PT1143931E

PT1143931E - Libertação de fármacos por via pulmonar

Info

Publication number: PT1143931E
Application number: PT99962010T
Authority: PT
Inventors: Pankaj Modi
Original assignee: Generex Pharm Inc
Priority date: 1998-12-21
Filing date: 1999-12-16
Publication date: 2007-01-31
Also published as: CA2353847A1; CA2353847C; JP2002532537A; AU759051B2; NZ512272A; EP1143931A1; ES2274651T3; US6294153B1; DE69933472D1; DK1143931T3; DE69933472T2; AU1851900A; MXPA01006377A; EP1143931B1; WO2000037052A1; ATE341309T1; JP3818852B2

Description

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DESCRIÇÃO "LIBERTAÇÃO DE FÁRMACOS POR VIA PULMONAR"

Campo da Invenção A presente invenção diz respeito a um sistema de libertação aperfeiçoado para a administração de produtos farmacêuticos de moléculas grandes, por exemplo fármacos peptidicos, vacinas e hormonas. Em particular, refere-se a produtos farmacêuticos para tratamento bucal ou pulmonar que se podem administrar por meio de um aerossol na boca.

Antecedentes da Invenção

Durante muitos anos, fizeram-se tentativas para promover tecnologias de libertação de fármacos que fossem convenientes para os doentes, não invasivas, e no aspecto económico alternativas viáveis à injecção de proteínas de grandes macromoléculas. Alguns dos esforços mais primitivos envolveram a administração transdérmica via electroporações, mas a maioria das vezes abandonou-se essa técnica devido às dificuldades técnicas em preparar sistemas para o transporte de grandes moléculas através da pele. A libertação por via oral, que deveria manifestamente ser a forma de dosagem preferível, tem tido algum sucesso. No entanto, um obstáculo importante é a degradação e a desnaturação das proteínas no tracto gastrintestinal. A probabilidade da quantidade certa de fármaco se introduzir efectivamente na corrente sanguínea parece difícil de reproduzir mesmo com a mais avançada tecnologia de transporte. 0 pulmão afigura-se um órgão vantajoso devido à enorme área superficial dos alvéolos, e ao facto de poder absorver moléculas pequenas e grandes enquanto 2 simultaneamente elimina por filtração os veículos de micropartículas e outras toxinas indesejadas do ar. Proteínas grandes, incluindo anticorpos, são facilmente absorvidas através dos alvéolos, quer directamente para o sistema circulatório quer, mais frequentemente, através do sistema linfático, que subsequentemente liberta o fármaco na corrente sanguínea. Proteínas de peso molecular superior a 50 kilodaltons, que incluem a esmagadora maioria de todos os produtos biotecnológicos do mercado e em desenvolvimento têm--se administrado com sucesso através do pulmão. Nenhum outro sistema não invasivo de libertação de fármacos parece ter a capacidade de libertar grandes moléculas tão eficazmente e rapidamente como a libertação pulmonar de um extremo ao outro do pulmão.

Os inaladores de dose regulada convencionais, utilizados principalmente para a asma, libertam os fármacos nas ramificações superiores do pulmão. A capacidade de libertar fármacos via pequenas moléculas através do pulmão profundo e no interior dos alvéolos constituiu um dos avanços tecnológicos mais significativos na libertação de fármacos. Os inaladores de dose regulada [metered-dose inhalers(MDIs)] convencionais libertam entre 0 e 80% do fármaco dependendo da formulação e da proporção propulsor-fármaco. No actual mercado norte-americano que tem em vista muitos fármacos, os progressos na tecnologia da libertação de fármacos poderá ter um impacto significativo. Um início rápido de acção via métodos não injectáveis constitui uma oportunidade considerável. Situações de controlo da dor, por exemplo da dor progressiva, da pós-cirúrgica, da enxaqueca e no serviço hospitalar de traumatologia/emergência, representam uma enorme oportunidade. Para gerir essas necessidades respeitantes à libertação de fármacos, há necessidade de 3 novos produtos, que simultaneamente proporcionem aos doentes um mecanismo conveniente adequado para os utilizadores e aos clínicos uma ferramenta para melhorar a globalidade das doenças mediante uma terapia de beneficiação, aceitação, e para impedir ou reduzir internamentos hospitalares dispendiosos. A expressão "que compreende" e o termo "compreende" quando se utilizam na presente memória descritiva citam-se para especificar a presença de aspectos estabelecidos, números inteiros, fases ou componentes mas não impedem a presença ou a adição de uma ou mais de outras suas características, números inteiros, fases, componentes ou grupos. A patente de invenção WO 99/40932 descreve uma formulação farmacêutica mista sob a forma de micelas que inclui um agente farmacêutico proteico micelar, um sulfato alquílico C8 a C22 de um metal alcalino, um salicilato de um metal alcalino, um edetato aceitável sob o ponto de vista farmacêutico e pelo menos um composto intensificador da absorção. Os compostos que intensificam a absorção escolhem--se de entre o grupo que consiste em lecitina, ácido hialurónico, sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico do ácido hialurónico, octilfenoxipolietoxi-etanol, ácido glicólico, ácido láctico, extracto de camomila, extracto de pepino, ácido oleico, ácido linolénico, óleo de borragem, óleo de primaveras ("evening primrose"), tri-hidro-xi-oxo-colanilglicina, glicerina, poliglicerina, lisina, polilisina, trioleína e suas misturas. A quantidade de cada composto intensificador da absorção encontra-se presente em uma concentração compreendida entre 1 e 10% p/p da formulação 4 total, e a concentração total dos compostos que melhoram a absorção é inferior a 50% p/p da formulação.

Sumário da Invenção

Actualmente tem-se verificado que se podem alcançar melhorias na penetração e na absorção de determinadas formulações micelares mediante mistura da formulação micelar mista com agentes propulsores tais como tetrafluoroetano, heptafluoroetano, dimetilfluoropropano, tetrafluoropropano, butano, isobutano, éter dimetílico e outros agentes propulsores não-CFC e CFC, especialmente quando libertados (por exemplo aplicados na mucosa bucal) através de dispositivos de aerossol, por exemplo inaladores de dose regulada (MDIs). Para muitos tipos de fármacos, os inaladores de dose regulada constituem uma tecnologia comprovada e uma sua forma de libertação popular. A utilização das presentes novas formulações e excipientes pode melhorar a qualidade (em termos de absorção), estabilidade e performance das formulações em MDIs. Os componentes da formulação escolhem-se especificamente para proporcionarem uma melhor penetração através dos poros e facilitarem a absorção dos fármacos de modo a atingirem niveis terapêuticos no plasma. Com alterações apropriadas na formulação e alterações na técnica de administração, a formulação pode libertar-se nos pulmões profundos, através da cavidade nasal e da cavidade bucal.

Os inaladores pressurizados proporcionam igualmente vastos limites de variação de dosagem, uma eficiência de dosagem consistente. Na área alvo atinge-se muito mais de 95% da dose durante esse tipo de libertação local. Nos inaladores pressurizados a menor dimensão das partículas (4-15 mícrones) intensifica igualmente a dosagem devido à cobertura mais 5 ampla dentro da cavidade pulmonar. Nessa situação, uma cobertura aumentada pode facilitar mais a absorção de fármacos tais como a insulina. Além disso, como esses dispositivos são independentes ("self-contained"), evita-se uma possível contaminação.

Por consequência, a presente invenção proporciona uma formulação farmacêutica em aerossol que compreende i) um agente farmacêutico sob a forma de micelas, ii) água, iíi) um composto fenólico escolhido de entre o grupo que consiste em fenol e metil-fenol em uma concentração compreendida entre 1 e 10% p/p da formulação total, e iv) um agente propulsor escolhido de entre o grupo que consiste em um éter dialquilico C1-C2, butanos, propulsor de fluorocarboneto, propulsor de fluorocarboneto que contém hidrogénio, propulsor de clorofluorocarboneto, propulsor de clorofluorocarboneto que contém hidrogénio e suas misturas e, v) pelo menos um excipiente escolhido de entre o grupo que consiste em sais, antioxidantes, agentes corantes, agentes aromatizantes, inibidores de proteases, agentes estabilizantes, glicerina, poliglicerina, lisina, polilisina e suas misturas.

De acordo com uma forma de realização, o agente farmacêutico encontra-se sob a forma de micelas.

De acordo com uma outra forma de realização, a proporção entre o agente farmacêutico, por exemplo a insulina, e o agente propulsor encontra-se entre 5:95 e 25:75.

De acordo com uma outra forma de realização, o fenol metílico é o m-cresol. 6

Ainda de acordo com uma outra forma de realização, escolhe-se o agente propulsor de entre o grupo que consiste em tetrafluoroetano, tetrafluoropropano, dimetilfluoropropa-no, heptafluoropropano, éter dimetílico, n-butano e isobutano.

Ainda de acordo com uma outra forma de realização, a formulação farmacêutica em aerossol acondiciona-se em um dispositivo distribuidor de aerossoles. A presente invenção proporciona igualmente um dispositivo distribuidor de aerossoles de dose regulada no qual se acondiciona uma formulação farmacêutica em aerossol de acordo com a presente invenção. A presente invenção proporciona igualmente uma formulação farmacêutica em aerossol para utilização em um método de administração que consiste em atomizar dentro da cavidade, sem inalação, a partir de um dispensador de spray de dose regulada, uma quantidade pré-determinada da formulação farmacêutica em aerossol, em que a formulação compreende i) um agente farmacêutico sob a forma de micelas, ii) água, iii) um composto fenólico escolhido de entre o grupo que consiste em fenol e metil-fenol em uma concentração compreendida entre 1 e 10% p/p da formulação total, e iv) um agente propulsor escolhido de entre o grupo que consiste em um éter dialquilico C1-C2, butanos, propulsor de fluorocarboneto, propulsor de fluorocarboneto que contém hidrogénio, propulsor de clorofluorocarboneto, propulsor de clorofluorocarboneto que contém hidrogénio e suas misturas e, v) pelo menos um excipiente escolhido de entre o grupo que consiste em sais, antioxidantes, agentes corantes, agentes aromatizantes, inibidores de proteases, agentes 7 estabilizantes, glicerina, poliglicerina, lisina, polilisina e as suas misturas.

Descrição Pormenorizada de Formas de Realização Preferidas A presente invenção proporciona um método aperfeiçoado para a libertação de agentes farmacêuticos macromoleculares (peso molecular elevado), particularmente através das membranas na boca ou nos pulmões. Os agentes farmacêuticos cobrem um amplo espectro de agentes, incluindo proteínas, péptidos, hormonas, vacinas e fármacos. Os pesos moleculares dos agentes farmacêuticos macromoleculares são de preferência superiores a 1 000, especialmente compreendidos entre 1 000 e 2 000 000.

Por exemplo, os agentes farmacêuticos preferidos incluem insulina, heparina, heparina de baixo peso molecular, hirulog, hirugen, huridin, interferões, interleucinas, citocinas, anticorpos mono e policlonais, imunoglobulinas, agentes quimíoterapêuticos, vacinas, glicoproteínas, toxóides bacterianos, hormonas, calcitoninas, factores do crescimento semelhantes à insulina (IGF), péptidos semelhantes ao glucagom (GLP-1), antibióticos de moléculas grandes, compostos trombolíticos à base de proteínas, inibidores das plaquetas, ADN, ARN, agentes terapêuticos genéticos e oligonucleótidos anti-sentido, opióides, narcóticos, hipnóticos, esteróides, fármacos utilizados no alívio da dor, por exemplo fármacos anti-inflamatórios não esteróides.

Como se compreenderá, a concentração do agente farmacêutico é a quantidade suficiente para actuar com eficácia no tratamento ou na prevenção de um distúrbio ou para regular um estado fisiológico em um animal ou no homem. A concentração ou a quantidade administrada do agente farmacêutico dependerá dos parâmetros determinados relativamente ao agente e ao método de administração, por exemplo nasal, pulmonar. Por exemplo, as formulações nasais tendem a exigir concentrações muito menores de alguns componentes a fim de evitar a irritação ou queimadura dos orifícios nasais. Para preparar uma formulação nasal apropriada é por vezes vantajoso diluir uma formulação oral até 10 a 100 vezes.

Sob o ponto de vista fisiológico, a totalidade de um péptido ou de uma proteína nas composições de acordo com a presente invenção é caracteristicamente a quantidade que estabelece o valor real do fármaco para produzir a actividade fisiológica (nível plasmático terapêutico) para a qual se está administrando o péptido ou a proteína. Tendo em consideração o facto de a biodisponibilidade de qualquer substância activa nunca poder ser 100%, isto quer dizer que a dose administrada do fármaco activo não é completamente absorvida, é preferível incorporar uma quantidade ligeiramente maior do que a dosagem necessária. Quando a forma de dosagem é um spray (aerossol) ou similar que se administra repetidamente a partir do mesmo recipiente, é recomendável uma libertação tal que a dose unitária seja ligeiramente maior do que a dose desejada. Deve compreender--se que a dosagem deve variar consoante a espécie dos animais de sangue quente como o homem, animais domésticos, e os seus pesos corporais.

Uma composição de acordo com a presente invenção prepara-se de preferência sob a forma de mícelas microfinas (1 a 10 nm ou menores) graças aos métodos de preparação utilizados. A utilização de atomizadores ou de dispositivos 9 de spray em aerossol (inaladores ou nebulizadores de doses reguladas) proporciona ainda uma redução suficiente no tamanho das partículas tendo em vista uma absorção eficaz na cavidade nasal ou pulmonar de modo que o fármaco possa ser absorvido com sucesso no ou atinja o local específico. A experiência do presente inventor mostra que diversas proteínas conservam a sua actividade biológica mesmo após exposição prolongada a propulsores em MDIs.

As formulações que contêm insulina e algumas outras, podem conter igualmente, pelo menos um sal inorgânico que abre canais no tracto gastrointestinal e pode proporcionar um estímulo adicional para libertar insulina. Exemplos não limitativos de sais inorgânicos são os sais de sódio, potássio, cálcio e zinco, especialmente o cloreto de sódio, o cloreto de potássio, o cloreto de cálcio, o cloreto de zinco e o bicarbonato de sódio.

Os peritos na matéria reconhecerão que a muitas formulações farmacêuticas se adiciona habitualmente pelo menos um agente antioxidante para impedir a degradação e a oxidação dos componentes activos sob o ponto de vista farmacêutico. Os peritos na matéria compreenderão igualmente que se podem incluir na formulação corantes, agentes aromatizantes e quantidades não terapêuticas de outros compostos. Agentes aromatizantes característicos são o mentol e outros aromas de frutos.

Escolhe-se o agente antioxidante de entre o grupo que consiste em tocoferol, mesilato de deteróxima, metilparabeno, etilparabeno e ácido ascórbico e as suas misturas. Um agente antioxidante preferido é o tocoferol. 10

Em uma forma de realização preferida adiciona-se à formulação pelo menos um inibidor de proteases para inibir a degradação do agente farmacêutico pela acção de enzimas proteoliticas. Dos inibidores de proteases conhecidos a maior parte são eficazes para concentrações compreendidas entre 1 e 3% p/p da formulação.

Exemplos não limitativos de inibidores eficazes de proteases são a bacitracina, a tripsina de sementes de soja, derivados de aprotinina e de bacitracina, por exemplo metileno-dissalicilato de bacitracina. A bacitracina é o mais eficaz dos inibidores indicados anteriormente quando utilizada em concentrações compreendidas entre 1,5 e 2% p/p. A tripsina de sementes de soja e a aprotinina podem utilizar--se ambas em concentrações de cerca de 1 a 2% p/p da formulação.

Julga-se que os compostos fenólicos actuam principalmente como agentes conservantes e complexantes para estabilizar fármacos, por exemplo a insulina. Além da sua função como agentes estabilizadores e conservantes, eles podem igualmente actuar como agentes anti-sépticos e, além disso, podem facilitar a absorção. O metil-fenol pode ser o o-cresol, o m-cresol ou o p-cresol, mas prefere-se o m-cresol.

Tipicamente, prepara-se uma formulação farmacêutica em aerossol mediante mistura enérgica de um agente farmacêutico, água, um composto fenólico e um excipiente de modo a formar--se uma formulação micelar.

Após a formação da formulação micelar, acondiciona-se em um recipiente sob pressão. 0 recipiente é, de preferência, do 11 tipo frasco-ampola ("vial") apropriado para utilização em um díspensador de doses reguladas, por exemplo um inalador ou um aplicador de doses reguladas. Em seguida, acondiciona-se o agente propulsor no frasco-ampola. À medida que se introduz o agente propulsor nesse frasco-ampola verifica-se uma grande turbulência no seu interior e o agente propulsor e a formulação farmacêutica misturam-se. Algumas das formulações com glicerina ou poliglicerina na sua composição tendem a não se separar por repouso. Outras podem separar-se. Para as formulações em aerossol que são basicamente homogéneas, pode não ser necessário agitar manualmente o frasco-ampola ("vial") antes da utilização, muito embora, por ser hábito fazê-lo com outras formulações, muitos utilizadores possam agitar o frasco-ampola. No entanto, recomenda-se a agitação do frasco-ampola para garantir precisão na administração farmacêutica de "descarga" ("shot") para "descarga" e desde a primeira descarga até à última a partir do mesmo recipiente. Como se sabe, a fim de libertar o agente farmacêutico no pulmão, é necessário que o utilizador inspire profundamente quando se liberta o spray em aerossol proveniente do recipiente sob pressão. Sustendo a respiração, o agente farmacêutico liberta-se na cavidade bucal. 0 método escolhido dependerá de uma série de factores, incluindo o tipo de agente farmacêutico, a concentração em aerossol, a velocidade de absorção pretendida necessária e similares.

Uma vantagem particular que resulta da utilização de dispensadores de dose regulada é que se pode libertar a formulação em uma dose relativamente precisa, por exemplo comparável com ("titratable to") uma injecção de uma dose de 1 unidade de insulina. 0 tamanho das gotículas da formulação encontra-se preferivelmente entre 1 e 5 μιτι de modo que as gotículas penetrem na mucosa bucal ou atinjam a superfície do 12 pulmão profundo. Desse modo, a presente invenção é apropriada para a libertação de fármacos proteicos tais como a insulina no tratamento da diabetes.

Os dispensadores sob pressão oferecem igualmente uma ampla gama de dosagem e uma eficácia de dosagem consistente. Com uma tal libertação, mais do que aproximadamente 95% da dose pode atingir a área alvo. 0 tamanho mais pequeno da partícula (1-5 μιη) obtido utilizando inaladores sob pressão reforça igualmente a dosagem devido à cobertura mais ampla dentro da cavidade pulmonar. Nessa situação, o aumento da cobertura pode facilitar mais absorção de um fármaco tal como a insulina. Além disso, dado que esses dispositivos são auto--suficientes ("self-contained"), evita-se uma potencial contaminação. A administração da formulação na cavidade bucal faz-se mediante a sua pulverização na boca, fundamentalmente sustendo a respiração, de modo que as gotículas permanecem na boca em vez de serem arrastadas para os pulmões.

Os exemplos seguintes, em que a insulina constitui o agente farmacêutico, ilustram as vantagens da presente invenção.

Exemplo 1

Pesou-se rigorosamente em uma balança analítica uma quantidade apropriada de insulina em pó (a fim de se obterem 200 unidades, 400 unidades ou 600 unidades por ml) , dependendo da actividade (27,5 a 28,3 unidades/mg). Transferiu-se o pó para um copo de vidro de boca larga equipado com um agitador. Adicionou-se água destilada e 13 agitou-se a solução a baixa velocidade. A essa solução adicionou-se, gota a gota, uma solução de HC1 5M (pH 2) até completa solubilização da insulina em pó. Neutralizou-se então a solução com NaOH 5M gota a gota até pH 7-8. Agitou-se continuamente a solução a baixa velocidade. A essa solução adicionou-se glicerina ou poliglicerina (10-20 mg/ml). Adicionou-se a glicerina ou a poliglicerina para maior intensificação da absorção e também para reduzir o tamanho da goticula para uma gama entre 1 e 5 micrones tendo em vista uma libertação pulmonar profunda. Agitou-se a solução durante mais 30 minutos e guardou-se à temperatura de 10 °C ou à temperatura ambiente. Esta técnica proporcionou soluções que contêm insulina (200U, 400U ou 600U/ml). A essas misturas adicionaram-se 15 mg de fenol e 15 mg de m-cresol dissolvidos em água para estabilizar a formulação e protegê-la contra o crescimento bacteriano e também para melhorar a absorção a partir da orofaringe e da traqueia, dos pulmões e da cavidade bucal.

Pipetaram-se (1 ml/frascos) soluções de insulina (200 U ou 400U ou 600U /ml) para frascos de vidro revestidos exteriormente com revestimentos plásticos na qualidade de revestimento protector. Nos frascos acondicionou-se seguidamente um agente propulsor à base de tetrafluoroetano não-CFC, (134a), por intermédio de um equipamento semi-auto-mático de enchimento de gases Pamasol 2008. Ajustou-se a quantidade de agente propulsor (HFA 134a) até uma descarga de 9 ml a fim de libertar uma quantidade exacta de insulina (2, 4 ou 6 unidades/descarga) quando se acciona a válvula do frasco-ampola. As válvulas foram concebidas para libertar 100 μΐ de spray por descarga que contém 2, 4 ou 6 unidades de insulina. 14

Determinou-se o tamanho da partícula aerodinâmica por meio de um Anderson Cascade Impactor-Mark-II (marca registada) da USP de 8 andares. Limpou-se o Multistage Cascade Impactor com metanol e secou-se ao ar à temperatura de 30 °C. Colocaram-se filtros de fibra de vidro nas placas de recolha. Alinharam-se apropriadamente os vedantes e ligou--se o dispositivo actuador ao bocal e montou-se sobre uma porta de indução USP e estágios de jacto. Ligou-se uma bomba de vácuo e ajustou-se o caudal de ar a 28,3 litro/minuto. Premiu-se o frasco-ampola mediante agitação durante 10 segundos e procedeu-se a duas descargas para eliminar os desperdícios. Administrou-se a descarga mediante a libertação do dispositivo actuador no bocal e repetiu-se durante 25 vezes. Recolheu-se a insulina depositada mediante lavagem do bocal com 0,6 mg/ml de EDTA em 10 ml de água a pH 8,7. Removeram-se cuidadosamente os filtros e colocaram-se em frascos de cintilação e submeteram-se à acção de ultra-sons durante 15 minutos. Calculou-se então a quantidade de insulina utilizando RP-HPLC. 15

Resultados :

Estádio vol. mg unidades descarga unidades/ Tamanho da pa: N. ° ml descarga pm 0 10 1 10 2 10 3 10 0,77 10, 1 5 2,0 4,0 4 10 0,78 10,1 5 2,0 3,8 5 10 0,81 10,0 5 2,0 3,0 6 10 0, 80 10,3 5 2,0 2, 1 7 10 0, 80 10, 1 5 2,0 1,0 8 10 0,79 10, 1 5 2,0 0,7 0 10 1 10 2 10 3 10 0,77 20,1 5 4,0 3,8 4 10 0,78 20, 1 5 4,0 3,3 5 10 0,81 20,0 5 4,0 3,0 6 10 0,80 20,3 5 4,0 2,0 7 10 0,80 20,1 5 4,0 1,0 8 10 0,79 20, 1 5 4,0 0, 6 (U400, 4 unidades/descarga)

Conclusão: determinou-se o tamanho da partícula como sendo igual a cerca de 3 mícrones e os andares 0-2 mostraram ausência de deposição de insulina o que é indicativo de que a maior parte das partículas era inferior a 6 mícrones. Desse modo, essa análise é indicativa de que houve uma deposição no pulmão profundo, visto que o tamanho da gotícula é geralmente inferior a 4 mícrones.

Além disso, determinou-se o rigor da dimensão da descarga procedendo a descargas em tubos de Thiel especialmente concebidos em vidro e pesando os tubos antes e depois da recolha da amostra. 16

Para 4 unidades por Actuação: (Determinação do rigor da dimensão da descarga) (400 U), os resultados foram: 16 Número da Descarga 10 15 20 25 30

Peso da Descarga (g) 0, 078 0,083 0,076 0, 079 0,070

Para 6 unidades por Actuação: (Determinação do rigor da dimensão da descarga) (600 U), os resultados foram: Número da Descarga 10 20 30 40 70

Peso da Descarga (g) 0, 17 0,18 0,182 0,174 0,177

Conclusão: A análise indica a uniformidade da dimensão da descarga libertada através das válvulas.

Volume Libertado de dose de Insulina (unidades/descarqa) (análise por HPLC):

Premiu-se o frasco-ampola mediante agitação durante 10 segundos e procedeu-se a duas descargas para eliminar os desperdícios. Administrou-se a descarga mediante libertação do dispositivo actuador no bocal e repetiu-se durante 25 vezes. Recolheu-se a insulina depositada mediante lavagem do bocal com 0,6 mg/ml de EDTA em 10 ml de água a pH 8,7. Removeram-se cuidadosamente os filtros e colocaram-se em frascos de cintilação e submeteram-se os 17 frascos à acção de ultra-sons durante 15 minutos. Seguidamente calculou-se a quantidade de insulina utilizando RP-HPLC. Repetiu-se o processo para 4 e 6 unidades/descarga da fórmula.

Volume Libertado da Dose de Insulina (unidades/descarga) (análises por HPLC): 2 unidades/descarga Descarga N.° Área do Pico (HPLC) Dose (μρ) Dose (unidades) (5-10) inicio 1796558 64,7 2,01 (45-50) meio 1679410 63, 8 2,0 (85-90) fim 1686757 65, 0 2,06 4 unidades/descarga Descarga N.° Área do Pico (HPLC) Dose () Dose (unidades) (5-10) início 2356780 118 4,2 (45-50) meio 2298610 110 4,0 (85-90) fim 2199182 105 3,9 6 unidades/descarga Descarga N.° Área do Pico (HPLC) Dose (μρ) Dose (unidades) (5-10) inicio 3017765 173,3 6,1 (45-50) meio 2984450 171,1 5,9 (85-90) fim 3003560 172,7 6,0

Conclusão: A análise indica a uniformidade da dose libertada por descarga através das válvulas. 18

Resultados Clínicos: A 15 voluntários saudáveis administraram-se as seguintes doses de insulina durante três dias.

Dia-1. 5 sopros de 2 unidades cada (total de 10 unidades) Dia-2: 5 sopros de 4 unidades cada (total de 20 unidades) Dia-3: 5 sopros de 6 unidades cada (total de 30 unidades) Níveis de insulina determinados no plasma, em pmole/1, de 15 em 15 minutos durante os primeiros 90 minutos e em seguida de 30 em 30 minutos durante 2 horas.

Dia-1 Dia-2 Dia-3 Tempo 10 unidades 20 unidades 30 unidades de insulina de insulina de insulina 0 35 38 42 15 56 62 72 30 89 97 112 45 119 138 178 60 160 178 202 75 160 175 190 90 142 157 173 120 78 112 141 150 62 87 92 180 37 49 67

Estes resultados mostram uma absorção significativa de insulina através das regiões dos pulmões e da orofaringe.

Lisboa, 22 de Dezembro de 2006

Claims

1 REIVINDICAÇÕES 1. Formulação farmacêutica sob a forma de aerossol que compreende i) um agente farmacêutico sob a forma de micelas, ii) água, iii) um composto fenólico escolhido de entre o grupo que consiste em fenol e metil-fenol em uma concentração compreendida entre 1 e 10% p/p da formulação total, e iv) um agente propulsor escolhido de entre o grupo que consiste em éter dialquilico C1-C2, butanos, propulsor de fluorocarboneto, propulsor de fluorocarboneto que contém hidrogénio, propulsor de clorofluorocarboneto, propulsor de clorofluorocarboneto que contém hidrogénio e as suas misturas, e v) pelo menos um excipiente escolhido de entre o grupo que consiste em sais, antioxidantes, agentes corantes, agentes aromatizantes, inibidores de proteases, agentes estabilizantes, glicerina, poliglicerina, lisina, polilisina e as suas misturas.

2. Formulação farmacêutica sob a forma de aerossol de acordo com a reivindicação 1., em que a razão entre o agente farmacêutico e o propulsor se encontra compreendida entre 5:95 e 25:75.

3. Formulação farmacêutica sob a forma de aerossol de acordo com a reivindicação 1. ou 2., em que o metil-fenol é o m-cresol.

4. Formulação farmacêutica sob a forma de aerossol de acordo com uma qualquer das reivindicações 1. a 3., em que se escolhe o agente propulsor de entre o grupo que consiste em tetrafluoretano, tetrafluoropropano, dimetilfluoropropano, heptafluoropropano, éter dimetilico, n-butano e isobutano. ο 5. ~ Formulação farmacêutica sob a forma de aerossol de acordo com uma qualquer das reivindicações 1. a 4., em que se escolhe o agente farmacêutico de entre o grupo que consiste em insulina, heparina, heparina de baixo peso molecular, hirulog, hirugen, huridin, interferões, interleucinas, citocinas, anticorpos mono e policlonais, imunoglobinas, agentes quimioterapêuticos, vacinas, glicoproteinas, toxóides bacterianos, hormonas, calcitoninas, factores do crescimento semelhantes à insulina (IGF), péptidos semelhantes ao glucagom (GLP-1), anticorpos de moléculas grandes, compostos trombolíticos à base de proteínas, inibidores das plaquetas, ADN, ARN, agentes terapêuticos genéticos e oligonucleótidos anti-sentido e muito opióides injectáveis, narcóticos, hipnóticos, esteróides, fármacos utilizados no alívio da dor e fármacos anti-inflamatórios não esteróides.

6. Formulação farmacêutica sob a forma de aerossol de acordo com a reivindicação 5., em que o agente farmacêutico é a insulina.

7. Dispensador de aerossol de doses reguladas que contém uma formulação farmacêutica sob a forma de aerossol que compreende i) um agente farmacêutico sob a forma de micelas, ii) água, iii) um composto fenólico escolhido de entre o grupo que consiste em fenol e metil-fenol numa concentração compreendida entre 1 e 10% p/p da formulação total, e iv) um agente propulsor escolhido de entre o grupo que consiste em éter dialquílico C1-C2, butanos, propulsor de fluorocarboneto, propulsor de fluorocarboneto que contém hidrogénio, propulsor de clorofluorocarboneto, propulsor de clorofluorocarboneto que contém hidrogénio e as suas misturas, e v) pelo menos um excipiente escolhido de entre o grupo que consiste em sais, antioxidantes, agentes corantes, 3 agentes aromatizantes, inibidores de proteases, agentes estabilizantes, glicerina, poliglicerina, lisina, polilisina e as suas misturas.

8. Dispensador de doses reguladas de acordo com a reivindicação 7., em que a razão entre o agente farmacêutico e o agente propulsor se encontra compreendida entre 5:95 e 25:75.

9. Dispensador de doses reguladas de acordo com a reivindicação 7. ou 8., em que o metil-fenol é o m-cresol.

10. Dispensador de doses reguladas de acordo com uma qualquer das reivindicações 7. a 9., em que se escolhe o agente propulsor de entre o grupo que consiste em tetrafluoroetano, tetrafluoropropano, dimetilfluoropropano, heptafluoropropano, éter dimetilico, n-butano e isobutano.

11. Dispensador de doses reguladas de acordo com uma qualquer das reivindicações 7. a 10., em que se escolhe o agente farmacêutico de entre o grupo que consiste em insulina, heparina, heparina de baixo peso molecular, hirulog, hirugen, huridin, interferões, interleucinas, citocinas, anticorpos mono e policlonais, imunoglobulinas, agentes quimioterapêuticos, vacinas, glicoproteinas, toxóides bacterianos, hormonas, calcitoninas, factores do crescimento semelhantes à insulina (IGF), péptidos semelhantes ao glucagom (GLP-1), antibióticos de moléculas grandes, compostos trombolíticos à base de proteínas, inibidores de plaquetas, ADN, ARN, agentes genéticos terapêuticos e oligonucleótidos anti-sentido e muitos opióides injectáveis, narcóticos, hipnóticos, esteróides, fármacos utilizados no alívio da dor e fármacos anti-inflamatórios não esteróides. 4

12. Dispensador de doses reguladas de acordo com a reivindicação 11., em que o agente farmacêutico é a insulina.

13. Formulação farmacêutica sob a forma de aerossol para utilização em um método de administração que compreende a pulverização de uma quantidade pré-determinada da formulação na boca com um dispositivo distribuidor de doses reguladas de aerossoles, compreendendo a formulação i) um agente farmacêutico sob a forma de micelas, ii) água, iii) um composto fenólico escolhido de entre o grupo que consiste em fenol e metil-fenol numa concentração compreendida entre 1 e 10% p/p da formulação total, e iv) um agente propulsor escolhido de entre o grupo que consiste em éter dialquilico C1-C2, butanos, propulsor de fluorocarboneto, propulsor de fluorocarboneto que contém hidrogénio, propulsor de clorofluorocarboneto, propulsor de clorofluorocarboneto que contém hidrogénio e as suas misturas, e v) pelo menos um excipiente escolhido de entre o grupo que consiste em sais, antioxidantes, agentes corantes, agentes aromatizantes, inibidores de proteases, agentes estabilizantes, glicerina, poliglicerina, lisina, polilisina e as suas misturas.

14. Formulação farmacêutica sob a forma de aerossol de acordo com a reivindicação 13., em que o método de administração compreende a pulverização em uma cavidade bucal de um ser humano, sem inalação.

15. Formulação farmacêutica sob a forma de aerossol de acordo com a reivindicação 13. ou 14., em que se escolhe o agente farmacêutico de entre o grupo que consiste em insulina, heparina, heparina de baixo peso molecular, hirulog, hirugen, huridin, interferões , interleucinas, citocinas, anticorpos mono e policlonais, imunoglobulinas, 5 agentes quimioterapêuticos, vacinas, glicoproteínas, toxóídes bacterianos, hormonas, calcitoninas, factores do crescimento semelhantes à insulina (IGF) , péptidos semelhantes ao glucagom (GLP-1), antibióticos de moléculas grandes, compostos tromboliticos à base de proteínas, inibidores de plaquetas, ADN, ARN, agentes genéticos terapêuticos e oligonucleótidos anti-sentido e muitos opióides injectáveis, narcóticos, hipnóticos, esteróides, fármacos utilizados no alívio da dor e fármacos anti-inflamatórios não esteróides.

16. Formulação farmacêutica sob a forma de aerossol de acordo com a reivindicação 15., em que o agente farmacêutico é a insulina. Lisboa, 22 de Dezembro de 2006