

No presente texto, o termo 5,10-

Metilenotetrahidrofolato (abreviado MTHF) diz respeito a ácidos 5,10-metileno-tetrahidrofólicos e seus poliglutamatos na forma de ácidos livres, na forma de sais farmaceuticamente aceitáveis, em particular de sais ácidos, assim como também de sais alcalinos ou alcalino-terrosos. Ácidos 5,10-metileno-tetrahidrofólicos e seus poliglutamatos incluem tanto misturas de isómeros ópticos, em particular misturas 1:1 de diasteriómeros, assim como diasteriómeros opticamente puros, em particular o ácido natural 5,10-metileno-(6R)-tetrahidrofólico opticamente puro.

Sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser sais ácidos, como por ex. sulfatos ou sulfonatos, preferencialmente sais de sulfatos ou podem ser também sais de metais alcalinos ou de metais alcalino-terrosos, preferencialmente sódio, potássio, magnésio, ou sais de cálcio. MTHF é um principio activo para preferencialmente aplicação parenteral em combinação com pirimidinas fluoradas como por ex. 5-Fluoruracil (5-FU), um citostático largamente utilizado no tratamento de tumores sólidos [Cofactor Biokeys Pharmaceuticals. Seley, K.L. IDrugs 4 (1), 99-101 (2001)]. MTHF é um folato reduzido e consegue o seu efeito quimioterapêutico conjuntamente com os análogos básicos 5-FdUMP, através da inibição da enzima timidilato 2 sintase (TS), que catalisa a conversão de desoxiuridilato (dUMP) em desoxitimidilato (dTMP), um componente principal da sintese de DNS. Uma vez que este passo representa a única fonte de novo para o desoxitimidilato nas células, a inibição desta enzima chave através da utilização de bases pirimidinicas fluoradas como por ex. 5-FU ou do pro-fármaco de 5-FU capecitabina (Xeloda) é um ponto de partida importante na terapia do cancro. A inactivação de TS é efectuada, através da formação de um complexo ternário covalente inibidor entre TS e o análogo básico 5-FdUMP, que é um metabolito de 5-FU, e MTHF. Um reforço do efeito citotóxico de 5-FU pode ser conseguido através do aumento da concentração intracelular de MTHF, em que a estabilidade dos complexos ternários é aumentada. Isto tem como efeito uma inibição directa da sintese de DNS e reparação, o que conduz finalmente à morte celular e atraso do crescimento do tumor. A utilização farmacêutica de MTHF encontra-se limitada através da sensibilidade extremamente elevada à oxidação pelo ar [Chemical Stability and Human Plasma Pharmacokinetics of Reduced Folates. Odin, E. et al. Câncer Investigation 16(7), 447-455 (1998), The Structure of "Active Formaldehyde" (N5, N10-methylene Tetrahydrofolic Acid) Osborn, M. J. et al. J. Am. Chem. Soc. 82, 4921-4927 (1960), Folates in foods: reactivity, stability during Processing, and nutritional implications. Hawkes, J. and Villota, R. Food Sei. Nutr. 28, 439-538 (1989)]. MTHF é um aducto de ácido tetrahidrofólico (THF) e formaldeido [5,10-Metileno-5,6,7,8-tetrahidrofolato. Conformation of the Tetrahydropyrazine e Imidazolidine Rings. Poe, M. et al. Biochemistry 18 (24), 5527-5530 (1979), Tetrahydrofolic Acid and Formaldehyde. Kallen, R.G. Methods in Enzymology 18B, 705-716 (1971)]. Em solução aquosa existe um equilíbrio entre MTHF por um lado, e THF e formaldeido por 3 outro. Para a estabilização de soluções de MT HF foram seguidas até agora as seguintes indicações:

Exclusão rigorosa de oxigénio do ar, através da utilização de equipamentos técnicos especiais para a reconstituição de formulações sólidas e injecção de MT HF num ambiente isento de ar [Chemical Stability and Human plasma Pharmacokinetics of Reduced Folates. Odin, E. et al. Câncer Investigation 16(7), 447-455 (1998), Fluid Transfer Systems US 4,564,054].

Adição de um agente de redução, como por ex. L( + ) -Ácido ascórbico ou dos seus sais, γ-Glutationa reduzida, β-Mercaptoetanol, Tioglicerin, N-acetil-L-Cisteína, etc. como protecção para a oxidação do MTHF sensível e em particular de THF. Estabilização através de compostos de inclusão de ciclodextrina EP 0579996 (Eprova). Utilização de concentrações elevadas do princípio activo.

Para a estabilização de outros derivados de ácido tetrahidrofólico são também conhecidos os métodos seguintes:

Estabilização de soluções contendo ácido 5-formiltetrahidrofólico, através de adição de citrato de sódio, acetato de sódio, ou cloreto de sódio EP 0 755396 (Pharmachemie) . Estabilização de soluções injectáveis contendo um sal de sódio ou sal de potássio do ácido 5-formiltetrahidrofólico a um valor de pH entre 7,5 e 8,5 EP0677159 (SAPEC). Estabilização de soluções contendo o sal de cálcio de 5-formiltetrahidrofólico, através da adição de citrato de sódio US 4,931,441 (Luitpold Pharmaceutical). A estabilização de ácido 5-formiltetrahidrofólico, em particular as suas soluções não pode ser comparada com a estabilização de soluções de ácidos 5,10-metileno-tetrahidrofólicos. Assim, os grupos metilenos ligados ao 4 anel de cinco membros do ácido 5,10-metileno-tetrahidrofólico confere visivelmente outras propriedades à substância em comparação com o ácido 5-formiltetrahidrofólico. Isto exprime-se por ex. num comportamento em relação à estabilidade e vias de degradação visivelmente diferentes. Em contraste com o ácido 5-formiltetrahidrofólico, o ácido 5,10-metilentetrahidrofólico em solução está sempre em equilíbrio com formaldeido e ácido tetrahidrofólico (THF), que se distingue através de uma sensibilidade à oxidação extremamente elevada. Pelo contrário o ácido 5-formiltetrahidrofólico não apresenta este comportamento de dissociação e é geralmente muito estável em soluções aquosas farmaceuticamente aceitáveis, mesmo sem adição de citrato de sódio e hidróxido de sódio.

Até aqui não foram por isso descritas nenhumas composições farmacêuticas estáveis de mthf.

Foi agora surpreendentemente constatado que a estabilidade de MTHF em soluções aquosas, suspensões e em formas sólidas, como por ex. pós ou liofilizados pode ser aumentada de uma maneira marcante, através do ajuste para um valor de pH básico e da utilização simultânea de citrato. Surpreendentemente esta estabilização é realizada mesmo na ausência de um agente redutor. Assim soluções de MTHF são estáveis durante horas mesmo sem a adição de agentes redutores (antioxidantes) e sem estarem em condições de exclusão de oxigénio. Isto é muito mais surpreendente, uma vez que na utilização de acetato, oxalato, maleato e outros constituintes ácidos em vez de citrato não podem ser obtidas composições estáveis de MTHF. Isto contrasta também com a situação em que o ácido 5-formiltetrahidrofólico com acetato se pode obter um efeito comparável com citrato (EP 0 755 396) . O citrato reduz nas soluções de ácido 5-formiltetrahidrofólico a hidrólise e 5 cisão oxidativa do esqueleto base e diminui assim a formação de produtos como por ex. ácido p-aminobenzoilglutamina, derivados de pterina e tetrahidropterin. Em contraste o citrato inibe no MTHF na gama de pH básica a cisão do formaldeido (hidrólise) na molécula. Esta é uma diferença marcante e surpreendente no comportamento destes dois compostos que pertencem ambos à classe de substâncias dos folatos. A presente invenção permite ainda para mais a preparação de sais de cálcio, ou sais ácidos pouco solúveis [Patente da Eprova Sais estáveis do ácido 5,10-metilenotetrahidrof ólico EP 0537 492] de MTHF em concentrações elevadas e em soluções isotónicas fisiologicamente aceitáveis. A estabilização inesperada de MTHF com citrato a pH básicos baseia-se num efeito sinergistico surpreendente da solução tampão citrato nesta gama de pH. A formação de complexos entre citrato e MTHF por um lado, e do citrato e do contra-ião (sal) do MTHF por outro, contribui de forma determinante para a estabilização dos grupos metileno, através da inibição da cisão do formaldeido a partir da molécula de MTHF(hidrólise). Deste modo é evitado que se origine o THF extremamente sensível à oxidação e o MTHF seja degradado.

Nas composições de acordo com a invenção o valor do pH é regulado na gama de 7,5-10,5, preferencialmente 8,5-9,5. Isto acontece com o auxílio de soda cáustica, ácido clorídrico na solução de MTHF que contem como substâncias estabilizantes e tampão, ácido cítrico, dihidrogenocitrato de sódio ou dihidrato de citrato trissódico. Uma adição de agentes de redução, como por ex. ácido L(+)-ascorbínico ou os seus sais, γ-glutationa reduzida, β-mercaptoetanol, tioglicerina, N-acetil-L-cisteína, etc. como protecção contra a oxidação é igualmente possível. 6

As formulações de acordo com a invenção são também especialmente adequadas para a preparação de soluções de liofilização e liofilisados ou pós secos e misturas secas, uma vez que as soluções MTHF estáveis, em elevadas concentrações podem ser vertidas para os recipientes adequados, como por ex. frascos, ampolas, etc. Os liofilisados apresentam uma capacidade de serem armazenados surpreendentemente boa e são estáveis. Através da adição de água ou de soluções aquosas podem ser reconstituídos sem problemas, em que as soluções injectáveis límpidas prontas apresentam novamente propriedades de estabilidade excelentes.

As referidas formulações são preferencialmente utilizadas por via parenteral. Podem igualmente ser preparadas a partir dos liofilizados formulações para aplicação enteral (por ex. orais, sublinguais ou rectais) ou tópicas (por ex. transdérmicas).

As formulações são preferencialmente utilizadas directamente como soluções à base de água ou suspensões à base de óleo, ou como liofilizados. Preparações para a aplicação parenteral incluem soluções injectáveis aquosas estéreis e soluções injectáveis não aquosas e suspensões dos compostos activos que apresentam preferencialmente uma composição isotónica.

As formulações podem porém ser administradas com um veículo. Como suportes podem ser utilizados substâncias orgânicas e inorgânicas que não reagem com as substâncias activas, por ex. água, óleo, álcool benzílico, polietilenoglicol, triacetato de glicerina, ou outros glicerídeos de ácidos gordos, gelatina, lecitina, ciclodextrina, hidratos de carbono como lactobiose ou amidos, estearato de magnésio, talco, ou celulose. As formulações preferidas para uma aplicação oral são comprimidos, drageias, cápsulas, pós, xaropes, concentrados 7 ou gotas, preferidas para uma aplicação rectal são supositórios. igualmente aplicáveis são suspensões, emulsões ou implantes e para aplicação tópica emplastros, ou cremes.

As preparações podem conter estabilizadores, aditivos para a libertação controlada dos compostos activos farmacêuticos, antioxidantes, tampões, bacteriostáticos e auxiliares para a regulação de uma solução isotónica. Suspensões aquosas estéreis e não estéreis podem conter aditivos de suspensões e agentes espessantes. A preparação pode existir em recipientes de dose simples, ou de dose múltipla, como por exemplo, ampolas seladas, ou frascos com tampas e encapsulados e pode ser armazenada congelada em estado seco (liofilizada) e ser preparada para utilização de acordo com as necessidades com um liquido estéril, por exemplo água, ou solução fisiológica salina. Da mesma forma podem também ser utilizados pós estéreis, granulados ou comprimidos.

Todas as preparações podem conter adicionalmente um ou vários princípios activos separadamente ou com efeitos sinergisticos. Em particular estes são bases pirimidínicas fluoradas, como por ex. 5-fluoruracil (5-FU), capecitabina (Xeloda), Tegafur, UFT, Doxifluridina, 2'-Desoxi-5-fluorouridina, diferentes citostáticos como por ex. Gemcitabina (Gemzar). Docetaxel (Taxotere), Paclitaxel (Taxol), Topotecan (Hycamtin), Irinotecan (CPT-11), Doxorubicina (Rubex), Mitomicina (MTC), Cisplatin (CDDP), Ciclofosfamida (CPM), Metotrexato (Ametopterina) Pemetrexed (Alimta), Vincristina (VCR), Citarabina (Ara-C), Epirubicina (Ellence), Oxaliplatin (Eloxatin), Tamoxifen (Nolvadex), Carboplatin (CBDCA), Etoposido (Etopophos), Ifosfamida (Ifex) ou antioxidantes, como por ex. vitamina C, vitamina E, glutationa, tioglicerina, acetilcisteína, assim como ambos os produtos de dissociação de MTHF formaldeído e ácido tetrahidrofólico. A composição continha entre 0,001 mg e 10000 mg de MTHF por dose. Na terapia são utilizadas preparações contendo preferencialmente 1 mg e 1000 mg de MTHF por dose. A dosagem depende da forma de terapia, da forma de aplicação da preparação, da idade, do peso, da nutrição e estado do doente. O tratamento pode ser iniciado com uma dose mais baixa inferior à quantidade óptima e ser aumentada até se atingir o efeito óptimo. Dosagens preferidas na terapia vão desde 1 mg e 1000 mg por dia, em particular entre 100 mg e 500 mg por dia. A aplicação pode ser realizada como toma única ou como tomas repetidas.

As preparações podem ser utilizadas em todas as áreas de aplicação dos folatos.

Com base na anterior descrição um perito no estado da técnica pode sem mais nada retirar os elementos decisivos da invenção e efectuar alterações, ou completá-la e ajustar deste modo a invenção a diferentes necessidades e condições sem se desviar dos pensamentos básicos e do âmbito da invenção.

Os exemplos seguintes podem ser efectuados com um sucesso semelhante, através da substituição dos produtos genéricos ou específicos descritos e/ou condições processuais por aqueles que são apresentados nos exemplos seguintes. Igualmente as seguintes concretizações especificas são fornecidas como puros exemplos, não limitando de forma alguma o restante deste documento.

Exemplos para ilustrar a invenção

Exemplo 1 9

Liofilizado contendo ácido 5,10-Metilen-(6R,S)-tetrahidrofólico 9900 ml de água são saturados com árgon. Dissolve-se completamente com agitação 421,9 g de ácido cítrico. Adiciona-se 232,0 g de sal de cálcio de ácido 5,10-Metilen-(6R, S)-tetrahidrofólico. O valor do pH é ajustado para 8,0 com soda cáustica em que o ácido 5,10-Metilen-(6R, S)- tetrahidrofólico se dissolve lentamente. A seguir o valor do pH é regulado para 8,5. A solução é esterilizada por filtração e frascos de vidro de 10 ml são cheios com 5,0 ml cada um.

Depois a solução é congelada ou liofilizada.

Obtêm-se frascos contendo ácido 5,10-Metilen-(6R, S)-tetrahidrofólico.

Exemplo 2

Estabilização de ácido 5,10-Metilen-(6R, S)- tetrahidrofólico (liofilizado)

Os frascos preparados de acordo com o Exemplo 1 apresentam os seguintes valores de estabilidade (Am 1466-A):

Armazenamento a 4°C (% de estabilidade relativa)

Duração (Meses) 0 3,0 6,0 9,0 12,0 18,0 24, 0 36,0 100,0 100,4 99,3 98,5 99,0 99, 4 98,0

Armazenamento a -15°C (% de estabilidade relativa)

Duração (Meses) 0 3, 0 6,0 9,0 12,0 18,0 24, 0 36,0 100,0 99,8 97, 9 98,3 98,8 98,8 98, 4 10

Em comparação, a amostra de referência não tratada do sal de cálcio do ácido 5,10-Metilen-(6R)-tetrahidrofólico apresenta os valores de estabilidade seguintes (Co751):

Armazenamento a +25°C (% de estabilidade relativa)

Duração (Meses) 0 0, 5 1,0 1,75 2,5 4,5 9,2 19,0 100, 0 92,3 83, 4 77,2 71,9 65,5 49,1 43,0

Exemplo 3

Estabilização de ácido 5,10-Metilen-(6R, S)- tetrahidrofólico (soluções)

As composições preparadas de acordo com o exemplo 1 mostram como solução diluída em solução de soro fisiológico os seguintes valores de estabilidade (AC0448):

Armazenamento a +25°C (% de estabilidade relativa), sem exclusão de ar

Duração (horas) 0 0, 67 1,33 2,0 2, 67 3,33 4,0 32,2 100,0 97,6 95,1 94,6 93,7 92,1 89, 9 51,8

As composições preparadas de acordo com o exemplo 1 mostram como solução aquosa diluída os seguintes valores de estabilidade (AC0447):

Armazenamento a +25°C (% de estabilidade relativa), sem exclusão de ar

Duração (horas) 0 0, 67 1,33 2,0 2,67 3,33 4,0 23,2 100,0 97,6 97,0 96,6 94,8 93,8 93,3 70,9 11

As composições preparadas de acordo com o exemplo 1 mostram como solução aquosa concentrada os seguintes valores de estabilidade (AC0447):

Armazenamento a +25°C (% de estabilidade relativa), sem exclusão de ar

Duração (horas) 0 2, 0 4,0 6,0 12,0 24,0 100,0 100,2 99,2 98,1 95,9 86,2

Como comparação no estado da técnica puderam ser encontrados os seguintes valores para a estabilidade do sal de cálcio do ácido 5,10-Metilen-(6R,S)-tetrahidrofólico em solução em soro fisiológico (ver Chemical Stability and Human Plasma Pharmacokinetics of Reduced Folates. Odin, E. et al. Câncer Investigation 16(7), 447-455(1998)].

Armazenamento a +25°C (% de estabilidade relativa

Duração (horas) 0 4,0 24,0 26,0 48,0 Com exclusão de ar 100,0 O OD LO 38,0 18,0 CO o Sem exclusão de ar 100,0 84 12,0 co o 6,0

Exemplo 4

Comprimidos contendo ácido 5,10-Metilen-(6R)-tetrahidrofólico 990 1 de água são saturados com árgon. Com agitação dissolve-se completamente 42,2 kg de ácido cítrico. 12

Adiciona-se 21,4 kg de ácido livre 5,10-Metilen-(6R)-tetrahidrofólico. 0 valor de pH é ajustado para 8,0 com soda cáustica dissolvendo-se então lentamente o ácido 5,10-Metilen- (6R) -tetrahidrofólico . Depois o valor de pH é ajustado para 8,5 com soda cáustica. A solução é esterilizada por filtração e liofilizada. 1000 g do liofilizado contendo o ácido 5,10-Metilen-(6R)-tetrahidrofólico é comprimido com 4 kg de lactose, 1,2 kg de amido, 0,2 kg de talco e 0,1 kg de estearato de magnésio dando origem a comprimidos, em que cada comprimido contém 100 mg de ácido 5,10-Metilen-(6R)-tetrahidrofólico.

Os comprimidos podem também ser revestidos como comprimidos de película.

Exemplo 5

Supositórios contendo ácido 5,10-Metilen-(6R,S)-tetrahidrofólico O liofilizado preparado de acordo com o exemplo 1 contendo 500 mg de ácido 5,10-Metilen-(6R)-tetrahidrofólico é fundido com 50 g de hidróxipropilcelulose e 2 kg de glicerídeos sintéticos dando origem a supositórios de modo que cada supositório contenha 500 mg de ácido 5,10-Metilen-(6R,S)-tetrahidrofólico.

Exemplo 6

Composição contendo entre outros ácido 5,10-Metilen-(6R,S)-tetrahidrofólico e 5-Fluoruracil

De forma análoga aos Exemplos 1, 4, 5 e 7 é preparada uma composição contendo adicionalmente para a aplicação correspondente as quantidades habituais de ácido 5,10- 13

Metilen-(6R,S)-tetrahidrofólico e também as quantidades habituais para esta aplicação de 5-Fluoruracilo.

Exemplo 7

Liofilizado contendo ácido 5,10-Metilen-(6R)- tetrahidrofólico 9900 1 de água são saturados com árgon. Sob agitação dissolve-se completamente 316,5 g de ácido cítrico. Adiciona-se 212,5 g de sulfato de 5,10-Metilen-(6R) -tetrahidrof ólico. O valor de pH é ajustado para 8,0 com soda cáustica dissolvendo-se então lentamente o sulfato do ácido 5,10-Metilen-(6R)-tetrahidrofólico. Depois o valor de pH é ajustado para 8,5 com soda cáustica. A solução é esterilizada por filtração e é vertida para frascos de vidro de 10 ml contendo cada um 5,0 ml da solução. Depois a solução é congelada e liofilizada. Obtêm-se frascos contendo ácido 5,10-Metilen-(6R)-tetrahidrofólico.

Exemplo 8

Estabilização de ácido 5,10-Metilen-(6R)-tetrahidrofólico (solução)

As composições preparadas de acordo com o exemplo 7 mostram como solução aquosa concentrada os seguintes valores de estabilidade (Am 1758-2/a):

Armazenamento a +25°C (% de estabilidade relativa), sem exclusão de ar

Duração (horas) 0 0,67 1,33 2,67 4,0 5,33 100,0 100,2 99,1 98,2 98,4 97, 7 14

Como comparação no estado da técnica puderam ser encontrados os seguintes valores para a estabilidade do sal de cálcio do ácido 5,10-Metilen-(6R,S)-tetrahidrofólico em solução em soro fisiológico (ver Chemical Stability and Human Plasma Pharmacokinetics of Reduced Folates. Odin, E. et al. Câncer Investigation 16(7), 447-455(1998)].

Armazenamento a +25°C (% de estabilidade relativa)

Duração (horas) 0 4,0 24,0 26,0 48,0 Com exclusão de ar 100,0 58,0 38,0 18,0 8,0 Sem exclusão de ar 100,0 84 12,0 8,0 6,0

Lisboa, 18 de Dezembro de 2009.

Claims (15)

1 Reivindicações 1. Composições farmacêuticas estáveis de 5,10-metileno-(6R)-, —(6S)— ou (6R, S)-tetrahidrofolato, caracterizada por a composição compreender o ácido 5,10-metileno-(6R)-, (6 S)— ou -(6R,S)-tetrahidrofólico, ou um sal farmaceuticamente aceitável do ácido 5,10-metileno-(6R)-, -(6 S)— ou -(6R,S)-tetrahidrofólico conjuntamente com citrato, e apresentar um pH entre 7,5 e 10,5, preferencialmente entre 8,5 e 9,5.

2. Composições farmacêuticas estáveis de acordo com a reivindicação 1 conjuntamente com outros princípios activos e excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

3. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 2, caracterizada por compreender formaldeído como adjuvante.

4. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 2, caracterizada por compreender um outro folato como princípio activo.

5. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 4, caracterizada por compreender ácido tetrahidrofólico e seus sais como outro folato.

6. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por o sal de cálcio, ou um sal ácido ser utilizado como sal farmaceuticamente aceitável do ácido 5,10-metileno-(6R)-, —(6S)— ou -(6R,S)-tetrahidrofólico.

7. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 2, caracterizada por compreender um agente citostático como um outro princípio activo. 2

8. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 2, caracterizada por compreender um derivado de pirimidina fluorado como outro principio activo.

9. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 8, caracterizada por compreender 5-fluoruracil ou um pro-fármaco de 5-fluoruracil, particularmente capecitabina (xeloda) como um derivado de pirimidina fluorado.

10. Composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, compreendendo adicionalmente pelo menos um anti-oxidante ou um agente de captação de radicais livres.

11. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 10, caracterizada por compreender a vitamina C ou uma glutationa reduzida como anti-oxidante ou um agente de captação de radicais livres.

12. Composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizada por a composição existir sob a forma de um liofilizado, um pó seco, ou uma mistura seca.

13. Composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizada por a composição existir sob a forma de uma solução de liofilização.

14. Processo para estabilizar composições compreendendo 5,10-metileno-(6R)-, -(6S)- ou (6R,S)-tetrahidrofolato, caracterizado por ao ácido 5,10-metileno-(6R)-, —(6S)— ou -(6R,S)-tetrahidrofólico ser adicionado citrato e ser levado 3 a um pH entre 7,5 e 10,5, preferencialmente entre 8,5 e 9,5.

15. Uso de composições compreendendo um sal farmaceuticamente aceitável do ácido 5,10-metileno-(6R)-, -(6S) — ou - (6R, S)-tetrahidrofólico e um citrato a um pH entre 7,5 e 10,5, preferencialmente entre 8,5 e 9,5 para produzir uma preparação farmacêutica adequada para o uso nas correspondentes indicações medicinais. Lisboa, 18 de Dezembro de 2009.