PT1343773E - Derivados tiazole para o tratamento de distúrbios relacionados com a ppar - Google Patents

Description

DESCRIÇÃO

"DERIVADOS TIAZOLE PARA O TRATAMENTO DE DISTÚRBIOS RELACIONADOS COM O PPAR" A presente invenção refere-se a certos compostos novos. Em particular, a presente invenção refere-se a compostos que activam os receptores activados pelo proliferador de peroxissoma humano ("hPPARs"). A presente invenção refere-se também ao método para preparar os compostos, sua utilização em medicina, composições farmacêuticas contendo-os e métodos para a prevenção ou tratamento de doenças ou patologias mediadas pelo PPAR.

As doenças cardiovasculares têm sido associadas a vários factores de risco independentes. Estes incluem hipertensão, niveis de fibrinogénio aumentados, niveis elevados de triglicéridos, colesterol LDL elevado, colesterol total elevado e niveis baixos de colesterol HDL. Os inibidores da HMG CoA redutase ("estatinas") são úteis para o tratamento de patologias caracterizadas por niveis de LDL-c elevados. Foi demonstrado que a diminuição do LDL-c não é suficiente para reduzir o risco de doença cardiovascular em alguns doentes, em particular, aqueles com niveis normais de LDL-c. Este grupo de população é identificado pelo factor de risco independente de HDL-c baixo. O risco aumentado de doença cardiovascular associada a niveis de HDL-c baixos não foi ainda direccionado com sucesso a uma terapia com fármacos (i. e., actualmente, não existem fármacos no mercado que sejam úteis para aumentar o HDL-c). (Bisgaier, C. L.; Pape, Μ. E. Curr. Pharm. Des. 1998, 4, 53-70). 1 A síndrome X (incluindo sindrome metabólico) é definido vagamente como um conjunto de anormalidades incluindo hiperinsulemia, obesidade, niveis elevados de triglicéridos, ácido úrico, fibrinogénio, partículas LDL de baixa densidade e inibidor do activador do plasminogénio 1 (PAI-1) e níveis diminuídos de HDL-c. 0 NIDDM é descrito como resistência à insulina que, por sua vez, causa saída anómala de glucose e uma diminuição na reabsorção de glucose pelo músculo esquelético. Estes factores conduzem, eventualmente, a uma tolerância à glucose diminuída (IGT) e hiperinsulinemia.

Os Receptores Activados pelo Proliferador de Peroxisoma (PPARs) são receptores orfãos que pertencem à superfamília dos receptores esteróide/retinóide dos factores de transcrição activados por ligando. Ver, por exemplo, Willson T .M. e Wahli, W., Curr. Opin. Chem. Biol., 1, pp 235-241 (1997) e Willson T.M. et al., J. Med. Chem., 43, p 527-549 (2000) . A ligação dos ligandos agonistas ao receptor resulta em alterações no nível de expressão dos ARNm codificados pelos genes PPAR alvo.

Foram isolados três Receptores Activados pelo Peroxisoma Proliferador e denominados PPAR-alfa, PPAR-gama e PPAR-delta (também conhecido por NUC1 ou PPAR-beta).

Estes PPARs regulam a expressão dos genes alvo por ligação a elementos da sequência de ADN, denominados elementos de resposta dos PPAR (PPRE). Até à data, foram identificados PPREs nos promotores de vários genes que codificam proteínas que regulam o metabolismo lipídico, sugerindo que os PPARs desempenham uma função determinante na cascata de sinalização 2 adipogénica e homeostase lipídica (H. Keller e W. Wahli, Trends Endocrinol. Metab 291-296, 4 (1993)).

Foi agora revelado gue tiazolidinadionas são activadores potentes e selectivos de PPAR-gama e ligam-se directamente ao receptor PPAR-gama (J. M. Lehmann et al., J. Biol. Chem. 12953-12956, 270 (1995)), proporcionado evidência de gue PPAR-gama é um alvo possível para acções terapêuticas das tiazolidinadionas.

Os activadores do receptor nuclear PPARy, por exemplo, troglitazona, demonstram em clínica, potenciar a acção da insulina, reduzir a glucose no soro e possuir efeitos peguenos mas significativos na redução dos níveis de triglicéridos no soro em doentes com diabetes Tipo 2. Ver, por exemplo, D. E. Kelly et al., Curr. Opin. Endocrinol. Diabetes, 90-96, 5 (2), (1998); M. D. Johnson et al., Ann. Pharmacother., 337-348, 32 (3), (1997); e M. Leutenegger et al., Curr. Ther. Res., 403-416, 58 (7), (1997) . O mecanismo para este efeito de diminuição dos triglicéridos parece ser, predominantemente, pela remoção aumentada de lipoproteínas de densidade muito baixa (VLDL) através da indução da expressão do gene da lipoproteína lipase (LPL) . Ver, por exemplo, B. Staels et al., Arterioscler.

Thromb., Vasc. Biol., 1756-1764, 17 (9), (1997).

Os fibratos são uma classe de fármacos que podem reduzir os triglicéridos do soro em 20-50%, baixar as LDLc em 10-15%, alterar o tamanho das partículas LDL das LDL pequenas densas mais aterogénicas para LDL densas normais e aumenta o HDLc em 10-15%. Os resultados experimentais indicam que os efeitos dos 3 fibratos nos lípidos do soro são mediados através da activação do PPARa. Ver, por exemplo, B. Staels et al., Curr. Pharm. Des., 1-14, 3 (1), (1997). A activação do PPARa resulta na transcrição de enzimas que aumentam o catabolismo do ácido gordo e diminuem a sintese de novo de ácido gordo no figado, resultando na sintese de triglicéridos e produção/secreção de VLDL diminuída. Além disso, a activação de PPAR diminui a produção de apoC-III. A redução em apoC-III, um inibidor da actividade da LPL, aumenta a eliminação de VLDL. Ver, por exemplo, J. Auwerx et al., Atherosclerosis, (Shannon, Irei.), S29-S37, 124 (Suppl), (1996).

Certos compostos que activam, ou de outro modo, interagem com um ou mais dos PPARs têm sido implicados na regulação dos níveis de triglicéridos e colesterol em modelos animais. Ver, por exemplo, Patentes U.S. 5847008 (Doebber et al.) e 5859051 (Adams et al.) e publicações PCT WO 97/28149 (Leibowitz et al.) e WO99/04815 (Shimokawa et al.). Num relatório recente (Berger et al., J. Biol. Chem. 1999), vol. 274, pp. 6718-6725) foi referido que a activação do PPARõ não parece modular os níveis de triglicéridos ou glucose.

Consequentemente, a invenção proporciona um composto de fórmula 1 e seus sais farmaceuticamente aceitáveis e seus solvatos e ésteres de alquiloCi-C6. 4

(1) em que: X2 é 0, S ou CH2 R6 é H, CH3 ou CH2CH3; R é H, CF3 ou CH3;

Cada R é, independentemente, CF3 ou F; y é 1 ou 2/ as doenças ou patologias medidas pelo hPPAR incluem dislipidemia incluindo dislipidemia diabética associada e dislipidemia mista, sindrome X (como definido neste pedido, isto engloba sindrome metabólica), insuficiência cardíaca, hipercolesteremia, doença cardiovascular incluindo aterosclerose, arteriosclerose e hipertrigliceridemia, diabetes mellitus tipo II, diabetes tipo I, resistência à insulina, hiperlipidemia, inflamação, doenças hiperproliferativas epiteliais incluindo eczema e psoríase, e patologias associadas com os pulmões e intestinos e regulação do apetite e ingestão de alimentos em indivíduos que sofrem de distúrbios, tais como obesidade, anorexia bulímica e anorexia 5 nervosa. Em particular, os compostos desta invenção são úteis no tratamento e prevenção de diabetes e doenças cardiovasculares e patologias incluindo aterosclerose, arteriosclerose, hipertrigliceridemia e dislipidemia mista.

Noutro aspecto, a presente invenção proporciona composições farmacêuticas compreendendo um composto da invenção, de um modo preferido, em associação com um diluente ou veiculo farmaceuticamente aceitável.

Noutro aspecto, a presente invenção proporciona um composto da invenção para utilização em terapia e, em particular, em medicina humana.

Noutro aspecto, a presente invenção proporciona a utilização de um composto da invenção para a preparação de um medicamento de uma doença ou patologia mediada por hPPAR.

Como aqui utilizado, "um composto da invenção" significa um composto de fórmula (I) ou um seu sal, solvato ou éster de alquiloCi-C6 farmaceuticamente aceitável.

Enquanto os ésteres hidrolisáveis estão incluidos no âmbito desta invenção, os ácidos são preferidos, porque os dados sugerem que enquanto os ésteres são compostos úteis, na verdade, podem ser os ácidos nos quais se hidrolisa que são os compostos activos. Os ésteres que hidrolisam rapidamente podem produzir o ácido carboxilico nas condições do ensaio ou in vivo. Geralmente, o ácido carboxilico é activo quer nos ensaios de ligação como de transfecção transiente, enquanto o éster, normalmente, não se liga bem, mas é activo no ensaio de transfecção transiente, presumivelmente devido à hidrólise. Os 6 ésteres hidrolizáveis preferidos são os ésteres de alquiloCi-C6 em que o grupo alquilo pode ser de cadeia linear ou cadeia ramificada. Os ésteres de metilo ou etilo são mais preferidos.

De um modo preferido, X2 é 0, S ou C(R10Ri:l) . De um modo muito preferido, X2 é 0 ou S;

De um modo preferido R9 é CH3;

De um modo preferido, R6 é H, CH3 ou CH2CH3.

De um modo preferido, y é 1 ou 2. Quando y é 2, de um modo preferido, um dos substituintes é halogéneo e outro é CF3. Quando y é 1, de um modo preferido, o substituinte está na posição para no anel.

Enquanto os grupos preferidos para cada variável foram, geralmente, listados acima, de um modo geral, separadamente, para cada variável, os compostos preferidos desta invenção incluem aqueles em que várias ou cada uma das variáveis na Fórmula (I) é seleccionada dos grupos preferidos, mais preferidos ou muito preferidos para cada variável. Assim, esta invenção pretende incluir todas as combinações de grupos preferidos ou muito preferidos.

Os compostos preferidos de fórmula 1 incluem. ácido 2—{4—[({2—[2-fluoro-4-(trifluorometil)fenil]-4-metil-l,3-tiazol-5-il}metil)sulfanil]-2-metilfenoxi} - 2-metilpropanóico 7 éster etilico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil 2-(4-trifluorometilfenil)tiazol-5-il]etoxi}fenoxi)propiónico éster etilico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil 2-(4-trifluorometilfenil)tiazol-5-il]propoxi}fenoxi)propiónico éster etilico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil 2-(3-fluoro-4-trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]etoxi}-fenoxi)-propiónico éster etilico do ácido (S)-2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4 metil-2-(4-trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]etoxi}-fenoxi)-propiónico éster etilico do ácido (R)-2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4 metil-2-(4-trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]etoxi}-fenoxi)-propiónico éster etilico do ácido 2-(4-{1-[2-(2-fluoro-4 trifluorometil-fenil)-4-metil-tiazol-5-il]-etoxi}-2-metil-fenoxi)-2-metil-propiónico éster etilico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[2-(4 trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-etoxi}-fenoxi)-propiónico éster etilico do ácido (R)-2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4 metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]propoxi}-fenoxi)-propiónico éster etílico do ácido (S)-2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]propoxi}-fenoxi)-propiónico éster etílico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-[4-metil-2-(4-trifluorometilfenil)tiazol-5-il-metoxi]fenoxi)propiónico éster etílico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-etilsulfanil}-fenoxi)-propiónico éster etilico do ácido 2-metil-2-(2-metil)-4-{1-[2-(4- trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-etilsulfanil}-fenoxi)-propiónico éster etílico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-propilsulfanil}-fenoxi)-propiónico ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4- trifluorometilfenil)tiazol-5-il]etoxi}fenoxi)propiónico ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4- trifluorometilfenil)tiazol-5-il]propoxi}fenoxi)propiónico ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(3-fluoro-4- trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]etoxi}-fenoxi)-propiónico 9 ácido (S)-2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4- trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]etoxi}-fenoxi)- propiónico ácido (R)-2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4- trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]etoxi}-fenoxi)- propiónico ácido 2— (4—{1—[2— (2 — fluoro-4-trifluorometil-fenil)-4-metil-tiazol-5-il]-etoxi}-2-metil-fenoxi)-2-metil- propiónico ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[2-(4-trifluorometil- fenil) -tiazol-5-il]-etoxi}-fenoxi)-propiónico ácido (R)-2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4- trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]propoxi}-fenoxi)-propiónico ácido (S)-2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4- trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]propoxi}-fenoxi)-propiónico ácido 2-metil-2-(2-metil-4-[4-metil-2-(4- trifluorometilfenil)tiazol-5-il-metoxi]fenoxi)propiónico ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4- trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-etilsulfanil}-fenoxi)-propiónico ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[2-(4-trifluorometil fenil) -tiazol-5-il]-etilsulfanil}-fenoxi)-propiónico 10 ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4- trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-propilsulfanil}-fenoxi)-propiónico e seus sais e solvatos farmaceuticamente aceitáveis.

Os especialistas na técnica irão reconhecer que existem estereocentros nos compostos de fórmula (I) . Consequentemente, a presente invenção inclui todos os estereoisómeros e isómeros geométricos possíveis de fórmula (I) e inclui não só compostos racémicos como esta invenção também tem como intenção abranger cada um destes isómeros nas suas formas racémicas, enriquecidas ou purificadas. Quando um composto de fórmula (I) é desejado como um enantiómero simples, pode ser obtido por resolução do produto final ou por síntese estereoespecífica, utilizando um catalisador opticamente activo, um sistema catalítico com ligandos opticamente activos, material de partida isomericamente puro ou qualquer intermediário conveniente. A resolução do produto final, um intermediário ou um material de partida, pode ser efectuado por qualquer método adequado conhecido na técnica. Ver, por exemplo, Stereochemistry of Carbon Compounds por E. L. Eliel (Mcgraw Hill, 1962) e Tables of Resolving Agents por S. H. Wilen. Adicionalmente, em situações onde os tautómeros dos compostos de fórmula (I) são possíveis, a presente invenção pretende incluir todas as formas tautoméricas dos compostos. Em particular, em muitos dos compostos preferidos desta invenção, o átomo de carbono, ao qual estão ligados R6 e R7, é quiral. Em alguns destes compostos quirais, as actividades dos vários receptores PPAR variam entre os isómeros S e R. Qual destes isómeros é o preferido, irá depender, em particular, da utilidade desejada do composto. Por outras palavras, mesmo com o mesmo composto, é possível que o isómero S seja o preferido para 11 algumas utilizações, enquanto o isómero R seja preferido para outras.

Os agonistas hPPAR de fórmula (I) podem ser agonistas de apenas um tipo ("agonistas selectivos"), agonistas para dois subtipos de PPAR ("agonistas duplos") ou agonistas para os três subtipos ("agonistas pan"). Como aqui utilizado, por "agonista", ou "composto de activação" ou "activador" ou semelhantes, significa aqueles compostos que possuem um pKi de, pelo menos, 6,0, de um modo preferido, pelo menos, 7,0 para o PPAR relevante, por exemplo, hPPARõ no ensaio de ligação descrito abaixo e que atinge, pelo menos, 50% de activação do PPAR relevante relativamente ao controlo positivo apropriado indicado no ensaio de transfecção descrito abaixo a concentrações de 10~5 M ou menos. De um modo mais preferido, os agonistas desta invenção atingem 50% de activação de, pelo menos, um PPAR humano no ensaio de transfecção relevante a concentrações de 10“6 M ou menos. De um modo preferido, os compostos de fórmula (I) são agonistas de hPPAR. De um modo mais preferido, os compostos são agonistas de hPPARõ. De um modo muito preferido, são agonistas dual de hPPARõ e hPPARa ou agonistas pan.

Será também evidente pelos especialistas na técnica que os compostos da presente invenção podem também ser utilizados na forma de um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável. Os sais fisiologicamente aceitáveis dos compostos de fórmula (I) incluem sais convencionais formados a partir de ácidos ou bases orgânicos ou inorgânicos farmaceuticamente aceitáveis, bem como sais de adição de ácidos de amónio quaternário. Os exemplos mais específicos de sais de ácidos adequados incluem ácido clorídrico, bromidrico, sulfúrico, fosfórico, nitrico, perclórico, fumárico, acético, propiónico, succinico, glicólico, 12 fórmico, láctico, maleico, tartárico, cítrico, palmóico, malónico, hidroximaleico, fenilacético, glutâmico, benzóico, salicílico, fumárico, toluenossulfónico, metanossulfónico, naftaleno-2-sulfónico, benzenossulfónico hidroxinaftóico, hidroiodico, málico, esteróico, tânico e semelhantes. Outros ácidos, tais como oxálico, embora não sendo eles próprios farmaceuticamente aceitáveis, podem ser úteis na preparação de sais úteis como intermediários na obtenção dos compostos da invenção e seus sais farmaceuticamente aceitáveis. Exemplos mais específicos de sais básicos adequados, incluem sais de sódio, lítio, potássio, magnésio, alumínio, cálcio, zinco, N,N'-dibenziletilenodiamina, cloroprocaína, colina, dietanolamina, etilenodiamina, N-metilglucamina e procaína. Será evidente para os especialistas na técnica de química orgânica que muitos compostos orgânicos podem formar complexos com os solventes nos quais são feitos reagir ou a partir dos quais eles são precipitados ou cristalizados. Estes complexos são conhecidos como "solventes". Por exemplo, um complexo com água é conhecido como "hidrato". Os solvatos do composto de fórmula (I) estão dentro do âmbito da invenção. Daqui para a frente, as referências a um composto, de acordo com a invenção, incluem ambos os compostos de fórmula (I) e seus sais e solvatos farmaceuticamente aceitáveis.

Os compostos da invenção e seus derivados farmaceuticamente aceitáveis são administrados, convenientemente, na forma de composições farmacêuticas. Tais composições podem ser apresentadas, convenientemente, para utilização de um modo convencional em mistura com um ou mais veículos ou excipientes fisiologicamente aceitáveis. 13

Embora seja possível que os compostos da presente invenção possam ser administrados terapeuticamente como os químicos em bruto, é preferido apresentar o ingrediente activo como uma formulação farmacêutica. 0(s) veículo(s) deve(m) ser "aceitáveis" no sentido de serem compatíveis com os outros ingredientes da formulação e não prejudiciais para o seu recipiente.

Consequentemente, a presente invenção proporciona também uma formulação farmacêutica compreendendo um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável juntamente com um ou mais seus veículos farmaceuticamente aceitáveis e, opcionalmente, outros ingredientes terapêuticos e/ou profiláticos.

As formulações incluem aquelas para administração oral, parentérica (incluindo subcutânea, e. g., por injecção ou por comprimido de depósito, intradérmica, intratecal, intramuscular e. g. por depósito e intravenosa), rectal e tópica (incluindo dérmica, bucal e sublingual) embora a via mais adequada possa depender, por exemplo, da patologia e distúrbio do receptor. As formulações podem ser apresentadas, de forma conveniente, na forma de dosagem unitária e podem ser preparadas através de qualquer um dos métodos bem conhecidos na técnica de farmácia. Todos os métodos incluem o passo de colocar em associação os compostos ("ingrediente activo") com o veículo, que constitui um ou mais ingredientes acessórios. No geral, as formulações são preparadas colocando em associação uniforme e íntima o ingrediente activo com vaículos líquidos ou veículos sólidos finamente divididos ou ambos e então, se necessário, moldado o produto na formulação desejada. 14

As formulações adequadas para administração oral podem ser apresentadas como unidades discretas, tais como cápsulas, comprimidos revestidos ou comprimidos (e. g., comprimidos mastigáveis em particular para administração pediátrica) contendo, cada um, uma quantidade pré-determinada do ingrediente activo; como um pó ou grânulos; como uma solução ou uma suspensão num liquido aquoso ou liquido não-aquoso; ou como uma emulsão liquida óleo em água ou uma emulsão liquida água em óleo. 0 ingrediente activo pode também ser apresentado como um bolus, electuário ou pasta.

Um comprimido por ser preparado por compressão ou moldagem, opcionalmente, com um ou mais ingredientes acessórios. Os comprimidos prensados podem ser preparados por compressão do ingrediente activo numa máquina adequada, numa forma de livre curso tal como um pó ou grânulos, opcionalmente, misturados com outros excipientes convencionais, tais como agentes ligandos, (por exemplo, xarope, acácia, gelatina, sorbitol, tragacanto, mucilage de amido ou polivinilpirrolidona) , enchimentos (por exemplo, lactose, açúcar, celulose microcristalina, amido de milho, fosfato de cálcio ou sorbitol), lubrificantes (por exemplo, estearato de magnésio, ácido esteárico, talco, polietilenoglicol ou silica), desintegrantes (por exemplo, amido de batata ou glicolato de amido de sódio) ou agentes humidificantes, tais como laurilsulfato de sódio. Os comprimidos moldados podem ser preparados por moldagem de uma mistura do composto em pó humidificado, numa máquina adequada, com um diluente liquido inerte. Os comprimidos podem ser, opcionalmente, revestidos ou com ranhuras e podem ser formulados de modo a proporcionarem uma libertação lenta ou controlada do seu ingrediente activo. Os comprimidos podem ser revestidos de acordo com métodos bem conhecidos na técnica. 15

Alternativamente, os compostos da presente invenção podem ser incorporados em preparações líquidas orais, tais como suspensões oleosas ou aquosas, soluções, emulsões, xaropes ou elixires, por exemplo. No entanto, as formulações contendo estes compostos podem ser apresentadas como um produto seco para a constituição com água ou outro veículo adequado antes de utilização. Tais preparações líquidas podem conter aditivos convencionais, tais como agentes de suspensão, tais como xarope de sorbitol, metilcelulose, glucose/xarope de açúcar, gelatina, hidroxietilcelulose, carboximetilcelulose, gel de estearato de alumínio ou gorduras hidrogenadas comestíveis; agentes de emulsificação, tais como lecitina, mono-oleato de sorbitano ou acácia; veículos não aquosos (que podem incluir óleos comestíveis) , tais como óleo de amêndoa, óleo de coco fraccionado, ésteres oleosos, propilenoglicol ou álcool etílico; e conservantes, tais como p-hidroxibenzoatos de metilo ou propilo ou ácido sórbico. Tais preparações podem também ser formuladas como supositórios, e. g., contendo bases para supositório convencionais, tais como manteiga de cacau ou outros glicéridos.

As formulações para administração parentérica incluem soluções para injecção estéreis aquosas e não aquosas que podem conter anti-oxidantes, tampões, bactericidas e solutos que tornam a formulação isotónica com o sangue do receptor pretendido; e suspensões estéreis aquosas e não aquosas que podem incluir agentes de suspensão e agentes de espessamento.

As formulações podem ser apresentadas em recipientes de dose unitária ou multi-dose, por exemplo, ampolas e frasquinhos selados e podem ser armazenadas em condições de secagem por congelação (liofilização) necessitando apenas da adição de um 16 veículo líquido estéril, por exemplo, água para injecção, imediatamente antes da utilização. As soluções e suspensões para injecção extemporâneas podem ser preparadas a partir de pós estéreis, grânulos e comprimidos do tipo previamente descrito.

As formulações para administração rectal podem ser apresentadas como um supositório com os veículos normais, tais como manteiga de cacau, gordura dura ou polietilenoglicol.

As formulações para administração tópica na boca, por exemplo, bucalmente ou sublingualmente, incluem pastilhas compreendendo o ingrediente activo numa base aromatizada, tal como sacarose e acácia ou tragacanto e pastilhas compreendendo o ingrediente activo numa base, tal como gelatina e glicerina ou sacarose e acácia.

Os compostos podem também ser formulados como preparações de depósito. Tais formulações de longa acção podem ser administradas por implantes (por exemplo, subcutaneamente ou intramuscularmente) ou por injecção intramuscular. Assim, por exemplo, os compostos podem ser formulados com materiais hidrofóbicos ou poliméricos adequados (por exemplo, como uma emulsão num óleo aceitável) ou resinas de permuta iónica, ou como derivados pouco solúveis, por exemplo, como um sal pouco solúvel.

Além dos ingredientes particularmente mencionados acima, as formulações podem incluir outros agentes convencionais na técnica, tendo em conta o tipo de formulação em questão, por exemplo, aqueles adequados para administração oral podem incluir agentes aromatizantes. 17

Será evidente para os especialistas na técnica que a referência aqui feita ao tratamento estende-se até à profilaxia, bem como ao tratamento de doenças estabelecidas ou sintomas. No entanto, será evidente que a quantidade de um composto da invenção necessária para utilização no tratamento irá variar com a natureza da patologia a ser tratada e a idade e a condição do doente e, ficará, em último caso, à consideração do médico ou veterinário responsável. No entanto, no geral, as doses administradas para tratamento de um humano adulto irão estar, tipicamente, na gama de 0,02-5000 mg por dia, de um modo preferido, 1-1500 mg por dia. A dose desejada pode ser convenientemente apresentada numa dose única ou como doses divididas administradas em intervalos apropriados, por exemplo, como duas, três, quatro ou mais sub-doses por dia. As formulações de acordo com a invenção podem conter entre 0,1-99% do ingrediente activo, convenientemente,, de 30-95% por comprimidos e cápsulas e 3-50% para preparações liquidas. O composto de fórmula (I) para utilização na presente invenção pode ser utilizado em combinação com outros agentes terapêuticos, por exemplo, estatinas e/ou outros fármacos de diminuição de lípido, por exemplo, inibidores de MTP e reguladores positivos de LDLR. Os compostos da invenção podem também ser utilizados em combinação com agentes antidiabéticos, e. g., metformina, sulfonilureias e/ou agonistas de PPAR gama, PPAR alfa ou PPAR alfa/gama (por exemplo tiazolidinadionas, tais como, e. g., Pioglitazona e Rosiglitazona) . Os compostos podem também ser utilizados em combinação com agentes anti-hipertensores, tais como antagonistas da angistensina e. g. telmisartan, antagonistas do canal de cálcio, e. g. lacidipina e inibidores de ACE, e. g., enalapril. Assim, esta invenção proporciona, noutro aspecto, a utilização de uma combinação 18 compreendendo um composto de fórmula (I) com um outro agente terapêutico no tratamento de uma doença mediada por hPPAR.

Quando os compostos de fórmula (I) são utilizados em combinação com outros agentes terapêuticos, os compostos podem ser administrados quer sequencialmente ou simultaneamente, através de qualquer via conveniente.

As combinações referidas acima podem, convenientemente, ser apresentadas na forma de uma formulação farmacêutica e, assim, formulações farmacêuticas compreende uma combinação, como definida acima, optimamente em conjunto com um veiculo ou excipiente farmaceuticamente aceitável, compreendem um outro aspecto da invenção. Os componentes individuais de tais combinações podem ser administrados quer sequencialmente ou simultaneamente em formulações farmacêuticas combinadas ou separadas.

Quando combinados na mesma formulação, será evidente que os dois compostos devem ser estáveis e compatíveis uns com os outros e com outros componentes da formulação e podem ser formulados para administração. Quando formulados separadamente, podem ser proporcionados em qualquer formulação conveniente, de um modo conveniente, como conhecido na técnica para tais compostos.

Quando um composto de fórmula (I) é utilizado em combinação com um segundo agente terapêutico activo contra a mesma doença mediada por hPPAR, a dose de cada composto pode diferir da mesma quando o composto é utilizado individualmente. As doses apropriadas serão rapidamente evidentes para os especialistas na técnica. 19

Os compostos desta invenção podem ser convenientemente preparados por um processo geral, em que a porção do tipo A é associada a um álcool (B e D) utilizando o protocolo de Mitsunobu (0. Mitsunobu, 1981 Synthesis, p 1) ou por alquilação de A utilizando uma base não nucleofilica adequada, tal como K2CO3, CS2CO3 ou NaH, com um halogeneto de alquilo (C, E e F) . Notar que esta sintese é, de um modo preferido, efectuada com o grupo ácido protegido por R. De um modo preferido, R é alquilol-6 que pode ser hidrolisado para dar um ácido de Fórmula (I) ou, ser for rapidamente hidrolisável, pode ser administrado o éster resultante.

Alguns dos outros intermediários do tipo (A) estão disponíveis comercialmente enquanto outros podem ser sintetizados como esquematizado abaixo. As sínteses dos intermediários do tipo (B-F) estão também ilustradas abaixo.

Por exemplo Y é S, Z é N, R1, R2, R3 e R6 são CH3, R7 é Η, X2 é 0 e R8 é para-CF3t 20

A

OH HO"

D DEAD/Ph3P/THF OU TMAD/Bu3P/Tolueno

A

OH

C

E

MeCN K2CO3 OU CS2CO3 R<

Os compostos da invenção podem ser preparados através de um método alternativo, no qual os compostos de fórmula (G) são feitos reagir com os sais de fosfónio de fórmula (H), sob condições de Wittig convencionais, para proporcionar o alceno de fórmula (J) que pode ser reduzido com Pd/C sob atmosfera de hidrogénio para proporcionar o éster etilico do composto de fórmula (I), que pode ser hidrolisado para produzir o ácido livre.

MeCN/refluxo G H J

Os compostos de fórmula (H) podem ser preparados a partir da reacção entre compostos de fórmula (C) e PPh3 em CH3CN a refluxo durante 1 h.

Os que se segue ilustra os Intermediários e Exemplos de Fórmula 1 e não deve ser entendido como constituindo uma sua limitação.

As estruturas dos compostos foram confirmadas por ressonância magnética nuclear (RMN) ou espectrometria de massa 21 (MS) . Os espectros de RMN de 1R foram registados num espectrofotómetro Brucker 300 MHz à temperatura ambiente. Os desvios na RMN (δ) são apresentados em partes por milhão (ppm) , "pf" é o ponto de fusão e é apresentado em °C. A cromatografia em coluna foi efectuada utilizando a técnica descrita por W.C. Still et alr J.Org.Chem. 1978, 43, 2923-2925 em silica gel Merck 60 (40-63 μΜ).

Os compostos utilizados como materiais de partida são guer compostos gue estão disponíveis comercialmente ou compostos conhecidos

Abreviaturas: tlc : cromatografia de camada fina e.e. : excesso enantiomérico DMSO-dô : dimetilsulfóxido deuterado CDCI3 : clorofórmio deuterado CD3OD : metanol deuterado C6H12: ciclo-hexano DCC : dicico-hexilcarbodiimida DMAP : 4-dimetilaminopiridina DMF: N,N-dimetilformamida 22

Et20: éter dietílico

EtOAc: Acetato de etilo

MeOH: Metanol PBu3: Tributilfosfina PCC: Clorocromato de piridínio

Rf: fracção de retenção

Rt: tempo de retenção TMAD: Ácido bis[dimetilamida]azodicarboxílico THF: tetra-hidrofurano min: minuto br: larga s: singuleto d: dubleto dd: dubleto de dubletos t: tripleto q: quarteto 23 m: multipleto

Intermediário 1: CF,

A uma solução bem agitada de LiAlH4 (1,52 g, 40 mmol) em THF seco (50 mL) a 0 °C, foi lentamente adicionada uma solução de 4-metil-2-[4-(trifluorometil)-fenil]-tiazole-5-carboxilato de etilo (12,6 g, 40 mmol) em THF seco (50 mL) . A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h. A reacção foi arrefecida rapidamente por adição lenta de água a 0 °C (2 mL) , NaOH 5 N (2 mL) e água (6 mL) . O precipitado foi filtrado, lavado com EtOAc, MeOH, CH2C12 e THF. Após evaporação, foi obtido um sólido amarelo, que foi cristalizado a partir de MeOH-água para proporcionar o intermediário 1 representado acima (9,90 g, 36 mmol, 90%) como um sólido amarelo, pf 120-122 °C.

Intermediário 2:

A uma solução de 2-fluoro-4-(trifluorometil)benzonitrilo (5,2 g, 27,5 mmol) em 50 mL de metanol, foram adicionados 10 mL 24 de água (137,5 mmol) seguidos por NaSH^tbO (7,7 g, 137,5 mmol). Após aguecimento a 50 °C durante 12 horas, o solvente foi removido in vácuo e o residuo tratado com água (200 mL) e extraido com EtOAc (2 x 150 mL) . As camadas orgânicas foram secas (MgSCL) e o solvente evaporado para proporcionar o residuo em bruto que foi purificado numa Biotage Flash Elute com uma coluna de silica 40 M, eluida com hexano/acetato de etilo (4:1) para proporcionar o composto do titulo como um sólido amarelo (3,27 g, 53%). MS C8H6F4NS: m/z 224 (M+l); TR HPLC 2,013 (C18 4,6 x 60 mm, 1% de MeOH/0-90% de CH3CN/H20 (TFA a 0,1%) / (TEA 50 mM/TFA) , 4 min a 3 mL/min 0 254/220 nm).

Intermediário 3:

O intermediário 2 foi tratado com 2-cloro-3-oxobutanoato de etilo em etanol em refluxo, de um dia para o outro, e evaporado. O residuo foi feito passar através de uma tampa de silica gel com hexano:acetato de etilo (4:1) para proporcionar o composto do titulo como um sólido amarelo claro, após evaporação (71%). MS C14H12F4NO2S: m/z 333 (M+l) 25

Intermediário 4:

A uma solução de NaOEt (9,94 g, 14,6 mmol) em EtOH (50 mL), sob atmosfera de azoto, foi adicionado Formato de etilo (11,81 mL, 14,6 mmol) e éster etilico do ácido cloroacético (10,96 mL, 14.6 mmol) em solução em 50 mL de Et20 seco. A mistura foi agitada à ta durante 20 horas e filtrada após adição de de 50 mL de Et20 seco. O sólido resultante foi dissolvido em 100 mL de EtOH e após adição de 4-trifluorometiltiobenzamida (3 g, 14.6 mmol) foi efectuada uma agitação a refluxo durante 20 horas. O EtOH foi removido sob pressão reduzida e foram adicionados 250 mL de CH2CI2 e 50 mL de água. A camada orgânica foi separada e seca sob Na2S04, filtrada, concentrada até à secura e purificada por cromatografia flash C6Hi2/EtOAc (80:20) para proporcionar o composto do titulo (750 mg, 2,49 mmol) como um pó branco num rendimento de 17%. GC/MS C13H10F3NO2S: m/z 301 26

Intermediário 5:

HO

0 intermediário 3 foi feito reagir, como descrito num processo de redução com LiAlH4 geral, para proporcionar o composto do titulo como um sólido amarelo claro (83%). MS C12H9F4NOS: m/z 291 (M+l)

Intermediário 6:

0 intermediário 5 foi feito reagir com cloreto de mesilo para proporcionar o composto do titulo como um sólido amarelo claro (100%) .

Rf do álcool de partida em 3:1 hexanos/acetato de etilo é de 0,25

Rf do cloreto em 3:1 hexanos/acetato de etilo é de 0,75 27

Intermediário 7:

0 intermediário 6 foi tratado com 2-metil-4-sulfanilfenol, como descrito num processo de alquilação geral, para proporcionar o composto do titulo como um óleo amarelo (0,242 g, 49%) . RMN de XH (CDC13) : δ 2,22 (s, 3H) , 2,25 (s, 3H) , 4,15 (s, 2H) , 6,69 (d, 1H) , 7,13 (d, 1H) , 7,20 (s, 1H) , 7,50 (m, 2H) , 8,39 (t, 1 H) , MS C19H16F4NOS2: m/z 414 (M+l).

Intermediário 8:

A uma solução do Intermediário 1 (75,5 g, 0,276 mmol, 1 eq) em CH2CI2, foi adicionado clorocromato de piridinio (119 g, 0,552 mmol, 2 eq) . Então, a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas. A mistura foi decantada uma noite e, depois, filtrada sob celite e removida por 28 evaporação. 0 resíduo foi purificado por cromatografia flash utilizando CH2C12 como eluente, para proporcionar o composto do título como um sólido amarelo (46 g, 0,17 mmol) num rendimento de 61,5%. GC/MS: Ci2H8F3NOS: m/z 271 Intermediário 9:

A uma solução do intermediário 4 (0,8 g, 2,65 mmol) foi adicionado, gota a gota, LÍAIH4 (2,7 mL/1 N em THF, 2,7 mmol). A mistura resultante foi agitada durante 30 min à t.a. e a reacção foi arrefecida rapidamente pela adição cuidadosa de NH4C1 e água. O precipitado foi filtrado, o filtrado foi concentrado sob vácuo e o resíduo obtido foi submetido a cromatografia flash CH2Cl2/MeOH (99:1), para proporcionar o composto do título (500 mg, 1,93 mmol) como um sólido branco num rendimento de 73%. RMN de 1R (CDCI3) δ: 3,48 (br t, 1H) , 4,73 (br d, 2H) , 7,52 (m, 3H), 7,82 (d, 2H) 29

Intermediário 10: Ο

A uma solução do intermediário 9 (500 mg, 1,93 mmol) em CH2CI2 (20 mL) , foi adicionado PCC (830 mg, 2 eq.)· Após agitação durante 2 horas à ta, o solvente foi removido por evaporação e o resíduo submetido a cromatografia flash com CH2C12 para proporcionar o composto do título (460 mg, 1,78 mmol) como um pó branco num rendimento de 93%. RMN de ΧΗ (CDC13) δ: 7,68 (d, 2H) , 8,07 (d, 2H) , 8,41 (s, 1H) 10,01 (s, 1H)

Intermediário 11:

Uma solução de 4-trifluorometil-tiobenzamida (5 g, 24,3 mmol) e 3-cloro-pentano-2,4-diona (3,2 mL, 24,3 mmoles) em 50 mL de EtOH, foi aquecida até refluxo durante 18 horas e evaporada até à secura. O resíduo foi diluído com 250 mL de CH2C12 e lavado com 50 mL de solução saturada de NaHC03. A fase orgânica foi separada e seca sob Na2SC>4. Após filtração e 30 concentração sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia flash (CH2C12) para proporcionar o composto do título como um pó castanho claro (6,3 g, 22 mmol) num rendimento de 90%. GC/MS C13H10F3NOS: m/z 285.

Intermediário 12:

Uma solução de 3-fluoro-4-trifluorometil-tiobenzamida (540 mg, 2,42 mmol) e 3-cloropentano-2,4-diona (577 pL, 4,9 mmoles) em 50 mL de EtOH, foi aquecida até refluxo durante 48 horas e evaporada até à secura. O resíduo foi diluído com 250 mL de CH2C12 e 50 mL de uma solução saturada de NaHCCç. A fase orgânica foi separada e seca sob Na2S04- Após filtração e concentração sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia flash (CH2C12) para proporcionar o composto do título como um pó castanho claro (500 mg, 1,65 mmol) num rendimento de 68%. GC/MS C13H9F4NOS: m/z 303 31

Intermediário 13:

Uma solução de 4-etil-tiobenzamida (2 g, 12 mmol) e 3-cloro-pentano-2,4-diona (2,2 mL, 14 mmol) em 30 mL de EtOH foi aquecida a refluxo durante 18 horas e evaporada até à secura. O resíduo foi diluído com 250 mL de CH2CI2 e lavado com 50 mL de solução saturada de NaHCCç. A fase orgânica foi separada, seca sob Na2SC>4, filtrada e concentrada sob vácuo para proporcionar o composto do título (2,94 g, 12 mmol) num rendimento em bruto quantitativo. RMN de ΧΗ (CDC13) δ: 1,15 (t, 3H) , 2,52 (s, 3H) , 2,61 (q, 2H) , 2,72 (s, 3H), 7,20 (d, 2H), 7,85 (d, 2H).

Intermediário 14:

Uma solução de 3,4-dicloro-tiobenzamida (1,5 g, 7,3 mmol) e 3-cloro-pentano-2,4-diona (1,2 mL, 11 mmol) em 30 mL de EtOH foi 32 aquecida até refluxo durante 18 horas e evaporada até à secura. O resíduo foi diluído com 250 mL de CH2CI2 e lavado com 50 mL de solução saturada de NaHC03. A fase orgânica foi separada, seca sob Na2S04, filtrada e concentrada sob vácuo, para proporcionar o composto do título como um pó branco sujo (1,5 g, 5,2 mmol) num rendimento de 71%, após trituração do resíduo em água e lavagem com pentano. RMN de ΧΗ (CDC13) δ: 2,52 (s, 3H) , 2,72 (s, 3H) , 7,47 (d, 1H) , 7,74 (dd, 1H) , 8,04 (d, 1 H) .

Intermediário 15:

Uma solução de 4-cloro-tiobenzamida (5 g, 29 mmol) e 3-cloro-pentano-2,4-diona (3,2 mL, 27 mmol) em 50 mL de EtOH foi aquecida até refluxo durante 5 horas e evaporada até à secura. O resíduo foi diluído com 250 mL de CH2CI2 e lavado com 50 mL de solução saturada de NaHC03. A fase orgânica foi separada e seca sob Na2SC>4. Após filtração e concentração sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia flash (CH2CI2) para proporcionar o composto do título (7,2 g, 28,5 mmol) num rendimento quantitativo. RMN de XH (CDCI3) δ: 2,54 (s, 3H) , 2,83 (s, 3H) , 7,41 (d, 2H) , 8,01 (d, 2H) 33

Intermediário 16:

A uma solução do intermediário 8 (1,9 g, 7 mmol) em 25 mL

de THF, foi adicionada lentamente a -10 °C, uma solução de brometo de metilmagnésio 1,4 M em tetra-hidrofurano (7 mL, 11,9 mmol, 1,4 eq) . A mistura foi aquecida naturalmente à temperatura ambiente e, depois, agitada durante 1,5 horas. A mistura resultante foi arrefecida rapidamente com solução saturada de NH4CI (100 mL) e extraida com Acetato de Etilo (2 x 250 mL) . A fase orgânica foi lavada com solução salina saturada e água e, depois, seca sob Na2SC>4 e removida por evaporação para proporcionar o composto do titulo como um sólido amarelo (1,9 g, 6,96 mmol) num rendimento em bruto a 99%. GC/MS C13H12F3NOS: m/z 287

pf: 147 °C 34

Intermediário 17:

A uma solução do intermediário 10 (1,35 g, 5,25 mmol) foi adicionada lentamente a -10 °C, uma solução de brometo de metilmagnésio 1,4 M em tetra-hidrofurano (4,1 mL, 5,8 mmol, 1,1 eq). A mistura foi naturalmente aquecida à temperatura ambiente e, depois, agitada durante 1,5 horas. A mistura resultante foi arrefecida rapidamente com solução saturada de NH4C1 (100 mL) e extraida com Acetato de Etilo (2 x 250 mL) . A fase orgânica foi lavada com solução salina saturada e água e, depois, seca sob Na2SC>4 e removida por evaporação para proporcionar o composto do titulo como um sólido branco sujo (700 mg, 2,58 mmol) num rendimento de 49% após purificação por cromatografia flash CH2Cl2/MeOH (99:1). GC/MS: C12H10F3NOS m/z= 273

Intermediário 18:

35

A uma solução do intermediário 11 (5 g, 17,5 mmol) e (S)-2-metil-CBS-oxazaborolidina (3,5 mL, 3,5 mmol, solução 1 N em tolueno) em THF anidro, foi adicionada lentamente a 0 °C, uma solução de complexo borano-metilsulfido (10,5 mL, 21 mmol, solução 2 M em THF) . A solução foi agitada durante 2,5 horas e uma monitorização por tlc de uma aliquota hidrolisada indicou que a reacção tinha terminado. Foram adicionados 20 mL de MeOH e 100 mL de HC1 0,5 N à solução para arrefecer rapidamente a reacção. A extracção por EtOAC (3 x 200 mL) e lavagem acidica com HC1 diluido (3 x 50 mL) proporcionou, após secagem sob

Na2S04, filtração e concentração sob vácuo, 5 g de um sólido branco. A recristalização em Hexano/EtOH (200 mL/6 mL) proporcionou após filtração, 1,12 g de um pó racémico. O filtrado foi evaporado até à secura e o sólido amarelo resultante foi triturado com 100 mL de hexano para proporcionar após filtração 3,5 g de um sólido branco com um ee = 95,5%. RMN de (CDC13, 300 Mhz) õ: 1,4 (d, 3H) , 2,26 (s, 3H) , 5,03 (q, 1H) , 7,06 (s, 1H) , 7,46 (d, 2H) , 7,8 (d, 2H) HPLC Chiralpak AD-RH (4,6 x 150 mm, 65% de CH3CN/35% de H20, 0,3m Umin)

Rt: 17,0 min [oí]25D = + 38,1 (c = 0,25/CHCl3) para ee = 95,5% 36

Intermediário 19:

Foi aplicado o mesmo processo experimental que para o intermediário 18 a uma quantidade de 3 g da metilcetona, utilizando a (R)-2-Metil-CBS-oxazaborolidina. 0 composto do titulo (1,7 g; 5,9 mmol) foi obtido como um pó branco num rendimento de 56% e com um excesso enantiomérico de 79,4% como determinado por HPLC. Para aumentar o excesso enantiomérico, o álcool resultante (1,7 g, 5,9 mmol) foi associado ao ácido (R)-(-)-□ Metoxifenilacético (1,1 g; 6,5 mmol) com DCC (1,5 g) e uma quantidade catalítica de DMAP. Os dois ésteres diasteoméricos apresentam um DRf = 0,1 o que permitiu o isolamento da fracção menos polar, a maior (2,35 g, 5,4 mmol) após cromatografia flash utilizando Éter de Petróleo/EtOAc (85:15). Finalmente, este éster em solução em 50 mL de EtOH foi saponificado a 0 °C utilizando NaOH 1 N (5,7 mL, 5,7 mmol). Após completa, a reacção foi arrefecida rapidamente por adição, gota a gota, a 0 °C, de HCl 1 N (5,7 mL) . Após remoção do EtOH sob pressão reduzida, a extracção com Et20 (200 mL) , lavagem da fase orgânica com 25 mL de NaHC03 saturada, proporcionou o composto do titulo (1,4 g, 4,8 mmol) num rendimento de 8 6% como um óleo pálido com um e.e. = 98%. RMN de (CDC13, 300 Mhz) õ: 1,60 (d, 3H) , 2,44 (s, 3H) , 5,21 (q, 1H) , 7,66 (d, 2H) , 8,0 (d, 2H) HPLC Chiralpak AD-RH (4,6 x 150 mm, 65% de CH3CN/35% de H2O, 0,3 mL/min) 37

Rt: 15,54 min [oí]25d = - 31 (c = 0,32/CHCI3) para ee = 86%.

Intermediário 20 :

A uma solução do intermediário 12 (500 mg, 1,65 mmol) em

MeOH (25 mL) foi adicionado, de uma só vez, NaBH4 (69 mg, 1,7 mmol). A solução foi agitada durante 30 min e concentrada até à secura. A hidrólise com HC1 1 N (5 mL) , seguida por extracção com Et20 (2 x 75 mL) , secagem da fase orgânica sob Na2S04, filtração e concentração sob vácuo proporcionou um resíduo que foi submetido a cromatografia flash CH2Cl2/MeOH (99:1) para proporcionar 380 mg do composto do título. RMN de ΧΗ (CDCls) δ: 1,53 (d, 3H) , 2,39 (s, 3H) , 5,12 (q, 1H) , 7,15 (s, 1H) , 7,57 (m, 1H) , 7,68 (m, 2H) . 38

Intermediário 21:

A uma solução do intermediário metilcetona 13 (3,5 g, 14,2 mmol) em EtOH (50 mL), foi adicionado, de uma só vez, NaBH4 (1,1 g, 25 mmol, 2 eq.) a 0 °C. Após agitação durante 3 horas à temperatura ambiente, o EtOH foi removido sob pressão reduzida e foi adicionado HC1 1 N. O precipitado resultante foi removido por filtração, lavado com água e seco sob vácuo para proporcionar o composto do titulo (1,9 g, 7,6 mmol) num rendimento de 54% como um sólido branco. RMN de (CDC13) δ: 1,22 (t, 3H) , 1,54 (d, 3H) , 2,37 (s, 3H) , 2,64 (q, 2H) , 5,14 (q, 1H) , 7,20 (d, 2H) , 7,76 (d, 2H) .

Intermediário 22:

A uma solução do intermediário metilcetona 14 (1,7 g, 5,9 mmol) em EtOH (25 mL) foi adicionado, de uma só vez, NaBH4 39 (450 mg, 12 mmol, 2 eq.) a 0 °C. Após agitação durante 3 horas à temperatura ambiente, o EtOH foi removido sob pressão reduzida e foi adicionado HC1 1 N. O precipitado resultante foi removido por filtração, lavado com água e seco sob vácuo para proporcionar o composto do titulo (1,58 g, 5,48 mmol) num rendimento de 92% como um sólido branco. RMN de XH (CDCI3) δ: 1,50 (d, 3H) , 2,01 (d, 1H) , 2,35 (s, 3H) 5, 12 (m, 1H), 7,37 (d, 1H, J = 8,48 Hz), 7,60 (dd, 1H J = 8,3 Hz e 2,07 Hz) , 7,92 (d, 1H, J = 2,1 Hz).

Intermediário 23:

A uma solução do intermediário metilcetona 15 (2,5 g, 9, 9 mmol) em EtOH (25 mL) foi adicionado, de uma só vez, NaBH4 (750 mg, 20 mmol, 2 eq.) a 0 °C. Após agitação durante 3 horas à temperatura ambiente, o EtOH foi removido sob pressão reduzida e foi adicionado HC1 1 N. O precipitado resultante foi removido por filtração, lavado com água e seco sob vácuo para proporcionar o composto do titulo (2,4 g, 9,4 mmol) num rendimento de 95% como um sólido branco. RMN de XH (CDC13) δ: 1,56 (d, 3H, J = 6 Hz), 2,39 (s, 3H) , 5,16 (m, 1H) , 7,37 (d, 2H, J = 8,0 Hz), 7,79 (d, 2H, J = 8,0 Hz). 40

Intermediário 24:

A uma solução de etil-4-metil-2-[4-(trifluorometil)-fenil]-tiazole-5-carboxilato (2 g, 6,4 mmol), foi adicionada lentamente a -10 °C, uma solução de brometo de metilmagnésio 1,4 M em tolueno (10 mL, 14 mmol, 2 eq) . A mistura foi naturalmente aquecida à temperatura ambiente e, depois, agitada durante 72 horas. A mistura resultante foi arrefecida rapidamente com solução saturada de NH4C1 (100 mL) e extraída com EtOAc (2 x 250 mL) . A fase orgânica foi lavada com solução salina saturada e água e, depois, seca sob Na2S04 e removida por evaporação para proporcionar o composto do título como um sólido amarelo (1 g, 3,3 mmol) num rendimento de 52%. RMN de (CDC13) δ: 1,70 (s, 6H) , 2,65 (s, 3H) , 7,60 (d, 2H) , 7, 95 (d, 2H) .

Intermediário 25:

A uma solução do intermediário 4 (750 mg, 2,5 mmol) foi adicionada lentamente, a -10 °C, uma solução de brometo de

metilmagnésio 1,4 M em tolueno (8,95 mL, 12,5 mmol, 5 eq) . A 41 mistura foi naturalmente aquecida à temperatura ambiente e, depois, agitada durante 24 horas. A mistura resultante foi arrefecida rapidamente com solução saturada de NH4C1 (100 mL) e extraída com EtOAc (2 x 250 mL) . A fase orgânica foi lavada com solução salina saturada e água, depois, seca sob Na2SC>4 e removida por evaporação, para proporcionar o composto do título (460 mg, 1,6 mmol) num rendimento de 64% após cromatograf ia flash CH2Cl2/MeOH (99:1). GC/MS: C13H12F3NOS m/z: 287 Intermediário 26:

A uma solução do intermediário 8 (4,05 g, 15 mmol) em 50 mL de THF, foi adicionada lentamente, a -10 °C, uma solução de brometo de etilmagnésio 3 M em Et20 (5,5 mL, 16,5 mmol, 1,1 eq). A mistura foi aquecida naturalmente à temperatura ambiente e, depois, agitada durante 1,5 horas. A mistura resultante foi arrefecida rapidamente com solução saturada de NH4C1 (100 mL) e extraída com Acetato de etilo. A fase orgânica foi lavada com solução salina saturada e água e, depois, seca sob Na2S04 e removida por evaporação. O resíduo foi retirado com uma mistura de éter isopropílico e éter de petróleo. O sólido branco obtido foi filtrado para proporcionar o composto do título (4,31 g, 14,3 mmol) num rendimento de 95%. GC/MS: Ci4Hi4F3NOS: m/z 301 42

pf: 104-106 °C

Intermediário 27:

O intermediário 26 (8,23 g, 27,3 mmol) foi adicionado a uma mistura de ácido (R)-(-)-□-Metoxifenilacético (5 g* 30 mmol) DCC (6, 18 g , 30 mmol) e DMAP (catalítico) em 250 mL de THF. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 24 horas e feita passar através de uma tampa de silica gel. 0 filtrado foi concentrado até à secura e submetido a cromatografia flash utilizando Éter de petróleo/EtOAc (95 : 5) . A fracção menos polar foi recolhida para proporcionar 2, 9 g do composto do titulo (2,9 g, 6 mmo 1) . RMN de (CDC13) δ: 0,73 (t, 3H) , 1, 83 (m, 2 H) , 2,49 (s , 3H) , 3,37 (s, 3H) , 4,74 (s, 1H) , 5,97 (t, 1 H) , 7,33 (m, 3H) , 7,43 (m, 2H) , 7,66 (d, 2H) , 8,00 (d, 2H) 43

Intermediário 28:

A uma solução bem agitada do Intermediário 27 (2,75 g, 6 mmol) em THF/EtOH foi adicionada, gota a gota, a 0 °C uma solução de 18 mL de NaOH 1 N em 15 mL de água. Após 5 min, a clivagem estava completa e, lentamente, foram adicionados a 0 °C 18 mL de HC1 1 N em 15 mL de H20. Os solventes orgânicos foram removidos sob pressão reduzida e a extracção com EtOAc (250 mL), lavagem com solução salina saturada (25 mL) e secagem sob Na2S04 proporcionou um residuo que foi sujeito a cromatografia CH2Cl2/EtOAc (90:10) para proporcionar o composto do titulo num rendimento de 82% (1,49 g, 3,3 mmol) com um e.e. = 98%. GC/MS: C14H14F3NOS m/z 301 [a] 25d= -10 (c = 0,279, CHC13) para e.e. = 98% HPLC Chiralpak AD-RH (4,6 x 150mm, 65% de CH3CN/35% de H20, 0,3 mL/min)

Rt: 21,2 min 44

Intermediário 29:

Foi aplicado o mesmo protocolo de esterificação como descrito para o intermediário 27 com 10 g do Intermediário racémico 26 e 6 g de Ácido (S)-(+)-□-Metoxifenilacético, para proporcionar 2,85 g do diasterómero menos polar. RMN de (CDC13) δ: 0,73 (t, 3H) , 1,82 (m, 2H) , 2,49 (s, 3H) , 3,37 (s, 3H) , 4,74 (s, 1H), 5,97 (t, 1H), 7,33 (m, 3H), 7,43 (m, 2H) , 7, 66 (d, 2H) , 8,0 (d, 2H) .

Intermediário 30:

O mesmo protocolo de saponificação como utilizado para obter o Intermediário 28 foi aplicado para obter Intermediário 29 (2,85 g, 6,35 mmol), para proporcionar o composto do titulo (1,58 g, 5,25 mmol) como um óleo amarelo pálido num rendimento de 82,5% e com um e.e. = 98%. 45 RMN de ΧΗ (CDC13) δ: 0,98 (t, 3H) , 1,96 (m, 2H) , 2,45 (s, 3H) , 4,92 (t, 1H) , 7,66 (d, 2H) , 8,0 (d, 2H) .

[a] 25d = + 11 (c = 0,29, CHCI3) para e.e. = 98% HPLC Chiralpak AD-RH (4,6 x 150 mm, 65% de CH3CN/35% de H2O, 0,3 mL/min)

Rt: 25,04 min

Intermediário 31:

A uma solução do intermediário 8 (2,71 g, 10 mmol) foi lentamente adicionada, a -12 °C, uma solução 2 M de brometo de isopropilmagnésio em THF (5,5 mL, 11 mmol). A mistura foi naturalmente aquecida à temperatura ambiente e depois agitada durante 1,5 horas. A mistura resultante foi arrefecida rapidamente com solução saturada de NH4C1 (100 mL) e extraida com EtOAC (2 x 150 mL) . A fase orgânica foi lavada com solução salina saturada e água e, depois, seca sob Na2S04 e removida por evaporação para proporcionar o composto do titulo (2 g, 6,34 mmol) num rendimento de 63,5%, como um pó ligeiramente amarelo após cristalização em hexano/Etanol. 46 RMN de ΧΗ (CDC13, 300 MHz) δ: 0,8 (d, 3H) , 1,05 (d, 3H) , 1,9 (m 1H) , 2,35 (s, 3H) , 4,55 (d, 1H) , 7,6 (d, 2H) , 7,95 (d, 2H) .

Intermediário 32:

A uma solução do intermediário 8 (5,42 g, 20 mmol) em 50 mL de THF, foi adicionada lentamente a -78 °C, uma solução 1 M de brometo de alilmagnésio em Et30 (22 mL, 22 mmol, 1,1 eq) . A mistura foi agitada durante 30 minutos a -78 °C e foi naturalmente aquecida à t.a. e, depois, agitada durante 1 hora. A mistura resultante foi arrefecida rapidamente com solução saturada de NH4C1 (100 mL) e extraída com acetato de etilo. A fase orgânica foi lavada com solução salina saturada e água e, depois, seca sob Na2S04 e removida por evaporação. O resíduo foi retirado em heptano para proporcionar o composto do título após filtração como um sólido branco (5 g, 16 mmol) num rendimento de 80%. LC/MS : C15H15F3NOS : m/z 314,00 (M+l) 47

Intermediário 33:

A uma solução do intermediário 8 (813 mg, 3 mmol) , foi adicionada lentamente -78 °C, uma solução 2 M de butil-lítio em tetra-hidrofurano (1,6 mL, 3 mmol). A mistura foi naturalmente aquecida à temperatura ambiente e, depois, agitada durante 1,5 horas. A mistura resultante foi arrefecida rapidamente com solução saturada de NH4C1 (100 mL) e extraida com EtOAc (2 x 100 mL) . A fase orgânica foi lavada com solução salina saturada e água e, depois, seca sob Na2S04 e removida por evaporação para proporcionar o composto do titulo como um sólido amarelo (770 mg, 6,96 mmol) num rendimento em bruto de 99%. RMN de ΧΗ (CDCls, 300 MHz) δ: 0,8 (t, 3H) , r 1/25 (m, 4H), 1,7 (m 1H) , 1,8 (m, 1H) , r 2, 3 (s, 3H) , 2,8 (br S, 1H) , 4,9 (t, 1 H) 7,55 (d, 2H) , 7,9 (d, 2H) .

pf 72-74 °C 48

Intermediário 34: kc

A uma solução do intermediário 8 (5 g, 18,45 mmol), foi lentamente adicionada a 0 °C, uma solução 2 M de brometo de ciclopentilmagnésio em Et20 (11 mL, 22 mmol) . A mistura foi naturalmente aquecida à temperatura ambiente e, depois, agitada durante 1,5 hora. A mistura resultante foi arrefecida rapidamente com solução saturada de NH4CI (100 mL) e extraida com EtOAc (2 x 250 mL) . A fase orgânica foi lavada com solução salina saturada e água e, depois, seca sob Na2S04, removida por evaporação para proporcionar o composto do titulo (2,2 g, 6,4 mmol) num rendimento de 35% após cromatografia flash utilizando CeH^/EtOAc (85:15). LC/MS Ci7H19F3NOS : m/z 342 (M+l)

Intermediário 35:

A uma solução do intermediário 8 (1,4 g, 5,17 mmol) em 50 mL de THF, foi adicionada lentamente a -78 °C, uma solução 1 M de brometo de fenilmagnésio em THF (5,7 mL, 5,7 mmol, 1,1 eq). 49 A mistura foi agitada durante 30 min a -78 °C e foi naturalmente aquecida à temperatura ambiente e, depois, agitada durante 2 horas. A mistura resultante foi arrefecida rapidamente com solução saturada de NH4C1 e extraida com acetato de etilo. A fase orgânica foi lavada com água, seca sob Na2SC>4, removida por evaporação e o residuo foi cristalizado em hexano. O sólido branco obtido foi filtrado e lavado com hexano para proporcionar o composto do titulo (1,7 g, 4,9 mmol) num rendimento de 86%. GC/MS: Ci8H14F3NOS m/z 34 9 Intermediário 36:

HO

A uma solução do intermediário 8 (4,48 g, 16,5 mmol), foi lentamente adicionada a -10 °C, uma solução 1,3 M de cloreto de benzilmagnésio em tetra-hidrofurano (20 mL, 26,5 mmol, 1,6 eq) . A mistura foi naturalmente aquecida à temperatura ambiente e, depois, agitada durante 1,5 horas. A mistura resultante foi arrefecida rapidamente com solução saturada de NH4C1 (100 mL) e extraida com Acetato de Etilo (2 x 250 mL) . A fase orgânica foi lavada com solução salina saturada e água e, depois, seca sob Na2SC>4 e removida por evaporação para proporcionar um sólido amarelo pálido. Após sonificação em éter de petróleo e filtração, foi obtido o composto do titulo (2,8 g, 7,7 mmol) num rendimento de 48% como um pó branco. 50

LC/MS: C19H17F3NOS m/z 364,13 (M+l) pf: 126-129 °C

Intermediário 37:

Uma suspensão de 20 g (0,133 mole) de 4-acetil-2-metilfenol e 30 g de carbonato de potássio (0,2 mole) em 500 mL de acetona foi aguecida a refluxo durante 24 horas. Foram adicionados, gota a gota, 30 mL de 2-bromo-2-metilpropionato de etilo em solução em 30 mL de acetona. A mistura foi agitada a refluxo durante 20 horas e uma monitorização por tlc mostrou que a reacção não estava completa. Depois, foram adicionadas duas porções equivalentes suplementares de carbonato de potássio e halogeneto com um intervalo de 7 horas. A mistura foi agitada durante 24 horas a refluxo e agitada à temperatura ambiente durante 2 dias, depois removida por filtração e concentrada sob vácuo. O residuo foi extraído com 300 mL de EtOAc e lavado com 100 mL de NaOH 1 N e 100 mL de solução salina saturada. A camada orgânica foi seca sob Na2S04, filtrada e concentrada sob vácuo para proporcionar 32,6 g do composto do título, com um óleo amarelo, num rendimento de 92%. 51 3H) , 1,63 (s, 6H) , 2,24 (s, 3H) , 6,58 (d, 1 H) , 7, 67 (d, 1H) , 7,75 RMN de ΧΗ (CDC13) : δ 1,19 (t 2,50 (s, 3H) , 4,20 (q, 2H) , (s, 1H).

Intermediário 38:

A uma solução de 30 g (0,11 mole) do intermediário 37 em 300 mL de CH2CI2, foram adicionadas, de um só vez, 2,2 g (0,011 mole) de ácido p-toluenossulfónico e 35,9 g (0,125 mol) de ácido m-cloroperbenzóico. A solução foi aquecida a 50 °C durante 21 horas e, depois, filtrada e lavada consecutivamente com uma solução de 20 de Kl em 200 mL de água, 20 g de Na2S03 em 200 mL de água, 150 mL de NaOH 1 N e 100 mL de solução salina saturada. A camada orgânica foi seca sob Na3S04, filtrada e concentrada sob vácuo, para proporcionar 28,54 g do composto esperado num rendimento de 89%. GC/MS C15H20O5: m/z 280 52

Intermediário 39:

A uma solução de 25 g (0,089 mol) do intermediário 38 em 250 mL de EtOH anidro, foram adicionadas 9,1 g de NaOEt (0,134 mol) . A solução foi aquecida a 50 °C durante 6 horas e concentrada sob vácuo. O resíduo foi retirado com 200 mL de água e acidificado cuidadosamente para pH = 1 com 150 mL de HC1 1 N. A extracção com 3 x 200 mL de EtOAc e secagem das camadas orgânicas recolhidas sob MgSCh, proporcionou após filtração e evaporação sob vácuo, 21,62 g do composto do título. GC/MS Ci3Hi804 : m/z 238 Intermediário 40:

A uma solução agitada fria (0 °C) do intermediário 1 (8,2 g, 30 mmol) e Et3N (6,07 g, 8,36 mL, 60 mmol) , em CH2CI2 seco (120 mL) , foi lentamente adicionado MeSChCl (5,49 g, 3,71 mL, 48 mmol) . Após 2 horas a 0 °C, foi adicionado mais Et3N (6 mmol) e MeSChCl (4,8 mmol). Após mais 2 horas, uma tlc (hexano:EtOAc, 1:1) mostrou que a reacção estava completa. A mistura reaccional foi diluída com CH2CI2 (120 mL) e lavada com 53

NaHC03 (sat.) (2 x 240 mL) e água (2 x 240 mL), seca, filtrada e evaporada para proporcionar o composto do titulo (8,0 g, 27 mmol, 90%) como um sólido amarelo.

Intermediário 41:

Uma solução de 2-fluoro-4-trifluorometil-tiobenzamida (1,02 g, 4,57 mmol) e 3-cloropentano-2,4-diona (654 yL, 5,5 mmol) em 30 mL de EtOH foi aquecida até refluxo durante 18 horas. Foram adicionados 1,2 equivalentes suplementares de 3-cloropentano-2,4-diona (654 yL, 5,5 mmol), a reacção aquecida até refluxo durante mais 18 horas e evaporada até à secura. O residuo foi diluido com 250 mL de CH2CI2 e lavado com 50 mL de solução saturada de NaHCCq. A fase orgânica foi separada, seca sob Na2S04, filtrada e concentrada sob vácuo para proporcionar o composto do titulo (850 mg, 12 mmol) , num rendimento de 61%, como um sólido amarelo após cromatografia flash CH2CI2. GC/MS C13H9F4NOS m/z 303 54

Intermediário 42:

HO

A uma solução do intermediário metilcetona 41 (850 mg, 2,8 mmol) em EtOH (50 mL) foi adicionada, de uma só vez, NaBH4 (117 mg, 3 mmol, 1,1 eq.) a 0 °C. Após agitação durante 30 minutos à temperatura ambiente, o MeOH foi removido sob pressão reduzida, foi adicionado HC1 1 N e extracção com Et20 (2 x 100 mL) seguida por secagem sob Na2SC>4 e filtração proporcionou o composto do titulo (770 mg, 2,53 mmol) num rendimento de 90% como um sólido amarelo claro. GC/MS C13H11F4NOS m/z 305 Intermediário 43:

A uma solução de ácido clorossulfónico (90 mL, 4,4 eq.) foi adicionado, gota a gota, a 0 °C durante 1 h, éster etílico do ácido 2-metil-2-o-toliloxipropiónico (68 g, 0,306 mol). Após agitação durante 1 hora a 0 °C e mais 30 min a 15 °C, a mistura foi vertida em gelo triturado e o precipitado assim obtido foi filtrado e lavado com água fria. O composto do título foi obtido como um pó branco sujo (62,2 g, 0,194 mol) num rendimento de o o · 55 63 GC/MS: C13H17CIO5S m/z: 320,5

Intermediário 44:

A um frasco de fundo redondo com três gargalos, sob uma atmosfera de azoto, contendo Zn (13,1 g, 0,2 mol, 3,5 eq) em

EtOAc seco (150 mL), foi adicionado o intermediário 43 (18,32 g, 0,057 mol). Após agitação durante 30 min, foi adicionado, lentamente, diclorometilsilano (24,4 mL, 0,2 mol, 3,5 eq) em 90 min a 70 °C. Após agitação durante 5 horas a 70 °C foi adicionada uma porção suplementar de Zn (3 g, 45 mmol) para completar a reacção. Depois, a mistura resultante foi agitada durante a noite, filtrada e o precipitado zinco lavado com EtOAc. Foi efectuada uma extracção inversa no filtrado com NaOH 1 N (3 x 300 mL) e as fases básicas recolhidas foram lavadas com EtOAc (400 mL) . A acidificação das fases aquosas básicas para pH = 3-4 com HC1 concentrado, extracção com EtOAc (3 x 300 mL) , secagem da fase orgânica sob MgSCU, filtração e concentração até à secura proporcionou um óleo incolor. O composto do titulo (10,01 g, 39,4 mmol) foi obtido após cromatografia flash CeHi2/EtOAc (90:10) como um óleo incolor num rendimento de 69%. GC/MS: C13H18O3S m/z: 254 56

Exemplo 1:

ácido 2-{4-[({2-[2-fluoro-4-(trifluorometil)fenil]-4-metil-1, 3-tiazol-5-il}metil)sulfanil]-2-metilfenoxi}-2-metil-propanóico A um frasco de 2 5 mL de fundo redondo equipado com uma barra magnética de agitação e uma entrada de N2 foi adicionado o intermediário 7 (240 mg, 0,58 mmol, 1 eq) em acetona (4 mL) seguido por adição de 2-triclorometil-2-propanol (210 mg, 1,18 mmol, 2 eq) . A reacção foi arrefecida para 0 °C e, depois, foi adicionado NaOH (sedimentos, 190 mg, 4,8 mmol, 8 eq) . A mistura reaccional foi aquecida até à temperatura ambiente e agitada à temperatura ambiente, de um dia para o outro, periodo após o qual foi removida a acetona in vacuo e o residuo resultante foi particionado entre EtOAc e água acidificada para pH 2 com HC1 conc. As fases foram então separadas e a fracção orgânica foi lavada com solução salina saturada, seca sob MgS04 e concentrada in vacuo para proporcionar, após cromatografia, (0,05 g, 17%) do composto do titulo como um sólido cremoso colorido. RMN de (CD3OD) : δ 1,59 (s, 6H) , 2,17 (s, 3H) , 2,20 (s, 3H) , 4,24 (s, 2H) , ) , 6,72 (d, 1H) , 7,12 (d, 1 H) , 7,20 (s, 1H) , 7,65 (m, 2H) , 8,38 (t, 1 H) . MS C23H22F4NO3S2 m/z 500 (M+l) . 57

Exemplo 2:

éster etílico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]etoxi}fenoxi)propiónico A uma solução do intermediário 39 (238 mg, 1 mmol) e intermediário 16 (287 mg, 1 mmol, 1 eq) em THF seco, foi adicionado PBU3 (0,37 mL, 1,5 mmol, 1,5 eq). A mistura resultante foi agitada a 0 °C e, depois, foi adicionado de uma só vez, TMAD (258 mg, 1,5 mmol, 1,5 eq). A mistura foi agitada a 0 °C durante 10 minutos e à temperatura ambiente durante 24 horas. A mistura resultante foi removida por filtração e concentrada in vacuo, e o composto do título foi obtido como um óleo amarelo (270 mg, 0,532 mmol) num rendimento de 53% após cromatografia flash, utilizando ciclo-hexano/acetato de etilo (95:5) como eluente. MS: C26H29F3NO4S m/z 507, 96 (M+l)

58

Exemplo de Referência 3: ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]etoxi}fenoxi)propiónico A uma solução do Exemplo 2 (200 mg, 0,394 mmol) em etanol, foi adicionado NaOH IN (5 mmol, 12,7 eq) . A mistura resultante foi agitada a 80 °C durante 1,5 horas e, após arrefecimento à temperatura ambiente foi adicionado HC1 1 N (5 mmol, 12,7 eq) . A mistura resultante foi concentrada in vacuo e o residuo foi purificado por cromatografia flash utilizando CtbC^/MeOH (95:5) como eluente para proporcionar um óleo. 0 produto foi cristalizado com uma mistura de água/EtOH/MeOH, removido por filtração e lavado com água para proporcionar 0 composto do titulo (50 mg, . 0,104 mmol) num rendimento de 26%. LC/MS: C24H25F3NO4S m/z 480,25 (M+l) /C24H23F3NO4S: m/z 478,31 (M-l)

Exemplo de Referência 4:

éster etilico do ácido_(2-metil-4- {1- [4-metil-2- (4- trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]etoxi}-fenoxi)-acético

Uma solução de (4-hidroxi-2-metilfenoxi)acetato de etilo (0,073 g) e intermediário 16 (100 mg) em tetra-hidrofurano seco 59 (20 mL) foi arrefecida para 0 °C e foi adicionada tributilfosfina (0,092 mg) seguida por azodicarbonildimorfolida (0,115 g) e a mistura agitada de um dia para o outro. A mistura reaccional foi depois concentrada e o resíduo particionado entre EtOAc (40 mL) e água (40 mL) . A fase orgânica foi recolhida, seca sob sulfato de magnésio e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia eluída com ciclo-hexano/acetato de etilo (10:1) para proporcionar o composto do título como um óleo incolor. RMN de ΧΗ (CDCls, 300 MHz) δ: 1, 27 (t, 3H) , 1, 70 (d, 3H),), 2,24 (s, 3H),), r 2,45 (s, 3H) , 4,24 (q, 2H) , 4,54 (s, 2H) , 5,47 (q, 1H) , 6, 60 (m, 2H) , 6, 75 (d, 1H), 7, 65 (d, 2H), 7,98 (d, 2H).

Exemplo de Referência 5:

ácido_(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometilfenil)- tiazol-5-il]etoxi}-fenoxi)-acético

Uma solução do exemplo 4 (0,105 g) em metanol (15 mL) foi tratada com NaOH 2 N (0,5 mL) e a mistura aquecida até refluxo durante 20 minutos. A reacção arrefecida foi concentrada e o resíduo diluído com água (20 mL) foi adicionado ácido clorídrico 2 N e a suspensão resultante extraída com diclorometano (20 mL). 60 0 extracto orgânico foi seco sob MgS04 e concentrado para proporcionar o composto do titulo como um sólido amarelo. RMN de XH (CDCI3, 300 Mhz) δ: 1,70 (d, 3H), 2,22 (s, 3H), 2,44 (s, 3H) , 4,58 (s, 2H), 5, 47 (q, 1 H) , 6, 60 (m, 2H) , 6,75 (s, 1H) , 7, 65 (d, 2H), 7,95 (d, 2H) φ LC/MS C22H21F3NO4S m/z 452 (M+l)

Exemplo 6:

éster etílico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(3 — fluoro-4-trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]etoxi}-fenoxi)-propiónico A uma solução de PBU3 (460 pL, 1,5 eq) e TMAD (321 mg, 1,5 eq) em THF seco (50 mL) foi adicionado o intermediário 39 (356 mg, 1,4 mmol) e intermediário 20 (380 mg, 1,24 mmol, 1,1 eq) . A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 18 horas e foi concentrada até à secura para proporcionar o composto do título (270 mg, 0,51 mmol) como um óleo incolor após cromatografia flash CH2CI2/C6H12 (80:20). RMN de ΧΗ (CDCI3) δ: 1, 15 (t, 3H) , 1, 35 (s, 6H) , 1, 62 (d, 3H) , 2,08 (s, 3H) , 2,34 (s, 3H) , 4,12 (q, 2H) , 5,38 (q, 1H) , 6,45 (dd, 1H) , 6,51 (d, 1H) , 6,6 (d, 1H) , 7, .52 (d, 2H) , 7, 63 (d, 2H) . 61

Exemplo 7:

ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(3-fluoro-4-trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]etoxi}-fenoxi)-propiónico

Uma solução do exemplo 6 (270 mg) em EtOH (15 mL) foi tratada com hidróxido de sódio 1 N (1,54 mL, 3 eq.) e a mistura aquecida até refluxo durante 3 horas. A reacção arrefecida foi concentrada e o residuo diluido com água (20 mL); foi adicionado ácido clorídrico 1 N (2 mL) e a suspensão resultante extraida com diclorometano (20 mL) . O extracto orgânico foi seco sob sulfato de magnésio e concentrado para proporcionar o composto do titulo num rendimento de 74% como um sólido amarelo (190 mg). (s, 6H), LO \—1 (d, 3H) , 2,43 (s, 3H) , , 6, 82 (dd, 1H) , 6, 97 (m, 2H) , 7,85 RMN de ΧΗ (CDC13) δ: 1,80 2,70 (s, 3H) , 5,82 (q, 1H) (m, 1H) , 7,95 (m, 2H) . LC/MS: C24H22F4NO4S m/z 495,7 (M-l) 62

Exemplo 8:

éster etílico do ácido (S)-2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]etoxi}-fenoxi)-propiónico

Foi aplicado o mesmo protocolo de Mitsunobu, como descrito para o exemplo 2, ao intermediário 18 (1,722 g, 6 mmol; e.e. = 95,5%) e intermediário 39 (1,43 g, 6 mmol, 1 eq.) . 0 composto do titulo foi obtido como um óleo amarelo pálido (1,6 g, 3,15 mmol) num rendimento de 52,5%. RMN de 1R (CDCls, 300 MHz) õ: 1,15 (t, 3H) , 1,44 (s , 6H) , 1, 61 (d, 3H) , 2 ,09 (s, 3H) , 2,36 (s , 3H) , 4, 13 (q, 2H) , 5, 39 (q, 1H) , 6, 47 (dd, 1H), 6, 53 (d, 1H) , 6, 63 (d, 1H) , 7,57 (d , 2H) , 7, 90 (d, 2H). 63

Exemplo 9:

ácido (S)-2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]etoxi}-fenoxi)-propiónico

Foi aplicado o mesmo protocolo de saponificação, como para o exemplo 3, utilizando 1,6 g do Exemplo 8 (1,6 g, 3,15 mmol). 0 pó branco obtido após processamento foi recristalizado em Hexano/EtOH para proporcionar o composto do titulo como um pó branco (780 mg, 1, 628 mmol) num rendimento de 52,5% com um e . e . = 99,9%

pf 134-135 °C RMN de 1 H (CDCls) d: 1 ,41 (s , 6H), 1,58 (d, 3H) , 2,06 (s 3H) , 2,33 ; (s, 3H) , 5, 36 (q, 1H) , 6,46 (dd, 1 H) , 6, 61 (m, 2H) 7,50 (d, 2H) , 7,82 (d, 2H) [a]25 D = _ 169 , 9 (c = 0 , 275, CHC13) para e.e. = 99, 9 0 0 HPLC Chiralpak AD (4,6 x 250 mm, 95% de Hexano/5% de EtOH) Rt: 8,79 min 64

Exemplo 10:

éster etílico do ácido (R)-2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]etoxi}-fenoxi)-propiónico

Foi aplicado o mesmo protocolo de Mitsunobu, como descrito para o exemplo 2, com o Intermediário 19 (1,4 g, 4,9 mmol, e.e. = 98%) e intermediário 39 (1,17 g, 4,9 mmol). O composto do titulo foi obtido como um óleo amarelo pálido (1,4 g, 2,9 mmol) num rendimento de 60%. RMN de ΧΗ (CDCls) δ: 1, 04 (t , 3H) , 1,33 (s, 6H) , 1,50 (d, 3H) , 1, 98 (s, 3H) , 2,25 (s, 3H) , 4,02 (q, 2H) , 5 ,27 (q, i H) , 6, 35 (dd, 1H) , 6,42 (d, 1H), 6, 52 (d, 1H), 7,46 (d, 2H) , 7,80 (d, 2H)

CF, 65

Exemplo de Referência 11: ácido (R)-2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]etoxi}-fenoxi)-propiónico

Foi aplicado o mesmo protocolo de saponificação, como descrito para o exemplo 3, utilizando o Exemplo 10 (400 mg, 0,79 mmol). O residuo foi purificado por cromatografia flash CH2CÍ2/MeOH (99:1) para proporcionar o composto do titulo (220 mg, 0,458 mmol) como um óleo amarelo pálido num rendimento de 58% com um e.e. = 87%. RMN de XH (CDCI3, 300 MHz) õ: 1,47 (s, 6H) , 1,63 (d, 3H) , 2,12 (s, 3H) , 2,38 (s, 3H) , 5,42 (q, 1 H) , 6, 52 (dd, 1H) , 6, 67 (m, 2H) , 7, 56 (d, 2H), 7, 90 (d, 2H). [a] 25 D + 142 (c = 0,37, CHCI3) para ee = 87% HPLC : Chiralpak-AD (4,6 x 250 mm, 95% de Hexano/5% de EtOH) Rt: 15 min LC/MS: C24H25F3NO4S m/z 480, 0 (M+l) 66

Exemplo de Referência 12:

éster etílico do ácido 2-(4-{1-[2-(4-cloro-fenil)-4-metil-tiazol-5-il]-etoxi}-2-metil-fenoxi)-2-metil-propiónico

Foram aplicadas as mesmas condições de Mitsunobu, como descrito para 0 exemplo racémico 2, ao Intermediário 23 (520 mg, 2 mmo1) e Intermediário Fenol 39 (530 mg, 2,2 mmol ) e proporcionaram 0 composto do título num rendimento de 33% (320 mg, 0,67 mmol) como um óleo incolor. RMN de 1 H (CDC13) d: 1,15 (t, 3H) , 1,44 (s, 6H) , 1, 60 (d, 3H) , 2,09 (s, 3H) , 2,33 (s, 3H) , 4,13 (q, 2H) , 5,36 (q, 1H), 6,46 (dd, 1H) , 6, 52 (d, 1H) , 6,62 (d, 1H) , 7,27 (d, 2H), 7,72 (d, 2H) 67

Exemplo de Referência 13: o

ct ácido 2 - (4 —{1—[2 - (4-cloro-fenil)-4-metil-tiazol-5-il]- etoxil-2-metil-fenoxi)-2-metil-propiónico

Foram aplicadas as mesmas condições de saponificação como descrito para o exemplo racémico 3, ao exemplo 12 (320 mg, 0,67 mmol) e proporcionaram o composto do titulo num rendimento de 7 0 % (210 mg, 0,47 mmo1) . LC/MS: C23H23CINO4S m/z 444, 1 (M-l) LC/MS: C23H25CINO4S m/z 446 (M+l)

Exemplo de Referência 14: o

éster etilico do ácido 2-(4-{1-[2-(3,4-dicloro-fenil)-4-metil-tiazol-5-il]-etoxi}-2-metil-fenoxi)-2-metil-propiónico 68

Foram aplicadas as mesmas condições de Mitsunobu, como descrito para o exemplo racémico 2, ao Intermediário 22 (580 mg, 2 mmol) e Intermediário Fenol 39 (530 mg, 2,2 mmol) e proporcionaram o composto do titulo num rendimento de 42% (430 mg, 0,84 mmol) como um óleo incolor. RMN de (CDCI3) δ : 1,15 (t, 3H) , 1,43 (s, 6H) , 1,59 (d, 3H) , 2,09 (s, 3H) , 2,33 (s, 3H), 4,13 (q, 2H), 5, 37 (q, 1H) , 6, 46 (dd, 1H) , 6,52 (d, 1H) , 6,63 (d, 1H) , 7,36 (d, 1H), 7,59 (dd, 1H) , 7, 91 (d, 1 H) .

Exemplo de Referência 15: o

ácido 2-(4-{l-[2-(3,4-dicloro-fenil)-4-metil-tiazol-5-il]-etoxi}-2-metil-fenoxi)-2-metil-propiónico

Foram aplicadas as mesmas condições de saponificação, como descrito para o exemplo racémico 3, ao exemplo 14 (480 mg, 0,94 mmol) e proporcionaram o composto do titulo num rendimento de 67% (300 mg, 0,63 mmol). LC/MS: C23H22CI2NO4S m/z 478 e 480 (M-l) 69

Exemplo de Referência 16: o

éster etílico do ácido 2-(4-{1-[2-(4-etil-fenil)-4-metil-tiazol-5-il]-etoxi}-2-metil-fenoxi)-2-metil-propiónico

Foram aplicadas as mesmas condições de Mitsunobu, como descrito para o exemplo racémico 2, ao Intermediário 21 (500 mg, 2 mmol) e Intermediário Fenol 39 (530 mg, 2,2 mmol) e proporcionaram o composto do título num rendimento de 30% (280 mg, 0,6 mmol) como um óleo incolor. RMN de (CDCls) õ: 1,25 (m, 6H) , 1,53 (s , 6H) , 1,70 (d, 3H) , 2,19 (s, 3H) , 2, , 42 (s, 3H) , 4,23 (q, 2H) , 5,46 (q, 1H) , 6,57 (dd, 1 H) , 6, 62 (d, 1H) , 6,73 (d, 1 H), 7, 23 (d, 2H) , 7,81 (d, 2H) . 70

Exemplo de Referência 17: o o

Ácido_2 - (4 - {1- [2 - (4-etil-fenil) - 4-metil-tiazol-5-il] - etoxi}-2-metil-fenoxi)-2-metil-propiónico

Foram aplicadas as mesmas condições de saponificação, como descrito para o exemplo racémico 3, ao exemplo 16 (280 mg, 0,6 mmol) e proporcionaram o composto do titulo num rendimento de 76% (200 mg, 0,45 mmo1). LC/MS : C25H30NO4S m/z 440, 0 (M+l)

Exemplo 18:

éster_etílico_do_ácido_2 - (4 - {1- [2 - (2-fluoro-4- trifluorometil-fenil)-4-metil-tiazol-5-il]-etoxi}-2-metil-fenoxi)-2-metil-propiónico 71

Foram aplicadas as mesmas condições de Mitsunobu, como descrito para o exemplo racémico 2, ao Intermediário 42 (400 mg, 1,31 mmo1) e Intermediário fenol 39 (312 mg, 1,31 mmol ) e proporcionaram 0 composto do titulo num rendimento de 35% (240 mg, 0,456 mmo1 ) como um óleo incolor • RMN de ΧΗ (CDC13) õ: 1,16 (t, 3H) , 1,44 (s, 6H) , 1,63 (d, 3H) , \—1 CM (s, 3H), 2 , 38 (s, 3H) , 4,14 (q, 2H) , 5,42 (q, 1H), 6, 47 (dd, 1H) , 6,52 (d, 1H) , 6, 65 (d, 1 H) , 7, : 38 (d , 2H) , 8,3 (m, 1 H) .

Exemplo 19:

ácido 2—(4 — {1—[2—(2 — fluoro-4-trifluorometil-fenil)-4-metil-tiazol-5-il]-etoxi}-2-metil-fenoxi)-2-metil-propiónico

Foram aplicadas as mesmas condições de saponificação, como descrito para o exemplo racémico 3, ao exemplo 18 (240 mg, 0,46 mmol) e proporcionaram o composto do titulo num rendimento de 97% como um pó branco (220 mg, 0,442 mmol).

pf 133 °C LC/MS :C24H22F4NO4S m/z 495, 9 (M-l) 72

Exemplo 20:

éster etílico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-etoxi}-fenoxi)-propiónico

Foram aplicadas as mesmas condições de Mitsunobu, como descrito para o exemplo racémico 2, ao Intermediário 17 (400 mg, 1,46 mmol) e Intermediário fenol 39 (349 mg, 1,46 mmol) e proporcionaram o composto do título num rendimento de 21% (150 mg, 0,303 mmol) como um óleo incolor. RMN de (CDC13) õ: 1,17 (t , 3H) , . 1 LO (s, 6H) , 1, 67 (d, 3H) , 2,11 (s, 3H), 4, 14 (q, 2H) , 5,46 (q, 1 H) , 6, 55 (s, 2H) , 6,69 (br s, 1 H) , 7,60 (d, , 2H), 7, 66 (s, 1 H) , 7, 95 (d, 2H) 73

Exemplo 21:

ο HO

ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-etoxi}-fenoxi)-propiónico

Foram aplicadas ao exemplo 20 (150 mg, 0,3 mmol) as mesmas condições de saponificação, como descrito para o exemplo racémico 3, e proporcionaram o composto do titulo num rendimento de 64%, como um pó amarelo (90 mg, 0,193 mmol). LC/MS : C23H23F3NO4S m/z 465, 99 (M+l)

Exemplo de Referência 22: o

éster etílico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-metil-l-[4-metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-etoxi}-fenoxi)-propiónico 74

Foram aplicadas as mesmas condições de Mitsunobu, como descrito para o exemplo racémico 2, ao Intermediário 24 (500 mg, 1,66 mmol) e Intermediário fenol 39 (440 mg, 1,85 mmol) e proporcionaram o composto do titulo num rendimento de 70% (610 mg, 1,17 mmol) como um óleo após purificação flash CH2CI2. RMN de 1 H (CDCI3) δ: 1 ,20 (t, 3H) , 1, 50 (s, 6H) , 1,72 (s, 6H) , 2,11 (s, 3H) , 2,5 6 (s, 3H) , 4,18 (q, 2H) , 6, 45 (dd, 1 H) , 6,49 (d, 1H) , 6, 64 (d, 1H) , 7, 64 (d, 2H) , 7 , 96 (d, 2H) φ

Exemplo de Referência 23:

ácido_2-metil-2- (2-metil-4- {1-metil-l- [4-metil-2- (4- trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-etoxi}-fenoxi)-propiónico

Foram aplicadas as mesmas condições de saponificação, como descrito para o exemplo racémico 3, ao exemplo 22 (300 mg, 0,58 mmol) e proporcionaram o composto do título num rendimento de 20% como um pó amarelo (60 mg, 0,12 mmol) LC/MS: C25H27F3NO4S m/z 4 94,0 (M+l) 75

Exemplo de Referência 24:

éster etílico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-metil-l-[2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-etoxi}-fenoxi)-propiónico

Foram aplicadas as mesmas condições de Mitsunobu, como descrito para o exemplo racémico 2, ao Intermediário 25 (460 mg, 1,6 mmol) e Intermediário Fenol 39 (381 mg, 1,85 mmol) e proporcionaram o composto do título num rendimento de 13,5% (610 mg, 1,17 mmol) como um óleo após purificação por cromatografia flash C6Hi2/EtOAc (80:20). RMN de 1R (CDCls) õ: 1,15 (t, 3H) , 1,46 (s, 6H) , O LO \—1 (s, 3H) , 1, 68 (s, 6H) , 2,06 (s, 3H), 4 ,13 (q, 2H) , 5 ,46 (q, i H) , 6,55 (s, 2H) , 6,69 (br s, 1H) , 7,60 (d, 2H) , 7,66 (s, 1 H), 7,95 (d, 2H) . 76

Exemplo de Referência 25:

ácido_2-metil-2-(2-metil-4-{1-metil-l-[2-(4-trifluorometil- fenil)-tiazol-5-il]-etoxi}-fenoxi)-propiónico

Foram aplicadas as mesmas condições de saponificação, como descrito para o exemplo racémico 3, ao exemplo 24 (110 mg, 0,217 mmol) e proporcionou o composto do titulo num rendimento de 58% como um óleo castanho (60 mg, 0,125 mmol). LC/MS: C24H23F3NO4S m/z 478, 1 (M-l)

Exemplo 26:

éster etilico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]propoxi}fenoxi)propiónico A uma solução do intermediário 39 (1,03 g, 4,3 mmol) e intermediário 26 (1,24 g, 4,3 mmol, 1 eq) em tolueno seco, foi adicionado PBU3 (1,6 mL, 6,45 mmol, 1,5 eq). A mistura resultante 77 foi deixada a agitar a 0 °C e, depois, foi adicionado TMAD (1,11 g, 6,45 mmol, 1,5 eq) . A mistura foi agitada a 0 °C durante 1 horas e à temperatura ambiente durante 24 horas. A mistura resultante foi removida por filtração, concentrada in vacuo, para proporcionar o composto do titulo após cromatografia flash (ciclo-hexano/EtOAc: 95/5) como um óleo amarelo (1,3 g, 2,49 mmol) num rendimento de 58%. LC/MS: C27H31F3NO4S m/z 522,19 (M+l)

Exemplo 27:

HO

ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometil)-tenil)-tiazol-5-il]propoxi}fenoxi)propiónico A uma solução do exemplo 26 (1,1 g, 2,17 mmol) em THF/etanol (1/1) foi adicionado NaOH 1 N (10 mmol, 4,6 eq) . A mistura resultante foi agitada a 80 °C durante 1,5 horas e, após arrefecimento à temperatura ambiente, foi adicionado HC1 1 N (10 mmol, 4,6 eq). A mistura resultante foi concentrada in vacuo, e o resíduo foi sonicado em água/EtOH. O sólido resultante foi removido por filtração e lavado com água, HC1 diluído e água para proporcionar o composto do título (680 mg, 1,38 mmol) num rendimento de 64% como um pó branco. LC/MS: C25H27F3NO4S: m/z 493,79 (M+l) 78

Exemplo 28:

éster etílico do ácido (R)-2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]propoxi}-fenoxi)-propiónico

Foram aplicadas as mesmas condições de Mitsunobu, como descrito para o exemplo racémico 2, ao intermediário 28 (1,4 g, 4.65 mmol; e.e. = 98%) e intermediário fenol 39 (1,11 g, 4.65 mmol) e proporcionaram o composto do título num rendimento de 54% (1,3 g, 2,5 mmol) com um e.e. = 89%. MS: C27H31F3NO4S m/z: 522,1 (M+l) [a]25D = + 147,5 (c = 0,268, CHCI3) para e.e. = 89% HPLC: Chiralpak-AD (4,6 x 250 mm, 95% de Hexano/5% de ETOH)

Rt: 8,98 min 79

Exemplo 29:

ácido (R)-2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]propoxi}-fenoxi)-propiónico

Foram aplicadas as mesmas condições de saponificação, como descritas para o exemplo racémico 3, ao exemplo 28 (1,245 g, 2,4 mmol, e.e. = 89%) e proporcionou o composto do titulo num rendimento de 68% como um pó branco (800 mg, 1,6 mmol) com um e.e. = 89%. MS: C25H27F3NO4S: m/z 494, 1 (M+l) [a]25D= + 145,2 (c = 0,259, CHCI3) para e.e. = 89% HPLC: Chiralpak-AD (4,6 x 250 mm, 95% de Hexano/5% de EtOH)

Rt: 15,88 min 80

Exemplo 30:

éster etílico do ácido (S)-2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]propoxi}-fenoxi)-propiónico

Foram aplicadas as mesmas condições de Mitsunobu, como descrito para o exemplo racémico 2, ao intermediário (R)-álcool 30 (1,58 g, 5,2 mmo1 , e . e . = 98%) e intermediário fenol 39 (1,5 g, 6,24 mmo1) e proporcionaram o composto do título num rendimento de 59% (1,6 g, 3 mmo1) • RMN de 1 H (CDCls, 3 0 0 Mh z) õ: 1,02 (t, 3H) , 1,20 (t, 3H) , 1,49 (s, 6H) , 1,88 (m, 1H), 2,11 (m, 1H) , 2,14 (s, 3H) , 2,42 (s, 3H) , 4,16 (q, 2H), 5, 16 (t, 1H) , 6,51 (dd, 1H) , 6,56 (d, 1H) , 6, 67 (d, 1H), 7,62 (d, 2H) , 7,96 (d, 2H). 81

Exemplo de Referência 31:

ácido (S)-2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]propoxi}-fenoxi)-propiónico

Foram aplicadas as mesmas condições de saponificação, como descritas para 0 exemplo racémico 3, ao exemplo 30 d, 6 g, 3 mmo1) e proporcionaram 0 composto do titulo num rendimento de 74% como um óleo viscoso (1,1 g, 2,2 mmol) com um e . e. ; = 83% • RMN de 1 H (CDCI3) õ: 1,03 (t, 3H), 1,51 (s, 6H) , 1,89 (m, 1H) , 2,12 (m, 1H), 2, 16 (s, 3H) , 2,24 (s, 3H), 5,18 (t, 1H) , 6, 55 (dd, 1 H) , 6,71 (m, 2H) , 7,60 (d, 2H) , 7,93 (d, 2H) .

[a]25D = -129 (c = 0,322, CHCI3) para e.e. = 83% HPLC: Chiralpak-AD (4,6 x 250 mm, 95% de Hexano/5% de EtOH) Rt: 7,57 min 82

Exemplo de Referência 32:

éster etílico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]but-3-eniloxi}fenoxi)propiónico A uma solução do intermediário 39 (1,5 g, 6,3 mmol) e intermediário 32 (1, 97 g, 6,3 mmol, 1 eg) em tolueno seco foi adicionado PBU3 (2,35 mL, 9,45 mmol, 1,5 eg). A mistura resultante foi deixada a agitar a 0 °C e, depois, foi adicionado TMAD (1,63 g, 9,45 mmol, 1,5 eq) . A mistura foi agitada a 0 °C durante 1 hora e à t.a. durante 24 horas. A mistura resultante foi removida por filtração, concentrada in vacuo e o composto do título foi obtido por cromatografia flash utilizando ciclo-hexano/acetato de etilo (8/2) como eluente, um óleo amarelo (2,08 g, 3,9 mmol) num rendimento de 62%. RMN de ΧΗ (CDC13) : δ 1,21 (t, 3H) , 1,5 (s, 6H) , 2,15 (s, 3H) , 2,42 (s, 3H) , 2,65 (m, 1H) , 2,85 (m, 1H) , 4,2 (q, 2H) , 5,15 (m, 2H), 5,30 (t, 1H), 5,85 (m, 1H) , 6,55 (m, 2H) , 6,7 (d, 1H) , 7,65 (d, 2H), 7,97 (d, 2H) . LC/MS: C28H31F3NO4S: m/z 534,21 (M+l) 83

Exemplo de Referência 33:

ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]but-3-eniloxi}fenoxi)propiónico A uma solução do exemplo 32 (1 g, 1,87 mmol) em THF/etanol (1/1) foi adicionado, gota a gota, NaOH 0,2 N (5,6 mmol, 3 eq). A mistura resultante foi agitada a 50 °C durante 3 horas e, após arrefecimento a 0 °C, foi adicionado HC1 0,2 N (5,6 mmol, 3 eq). A mistura resultante foi concentrada in vacuo, então o residuo foi removido em água e extraído com acetato de etilo. A fase orgânica foi removida por evaporação e o resíduo foi purificado por cromatograf ia flash utilizando CthC^/MeOH (97/3) como eluente. O resíduo foi tratado vigorosamente com NaOH 0,2 N durante 1 hora e, depois, foi adicionado HC1 0,2 N, gota a gota, para proporcionar a precipitação de um sólido branco. Após filtração, o sólido branco foi lavado com uma pequena quantidade de heptano para proporcionar o composto do título (100 mg, 0,2 mmol) num rendimento de 11% como um pó branco. LC/MS: C26H27F3NO4S: m/z 505, 97 (M+l)/C26H25F3NO4S: m/z 504,04 (M-l) 84

Exemplo de Referência 34:

éster etílico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]butoxi}-fenoxi)-propiónico

Uma mistura de 1 g do exemplo 32 (1,8 mmol) e 100 mg de Pd a 10% em carvão em EtOH (50 mL) foi agitada sob uma atmosfera de Hidrogénio à temperatura ambiente durante 4 horas. A mistura foi filtrada através de uma almofada de celite e enxaguada com 25 mL de EtOH. O filtrado foi concentrado até à secura, para proporcionar o composto do titulo (1,0 g, 2 mmol) como um pó castanho num rendimento quantitativo em bruto. MS: C28H33F3NO4S: m/z 536, 1 (M+l) 85

Exemplo de Referência 35:

ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometil-chenil)-tiazol-5-il]butoxi}-fenoxi)-propiónico A uma solução do exemplo 34 (800 mg, 1,5 mmol) em THF/Etanol (5/20 mL) foi adicionado NaOH 1 N (10 mmol, 10 mL) . A mistura resultante foi agitada a 50 °C durante 2 horas e, após arrefecimento à temperatura ambiente foi adicionado HC1 1 N (10 mmol, 10 mL) . A mistura resultante foi concentrada in vacuo, então o residuo foi sujeito a cromatograf ia flash CfhC^/MeOH (98:2) para proporcionar o composto do titulo (310 mg, 0,61 mmol) num rendimento de 40% como um óleo incolor.

MS: C26H27F3NO4S

MS: C26H29F3NO4S m/z 506,16 (M-l) m/z 508,0 (M+l) 86

Exemplo de Referência 36:

éster etílico do ácido 2-metil-{2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2- (4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-propoxi}-fenoxi) }-propiónico A uma solução do intermediário fenol 39 (1,58 g, 6,6 mmol) e intermediário 31 (1,9 g, 6,6 mmol, 1,1 eq) em tolueno seco foi adicionado PBU3 (1,66 mL, 1,5 eq) . A mistura resultante foi deixada a aquecer para 0 °C e, depois foi adicionado TMAD (1,15 g, 1,5 eq) . A mistura foi agitada a 0 °C durante 1 hora e à temperatura ambiente durante 24 horas. A mistura resultante foi removida por filtração e concentrada in vacuo e o composto do título foi obtido por cromatografia flash utilizando Ciclo-hexano/Acetato de etilo (95/5), como um óleo amarelo (450 mg, 0,84 mmol) num rendimento de 14%. MS: C28H33F3NO4S: m/z 536, 1 (M+l) 87

Exemplo de Referência 37:

ácido 2-metil-{2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-1]-propoxi}-fenoxi)}-propiónico A uma solução do exemplo 36 (450 mg, 0,84 mmol) em THF/Etanol (5/20 mL) foi adicionado NaOH 1 N (5 mmol, 5 mL) . A mistura resultante foi agitada a 50 °C durante 2 horas e, após arrefecimento à temperatura ambiente, foi adicionado HC1 1 N (5 mmol, 5 mL) . A mistura resultante foi concentrada in vacuo e o residuo foi submetido a cromatografia flash CfhC^/EtOAc (95:5) para proporcionar o composto do titulo (290 mg, 0,57 mmol) num rendimento de 68% como um pó amarelo amorfo. MS: C26H27F3NO4S: m/z 506, 24 (M-l) MS: C26H29F3NO4S: m/z 508,1 (M+l)

Exemplo de Referência 38:

éster etílico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]pentiloxi}-fenoxi)-propiónico A uma solução do Intermediário 39 (238 mg, 1 mmol) e intermediário 33 (329 mg, 1 mmol, 1 eq) em tolueno seco, foi adicionado PBU3 (1,5 mmol, 1,5 eq) . A mistura resultante foi deixada a aquecer para 0 °C e, depois, foi adicionado TMAD (1,55 mmol, 1,5 eq). A mistura foi agitada a 0 °C durante 1 hora e à temperatura ambiente durante 24 horas. A mistura resultante foi removida por filtração, concentrada in vacuo e o composto do título foi obtido por cromatografia flash utilizando Ciclo-hexano/EtOAc (90:10), como um óleo amarelo (100 mg, 0,18 mmol ) num rendimento de 18%. RMN de (CDCls) õ: 0,8 (t, 3H), 1,15 (t, 3H), 1,25 (m, 2H) , r 1,4 (s, 6H) , 1,75 (m, 1 H) , 2,05 (m, 4H) , 2,3 (s, 3H) , 4,1 (q, 2H) , 5, 15 (t, 1H) , 6,45 (dd, 1H), 6, 55 (d, 1H), 6, 6 (d, 1 H) , 7,55 (d, 2H) , 7,9 (d, 2H) φ 89

Exemplo de Referência 39:

ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]pentiloxi}-fenoxi)-propiónico A uma solução do exemplo 38 (90 mg, 0,164 mmol) em

THF/Etanol (1/1), foi adicionado NaOH 1 N (5 mmol, 5 mL) . A

mistura resultante foi agitada a 80 °C durante 1,5 hora e, após arrefecimento à temperatura ambiente, foi adicionado HC1 1 N (5 mmol, 5 mL) . A mistura resultante foi concentrada in vacuo, depois o residuo foi submetido a cromatografia flash eluida com CH2CÍ2/EtOAc (90:10) para proporcionar o composto do titulo (20 mg, 0,038 mmol) num rendimento de 23% como um óleo incolor. RMN de (CDCls) õ: 0,8 (t, 3H) , LO \—1 \—1 -1,35 (m, 4H) , 1,45 (s, 6H) , 1, 8 (m, 1H) , 2,05 (m, 4H), . 2,35 (s, 3H); 5,15 (t, 1H), 6,45 (m, 1H) , 6, 65 (m, 2H) , 7,55 (d, 2H) , 7, 9 (d, 2H). 90

Exemplo de Referência 40:

éster etílico do ácido 2-(4-{ciclopentil-[4-metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-metoxi)-2-metil-fenoxi)-2-metil-propiónico A uma solução do Intermediário 39 (714 mg, 3 mmol) e intermediário 34 (1,024 g, 3 mmol, 1,1 eq) em tolueno seco, foi adicionado PBU3 (1,1 mL, 1,5 eq) . A mistura resultante foi deixada a aquecer para 0 °C e, depois, foi adicionado TMAD (774 mg, 1,5 eq). A mistura foi agitada a 0 °C durante 1 hora e à temperatura ambiente durante 24 horas. A mistura resultante foi removida por filtração e concentrada in vacuo, e o composto do título foi obtido como um óleo amarelo viscoso (950 mg, 0,84 mmol) num rendimento de 56%, por cromatografia flash utilizando Ciclo-hexano/EtOAc (95:5) LC/MS: C30H35F3NO4S: m/z 562,0 (M+l) 91

Exemplo de Referência 41:

ácido_2- (4-{ ciclopentil- [4-metil-2- (4-trif luorometil- fenil)-tiazol-5-il]-metoxi}-2-metil-fenoxi)-2-metil-propiónico A uma solução do exemplo 40 (930 mg, 1,66 mmol) em THF/Etanol (10/60 mL) foi adicionado, gota a gota, NaOH 1 N (8,3 mmol, 8,3 mL) diluido em 15 mL de água. A mistura resultante foi agitada a 60 °C durante 4 horas e, após arrefecimento à temperatura ambiente, foi adicionado HC1 1 N (9 mmol, 9 mL) diluido em 20 mL de água. A mistura resultante foi concentrada in vacuo e o residuo foi submetido a cromatograf ia flash CfhC^/MeOH (98:2) para proporcionar o composto do titulo (690 mg, 1,29 mmol) num rendimento de 78% como um pó branco amorfo. LC/MS: C28H29F3NO4S: m/z 532,2 (M-l) LC/MS: C28H31F3NO4S: m/z 534,2 (M+l) 92

Exemplo de Referência 42:

éster etílico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]fenilmetoxi}fenoxi) propiónico A uma solução do intermediário 39 (715 mg, 3 mmol) e intermediário 35 (1,05 g, 3 mmol, 1 eq) em tolueno seco, foi adicionado PBU3 (1,11 mL, 4,5 mmol, 1,5 eq). A mistura resultante foi deixada a agitar a 0 °C e, depois, foi adicionado TMAD (775 mg, 4,5 mmol, 1,5 eq). A mistura foi agitada a 0 °C durante 1 hora e à temperatura ambiente durante 24 horas. A mistura resultante foi removida por filtração e concentrada in vacuo, e o composto do titulo foi obtido por cromatografia flash utilizando ciclo-hexano/acetato de etilo (85:15) como eluente, como um óleo amarelo (870 mg, 1,53 mmol) num rendimento de 51%. LC/MS: C31H31F3NO4S: m/z 569, 99 (M+l) 93

Exemplo de Referência 43:

ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometilfenil)-tiazol-5-ilfenilmetoxi}fenoxi)propiónico A uma solução do exemplo 42 (740 mg, 1,3 mmol) em THF/etanol (1/1) foi adicionado, gota a gota, NaOH 0,2 N (6,5 mmol, 5 eq) . A mistura resultante foi agitada a 50 °C durante 4 horas e, após arrefecimento a 0 °C, foi adicionado HC1 0,2 N (6,5 mmol, 5 eq). A mistura resultante foi concentrada in vacuo, então o resíduo foi removido em água e extraído com acetato de etilo. A fase orgânica foi removida por evaporação e o resíduo foi purificado por cromatografia flash utilizando CH2Cl2/acetato de etilo (80/20) como eluente. O resíduo foi tratado vigorosamente com NaOH 0,2 N durante 1 hora e, depois, foi adicionado, gota a gota, HCl 0,2 N para proporcionar a precipitação de um sólido branco. Após filtração, o sólido branco foi lavado com uma pequena quantidade de heptano para proporcionar o composto do título (300 mg, 0,55 mmol) num rendimento de 43%. LC/MS: C29H27F3NO4S: m/z 541, 94 (M+l) /C29H25F3NO4S: m/z 540,03 (M-l) 94

Exemplo 44:

éster etílico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-[4-metil-2-(4-trifluorometilfenil)tiazol-5-il-metoxilfenoxi)propiónico 480 mg do Intermediário 39 (2 mmol) em 50 mL de acetona foram agitadas com 1 g de CS2CO3 durante 15 minutos. O Intermediário 40 (651 mg, 2,2 mmol) foi adicionado e a mistura aquecida até refluxo durante 1 hora. Após filtração e concentração sob vácuo, o resíduo foi removido com 200 mL de CH2CI2 e lavado com água. A camada orgânica foi seca sob Na2SC>4, filtrada e concentrada para proporcionar 0,9 g do composto esperado como um óleo. RMN de 1 H (CDC13: ): δ 1,21 (t, 3H) , 1,5 (s, 6H) , 2,17 (s, 3H) , 2,42 (s, 3H) , 4, 2 (q, 2H), 5, 05 (s, 2H) , 6,62 (dd, 1 H) , 6,75 (m, 2H) , 7,58 (d, 2H) , 7,92 (d, 2H) . 95

Exemplo de Referência 45:

ácido 2-metil-2-(2-metil-4-[4-metil-2-(4-trifluorometilfenil)tiazol-5-il-metoxi]fenoxi)propiónico 900 mg do exemplo 44 dissolvidas em 30 mL de EtOH e 10 mL de NaOH 1 N foram aquecidas até refluxo durante 1 hora. Após arrefecimento para a temperatura ambiente a solução foi acidificada com HC1 1 N e concentrada sob vácuo. A trituração do residuo com água proporcionou, após filtração e lavagem com água, um pó branco sujo que foi recristalizado com CH3CN para proporcionar 370 mg do composto do titulo como cristais ligeiramente amarelos.

pf: 154 °C 96

Exemplo de Referência 46:

éster etílico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-2-fenil-etoxil-fenoxi)-propiónico

Foram aplicadas, ao intermediário 36 (1 g, 2,75 mmol) e

Intermediário fenol 39 (655 mg, 2,75 mmol), as mesmas condições de Mitsunobu, como descrito para o exemplo racémico 2, e proporcionaram o composto do título (340 mg, 0,58 mmol) num rendimento de 21%, como um resíduo castanho após purificação por cromatografia flash CeH^/EtOAc (9:1). LC/MS C32H33F3NO4S m/z 584,2 (M+l) 97

Exemplo de Referência 47:

ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-2-fenil-etoxi}-fenoxi)-propiónico

Foram aplicadas, ao exemplo 46 (280 mg, 0,48 mmol) e proporcionaram o composto do titulo (210 mg, 0,37 mmol), as mesmas condições de saponificação, como descritas para o exemplo racémico 3, , num rendimento de 7 9% após cromatograf ia flash CH2CÍ2/MeOH (95:5) como um pó castanho amorfo. LC/MS C30H27F3NO4S m/z 554,3 (M-l) 98

Exemplo 48: ο

éster etílico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-etilsulfanil}-fenoxi)-propiónico A uma suspensão do intermediário 16 (287 mg, 1 mmol) e Znl2

(160 mg, 0,5 mmol) em 10 mL de CH2CI2, foi adicionado o intermediário tiofenol 44 (305 mg, 1,2 mmol) em solução em 10 mL de CH2CI2. Após agitação durante 24 horas à ta, a reacção não estava completa e foi adicionado um equivalente suplementar de Znl2 (319 mg, 1 mmol). A mistura foi agitada durante 24 horas à ta e arrefecida rapidamente com água (10 mL) e foram adicionados 100 mL de CH2CI2 e a fase orgânica separada por secagem sob Na2S04, concentrada sob vácuo e purificada por cromatografia flash C6Hi2/EtOAc (90:10). O composto do titulo (320 mg, 0,61 mmol) foi obtido como um óleo viscoso incolor num rendimento de 61%. LC/MS: C26H29F3NO3S2 m/z 523, 98 (M+l) 99

Exemplo 4 9:

ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-etilsulfanil}-fenoxi)-propiónico

Foram aplicadas as mesmas condições de saponificação, como descritas para o exemplo racémico 3, ao exemplo 48 (290 mg, 0,56 mmol) e proporcionou o composto do titulo (130 mg, 0,262 mmol) num rendimento de 47%, como um pó branco. RMN de (CDC13) δ: 1,59 (s, 6H) , 1,68 (d, 3H) , 1,99 (s, 3H) , 2,14 (s, 3H) , 4,41 (q, 1H) , 6,61 (dd, 1 H) , 6,95 (dd, 1 H) , 7,04 (br s, 1 H) , 7,15 (d, 1H) , 7,66 (d, 2H) , 7,94 (d, 2H) . 100

Exemplo 50:

éster etílico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-etilsulfanil}-fenoxi)-propiónico

Foram aplicadas as mesmas condições de Mitsunobu, como descrito para o exemplo racémico 2, ao Intermediário 17 (350 mg, 1,3 mmol) e Intermediário tiofenol 44 (358 mg, 1,3 mmol) e proporcionaram o composto do título (520 mg, 1,02 mmol) num rendimento de 80%, como um óleo, após purificação por cromatografia flash H2CI2. RMN de ΧΗ (CDCI3) δ : 1, 24 (t, 3H), 1, 62 (s , 6H) , 1,74 (d, 3H) , 2,20 (s, 3H) , 4,24 (q, 2H) , 4,50 (q, 1H) , 6,56 (d, 1H) , 7,07 (dd, 1 H), 7,20 (d, 1H) , 7,71 (d, 2H), 8,03 (d, 2H) φ 101

Exemplo de Referência 51:

o HO

ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-etilsulfanil}-fenoxi)-propiónico

Foram aplicadas as mesmas condições de saponificação, como descritas para o exemplo racémico 3, ao exemplo 50 (520 mg, 1,02 mmol) e proporcionaram o composto do titulo num rendimento quantitativo como um pó branco sujo. LC/MS C23H23F3NO3S2 m/z 481, 93 (M+l) LC/MS C23H21F3NO3S2 m/z 480, 00 (M-l)

Exemplo de Referência 52:

éster etilico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-metil-l-[4-metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-etilsulfanil}-fenoxi)-propiónico 102

Foram aplicadas as mesmas condições de junção, como descritas para o exemplo 48, ao Intermediário 24 (350 mg, 1,16 mmol) e intermediário tiofenol 44 (354 mg, 1,3 mmol) e proporcionaram o composto do titulo (140 mg, 0,26 mmol) num rendimento de 22%, como um óleo incolor após purificação por cromatografia flash CeHi2/EtOAc (80:20). LC/MS C27H31F3NO3S2 m/z 538 (M+l)

Exemplo de Referência 53:

ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-metil-l-[4-metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-etilsulfanil}-fenoxi)- propiónico

Foram aplicadas as mesmas condições de saponificação, como descritas para o exemplo racémico 3, ao exemplo 52 (140 mg, 0,26 mmol) e proporcionaram o composto do título (70 mg, 0,13 mmol) num rendimento de 52%, como um óleo incolor. LC/MS C25H27F3NO3S2 m/z 510,1 (M+l) LC/MS C25H25F3NO3S2 m/z 508,2 (M-l) 103

Exemplo de Referência 54:

éster etílico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-metil-l-[2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-etilsulfanil}-fenoxi)-propiónico

Foram aplicadas as mesmas condições de junção, como descritas para o exemplo 48, ao Intermediário 25 (350 mg, 1,22 mmo 1) e intermediário tiofenol 44 (371 mg, 1,4 mmo 1 ) e proporcionaram 0 composto do título (300 mg, 0,57 mmo1) num rendimento de 46%, como um óleo incolor após purificação por cromatografia flash CH2CI2. RMN de ΧΗ (CDC13) δ: 1,1 (t, 3H) , 1,46 (s, 6H) , 1, 63 (s, 6H), 2,05 (s, 3H) , 4,1 (q, 2H) , 6,4 (d, 1H), 6 , 85 (dd, 1H) , 6,98 (d, 1H) , 7,62 (d, 2H) , 7,95 (d, 2H) 104

Exemplo de Referência 55: o o

ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-metil-l-[2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-etilsulfanil}-fenoxi)-propiónico

Foram aplicadas as mesmas condições de saponificação, como descritas para o exemplo racémico 3, ao exemplo 54 (300 mg, 0,54 mmol) e proporcionaram o composto do titulo (130 mg, 0,262 mmol) num rendimento de 48%, como um óleo pegajoso. LC/MS C24H25F3NO3S2 m/z 496, 0 (M+l)

Exemplo 56: o

éster etílico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-propilsulfanil}-fenoxi)-propiónico

Foram aplicadas as mesmas condições de junção, como descritas para o exemplo 48, ao Intermediário 26 (800 mg, 105 2,6 mmol) e intermediário tiofenol 44 (660 mg, 2,6 mmol) e proporcionaram o composto do titulo (1000 mg, 1,86 mmol) num rendimento de 71% como um óleo ligeiramente amarelo após purificação por cromatografia flash CeHi^/EtOAc (95:5). LC/MS C27H31F3NO3S2 m/z 538,01 (M+l)

Exemplo 57: o

ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-propilsulfanil}-fenoxi)-propiónico

Foram aplicadas as mesmas condições de saponificação, como descritas para o exemplo racémico 3, ao exemplo 56 (1 mg, 1,86 mmol) e proporcionou o composto do titulo (840 mg, 1,65 mmol) num rendimento de 88%, como um pó branco amorfo. LC/MS C25H27F3NO3S2 m/z 510,0 (M+l) LC/MS C25H25F3NO3S2 m/z 508,1 (M-l)

Foram preparados os seguintes intermediários e ligandos para os ensaios de ligação e transfecção descritos abaixo: 106

(i) ácido 2-{2-metil-4-[({4-metil-2-[4-(trifluorometil) fenil]-1,3-tiazol-5-il}metil)sulfanil]fenoxi}acético.

Este composto foi utilizando como uma referência PPAR delta nos ensaios de transfecção descritos abaixo e foi preparado de acordo com o método apresentado no documento W0200100603-A1. (ii) ácido 2-metil-2-[4-{[(4-metil-2-[4-trifluorometilfenil]-tiazol-5-ilcarbonil)aminolmetil}-fenoxi]propiónico.

Este composto foi utilizado como uma referência PPAR alfa no ensaio de transfecção descrito abaixo e foi preparado de acordo com o método apresentado no documento W0200140207-A1. (iii) ácido 5 —{4 —[2-(Metil-piridin-2-il-amino)-etoxi]- benzi1}-tiazolidina-24-diona

Este composto foi utilizado como uma referência PPAR gama no ensaio de transfecção descrito abaixo e foi preparado de acordo com o método apresentado em J.Med.Chem. 1994, 37 (23), 3977 . 107

Ensaio de Ligação:

Os compostos foram testados na sua capacidade de se ligarem ao hPPAR gama, hPPAR alfa ou PPAR delta, utilizando um Ensaio de Proximidade de Cintilação (SPA). 0 dominio de ligação do ligando do PPAR (LBD) foi expresso em E. coli como proteínas de fusão marcadas com polyHis e purificados. O LBD foi então marcado com biotina e imobilizado em esferas de cintilação de proximidade modificadas com estreptavidina. As esferas foram depois incubadas com uma quantidade constante do ligando radioactivo apropriado (3H-BRL 49653 para o PPAR gama, ácido 2-(4-(2-(2,3-Ditritio-l-heptil-3-(2,4-difluorofenil)ureido)etil)fenoxi)-2-metilbutanóico marcado radioactivamente para o hPPAR alfa (ver documento WO 00/08002) e GW 2433 marcado (ver Brown, P. J et al. Chem. Biol., 4, 909-918 (1997). Para a estrutura e síntese deste ligando (para o PPAR delta) e concentrações variadas do composto de teste e, após equilíbrio da ligação de radioactividade às esferas, foi determinada por contador de cintilação. A quantidade de ligação não específica, como determinado por poços de controlo contendo 50 μΜ do ligando não marcado correspondente, foi subtraída de cada ponto dos dados. Para cada composto testado, foram construídos gráficos de concentração de ligando vs. CPM da ligação do ligando radioactivo e foram estimados os valores de Kl aparentes a partir de ajuste não linear pelos mínimos quadrados dos dados assumindo ligação competitiva simples. Os detalhes deste ensaio foram apresentados noutro local (ver, Blanchard, S. G. et al. Development of a Scintillation Proximity Assay for Peroxisome Proliferator-Activated Receptor gama Ligand Binding Domain. Anal. Biochem., 257, 112-119 (1998)) . 108

Ensaio de transfecção:

Os compostos foram rastreados para a potência funcional em ensaios de transfecção transiente em células CV-1 para a sua capacidade para activar os subtipos PPAR (ensaio de transactivação). Foi utilizado um sistema de receptor quimérico previamente estabelecido para permitir a comparação da actividade transcricional relativa dos subtipos de receptor no mesmo gene alvo e para prevenir a activação do receptor endógeno de complicar a interpretação de resultados. Ver, por exemplo, Lehmann, J. M. ; Moore, L. B.; Smith-Oliver, T. A.; Wilkison, W. 0.; Willson, T. M.; Kliewer, S. A., An antidiabetic thiazolidinedione is a high affinity ligand for peroxisome proliferator-activated receptor gama (PPARgama), J. Biol. Chem., 270, 12953-6 (1995) . Os dominios de ligação do ligando para o PPAR alfa, PPAR gama e PPAR delta de murinos e humanos foram, cada um, fundidos ao domínio de ligação do factor de transcrição de levedura GAL4 do ADN. As células CV-1 foram transfectadas, transientemente, com vectores de expressão para a quimera PPAR respectiva juntamente com uma construção repórter contendo cinco cópias de orientação de expressão do local de ligação do GAL4 ao ADN de fosfatase alcalina de placenta secretada (SPAP) e beta-galactosidase. Após 16 h, o meio foi alterado para meio DME suplementado com soro bovino fetal deslipidado a 10% e o composto de teste na concentração apropriada. Após 24 h adicionais, os extractos celulares foram preparados e ensaiados para a actividade da fosfatase alcalina e β-galactosidase. A actividade da fosfatase alcalina foi corrigida para a eficiência de transfecção utilizando a actividade da beta-galactosidase como um padrão interno (ver, por exemplo, Kliewer, S. A., et ai. Cell 83, 813-819 (1995)). No ensaio de hPPAR gama foi utilizada rosiglitazona (BRL 49653), como um controlo positivo. Nos 109 ensaios de hPPAR alfa, o controlo positivo foi o ácido 2-metil-2-[4 —{ [(4-metil-2-[4-trifluorometilfenil]-tiazol-5-il-carbonil)amino]metil}-fenoxi]propiónico. 0 controlo positivo para os ensaios de PPAR delta foi o ácido 2-{2-metil-4-[({4-metil-2-{trifluorometil)fenil]-1,3-tiazol-5-il}metil)sulfanil] fenoxi}acético.

Todos os Exemplos de ácidos apresentados acima mostraram, pelo menos, 50% de activação do hPPARõ relativamente ao controlo positivo a concentrações de 10~7 M ou inferiores.

As actividades nos três subtipos de hPPARsão apresentadas na tabela abaixo para os compostos mais preferidos e são expressas em nanomolar.

Exemplo EC50 do hPPARa EC50 do hPPARõ EC50 do hPPARy 1 43 2,5 57 9 16 3 7000 11 10 0,7 300 31 5 1,7 660 29 9 1,5 240

Lisboa, 18 de Janeiro de 2007 110

Claims (12)

1. REIVINDICAÇÕES 1. Composto de fórmula (I) ou um seu sal aceitável, solvato ou ésteres de alquiloCi farmaceuticamente -6 r

   (D

   (Re)y em que: X2 é 0, S ou CH2 R6 é H, CH3 ou CH2CH3; R9 é H, CF3 ou CH3; Cada R8 é, independentemente, CF3 ou F; y é 1 ou 2; em que y é 2. 2, em que um dos
2. 2. Composto de acordo com a reivindicação 1,
3. 3. Composto de acordo com a reivindicação substituintes R8 é halogéneo. 1
4. 4. Composto de acordo com a reivindicação 3, em que um dos substituintes R8 é halogéneo e o outro é CF3.
5. 5. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que y é 1.
6. 6. Composto de acordo com a reivindicação 5, em que o substituinte R8 está na posição para.
7. 7. Composto de acordo com a reivindicação 6, em que R8 é CF3.
8. 8. Composto de acordo com a reivindicação 1, seleccionado do grupo consistindo de: ácido 2 — {4—[({2—[2 — fluoro-4-(trifluorometil)fenil]-4- metil-l,3-tiazol-5-il}metil)sulfanil]-2-metilfenoxi} - 2-metilpropanóico éster etilico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometilfenil)tiazol-5-il]etoxi}fenoxi)propiónico éster etilico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometilfenil)tiazol-5-il]propoxi}fenoxi)propiónico éster etilico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(3-Fluoro-4-trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]etoxi}-fenoxi)-propiónico éster etilico do ácido (S)-2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]etoxi}-fenoxi)-propiónico 2 éster etílico do ácido (R)-2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]etoxi}-fenoxi)-propiónico éster etílico do ácido 2-(4-{1-[2-(2-fluoro-4-trifluorometil-fenil)-4-metil-tiazol-5-il]-etoxi}-2-metil-fenoxi)-2-metil-propiónico éster etílico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-etoxi}-fenoxi)-propiónico éster etílico do ácido (R)-2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]propoxi}-fenoxi)-propiónico éster etílico do ácido (S)-2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]propoxi}-fenoxi)-propiónico éster etílico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-[4-metil-2-(4-trifluorometilfenil)tiazol-5-il-metoxi]fenoxi)propiónico éster etílico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-etilsulfanil}-fenoxi)-propiónico éster etílico do ácido 2-metil)-2-(2-metil)-4-{1-[2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-etilsulfanil} -fenoxi)-propiónico 3 éster etilico do ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4-trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-propilsulfanil}-fenoxi)-propiónico ácido 2-metil-2-(2-meti1-4-{1-[4-metil-2-(4- trifluorometilfenil)tiazol-5-il]etoxi}fenoxi)propiónico ácido 2-metil-2-(2-meti1-4-{1-[4-metil-2-(4- trifluorometilfenil)tiazol-5-il]propoxi}fenoxi)propiónico ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(3-Fluoro-4- trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]etoxi}-fenoxi)- propiónico ácido (S)-2-metil-2-(2-meti1-4-{1-[4-metil-2-(4- trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]etoxi}-fenoxi)-propiónico ácido (R)-2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4- trifluorometilfenil)-tiazol-5-il]etoxi}-fenoxi)-propiónico ácido 2— (4—{1— [2— (2-fluoro-4-trifluorometil-fenil)-4- metil-tiazol-5-il]-etoxi}-2-metil-fenoxi)-2-metil-propiónico ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[2-(4-trifluorometil- fenil)-tiazol-5-il]-etoxi}-fenoxi)-propiónico 4 ácido (R)-2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4- trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]propoxi}-fenoxi)-propiónico ácido (S)-2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4- trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]propoxi}-fenoxi)-propiónico ácido 2-metil-2-(2-metil-4-[4-metil-2-(4- trifluorometilfenil)tiazol-5-il-metoxi]fenoxi)propiónico ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4- trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-etilsulfanil}-fenoxi)-propiónico ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[2-(4-trifluorometil- fenil) -tiazol-5-il]-etilsulfanil}-fenoxi)-propiónico ácido 2-metil-2-(2-metil-4-{1-[4-metil-2-(4- trifluorometil-fenil)-tiazol-5-il]-propilsulfanil}-fenoxi)-propiónico e seus sais e solvatos farmaceuticamente aceitáveis.
9. 9. Composto de acordo com a reivindicação 1, seleccionado do grupo consistindo de: ácido 2 — {4 —[({2-[2-fluoro-4-(trifluorometil)fenil]-4-metil-l,3-tiazol-5-il}metil)sulfanil]-2-metilfenoxi}-2-metilpropanóico; e seus sais e solvatos farmaceuticamente aceitáveis. 5
10. 10. Composto de acordo com qualquer das reivindicações 1-9, para utilização em terapia.
11. 11. Composição farmacêutica compreendendo um composto de acordo com qualquer das reivindicações 1-9.
12. 12. Utilização de um composto de acordo com qualquer das reivindicações 1-9 para a preparação de um medicamento para o tratamento de dislipidemia, sindrome X, insuficiência cardica, hipercolesteremia, doença cardiovascular, diabetes mellitus tipo II, diabetes tipo I, resitência à insulina, hiperlipidemia, obesidade, anorexia bolimica e anorexia nervosa. Lisboa, 18 de Janeiro de 2007 6