PT1565467E

PT1565467E - Novos derivados antagonistas do receptor da vitronectina, procedimentos para a sua preparação, suas aplicações como medicamentos e as composições farmacêuticas que os contêm

Info

Publication number: PT1565467E
Application number: PT03799611T
Authority: PT
Inventors: Jean-Marie Ruxer; Jean-Michel Lefrancois; Bertrand Heckmann
Original assignee: Galapagos Sas
Priority date: 2002-11-19
Filing date: 2003-11-12
Publication date: 2009-07-15
Also published as: HK1076277A1; IL168136A; ATE518842T1; SI2070914T1; JP2006508999A; US20090149476A1; PT2070914E; SI1565467T1; FR2847254B1; RU2005119163A; CN1738817B; HK1129372A1; AU2003299330B2; RU2412185C2; US7763621B2; DK2070914T3; WO2004048375A1; CN101928287A; CY1112218T1; MA27492A1

Description

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DESCRIÇÃO "NOVOS DERIVADOS ANTAGONISTAS DO RECEPTOR DA VITRONECTINA, PROCEDIMENTOS PARA A SUA PREPARAÇÃO, SUAS APLICAÇÕES COMO MEDICAMENTOS E AS COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS QUE OS CONTÊM" A presente invenção tem por objecto novos derivados antagonistas do receptor da vitronectina, procedimentos para a sua preparação, suas aplicações como medicamentos e as composições farmacêuticas que os contêm. A invenção tem por objecto os compostos da fórmula (I):

R1 (I) em que Ri, R2, R3, R4 e G têm os significados indicados abaixo assim como os seus sais fisiologicamente aceitáveis. Os compostos da fórmula (I) são compostos que têm uma actividade farmacológica e, por isso, são utilizáveis como medicamentos. São antagonistas do receptor da vitronectina, e inibidores da adesão celular, e inibem a reabsorção óssea mediada pelos osteoclastos. Por isso, são úteis para o tratamento terapêutico ou profiláctico de doenças que são provocadas, pelo menos em parte, por um aumento indesejado da reabsorção óssea como, por exemplo, a osteoporose. Além disso, a invenção tem por objecto os procedimentos de preparação dos compostos da fórmula (I), as suas aplicações, em particular como medicamentos, e as composições farmacêuticas que os contêm. 0 osso está constantemente em processo dinâmico que inclui a reabsorção óssea e a formação óssea. Estes 2 processos são mediados via células especializadas. A formação óssea é o resultado do depósito de uma matriz mineral pelos osteoblastos, e a reabsorção óssea é o resultado da dissolução desta matriz óssea pelos osteoclastos. A maioria dos problemas ao nivel dos ossos baseia-se numa perturbação do equilíbrio entre a formação óssea e a reabsorção óssea. A osteoporose caracteriza-se por uma perda seca desta matriz óssea. Um osteoclasto maduro activado reabsorve o osso depois da adesão à matriz óssea através da secreção de enzima proteolítica, e de protões no interior da zona de adesão, dando como resultado depressões ou cavidades da superfície do osso que aparecem no momento em que o osteoclasto se descola do osso.

Os estudos demonstraram que a fixação do osteoclasto no osso é mediada por receptores: as integrinas. As integrinas são uma superfamília de receptores que medeiam os processos de adesão célula/célula e mais particularmente célula/matriz, incluindo especialmente 0CnbP3 como receptor das plaquetas sanguíneas (fibrinogénio) e ανβ3 como receptor da vitronectina. Os péptidos que contêm o motivo RGD, assim como os anticorpos anti-avp3, são conhecidos pelas suas capacidades de inibição da reabsorção da dentina e do impedimento da adesão dos osteoclastos sobre as matrizes mineralizadas (Horton et al. Exp. Cell. Res. (1991), 195, 368) . 0 péptido equistatina, isolado do veneno da serpente, que contém igualmente um motivo RGD, e que é descrito como inibidor da adesão dos osteoclastos ao osso, é um inibidor potente da reabsorção óssea nos tecidos em cultivo in vitro (Sato et al. J. Cell. Biol. (1990), 111, 1713) e in vivo em ratos (Fisher et al. Endocrinology (1993), 132, 1411). O receptor ανβ3 é uma glicoproteína transmembranar que se expressa num grande número de células que incluem as células endoteliais, as células do músculo liso, os osteoclastos e as células cancerosas, o que leva a uma 3 pluripotencialidade dos compostos da fórmula (I) de acordo com a invenção.

Com efeito, os receptores ανβ3, expressos ao nível da membrana dos osteoclastos, são a base do processo de adesão/reabsorção, que contribuem para a organização do citosqueleto celular, e estão envolvidos na osteoporose. Os receptores 0Cvp3 expressos ao nível das células do músculo liso da aorta, estimulam as suas migrações para a neoíntima, o que conduz à formação da arteriosclerose e ao aparecimento de reestenose pós-angioplástica (Brown et al., Cardiovascular Res. (1994), 28, 1815). As células endoteliais segregam factores de crescimento que são mitógenos para o endotélio, e podem contribuir para a formação de novos vasos sanguíneos (angiogénese).

Desta forma, os antagonistas da integrina ανβ3 podem levar a uma regressão dos tumores cancerosos induzindo a apoptose dos vasos sanguíneos angiogénicos. (Brook et al. Cell (1994) 79, 1157) .

Cheresh et al. (Science 1995, 270, 1500) descrevem anticorpos anti-c^3, ou antagonistas do receptor (Χνβ3, que inibem o processo de angiogénese induzido por bFGF nos olhos de ratos, uma propriedade que pode ser utilizada para o tratamento de retinopatias, especialmente dos diabéticos. O pedido de patente WO-A-94/12181 descreve sistemas aromáticos ou não aromáticos substituídos, e o documento WO-A-94/08577 descreve heterociclos substituídos, como antagonistas do receptor de fibrinogénio e inibidores da agregação plaquetária. Nos documentos EP-A-528586 e EP-A-528587 descrevem-se derivados da fenilalanina, substituídos por um aminoalquilo ou um heterociclo, e o documento WO-A-95/32710 descreve derivados arílicos como inibidores da reabsorção óssea pelos osteoclastos. O documento WO-A-96/00574 descreve benzodiazepinas e o documento WO-A-96/00730 descreve compostos inibidores do receptor de fibrinogénio, em particular benzodiazepinas que estão 4 ligadas a um anel de 5 membros azotado, como antagonistas do receptor da vitronectina. Os documentos W09800395, W099/32457 e W099/37621 descrevem antagonistas do receptor da vitronectina derivados da tirosina. 0 documento EP0820991 reivindica derivados de cicloalquilo como antagonistas do receptor da vitronectina.

Outras investigações permitiram mostrar que os derivados da fórmula (I) apresentam uma forte actividade como antagonistas do receptor da vitronectina e da reabsorção óssea mediada pelos osteoclastos. A invenção tem por objecto os compostos da fórmula (I):

em todas as suas formas isómeras, isolados ou em mistura, assim como os seus sais de adição fisiologicamente aceitáveis, em que: - G representa

R7R8N-C (=NR6) -NH-CO

Het-NH-CO;

Het-NH-CH2-,

Het-,

Het representa um sistema monociclico ou policíclico, sendo cada anel constituído por 4 a 10 membros aromáticos ou não aromáticos, tendo o anel, ou pelo menos um dos anéis, de 1 a 4 átomos de azoto, substituído ou não substituído por um ou mais grupos Rg - R1 representa um átomo de hidrogénio, um grupo arilo (C5-C14); arilo (C5-C14) -alquilo (C4-C4); um radical amino não substituído ou monossubstituído ou dissubstituído por um radical alquilo e/ou um radical acilo contendo de 1 a 4 átomos de carbono; 5 - R2 representa um átomo de hidrogénio; um átomo de halogéneo; um grupo nitro; um radical alquilo que contém de 1 a 4 átomos de carbono; um radical amino não substituído ou monossubstituído ou dissubstituído por um radical alquilo e/ou um radical acilo contendo de 1 a 4 átomos de carbono; um grupo - (CH2) 0-2-CO2R5; ou um grupo - (CH2) 0-2-OR5; - R3 representa - um átomo de hidrogénio, - um radical -C02R5, - um radical -S02R5 ou - um sistema monocíclico ou policíclico, sendo cada anel constituído por 4 a 10 membros aromáticos ou não aromáticos, contendo o anel ou pelo menos um dos anéis, de 1 a 4 hetero-átomos escolhidos de entre N, O ou S, substituído ou não substituído por um ou mais radicais R9, - R4 representa OH; alcoxi (Ci-C8) ; aril (C5-C14) -alquiloxi (Ci~ C4); ariloxi (C5-C14); cicloalquiloxi (C3-C12); cicloalquil (C3-Ci2)-alquiloxi (C1-C4); alquilcarboniloxi (Ci-C8) -alquiloxi (Ci— C4); aril (C5-C14) -alquilcarboniloxi (C1-C4) -alquiloxi (C1-C4); dialquil (Ci-C8) aminocarbonilmetiloxi; aril (C5-C14) - dialquil(C1-C4)aminocarbonilmetiloxi; um radical amino não substituído ou monossubstituído ou dissubstituído por um radical alquilo (C1-C4) e/ou arilo (C5-C14) e/ou aril (C5-C14)-alquilo (C1-C4) e/ou um radical acilo (C1-C5); ou então o resíduo de um aminoácido D ou L; - R5 representa alquilo (Ci-Ce); arilo (C5-C14); aril (C5-C14)-alquilo (C1-C4) ; cicloalquilo (C3-C12) ou cicloalquil (C3-C12) -alquilo(C1-C4), bicicloalquil-alquilo(C1-C4) , tricicloalquil-alquilo (C1-C4) , estando tais radicais arilo, alquilo, cicloalquilo, bicicloalquilo e tricicloalquilo substituídos ou não substituídos por um ou mais grupos escolhido (s) de R9; - R6 representa um átomo de hidrogénio; um grupo hidroxilo; nitro; alquil (Ci-Ce) -O-CO; ou alquil (Ci—Ce) -0-C0-0-; 6 - R7 e R8, independentemente entre si representam um átomo de hidrogénio ou um radical alquilo (Ci-C6) - não substituído ou substituído por R9; - R9 representa halogéneo; amino; nitro; hidroxilo, alquiloxi (C1-C4); alquiltio (C1-C4); carboxi; alquiloxicarbonilo (C1-C4) ; alquilo (Ci-Cs) não substituído ou substituído por um ou mais átomos de halogéneo, arilo (C5-C14) , aril (C5-C14) -alquilo (C1-C4) .

Todos os radicais que se podem encontrar várias vezes nos compostos da fórmula (I) , por exemplo, o radical R9, são independentes entre si e podem ser idênticos ou diferentes.

Os radicais alquilo podem ser lineares ou ramificados. Isto aplica-se igualmente quando contêm um substituinte ou quando estão incluídos em grupos tais como, por exemplo, alcoxi, alcoxicarbonilo ou aralquilo.

Por alquilo (Ci—C8) entendem-se os radicais metilo, etilo, propilo, butilo, pentilo, hexilo, heptilo, octilo, nonilo, os n-isómeros destes radicais, isopropilo, isobutilo, isopentilo, neopentilo, iso-hexilo, 3-metilpentilo, 2,3,4-trimetil-hexilo, sec-butilo, terc-butilo, terc-pentilo. De entre os radicais preferidos podem-se referir os grupos alquilo (C1-C4) tais como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, e terc-butilo. De preferência, alquilo representa metilo ou etilo.

Os radicais cicloalquilo podem ser monocíclicos, bicíclicos ou tricíclicos. Trata-se, por exemplo, de radicais ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo, ciclo-heptilo, ciclo-octilo, ciclononilo, ciclodecilo, cicloundecilo, ciclododecilo, ciclotetradecilo ou ciclo-octadecilo, que chegado o momento podem ser substituídos, por exemplo, por um alquilo com 1 a 4 átomos de carbono. Como radicais cicloalquilo substituídos, podem-se referir o 4-meticiclo-hexilo e o 2,3-dimetilciclo-hexilo. 7

Os radicais bicicloalquilo e tricicloalquilo podem estar substituídos ou não substituídos em qualquer posição, por exemplo, por um ou mais grupos 0X0 e/ou um ou mais grupos alquilo idênticos ou diferentes, tais como metilo ou isopropilo e de preferência metilo. A ligação de união do radical bi ou tricíclico pode-se situar em qualquer posição da molécula. A ligação pode-se situar no átomo de carbono ponte ou num dos outros átomos de carbono. Esta ligação também se pode apresentar em qualquer posição do ponto de vista da estereoquímica como, por exemplo, exo ou endo. Como exemplo de radicais bicicloalquilo ou tricicloalquilo, podem-se referir: canfanilo, bornilo, adamantilo tal como 1-adamantilo ou 2-adamantilo, caranilo, episobornilo, epibornilo, norbornilo ou norpinanilo.

Por halogéneo entende-se flúor, cloro, bromo ou iodo. Pelo termo arilo (C5-C14), entende-se: os radicais arilo(C5-C14) heterocíclicos (= heteroarilo(C5-C14)), nos quais um ou mais átomos de carbono do anel são substituídos por um hetero-átomo tal como azoto, oxigénio ou enxofre, - ou então os radicais arilo(0δ-0ι4) carbocíclico.

De entre os radicais arilo(C6-C14) carbocíclicos, podem-se referir: fenilo, naftilo, bifenililo, antrilo ou fluorenilo e particularmente 1-naftilo, 2-naftilo e fenilo.

Salvo indicação em contrário, os radicais arilo, em particular fenilo, podem estar não substituídos ou substituídos por um ou mais radicais idênticos ou diferentes escolhidos de entre alquilo (Ci-C8) , em particular alquilo (C1-C4) , hidroxilo, alquiloxi (Ci-C8) , alquiltio (Ci-C8) , halogéneo tal como flúor, cloro e bromo, nitro, amino, alquilamino (C1-C4) , dialquilamino (C1-C4) , trifluorometilo, metilendioxi, ciano, aminocarbonilo, alquilaminocarbonilo(C1-C4), dialquilaminocarbonilo (C1-C4), carboxi, alcoxicarbonilo (C1-C4) , fenilo, fenoxi, benzilo e benziloxi. 8

No caso do fenilo monossubstituído, o substituinte pode-se situar na posição 2, 3 ou 4, e de preferência na posição 3 ou 4. Caso o fenilo esteja dissubstituido, os substituintes podem estar na posição 2,3 ou 2,4 ou 2,5 ou 2,6 ou 3,4 ou 3,5. De preferência, nos fenilos dissubstituidos, os dois substituintes estão na posição 3,4. Quando este fenilo está trissubstituido, as posições são as seguintes: 2,3,4 ou 2,3,5 ou 2,3,6 ou 2,4,5 ou 2,4,6 ou 3,4,5. Da mesma forma, os radicais naftilo ou outros radicais arilo podem estar substituídos em quaisquer posições como, por exemplo, o radical 1-naftilo na posição 2, 3, 4, 5, 6, 7, e 8, e o radical 2-naftilo na posição 1, 3, 4 , 5, 6, e 7 . 0 grupo arilo (C5-C14) pode representar igualmente um sistema aromático monociclico ou policiclico em que 1, 2, 3, ou 4 átomos de carbono do anel estão substituídos por hetero-átomos, em particular idênticos ou diferentes do grupo constituído por azoto, oxigénio e enxofre. De entre os grupos arilo (C5-C14) heterocíclicos (=heteroarilo(C5-C14) ) podem-se referir os grupos 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, pirrolilo, furilo, tienilo, imidazolilo, pirazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, tetrazolilo, piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, ftalazinilo, quinazolinilo, indolilo, isoindolilo, indazolilo, quinolilo, isoquinolilo, quinoxalinilo, cinolinilo, β-carbolinilo, ou também derivados benzocondensados, ciclopenta-, ciclo-hexa-, ou ciclo-heptacondensados destes radicais. 0 sistema heterocíclico pode estar substituído pelos mesmos substituintes anteriormente referidos para o sistema carbocíclico.

Os átomos de carbono optimamente activos contidos nos compostos da fórmula (I) podem apresentar independentemente uns dos outros a configuração R ou a configuração S. 9

Os compostos da fórmula (I) podem estar em forma de enantiómeros puros ou de diastereoisómeros puros ou em forma de uma mistura de enantiómeros como, por exemplo, em forma de racematos ou de misturas de diastereoisómeros. A presente invenção tem então por objecto os enantiómeros puros, as misturas destes enantiómeros, os diastereoisómeros puros e as misturas destes diastereoisómeros. A invenção compreende as misturas de dois ou mais de dois estereoisómeros da fórmula (I) e todas as relações destes estereoisómeros no seio de tais misturas.

Os compostos da fórmula (I) podem, chegado o momento, estar presentes em forma de isómeros E ou de isómeros Z. A invenção tem então por objecto os isómeros E puros, os isómeros Z puros e as misturas E/Z de acordo com qualquer relação. A invenção compreende igualmente todas a formas tautómeras dos compostos da fórmula (I), por exemplo, no que se refere à forma representada pela fórmula (I), com G = R7R8N-C (=NR6) -NH-CO considera-se a forma como a acilguanidina está presente em forma de um grupo CON=C (NR6) -NR7R8, e todas as outras formas que difiram pela posição diferente do átomo de hidrogénio.

Os diastereoisómeros, incluindo os isómeros E/Z, podem ser separados em isómeros individuais, por exemplo, por cromatografia. Os racematos podem ser separados em dois enantiómeros por métodos correntes tais como a cromatografia em fase quiral ou por métodos de resolução.

Os sais fisiologicamente aceitáveis dos compostos da fórmula (I) são em particular sais farmaceuticamente utilizáveis ou não tóxicos ou fisiologicamente utilizáveis.

Quando os compostos da fórmula (I) têm um grupo ácido tal como o ácido carboxilico, trata-se, por exemplo, de sais de metais alcalinos ou alcalino-térreos tais como os 10 sais de sódio, de potássio, de magnésio, de cálcio, e igualmente os sais formados com iões de amónio quaternários fisiologicamente aceitáveis e os sais de adição com ácidos tais como o amoníaco e as aminas orgânicas fisiologicamente aceitáveis como, por exemplo, trietilamina, etanolamina ou tris-(2-hidroxietil)amina.

Quando os compostos da fórmula (I) contêm um grupo básico, podem formar um sal de adição com ácidos como, por exemplo, com ácidos inorgânicos tais como o ácido clorídrico, sulfúrico, fosfórico ou com ácidos orgânicos carboxílicos tais como o ácido acético, trifluoroacético, cítrico, benzóico, maleico, fumárico, tartárico, metanossulfónico ou para-toluenossulfónico.

Os compostos da fórmula (I) que têm um grupo básico e um grupo ácido como, por exemplo, guanidino e carboxílico, podem estar presentes em forma de iões bipolares (betaínas), que estão igualmente incluídos na presente invenção.

Chegado o momento, um anião Q" fisiologicamente aceitável pode estar contido nos compostos da fórmula (I) que têm um grupo amónio carregado. Trata-se, de preferência, de um anião monovalente ou de um equivalente de anião polivalente de um ácido orgânico ou inorgânico não tóxico, fisiologicamente aceitável e, particularmente, farmaceuticamente aceitável como, por exemplo, o anião ou um equivalente de anião de um dos ácidos acima referidos, úteis para a formação dos sais de adição. Q~ pode ser, por exemplo, um dos aniões (ou equivalente de anião) de um grupo escolhido de entre cloro, sulfato, fosfato, acetato, trifluoroacetato, citrato, benzoato, maleato, fumarato, tartarato, metanossulfonato e para-toluensulfonato.

Os sais dos compostos da fórmula (I) podem ser obtidos pelos métodos normais conhecidos pelo 11 especialista na técnica como, por exemplo, combinando um composto da fórmula (I) com um ácido orgânico ou inorgânico ou uma base num solvente ou num dispersante ou a partir de outro sal por intercâmbio de catião ou de anião. A invenção inclui igualmente todos os sais dos compostos da fórmula (I) que, devido à sua baixa aceitabilidade fisiológica, não são directamente utilizáveis como medicamentos, mas são utilizáveis como produtos intermédios para a execução de modificações químicas posteriores ao nível dos compostos da fórmula (I), ou como produtos de partida para a preparação de sais fisiologicamente aceitáveis. A presente invenção inclui igualmente todos os solvatos dos compostos da fórmula (I) como, por exemplo, os hidratos, os solvatos formados com os álcoois, e todos os derivados dos compostos da fórmula (I) como, por exemplo, os ésteres, pró-fármacos e outros derivados fisiologicamente aceitáveis, assim como os metabolitos dos compostos da fórmula (I). A invenção tem mais particularmente por objecto os compostos da fórmula (I) em que G representa um grupo Het, Het-NHCO-, ou Het-NH-CH2- em que Het representa: 12

A invenção tem mais particularmente por objecto os compostos da fórmula (I) tal como acima definidos, em que R3 é um heterociclo escolhido de entre 13

assim como os seus sais de adição farmaceuticamente aceitáveis. A invenção tem mais particularmente por objecto os compostos da fórmula (I) tal como acima definidos, em que R3 é um grupo benziloxicarbonilo, assim como os seus sais de adição farmaceuticamente aceitáveis. A invenção tem mais particularmente por objecto os compostos da fórmula (I) tal como acima definidos em que R2 é um hidrogénio, um radical alquilo que tem de 1 a 4 átomos de carbono, e particularmente metilo e etilo, ou um átomo de flúor assim como os seus sais de adição farmaceuticamente aceitáveis. A invenção tem mais particularmente por objecto os compostos da fórmula (I) tal como acima definidos em que: - G representa

assim como os seus sais de adição farmaceuticamente aceitáveis. A invenção tem mais particularmente por objecto os compostos da fórmula (I) tal como acima definidos em que - G representa 14

R1 representa um átomo de hidrogénio, R2 representa um átomo de hidrogénio, um átomo de flúor, um radical metilo ou um radical etilo, R3 representa um grupo benziloxicarbonilo, R4 representa um grupo hidroxi ou alquiloxi(C1-C4), assim como os sais de adição farmaceuticamente aceitáveis. A invenção tem particularmente por objecto os compostos da fórmula (I) com os nomes seguintes: 3-[[5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina 3-[[5-etil-6-[4-[(1,2,3,4,5,6-hexa-hidro-2-pirimidinil)iminocarbonil]-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina 3- [ [6- [4- (1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-metil-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina 3- [ [6- [4- [ (1,2,3,4,5,6-hexa-hidro-2-pirimidinil)iminocarbonil]-1-piperidinil]-5-metil-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina 3- [ [5-etil-6-[4-(l,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[ (fenilmetoxi)carbonil]alaninato de etilo 3- [ [6- [4- (1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-metil-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de isopropilo 3- [ [5-etil-6-[4-(l,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-i-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo) 15 3-[[5-metil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo) 3- [ [5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-(1-naftalensulfonil)alaninato de (1,1-dimetiletilo) na configuração (R) ou na configuração (S) ou as suas misturas, assim como os seus sais de adição. A presente invenção tem igualmente por objecto um procedimento de preparação dos compostos da fórmula (I) . Os compostos em geral podem ser preparados, por exemplo, durante uma síntese convergente por acoplamento de dois ou mais fragmentos que podem derivar por retrossíntese dos compostos da fórmula (I) . Tendo em vista evitar que os grupos funcionais possam conduzir a reacções indesejáveis ou secundárias no decurso de cada etapa de síntese, pode ser vantajoso ou necessário no decurso da síntese dos compostos da fórmula (I), que se introduzam os grupos funcionais em forma de precursores que depois se converterão em grupos funcionais desejados ou que se bloqueiem temporariamente estes grupos funcionais seguindo uma estratégia de grupo protector apropriada para a síntese que é conhecida pelo especialista na técnica (Greene, Wuts protective Group in Organic Synthesis, Wiley 1991).

Desta forma, os compostos da fórmula (I) podem ser preparados de acordo com o esquema seguinte: 16

A invenção tem então por objecto um procedimento de preparação dos compostos da fórmula (I) em que se faz reagir um composto da fórmula (II):

em que R1, R2, R3 e R4 são como anteriormente definidos, com um composto da fórmula (III)

G

NH (III) 17 em que G é como anteriormente definido, na presença de uma base ou de um reagente de acoplamento de metal de transição.

Em seguida, submete-se eventualmente o composto da fórmula (I) a ruptura da função R3-HN- para se regenerar a amina livre, a que segue a condensação de radicais R3 de estrutura -C02-R5 ou -SO2-R5, e/ou chegado o momento, à hidrólise e eventualmente à esterificação ou à amidificação e/ou à salificação. A titulo de variante, a invenção tem igualmente por objecto um procedimento de preparação dos compostos da fórmula (I) em que se faz reagir um composto da fórmula (II) tal como anteriormente definido com um composto da fórmula (Illa) :

O

(IIIa) tendo em vista a obtenção do composto intermédio da fórmula (IV): 0

R1 (IV) depois, faz-se reagir um composto da fórmula Het-NH2, tendo em vista a obtenção dos compostos da fórmula (I), representando G um grupo Het-NHCO-, depois submete-se eventualmente o composto da fórmula (I) obtido a ruptura da função R3-NH- para se regenerar a amina livre, a que se segue a condensação de radicais R3 de 18 estrutura -C02-R5 ou -S02R5, e/ou chegado o momento à esterificação ou à amidificação e/ou à salificação. 0 acoplamento de um composto da fórmula (II) com um derivado de piperidina da fórmula (III) ou (Illa) pode ser efectuado na presença de uma base forte em refluxo. Utiliza-se particularmente a di-isopropiletilamina. 0 tempo de reacção pode variar de 4 a 12 horas em refluxo.

Ao nivel do composto da fórmula (IV), quando OR é hidroxilo, se uma guanidina da fórmula (Het-NH2) reagir com um ácido carboxílico da fórmula (IV), então, activa-se primeiramente o ácido carboxílico. A activação pode ser efectuada, por exemplo, com um diciclo-hexilcarbodi-imida (DCCI) ou com tetrafluoroborato de 0-( (ciano(etoxicarbonil)metilen)amino)-1,1,3,3-tetrametilurónio (TOTU; Kõnig et al, Proc. 21st Europ. Peptide Symp. 1990 (Eds Giralt, Andreu, Escom, Leiden 1991, p. 243) ou outros agentes activantes correntes em síntese peptídica.

Além das guanidinas livres da fórmula (Het-NH2) , os sais de guanidina podem igualmente ser utilizados na reacção com os compostos da fórmula (IV), sendo formadas as guanidinas livres in situ ou por uma etapa separada por intermédio de uma base. A reacção de um derivado activo de um ácido carboxílico da fórmula (IV) com a guanidina (ou derivado) da fórmula (Het-NH2) é efectuada de preferência de uma forma conhecida num solvente orgânico prótico ou aprótico, mas inerte. Neste caso utilizam-se solventes tais como metanol, isopropanol, terc-butanol, dimetilformamida, diclorometano ou tetra-hidrofurano a temperaturas de 0°C até à temperatura de refluxo destes solventes, especialmente durante a reacção de esteres metílicos ou etílicos (OR é um metoxi ou um etoxi) com as guanidinas.

As reacções dos compostos da fórmula (IV) com as guanidinas livres são efectuadas vantajosamente num 19 solvente aprótico inerte tal como dimetilformamida, diclorometano, tetra-hidrofurano, dimetoxietano ou dioxano, chegado o momento adicionando uma base tal como, por exemplo, terc-butóxido de potássio, metóxido de sódio ou uma base orgânica tal como N-metilmorfolina. No entanto, também se pode utilizar a água como solvente nas reacções dos compostos da fórmula (IV) com as guanidinas da fórmula (Het-NH2), por exemplo, utilizando uma base tal como o hidróxido de sódio. A mistura de reacção é depois tratada e, se se desejar, o produto de reacção é purificado seguindo os métodos conhecidos pelo especialista na técnica.

Os grupos protectores eventualmente presentes nos compostos da fórmula (I) obtidos a partir dos compostos da fórmula (IV) com as aminas ou guanidinas da fórmula Het-NH2, ou a partir de compostos da fórmula (II) com os compostos da fórmula (III), eliminam-se em seguida por procedimentos clássicos; por exemplo, os grupos éster terc-butilico convertem-se em ácido carboxilico por tratamento com ácido trifluoroacético, os grupos benzilo são eliminados por hidrogenação ou também os grupos fluorenilmetoxicarbonilo são eliminados na presença de amina secundária, e são utilizadas outras reacções por procedimentos Standard, por exemplo, por reacções de acilação.

As reacções de hidrólise tendo em vista a obtenção de um derivado de ácido (COR4 = C02H), de esterificação tendo em vista a obtenção de um éster ou de um pró-fármaco (especialmente COR4 = alquiloxicarbonilo ou ariloxicarbonilo a partir do ácido correspondente), ou de amidificação (COR4 = aminocarbonilo mono- ou dissubstituido a partir do ácido correspondente), são efectuadas seguindo os métodos usuais conhecidos pelo especialista na técnica. 20

Especialmente se a hidrólise for efectuada no meio ácido, por exemplo, na presença de ácido trifluoroacético, num solvente orgânico halogenado como, por exemplo, diclorometano.

Se for necessário, a conversão em sais fisiologicamente aceitáveis é efectuada pelos procedimentos conhecidos pelo especialista na técnica.

Os compostos de partida da fórmula (II) podem ser preparados de acordo com os procedimentos descritos na bibliografia ou então são acessíveis por analogia. A preparação dos compostos da fórmula (II) está ilustrada no esquema descrito acima, entendendo-se que a presente invenção não está restrita a estas sínteses ou a estes produtos de partida. O especialista na técnica não terá grandes dificuldades em prever as modificações das sínteses descritas neste pedido para a preparação de outros compostos da fórmula (II) de acordo com a invenção. A invenção tem então por objecto o procedimento de preparação dos compostos da fórmula (II) caracterizado pelo facto de se fazer reagir um composto da fórmula (V) R2

(V) R1

Em que R1 e R2 são como anteriormente definido, e X representa um halogéneo, de preferência cloro, com um composto da fórmula (VI)

Em que R3 e R4 são tais como anteriormente definidos, na presença de uma base forte. 21

Geralmente utiliza-se uma base forte impedida, tal como di-isopropiletilamina em condições de reacção conhecidas pelo especialista na técnica na utilização de substituição nucleófila. De preferência, trabalha-se na presença de dimetilformamida e à temperatura de refluxo. Por outro lado, o grupo C0R4 representará de preferência um grupo éster impedido, tal como o grupo terc-butiloxicarbonilo.

De acordo com outra variante da invenção, os produtos da fórmula (I) podem igualmente ser preparados de acordo com o esquema seguinte: R2 ΗΟγ^γΟΗ N^N R1 R2 π

Νγ N M R1

De acordo com a invenção, o procedimento de preparação dos produtos da fórmula (I) consiste na reacção de um produto da fórmula (lia)

R1 (Ha) em que R1, R2, G e X são tal como anteriormente definidos, 22 com um produto da fórmula (VI)

em que R3 e R4 são como anteriormente definidos, na presença de uma base forte, ou então por catálise com paládio, b) depois submete-se eventualmente o produto da fórmula (I) a ruptura da função R3-NH- para se regenerar a amina livre, a que se segue a condensação do radical R3 de estrutura -C02-R5 ou -SO2-R5, e/ou chegado o momento, à hidrólise e eventualmente à esterificação ou à amidificação e/ou à salificação. A reacção da pirimidina da fórmula (lia) com a amina da fórmula geral (VI) é efectuada em condições análogas às condições anteriormente descritas para a reacção de uma pirimidina da fórmula (V) com a amina da fórmula geral (VI) . Em especial, é possível trabalhar-se na di-isopropiletilamina num solvente orgânico tal como uma amida (por exemplo, dimetilacetamida, dimetilformamida), a uma temperatura no intervalo entre 90°C e a temperatura de refluxo da mistura de reacção. É igualmente possível trabalhar-se por catálise com paládio (por exemplo, tris(dibenziliden-acetona)dipaládio) na presença de fluoreto de césio, à temperatura de refluxo da mistura de reacção. Entende-se que as funções que podem interferir com a reacção serão protegidas. A protecção e a libertação destas funções são efectuadas de acordo com os métodos habituais que não alteram a restante molécula. A condensação de radicais R3 de estrutura -C02-R5 ou S02-R5 com a amina livre, e a hidrólise, são efectuadas da forma anteriormente descrita.

Os derivados de pirimidina da fórmula (lia) podem ser preparados por acção de um produto da fórmula (III) 23

ΝΗ em que G é tal como acima definido, sobre um derivado di-halogenado da pirimidina da fórmula (V) R2

T R1 em que Rl, R2 e X são como anteriormente definidos. A reacção é vantajosamente efectuada na presença de uma base forte impedida, à temperatura de refluxo da mistura de reacção. Trabalha-se nas condições abaixo descritas nos exemplos, e especialmente na presença de uma amina impedida como a di-isopropiletilamina, numa amida como, por exemplo, a dimetilacetamida. Entende-se que as funções que possam interferir com a reacção serão protegidas. A protecção e a libertação destas funções é efectuada de acordo com os métodos habituais que não alteram a restante molécula.

Os compostos da fórmula (I) são compostos que têm uma actividade farmacológica e, desta forma, podem ser utilizados como medicamentos, especialmente no tratamento ou na prevenção de doenças ósseas, doenças tumorais e igualmente problemas cardiovasculares.

Por isso, a presente invenção tem por objecto os compostos da fórmula (I) e/ou os seus sais fisiologicamente aceitáveis como medicamentos.

Os compostos da fórmula (I) assim como os seus sais fisiologicamente aceitáveis e os seus pró-fármacos podem ser administrados a animais, de preferência aos mamíferos e particularmente aos seres humanos, como medicamentos terapêuticos ou profilácticos.

Podem-se administrar tal como estão ou em mistura com um ou mais compostos da fórmula (I), ou também em forma de 24 uma preparação farmacêutica (composição farmacêutica), que permita uma administração enteral ou parenteral, e que contenha como composto activo uma dose eficaz de pelo menos um composto da fórmula (I) e/ou os seus sais fisiologicamente aceitáveis, assim como veículos e/ou aditivos normais e farmaceuticamente inertes.

As composições farmacêuticas de acordo com a invenção, permitem uma administração enteral ou parenteral contendo como composto activo uma dose eficaz de pelo menos um composto da fórmula (I) e/ou os seus sais fisiologicamente aceitáveis assim como um ou mais veículos farmaceuticamente inertes, e/ou um ou mais aditivos habituais.

Por isso, a invenção tem por objecto as composições farmacêuticas contendo um composto da fórmula (I) tal como anteriormente definido, assim como um ou mais excipientes.

Os medicamentos podem ser administrados oralmente, por exemplo, em forma de pastilhas, comprimidos, comprimidos revestidos, películas, grânulos, cápsulas e cápsulas moles, soluções, xaropes, emulsão, suspensão ou mistura de aerossol.

No entanto, a administração pode ser efectuada por via rectal, por exemplo, em forma de supositório, por via parenteral, por exemplo, em forma de soluções injectáveis ou de infusões, microcápsulas ou implantes, por via percutânea, por exemplo, em forma de pomada, soluções, pigmentos ou corantes, por via transdérmica em forma de emplastros ou por outras vias como, por exemplo, em forma de aerossol ou de pulverização nasal.

As composições farmacêuticas de acordo com a invenção são preparadas de acordo com métodos conhecidos em si mesmos, em veículos orgânicos ou inorgânicos, farmaceuticamente inertes, sendo adicionados aos compostos da fórmula (I) e/ou aos seus sais fisiologicamente aceitáveis. 25

Para a produção de pastilhas, comprimidos, comprimidos revestidos e cápsulas de gelatina dura, é possível utilizar, por exemplo, lactose, amido de milho ou os seus derivados, talco, ácido esteárico ou os seus sais, etc. Os veículos adequados para as cápsulas em gelatina mole ou para os supositórios são, por exemplo, gorduras, ceras, polióis semi-sólidos ou líquidos, óleos naturais ou modificados, etc. Os veículos apropriados para a preparação de soluções como, por exemplo, as soluções injectáveis, as emulsões ou os xaropes são, por exemplo, água, álcoois, glicerol, polióis, sacarose, açúcares investidos, glicose, óleos vegetais, etc. Os veículos adequados para as microcápsulas ou os implantes são, por exemplo, os copolímeros de ácido glioxílico e de ácido láctico. As preparações farmacêuticas contêm normalmente de 0,5% a 90% em peso de compostos da fórmula (I) e/ou dos seus sais fisiologicamente aceitáveis.

Além dos princípios activos e dos veículos, as preparações farmacêuticas podem conter aditivos tais como, por exemplo, diluentes, desagregantes, ligantes, lubrificantes, agentes humidificantes, estabilizantes, emulsionantes, conservantes, agentes edulcorantes, corantes, agentes aromatizantes ou aromatizantes, espessantes, agentes tamponantes, e também solventes ou solubilizantes ou agentes para a obtenção de um efeito retardante e igualmente sais para a modificação da pressão osmótica, agentes de revestimento ou antioxidantes.

Podem igualmente conter dois ou mais compostos da fórmula (I) e/ou os seus sais fisiologicamente aceitáveis. Adicionalmente, além do pelo menos um composto da fórmula (I) e/ou os seus sais fisiologicamente aceitáveis, podem conter pelo menos um ou mais princípios activos utilizáveis a título terapêutico ou profiláctico.

As preparações farmacêuticas (composições farmacêuticas) contêm normalmente de 0,2 a 500 mg, de 26 preferência de 1 a 200 mg de composto da fórmula (I) e/ou os seus sais fisiologicamente aceitáveis e/ou os seus pró-fármacos.

Os compostos da fórmula (I) são particularmente antagonistas dos receptores da vitronectina e desta forma, por exemplo, são capazes de inibir a adesão de osteoclastos sobre a superfície dos ossos, e de igual modo a reabsorção óssea pelos osteoclastos. A acção dos compostos da fórmula (I) pode ser demonstrada, por exemplo, num ensaio em que se determina a inibição da união da vitronectina às células que contêm o receptor da vitronectina. Os detalhes sobre este ensaio são apresentados abaixo. Como antagonistas do receptor da vitronectina, os compostos da fórmula (I) e os seus sais fisiologicamente aceitáveis, são geralmente adequados para o tratamento ou prevenção de doenças relacionadas com interacções entre os receptores da vitronectina e os seus ligandos, nos processos de interacção célula/célula ou célula/matriz, ou que podem ser influenciados pela inibição de interacções deste tipo, para aliviar ou curar quando se desejar uma inibição das interacções deste tipo. Tal como explicado no início, tal interacção desempenha um papel importante na reabsorção óssea, na angiogénese ou na proliferação de células do músculo vascular liso.

As doenças ósseas cujo tratamento ou prevenção necessitam da utilização de compostos da fórmula (I), são especialmente a osteoporose, hipercalcemia, osteopenia, por exemplo, causada pelas metástases ósseas, os problemas dentais como, por exemplo, as parodontites, hiperparatiroidismo, as erosões periarticulares na artrite reumatóide e a doença de Paget. Além disso, os compostos da fórmula (I) podem ser utilizados para aliviar, impedir ou tratar os problemas ósseos que são provocados pelos tratamentos, pelos glicocorticóides, pelas terapias ligadas à ingestão de esteróides ou de corticosteróides ou pelas 27 deficiências de hormonas sexuais masculinas ou femininas. Todos estes problemas se caracterizam por uma perda óssea, que se baseia numa falta de equilíbrio entre a formação óssea e a destruição óssea, e que pode ser influenciada favoravelmente pela inibição da reabsorção óssea pelos osteoclastos. Conjuntamente com esta utilização como inibidor da reabsorção óssea mediada através dos osteoclastos, os compostos da fórmula (I) e os seus sais fisiologicamente aceitáveis são utilizados como inibidores do crescimento tumoral ou das metástases cancerosas, no tratamento de problemas inflamatórios, no tratamento ou prevenção dos problemas cardiovasculares, tais como arteriosclerose ou a reestenose, ou no tratamento ou prevenção de nefropatia ou retinopatia tal como, por exemplo, a retinopatia diabética.

Os compostos de acordo com a invenção podem ter igualmente uma actividade face a outras integrinas que interagem com o seu ligando através da sequência tripeptidica RGD (ανβι, Οίνβδ, (ΧιιΒβ3) , conferindo as propriedades farmacológicas utilizáveis para o tratamento das patologias associadas a estes receptores.

Esta actividade face às integrinas torna desta forma os compostos da fórmula (I) utilizáveis na prevenção ou no tratamento de numerosas doenças tais como as acima mencionadas, ou as mencionadas na revista de Dermot Cox DN§P 8(4) Maio de 1995, 197-205, cujo conteúdo é incorporado no presente pedido.

Por conseguinte, a presente invenção tem mais particularmente por objecto um composto da fórmula (I) e/ou os seus sais f isiologicamente aceitáveis tal como acima definidos, como medicamento com uma actividade antagonista do receptor da vitronectina.

Por conseguinte, a presente invenção tem mais particularmente por objecto um composto da fórmula (I) e/ou os seus sais fisiologicamente aceitáveis e/ou os seus pró- 28 fármacos tal como acima definidos, como medicamento com uma actividade inibidora da reabsorção óssea ou para o tratamento ou prevenção da osteoporose.

Por conseguinte, a presente invenção tem mais particularmente por objecto um composto da fórmula (I) e/ou os seus sais f isiologicamente aceitáveis tal como acima definidos, como medicamento com uma actividade inibidora do crescimento tumoral ou das metástases cancerosas.

Por conseguinte, a presente invenção tem mais particularmente por objecto um composto da fórmula (I) e/ou os seus sais f isiologicamente aceitáveis tal como acima definidos, como medicamento com uma actividade anti-inflamatória ou para o tratamento ou a prevenção dos problemas cardiovasculares, reestenose, arteriosclerose, nefropatias ou retinopatias. A presente invenção tem igualmente por objecto a utilização de compostos da fórmula (I) e/ou dos seus sais fisiologicamente aceitáveis tal como acima definidos, para a preparação de medicamentos destinados à prevenção ou ao tratamento da osteoporose. A presente invenção tem igualmente por objecto a utilização dos compostos da fórmula (I) e/ou dos seus sais fisiologicamente aceitáveis tal como acima definidos, para a preparação de medicamentos destinados à inibição do crescimento tumoral ou das metástase cancerosas. A presente invenção tem igualmente por objecto a utilização dos compostos da fórmula (I) e/ou os seus sais fisiologicamente aceitáveis tal como acima definidos, para a preparação de medicamentos destinados à prevenção ou ao tratamento dos problemas cardiovasculares, da reestenose, da arteriosclerose, de nefropatias ou de retinopatias.

Quando se utilizam os compostos da fórmula (I) , as doses podem variar entre grandes limites e devem ser fixadas em função da pessoa a tratar. Isto depende, por exemplo, do composto utilizado ou da natureza e da 29 gravidade da doença a tratar, e do facto de se encontrar em condições graves ou crónicas, ou de se utilizar um tratamento profiláctico.

No caso de uma administração por via oral, a dose diária varia geralmente de 0,01 a 100 mg/kg e de preferência de 0,1 a 50 mg/kg, particularmente de 0,1 a 5 mg/kg. Por exemplo, para um adulto de 75 Kg pode-se prever uma dose diária que varia de 0,3 a 0,5 mg/Kg.

No caso de uma administração por via intravenosa, a dose diária varia de cerca de 0,01 até 100 mg/Kg, e de preferência de 0,05 a 10 mg/kg A dose diária pode ser dividida, em particular no caso da administração de grandes quantidades de principio activo, em várias como, por exemplo, 2, 3 ou 4 partes. Chegado o momento, em função do comportamento individual, pode ser necessário administrar as diferentes doses de forma crescente ou decrescente. Além da utilização dos compostos da fórmula (I) como medicamentos, pode-se igualmente prever a sua utilização como veiculo ou suporte de compostos activos, tendo em vista levar estes compostos activos de forma específica para um sítio de acção (Direcção de fármacos, veja Targeted Drug Delivery, R. C. Juliano, Handbook of Experimental Pharmacology, Vol. 100, Ed. Born, G. V. R. et al., Springer Verlag) . Os compostos activos que podem ser levados são em particular os que são utilizados para o tratamento ou prevenção das doenças acima referidas.

Os compostos da fórmula (I) e os seus sais podem igualmente ser utilizados como agentes de diagnóstico, por exemplo, para métodos in vitro, ou como auxiliares em estudos bioquímicos em que se deseje bloquear o receptor da vitronectina ou influir nas interacções células/células ou células/matrizes. Além disso, podem ser utilizados como intermediário para a preparação de outros compostos, particularmente outros agentes activos, que são acessíveis 30 a partir dos compostos da fórmula (I), por exemplo, por modificação ou introdução de radicais ou de grupos funcionais.

Exemplos

Os produtos foram identificados por espectro de massa (MS), infra-vermelhos (IR) e/ou espectro de RMN. Os compostos, que foram purificados por cromatografia utilizando um eluente contendo, por exemplo, ácido acético ou trif luoroacético, e que depois se secam, ou em que durante a última etapa de síntese, por exemplo, do ácido trifluoroacético, foram utilizados para a eliminação de um grupo protector terc-butilo, contêm por vezes, em função da forma como se faz a secagem do produto, ácido proveniente do eluente ou da última etapa de síntese e que, por conseguinte, se encontram parcial ou totalmente em forma de sal do ácido utilizado como, por exemplo, em forma de um sal de ácido acético ou trifluoroacético. Podem igualmente estar mais ou menos hidratados.

Abreviaturas/nomes químicos eventualmente utilizados:

AcOEt: acetato de etilo; EDCI: cloridrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etil-carbodi-imida; DMF:

dimetilformamida; DIPEA: Di-isopropiletilamina; MeOH metanol; TEA: trietilamina; TFA: ácido trifluoroacético; THF: tetra-hidrofurano; MCPBA: ácido meta- cloroperoxibenzóico; DBU: 1,8-diazabiciclo [ 5.4.0] undec-7-eno; APTS: ácido paratoluensulfónico; DPPA:

difenilfosforilazida; DMSO: dimetilssulfóxido; Pd/C

Paládio sobre carvão; Boc: terc-butoxicarbonilo; CBz benziloxicarbonilo; DCC: 1,3-diciclo-hexilcarbodi-imida; TMSBr: bromotrimetilsilano; TMSI: iodeto de trimetilsilano. IR: Infra-vermelho; RMN: Ressonância Magnética Nuclear; SM: Espectro de Massa; ESP Electropulverização no modo positivo; ep: ombro; F: forte; s: singleto; d: dobleto; t: 31 tripleto; q: quadrupleto; quint: quintupleto; 1: largura; m: multipleto ou mássico; J: constante de acoplamento; Rf: factor de retenção (cromatografia).

Entende-se que nos exemplos que se seguem, os produtos dos exemplos 1 a 5 estão em forma racémica, os produtos dos exemplos 6 a 9, 11, e 13 a 41, assim como os seus ésteres precursores, estão em forma (S) sobre o centro assimétrico da 3-amino alanina, e os exemplos 10 e 12 e chegado o momento os seus ésteres precursores estão em forma (R) sobre o centro assimétrico da 3-amino alanina.

Preparação 1 Síntese de 4,6-dicloro-5-etil-pirimidina (composto da fórmula (V).

HO

OH POCI3/PhNEt2

Uma mistura de 5 g (35,7 mmoles) de 5-etil-4,6-di-hidroxipirimidina (comercializada pela Aldrich) em 30 ml de oxicloreto de fósforo é mantida em refluxo durante 1 hora. Depois de voltar à temperatura ambiente, adiciona-se gota a gota uma mistura de 4 ml de N, N-dietilanilina em 10 ml de oxicloreto de fósforo, e deixa-se tudo em refluxo durante 4 horas. Depois de voltar à temperatura ambiente, deita-se o meio de reacção sobre uma mistura de gelo e água. Extrai-se em acetato de etilo, lavam-se as fases orgânicas com ácido clorídrico 2N, secam-se sobre sulfato de magnésio e evaporam-se até que fiquem secas no vácuo. Obtêm-se 6 g (Rend = 95 %) de um óleo castanho de produto esperado utilizado em seguida tal como está. CCM: Rf = 0,5 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol 90-10)

Exemplo 1 32

Bis(trifluoroacetato) de 3-[[5-etil-6-[4-(1,2, 3,4-tetra-hidro-1,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina

Etapa a) Síntese de 3-[(6-cloro-5-etil-4-pirimidinil)amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil] alaninato de (1,1-dimetiletilo).

A uma mistura de 3,8 g (21 mmoles) de 4,6-dicloro-5-etil-pirimidina e 4,4 g (15 mmoles) de 3-amino-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo) (preparado de acordo com J. Med. Chem. (2001), 44(8), 1158— 1176) em 50 ml de dimetilformamida, adicionam-se 10 ml de di-isopropiletilamina, depois aquece-se esta mistura a 120°C durante 6 horas. Elimina-se então a dimetilformamida no vácuo, e recolhe-se o resíduo numa mistura de acetato de etilo, água e uma solução saturada de bicarbonato de sódio. Decanta-se a fase orgânica e depois seca-se a mesma sobre sulfato de magnésio, e elimina-se o solvente por evaporação no vácuo. Cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica, eluindo-se com um gradiente de heptano 100% até heptano-acetato de etilo 50-50. Obtêm-se 4,7 g (Rend0 = 70 %) de produto esperado em forma de um óleo. CCM: Rf = 0,2 (gel de sílica, eluente: heptano-acetato de etilo 70-30) IR (CHC13) : 3411 (NH); 1718 (C=0); 1571;1498 cm-1 (Heterociclo+AromáticofAmido) 1H-RMN (DMSO-d6) : Ô 1,02 (t, 3H, CH2-CH3); 1,30 (s, 9H, tBu) ; 2,57 (q, 2H, CH2-CH3) ; 3,74 (m, 2H, NH-CH2-CH-NH) ; 4,29 (ql, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 5,00 e 5,06 (sist. AB, 2H, 0-CH2-Ph) ; 7,22 (tl, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 7,34 (m, 5H, Ph) ; 7,64 (dl, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 8,16 ppm (s, 1H, N=CH-N) 33 HPLC/SM: (tr=26 minutos): 435 (MH+); 379 (MH-tBu+).

Etapa b) Síntese de 3-[ [5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l, naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo).

3 Cf 3C00H

Agita-se uma mistura de 1,68 g (3 mmoles) de tris(trifluoroacetato) de 1,2,3,4-tetra-hidro-7-(4-piperidinil)-1,8-naftiridina, (preparado de acordo com as patentes EP1065207 ou WO 0078317) e 7,5 g (14,1 mmoles equivalentes de base) de poliestireno aminometílico (Polymer Labs, 1,88 mmoles/g), em 200 ml de solução de diclorometano-metanol 50-50, à temperatura ambiente durante 1 hora. Filtra-se a mistura, lava-se a resina com metanol e diclorometano, e concentra-se a filtragem até que fique seca no vácuo, dando 630 mg de amina livre. Adicionam-se a este resíduo 651 mg (1,5 mmoles) de 3-[(6-cloro-5-etil-4-pirimidinil)-amino]-N-[(fenilmetoxi)-carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo) e 2 ml de di-isopropiletilamina, e mantém-se em refluxo durante 8 horas. Evapora-se o meio de reacção até que fique seco no vácuo, e recolhe-se o resíduo em acetato de etilo, água e uma solução saturada de bicarbonato de sódio. Separa-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio e evapora-se o solvente no vácuo. Cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica, eluindo-se sucessivamente com diclorometano puro, uma mistura de diclorometano-metanol 90-10 e depois uma mistura de diclorometano-metanol-água-ácido acético 90-10-1-1. Obtêm-se 115 mg (Rend = 12%) de um produto esperado em forma de óleo. Recuperam-se igualmente 280 mg (43%) de composto clorado de partida. 34 CCM: Rf = 0,55 (alumina, eluente: heptano-acetato de etilo 50-50). IR (CHC13) : 3438 (NH 1717 (C=0); 1583; 1500 cm-1 (Heterociclo+Aromático+Amido). 1H-RMN (DMSO-d6) : Ô 1,06 (t, 3H, CH2-CH3) ; 1,31 (s, 9H, tBu); 1,77 (m, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 1,78 (m, 4H, CH2-CH-CH2) ; 2,43 (q, 2H, CH2-CH3) ; 2,51 (m, 1H, CH2-ÇH-CH2) ; 2,61 (m, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 2,82 e 3,44 (2m, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2) ; 3.23 (m, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 3,72 (m, 2H, NH-CH2-CH-NH) ; 4.23 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 5,03 (dl, 2H, CHg-Ph); 6,22 (m, 1H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 6,30 e 7,05 (2m, 2H, H naftiridina) ; 6,35 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 7,34 (m, 5H, Ph) ; 7,60 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 8,11 ppm (N=CH-N) . HPLC/SM: (tr=14 minutos): 616 (MH+).

Etapa c) Síntese de bis(trifluoroacetato) de 3-[ [5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina.

Agitam-se 110 mg (0,18 mmoles) de 3—[[5—etil—6 — [4 — (1,2,3,4-tetra-hidro-l, 8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo) em 5 ml de diclorometano com 1 ml de ácido trifluoroacético à temperatura ambiente até desaparecimento do produto de partida em CCM (gel de sílica, eluente: CH2Cl2-Me0H-H20-Ac0H 90-10-1-1). Adiciona-se tolueno, e evapora-se o meio de reacção até que fique seco no vácuo. Solubiliza-se o resíduo na quantidade mínima de diclorometano com um pouco de metanol, depois deita-se sobre um éter di-isopropílico. Filtra-se o precipitado. 35

Obtêm-se 108 mg (Rend° =76%) de produto esperado em forma de um sólido amorfo. CCM: Rf = 0,33 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 90-10-1-1) IR (CHC13) : 1677 (C=0) ; 1626; 1586; 1500 cm-1 (Heterociclo+Aromático+Amido). 1H-RMN (DMSO-d6) : δ 1,07 (t, 3H, CH2-CH3) ; 1,77 e 1,94 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH-) ; 1,84 (m, 2H, ΝΗ-ΟΗ2-ΟΗ2-ΟΗ2-) ; 2,45 (q, 2H, CH2-CH3) ; 2,75 (t, 2H, NH-CH2-CH2-CH2-) ; 2,85 (t, 1H, N-CH2-CH2-CH-) ; 2,98 e 3,53 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH-) ; 3,43 (m, 2H, N-CH2-CH2-CH2-) ; 3,61 e 3,85 (2m, 2H, NH CH2-CH-NH) ; 4,32 (q, 1H, NH-CH2-CH-NH, ) ; 4,99 e 5,04 (sist. AB, 2H, Q-CH2-Ph) ; 6,67 (d, 1H, H naftiridina) ; 7,22 (sl, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 7,35 (m, 5H, Ph) ; 7,60 (d, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 7,64 (d, 1H, H naftiridina), 8,26 (s, 1H, N=CH-N) ; 8,29 ppm (sl, 1H, NH-CH2-CH2-CH2-) . HPLC/SM: (tr=8,0 minutos): 560 (MH+); 427 (MH-

Naftiridina+); 280 (M+2H++)

Microanálise:

Teoria 0=51,84 %; H=4,99 %; N=12,45%;

Encontrado C=52,0 %; H=5,2 %; N=12,4 %;

Exemplo 2 3- ( [5-etil-6- (4-[(1,2,3,4,5,6-hexa-hidro-2-pirimidinil)-iminocarbonil]-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina.

Etapa a) Síntese de 3- [ [5-etil-6-[4-(metoxicarbonil)-1- piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)-carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo). 36

Aquece-se a uma temperatura entre 110 e 120°C uma mistura de 1,2 g (2,8 mmoles) de 3-[ (6-cloro-5etil-4-pirimidinil)amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo), 5 ml de 4-piperidinilcarboxilato de metilo e 1 ml de di-isopropiletilamina, durante 4 horas. Depois de ela arrefecer à temperatura ambiente, recolhe-se o meio de reacção em acetato de etilo, água e uma solução saturada de bicarbonato de sódio. Separa-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio, e depois concentra-se até ficar seca no vácuo. Cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica com um gradiente de heptano puro até acetato de etilo puro. Obtêm-se 260 mg (Rend° = 17%) de produto esperado em forma de um óleo. CCM: Rf = 0,36 (gel de sílica, eluente: heptano- acetato de etilo 50-50) . IR (CHC13) : 3422 (NH) ; 1725 (C=0) ; 1582; 1499 cm-1 (Heterociclo+Aromático+Amido) 1H-RMN (DMSO-d6) : δ 1,05 (t, 3H, CH2-CH3) ; 1,30 (s, 9H, tBu) ; 1,67 e 1,88 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH) ; 2,40 (q, 2H, CH2-CH3) ; 2,50 (m, 1H, N-CH2-CH2-CH) ; 2,81 e 3,33 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH); 3,62 (s, 3H;0-CH3) ; 3,71 (m, 2H, NH-CH2-CH- NH); 4,22 (q, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 5,02 (s, 2H, Q-CH2-Ph) ; 6,36 (t, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 7,34 (m, 5H, Ph) ; 7,64 (d, 1H, NH-CH2-CH-NH); 8,10 ppm (s, 1H, N=ÇH-N). HPLC/SM: (tr=12min) : 564 (MNa+) ; 542 (MH+) ; 486 (MH- tBu+) .

Etapa b) Síntese de 3-[[5-etil-6-[4-[(1,2,3,4,5,6-hexa-hidro-2-pirimidinil)iminocarbonil]-1-piperidinil]-4-pirimidinil]-amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina. 37

Agita-se uma mistura de 250 mg (0,46 mmoles) de 3-[[5-etil-6-[4-(metoxicarbonil)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo) e 200 mg (2,0 mmoles) de 2-amino-1,4,5,6-tetra-hidropirimidina (preparada de acordo com R. F. Evans J. Chem. Soc. 1964, 2450-2455) em 15 ml de diclorometano durante 24 horas à temperatura ambiente. Depois de se evaporar até ficar seca no vácuo, cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica eluindo-o com um gradiente de diclorometano-metanol-água-ácido acético 85-15-2-2. Depois da evaporação do solvente das fracções interessantes, recolhe-se o resíduo na quantidade mínima de uma mistura de metanol-diclorometano 50-50, e precipita-se o ácido por adição de éter etílico. Depois da filtração e secagem no vácuo, obtêm-se 18 mg (Rend0 = 7%) de produto esperado em forma de um sólido amorfo. CCM: Rf = 0,5 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-ácido acético 70-20-10) IR (CHCls) : 3287 (OH/NH) ; 1700; 1600 (C=0) ; 1582; 1499 cm-1 (Heterociclo+Aromático+Amido) . 1H-RMN (DMSO-d6) : Ò 1,05 (t, 3H, CH2-CH3) ; 1,67 e 1,86 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH-) ; 1,80 (m, 2H, NH-CH2-CH2-CH2-NH) ; 2,26 (m, 1H, N-CH2-CH2-CH-) ; 2,38 (m, 2H, CH2-CH3) ; 2,78 e 3,33 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH-) ; 3,24 (m, 4H, NH-CH2-CH2-CH2- NH) ; 3,42 e 3,75 (2m, 2H, NH-CH2-CH-NH) ; 4,08 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH); 4,95 e 5,00 (sist. AB, 2H, Q-CH2-Ph) ; 6,10 (tl, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 6,74 (sl, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 7,30 (m, 5H, Ph) ; 8,05 (s, 1H, N=CH-N) ; 8,55 ppm (sl, 2H, NH-CH2-CH2-CH2-NH) . 38 HPLC/SM; (tr=6min): 553 (MH+); 364 (MH-tBu-PhCH2+); 320 (MH-tBu-Z+).

Exemplo 3 3- [[6-[4-(l,2,3, 4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-metil-4-pirimidinil]amino]-N-[ (fenil-metoxi)carbonil]alanina

Etapa a) Síntese de 3-[(6-cloro-5-metil-4-pirimidinil)amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo).

Aquece-se a 120°C uma mistura de 325 mg (2 mmoles) de 4, 6-dicloro-5-metil-pirimidina (comercializado por SPECS), 600 mg (2 mmoles) de 3-amino-N- [(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo) (preparado de acordo com J. Med. Chem. (2001), 44 (8), 1158-1176) em 3ml de dimetilformamida e 3 ml de di-isopropiletilamina durante uma noite. Concentra-se o meio de reacção até que fique seco no vácuo, e recolhe-se o resíduo numa mistura de água, acetato de etilo e uma solução de bicarbonato de sódio saturado. Separa-se a fase orgânica e extrai-se a fase aquosa com acetato de etilo. Secam-se as fases orgânicas reunidas sobre sulfato de magnésio e depois evapora-se o solvente no vácuo.

Cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica, eluindo-se com um gradiente de heptano (100%) até uma mistura de heptano-acetato de etilo (50-50). Obtêm-se 450 mg (Rend0 = 53%) de produto esperado em forma de um óleo. CCM: Rf = 0,5 (gel de sílica, eluente: acetato de etilo-heptano 25-75) 39 1H-RMH (CDC13): Ô 1,48 (s, 9H, tBu); 2,08 (s, 3H, CH3) ; 3,80 e 3,97 (2m, 2H, NH-CH2-CH-NH) ; 4,50 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH); 5,08 e 5,15 (sist. AB, 2H, Q-CH2-Ph) ; 5,86 (dl, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 6,12 (sl, 1H, NH-CH2-CH-NH); 7,35 (m, 5H,

Ph); 8,30 ppm (s, 1H, N=CH-N). SM (FAB): 421 (MH+); 365 (ΜΗ-tBu).

Etapa b) Síntese de 3-[[6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8- naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-metil-4- pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo).

Aquece-se a 120°C uma mistura de 370 mg (0,88 mmoles) de 3-[(6-cloro-5-metil-4-pirimidinil)amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo) e 1,0 g (1,79 mmoles) de tris (trifluoroacetato) de 1,2,3,4-tetra-hidro-7-(4-piperidinil)-1,8-naftiridina (preparada de acordo com as patentes EP1065207 ou WO 0078317) em 1 ml de di-isopropiletilamina durante 2 horas. Adicionam-se então 10 ml de xileno, e mantém-se o meio em refluxo durante 4 horas. Recolhe-se o meio de reacção numa mistura de água, acetato de etilo e solução saturada de bicarbonato de sódio. Decanta-se a fase orgânica e reextrai-se a fase aquosa com um acetato de etilo. Secam-se as fases orgânicas reunidas sobre sulfato de magnésio e evapora-se até ficar seco no vácuo, e cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica com um gradiente de acetato de etilo 100% até uma mistura de acetato de etilo-metanol-trietilamina-diclorometano 50-10-10-50. Obtêm-se 32 mg (Rend0 = 6%) de produto esperado, e recuperam-se 200 mg (54%) de produto clorado de partida. 40 CCM: Rf=0,6 (gel de sílica, eluente: acetato de etilo diclorometano-metanol 50-40-10) 1H-RMN (CDC13) : δ 1,49 (s, 9H, tBu) ; 1,97 (m, 2H, NH-CH2-CH2-CH2) ; 2,01 (s, 3H, CH3) ; 2,18 (m, 4H, N-CH2-CH2-CH) ; 2,79 (m, 2H, NH-CH2-CH2-CH2) ; 2,98 (m, 1H, N-CH2-CH2-CH) ; 3,39 e 3,89 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH) ; 3,52 (m, 2H, NH-CH2- CH2-CH2); 3,77 e 4,09 (2m, 2H, NH-CH2-CH-NH) ; 4,47 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 5,13 (Sl, 2H, 0-CH2-Ph) ; 5,92 (sl, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 6,47 (dl, 1H, H naftiridina) ; 7,37 (m, 5H,

Ph) ; 7,38 (m, 1H, H naftiridina); 8,41; 8,68 e 14,80 ppm (3sl, 3H, N=CH-N e móveis) . SM: 602 (MH+); 546 (MH-tBu+).

Etapa c) Síntese da 3-[[6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8- naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-metil-4-pirimidinil]-amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina.

Agita-se à temperatura ambiente uma mistura de 38 mg (0,06 mmoles) de 3-[ [6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-metil-4-pirimidinil]-amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1— dimetiletilo) e 2 ml de ácido trifluoroacético em 10 ml de diclorometano durante 3 horas. Adicionam-se então 5 ml de tolueno, e evapora-se a mistura até ficar seca. Obtêm-se 26 mg (Rend° = 76%) de produto esperado em forma de um sólido amorfo. CCM: Rf=0,8 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 90-10-1-1). 1H-RMN (DMSO-d6) : ò 1,84 (m, 2H, NH-CH2-CH2-CH2) ; 1,92 (s, 3H, CH3) ; 1,75 e 1,91 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH) ; 2,74 (m, 41 2Η, NH-CH2-CH2-CH2) ; 2,84 (m, 1H, N-CH2-CH2-CH) ; 2,92 e 3,67 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH) ; 3,44 (m, 2H, NH-CH2-CH2-CH2) ; 3,63 e 3,82 (2m, 2H, NH-CH2-CH-NH) ; 4,29 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH); 5,02 (sl, 2H, Q-CH2-Ph) ; 6,68 (d, 1H, H naftiridina); 7,20 a 7,40 (m, 5H, Ph) ; 7,64 (dl, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 7,65 (d, 1H, H naftiridina); 7,82 e 8,21 ppm (2sl, 3H, N=CH-N e móveis) . HPLC/SM: (tr=7min) 546 (MH+); 273 (M+2H++) .

Exemplo 4 3- [ [6— [4 — [ (1,2,3,4,5,6-hexa-hidro-2-pirimidinil)-iminocarbonil]-1-piperidinil] -5-metil-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenil-metoxi)carbonil]alanina

Etapa a)

Sintese de 3-[[6-[4-(metoxicarbonil)-1-piperidinil]-5-metil-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]-alaninato de (1,1-dimetiletilo)

Aquece-se em refluxo uma mistura de 80 mg (0,19 mmoles) de 3-[(6-cloro-5-metil-4-pirimidinil)-amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo) e 3 ml de 4-piperidinilcarboxilato de metilo durante 3 horas. Recolhe-se o meio de reacção, depois de ele ter arrefecido, em água, acetato de etilo e uma solução saturada de bicarbonato de sódio. Separa-se a fase orgânica e reextrai-se a fase aquosa com acetato de etilo. Secam-se as fases orgânicas reunidas sobre sulfato de magnésio, e depois elimina-se o solvente no vácuo. Cromatografa-se 0 resíduo sobre gel de sílica, eluindo-se com um gradiente de heptano (100%) até heptano-acetato de etilo (50-50). Obtêm-se 25 mg (Rend0 = 25%) do produto esperado em forma de óleo. 42 CCM: Rf=0,3 (gel de sílica, eluente: acetato de etilo-heptano 50-50) IR (CHC13) : 3421 (NH); 1724 (C=0); 1585; 1501 cm-1(C=C, C=N) 1H-RMN (DMSO-d6) : δ 1,31 (s, 9H, tBu) ; 1,68 (ql, 2H, CH2-CH(C=Q) ) ; 1,87 (m, 2H, CH2-CH (C=0) ) , 1,87 (s, 3H, CH3-C=) ; 2,51 (mascarado, 1H, -CH2-CH-CH2-) ; 2,80 (tl, 2H, -N-(CH2) 2- (CH2) 2-) ; 3,44 (dl, 2H, -N-(CH2) 2-(CH2) 2-) ; 3,62 (s, 3H, CH3-O) ; 3,71 (m, 2H, NH-CH2~CH-NH-) ; 4,22 (m, 1H, NH- CH2-CH-NH-); 5,03 (sl, 2H, Q-CH2-Ph) ; 6,35 sl, 1H, NH-CH2-CH-NH-); 7,34 (m, 5H, Ph) ; 7,63 (dl, 1H, NH-CH2-CH-NH-) ; 8,08 ppm (s, 1H, N=CH-N). HPLC/SM: (tr=17min) 528 (MH+); 472 (MH-tBu+)

Etapa b) Síntese de 3-[ [6-[4-[ (1,2,3,4,5,6-hexa-hidro-2-pirimidinil)iminocarbonil]-1-piperidinil]-5-metil-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina.

Agita-se à temperatura ambiente uma mistura de 100 mg (0,19 mmoles) de 3-[[6-[4-(metoxicarbonil)-1-piperidinil]-5-metil-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]-alaninato de (1,1-dimetiletilo) e 150 mg (1,5 mmoles) de 2-amino-1,4,5,6-tetra-hidropirimidina (preparada de acordo com R. F. Evans J. Chem. Soc. 1964, 2450-2455) em 10 ml de diclorometano durante 5 horas. Evapora-se o meio de reacção até ficar seco no vácuo, e cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica, eluindo-se com uma mistura de diclorometano-metanol-água-ácido acético 85-15-2-2. Obtêm-se 10 mg (Rend0 = 10%) de produto esperado em forma de um sólido amorfo. 43 CCM: Rf=0,4 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 85-15-2-2) 1H-RMN (DMS0-d6): δ 1,64 e 1,74 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH); 1,77 (m, 2H, NH-CH2-CH2-CH2-NH) ; 1,85 (s, 3H, CH3) ; 2,11 (m, 1H, N-CH2-CH2-CH) ; 3,17 (m, 4H, NH-CH2-CH2-CH2-NH) ; 2,68 e 3,42 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH) ; 3,30 e 3,62 (2m, 2H, HN-CH2- CH-NH) ; 3,73 (m, 1H, N-CH2-CH-NH) ; 5,00 (m, 2H, Q-CH2-Ph) , 6,54 (dl, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 6,77 (sl, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 7,33 (m, 5H, Ph); 8,04 ppm (s, 1H, N=CH-N). HPLC/SM: (tr=l,9min) 1077 (2MH+) ; 539 (MH+); 440 (MH- aminotetra-hidropirimidina+)

Exemplo 5

Dicloridrato de 3-[[5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il) -1-piperidinil] -4-pirimidinil] amino] -N- [ (fenilmetoxi)carbonil]alaninato de etilo

A 4 ml de etanol arrefecido a -12°C em atmosfera de azoto adicionam-se 160 μΐ (2,19 mmoles) de cloreto de tionilo, e agita-se a mistura durante 30 minutos. Adiciona-se então uma solução de 354 mg (0,45 mmoles) de bis(trifluoroacetato) de 3-[[5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra- hidro-l, 8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina em 13 ml de etanol. Agita-se a mistura durante 30 minutos a -12°C, depois deixa-se voltar à temperatura ambiente, e finalmente aquece-se a 40°C em azoto durante 4 horas. Evapora-se o meio de reacção até ficar seco no vácuo e cristaliza-se o resíduo numa mistura de éter di-isopropílico e pentano, e filtra-se o sólido. Obtêm-se 44 284 mg (Rend0 - 95%) de produto esperado em forma de um sólido bege amorfo. CCM: Rf=0,4 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 90-10-1-1) IR (CHC13) : 3400-3000 (OH, NH) ; 1719(0=0); 1654; 1623; 1580 1504 cm-1(C=C, C=N, aromático) 1H-RMN (DMSO-d6) : δ 1,09 (t, 3H, ΟΗ2-ΟΗ3) ; 1,14 (t, 3H, O-CH2-CH3) ; 1,85 (m, 2H, ΝΗ-ΟΗ2-ΟΗ2-ΟΗ2) ; 1,85 e 2,00 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH) ; 2,48 (m, 2H, CH2-CH3) ; 2,75 (t, 2H, NH- CH2-CH2-CH2) ; 2,92 (m, 1H, N-CH2-CH2-CH) ; 3,03 e 3,57 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH) ; 3,44 (t, 2H, N-CH2-CH2-CH2) ; 3,76 e 3,87 (2m, 2H, NH-CHz-CH-NH) ; 4,07 (q, 2H, Q-CH2-CH3) ; 4,39 (q,

1H, NH-CH2-CH-NH) , 5,03 (s, 2H, Q-CH2-Ph) ; 6,62 (d, 1H, H naftiridina) ; 6,86 (sl, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 7,30 (m, 5H,

Ph) ; 7,33 (sl, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 7,58 (d, 1H, H naftiridina); 8,20 ppm (s, 1H, N=CH-N). HPLC/SM: (tr=6,2min) 588 (MH+); 454 (MH-COOCH2Ph+) ; 437 (MH-NHCOOCH2Ph+) .

Exemplo 6 Síntese de 4,6-di-hidroxi-5-metil-pirimidina

0 0

EtONa Η,Ν^ΝΗ

EtOH ΗΟγΙγΟΗ

N^N A uma solução de 7,5 g (94 mmoles) de cloridrato de formamidina em 250 ml de etanol arrefecido a 0°C adicionam-se 102 ml (282 mmoles) de uma solução de etilato de sódio ao 21% em etanol, e agita-se a mistura durante 30 minutos. Adiciona-se então uma solução de 13 ml (94 mmoles) de metilmalonato de dietilo em 50 ml de etanol, e agita-se durante uma noite à temperatura ambiente. Evapora-se a mistura de reacção até ficar seca sob pressão reduzida (2 kPa), e recolhe-se o resíduo em acetato de etilo, água e ácido acético para se levar o pH a 6. Filtra-se o precipitado, depois lava-se sucessivamente com água, isopropanol, éter dietílico e finalmente pentano. Obtêm-se 45 7 g (Rend0 = 60%) de produto esperado em forma de um sólido bege. CCM: Rf=0,20 (gel de sílica, eluente: acetato de etilo-diclorometano-metanol 50-40-10) 1H-RMN (DMSO d6): Ô ppm 1,73 (s, 3H, C~CH3) ; 7,88 (s, N=CH-N). SM: 127 (MH+); 125 (M-H-). Síntese de 4,6-dibromo-5-metil-pirimidina

Aquece-se uma mistura de 6 g (47,6 mmoles) de 5-metil-4,6-di-hidroxi-pirimidina em 18 g de oxibrometo de fósforo até 200°C durante 3 horas. Depois de a mistura de reacção voltar à temperatura ambiente, recolhe-se com uma mistura de água gelada e bicarbonato de sódio, e extrai-se em acetato de etilo, lavam-se as fases orgânicas com água, secam-se sobre sulfato de magnésio e evaporam-se até ficarem secas sob pressão reduzida (2 kPa). Obtêm-se 9 g (Rend0 = 75%) de um sólido bege. CCM: Rf=0,27 (gel de sílica, eluente: diclorometano-pentano 50-50) 1H-RMN (CDCI3) : δ ppm 2,58(s, 3H, C-CH3); 8,51 (s, N=CH-N) . SM: 253-255 (MH+) . Síntese de 6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-metil-4-bromopirimidina

Num balão de ensaio contendo 8 g (36,8 mmoles) de 4-(1,2,3, 4-tetra-hidro-l, 8-naftiridin-7-il)-1-piperidina livre de sais, adicionam-se 70 ml de dimetilacetamida, 46 7,56 g (30 mmoles) de 4,6-dibromo-5-metil-pirimidina em solução em 4 0 ml de dimetilacetamida, e 14 ml de di-isopropiletilamina. Aquece-se esta mistura a 140°C durante 4 horas, depois concentra-se até ficar seca sob pressão reduzida (2 kPa) . Recolhe-se o resíduo obtido com uma mistura de água, acetato de etilo e uma solução de bicarbonato de sódio saturado. Separa-se a fase orgânica, e reextrai-se a fase aquosa com acetato de etilo. Secam-se as fases orgânicas reunidas sobre sulfato de magnésio, depois evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa) . Lava-se o sólido obtido várias vezes com éter di-isopropílico e depois com pentano, e obtêm-se 7,7 g do produto esperado em forma de um pó castanho claro. Concentra-se a filtragem até ficar seca, depois cromatografa-se sobre gel de sílica, eluindo-se com um gradiente de acetato de etilo (100%) e depois acetato de etilo-metanol (95-5). Obtêm-se 533 mg de produto esperado em forma de um pó amarelo. (Rend0 global = 70%).

Preparação de naftiridina em forma de amina livre:

Deslocam-se 22 g de naftiridina do seu sal com 6 equivalentes mássicos de resina básica Amberlist A21 (resina do tipo R-NMe2) numa mistura CH2Cl2/MeOH/AcOEt 1/1/1 com agitação durante 30 minutos. Lava-se previamente a resina e deixa-se que ela se inche durante 20 minutos nesta mistura de solvente. Esta operação deve ser repetida 3 vezes para que a deslocação do sal seja total. Depois da filtração da resina, e da evaporação dos solventes, obtêm-se 8 g (36,8 mmoles) de naftiridina livre. CCM: Rf=0,33 (gel de sílica, eluente: acetato de etilo (100%)). 1H-RMN (DMSO-d6) : δ 1,7 a 1,85 (m, 6H, NH-CH2-CH2-CH2, N-CH2-CH2-CH-CH2) ; 2,23 (s, 3H, CH3-) ; 2,60 (m, 3H, CH2-CH-CH2, NH-CH2-CH2-CH2) ; 3,23 (m, 2H, NH-CH2-CH2-CH2) ; 2,97 e 3,92 (2m, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2) ; 6,3 e 7,05 (2d, 2H, CH=CH naftiridina); 8,28 (s, 1H, N=CH-N). 47 SM (FAB): 388(M); 389(MH+) Síntese de 3-[ [5-metil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo).

Aquece-se em refluxo uma mistura de 620 mg (1,6 mmoles) de 4-bromo-5-metil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-pirimidina, 565 mg (1,92 mmoles) de 3-amino-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo) (preparado de acordo com J. Med. Chem. (2001), 44(8), 1158-1176), 340 mg (2,25 mmoles) de fluoreto de césio, 73 mg (0,08 mmoles)de tris(dibenzilidenacetona) dipaládio (0), e 100 mg (0,16 mmoles) de S(-)2,2'-bis(difenil-fosfino)-1,1'-binaftilo em 50 ml de dioxano durante 5 horas. Arrefece-se, e depois adicionam-se novamente 280 mg (0,96 mmoles) de 3-amino-N-[(fenilmetoxi)-carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo), 340 mg (2,25 mmoles) de fluoreto de césio, 73 mg (0,08 mmoles) de tris (dibenzilidenacetona)dipaládio (0), e 100 mg (0,16 mmoles) de S(-)2,2'-bis(difenil-fosfino)-1,1'-binaftilo, e aquece-se em refluxo durante 5 horas. Evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa), e recolhe-se o resíduo em acetato de etilo, água e uma solução saturada de bicarbonato de sódio. Separa-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio, e evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa) . Cromatografa-se o resíduo uma primeira vez sobre gel de sílica, eluindo-se com um gradiente de acetato de etilo-cloreto de metileno-trietilamina-metanol de 50-50-0-0 a 50-50-2-2. Cromatografa-se o produto obtido uma segunda vez sobre alumina, eluindo-se com uma mistura de heptano- 48 cloreto de metileno 50-50 e depois acetato de etilo-éter di-isopropílico 50-50. Obtêm-se 360 mg (Rend0 = 37%) de produto esperado em forma de sólido amorfo branco. CCM: Rf= 0,20 (gel de sílica, eluente: cloreto de metileno-metanol 95-5). IR (CHC13) : 3435 (NH); 1717 (C=0); 1583,1555,1501 cm-1 (Heterociclo+Aromático+Amido). 1H-RMN (CDC13): δ : 1,47 (s, 9H , tBu ); 1,94 (s, 3H , c- CHa) ; : 1,75 a 2,05(m, 6H , CH 2-ÇH2 -ch2- -NH e Cíb-CH-CHz) ; 2, 60 a 2,77 (m, 3H, ch2-ch- -ch2 e CH2-CH2-CH 2-NH) ; 2,93 e 3, 90 (2m, 4H, CH2-CH2-N· -CH2-CH2); 3,42 (m, 2H, ch2-ch2 -CH2-NH) ; 3 , 66 (m, 2H, nh-ch2-ch- -NH) ; 4 ,45 (m, 1H, NH- ch2-ch -NH); 4, 95, 5, 25 e 6,20 (3m, 3H, CH2- ch2- ch2-nh, nh-ch2-ch- -NH, NH- ch2- -CH- NH) ; 5,12 (s, 2H, CH2-Ph) ; 7 ,35 (m, 5H, Ph) ; 8,29 ppm (s , N [=CH- N) . SM: 602 (MH+); 546 (MH-tBu+); 412 (MH-COOCH2Ph+) . [<XD] (0, 625% EtOH) : -4,5° Síntese de bis (trifluoroacetato) de 3-[[5-metil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l, 8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4- pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina

Agitam-se 350 mg (0,58 mmoles) de 3-[[5-metil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo) em 15 ml de diclorometano com 3 ml de ácido trifluoroacético à temperatura ambiente até ao desaparecimento do produto de partida em CCM (gel de sílica, eluindo CH2Cl2-Me0H-H20-Ac0H 90-10-1-1) . Adiciona-se tolueno, e evapora-se a mistura de reacção até ficar seca sob pressão reduzida (2 kPa). Solubiliza-se o produto num 49 mínimo de diclorometano com um pouco de metanol e depois deita-se sobre éter di-isopropílico. Filtra-se o precipitado. Obtêm-se 330 mg (Rend0 = 73% expressos como ditrifluoroacetato) de produto esperado em forma de um sólido branco. CCM: Rf=0,44 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 90-10-1-1) 1H-RMN (CDC13) : δ 1,96 (s, 3H, C~CH3) ; 1,80 a 2,05 (m, 6H, CH2-CH2-CH2-NH e CH2-CH-CH2) ; 2,76 (t, 2H, ΝΗ-ΟΗ2-ΟΗ2-ΟΗ2-

); 2,96 (t, 1H, N-CH2-CH2-CH-) 3,21 e 3,83 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH-); 3,50 (m, 2H, Ν-ΟΗ2-ΟΗ2-ΟΗ2-) ; 3,83, e4,05 (2m, 2H, NH-CHz-CH-NH) ; 4,54 (q, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 5, 50 (s, 2H, 0-CH2-Ph) ; 6,40 (d, 1H, H naftiridina) ; 6,55 (dl, 1H, NH) ; 7,28 (m, 5H, Ph); 7,45 (ml, 1H, NH); 8,22 (d, 1H, H naftiridina), 8,22 (s, 1H, N=CH-N); 9,62 ppm (sl, 1H). SM: 546 (MH+) ; 412 (MH-COOCH2Ph+) ; 544- (M-H-); 436-(544-OCH2Ph-); 1089- (2M-H-) [aD] (0,60% MeOH):-14,0.

Exemplo 7

Preparação da naftiridina em forma de amina livre:

Deslocam-se 22 g de naftiridina do seu sal por 6 equivalentes mássicos de resina básica Amberlist A21 (resina do tipo R-NMe2) numa mistura CH2Cl2/MeOH/AcOEt 1/1/1 com agitação durante 30 minutos. Lava-se previamente a resina, e deixa-se que inche durante 20 minutos nesta mistura de solvente. Esta operação deve ser repetida 3 vezes para que a deslocação do sal seja total. Depois da filtração da resina e da evaporação dos solventes, obtêm-se 8 g (36,8 mmoles) de naftiridina livre. CCM: Rf=0,33 [gel de sílica, eluente: acetato de etilo (100%)] 1H-RMN (DMSO-d6) : δ 1,7 à 1,85 (m, 6H, NH-CH2-CH2-CH2, N-CH2-CH2-CH-CH2) ; 2,23 (s, 3H, CH3-) ; 2,60 (m, 3H, CH2-CH- CH2, NH-CH2-CH2-CH2) ; 3,23 (m, 2H, NH-CH2-CH2-CH2) ; 2,97 e 50 3,92 (2m, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2) ; 6,3 e 7,05 (2d, 2H, CH=CH naftiridina); 8,28 (s, 1H, N=CH-N). SM (FAB): (tr=0,50 minutos e 2,80 minutos): 388(M); 389 (MH+) Síntese de N-(alfa)-Z-L,2-3-diaminopropionato de etilo

Num balão de ensaio contendo 26 ml de etanol absoluto, adicionam-se gota a gota e a 0°C 12 ml (168 mmoles) de cloreto de tionilo. Agita-se esta mistura durante vinte minutos à TA, depois adicionam-se, em pequenas quantidades, 2 g (8,4 mmoles) de ácido N-(alfa)-Z-L,2-3-diamino-propiónico, aparecendo uma turvação branca.

Em seguida, mantém-se a mistura de reacção em refluxo (78°C) durante 2 horas (ao fim de alguns minutos de aquecimento, a solução fica clara) .

Depois de arrefecer, concentra-se a solução até ficar seca. Obtém-se um líquido amarelo ao qual se adiciona éter isopropílico. Espessa-se o produto esperado, elimina-se então o sobrenadante, e recolhe-se o resíduo numa mistura de água, acetato de etilo e solução de bicarbonato de sódio saturado. Separa-se a fase orgânica, e extrai-se novamente a fase aquosa em acetato de etilo. Secam-se as fases orgânicas reunidas sobre sulfato de magnésio e depois evapora-se o solvente no vácuo. Obtêm-se 1,4 g de um óleo amarelo pálido, que é o éster em forma de amina livre (rendimento = 63 %). CCM: Rf = 0,41 [Gel de sílica, eluente: cloreto de metileno-metanol (85-15) e 2% de água-ácido acético (1-1)]. 51 1H-RMN (CDC13) : δ 1,33 (t, 3H, CH3-CH2-0) ; 2,53 (m, 2H, NH2-CH2-CH) 3,15 (m, 2H, NH2-CH2-CH) ; 4,22 (q, 2H, CH3-CH2- 0) ; 4,42 (m, 1H, NH2-CH2-CH-NH) ; 5,85 (m, 1H, CH-NH-CO) ; 5,15 (s, 2H, 0-CH2-Ph) ; 7,35 (m, 5H, Ph) SM (FAB): (tr = 0,51 minutos e 1,2 minutos): 267 (MH+); 533 (2MH+) [a]D (CHC13) = +6,336

Sintese de 3- [ [6- [4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8- naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-metil-4-pirimidinil]-amino]-N-[(fenil-metoxi)carbonil]alaninato de etilo

Aquece-se em refluxo durante 4 horas uma mistura de 1,9 g (4,9 mmoles) de 6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8- naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-metil-4-bromo-pirimidina e 1,62 g (6,08 mmoles) de 3-amino-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de etilo, na presença de 1,06 g (6,86 mmoles) de fluoreto de césio, 310 mg (490 μιηοΙθΞ) de (2,2 '-bis (difenilfosfino)-1,1'-binaftilo e 230 mg (245 μηιοΙβΞ) de tris(dibenzilidenacetona)dipaládio(0) em 40 ml de 1,2-dimetoxietano. Deixa-se depois que a mistura de reacção volte à temperatura ambiente para se adicionarem 230 mg (245 μιηοίβε) de tris (dibenzilidenacetona) dipaládio (0), e depois mantém-se novamente em refluxo durante 16 horas.

Depois de ela arrefecer, concentra-se a solução até ficar seca e depois recolhe-se numa mistura de água, acetato de etilo e solução saturada de bicarbonato de sódio. Decanta-se a fase orgânica, e extrai-se a fase aquosa em acetato de etilo. Secam-se as fases orgânicas 52 reunidas sobre sulfato de magnésio, e submetem-se a evaporação até ficarem secas no vácuo. Cromatografa-se o residuo sobre gel de silica com acetato de etilo a 100%. Obtêm-se 1,15 g do produto esperado em forma de óleo amarelo pálido (rendimento = 40 %) CCM: Rf= 0,16 (gel de silica, eluente: acetato de etilo 100 %) 1H-RMN (CDC13) : δ 1,25 (t, 3H, CH3-CH2-0) ; 1,80 a 2,05 (m, 9H, NH-CH2-CH2-CH2, N-CH2-CH2-CH-CH2, CH3-C=C-) ; 2,72 (m, 3H, CH2-CH-CH2, NH-CH2-CH2-CH2) ; 2,95 e 3,93 (2m, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2) ; 3,45 (m, 2H, ΝΗ-ΟΗ2-ΟΗ2-ΟΗ2) ; 3,68 (d, 2H, NH-CH2-CH-NH) 4,23 (t, 2H, CH3-CH2-Q) , 4,45 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH); 5,10 e 5,17 (sist. AB, 2H, Q-CH2-Ph) ; -6,41 e 7,18 (2d, 2H, CH=CH naftiridina) ; 7,35 (m, 5H, Ph) ; 8,27 (s, 1H, N=CH-N). HPLC/SM: (tr = 0,48 minutos e 2,9 minutos): 574 (MH+); 440 [MH - Z+]; 287 [MH - (tBu - Z+) ] [a]D (CHCI3) = + 0,788

Formação do cloridrato:

MW =610,15 M F=C31H39N704.HCI

Solubilizam-se 1,15 g de 3-[[6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-1,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-metil-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de elito num mínimo de cloreto de metileno. Deita-se esta solução sobre um éter etílico, (a solução deve ficar 53 transparente). Adicionam-se depois, gota a gota, com agitação, 2,65 ml de HC1 2N diluído num pouco de éter etílico. Espessa-se o cloridrato, elimina-se o sobrenadante e depois cristaliza-se o resíduo em éter isopropílico. Obtém-se então um sólido que se filtra e se lava com éter e depois com pentano. Depois de ele secar, obtêm-se 890 mg de um pó amarelo pálido (rendimento = 73%)

Exemplo 8

Preparação da naftiridina em forma de amina livre:

Deslocam-se 22 g de naftiridina do seu sal mediante 6 equivalentes mássicos de resina básica Amberlist A21 (resina do tipo R-NMe2) numa mistura CH2Cl2/MeOH/AcOEt 1/1/1 com agitação durante 30 minutos. Lava-se previamente a resina, e deixa-se que inche durante 20 minutos nesta mistura de solvente. Esta operação deve ser repetida 3 vezes para que a deslocação do sal seja total. Depois de se filtrar a resina, e de se evaporarem os solventes, obtêm-se 8 g (36,8 mmoles) de naftiridina livre. CCM: Rf=0,33 [gel de sílica, eluente: acetato de etilo (100%)] 1H-RMN (DMSO-d6) : δ 1,7 a 1,85 (m, 6H, NH-CH2-CH2-CH2, N-CH2-CH2-CH-CH2) ; 2,23 (s, 3H, CH3-) ; 2,60 (m, 3H, CH2-CH-CH2, NH-CH2-CH2-CH2) ; 3,23 (m, 2H, NH-CH2-CH2-CH2) ; 2,97 e 3,92 (2m, 4H, CH2-CH2-N-CH2-, CH2) ; 6,3 e 7,05 (2d, 2H, CH=CH naftiridina); 8,28 (s, 1H, N=CH-N) . SM (FAB): (tr = 0,50 minutos e 2,80 minutos): 388 (M); 389 (MH+) Síntese de N-(alfa)-Z-L,2-3-diaminopropionato de isopropilo 54

Num balão de ensaio contendo 125 ml de isopropanol, adicionam-se gota a gota e a 0°C 46 ml (840 mmoles) de cloreto de tionilo. Agita-se esta mistura durante 20 minutos à TA e depois adicionam-se em pequenas quantidades 10 g (42 mmoles) de ácido N-(alfa)-Z-L, 2-3- diaminopropiónico, aparecendo uma turvação branca.

Mantém-se a mistura de reacção em refluxo (78°C) durante 2 horas (ao fim de alguns minutos de aquecimento, a solução fica transparente).

Depois de arrefecer, concentra-se a solução até ficar seca, obtém-se um liquido amarelo ao qual se adiciona éter isopropilico. Espessa-se o produto esperado, elimina-se então o sobrenadante, e recolhe-se o resíduo numa mistura de água, acetato de etilo e solução de bicarbonato de sódio saturado. Separa-se a fase orgânica, e extrai-se novamente a fase aquosa em acetato de etilo. Secam-se as fases orgânicas reunidas sobre sulfato de magnésio e depois evapora-se o solvente no vácuo. Obtêm-se 7,4 g de um pó branco, que é o éster em forma de amina livre (rendimento = 42%) . CCM: Rf = 0,5 [Gel de sílica, eluente: cloreto de metileno-metanol (85-15) e 2% de água-ácido acético(1-1)]. 1H-RMN (CDC13) : δ 1,25 (d, 6H, CH3-CH-CH3) ; 1,60 (m, 2H, NH2-CH2-CH) 3,10 (m, 2H, NH2-CH2-CH) ; 4,35 (m, 1H, NH2-CH2-CH-NH) 5,10 (m, 1H, CH3-CH-CH3) ; 5,15 (s, 2H, Q-CH2-Ph);5,2 (m,1H, CH-NH-CO), 7,37 (m, 5H, Ph). SM (FAB): (tr = 0,52 minutos e 2,09 minutos): 281 (MH+); 239(MH-ipr+) [<X]D (CHC13) = +15,02 55 Síntese de 3-[[6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8- naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-metil-4-pirimidinil]-amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de isopropilo.

Uma mistura de 1,5 g (3,86 mmoles) de 6— [4— (1,2,3,4 — tetra-hidro-1,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-metil-4-bromo-pirimidina e 1,30 g (4,63 mmoles) de 3-amino-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de isopropilo, na presença de 825 mg (5,41 mmoles) de fluoreto de césio, 241 mg (386 μηιοΙθΞ) de (2,2 '-bis (difenilfosfino)-1,1'-binaftilo e 180 mg (193 ymoles) de tris (dibenziliden- acetona)dipaládio(0) em 40 ml de 1,2-dimetoxietano, aquece-se em refluxo durante 5 horas e 30 minutos. Faz-se com que a mistura de reacção volte à temperatura para se adicionarem 180 mg (245 μιηοίβε) de tris(dibenzilidenacetona)dipaládio(0), e depois mantém-se novamente em refluxo durante 16 horas.

No dia seguinte, aquece-se durante mais 9 horas depois de se terem adicionado 180 mg (193 μιηο1β3) de tris(dibenzilidenacetona)dipaládio(0). Depois de a solução arrefecer, concentra-se até que fique seca e depois recolhe-se numa mistura de água, acetato de etilo e solução saturada de bicarbonato de sódio. Decanta-se a fase orgânica, e extrai-se a fase aquosa com acetato de etilo. Secam-se as fases orgânicas reunidas sobre sulfato de magnésio, e evaporam-se até ficarem secas no vácuo. Cromatografa-se o resíduo em gel de sílica com acetato de etilo 100%. Obtêm-se 1,52 g de produto esperado em forma de cristais de cor amarela pálida (rendimento = 50%). 56 CCM: Rf = 0,18 (gel de sílica, eluente: acetato de etilo 100 %) 1H-RMN (CDC13) : δ 1,27 (d, 6H, CH3-CH-CH3) ; 1,83 a 2,05 (m, 9H, NH-CH2-CH2-CH2, N-CH2-CH2-CH-CH2, CH3-C=C-) ; 2,72 (m, 3H, CH2-CH-CH2, NH-CH2-CH2-CH2) ; 2,95 e 3,93 (2m, 4H, CH2- CH2-N-CH2-CH2) ; 3,45 (m, 2H, NH-CH2-CH2-CH2) ; 3,68 (d, 2H, NH-CH2-CH-NH), 4,50 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH); 5,07 (m, 1H, CH3-CH-CH3); 5,12 (s, 2H, O-CHz-Ph) ; 6,42 e 7,18 (2d, 2H, CH=CH naftiridina); 7,35 (m, 5H, Ph); 8,28 (s, 1H, N=CH-N). HPLC/SM: (tr = 0,48 minutos e 3,03 minutos): 588 (MH+); 454 [MH - Z+]; 412 [MH - (ipr - Z)+] [a] D (CHCI3) = + 0,7655

Formação do cloridrato:

M W =624,19 M F =C32H41 N704.HCI

Solubilizam-se 3,8 g de 3-[[6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-1,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-metil-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de isopropilo em 20 ml de cloreto de metileno. Deita-se esta solução sobre éter etílico (a solução deve ficar transparente). Adicionam-se depois, gota a gota com agitação, 3,23 ml de HC1 2N diluído num pouco de éter etílico. Espessa-se o cloridrato, elimina-se 0 sobrenadante e depois cristaliza-se o resíduo em éter isopropílico. Obtém-se então um sólido que se filtra e se lava com éter e depois com pentano. Depois de ele secar, obtêm-se 3,44 g de um pó branco, (rendimento = 85%). 57

Exemplo 9 Síntese de 4,6-dibromo-5-etil-pirimidina

Aquece-se a 160°C durante 1 hora uma mistura de 2,8 g (20 mmoles) de 5-etil-4,6-di-hidroxi-pirimidina (comercializada pela Aldrich) e 8,85 g (31 mmoles) de oxibrometo de fósforo. Depois de voltar à temperatura ambiente, deita-se a mistura de reacção sobre uma mistura de gelo, solução saturada de bicarbonato de sódio e acetato de etilo. Decanta-se e lava-se a fase orgânica com uma solução saturada de bicarbonato de sódio, seca-se sobre sulfato de magnésio, e elimina-se o solvente por evaporação sob pressão reduzida (2 kPa). Cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica, eluindo-se com um gradiente de heptano 100% até heptano-acetato de etilo 50-50. Obtêm-se 3,92 g (Rend0 = 74%) de um sólido castanho claro do produto esperado que é utilizado em seguida tal como está. CCM: Rf = 0,5 (gel de sílica, eluente: heptano-acetato de etilo 90-10) IR (CHC13) : 1538;1503 (C=C, C=N) 1H-RMN (DMSO-d6) : δ 1,16 (t, 3H, CH2-CH3) ; 2,86 (q, 2H, CH2-CH3) ; 8,63 ppm (S, 1H, N=CH-N) SM: 266 (MH+) ; 24 9 (MH-CH3+) ; 184 (MH-HBr+) Síntese de 4-bromo-5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-1,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-pirimidina

58

Agita-se uma mistura de 3,67 g (6,45 mmoles) de tris(trifluoroacetato) de 1,2,3,4-tetra-hidro-7-(4-piperidinil)-1,8-naftiridina (preparado de acordo com as patentes EP1065207 ou WO 0078317) e 25 g de resina Amberlist A-21 (de Fluka 06424, lavada previamente com solução de diclorometano-acetato de etilo-metanol 1-1-1) em 150 ml de solução de diclorometano-acetato de etilo-metanol 1-1-1 à temperatura ambiente durante 1 hora. Filtra-se a mistura e lava-se a resina com a solução ternária. Agita-se a filtragem obtida à temperatura ambiente durante 1 hora na presença de 25 g de resina Amberlist A-21 tratada da forma acima indicada; repete-se esta operação uma terceira vez. Concentra-se a filtragem assim obtida até ela ficar seca sob pressão reduzida (2 kPa) dando 1,4 g de amina livre. Adicionam-se a este resíduo 2,06 g (7,74 mmoles) de 4,6-dibromo-5-etil-pirimidina, 200 ml de dimetilacetamida e 5 ml de di-isopropiletilamina, e aquece-se a 100°C durante 3,5 horas. Evapora-se a mistura de reacção até ela ficar seca sob pressão reduzida (2 kPa), e recolhe-se o resíduo em acetato de etilo, água e uma solução saturada de bicarbonato de sódio. Separa-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio, e evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa) . Cromatografa-se o resíduo em gel de sílica, eluindo-se com um gradiente de heptano 100 % até heptano-acetato de etilo 50-50. Obtêm-se 1,5 g (Rend0 = 58%) de produto esperado em forma de um sólido bege. CCM: Rf = 0,5 (alumina, eluente: heptano-acetato de etilo 50-50) IR (CHCla) : 3440 (NH); 1596, 1586, 1547, 1508, 1480 cm-1 (Heterociclo+Aromático) 1H-RMN (DMSO-d6) : Ô 1,23 (t, 3H, CH2-CH3); 1,75 (m, 6H, CH2-CH2-CH2-NH, CH2-CH-CH2) ; 2,67 (m, 5H, CH2-CH3, CH2-CH-CH2, CH2-CH2-CH2-NH) ; 3,02 (t, 2H, CH2-CH2-N); 3,23 (m, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 3,90 (d, 2H, CH2-CH2-N) ; 6,20 (S, 1H, CH2-CH2-CH2- 59 ΝΗ) ; 6,30 e 7,04 (2d, 2H, H naftiridina); 8,27 ppm (s,N=CH-N). SM: 403 (MH+) . Síntese de 3-[ [5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo).

vv +

Br j ΛΊΟ

Aquece-se em refluxo uma mistura de 317 mg (0,79 mmoles) de 4-bromo-5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-1,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-pirimidina, 279 mg (0,95 mmoles) de 3-amino-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo) (preparada de acordo com J. Med. Chem. (2001), £4(8), 1158-1176), 168 mg (1,11 mmoles) de fluoreto de césio, 36 mg (0,04 mmoles) de tris(dibenzilidenacetona) dipaládio (0), 49 mg (0,08 mmoles) de S (-)2,2'-bis(difenil-fosfino)-1,1'-binaftilo em 11 ml de dioxano, durante 21 horas. Arrefece-se e depois adicionam-se novamente 140 mg (0,48 mmoles) de 3-amino-N-[(fenilmetoxi)-carbonil]alaninato de (1,1— dimetiletilo), 168 mg (1,11 mmoles) de fluoreto de césio, 36 mg (0,04 mmoles) de tris(dibenzilidenacetona)dipaládio (0), e 49 mg (0,08 mmoles) de S (-)2,2'-bis(difenil-fosfino) -1,1'-binaftilo em 2 ml de dioxano, e aquece-se em refluxo durante 3,5 horas. Evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa), e recolhe-se o resíduo em acetato de etilo, água e uma solução saturada de bicarbonato de sódio. Separa-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio e evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa). Cromatografa-se o resíduo em gel de sílica, eluindo-se com um gradiente de heptano-acetato de etilo-metanol 50-50-0, 25-75-0, 0-100-0 60 e finalmente 0-100-3. Obtêm-se 400 mg (Rend0 = 83%) de produto esperado em forma de óleo. CCM: Rf = 0,55 (gel de sílica, eluente: acetato de etilo-metanol-trietilamina 95-2-2) . IR (CHC13) : 3435 (NH); 1717 (C=0); 1583, 1555, 1501 cm-1 (Heterociclo+Aromático+Amido). 1H-RMN (DMSO-d6) : δ 1,06 (t, 3H, CH2-CH3) ; 1,31 (s, 9H, tBu) ; 1,75 (m, 2H, ΟΗ2-ΟΗ2-ΟΗ2-ΝΗ) ; 1,77 (m, 4H, CH2-CH-CH2); 2,46 (m, 2H, CH2-CH3); 2,53 (m, 1H, CH2-CH-CH2) ; 2,62 (t, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 2,83 e 3,44 (2m, 4H, CH2-CH2-N-CH2- CH2) ; 3,24 (m, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 3,72 (m, 2H, NH-CH2-CH-

NH) ; 4,23 (q, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 5,02 (s, 2H, CH2-Ph) ; 6,24 (s, 1H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 6,30 e 7,06 (2d, 2H, H naftiridina); 6,36 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 7,34 (m, 5H, Ph), 7,62 (d, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 8,11 ppm (s,N=CH-N). SM: 616 (MH+); 560 (MH-tBu+); 426 (MH-COOCH2F+) .

[<XD] (1% CHC13) :+2,4° [ aD] (1,05% EtOH) :-6,1° Síntese de bis(trifluoroacetato) de 3-[[5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina

Agitam-se 475 mg (0,77 mmoles) de 3-[[5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo) em 15 ml de diclorometano com 3,5 ml de ácido trifluoroacético à temperatura ambiente até ao desaparecimento do produto de partida em CCM (gel de sílica, eluente: CH2Cl2-Me0H-H20-Ac0H 90-10-1-1). Adiciona-se tolueno, e evapora-se a mistura de reacção até que fique 61 seca sob pressão reduzida (2 kPa). Solubiliza-se o produto no mínimo de diclorometano com um pouco de metanol e depois deita-se em éter di-isopropílico. Filtra-se o precipitado. Obtêm-se 368 mg (Rend0 = 61% expressos como ditrifluoroacetato) de produto esperado em forma de um sólido amorfo. CCM: Rf=0,33 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 90-10-1-1) IR (CHC13) : 1677 (C=0) ; 1625; 1587; 1492 cm-1 (Sistema conjugado+Aromático). 1H-RMN (DMSO-d6) : δ 1,04 (t, 3H, CH2-CH3) ; 1,77 e 1,90 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH-) ; 1,81 (m, 2H, ΝΗ-ΟΗ2-ΟΗ2-ΟΗ2-) ; 2,45 (q, 2H, CH2-CH3) ; 2,73 (t, 2H, ΝΗ-0Η2-0Η2-0Η2-) ; 2,78 (t, 1H, N-CH2-CH2-CH-) ; 2,87 e 3,48 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH-) ; 3,23 (m, 2H, N-CH2-CH2-CH2-); 3,58 e 3,83 (2m, 2H, NH-CH2-CH-NH); 4,28 (q, 1H, NH-CH2-CH-NH); 5,01 (sist. AB, 2H, 0-CH2-Ph); 6,65 (d, 1H, H naftiridina); 6,55 (sl, 1H, NH-CH2~ CH-NH) ; 7,33 (m, 5H, Ph) ; 7,68 (d, 1H, NH-CH2-CH-NH); 7,58 (d, 1H, H naftiridina); 8,15 (s, 1H, N=CH-N) ; 6,24 ppm (sl, 1H, NH-CH2-CH2-CH2-) . SM: 560 (MH+); 426 (MH-COOCH2Ph+) ; 558- (M-H-) ; 450- (558-OCH2Ph-) ; 1117- (2M-H-) [aD] (1% CHC13) :+2,4°

Exemplo 10 N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1 dimetiletilo)

Adiciona-se, a 480 mg (2 mmoles) de ácido N-[(fenilmetoxi)carbonil]alânico, em 15 ml de acetato de tercbutilo, gota a gota, 1 ml de ácido perclórico. Agita-se 62 a mistura bifásica durante 24 horas à temperatura ambiente. Recolhe-se a mistura em acetato de etilo, água e uma solução saturada de bicarbonato de sódio. Separa-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio, e evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa). Cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica, eluindo-se com um gradiente de heptano-acetato de etilo-metanol 100-0-0, 0-100-0 e finalmente 0-95-05. Obtêm-se 50 mg (Rend0 = 10%) de produto esperado em forma de óleo. CCM: Rf=0,20 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 90-10-1-1) [0CD] (1,25 % CHC13) :-9,0° Síntese de 3-[[5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo)

Aquece-se em refluxo uma mistura de 200 mg (0,5 mmoles) de 4-bromo-5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-1,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-pirimidina, 50 mg (0,17 mmoles) de (D) 3-amino-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo), 40 mg (0,26 mmoles) de fluoreto de césio, 15 mg (0,016 mmoles) de tris(dibenzilidenacetona) dipaládio(0), 20 mg (0,032 mmoles) de 2,2'-bis(difenil-fosfino)-1,1'-binaftilo em 20 ml de dioxano, durante 5 horas. Arrefece-se, e depois adicionam-se novamente 15 mg (0,16 mmoles) de tris(dibenzilidenacetona)dipaládio(0) e aquece-se em refluxo durante 15 horas. Evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa), e recolhe-se o resíduo em acetato de etilo, água e uma solução saturada de bicarbonato de sódio. Separa-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio, e evapora-se o 63 solvente sob pressão reduzida (2 kPa). Cromatografa-se o resíduo uma primeira vez sobre alumina, eluindo-se com um gradiente de acetato de etilo-éter di-isopropílico-cloreto de metileno 50-50-50, 10-50-50, e finalmente 10-20-70 e depois sobre gel de sílica, eluindo-se com acetato de etilo. Obtêm-se 40 mg (Rend0 = 38%) de produto esperado em forma de óleo. CCM: Rf= 0,25 (gel de sílica, eluente: acetato de etilo) . SM: 616 (MH+) ; 560 (MH-tBu+) .

[aD] (1,0% CHC13) :-2,4 Síntese de bis (trifluoroacetato) de 3— [ [5—etil—6—[4 — (1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina

Agitam-se 40 mg (0,77 mmoles) de 3-[[5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo) em 10 ml de diclorometano com 1 ml de ácido trifluoroacético à temperatura ambiente até ao desaparecimento do produto de partida em CCM (gel de sílica, eluente CH2Cl2-Me0H-H20-Ac0H 90-10-1-1) . Adiciona-se tolueno, e evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa). Cromatografa-se o resíduo em gel de sílica, eluindo-se com uma mistura de CH2Cl2-Me0H-H20-Ac0H 90-10-1-1. Obtêm-se 25 mg (Rend0 = 48% expressos como ditrifluoroacetato) de produto esperado em forma de um sólido amorfo. CCM: Rf = 0,10 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 90-10-1-1) 64 SM: 560 (MH+) ; 426 (MH-COOCH2Ph+) ; 558- (M-H-) ; 450- (558 OCH2Ph-); 1117- (2M-H-) [OCD] (1,75% CHCI3) : -6, 0

Exemplo 11

Dicloridrato de 3-[ [5-etil-6- [4-(1,2,3,4-tetra-hidro-1,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de etilo

Adicionam-se a 5 ml de etanol arrefecido a -12°C em atmosfera de azoto, 160 μΐ (2,19 mmoles) de cloreto de tionilo, e agita-se a mistura durante 30 minutos. Adiciona-se então uma solução de 354 mg (0,45 mmoles) de bis(trifluoroacetato) de 3-[[5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-1,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina em 13 ml de etanol. Agita-se a mistura durante 30 minutos a -12°C, e depois deixa-se voltar à temperatura ambiente, e finalmente aquece-se a 40°C durante 4 horas em azoto. Evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa), e cristaliza-se o resíduo numa mistura de éter di-isopropílico e pentano, e filtra-se o sólido. Obtêm-se 284 mg (Rend° = 95%) de produto esperado em forma de um sólido bege amorfo. CCM: Rf=0,4 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 90-10-1-1) IR (CHCI3) : 3400-3000 (OH, NH); 1719 (C=0) ; 1654; 1623; 1580; 1504 cm-1(C=C, C=N, aromático) 1H-RMN (DMSO-d6) : δ 1,09 (t, 3H, CH2-CH3) ; 1,14 (t, 3H, 0-CH2-CH3) ; 1,85 (m, 2H, NH-CH2-CH2-CH2) ; 1,85 e 2,00 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH) ; 2,48 (m, 2H, CH2-CH3) ; 2,75 (t, 2H, NH- 65 CH2-CH2-CH2) ; 2,92 (m, 1H, N-CH2-CH2-CH) ; 3,03 e 3,57 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH) ; 3,44 (t, 2H, N-CH2-CH2-CH2) ; 3,76 e 3,87 (2m, 2H, NH-CH2-CH-NH) ; 4,07 (q, 2H, Q-CH2-CH3) ; 4,39 (q,

1H, NH-CH2-CH-NH) ; 5,03 (s, 2H, O-Cfb-Ph) ; 6,62 (d, 1H, H naftiridina) ; 6,86 (sl, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 7,30 (m, 5H, Ph) ; 7,33 (sl, 1H, NH-CHz-CH-NH) ; 7,58 (d, 1H, H naftiridina); 8,20 ppm (s, 1H, N=CH-N). SM: 588 (MH+) ; 454 (MH-COOCH2Ph+) ; 426 (454-C2H4+) .

[<XD] d% CHC13) : +4

Exemplo 12 N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de etilo

Adicionam-se a 12 ml de etanol arrefecido a 0°C numa atmosfera de azoto, 6 ml (63 mmoles) de cloreto de tionilo, e agita-se a mistura durante 20 minutos à temperatura ambiente. Adiciona-se então uma solução de 950 mg (4 mmoles) de ácido N-[(fenilmetoxi)carbonil]alânico em 5 ml de etanol. Agita-se a mistura em refluxo durante 1 hora em azoto. Evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa), e cristaliza-se o resíduo numa mistura de éter di-isopropílico e pentano, e filtra-se 0 sólido. Recolhe-se 0 sólido obtido em acetato de etilo, água e uma solução saturada de bicarbonato de sódio. Obtêm-se 535 mg (Rend0 = 50%) de produto esperado em forma de um óleo incolor. CCM: Rf=0,4 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 90-10-1-1) HPLC/SM: (tr = 0,5 e l,4min) 267 (MH+).

[aD] (1,0% CHCI3) :-11,2 66 Síntese de 3-[ [5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l, 8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de etilo.

SfJBINAP Pd2dba3

li | ^ λ λ CaF S J, o o % (I j Dioxano

Aquece-se em refluxo uma mistura de 320 mg (0,8 mmoles) de 4-bromo-5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l, 8- naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-pirimidina, 215 mg (1,04 mmoles) de (D) 3-amino-N-[(fenilmetoxi)carbonil]a-laninato de etilo, 190 mg (1,25 mmoles) de fluoreto de césio, 37 mg (0,04 mmoles) de tris(dibenzilidenacetona)dipaládio(0), 50 mg (0,08 mmoles) de S(-)2,2'-bi(difenil-fosfino)-1,1'-binaftilo em 15 ml de dioxano, durante 5 horas.

Arrefece-se, e depois adicionam-se novamente 37 mg (0,04 mmoles) de tris(dibenzilidenacetona)dipaládio(0), e aquece-se em refluxo durante 7 horas. Evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa) , e recolhe-se o resíduo em acetato de etilo, água e uma solução saturada de bicarbonato de sódio. Separa-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio, e evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa) .

Cromatografa-se o resíduo sobre alumina, eluindo-se com um gradiente de acetato de etilo-éter di-isopropílico-cloreto de metileno 50-50-50, 10-50-50 e finalmente 10-20-70.

Obtêm-se 260 mg (Rend0 = 55%) de produto esperado em forma de óleo. CCM: Rf = 0,25 (gel de sílica, eluente: acetato de etilo). 1H-RMN (CDC13) : δ 1,16 (t, 3H, CH2-CH3) ; 1,27 (t, 3H, O-CH2-CH3) ; 1,85 a 2,00 (m, 6H, N-CH2-CH2-CH e NH-CH2-CH2- CH2) ; 2,46 (m, 2H, CH2-ÇH3) ; 2,75 (t, 3H, NH-CH2-CH2-CH2 e N-CH2-CH2-CH) ; 3,89 (t, 2H, N-CH2-CH2-CH2) ; 3,47 e 3,61 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH) ; 3,00 e 3,98 (2m, 2H, NH-CH2-CH-NH) ; 4,22 67 (m, 2H, O-CH2-CH3) ; 4,54 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH); 5,13 (s, 2H, 0-CH2-Ph); 6,43 (d, 1H, H naftiridina); 7,22 (d, 1H, H naftiridina); 7,35 (m, 5H, Ph) ; 8,27 ppm (s, 1H, N=CH-N) . SM: 588 (MH+) ; 454 (MH-COOCH2Ph+) .

[aD] (1,3% CHCI3) :-6, 0

Exemplo 13 Síntese de 6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-etil-4-cloro-pirimidina

Num balão de ensaio contendo 12,5 g (57,5 mmoles) de 4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l, 8-naftiridin-7-il)-1-piperidina livre do seu sal, adicionam-se 80 ml de dimetilacetamida, 11,8 g (30 mmoles) de 4,6-dicloro-5-etil-pirimidina em solução em 40 ml de dimetilacetamida e 24 ml de di-isopropiletilamina. Aquece-se esta mistura a 140°C durante 5 horas e depois concentra-se até que fique seca no vácuo. Recolhe-se 0 resíduo obtido numa mistura de água, acetato etilo e uma solução de bicarbonato de sódio saturada. Separa-se a fase orgânica e reextrai-se a fase aquosa em acetato de etilo. Secam-se as fases orgânicas reunidas sobre sulfato de magnésio, e depois evapora-se o solvente no vácuo para dar 15,5 g de um óleo alaranjado. Solubiliza-se este óleo num mínimo de cloreto de metileno e precipita-se em éter isopropílico; obtêm-se 9 g de produto esperado em forma de um pó bege. Concentra-se a filtragem até que fique seca, e depois cromatografa-se sobre gel de sílica, eluindo-se com um gradiente de ciclo-hexano (100%), acetato de etilo-ciclo-hexano (50-50), e depois acetato de etil-ciclo-hexano (70-30).

Obtêm-se 3 g de produto esperado em forma de um pó amarelo pálido. (Rend0 = 58%) 68

Preparação da naftiridina em forma de amina livre:

Deslocam-se 28,5 g de naftiridina do seu sal por 6 equivalentes mássicos de resina básica Amberlist A21 (resina do tipo R-NMe2) numa mistura CH2Cl2/MeOH/AcOEt 1/1/1 com agitação durante 30 minutos. Lava-se previamente a resina, e deixa-se que inche durante 20 minutos nesta mistura de solvente. Esta operação deve ser repetida 3 vezes para que a deslocação do sal seja total. Depois de se filtrar a resina e evaporar os solventes, obtêm-se 12,5 g (57,5 mmoles) de naftiridina livre. CCM Rf = 0,32 [gel de sílica, eluente: acetato de etilo (100%)] 1H-RMN () : δ 1,32 (t, 3H, CH3-CH2) ; 1,81 a 2,05 (m, 6H, NH-CH2-CH2-CH2, N-CH2-CH2-CH-CH2) ; 2,70 (m, 5H, CH2-CH-CH2, NH-CH2-CH2-CH2, CH3-CH2) ; 3,43 (m, 2H, NH-CH2-CH2-CH2) ; 3,05 e 3,97 (2m, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2) ; 6,4 e 7,12 (2d, 2H, CH=CH naftiridina); 8,37 (s, 1H, N=CH-N). HPLC/SM: (tr = 0,51 minutos e 2,93 minutos): 358 (MH+) Síntese de 3- [ [6- [4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8- naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-etil-4-pirimidinil]-amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de isopropilo.

Aquece-se em refluxo uma mistura de 1 g (2,79 mmoles) de 6- [4- (1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-etil-4-cloropirimidina e 940 mg (3,35 mmoles) de 3-amino-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de isopropilo, na presença de 594 mg (3,91 mmoles) de fluoreto de césio, 174 mg (279 μηιοίθε) de (2,2'-bis (difenilfosf ino)-1,1'-binaftilo e 130 mg (140 μπιοίβε) de 69 tris(dibenzilidenacetona)dipaládio(0) em 35 ml de 1,2-dimetoxietano durante 5 horas. Volta-se a aquecer a mistura de reacção até à mesma temperatura para se adicionarem 180 mg (14 0 Hmoles) de tris (dibenzilidenacetona)dipaládio(0), e depois mantém-se novamente em refluxo durante 16 horas.

Depois de a solução ter arrefecido, concentra-se até que fique seca, e depois recolhe-se numa mistura de água, acetato de etilo e uma solução saturada de bicarbonato de sódio. Decanta-se a fase orgânica e extrai-se a fase aquosa com acetato de etilo. Secam-se as fases orgânicas reunidas sobre sulfato de magnésio e evaporam-se até que fiquem secas no vácuo. Cromatografa-se o resíduo em gel de sílica com acetato de etilo 100%. Obtêm-se 1,07 g de produto esperado em forma de cristais de cor amarela pálida (Rendimento = 64%). CCM: Rf = 0,20 (gel de sílica, eluente: acetato de etilo 100) 1H-RMN (CDC13) : Ô 1,18 (t, 3H, CH3-CH2) ; 1,25 (d, 6H, CH3-CH-CH3); 1,83 a 2,05 (m, 6H, NH-CH2-CH2-CH2, N-ÇH2-CH2- CH-CH2) ; 2,45 (q, 2H, CH3-CH2) ; 2,72 (m, 3H, CH2-CH-CH2, NH-CH2-CH2-CH2) ; 2,97 e 3,93 (2m, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2) ; 3,45 (m, 2H, NH-CH2-CH2-CH2) ; 3,60 (d, 2H, NH-CH2-CH-NH) , 4,50 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 4,97 a 5,20 (m, 3H, CH3-CH-CH3, 0- CH2-Ph); 6,43 e 7,18 (2d, 2H, CH=CH naftiridina) ; 7,35 (m, 5H, Ph); 8,28 (s, 1H, N=CH-N). HPLC/SM: (tr = 0,50 minutos e 3,14 minutos): 602 (MH+); 468 [MH - Z+]; 426 [MH - (ipr - Z)+] [a]D (CHC13) = + 2,175

Formação do cloridrato: 70

M W ”638,22 Μ F =C33Hd3N70<l,HCI

Solubilizam-se 3,2 g (5,3 mmoles) de 3— [ [6— [4 — (1,2,3,4 — tetra-hidro-1,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-metil-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]-alaninato de isopropilo num mínimo de cloreto de metileno. Deita-se esta solução sobre éter etílico (a solução deve ficar transparente). Adicionam-se depois, gota a gota, com agitação, 2,65 ml de HC1 2N em éter etílico. Espessa-se o cloridrato, elimina-se o sobrenadante, e depois recristaliza-se o resíduo em éter isopropílico. Obtém-se então um sólido que se filtra e se lava com éter e depois com pentano. Depois de secar, obtêm-se 3,5 g de um pó esbranquiçado. (Rendimento = quantitativo).

Exemplo 14 Síntese de 2-(2-benziloxicarbonilamino-3-(5-etil-6-[4-(5,6,7,8-tetra-hidro-[1,8]naftiridin-2-il)-piperidin-l-il]-pirimidin-4-ilamino)-propinilamino)-4-metilpentanoato de tercbutilo.

Agitam-se 80 mg (0,15 mmoles) de 3-[ [5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l, 8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina, 45 mg (0,20 mmoles) de cloridrato de L-leucinato de tercbutilo, 22 mg (0,16 mmoles) de 1-hidroxibenzotriazol, 30 mg (0,16 71 mmoles) de cloridrato de 1-[3-(dimetilamino)propil]-3-etilcarbodi-imida, 0,050 ml (0,45 mmoles) de N-metilmorfolina e 0,070 ml (0,50 mmoles) de trietilamina em 5 ml de dimetilformamida durante 24 horas à temperatura ambiente. Evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa), e recolhe-se o resíduo em acetato de etilo e uma solução saturada de bicarbonato de sódio. Separa-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio, e evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa) . Cromatografa-se o resíduo em gel de sílica, eluindo-se com um gradiente de acetato de etilo-cloreto de metileno-metanol de 50-50-0 a 50-45-5. Obtêm-se 60 mg (Rend0 = 55%) de produto esperado em forma de um sólido branco. CCM: Rf = 0,66 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 85-15-2-2) 1H-RMN (CDC13) : δ 0,91 (t, 3H, CH2-CH3) ; 1,16 (d, 6H, CHCHzCH (CH3) 2) ; 1,28 (tl, 2H, CHCH2CH (CH3) 2) ; 1,41 a 1,57 (m, 1H, CHCH2CH (CH3) 2) ; 1,48 (s, 9H, tBu) ; 1,80 a 2,05 (m, 6H, CH2-CH2-CH2-NH, CH2-CH-CH2) ; 2,4 9 (m, 2H, CH2-CH3) ; 2,67 (à, 1H, CH2-CH-CH2); 2,73 (t, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 2,98 e 3,66 (ql e m, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2) ; 3,43 (m, 2H, ΟΗ2-ΟΗ2-ΟΗ2- NH) ; 3,70 e 4,16 (2m, 2H, NH-CH2-CH-NH) ; 4,32 (m, 1H, NH- CH2-CH-NH) ; 4,49 (m, 1H, CONH-CHCH2CH (CH3) 2)-CO) ; 5,13 (m, 2H, CH2-Ph) ; 5, 42, 6,83 e 7,92 (3H, Hmóveis) ; 6,43 e 7,15 (2d, 2H, H naftiridina) ; 7,37 (m, 5H, Ph) ; 8,2 ppm (s, 1H, N=CH-N). SM: 729 (MH+) . Síntese de ácido 2- (2-benziloxicarbonilamino-3-{5-etil-6-[4- (5,6,7,8-tetra-hidro-[1,8]naftiridin-2-il)-piperidin-1—i1]-pirimidin-4-ilamino}-propinilamino)-4-metilpentanóico 72

Agitam-se 60 mg (0,083 mmoles) de 2-(2-benziloxicarbonilamino-3-{5-etil-6-[4-(5,6,7,8-tetra-hidro-[1,8]naftiridin-2-il)-piperidin-l-il]-pirimidin-4-ilamino}-propinilamino)-4-metilpentanoato de tercbutilo em 5 ml de diclorometano com 0,5 ml de ácido trifluoroacético à temperatura ambiente até ao desaparecimento do produto de partida em CCM (gel de sílica, eluente: CH2Cl2-Me0H-H20-AcOH 90-10-1-1). Adiciona-se tolueno e evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa). Solubiliza-se o produto no mínimo de diclorometano com um pouco de metanol e depois deita-se em éter di-isopropílico. Filtra-se o precipitado. Obtêm-se 55 mg (Rend° = 74% expressos como difluoroacetato) de produto esperado em forma de um sólido branco. CCM: Rf = 0,52 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 85-15-2-2) SM: 673 (MH+).

Exemplo 15 Síntese de 4,6-di-hidroxi-5-propil-pirimidina O 0 Η,Ν^ΝΗ Cf

EtONa

HO

OH

EiOH

Adicionam-se, a uma solução de 7,5 g (94 mmoles) de cloridrato de formamidina em 200 ml de etanol arrefecido a 0°C, 102 ml (282 mmoles) de uma solução de etilato de sódio a 21% em etanol, e agita-se a mistura durante 30 minutos; adiciona-se então uma solução de 19,5 ml (94 mmoles) de propilmalonato de dietilo em 50 ml de etanol, e agita-se 73 durante uma noite à temperatura ambiente. Evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa) . Recolhe-se o residuo em 100 ml de uma solução saturada de cloreto de sódio, e extrai-se em 800 e 200 ml de n-butanol. Secam-se as fases orgânicas sobre sulfato de sódio, filtram-se e evaporam-se até que fiquem secas sob pressão reduzida (2 kPa) . Obtêm-se 7,3 g (Rend0 = 50%) de produto esperado em forma de um sólido bege. 1H-RMN (DMSO d6): δ 0, 85 (t, 3H, CH2-CH2-CH3) ; l,39(sext, 2H, CH2-CH2-CH3); 2,23 (t, 2H, CH2-CH2-CH3) ; 7,85 ppm (s,N=ÇH-N). SM: 155 (MH+); 159 (M-H-).

Sintese de 4,6-dicloro-5-propil-pirimidina

Mantém-se em refluxo uma mistura de 3 g (19,5 mmoles) de 5-propil-4,6-di-hidroxi-pirimidina em 20 ml de oxicloreto de fósforo durante 1 hora. Depois de voltar à temperatura ambiente, adiciona-se gota a gota uma mistura de 3 ml de N,N-dietilanilina em 10 ml de oxicloreto de fósforo, e mantém-se em refluxo durante 4 horas. Depois de voltar à temperatura ambiente, deita-se a mistura de reacção sobre uma mistura de gelo e água, e depois adiciona-se lentamente bicarbonato de sódio até pH básico. Extrai-se em acetato de etilo, seca-se sobre sulfato de magnésio, e evapora-se até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa). Cromatografa-se o residuo sobre alumina, eluindo-se com um gradiente de heptano-cloreto de metileno 100-0 a 80-20. Obtêm-se 2 g (Rend0 = 54%) de produto esperado em forma de um sólido azulado. CCM: Rf=0,35 (gel de sílica, eluente: heptano-acetato de etilo 90-10). 74 Síntese de 6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-propil-4-cloro-pirimidina

Num balão de ensaio contendo 1,6 g (7,4 mmoles) de 4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidina livre do seu sal, adicionam-se 50 ml de dimetilacetamida, 2 g (10,5 mmoles) de 4,6-dicloro-5-propil-pirimidina e 4 ml de di-isopropiletilamina. Aquece-se esta mistura a 140°C durante 5 horas, e depois concentra-se até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa). Recolhe-se o resíduo obtido numa mistura de água, acetato de etilo e solução de bicarbonato de sódio saturada. Separa-se a fase orgânica, e reextrai-se a fase aquosa com acetato de etilo. Secam-se as fases orgânicas reunidas sobre sulfato de magnésio, e depois evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa) . Cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica, eluindo-se com um gradiente de heptano-cloreto de metileno-acetato de etilo de 50-50-0 a 0-0-100. Obtêm-se 875 mg de produto esperado em forma de um sólido amorfo. (Rend0 = 50%). CCM: Rf = 0,25 [gel de sílica, eluente: acetato de etilo (100%)] 1H-RMN (CDC13) : δ 1,02 (t, 3H,C-CH2-CH2-CH3) ; 1,72 (sext, 2H, C-CH2-CH2-CH3) ; 1,81 a 2,07 (m, 6H, NH-CH2-CH2- CH2, N-CH2-CH2-CH-CH2) ; 2,64 (t, 2H, 0-0Η2-0Η2-0Η3) ; 2,73 (m, 3H, CH2-CH-CH2, NH-CH2-CH2-CH2) ; 3,46 (t, 2H, NH-CH2-CH2- CH2) ; 3,06 e 3,96 (m e d, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2); 5,00 (m,

2H, NH-CH2-CH2-CH2); 6,40 e 7,14 (2d, 2H, CH=CH naftiridina); 8,38 (s, 1H, N=CH-N). SM: 372,374 (MH+). 75 Síntese de 3-[[5-propil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo).

Aquece-se em refluxo uma mistura de 600 mg (1,62 mmoles) de 4-cloro-5-propil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-pirimidina, 590 mg (2 mmoles) de 3-amino-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo) (preparado de acordo com J. Med. Chem. (2001), £4(8), 1158-1176), 380 mg (2,51 mmoles) de fluoreto de césio, 76 mg (0,083 mmoles) de tris (dibenzilidenacetona) dipaládio(0), 102 mg (0,163 mmoles) de 2,2'-bis (difenil-fosfino)-1,1'-binaftilo em 50 ml de dioxano, durante 20 horas. Evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa), e recolhe-se o resíduo em acetato de etilo, água e uma solução saturada de bicarbonato de sódio. Separa-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio, e evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa) . Cromatografa-se o resíduo sobre alumina, eluindo-se com um gradiente de cloreto de metileno-éter di-isopropílico-acetato de etilo-metanol de 50-50-0-0 a 0-50-50-0, depois 0-0-100-0 e finalmente 0-0-90-10. Obtêm-se 620 mg (Rend0 = 61%) de produto esperado em forma de um sólido amorfo amarelo. CCM: Rf = 0,12 (gel de sílica, eluente: acetato de etilo). 1H-RMN (CDC13) : δ 0,90 (t, 2H, C-CtR-CtR-CtR) ; 1,01 (t, 3H, C-CH2-CH2-CH3) ; 1,48 (s, 9H, tBu) ; 1,81 a 2,07 (m, 6H, NH-CH2-CH2-CH2, N-CH2-CH2-CH-CH2) ; 2,39 (t, 2H, C-CH2-CH2-CH3) ; 2,65 (tl, 1H, CH2-CH-CH2); 2,73 (t, 2H, NH-CH2-CH2-CH2) ; 2,97 e 3,55 (tl e dl, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2) ; 3,44 (m, 2H, 76 NH-CH2-CH2-CH2) ; 3,85 e 3,93 (2m, 2H, NH-CH2-CH-NH) ; 4,46

(m, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 5,14 (s, 2H, CH2-Ph) ; 6,16 (d, 1H CH2-CH2-CH2-NH) ; 6,44 (d, 1H, H naftiridina) ; 7,15 (d, 1H, H naftiridina), 7,37 (m, 5H, CH2Ph) ; 8,29 (s, 1H, N=CH-N); SM: 630 (MH+); 574 (MH-tBu+); 440 (MH-COOCH2Ph+) . Síntese de bis(trifluoroacetato) de 3-[ [5-propil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina

Agitam-se 610 mg (0,97 mmoles) de 3-[[5-propil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo) em 50 ml de diclorometano com 5 ml de ácido trifluoroacético, a temperatura ambiente até ao desaparecimento do produto de partida em CCM (gel de sílica, eluente CH2Cl2-Me0H-H20-Ac0H 90-10-1-1) . Adiciona-se tolueno, e evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa). Solubiliza-se o produto num mínimo de diclorometano com um pouco de metanol, e depois deita-se sobre éter di-isopropílico. Filtra-se o precipitado. Obtêm-se 400 mg (Rend0 = 51% expressos como ditrifluoroacetato) de produto esperado em forma de um sólido bege. CCM: Rf = 0,40 (gel de silica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 85-15-2-2) 1H-RMN (DMSO d6): δ 0,93 (t, 3H,C-CtR-CtR-CtR); 1,48 (m, 2H, C-CH2-CH2-CH3) ; 1,67 a 2,00 (m, 6H, CH2-CH2-CH2-NH e CH2-CH-CH2) ; 2,40 (t, 2H, C-CH2-CH2-CH3); 2,65 a 2,96 (m, 5H, NH-CH2-CH2-CH2-, N-CH2-CH2-CH-, N-CH2-CH2-CH-) ; 3,32 a 3,51 (m, 4H, N-CH2-CH2-CH- e NH-CH2-CH2-CH2-) ; 3,56 e 3,84 (2m, 2H, 77 NH-CH2-CH-NH) ; 4,31 (q, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 5,02 (s, 2H, 0- CH2-Ph) ; 6,68 (d, 1H, H naftiridina) ; 7,33 (m, 5H, Ph) ; 7,61 (m, 1H, H naftiridina); 8,20 (s, 1H, N=CH-N). SM: 574 (MH+) ; 440 (MH-COOCH2Ph+) ; 572- (M-H-) ; 464-(572-OCH2Ph-); 1145- (2M-H-) [aD] (1,20% CHC13) :-17,7.

Exemplo 16 Síntese de 4,6-di-hidroxi-5-isobutil-pirimidina.

Adicionam-se, a uma solução de 7,5 g (94 mmoles) de cloridrato de formamidina em 200 ml de etanol arrefecido a 0°C, 102 ml (282 mmoles) de uma solução de etilato de sódio ao 21% em etanol, e agita-se a mistura durante 30 minutos; adiciona-se então uma solução de 20,6 ml (94 mmoles) de propilmalonato de dietilo em 50 ml de etanol, e agita-se durante uma noite à temperatura ambiente. Evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa) . Recolhe-se o resíduo em 100 ml de uma solução saturada de cloreto de sódio, e extrai-se com 800 e 200 ml de n-butanol. Secam-se as fases orgânicas sobre sulfato de sódio, filtram-se e evaporam-se até que fiquem secas sob pressão reduzida (2 kPa). Obtêm-se 13,7 g (Rend0 = 86%) de produto esperado em forma de um sólido bege. CCM: Rf = 0,53 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 85-15-2-2) 1H-RMN (DMSO d6) : δ 0,81 (d, 6H, CH2-CH- (CH3) 2) ; 1,85 (m, 1H, -CH2-ÇH-(CH3)2) ; 2,13 (d, 2H, -CH2-CH- (CH3) 2); 7,81 ppm (s,N=CH-N). SM: 169 (MH+); 167 (M-H-) . Síntese de 4,6-dicloro-5-isobutil-pirimidina 78

10

Mantém-se em refluxo uma mistura de 3 g (17,9 mmoles) de 5-isobutil-4,6-di-hidroxi-pirimidina em 20 ml de oxicloreto de fósforo durante 1 hora. Depois de voltar à temperatura ambiente, adiciona-se, gota a gota, uma mistura de 3 ml de N, N-dietilanilina em 10 ml de oxicloreto de fósforo, e mantém-se em refluxo durante 4 horas. Depois de voltar à temperatura ambiente, deita-se a mistura de reacção sobre uma mistura de gelo e água, e depois adiciona-se suavemente bicarbonato de sódio até pH básico. Extrai-se com acetato de etilo, seca-se sobre sulfato de magnésio, e evapora-se até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa). Cromatografa-se o residuo sobre alumina, eluindo-se com um gradiente de heptano-cloreto de metileno, 100-0 a 80-20. Obtêm-se 0,9 g (Rend0 = 25%) de um óleo castanho. CCM: Rf = 0,25 (gel de sílica, eluente: heptano- acetato de etilo 95-5) . Síntese de 6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-isobutil-4-cloro-pirimidina

Num balão de ensaio contendo 0,95 g (4,4 mmoles) de 4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidina livre do seu sal, adicionam-se 25 ml de dimetilacetamida, 0,9 g (4,4 mmoles) de 4,6-dicloro-5-isobutil-pirimidina e 2 ml de di-isopropiletilamina. Aquece-se esta mistura a 120°C durante 5 horas, e depois concentra-se até que fique 79 seca sob pressão reduzida (2 kPa). Recolhe-se o resíduo obtido numa mistura de água, acetato de etilo e solução de bicarbonato de sódio saturada. Separa-se a fase orgânica, e reextrai-se a fase aquosa com acetato de etilo. Secam-se as fases orgânicas reunidas sobre sulfato de magnésio, e depois evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa). Cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica, eluindo-se com um gradiente de heptano-cloreto de metileno-acetato de etilo, 50-50-0 a 0-0-100. Obtém-se 1 g de produto esperado em forma de um sólido bege. (Rend0 = 60%). CCM: Rf = 0,25 [gel de sílica, eluente: acetato de etilo (100%)] 1H-RMN (CDC13) : δ 0,89 (d, 6H,CH2-CH- (CH3)2); 1,77 a 2,12 (m, 7H, NH-CH2-CH2-CH2, N-CH2-CH2-CH-CH2 e CH2-CH- (CH3)2); 2,66 (d, 2H, -CH2-CH- (CH3) 2) ; 2,73 (t, 2H, NH-CH2-CH2-CH2) ; 2,61 a 2,77 (1H, mascarado, CH2-CH-CH2) ; 3,44 (m, 2H, NH-CH2-CH2-CH2) ; 3,03 e 3,87 (t e d, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2) ; 5,11 (m, 2H, NH-CH2-CH2-CH2) ; 6,41 e 7,15 (2d, 2H, CH=CH naftiridina) 8,40 (s, 1H, N=ÇH-N). SM: 386,388 (MH+). Síntese de 3-[[5-isobutil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-1,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo).

Aquece-se em refluxo uma mistura de 450 mg (1,17 mmoles) de 4-cloro-5-isobutil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-1,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-pirimidina, 413 mg (1,4 mmoles) de 3-amino-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo) (preparado de acordo com J. Med. Chem. (2001), 4£(8), 1158-1176), 275 mg (1,81 mmoles) de 80 fluoreto de césio, 55 mg (0, 060 mmoles) de tris(dibenzilidenacetona) dipaládio(0), 75 mg (0,12 mmoles) de 2,2'-bis(difenil-fosfino)-1,1'-binaftilo em 35 ml de dioxano, durante 20 horas. Evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa), e recolhe-se o resíduo em acetato de etilo, água e uma solução saturada de bicarbonato de sódio. Separa-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio, e evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa). Cromatografa-se o resíduo sobre alumina, eluindo-se com um gradiente de cloreto de metileno-éter di-isopropílico-acetato de etilo-metanol, 50-50-0-0 a 0-50-50-0, depois 0-0-100-0, e finalmente 0-0-90-10. Obtêm-se 630 mg (Rend0 = 83%) de produto esperado em forma de sólido amorfo amarelo. CCM: Rf = 0,12 (gel de sílica, eluente: acetato de etilo). 1H-RMN (CDC13) : Ô 0,91 (d, 6H, CH2-CH- (CH3)2) ; 1,49 (S, 9H, tBu) ; 1,77 a 2,07 (m, 7H, -CH2-CH-(CH3) 2) , NH-CH2-CH2-CH2 e N-CH2-CH2-CH-CH2) ; 2,32 (d, 2H, -CH2-CH- (CH3) 2) ; 2,65 (tl, 1H, CH2-CH-CH2); 2,73 (t, 2H, NH-CH2-CH2-CH2) ; 2,95 (tl, 2H CH2-CH2-N-CH2-CH2) ; 3,44 (m 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2 e NH-CH2-CH2-CH2) ; 3,85 e 3,92 (2m, 2H, NH-CH2-CH-NH) ; 4,45 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 5,14 (s, 2H, CH2-Ph) ; 6,12 (d, 1H CH2-CH2-CH2-NH) ; 6,43 (d, 1H, H naftiridina) ; 7,16 (d, 1H, H naftiridina), 7,37 (m, 5H, CH2Ph); 8,31 (s, 1H, N=CH-N) ; SM: 644 (MH+); 588 (MH-tBu+); 454 (MH-COOCH2Ph+) . Síntese de bis(trifluoroacetato) de 3-[[5-isobutil-6-[4-(1, 2,3, 4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina 81

Agitam-se 620 mg (0,96 mmoles) de 3-[[5-isobutil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)-carbonil] alaninato de (1,1-dimetiletilo) em 50 ml de diclorometano com 5 ml de ácido trifluoroacético à temperatura ambiente até ao desaparecimento do produto de partida em CCM (gel de silica, eluente CH2Cl2-Me0H-H20-Ac0H 90-10-1-1) . Adiciona-se tolueno, e evapora-se a mistura de reacçâo até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa). Solubiliza-se o produto no mínimo de diclorometano com um pouco de metanol, depois deita-se em éter di-isopropílico. Filtra-se o precipitado. Obtêm-se 525 mg (Rend0 = 67% expressos como ditrifluoroacetato) de produto esperado em forma de um sólido bege. CCM: Rf = 0,40 (gel de sílica, eluente: diclorometano- metanol-água-ácido acético 85-15-2-2) 1H-RMN (DMSO d6): 0,83(d, 6H, CH2-CH- (CH3) 2) ; 1,60 a 2,05 (m, 7H, -CH2-CH-(CH3) 2) , NH-CH2-CH2-CH2 e N-CH2-CH2-CH-CH2) ; 2,35 (m, 2H, -CH2-CH- (CH3) 2) ; 2,65 a 2,87 (m, 3H, CH2-CH-CH2 e NH-CH2-CH2-CH2) ; 2,91 (tl, 2H CH2-CH2-N-CH2-CH2) ; 3,42 (m 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2 e NH-CH2-CH2-CH2) ; 3,57 e 3,84 (2m, 2H, NH-CH2-CH-NH); 4,32 (m, 1H, NH-CH2-ÇH-NH) ; 5,0 (s, 2H, CH2~Ph) ; 6,68 (d, 1H, H naftiridina); 7,37 (m, 5H, CH2Ph); 7,66 (d, 1H, H naftiridina); 7,59 (d, 1H CH2-CH2-CH2-NH) ; 8,27 (s, 1H, N=CH-N). SM: 588 (MH+) ; 454 (MH-COOCH2Ph+) ; 586- (M-H-) ; 4 78- (586-OCH2Ph-); 1173- (2M-H-) [aD] (0,75% CHCI3) :+1,0.

Exemplo 17 ,0 82 Síntese de 5-metoxi-4,6-di-hidroxi-pirimidina ,0 82 NHk + NH2) hci

EtONa en EtOH EtOH

OH

Num balão de ensaio contendo 30 ml de etanol absoluto e 90 ml de uma solução de etilato de sódio de concentração 1,7 moles/1 em etanol, adicionam-se, a 0°C e em pequenas quantidades, 5 g (6,2 mmoles) de cloridrato de formamidina. Agita-se à temperatura ambiente durante 20 minutos, depois adicionam-se, gota a gota, 8,5 ml de metoximalonato de dimetilo. Mantém-se a agitação durante 16 horas. Acidifica-se depois a mistura de reacção com ácido acético até pH 4 a 5, e depois concentra-se até que fique seca na presença de ciclo-hexano. Cromatografa-se o produto bruto obtido sobre gel de sílica depois de ser inchado, eluindo-se com uma mistura de cloreto de metileno-metanol (85-15) e 2 % de água-ácido acético (1-1). Obtêm-se 9,5 g do produto esperado contendo uma pequena quantidade de sais de acetato de sódio. CCM: Rf = 0 [Gel de sílica, eluente: cloreto de metileno-metanol (85-15) e 2% de água-ácido acético (1-1)] 1H-RMN (MeOD): δ 3,67 (s, CH3-0); 7,73 (s, 1H, N=CH-N) 2,00 (S, 3H, CH3-COO-) HPLC/SM: (tr=0,5 minutos) Síntese de 4,6-dicloro-5-metoxi-pirimidina

OH Cl 1 POCI3 0— "Ί N OH a" N XCI

Mantém-se em refluxo uma mistura de 5 g (35,2 mmoles) de 5-metoxi-4,6-di-hidroxi-pirimidina e 40 ml de oxicloreto de fósforo durante uma hora. Depois de voltar à 83 temperatura ambiente, adiciona-se, gota a gota, uma mistura de 4,8 ml de Ν,Ν-dietilanilina e 18 ml de oxicloreto de fósforo. Mantém-se novamente o conjunto em refluxo durante 4 horas e 30 minutos. Depois de arrefecer, deita-se suavemente a mistura de reacção sobre uma mistura de gelo e água, e depois neutraliza-se com uma solução saturada de bicarbonato de sódio. Extrai-se esta fase aquosa em acetato de etilo. Secam-se as fases orgânicas reunidas sobre sulfato de magnésio e evaporam-se até que fiquem secas no vácuo. Purifica-se o resíduo obtido sobre sílica eluindo-se com uma mistura de ciclo-hexano e acetato (95-5) .

Obtêm-se 2,5 g (Rend0 = 40%) de produto esperado em forma de um pó branco. CCM: Rf =0,48 [ Gel de sílica, eluente ciclo-hexano-acetato de etilo (80-20)] 1H-RMN (MeOD) : δ 4,00 (s, CH3-0) ; 8,55 (s, 1H, N=CH-N) HPLC/SM: tr= 1,3 minutos Síntese de 6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-metoxi-4-cloro-pirimidina

Num balão de ensaio contendo 800 mg (3,68 mmoles) de 4-(1,2,3, 4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidina livre do seu sal, adicionam-se 2,2 g (12,3 mmoles) de 4,6-dicloro-5-metoxi-pirimidina em solução em 25 ml de dimetilacetamida e 3640 μΐ de di-isopropiletilamina. Aquece-se esta mistura a 130°C durante 2 horas, e depois concentra-se até que fique seca no vácuo. Recolhe-se o resíduo obtido numa mistura de água, acetato de etilo e solução de bicarbonato de sódio saturada. Separa-se a fase orgânica, e reextrai-se a fase aquosa com acetato de etilo. Secam-se as fases orgânicas reunidas sobre sulfato de magnésio e depois evapora-se o solvente no vácuo. 84

Cromatografa-se o resíduo sobre alumina, eluindo-se com uma mistura de ciclo-hexano e acetato (80-20) . Obtêm-se 900 mg (Rend0 = 68%) de produto esperado em forma de um pó amarelo.

Preparação da naftiridina em forma de amina livre:

Deslocam-se 2,4 g de naftiridina do seu sal por 6 equivalentes mássicos de resina básica Amberlist A21 (resina do tipo R-NMe2) numa mistura CtbCWMeOH/AcOEt 1/1/1 com agitação durante 30 minutos. Lava-se previamente a resina, e deixa-se que inche durante 20 minutos nesta mistura de solvente. Esta operação deve ser repetida 3 vezes para que a deslocação do sal seja total. Depois de se filtrar a resina e de se evaporarem os solventes, obtêm-se 800 mg (3,68 mmoles) de naftiridina livre (Rend0 = 88%) . CCM: Rf = 0,4 [alumina, eluente: acetato de etilo ciclo-hexano (30-70)] 1H-RMN (MeOD) : δ 1,75 a 1,95 (m, 6H, NH-CH2-CH2-CH2, N-CH2-CH2-CH-CH2) ; 2,70 (t, 1H,CH2-CH-CH2) ; 2,8 (m, 2H, NH- CH2-CH2-CH2) ; 3,15 e 3,75 (2m, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2); 3,75 (s, CH3-O); 6,4 e 7,15 (2d, 2H, CH=CH naftiridina); 8,1 (S, 1H, N=CH-N) . HPLC/SM: (tr = 0,53 minutos e 2,56 minutos): 359(M); 360 (MH+); 361 (M+2H++) . Síntese de 3-[ [6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-metoxi-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo)

85

Aquece-se em refluxo uma mistura de 300 mg (0,83 mmoles) de 6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-metoxi-4-cloro-pirimidina e 295 mg (l mmol) de 3-amino-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo) (preparado de acordo com J. Med. Chem. (2001), £4(8), 1158-1176), na presença de 177 mg (1,17 mmoles) de fluoreto de césio, 52 mg (83 μηιοΙθΞ) de (2,2'-bis (difenilfosfino)-1,1' -binaftilo e 40 mg (42 μηιοΙθΞ) de tris-(dibenzilidenacetona)dipaládio(0) , em 10 ml de dioxano durante 3 horas e 30 minutos. Deixa-se que a mistura de reacção volte à temperatura ambiente, adicionam-se então 0,5 mmoles de 3-amino-N- [(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo) e 1,17 mmoles de fluoreto de césio, 83 μπιοίθε de (2,2'-bis (difenilfosfino)-1,1' -binaftilo e 42 μηιοίβε de tris-(dibenzilidenaceton) dipaládio (0), e depois mantém-se a mistura de reacção em refluxo durante mais 8 horas. Depois de arrefecer, concentra-se a solução até que fique seca e recolhe-se numa mistura de água, acetato de etilo e solução saturada de bicarbonato de sódio. Decanta-se a fase orgânica, e extrai-se a fase aquosa com acetato de etilo. Secam-se as fases orgânicas reunidas sobre sulfato de magnésio e evaporam-se até que fiquem secas no vácuo. Cromatografa-se o resíduo sobre alumina com um gradiente de éter isopropílico e acetato de etilo (70-30, 60-40, 50-50) terminado pelo acetato de etilo a 100%. Juntam-se as fracções que contêm o produto esperado para uma segunda purificação sobre gel de sílica com um gradiente de acetato de etilo a 100%. Obtém-se um produto esperado em forma de um óleo amarelo pálido que se recolhe numa mistura de éter isopropílico e pentano para dar 220 mg (Rendimento = 43%) de um pó branco. CCM: Rf = 0,3 (alumina eluente: éter isopropílico- acetato de etilo 60-40) 86 1H-RMN (MeOD) : δ 1,46 (s, 9H, tBu) ; 1,80 (m, 2H, NH- CH2-CH2-CH2) ; 1,90 (m, 4H, N-CH2-CH2-CH-CH2) ; 2,65 (m, 1H, CH2-CH-CH2) ; 2,69 (t, 2H, NH-CH2-CH2-CH2) ; 2,95 e 3,78 (2m, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2) ; 3,38 (t, 2H, NH-CH2-CH2-CH2) ; 3,59 (s, CH3-O) ; 4,35 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 4,45 (d, 2H, NH- CH2-CH-NH) ; 5,03 e 5,12 (sist. AB, 2H, Q-CH2-Ph) ; 6,38 e 7,15 (2d, 2H, CH=CH naftiridina) ; 7,32 (m, 5H, Ph) ; 7,90 (S, 1H, N=CH-N). HPLC/SM: (tr = 3,4 minutos): 618 (MH+);562 (MH -tBu); 428 [MH - (tBu-Z+)] Síntese do ácido correspondente:

Agita-se à temperatura ambiente uma mistura de 200 mg (0,32 mmoles) de 3-[[5-metoxi-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-1,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-metil-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo) e 1,5 ml de ácido trifluoroacético em 15 ml de diclorometano durante 8 horas. Adiciona-se então tolueno, e evapora-se a mistura até que fique seca. Obtêm-se 350 mg de um óleo amarelo. Este óleo é recolhido num mínimo de cloreto de metileno e é precipitado em éter isopropílico; obtém-se assim o sal de trifluoroacetato não puro. Repete-se a precipitação em éter até à purificação (controlada em CCM). Obtêm-se finalmente 156 mg do produto esperado (Rend0 =71%) em forma de um pó branco. CCM: Rf=0,4 (gel de sílica, eluente diclorometano-metanol-água-ácido acético 90-10-1-1) . 1H-RMN (MeOD): Ô 1,85 (m, 2H, NH-CH2-CH2-CH2) ; 2,00 (m, 4H, N-CH2-CH2-CH-CH2); 2,83 (t, 2H, NH-CH2-CH2-ÇH2); 3,90 (m, 1H, CH2-CH-CH2) ; 3,12 e 3,72 (2m, 4H, CH2-CH2-N-CH2- 87 CH2) ; 3,52 (t, 2H, NH-CH2-CH2-CH2) ; 3.62 (s, 3H, CH3-0) ; 4,52 (m, 2H, NH-CH2-CH-NH) ; 4,60 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH); 5.06 e 5,10 (sist. AB, 2H, Q-CH2-Ph) ; -6,65 e 7,62 (2d, 2H, CH=CH naftiridina) ; 7,43 (m, 5H, Ph) ; 8,00 (s, 1H, N=CH-N). HPLC/SM: (tr =0,5 minutos e 2,75 minutos): 562 (MH+); 428 [MH - (tBu-Z+)]; 428

Exemplo 18 Síntese de 4,6-dibromo-5-flúor-pirimidina o o

H,N. ^NH

1/ EtGNa-EtOH

Br

Br 2/ POBr, 1/ Adicionam-se a uma solução de 5,83 g (56 mmoles) de acetato de formamidina em 300 ml de etanol arrefecido 0°C, 60,7 ml (168 mmoles) de uma solução de etilato de sódio a 21% em etanol, e agita-se a mistura durante 30 minutos; adiciona-se então uma solução de 10 g (56 mmoles) de fluoromalonato de dietilo em 25 ml de etanol, e agita-se durante uma noite a temperatura ambiente. Arrefece-se a mistura a 0°C e depois adicionam-se 17,85 ml de ácido clorídrico concentrado para se levar o pH a 6. Filtra-se o precipitado e depois lava-se sucessivamente com água, isopropanol, éter dietílico e finalmente pentano. Obtêm-se 14,2 g (teóricos = 7,3 g) de produto esperado e de sais minerais, utilizado em seguida tal como está. 2/ Mantém-se a 200°C uma mistura de 14,2 g (56 mmoles) de 5-flúor-4,6-di-hidroxi-pirimidina em 21 g de oxibrometo de fósforo durante 3 horas. Depois de voltar à temperatura ambiente, recolhe-se a mistura de reacçâo numa mistura de água gelada de bicarbonato de sódio e extrai-se com acetato de etilo, lavam-se as fases orgânicas com água, secam-se sobre sulfato de magnésio e evaporam-se até que fiquem secas sob pressão reduzida (2 kPa). Cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica, eluindo-se com um gradiente 88 de cloreto de metileno-heptano de 0-100 a 100-0. Obtêm-se 850 mg (Rend0 = 06%) de produto esperado em forma de um sólido bege, utilizado em seguida tal como está. CCM: Rf=0,50 (gel de sílica, eluente: diclorometano-heptano 50-50) Síntese de 4-bromo-5-flúor-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-1,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-pirimidina

Agita-se uma mistura de 840 mg (1,5 mmoles) de tris(trifluoroacetato) de 1,2,3,4-tetra-hidro-7-(4- piperidinil)-1,8-naftiridina (preparada de acordo com as patentes EP1065207 ou WO 0078317), e 5 g de resina

Amberlist A-21 (de Fluka 06424, previamente lavada com solução de diclorometano-acetato de etilo-metanol 1-1-1) em 100 ml de solução de diclorometano-acetato de etilo- metanol 1-1-1 à temperatura ambiente durante 1 hora. Filtra-se a mistura, lava-se a resina com a solução ternária. Agita-se a filtragem obtida à temperatura ambiente durante 1 hora na presença de 5 g de resina

Amberlist A-21 tratada da forma anteriormente descrita. Concentra-se a filtragem assim obtida até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa) dando 320 mg de amina livre. Adicionam-se a este resíduo 384 mg (1,5 mmoles) de 4,6-dibromo-5-flúor-pirimidina, 6 ml de dimetilacetamida e 1,5 ml de di-isopropiletilamina, e mantém-se a 130°C durante 1,5 horas. Evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa), e recolhe-se o resíduo em acetato de etilo, água e uma solução saturada de bicarbonato de sódio. Separa-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio, e evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa) . Cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica, eluindo-se com heptano-acetato de etilo 50-50. Obtêm-se 300 mg (Rend0 = 52%) de produto esperado em forma de um sólido amorfo. 89 CCM: Rf = 0,15 (gel de sílica, eluente: heptano-acetato de etilo 50-50) . IR (CHC13) : 3440 (NH) ; 1573, 1542, 1503 cm-1 (Heterociclo) 1H-RMN (CDC13): δ 1,82, 1,92 e 2,02 (dt, t e d 6H, CH2-CH2-CH2-NH e CH2-CH-CH2) ; 2,72 (t, 2H, CH2-CH2-CH2- NH); 2,80 (tl, 1H, CH2-CH-CH2); 3,13 e 4,68 (tl e d, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2); 3,42 (m, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 5,00 (m, 1H NH) ; 6,37 (d, 1H, naftiridina); 7,14 (d, 1H, naftiridina); 8,11 ppm (s,N=CH-N). SM: 392 (MH+) . Síntese de 3-[[5-flúor-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo).

Aquece-se em refluxo uma mistura de 280 mg (0,72 mmoles) de 4-bromo-5-flúor-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l, 8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-pirimidina, 253 mg (0,86 mmoles) de 3-amino-N-[ (fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo) (preparada de acordo com J. Med. Chem. (2001), 44_(8), 1158-1176), 152 mg (1,00 mmoles) de fluoreto de césio, 33 mg (0,036 mmoles) de tris (dibenzilidenacetona) dipaládio(0), 45 mg (0,072 mmoles) de 2,2'-bis(difenil-fosfino)-1,1'-binaftilo em 50 ml de dioxano durante 6 horas. Arrefece-se, e depois adiciona-se novamente 125 mg (0,43 mmoles) de 3-amino-N-[(fenilmetoxi)carbonil]-alaninato de (1,1-dimetiletilo), 152 mg (1,0 mmoles) de fluoreto de césio, 33 mg (0,036 mmoles) de tris(dibenzilidenacetona)dipaládio(0), e 45 mg (0,072 mmoles) de 2,2'-bis(difenil-fosfino)-1,1' - 90 binaftilo, e aquece-se em refluxo durante 4 horas. Evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa), e recolhe-se o resíduo em acetato de etilo, água e uma solução saturada de bicarbonato de sódio. Separa-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio, e evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa) . Cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica, eluindo-se com um gradiente de heptano-acetato de etilo-metanol de 100-0-0 a 0-100-0 e finalmente 0-95-5. Cromatografa-se o produto obtido uma segunda vez sobre alumina, eluindo-se com uma mistura de heptano-cloreto de metileno 50-50 e depois com acetato de etilo-éter di-isopropílico 50-50. Obtêm-se 300 mg (Rend0 = 70%) de produto esperado em forma de um óleo amarelo) CCM: Rf = 0,35 (gel de sílica, eluente: acetato de etilo. IR (CHCls) : 3439 (NH); 1718 (C=0); 1609, 1503 cm-1 (Heterociclo+Aromático+Amido). 1H-RMN (CDC13) : δ 1,47 (s, 9H, tBu); 1,70 a 2,05(m, 6H,CH2-CH2-CH2-NH e CH2-CH-CH2) ; 2,73 (t, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 2,80 (tl, 1H, CH2-CH-CH2); 3,01 e 3,90 (tl e m, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2) ; 3,43 (m, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 4,42 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH); 4,51 (dl, 2H, NH-CH2-CH-NH) ; 5,11 (m, 1H NH) ; 5,14 (s, 2H, CH2-Ph) ; 6,12 (m, 1H CH2-CH2-CH2-NH) ; 6,37 (d, 1H, naftiridina) ; 7,16 (d, 1H, naftiridina) ; 7,35 (m, 5H,

Ph); 7,98 ppm (s,N=CH-N). SM: 606 (MH+); 550 (MH-tBu+); 416 (550-COOCH2Ph+), 604- [(MH)]-, 650- [(604+HCOOH)]-, 496-,[(604-OCH2Ph) ] -.

[0tD] (1,0% CHCI3) :+4,4 Síntese de bis (trifluoroacetato) de 3-[ [5-flúor-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina 91

Agitam-se 290 mg (0,48 mmoles) de 3-[[5-flúor-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo) em 40 ml de diclorometano com 4 ml de ácido trifluoroacético à temperatura ambiente até ao desaparecimento do produto de partida em CCM (gel de sílica, eluente CH2Cl2-Me0H-H20-Ac0H 90-10-1-1). Adiciona-se tolueno, e evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa). Solubiliza-se o produto num mínimo de diclorometano com um pouco de metanol, e depois deita-se sobre éter di-isopropílico. Filtra-se o precipitado. Obtêm-se 310 mg (Rend0 = 83% expressos como ditrifluoroacetato) de produto esperado em forma de um sólido branco. CCM: Rf = 0,44 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 90-10-1-1) SM: 550 (MH+); 416 (MH-COOCH2Ph+) ; 548- (M-H-) ; 440-(548-OCH2Ph-); 1097- (2M-H-) [aD] (0,30% MeOH) : -9,3.

Exemplo 19 Síntese de 3-[5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-alaninato de (1,1-dimetiletilo).

92

Num balão de ensaio contendo 3 g (4,87 mmoles) de 3-[[6—[4—(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-etil-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)-carbonil]alanina, adicionam-se 150 ml de ácido acético a 100% e 300 mg de paládio activado sobre carvão (5-10%) . Purga-se esta mistura sob pressão reduzida (2 kPa), e depois deixa-se agitar à temperatura ambiente e sob a pressão atmosférica de hidrogénio durante 22 horas.

Filtra-se o meio heterogéneo obtido sobre Clareei. Concentra-se a filtragem até que fique seca, depois recolhe-se numa mistura de água, acetato de etilo e solução de bicarbonato de sódio saturada. Extrai-se a fase orgânica com acetato de etilo e seca-se sobre sulfato de magnésio e depois evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa) . Obtêm-se 1,95 g de um óleo amarelo pálido. CCM: Rf = 0,65 (gel de silica, eluente: acetato de etilo-metanol-trietilamina 90-5-5) 1H-RMN (CDC13) : δ 1,09 (t, 3H, CH2-CH3) ; 1,35 (s, 9H, tBu) ; 1,75 (m, 6H, CH2-CH-CH2 e CH2-CH2-CH2-NH) ; 2,44 (m,2H, CH2-CH3); 2,60 (t, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 2,81 (m, 2H, CH2-CH-CH2 e NH-CH2-CH-NH) ; 3,23 (m, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 3,41 (m, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2) ; 3,42 e 3,57 (2m, 2H, NH-CH2~CH-NH) ; 6,25 (m, 2H, CH2-CH2-CH2-NH e NH-CH2-CH-NH); 6,30 e 7,04 (2d, 2H, H naftiridina); 8,08 ppm (s, 1H, N=CH-N). IR (CHCI3) : 3439 (NH); 1726 (C=0) ; 1580, 1502 cm-1 (heterociclo) . SM: 482+ [MH]+; 426+ [MH+ - tBu]+; 339+ [MH+ -CH2CH(NH2)C02tBu ]+; 241, T [M+2H]2 [aD] :-3 (1% CHCI3) Síntese de 3-[ [5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(adamantilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetil-etilo). 93

Agita-se durante 5 horas à temperatura ambiente uma mistura 239 mg (0,49 mmoles) de 3-[5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-1,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil] -4-pirimidinil] amino]-alaninato de (1,1-dimetiletilo), 152 mg (0,49 mmoles) de N-adamantilmetoxicarboniloxisuccinimida e 0,104 ml (0,75 mmoles) de trietilamina em 50 ml de cloreto de metileno. Evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa), e recolhe-se o residuo em acetato de etilo, água e uma solução saturada de bicarbonato de sódio. Separa-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio e evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa). Cromatografa-se o residuo sobre gel de silica, eluindo-se com um gradiente de cloreto de metileno 100% até cloreto de metileno-metanol 90-10. Obtêm-se 77 mg (Rend0 = 17%) de produto esperado em forma de um sólido bege. CCM: Rf = 0,45 (gel de sílica, eluente: cloreto de metileno-metanol-ácido acético-água 90-10-1-1) . IR (CHCla) : 3437 (NH) ; 1711 (C=0) ; 1583, 1556, 1501 cm-1 (Heterociclo) 1H-RMN (DMSO-d6) : δ 1,08 (t, 3H, CH2-CH3) ; 1,45 a 1,92 (m, 15H, adamantilo); 1,32 (s, 9H, tBu); 1,77 (m, 6H, CH2- CH-CH2 e CH2-CH2-CH2-NH) ; 2,44 (q, 2H, ÇHa-CHa); 2,50 (m, 1H, CH2-CH-CH2); 2,61 (t, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 2,82 e 3,44 (2m, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2) ; 3,22 (m, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 3,56 (s, 2H, 0-CH2-adam) ; 3,66 (m, 2H, NH-CH2-CH-NH); 4,17 (q, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 6,24 (s, 1H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 6,30 e 7,05 (2d, 2H, H naftiridina) ; 6,37 (t, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 7,44 (d, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 8,10 ppm (s,N=CH-N) . 94 SM: 674 (MH+) ; 618 (MH-tBu+) ; 426 (618-COOCH2adam+) ; 337,7 (M2H++); 718- (M-H-HCOOH); 672- (M-H).

[a] D: +2,5 (1% CHC13) . Síntese de 3-[ [5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l, 8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(adamantilmetoxi)carbonil]alanina

Agitam-se 130 mg (0,19 mmoles) de 3 — [ [5—etil—6 — [4 — (1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(adamantilmetoxi)carbonil]-alaninato de (1, 1-dimetiletilo) em 20 ml de diclorometano com 2 ml de ácido trifluoroacético à temperatura ambiente até ao desaparecimento do produto de partida em CCM (gel de sílica, eluente CH2Cl2-Me0H-H20-Ac0H 90-10-1-1) . Adiciona-se tolueno, e evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa). Solubiliza-se o produto no mínimo de diclorometano com um pouco de metanol, e depois deita-se sobre éter di-isopropílico. Filtra-se o precipitado. Obtêm-se 368 mg (Rend0 = 61% expressos como ditrifluoroacetato) de produto esperado em forma de um sólido amorfo. CCM: Rf = 0,35 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 90-10-1-1) IR (CHCI3) : 3401 (NH) ; 1668 (C=0) ; 1581, 1492 cm-1 (Heterociclo) 1H-RMN (DMSO-d6) : Ô 1,08 (t, 3H, CH2-CH3) ; 1,45 a 1,92 (m, 15H, adamantilo); 1,76 (m, 6H, CH2-CH-CH2, CH2-CH2-CH2-NH); 2,43 (q, 2H, CH2-CH3); 2,50 (m, 1H, CH2-CH-CH2); 2,60 (t, 2H; CH2-CH2-CH2-NH) ; 2,82 e 3,45 (2m, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2); 3,23 (m, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 3,49 e 3,58 (m, 2H, O- 95 CH2-adam) ; 3,56 e 3,76 (m, 2H, NH-CH2-CH-NH) ; 4,18 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 6,26 (s, 1H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 6,30 e 7,05 (2d, 2H, H naftiridina); 6,44 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH); 7,25 (d, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 8,11 ppm (s, N=CH-N). SM: 618 (MH+); 426 (MH-COOCH2Ph+) ; 1235 (2MH+) ; 309,8 (M2H++); 616- (M-H-) [an] : (0,7% CH3OH) : -2,8

Exemplo 20 Síntese de 3-[5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil] -4-pirimidinil]amino] -alaninato de (1,1-dimetiletilo)

[ [6- [4- (1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-etil-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenil-metoxi)carbonil]alanina, adicionam-se 150 ml de ácido acético a 100% e 300 mg de paládio activado em carvão (5-10%). Purga-se esta mistura sob pressão reduzida (2 kPa), depois deixa-se agitar à TA sob pressão atmosférica de hidrogénio durante 22 horas. Filtra-se o meio heterogéneo obtido sobre Clareei. Concentra-se a filtragem até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa), e depois recolhe-se numa mistura de água, acetato de etilo e solução de bicarbonato de sódio saturada. Extrai-se a fase orgânica com acetato de etilo e seca-se sobre sulfato de magnésio e depois evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa). Obtêm-se 1,95 g de um óleo amarelo pálido. CCM Rf = 0,65 (gel de sílica, eluente AcOEt-MeOH-TEA = 90-5-5) 96 ad = -3 (1% CHC13) 1H-RMN (CDC13) : Ô 1,09 (t, 3H, CH2-CH3) ; 1,35 (s, 9H, tBu) ; 1,75 (m, 6H, CH2-CH-CH2 e CH2-CH2-CH2-NH); 2,44 (m, 2H, CH^-CHa); 2,60 (t, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 2,81 (m, 2H, CH2-CH-CH2 e NH-CH2-CH-NH) ; 3,23 (m, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 3,41 (m, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2); 3,42 e 3,57 (2m, 2H, NH-CH2-CH-NH) ; 6,25 (m, 2H, CH2-CH2-CH2-NH e NH-CH2-CH-NH) ; 6,30 e 7,04 (2d, 2H, H naftiridina); 8,08 ppm (s, 1H, N=CH-N). IR (CHC13) 3439 (NH); 1726 (C=0); 1580 - 1502 (heterociclo) HPLC/SM 482+ [MH]+; 426+ [MH+ - tBu] + ; 339+ [MH+ -CH2CH (NH2) C02tBu]+; 241, 7+ [M+2H]2 Exemplos 21 a 31 Exemplo 28 Etapa a) Síntese de 3-[[5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-(4- metoxi-benzenossulfonil)alaninato de (1,1-dimetiletilo).

Adiciona-se a uma mistura de 150 mg (0,31 mmoles) de 3-[5-etil-6-[4-(l,2,3,4-tetra-hidro-l, 8-naftiridin-7-il)-l-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]alaninato de (1,1-dimetiletilo), em solução em 6 ml de diclorometano e 650 μΐ de piridina, 64,3 mg (0,31 mmoles) de cloreto de 4-metoxibenzenossulfonilo em solução em 3 ml de diclorometano. Agita-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 5 horas. Depois, evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa), e cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica com o eluente seguinte: acetato de etilo-diclorometano/metanol (95/5) 50-50 a acetato de etilo- 97 metanol 90-10. Obtêm-se 55,8 mg (Rend0 = 28%) de produto esperado. CCM: Rf = 0,63 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 85-15-2-2) 1H-RMN (CDC13) : δ 1,21 (t, 3H, CH2-CH3) ; 1,30 (s, 9H, tBu) ; 1,92 e 2,02 (2m, 6H, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2, CH2-CH2-CH2-NH) ; 2,48 (q, 2H, CH2-CH3) ; 2,72 (m, 3H, N-CH2-CH2-CH- CH2-CH2, CH2-CH2-CH2-NH) ; 2,97 e 3,61 (2m, 4H, N-ÇH2-ÇH2-CH-

CH2-CH2) ; 3,45 (m, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 3,74 e 3,86 e 3,95 (3m, 6H, NH-CH2-CH-NH, OCH3) ; 4,95 (t, 1H, NH móvel); 5,92 (dl, 1H, NH móvel); 6,43 e 7,20 (2d, 2H, CH=CH naftiridina) ; 6,95 e 7,79 (2d, 4H, CH=CH benzeno) ; 8,29 (s, 1H, N=CH-N). SM: 652 (MH+) .

Etapa b) Síntese de 3-[ [5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-(4-metoxibenzenossulfonil)alanina

Agitam-se 55,8 mg (0,086 mmoles) de 3-[ [5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-(4-metoxi-benzenossulfonil)alaninato de (1,1-dimetiletilo) em 5 ml de diclorometano com 0,5 ml de ácido trifluoroacético à temperatura ambiente até ao desaparecimento do produto de partida em CCM (gel de sílica, eluente CH2Cl2-Me0H-H20-Ac0H 85-15-2-2) . Adiciona-se tolueno, e evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa). Solubiliza-se o produto no mínimo de diclorometano com um pouco de metanol e depois deita-se sobre éter di-isopropilico. Filtra-se o 98 precipitado. Obtêm-se 59,8 mg (Rend0 = 85% expressos como ditrifluoroacetato) de produto esperado. CCM: Rf = 0,33 (gel de silica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 85-15-2-2). 1H-RMN (MeOD) : δ 1,22 (t, 3H, CH2-CH3) ; 1,96 e 2,10 (2m, 6H, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2, CH2-CH2-CH2-NH) ; 2,55 (q, 2H, CH2-CH3) ; 2,85 (t, 2H, ΟΗ2-ΟΗ2-ΟΗ2-ΝΗ); 2,95 (m, 1H, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2); 3,20 e 3,67 e 3,92 (3m, 6H, N-CH2-CH2-CH- CH2-CH2, NH-CH2-CH-NH) ; 3,51 (m, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 4,24

(m, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 6,71 e 7,64 (2d, 2H, CH=CH naftiridina) 6,99 e 7,74 (2d, 4H, CH=CH benzeno); 8,27 (s, 1H, N=CH-N). SM: 596 (MH+).

Modo de operação geral de preparação de sulfonamidas

Etapa a)

Adicionam-se a uma mistura de 150 mg (0,31 mmoles) de 3-[5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]alaninato de (1,1-dimetiletilo), em solução em 6 ml de diclorometano e 650 μΐ de piridina, 0,31 mmoles (massa mx) de cloreto de sulfonilo em solução em 3 ml de diclorometano. Agita-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 5 horas. Depois, evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa), e cromatografa-se o residuo sobre gel de silica com o eluente seguinte: acetato de etilo-diclorometano/metanol (95/5) 50-50 a acetato de etilo-metanol 90-10. Obtém-se uma massa my de produto esperado. CCM: Rf (eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 85-15-2-2). 99 Etapa b)

Agita-se uma massa my de 3-[ [5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-1,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-(R-sulfonil)alaninato de (1,1— dimetiletilo) em 5 ml de diclorometano com 0,5 ml de ácido trifluoroacético à temperatura ambiente até ao desaparecimento do produto de partida em CCM (gel de silica, eluente: CH2Cl2-Me0H-H20-Ac0H 85-15-2-2). Adiciona-se tolueno e evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa). Solubiliza-se o produto no minimo de diclorometano com um pouco de metanol e depois deita-se sobre éter di-isopropilico. Filtra-se o precipitado. Obtém-se uma massa mz de produto esperado. CCM: Rf (eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 85-15-2-2).

Cloreto de sulfoni lo Mx (mg ) Éster formado My (mg ) Ren d° SM (MH+ ) Rf Exemplo 21 47, 1 W yo 30 22 672 0,6 1 Exemplo 22 4-0 0 N—! 40, 4 38, 7 29 640 0,6 3 100

Exemplo 23 -ΓΟ 59, 3 48 24 636 0,6 9 Exemplo 24 Cl H 0 55, 1 =^-“ríy 18, 4 10 622- 624 0,6 5 Exemplo 25 iK> 65, 6 qJv &sss/ ^ K,° (WCTo. 57, 6 28 656— 658 0,6 7 Exemplo 26 0 __ ,_, o^Ly\ / \ 78, 6 oV oks/ \ o „ / rvN ^ w w W 70 32 698 0,6 7 Exemplo 27 C V/° o~s >-0 73, 0 c-V qKh ^ ^ >4 ^ 49, 3 23 680 0,6 7 Exemplo 29 76, oV °=< 1 /t'i\ ,c H ^ y ^ 63, 4 30 690 0,6 3 Exemplo 30 °KK( 0- 81, 7 21, 4 10 708 0,6 3 Exemplo 31 \Xj 0 62, 7 56, 3 28 647 0,6 5

Mx: Massa de cloreto de sulfonilo introduzido

My: Massa de éster obtida 101 Ácido obtido FW (base livre) Base livre + 2TFA Mz (mg) SM (MH+) Rf Exemplo 21 615,76 843, 7 6 20,8 616 0,4 Exemplo 22 0=/ 583,69 811, 6 9 31,2 584 0,3 3 Exemplo 23 OM μ Λ V7 Lq~{^yfy ™ 579,73 807, 7 3 45, 4 580 0,3 Exemplo 24 0=( \ M 777^ /““PJ { í>" kxk* ~ 566,13 794,1 3 11, 6 566- 568 0,2 6 Exemplo 25 0-: _/ WWW =** 600,14 828,1 4 58,3 600- 601 0,3 Exemplo 26 K / \ r HHK* 7Ό 641,8 869, 8 56,6 642 0,3 7 Exemplo 27 °7_« C^y-Q^» " 623,74 851,7 4 41,2 624 0,3 7 Exemplo 29 OH 633,7 861, 7 59,8 634 0,3 3 Exemplo 30 V\ Q3-0-B’ :pih 651,79 879, 7 9 48,5 652 0,3 5 102

Exemplo 31 0= £ H & N yO [ 590,71 818,7 1 28 591 0,2 6 Mz: Massa de ácido obtida

Exemplo 32 Síntese de 3-[[5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-(1-naftalensulfonil)alaninato de (1,1-dimetiletilo).

Agita-se durante 5 horas à temperatura ambiente uma mistura de 239 mg (0,49 mmoles) de 3-[5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]alaninato de (1,1-dimetiletilo), 113 mg (0,5 mmoles) de cloreto de 1-naftalensulfonilo e 0,104 ml (0,75 mmoles) de trietilamina em 50 ml de tetra-hidrofurano. Evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa), e recolhe-se o resíduo numa mistura de acetato de etilo, água e solução saturada de bicarbonato de sódio. Separa-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio, e evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa). Cromatografa-se o resíduo sobre alumina, eluindo-se com um gradiente de heptano-acetato de etilo 75-25 a 0-100. Obtêm-se 220 mg (Rend° = 67%) de produto esperado em forma de um sólido branco. CCM: Rf = 0,10 (gel de sílica, eluente: cloreto de metileno-metanol-ácido acético-água 90-10-1-1) . IR (CHC13) : 3440 (NH); 1728 (C=0) ; 1583, 1555, 1503 cm-1 (Heterociclo+aromático) 103 1H-RMN (CDC13) : δ 1,02 (t, 3H, CH2CH3) ; 1,15 (s, 9H, tBu) ; 1,81 a 2,03 (m, 6H, CH2-CH-CH2 e CH2-CH2-CH2-NH) ; 2,23 e 2,31 (2q, 2H, CH2-CH3) ; 2,67 (t, 1H, CH2-CH-CH2) ; 2,72 (t, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 2,93 e 3,56 (tl e dl, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2); 3,43 (m, 2H, CH2-CH2-CH2-NH); 3,66 e 3,76 (2m, 2H, NH-CH2-CH-NH) ; 3,97 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 4,73 (t, 1H, t, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 6,55 (s, 1H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 6,42 e 7,05(2d, 2H, H naftiridina); 7,51 (t, 1H, H3 1-S02naftilo); 7,57 e 7,62 (21, 2H, H6 e H7 1-S02naftilo) ; 7,90 (d, 1H, H2 1- S02naftilo); 8,02 (d, 1H, H4 1-S02naftilo) ; 8,22 (m, 2H, N=CH-N e H5 1-S02naftilo); 8,61 ppm (m, 1H, H8 1- S02naftilo).

Sm: 672 (MH+); 426 (616-SOOnaft+); 670- (M-H) .

[OC] D: +3,3 (1% CHC13) . Síntese de 3-[ [5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-(1-naftalensulfonil)alanina

Agitam-se 220 mg (0,33 mmoles) de 3-[[5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-(1-naftalensulfonil)alaninato de (1,1 dimetiletilo) em 20 ml de diclorometano com 2 ml de ácido trifluoroacético à temperatura ambiente até ao desaparecimento do produto de partida em CCM (gel de sílica, eluente CH2Cl2-Me0H-H20-Ac0H 90-10-1-1) . Adiciona-se tolueno, e evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa). Solubiliza-se o produto no mínimo de diclorometano com um pouco de 104 metanol, depois deita-se sobre éter di-isopropílico. Filtra-se o precipitado. Obtêm-se 230 mg (Rend0 = 82% expressos como ditrifluoroacetato) de produto esperado em forma de um sólido branco. CCM: Rf=0,10 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 90-10-1-1) IR (CHC13) : 3412-3257 (OH, NH); 1668 (C=0) ; 1628, 1582, 1505 cm-1 (C=C, C=N, aromático) 1H-RMN (DMSO-d6) : δ 0,87 (t, 3H, CH2-CH3) ; 1,77 (m, 6H, CH2-CH-CH2, CH2-CH2-CH2-NH) ; 2,05 (q, 1H, CH2-CH3) ; 2,16 (q, 1H, CH2-CH3) ; 2,62 (t, 2H, ΟΗ2-ΟΗ2-ΟΗ2-ΝΗ) ; 2,73 e 3,50 (2m, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2); 2,80 (m, 1H, CH2-CH-CH2); 3,20 (m, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 3,50 (m, 2H, CH-CH2-CH2-N) ; 3,66 e 3,76 (2m, 2H, NH-CH2-CH-NH) ; 3,97 (t, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 6,26 (s, 1H, CH2-CH2-CH2-NH); 6,31 e 7,06 (2d, 2H, H naftiridina) ; 7,55 (t, 1H, H3 1-S02naftilo); 7,62 (m, 2H, H6 e H7 1- S02naftilo) ; 7,96 ppm (s,N=CH-N) , ; 8,02 (m, 1H, H5 1- S02naftilo); 8,08 (d, 1H, H2 1-S02naftilo); 8,14 (d, 1H, H4 1-S02naftilo); 8,58 (m, 1H, H8 1-S02naftilo). SM: 616 (MH+); 426 (MH-S00naft+) ; 1231 (2MH+) ; 308,8 (M2H++); 614- (M-H-) [ aD] : (0,4% CH30H) :+7,0

Exemplo 33 Síntese de 3-[[5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-(2-piridinil)alaninato de (1,1-dimetiletilo).

Agita-se durante 24 horas em refluxo uma mistura de 240 mg (0,50 mmoles) de 3-[5-etil-6-[4-(1,2,3, 4-tetra-hidro-l, 8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-alaninato de (1,1-dimetiletilo) e 3 ml 105 de 2-fluoropiridina. Evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa), e recolhe-se o resíduo em acetato de etilo, água e uma solução saturada de bicarbonato de sódio. Separa-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio, e evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa). Cromatografa-se o resíduo sobre alumina, eluindo-se com uma mistura de acetato de etilo-cloreto de metileno-metanol 80-16-4. Obtêm-se 13 mg (Rend° =05%) de produto esperado em forma de óleo. CCM: Rf = 0,40 (gel de sílica, eluente: cloreto de metileno-metanol 90-10). SM: 559 (MH+). Síntese de 3-[ [5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l, 8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-(2-piridinil)alanina

Agitam-se 13 mg (0,023 mmoles) de 3—[[5—etil—6—[4 — (1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-(2-piridinil)alaninato de (1,1— dimetiletilo) em 2 ml de diclorometano com 0,2 ml de ácido trifluoroacético à temperatura ambiente até ao desaparecimento do produto de partida em CCM (gel de sílica, eluente CEkC^-MeOH-EkO-AcOH 90-10-1-1) . Adiciona-se tolueno, e evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa). Solubiliza-se o produto no mínimo de diclorometano, depois deita-se sobre éter di-isopropílico. Filtra-se o precipitado. Obtêm-se 13 mg (Rend0 = 76% expressos como ditrifluoroacetato) de produto esperado em forma de um sólido bege. CCM: Rf = 0,35 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 85-15-2-2) 106 SM: 503 (MH+) ; 501- (M-H-)

Exemplo 34 Síntese de 3-[[5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-(2-benzotiazolil)alaninato de (1,1-dimetiletilo).

Agita-se durante 2 horas a 100°C uma mistura de 200 mg (0,42 mmoles) de 3-[5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-alaninato de (1,1-dimetiletilo) e 90 mg (0,6 mmoles) de 2-fluorobenzotiazol em 5 ml de piridina. Evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa), e recolhe-se o resíduo em acetato de etilo, água e uma solução saturada de bicarbonato de sódio. Separa-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio, e evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa). Cromatografa-se o resíduo uma primeira vez sobre gel de sílica, eluindo-se com um gradiente de cloreto de metileno-acetato de etilo-metanol 100-0-0 a 0-100-0 e depois 0-95-5; depois uma segunda vez sobre fase inversa RP8 eluindo-se com um gradiente de metanol-água 80-20 a 100-0. Obtêm-se 50 mg (Rend0 = 19%) de produto esperado em forma de um sólido rosado. CCM: Rf = 0,20 (gel de sílica, eluente: acetato de etilo-metanol 98-2). 1H-RMN (CDC13) : δ 1,06 (t, 3H, CH2CH3) ; 1,49 (s, 9H, tBu) 1,77 a 2,01 (m, 6H, CH2-CH-CH2 e CH2-CH2-CH2-NH) ; 2,41 (q, 2H, CH2-CH3); 2,61 (t, 1H, CH2-CH-CH2) ; 2,72 (t, 2H, CH2~ CH2-CH2-NH) ; 2,92 e 3,51 (ql e tl, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2) ; 3,42 (m, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 3,95 e 4,09 (2m, 2H, NH-CH2-CH- 107 ΝΗ) ; 4,88 (m, 1Η, NH-CH2-CH-NH); 4,98 e 5,63 (me t, 2H, NH-CH2-CH-NH e NH-CH2-CH-NH) ; 6,67 (sl, 1H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 6,41 e 7,13 (2d, 2H, H naftiridina) ; 7,12, 7,31 e 7,57 (t mascarado, t e tl 4H, H benzotiazol) ; 8,32 ppm (s, 1H, N=CH-N). SM: 615 (MH+); 559 (MH-tBu+); 613- (M-H-). Síntese de 3-[[5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-(2-benzotiazolil)alanina

Agitam-se 45 mg (0,073 mmoles) de 3-[[5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l, 8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-(2-benzotiazolil)alaninato de (1,1-dimetiletilo) em 10 ml de diclorometano com 1 ml de ácido trifluoroacético à temperatura ambiente até ao desaparecimento do produto de partida em CCM (gel de sílica, eluente CH2Cl2-Me0H-H20-Ac0H 90-10-1-1) . Adiciona-se tolueno, e evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa). Solubiliza-se o produto no mínimo de diclorometano com um pouco de metanol e depois deita-se sobre éter di-isopropílico. Filtra-se o precipitado. Obtêm-se 60 mg (Rend0 = 97% expressos como ditrifluoroacetato) de produto esperado em forma de um sólido branco. CCM: Rf = 0,45 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 85-15-2-2) 1H-RMN (CDC13) : δ 1,15 (t, 3H, CH2-CH3) ; 1,75 a 2,07(m, 6H, CH2-CH-CH2, CH2-CH2-CH2-NH) ; 2,51 (q, 1H, CH2-CH3) ; 2,76 (tl, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 2,96 (m, 1H, CH2-ÇH-CH2) ; 3,20 e 3,73 (2m, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2); 3,51 (m, 2H, CH2-CH2-CH2- NH) 108 4,23 (m, 2H, NH-CH2-CH-NH) , 4,67 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 6,38 e 7,35 (2d, 2H, H naftiridina) ; 7,20, 7,35, 7,47 e 7,54 (t, t mascarado, dl e dl 4H, Hbenzotiazol); 7,73 e 10,05 (2m, 2H, Hmóveis); 8,36 ppm (s, 1H, N=CH-N). SM: 559 (MH+) ; 557- (M-H-)

Exemplo 35

Operando-se tal como no exemplo 34, a partir de 3— [5— etil-6- [4- (1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-alaninato de (1,1— dimetiletilo), prepara-se a 3—[[5—etil—6—[4—(1,2,3,4 — tetra-hidro-1,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[2-(4-metoxibenzimidazolil)]alanina em forma de um sólido bege. CCM: Rf = 0,40 (gel de silica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 85-15-2-2) 1H-RMN (CDC13) : Ô 1,12 (m, 3H, CH2CH3); 1,65 a 2,07 (m, 6H, CH2-CH-CH2 e CH2-CH2-CH2-NH) ; 2,47 (m, 2H, CH2-CH3) ; 2,74 (m, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 2,92 (m, 1H, CH2-CH-CH2); 3,17 e 3,73 (2m, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2) ; 3,52(m, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 3,79 (s, 1H, OCH3) ; 4,18 (m, 2H, NH-CH2-CH-NH); 4,81 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH); 6,35 e 7,36c (2d, 2H, H naftiridina); 6,72 e 7,18 (2d, 2H, NC (C) CHCHC (CH) OCH3) ; 6,87 (s, 1H,NC(C)CHC(CH)0CH3) ; 6, 37, 7, 70 e 9,84 (3Hmóveis) ; 8,32 ppm (s, 1H, N=CH-N). SM: 572 (MH+); 570- (M-H-).

Exemplo 36 Síntese de 2-(2-benziloxicarbonilamino-3-{5-metil-6-[4-(5,6,7,8-tetra-hidro-[1,8]naftiridin-2-il)-piperidin-l-il]-pirimidin-4-ilamino}-propinilamino)-propionato de terc-butilo. 109

Agitam-se 170 mg (0,30 mmoles) de 3-[[5-metil-6-[4-(1,2,3, 4-tetra-hidro-l, 8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina, 150 mg (1,0 mmoles) de L-alaninato de tercbutilo, 66 mg (0,48 mmoles) de 1-hidroxi-benzotriazol, 90 mg (0,48 mmoles) de cloridrato de 1-[3-(dimetilamino)propil]-3-etil-carbodi-imida, 0,015 ml (0,135 mmoles) de N-metilmorfolina e 0,210 ml (1,50 mmoles) de trietilamina em 10 ml de dimetilformamida durante 24 horas à temperatura ambiente. Evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa), e recolhe-se o resíduo em acetato de etilo e solução saturada de bicarbonato de sódio. Separa-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio e evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa). Cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica, eluindo-se com uma mistura de acetato de etilo-cloreto de metileno-metanol de 50-50-10. Obtêm-se 120 mg (Rend0 = 60%) de produto esperado em forma de um sólido branco. CCM: Rf = 0,40 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 90-10-1-1) SM: 673 (MH+) . Síntese de ácido 2-(2-benziloxicarbonilamino-3-{5-metil-6- [4-(5,6,7,8-tetra-hidro-[1,8]naftiridin-2-il)-piperidin-l-il]-pirimidin-4-ilamino}-propinilamino)-propiónico. 110 . t [

y-ο» ο CF3COOH-CH2Ct2

Agitam-se 120 mg (0,179 mmoles) de 2-(2-benziloxicarbonilamino-3-{5-metil-6-[4-(5,6,7,8-tetra-hidro[1,8]naftiridin-2-il)-piperidin-l-il]-pirimidin-4-ilamino}-propinilamino)-propionato de tercbutilo em 5 ml de diclorometano com 1 ml de ácido trifluoroacético à temperatura ambiente até ao desaparecimento do produto de partida em CCM (gel de sílica, eluente: CH2Cl2-Me0H-H20-AcOH 90-10-1-1). Adiciona-se tolueno, e evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa). Solubiliza-se o produto no mínimo de diclorometano com um pouco de metanol e depois deita-se sobre éter di-isopropílico. Filtra-se o precipitado.

Obtêm-se 95 mg (Rend0 = 63% expressos como ditrifluoroacetato) de produto esperado em forma de um sólido branco. CCM: Rf = 0,45 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 85-15-2-2) SM: 616 (MH+) .

Exemplo 37 Síntese de 2-(2-benziloxicarbonilamin-3-{5-etil-6-[4-(5, 6, 7,8-tetra-hidro-[1,8]naftiridin-2-il)-piperidin-l-il] -pirimidin-4-ilaminojpropinilamino)propionato de tercbutilo .

111

Agitam-se 80 mg (0,15 mmoles) de 3—[[5—etil—6 — [4 — (1,2,3, 4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina, 32 mg (0,20 mmoles) de L-alaninato de tercbutilo, 22 mg (0,16 mmoles) de 1-hidroxi-benzotriazol, 30 mg (0,16 mmoles) de cloridrato de 1-[3-(dimetilamino)propil]-3-etil-carbodi-imida, 0,050 ml (0,45 mmoles) de N-metilmorfolina e 0,070 ml (0,50 mmoles) de trietilamina em 5 ml de dimetilformamida durante 24 horas à temperatura ambiente. Evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa), e recolhe-se o resíduo em acetato de etilo e uma solução saturada de bicarbonato de sódio. Separa-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio, e evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa). Cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica, eluindo-se com um gradiente de acetato de etilo-cloreto de metileno-metanol de 50-50-0 a 50-45-5. Obtêm-se 55 mg (Rend0 = 53%) de produto esperado em forma de um sólido branco. CCM: Rf = 0,30 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 90-10-1-1) 1H-RMN (CDC13) : δ 0,91 (t, 3H, CH2-CH3) ; 1,38 (d, 3H, CONH-CH(CH3)-C0) ; 1,48 (s, 9H, tBu) ; 1,79 a 2,07 (m, 6H, CH2-CH2-CH2-NH, CH2-CH-CH2) ; 2,49 (m, 2H, CH2-CH3) ; 2,66 (m, 1H, CH2-CH-CH2); 2,73 (t, 2H, CH2-CH2-CH2-NH); 2,97 e 3,63 (2m, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2); 3,42 (m, 2H, ΟΗ2-ΟΗ2-ΟΗ2- NH) ; 3,73 e 4,14 (2m, 2H, NH-CH2-CH-NH); 4,31 (m, 1H, NH-CH2-CH- NH) ; 4,44 (q, 1H, CONH-CH (CH3) -CO) ; 5,14 (m, 2H, CH2~Ph) ;

5, 35, 6, 92 e 7,89 (3H, Hmóveis) ; 6,42 e 7,14 (2d, 2H, H naftiridina); 7,36 (m, 5H, Ph); 8,29 ppm (s, 1H, N=CH-N). SM: 687 (MH+). Síntese de ácido 2- (2-benziloxicarbonilamino-3-{5-etil-6-[4- (5,6,7,8-tetra-hidro-[1,8]naftiridin-2-il)-piperidin-1-il]-pirimidin-4-ilamino}-propinilamino)-propiónico. 112

Ο V1' CF3C00H-CHjC!j

Agitam-se 50 mg (0,073 mmoles) de 2—(2 — benziloxicarbonilamino-3-{5-etil-6-[4-(5,6, 7,8-tetra-hidro-[1,8]naftiridin-2-il)-piperidin-l-il]-pirimidin-4-ilamino}-propinilamino)-propionato de tercbutilo em 5 ml de diclorometano com 0,5 ml de ácido trifluoroacético à temperatura ambiente até ao desaparecimento do produto de partida em CCM (gel de silica, eluente CH2Cl2-Me0H-H20-Ac0H 90-10-1-1). Adiciona-se tolueno e evapora-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa) . Solubiliza-se o produto no mínimo de diclorometano com um pouco de metanol e depois deita-se sobre éter di-isopropílico. Filtra-se o precipitado. Obtêm-se 53 mg (Rend0 = 85% expressos como ditrifluoroacetato) de produto esperado em forma de um sólido branco. CCM: Rf = 0,12 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 90-10-1-1) 1H-RMN (CDC13) : δ 1,16 (t, 3H, CH2-ÇH3) ; 1,41 (d, 3H, CONH-CH (CH3)-CO); 1,80 a 2,10 (m, 6H, CH2-CH2-CH2-NH, CH2-

CH2-CH2) ; 3,52 (m, 2H, CH2-CH2-CH2-NH) ; 3,78 e 4,13 (2m, 2H, NH-CHz-CH-NH) ; 4,4 6 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH); 4,59 (m, 1H, CONH-CH (CH3)-CO) , 5,05 (m, 2H, CH2-Ph) ; 6,41 e 7,38 (2d, 2H, H naftiridina) ; 6, 68, 7,20, 7,95 e 9,68 (4H, Hmóveis) 7,31 (m, 5H, Ph) ; 8,28 ppm (s, 1H, N=CH-N) . SM: 631 (MH+).

Exemplo 38 1) Síntese de 4-hidroxi-l-piperidincarboxilato de terc butilo 113

comercial 1

Dissolve-se 1 g (5 mmoles) de 4-oxo-l-piperidincarboxilato terc-butilo (comercializado pela Aldrich) em 5 ml de etanol. Arrefece-se esta solução até 0°C com a ajuda de um banho de gelo, e adicionam-se em porções 200 mg (7,56 mmoles) de tetraboro-hidreto de sódio, e agita-se durante 4 horas à temperatura ambiente. Adiciona-se, sobre a mistura de reacção, uma solução aquosa saturada de cloreto de amónio. Evapora-se o etanol sob pressão reduzida (2 kPa), e depois recolhe-se a mistura de reacção em acetato de etilo. Separa-se a fase orgânica da fase aquosa. Repete-se uma vez esta extracção, e juntam-se depois as fases orgânicas que se secam sobre sulfato de magnésio. Concentram-se sob pressão reduzida (2 kPa) e recuperam-se desta forma 1,05 g (Rend0 = 100%) de um óleo incolor. CCM: Rf=0,5 (gel de silica, eluente: CH2Cl2/MeOH 90: 10 1H-RMN (CDC13): δ 1,47 (s, 9H, tBu) e (m, 2H; -CHH-CH2-N-CH2-CHH-); 1,87 (m, 2H, -CHH-CH2-N-CH2-CHH-) ; 3,04 (m, 2H, -CHH-N-CHH-) ; 3,85 (m, 2H, -CHH-N-CHH-) e (m,1H, -CH-OH) 2) Sintese de 4-iodo-l-piperidincarboxilato de terc- butilo 2:

2 114

Dissolvem-se 2,15 g (8,2 mmoles) de trifenilfosfina e 2,08 g (8,2 mmoles) de iodo em 30 ml de acetonitrilo. Deixa-se agitar durante 10 minutos à temperatura ambiente, depois adicionam-se 918 mg de imidazol (13,5 mmoles) e deixa-se agitar durante mais 10 minutos à temperatura ambiente. Adiciona-se depois 1 g (5 mmoles) de 4-hidroxi-l-piperidincarboxilato de terc-butilo da etapa anterior, e deixa-se agitar durante 24 horas à temperatura ambiente. Trata-se a reacção adicionando uma solução aquosa de tiossulfato de sódio, e evapora-se o acetonitrilo sob pressão reduzida (2 kPa), recolhe-se em acetato de etilo, extrai-se e lava-se com uma solução aquosa de tiossulfato de sódio. Secam-se as fases orgânicas sobre mgS04, filtram-se, e evapora-se o acetato de etilo sob pressão reduzida (2 kPa) . Cromatografa-se sobre gel de silica, eluindo-se com diclorometano e depois diclorometano/ metanol 90:10. Recuperam-se 1,1 g (Rend0 = 70%) de óleo incolor. CCM: Rf = 0,8 (gel de silica, eluente: CH2Cl2/MeOH 90: 10 1H-RMN (CDC13) : δ 1,47 (s, 9H, tBu); 2.03 (m, 4H, -CH2-CHI-CH2-); 3,30 e 3,60 (2m, 4H, -CH2-N-CH2-) ; 4,46 (m, 1H -CHI-) 3) Síntese de 2-bromo-6-(2,5-dimetil-pirrol-l-il)-piridina 3

Χ^γ

Comercial 0

Dean-Stark

Tolueno Reflujo 5H 90%

Num balão de ensaio de fundo redondo de 100 ml, com uma montagem de Dean Stark, dispõe-se 1 g (5,78 mmoles) de 2-amino-6-bromopiridina comercializada pela Aldrich em 30 ml 115 de tolueno. Adicionam-se 0,3 ml de ácido acético e 0,8 ml (6,78 mmoles) de acetonilacetona comercializada pela Aldrich. Aquece-se o tolueno em refluxo durante 5 horas. Deixa-se voltar à temperatura ambiente, e evapora-se o tolueno sob pressão reduzida (2 kPa). Adiciona-se água e extrai-se com acetato de etilo. Juntam-se as fases orgânicas, que se secam sobre sulfato de magnésio. Evapora-se o acetato de etilo sob pressão reduzida (2 kPa), e purifica-se o residuo bruto por cromatografia sobre gel de sílica, eluindo-se com diclorometano. Recupera-se 1 g (Rend0 = 90%) de pó amarelo. CCM: Rf = 0,7 (gel de sílica, eluente: CH2C12) 1H-RMN (CDC13) : δ 2,20 (s, 6H, -CfRC^H-Cf^CCH^-) ; 5,90 (s, 2H, -CH3C=CH-CH=CCH3-) ; 7,08 (d, 1H, H3 ou H5); 7,16 (d, 1H, H3 ou H5); 7,29 (t, 1H, H4) 4) Síntese de éster terc-butílico do ácido 6-(2,5-dimetil-pirrol-l-il)-3',4',5',6'-tetra-hidro-2 Ή-[2,4']-bipiridinil-1'-carboxílico 4

Activado Zn

Em atmosfera de árgon, dispõem-se em suspensão 284 mg (4,34 mmoles) de zinco electrolítico ao qual se adicionam 0,033 ml de 1,2-dibromoetano e 1 ml de tetra-hidrofurano. Agita-se durante 3 minutos a 60°C, e deixa-se voltar à temperatura ambiente. Adicionam-se 0,047 ml de cloreto de trimetilsililo, e agitam-se durante 30 minutos à temperatura ambiente. Adiciona-se 1 g (3,2 mmoles) de _2 anteriormente solubilizado em 2 ml de tetra-hidrofurano. 116

Agita-se esta mistura de reacção durante 45 minutos à temperatura ambiente, e adiciona-se a uma solução contendo 30 mg (0,032 mmoles) de tris (dibenzilidenacetona)dipaládio comercializado pela Aldrich e 30 mg (0,13 mmoles) de tris (2-furil)fosfina comercializada pela LANCASTER. Adiciona-se depois 1 g (4 mmoles) de .3 anteriormente solubilizado em 10 ml de tetra-hidrofurano. Deixa-se a mistura de reacção com agitação magnética a 60°C durante 2 horas. Deixa-se voltar à temperatura ambiente, filtra-se sobre Clareei, e extrai-se entre acetato de etilo e uma solução aquosa saturada em bicarbonato de sódio. Extrai-se a fase aquosa 2 vezes em acetato de etilo e depois juntam-se as fases orgânicas, que se secam sobre sulfato de magnésio. Evapora-se o acetato de etilo sob pressão reduzida (2 kPa), e purifica-se o resíduo bruto por cromatografia sobre gel de sílica, eluindo-se com uma mistura de heptano/acetato de etilo 4:1. Recuperam-se 350 mg (Rend0 = 30%) de produto esperado em forma de óleo amarelo. CCM: Rf = 0,2 (gel de sílica, eluente: Heptano/

Acetato de etilo 90:10) 1H-RMN (CDC13): δ 1,50 (s, 9H, tBu); 1.78 e 1.97 (m, 4H, -CHz-Cfb-N-Cfb-CH^-) ; 2,18 (s, 6H, -CH^C^H-CH^CHh.-) ; 2,85 e 2,95 (m, 3H, CH-CH2-CHH-N-CHH-CH2) ; 4,28 (m, 2H, -CH2- CHH-N-CHH-CH2-) ; 5,92 (s, 2H, -CH3C=CH-CH=CCH3-) ; 7,08 (d, 1H, H3 ou H5); 7,16 (d, 1H, H3 ou H5); 7,29 (t, 1H, H4) 5) Síntese de 6-(2,5-dimetil-pirrol-l-il) - 1',2',3',4',5',6'-hexa-hidro-[2,4']bipiridinilo 117

Dispõem-se em solução 330 mg (0, 928 mmoles) de | em 3 ml de diclorometano, aos quais se adicionam 0,3 ml de ácido trifluoroacético. Agita-se durante 2 horas à temperatura ambiente. Evapora-se o diclorometano sob pressão reduzida (2 kPa) . Recolhe-se o resíduo obtido em água, basifica-se até um pH = 10 com um amoníaco concentrado, e extrai-se o produto com diclorometano. Seca-se a fase orgânica sobre sulfato de magnésio e evapora-se o diclorometano sob pressão reduzida (2 kPa). Recuperam-se 220 mg (Rend° = 92%) de óleo amarelo. CCM: Rf = 0,3 (gel de sílica, eluente: CH2Cl2/MeOH 90: 10) 1H-RMN (CDC13) : δ 1,90 e 2,08 (m, 4H, -CH2_-CH2-N-CH2- CH2-); 2,18 (s, 6H, -CH3C=CH-CH=CCH3-) ; 2,88 e 3,34 (m, 4H, -CH2-CH2_-N-CH2-CH2-) ; 2,95, (m, 1H, CH-CH2-CH2-N-CH2-) ; 4,10 (m, 1H, NH) 5,92 (s, 2H, -CH3C=CH-CH=CCH3-) ; 7,08 (d, 1H, H3 ou H5); 7,16 (d, 1H, H3 ou H5), 7,29(t, 1H, H4) SM: 256 (MH+) 6) Síntese de 1'-(6-cloro-5-metil-pirimidin-4-il)-6-(2,5-dimetil-pirrol-i-il)-1',2',3',4',5',6'-hexa-hidro-[2,4']bipiridinilo

118

Dissolvem-se 220 mg (0, 860 mmoles) de 5 em 2 ml de dimetilacetamida, aos quais se adicionam 140 mg (0,860 mmoles) de 4,6-dicloro-5-metil-pirimidina, comercializada pela SPECS, e 0,2 ml de di-isopropiletilamina. Aquece-se a mistura a 110°C com agitação magnética durante uma hora.

Deixa-se que a mistura volte à temperatura ambiente, e evapora-se a dimetilacetamida sob pressão reduzida (0,2 kPa) . Recolhe-se o residuo bruto em acetato de etilo, e lava-se com água. Extrai-se a fase aquosa 2 vezes com acetato de etilo, juntam-se as fases orgânicas e secam-se sobre sulfato de magnésio. Evapora-se o acetato de etilo sob pressão reduzida (0,2 kPa) e recuperam-se 330 mg de resina castanha que são utilizados na etapa seguinte sem purificação. CCM: Rf = 0,4 (gel de silica, eluente: CH2CI2) 1H-RMN (CDC13) : δ 2,02 e 2,10 (m, 4H, -CH2-CH2-N-CH2- CH2_-); 2,18 (s, 6H, -CH1C=CH-CH=CCH3-) ; 2,30(s, 3H, CH3) ; 3,08 e 4,01 (m, 4H, -CH2-Cí^-N-CH2_-CH2-) ; 3,02, (m, 1H, CH- CH2-CH2-N-CH2-) ; 5,92 (s, 2H, -CH3C=CH-CH=CCH3-) ; 7,09 (d, 1H, H3 ou H5); 7,20 (d, 1H, H3 ou H5) ; 7,29(t, 1H, H4) ; 8,41 (s, 1H, =N-CH=N) 7) Síntese do éster terc-butílico do ácido 2- benziloxicarbonilamino-3-{6-[6-(2,5-dimetil-pirrol-l-il)-3',4',5',6'-tetra-hidro-2'H-[2,4']bipiridinil-1'-il]-5-metil-pirimidin-4-ilamino}-propiónico 7:

DME 90”C

Solubilizam-se 330 mg (0,866 mmoles) da etapa anterior em 5 ml de dimetoxietano. Adicionam-se sucessivamente 119 286 mg (1 mmol) de 3-amino-N-[ (fenilmetoxi)carbonil]-alaninato de (1,1-dimetiletilo) (preparado de acordo com J. Med. Chem. (2001), 4£(8), 1158-1176), 184 mg (1,21 mmoles) de fluoreto de césio, 54 mg (10% mol) de rac-2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftilo, comercializado pela

Aldrich, e 40 mg (5% mol) de tris (dibenzilidenacetona) dipaládio, comercializado pela Aldrich. Aquece-se esta mistura a 100°C durante 18 horas com agitação magnética. Adicionam-se novamente 54 mg (10% mol) de rac-2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftilo, 40 mg (5% mol) de tris(dibenzilidenacetona)dipaládio, e aquece-se durante mais 2 horas a 100°C. Deixa-se voltar à temperatura ambiente e evapora-se o dimetoxietano sob pressão reduzida (2 kPa) . Recolhe-se o resíduo obtido em acetato de etilo e lava-se com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio. Extrai-se a fase aquosa em acetato de etilo, juntam-se as fases orgânicas que se secam sobre sulfato de magnésio. Evapora-se o acetato de etilo sob pressão reduzida (2 kPa). Purifica-se o resíduo obtido por cromatografia sobre gel de sílica, eluindo-se com uma mistura de heptano/acetato de etilo 1:1. Recuperam-se 200 mg de sólido amarelo. CCM: Rf = 0,2 (gel de sílica, eluente: Heptano/acetato de etilo 1:1) 1H-RMN (CDC13) : δ 1,50 (s, 9H, tBu); 1,97 (s, 3H, CH3) ; 2,02 a 2,10 (m, 4H, -CH2-CH2-N-CH2-CH2-) ; 2,18 (s, 6H, - CH3C=CH-CH=CCH2-) ; 3,20 e 3,78 (m, 4H, -CH2-C^-N-CH2_-CH2) ; 3,00 (m, 1H, CH-CH2-CH2-N-CH2-); de 3,85 a 4,00 (m, 2H, NH-CHz-CHCOOtBuNH) ; 4,47(m, 1H, NH-CH2CH-COOtBuNH) ; 5,12 (2H, -Q-CH2-Fenil); 5,92 (s, 2H, -CH3C=CH-CH=CCH3-) ; 6,12 (m, 1H móvel); 7,09 (d, 1H, H3 ou H5); 7,21 (d, 1H, H3 ou H5) ; 7,78 (t, 1H, H4); 7,45 (m, 5H aromáticos); 8,32 (s, 1H, =N-CH=N) SM: 641 (MH+), 584(MH-tBu+) 120 8) Síntese do éster terc-butílico do ácido 3— [6— (6— amino-3', 4',5' , 6'-tetra-hidro-2'H-[2,4' ]bipiridinil-1' -il) -5-metil-pirimidin-4-ilamino]-2-benziloxicarbonilamino- propiónico 8:

4

Dissolvem-se 100 mg (0,15 mmoles) de 1_ em 3 ml de etanol e 0,3 ml de água. Adicionam-se 50 mg (0,75 mmoles) de cloridrato de hidroxilamina, comercializado pela ACROS, e aquece-se durante 18 horas a 90°C. Evaporam-se os solventes sob pressão reduzida (2 kPa) e purifica-se o residuo bruto por cromatografia sobre gel de sílica, eluindo-se com uma mistura de CH2Cl2/MeOH 90:10. Obtêm-se 30 mg (36%) de produto esperado em forma de resina incolor. CCM: Rf = 0,5 (gel de sílica, eluente: CH2Cl2/MeOH 90: 10) 1H-RMN (CDC13) : δ 1,50 (s, 9H, tBu) ; 1,97 (s, 3H, CH3); 2,02 a 2,10 (m, 4H, -CH2-CH2-N-CH2-CH2-); 2,18 (s, 6H, -CH2C=CH-CH=CCH3-) ; 3,20 e 3,78 (m, 4H, -CH2-CH2-N-CH^-CH2-); 3,00 (m, 1H, CH-CH2-CH2-N-CH2-); de 3,85 a 4,00 (m, 2H, NH-CH2-CHCOOtBuNH) ; 4,47 (m, 1H, NH-CH2CH-COOtBuNH) ; 5,12 (2H, -C-CHz-Fenil) ; 5,92 (s, 2H, -CH3C=CH-CH=CCH3-) ; 6,18,

6,57, 6,62 (3d, H3 e H5 + 1H móvel); 7,45 (m, 5H aromáticos); 7,60 (t, 1H, H4); 8,32 (s, 1H, =N-CH=N). SM: 562 (MH+) 372 (ΜΗ-tBu e -COO-benzilo+) 9) Síntese do ácido 3-[6-(6-amino-3',4',5',6'-tetra-hidro-2 Ή-[2,4' ]bipiridinil-1'-il)-5-metil-pirimidin-4-ilamino]-2-benziloxicarbonilamino-propiónico 9 121

Solubilizam-se 30 mg (0,053 mmoles) de 8_ anteriormente preparado em 2 ml de diclorometano e 0,2 ml de ácido trifluoroacético. Deixa-se agitar durante 9 horas à temperatura ambiente. Adiciona-se tolueno e evapora-se até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa). Purifica-se o produto por cromatografia sobre gel de silica, eluindo-se com uma mistura de CH2Cl2/MeOH/ácido acético 90:10:1.

Recuperam-se 10 mg (Rend° = 37%) de produto esperado concretizado em forma de sólido bege numa mistura CH2Cl2/éter isopropilico. CCM: Rf = 0,2 (gel de silica, eluente: CH2Cl2/MeOH/ácido acético 90:10:1 1H-RMN (DMSO) : ò 1,90 (s, 3H, CH3) ; 1,80 a 1.85 (m, 4H, -CH2-CH2-N-CH2-CH2-); parcialmente mascarado por água do DMSO: (4H, -CH2-CH2-N-CH2-CH2-) e (2H, NH-CH2-CHCOOtBuNH) ; 2,80 (m, 1H, CH-CH2-CH2-N-CH2-) ; 4,15 (m, 1H, CH2-CH-COOtBuNH-); 5,02 (2H, -Q-CH2-Fenil) ;6,27 (d, 1H, H3 ou H5) ; 6,40 (d, 1H, H3 ou H5); 6.52(m, 1H, H4); 7,5(m, 5H aromáticos); 8,10 (S, 1H, =N-CH=N) . SM: 506 (MH+), 372 (MH-COO-Benzil+),

Exemplo 39

Bis (trifluoroacetato) de 3-[5-etil-6-[4-(aminometil-2-piridinil)-1-piperidinil]-4-pirimidinilamino]-N-[(fenil-metoxi)carbonil]alanina

Etapa a) Síntese de (4-aminometilpiperidin)-1-carboxilato de (1,1-dimetiletilo). 122

A uma solução de 10 g (87,5 mmoles) de 4-aminometilpiperidina (comercializada pela Aldrich) em 110 ml de tolueno num caudal de azoto, adicionam-se 9 ml de benzaldeido (87,5 mmoles), e depois aquece-se esta mistura a 120°C (presença de um Dean-stark) durante 8 horas. Deixa-se que a mistura de reacção volte à temperatura ambiente e depois adicionam-se 21 g (96,25 mmoles) de dicarbonato de di-terc-butilo a 0°C em 15 minutos. Deixa-se agitar na presença de azoto durante uma noite. No dia seguinte, concentra-se a mistura de reacção até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa), recolhe-se o óleo em 115 ml de uma solução aquosa de KHS04 IN, e agita-se vigorosamente em azoto durante 7 horas. Adiciona-se acetato de etilo à mistura de reacção, e extrai-se a fase aquosa duas vezes com acetato de etilo. Depois basificam-se as águas-mães por adição de pastilhas de NaOH, e em seguida extrai-se a fase aquosa 3 vezes com clorofórmio que se dilui em NaCl. Secam-se as fases orgânicas juntas sobre sulfato de magnésio e depois evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa). Obtêm-se 17,3 g (Rend0 = 92%) de produto esperado em forma de um óleo amarelo. CCM: Rf = 0,5 (alumina, eluente: diclorometano-metanol (90-10) 1H-RMN (CDC13) : δ 1,05 e 1,67 (2m, 4H, N-CH2-ÇH2-CH-CH2-CH2) ; 1,17 (s, 2H, NH2); 1,42 (s, 10H, tBu, CH2-CH-CH2) ; 2,55 (d, 2H, CH2-NH2) ; 2,65 e 4,07 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) SM: 215 (MH+); 159 (MH-tBu+).

Etapa b) 123 Síntese de (4-(2-aminometilpiridinil)-piperidin)-1-carboxilato de (1,1-dimetiletilo) .

Mantém-se em refluxo durante 6 horas uma mistura de 2,18 g (10,19 mmoles) de (4-aminometilpiperidin)-1-carboxilato de (1,1-dimetiletilo) em 5 ml de 2- fluoropiridina. Depois de voltar à temperatura ambiente, evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa), e recolhe-se o resíduo sólido amarelo numa mistura de água, acetato de etilo e solução saturada de bicarbonato de sódio. Decanta-se a fase orgânica, lava-se com uma solução saturada de cloreto de sódio, depois seca-se sobre sulfato de magnésio e evapora-se até que fique seca sob pressão reduzida (1,3 kPa). Cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica com o eluente seguinte: acetato de etilo-ciclo-hexano 70-30. Obtêm-se 1,19 g (Rend° = 40%) de produto esperado. CCM: Rf = 0,4 (gel de sílica, eluente: acetato de etilo-ciclo-hexano 70-30) 1H-RMN (CDC13) : δ 1,20 e 1,80 (2m, 5H, Ν-ΟΗ2-ΟΗ2-ΟΗ-ΟΗ2-CH2) ; 1,47 (s, 9H, tBu) ; 2,71 e 4,15 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 3,21 (m, 2H, CH-CH2-NH) ; 4,80 (m, 1H, CH-CH2-NH) ; 6,41 (d, 1H, CH=CH piridina); 6,60 (m, 1H, CH=CH piridina) 7,45 (m, 1H, CH=CH piridina); 8,07 (m, 1H, N-CH=CH). SM: 292 (MH+); 192 (MH-tBu+).

Etapa c) Síntese de 2-(4-metilpiperidinil)aminopiridina 124

aminometilpiridinil)-piperidin)-1-carboxilato de (1,1— dimetiletilo) em 25 ml de diclorometano com 6 ml de ácido trifluoroacético à temperatura ambiente até ao desaparecimento do produto de partida em CCM (gel de sílica, eluente acetato de etilo 100) . Adicionam-se então 20 ml de tolueno, e evapora-se a mistura até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa). Recolhe-se o resíduo com uma mistura de cloreto de metileno e solução aquosa de hidroxido de sódio 2N. Decanta-se a fase orgânica, lava-se com uma solução saturada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de magnésio e evapora-se até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa). Recolhe-se o óleo obtido com um pouco de éter di-isopropílico e pentano e depois condensa-se até que fique seco sob pressão reduzida (2 kPa). Obtêm-se 590 mg (Rend0 = 82%) de produto esperado em forma de um sólido amarelo. CCM: Rf = 0,2 (gel de sílica, eluente diclorometano-metanol-água-ácido acético 70-30-6-3). 1H-RMN (CDC13) : δ 1,25 e 1,8 (2m, 4H, NH-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 1,72 (m, 1H, CH2-CH-CH2); 2,62 e 3,15 (2m, 6H, NH-CH2-CH2-CH-CH2-CH2 e CH-CH2-NH) ; 4,62 (s, 1H, NH móvel);

6,37 (d, 1H, CH=CH piridina) ; 6,56 (m, 1H, CH=CH piridina) ; 7,41 (m, 1H, CH=CH piridina); 8,07 (m, 1H, N-CH=CH). SM: 192 (MH+) .

Etapa d) Síntese de 4-bromo-5-etil-6-[4-(aminometil-2- piridinil)-1-piperidinil]-pirimidina 125

Adicionam-se 1,8 ml de di-isopropiletilamina a uma mistura de 657 mg (2,47 mmoles) de 4, 6-dibromo-5-etil-pirimidina e 450 mg (2,35 mmoles) de 2— (4 — metilpiperidinil)amino-piridina em 55 ml de N,N-dimetilacetamida. Aquece-se esta mistura a 110°C durante 4 horas. Depois elimina-se o solvente sob pressão reduzida (0,2 kPa), e recolhe-se o residuo numa mistura de acetato de etilo, água e solução saturada de bicarbonato de sódio. Decanta-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio e depois condensa-se sob pressão reduzida (2 kPa) . Cromatografa-se o óleo castanho obtido sobre alumina, eluindo-se com o gradiente seguinte: heptano-acetato de etilo 80-20 e 70-30. Obtêm-se 747 mg (Rend° = 84%) de produto esperado em forma de um sólido bege. CCM: Rf = 0,5 (alumina, eluente: heptano-acetato de etilo 50-50) . 1H-RMN (CDC13) : δ 1,29 (t, 3H, CH2-CH3) ; 1,42 e 1,9 (2m, 5H, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 2,70 (q, 2H, CH2-CH3) ; 2,95 e 3,88 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 3,27 (m, 2H, CH-CH2- NH); 4,81 (m, 1H, NH móvel); 6,42 (m, 1H, CH=CH piridina); 6.60 (m, 1H, CH=CH piridina); 7,46 (m, 1H, CH=CH piridina) 8,09 (m, 1H, N-CH=CH); 8,31 (s, 1H, N=CH-N) . SM: 378 (MH+).

Etapa e) Síntese de 3-[5-etil-6-[4-(aminometil-2-piridinil)-1-piperidinil]-4-pirimidinilamino]-N-[(fenilmetoxi)-carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo). 126

Mantém-se em refluxo durante 7 horas uma mistura de 300 mg (0,79 mmoles) de 4-bromo-5-etil-6-[4-(aminometil-2-piridinil)-1-piperidinil]-pirimidina, 282,5 mg (0,96 mmoles) de 3-amino-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo), 168,6 mg (1,11 mmoles) de fluoreto de césio, 49,8 mg (0,08 mmoles) de tris(dibenzilidenacetona) dipaládio(O) e 49,8 mg (0,08 mmoles) de rac-2,2'- bis(difenil-fosfino)-1,1'-binaftilo em 8 ml de 1,4-dioxano. Faz-se com que a mistura de reacção volte à temperatura ambiente para se adicionarem 49,8 mg (0,08 mmoles) de tris(dibenzilidenacetona)dipaládio (0), e depois mantém-se novamente em refluxo durante 4 horas. Depois de a mistura arrefecer, concentra-se sob pressão reduzida (2 kPa) e depois recolhe-se o resíduo obtido numa mistura de acetato de etilo, água e solução saturada de bicarbonato de sódio. Decanta-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio e depois concentra-se sob pressão reduzida (2 kPa). Cromatografa-se o resíduo uma primeira vez sobre alumina, eluindo-se com o gradiente seguinte: éter di-isopropílico-acetato de etilo 80-20 até 100% de acetato de etilo. A segunda cromatografia é efectuada sobre gel de sílica com acetato de etilo como eluente. Obtêm-se 272 mg (Rend0 = 58%) de produto esperado. CCM: Rf = 0,4 (gel de sílica, eluente: acetato de etilo). 1H-RMN (CDC13) : δ 1,15 (t, 3H, CH2-CH3) ; 1,47 e 1,90 (2m, 13H, tBu, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 1,81 (m, 1H, N-CH2-

CH2-CH-CH2-CH2); 2,41 (q, 2H, CH2-CH3) ; 2,85 e 3,50 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 3,27 (m, 2H, CH-CH2-NH) ; 3,90 (m, 2H, NH-CH2-CH-NH) ; 4,45 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 4,85 (m, 1H, NH 127 móvel); 5,05 (m, 1H, NH móvel); 5,12 (s, 2H, Q-CH2-Ph) ; 6,16 (dl, 1H, NH móvel); 6.42 (d, 1H, CH=CH piridina); 6,60 (m, 1H, CH=CH piridina); 7,35 (m, 5H, Ph) ; 7,45 (m, 1H, CH=CH piridina); 8,07 (dl, 1H, N-CH=CH); 8,28 (s, 1H, N=CH-N).

Sm: 590 (MH+); 534 (MH-tBu+).

[a]D (CHC13)=+2,9

Etapa f) Síntese de bis(trifluoroacetato) de 3-[5-etil-6-[4-(aminometil-2-piridinil)-1-piperidinil]-4-pirimidinil-amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina

Agitam-se 229 mg (0,39 mmoles) de 3-[5-etil-6-[4-(aminometil-2-piridinil)-1-piperidinil]-4-pirimidinil-amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1— dimetiletilo) em 7,5 ml de diclorometano com 0,9 ml de ácido trifluoroacético à temperatura ambiente até ao desaparecimento do produto de partida em CCM (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 90-10-1-1) . No fim da reacção, adiciona-se tolueno à mistura de reacção e depois evapora-se até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa). Solubiliza-se o produto no mínimo de diclorometano com um pouco de metanol, e depois deita-se sobre éter etílico. Filtra-se o precipitado. Obtêm-se 97,4 mg (Rend0 = 38%) de produto esperado em forma de um sólido amorfo. CCM: Rf = 0,1 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 90-10-1-1). 1H-RMN (CDCI3 + 2 gotas MeOD) : δ 1,12 (t, 3H, CH2-CH3) , 1,43 e 1,95 (2m, 5H, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 2,41 (q, 2H, 128 CH2-CH3); 3,10 e 3,65 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 3,26 (d, 2H, CH-CH2-NH) ; 3,80 e 4,02 (2m, 2H, NH-CH2-CH-NH) ; 4,41 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 5,10 (s, 2H, Q-CH2-Ph) ; 6,74 (t, 1H, CH=CH piridina); 6,87 (d, 1H, CH=CH piridina); 7,32 (m, 5H, Ph); 7,81 (m, 2H, CH=CH piridina e N-CH=CH); 8,23 (s, 1H, N=CH-N) . SM: 534 (MH+).

[a] D (CHCI3) =+l, 88

Exemplo 40 Etapa a)

Sintese de 4-[3-(4-metoxi-2-nitro-fenil)- tioureidometil]-piperidin-l-carboxilato de (1,1— dimetiletilo). "7“ rH·

N.

THF IMH, 0 0

Agita-se uma mistura de 1 g (4,67 mmoles) de 4-aminometilpiperidin)-1-carboxilato de (1,1-dimetiletilo) e 1,08 g (6,06 mmoles) de isotiocianato de 4-metoxi-2-nitrofenilo, em 70 ml de tetra-hidrofurano, à temperatura ambiente, em caudal de azoto, durante 5 horas. Depois evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa), e cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica com o eluente seguinte: acetato de etilo-heptano de 20-80 a 30-70. Obtêm-se 1,66 g (Rend0 = 84%) de produto esperado. CCM: Rf = 0,4 (gel de sílica, eluente: acetato de etilo-heptano 50-50) 1H-RMN (CDCI3) : δ 1,25 e 1,76 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 1,47 (s, 9H, tBu) ; 1,91 (m, 1H, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) 2,73 e 4,15 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 3,51 (m, 2H,

CH-CH2-NH); 3,90 (s, 3H, O-CH3); 6,66 (m, 1H, CH=CH aromático); 7,22 (m, 1H, CH=CH aromático); 7,59 (m, 1H, CH=CH aromático). 129 SM: 425 (MH+); 325 (MH-C00tBu+).

Etapa b) Síntese de 4-[(6-metoxi-2-aminometilbenzimidazol)]-piperidin-l-carboxilato de (1,1-dimetiletilo).

A uma solução de 1,12 g (2,64 mmoles) de 4—[3— (4 — metoxi-2-nitro-fenil)-tioureidometil]-piperidin-l-carboxilato de (1,1-dimetiletilo) em 100 ml de ácido acético adiciona-se uma mistura de 2 g de zinco activado num pouco de ácido acético (activa-se o zinco por aquecimento da pistola de calor). Deixa-se em agitação durante 5 horas, depois adiciona-se Clareei à solução, filtra-se a mistura sobre Clareei e evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa). Obtêm-se 1,8 g de produto esperado.

Depois coloca-se este produto bruto em solução em 100 ml de dimetilformamida, e adicionam-se 10 ml de trietilamina e 500 mg de dicloreto de mercúrio. Coloca-se a mistura de reacção em agitação à temperatura ambiente durante 15 horas. Depois evapora-se o solvente sob pressão reduzida (0,2 kPa), e recolhe-se o resíduo numa mistura de água, uma solução saturada de bicarbonato de sódio e acetato de etilo. Decanta-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio e elimina-se o solvente por evaporação sob pressão reduzida (2 kPa). Cromatografa-se o resíduo sobre alumina, eluindo-se com o gradiente seguinte: acetato de etilo-diclorometano/metanol 50-50 (100% de CH2C12) a 50-50 (95/5 CH2Cl2/MeOH) . Obtêm-se 740 mg (Rend0 = 77% em 2 etapas) de produto esperado. CCM: Rf = 0,4 (alumina, eluente: acetato de etilo-diclorometano/metanol 50-50(95/5)) . 130 1H-RMN (CDC13) : δ 1,07 e 1,64 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 1,46 (s, 9H, tBu) ; 1,76 (m, 1H, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 2,61 e 4,05 (2m, 4H, NH-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 3,29 (m, 2H, CH-CH2-NH) ; 3,81 (s, 3H, Q-CH3) ; 6,66 e 7,12 (2d, 2H, CH=CH benzimidazol); 6,88 (s, 1H, NH-C=CH-C-OCH3) . SM: 361 (MH+); 305 (MH-tBu+); 261 (MH-COOtBu+).

Etapa c) Síntese de tri (trifluoroacetato) de 4-(6-metoxi-2-aminometilbenzimidazol)piperidina

Agitam-se 918 mg (2,55 mmoles) de 4-[(6-metoxi-2-aminometilbenzimidazol)]-piperidin-l-carboxilato de (1,1-dimetiletilo) em 35 ml de diclorometano com 6 ml de ácido trifluoroacético à temperatura ambiente até ao desaparecimento do produto de partida em CCM (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 90-10-1-1) . Adiciona-se então tolueno e evapora-se a mistura sob pressão reduzida (2 kPa). Obtêm-se 1,15 g de produto esperado em forma de sal de trifluoroacetato. CCM: Rf = 0,15 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 90-10-1-1) . 1H-RMN (MeOD) : δ 1,50 e2,05 (2m, 5H, NH-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 3,00 e 3,43 (2m, 4H, NH-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 3,35 (d, 2H, CH-CH2-NH) ; 3,81 (s, 3H, Q-CH3) ; 6,85 e 7,25 (2m, 2H, CH=CH benzimidazol); 6,91 (s, 1H, NH-C=CH-C-OCH3) . SM: 261 (MH+) .

Etapa d) Síntese de 4-bromo-5-etil-6-[4-(6-metoxi-2-aminometil-benzimidazol)-1-piperidinil]pirimidina. 131

Num balão de ensaio contendo 356 mg (1,37 mmoles) de 4-(6-metoxi-2-aminometilbenzimidazol)piperidina, livre do seu sal, adicionam-se 35 ml de N,N-dimetilacetamida, 381,84 mg (1,43 mmoles) de 4,6-dibromo-5-etil-pirimidina em solução e depois adicionam-se 1,2 ml de di-isopropiletilamina. Aquece-se esta mistura a 110°C durante 3 horas e depois concentra-se sob pressão reduzida (0,2 kPa). Recolhe-se o resíduo obtido numa mistura de água, acetato de etilo e uma solução de bicarbonato de sódio saturada. Separa-se a fase orgânica e reextrai-se a fase aquosa com acetato de etilo. Secam-se as fases orgânicas reunidas sobre sulfato de magnésio, filtram-se e depois evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa). Cromatografa-se o produto obtido sobre gel de sílica, eluindo-se com um gradiente de diclorometano-metanol 95-5 e depois diclorometano-metanol 90-10.

Obtêm-se 383 mg (Rend0 = 63%) de produto esperado.

Preparação da 4-(6-metoxi-2-aminometilbenzimidazol)-piperidina em forma de amina livre:

Deslocam-se do seu sal 700 mg de 4-(6-metoxi-2-aminometilbenzimidazol)piperidina por 6 equivalentes mássicos de resina básica Amberlist A21 (resina do tipo R-ΝΜβ2) numa mistura CH2Cl2-MeOH-AcOEt 1-1-1 em agitação durante 30 minutos. Lava-se previamente a resina, e deixa-se que inche durante 20 minutos nesta mistura de solvente. Esta operação deve ser repetida 3 vezes para que a deslocação do sal seja total. Depois de se filtrar a resina e de se evaporarem os solventes, obtêm-se 356 mg (1,37 mmoles) de 4-(6-metoxi-2-aminometilbenzimidazol)piperidina livre. CCM: Rf=0,23 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol 90-10) . 132 lH-RMN (CDC13) : δ 1,27 (t, 3H, CH2-CH3) ; 1,32 e 1,80 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 1,89 (m, 1H, N-CH2-CH2-CH- CH2-CH2; 2,63 (q, 2H, CH2-CH3) ; 2,85 e 3,82 (2m, 7H, N-CH2~ CH2-CH-CH2-CH2, Q-CH3) ; 3,37 (m, 2H, CH-CH2-NH) ; 6,67 e 7,15 (2d, 2H, CH=CH benzimidazol); 6,90 (s, 1H, NH-C=CH-C-OCH3); 8,27 (s, 1H, N=CH-N). SM: 446 (MH+) .

Etapa e) Síntese de 4-bromo-5-etil-6-[4-(6-metoxi-2-aminometil-1-carboxilato de (1,1-dimetiletil)benzimidazol)-1-piperidinil]pirimidina.

À mistura de 159,7 mg (0,36 mmoles) de 4-bromo-5-etil-6- [4- (6-metoxi-2-aminometilbenzimidazol) -1-piperidinil]pirimidina em 15 ml de diclorometano adicionam-se 1,5 ml de piridina e depois 471 mg (2,16 mmoles) de dicarbonato de di-terc-butilo. Deixa-se em agitação à temperatura ambiente durante uma noite. Adiciona-se um pouco de tolueno à mistura de reacção e depois evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa). Recolhe-se o resíduo numa mistura de água, acetato de etilo e uma solução saturada de bicarbonato de sódio. Decanta-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio e depois condensa-se sob pressão reduzida (2 kPa). Cromatografa-se o produto bruto obtido sobre gel de sílica, eluindo-se com o gradiente seguinte: heptano-acetato de etilo 60-40 a 50-50. Obtêm-se 136 mg (Rend0 = 69%) de produto esperado (em forma de 2 regioisómeros que se distinguem mediante RMN com uma relação 50/50) . 133 CCM: Rf = 0,5 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol 90-10). 1H-RMN (CDCL3) : δ 1,30 (t, 6H, CH2-CH3) ; 1,47 e 1,96 (2m, 8H, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 1,72 (2sl, 20H, tBu, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2); 2,70 (q, 4H, CH2~CH3) ; 2,97 e 3,89 (2m, 8H, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 3,52 (m, 4H, CH-CH2-NH) ; 3.82 (s, 6H, OCH3) ; 6,62 e 6,82 e 7,31 e 7,46 (4d, 4H, CH=CH benzimidazol); 7,00 e 7,26 (2s, 2H, NH-C=CH-C-OCH3) ; 8,31 (s, 2H, N=CH-N). SM: 545/547 (MH+).

Etapa f) Síntese de 3-[5-etil-6-[4-(6-metoxi-2-aminometil-benzimidazol-l-carboxilato de (1,1-dimetiletilo))-1-piperidinil]-4-pirimidinilamino]-N- [(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo).

Mantém-se em refluxo durante 24 horas uma mistura de 136 mg (0,25 mmoles) de 4-bromo-5-etil-6-[4-(6-metoxi-2-aminometil-l-carboxilato de (1,1-dimetiletilo)-benzimidazol)-1-piperidinil]pirimidina, 88,5 mg (0,30 mmoles) de 3-amino-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo), 53,2 mg (0,35 mmoles) de fluoreto de césio, 11,4 mg (0,012 mmoles) de tris(dibenzilidenacetona)dipaládio (0) e 15,6 mg (0,025 mmoles) de rac-2,2'-bis(difenil-fosfino)-1,1'-binaftilo em 6 ml de 1,2-dimetoxietano. Durante a reacção, adicionam-se 11,4 mg de tris(dibenzilidenacetona)dipaládio(0). Depois de a mistura arrefecer, concentra-se a mesma sob pressão reduzida (2 kPa) e depois recolhe-se o resíduo obtido numa mistura de acetato de etilo, água e solução saturada de 134 bicarbonato de sódio. Decanta-se a fase orgânica, seca-se sobre sulfato de magnésio e depois concentra-se sob pressão reduzida (2 kPa). Cromatografa-se o resíduo uma primeira vez sobre gel de sílica, eluindo-se com o gradiente seguinte: acetato de etilo-heptano 40-60 até 100% de acetato de etilo. A segunda cromatografia é efectuada sobre alumina, eluindo-se com o gradiente seguinte: acetato de etilo-diclorometano-metanol 50-50-0 a 50-50-2%.

Obtêm-se 58 mg (Rend0 = 30%) de produto esperado (em forma de 2 regioisómeros que se distinguem por RMN com uma relação 50/50) . CCM: Rf = 0,4 (gel de sílica, eluente: acetato de etilo) . 1H-RMN (CDC13) : δ 1,15 (t, 6H, CH2-CH3) ; 1,46 e 1,91 (2m, 26H, tBu, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 1,72 (m, 20H, tBu, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 2,41 (q, 4H, CH2-CH3) ; 2,87 e 3,51 (2m, 12H, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2, CH-CH2-NH) ; 3,82 (s, 6H, OCH3) ; 3,90 (m, 4H, NH-CH2-CH-NH) ; 4,43 (m, 2H, NH-CH2-CH-NH); 5,12 (s, 4H, Q-CH2-Ph); 6,12 (dl, 2H, NH móvel); 6,61 (d,

1H, CH=CH benzimidazol) ; 6,82 (m, 1H, CH=CH benzimidazol); 7,00 (sl, 1H, NH-C=CH-C-OCH3) ; 7,35 (m, 12H, Ph, CH=CH benzimidazol); 7,45 (d, 1H, CH=CH benzimidazol); 8,29 (s, 2H, N=CH-N). HPLC/SM: 759 (MH+); 659. (MH-COOtBu+); 603 (MH-COOtBu-tBu+) .

Etapa g) Síntese de bis(trifluoroacetato) de 3-[5-etil-6-[4-(6-metoxi-2-aminometil-benzimidazol)-1-piperidinil]-4-pirimidinilamino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina. 135

Agitam-se 58 mg (0,08 mmoles) de 3-[5-etil-6-[4-(6-metoxi-2-aminometilbenzimidazol-l-carboxilato de (1,1 dimetiletilo))-1-piperidinil]-4-pirimidinilamino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo) em 2 ml de diclorometano com 0,2 ml de ácido trifluoroacético à temperatura ambiente até ao desaparecimento do produto de partida em CCM (gel de silica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 90-10-1-1) . No fim da reacção, adiciona-se tolueno à mistura de reacção e depois evapora-se até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa). Solubiliza-se o produto no mínimo de diclorometano com um pouco de metanol e depois deita-se sobre éter di-isopropílico. Filtra-se o precipitado. Obtêm-se 16 mg (Rend0 = 35%) de produto esperado em forma de um sólido amorfo. CCM: Rf = 0,3 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 90-10-1-1) . 1H-RMN (MeOD) : δ 1,12 (t, 3H, CH2-CH3) ; 1,4 9 e 1,95 (2m, 5H, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 2,51 (q, 2H, CH2-CH3) ; 3,00 e 3,52 (2m, 4H, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 3,39 (d, 2H, CH-CH2- NH) ; 3,77 e 4,01 (2m, 2H, NH-CH2-CH-NH); 3,86 (s, 3H, OCH3) ; 4,56 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH) ; 5,07 (m, 2H, Q-CH2-Ph) ; 6,91 (d, 1H, CH=CH benzimidazol) ; 6,96 (s, 1H, NH-C=CH-C- OCH3) 7,32 (m, 6H, Ph, CH=CH benzimidazol); 8,20 (s, 1H, N=CH-N). HPLC/SM: 603 (MH+);

Exemplo 41 136 Síntese de 2,5-dimetil-4,6-di-hidroxi-pirimidina:

0

Arrefece-se a 0°C com um banho de gelo um balão de ensaio contendo 40 ml de metanol, em atmosfera de azoto, adicionam-se 9,72 g de metilato de sódio (isto é, uma solução com uma concentração de c=3 mol.l"1) à mistura de reacção, e depois adicionam-se a 0°C e em pequenas quantidades 5 g (53 mmoles) de cloridrato de acetamidina. Deixa-se agitar à temperatura ambiente durante 20 minutos e depois adicionam-se, gota a gota, 8,3 ml de metilmalonato de dietilo. Mantém-se a agitação durante 3 horas. Depois condensa-se o metanol sob pressão reduzida (2 kPa) . Recolhe-se o produto bruto obtido com um mínimo de água, arrefece-se a 0°C e depois acidifica-se com ácido acético puro até um pH que se situe entre 4 e 5. Filtra-se o precipitado branco formado e lava-se com água, éter etílico e pentano. Depois seca-se o produto branco sobre P205 sob pressão reduzida (0,2 kPa). Obtêm-se 3,3 g (Rend0 = 49%) de produto esperado. CCM: Rf = 0,2 (Gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 85-15-2-2) . 1H-RMN (DMSOd6) : Ô 1,68 (s, 3H, OH-CH=C-CH3) ; 2,18 (s, 3H, N=C-CH3) . Síntese de 2,5-dimetil-4,6-dicloro-pirimidina: OH Cl

Mantém-se em refluxo durante 8 horas uma mistura de 3,3 g (23,5 mmoles) de 2,5-dimetil-4,6-di-hidroxi-pirimidina e 15 ml de oxicloreto de fósforo. Depois de ela voltar à 137 temperatura ambiente, deita-se o meio de reacção lentamente sobre uma mistura de gelo e água. Extrai-se esta fase aquosa em acetato de etilo. Lava-se a fase orgânica com uma solução saturada de bicarbonato de sódio e depois seca-se sobre sulfato de magnésio e evapora-se até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa) . Obtêm-se 3,39 g (Rend0 = 81%) de produto esperado. CCM: Rf = 0,9 (Gel de silica, eluente: acetato de etilo 100%) 1H-RMN (CDC13) : δ 2,46 (s, 3H, C1-CH=C-CH3) ; 2,68 (s, 3H, N=C-CH3) SM: 177/179 (MH+).

Sintese de 6-[4-(1,2, 3, 4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-2,5-dimetil-4-cloro-pirimidina:

Num balão de ensaio contendo 2,95 g (13,5 mmoles) de 4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidina livres do seu sal, adicionam-se 2 g (11,3 mmoles) de 4,6-dicloro-2,5-dimetil-pirimidina em solução em 25 ml de dimetilacetamida e 5 ml de di-isopropiletilamina. Aquece-se esta mistura a 130°C durante 4 horas e depois concentra-se até que fique seca no vácuo. Recolhe-se o resíduo obtido numa mistura de água, acetato de etilo e uma solução de bicarbonato de sódio saturada. Separa-se a fase orgânica e reextrai-se a fase aquosa com acetato de etilo. Secam-se as fases orgânicas reunidas sobre sulfato de magnésio, e depois evapora-se o solvente sob pressão reduzida (2 kPa). Cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica, eluindo-se com um gradiente de acetato de etilo (100%) e depois com acetato de etilo-metanol (95-5) . Obtêm-se 2,2 g (Rend0 = 55%) de produto esperado. 138

Preparação da naftiridina em forma de amina livre:

Deslocam-se 8,3 g de naftiridina do seu sal por 6 equivalentes mássicos de resina básica Amberlist A21 (resina do tipo R-NMe2) numa mistura CH2Cl2/MeOH/AcOEt 1/1/1 em agitação durante 30 minutos. Lava-se previamente a resina e deixa-se que inche durante 20 minutos nesta mistura de solvente. Esta operação deve ser repetida 3 vezes para que a deslocação do sal seja total.

Depois de se filtrar a resina e de se evaporarem os solventes, obtêm-se 2,95 g (13,5 mmoles) de naftiridina livre. CCM: Rf = 0,15 [gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol 95-5] 1H-RMN (CDC13) : δ 1,90 e 2,01 (2m, 6H, NH-CH2-CH2-CH2, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 2,26 (s, 3H, CH3) ; 2,51 (s, 3H, N=C-CH3) ; 2,72 (m, 3H, NH-CH2-CH2-CH2, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 2,97 e 3,97 (2m, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2) ; 3,42 (m, 2H, NH-CH2~ CH2-CH2); 6,41 e 7,16 (2d, 2H, CH=CH naftiridina). SM: 358 (MH+) . Síntese de 3-[[6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8- naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-2,5-dimetil-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo).

Aquece-se em refluxo durante 24 horas uma mistura de 2,2 g (6,15 mmoles) de 6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-2,5-dimetil-4-cloro-pirimidina e 2,17 g (7,38.mmoles) de 3-amino-N- [(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetil-etilo) (preparada de acordo com J. Med. Chem. (2001), 44(8), 1158-1176), na presença de 1,31 g (8,61 mmoles) de fluoreto de césio, 383 mg (0,615 mmoles) de (2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftilo e 281 mg (0,307 mmoles) de tris-(dibenzilidenacetona)dipaládio(0), em 55 ml de 1,2- 139 dimetoxietano. Deixa-se que a mistura de reacção volte à temperatura ambiente, adicionam-se então 281 mg (0,307 mmoles) de tris-(dibenzilidenacetona)dipaládio(0) e depois mantém-se a mistura de reacção em refluxo durante mais 24 horas. Depois de a solução ter arrefecido, concentra-se até que fique seca sob pressão reduzida (2 kPa), e depois recolhe-se numa mistura de água, acetato de etilo e uma solução saturada de bicarbonato de sódio. Decanta-se a fase orgânica e extrai-se a fase aquosa com acetato de etilo. Secam-se as fases orgânicas agrupadas sobre sulfato de magnésio e evaporam-se até que fiquem secas sob pressão reduzida (2 kPa). Cromatografa-se o resíduo sobre alumina com um gradiente de éter isopropílico/acetato de etilo (50/50)-diclorometano (50-50). Juntam-se as fracções que contêm o produto esperado para uma segunda purificação sobre gel de sílica com um gradiente de acetato de etilo-heptano-metanol 50-50-0 a 90-0-10. Obtêm-se 550 mg (Rend0 = 15%) de produto esperado. CCM: Rf = 0,3 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol 90-10) 1H-RMN (CDC13): δ 1,46 (s, 9H, tBu); 1,92 (m, 9H, NH- CH2-CH2-CH2, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2, C=Ç-CH3) ; 2,41 (s, 3H, N=C-CH3) ; 2,70 (m, 3H, NH-CH2-CH2-CH2, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 2,91 e 3,66 (2m, 4H, CH2-CH2-N-CH2-CH2) ; 3,44 (m, 2H, NH- CH2-CH2-CH2) ; 3,90 (m, 2H, NH-CH2-CH-NH) ; 4,38 (m, 1H, NH- CH2-CH-NH); 5,13 (s, 2H, 0-CH2-Ph) ; 6,42 e 7,16 (2d, 2H, CH=CH naftiridina); 7,35 (m, 5H, Ph). SM: 616 (MH+) Síntese de ácido correspondente:

2CF3COOH 140

Agita-se à temperatura ambiente uma mistura de 500 mg (0,81 mmoles) de 3-[[6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-2,5-dimetil-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1-dimetiletilo) e 5 ml de ácido trifluoroacético em 30 ml de diclorometano durante 24 horas. Adiciona-se então um tolueno, e evapora-se a mistura até que fique seca. Solubiliza-se o produto no mínimo de diclorometano com um pouco de metanol e depois deita-se sobre éter di-isopropílico. Filtra-se o precipitado. Obtêm-se 485 mg (Rend0 = 76% expressos como ditrifluoroacetato) de produto esperado. CCM: Rf = 0,3 (gel de sílica, eluente: diclorometano-metanol-água-ácido acético 90-10-1-1). 1H-RMN (CDC13) : δ 1,97 (m, 9H, ΝΗ-ΟΗ2-ΟΗ2-ΟΗ2, N-CH2~CH2-CH-CH2-CH2, C=C-CH3) ; 2,54 (s, 3H, N=C-CH3) ; 2,78 (m, 2H, NH-CH2-CH2-CH2) ; 2,98 (m, 1H, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2) ; 3,22 e 3,80 a 4,07 (2m, 6H, N-CH2-CH2-CH-CH2-CH2, NH-ÇH2-ÇH-NH) ; 3,51 (m, 2H, NH-CH2-CH2-CH2) ; 4,45 (m, 1H, NH-CH2-CH-NH);

5,10 (s, 2H, Q-CH2-Ph); 6,42 e 7,37 (2m, 3H, CH=CH naftiridina, NH móvel); 7,32 (m, 5H, Ph). SM: 560 (MH+); 426 [MH+ - (COOCH2Ph) ] +.

Ensaio_farmacológico : Ensaio ELISA quistrina/Receptor Vitronectina (ανβ3)

Protocolo:

Revestem-se placas de 96 cavidades Maxisorp numa noite a 40°C com 100 μΐ de quistrina a 1 μg/ml (diluição em tampão de revestimento: carbonato 0,05 M/NaOH pH 9,6). No dia seguinte, esvaziam-se as cavidades e fixam-se os ligandos (quistrina) (tampões de fixação: PBS contendo 0,5% de BSA (pH= 7,4)) durante 1 hora à temperatura ambiente com agitação suave a 125 rpm. Lavam-se as cavidades seis vezes (tampão de lavagem: PBS contendo 0,05% de Tween 20 (pH 7,7) e depois adicionam-se, por cavidade e nesta ordem: 141 40 μΐ de tampão de incubação 10 μΐ da diluição do produto a ensaiar (diluem-se os produtos numa mistura de 50:50 DMSO/água) 50 μΐ de receptor θνβ3 humano (veja, Pytella et al. Methods Enzymol. (1987) 144 (diluição em tampão de incubação a adaptar de acordo com o lote do receptor e de acordo com o ligando). Coincubam-se o ligando, o receptor (Χνβ3 e os produtos a estudar durante 3 horas à temperatura ambiente com uma agitação suave de 125 rpm.

Lavam-se novamente as cavidades seis vezes, e depois incubam-se durante 2 horas à temperatura ambiente com uma agitação suave a 125 rpm, na presença de 100 μΐ de anticorpos anti-receptor acoplados a uma peroxidase (os anticorpos 4B12-HRP são diluídos em tampão de incubação (50 mM TRIS pH 7,4; 0,5 % de BSA; 0,05 % de Tween 20; 1 mM MnCl2; 50 μΜ CaCl2; 50 μΜ de MgCl2,- 100 mM NaCl) . Adapta-se a diluição de acordo com o lote do receptor.

Lavam-se as cavidades seis vezes antes da medição da união ligando-receptor efectuada por intermédio de um kit revelador de peroxidase (TBM Microwell Peroxidase Substrate System Kirkegaard; Ref cat. 50-76-00) .

Este kit contém um frasco A de substrato (3,3',5,5'-tetrametilbencidina a 0,4 g/1) e um frasco B (H202 a o, 02 % em tampão de citrato/ácido cítrico) . Extemporaneamente, mistura-se um volume de A com um volume de B, e depois distribui-se a mistura de reacção à razão de 100 μΐ/cavidades. Desenvolve-se a reacção enzimática durante 6 a 10 minutos para quistrina/avp3, e depois pára-se a sua evolução com a adição de 100 μΐ de ácido fosfórico 1M.

Determina-se a densidade óptica a 450 nm. 142

Expressão dos resultados

Traça-se a curva seguinte: a percentagem de ligação em função do logaritmo de cada concentração do produto submetido a ensaio.

Relativamente a cada produto, determina-se a IC50 seguindo-se esta fórmula: IC50=(B0+ Bmin)/2 BO = Máximo de ligação na ausência de qualquer produto.

Bmin = Minimo de ligação na presença da concentração de produto mais elevada.

Exemplo K/VnR IC50 (nM) 1 3 2 160 3 1—1 co 4 5,1

Actividade in vivo

Hipercalcemia induzida pela hormona paratiroidiana (PTH) num modelo de rato tiroparatireoidectomisado (TPXT).

Induz-se a estimulação da reabsorção óssea em ratazanas TPXT por perfusão de PTH, e seguem-se as variações da reabsorção óssea mediante a concentração de cálcio no soro.

Submetem-se os ratos macho Sprague Dawley, pesando 150-200 g, a tiroparatireoidectomização. Submetem-se os ratos a um regime Standard contendo 7 g Ca/kg (UAR) e água de Volvic. Ensaia-se a eficácia da tiroparatireoidectomia medindo as concentrações de Ca no soro 8 dias depois da operação em animais em jejum desde o dia anterior. Considera-se que os ratos estão tiroparatireoidectomizados quando as percentagens de Ca no soro forem inferiores a 80 mg/1. Dissolve-se a PTH (1-34) de rato (Bachem) em 0,15 M de NaCl Cys.HCl 2% e fornece-se por minibombas osmóticas (ALZET 2001D) em doses de 200 pmoles/kg/h. Introduzem-se as minibombas nas cavidades intraperitoneais com anestesia 143 (quetamina - 75 mg/kg e acepromazina - 2,5 mg/kg) em ratos TPXT em jejum desde o dia anterior. Os ratos TPXT de controlo recebem as minibombas cheias com o veículo da PTH.

Administra-se o produto a ensaiar, ou o veículo (controlos e ratos tratados pela PTH), 2 vezes por via subcutânea (2 ml/Kg de peso corporal) nos tempos 0 e 3h depois do início da infusão de PTH. Continua-se o ensaio durante as 6 horas seguintes. No fim do tratamento, recolhe-se a totalidade do sangue depois de decapitação. Centrifugam-se as amostras de sangue a 3000 rpm durante 15 mn (CR422 Jouan) para se obter o soro.

Medem-se as concentrações totais de Ca no soro por colorimetria (Ciba-Corning) utilizando um sistema de leitura de microplacas IEMS Labsystems, a 540 nm.

Analisa-se a diferença entre os valores médios de calcemia em ratos tratados e os grupos do controlo por variância e pelo teste de Dunnett.

Calcula-se a actividade de um produto com a fórmula seguinte:

Calcemia (produto) - calcemia (PTH) % de efeito =--------------------------------------x 100

Calcemia (PTH) - calcemia (controlo)

Os produtos dos exemplos 6, 9, 13 e 15 a 19, ensaiados pelo método anteriormente descrito, mostraram-se activos com doses de 2 vezes 1 mg/kg a 2 vezes 10 mg/kg por via subcutânea em ratos. 144

REFERÊNCIAS CITADAS NA DESCRIÇÃO

Esta lista de referências citadas pelo requerente é apresentada meramente por razões de conveniência para o leitor. Não faz parte da patente de invenção europeia. Embora se tenha tido todo o cuidado na sua concepção, não é possível excluir a existência de erros ou omissões, pelos quais o IEP não assume qualquer responsabilidade.

Documentos de patente citados na descrição wo 9412181 A [0009] wo 9408577 A [0009] EP 528586 ; A [0009] EP 528587 ; A [0009] WO 9532710 A [0009] WO 9600574 A [0009] WO 9600730 A [0009] WO 9800395 A [0009] WO 9932457 A [0009] wo 9937621 A [0009] EP 0820991 A [0009] EP 1065207 A [0115] WO 0078317 A [0115] [0144] [0251] [0413] [0144] [0251] [0413]

Bibliografia não relacionada com patentes citada na descrição: • HORTON et al. Exp. Cell. Res., 1991, vol. 195, 368 [0004] • SATO et al. J. Cell. Biol., 1990, vol. 111, 1713 [0004] • FISHER et al. Endocrinology, 1993, vol. 132, 1411 [0004] • BROWN et al. cardiovascular Res., 1994, vol. 28, 1815 [0006] • BROOK et al. Cell, 1994, vol. 79, 1157 [0007] • CHERESH et al. Science, 1995, vol. 270, 1500 [0008] 145 • GREENE. Wuts protective Group in Organic Synthesis. Wiley, 1991 [0046] • TOTU; KÔNIG et al. Proc. 21st Europ. Peptide Symp. 1990, 243 [0052] • Dermot Cox DN§P, Mai 1995, vol. 8 (4), 197-205 [0088] • Drug targeting, voir Targeted Drug Delivery. R. C. JULIANO et al. Handbook of Experimental Pharmacology. Springer Verlag, vol. 100 [0099] • J. Med. Chem., 2001, vol. 44 (8), 1158-1176 [0109] [0139] [0189] [0257] [0344] [0368] [0400] [0419] [0563] [0670] • R. F. EVANS. J. Chem. Soc.f 1964, 2450-2455 [0133] [0160] • PYTELLA et al. Methods Enzymol., 1987, 144 [0679]

Lisboa, 8/07/2009

Claims

1 REIVINDICAÇÕES 1. Os compostos de fórmula (I)

em todas as suas formas isómeras, isolados ou em mistura, assim como os seus sais de adição fisiologicamente aceitáveis e assim como os seus solvatos, em que - G representa: R7R8N-C (=NR6) -NH-CO; Het-NH-CO; Het-NH-CH2-; Het-; Het representa um sistema monocíclico ou policiclico, sendo cada anel constituído por 4 a 10 membros aromáticos ou não aromáticos, tendo o anel, ou pelo menos um dos anéis, de 1 a 4 átomos de azoto, substituído ou não substituído por um ou mais grupos R9; - R1 representa um átomo de hidrogénio; um grupo arilo (C5-C14); aril (C5-C14) -alquilo (C1-C4); um radical amino não substituído ou monossubstituído ou dissubstituído por um radical alquilo e/ou um radical acilo contendo de 1 a 4 átomos de carbono; - R2 representa um átomo de hidrogénio; um átomo de halogéneo; um grupo nitro; um radical alquilo contendo de 1 a 4 átomos de carbono; um radical amino não substituído ou monossubstituído ou dissubstituído por um radical alquilo e/ou um radical acilo contendo de 1 a 4 átomos de carbono; um grupo - (CH2) o-2_C02R5; ou um grupo - (CH2) 0-2-OR5; - R3 representa - um átomo de hidrogénio, - um radical -C02R5, 2 - um radical -S02R5 ou um sistema monociclico ou policíclico, sendo cada anel constituído por 4 a 10 membros aromáticos ou não aromáticos, contendo o anel, ou pelo menos um dos anéis, de 1 a 4 hetero-átomos escolhidos de entre N, O ou S, substituído ou não substituído por um ou mais radicais R9; R4 representa OH; alcoxi(Ci-Cs); aril (C5-C14) -alquiloxi (C1-C4) ; ariloxi (C5-C14) ; cicloalquiloxi (C3-C12) ; cicloalquil (C3-Ci2)-alquiloxi (C1-C4) ; alquil (Ci—C8) carboniloxi-alquiloxi (C1-C4); aril (C5-C14)-alquilcarboniloxi (C1-C4) - alquiloxi (C1-C4); dialquil (Ci-C8) aminocarbonilmetiloxi; aril (C5-C14)-dialquil(C1-C4)aminocarbonilmetiloxi; um radical amino não substituído ou monossubstituído ou dissubstituído por um radical alquilo (C1-C4) e/ou arilo (C5-C14) e/ou aril (C5-C14)-alquilo (C1-C4) e/ou um radical acilo (C1-C5); ou então o resíduo de um aminoácido D ou L; - R5 representa alquilo (Ci-C8) ; arilo (C5-C14); aril (C5-C14)-alquilo (C1-C4); cicloalquilo (C3-C12) ou cicloalquil (C3-C12) -alquilo(C1-C4), bicicloalquil-alquilo(C1-C4), triciclo-alquilalquilo(C1-C4), estando tais radicais arilo, alquilo, cicloalquilo, bicicloalquilo e tricicloalquilo substituídos ou não substituídos por um ou mais grupos escolhidos de R9; - R6 representa um átomo de hidrogénio; um grupo hidroxilo; nitro; alquil (Ci-Cê) -O-CO; ou alquil (Ci-C6) -O-CO-0-; - R7 e R8, independentemente entre si representam um átomo de hidrogénio ou um radical alquilo (Ci-C6) não substituído ou substituído por R9; - R9 representa halogéneo; amino; nitro; hidroxilo, alquiloxi (C1-C4); alquiltio (C1-C4); carboxi; alquiloxi (Ci-C4)carbonilo; alquilo(Ci-C8) não substituído ou substituído por um ou mais átomos de halogéneo, arilo (C5-C14), aril (C5-Ci4) -alquilo (C1-C4), entendendo-se que os radicais arilo podem estar substituídos ou não substituídos por um ou mais radicais 3 idênticos ou diferentes escolhido(s) de entre alquilo(Ci— Ce), em particular alquilo (C1-C4) , hidroxilo, alquiloxi(Ci— Ce), alquiltio(Ci-Ce), halogéneo escolhido de entre flúor, cloro e bromo, nitro, amino, alquilamino(C1-C4), dialquilamino(C1-C4), trifluorometilo, metilenodioxi, ciano, aminocarbonilo, alquil(C1-C4)aminocarbonilo, dialquil(C1-C4)aminocarbonilo, carboxi, alcoxi(Ci- C4)carbonil, fenilo, fenoxi, benzilo e benziloxi. ou G representa 1,2,3,4-tetra-hidro-l, 8-naftiridin-7-ilo. R1 representa metilo. - R1 representa metilo. - R2 representa fenilmetoxicarbonilo e - R3 representa OH ou t.butoxi 1 Os compostos de fórmula (I) de acordo com a 2 reivindicação 1, em que G representa um grupo Het, Het-NHCO-, ou Het-NH-CH2, representando Het os heterociclos 3 seguintes: 4

5

' Ν Ν ^

Ν~Ν Η

sais de adição farmaceuticamente assim como os seus aceitáveis.

4. Os compostos de fórmula (I) de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 2, em que R3 é um grupo benziloxicarbonilo, assim como os seus sais de adição farmaceuticamente aceitáveis.

5. Os compostos de fórmula (I) de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, em que R2 é um hidrogénio, um radical alquilo contendo de 1 a 4 átomos de carbono, ou um átomo de flúor, assim como os seus sais de adição farmaceuticamente aceitáveis.

6. Os compostos de fórmula (I) de acordo com a reivindicação 5, em que R2 é metilo ou etilo.

7. Os compostos de fórmula (I) de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, em que: G representa:

assim como os seus sais de adição farmaceuticamente aceitáveis. 6

8. Os compostos de fórmula (I) de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, em que: G representa

R1 representa um átomo de hidrogénio, R2 representa um átomo de hidrogénio, um átomo de flúor, um radical metilo ou um radical etilo, R3 representa um grupo benziloxicarbonilo, R4 representa um grupo hidroxi, assim como os sais de adição farmaceuticamente aceitáveis.

9. Os compostos de fórmula (I) de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, com os nomes seguintes: 3- [ [5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l, 8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4- pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina 3-[[5-etil-6-[4-[(1,2,3,4,5,6-hexa-hidro-2-pirimidinil)iminocarbonil]-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina 3- [[6- [4-(1,2,3, 4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-metil-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alanina 3— [ [6—[4—[ (1,2,3,4,5,6-hexa-hidro-2-pirimidinil)iminocarbonil]-1-piperidinil]-5-metil- 4- pirimidinil]amino]-N- [ (fenilmetoxi)carbonil]alanina 3-[[5-etil-6-[4-(l,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N- [ (fenilmetoxi)carbonil]alaninato de etilo 7 3- [ [6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-5-metil-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de isopropilo 3- [ [5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-i-piperidinil] -4-pirimidinil]amino]-N- [(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1- dimetiletilo) 3-[[5-metil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil]amino]-N-[(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1- dimetiletilo) 3- [ [-6- [4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l,8-naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-2,5-dimetil-4-pirimidinil]amino]-N- [(fenilmetoxi)carbonil]alaninato de (1,1- dimetiletilo) 3- [ [5-etil-6-[4-(1,2,3,4-tetra-hidro-l, 8- naftiridin-7-il)-1-piperidinil]-4- pirimidinil]amino]-N-(1-naftalensulfonil)alaninato de (1,1-dimetiletilo) na configuração (R) ou na configuração (S) , ou suas misturas, assim como os seus sais de adição.

10. Um procedimento de preparação dos compostos da fórmula (I), em que se faz reagir um composto de fórmula (II):

R1 em que R1, R2, R3 e R4 são tal como definidos na reivindicação 1, 8 com um composto de fórmula (III) 8

em que G é tal como definido na reivindicação 1, na presença de uma base ou de um reagente de acoplamento de metal de transição, b) submete-se eventualmente o composto de fórmula (I) assim obtido à clivagem da função R3-NH- para se regenerar a amina livre, a que se segue a condensação de radicais R3 de estrutura -CO2-R5 ou -SO2-R5, e/ou caso necessário, à hidrólise e eventualmente à esterificação ou à amidificação e/ou à salificação.

11. Um procedimento de preparação dos compostos de fórmula (I), em que a) se faz reagir um composto de fórmula (II), tal como definido na reivindicação 10, com um composto de fórmula (Illa) :

(IHa) tendo em vista a obtenção do composto intermédio de fórmula (IV):

(IV) b) se faz reagir o composto de fórmula (IV) com um composto da fórmula Het-NH2, tendo em vista a obtenção 9 dos compostos de fórmula (I), representando G um grupo Het-NHCO-, c) submete-se eventualmente o composto de fórmula (I) obtido à clivagem da função R3-NH- para se regenerar a amina livre, a que se segue a condensação de radicais R3 de estrutura -CO2-R5 ou -SO2R5, e/ou caso necessário à esterificação ou à amidificação e/ou à salificação.

12. Um procedimento de preparação dos compostos de fórmula (I) de acordo com uma das reivindicações 1 a 9, caracterizado pelo facto de a) se fazer reagir um composto de fórmula geral (Ha) :

R1 (lia) em que R1, R2, G e X são como anteriormente definidos, com um produto de fórmula (VI)

em que R3 e R4 são como anteriormente definidos, na presença de uma base forte ou então por catálise com paládio, b) depois submete-se eventualmente 0 produto de fórmula (I) eventualmente à clivagem da função R3-NH- para se regenerar a amina livre, a que se segue a condensação de radicais R3 de estrutura -C02-R5 ou -S02-R5, e/ou caso necessário, à hidrólise e eventualmente à esterificação ou à amidificação e/ou à salificação. 10

13. Como medicamentos, os compostos de fórmula (I) e/ou os seus sais fisiologicamente aceitáveis tal como definidos em qualquer uma das reivindicações 1 a 9.

14. Uma composição farmacêutica compreendendo um medicamento tal como definido na reivindicação 13, assim como um ou mais excipientes.

15. Como medicamento, de acordo com a reivindicação 13, tendo uma actividade antagonista do receptor da vitronectina, um composto de fórmula (I) e/ou os seus sais fisiologicamente aceitáveis, tal como definidos em qualquer uma das reivindicações 1 a 9.

16. Como medicamento, de acordo com a reivindicação 13, tendo uma actividade inibidora da reabsorção óssea ou para o tratamento ou prevenção da osteoporose, um composto de fórmula (I) e/ou os seus sais fisiologicamente aceitáveis tal como definidos em qualquer uma das reivindicações 1 a 9.

17. Como medicamento, de acordo com a reivindicação 13, tendo uma actividade inibidora do crescimento tumoral ou metástase cancerosa, um composto da fórmula (I) e/ou os seus sais fisiologicamente aceitáveis tal como definidos em qualquer uma das reivindicações 1 a 9.

18. Como medicamento, de acordo com a reivindicação 13, tendo uma actividade anti-inflamatória ou para o tratamento ou prevenção dos distúrbios cardiovasculares, reestenose, arteriosclerose, nefropatias ou retinopatias, um composto de fórmula (I) e/ou os seus sais fisiologicamente aceitáveis e/ou os seus pró-fármacos tal como definidos em qualquer uma das reivindicações 1 a 9. 11

19. Utilização dos compostos de fórmula (I) e/ou dos seus sais fisiologicamente aceitáveis tal como definidos em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, para a preparação de medicamentos destinados à prevenção ou ao tratamento da osteoporose.

20. Utilização dos compostos de fórmula (I) e/ou dos seus sais fisiologicamente aceitáveis tal como definidos em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, para a preparação de medicamentos destinados à inibição do crescimento tumoral ou das metástases cancerosas.

21. Utilização dos compostos de fórmula (I) e/ou dos seus sais fisiologicamente aceitáveis tal como definidos em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, para a preparação de medicamentos destinados à prevenção ou ao tratamento dos distúrbios cardiovasculares, reestenose, arteriosclerose, nefropatias ou retinopatias. Lisboa, 8/07/2009