RU2412185C2

RU2412185C2 - Новые производные антагонисты рецептора витронектина, способ их получения, их применение в качестве лекарственного средства и фармацевтические композиции, их содержащие

Info

Publication number: RU2412185C2
Application number: RU2005119163/04A
Authority: RU
Inventors: Жан-Мари РЮКСЕР (FR); Жан-Мари Рюксер; Жан-Мишель ЛЕФРАНСУА (FR); Жан-Мишель ЛЕФРАНСУА; Бертран ЭКМАНН (FR); Бертран ЭКМАНН
Original assignee: Галапаго Сас
Priority date: 2002-11-19
Filing date: 2003-11-12
Publication date: 2011-02-20
Also published as: IL205693A; JP2006508999A; ES2325616T3; CN1738817A; AU2003299330B2; NO20052491L; HK1129372A1; CO5700761A2; FR2847254A1; DE60327712D1; MXPA05005340A; PT1565467E; ZA200502850B; CN1738817B; AU2009212779B2; CA2506310A1; AU2009212779A1; ATE431825T1; EP1565467B1; HK1076277A1

Abstract

Изобретение относится к новым соединениям формулы (I) в форме (R) или (S)-изомеров, индивидуально или в смеси, а также к их физиологически приемлемым солям и гидратам, обладающим свойствами антагониста рецептора витронектина. В формуле (I)

G обозначает Het-NH-CO-, Het-NH-CH₂-, Het-; Het обозначает моно- или бициклическую систему, где каждый цикл представляет 5- или 6-членное ароматическое или неароматическое кольцо, причем по меньшей мере одно из колец содержит от 1 до 2 атомов азота в качестве гетероатомов, при этом Het замещен или незамещен группами R⁹; R¹ обозначает Н, (С₆-С₁₄)-арил, (С₆-С₁₄)арил(С₁-С₄)алкил; амино, незамещенный, моно- или дизамещенный алкилом и/или ацилом, содержащим от 1 до 4 атомов С; R² обозначает Н, галоген, нитрогруппу; алкил, содержащий от 1 до 4 атомов С; амино, незамещенный, моно- или дизамещенный алкилом и/или ацилом, содержащим от 1 до 4 атомов С; группу -(CH₂)_0-2-OR⁵; R³ обозначает Н, -CO₂R⁵, -SO₂R⁵ или моно-, или бициклическую систему, где каждый цикл представляет 5- или 6-членное ароматическое или неароматическое кольцо, причем по меньшей мере одно из колец содержит от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из N, О или S, незамещенную или замещенную радикалами R⁹; R⁴ обозначает ОН, (С₁-С₈)алкокси-; амино, незамещенный, моно- или дизамещенный (С₁-С₄)алкилом; или остаток аминокислоты; R⁵ обозначает (С₁-С₈)алкил; (С₆-С₁₄)арил; (С₆-С₁₄)арил(С₁-С₄)алкил; (С₃-С₁₂)циклоалкил или (С₃-С₁₂)циклоалкил(С₁-С₄)алкил; би- и трициклоалкил(С₁-С₄)алкил; причем арилы, алкилы, циклоалкилы не замещены или замещены группами R⁹; R⁹ обозначает галоген, амино, нитро, гидроксил, (С₁-С₄)алкилокси-, карбокси, (С₁-С₄)алкилоксикарбонил-, (С₁-С₈)алкил, незамещенный или замещенный атомами галогена; фенил. Изобретение относится также к способам получения соединений формулы (I), лекарственному средству и фармацевтической композиции, содержащим эти соединения, а также к их применению для получения лекарственного средства. 7 н. и 14 з.п. ф-лы, 3 табл.

Description

Настоящее изобретение относится к новым производным антагонистам рецептора витронектина, способу их получения, их применению в качестве лекарственных средств и фармацевтических композиций, в состав которых они входят.

Объектом изобретения являются соединения формулы (I):

в которой R¹, R², R³, R⁴ и G имеют значения, указанные ниже, а также их физиологически приемлемые соли. Соединения формулы (I) представляют собой соединения, обладающие фармакологической активностью и, следовательно, применимые в качестве лекарственных средств. Они являются антагонистами рецептора витронектина и ингибиторами клеточной адгезии, они также ингибируют резорбцию кости, опосредованную остеокластами. Следовательно, они пригодны для терапевтического лечения и профилактики заболеваний, вызванных по меньшей мере частично нежелательным усилением резорбции кости, например остеопорозом. Кроме того, объектом изобретения являются способы получения соединений формулы (I), их применение, в частности, в качестве лекарственного средства и фармацевтические композиции, их содержащие.

Кость постоянно подвержена динамическому процессу, который включает в себя резорбцию кости и образование кости. Эти процессы происходят через посредство специальных клеток. Образование кости является результатом отложения минерального матрикса остеобластами, а резорбция кости является результатом разложения этого костного матрикса остеобластами. Костные нарушения в большинстве случаев связаны с нарушением равновесия между образованием кости и резорбцией кости. Остеопороз характеризуется потерей сухого веса такого костного матрикса. Зрелый активированный остеобласт резорбирует кость после адгезии к костному матриксу посредством секреции протеолитического фермента и протонов внутри зоны адгезии, вызывая вдавливания и образование впадин на поверхности кости во время отделения остеобласта от кости.

Исследования показали, что прикрепление остеобласта к кости происходит через рецепторы - интегрины. Интегрины представляют собой суперсемейство рецепторов, опосредующих процессы адгезии клетка/клетка и более конкретно клетка/матрикс, к которому, в частности, относятся α_IIbβ₃ в качестве рецептора тромбоцитов (фибриноген) и α_vβ₃в качестве рецептора витронектина. Пептиды, содержащие звено RGD, а также анти-α_vβ₃- антитела известны своей способностью ингибировать резорбцию дентина и препятствовать адгезии остеокластов к минерализованным матрицам (Horton et al. Exp. Cell. Res. (1991), 195, 368). Пептид эхистатин, выделенный из змеиного яда, также содержащий звено RGD и описанный как ингибитор адгезии остеокластов к кости, является мощным ингибитором резорбции кости в тканевых культурах in vitro (Sato et al. J. Cell. Biol.(1990), 111, 1713) и in vivo у крыс (Ficher et al. Endocrinology (1993), 132, 1411).

Рецептор α_vβ₃представляет собой трансмембранный гликопротеин, используемый во многих клетках, включая клетки эндотелия, клетки гладкой мышцы, остеокласт и раковые клетки, поэтому соединения формулы (1) согласно изобретению имеют широкий спектр применения.

Действительно, рецепторы α_vβ₃, имеющие экспрессию на уровне мембраны остеокластов, являются основными в процессе адгезии/резорбции, способствуют формированию клеточного цитоскелета и участвуют в образовании остеопороза. Рецепторы α_vβ₃, имеющие экспрессию на уровне клеток гладкой мышцы аорты, стимулируют их миграцию к неоинтиме, в результате чего образуется артериосклероз и постангиопластичекий рестеноз (Вrown et al., cardiovascular Res. (1994), 28, 1815). Клетки эндотелия секретируют факторы роста, которые являются митогенными в отношении эндотелия, и могут способствовать образованию новых кровеносных сосудов (ангиогенез).

Антагонисты интегрина α_vβ₃ могут также вызывать обратное развитие злокачественных опухолей путем апоптоза ангиогенных кровеносных сосудов (Brook et al. Cell. (1994) 79, 1157).

Chresh et al. (Science 1995, 270, 1500) описали анти-α_vβ₃ - антитела или антагонисты рецептора α_vβ₃, ингибирующие процесс ангиогенеза, вызванный bFGF в глазе крысы, свойство, которое можно использовать для лечения ретинопатий, в частности, у больных диабетом.

В международной заявке на патент WO-A-12181 описаны замещенные ароматические и неароматические системы, а в WO-A-94/08577 описаны замещенные гетероциклы в качестве антагонистов рецептора фибриногена и ингибиторов агрегации тромбоцитов. В ЕР-А-528586 и ЕР-А-528587 описаны производные фенилаланина, замещенные аминоалкилом или гетероциклом, а в WO-A-95/32710 описаны арильные производные в качестве ингибиторов резорбции кости остеокластами. В WO-A-96/00574 описаны бензодиазепины, а в WO-A-96/00730 описаны соединения, ингибирующие рецептор фибриногена, в частности, бензодиазепины, связанные с азотсодержащим 5-членным циклом, в качестве антагонистов рецептора витронектина. В WO 9800395, WO 99/32457 и WO 99/37621 описаны антагонисты рецептора витронектина, являющиеся производными тирозина. В ЕР 0820991 заявлены производные циклоалкила в качестве антагонистов рецептора витронектина.

Другие исследования позволили показать, что производные формулы (I) обладают высокой активностью в качестве антагонистов рецептора витронектина и резорбции кости посредством остеокластов.

Изобретение относится к соединениям формулы (I):

в любых их изомерных формах, индивидуально или в смеси, а также к их физиологически приемлемым аддитивным солям, в которой:

G обозначает:

R⁷R⁸N-C(=NR⁶)-NH-CO-

Het-NH-CO-;

Het-NH-CH₂-;

Het-;

Het при этом обозначает моноциклическую или полициклическую систему, причем каждый цикл содержит от 4 до 10 ароматических или неароматических звеньев, цикл или по меньшей мере один из циклов содержит от 1 до 4 атомов азота, незамещенного или замещенного одной или несколькими группами R⁹ _;

R¹ обозначает атом водорода; (С₅-С₁₄)-арильную группу; (С₅-С₁₄)арил((С₁-С₄)алкил; радикал амино, незамещенный или монозамещенный или дизамещенный алкилом и/или ацилом, содержащим от 1 до 4 атомов углерода;

R² обозначает атом водорода; атом галогена; нитрогруппу; алкил, содержащий от 1 до 4 атомов углерода; радикал амино, незамещенный или монозамещенный или дизамещенный алкилом и/или ацилом, содержащим от 1 до 4 атомов углерода; группу -(СН₂)_0-2-СО₂R⁵, или группу -(СН₂)_0-2-ОR⁵;

R³ обозначает:

атом водорода;

радикал -СО₂R⁵;

радикал -SО₂R⁵ или

моноциклическую или полициклическую систему, причем каждый цикл содержит от 4 до 10 ароматических или неароматических звеньев, цикл или по меньшей мере один из циклов содержит от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из N, O или S, незамещенных или замещенных одним или несколькими радикалами R⁹,

R⁴ обозначает ОН; (С₁-С₈)алкокси-; (С₅-С₁₄)арил(С₁-С₄)алкокси-; (С₅-С₁₄)арилокси-; (С₃-С₁₂)циклоалкокси; (С₃-С₁₂)циклоалкил(С₁-С4)алкилокси-; (С₁-С₈)алкилкарбонилокси(С₁-С₄)алкилокси-; (С₅-С₁₄)арил(С₁-С₄)алкилкарбонилокси(С₁-С₄)алкилокси-; (С₁-С₈)диалкиламинокарбонилметилокси-; (С₅-С₁₄)арил(С₁-С₄)диалкиламинокарбонилметилокси-; радикал амино, незамещенный или монозамещенный или дизамещенный (С₁-С₄)алкилом и/или (С₅-С₁₄)арилом и/или (С₅-С₁₄)арил(С₁-С₄)алкилом и/или (С₁-С₅)ацилом, или остаток аминокислоты D или L;

R⁵ обозначает (С₁-С₈)алкил; (С₅-С₁₄)арил; (С₅-С₁₄)арил(С₁-С₄)алкил; (С₃-С₁₂)циклоалкил или (С₃-С₁₂)циклоалкил(С₁-С₄)алкил; бициклоалкил(С₁-С₄)алкил; трициклоалкил(С₁-С₄)алкил; причем указанные радикалы: арилы, алкилы, циклоалкилы, бициклоалкилы и трициклоалкилы не замещены или замещены одной или несколькими выбранными группами R⁹;

R⁶ обозначает атом водорода; группу гидроксильную, нитро, (С₁-С₆)алкил-О-СО-; или (С₁-С₆)алкил-О-СО-О-;

R⁷ и R⁸независимо друг от друга обозначают атом водорода или радикал (С₁-С₆)алкил, незамещенный или замещенный R⁹;

R⁹ обозначает галоген; амино; нитро; гидроксил, (С₁-С₄)алкилокси-; (С₁-С₄)алкилтио-; карбокси; (С₁-С₄)алкилоксикарбонил-; (С₁-С₈)алкил, незамещенный или замещенный одним или несколькими атомами галогена, (С₅-С₁₄)арил; (С₅-С₁₄)арил(С₁-С₄)алкил-.

Все радикалы, которые могут многократно входить в состав соединений формулы (I), как например, радикал R⁹, являются независимыми друг от друга и могут быть одинаковыми или разными.

Алкильные радикалы могут быть линейными или разветвленными. Это относится также к случаю, когда они замещены или входят в состав таких групп, как алкокси, алкоксикарбонил или аралкил.

(С₁-С₈)-алкил подразумевает радикалы: метил, этил, пропил, бутил, пентил, гексил, гептил, октил, нонил, н-изомеры указанных радикалов, изопропил, изобутил, изопентил, неопентил, изогексил, 3-метилпентил, 2,3,4-триметилгексил, вторбутил, третбутил, третпентил. Из предпочтительных радикалов можно назвать группы: (С₁-С₄)алкилы, такие как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил и третбутил. Предпочтительно алкил обозначает метил или этил.

Циклоалкилы могут быть моноциклическими, бициклическими или трициклическими. Речь идет, например, о радикалах: циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклооктил, циклононил, циклодецил, циклоундецил, циклододецил, циклотетрадецил или циклооктадецил, которые в случае необходимости могут быть замещены, например, алкилом, содержащим от 1 до 4 атомов углерода. В качестве замещенных циклоалкилов можно назвать 4-метилциклогексил и 2,3-диметилциклогексил.

Бициклоалкилы и трициклоалкилы могут быть замещены или незамещены в любом положении, например, одной или несколькими группами оксо и/или 1 или несколькими одинаковыми или разными алкильными группами, такими как метил или изопропил, и предпочтительно метилом. Соединительная связь би- или трициклического радикала может находиться в молекуле в любом положении. Связь может осуществляться с помощью мостикового атома углерода или одного из других атомов углерода. Эта связь может также находиться в любом положении с точки зрения стереохимии, например, в экзо- или эндо-положении. В качестве примеров бициклоалкильных или трициклоалкильных радикалов можно назвать камфанил, борнил, адамантил, такой как 1-адамантил или 2-адамантил, каранил, эпиизоборнил, эпиборнил, норборнил или норпинанил.

Галогеном является фтор, бром или йод.

Термин (С₅-С₁₄)арил подразумевает:

или гетероциклические (С₅-С₁₄)арилы (=(С₅-С₁₄)гетероарил), в которых один или несколько атомов углерода цикла замещены гетероатомом, таким как азот, кислород или сера,

или карбоциклические (С₆-С₁₄)арилы.

Из карбоциклических (С₆-С₁₄)арилов можно назвать фенил, нафтил, бифенил, антрил или флуоренил и более конкретно 1-нафтил, 2-нафтил и фенил.

Если не оговорено иное, арильные радикалы, в частности, фенил, могут быть незамещенными или замещенными одним или несколькими одинаковыми или разными радикалами, выбранными из (С₁-С₈)алкила, в частности, (С₁-С₄)алкила, гидроксила, (С₁-С₈)алкилокси, (С₁-С₈)алкилтио, галогена, такого как фтор, хлор и бром, нитро, амино, (С₁-С₄)алкиламино, ди(С₁-С₄)алкиламино, трифторметила, метилендиокси, циано, аминокарбонила, (С₁-С₄)алкиламинокарбонила, ди(С₁-С₄)алкиламинокарбонила, карбокси, (С₁-С₄)алкоксикарбонила, фенила, фенокси, бензила и бензилокси.

В случае монозамещенного фенила заместитель может находиться в положении 2, 3 или 4 и предпочтительно в положении 3 или 4. В случае дизамещенного фенила заместители могут находиться в положении 2, 3 или 2, 4, или 2, 5, или 2, 6, или 3, 4, или 3, 5. Предпочтительно в дизамещенных фенилах оба заместителя находятся в положении 3, 4. Если этот фенил является тризамещенным, положения будут следующими: 2, 3, 4 или 2, 3, 5, или 2, 3, 6, или 2, 4, 5, или 2, 4, 6, или 3, 4, 5. Аналогичным образом нафтилы или другие арилы могут замещаться в любом положении, например, радикал 1-нафтил в положении 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7 - и 8, а радикал 2-нафтил в положении 1-, 3-, 4-, 5-, 6- и 7-.

(С₅-С₁₄)арильная группа может также обозначать ароматическую моноциклическую или полициклическую систему, в которой 1, 2, 3 или 4 атома углерода цикла замещены гетероатомами, в частности, одинаковыми или разными, из группы, содержащей азот, кислород, и серу. Из гетероциклических (С₅-С₁₄)арильных групп (=(С₅-С₁₄)гетероарил) можно назвать следующие группы таких радикалов: 2-пиридил, 3-пиридил, 4-пиридил, пирролил, фурил, тиенил, имидазолил, пиразолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, изотиазолил, тетразолил, пиридил, пиразинил, пиримидинил, индолил, изоиндолил, индазолил, фталазинил, хинолил, изохинолил, хиноксалинил, хиназолинил, циннолинил, -карболинил или из бензо-конденсированных, циклопента-, циклогекса- или циклогепта- конденсированных производных таких радикалов. Гетероциклическая система может быть замещена теми же заместителями, что указаны выше в отношении карбоциклической системы.

Оптически активные атомы углерода, содержащиеся в соединениях формулы (I), могут иметь конфигурацию R и конфигурацию S независимо друг от друга.

Соединения формулы (I) могут быть в форме чистых энантиомеров или чистых диастереоизомеров или в виде смеси энантиомеров, например, в форме рацематов или смесей диастереоизомеров.

Таким образом настоящее изобретение относится к чистым энантиомерам, смесям этих энантиомеров, чистым диастереоизомерам или смесям этих диастереоизомеров.

Изобретение относится к смесям двух или более двух стереоизомеров формулы (1) и всех соотношений между этими стереоизомерами в указанных смесях.

Соединения формулы (1) могут в случае необходимости присутствовать в форме изомеров Е или изомеров Z. Таким образом изобретение относится к чистым изомерам Е, чистым изомерам Z и смесям Е/Z в любом соотношении.

Изобретение относится также ко всем таутомерным формам соединений формулы (1), например, в отношении формы, выраженной формулой (I), где G = R₇R₈N-C(=NR₆)-NH-CO-, рассматривают форму, в которой ацилгуанидил присутствует в виде группы -СО-N=C(NR₆)-NR₇R₈, и ко всем другим формам, в которых атом водорода находится в другом положении.

Диастереоизомеры, содержащие изомеры Е/Z, можно разделить на индивидуальные изомеры, например, хроматографией. Рацематы можно разделить на два энантиомера известными способами, такими как хроматография в хиральной фазе, или способами расщепления.

Физиологически приемлемыми солями соединений формулы (I) являются, в частности, фармацевтически приемлемые или нетоксичные, или физиологически приемлемые соли.

Если соединения формулы (I) содержат кислотную группу, такую как карбоновая кислота, то речь идет, например, о солях щелочных или щелочно-земельных металлов, таких как соли натрия, калия, магния, кальция, а также физиологически приемлемые соли, образованные ионами четвертичного аммония, и аддитивные соли кислот, такие как аммиак, и о физиологически приемлемых аминах, например, триэтиламине, этаноламине или трис(2-гидроксиэтил)амине.

Если соединения формулы (I) содержат щелочную групу, они могут образовывать аддитивные соли кислот, например, неорганических кислот, таких как соляная, серная, фосфорная кислота, или органических карбоновых кислот, таких как уксусная, трифторуксусная, лимонная, бензойная, малеиновая, фумаровая, винная, метансульфоновая или паратолуолсульфоновая кислота.

Соединения формулы (I), содержащие основную группу и кислотную группу, такую, например, как гуанидино или карбоксильную, могут присутствовать в форме цвитерионов (бетаинов), которые также относятся к настоящему изобретению.

В случае необходимости соединения формулы (I), содержащие заряженную группу аммония, могут содержать физиологически приемлемый анион Q^-. Предпочтительно это моновалентный анион или эквивалент поливалентного аниона органической или неорганичекой нетоксичной физиологически приемлемой и более конкретно фармацевтически приемлемой кислоты, например, анион или эквивалент аниона одной из вышеуказанных кислот, пригодных для получения аддитивных солей.

Например, Q^- может быть одним из анионов (или эквивалентом аниона) группы, выбранной из хлора, сульфата, фосфата, ацетата, трифторацетата, цитрата, бензоата, малеата, фумарата, тартрата, метансульфоната и паратолуолсульфоната.

Соли соединений формулы (I) можно получить традиционными способами, известными специалисту, например, комбинируя соединение формулы (I) с органической или неорганической кислотой или основанием в растворителе или диспергаторе или из другой соли путем катионообмена или анионообмена.

Изобретение относится также ко всем солям соединений формулы (I), которые в связи с их слабой физиологической пригодностью не приемлемы для прямого использования в качестве лекарственного средства, но пригодны в качестве промежуточных продуктов, применяемых для дальнейших химических превращений соединений формулы (I), или в качестве исходных продуктов для получения физиологически приемлемых солей.

К настоящему изобретению относятся все сольваты соединений формулы (I), например гидраты, сольваты, образованные спиртами, и все производные соединений формулы (I), напрмер сложные эфиры, пролекарства и другие физиологически приемлемые производные, а также метаболиты соединений формулы (I).

Более конкретно изобретение относится к соединениям формулы (I), в которой G обозначает группу Het, Het-NHCO-, или Het-NH-CH₂-, в которой Het обозначает:

Более конкретно изобретение относится к соединениям формулы (1), указанным выше, в которой R₃ обозначает

гетероцикл, выбранный из

а также к их фармацевтически приемлемым аддитивным солям.

Более конкретно изобретение относится к указанным выше соединениям формулы (I), в которой R³ обозначает бензилоксикарбонильную группу, а также к их фармацевтически приемлемым аддитивным солям.

Более конкретно изобретение относится к указанным выше соединениям формулы (I), в которой R² обозначает водород, радикал алкил, содержащий от 1 до 4 атомов углерода, и премущественно метил или этил или атом фтора, а также к их фармацевтически приемлемым аддитивным солям.

Более конкретно изобретение относится к указанным выше соединениям формулы (I), в которой

G обозначает:

G обозначает:

R¹ обозначает атом водорода

R² обозначает атом водорода, атом фтора, радикал метил или радикал этил,

R³ обозначает бензилоксикарбонильную группу

R⁴ обозначает гидрокси- или (С₁-С₄)алкилокси-группу,

Более конкретно изобретение относится к соединениям формулы (1), имеющим следующие названия:

3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланин

3-[[5-этил-6-[4-[(1,2,3,4,5,6-гексагидро-2-пиримидинил]иминокарбонил]-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланин

3-[[6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-метил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланин

3-[[6-[4-[(1,2,3,4,5,6-гексагидро-2-пиримидинил]иминокарбонил]-1-пиперидинил]-5-метил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланин

3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]этилаланинат

3-[[6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-метил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]изопропилаланинат

(1,1-диметилэтил)-3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланинат

(1,1-диметилэтил)-3-[[5-метил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланинат

(1,1-диметилэтил)-3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-(1-нафталинсульфонил)аланинат

имеющим конфигурацию (R) или конфигурацию (S) или их смесям, а также к их аддитивным солям.

Настоящее изобретение относится также к способу получения соединений формулы (I). Обычно соединения можно получить, например, в процессе конвергентного синтеза путем соединения двух или нескольких фрагментов, которые могут быть получены обратным синезом из соединений формулы (I). Для того, чтобы на каждой стадии синтеза функциональные группы не приводили к нежелательным или вторичным реакциям, может быть желательно или необходимо в процессе синтеза соединений формулы (I) вводить функциональные группы в виде предшественников, которые в дальнейшем преобразуют в требуемые функциональные группы, или временно заблокировать эти функциональные группы, применяя известную специалисту и приемлемую для синтеза стратегию использования группы защиты (Green, Wuts protective Group in Organic Synthesis, Willet 1991).

Таким образом соединения формулы (I) можно получить по следующей схеме:

Следовательно изобретение относится к способу получения соединений формулы (I), в ходе которого:

приводят во взаимодействие соединение формулы (II)

в которой R¹, R², R³ и R⁴ соответствуют описанным выше,

а) с соединением формулы (III)

в которой G соответствует описанному выше, в присутствии основания или реагента, связывающего переходный металл,

b) затем соединение формулы (I) возможно подвергают расщеплению по функциональной группе R³-NH- с тем, чтобы восстановить свободный амин, с последующим конденсированием радикалов R³структуры -СО₂-R⁵ или -SО₂-R⁵ и/или в случае необходимости гидролизу и возможно этерификации или амидированию и/или солеобразованию.

В варианте осуществления изобретение относится также к способу получения соединений формулы (I), в ходе которого

а) приводят во взаимодействие соединение формулы (II), соответствующее описанному выше, с соединением формулы (IIIа)

для получения промежуточного соединения формулы (IV):

b) затем приводят во взаимодействие соединение формулы Het-NH₂ и получают соединение формулы (I), где G обозначает группу Het-NHСО-,

с) затем полученное соединение формулы (I) возможно подвергают расщеплению по функциональной группе R³-NH- с тем, чтобы восстановить свободный амин, с последующим конденсированием радикалов R³структуры -СО₂-R⁵ или -SО₂-R⁵ и/или в случае необходимости этерификации или амидированию и/или солеобразованию.

Сочетание соединения формулы (II) с производным пиперидина формулы (III) или (IIIа) можно осуществлять путем кипячения с обратным холодильником в присутствии стерически затрудненного сильного основания. Более конкретно используют диизопропилэтиламин. Реакция может протекать с обратным холодильником в течение 4-12 часов.

Что касается соединения формулы (IV), если OR представляет собой гидроксил, т.е. если гуанидин формулы (Het-NH₂) взаимодействует с карбоновой кислотой формулы (IV), то карбоновую кислоту предварительно активируют.

Активацию можно проводить, например, с помощью дициклогексилкарбодиимида (DCCI) или О-((циано(этоксикарбонил)метилен)амино)-1,1,3,3-тетраметилурония тетрафторбората (TOTU; König et al, Proc. 21^st Europ. Peptide Symp.1990 (Eds Giralt, Andreu, Escom, Leiden 1991, p.243) или с помощью других активирующих агентов, обычно используемых в пептидном синтезе.

Кроме свободных гуанидинов формулы (Het-NH₂) можно также использовать соли гуанидина для взаимодействия с соединениями формулы (IV), причем свободные гуанидины получают in situ или на отдельной стадии с помощью основания.

Взаимодействие активированного производного карбоновой кислоты формулы (IV) с гуанидином (или производным) формулы (Het-NH₂) предпочтительно осуществляют известным способом в органическом протонном или апротонном, но инертном растворителе. В этом случае используют такие растворители, как метанол, изопропанол, третбутанол, диметилформамид, дихлорметан или тетрагидрофуран при температуре от 0°С до температуры кипячения с обратным холодильником указанных растворителей, в частности, в ходе взаимодействия сложных метиловых или этиловых эфиров (OR обозначает метокси или этокси) с гуанидинами.

Взаимодействия соединений формулы (IV) со свободными гуанидинами преимущественно осуществляют в инертном апротонном растворителе, таком как диметилформамид, дихлорметан, тетрагидрофуран, диметоксиэтан или диоксан, в случае необходимости добавляя основание, такое как, например, третбутоксид калия, метоксид натрия или органическое основание, такое как N-метилморфолин. Однако в качестве растворителя при взаимодействии соединений формулы (IV) со гуанидинами формулы (Het-NH₂) можно также использовать воду, например, в случае использования такого основания, как гидроксид натрия.

Затем реакционную смесь обрабатывают и, если требуется, продукт реакции очищают известными специалисту способами.

Защитные группы, возможно присутствующие в соединениях формулы (I), полученных из соединений формулы (IV) с помощью аминов или гуанидинов формулы (Het-NH₂) или из соединений формулы (II) с помощью соединений формулы (III), затем удаляют традиционными способами, например, группы сложного третбутилэфира превращают в карбоновую кислоту путем обработки трифторуксусной кислотой, бензиловые группы удаляют путем гидрирования или флуоренилметоксикарбонильные группы удаляют в присутствии вторичного амина, применяют и другие реакции, осуществляемые известными способами, например ацилированием.

Реакции гидролиза для получения производного кислоты (COR⁴= CO₂H), этерификации для получения сложного эфира или пролекарства (преимущественно COR⁴ = алкилоксикарбонил или арилоксикарбонил из соответствующей кислоты) или амидирования (COR⁴ = моно или дизамещенный аминокарбонил из соответствующей кислоты) проводят традиционными способами, известными специалисту.

В частности, гидролиз проводят в кислотной среде в присутствии трифторуксусной кислоты, например, в органическом галогенированном растворителе, таком как, например, дихлорметан.

В случае необходимости перевод в физиологически приемлемые соли осуществляют известными специалисту способами.

Исходные соединения формулы (II) можно получить описанными в литературе способами или по аналогии. Получение соединений формулы (II) иллюстрирует описанная выше схема, при условии, что настоящее изобретение не ограничено такими способами синтеза или такими исходными продуктами. Для специалиста не представляет большой трудности модифицировать описанные в настоящей заявке способы синтеза для получения других соединений формулы (II) согласно изобретению.

Следовательно изобретение относится к способу получения соединений формулы (II), отличающемуся тем, что вводят во взаимодействие соединение формулы (V):

в которой R¹ и R² соответствуют описанным выше, и Х обозначает галоген, предпочтительно хлор,

с соединением формулы (VI)

в которой R³ и R⁴ соответствуют описанным выше, в присутствии сильного основания.

Обычно используют стерически затрудненное сильное основание, такое как диизопропилэтиламин, в известных специалисту реакционных услових осуществления нуклеофильного замещения. Предпочтительно реакцию проводят в присутствии диметилформамида при температуре кипячения с обратным холодильником. Кроме того група COR4 предпочтительно обозначает группу стерически затрудненного сложного эфира, такую как третбутилоксикарбонильная группа.

В соответствии с другим вариантом изобретения продукты формулы (I) можно также получить по следующей схеме:

В соответствии с изобретением способ получения соединений формулы (I) заключается в том, что

а) приводят во взаимодействие соединение формулы (IIа)

в которой R¹, R², G и X соответствуют описанным выше,

с соединением формулы (VI)

в которой R³ и R⁴ соответствуют описанным выше, или в присутствии сильного основания, или путем катализа с помощью палладия,

b) затем соединение формулы (I) возможно подвергают расщеплению по функциональной группе R³-NH- с тем, чтобы восстановить свободный амин с последующим конденсированием радикалов R³структуры -СО₂-R⁵ или -SО₂-R⁵, и/или в случае необходимости гидролизу и возможно этерификации, или амидированию, и/или солеобразованию.

Взаимодействие пиримидина формулы (IIa) с амином общей формулы (VI) проводят в условиях, аналогичных описанным выше в отношении взаимодействия пиримидина формулы (V) с амином общей формулы (VI). В частности можно осуществлять процесс в диизопропилэтиламине в органическом растворителе, таком как амид (диметилцетамид, диметилформамид, например) при температуре от 90°С до температуры кипячения с обратным холодильником реакционной смеси. Можно также использовать катализ с помощью палладия (например, трис(дибензилиденацетон)дипалладия) в присутствии фторида цезия при температуре кипячения с обратным холодильником реакционной смеси. Следует иметь в виду, что функциональные группы, способные интерферировать в ходе реакции, защищены. Защиту и перевод этих групп в свободное состояние осуществляют традиционными способами без изменения остатка молекулы.

Конденсирование радикалов R³ структуры -СО₂-R⁵ или -SО₂-R⁵ на свободном амине и гидролиз проводят, как описано выше.

Производные пиримидина формулы (IIa) можно получить взаимодействием соединения формулы (III)

в которой G соответсвует описанному выше, с дигалогенированным производным пиримидина формулы (V)

в которой R¹, R², G и X соответствуют описанным выше.

Взаимодействие преимущественно происходит в присутствии стерически затрудненного сильного основания при температуре кипячения с обратным холодильником реакционной смеси. Процесс осуществляют в условиях, описанных ниже в примерах, и, в частности, в присутствии стерически затрудненного амина, такого как диизопропилэтиленамин в амиде, таком, например, как диметилацетамид. Следует иметь в виду, что функциональные группы, способные интерферировать в ходе реакции, защищены. Защита и перевод этих групп в свободное состояние осуществляют традиционными способами без изменения остатка молекулы.

Соединения формулы (I) являются соединениями, обладающими фармакологической активностью и могут, таким образом, использоваться, в частности, в качестве лекарственных средств, в частности, для лечения или профилактики костных заболеваний, опухолевых заболеваний, а также сердечно-сосудистых заболеваний.

Таким образом настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) и/или их физиологически приемлемым солям в качестве лекарственного средства.

Соединения формулы (I), а также их физиологически приемлемые соли и их пролекарства можно вводить животным, предпочтительно млекопитающим и более конкретно человеку в качестве лекарственных средств в лечебных или профилактических целях.

Их можно применять как таковые или в смеси с одним или несколькими другими соединениями формулы (I) или в форме фармацевтического препарата (фармацевтической композиции), который можно вводить через тонкий кишечник или парентерально, и содержащего в качестве активного вещества эффективное количество по меньшей мере одного соединения формулы (I) и/или его физиологически приемлемых солей, а также традиционные и инертные в лекарственном отношении наполнители и/или вспомогательные вещества.

Фармацевтические композиции согласно изобретению, которые можно вводить через тонкий кишечник или парентерально, содержат в качестве активного вещества эффективное количество по меньшей мере одного соединения формулы (I) и/или его физиологически приемлемых солей, а также обычно используемые один или несколько наполнителей и/или одно или несколько вспомогательных веществ.

Таким образом настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим соединение формулы (I), такое как описано выше, а также один или несколько эксципиентов.

Лекарственные средства можно вводить перорально, например, в форме пилюль, таблеток, таблеток, покрытых оболочкой, покрытых тонкой пленкой, гранул, желатиновых капсул и мягких капсул, растворов, сиропов, эмульсий, суспензий или аэрозольных смесей.

Можно осуществлять ректальное введение, например, в форме суппозиториев, парентеральное введение, например, в форме растворов для впрыскивания или вливания, микрокапсул или имплантантов, для введения через кожу, например, в виде мази, растворов, пигментов или красителей, через дерму в форме пластырей или другими способами, например, в виде аэрозоли или спрея для носа.

Фармацевтические композиции согласно изобретению можно получать известными способами, причем органические или неорганические инертные в лекарственном отношении наполнители добавляют к соединениям формулы (I) и/или их физиологически приемлемым солям.

Для получения пилюли, таблеток, таблеток, покрытых оболочкой, и твердых желатиновых капсул можно использовать, например, лактозу, кукурузный крахмал или его производные, тальк, стеариновую кислоту или ее соли и т.д. Носителями, приемлемыми для мягких желатиновых капсул или суппозиториев, являются, например, жиры, воски, полутвердые или жидкие полиолы, натуральные или модифицированные масла и т.д. Носителями, приемлемыми для получения растворов, например, инъекционных растворов, эмульсий или сиропов, являются, например, вода, спирты, глицерин, полиолы, сахароза, инвертные сахара, глюкоза, растительные масла и т.д. Носителями, приемлемыми для микрокапсул или имплантантов, являются, например, сополимеры глиоксалевой кислоты и молочной кислоты. Обычно лекарственные препараты содержат от 0,5 до 90 мас.% соединений формулы (I) и/или их физиологически приемлемых солей.

Кроме активных веществ и носителей лекарственные препараты могут содержать вспомогательные вещества, такие как, например, разбавители, дезинтеграторы, связующие, смазывающие вещества, ПАВ, стабилизаторы, эмульгаторы, консерванты, подсластители, красители, вкусовые добавки или ароматизаторы, загустители, буферы, а также растворители или солюбилизирующие средства или добавки для получения эффекта замедленного высвобождения, а также соли для изменения осмотического давления, вещества для оболочки или антиоксиданты.

Они могут также содержать два или несколько соединений формулы (I) и/или их физиологически приемлемых солей. Кроме по меньшей мере одного или нескольких соединений формулы (I) и/или их физиологически приемлемых солей они могут содержать по меньшей мере одно или несколько других активных веществ, применимых в лечебных или профилактических целях.

Фармацевтические препараты (фармацевтические композиции) обычно содержат от 0,2 до 500 мг и предпочтительно от 1 до 200 мг соединения формулы (I) и/или его физиологически приемлемых солей и/или его пролекарств.

Соединения формулы (I) являются, в частности, антагонистами рецепторов витронектина и способны, таким образом, ингибировать адгезию остеокластов к поверхности кости и, следовательно, резорбцию кости остеокластами.

Действие соединений формулы (I) можно продемонстрировать на примере теста, в котором определяют ингибирование связывания витронектина с клетками, содержащими рецептор витронектина. Более подробно этот тест описан ниже. Соединения формулы (I) и/или их физиологически приемлемые соли обычно применимы в качестве антагонистов рецептора витронектина для лечения или профилактики заболеваний, связанных с взаимодействием рецепторов витронектина с их лигандами в процессах взаимодействия клетка-клетка или клетка-матрикс или в процессах, на которые может влиять ингибирование взаимодействий такого типа для достижения ремиссии или излечения, если требуется ингибирование взаимодействий такого типа. Как было указано выше, такое взаимодействие играет важную роль в резорбции кости, в ангиогенезе или в пролиферации клеток гладкой васкулярной мышцы.

Костными заболеваниями, лечение или профилактика которых требуют использования соединений формулы (I), являются, в частности, остеопороз, гиперкальцемия, остеопения, вызванная, например, метастазами в кости, заболевания полости рта, например, парадонтиты, гиперпаратиреоз, приартикулярные эрозии при ревматоидном артрите и болезнь Паджета. Кроме того, соединения формулы (I) можно использовать для облегчения, предупреждения или лечения костных нарушений, вызванных лечением глюкокортикоидами, терапевтическим лечением стероидами или кортикостероидами или вызванных недостатком мужских или женских половых гормонов.

Все указанные нарушения связаны с потерей костной ткани в результате нарушения равновесия между процессами образования кости и разрушения кости, благоприятное воздействие на которое оказывает ингибирование резорбции кости остеокластами. Наряду с указанным применением в качестве ингибитора резорбции кости остеокластами, соединения формулы (I) и/или их физиологически приемлемые соли используют в качестве ингибиторов роста опухолей или раковых метастаз, для лечения воспалительных процессов, для лечения или профилактики сердечно-сосудистых заболеваний, таких как артериосклероз или рестеноз или для лечения или профилактики нефропатии или ретинопатии, например, диабетической ретинопатии.

Соединения согласно изобретению могут также обладать активностью в отношении других интегринов, которые взаимодействуют со своим лигандом посредством трипептидной последовательности RGD (α_vβ₁, α_vβ₅, α_IIbβ₃,), придающей им фармакологические свойства, пригодные для лечения патологий, связанных с этими рецепторами.

Такая активность в отношении интегринов делает соединения формулы (I) пригодными для предупреждения или лечения ряда заболеваний, таких как указаны выше или в обзоре Dermot Cox DN§P 8(4) май 1995, 197-205, содержание которого включено в настоящую заявку.

Таким образом, более конкретно настоящее изобретение относится к соединению формулы (I) и/или его физиологически приемлемым солям, таким как указаны выше, в качестве лекарственного средства, обладающего активностью антагониста рецептора витронектина.

Таким образом, более конкретно настоящее изобретение относится к соединению формулы (I) и/или его физиологически приемлемым солям и/или его пролекарствам, таким как описаны выше, в качестве лекарственного средства, обладающего ингибиторной активностью в отношении резорбции кости, или для лечения или профилактики остеопороза.

Таким образом, более конкретно настоящее изобретение относится к соединению формулы (I) и/или его физиологически приемлемым солям, таким как описаны выше, в качестве лекарственного средства, обладающего ингибиторной активностью в отношении роста опухолей или раковых метастаз.

Таким образом, более конкретно настоящее изобретение относится к соединению формулы (I) и/или его физиологически приемлемым солям, таким как описаны выше, в качестве лекарственного средства, обладающего противовоспалительной активностью или для лечения или профилактики сердечно-сосудистых заболеваний, рестеноза, артериосклероза, нефропатий или ретинопатий.

Таким образом, настоящее изобретение также относится к соединению формулы (I) и/или его физиологически приемлемым солям, таким как описаны выше, для получения лекарственных средств, предназначенных для ингибирования роста опухолей или раковых метастаз.

Таким образом, настоящее изобретение также относится к соединению формулы (I) и/или его физиологически приемлемым солям, таким как описаны выше, для получения лекарственных средств, предназначенных для лечения или профилактики сердечно-сосудистых заболеваний, рестеноза, артериосклероза, нефропатий или ретинопатий.

При применении соединений формулы (I) дозы могут варьироваться в широких пределах и должны устанавливаться в зависимости от пациента. Они, например, зависят от используемого соединения или от природы и тяжести заболевания, следует учитывать, является ли заболевание острым или имеет хронический характер или лечение является профилактическим.

При пероральном введении ежедневная доза составляет от 0,01 до 100 мг/кг и предпочтительно от 0,1 до 50 мг/кг, в частности от 0,1 до 5 мг/кг. Например, для взрослого человека весом 75 кг ежедневная доза может составлять от 0,3 до 0,5 мг/кг.

При внутривенном введении ежедневная доза составляет примерно от 0,01 до 100 мг/кг, предпочтительно от 0,05 до 10 мг/кг.

Ежедневная доза может быть разделена, особенно в случае назначения большой дозы активного вещества, на 2, 3 или 4 приема. В случае необходимости в зависимости от индивидуальной переносимости можно назначать различные дозы с их увеличением или снижением. Кроме применения соединений формулы (I) в качестве лекарственных средств, можно также использовать их в качестве носителя или суппорта активных веществ для осуществления специфической доставки таких активных веществ на сайт активности (Drug targeting, см. Targeted Drug Delivery, R. C. Juliano, Handbook of Experimental Pharmacology, Vol 100, Ed. Born, G.V.R et al, Springer Verlag). Доставляемыми активными веществами могут являться, в частности, вещества, используемые для лечения или профилактики указанных выше заболеваний.

Соединения формулы (I) и/или их соли можно также применять в качестве агентов для диагностики, например, в методах in vitro или в качестве вспомогательных веществ при биохимических исследованиях, которые требуют блокировки рецептора витронектина или воздействия на взаимодействия клетки-клетки или клетки-матриксы. Их можно также использовать в качестве промежуточных соединений для получения других соединений, в частности, других активных веществ, которые получают из соединений формулы (I), например, путем модификации или путем введения радикалов или функциональных групп.

Примеры

Продукты идентифицировали с помощью инфракрасного (IR) масс-спектра (MS) и/или спектра ЯМР. Соединения, которые очищают хроматографией с использованием элюента, содержащего, например, уксусную или трифторуксусную кислоту, и которые затем сушат или в которых используют, например, трифторуксусную кислоту для удаления защитной третбутильной группы на последней стадии синтеза, иногда содержат в зависимости от способа, использованного для сушки продукта, кислоту, происходящую из элюента или с последней стадии синтеза, и следовательно полностью или частично находятся в форме соли используемой кислоты, например, в форме соли уксусной или трифторуксусной кислоты. Они также могут быть гидрированы в большей или меньшей степени.

Возможно используемые аббревиатуры/химические названия

AcOEt: этилацетат; EDCI: 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимидхлоргидрат; DMF: диметилформамид; DIPEA: диизопропилэтиламин; MeOH: метанол; TEA: триэтиламин; TFA: трифторуксусная кислота; THF: тетрагидрофуран; MCPBA: мета-хлорпероксибензойная кислота; DBU: 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен; APTS: паратолуолсульфокислота; DPPA: дифенилфосфорилазид; DMSO: диметилсульфоксид; Pd/C: палладий на угле; Boc: третбутоксикарбонил; CBz: бензилоксикарбонил; DCC: 1,3-дициклогексилкарбодиимид; TMSBr: бромтриметилсилан; TMSI: йодид триметилсилана.

IR: инфракрасный; RMN: ядерный магнитный резонанс; SM: масс-спектр; ESP: Electrospray mode positif; ер.: плечо; F: сильный; с: синглет; д: дуплет; т: триплет; кв: квадруплет; квин: квинтет; уш: уширенный; м: мультиплет или массив; J: константа соединения; Rf: индекс удерживания (хроматография).

Следует иметь в виду, что в нижеследующих примерах продукты в примерах 1-5 имеют рацемическую форму, продукты в примерах 6-9, 11 и 13-14, а также их сложные эфиры-предшественники имеют форму (S) в асимметрическом центре 3-аминоаланина, и продукты в примерах 10 и 12 и в случае необходимости их сложные эфиры-предшественники имеют форму (R) в асимметрическом центре 3-аминоаланина.

Подготовка 1

Синтез 4,6-дихлор-5-этилпиримидина (соединение формулы (V)

Смесь 5 г (35,7 ммоль) 5-этил-4,6-дигидроксипиримидина (выпускаемого фирмой Aldrich) в 30 мл оксихлорида фосфора кипятят с обратным холодильником в течение 1 часа. После охлаждения до температуры окружающей среды вводят по каплям смесь 4 мл N,N-диэтиланилина в 10 мл оксихлорида фосфора и полученное нагревают с обратным холодильником в течение 4 часов. После охлаждения до температуры окружающей среды реакционную среду выливают на смесь воды со льдом. Экстрагируют этилацетатом, промывают органические фазы 2N хлористоводородной кислотой, сушат на сульфате магния и выпаривают досуха в вакууме. Получают 6 г (выход=95%) целевого продукта в виде масла каштанового цвета, используемого в дальнейшем как таковое.

ССМ: Rf=0,5 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол 90-10).

Пример 1

3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланин, бис(трифторацетат)

Стадия а)

Синтез (1,1-диметилэтил)-3-[(6-хлор-5-этил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината.

В смесь 3,8 г (21 ммоль) 4,6-дихлор-5-этилпиримидина и 4,4 г (15 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-амино-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината (полученного способом, описанным в J.Med.Chem.(2001), 44(8), 1158-1176) в 50 мл диметилформамида вводят 10 мл диизопропилэтиламина, затем нагревают эту смесь до 120°С в течение 6 часов. Затем диметилформамид удаляют в вакууме и обрабатывают остаток смесью этилацетата, воды и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу декантируют, затем сушат на сульфате магния и растворитель удаляют выпариванием в вакууме. Остаток хроматографируют на силикагеле, элюируя градиентом от 100% гептана до гептан-этилацетата 50-50. Получают 4,7 г (Выход=70%) целевого продукта в виде масла.

ССМ: Rf=0,2 (силикагель, элюент: гептан-этилацетат 70-30)

ИК (CHCl ₃ ): 3411 (NH); 1718 (С=О); 1571; 1498 см^-1 (Гетероцикл+ароматический+амид)

1H-ЯМР (DМSO-d6): δ 1,02 (т, 3Н, СН₂-СН ₃); 1,30 (с, 9H, tBu); 2,57 (кв, 2H, CH ₂-СН₃); 3,74 (м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,29 (уш. кв, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 5,00 и 5,06 (сист. AB, 2H, O-CH ₂-Ph); 7,22 (уш. т, 1H, NH-CH₂-CH-NH), 7,34 (м, 5H, Ph); 7,64 (уш. д, 1H, NH-CH₂-CH-NH), 8,16 ч./млн (с, 1H, N=CH-N).

ВЭЖХ/масс-спектр: (tr=26 мин): 435 (MH+); 379 (MH-tBu+).

Стадия b)

Синтез (1,1-диметилэтил)-3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината.

Смесь 1,68 г (3 ммоль) 1,2,3,4-тетрагидро-7-(4-пиперидинил)-1,8-нафтиридина, трис(трифторацетата) (полученного в соответствии с патентами ЕР1065207 или WO 0078317) и 7,5 г (14,1 ммоль эквивалентов основания) аминометилполистерола (Polymer Labs 1,88 ммоль/г) в 200 мл раствора дихлорметан-метанол 50-50 встряхивают при температуре окружающей среды в течение 1 часа. Смесь фильтруют, смолу промывают метанолом и дихлорметаном и фильтрат концентрируют досуха в вакууме, и получают 630 мг свободного амина. В этот остаток вводят 651 мг (1,5 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[(6-хлор-5-этил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината и 2 мл диизопропилэтиламина и нагревают с обратным холодильником в течение 8 часов. Реакционную среду выпаривают в вакууме и обрабатывают остаток этилацетатом, водой и насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют, затем сушат на сульфате магния и растворитель выпаривают в вакууме. Остаток хроматографируют на силикагеле, элюируя последовательно чистым дихлорметаном, смесью дихлорметан-метанол 90-10, затем смесью дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 90-10-1-1. Получают 115 мг (Выход=12%) целевого продукта в виде масла. Получают также 280 мг (43%) исходного хлорсодержащего продукта.

ССМ: Rf=0,55 (оксид алюминия, элюент: гептан-этилацетат 50-50)

ИК (CHCl ₃ ): 3438 (NH 1717 (С=О); 1583; 1500 см^-1 (Гетероцикл+ароматический+амид)

1H-ЯМР (DМSO-d6): δ 1,06 (т, 3Н, СН₂-СН ₃); 1,31 (с, 9H, tBu); 1,77 (м, 2H, CH₂-CH ₂-CH₂-NH); 1,78 (м, 4H, CH ₂-CH-CH ₂); 2,43 (кв, 2H, СН ₂-СН₃); 2,51 (м, 1H, СН₂-СН-СН₂); 2,61 (м, 2H, CH ₂-CH₂-CH₂-NH), 2,82 и 3,44 (2м, 4H, CH ₂-CH₂-N-CH₂-CH ₂); 3,23 (м, 2H, CH₂-CH₂-CH ₂-NH); 3,72 (м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,23 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 5,03 (уш. д, 2H, CH ₂-Ph); 6,22 (м, 1H, СН₂-СН₂-CH₂-NH); 6,30 и 7,05 (2м, 2H, H нафтиридин); 6,35 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 7,34 (м, 5H, Ph); 7,60 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 8,11 ч./млн (N=CH-N).

ВЭЖХ/масс-спектр: (tr=14 мин) : 4616 (MH+).

Стадия с)

Синтез 3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланина, бис(трифторацетата).

Встряхивают 110 мг (0,18 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината в 5 мл дихлорметана с 1 мл трифторуксусной кислоты при температуре окружающей среды до исчезновения исходного продукта в ССМ (силикагель, элюент: СН₂Сl₂-МеОН-Н₂О-АсОН 90-10-1-1). Добавляют толуол и выпаривают реакционную среду досуха в вакууме. Остаток растворяют в минимальном количестве дихлорметана с небольшим количеством метанола, затем выливают на простой диизопропиловый эфир. Осадок фильтруют. Получают 108 мг (Выход=76%) целевого продукта в виде аморфного твердого вещества.

ССМ: Rf=0,33 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 90-10-1-1))

ИК (CHCl ₃ ): 1677 (С=О); 1626; 1586; 1500 см^-1 (Гетероцикл+ароматический+амид)

1H-ЯМР (DМSO-d6): δ 1,07 (т, 3Н, СН₂-СН ₃); 1,77 и 1,94 (2м, 4H, N-CH₂-CH ₂-CH-); 1,84 (м, 2H, NH-CH₂-CH ₂-CH₂-); 2,45 (кв, 2H, СН₂-СН₃); 2,75 (т, 2Н, NH-CH₂-CH₂-CH₂-); 2,85 (т, 1Н, N-CH₂-CH₂-СН-), 2,98 и 3,53 (2 м, 4Н, N-CH₂-CH₂-CH-); 3,43 (м, 2Н, N-CH₂-СН₂-СН₂-); 3,61 и 3,85 (2 м, 2Н, NH-CH₂-CH-NH); 4,32 (кв, 1Н, NH-CH₂-CH-NH); 4,99 и 5,04 (сист. АВ, 2Н, O-CH₂-Ph); 6.67 (д, 1Н, Н нафтиридин); 7,22 (уш. с, 1Н, NH-CH₂-CH-NH); 7,35 (м, 5Н, Ph); 7,60 (д, 1Н, NH-CH₂-CH-NH); 7,64 (д, 1Н, Н нафтиридин), 8,26 (с, 1Н, N=CH-N); 8,29 ч./млн (уш. с, 1Н, NH-CH₂-CH₂-CH₂-).

ВЭЖХ/масс-спектр: (tr=8,0 мин): 560 (МН+); 427 (МН-нафтиридин+); 280 (М+2Н++).

Микроанализ:

Теоретически: С=51,84%; Н=4,99%; N=12,45%;

Найдено: С=52,0%; Н=5,2%; N=12,4%;

Пример 2

3-[[5-этил-6-[4-[(1,2,3,4,5,6-гексагидро-2-пиримидинил]иминокарбонил]-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси) карбонил]аланин

Стадия а)

Синтез (1,1-диметилэтил)-3-[[5-этил-6-[4-(метоксикарбонил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината.

Смесь 1,2 г (2,8 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[(6-хлор-5-этил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината, 5 мл метил-4-пиперидинилкарбоксилата и 1 мл изопропилэтиламина нагревают до температуры от 110 до 120°С в течение 4 часов. После охлаждения до температуры окружающей среды реакционную среду обрабатывают этилацетатом, водой и насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют, сушат на сульфате магния, затем концентрируют досуха в вакууме. Остаток хроматографируют на силикагеле, элюируя градиентом от чистого гептана до чистого этилацетата. Получают 260 мг (Выход=17%) целевого продукта в виде масла.

ССМ: Rf=0,36 (силикагель, элюент: гептан-этилацетат 50-50)

ИК (CHCl ₃ ): 3422 (NH); 1725 (С=О); 1582; 1499 см^-1 (Гетероцикл+ароматический+амид)

1H-ЯМР (DМSO-d6): δ 1,05 (т, 3Н, СН₂-СН ₃); 1,30 (с, 9H, tBu); 1,67 и 1,88 (2м, 4H, N-CH₂-CH ₂-CH); 2,40 (кв, 2H, СН ₂-СН₃); 2,50 (м, 1H, N-СН₂-СН₂-СН); 2,81 и 3,33 (2м, 4H, N-CH ₂-CH₂-CH); 3,62 (с, 3Н, О-СН ₃); 3,71 (м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,22 (кв, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 5,02 (с, 2H, О-CH ₂-Ph); 6,36 (т, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 7,34 (м, 5H, Ph); 7,64 (д, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 8,10 ч./млн (с, 1H, N=CH-N).

ВЭЖХ/масс-спектр: (tr=12 мин) : 564 (MNa+); 542 (МН+); 486 (MN-tBu+).

Стадия b)

Синтез 3-[[5-этил-6-[4-[(1,2,3,4-гексагидро-2-пиримидинил]иминокарбонил]-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланина

Смесь 250 мг (0,46 ммоль) 3-[[5-этил-6-[4-(метоксикарбонил)-1-пипериднил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината и 200 мг (2,0 ммоль) 2-амино-1,4,5,6-тетрагидропиримидина (полученного в соответствии с R.F.Evans J.Chem.Soc. 1964, 2450-2455)) в 15 мл дихлорметана встряхивают при температуре окружающей среды в течение 24 часов. После выпаривания досуха остаток хроматографируют на силикагеле, элюируя градентом от чистого дихлорметана до смеси дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 85-15-2-2. После выпаривания из растворителя требуемых фракций остаток обрабатывают минимальным количеством смеси метанол-дихлорметан 50-50 и кислоту осаждают путем добавления простого этилового эфира. Фильтруют, сушат досуха в вакууме и получают 18 мг (Выход=7%) целевого продукта в виде твердого аморфного вещества.

ССМ: Rf=0,5 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-уксусная кислота 70-20-10)

ИК (CHCl ₃ ): 3287 (ОН/NH); 1700; 1600 (С=О); 1582; 1499 см^-1 (Гетероцикл+ароматический+амид)

1H-ЯМР (DМSO-d6): δ 1,05 (т, 3Н, СН₂-СН ₃); 1,67 и 1,86 (2м, 4H, N-CH₂-CH ₂-CH-); 1,80 (м, 2H, NH-CH₂-CH ₂-CH₂-NH); 2,26 (м, 1H, N-CH₂-CH₂-CH-); 2,38 (м, 2H, СН ₂-СН₃); 2,78 и 3,33 (2м, 4H, N-CH ₂-CH₂-CH-), 3,24 (м, 4H, NH-CH ₂-CH₂-CH ₂-NH); 3,42 и 3,75 (2м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,08 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH), 4,95 и 5,00 (сист AB, 2H, О-CH ₂-Ph); 6,10 (уш. т, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 6,74 (уш. с, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 7,30 (м, 5H, Ph); 8,05 (с, 1Н, N=CH-N); 8,55 ч./млн (уш. с, 2Н, NH-CH₂-CH₂-CH₂-NH).

ВЭЖХ/масс-спектр: (tr=6 мин): 553(MH+); 364 (MH-tBu-PhCH₂+); 320 (MH-tBu-Z+).

Пример 3

Стадия а)

Синтез (1,1-диметилэтил)-3-[(6-хлор-5-метил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината.

Нагревают до 120°С смесь 325 мг (2 ммоль) 4,6-дихлор-5-метилпиримидина (выпускаемого SPECS), 600 мг (2 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-амино-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината (полученного в соответствии с J.Med.Chem. (2001), 44(8), 1158-1176) в 3 мл диметилформамида и 3 мл диизопропилэтиламина в течение ночи. Реакционную среду концентрируют досуха в вакууме и остаток обрабатывают смесью воды, этилацетата и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют и водную фазу повторно экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат на сульфате магния, затем растворитель выпаривают в вакууме. Остаток хроматографируют на силикагеле, элюируя градиентом от гептана (100%) до смеси гептан-этилацетата (50-50). Получают 450 мг (Выход=53%) целевого продукта в виде масла.

ССМ: Rf=0,5 (силикагель, элюент: этилацетат-гептан 25-75)

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,48 (с, 9H, tBu); 2,08 (с, 3H, СН ₃); 3,80 и 3,97 (2м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,50 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 5,08 и 5,15 (сист AB, 2H, О-CH ₂-Ph); 5,86 (уш. д, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 6,12 (уш. с, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 7,35 (м, 5H, Ph); 8,30 ч./млн (с, 1Н, N=CH-N).

Масс-спектр (FAB): 421 (MH+); 365 (MH-tBu).

Стадия b)

Синтез (1,1-диметилэтил)-3-[[6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-метил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината

Смесь 370 мг (0,88 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[(6-хлор-5-метил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината и 1,0 г (1,79 ммоль) 1,2,3,4-тетрагидро-7-(4-пиперидинил)-1,8-нафтиридина, трис(трифторацетат) (полученного в соответствии с патенетом ЕР1065207 или WO 0078317) в 1 мл диизопропилэтиламина нагревают до 120°С в течение 2 часов. Затем вводят 10 мл ксилола и нагревают среду с обратным холодильником в течение 4 часов. Реакционную среду обрабатывают смесью воды, этилацетата и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу декантируют и водную фазу повторно экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат на сульфате магния, затем выпаривают досуха в вакууме и остаток хроматографируют на силикагеле, элюируя градиентом от этилацетата 100% до смеси этилацетат-метанол-триэтиламин-дихлорметан 50-10-10-50. Получают 32 мг (выход=6%) целевого продукта и 200 мг (54%) исходного хлорсодержащего продукта.

ССМ: Rf=0,6 (силикагель, элюент: этилацетат-дихлорметан-метанол 50-40-10)

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,49 (с, 9H, tBu); 1,97 (м, 2H, NH-CH₂-CH ₂-CH₂); 2,01 (с, 3H, СН ₃); 2,18 (м, 4H, N-CH₂-CH ₂-CH); 2,79 (м, 2H, NH-CH₂-CH₂-CH ₂); 2,98 (м, 1H, N-CH₂-CH₂-CH); 3,39 и 3,89 (2м, 4H, N-CH ₂-CH₂-CH); 3,52 (м, 2H, NH-CH ₂-CH₂-CH₂); 3,77 и 4,09 (2м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,47 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 5,13 (уш. с, 2H, О-CH ₂-Ph); 5,92 (уш. с, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 6,47 (уш. д, 1H, H нафтиридин); 7,37 (м, 5Н, Ph); 7,38 (м, 1Н, Н нафтиридин); 8,41; 8,68 и 14,80 ч./млн (3уш. с, 3Н, N=CH-N и мобильные).

Масс-спектр: 602(MH+); 546 (MH-tBu +).

Стадия с)

Синтез 3-[[6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-метил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланина

При температуре окружающей среды встряхивают смесь 38 мг (0,06 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[[6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-метил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината и 2 мл трифторуксусной кислоты в 10 мл дихлорметана в течение 3 часов. Затем вводят 5 мл толуола и смесь выпаривают досуха. Получают 26 мг (Выход=76%) целевого продукта в виде твердого аморфного вещества.

ССМ: Rf=0,8 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 90-10-1-1)

1H-ЯМР (DМSO-d6): δ 1,84 (м, 2H, NH-CH₂-CH ₂-CH₂); 1,92 (с, 3Н, СН ₃); 1,75 и 1,91 (2м, 4H, N-CH₂-CH ₂-CH); 2,74 (м, 2H, NH-CH₂-CH₂-CH ₂); 2,84 (м, 1H, N-CH₂-CH₂-CH); 2,92 и 3,67 (2м, 4H, N-CH ₂-CH₂-CH); 3,44 (м, 2H, NH-CH ₂-CH₂-CH₂); 3,63 и 3,82 (2м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,29 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 5,02 (уш. с, 2H, O-CH ₂-Ph); 6,68 (д, 1H, H нафтиридин); 7,20-7,40 (м, 5H, Ph); 7,64 (уш. д, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 7,65 (д, 1H, H нафтиридин); 7,82 и 8,21 ч./млн (2уш. с, 3Н, N=CH-N и мобильные).

ВЭЖХ/масс-спектр: (tr=7 мин), 546(MH+); 273 (MH+2Н++).

Пример 4

Стадия а)

Синтез (1,1-диметилэтил)-3-[[6-[4-(метоксикарбонил)-1-пиперидинил]-5-метил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината.

Нагревают с обратным холодильником смесь 80 мг (0,19 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[(6-хлор-5-метил-4-пиримидинил)амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината и 3 мл 4-метилпиперидинилкарбоксилата в течение 3 часов. После охлаждения реакционную среду обрабатывают водой, этилацетатом и насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют и водную фазу повторно экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат на сульфате магния, затем растворитель выпаривают досуха в вакууме. Остаток хроматографируют на силикагеле, элюируя градиентом от гептана (100%) до смеси гептан-этилацетат (50-50). Получают 25 мг (Выход=25%) целевого продукта в виде масла.

ССМ: Rf=0,3 (силикагель, элюент: этилацетат-гептан 50-50)

ИК (CHCl ₃ ): 3421 (NH); 1724 (С=О); 1585; 1501 см^-1 (С=С, С=N).

1H-ЯМР (DМSO-d6): δ 1,31 (с, 9H, tBu); 1,68 (уш. кв, 2H, CH ₂-CH(C=О)); 1,87 (м, 2H, CH ₂-CH(C=О)); 1,87 (с, 3H, CH ₃-C=); 2,51 (скрытый, 1H, -CH₂-CH-CH₂-); 2,80 (уш. т, 2H, -N- (CH ₂ ) ₂-(CH₂)₂-); 3,44 (уш. д, 2H, -N-(CH ₂ ) ₂-(CH₂)₂-); 3,62 (с, 3H, СН ₃-О); 3,71 (м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH-); 4,22 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH-); 5,03 (уш. с, 2H, O-CН ₂-Ph); 6,35 (уш. с, 1H, NH-CH₂-CH-NH-); 7,34 (м, 5H, Ph); 7,63 (уш. д, 1H, NH-CH₂-CH-NH-); 8,08 ч./млн (с, 1H, N=CH-N).

ВЭЖХ/масс-спектр: (tr=17 мин) 528 (MН+); 472 (MН-tBu+).

Стадия b)

Синтез 3-[[6-[4-[(1,2,3,4,5,6-гексагидро-2-пиримидинил]иминокарбонил]-1-пиперидинил]-5-метил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланина.

При температуре окружающей среды встряхивают смесь 100 мг (0,19 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[[6-[4-(метоксикарбонил)-1-пиперидинил]-5-метил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината и 150 мг (1,5 ммоль) 2-амино-1,4,5,6-тетрагидропиримидина (полученного в соответствии с R.F.Evans J.Chem.Soc. 1964, 2450-2455)) в 10 мл дихлорметана в течение 5 часов. Реакционную смесь выпаривают досуха и остаток хроматографируют на силикагеле, элюируя смесью дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 85-15-2-2.

Получают 10 мг (Выход=10%) целевого продукта в виде твердого аморфного вещества.

ССМ: Rf=0,4 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 85-15-2-2).

1H-ЯМР (DМSO-d6): δ 1,64 и 1,74 (2м, 4H, N-CH₂-CH ₂-CH); 1,77 (м, 2H, NН-СН₂-СН ₂-СН₂-NH); 1,85 (с, 3Н, СН ₃); 2,11 (м, 1H, N-CH₂-CH₂-CH);. 3,17 (м, 4H, NH-CH ₂-CH₂-CH ₂-NH); 2,68 и 3,42 (2м, 4H, N-CH ₂-CH₂-CH); 3,30 и 3,62 (2м, 2H, HN-CH ₂-CH-NH); 3,73 (м, 1H, N-CH₂-CH-NH); 5,00 (м, 2H, O-CH ₂-Ph); 6,54 (уш. д, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 6,77 (уш. с, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 7,33 (м, 5H, Ph); 8,04 ч./млн (с, 1H, N=CH-N).

ВЭЖХ/масс-спектр: (tr=1,9 мин) 1077 (2MH+); 539 (MH+); 440 (МН-аминотетрагидропиримидин+).

Пример 5

3-[[5-этил-6-[4-[(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]этилаланинат, дихлоргидрат

В 4 мл этанола, охлажденного до -12°С в атмосфере азота, вводят 160 мкл (2,19 ммоль) тионилхлорида и смесь встряхивают в течение 30 минут. Затем вводят раствор 354 мг (0,45 ммоль) 3-[[5-этил-6-[4-[(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланина, бис(трифторацетата) в 13 мл этанола. Смесь встряхивают в течение 30 мин при -12°С, затем оставляют для нагревания до температуры окружающей среды и, наконец, нагревают до 40°С в течение 4 часов в атмосфере азота. Реакционную смесь выпаривают досуха в вакууме и остаток кристаллизуют в смеси простого диизопропилового эфира и пентана и твердое вещество фильтруют. Получают 284 мг (Выход=95%) целевого продукта в виде твердого аморфного вещества бежевого цвета.

ССМ: Rf=0,4 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 90-10-1-1).

ИК (CHCl ₃ ): 3400-3000 (ОН, NH); 1719 (С=О); 1654; 1623; 1580; 1504 см^-1 (С=С, С=N, ароматический)

1H-ЯМР (DМSO-d6): δ 1,09 (т, 3Н, СН₂-СН ₃); 1,14 (т, 3H, O-СН₂-СН ₃); 1,85 (м, 2H, NH-CH₂-CH ₂-CH₂); 1,85 и 2,00 (2м, 4H, N-CH₂-CH ₂-CH); 2,48 (м, 2H, СН ₂-СН₃); 2,75 (т, 2H, NH-CH₂-CH₂-CH ₂); 2,92 (м, 1H, N-CH₂-CH₂-CH); 3,03 и 3,57 (2м, 4H, N-CH ₂-CH₂-CH); 3,44 (т, 2H, N-CH ₂-CH₂-CH₂); 3,76 и 3,87 (2м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,07 (кв, 2H, O-СН ₂-СН₃); 4,39 (кв, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 5,03 (с, 2H, O-CH ₂-Ph); 6,62 (д, 1H, H нафтиридин); 6,86 (уш. с, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 7,30 (м, 5H, Ph); 7,33 (уш. с, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 7,58 (д, 1H, H нафтиридин); 8,20 ч./млн (с, 1H, N=CH-N).

ВЭЖХ/масс-спектр: (tr=6,2 мин) 588 (MН+); 454 (МН-СООСН₂Рh+); 437 (MH-NHCOOCH₂Ph+).

Пример 6

Синтез 4,6-дигидрокси-5-метилпиримидина.

В раствор 7,5 г (94 ммоль) формамидинхлоргидрата в 250 мл этанола, охлажденного до 0°С, вводят 102 мл (282 ммоль) 21% раствора этилата натрия в этаноле и смесь встряхивают в течение 30 минут, затем вводят раствор 13 мл (94 ммоль) диэтилметилмалоната в 50 мл этанола и встряхивают в течение ночи при температуре окружающей среды. Выпаривают реакционную смесь досуха при пониженном давлении (2 кПа) и обрабатывают остаток этилацетатом, водой и уксусной кислотой для получения рН, равного 6. Осадок фильтруют, затем промывают последовательно водой, изопропанолом, простым диэтиловым эфиром и, наконец, пентаном. Получают 7 г (Выход=60%) целевого продукта в виде твердого вещества бежевого цвета.

ССМ: Rf=0,20 (силикагель, элюент: этилацетат-дихлорметан-метанол 50-40-10).

1H-ЯМР (DМSO-d6): δ ч./млн 1,73 (с, 3Н, С-СН ₃); 7,88 (с, N=СН-N).

Масс-спектр: 127(MН+); 125 (М-Н-).

Синтез 4,6-дибром-5-метилпиримидина.

Смесь 6 г (47,6 ммоль) 5-метил-4,6-дигидроксипиримидина в 18 г оксибромида фосфора нагревают до 200°С в течение 3 часов. После охлаждения до температуры окружающей среды реакционную смесь обрабатывают смесью ледяной воды и бикарбоната натрия и экстрагируют этилацетатом, промывают органические фазы водой, сушат на сульфате магния и выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа). Получают 9 г (Выход=75%) твердого вещества бежевого цвета.

ССМ: Rf=0,27 (силикагель, элюент: дихлорметан-пентан 50-50).

1H-ЯМР (CDCl3): δ ч./млн 2,58 (с, 3Н, С-СН ₃); 8,51 (с, N=CH-N).

Масс-спектр: 253-255 (MН+).

Синтез 6-[4-[(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-метил-4-бромпиримидина:

В одногорлую колбу, содержащую 8 г (36,8 ммоль) 4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиримидина, полученного из его соли, вводят 70 мл диметилацетамида, 7,56 г (30 ммоль) 4,6-дибром-5-метилпиримидина в растворе в 40 мл диметилацетамида и 14 мл диизопропилэтиламина. Эту смесь нагревают до 140°С в течение 4 часов, затем концентрируют досуха при пониженном давлении (2кПа). Полученный остаток обрабатывают смесью воды, этилацетата и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют и водную фазу повторно экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат на сульфате магния, затем растворитель выпаривают при пониженном давлении (2кПа). Полученное твердое вещество многократно промывают простым диизопропиловым эфиром, затем пентаном и получают 7,7 г целевого продукта в виде порошка светло-коричневого цвета. Фильтрат концентрируют досуха, затем хроматографируют на силикагеле, элюируя с градиентом этилацетата (100%), затем смесью этилацетат-метанол (95-5). Получают 533 мг целевого продукта в виде желтого порошка (общий выход = 70%).

Получение нафтиридина в виде свободного амина:

22 г нафтиридина вытесняют из его соли 6 масс-эквивалентами щелочной смолы amberlyst А21 (смола типа R-NМe₂) в смеси CH₂Cl₂/MeOH/AcOEt 1/1/1, при встряхивании в течение 30 минут. Смолу предварительно промывают и оставляют на 20 минут для набухания в этой смеси растворителя. Указанную операцию повторяют 3 раза до полного вытеснения из соли. После фильтрования смолы и выпаривания растворителей получают 8 г (36,8 ммоль) свободного нафтиридина.

ССМ: Rf=0,33 (силикагель, элюент: этилацетат (100%)).

1H-ЯМР (DМSO-d6): δ 1,7-1,85 (м, 6H, NH-CH₂-CH ₂-CH₂, N-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂); 2,23 (с, 3Н, СН₃-); 2,60 (м, 3Н, СН₂-СН-СН₂, NH-CH₂-CH₂-CH ₂); 3,23 (м, 2H, NH-CH₂-CH₂-CH ₂); 2,97 и 3,92 (2м, 4H, CH₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂); 6,3 и 7,05 (2д, 2H, CH=CH нафтиридин); 8,28 (с, 1H, N=CH-N).

Масс-спектр (FAB): 388 (М); 389 (MН+).

Синтез (1,1-диметилэтил)-3-[[5-метил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината.

Нагревают с обратным холодильником 620 мг (1,6 ммоль) 4-бром-5-метил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]пиримидина, 565 мг (1,92 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-амино-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината (полученного в соответствии с J.Med.Chem. (2001), 44(8), 1158-1176), 340 мг (2,25 моль) фторида цезия, 73 мг (0,08 ммоль) трис(дибензилиденацетона)дипалладия(0), 100 мг (0,16 ммоль) S(-)2,2'-бис(дифенилфосфин)-1,1'-бинафтила в 50 мл диоксана в течение 5 часов. Охлаждают, затем повторно вводят 280 мг (0,96 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-амино-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината, 340 мг (2,25 ммоль) фторида цезия, 73 мг (0,08 ммоль) трис(дибензилиденацетона)дипалладия(0), 100 мг (0,16 ммоль) S(-)2,2'-бис(дифенилфосфин)-1,1'-бинафтила и нагревают с обратным холодильником в течение 5 часов. Реакционную смесь выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа) и остаток обрабатывают этилацетатом, водой и насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют, сушат на сульфате магния и растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа). Остаток хроматографируют первый раз на силикагеле, элюируя градиентом этилацетат-метиленхлорид-триэтиламин-метанол от 50-50-0-0 до 50-50-2-2. Полученный продукт повторно хроматографируют на оксиде алюминия, элюируя смесью гептан-метиленхлорид 50-50, затем этилацетат-простой диизопропиловый эфир 50-50. Получают 360 мг (Выход=37%) целевого продукта в виде твердого аморфного вещества белого цвета.

ССМ: Rf=0,20 (силикагель, элюент: метиленхлорид-метанол 95-5).

ИК (CHCl ₃ ): 3435 (NH); 1717 (С=О); 1583; 1555; 1501 см^-1 (гетероцикл+ароматический+амид).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,47 (с, 9H, tBu); 1,94 (с, 3H, С-СН ₃); 1,75-2,05 (м, 6Н, CH₂-CH ₂-CH₂-NH и CH ₂-CH-CH ₂); 2,60-2,77 (м, 3H, CH₂-CH-CH₂ и СН ₂-СН₂-СН₂-NН); 2,93 и 3,90 (2м, 4H, CH₂-CН ₂-N-CH ₂-CH₂); 3,42 (м, 2H, CH₂-CH₂-CH ₂-NH); 3,66 (т, 2Н, NH-CH ₂-CH-NH), 4,45 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 4,95, 5,25 и 6,20 (3м, 3H CH₂-CH₂-CH₂-NH NH-CH₂-CH-NH, NH-CH₂-CH-NH); 5,12 (с, 2H, CH ₂-Ph); 7,35 (м, 5Н, Ph); 8,29 ч./млн (с, N=CH-N).

Масс-спектр: 602 (MН+); 546 (МН-tBu+); 412 (MH-COOCH₂Ph+).

[α _D ] (0,625% EtOH): -4,5.

Синтез 3-[[5-метил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланина, бис(трифторацетата).

Встряхивают 350 мг (0,58 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[[5-метил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината в 15 мл дихлорметана с 3 мл трифторуксусной кислоты при температуре окружающей среды до исчезновения исходного продукта в ССМ (силикагель, элюент: CH₂Cl₂-MeOH-H₂O-AcOH 90-10-1-1). Добавляют толуол и выпаривают реакционную смесь досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток растворяют в минимальном количестве дихлорметана с небольшим количеством метанола, затем выливают на простой диизопропиловый эфир. Осадок фильтруют. Получают 330 мг (Выход=73%, выражен в дитрифторацетате) целевого продукта в виде твердого вещества белого цвета.

ССМ: Rf=0,44 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 90-10-1-1).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,96 (с, 3H, С-СН₃); 1,80-2,05 (м, 6H, CH₂-CH₂-CH₂-NH и СН₂-СН-СН₂); 2,76 (т, 2H, NH-CH₂-CH₂-CH₂-); 2,96 (т, 1H, N-CH₂-CH₂-CH-); 3,21 и 3,83 (2м, 4H, N-CH₂-CH₂-CH-); 3,50 (м, 2H, N-CH₂-CH₂-CH₂-); 3,83 и 4,05 (2м, 2H, NH-CH₂-CH-NH); 4,54 (кв, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 5,50 (с, 2H, O-CH₂-Ph); 6,40 (д, 1H, H нафтиридин); 6,55 (уш. д, 1H, NH); 7,28 (м, 5H, Ph), 7,45 (уш. м, 1H, NH); 8,22 (д, 1H, H нафтиридин), 8,22 (с, 1H, N=CH-N); 9,62 ч./млн (уш. с, 1H).

Масс-спектр: 546 (MН+); 412 (MH-COOCH₂Ph+); 544- (М-Н-); 436- (544-ОСН₂Рh-); 1089- (2М-Н-).

[α _D ] (0,60% МеOH): -14,0.

Пример 7

Получение нафтиридина в форме свободного амина:

22 г нафтиридина вытесняют из его соли 6 масс-эквивалентами щелочной смолы amberlyst А21 (смола типа R-NМe₂) в смеси CH₂Cl₂/MeOH/AcOEt 1/1/1, встряхивая в течение 30 минут. Смолу предварительно промывают и оставляют на 20 минут для набухания в этой смеси растворителя. Указанную операцию повторяют 3 раза до полного вытеснения из соли. После фильтрования смолы и выпаривания растворителей получают 8 г (36,8 ммоль) свободного нафтиридина.

Масс-спектр (FAB): (tr=0,50 мин и 2,80 мин): 388 (М); 389 (MН+).

Синтез N-(альфа)-Z-L,2-3-этилдиаминпропионата.

В одногорлую колбу, содержащую 26 мл абсолютного этанола, вводят по каплям при 0°С 12 мл (168 ммоль) тионилхлорида. Эту смесь встряхивают в течение примерно 20 минут при температуре окружающей среды, затем в нее вводят небольшими порциями 2 г (8,4 ммоль) N-(альфа)-Z-L,2-3-диаминпропионовой кислоты, появляется белая взвесь.

Затем реакционную смесь нагревают с обратным холодильником (78°С) в течение 2 часов (после нагревания в течение нескольких минут раствор становится прозрачным).

После охлаждения раствор концентрируют досуха, получают желтую жидкость, в которую вводят простой изопропиловый эфир. Образуется целевой продукт, затем удаляют отстоявшуюся жидкость и остаток обрабатывают смесью воды, этилацетата и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют и водную фазу повторно экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат на сульфате магния, затем растворитель выпаривают в вакууме. Получают 1,4 г светло-желтого масла, это сложный эфир в виде свободного амина (выход =63%).

ССМ: Rf=0,41 (силикагель, элюент: метиленхлорид-метанол (85-15) и 2% вода-уксусная кислота (1-1)).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,33 (т, 3H, СН ₃-СН₂-О); 2,53 (м, 2H, NH ₂-CH₂-CH) 3,15 (м, 2H, NH₂-CH ₂-CH); 4,22 (кв, 2H, СН₃-СН ₂-О); 4,42 (м, 1H, NH₂-CH₂-CH-NH); 5,85 (м, 1H, CH-NH-CO); 5,15 (с, 2H, O-CH ₂-Ph); 7,35 (м, 5H, Ph)

Масс-спектр (FAB): (tr=0,51 мин и 1,2 мин): 267 (MН+); 533 (2MH+).

[α _D ] (CHCl₃)=+6,336.

Синтез 3-[[-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-метил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]этилаланината.

Смесь 1,9 г (4,9 ммоль) 6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-метил-4-бромпиримидина и 1,62 г (6,08 ммоль) 3-амино-N-[(фенилметокси)карбонил]этилаланината в присутствии 1,06 г (6,86 ммоль) фторида цезия, 310 мг (490 мкмоль) (2,2'-бис(дифенилфосфин)-1,1'-бинафтила и 230 мг (245 мкмоль) трис(дибензилиденацетона)дипалладия(0) в 40 мл 1,2-диметоксиэтана нагревают с обратным холодильником в течение 4 часов. Реакционную смесь затем доводят до температуры для введения 230 мг (245 мкмоль) трис(дибензилиденацетон)дипалладия(0), затем повторно нагревают с обратным холодильником в течение 16 часов.

После охлаждения раствор концентрируют досуха, затем обрабатывают смесью воды, этилацетата и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу декантируют и водную фазу экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат на сульфате магния и выпаривают досуха в вакууме. Остаток хроматографируют на силикагеле с помощью 100% этилацетата. Получают 1,15 г целевого продукта в виде твердого светло-желтого масла (выход = 40%).

ССМ: Rf=0,16 (силикагель, элюент: этилацетат 100%).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,25 (т, 3Н, СН ₃-СН₂-О); 1,80-2,05 (м, 9Н, NH-CH₂-CH ₂-CH₂, N-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂, СН₃-С=С-); 2,72 (м, 3Н, СН₂-СН-СН₂, NH-CH₂-CH₂-CH ₂); 2,95 и 3,93 (2м, 4H, CH₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂); 3,45 (м, 2H, NH-CH ₂-CH₂-CH₂); 3,68 (д, 2H, NH-CH ₂-CH-NH) 4,23 (т, 2H, CH₃-CH ₂-О), 4,45 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 5,10 и 5,17 (сист AB, 2H, O-CH ₂-Ph); -6,41 и 7,18 (2д, 2H, CH=CH нафтиридин); 7,35 (м, 5H, Ph); 8,27 (с, 1H, N=CH-N).

ВЭЖХ/масс-спектр: (tr=0,48 мин и 2,9 мин): 574 (MН+); 440 [МН-Z+]; 287[MH-(tBu-Z+)].

[α _D ] (CHCl₃): +0,788.

Получение хлоргидрата:

1,15 г 3-[[-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-метил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]этилаланината растворяют в минимальном количестве метиленхлорида. Этот раствор выливают на простой этиловый эфир, раствор должен оставаться прозрачным. Затем по каплям при встряхивании вливают 2,65 мл HCl 2N, разведенной в небольшом количестве простого этилового эфира. Образуется хлоргидрат, отстоявшуюся жидкость удаляют, затем остаток кристаллизуют в простом изопропиловом эфире. Получают твердое вещество, которое фильтруют, промывают простым эфиром, затем пентаном. После сушки получают 890 мг светло-желтого порошка (выход=73%).

Пример 8

1H-ЯМР (DMSO-d6): δ 1,7-1,85 (м, 6Н, NH-CH₂-CH ₂-CH₂, N-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂); 2,23 (с, 3Н, СН₃-); 2,60 (м, 3Н, СН₂-СН-СН₂, NH-CH₂-CH₂-CH ₂); 3,23 (м, 2H, NH-CH₂-CH₂-CH ₂); 2,97 и 3,92 (2м, 4Н, CH₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂); 6,3 и 7,05 (2д, 2H, CH=CH нафтиридин); 8,28 (с, 1H, N=CH-N).

Синтез N-(альфа)-Z-L,2-3-изопропилдиаминпропионата.

В одногорлую колбу, содержащую 125 мл изопропанола, вводят по каплям при 0°С 46 мл (840 ммоль) тионилхлорида. Эту смесь встряхивают в течение примерно 20 минут при температуре окружающей среды, затем в нее вводят небольшими порциями 10 г (42 ммоль) N-(альфа)-Z-L,2-3-диаминпропионовой кислоты, появляется белая взвесь.

После охлаждения раствор концентрируют досуха, получают желтую жидкость, в которую вводят простой изопропиловый эфир. Образуется целевой продукт, затем удаляют отстоявшуюся жидкость и остаток обрабатывают смесью воды, этилацетата и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют и водную фазу повторно экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат на сульфате магния, затем растворитель выпаривают в вакууме. Получают 7,4 г белого порошка, это сложный эфир в виде свободного амина (выход =42%).

ССМ: Rf=0,5 (силикагель, элюент: метиленхлорид-метанол (85-15) и 2% вода-уксусная кислота (1-1)).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,25 (д, 6H, СН ₃-СН-СН ₃); 1,60 (м, 2H, NH ₂-CH₂-CH) 3,10 (м, 2H, NH₂-CH ₂-CH); 4,35 (м, 1H, NH₂-CH₂-CH-NH) 5,10 (м, 1H, СН₃-СН-СН₃); 5,15 (с, 2H, O-CH ₂-Ph); 5,2 (м, 1H, CH-NH-CO), 7,37 (м, 5H, Ph).

Масс-спектр (FAB): (tr=0,52 мин и 2,09 мин): 281 (MН+); 239 (MH-ipr+).

[α _D ] (CHCl₃)=+15,02.

Синтез 3-[[-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-метил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]изопропилаланината.

Смесь 1,5 г (3,89 ммоль) 6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-метил-4-бромпиримидина и 1,30 г (4,63 ммоль) 3-амино-N-[(фенилметокси)карбонил]изопропилаланината в присутствии 825 мг (5,41 ммоль) фторида цезия, 241 мг (386 мкмоль) (2,2'-бис(дифенилфосфин)-1,1'-бинафтила и 180 мг (193 мкмоль) трис(дибензилиденацетона)дипалладия(0) в 40 мл 1,2-диметоксиэтана нагревают с обратным холодильником в течение 5 часов 30 минут. Реакционную смесь затем доводят до температуры для введения 180 мг (245 мкмоль) трис(дибензилиденацетон)дипалладия(0), затем повторно нагревают с обратным холодильником в течение 16 часов.

На следующий день нагревают еще в течение 9 часов после добавления 180 мг (193 мкмоль) трис(дибензилиденацетона)дипалладия(0). После охлаждения раствор концентрируют досуха, затем обрабатывают смесью воды, этилацетата и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу декантируют и водную фазу экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат на сульфате магния и выпаривают досуха в вакууме. Остаток хроматографируют на силикагеле с помощью 100% этилацетата. Получают 1,15 г целевого продукта в виде кристаллического светло-желтого вещества (выход = 50%).

ССМ: Rf=0,18 (силикагель, элюент: этилацетат 100%).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,27 (д, 6Н, СН₃-СН-СН₃); 1,83-2,05 (м, 9H, NH-CH₂-CH ₂-CH₂, N-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂, CH ₃-C=C-); 2,72 (м, 3Н, СН₂-СН-СН₂, NH-CH₂-CH₂-СH ₂); 2,95 и 3,93 (2м, 4H, СН₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂); 3,45 (м, 2H, NH-CH ₂-CH₂-CH₂); 3,68 (д, 2H, NH-CH ₂-CH-NH), 4,50 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 5,07 (м, 1Н, СН₃-СН-СН₃); 5,12 (с, 2H, O-CH ₂-Ph); 6,42 и 7,18 (2д, 2H, CH=CH нафтиридин); 7,35 (м, 5H, Ph); 8,28 (с, 1H, N=CH-N).

ВЭЖХ/масс-спектр: (tr=0,48 мин и 3,03 мин): 588 (MН+); 454 [МН-Z+]; 412[MH-(ipr-Z+)].

[α _D ] (CHCl₃): +0,7655.

Получение хлоргидрата:

3,8 г 3-[[-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-метил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]изопропилаланината растворяют в 20 мл метиленхлорида. Этот раствор выливают на простой этиловый эфир, раствор должен оставаться прозрачным. Затем по каплям при встряхивании вводят 3,23 мл HCl 2N, разведенной в небольшом количестве простого этилового эфира. Образуется хлоргидрат, отстоявшуюся жидкость удаляют, затем остаток кристаллизуют в простом изопропиловом эфире. Получают твердое вещество, которое фильтруют, промывают простым эфиром, затем пентаном. После сушки получают 3,44 г белого порошка (выход=85%).

Пример 9

Синтез 4,6-дибром-5-этилпиримидина.

Смесь 2,8 г (20 ммоль) 5-этил-4,6-дигидроксипиримидина (доступный от Aldrich) и 8,85 г (31 ммоль) оксибромида фосфора нагревают до 160°С в течение 1 часа. После охлаждения до температуры окружающей среды реакционную среду выливают на смесь льда, насыщенного раствора бикарбоната натрия и этилацетата. Декантируют, промывают органическую фазу насыщенным раствором бикарбоната натрия, сушат на сульфате магния и выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток хроматографируют на силикагеле, элюируя градиентом от гептана 100% до гептан-этилацетата 50-50. Получают 3,92 г (Выход=74%) твердого вещества светло-коричневого цвета, используемого как таковое на следующих стадиях.

ССМ: Rf=0,5 (силикагель, элюент: гептан-этилацетат 90-10).

ИК (CHCl ₃ ): 1538; 1503 (С=С, С=N).

1H-ЯМР (DMSO-d6): δ 1,16 (т, 3Н, СН₂-СН ₃); 2,86 (кв, 2Н, СН ₂-СН₃); 8,63 ч./млн (с, 1Н, N=CH-N).

Масс-спектр: 266 (MН+); 249 (МН-СН₃+); 184 (МН-НBr+).

Синтез 4-бром-5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]пиримидина.

Смесь 3,67 г (6,45 ммоль) 1,2,3,4-тетрагидро-7-(4-пиперидинил)-1,8-нафтиридина, трис(трифторацетата) (полученного в соответствии с ЕР1065207 или WO 0078317) и 25 г смолы Amberlyst A-21 (производство Fluka 06424, предварительно промытой раствором дихлорметан-этилацетат-метанол 1-1-1) в 150 мл раствора дихлорметан-этилацетат-метанол 1-1-1, встряхивают при температуре окружающей среды в течение 1 часа. Смесь фильтруют, смолу промывают трехкомпонентным раствором. Полученный фильтрат встряхивают при температуре окружающей среды в течение 1 часа в присутствии 25 г смолы Amberlyst A-21, обработанной как указано выше; эту операцию повторяют третий раз. Полученный фильтрат концентрируют досуха при пониженном давлении (2 кПа) и получают 1,4 г свободного амина. В этот остаток вводят 2,06 г (7,74 ммоль) 4,6-дибром-5-этилпиримидина, 200 мл диметилацетамида и 5 мл диизопропилэтиламина и нагревают до 100°С в течение 3,5 часов. Реакционную смесь выпаривают при пониженном давлении (2 кПа) и обрабатывают остаток этилацетатом, водой и насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют, сушат на сульфате магния и растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа). Остаток хроматографируют на силикагеле, элюируя градиентом от 100% гептана до гептан-этилацетата 50-50. Получают 1,5 г (Выход=58%) целевого продукта в виде твердого вещества бежевого цвета.

ССМ: Rf=0,5 (оксид алюминия, элюент: гептан-этилацетат 50-50).

ИК (CHCl ₃ ): 3440 (NH); 1596; 1586; 1547; 1508; 1480 см^-1 (Гетероцикл+ароматический).

1H-ЯМР (DМSO-d6): δ 1,23 (т, 3Н, СН₂-СН ₃); 1,75 (м, 6H, CH₂-CH ₂-CH₂-NH, CH ₂-CH-СH ₂); 2,67 (м, 5H, СН ₂-СН₃, СН₂-СН-СН₂, CH ₂-CH₂-CH₂-NH); 3,02 (т, 2H, CH₂-CH ₂-N); 3,23 (м, 2H, СН₂-СН₂-CН ₂-NH); 3,90 (д, 2H, CH₂-CH ₂-N); 6,20 (с, 1H, CH₂-CH₂-CH₂-NH); 6,30 и 7,04 (2д, 2H, H нафтиридин); 8,27 ч./млн (с, N=CH-N).

Масс-спектр: 403(MH+).

Нагревают с обратным холодильником смесь 317 мг (0,79 ммоль) 4-бром-5-метил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]пиримидина, 279 мг (0,95 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-амино-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината (полученного в соответствии с J.Med.Chem. (2001), 44(8), 1158-1176), 168 мг (1,11 моль) фторида цезия, 36 мг (0,04 ммоль) трис(дибензилиденацетона)дипалладия(0), 49 мг (0,08 ммоль) S(-)2,2'-бис(дифенилфосфин)-1,1'-бинафтила в 11 мл диоксана в течение 21 часа. Охлаждают, затем повторно вводят 140 мг (0,48 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-амино-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината, 168 мг (1,11 ммоль) фторида цезия, 36 мг (0,04 ммоль) трис(дибензилиденацетона)дипалладия(0), 49 мг (0,08 ммоль) S(-)2,2'-бис(дифенилфосфин)-1,1'-бинафтила в 2 мл диоксана и нагревают с обратным холодильником в течение 3,5 часов. Реакционную смесь выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа) и остаток обрабатывают этилацетатом, водой и насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют, сушат на сульфате магния и растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа). Остаток хроматографируют на силикагеле, элюируя градиентом гептан-этилацетат-метиленхлорид-метанол 50-50-0, 25-75-0, 0-100-0 и, наконец 0-100-3. Получают 400 мг (Выход=83%) целевого продукта в виде масла.

ССМ: Rf=0,55 (силикагель, элюент: этилацетат-метанол-триэтиламин 95-2-2).

ИК (CHCl ₃ ): 3435 (NH); 1717 (С=О); 1583; 1555; 1501 см^-1 (гетероцикл+ароматический+амид)

1H-ЯМР (DМSO-d6): δ 1,06 (т, 3Н, СН₂-СН ₃); 1,31 (с, 9H, tBu); 1,75 (м, 2H, CH₂-CH ₂-CH₂-NH); 1,77 (м, 4H, CH ₂-CH-CH ₂); 2,46 (м, 2H, СН ₂-СН₃); 2,53 (м, 1Н, CH₂-CH-CH₂); 2,62 (т, 2H, CH ₂-CH₂-CH₂-NH); 2,83 и 3,44 (2м, 4H, CH₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂); 3,24 (м, 2H, CH₂-CH₂-CH ₂-NH); 3,72 (м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,23 (кв, 1Н, NH-CH₂-CH-NH); 5,02 (с, 2H, СН ₂-Ph), 6,24 (с, 1Н, CH₂-CH₂-CH₂-NH); 6,30 и 7,06 (2д, 2H, H нафтиридин); 6,36 (м, 1Н, NH-CH₂-CH-NH); 7,34 (м, 5H, Ph); 7,62 (д, 1Н, NH-CH₂-CH-NH); 8,11 ч./млн (с, N=CH-N).

Масс-спектр: 616 (MН+); 560 (МН-tBu+); 426 (MH-COOCH₂Ph+).

[α _D ] (1,05% EtOH): -6,1.

Встряхивают 475 мг (0,77 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината в 15 мл дихлорметана с 3,5 мл трифторуксусной кислоты при температуре окружающей среды до исчезновения исходного продукта в ССМ (силикагель, элюент: CH₂Cl₂-MeOH-H₂O-AcOH 90-10-1-1). Добавляют толуол и выпаривают реакционную смесь досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток растворяют в минимальном количестве дихлорметана с небольшим количеством метанола, затем выливают на простой диизопропиловый эфир. Осадок фильтруют. Получают 368 мг (Выход=61%, выражен в дитрифторацетате) целевого продукта в виде аморфного вещества.

ССМ: Rf=0,33 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 90-10-1-1).

ИК (CHCl ₃ ): 1677 (С=0); 1625; 1587; 1492 см^-1 (сопряженная система + ароматический).

1H-ЯМР (DМSO-d6): δ 1,04 (т, 3Н, СН₂-СН ₃); 1,77 и 1,90 (2м, 4H, N-CH₂-CH ₂-CH-); 1,81 (м, 2H, NH-CH₂-CH ₂-CH₂-); 2,45 (кв, 2H, СН ₂-СН₃); 2,73 (т, 2H, NH-CH₂-CH₂-CH ₂-); 2,78 (т, 1H, N-CH₂-CH₂-CH-); 2,87 и 3,48 (2м, 4H, N-CH ₂-CH₂-CH-); 3,23 (м, 2H, N-CH ₂-CH₂-CH₂-); 3,58 и 3,83 (2м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,28 (кв, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 5,01 (сист AB, 2H, O-CH ₂-Ph); 6,65 (д, 1H, H нафтиридин); 6,55 (уш. с, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 7,33 (м, 5H, Ph); 7,68 (д, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 7,58 (д, 1H, H нафтиридин); 8,15 (с, 1H, N=CH-N); 6,24 ч./млн (уш. с, 1H, NH-CH₂-CH₂-CH₂-).

Масс-спектр: 560 (MН+); 426 (MH-COOCH₂Ph+); 558- (М-Н-); 450- (558-ОСН₂Рh-); 1117- (2М-Н-).

[α _D ] (1% CHCl₃): +2,4.

Пример 10

(1,1-диметилэтил)-N-[(фенилметокси)карбонил]аланинат

В 480 мг (2 ммоль) N-[(фенилметокси)карбонил]аланиновой кислоты в 15 мл третбутилацетата вводят по каплям 1 мл перхлорной кислоты. Двухфазную смесь встряхивают в течение 24 часов. Смесь обрабатывают этилацетатом, водой и насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют, сушат на сульфате магния и растворитель выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток хроматографируют на силикагеле, элюируя градиентом гептан-этилацетат-метанол 100-0-0, 0-100-0, и наконец, 0-95-05. Получают 50 мг (Выход=10%) целевого продукта в виде масла.

ССМ: Rf=0,20 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 90-10-1-1).

[α _D ] (1,25% CHCl ₃ ): -9,0.

Нагревают с обратным холодильником 200 мг (0,5 ммоль) 4-бром-5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидина, 50 г (0,17 ммоль) (D)(1,1-диметилэтил)-3-амино-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината, 40 мг (0,26 моль) фторида цезия, 15 мг (0,016 ммоль) трис(дибензилиденацетона)дипалладия(0), 20 мг (0,032 ммоль) 2,2'-бис(дифенилфосфин)-1,1'-бинафтила в 20 мл диоксана в течение 5 часов. Охлаждают, затем повторно вводят 15 мг (0,016 ммоль) трис(дибензилиденацетона)дипалладия(0) и нагревают с обратным холодильником в течение 15 часов. Реакционную смесь выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа) и остаток обрабатывают этилацетатом, водой и насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют, сушат на сульфате магния и растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа). Остаток хроматографируют первый раз на оксиде алюминия, элюируя градиентом этилацетат-простой диизопропиловый эфир-метиленхлорид от 50-50-50, 10-50-50 и, наконец, 10-20-70, затем на силикагеле, элюируя этилацетатом. Получают 40 мг (Выход=38%) целевого продукта в виде масла.

ССМ: Rf=0,25 (силикагель, элюент: этилацетат).

Масс-спектр: 616 (MН+); 560 (МН-tBu+).

[α _D ] (1,0% СНСl₃): -2,4.

Встряхивают 40 мг (0,77 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината в 10 мл дихлорметана с 1 мл трифторуксусной кислоты при температуре окружающей среды до исчезновения исходного продукта в ССМ (силикагель, элюент: CH₂Cl₂-MeOH-H₂O-AcOH 90-10-1-1). Добавляют толуол и выпаривают реакционную смесь досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток хроматографируют на силикагеле, элюируя смесью CH₂Cl₂-MeOH-H₂O-AcOH 90-10-1-1. Получают 25 мг (Выход=48%, выражено в дитрифторацетате) целевого продукта в виде твердого аморфного вещества.

ССМ: Rf=0,10 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 90-10-1-1).

[α _D ] (1,75% CHCl₃): -6,0.

Пример 11

Дихлоргидрат 3-[[5-этил-6-[4-[(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]этилаланината

В 5 мл этанола, охлажденного до -12°С в атмосфере азота, вводят 160 мкл (2,19 ммоль) тионилхлорида и смесь встряхивают в течение 30 минут. Затем вводят раствор 354 мг (0,45 ммоль) 3-[[5-этил-6-[4-[(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланина, бис(трифторацетата) в 13 мл этанола. Смесь встряхивают в течение 30 мин при -12°С, затем оставляют для нагревания до температуры окружающей среды и, наконец, нагревают до 40°С в течение 4 часов в атмосфере азота. Реакционную смесь выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа) и остаток кристаллизуют в смеси простого диизопропилового эфира и пентана и твердое вещество отфильтровывают. Получают 284 мг (Выход=95%) целевого продукта в виде твердого аморфного вещества бежевого цвета.

1H-ЯМР (DМSO-d6): δ 1,09 (т, 3Н, СН₂-СН ₃); 1,14 (т, 3H, О-СН₂-СН ₃); 1,85 (м, 2Н, NH-CH₂-CH ₂-CH₂); 1,85 и 2,00 (2м, 4H, N-CH₂-CH ₂-CH); 2,48 (м, 2Н, СН ₂-СН₃); 2,75 (т, 2Н, NH-CH₂-CH₂-СН ₂); 2,92 (м, 1Н, N-CH₂-CH₂-CH); 3,03 и 3,57 (2м, 4H, N-CH ₂-CH₂-CH); 3,44 (т, 2H, N-СН ₂-СН₂-СН₂); 3,76 и 3,87 (2м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,07 (кв, 2H, O-CH ₂-CH₃); 4,39 (кв, 1Н, NH-CH₂-CH-NH); 5,03 (с, 2H, O-CH ₂-Ph); 6,62 (д, 1Н, H нафтиридин); 6,86 (уш. с, 1Н, NH-CH₂-CH-NH), 7,30 (м, 5H, Ph); 7,33 (уш. с, 1Н, NH-CH₂-CH-NH); 7,58 (д, 1Н, H нафтиридин); 8,20 ч./млн (с, 1Н, N=CH-N).

Масс-спектр: 588 (MН+); 454 (МН-СООСН₂Рh); 426 (MH-NHCOOCH₂Ph+).

[α _D ] (1% CHCl₃): +4.

Пример 12

N-[(фенилметокси)карбонил]этилаланинат

В 12 мл этанола, охлажденного до 0°С в атмосфере азота, вводят 6 мл (63 ммоль) тионилхлорида и смесь встряхивают в течение 20 минут при температуре окружающей среды. Затем вводят раствор 950 мг (4 ммоль) N-[(фенилметокси)карбонил]аланиновой кислоты в 5 мл этанола. Смесь встряхивают при нагревании с обратным холодильником в течение 1 часа в атмосфере азота. Реакционную смесь выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа) и остаток кристаллизуют в смеси простого диизопропилового эфира и пентана и твердое вещество отфильтровывают. Полученное твердое вещество обрабатывают этилацетатом, водой и насыщенным раствором бикарбоната натрия. Получают 535 мг (Выход=50%) целевого продукта в виде бесцветного масла.

ВЭЖХ/масс-спектр: (tr=0,5 и 1,4 мин) 267 (МН+).

[α _D ] (1,0% CHCl₃): -11,2.

Синтез 3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]этилаланината.

Нагревают с обратным холодильником 320 мг (0,8 ммоль) 4-бром-5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]пиримидина, 215 мг (0,14 ммоль) (D) 3-амино-N-[(фенилметокси)карбонил]этилаланината, 190 мг (1,25 ммоль) фторида цезия, 37 мг (0,04 ммоль) трис(дибензилиденацетона)дипалладия(0), 50 мг (0,08 ммоль) S(-)-2,2'-бис(дифенилфосфин)-1,1'-бинафтила в 15 мл диоксана в течение 5 часов. Охлаждают, затем повторно вводят 37 мг (0,04 ммоль) трис(дибензилиденацетона)дипалладия(0) и нагревают с обратным холодильником в течение 7 часов. Реакционную смесь выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа) и остаток обрабатывают этилацетатом, водой и насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют, сушат на сульфате магния и растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа). Остаток хроматографируют на оксиде алюминия, элюируя градиентом этилацетат-простой диизопропиловый эфир-метиленхлорид 50-50-50, 10-50-50 и, наконец 10-20-70. Получают 260 мг (Выход=55%) целевого продукта в виде масла.

ССМ: Rf=0,25 (силикагель, элюент: этилацетат).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,16 (т, 3Н, СН₂-СН ₃); 1,27 (т, 3H, O-CH₂-CH ₃); 1,85-2,00 (м, 6H, N-CH₂-CH ₂-CH и NH-CH₂-CH ₂-CH₂); 2,46 (м, 2H, СН ₂-СН₃); 2,75 (т, 3H, NH-CH₂-CH₂-CH ₂ и N-CH₂-CH₂-CH); 3,89 (т, 2H, N-CH ₂-CH₂-CH₂); 3,47 и 3,61 (2м, 4H, N-CH ₂-CH₂-CH); 3,00 и 3,98 (2м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,22 (м, 2H, O-CH ₂-CH₃); 4,54 (м, 1Н, NH-CH₂-CH-NH); 5,13 (с, 2H, O-CH ₂-Ph); 6,43 (д, 1Н, H нафтиридин); 7,22 (д, 1Н, H нафтиридин); 7,35 (м, 5H, Ph); 8,27 ч./млн (с, 1Н, N=CH-N).

Масс-спектр: 558 (MН+); 454 (МН-СООСН₂Рh+).

[α _D ] (1,3% СНСl₃): -6,0.

Пример 13

Синтез 6-[4-[(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-этил-4-хлорпиримидина:

В одногорлую колбу, содержащую 12,5 г (57,5 ммоль) 4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидина, полученного из его соли, вводят 80 мл диметилацетамида, 11,8 г (30 ммоль) 4,6-дихлор-5-этилпиримидина в растворе в 40 мл диметилацетамида и 24 мл диизопропилэтиламина. Эту смесь нагревают до 140°С в течение 5 часов, затем концентрируют досуха в вакууме. Полученный остаток обрабатывают смесью воды, этилацетата и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют и водную фазу повторно экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат на сульфате магния, затем растворитель выпаривают досуха в вакууме и получают 15,5 г оранжеватого масла. Это масло растворяют в минимальном количестве метиленхлорида и осаждают в простом изопропиловом эфире, получают 9 г целевого продукта в виде порошка бежевого цвета. Фильтрат концентрируют досуха, затем хроматографируют на силикагеле, элюируя градиентом циклогексана (100%), этилацетата-циклогексана (50-50), затем этилацетата-циклогексана (70-30).

Получают 3 г целевого продукта в виде бледно-желтого порошка (общий выход = 58%).

28,5 г нафтиридина вытесняют из его соли 6 масс-эквивалентами щелочной смолы amberlyst А21 (смола типа R-NМe₂) в смеси CH₂Cl₂/MeOH/AcOEt 1/1/1, встряхивая в течение 30 минут. Смолу предварительно промывают и оставляют на 20 минут для набухания в этой смеси растворителя.

Указанную операцию повторяют 3 раза до полного вытеснения из соли.

После фильтрования смолы и выпаривания растворителей получают 12,5 г (57,5 ммоль) свободного нафтиридина.

ССМ: Rf=0,32 (силикагель, элюент: этилацетат (100%)).

1H-ЯМР (): δ 1,32 (т, 3Н, СН ₃-СН₂); 1,81-2,05 (м, 6H, NH-CH₂-CH ₂-CH₂, N-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂); 2,70 (м, 5H, CH₂-CH-CH₂, NH-CH₂-CH₂-CH ₂, СН₃-СН ₂); 3,43 (м, 2H, NH-CH₂-CH₂-CH ₂); 3,05 и 3,97 (2м, 4H, CH₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂); 6,4 и 7,12 (2д, 2H, CH=CH нафтиридин); 8,37 (с, 1H, N=CH-N).

ВЭЖХ/масс-спектр: (tr= 0,51 и 2,93 мин); 358 (MН+).

Синтез 3-[[-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-этил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]изопропилаланината.

Смесь 1 г (2,79 ммоль) 6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-этил-4-хлорпиримидина и 940 мг (3,35 ммоль) 3-амино-N-[(фенилметокси)карбонил]изопропилаланината в присутствии 594 мг (3,91 ммоль) фторида цезия, 174 мг (279 мкмоль) (2,2'-бис(дифенилфосфин)-1,1'-бинафтила и 130 мг (140 мкмоль) трис(дибензилиденацетон)дипалладия(0) в 35 мл 1,2-диметоксиэтана нагревают с обратным холодильником в течение 5 часов. Реакционную смесь затем доводят до температуры для введения 180 мг (140 мкмоль) трис(дибензилиденацетон)дипалладия(0), затем повторно нагревают с обратным холодильником в течение 16 часов.

После охлаждения раствор концентрируют досуха, затем обрабатывают смесью воды, этилацетата и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу декантируют и водную фазу экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат на сульфате магния и выпаривают досуха в вакууме. Остаток хроматографируют на силикагеле с помощью 100% этилацетата. Получают 1,07 г целевого продукта в виде кристаллического светло-желтого вещества (выход = 64%).

ССМ: Rf=0,20 (силикагель, элюент: этилацетат 100%).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,18 (т,, 3H, СН ₃-СН₂); 1,25 (д, 6H, СН₃-СН-СН₃); 1,83-2,05 (м, 6H, NH-CH₂-CH ₂-CH₂, N-CH₂-CH ₂-CH-СН ₂); 2,45 (кв, 2H, CH₃-CH ₂); 2,72 (м, 3H, CH₂-CH-CH₂, NH-CH₂-CH₂-CH ₂); 2,97 и 3,93 (2м, 4H, CH₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂); 3,45 (м, 2H, NH-CH ₂-CH₂-CH₂); 3,60 (д, 2H, NH-CH ₂-CH-NH), 4,50 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 4,97-5,20 (м, 3H, CH₃-CH-CH₃, O-CH ₂-Ph); 6,43 и 7,18 (2д, 2H, CH=CH нафтиридин); 7,35 (м, 5H, Ph); 8,28 (с, 1H, N=CH-N).

ВЭЖХ/масс-спектр: (tr=0,50 мин и 3,14 мин): 602(MН+); 468 [МН-Z+]; 426 [MH-(ipr-Z)+].

[α _D ] (CHCl₃): +2,175.

Получение хлоргидрата:

3,2 г (5,3 ммоль) 3-[[-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-этил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]изопропилаланината растворяют в минимальном количестве метиленхлорида. Этот раствор выливают на простой этиловый эфир, раствор должен оставаться прозрачным. Затем по каплям при встряхивании вводят 2,65 мл HCl 2N в простом этиловом эфире. Образуется хлоргидрат, отстоявшуюся жидкость удаляют, затем остаток повторно кристаллизуют в простом изопропиловом эфире. Получают твердое вещество, которое фильтруют, промывают простым эфиром, затем пентаном. После сушки получают 3,5 г порошка грязно-белого цвета (выход = количественный)

Пример 14

Синтез 2-(2-бензилоксикарбониламино-3-{5-этил-6-[4-(5,6,7,8-тетрагидро-[1,8]-нафтиридин-2-ил)-пиперидин-1-ил]- пиримидин-4-иламино}пропиниламино)-третбутилметилпентаноата

Встряхивают 80 мг (0,15 ммоль) 3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланина, 45 мг (0,20 ммоль) третбутил-L-лейцинат-хлоргидрата, 22 мг (0,16 ммоль) 1-гидроксибензотриазола, 30 мг (0,16 ммоль) 1-[3-(диметиламино)пропил]-3-этилкарбодиимидхлоргидрата, 0,050 мл (0,45 ммоль) N-метилморфолина и 0,070 мл (0,50 ммоль) триэтиламина в 5 мл диметилформамида в течение 24 часов при температуре окружающей среды. Выпаривают реакционную смесь досуха при пониженном давлении (2 кПа) и остаток обрабатывают этилацетатом и насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют, сушат на сульфате магния и растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа). Осадок хроматографируют, элюируя градиентом этилацет-метиленхлорид-метанол от 50-50-0 до 50-45-5. Получают 60 мг (Выход=55%) целевого продукта в виде твердого вещества белого цвета.

ССМ: Rf=0,66 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 85-15-2-2).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 0,91 (т, 3H, СН₂-СН ₃); 1,16 (д, 6H, CHCH₂CH(CH ₃ ) ₂); 1,28 (уш. т, 2H, CHCH ₂CH(СН₃)₂); 1,41-1,57 (м, 1H, CHCH₂ CH(CH₃)₂); 1,48 (с, 9H, tBu); 1,80-2,05 (м, 6H, CH₂-CH ₂-CH₂-NH, CH ₂-CH-СН ₂); 2,49 (м, 2H, СН ₂-СН₃); 2,67 (тт, 1H, СН₂-СН-СН₂); 2,73 (т, 2H, СН ₂-СН₂-СН₂-NН); 2,98 и 3,66 (уш. кв и м, 4H, СН₂-СН ₂-N-СН ₂-СН₂); 3,43 (м, 2H, CH₂-CH₂-CH ₂-NH); 3,70 и 4,16 (2м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,32 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 4,49 (м, 1H, CONH-CHCH₂CH(CH₃)₂)-CO); 5,13 (м, 2H, CH ₂-Ph); 5,42, 6,83 и 7,92 (3Н, Н мобильные); 6,43 и 7,15 (2д, 2Н, Н нафтиридин); 7,37 (м, 5Н, Ph); 8,2 ч/млн (с, 1Н, N=CH-N).

Масс-спектр: 729 (МН+).

Синтез 2-(2-бензилоксикарбониламино-3-{5-этил-6-[5,6,7,8-тетрагидро-[1,8]нафтиридин-2-ил)пиперидин-1-ил]пиримидин-4-иламино}пропиниламино)-4-метилвалериановой кислоты

Встряхивают 60 мг (0,083 ммоль) третбутил-2-(2-бензилоксикарбониламино-3-{5-этил-6-[5,6,7,8-тетрагидро-[1,8]нафтиридин-2-ил)пиперидин-1-ил]пиримидин-4-иламино}пропиниламино)-4-метилпентаноата в 5 мл дихлорметана с 0,5 мл трифторуксусной кислоты при температуре окружающей среды до исчезновения исходного продукта в ССМ (силикагель, элюент: CH₂Cl₂-MeOH-H₂O-AcOH 90-10-1-1). Добавляют толуол и выпаривают реакционную смесь досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток растворяют в минимальном количестве дихлорметана с небольшим количеством метанола, затем выливают на простой диизопропиловый эфир. Осадок фильтруют. Получают 55 мг (Выход=74%, выражен в дитрифторацетате) целевого продукта в виде твердого вещества белого цвета.

ССМ: Rf=0,52 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 85-15-2-2).

Масс-спектр: 673 (MН+).

Пример 15

Синтез 4,6-дигидрокси-5-пропилпиримидина

В раствор 7,5 г(94 ммоль) формамидинхлоргидрата в 200 мл этанола, охлажденный до 0°С, вводят 102 мл (282 ммоль) 21% раствора этилата натрия в этаноле и встряхивают смесь в течение 30 минут; затем вводят раствор 19,5 мл (94 ммоль) диэтилпропилмалоната в 50 мл этанола и встряхивают в течение ночи при температуре окружающей среды. Реакционную смесь выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток обрабатывают 100 мл насыщенного раствора хлоридом натрия и экстрагируют 800 и 200 мл н-бутанола. Органические фазы сушат на сульфате натрия, фильтруют и выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа). Получают 7,3 г (Выход=50%) целевого продукта в виде твердого вещества бежевого цвета.

1H-ЯМР (DMSO d6): δ 0,85 (т, 3Н, СН₂-СН₂-СН ₃); 1,39 (секст, 2Н, СН₂-СН ₂-СН₃); 2,23 (т, 2Н, СН ₂-СН₂-СН₃); 7,85 ч./млн (с, N=CH-N).

Масс-спектр: 155 (МН+); 159 (М-Н-).

Синтез 4,6-дихлор-5-пропилпиримидина.

Смесь 3 г (19,5 ммоль) 5-пропил-4,6-дигидроксипиримидина в 20 г оксихлорида фосфора нагревают с обратным холодильником в течение 1 часа. После охлаждения до температуры окружающей среды вводят по каплям смесь 3 мл N,N-диэтиланилина в 10 мл оксихлорида фосфора и нагревают полученное с обратным холодильником в течение 4 часов. После охлаждения до температуры окружающей среды реакционную смесь выливают на смесь льда с водой, затем постепенно вводят бикарбонат натрия до получения щелочного рН. Экстрагируют этилацетатом, сушат на сульфате магния и выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток хроматографируют на оксиде алюминия, элюируя градиентом гептан-метиленхлорида от 100-0 до 80-20. Получают 2 г (Выход=54%) в виде твердого вещества голубоватого цвета.

ССМ: Rf=0,35 (силикагель, элюент: гептан-этилацетат 90-10).

Синтез 6-[4-[(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-пропил-4-хлорпиримидина:

В одногорлую колбу, содержащую 1,6 г (7,4 ммоль) 4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидина, полученного из его соли, вводят 50 мл диметилацетамида, 2 г (10,5 ммоль) 4,6-дихлор-5-пропилпиримидина и 4 мл диизопропилэтиламина. Эту смесь нагревают до 140°С в течение 5 часов, затем концентрируют досуха при пониженном давлении (2 кПа). Полученный остаток обрабатывают смесью воды, этилацетата и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют и водную фазу повторно экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат на сульфате магния, затем растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа). Остаток хроматографируют на силикагеле, элюируя градиентом гептан-метиленхлорид-этилацетат от 50-50-0 до 0-0-100. Получают 875 мг целевого продукта в виде твердого аморфного вещества (выход=50%).

ССМ: Rf=0,25 (силикагель, элюент: этилацетат (100%)).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,02 (т, 3Н, С-СН₂-СН₂-СН ₃); 1,72 (секст, 2H, С-СН₂-СН ₂-СН₃); 1,81-2,07 (м, 6H, NH-CH₂-CH ₂-CH₂, N-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂); 2,64 (т, 2H, С-СН ₂-СН₂-СН₃); 2,73 (м, 3Н, СН₂-СН-СН₂, NH-CH₂-CH₂-CH ₂); 3,46 (т, 2H, NH-CH ₂-CH₂-CH₂); 3,06 и 3,96 (м и д, 4H, CH₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂); 5,00 (м, 2H, NH-CH₂-CH₂-CH₂); 6,40 и 7,14 (2д, 2H, CH=CH нафтиридин); 8,38 (с, 1H, N=CH-N).

Масс-спектр: 372; 374 (MН+).

Синтез (1,1-диметилэтил)-3-[[5-пропил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината.

Нагревают с обратным холодильником 600 мг (1,62 ммоль) 4-хлор-5-пропил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]пиримидина, 590 мг (2 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-амино-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината (полученного в соответствии с J.Med.Chem. (2001), 44(8), 1158-1176), 380 мг (2,51 ммоль) фторида цезия, 76 мг (0,083 ммоль) трис(дибензилиденацетона)дипалладия(0), 102 мг (0,163 ммоль) 2,2'-бис(дифенилфосфин)-1,1'-бинафтила в 50 мл диоксана в течение 20 часов. Реакционную смесь выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа) и остаток обрабатывают этилацетатом, водой и насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют, сушат на сульфате магния и растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа). Остаток хроматографируют на оксиде алюминия, элюируя градиентом метиленхлорид-простой диизопропиловый эфир-этилацетат-метанол от 50-50-0-0 до 0-50-50-0, затем 0-0-100-0 и наконец 0-0-90-10. Получают 620 мг (Выход=61%) целевого продукта в виде твердого аморфного вещества желтого цвета.

ССМ: Rf=0,12 (силикагель, элюент: этилацетат).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 0,90 (т, 2H, С-СН₂-СН ₂-СН₃); 1,01 (т, 3H, C-СН₂-СН₂-СН ₃); 1,48 (с, 9H, tBu); 1,81-2,07 (м, 6H, NH-CH₂-CH ₂-CH₂, N-CH₂-CH ₂-CH-СН ₂); 2,39 (т, 2H, С-СН ₂-СН₂-СН₃); 2,65 (уш. т, 1H, CH₂-CH-CH₂); 2,73 (т, 2H, NH-CH₂-CH₂-CH ₂); 2,97 и 3,55 (уш. т и уш. д, 4H, CH₂-СН ₂-N-CH ₂-CH₂); 3,44 (м, 2H, NH-CH ₂-CH₂-CH₂); 3,85 и 3,93 (2м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,46 (м, 1H, NH-СН₂-CH-NH); 5,14 (с, 2H, CH ₂-Ph); 6,16 (д, 1H CH₂-CH₂-CH₂-NH); 6,44 (д, 1H, H нафтиридин); 7,15 (д, 1H, H нафтиридин), 7,37 (м, 5H, CH₂ Ph); 8,29 (с, 1H, N=CH-N).

Масс-спектр: 630 (MН+); 574 (МН-tBu+); 440 (MH-COOCH₂Ph+).

Синтез бис(трифторацетат) 3-[[5-пропил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланина.

Встряхивают 610 мг (0,97 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[[5-пропил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината в 50 мл дихлорметана с 5 мл трифторуксусной кислоты при температуре окружающей среды до исчезновения исходного продукта в ССМ (силикагель, элюент: CH₂Cl₂-MeOH-H₂O-AcOH 90-10-1-1). Добавляют толуол и выпаривают реакционную смесь досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток растворяют в минимальном количестве дихлорметана с небольшим количеством метанола, затем выливают на простой диизопропиловый эфир. Осадок фильтруют. Получают 400 мг (Выход=51%, выражен в дитрифторацетате) целевого продукта в виде твердого вещества бежевого цвета.

ССМ: Rf=0,40 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 85-15-2-2).

1H-ЯМР (DМSO d6): δ 0,93 (т, 3Н, С-СН₂-СН₂-СН ₃); l,48 (м, 2H, С-СН₂-СН ₂-СН₃); 1,67-2,00 (м, 6H, СН₂-СН ₂-СН₂-NН и СН ₂-СН-СН₂); 2,40 (т, 2H, С-СН ₂-СН₂-СН₃); 2,65-2,96 (м, 5H, NH-CH₂-CH₂-CH ₂-, N-CH₂-CH₂-CH-, N-СН ₂-CH₂-CH-); 3,32-3,51 (м, 4H, N-CH ₂-CH₂-CH- и NH-CH ₂-CH₂-CH₂-); 3,56 и 3,84 (2м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,31 (кв, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 5,02 (с, 2H, O-CH ₂-Ph); 6,68 (д, 1H, H нафтиридин); 7,33 (м, 5H, Ph); 7,61 (м, 1H, H нафтиридин); 8,20 (с, 1H, N=CH-N).

Масс-спектр: 574 (MН+); 440 (MH-COOCH₂Ph+); 572- (М-Н-); 464- (572-ОСН₂Рh-); 1145- (2М-Н-).

[α _D ] (1,20% CHCl₃) -17,7.

Пример 16

Синтез 4,6-дигидрокси-5-изобутилпиримидина

В раствор 7,5 г (94 ммоль) формамидинхлоргидрата в 200 мл этанола, охлажденный до 0°С, вводят 102 мл (282 ммоль) 21% раствора этилата натрия в этаноле и встряхивают смесь в течение 30 минут; затем вводят раствор 20,6 мл (94 ммоль) диэтилпропилмалоната в 50 мл этанола и встряхивают в течение ночи при температуре окружающей среды. Реакционную смесь выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток обрабатывают 100 мл насыщенного раствора хлоридом натрия и экстрагируют 800 и 200 мл н-бутанола. Органические фазы сушат на сульфате натрия, фильтруют и выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа). Получают 13,7 г (Выход=86%) целевого продукта в виде твердого вещества бежевого цвета.

ССМ: Rf=0,53 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 85-15-2-2).

1H-ЯМР (DMSO d6): δ 0,81 (д, 6Н, СН₂-СН-(СН ₃ ) ₂); 1,85 (м, 1Н, -СН₂-СН-(СН₃)₂); 2,13 (д, 2Н, -СН ₂-СН-(СН₃)₂); 7,81 ч./млн (с, N=CH-N).

Масс-спектр: 169 (МН+); 167 (М-Н-).

Синтез 4,6-дихлор-5-изобутилпиримидина.

Смесь 3 г (17,9 ммоль) 5-изобутил-4,6-дигидроксипиримидина в 20 г оксихлорида фосфора нагревают с обратным холодильником в течение 1 часа. После охлаждения до температуры окружающей среды вводят по каплям смесь 3 мл N,N-диэтиланилина в 10 мл оксихлорида фосфора и нагревают полученное с обратным холодильником в течение 4 часов. После охлаждения до температуры окружающей среды реакционную смесь выливают на смесь льда с водой, затем постепенно вводят бикарбонат натрия до получения щелочного рН. Экстрагируют этилацетатом, сушат на сульфате магния и выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток хроматографируют на оксиде алюминия, элюируя градиентом гептан-метиленхлорида от 100-0 до 80-20. Получают 0,9 г (Выход=25%) коричневого масла.

ССМ: Rf=0,25 (силикагель, элюент: гептан-этилацетат 95-5).

Синтез 6-[4-[(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-изобутил-4-хлорпиримидина:

В одногорлую колбу, содержащую 0,95 г (4,4 ммоль) 4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидина, полученного из его соли, вводят 25 мл диметилацетамида, 0,9 г (4,4 ммоль) 4,6-дихлор-5-изобутилпиримидина и 2 мл диизопропилэтиламина. Эту смесь нагревают до 120°С в течение 5 часов, затем концентрируют досуха при пониженном давлении (2 кПа). Полученный остаток обрабатывают смесью воды, этилацетата и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют и водную фазу повторно экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат на сульфате магния, затем растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа). Остаток хроматографируют на силикагеле, элюируя градиентом гептан-метиленхлорид-этилацетат от 50-50-0 до 0-0-100. Получают 1 г целевого продукта в виде твердого вещества бежевого цвета (выход=60%).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 0,89 (д, СН₂-СН₂-СН-(CH ₃ ) ₂); 1,77-2,12 (м, 7H, NH-CH₂-CH ₂-CH₂, N-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂ и CH₂-CH-(СН₃)₂); 2,66 (д, 2H, -СН ₂-СН-(СН₃)₂); 2,73 (т, 2H, NH-CH₂-CH₂-CH ₂); 2,61-2,77 (1Н, скрытый, CH₂-CH-CH₂); 3,44 (м, 2H, NH-CH ₂-CH₂-CH₂); 3,03 и 3,87 (т и д, 4H, CH₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂); 5,11 (м, 2H, NH-CH₂-CH₂-CH₂); 6,41 и 7,15 (2д, 2H, CH=CH нафтиридин); 8,40 (с, 1Н, N=CH-N).

Масс-спектр: 386, 388 (MН+).

Синтез (1,1-диметилэтил)-3-[[5-изобутил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината.

Нагревают с обратным холодильником 450 мг (1,17 ммоль) 4-хлор-5-изобутил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]пиримидина, 413 мг (1,4 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-амино-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината (полученного в соответствии с J.Med.Chem. (2001), 44(8), 1158-1176), 275 мг (1,81 ммоль) фторида цезия, 55 мг (0,060 ммоль) трис(дибензилиденацетона)дипалладия(0), 75 мг (0,12 ммоль) 2,2'-бис(дифенилфосфин)-1,1'-бинафтила в 35 мл диоксана в течение 20 часов. Реакционную смесь выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа) и остаток обрабатывают этилацетатом, водой и насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют, сушат на сульфате магния и растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа). Остаток хроматографируют на оксиде алюминия, элюируя градиентом метиленхлорид-простой диизопропиловый эфир-этилацетат-метанол от 50-50-0-0 до 0-50-50-0, затем 0-0-100-0 и наконец 0-0-90-10. Получают 630 мг (Выход=83%) целевого продукта в виде твердого аморфного вещества желтого цвета.

ССМ: Rf=0,12 (силикагель, элюент: этилацетат).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 0,91 (д, 6H, CH₂-CH-(СН ₃ ) ₂); 1,49 (с, 9H, tBu); 1,77-2,07 (м, 7H, -CH₂-CH-(СН₃)₂), NH-CH₂-CH ₂-CH₂ и N-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂); 2,32 (д, 2H, -СН ₂-СН-(СН₃)₂); 2,65 (уш. т, 1H, CH₂-CH-CH₂); 2,73 (т, 2H, NH-CH₂-CH₂-CH ₂); 2,95 (уш. т, 2H CH₂-CH ₂-N-CH₂-CH₂); 3,44 (м 4H, CH₂-CH ₂-N-CH₂-CH₂ и NH-CH ₂-CH₂-CH₂); 3,85 и 3,92 (2м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,45 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 5,14 (с, 2H, CH ₂-Ph); 6,12 (д, 1H CH₂-CH₂-CH₂-NH); 6,43 (д, 1H, H нафтиридин); 7,16 (д, 1H, H нафтиридин), 7,37 (м, 5Н, СН₂ Ph); 8,31 (с, 1Н, N=CH-N).

Масс-спектр: 644 (MН+); 588 (МН-tBu+); 454 (MH-COOCH₂Ph+).

Синтез 3-[[5-изобутил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланина, бис(трифторацетат).

Встряхивают 620 мг (0,96 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[[5-изобутил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината в 50 мл дихлорметана с 5 мл трифторуксусной кислоты при температуре окружающей среды до исчезновения исходного продукта в ССМ (силикагель, элюент: CH₂Cl₂-MeOH-H₂O-AcOH 90-10-1-1). Добавляют толуол и выпаривают реакционную смесь досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток растворяют в минимальном количестве дихлорметана с небольшим количеством метанола, затем выливают на простой диизопропиловый эфир. Осадок фильтруют. Получают 525 мг (Выход=67%, выражен в дитрифторацетате) целевого продукта в виде твердого вещества бежевого цвета.

1H-ЯМР (DМSO d6): 0,83 (д, 6H, CH₂-CH-(СН ₃ ) ₂); 1,60-2,05 (м, 7H, -СН₂-СН-(СН₃)₂), NH-CH₂-CH ₂-CH₂ и N-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂); 2,35 (м, 2H, -CH ₂-CH-(СН₃)₂); 2,65-2,87 (м, 3Н, CH₂-CH-CH₂ и NH-CH₂-CH₂-CH ₂); 2,91 (уш. т, 2H CH₂-CH ₂-N-CH₂-CH₂); 3,42 (м 4H, CH₂-CH ₂-N-CH₂-CH₂ и NH-CH ₂-CH₂-CH₂); 3,57 и 3,84 (2м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,32 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 5,0 (с, 2H, CH ₂-Ph); 6,68 (д, 1H, H нафтиридин); 7,37 (м, 5H, CH₂ Ph); 7,66 (д, 1H, H нафтиридин); 7,59 (д, 1H СН₂-СН₂-СН₂-NН); 8,27 (с, 1H, N=CH-N).

Масс-спектр: 588 (MН+); 454 (MH-COOCH₂Ph+); 586- (М-Н-); 478- (586-ОСН₂Рh-); 1173- (2М-Н-).

[α _D ] (0,75% CHCl₃): +1,0.

Пример 17

Синтез 5-метокси-4,6-дигидроксипиримидина

В одногорлую колбу, содержащую 30 мл абсолютного этанола и 90 мл раствора этилата натрия в этаноле концентации 1,7 моль/л, вводят при 0°С небольшими порциями 5 г (6,2 ммоль) формамидинхлоргидрата. Встряхивают при температуре окружающей среды в течение примерно 20 минут, затем вводят по каплям 8,5 мл диметилметоксималоната. Продолжают встряхивать в течение 16 часов. После этого реакционную среду подкисляют чистой уксусной кислотой до получения рН от 4 до 5, затем концентрируют досуха в присутствии циклогексана. Полученное сырое вещество хроматографируют на силикагеле после сгущения, используя в качестве элюента смесь метиленхлорид-метанол (85-15) и 2% вода-уксусная кислота (1-1). Получают 9,5 г целевого продукта, содержащего небольшое количество солей ацетата натрия.

ССМ: Rf=0 (силикагель, элюент: метиленхлорид-метанол (85-15) и 2% вода-уксусная кислота (1-1).

1H-ЯМР (МeOD): δ 3,67 (с, СН₃-О); 7,73 (с, 1Н, N=CH-N); 2,00 (с, 3Н, СН₃-СОО-).

ВЭЖХ/масс-спектр: (tr=0,5 мин).

Синтез 4,6-дихлор-5-метоксипиримидина.

Смесь 5 г (35,2 ммоль) 5-метокси-4,6-дигидроксипиримидина и 40 г оксихлорида фосфора нагревают с обратным холодильником в течение 1 часа. После охлаждения до температуры окружающей среды вводят по каплям смесь 4,8 мл N,N-диэтиланилина и 18 мл оксихлорида фосфора.

Полученное повторно нагревают с обратным холодильником в течение 4 часов 30 мин. После охлаждения реакционную смесь медленно выливают на смесь льда с водой, затем нейтрализуют насыщенным раствором бикарбоната натрия. Эту водную фазу экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат на сульфате магния и выпаривают досуха в вакууме.

Полученный остаток очищают на кремнеземе, элюируя смесью циклогексана и ацетата (95-5).

Получают 2,5 г (Выход=40%) целевого продукта в виде порошка белого цвета.

ССМ: Rf=0,48 (силикагель, элюент: циклогексан-этилацетат (80-20)).

1H-ЯМР (МeOD): δ 4,00 (с, СН₃-О); 8,55 (с, 1Н, N=CH-N).

ВЭЖХ/масс-спектр: tr = 1,3 мин.

Синтез 6-[4-[(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-метокси-4-хлорпиримидина:

В одногорлую колбу, содержащую 800 мг (3,68 ммоль) 4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидина, полученного из его соли, вводят 2,2 г (12,3 ммоль) 4,6-дихлор-5-метоксипиримидина в растворе в 25 мл диметилацетамида и 3640 мкл диизопропилэтиламина. Эту смесь нагревают до 130°С в течение 2 часов, затем концентрируют досуха в вакууме. Полученный остаток обрабатывают смесью воды, этилацетата и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют и водную фазу повторно экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат на сульфате магния, затем растворитель выпаривают в вакууме. Остаток хроматографируют на оксиде алюминия, элюируя смесью циклогексана и ацетата (80-20). Получают 900 мг (выход = 68%) целевого продукта в виде желтого порошка.

2,4 г нафтиридина вытесняют из его соли 6 масс-эквивалентами щелочной смолы amberlyst А21 (смола типа R-NМe₂) в смеси CH₂Cl₂/MeOH/AcOEt 1/1/1, встряхивая в течение 30 минут. Смолу предварительно промывают и оставляют на 20 минут для набухания в этой смеси растворителя. Эту операцию повторяют 3 раза до полного вытеснения из соли. После фильтрации смолы и выпаривания растворителей получают 800 мг (3,68 ммоль) свободного нафтиридина (выход = 88%).

ССМ: Rf=0,4 (оксид алюминия, элюент: этилацетат-циклогексан (30-70)).

1H-ЯМР (МeOD): δ 1,75-1,95 (м, 6H, NH-CH₂-CH ₂-CH₂, N-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂); 2,70 (т, 1H, CH₂-CH-CH₂); 2,8 (м, 2H, NH-CH₂-CH₂-CH ₂); 3,15 и 3,75 (2м, 4H, CH₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂); 3,75 (с, CH₃-О); 6,4 и 7,15 (2д, 2H, CH=CH нафтиридин); 8,1 (с, 1H, N=CH-N).

ВЭЖХ/масс-спектр: (tr= 0,53 и 2,56 мин); 359 (М); 360 (MН+); 361 (М+2Н++).

Синтез (1,1-диметилэтил)-3-[[6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-метокси-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината.

Cмесь 300 мг (0,83 ммоль) 6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-метокси-4-хлорпиримидина и 295 мг (1 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-амино-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината (полученного в соответствии с J.Med.Chem. (2001), 44(8), 1158-1176) в присутствии 177 мг (1,17 ммоль) фторида цезия, 52 мг (83 мкмоль) 2,2'-бис(дифенилфосфин)-1,1'-бинафтила и 40 мг (42 мкмоль) трис(дибензилиденацетон)дипалладия(0) в 10 мл диоксана нагревают с обратным холодильником в течение 3 часов 30 мин. Реакционную смесь охлаждают. Затем вводят 0,5 ммоль (1,1-диметилэтил)-3-амино-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината и 1,17 ммоль фторида цезия, 83 мкмоль 2,2'-бис(дифенилфосфин)-1,1'-бинафтила и 42 мкмоль трис(дибензилиденацетон)дипалладия(0), затем нагревают реакционную смесь с обратным холодильником в течение еще 8 часов.

После охлаждения раствор концентрируют досуха и обрабатывают смесью воды, этилацетата и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу декантируют и водную фазу экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат на сульфате магния и выпаривают досуха в вакууме. Остаток хроматографируют на оксиде алюминия градиентом изопропилового эфира и этилацетата (70-30, 60-40, 50-50), заканчивая этилацетатом 100%. Фракции, содержащие целевой продукт, объединяют для повторной очистки на силикагеле градиентом 100% этилацетата. Получают целевой продукт в виде бледно-желтого масла, которое обрабатывают смесью простого изопропилового эфира и пентана и получают 220 мг (выход=43%) белого порошка.

ССМ: Rf=0,3 (оксид алюминия элюент: простой изопропиловый эфир-этилацетат 60-40).

1H-ЯМР (МeOD): δ 1,46 (с, 9H, tBu); 1,80 (м, 2H, NH-CH₂-CH ₂-CH₂); 1,90 (м, 4H, N-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂); 2,65 (м, 1H, CH₂-CH-CH₂); 2,69 (т, 2H, NH-CH₂-CH₂-CH ₂); 2,95 и 3,78 (2м, 4H, CH₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂); 3,38 (т, 2H, NH-CH ₂-CH₂-CH₂); 3,59 (с, СН₃-О); 4,35 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 4,45 (д, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 5,03 и 5,12 (сист. AB, 2H, O-CH ₂-Ph); 6,38 и 7,15 (2д, 2H, CH=CH нафтиридин); 7,32 (м, 5H, Ph); 7,90 (с, 1H, N=CH-N).

ВЭЖХ/масс-спектр: (tr=3,4 мин): 618(MН+); 562 (МН-tBu); 428 [(MH-tBu-Z+)].

Синтез соответствующей кислоты:

Встряхивают при температуре окружающей среды 200 мг (0,32 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[[5-метокси-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-метил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината и 1,5 мл трифторуксусной кислоты в 15 мл дихлорметана в течение 8 часов. Добавляют толуол и выпаривают смесь досуха. Получают 350 мг масла желтого цвета, это масло обрабатывают минимальным количеством метиленхлорида, осаждают в простом изопропиловом эфире и получают таким образом неочищенную соль трифторацетата. Повторно осаждают в простом эфире до очищения (контролируют с помощью ССМ). Окончательно получают 156 мг целевого продукта (Выход=71%) в виде белого порошка.

1H-ЯМР (МeOD): δ 1,85 (м, 2H, NH-CH₂-CH ₂-CH₂); 2,00 (м, 4H, N-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂); 2,83 (т, 2H, NH-CH₂-CH₂-CH ₂); 3,90 (м, 1H, CH₂-CH-CH₂); 3,12 и 3,72 (2м, 4H, CH₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂); 3,52 (т, 2H, NH-CH ₂-CH₂-CH₂); 3,62 (с, 3Н, СН₃-О); 4,52 (м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,60 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 5,06 и 5,10 (сист. AB, 2H, O-CH ₂-Ph); -6,65 и 7,62 (2д, 2H, CH=CH нафтиридин); 7,43 (м, 5H, Ph); 8,00 (с, 1H, N=CH-N).

ВЭЖХ/масс-спектр: (tr=0,5 мин и 2,75 мин): 562 (MН+); 428 [MH-(tBu-Z+)]; 428.

Пример 18

Синтез 4,6-дибром-5-фторпиримидина

1. В раствор 5,83 г (56 ммоль) формамидинацетата в 300 мл этанола, охлажденный до 0°С, вводят 60,7 мл (168 ммоль) 21% раствора этилата натрия в этаноле и встряхивают смесь в течение 30 минут; затем вводят раствор 10 г (56 ммоль) диэтилфтормалоната в 25 мл этанола и встряхивают в течение ночи при температуре окружающей среды. Смесь охлаждают до 0°С, затем вводят 17,85 мл концентрированной соляной кислоты до получения рН 6. Осадок фильтруют, затем последовательно промывают водой, изопропанолом, простым диэтиловым эфиром и, наконец, пентаном. Получают 14,2 г (теоретически 7,3 г) целевого продукта и минеральных солей, используемых как таковые в дальнейшем.

2. Смесь 14,2 г (56 ммоль) 5-фтор-4,6-дигидроксипиримидина в 21 г оксибромида фосфора нагревают до 200°С в течение 3 часов. После охлаждения до температуры окружающей среды реакционную смесь обрабатывают смесью ледяной воды и бикарбоната натрия и экстрагируют этилацетатом, промывают органические фазы водой, сушат на сульфате магния и выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток хроматографируют на силикагеле, элюируя градиентом метиленхлорид-гептана от 0-100 до 100-0. Получают 850 мг (Выход=0,6%) целевого продукта в виде твердого вещества бежевого цвета, используемого как таковое в дальнейшем.

ССМ: Rf=0,50 (силикагель, элюент: дихлорметан-гептан 50-50).

Синтез 4-бром-5-фтор-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]пиримидина.

Смесь 840 мг (1,5 ммоль) 1,2,3,4-тетрагидро-7-(4-пиперидинил)-1,8-нафтиридина, трис(трифторацетата) (полученного в соответствии с ЕР1065207 или WO 0078317) и 5 г смолы Amberlyst A-21 (производство Fluka 06424, предварительно промытой раствором дихлорметан-этилацетат-метанол 1-1-1) в 100 мл раствора дихлорметан-этилацетат-метанол 1-1-1 встряхивают при температуре окружающей среды в течение 1 часа. Смесь фильтруют, смолу промывают трехкомпонентным раствором. Полученный фильтрат встряхивают при температуре окружающей среды в течение 1 часа в присутствии 5 г смолы Amberlyst A-21, обработанной как указано выше. Полученный фильтрат концентрируют досуха при пониженном давлении (2 кПа) и получают 320 мг свободного амина. В этот остаток вводят 384 мг (1,5 ммоль) 4,6-дибром-5-фторпиримидина, 6 мл диметилацетамида и 1,5 мл диизопропилэтиламина и нагревают до 130°С в течение 1,5 часов. Реакционную смесь выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа) и обрабатывают остаток этилацетатом, водой и насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют, сушат на сульфате магния и растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа). Остаток хроматографируют на силикагеле, элюируя гептан-этилацетатом 50-50. Получают 300 мг (Выход=52%) целевого продукта в виде аморфного твердого вещества.

ССМ: Rf=0,15 (силикагель, элюент: гептан-этилацетат 50-50).

ИК (CHCl ₃ ): 3440 (NH); 1573; 1542; 1503; см^-1 (Гетероцикл).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,82, 1,92 и 2,02 (дт, т и д 6H, СН₂-CH ₂-CH₂-NH и СН ₂-СН-СН ₂); 2,72 (т, 2H, CH ₂-CH₂-CH₂-NH); 2,80 (уш. т, 1H, CH₂-CH-CH₂); 3,13 и 4,68 (уш. т и д, 4H, CH₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂); 3,42 (м, 2H, CH₂-CH₂-CH ₂-NH); 5,00 (м, 1H NH); 6,37 (д, 1H, нафтиридин); 7,14 (д, 1H, нафтиридин); 8,11 ч./млн (с, N=CH-N).

Масс-спектр: 392(MH+).

Синтез (1,1-диметилэтил)-3-[[5-фтор-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината.

Нагревают с обратным холодильником смесь 280 мг (0,72 ммоль) 4-бром-5-фтор-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]пиримидина, 253 мг (0,86 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-амино-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината (полученного в соответствии с J.Med.Chem. (2001), 44(8), 1158-1176), 152 мг (1,00 моль) фторида цезия, 33 мг (0,036 ммоль) трис(дибензилиденацетона)дипалладия(0), 45 мг (0,072 ммоль) 2,2'-бис(дифенилфосфин)-1,1'-бинафтила в 50 мл диоксана в течение 6 часов. Охлаждают, затем повторно вводят 125 мг (0,43 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-амино-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината, 152 мг (1,0 ммоль) фторида цезия, 33 мг (0,036 ммоль) трис(дибензилиденацетона)дипалладия(0), 45 мг (0,072 ммоль) 2,2'-бис(дифенилфосфин)-1,1'-бинафтила и нагревают с обратным холодильником в течение 4 часов. Реакционную смесь выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа) и остаток обрабатывают этилацетатом, водой и насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют, сушат на сульфате магния и растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа). Остаток хроматографируют на силикагеле, элюируя градиентом гептан-этилацетат-метанол от 100-0-0 до 0-100-0 и, наконец 0-95-5. Полученный продукт повторно хроматографируют на оксиде алюминия, элюируя смесью гептан-метиленхлорид 50-50, затем этилацетат-простой диизопропиловый эфир 50-50. Получают 300 мг (Выход=70%) целевого продукта в виде масла желтого цвета.

ССМ: Rf=0,35 (силикагель, элюент: этилацетат).

ИК (CHCl ₃ ): 3439 (NH); 1718 (С=О); 1609; 1503 см^-1 (гетероцикл+ароматический+амид)

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,47 (с, 9Н, tBu); 1,70-2,05 (м, 6Н, СН₂-СН ₂-СН₂-NH и СН ₂-СН-СН ₂); 2,73 (т, 2Н, СН ₂-СН₂-СН₂-NH); 2,80 (уш. т, 1Н, СН₂-СН-СН₂); 3,01 и 3,90 (уш. т и м, 4Н, СН₂-СН ₂-N-СН ₂-СН₂); 3,43 (м, 2Н, СН₂-СН₂-СН ₂-NH); 4,42 (м, 1Н, NH-СН₂-СН-NH); 4,51 (уш. д, 2Н, NH-СН ₂-СН-NH); 5,11 (м, 1Н NH); 5,14 (с, 2Н, СН ₂-Ph); 6,12 (м, 1Н СН₂-СН₂-СН₂-NH); 6,37 (д, 1Н, нафтиридин); 7,16 (д, 1Н, нафтиридин); 7,35 (м, 5Н, Ph); 7,98 ч./млн (с, N=CH-N).

Масс-спектр: 606 (MН+); 550 (МН-tBu+); 416 (550-COOCH₂Ph+), 604-[(M-H)], 650-[(604+HCOOH)]-, 496-[(604-OCH₂Ph)]-.

[α _D ] (1,0% CHCl₃): +4,4.

Синтез бис(трифторацетат) 3-[[5-фтор-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланина.

Встряхивают 290 мг (0,48 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[[5-фтор-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината в 40 мл дихлорметана с 4 мл трифторуксусной кислоты при температуре окружающей среды до исчезновения исходного продукта в ССМ (силикагель, элюент: CH₂Cl₂-MeOH-H₂O-AcOH 90-10-1-1). Добавляют толуол и выпаривают реакционную смесь досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток растворяют в минимальном количестве дихлорметана с небольшим количеством метанола, затем выливают на простой диизопропиловый эфир. Осадок фильтруют. Получают 310 мг (Выход=83%, выражен в дитрифторацетате) целевого продукта в виде белого твердого вещества.

Масс-спектр: 550 (MН+); 416 (МН-COOCH₂Ph+), 548-[(M-H)], 440-[(548-OCH₂Ph)]-, 1097-(2М-Н-).

[α _D ] (0,30% МеОН): -9,3.

Пример 19

Синтез (1,1-диметилэтил)-3-[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино] аланината.

В одногорлую колбу, содержащую 3 г (4,87 ммоль) 3-[[6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-этил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланина, вводят 150 мл 100% уксусной кислоты и 300 мг палладия, активированного на угле (5-10%). Эту смесь очищают при пониженном давлении (2 кПа), затем встряхивают при температуре окружающей среды и под давлением в атмосфере азота в течение 22 часов.

Полученную гетерогенную среду фильтруют через clarcel. Фильтрат концентрируют досуха, затем обрабатывают смесью воды, этилацетата и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу экстрагируют этилацетатом и сушат на сульфате магния, затем растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа). Получают 1,95 мг бледно-желтого масла.

ССМ: Rf=0,65 (силикагель, элюент: этилацетат-метанол-триэтиламин 90-5-5).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,09 (т, 3H, СН₂-СН ₃); 1,35 (с, 9H, tBu); 1,75 (м, 6H, CH ₂-CH-CH ₂и CH₂-CH ₂-CH₂-NH); 2,44 (м, 2Н, CH ₂-СН₃); 2,60 (т, 2Н, CH ₂-CH₂-CH₂-NH); 2,81 (м, 2Н, СН₂-СН-СН₂ и NH-CH₂-CH-NH); 3,23 (м, 2Н, CH₂-CH₂-CH ₂-NH); 3,41 (м, 4H, CH₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂); 3,42 и 3,57 (2м, 2Н, NH-CH ₂-CH-NH); 6,25 (м, 2Н, CH₂-CH₂-CH₂-NH и NH-CH₂-CH-NH); 6,30 и 7,04 (2д, 2Н, H нафтиридин); 8,08 ч./млн (с, 1H, N=CH-N).

ИК (CHCl ₃ ): 3439 (NH); 1726 (C=)0; 1580, 1502 cм^-1 (гетероцикл).

Масс-спектр: 482⁺(MН)⁺; 426⁺[MH⁺-tBu]⁺; 339⁺[MH⁺-CH₂CH(NH₂)CO₂tBu]⁺; 241,7⁺, [М+2Н]².

[α _D ] :-3(1% CHCl₃).

Синтез (1,1-диметилэтил)-3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(адамантилметокси)карбонил]аланината.

Смесь 239 мг (0,49 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]аланината, 152 мг (0,49 ммоль) N-адамантилметоксикарбонилоксисукцинимида и 0,104 мл (0,75 ммоль) триэтиламина в 50 мл метиленхлорида встряхивают в течение 5 часов при температуре окружающей среды. Реакционную смесь выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа) и остаток обрабатывают этилацетатом, водой и насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют, сушат на сульфате магния и растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа). Остаток хроматографируют на силикагеле, элюируя градиентом от 100% метиленхлорида до метиленхлорид-метанола 90-10. Получают 77 мг (Выход=17%) целевого продукта в виде твердого вещества бежевого цвета.

ССМ: Rf=0,45 (силикагель, элюент: метиленхлорид-метанол-уксусная кислота-вода 90-10-1-1).

ИК (CHCl ₃ ): 3437 (NH); 1711 (C=O); 1583; 1556; 1501 см^-1 (гетероцикл).

1H-ЯМР (DМSO-d6): δ 1,08 (т, 3Н, СН₂-СН ₃); 1,45-1,92 (м, 15H, адамантил); 1,32 (с, 9H, tBu); 1,77 (м, 6H, CH ₂-CH-CH ₂ и CH₂-CH ₂-CH₂-NH); 2,44 (кв, 2H, СН ₂-СН₃); 2,50 (м, 1H, CH₂-CH-CH₂); 2,61 (т, 2H, CH ₂-CH₂-CH₂-NH); 2,82 и 3,44 (2м, 4H, CH₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂); 3,22 (м, 2H, CH₂-CH₂-CH ₂-NH); 3,56 (с, 2H, O-CH ₂-адамантил); 3,66 (м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,17 (кв, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 6,24 (с, 1H, CH₂-CH₂-CH₂-NH); 6,30 и 7,05 (2д, 2H, H нафтиридин); 6,37 (т, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 7,44 (д, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 8,10 ч./млн (с, N=CH-N).

Масс-спектр: 674 (MН+); 618 (МН-tBu+); 426 (618-COOCH₂adam+); 337,7 (M2H++); 718-(M-H-HCOOH); 672-(M-H).

[α _D ] :+2,5 (1% CHCl₃).

Синтез 3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(адамантилметокси)карбонил]аланина

Встряхивают 130 мг (0,19 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(адамантилметокси)карбонил]аланината в 20 мл дихлорметана с 2 мл трифторуксусной кислоты при температуре окружающей среды до исчезновения исходного продукта в ССМ (силикагель, элюент: CH₂Cl₂-MeOH-H₂O-AcOH 90-10-1-1). Добавляют толуол и выпаривают реакционную смесь досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток растворяют в минимальном количестве дихлорметана с небольшим количеством метанола, затем выливают на простой диизопропиловый эфир. Осадок фильтруют. Получают 368 мг (Выход=61%, выражен в дитрифторацетате) целевого продукта в виде аморфного твердого вещества.

ССМ: Rf=0,35 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 90-10-1-1).

ИК (CHCl ₃ ): 3401 (NH); 1668 (C=O); 1581; 1492 см^-1 (гетероцикл).

1H-ЯМР (DМSO-d6): δ 1,08 (т, 3Н, CH₂-СН ₃); 1,45-1,92 (м, 15H, адамантил); 1,76 (м, 6Н, CH ₂-CH-CH ₂, CH₂-CH ₂-CH₂-NH); 2,43 (кв, 2H, CH ₂-СН₃); 2,50 (м, 1Н, CH₂-CH-CH₂); 2,60 (т, 2H, CH ₂-CH₂-CH₂-NH); 2,82 и 3,45 (2м, 4H, CH₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂); 3,23 (м, 2H, CH₂-CH₂-CH ₂-NH); 3,49 и 3,58 (м, 2H, O-CH ₂-адамантил); 3,56 и 3,76 (м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,18 (м, 1Н, NH-CH₂-CH-NH); 6,26 (с, 1Н, CH₂-CH₂-CH₂-NH); 6,30 и 7,05 (2д, 2H, H нафтиридин); 6,44 (м, 1Н, NH-CH₂-CH-NH); 7,25 (д, 1Н, NH-CH₂-CH-NH); 8,11 ч./млн (с, N=CH-N).

Масс-спектр: 618 (MН+); 426 (МН-COOCH₂Ph+), 1235 (2MH+), 309,8 (М2Н++); 616-(М-Н-).

[α _D ]: (0,7% CH₃ОН): -2,8.

Пример 20

Синтез (1,1-диметилэтил)-3-[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]аланината

В одногорлую колбу, содержащую 3 г (4,87 ммоль) 3-[[6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-этил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланина, вводят 150 мл 100% уксусной кислоты и 300 мг палладия, активированного на угле (5-10%). Эту смесь очищают при пониженном давлении (2 кПа), затем встряхивают под давлением в атмосфере азота в течение 22 часов.

Полученную гетерогенную среду фильтруют через clarcel. Фильтрат концентрируют досуха при пониженном давлении (2 кПа), затем обрабатывают смесью воды, этилацетата и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу экстрагируют этилацетатом и сушат на сульфате магния, затем растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа). Получают 1,95 г бледно-желтого масла.

ССМ: Rf=0,65 (силикагель, элюент: АсОЕt-MeOH-TEA=90-5-5).

α _D =-3 (1% CHCl₃).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,09 (т, 3Н, СН₂-СН ₃); 1,35 (с, 9Н, tBu); 1,75 (м, 6H, CH ₂-CH-CH ₂ и CH₂-CН ₂-CH₂-NH); 2,44 (м, 2H, CH ₂-СН₃); 2,60 (т, 2H, CH ₂-CH₂-CH₂-NH); 2,81 (м, 2H, CH₂-CH-CH₂ и NH-CH₂-CH-NH); 3,23 (м, 2H, CH₂-CH₂-CН ₂-NH); 3,41 (м, 4H, CН₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂); 3,42 и 3,57 (2м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 6,25 (м, 2H, CH₂-CH₂-CH₂-NH и NН-СН₂-CH-NH); 6,30 и 7,04 (2д, 2H, H нафтиридин); 8,08 ч./млн (с, 1H, N=CH-N).

ИК (CHCl ₃ ) 3439 (NH); 1726 (C=0); 1580-1502 (гетероцикл).

ВЭЖХ/масс-спектр: 482⁺(MН)⁺; 426⁺[MH⁺-tBu]⁺; 339⁺[MH⁺-CH₂CH(NH₂)CO₂tBu]⁺; 241,7⁺ [М+2Н]².

Примеры с 21 по 31

Пример 28

Стадия а)

Синтез (1,1-диметилэтил)-3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-(4-метоксибензолсульфонил)аланината.

В смесь 150 мг (0,31 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]аланината в растворе в 6 мл дихлорметана и 650 мкл пиридина вводят 64,3 мг (0,31 ммоль) 4-метоксибензолсульфонилхлорида в растворе в 3 мл дихлорметана. Реакционную смесь встряхивают при температуре окружающей среды в течение 5 часов. Затем растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа) и остаток хроматографируют на силикагеле, используя следующий элюент: от этилацетат-дихлорметан/метанол (95-5) 50-50 до этилацетат-метанол 90-10. Получают 55,8 мг (Выход=28%) целевого продукта.

ССМ: Rf=0,63 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 85-15-2-2).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,21 (т, 3Н, СН₂-СН ₃); 1,30 (с, 9H, tBu); 1,92 и 2,02 (2м, 6H, N-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂-CH₂, СН₂-СН ₂-СН₂-NH); 2,48 (кв, 2H, СН ₂-СН₃); 2,72 (м, 3Н, N-CH₂-CH₂-CH-CH₂-CH₂, CH ₂-CH₂-CH₂-NH); 2,97 и 3,61 (2м, 4H, N-CH ₂-CH₂-CH-CH₂-CH ₂); 3,45 (м, 2H, CH₂-CH₂-CH ₂-NH); 3,74 и 3,86 и 3,95 (3м, 6H, NH-CH ₂-CH-NH, ОСН₃); 4,95 (т, 1H, NH мобильный); 5,92 (д, 1H, NH мобильный); 6,43 и 7,20 (2д, 2H, CH=CH нафтиридин); 6,95 и 7,79 (2д, 4H, CH=CH бензол); 8,29 (с, 1H, N=CH-N).

Масс-спектр: 652 (MН+).

Стадия b)

Синтез 3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-(4-метоксибензолсульфонил)аланина

Встряхивают 55,8 мг (0,086 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[4-(метоксибензолсульфонил)аланината в 5 мл дихлорметана с 0,5 мл трифторуксусной кислоты при температуре окружающей среды до исчезновения исходного продукта в ССМ (силикагель, элюент: CH₂Cl₂-MeOH-H₂O-AcOH 85-15-2-2). Добавляют толуол и выпаривают реакционную смесь досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток растворяют в минимальном количестве дихлорметана с небольшим количеством метанола, затем выливают на простой диизопропиловый эфир. Осадок фильтруют. Получают 59,8 мг (Выход=85%, выражен в дитрифторацетате) целевого продукта.

ССМ: Rf=0,33 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 85-15-2-2).

1H-ЯМР (МeOD): δ 1,22 (т, 3Н, СН₂-СН ₃); 1,96 и 2,10 (2м, 6H, N-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂-CH₂, CH₂-CH ₂-CH₂-NH); 2,55 (кв, 2H, СН ₂-СН₃); 2,85 (т, 2H, CH ₂-CH₂-CH₂-NH); 2,95 (м, 1H, N-CH₂-CH₂-CH-CH₂-CH₂); 3,20 и 3,67 и 3,92 (3м, 6H, N-CH ₂-CH₂-CH-CH₂-CH ₂, NH-CH ₂-CH-NH); 3,51 (м, 2H, CH₂-CH₂-CH ₂-NH); 4,24 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 6,71 и 7,64 (2д, 2H, CH=CH нафтиридин); 6,99 и 7,74 (2д, 4H, CH=CH бензол); 8,27 (с, 1H, N=CH-N).

Масс-спектр: 596 (MН+).

Общая методика пролучения сульфонамидов

Стадия а)

В смесь 150 мг (0,31 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]аланината в растворе в 6 мл дихлорметана и 650 мкл пиридина вводят 0,31 ммоль (масса m_x) сульфонилхлорида в 3 мл дихлорметана. Реакционную смесь встряхивают при температуре окружающей среды в течение 5 часов. Затем растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа) и остаток хроматографируют на силикагеле, используя следующий элюент: от этилацетат-дихлорметан/метанол (95-5) 50-50 до этилацетат-метанол 90-10. Получают массу m_y целевого продукта.

ССМ: Rf (элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 85-15-2-2).

Стадия b)

Встряхивают массу m_y (1,1-диметилэтил)-3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-(R-сульфонил)аланината в 5 мл дихлорметана с 0,5 мл трифторуксусной кислоты при температуре окружающей среды до исчезновения исходного продукта в ССМ (силикагель, элюент: CH₂Cl₂-MeOH-H₂O-AcOH 85-15-2-2). Добавляют толуол и выпаривают реакционную смесь досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток растворяют в минимальном количестве дихлорметана с небольшим количеством метанола, затем выливают на простой диизопропиловый эфир. Осадок фильтруют. Получают массу m_z целевого продукта.

	Сульфонилхлорид	m _x (мг)	Полученный сложный эфир	m _y (мг)	Выход	Масс-спектр (МН+)	Rf
Пример 21		47,1		30	22	672	0,61
Пример 22		40,4		38,7	29	640	0,63
Пример 23		59,3		48	24	636	0,69
Пример 24		55,1		18,4	10	622-624	0,65
Пример 25		65,6		57,6	28	656-658	0,67
Пример 26		78,6		70	32	698	0,67
Пример 27		73,0		49,3	23	680	0,67
Пример 29		76,1		63,4	30	690	0,63
Пример 30		81,7		21,4	10	708	0,63
Пример 31		62,7		56,3	28	647	0,65
M_x: введенная масса сульфонилхлорида M_y: полученная масса сложного эфира

	Полученная кислота	FW (свободное основание)	Своб. Основание +2TFA	m _z (мг)	Масс-спектр (МН+)	Rf
Пример 21		615,76	843,76	20,8	616	0,4
Пример 22		583,69	811,69	31,2	584	0,33
Пример 23		579,73	807,73	45,4	580	0,3
Пример 24		566,13	794,13	11,6	566-568	0,26
Пример 25		600,14	828,14	58,3	600-601	0,3
Пример 26		641,8	869,8	56,6	642	0,37
Пример 27		623,74	851,74	41,2	624	0,37
Пример 29		633,7	861,7	59,8	634	0,33
Пример 30		651,79	879,79	48,5	652	0,35
Пример 31		590,71	818,71	28	591	0,26
M_z: масса полученной кислоты

Пример 32

Синтез (1,1-диметилэтил)-3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-(1-нафталинсульфонил)аланината.

Смесь 239 мг (0,49 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]аланината, 113 мг (0,5 ммоль) 1-нафталинсульфонилхлорида и 0,104 мл (0,75 ммоль) триэтиламина в 50 мл тетрагидрофурана встряхивают в течение 5 часов при температуре окружающей среды. Реакционную смесь выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа) и остаток обрабатывают этилацетатом, водой и насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют, сушат на сульфате магния и растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа). Остаток хроматографируют на оксиде алюминия, элюируя градиентом гептан-этилацетат от 75-25 до 0-100. Получают 220 мг (Выход=67%) целевого продукта в виде твердого белого вещества.

ССМ: Rf=0,10 (силикагель, элюент: метиленхлорид-метанол-уксусная кислота-вода 90-10-1-1).

ИК (CHCl ₃ ): 3440 (NH); 1728 (C=O); 1583; 1555; 1503 см^-1 (гетероцикл+ароматический).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,02 (т, 3H, СН₂ СН ₃); 1,15 (с, 9Н, tBu); 1,81-2,03 (м, 6H, CH ₂-CH-CH ₂ и CH₂-CH ₂-CH₂-NH); 2,23 и 2,31 (2кв, 2H, СН ₂-СН₃); 2,67 (т, 1H, CH₂-CH-CH₂); 2,72 (т, 2H, CH ₂-CH₂-CH₂-NH); 2,93 и 3,56 (уш. т и уш. д, 4H, CH₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂); 3,43 (м, 2H, CH₂-CH₂-CH ₂-NH); 3,66 и 3,76 (2м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 3,97 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 4,73 (т, 1H, т, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 6,55 (с, 1H, CH₂-CH₂-CH₂-NH); 6,42 и 7,05 (2д, 2H, H нафтиридин); 7,51 (т, 1H, H3 1-SO₂нафтил); 7,57 и 7,62 (2т, 2Н, Н6 и Н7 1-SO₂нафтил); 7,90 (д, 1Н, Н2 1-SO₂нафтил); 8,02 (д, 1Н, Н4 1-SO₂нафтил); 8,22 (м, 2Н, N=CH-N и Н5 1-SO₂нафтил); 8,61 ч./млн (м, 1Н, Н8 1-SO2нафтил).

Масс-спектр: 672 (MН+); 426 (616-SOOnapht+); 670-(M-H).

[α _D ] :+3,3 (1% CHCl₃).

Синтез 3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-(1-нафталинсульфонил)аланина

Встряхивают 220 мг (0,33 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-(1-нафталинсульфонил)аланината в 20 мл дихлорметана с 2 мл трифторуксусной кислоты при температуре окружающей среды до исчезновения исходного продукта в ССМ (силикагель, элюент: CH₂Cl₂-MeOH-H₂O-AcOH 90-10-1-1). Добавляют толуол и выпаривают реакционную смесь досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток растворяют в минимальном количестве дихлорметана с небольшим количеством метанола, затем выливают на простой диизопропиловый эфир. Осадок фильтруют. Получают 230 мг (Выход=82%, выражен в дитрифторацетате) целевого продукта в виде твердого белого вещества.

ИК (CHCl ₃ ): 3412-3257 (ОН, NH); 1668 (C=O); 1628; 1582, 1505 см^-1 (С=С, С=N, ароматический)).

1H-ЯМР (DМSO-d6): δ 0,87 (т, 3Н, СН₂-СН ₃); 1,77 (м, 6H, CH ₂-CH-CH ₂, CH₂-CH ₂-CH₂-NH); 2,05 (кв, 1H, СН ₂-СН₃); 2,16 (кв, 1H, СН ₂-СН₃); 2,62 (т, 2H, CH ₂-CH₂-CH₂-NH); 2,73 и 3,50 (2м, 4H, CH₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂); 2,80 (м, 1H, СН₂-СН-СН₂); 3,20 (м, 2H, CH₂-CH₂-CH ₂-NH); 3,50 (м, 2H, СН-СН₂-СН ₂-N); 3,66 и 3,76 (2м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 3,97 (т, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 6,26 (с, 1H, CH₂-CH₂-CH₂-NH); 6,31 и 7,06 (2д, 2H, H нафтиридин); 7,55 (т, 1H, Н3 1-SO₂нафтил); 7,62 (м, 2H, Н6 и H7 1-SO₂нафтил); 7,96 ч./млн (с, N=CH-N); 8,02 (м, 1H, H5 1-SO₂нафтил); 8,08 (д, 1H, H2 1-SO₂нафтил); 8,14 (д, 1H, H4 1-SO₂нафтил); 8,58 (м, 1H, H8 1-SO₂нафтил).

Масс-спектр: 616 (MН+); 426 (МН-SOOnapht+), 1231 (2MH+), 308,8 (М2Н++); 616-(М-Н-).

[α _D ] (0,4% CH₃ОН): +7,0.

Пример 33

Синтез (1,1-диметилэтил)-3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-(2-пиридинил)аланината.

Смесь 240 мг (0,50 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]аланината и 3 мл 2-фторпиридина встряхивают в течение 24 часов с обратным холодильником. Реакционную смесь выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа) и остаток обрабатывают этилацетатом, водой и насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют, сушат на сульфате магния и растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа). Остаток хроматографируют на оксиде алюминия, элюируя смесью этилацетат-метиленхлорид-метанол 80-16-4. Получают 13 мг (Выход=0,5%) целевого продукта в виде масла.

ССМ: Rf=0,40 (силикагель, элюент: метиленхлорид-метанол- 90-10).

Масс-спектр: 559 (MН+).

Синтез 3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-(2-пиридинил)аланина

Встряхивают 13 мг (0,23 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-(2-пиридинил)аланината в 2 мл дихлорметана с 0,2 мл трифторуксусной кислоты при температуре окружающей среды до исчезновения исходного продукта в ССМ (силикагель, элюент: CH₂Cl₂-MeOH-H₂O-AcOH 90-10-1-1). Добавляют толуол и выпаривают реакционную смесь досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток растворяют в минимальном количестве дихлорметана, затем выливают на простой диизопропиловый эфир. Осадок фильтруют. Получают 13 мг (Выход=76%, выражен в дитрифторацетате) целевого продукта в виде твердого бежевого вещества.

ССМ: Rf=0,35 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 85-15-2-2).

Масс-спектр: 503 (MН+); 501- (М-Н-).

Пример 34

Синтез (1,1-диметилэтил)-3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-(2-бензотиазолил)аланината.

Смесь 200 мг (0,42 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]аланината и 90 мг (0,6 ммоль) 2-фторбензотиазола в 5 мл пиридина встряхивают в течение 2 часов при температуре 100°С. Реакционную смесь выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа) и остаток обрабатывают этилацетатом, водой и насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют, сушат на сульфате магния и растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа). Остаток хроматографируют первый раз на силикагеле, элюируя градиентом метиленхлорид-этилацетат-метанол от 100-0-0 до 0-100-0, затем 0-95-5; второй раз на обратной фазе RР8, элюируя градиентом метанол-вода от 80-20 до 100-0. Получают 50 мг (Выход=19%) целевого продукта в виде твердого вещества розоватого цвета.

ССМ: Rf=0,20 (силикагель, элюент: этилацетат-метанол 98-2).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,06 (т, 3H, СН₂ СН ₃); 1,49 (с, 9Н, tBu); 1,77-2,01 (м, 6H, CН ₂-CH-CH ₂ и СН₂-CH ₂-C₂-NH); 2,41 (кв, 2H, СН ₂-СН₃); 2,61 (т, 1Н, CH₂-CH-CH₂); 2,72 (т, 2H, CH ₂-CH₂-СН₂-NH); 2,92 и 3,51 (уш. кв и уш. т, 4H, CH₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂); 3,42 (м, 2H, CH₂-CH₂-CH ₂-NH); 3,95 и 4,09 (2м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,88 (м, 1Н, NH-CH₂-CH-NH); 4,98 и 5,63 (м и т, 2H, NH-CH₂-CH-NH и NH-CH₂-CH-NH); 6,67 (уш. с, 1H, CH₂-CH₂-CH₂-NH); 6,41 и 7,13 (2д, 2H, H нафтиридин); 7,12, 7,31 и 7,57 (т скрытый, т и уш. т 4H, H бензотиазол); 8,32 ч./млн (с, 1Н, N=CH-N).

Масс-спектр: 615 (MН+), 559 (МН-tBu+); 613- (М-Н-).

Синтез 3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-(2-бензотиазолил)аланина

Встряхивают 45 мг (0,073 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-(2-бензотиазолил)аланината в 10 мл дихлорметана с 1 мл трифторуксусной кислоты при температуре окружающей среды до исчезновения исходного продукта в ССМ (силикагель, элюент: CH₂Cl₂-MeOH-H₂O-AcOH 90-10-1-1). Добавляют толуол и выпаривают реакционную смесь досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток растворяют в минимальном количестве дихлорметана с небольшим количеством метанола, затем выливают на простой диизопропиловый эфир. Осадок фильтруют. Получают 60 мг (Выход=97%, выражен в дитрифторацетате) целевого продукта в виде твердого белого вещества.

ССМ: Rf=0,45 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 85-15-2-2).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,15 (т, 3H, СН₂-СН ₃); 1,75-2,07 (м, 6Н, CH ₂-CH-CH ₂, CH₂-CH ₂-CH₂-NH); 2,51 (кв, 1H, СН ₂-СН₃); 2,76 (уш. т, 2H, CН ₂-CH₂-CH₂-NH); 2,96 (м, 1H, СН₂-СН-СН₂); 3,20 и 3,73 (2м, 4H, CH₂-CH ₂-N-CН ₂-CH₂); 3,51 (м, 2H, CH₂-CH₂-CH ₂-NH); 4,23 (м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,67 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 6,38 и 7,35 (2д, 2H, H нафтиридин); 7,20, 7,35, 7,47 и 7,54 (т, т скрытый, уш. д и уш. д 4H, H бензотиазол); 7,73 и 10,05 (2м, 2H, H мобильный); 8,36 ч./млн (с, 1H, N=CH-N).

Масс-спектр: 559 (MН+); 557- (М-Н-).

Пример 35

По аналогии с примером 34 из (1,1-диметилэтил)-3-[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]аланината получают 3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[2-(4-метоксибензимидазолил)]аланин в виде твердого бежевого вещества.

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,12 (м, 3Н, СН₂ СН ₃); 1,65-2,07 (м, 6Н, CH ₂-CH-CH ₂ и CH₂-CH ₂-CH₂-NH); 2,47 (м, 2H, СН ₂-СН₃); 2,74 (м, 2H, СН ₂-СН₂-СН₂-NН); 2,92 (м, 1H, CH₂-CH-CH₂); 3,17 и 3,73 (2м, 4H, CH₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂); 3,52 (м, 2H, CH₂-CH₂-CH ₂-NH); 3,79 (с, 1H, ОСН3); 4,18 (м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,81 (м, 1H, NH-СН₂-СН-NH); 6,35 и 7,36с (2д, 2H, H нафтиридин); 6,72 и 7,18 (2д, 2H, NC(C)CHCHC(CH)ОСН3); 6,87 (с, 1H, NC(C)CHC(CH)ОСН3); 6,37, 7,70 и 9,84 (3H мобильные); 8,32 ч./млн (с, 1H, N=CH-N).

Масс-спектр: 572 (MН+); 570- (М-Н-).

Пример 36

Синтез третбутил-2-(2-бензилоксикарбониламино-3-{5-метил-6-[4-(5,6,7,8-тетрагидро-[1,8]-нафтиридин-2-ил)-пиперидин-1-ил]- пиримидин-4-иламино}пропиниламино)пропионата

Встряхивают 170 мг (0,30 ммоль) 3-[[5-метил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланина, 150 мг (1,0 ммоль) третбутил-L-аланината, 66 мг (0,48 ммоль) 1-гидроксибензотриазола, 90 мг (0,48 ммоль) 1-[3-(диметиламино)пропил]-3-этилкарбодиимидхлоргидрата, 0,015 мл (0,135 ммоль) N-метилморфолина и 0,210 мл (1,50 ммоль) триэтиламина в 10 мл диметилформамида в течение 24 часов при температуре окружающей среды. Выпаривают реакционную смесь досуха при пониженном давлении (2 кПа) и остаток обрабатывают этилацетатом и насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют, сушат на сульфате магния и растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа). Осадок хроматографируют на силикагеле, элюируя смесью этилацетат-метиленхлорид-метанол 50-50-10. Получают 120 мг (Выход=60%,) целевого продукта в виде твердого вещества белого цвета.

ССМ: Rf=0,40 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 90-10-1-1).

Масс-спектр: 673 (МН+).

Синтез 2-(2-бензилоксикарбониламино-3-{5-метил-6-[5,6,7,8-тетрагидро-[1,8]нафтиридин-2-ил)пиперидин-1-ил]пиримидин-4-иламино}пропиниламино)пропионовой кислоты

Встряхивают 120 мг (0,179 ммоль) третбутил-2-(2-бензилоксикарбониламино-3-{5-метил-6-[4-[5,6,7,8-тетрагидро-[1,8]нафтиридин-2-ил)пиперидин-1-ил]пиримидин-4-иламино}пропиниламино)пропионата в 5 мл дихлорметана с 1 мл трифторуксусной кислоты при температуре окружающей среды до исчезновения исходного продукта в ССМ (силикагель, элюент: CH₂Cl₂-MeOH-H₂O-AcOH 90-10-1-1). Добавляют толуол и выпаривают реакционную смесь досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток растворяют в минимальном количестве дихлорметана с небольшим количеством метанола, затем выливают на простой диизопропиловый эфир. Осадок фильтруют. Получают 95 мг (Выход=63%, выражен в дитрифторацетате) целевого продукта в виде твердого вещества белого цвета.

Масс-спектр: 616 (MН+).

Пример 37

Синтез третбутил-2-(2-бензилоксикарбониламино-3-{5-этил-6-[4-(5,6,7,8-тетрагидро-[1,8]-нафтиридин-2-ил)-пиперидин-1-ил]пиримидин-4-иламино}пропиниламино)пропионата

Встряхивают 80 мг (0,15 ммоль) 3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланина, 32 мг (0,20 ммоль) третбутил-L-аланината, 22 мг (0,16 ммоль) 1-гидроксибензотриазола, 30 мг (0,16 ммоль) 1-[3-(диметиламино)пропил]-3-этилкарбодиимидхлоргидрата, 0,050 мл (0,45 ммоль) N-метилморфолина и 0,070 мл (0,50 ммоль) триэтиламина в 5 мл диметилформамида в течение 24 часов при температуре окружающей среды. Выпаривают реакционную смесь досуха при пониженном давлении (2 кПа) и остаток обрабатывают этилацетатом и насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют, сушат на сульфате магния и растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа). Осадок хроматографируют на силикагеле, элюируя смесью этилацет-метиленхлорид-метанол от 50-50-0 до 50-45-5. Получают 55 мг (Выход=53%) целевого продукта в виде твердого вещества белого цвета.

ССМ: Rf=0,30 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 90-10-1-1).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 0,91 (т, 3H, СН₂-СН ₃); 1,38 (д, 3H, CONH-CH(CH ₃)-CO); 1,48 (с, 9H, tBu); 1,79-2,07 (м, 6H, CH₂-CH ₂-CH₂-NH, CH ₂-CH-CН ₂); 2,49 (м, 2H, СН ₂-СН₃); 2,66 (м, 1H, CH₂-СН-CH₂); 2,73 (т, 2H, CH ₂-CH₂-CH₂-NH); 2,97 и 3,63 (2м, 4H, CH₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂); 3,42 (м, 2H, CН₂-CH₂-CH ₂-NH); 3,73 и 4,14 (2м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,31 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 4,44 (кв, 1H, CONH-CH(CH₃)-CO); 5,14 (м, 2H, CH ₂-Ph); 5,35, 6,92 и 7,89 (3H, H мобильные); 6,42 и 7,14 (2д, 2H, H нафтиридин); 7,36 (м, 5H, Ph); 8,29 ч./млн (с, 1H, N=CH-N).

Масс-спектр: 687 (МН+).

Синтез 2-(2-бензилоксикарбониламино-3-{5-этил-6-[4-(5,6,7,8-тетрагидро-[1,8]-нафтиридин-2-ил)пиперидин-1-ил]пиримидин-4-иламино}пропиниламино)пропионовой кислоты

Встряхивают 50 мг (0,073 ммоль) третбутил-2-(2-бензилоксикарбониламино-3-{5-этил-6-[4-(5,6,7,8-тетрагидро-[1,8]-нафтиридин-2-ил)пиперидин-1-ил]пиримидин-4-иламино}пропиниламино)пропионата в 5 мл дихлорметана с 0,5 мл трифторуксусной кислоты при температуре окружающей среды до исчезновения исходного продукта в ССМ (силикагель, элюент: CH₂Cl₂-MeOH-H₂O-AcOH 90-10-1-1). Добавляют толуол и выпаривают реакционную смесь досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток растворяют в минимальном количестве дихлорметана с небольшим количеством метанола, затем выливают на простой диизопропиловый эфир. Осадок фильтруют. Получают 53 мг (Выход=85%, выражен в дитрифторацетате) целевого продукта в виде твердого вещества белого цвета.

ССМ: Rf=0,12 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 90-10-1-1).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,16 (т, 3Н, СН₂-СН ₃); 1,41 (д, 3H, CONH-CH(CH ₃)-CO); 1,80-2,10 (м, 6H, CH₂-CH ₂-CH₂-NH, СН ₂-СН-СН₂); 2,48 (м, 2H, CH ₂-СН₃); 2,79 (м, 2H, СН ₂-СН₂-СН₂-NН); 3,00 (уш. т, 1H, СН₂-СН-СН₂); 3,28 и 3,84 (2м, 4H, CH₂-CH ₂-N-СН ₂-CH₂); 3,52 (м, 2H, CH₂-CH₂-CH ₂-NH); 3,78 и 4,13 (2м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,46 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 4,59 (м, 1H, CONH-CH(CH₃)-CO); 5,05 (м, 2H, CH ₂-Ph); 6,41 и 7,38 (2д, 2H, H нафтиридин); 6,68, 7,20, 7,95 и 9,68 (4H, H мобильные); 7,31 (м, 5H, Ph); 8,28 ч./млн (с, 1H, N=CH-N).

Масс-спектр: 631 (MН+).

Пример 38

1) Синтез третбутил-4-гидрокси-1-пиперидинкарбоксилата 1:

Растворяют 1 г (5 ммоль) третбутил-4-оксо-1-пиперидинкарбоксилата (выпускаемого фирмой Aldrich) в 5 мл этанола. Этот раствор охлаждают до 0°С на ледяной бане, вводят порцией 200 мг (7,56 ммоль) тетраборгидрата натрия и встряхивают в течение 4 часов при температуре окружающей среды. В реакционную смесь добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония. Выпаривают этанол при пониженном давлении (2 кПа), затем обрабатывают реакционную смесь этилацетатом. Отделяют органическую фазу от водной фазы. Проводят эту экстракцию еще один раз и затем объединяют органические фазы и сушат на сульфате магния. Концентрируют при пониженном давлении (2 кПа) и получают 1,05 г (Выход=100%) бесцветного масла.

ССМ: Rf=0,5 (силикагель, элюент: СН₂Cl₂/MeOH 90:10).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,47 (с, 9H, tBu) и (м, 2H; -CHH-CH₂-N-CH₂-CHH-); 1,87 (м, 2H, -CHH-CH₂-N-CH₂-CHH-); 3,04 (м, 2H, -CHH-N-CHH-); 3,85 (м, 2H, -CHH-N-CHH-) и (м, 1H, -CH-OH).

2) Синтез третбутил-4-йод-1-пиперидинкарбоксилата 2:

Растворяют 2,15 г трифенилфосфина (8,2 ммоль) и 2,08 г йода (8,2 ммоль) в 30 мл ацетонитрила.

Встряхивают в течение 10 минут при температуре окружающей среды, затем вводят 918 мг имидазола (13,5 ммоль) и встряхивают еще в течение 10 мин при температуре окружающей среды. Затем вводят 1 г (5 ммоль) третбутил-4-гидрокси-1-пиперидинкарбоксилата, полученного на предыдущей стадии, и встряхивают в течение 24 часов при температуре окружающей среды. В реакционную смесь добавляют насыщенный водный раствор тиосульфата натрия и выпаривают ацетонитрил при пониженном давлении (2 кПа). Обрабатывают этилацетатом, экстрагируют и промывают водным раствором тиосульфата натрия. Органические фазы сушат MgSO₄, фильтруют и выпаривают этилацетат при пониженном давлении (2 кПа). Хроматографируют на силикагеле, элюируя дихлорметаном, затем дихлорметан/метанолом 90/10.

Получают 1,1 г (Выход=70%) бесцветного масла.

ССМ: Rf=0,8 (силикагель, элюент: СН₂Cl₂/MeOH 90/10).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,47 (с, 9H, tBu); 2,03 (м, 4H, -СН ₂-CHI-CH ₂-); 3,30 и 3,60 (2м, 4H, -CH ₂-N-CH ₂-); 4,46 (м, 1H -CHI-).

3) Синтез 2-бром-6-(2,5-диметилпирол-1-ил)пиридина 3:

В колбу, объемом 100 мл, на которой прикреплено усторойство Dean Stark, вводят 1 г (5,78 ммоль) 2-амино-6-бромпиридина, выпускаемого фирмой Aldrich, в 30 мл толуола. Добавляют 0,3 мл уксусной кислоты и 0,8 мл (6,78 ммоль) ацетонилацетона, выпускаемого фирмой Aldrich. Нагревают в течение 5 часов до конденсации толуола. Охлаждают до температуры окружающей среды и выпаривают толуол при пониженном давлении (2 кПа). Вводят воду и экстрагируют этилацетатом. Объединяют органические фазы и сушат полученное на сульфате магния. Выпаривают этилацетат при пониженном давлении (2 кПа) и сырой остаток очищают хроматографией на силикагеле, элюируя дихлорметаном.

Получают 1 г (Выход=90%) желтого порошка.

ССМ: Rf=0,7 (силикагель, элюент: СН₂Cl₂).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 2,20 (с, 6H, -СН ₃С=СН-СН=ССН ₃-); 5,90 (с, 2Н, -СН₃С=СН-СН=ССН₃-); 7,08 (д, 1Н, H3 или H5 ); 7,16 (д, 1H, H3 или H5); 7,29(т, 1Н, H4).

4) Синтез третбутилового эфира 6-(2,5-диметилпиррол-1-ил)-3',4',5',6'-тетрагидро-2'Н-[2,4']бипиридинил-1'-карбоновой кислоты 4:

В атмосфере аргона суспендируют 284 мг (4,34 ммоль) электролитического цинка, к которому добавляют 0,033 мл 1-2-дибромэтана и 1 мл тетрагидрофурана.

Встряхивают в течение 3 мин при 60°С и охлаждают до температуры окружающей среды. Вводят 0,047 мл триметилсилилхлорида и встряхивают 30 мин при температуре окружающей среды. Вводят 1 г (3,2 ммоль) 2, предварительно растворенного в 2 мл тетрагидрофурана. Эту реакционную смесь встряхивают в течение 45 мин при температуре окружающей среды и вводят в нее раствор, содержащий 30 мг (0,032 ммоль) трис(дибензилиденацетона)дипалладия, выпускаемого фирмой Aldrich, и 30 мг (0,13 ммоль) трис(2-фурил)фосфина, выпускаемого фирмой LANCASTER. Затем вводят 1 г (4 ммоль) 3, предварительно растворенного в 10 мл тетрагидрофурана. Осуществляют магнитное перемешивание реакционной смеси при 60°С в течение 2 часов. Охлаждают до температуры окружающей среды и фильтруют через clarcel и экстрагируют, распределяя между этилацетатом и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Водную фазу два раза экстрагируют этилацетатом, затем органические фазы объединяют и сушат полученное на сульфате магния. Выпаривают этилацетат при пониженном давлении (2 кПа) и сырой остаток очищают хроматографией на силикагеле, элюируя смесью гептан/этилацетат 4:1. Получают 350 мг (Выход=30%) целевого продукта в виде желтого масла.

ССМ: Rf=0,2 (силикагель, элюент: гептан/этилацетат 90:10).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,50 (с, 9H, tBu); 1,78 и 1,97 (м, 4H, -CH ₂-CH₂-N-CH₂-CH ₂-); 2,18 (с, 6H, -CH ₃C=CH-CH=CCH ₃-); 2,85 и 2,95 (м, 3H, CH-CH₂-CHH-N-CHH-CH₂-); 4,28 (м, 2H, -CH₂-CHH-N-СНН-СН₂-); 5,92 (с, 2H, -CH₃C=CH-CH=CCH₃-); 7,08 (д, 1H, H3 или H5); 7,16 (д, 1H, H3 или H5 ); 7,29 (т, 1H, H4).

5) Синтез 6-(2,5-диметилпиррол-1-ил)-1',2',3',4',5',6'-гексагидро-[2,4']бипиридинила

Растворяют 330 мг (0,928 ммоль) 4 в 3 мл дихлорметана и вводят 0,3 мл трифторуксусной кислоты. Встряхивают в течение 2 часов при температуре окружающей среды. Выпаривают дихлорметан при пониженном давлении (2 кПа). Обрабатывают полученный остаток водой, подщелачивают до рН 10 с помощью концентрированного аммиака и экстрагируют продукт дихлорметаном. Органическую фазу сушат на сульфате магния и выпаривают дихлорметан при пониженном давлении (2 кПа). Получают 220 мг (Выход=92%) желтого масла.

ССМ: Rf=0,3 (силикагель, элюент: СH₂Cl₂/MeOH 90:10).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,90 и 2,08 (м, 4H, -CH ₂-CH₂-N-CH₂-CH ₂-); 2,18 (с, 6H, -CH ₃C=CH-CH=CСH ₃-); 2,88 и 3,34 (м, 4H, -CH₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂-); 2,95 (м, 1H, СН-CH₂-CH₂-N-CH₂-); 4,10 (м, 1H, NH); 5,92 (с, 2H, -CH₃C=CH-CH=CCH₃-); 7,08 (д, 1H, H3 или H5); 7,16 (д, 1H, H3 или H5); 7,29 (т, 1H, H4).

Масс-спектр: 256 (МН+)

6) Синтез 1'-(6-хлор-5-метилпиримидин-4-ил)-6-(2,5 диметилпиррол-1-ил)-1',2',3',4',5',6'-гексагидро[2,4']бипиридинила

Растворяют 220 мг (0,860 ммоль) 5 в 2 мл диметилацетамида и вводят 140 мг (0,860 ммоль) 4,6-дихлор-5-метилпиримидина, выпускаемого фирмой SPECS, и 0,2 мл диизопропилэтиламина. Смесь нагревают до 110°С при магнитном перемешивании в течение 1 часа. Охлаждают до температуры окружающей среды и выпаривают диметилацетамид при пониженном давлении (2 кПа). Сырой остаток обрабатывают этилацетатом и промывают водой. Водную фазу двукратно экстрагируют этилацетатом, органические фазы объединяют и сушат на сульфате магния. Выпаривают этилацетат при пониженном давлении (2 кПа) и получают 330 мг смолы коричневого цвета, используемой на следующей стадии без очистки.

ССМ: Rf=0,4 (силикагель, элюент: СH₂Cl₂).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 2,02 и 2,10 (м, 4Н, -CH ₂-CH₂-N-CH₂-CH ₂-); 2,18 (с, 6H, -СН ₃С=СН-СН=ССН ₃-); 2,30 (с, 3Н, СН₃); 3,08 и 4,01 (м, 4Н, -CН₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂-); 3,02 (м, 1H, CH-CH₂-CH₂-N-CH₂-); 5,92 (с, 2H, -CH₃C=СН-CH=CCH₃-); 7,09 (д, 1H, H3 или H5); 7,20 (д, 1H, H3 или H5 ); 7,29 (т, 1H, H4); 8,41 (с, 1H, =N-CH=N)

7) Синтез третбутилового эфира 2-бензилоксикарбониламино-3-{6-[6-(2,5-диметилпиррол-1-ил)-3',4',5',6'-тетрагидро-2'H-[2,4']бипиридинил-1'-ил]-5-метилпиримидин-4-иламино}-пропионовой кислоты 7:

330 мг (0,866 ммоль) вещества, полученного на предыдущей стадии, растворяют в 5 мл диметоксиэтана. Последовательно вводят 286 мг (1 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-амино-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината (полученного в соответствии с J.Med.Chem. (2001), 44(8), 1158-1176), 184 мг (1,21 моль) фторида цезия, 54 мг (10% мол.) rac-2,2'-бис(дифенилфосфин)-1,1'-бинафтила, выпускаемого фирмой Aldrich, и 40 мг (5% мол.) трис(дибензилиденацетон)дипалладия, выпускаемого фирмой Aldrich. Эту смесь нагревают до 100°С в течение 18 часов при магнитном перемешивании. Повторно вводят 54 мг (10% мол.) rac-2,2'-бис(дифенилфосфин)-1,1'-бинафтила, 40 мг (5% мол.) трис(дибензилиденацетон)дипалладия и нагревают еще в течение 2 часов до 100°С. Охлажлают до температуры окружающей среды и выпаривают диметоксиэтан при пониженном давлении (2 кПа). Полученный остаток обрабатывают этилацетатом и промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия. Водную фазу экстрагируют этилацетатом, органические фазы объединяют и сушат на сульфате магния. Выпаривают этилацетат при пониженном давлении (2 кПа). Полученный остаток очищают хроматографией на силикагеле, элюируя смесью гептан-этилацетат 1:1. Получают 200 мг твердого вещества желтого цвета.

ССМ: Rf=0,2 (силикагель, элюент: гептан/этилацетат 1:1).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,50 (с, 9H, tBu); 1,97 (с, 3H, CH₃); 2,02-2,10 (м, 4H, -CH ₂-CH₂-N-CH₂-CH ₂-); 2,18 (с, 6H, -CH ₃С=CH-СН=ССН ₃-); 3,20 и 3,78 (м, 4H, -CH₂-СН ₂-N-CH ₂-CH₂-); 3,00 (м, 1H, СН-СН₂-СН₂-N-СН₂-); от 3,85 до 4,00 (м, 2H, NH-CH ₂-CHCOOtBuNH); 4,47 (м, 1H, NH-CH₂CH-COOtBuNH); 5,12 (2H, -O-CH ₂-фенил); 5,92 (с, 2H, -CH₃C=CH-CH=CCH₃-); 6,12 (м, 1H мобильный); 7,09 (д, 1H, H3 или H5); 7,21 (д, 1H, H3 или H5); 7,78 (т, 1H, H4); 7,45 (м, 5H ароматические); 8,32 (с, 1H, =N-CH=N).

Масс-спектр: 641 (MН+); 584 (МН-tBu+)

8) Синтез третбутилового эфира 3-[6-(6-амино-3',4',5',6'-тетрагидро-2'H-[2,4']бипиридинил-1'-ил)-5-метилпиримидин-4-иламино]-2-бензилоксикарбониламинопропионовой кислоты 8:

Растворяют 100 мг (0,15 ммоль) 7 в 3 мл этанола и 0,3 мл воды. Вводят 50 мг (0,75 ммоль) гидроксиламинхлоргидрата, выпускаемого фирмой ACROS, и нагревают до 90°С в течение 18 часов. Выпаривают растворители при пониженном давлении (2 кПа) и сырой остаток очищают хроматографией на силикагеле, элюируя смесью СH₂Cl₂/MeOH 90:10). Получают 30 мг (36%) целевого продукта в виде бесцветной смолы.

ССМ: Rf=0,5 (силикагель, элюент: СH₂Cl₂/MeOH 90:10).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,50 (с, 9Н, tBu); 1,97 (с, 3Н, СН₃); 2,02-2,10 (м, 4H, -CH ₂-CH₂-N-CH₂-СН ₂-); 2,18 (с, 6H, -CH ₃C=CH-СН=ССН ₃-); 3,20 и 3,78 (м, 4H, -CH₂-CH ₂-N-СН ₂-CH₂-); 3,00 (м, 1H, CH-CH₂-CH₂-N-CH₂-); от 3,85 до 4,00 (м, 2H, NH-CH ₂-CHCOOtBuNH); 4,47 (м, 1H, NH-CH₂CH-COOtBuNH); 5,12 (2H, -O-CH ₂-фенил); 5,92 (с, 2H, -CH₃C=CH-CH=CCH₃-); 6,18, 6,57, 6,62 (3д, Н3 и H5 +1H мобильный); 7,45 (м, 5H ароматические); 7,60 (т, 1H, H4); 8,32 (с, 1H, =N-CH=N).

Масс-спектр: 562 (MН+); 372 (МН-tBu и -СО-О-бензил+).

9) Синтез 3-[6-(6-амино-3',4',5',6'-тетрагидро-2'H-[2,4']бипиридинил-1'-ил)-5-метилпиримидин-4-иламино]-2-бензилоксикарбониламинопропионовой кислоты 9:

Растворяют 30 мг (0,053 ммоль) 8, полученного на предыдущей стадии, в 2 мл дихлорметана и 0,2 мл трифторуксусной кислоты. Встряхивают в течение 9 часов при температуре окружающей среды. Вводят толуол и выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа). Продукт очищают хроматографией на силикагеле, элюируя смесью СH₂Cl₂/MeOH/уксусная кислота 90:10:1.

Получают 10 мг (выход=37%) целевого продукта в виде твердого вещества бежевого цвета в смеси СH₂Cl₂/простой изопропиловый эфир.

ССМ: Rf=0,2 (силикагель, элюент: СH₂Cl₂/MeOH/уксусная кислота 90:10:1).

1H-ЯМР (DМSO): δ 1,90 (с, 3H, CH₃); 1,80-1,85 (м, 4H,-CH ₂-CH₂-N-CH₂-CH ₂-); частично скрыты водой DМSO :(4H, -CH₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂-) и (2H, NH-CH ₂-CHCOOtBuNH); 2,80 (м, 1H, СН-CH₂-CH₂-N-CH₂-); 4,15 (м, 1H, CH₂-CH-COOtBuNH-); 5,02 (2H,-O-CH ₂-фенил); 6,27 (д, 1H, H3 или H5); 6,40 (д, 1H, H3 или H5); 6,52 (м, 1H, H4); 7,5 (м, 5H ароматические); 8,10 (с, 1H, =N-CH=N).

Масс-спектр: 506 (MН+); 372 (МН- СО-О-бензил+)

Пример 39

3-[5-этил-6-[4-(аминометил-2-пиридинил)-1-пиперидинил]-4-пиримидиниламино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланин, бис(трифторацетат)

Стадия а)

Синтез (1,1-диметилэтил)-(4-аминометилпиперидин)-1-карбоксилата

В раствор 10 г (87,5 ммоль) 4-аминометилпиперидина (фирмы Aldrich) в 110 мл толуола, находящийся в потоке азота, вводят 9 мл бензальдегида (87,5 ммоль), затем нагревают эту смесь до 120°С (в присутствии Dean Stark) в течение 8 часов. Реакционную смесь охлаждают до температуры окружающей среды, затем вводят 21 г (96,25 ммоль) дитретбутилдикарбоната при 0°С в течение ¼ часа. Встряхивают в атмосфере азота в течение ночи. На следующий день реакционную смесь концентрируют досуха при пониженном давлении (2 кПа) и масло обрабатывают 115 мл водного раствора KHSO₄ 1N и интенсивно встряхивают в атмосфере азота в течение 7 часов. В реакционную смесь вводят этилацетат и водную фазу двукратно экстрагируют этилацетатом. Затем маточный раствор подщелачивают путем добавления таблеток NaOH, после чего водную фазу трехкратно экстрагируют хлороформом, высаливая NaCl. Объединенные органические фазы сушат на сульфате магния и растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа). Получают 17,3 г (Выход=92%) целевого продукта в виде масла желтого цвета.

ССМ: Rf=0,5 (оксид алюминия, элюент: дихлорметан-метанол 90-10).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,05 и 1,67 (2м, 4H, N-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂-СН₂); 1,17 (с, 2H, NH ₂); 1,42 (с, 10H, tBu, CH₂-CH-CH₂); 2,55 (д, 2H, CH ₂-NH₂); 2,65 и 4,07 (2м, 4H, N-CH ₂-CH₂-CH-CH₂-CH ₂).

Масс-спектр: 215 (MH+); 159 (MH-tBu+).

Стадия b)

Синтез (1,1-диметилэтил)-(4-(2-аминометилпиридинил)пиперидин)-1-карбоксилата

Смесь 2,18 г (10,19 ммоль) (1,1-диметилэтил)-(4-аминометилпиперидин)-1-карбоксилата в 5 мл 2-фторпиридина нагревают с обратным холодильником в течение 6 часов. После охлаждения до температуры окружающей среды растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа) и твердый остаток желтого цвета обрабатывают смесью воды, этилацетата и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу декантируют, промывают насыщенным раствором хлорида натрия, затем сушат на сульфате магния и выпаривают досуха при пониженном давлении (1,3 кПа). Остаток хроматографируют на силикагеле, элюируя этилацетатом-циклогексаном 70-30. Получают 1,19 г (Выход=40%) целевого продукта.

ССМ: Rf=0,4 (силикагель, элюент: этилацетат-циклогексан 70-30).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,20 и 1,80 (2м, 5H, N-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂-СН₂); 1,47 (с, 9H, tBu); 2,71 и 4,15 (2м, 4H, N-CH ₂-CH₂-CH-СН₂-СН ₂); 3,21 (м, 2H, CH-CH ₂-NH); 4,80 (м, 1H, CH-CH₂-NH); 6,41 (д, 1H, CH=CH пиридин); 6,60 (м, 1H, CH=CH пиридин); 7,45 (м, 1H, CH=CH пиридин); 8,07 (м, 1H, N-CH=CH).

Масс-спектр: 292 (MH+), 192(МН-tBu+).

Стадия с)

Синтез 2-(4-метилпиперидинил)аминопиридина

Встряхивают 1,09 г (3,74 ммоль) (1,1-диметилэтил)-(4-(2-аминометилпиридинил)пиперидин)-1-карбоксилата в 25 мл дихлорметана с 6 мл трифторуксусной кислоты при температуре окружающей среды до исчезновения исходного продукта в ССМ (силикагель, элюент: этилацетат 100%). Добавляют 20 мл толуола и смесь выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток обрабатывают смесью метиленхлорида и водного раствора гидроксида натрия 2N. Органическую фазу декантируют, промывают насыщенным раствором хлорида натрия, затем сушат на сульфате магния и выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа). Полученное масло обрабатывают небольшим количеством простого диизопропилового эфира и пентана, затем конденсируют досуха при пониженном давлении (2 кПа). Получают 590 мг (Выход=82%) целевого продукта в виде твердого вещества желтого цвета.

ССМ: Rf=0,2 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислта 70-30-6-3).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,25 и 1,8 (2м, 4H, NH-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂-СН₂); 1,72 (м, 1H, CH₂-CH-CH₂); 2,62 и 3,15 (2м, 6H, NH-CH ₂-CH₂-CH-CH₂-CH ₂ и CH-CH ₂-NH); 4,62 (с, 1H, NH мобильный); 6,37 (д, 1H, CH=CH пиридин); 6,56 (м, 1H, CH=CH пиридин); 7,41 (м, 1H, CH=CH пиридин); 8,07 (м, 1H, N-СН=СН).

Масс-спектр: 192 (MH+).

Стадия d)

Синтез 4-бром-5-этил-6-[4-(аминометил-2-пиридинил)-1-пиперидинил]пиримидина

В смесь 657 мг (2,47 ммоль) 4,6-дибром-5-этилпиримидина и 450 мг (2,35 ммоль) 2-(4-метилпиперидинил)аминопиридина в 55 мл N,N-диметилацетамида вводят 1,8 мл диизопропилэтиламина. Нагревают эту смесь до 110°С в течение 4 часов. Растворитель удаляют при пониженном давлении (0,2 кПа) и обрабатывают остаток смесью воды, этилацетата, воды и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу декантируют, затем сушат на сульфате магния и конденсируют при пониженном давлении (2 кПа). Полученное каштанового цвета масло хроматографируют на оксиде алюминия, элюируя следующим градиентом: гептан-этилацетат от 80-20 до 70-30. Получают 747 мг (Выход=84%) целевого продукта в виде твердого вещества бежевого цвета.

ССМ: Rf=0,5 (оксид алюминия, элюент: гептан-этилацетат 50-50)

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,29 (т, 3H, CH₂-CH ₃); 1,42 и 1,9 (2м, 5H, N-СН₂-СН ₂-СН-СН ₂-СН₂); 2,70 (кв, 2H, CН ₂-CH₃); 2,95 и 3,88 (2м, 4H, N-CH ₂-CH₂-CH-CH₂-CH ₂); 3,27 (м, 2H, CH-CH ₂-NH); 4,81 (м, 1Н, NH мобильный); 6,42 (м, 1H, CH=CH пиридин); 6,60 (м, 1H, CH=CH пиридин); 7,46 (м, 1H, CH=CH пиридин); 8,09 (м, 1H, N-CH=CH); 8,31 (с, 1H, N=CH-N).

Масс-спектр: 378 (MH+).

Стадия е)

Синтез (1,1-диметилэтил)-3-[5-этил-6-[4-(аминометил-2-пиридинил)-1-пиперидинил]-4-пиримидиниламино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината

Смесь 300 мг (0,79 ммоль) 4-бром-5-этил-6-[4-(аминометил-2-пиридинил)-1-пиперидинил]пиримидина, 282,5 мг (0,96 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-амино-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината, 168,6 мг (1,11 ммоль) фторида цезия, 49,8 мг (0,08 ммоль) трис(дибензилиденацетон)дипалладия(0) и 49,8 мг (0,08 ммоль) rac-2,2'-бис(дифенилфосфин)-1,1'-бинафтила в 8 мл 1,4-диоксана нагревают с обратным холодильником в течение 7 часов. Реакционную смесь затем доводят до температуры окружающей среды для введения 49,8 мг (0,08 ммоль) трис(дибензилиденацетон)дипалладия(0), затем повторно нагревают с обратным холодильником в течение 4 часов. После охлаждения смесь концентрируют при пониженном давлении (2 кПа), затем полученный остаток обрабатывают смесью этилацетата, воды и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу декантируют, сушат на сульфате магния, затем концентрируют при пониженном давлении (2 кПа).

Остаток хроматографируют первый раз на оксиде алюминия, элюируя следующим градиентом: диизопропиловый эфир-этилацетат от 80-20 до 100% этилацетат. Второй раз хроматографируют на силикагеле, используя в качестве элюента этилацетат.

Получают 272 мг целевого продукта (выход = 58%).

ССМ: Rf=0,4 (силикагель, элюент: этилацетат).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,15 (т, 3H, СН₂-СН ₃); 1,47 и 1,90 (2м, 13H, tBu, N-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂-CH₂); 1,81 (м, 1H, N-CH₂-CH₂-CH-CH₂-CH₂); 2,41 (кв, 2H, СН ₂-СН₃); 2,85 и 3,50 (2м, 4H, N-CH ₂-CH₂-CH-CH₂-CH ₂); 3,27 (м, 2H, CH-CH ₂-NH); 3,90 (м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,45 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 4,85 (м, 1H, NH мобильный); 5,05 (м, 1H, NH мобильный); 5,12 (с, 2H, O-CH ₂-Ph); 6,16 (уш. д, 1H, NH мобильный); 6,42 (д, 1H, CH=CH пиридин); 6,60 (м, 1H, CH=CH пиридин); 7,35 (м, 5H, Ph); 7,45 (м, 1H, CH=CH пиридин); 8,07 (уш. д, 1H, N-CH=CH); 8,28 (с, 1H, N=CH-N).

Масс-спектр: 590 (MН+); 534 (MH-tBu+)].

[α _D ] (CHCl ₃ )=+2,9.

Стадия f)

Синтез 3-[5-этил-6-[4-(аминометил-2-пиридинил)-1-пиперидинил]-4-пиримидиниламино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланина, бис(трифторацетат)

Встряхивают 229 мг (0,39 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[[5-этил-6-[4-(аминометил-2-пиридинил)-1-пиперидинил]-4-пиримидиниламино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината в 7,5 мл дихлорметана с 0,9 мл трифторуксусной кислоты при температуре окружающей среды до исчезновения исходного продукта в ССМ (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 90-10-1-1). В конце реакции в реакционную смесь добавляют толуол и выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток растворяют в минимальном количестве дихлорметана с небольшим количеством метанола, затем выливают на простой этиловый эфир. Осадок фильтруют. Получают 97,4 мг (Выход=38%) целевого продукта в виде твердого аморфного вещества.

ССМ: Rf=0,1 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 90-10-1-1).

1H-ЯМР (CDCl ₃ + 2 капли МeOD): δ 1,12 (т, 3Н, СН₂-СН ₃); 1,43 и 1,95 (2м, 5H, N-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂-CH₂); 2,41 (кв, 2H, CH ₂ -CH₃); 3,10 и 3,65 (2м, 4H, N-CH ₂-CH₂-CH-CH₂-CH ₂); 3,26 (д, 2H, CH-CH ₂-МH); 3,80 и 4,02 (2м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,41 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 5,10 (с, 2H, O-CH ₂-Ph); 6,74 (т, 1H, CH=CH пиридин); 6,87 (д, 1H, CH=CH пиридин); 7,32 (м, 5H, Ph); 7,81 (м, 2H, CH=CH пиридин и N-CH=CH); 8,23 (с, 1H, N=CH-N).

Масс-спектр: 534 (MН+).

[α _D ] (CHCl ₃ )=+1,88.

Пример 40

Стадия а)

Синтез (1,1-диметилэтил)-4-[3-(4-метокси-2-нитрофенил)тиоуреидометил]пиперидин-1-карбоксилата

Смесь 1 г (4,67 ммоль) (1,1-диметилэтил)-4-аминометилпиперидин)-1-карбоксилата и 1,08 г (6,06 ммоль) 4-метокси-2-нитрофенилизотиоцианата в 70 мл тетрагидрофурана встряхивают в течение 5 часов при температуре окружающей среды в потоке азота. Растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа) и остаток хроматографируют на силикагеле, используя следующий элюент: этилацетат-гептан от 20-80 до 30-70. Получают 1,66 г (Выход=84%) целевого продукта.

ССМ: Rf=0,4 (силикагель, элюент: этилацетат-гептан 50-50).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,25 и 1,76 (2м, 4H, N-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂-CH₂); 1,47 (с, 9H, tBu); 1,91 (м, 1H, N-CH₂-CH₂-CH-CH₂-CH₂); 2,73 и 4,15 (2м, 4H, N-CH ₂-CH₂-CH-CH₂-CH ₂); 3,51 (м, 2H, CH-CH ₂-NH); 3,90 (с, 3Н, O-СН ₃); 6,66 (м, 1H, CH=CH ароматический); 7,22 (м, 1H, CH=CH ароматический); 7,59 (м, 1H, CH=CH ароматический).

Масс-спектр: 425 (MН+), 325 (МН-СООtBu+).

Стадия b)

Синтез (1,1-диметилэтил)-4-[(6-метокси-2-аминометилбензимидазол)]пиперидин-1-карбоксилата

В раствор 1,12 г (2,64 ммоль) (1,1-диметилэтил)-4-[3-(4-метокси-2-нитрофенил)тиоуреидометил]пиперидин-1-карбоксилата в 100 мл уксусной кислоты вводят 2 г активированного цинка в небольшом количестве уксусной кислоты (цинк активируют путем нагревания с помощью пистолета-нагревателя). Встряхивают в течение 5 часов, затем в раствор вводят clarcel, смесь фильтруют через clarcel и растворитель выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа). Получают 1,8 г целевого продукта.

Этот сырой продукт затем растворяют в 100 мл диметилформамида и вводят 10 мл триэтиламина и 500 мг дихлорида ртути. Встряхивают реакционную смесь при температуре окружающей среды в течение 15 часов. Затем растворитель выпаривают при пониженном давлении (0,2 кПа) и остаток обрабатывают смесью воды, насыщенного раствора бикарбоната натрия и этилацетата. Органическую фазу декантируют, сушат на сульфате магния и растворитель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа). Остаток хроматографируют на оксиде алюминия, элюируя следующим градиентом: этилацетат-дихлорметан/метанол от 50-50 (100% CH₂Cl₂) до 50-50 (95/5 CH₂Cl₂/МеОН). Получают 740 мг (Выход=77% по двум стадиям) целевого продукта.

ССМ: Rf=0,4 (оксид алюминия, элюент: этилацетат-дихлорметан/метанол 50-50(95/5)).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,07 и 1,64 (2м, 4H, N-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂-СН₂); 1,46 (с, 9H, tBu); 1,76 (м, 1H, N-CH₂-CH₂-CH-CH₂-CH₂); 2,61 и 4,05 (2м, 4H, NH-CH ₂-CH₂-CH-CH₂-CH ₂); 3,29 (м, 2H, CH-CH ₂-NH); 3,81 (с, 3H, O-СН ₃); 6,66 и 7,12 (2д, 2H, CH=CH бензимидазол); 6,88 (с, 1H, NH-C=CH-C-OCH3).

Масс-спектр: 361 (MН+), 305 (МН-tBu+), 261 (МН-СООtBu+).

Стадия с)

Синтез 4-(6-метокси-2-аминометилбензимидазол)пиперидина, трис(трифторацетат).

Встряхивают 918 мг (2,55 ммоль) (1,1-диметилэтил)-4-[(6-метокси-2-аминометилбензимидазол)]пиперидин-1-карбоксилата в 35 мл дихлорметана с 6 мл трифторуксусной кислоты при температуре окружающей среды до исчезновения исходного продукта в ССМ (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 90-10-1-1). Затем добавляют толуол и выпаривают смесь при пониженном давлении (2 кПа). Получают 1,15 г целевого продукта в форме соли трифторацетата.

ССМ: Rf=0,15 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 90-10-1-1).

1H-ЯМР (МeOD): δ 1,50 и 2,05 (2м, 5H, NH-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂-СН2); 3,00 и 3,43 (2м, 4H, NH-CH ₂-CH₂-CH-CH₂-CH ₂); 3,35 (д, 2H, CH-CH ₂-NH); 3,81 (с, 3Н, O-СН ₃); 6,85 и 7,25 (2м, 2H, CH=CH бензимидазол); 6,91 (с, 1H, NH-C=CH-C-OCH₃).

Масс-спектр: 261 (MН+).

Стадия d)

Синтез 4-бром-5-этил-6-[4-(6-метокси-2-аминометилбензимидазол)-1-пиперидинил]пиримидина

В одногорлую колбу, содержащую 356 мг (1,37 ммоль) 4-(6-метокси-2-аминометилбензимидазол)пиперидина, полученного из его соли, вводят 35 мл N,N-диметилацетамида, 381,84 мг (1,43 ммоль) 4,6-дибром-5-этилпиримидина в растворе, затем вводят 1,2 мл диизопропилэтиламина. Эту смесь нагревают до 110°С в течение 3 часов, затем концентрируют при пониженном давлении (2 кПа). Полученный остаток обрабатывают смесью воды, этилацетата и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют и водную фазу повторно экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат на сульфате магния, фильтруют, затем растворитель выпаривают досуха при пониженном давлении (2кПа). Полученный продукт хроматографируют на силикагеле, элюируя градиентом дихлорметан-метанол 95-5, затем дихлорметан-метанол 90-10.

Получают 383 мг целевого продукта (выход = 63%).

Получение 4-(6-метокси-2-аминометилбензимидазол)пиперидина в виде свободного амина.

700 мг 4-(6-метокси-2-аминометилбензимидазол)пиперидина вытесняют из его соли 6 масс-эквивалентами щелочной смолы amberlyst А21 (смола типа R-NМe₂) в смеси CH₂Cl₂/MeOH/AcOEt 1/1/1, встряхивая в течение 30 минут. Смолу предварительно промывают и оставляют на 20 минут для набухания в этой смеси растворителя. Указанную операцию повторяют 3 раза до полного вытеснения из соли. После фильтрования смолы и выпаривания растворителей получают 356 мг (1,37 ммоль) свободного 4-(6-метокси-2-аминометилбензимидазол)пиперидина.

ССМ: Rf=0,23 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол 90-10).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,27 (т, 3Н, СН₂-СН ₃); 1,32 и 1,80 (2м, 4H, N-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂-CH₂); 1,89 (м, 1H, N-CH₂-CH₂-CH-CH₂-CH₂); 2,63 (кв, 2H, СН ₂-СН₃); 2,85 и 3,82 (2м, 7H, N-CH ₂-CH₂-CH-CH₂-СН ₂, О-СН ₃); 3,37 (м, 2Н, СН-СН ₂-NН); 6,67 и 7,15 (2д, 2Н, СН=СН бензимидазол); 6,90 (с, 1Н, NН-С=СН-С-ОСН₃); 8,27 (с, 1Н, N=СН-N).

Масс-спектр: 446 (MН+).

Стадия е)

Синтез 4-бром-5-этил-6-[4-((1,1-диметилэтил)бензимидазол- 6-метокси-2-аминометил-1-карбоксилат)-1-пиперидинил]пиримидина

В смесь 159,7 мг (0,36 ммоль) 4-бром-5-этил-6-[4-(6-метокси-2-аминометилбензимидазол)-1-пиперидинил]пиримидина в 15 мл дихлорметана вводят 1,5 мл пиридина, затем 471 мг (2,16 ммоль) дитретбутилдикарбоната. Встряхивают при температуре окружающей среды в течение ночи. Вводят в реакционную смесь небольшое количество толуола, затем раствортель выпаривают при пониженном давлении (2 кПа). Обрабатывают остаток смесью воды, этилацетата и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу декантируют, затем сушат на сульфате магния и конденсируют при пониженном давлении (2 кПа). Полученный сырой продукт хроматографируют на силикагеле, элюируя следующим градиентом: гептан-этилацетат от 60-40 до 50-50. Получают 136 мг (Выход=69%) целевого продукта (в виде двух региоизомеров, определяемых с помощью ЯМР в соотношении 50-50).

ССМ: Rf=0,5 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол 90-10).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,30 (т, 6H, СН₂-СН ₃); 1,47 и 1,96 (2м, 8H, N-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂-CH₂); 1,72 (2 уш. с, 20H, tBu, N-CH₂-CH₂-CH-CH₂-CH₂); 2,70 (кв, 4H, CН ₂-CH₃); 2,97 и 3,89 (2м, 8H, N-CH ₂-CH₂-CH-CH₂-CH ₂); 3,52 (м, 4H, CH-CH ₂-NH); 3,82 (с, 6H, OCH ₃); 6,62 и 6,82 и 7,31 и 7,46 (4д, 4H, CH=CH бензимидазол); 7,00 и 7,26 (2с, 2H, NH-C=CH-C-OCH₃); 8,31 (с, 2H, N=CH-N).

Масс-спектр: 545/547 (MH+).

Стадия f)

Синтез (1,1-диметилэтил)-3-[5-этил-6-[4-((1,1-диметилэтил)-6-метокси-2-аминометилбензимидазол-1-карбоксилат)-1-пиперидинил]-4-пиримидиниламино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината

Смесь 136 мг (0,25 ммоль) 4-бром-5-этил-6-[4-((1,1-диметилэтил)бензимидазол-6-метокси-2-аминометил-1-карбоксилат)-1-пиперидинил]пиримидина, 88,5 мг (0,30 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-амино-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината, 53,2 мг (0,35 ммоль) фторида цезия, 11,4 мг (0,012 ммоль) трис(дибензилиденацетон)дипалладия(0) и 15,6 мг (0,025 ммоль) rac-2,2'-бис(дифенилфосфин)-1,1'-бинафтила в 6 мл 1,2-диметоксиэтана нагревают с обратным холодильником в течение 24 часов. В ходе реакции вводят 11,4 мг трис(дибензилиденацетон)дипалладия(0). После охлаждения смесь концентрируют при пониженном давлении (2 кПа), затем полученный остаток обрабатывают смесью этилацетата, воды и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу декантируют, сушат на сульфате магния, затем концентрируют при пониженном давлении (2 кПа). Остаток хроматографируют первый раз на силикагеле, элюируя следующим градиентом: этилацетат-гептан от 40-60 до 100% этилацетат. Второй раз хроматографируют на оксиде алюминия, элюируя следующим градиентом: этилацетат-дихлорметан-метанол от 50-50-0 до 50-50-2.

Получают 58 мг (выход = 30%) целевого продукта (в виде 2 региоизомеров, определяемых с помощью ЯМР в соотношении 50/50).

ССМ: Rf=0,4 (силикагель, элюент: этилацетат).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,15 (т, 6H, CH₂-CH ₃); 1,46 и 1,91 (2м, 26H, tBu, N-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂-CH₂); 1,72 (м, 20H, tBu, N-CH₂-CH₂-CH-CH₂-CH₂); 2,41 (кв, 4H, CH ₂-CH₃); 2,87 и 3,51 (2м, 12H, N-CH ₂-CH₂-CH-CH₂-CH ₂, CH-CH ₂-NH); 3,82 (с, 6H, OCH₃); 3,90 (м, 4H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,43 (м, 2H, NH-CH₂-CH-NH); 5,12 (с, 4H, O-CH ₂-Ph); 6,12 (уш. д, 2H, NH мобильный); 6,61 (д, 1H, CH=CH бензимидазол); 6,82 (м, 1H, CH=CH бензимидазол); 7,00 (уш. с, 1H, NH-C=CH-C-OCH₃); 7,35 (м, 12H, Ph, CH=CH бензимидазол); 7,45 (д, 1H, CH=CH бензимидазол); 8,29 (с, 2H, N=CH-N).

ВЭЖХ/масс-спектр: 759 (MН+); 659 (MH-СООtBu+); 603(MH-СООtBu-tBu+).

Стадия g)

Синтез 3-[5-этил-6-[4-(6-метокси-2-аминометилбензимидазол)-1-пиперидинил]-4-пиримидиниламино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланина, бис-трифторацетата

Встряхивают 58 мг (0,08 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[5-этил-6-[4-((1,1-диметилэтил)-6-метокси-2-аминометилбензимидазол-1-карбоксилат)-1-пиперидинил]-4-пиримидиниламино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината в 2 мл дихлорметана с 0,2 мл трифторуксусной кислоты при температуре окружающей среды до исчезновения исходного продукта в ССМ (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 90-10-1-1). В конце реакции в реакционную смесь добавляют толуол и выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток растворяют в минимальном количестве дихлорметана с небольшим количеством метанола, затем выливают на простой диизопропиловый эфир. Осадок фильтруют. Получают 16 мг (Выход=35%) целевого продукта в виде твердого аморфного вещества.

ССМ: Rf=0,3 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 90-10-1-1).

1H-ЯМР (МeOD): δ 1,12 (т, 3Н, СН₂-СН ₃); 1,49 и 1,95 (2м, 5H, N-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂-CH₂); 2,51 (кв, 2H, СН ₂-СН₃); 3,00 и 3,52 (2м, 4H, N-CH ₂-CH₂-CH-CH₂-CH ₂); 3,39 (д, 2H, CH-CH ₂-NH); 3,77 и 4,01 (2м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 3,86 (с, 3Н, ОСН ₃); 4,56 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 5,07 (м, 2H, O-CH ₂-Ph); 6,91 (д, 1H, CH=CH бензимидазол); 6,96 (с, 1H, NH-C=CH-C-OCH₃); 7,32 (м, 6H, Ph, CH=CH бензимидазол); 8,20 (с, 1H, N=CH-N).

ВЭЖХ/масс-спектр: 603 (MН+).

Пример 41

Синтез 2,5-диметил-4,6-дигидроксипиримидина:

Одногорлую колбу, содержащую 40 мл метанола, находящуюся в атмосфере азота, охлаждают до 0°С на ледяной бане, в реакционную смесь вводят 9,72 г метилата натрия (раствор, имеющий концентрацию с=3 мол. l^-1), затем при 0°С вводят небольшими порциями 5 г (53 ммоль) ацетамидинхлоргидрата. Встряхивают при температуре окружающей среды в течение 20 минут, затем вводят по каплям 8,3 мл диэтилметилмалоната. Продолжают встряхивать в течение 3 часов. Затем метанол конденсируют при пониженном давлении (2 кПа). Полученный сырой продукт обрабатывают минимальным количеством воды, охлаждают до 0°С, затем подкисляют чистой уксусной кислотой до получения рН от 4 до 5. Образовавшийся белый осадок фильтруют, промывают водой, этиловым эфиром и пентаном. Затем продукт белого цвета сушат на Р₂О₅ при пониженном давлении (0,2 кПа). Получают 3,3 г (выход=49%) целевого продукта.

ССМ: Rf=0,2 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота 85-15-2-2).

1H-ЯМР (DMSOd6): δ 1,68 (с, 3Н, ОН-СН-=С-СН ₃); 2,18 (с, 3Н, N=C-СН ₃).

Синтез 2,5-диметил-4,6-дихлорпиримидина

Смесь 3,3 г (23,5 ммоль) 2,5-диметил-4,6-дигидроксипиримидина и 15 мл оксихлорида фосфора нагревают с обратным холодильником в течение 8 часов. После охлаждения до температуры окружающей среды реакционную среду медленно выливают на смесь воды со льдом. Эту водную фазу экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия, затем сушат на сульфате магния и выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа). Получают 3,39 г (Выход=81%) целевого продукта.

ССМ: Rf=0,9 (силикагель, элюент: этилацетат 100%).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 2,46 (с, 3Н, Cl-CH=C-CH ₃); 2,68 (с, 3Н, N=C-CH₃).

Масс-спектр: 177/179(MH+).

Синтез 6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-2,5-диметил-4-хлорпиримидина:

В одногорлую колбу, содержащую 2,95 г (13,5 ммоль) 4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидина, полученного из его соли, вводят 2 г (11,3 ммоль) 4,6-дихлор-2,5-диметилпиримидина в растворе в 25 мл диметилацетамида и 5 мл диизопропилэтиламина. Эту смесь нагревают до 130°С в течение 4 часов, затем концентрируют досуха в вакууме. Полученный остаток обрабатывают смесью этилацетата, воды и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют и водную фазу повторно экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат на сульфате магния, затем растворитель выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток хроматографируют на силикагеле, элюируя градиентом этилацетата (100%), затем этилацетат-метанола (95-5). Получают 2,2 г целевого продукта (выход = 55%).

8,3 г нафтиридина вытесняют из его соли 6 масс-эквивалентами щелочной смолы amberlyst А21 (смола типа R-NМe₂) в смеси CH₂Cl₂/MeOH/AcOEt 1/1/1, встряхивая в течение 30 минут. Смолу предварительно промывают и оставляют на 20 минут для набухания в этой смеси растворителя. Указанную операцию повторяют 3 раза до полного вытеснения из соли.

После фильтрования смолы и выпаривания растворителей получают 2,95 г (13,5 ммоль) свободного нафтиридина.

ССМ: Rf=0,15 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол 95-5).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,90 и 2,01 (2м, 6H, NH-CH₂-CH ₂-CH₂, N-СН₂-СН ₂-СН-СН ₂-СН₂); 2,26 (с, 3H, СН₃); 2,51 (с, 3H, N=C-CH ₃); 2,72 (м, 3H, NH-CH₂-CH₂-CH ₂, N-CH₂-CH₂-CH-CH₂-CH₂); 2,97 и 3,97 (2м, 4H, CH₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂); 3,42 (м, 2H, NH-CH ₂-CH₂-CH₂); 6,41 и 7,16 (2д, 2H, CH=CH нафтиридин).

Масс-спектр: 358 (MН+).

Синтез (1,1-диметилэтил)-3-[[6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-2,5-диметил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината

Смесь 2,2 г (6,15 ммоль) 6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-2,5-диметил-4-хлорпиримидина и 2,17 г (7,38 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-амино-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината (полученного в соответствии с J.Med.Chem. (2001), 44(8), 1158-1176) в присутствии 1,31 г (8,61 ммоль) фторида цезия, 383 мг (0,615 ммоль) (2,2'-бис(дифенилфосфин)-1,1'-бинафтила и 281 мг (0,307 ммоль) трис(дибензилиденацетон)дипалладия(0) в 55 мл 1,2-диметоксиэтана нагревают при кипячении с обратным холодильником в течение 24 часов. Затем реакционную смесь охлаждают до температуры окружающей среды и вводят 281 мг (0,307 ммоль) трис(дибензилиденацетон)дипалладия(0), затем реакционную смесь нагревают при кипячении с обратным холодильником в течение еще 24 часов. После охлаждения раствор концентрируют досуха при пониженном давлении (2 кПа), затем обрабатывают смесью воды, этилацетата и насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу декантируют и водную фазу экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат на сульфате магния и выпаривают досуха при пониженном давлении (2 кПа). Остаток хроматографируют на оксиде алюминия градиентом простой изопропиловый эфир/этилацетат (50/50)-дихлорметан (50-50). Фракции, содержащие целевой продукт, объединяют для повторной очистки на силикагеле градиентом этилацетат-гептан-метанол от 50-50-0 до 90-0-10. Получают 550 мг (выход = 15%) целевого продукта.

ССМ: Rf=0,3 (силикагель, элюент: дихлорметан-метанол 90-10)).

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,46 (с, 9H, tBu); 1,92 (м, 9H, NH-CH₂-CH ₂-CH₂, N-CH₂-CH ₂-CH-CH ₂-CH₂, C=C-CH ₃); 2,41 (с, 3H, N=C-СН ₃); 2,70 (м, 3H, NH-CH₂-CH₂-CH ₂, N-CH₂-CH₂-CH-CH₂-CH₂); 2,91 и 3,66 (2м, 4H, CH₂-CH ₂-N-CH ₂-CH₂); 3,44 (м, 2H, NH-CH ₂-CH₂-CH₂); 3,90 (м, 2H, NH-CH ₂-CH-NH); 4,38 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 5,13 (с, 2H, O-CH ₂-Ph); 6,42 и 7,16 (2д, 2H, CH=CH нафтиридин); 7,35 (м, 5H, Ph).

Масс-спектр: 616 (MН+).

Синтез соответствующей кислоты:

Встряхивают при температуре окружающей среды 500 мг (0,81 ммоль) (1,1-диметилэтил)-3-[[6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-2,5-диметил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланината и 5 мл трифторуксусной кислоты в 30 мл дихлорметана в течение 24 часов. Затем добавляют толуол и выпаривают смесь досуха. Остаток растворяют в минимальном количестве дихлорметана с небольшим количеством метанола, затем выливают на простой диизопропиловый эфир. Осадок фильтруют. Получают 485 мг (Выход=76%, выражен в дитрифторацетате) целевого продукта.

1H-ЯМР (CDCl ₃ ): δ 1,97 (м, 9H, NH-CH₂-CH ₂-CH₂, N-CH₂-CH ₂-СН-СН ₂-СН₂, С=С-СН ₃); 2,54 (с, 3Н, N=C-CH ₃); 2,78 (м, 2H, NH-CH₂-CH₂-CH ₂); 2,98 (м, 1H, N-CH₂-CH₂-CH-CH₂-CH₂); 3,22 и 3,80-4,07 (2м, 6H, N-CH ₂-CH₂-CH-CH₂-CH ₂, NH-CH ₂-CH-NH); 3,51 (м, 2H, NH-CH ₂-CH₂-CH₂), 4,45 (м, 1H, NH-CH₂-CH-NH); 5,10 (с, 2H, O-CH ₂-Ph); 6,42 и 7,37 (2м, 3Н, CH=CH нафтиридин, NH мобильный); 7,32 (м, 5H, Ph).

Масс-спектр: 560 (MН+); 426 [MH+ -(СООСН₂Рh)]+.

Фармакологический тест: Тест ELISA кистрин/рецептор витронектина (α _v β ₃ )

Протокол:

96-луночные планшеты MaxiSorp покрывают на ночь при 40°С 100 мкл кистрина в концентрации 1 мкг/мл (разведение в буфере покрытия: карбонат 0,05 М/NaOH pH 9,6). На следующий день лунки опорожняют и лиганды (кистрин) связывают (связывающий буфер: PBS, содержащий 0,5% BSА (рН 7,4)) в течение 1 часа при температуре окружающей среды в условиях слабого перемешивания 125 rpm. Лунки промывают шесть раз (буфер для промывания: PBS, содержащий 0,5% Tween 20 (рН 7,7), затем в каждую лунку вводят в следующем порядке:

- 40 мкл инкубационного буфера

- 10 мкл разведенного тестируемого продукта (продукты разведены в смеси 50:50 DMSO/вода)

- 50 мкл рецептора α_vβ₃ человека (ср. Pytella et al. Methods Enzymol. (1987) 144 (разведение в инкубационном буферном растворе, адаптируют в зависимости от количества рецептора и в зависимости от лиганда). Лиганд, рецептора α_vβ₃ и исследуемые продукты инкубируют совместно в течение 3 часов при температуре окружающей среды при слабом перемешивании 125 rpm.

Лунки повторно шестикратно промывают, затем инкубируют в течение 2 часов при температуре окружающей среды при слабом перемешивании 125 rpm в присутствии 100 мкл антирецепторного антитела в сочетании с пероксидазой (антитело 4В12-HRP разводят в инкубационном буфере (50 мМ TRIS pH 7,4; 05% BSA; 0,05% Tween 20; 1mM MnCl₂; 50 мкМ CaCl₂; 50 мкМ MgCl₂; 100 mM NaCl). Разведение адаптируют к количеству рецептора.

Затем лунки шестикратно промывают, прежде чем приступить к измерению связывания лиганд-рецептора посредством набора для выявления пероксидазы (TBM Microwell Peroxidase Substrate System Kirkgaard; Ref cat 50-76-00).

Этот набор содержит флакон А субстрата (3,3',5,5'-тетраметилбензидина в концентрации 0,4 г/л) и флакон В (0,02% Н₂О₂ в буферном растворе цитрат/лимонная кислота). Непосредственно перед использованием объем А смешивают с объемом В, затем реакционную смесь распределяют из расчета 100 мкл на лунку.

Ферментативная реакция развивается в течение 6-10 минут в отношении Kistrine/α_vβ₃, затем ее останавливают путем введения 100 мкл 1М фосфорной кислоты. Оптическую плотность определяют при 450 нм.

Полученные результаты

Строят следующую кривую: процент связывания как функция логарифма при каждой концентрации тестируемого продукта.

Для каждого продукта определяют IC50 по следующей формуле: IC50=(В0+В_мин)/2,

В0 = максимум связывания при полном отсутствии продукта;

В_мин = минимум связывания при самой высокой концентрации продукта.

Пример	K/VnR IC₅₀ (нM)
1	3
2	160
3	3,1
4	5,1

Активность in vivo

Гиперкальцемия, вызванная гормоном паращитовидной железы (РТН) на модели тиреопаратиреоидэктомированной (ТРХТ) крысы.

Стимуляция резорбции кости у ТРХТ крыс вызвана перфузией РТН и изменения резорбции кости вызывают концентрацию кальция в сыворотке.

Крысы-самцы Sprague Dawleyecom весом 150-200 г тиреопаратиреоидэктомированы. Крысы получают стандартный рацион, содержащий 7 г Са/кг (UAR) и воду Volvic. Эффективность тиреопаратиреоидэктомии тестировали через 8 дней после операции путем измерения значений концентрации СА в сыворотке животных, проводимого натощак. Крысы считаются тиреопаратиреоидэктомированными, если содержание Са в сыворотке составляет менее 80 мг/л. РТН (1-34) крысы (Bachem) растворяют в 0,15М NaCl Cys.HCl 2% и подают осмотическими мининасосами (ALZET 2001D) дозами, составляющими 200 pmol/кг/час. Мининасосы вводят под анестезией (кетамин-75 мг/кг и ацепромазин-2,5 мг/кг) во внутрибрюшные полости ТРХТ крыс натощак. Контрольным ТРХТ крысам вводят насосы, содержащие вектор РТН.

Или тестируемый продукт, или вектор (контрольные или крысы, обработанные РТН) вводят дважды подкожно (2 мл/кг веса тела) во времена 0 до 3 часа после начала вливания РНТ. Тест продолжают в течение последующих 6 часов. По окончании обработки всю кровь собирают после декапитации. Образцы крови центрифугируют со скоростью 3000 tpm в течение 15 мин (CR422 Jouan) для получения сыворотки.

Общие показатели концентрации Са в сыворотке измеряют с помощью колорометрии (Ciba-Corning), используя систему считывания микропластин IEMS Labsystems при 540 нм.

Разницу между средними показателями кальциемии у крыс после обработки и в контрольных группах анализируют с помощью дисперсионного анализа и тестом Dunnett.

Активность продукта вычисляют по следующей формуле:

Продукты из примеров 6, 9, 13 и 15-19, тестированные описанным методом, показали активность на крысах при подкожном введении от 1 мг/кг двукратно до 10 мг/кг двукратно.

Claims

1. Соединения формулы (I):

в форме (R) или (S)-изомеров, индивидуально или в смеси, а также их физиологически приемлемые аддитивные соли и их гидраты, в которой: G обозначает:
Het-NH-CO-;
Het-NH-CH₂-;
Het-;
Het при этом обозначает моноциклическую или бициклическую систему, причем каждый цикл представляет собой 5- или 6-членное ароматическое или неароматическое кольцо, причем кольцо или по меньшей мере одно из колец содержит от 1 до 2 атомов азота в качестве гетероатомов, при этом Het является замещенным или незамещенным одной или несколькими группами R⁹;
R¹ обозначает атом водорода; (С₆-С₁₄)арильную группу; (С₆-С₁₄)арил(С₁-С₄)алкил; радикал амино, незамещенный, монозамещенный или дизамещенный алкилом и/или ацилом, содержащим от 1 до 4 атомов углерода;
R² обозначает атом водорода; атом галогена; нитрогруппу; алкил, содержащий от 1 до 4 атомов углерода; радикал амино, незамещенный, монозамещенный или дизамещенный алкилом и/или ацилом, содержащим от 1 до 4 атомов углерода; группу -(CH₂)_0-2-OR⁵;
R³ обозначает:
атом водорода;
радикал -CO₂R⁵;
радикал -SO₂R⁵ или
моноциклическую или бициклическую систему, причем каждый цикл представляет собой 5- или 6-членное ароматическое или неароматическое кольцо, причем кольцо или по меньшей мере одно из колец содержит от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из N, О или S, незамещенную или замещенную одним или несколькими радикалами R⁹;
R⁴ обозначает ОН; (C₁-C₈)алкокси-; радикал амино, незамещенный, монозамещенный или дизамещенный (С₁-С₄)алкилом; или остаток аминокислоты D или L;
R⁵ обозначает (С₁-С₈)алкил; (С₆-С₁₄)арил; (С₆-С₁₄)арил(С₁-С₄)алкил; (С₃-С₁₂)циклоалкил или (С₃-С₁₂)циклоалкил(С₁-С₄)алкил; бициклоалкил(С₁-С₄)алкил; трициклоалкил(С₁-С₄)алкил; причем указанные радикалы: арилы, алкилы, циклоалкилы, бициклоалкилы и трициклоалкилы не замещены или замещены одной или несколькими выбранными группами R⁹;
R⁹ обозначает галоген; амино; нитро; гидроксил; (С₁-С₄)алкилокси-; карбокси; (C₁-С₄)алкилоксикарбонил-; (С₁-С₈)алкил, незамещенный или замещенный одним или несколькими атомами галогена; фенил,
при условии, что фенильные радикалы могут быть незамещенными или замещенными одним или несколькими одинаковыми или разными радикалами, выбранными из (С₁-С₈)алкила, в частности (С₁-С₄)алкила, гидроксила, (С₁-С₈)алкилокси, галогена, выбранного из фтора, хлора и брома, нитро, амино, (С₁-С₄)алкиламино, ди(С₁-С₄)алкиламино, трифторметила, циано, аминокарбонила, (С₁-С₄)алкиламинокарбонила, ди(С₁-С₄)алкиламинокарбонила, карбокси, (С₁-С₄)алкоксикарбонила,
или
G обозначает 1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил,
R¹ обозначает метил,
R² обозначает метил,
R³ обозначает бензилоксикарбонил, и
R⁴ обозначает ОН или трет-бутокси.

2. Соединения формулы (I) по п.1, в которой G обозначает группу Het, Het-NHCO-, или Het-NH-СН₂-, в которой Het обозначает следующие гетероциклы:

где n=1 или 2.

3. Соединения формулы (I) по любому из пп.1 и 2, в которой R³ обозначает: гетероцикл, выбранный из

а также их фармацевтически приемлемые аддитивные соли.

4. Соединения формулы (I) по любому из пп.1 и 2, в которой R³ обозначает бензилоксикарбонильную группу, а также их фармацевтически приемлемые аддитивные соли.

5. Соединения формулы (I) по п.2, в которой R² обозначает водород, радикал алкил, содержащий от 1 до 4 атомов углерода или атом фтора, а также их фармацевтически приемлемые аддитивные соли.

6. Соединения формулы (I) по п.5, в которой R² обозначает метил или этил.

7. Соединения формулы (I) по п.1, в которой
G обозначает:

8. Соединения формулы (I) по п.1, в которой G обозначает:

R¹ обозначает атом водорода,
R² обозначает атом водорода, атом фтора, радикал метил или радикал этил,
R³ обозначает бензилоксикарбонилоксигруппу,
R⁴ обозначает гидроксильную группу,
а также их фармацевтически приемлемые аддитивные соли.

9. Соединения формулы (I) по п.1, имеющие следующие названия:
3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланин,
3-[[5-этил-6-[4-[(1,2,3,4,5,6-гексагидро-2-пиримидинил)иминокарбонил]-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланин,
3-[[6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-метил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланин,
3-[[6-[4-[(1,2,3,4,5,6-гексагидро-2-пиримидинил)иминокарбонил]-1-пиперидинил]-5-метил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланин,
этил-3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланинат,
изопропил-3-[[6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-5-метил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланинат,
(1,1-диметилэтил)-3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланинат,
(1,1-диметилэтил)-3-[[5-метил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланинат,
(1,1-диметилэтил)-3-[[6-[4-[(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-2,5-диметил-4-пиримидинил]амино]-N-[(фенилметокси)карбонил]аланинат,
(1,1-диметилэтил)-3-[[5-этил-6-[4-(1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридин-7-ил)-1-пиперидинил]-4-пиримидинил]амино]-N-(1-нафталинсульфонил)аланинат,
имеющие конфигурацию (R) или конфигурацию (S) или их смеси, а также их аддитивные соли.

10. Способ получения соединений формулы (I), в котором
а) приводят во взаимодействие соединение формулы (II)

в которой R¹, R², R³ и R⁴ такие, как описаны в п.1, с соединением формулы (III)

в которой G такое, как описано в п.1, в присутствии основания,
b) и при необходимости в полученном таким образом соединении формулы (I) превращают одну группу R³ в другую группу R³ путем удаления одной группы R³ с получением свободного амина с последующей конденсацией с соединением, содержащим другую группу R³, выбранную из -CO₂-R⁵ или -SO₂-R⁵, и/или в случае необходимости соединение формулы (I) подвергают гидролизу с получением соответствующей кислоты или возможно этерификации с получением соответствующего эфира или амидированию с получением соответствующего амида и/или соединение формулы (I) переводят в фармацевтически приемлемую соль.

11. Способ получения соединений формулы (I), в котором
а) приводят во взаимодействие соединение формулы (II), такое как описано в п.10, с соединением формулы (IIIa)

b) приводят во взаимодействие соединение формулы (IV) с соединением Het-NH₂ для получения соединений формулы (I), где G обозначает группу Het-NHCO-,
c) и при необходимости в полученном таким образом соединении формулы (I) превращают одну группу R³ в другую группу R³ путем удаления одной группы R³ с получением свободного амина с последующей конденсацией с соединением, содержащим другую группу R³, выбранную из -СО₂-R⁵ или -SO₂-R⁵, и/или в случае необходимости соединение формулы (I) подвергают этерификации с получением соответствующего эфира или амидированию с получением соответствующего амида и/или соединение формулы (I) переводят в фармацевтически приемлемую соль.

12. Способ получения соединений формулы (I) по любому из пп.1-9, отличающийся тем, что
а) приводят во взаимодействие соединение общей формулы (IIa)

в которой R¹, R², G и X такие, как описаны выше,
с соединением формулы (VI)

в которой R³ и R⁴ такие, как описаны выше, или в присутствии сильного основания, или путем катализа с помощью палладия,
b) и при необходимости в полученном таким образом соединении формулы (I) превращают одну группу R³ в другую группу R³ путем удаления одной группы R³ с получением свободного амина с последующей конденсацией с соединением, содержащим другую группу R³, выбранную из -CO₂-R⁵ или -SO₂-R⁵, и/или в случае необходимости соединение формулы (I) подвергают гидролизу с получением соответствующей кислоты или возможно этерификации с получением соответствующего эфира или амидированию с получением соответствующего амида и/или соединение формулы (I) переводят в фармацевтически приемлемую соль.

13. Лекарственное средство, обладающее свойствами антагониста рецептора витронектина, представляющее собой соединения формулы (I) и/или их физиологически приемлемые соли, такие как описаны выше по любому из пп.1-9.

14. Лекарственное средство по п.13, ингибирующее резорбцию кости при лечении или предупреждении остеопороза.

15. Лекарственное средство по п.13, ингибирующее рост опухолей или костных метастаз.

16. Лекарственное средство по п.13, обладающее противовоспалительной активностью при лечении или предупреждении сердечно-сосудистых заболеваний, рестеноза, артериосклероза или ретинопатии.

17. Фармацевтическая композиция, обладающая активностью антагониста рецептора витронектина, содержащая соединение формулы (I) по пп.1-9 в эффективном количестве, а также один или несколько эксципиентов.

18. Применение соединений формулы (I) и/или их физиологически приемлемых солей, таких как описаны по любому из пп.1-9 для получения лекарственного средства, обладающего активностью антагониста рецептора витронектина.

19. Применение по п.18, в котором лекарственное средство предназначено для предупреждения или лечения остеопороза.

20. Применение по п.18, в котором лекарственное средство предназначено для ингибирования роста опухолей или костных метастаз.

21. Применение по п.18, в котором лекарственное средство предназначено для предупреждения или лечения сердечно-сосудистых заболеваний, рестеноза, артериосклероза или ретинопатии.