PT1141308E - Ptroteínas de streptococcus do grupo b e sua utilização - Google Patents

Description

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DESCRIÇÃO "Proteínas de Streptococcus do Grupo B e sua utilização" Campo da invenção A presente invenção refere-se à identificação de genes e proteínas bacterianos, e à sua utilização. Mais particularmente, refere-se à sua utilização em terapia, para imunização e na pesquisa de fármacos.

Antecedentes da invenção O Streptococcus do Grupo B (GBS), também conhecido por Streptococcus agalactiae, é o agente causador de várias condições. Em particular, o GBS causa: infecção neonatal de início precoce.

Esta infecção usualmente inicia-se in utero e causa grave septicemia e pneumonia em crianças, que é letal se não for tratada e mesmo com tratamento está associada a uma taxa de mortalidade de 10-20%.

Infecção neonatal de início tardio.

Esta infecção ocorre no período desde pouco após o nascimento até cerca de 3 meses de idade. Causa uma septicemia, que é complicada por meningite em 90% dos casos. Ocorrem também outras infecções focais incluindo osteomielite, artrite séptica, abscessos e endoftalmite.

Infecções dos adultos.

Estas parecem ser cada vez mais comuns e ocorrer mais frequentemente em mulheres que acabaram de dar à luz um bebé, nos idosos e nos imunocomprometidos. Caracterizam-se por septicemia e infecções focais incluindo osteomielite, artrite séptica, abscessos e endoftalmite.

Infecções do tracto urinário. O GBS é uma causa de infecções do tracto urinário e durante a gravidez é responsável por cerca de 10% de todas as infecções. 2

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Infecções veterinárias. O GBS causa mastite crónica em vacas. Esta, por sua vez, conduz a uma reduzida produção de leite e tem portanto uma considerável importância económica.

As infecções por GBS podem ser tratadas com antibióticos. Contudo, é preferível a imunização. É portanto desejável o desenvolvimento de um imunogénio que possa ser utilizado numa vacina terapeuticamente eficaz.

Sumário da invenção A presente invenção baseia-se na identificação de um gene no GBS, e refere-se também a organismos, cujo produto pode estar localizado na superfície externa do organismo e portanto pode ser utilizado como alvo para imunoterapia.

De acordo com um aspecto da invenção, um péptido compreende a sequência de aminoácidos aqui identificada como SEQ ID NO:23 ou um seu homólogo ou fragmento funcional, para utilização terapêutica, e.g. quando isolado. A expressão "fragmentos funcionais" utiliza-se aqui para definir uma parte do gene ou do péptido que retém a actividade do gene ou do péptido completos. Por exemplo, pode-se utilizar um fragmento funcional do péptido como determinante antigénico, útil numa vacina ou na produção de anticorpos.

Pode-se utilizar um fragmento de um gene para codificar o péptido activo. Alternativamente, o fragmento do gene pode ter utilidade em terapia génica, no direccionamento do gene do tipo selvagem in vivo para exercer um efeito terapêutico.

Um péptido de acordo com a presente invenção pode compreender a sequência de aminoácidos aqui identificada como SEQ ID NO:23.

Devido à localização extracelular ou na superfície celular, o péptido da presente invenção pode ser um candidato adequado para a produção de uma vacina terapeuticamente eficaz contra o GBS. Na expressão "terapeuticamente eficaz" pretende-se incluir o efeito profiláctico de vacinas. Por exemplo, uma vacina pode compreender um péptido de acordo com 3 ΕΡ 1 141 308 /PT a invenção, ou os meios para a sua expressão, para o tratamento de infecção. A vacina pode ser administrada a fêmeas antes ou durante a gravidez para proteger a mãe e o neonato contra a infecção por GBS.

De acordo com outro aspecto da invenção, o péptido ou o gene podem ser utilizados para a pesquisa de potenciais fármacos antimicrobianos ou para a detecção de virulência.

Um outro aspecto da presente invenção consiste na utilização de qualquer dos produtos aqui identificados, para o tratamento ou prevenção de uma condição associada com a infecção por uma estirpe de estreptococos do Grupo B.

Embora a proteína tenha sido descrita para utilização no tratamento de pacientes, utilizações veterinárias dos produtos da invenção são também consideradas dentro do âmbito da presente invenção. Em particular, os péptidos ou as vacinas podem ser utilizados no tratamento de mastite crónica, especialmente em vacas.

Descrição da invenção A presente invenção é descrita com referência à estirpe M732 de Streptococcus do Grupo B. Contudo, todas as estirpes de GBS e muitas outras estirpes bacterianas incluem provavelmente péptidos ou proteínas relacionados possuindo homologia de sequência de aminoácidos com o péptido de M732. Os organismos que provavelmente contêm os péptidos incluem, mas não se lhes limitam, S. pneumoniae, S. pyogenes, S. suis, S. milleri, Streptococcus do Grupo C e do Grupo G e Enterococcus. Podem ser desenvolvidas vacinas contra cada um destes da mesma maneira que se descreve para GBS.

Preferivelmente, os péptidos que podem ser úteis para a produção de vacinas possuem mais de 40% de similaridade de sequências com o péptido aqui identificado. Mais preferivelmente, os péptidos possuem mais de 60% de similaridade de sequências. Mais preferivelmente, os péptidos possuem mais de 80% de similaridade de sequências, e.g. 95% de similaridade. 4

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Depois de caracterizado um gene de acordo com a invenção, é possível utilizar a sequência do gene para estabelecer homologias em outros microorganismos. Desta maneira é possível determinar se outros microorganismos possuem produtos de superfície externa similares. As homologias de sequências podem ser estabelecidas através de pesquisa em bases de dados existentes, e.g. EMBL ou Genbank.

Os péptidos ou proteínas de acordo com a invenção podem ser purificados e isolados por métodos conhecidos na especialidade. Em particular, depois de identificada a sequência do gene, será possível utilizar técnicas recombinantes para expressar o gene num hospedeiro adequado. Fragmentos activos e homólogos podem ser identificados e podem ser úteis em terapia. Por exemplo, os péptidos ou seus fragmentos activos, podem ser utilizados como determinantes antigénicos numa vacina, para eliciar uma resposta imunitária. Podem igualmente ser utilizados na preparação de anticorpos, para imunização passiva, ou aplicações de diagnóstico. Os anticorpos adequados incluem anticorpos monoclonais, ou seus fragmentos, incluindo fragmentos fv de cadeia simples. Os métodos para a preparação de anticorpos serão evidentes para os peritos na especialidade. A preparação de vacinas baseadas em microorganismos atenuados é conhecida dos peritos na especialidade. As composições de vacina podem ser formuladas com transportadores ou adjuvantes adequados, e.g. alúmen, conforme necessário ou desejado, e utilizadas em terapia, para proporcionar uma imunização eficaz contra estreptococos do grupo B ou outros microorganismos relacionados. A preparação de formulações de vacina será evidente para os peritos na especialidade.

Mais geralmente, e como é bem conhecido pelos peritos na especialidade, pode ser seleccionada uma quantidade adequada de um componente activo da invenção, para utilização terapêutica, assim como podem ser seleccionados transportadores ou excipientes, e vias de administração, adequados. Estes factores serão escolhidos ou determinados de acordo com critérios conhecidos tais como a natureza/gravidade da condição a tratar, o tipo ou saúde do indivíduo, etc. 5

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Os produtos da presente invenção foram identificados como se segue:

Uma biblioteca génica parcial de ADN cromossómico de GBS (estirpe M732) foi preparada utilizando os vectores plasmidicos pFW-phoAl, pFW-phoA2 e pFW-phoA3 (Podbielski, A. et al. 1996. Gene 177:137-147). Estes plasmideos possuem um marcador constitutivo de resistência ao antibiótico espectinomicina-adeniltransferase, que confere um elevado nivel de resistência a espectinomicina e é portanto facilmente seleccionado. Adicionalmente, estes vectores contêm um gene phoA truncado (sem comando) de Escherichia coli para fosfatase alcalina. Os três vectores diferem apenas em relação ao quadro de leitura em que o gene phoA sem comando existe, em comparação com um local para a enzima de restrição BamRI em enquadramento a montante. Como este gene phoA truncado de E. coli não possui a sequência de comando apropriada para exportar esta enzima através da membrana bacteriana, está ausente actividade de fosfatase alcalina extracelular quando estes plasmideos são propagados num mutante phoA de E. coli {e.g. estirpe DH5a). O substrato cromogénico da fosfatase alcalina, XP (5-bromo-4-cloro-3-indolil-fosfato), não entra intacto nas células bacterianas e portanto apenas se pode detectar actividade de fosfatase alcalina exportada ou associada à superfície. Quando está presente actividade de fosfatase alcalina exportada ou associada à superfície, o substrato cromogénico XP é clivado para originar um pigmento azul e as correspondentes colónias bacterianas podem ser identificadas pela sua cor azul.

O ADN plasmídico foi totalmente digerido com BamRI e desfosforilado utilizando fosfatase alcalina de camarão. O ADN genómico de GBS foi parcialmente digerido com Sau3AI, fraccionado por tamanhos num gradiente de sacarose e os fragmentos com tamanho <1 kb foram ligados aos vectores pFW-phoA preparados. A estirpe DH5a de E. coli foi escolhida como hospedeiro de clonagem pois não possui um gene phoA funcional. Os plasmideos recombinantes foram seleccionados em ágar de Luria contendo 100 pg/ml de espectinomicina e 40 pg/ml do substrato cromogénico XP. Os transformantes de E. coli portadores dos plasmideos contendo ADN da inserção de GBS que complementa a sequência de sinal de exportação do gene phoA 6

ΕΡ 1 141 308 /PT sem comando foram identificados pela cor azul das colónias. Aproximadamente 30 000 diferentes plasmideos recombinantes contendo ADN da inserção de GBS foram pesquisados desta maneira e 83 plasmideos recombinantes, que complementavam o phoA sem comando, foram escolhidos para estudos adicionais. A partir destas experiências foram seleccionados vários clones, cada um contendo um plasmideo contendo um gene (ou uma sua parte), que complementava o phoA sem comando.

Depois de identificado o gene em cada clone é então possível obter a sequência do gene de comprimento completo, como se segue.

Utilizando o fragmento do gene identificado e sequenciado, desenharam-se iniciadores oligonucleotidicos para a sequenciação do ADN genómico. Estes iniciadores foram desenhados de modo a ficarem na sequência num sentido 'para fora' da sequência obtida. Depois de lida, a sequência obtida foi observada para verificar se os terminais 5' e 3' do gene tinham sido atingidos. A presença destas caracteristicas foi identificada por verificação contra sequências homólogas, e para a extremidade 5' pela presença de um codão de iniciação AUG (ou equivalente aceite) precedido de uma sequência de consenso de Shine-Dalgarno, e para a extremidade 3', pela presença de um codão de terminação da tradução (Stop).

Depois da identificação do gene de comprimento completo, desenharam-se os iniciadores para a amplificação do produto de comprimento completo. Os iniciadores utilizados incluíam locais de reconhecimento de enzimas de restrição (Ncol na extremidade 5' e £co0109l na extremidade 3') para permitir a subsequente clonagem do produto no sistema de expressão de Lactococcus utilizado. A PCR foi realizada utilizando os iniciadores, e os produtos foram clonados num vector de clonagem pCR2.1 (In Vitrogen). Após confirmação da presença do fragmento clonado, o ADN foi excisado utilizando as enzimas de restrição Ncol e Eco0109l. 7

ΕΡ 1 141 308 /PT Ο vector no qual este fragmento foi inserido era uma versão modificada de pNZ8048 (Kuipers, O.P. et al. (1998) J. Biotech 64: 15-21). Este vector, portador de uma origem de replicação de lactococos, um marcador de resistência ao cloranfenicol, um promotor indutivel de nisina e um local de multiclonagem, foi alterado através da substituição do local de multiclonagem por dois marcadores 10X His, flanqueados na extremidade mais a 5' com um local Ncol, dividido no meio por um local de multiclonagem (incluindo um local £coOl09l), e um codão de Stop (terminação) na extremidade 3' dos marcadores His. O gene de interesse foi inserido de modo a que um marcador 10X His ficasse na posição 3' relativamente à região de codificação. Depois da transformação do plasmideo recombinante em L. lactis (estirpe NZ9000 - Kuipers, O.P. et al. (1998) supra), estabeleceu-se uma cultura liquida de 400 ml e induziu-se a tradução da proteína por adição de nisina à cultura. Após uma incubação de 2 horas, colheram-se as células e lisaram-se por batimento com contas. Clarificou-se o lisado resultante por centrifugação, depois passou-se sobre uma coluna de afinidade de metal (Talon, Clonetech). Lavou-se a coluna repetidamente antes da eluição das proteínas ligadas com imidazole.

Para identificar as fracções contendo a proteína recombinante marcada com His, analisou-se uma alíquota de cada fracção por SDS-PAGE, Western blot e sondou-se com anticorpos anti-His. A proteína recombinante obtida foi então utilizada para imunizar coelhos brancos da Nova Zelândia, colhendo soros pré-imunes antes da imunização. Após um reforço, sacrificaram-se os coelhos e colheram-se os soros. Estes soros foram utilizados em Western blot, ELISA e modelos de protecção animais.

Utilizando os soros obtidos a partir dos estudos com animais, realizaram-se estudos de imunossorção.

Cresceu-se Streptococcus do Grupo B em 20 ml de caldo Todd Hewitt (THB) durante 8 horas, colheu-se e ressuspendeu-se em 5 ml de PBS. Utilizaram-se alíquotas de 50 μΐ para revestir poços numa placa de 96 poços (Nunc immuno-Sorb). Deixou-se 8 ΕΡ 1 141 308 /PT esta placa a 4°C durante a noite para permitir a adsorção das bactérias sobre a placa. Lavaram-se as placas duas vezes com PBS, depois bloquearam-se com BSA a 3% em PBS durante lha 37°C. Lavaram-se novamente as placas. Realizaram-se diluições em série de 10 vezes dos soros em PBS e adicionaram-se 50 μΐ destas diluições aos poços da placa, em duplicado. Cobriu-se a placa e incubou-se durante lha 37°C. Lavou-se a placa, depois adicionaram-se 50 μΐ de anticorpo secundário anti-coelho conjugado com fosfatase alcalina numa concentração de 1:5000 a cada poço. Após incubação a 37°C durante uma hora, lavou-se novamente a placa. Adicionaram-se 50 μΐ de substrato (PNPP) a cada poço, e deixou-se prosseguir a reacção durante 30 min antes da leitura da absorvância a 405 nm.

Realizaram-se também estudos de protecção em animais para testar a eficácia da protecção nos coelhos imunizados.

Cresceu-se GBS M732 em THB até se atingir a fase semi-logaritmica - aproximadamente 5 horas. Contaram-se as células numa câmara de contagem, e diluiram-se as bactérias para originar uma concentração de 2xl07 bactérias por ml em soros pré-imunes ou de teste. Injectaram-se 50 μΐ pela via intraperitoneal em ratinhos de 0-1 dia de idade. Observaram-se os ratinhos quanto à sobrevivência ao longo de 48 horas. O Exemplo que se segue ilustra a invenção.

Exemplo 1

Seleccionou-se um clone contendo um plasmideo designado pho3-l. Este plasmideo continha um gene (ou uma sua parte), que complementava o phoA sem comando. As sequências de nucleótidos e de aminoácidos deduzida do gene estão apresentadas em SEQ ID NO:22 e 23.

Realizou-se uma comparação da sequência de aminoácidos de pho3-l.

Os homólogos do produto do gene pho3-l de GBS podem ser identificados em Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Bacillus subtilis (yutD) e Enterococcus faecalis. Os homólogos de S. pyogenes, S. pneumoniae e E. faecalis foram identificados a partir de dados da sequência genómica e não haviam anotações disponíveis quanto à identidade do gene ou 9 ΕΡ 1 141 308 /PT dos produtos génicos. Em B. subtilis, a função do produto do gene yutD é desconhecida. Pode-se contudo notar que o gene yutD está localizado no cromossoma de B. subtilis numa região contendo genes envolvidos na síntese da parede celular. O facto desta sequência de ADN complementar o gene phoA sem comando sugere que este produto génico está localizado extracelularmente.

LISTAGEM DE SEQUÊNCIAS

<110> Microscience Limited <120> GENES E PROTEÍNAS, E SUA UTILIZAÇÃO <130> REP05973WO < 14 0 > < 141 > <160> 35 <170> Patentln Ver. 2.1

<210> 1 <211> 587 <212> ADN

<213> Streptococcus do Grupo B < 2 2 0 > <221> CDS <222> (1)..(582) < 4 0 0 > 1 atg ate cca gta gta ate gaa caa aca agt cgt ggt gaa cgt tet tat 48 Met Ile Pro Vai Vai Ile Glu Gin Thr Ser Arg Gly Glu Arg Ser Tyr 1 5 10 15 gat att tac tea cgt ctt tta aaa gat cgt att att atg ttg aca ggc 96 Asp Ile Tyr Ser Arg Leu Leu Lys Asp Arg Ile Ile Met Leu Thr Gly 20 25 30 caa gtt gag gat aat atg gee aat agt ate att gea cag tta ttg ttt 144 Gin Vai Glu Asp Asn Met Ala Asn Ser Ile Ile Ala Gin Leu Leu Phe 35 40 45 ctc gat gea caa gat aat aca aag gat att tac ctt tat gtc aat aca 192 Leu Asp Ala Gin Asp Asn Thr Lys Asp Ile Tyr Leu Tyr Val Asn Thr 50 55 60 cca ggt ggt tea gta teg gct gga Ctt gct att gtg gac acc atg aac 240 Pro Gly Gly Ser Vai Ser Ala Gly Leu Ala Ile Val Asp Thr Met Asn 65 70 75 80 ttc att aaa teg gac gta cag acg att gtt atg ggg atg gct gct teg 288 Phe Ile Lys Ser Asp Vai Gin Thr lie Vai Met Gly Met Ala Ala Ser 85 90 95 10

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<210> 3 <211> 218 <212> ADN

<213> Streptococcus do Grupo B <220>

<221> CDS <222> (1)..(216) <400> 3 ate aga gea tat tet ggt cet ctt teg gtt ttc ctg cca cgt ttt aaa 48

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Ile Arg Ala Tyr Ser Gly Pro Leu Ser Vai Phe Leu Pro Arg Phe Lys 15 10 15

Ala Cys Asp Ile Ile Vai Asn Vai Arg Arg Thr Ile Met Leu Phe Lys 20 25 30

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Trp Leu Leu Gly Leu Tyr Leu Pro Leu Ile Gly Ala Pro Vai Phe Ala 50 55 60

Ile Leu Ile Gly Ile Ile Vai Gly 65 70

<210> 5 <211> 705 <212> ADN

<213> Streptococcus do Grupo B <220> <221> CDS <222> (1)..(705) <400> 5 atg aat aaa aga aga aaa tta tca aaa ttg aat gta aaa aar caa cat Met Asn Lys Arg Arg Lys Leu Ser Lys Leu Asn Vai Lys Lys Gin His 1 5 10 15 48 13

ΕΡ 1 141 308 /PT tta gct tat gga gct ate act tta gta gcc ctt ttt tca tgt att ttg 96 Leu Ala Tyr Gly Ala Ile Thr Leu Vai Ala Leu Phe Ser Cys Ile Leu 20 25 30 gct gta acg gtc ate ttt aaa agt tca caa gtt act act gaa tct ttg 144 Ala Vai Thr Vai Ile Phe Lys Ser Ser Gin Vai Thr Thr Glu Ser Leu 35 40 45 tca aaa gca gat aaa gtt ege gta gcc aaa aaa tca aaa atg act aag 192 Ser Lys Ala Asp Lys Vai Arg Vai Ala Lys Lys Ser Lys Met Thr Lys 50 55 60 gcg aca tct aaa tca aaa gta gaa gat gta aaa cag gct cca aaa cct 240 Ala Thr Ser Lys Ser Lys Vai Glu Asp Vai Lys Gin Ala Pro Lys Pro 65 70 75 80 tct cag gca tct aat gaa gcc cca aaa tca agt tct caa tct aca gaa 288 Ser Gin Ala Ser Asn Glu Ala Pro Lys Ser Ser Ser Gin Ser Thr Glu 85 90 95 gct aat tct cag caa caa gtt act gcg agt gaa gag acg gct gta gaa 336 Ala Asn Ser Gin Gin Gin Vai Thr Ala Ser Glu Glu Thr Ala Val Glu 100 105 110 caa gca gtt gta aca gaa ata ccc ctg cta cca gtc agg cac aac aac 384 Gin Ala Vai Vai Thr Glu Ile Pro Leu Leu Pro Vai Arg His Asn Asn 115 120 125 ctt tat gct gtt act gag aca cct tac aac cct gct caa cca cca gac 432 Leu Tyr Ala Vai Thr Glu Thr Pro Tyr Asn Pro Ala Gin Pro Pro Asp 130 135 140 caa gtg gcc agg tat gag caa tgg aaa tac tgc cag gcg gtc gga tct 480 Gin Vai Ala Arg Tyr Glu Gin Trp Lys Tyr Cys Gin Ala Val Gly Ser 145 150 155 160 gct gct gca gca caa atg gct gct gca aca gga gtc cct cag tct act 528 Ala Ala Ala Ala Gin Met Ala Ala Ala Thr Gly Vai Pro Gin Ser Thr 165 170 175 tgg gaa cat att att gcc cgt gaa tca aat ggt aat cct aat gtt gct 576 Trp Glu His Ile Ile Ala Arg Glu ser Asn Gly Asn Pro Asn Val Ma 180 185 190 aat gcc tca gga gct tca gga ctt ttc caa acg atg cca ggt tgg ggt 624 Asn Ala Ser Gly Ala Ser Gly Leu Phe Gin Thr Met Pro Gly Trp Gly 195 200 205 tca aca gct aca gtt cag gat caa çta att cag cta tta aag ctt att 672

Ser Thr Ala Thr Vai Gin Asp Gin Vai Ile Gin Leu Leu Lys Leu Ile 210 215 220 cgt gct caa ggg tta tca gct ggg tac cag tga 705

Arg Ala Gin Gly Leu Ser Ala Gly Tyr Gin 225 230 235 14

ΕΡ 1 141 308 /PT

<210> 6 <211> 234 < 212 > PRT <213> Streptococcus do Grupo B <400> 6

Met Asn Lys Arg Arg Lys Leu Ser Lys Leu Asn Vai Lys Lys Gin His 15 10 15

Leu Ala Tyr Gly Ala Ile Thr Leu Vai Ala Leu Phe Ser Cys Ile Leu 20 25 30

Ala Vai Thr Vai lie Phe Lys Ser Ser Gin Vai Thr Thr Glu Ser Leu 35 40 45

Ser Lys Ala Asp Lys Vai Arg Vai Ala Lys Lys Ser Lys Met Thr Lys 50 55 60

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ΕΡ 1 141 308 /PT <210> 7 <211> 594

< 212 > ADN

<213> Streptococcus do Grupo B <220> <221> CDS <222> (1)..(594) < 4 0 0 > 7 atg act gaa cca ttt ttt gat aaa gaa tta act tgt ege cca att gaa 48 Met Thr Glu Pro Phe Phe Asp Lys Glu Leu Thr Cys Arg Pro Ile Glu 1 5 10 15 gcc att cct gaa ttg ttg gaa ttc gat att acc gtt cgt gga gac aac 96 Ala Xle Pro Glu Leu Leu Glu Phe Asp Xle Thr Vai Arg Gly Asp Asn 20 25 30 cgt gga tgg ttc aaa gag aac ttt caa aaa gaa aaa atg ata ccg ctt 144 Arg Gly Trp Phe Lys Glu Asn Phe Gin Lys Glu Lys Met Ile Pro Leu 35 40 45 ggt ttc cca gaa age ttc ttt gag gea gac aaa cta caa aat aat att 192 Gly Phe Pro GlU Ser Phe Phe Glu Ala Asp Lys Leu Gin Asn Asn Ile 50 55 60 tcg ttt aca aaa aaa aat act ttg cga ggt etc cat gea gag cct tgg 240 Sec Phe Thr Lys Lys Asn Thr Leu Arg Gly Leu His Ala Glu Pro Trp 65 70 75 80 gat aaa tat gtt tcg ate gct gat gaa gga cgt gtg ate ggt act tgg 288 Asp Lys Tyr Vai Ser Ile Ala Asp Glu Gly Arg Vai Ile Gly Thr Trp 85 90 95 16

ΕΡ 1 141 308 /PT gtt gac ctc cgt gaa ggt gac agt ttt ggt aac gtt tac caa acg att 336 Vai Asp Leu Arg Glu Gly Asp Ser Phe Gly Asn Vai Tyr Gin Thr Ile 100 105 110 ate gat gee tea aaa ggt att ttt gtt cca ege ggc gtt gct aat ggt 384 Ile Asp Ala Ser Lys Gly Ile Phe Vai Pro Arg Gly Vai Ala Asn Gly 115 120 125 ttc caa gtt ctt tea gat aaa gea gct tat act tat ctc gtt aac gat 432 Phe Gin Vai Leu Ser Asp Lys Ala Ala Tyr Thr Tyr Leu Vai Asn Asp 130 135 140 tat tgg gea ctt gaa ctc aaa cca aaa tat gct ttc gtt aac tat gea 480 Tyr Trp Ala Leu Glu Leu Lys Pro Lys Tyr Ala Phe Vai Asn Tyr Ala 145 150 155 160 gat cca aat cta ggc att cag tgg gaa aat ctw gaa gaa gea gaa gtc 528 Asp Pro Asn Leu Gly Ile Gin Trp Glu Asn Xaa Glu Glu Ala Glu Val 165 170 175 tea gaa gea gat aag aat cac cca ctt ctc aaa gat gta aaa cct ttg 576 Ser Glu Ala Asp Lys Asn His Pro Leu Leu Lys Asp Vai Lys Pro Leu 180 185 190 aag aag gaa gat ttg taa 594 Lys Lys Glu Asp Leu 195

<210> 8 <211> 197 <212> PRT <213> Streptococcus do Grupo Β < 4 0 0 > 8

Met Thr Glu Pro Phe Phe Asp Lys Glu Leu Thr Cys Arg Pto Ile Glu 15 10 15

Ala Ile Pro Glu Leu Leu Glu Phe Asp Ile Thr Vai Arg Gly Asp Asn 20 25 30

Arg Gly Trp Phe Lys Glu Asn Phe Gin Lys Glu Lys Met Ile Pro Leu 35 40 45

Gly Phe Pro Glu Ser Phe Phe Glu Ala Asp Lys Leu Gin Asn Asn Ile 50 55 60

Ser Phe Thr Lys Lys Asn Thr Leu Arg Gly Leu His Ala Glu Pro Trp 17

ΕΡ 1 141 308 /PT 65 10 15 80 Asp Lys Tyr Val Ser Ile Ala Asp Glu Gly Arg Val Ile Gly Thr Trp 85 90 95 Vai Asp Leu Arg Glu Gly Asp Ser Phe Gly Asn Val Tyr Gin Thr Ile 100 105 110 Ile Asp Ala Ser Lys Gly Ile Phe Val Pro Arg Gly Val Ala Asn Gly 115 120 125 Phe Gin Vai Leu Ser Asp Lys Ala Ala Tyr Thr Tyr Leu Val Asn Asp 130 135 140 Tyr Trp Ala Leu Glu Leu Lys Pro Lys Tyr Ala Phe Val Asn Tyr Ala 145 150 155 160 Asp Pro Asn Leu Gly Ile Gin Trp Glu Asn Xaa Glu Glu Ala Glu Val 165 110 175 Ser Glu Ala Asp Lys Asn His Pro Leu Leu Lys Asp Val Lys Pro Leu 180 185 190

Lys Lys Glu Asp Leu 195

<210> 9 <211> 1217 <212> ADN

<213> Streptococcus do Grupo B < 2 2 0 > <221> CDS <222> (1)..(570) < 2 2 0 >

<221> CDS <222> (679)..(945) < 4 0 0 > 9 ggg ttg gea gaa atg caa cat gtc aat cat tet 48 Gly Leu Ala Glu Met Gin His Vai Asn His Ser 10 15 tat tat tta ate gga Tyr Tyr Leu Ile Gly 1 5 tet ttt gat aaa gea tea aaa gea gga ttt att att gct tta ggc att 96

Ser Phe Asp Lys Ala Ser Lys Ala Gly Phe Ile Ile Ala Leu Gly Ile 18

ΕΡ 1 141 308 /PT 20 25 30 gtt tat gga gat att ggt aca age cca ctc tat acg atg caa tea ttg Vai Tyr Gly Asp ile Gly Thr Ser Pro Leu Tyr Thr Met Gin Ser Leu 35 40 45 gtt gaa aac caa ggt ggt att tct agt gtc aca gaa teg ttt ate tta Val Glu Asn Gin Gly Gly Ile Ser Ser Val Thr Glu ser Phe Ile Leu 50 55 60 ggt tct ata tct tta ate ata tgg acc ttg aca ctt att aca act ate Gly Ser Ile Ser Leu Ile Ile Trp Thr Leu Thr Leu Ile Thr Thr Ile 65 70 75 B0 aag tat gtg ctt gta gct tta aag gcg gat aat cac cac gaa ggt ggt Lys Tyr Val Leu Val Ala Leu Lys Ala Asp Asn His His Glu Gly Gly 85 90 95 att ttt tct tta tat acc ctt gtt aga aaa atg aca cct tgg tta att Ile Phe Ser Leu Tyr Thr Leu Val Arg Lys Met Thr Pro Trp Leu Ile 100 105 110 gtt ccg gct gtt att gga ggt gca acc ttg ttg tea gat gga gct ttg Val Pro Ala Val Ile Gly Gly Ala Thr Leu Leu Ser Asp Gly Ala Leu 115 120 125 acg cca gct gta acc gta ctt cag ccg tta agg att aaa gta gtt cct Thr Pro Ala Val Thr Val Leu Gin Pro Leu Arg Ile Lys Val Val Pro 130 135 140 agt ttg cag cat att tcc aga ate aga gta tgt tat ttt gcg acc ttg Ser Leu Gin His Ile Ser Arg Ile Arg Val cys Tyr Phe Ala Thr Leu 145 150 155 160 tta ttt act gtt act ttt gcc ate caa ggt ttg gaa cgg gtg tta ttg Leu Phe Thr Val Thr Phe Ala Ile Gin Gly Leu Glu Arg Val Leu Leu 165 170 175 gaa tta ttg gcc att atg tta tat ggt ttg cct ttt ggt tta Glu Leu Leu Ala Ile Met Leu Tyr Gly Leu Pro Phe Gly Leu 180 185 190 ncggtctcct tatagttttg cccatccaga agttttcaag cattaatcca tactacggtt tgaaattgtt atttagtcca gagaatcata aaggtatttt tattttag gat cta ttt

Asp Leu Phe tcc tgg cga caa acg gga gca gaa gca cta tac tct gac tta ggt cat 735 19

ΕΡ 1 141 308 /PT

Ser Trp Arg Gin Thr Gly Ala Glu Ala Leu Tyr Ser Asp Leu Gly His 195 200 205 gtt ggg cgt gga aat ata cat gtt tca tgg ccg ttc gtt aag gtt gee 783 Vai Gly Arg Gly Asn Ile His Vai Ser Trp Pro Phe Vai Lys Vai Ala 210 215 220 225 att ata ctt tct tat tgt ggg caa ggg gca tgg att tta gct aat aag 831 Ile Ile Leu Ser Tyr Cys Gly Gin Gly Ala Trp ile Leu Ala Asn Lys 230 235 240 aac gca gga aat gaa ttg aat ccc ttt ttt gct agt att cct teg caa 879 Asn Ala Gly Asn Glu Leu Asn Pro Phe Phe Ala Ser Ile Pro Ser Gin 245 250 255 ttt aca atg cat gtc gtt att tta gct act ttg gca gct ate ate gct 927 Phe Thr Met His Vai Vai Ile Leu Ala Thr Leu Ala Ala Ile Ile Ala 260 265 270 tca cag gca ctg att tct ggatcaattt accttaagtt ctgagctatg 975 ser Gin Ala Leu ile ser 275 cgactaaaaa tattcccaea atttegttea acttatcctg ttgacaatat tgggtcaaac 1035 ctacatacct ggtattaatt ggttcttatt tgceattaca acctctattg gtttgctttt 1095 taagacttca gcgcacatgg aagcagcata tggatCagcg ataacaatta cgaCgctaaC 1155 gacaactatt ttactgtctt tctttttaat tcaaaaagga gtaaagagag gttttagcta 1215 tt 1217

<210> 10 <211> 190 <212> PRT <213> Streptococcus do Grupo B <400> 10

Tyr Tyr Leu Ile Gly Gly Leu Ala Glu Met Gin His Vai Asn His Ser 15 10 15

Ser Phe Asp Lys Ala Ser Lys Ala Gly Phe Ile Ile Ala Leu Gly Ile 20 25 30

Ser Leu

Vai Tyr Gly Asp Ile Gly Thr Ser Pro Leu Tyr Thr Met Gin 35 40 45 20

ΕΡ 1 141 308 /PT

Vai Glu Asn Gin Gly Gly Ile Ser Ser Vai Thr Glu Ser Phe Ile Leu 50 55 60

Gly Ser Ile Ser Leu Ile Ile Trp Thr Leu Thr Leu Ile Thr Thr Ile 65 70 75 80

Lys Tyr Vai Leu Vai Ala Leu Lys Ala Asp Asn His His Glu Gly Gly 85 90 95

Ile Phe Ser Leu Tyr Thr Leu Vai Arg Lys Met Thr Pro Trp Leu Ile 100 105 110

Vai Pro Ala Vai Ile Gly Gly Ala Thr Leu Leu Ser Asp Gly Ala Leu 115 120 125

Thr Pro Ala Vai Thr Vai Leu Gin Pro Leu Arg Ile Lys Vai Vai Pro 130 135 140

Ser Leu Gin His Ile Ser Arg Ile Arg Vai cys Tyr Phe Ala Thr Leu 145 150 155 160

Leu Phe Thr Vai Thr Phe Ala Ile Gin Gly Leu Glu Arg Vai Leu Leu 165 170 175

Glu Leu Leu Ala Ile Met Leu Tyr Gly Leu Pro Phe Gly Leu 180 185 190

<210> 11 <211> 89 <212> PRT <213> Streptococcus do Grupo B < 4 0 0 > 11

Asp Leu Phe Ser Trp Arg Gin Thr Gly Ala Glu Ala Leu Tyr Ser Asp 15 10 15

Leu Gly His Vai Gly Arg Gly Asn Ile His Vai Ser Trp Pro phe Vai 20 25 30

Lys Vai Ala Ile Ile Leu Ser Tyr Cys Gly Gin Gly Ala Trp Ile Leu 35 40 45

Ala Asn Lys Asn Ala Gly Asn Glu Leu Asn Pro Phe Phe Ala ser Ile 50 55 60

Pro Ser Gin Phe Thr Met His Vai Vai Ile Leu Ala Thr Leu Ala Ala 65 70 75 80

Ile Ile Ala Ser Gin Ala Leu Ile Ser 85 21

ΕΡ 1 141 308 /PT

<210> 12 <211> 378 <212> ADN <213> Streptococcus do Grupo Β < 2 2 0 > <221> CDS <222> (1)..(378) < 4 0 0 > 12 âtg cag gta ttt tta aat att gtc aat aaa ttc ttt gat cca gtt att 48 Met Gin Vai Phe Leu Asn Ile Vai Asn Lys Phe Phe Asp Pro Vai Ile 1 5 10 15 cat atg ggt teg gga gtt gtg atg cta att gtc atg aca ggt tta gee 96 Kis Met Gly Ser Gly Vai Vai Met Leu Ile Vai Met Thr Gly Leu Ala 20 25 30 atg ata ttt gga gtg aag ttt tet aaa gea ctt gaa ggt ggt att aag 144 Met Ile Phe Gly Vai Lys Phe Ser Lys Ala Leu Glu Gly Gly Ile Lys 35 40 45 tta gct att gct ctt acg ggt att ggt gct att att ggt att tta act 192 Leu Ala Ile Ala Leu Thr Gly Ile Gly Ala Ile Ile Gly Ile Leu Thr 50 55 60 ggt gct ttt tcc gaa tea ctt caa gct ttt gtt aaa aat aca gga ate 240 Gly Ala Phe Ser Glu Ser Leu Gin Ala Phe Vai Lys Asn Thr Gly Ile 65 70 75 80 aat cta age att att gac gtt ggt tgg gct cca tta gea act att aca 288 Asn Leu Ser Ile Ile Asp Vai Gly Trp Ala Pro Leu Ala Thr Ile Thr 85 90 95 tgg gga tea cca tat acg ctt tac ttc tta tta ate atg ctt att gtc 336 Trp Gly Ser Pro Tyr Thr Leu Tyr Phe Leu Leu Ile Met Leu lie Vai 100 105 110 aat att gtt atg att gtt atg aaa aaa aaa cgg ata cct tag 378 Asn Ile Vai Met Ile Vai Met Lys Lys Lys Arg Ile Pro 115 120 125

<210> 13 <211> 125 <212> PRT <213> Streptococcus do Grupo Β 22

ΕΡ 1 141 308 /PT < 4 0 0 > 13

Met Gin Vai Phe Leu Asn Ile Vai Asn Lys phe Phe Asp Pro Vai Ile 15 10 15

His Met Gly Ser Gly Vai Vai Met Leu Ile Vai Met Thr Gly Leu Ala 20 25 30

Met Ile Phe Gly Vai Lys Phe Ser Lys Ala Leu Glu Gly Gly Ile Lys 35 40 45

Leu Ala Ile Ala Leu Thr Gly Ile Gly Ala Ile Ile Gly Ile Leu Thr 50 55 60

Gly Ala Phe Ser Glu Ser Leu Gin Ala Phe Vai Lys Asn Thr Gly Ile 65 70 75 80

Asn Leu Ser Ile Ile Asp Vai Gly Trp Ala Pro Leu Ala Thr Ile Thr oc. on os

Trp Gly Ser Pro Tyr Thr Leu Tyr Phe Leu Leu Ile Met Leu Ile Vai 100 105 110

Asn Ile Vai Met Ile Vai Met Lys Lys Lys Arg Ile Pro 115 120 125 <210> 14 <211> 705 <212> ADN <213> Streptococcus do Grupo B < 2 2 0 > <221> CDS <222> (118) .. (705) < 4 0 0 > 14 ggatcgggcg caagcttaac gattcttttt aaaatcatta aattttaaaa caaatttcag 60 acatattgcc aaagttttga tattattact ataatatagt ttgtagagga gaataat 117

165 23 ΕΡ 1 141 308 /PT

atg ggc caa gaa cct ate ate gaa tat caa aat ate aat aaa gtg tat Met Gly Gin Glu Pro lie Zle Glu Tyr Gin Asn lie Asn Lys Vai Tyr 15 10 15 ggg gaa aat gtt gcg gtt gaa gat att aac ctt aaa att tac cct ggt Gly Glu Asn Vai Ala Vai Glu Asp Ile Asn Leu Lys Ile Tyr Pro Gly 20 25 30 gat ttc gtt tgt ttc ate ggt acg agt gga tea ggt aaa aca aca tta Asp Phe Vai Cys Phe Ile Gly Thr Ser Gly Ser Gly Lys Thr Thr Leu 35 40 45 atg cgt atg gtt aac cat atg tta aaa cca aca aat ggt act cta tta Met Arg Met Vai Asn His Met Leu Lys Pro Thr Asn Gly Thr Leu Leu 50 55 60 ttt aag gga aaa gat ate tet act att aac ccc att gaa tta aga ege Phe Lys Gly Lys Asp Ile Ser Thr He Asn Pro Ile Glu Leu Arg Arg 65 70 75 80 aga att gga tat gtt ate caa aac att ggt tta atg cct cat atg acc Arg Ile Gly Tyr Vai lie Gin Asn Ile Gly Leu Met Pro His Met Thr 85 90 95 att tac gaa aat ata gtt ctt gta cca aaa tta ttg aaa tgg tea gaa Ile Tyr Glu Asn ile Vai Leu Vai Pro Lys Leu Leu Lys Trp Ser Glu 100 105 110 gaa gct aaa aga gct aaa gea agg gaa ctt att aaa tta gtt gaa tta Glu Ala Lys Arg Ala Lys Ala Arg Glu Leu Ile Lys Leu Vai Glu Leu 115 120 125 ccc gaa gaa tat ttg gat ege tac cct agt gag ttg tet ggc ggt cag Pro Glu Glu Tyr Leu Asp Arg Tyr Pro Ser Glu Leu Ser Gly Gly Gin 130 135 140 caa caa cgt ate ggt gtc att ege gct ctt gea gea gac caa gat att Gin Gin Arg Ile Gly Vai Ile Arg Ala Leu Ala Ala Asp Gin Asp Ile 145 150 155 160 att tta atg gat gag cct ttt gga gct ctg gat cct att act aga gaa Ile Leu Met Asp Glu Pro Phe Gly Ala Leu Asp Pro Ile Thr Arg Glu 165 170 175 ggt att caa gac ttt agt caa gtc tet tea gga aga aat ggg gga aaa Gly Ile Gin Asp Phe Ser Gin vai Ser Ser Gly Arg Asn Gly Gly Lys 180 185 190 cta tea tet tag Leu Ser Ser 195<210> 15 <211> 195 <212> PRT<213> Streptococcus do Grupo B 213 261 309 357 405 453 501 549 597 645 693 705 24

ΕΡ 1 141 308 /PT <400> 15

Met Gly Gin Glu Pro Ile Ile Glu Tyr Gin Asn Ile Asn Lys Vai Tyr 15 io 15

Gly Glu Asn Vai Ala Vai Glu Asp Ile Asn Leu Lys Ile Tyr Pro Gly 20 25 30

Asp Phe Vai Cys Phe Ile Gly Thr Ser Gly Ser Gly Lys Thr Thr Leu 35 40 45

Met Arg Met Vai Asn His Met Leu Lys Pro Thr Asn Gly Thr Leu Leu 50 55 60

Phe Lys Gly Lys Asp Ile Ser Thr Ile Asn Pro Ile Glu Leu Arg Arg 65 70 75 80

Arg Ile Gly Tyr Vai Ile Gin Asn Ile Gly Leu Met Pro His Met Thr 85 90 95

Ile Tyr Glu Asn Ile Vai Leu Vai Pro Lys Leu Leu Lys Trp Ser Glu 100 105 110

Glu Ala Lys Arg Ala Lys Ala Arg Glu Leu Ile Lys Leu Vai Glu Leu

Pro Glu Glu Tyr Leu Asp Arg Tyr Pro Ser Glu Leu Ser Gly Gly Gin 130 135 140

Gin Gin Arg Ile Gly Vai Ile Arg Ala Leu Ala Ala Asp Gin Asp Ile 145 150 155 160

Ile Leu Met Asp Glu Pro Phe Gly Ala Leu Asp Pro Ile Thr Arg Glu 165 170 175

Gly Ile Gin Asp Phe Ser Gin Vai Ser Ser Gly Arg Asn Gly Gly Lys 180 185 190

Leu Ser Ser 195 <210> 16 <211> 367 <212> ADN <213> Streptococcus do Grupo B <220> <221> CDS <222> (1)..(366) 25 ΕΡ 1 141 308 /PT < 4 0 0 > 16 ate cct tat agt gat gtt ttt gct aca gga gga ttt tta tac tat gta 48 Ile Pro Tyr Ser Asp Vai Phe Ala Thr Gly Gly Phe Leu Tyr Tyr Vai 1 5 10 15 acg att gct cta agt tac ctt tta 999 tet agt ate tgg tta ttt att 96 Thr Ile Ala Leu Ser Tyr Leu Leu Gly Ser ser Ile Trp Leu Phe Ile 20 25 30 gta cag ttt att gct tac tat gta tet gga att tat ttt tat aaa tta 144 Vai Gin Phe Ile Ala Tyr Tyr Vai Ser Gly Ile Tyr Phe Tyr Lys Leu 35 40 45 gtt tat tat gtg gea caa agt gaa att gtc teg ata ggc atg acg ttg 192 Vai Tyr Tyr Vai Ala Gin Ser Glu Ile Vai Ser Ile Gly Met Thr Leu 50 55 60 att ttc tat ata atg aat att gtc tta gga ttc ggt ggt atg tac cca 240 Ile Phe Tyr Ile Met Asn Ile Vai Leu Gly Phe Gly Gly Met Tyr Pro 65 70 75 eo ata cag tgg gea tta cct ttt atg ctc att teg cta tgg ttt tta att 288 Ile Gin Trp Ala Leu Pro Phe Met Leu Ile Ser Leu Trp Phe Leu Ile 85 90 95 aaa ttt tgt gtc gat aat ate gtt gat gaa gea ttt ata ttt tat ggt 336 Lys Phe Cys Vai Asp Asn Ile Vai Asp Glu Ala Phe Ile Phe Tyr Gly 100 105 110 att tta gea gea ttc tea cta ttt ata gat c 367 Ile Leu Ala Ala Phe ser Leu Phe Ile Asp 115 120

<210> 17 <211> 122 < 212 > PRT

<213> Streptococcus do Grupo B 26

ΕΡ 1 141 308 /PT < 4 0 0 > 17

Ile Pro Tyr Ser Asp Vai Phe Ala 1 5

Thr Ile Ala Leu Ser Tyr Leu Leu 20

Vai Gin Phe Ile Ala Tyr Tyr Vai 35 40

Vai Tyr Tyr Vai Ala Gin Ser Glu 50 55

Ile Phe Tyr Ile Met Asn Ile Vai 65 70

Ile Gin Trp Ala Leu Pro Phe Met 85

Lys Phe Cys Vai Asp Asn Ile Vai 100

Ile Leu Ala Ala Phe Ser Leu Phe 115 120

Thr Gly Gly Phe Leu Tyr Tyr Vai 10 15

Gly Ser Ser Ile Trp Leu Phe Ile 25 30

Ser Gly Ile Tyr Phe Tyr Lys Leu 45

Ile Vai Ser Ile Gly Met Thr Leu 60

Leu Gly Phe Gly Gly Met Tyr Pro 75 80

Leu Ile Ser Leu Trp Phe Leu Ile 90 95

Asp Glu Ala phe ile Phe Tyr Gly 105 110

Ile Asp

<210> 18 <211> 570 <212> ADN

<213> Streptococcus do Grupo B < 2 2 0 > <221> CDS <222> (1)..(570) <400> 18 atg agg aaa cgt ttt tcc ttg cta aat ttt att gtt gtt act ttt att 48

Met Arg Lys Arg Phe Ser Leu Leu Asn Phe Ile Vai Vai Thr Phe Ile 15 10 15 ttc ttt ttc ttt att ctt ttt ccg ctt tta aac cat aag gga aaa gta 96

Phe Phe Phe Phe Ile Leu Phe Pro Leu Leu Asn His Lys Gly Lys Vai 25 30 20 27

ΕΡ 1 141 308 /PT gat gct aat tet agg cag agt gtt acc tac acc aaa gaa gaa ttt ata Asp Ala Asn Ser Arg Gin Ser Val Thr Tyr Thr Lys Glu Glu Phe Ile 35 40 45 caa aaa att gtg cca gat gcg caa gat cta gga aag teg tac ggt att Gin Lys Ile Vai Pro Asp Ala Gin Asp Leu Gly Lys Ser Tyr Gly Ile 50 55 60 cgt cct tea ttt att att gea cag gcg gct ttg gat tet gat ttc gga Arg Pro ser Phe Ile Ile Ala Gin Ala Ala Leu Asp Ser Asp Phe Gly 65 70 75 80 gag aaa tat age tat agt ate ata ate tgt tgg ttg ctt gea gaa cca Glu Lys Tyr Ser Tyr Ser Ile Ile Ile Cys Trp Leu Leu Ala Glu Pro 85 90 95 gga acg ccc tea att acc tta aat gat agt agt aca gga aaa aaa cag Gly Thr Pro Ser Ile Thr Leu Asn Asp Ser Ser Thr Gly Lys Lys Gin 100 105 110 gaa aag caa ttt act cat tat aaa tet tgg aag tat tea atg gat gat Glu Lys Gin Phe Thr His Tyr Lys Ser Trp Lys Tyr Ser Met Asp Asp 115 120 125 tac ctt gct cat ata aaa tet gga gcg aca ggc aaa aaa gat tea tat Tyr Leu Ala His Ile Lys Ser Gly Ala Thr Gly Lys Lys Asp Ser Tyr 130 135 140 act ata atg gtg tet gtt aaa aat cca aaa act tta gtg caa aaa tta Thr Ile Met Vai Ser val Lys Asn Pro Lys Thr Leu Val Gin Lys Leu 145 150 155 160 caa gat agt ggt ttt gat aat gac aaa aag tac gct aaa aaa atg acg Gin Asp Ser Gly Phe Asp Asn Asp Lys Lys Tyr Ala Lys Lys Met Thr 165 170 175 gaa ate att gat ttg tat gat tta aca aga tat gat aag tga Glu Ile Ile Asp Leu Tyr Asp Leu Thr Arg Tyr Asp Lys 180 185 190

<210> 19 <211> 189 < 212 > PRT

<213> Streptococcus do Grupo B 28

ΕΡ 1 141 308 /PT <400> 19

Met Arg Lys Arg Phe Ser Leu Leu Asn Phe Ile Vai Vai Thr Phe Ile 15 10 15

Phe Phe Phe Phe Ile Leu Phe Pro Leu Leu Asn His Lys Gly Lys Vai 20 25 30

Asp Ala Asn Ser Arg Gin Ser Vai Thr Tyr Thr Lys Glu Glu Phe Ile 35 40 45

Gin Lys Ile Vai Pro Asp Ala Gin Asp Leu Gly Lys Ser Tyr Gly Ile 50 55 60

Arg Pro Ser Phe Ile Ile Ala Gin Ala Ala Leu Asp Ser Asp Phe Gly 65 70 75 80

Glu Lys Tyr Ser Tyr Ser Ile Ile ile Cys Trp Leu Leu Ala Glu Pro 85 90 95

Gly Thr Pro Ser Ile Thr Leu Asn Asp Ser Ser Thr Gly Lys Lys Gin 100 105 110

Glu Lys Gin Phe Thr His Tyr Lys Ser Trp Lys Tyr Ser Met Asp Asp 115 120 125

Tyr Leu Ala His Ile Lys Ser Gly Ala Thr Gly Lys Lys Asp Ser Tyr 130 135 140

Thr Ile Met Vai Ser Vai Lys Asn Pro Lys Thr Leu Vai Gin Lys Leu 145 150 155 160

Gin Asp Ser Gly Phe Asp Asn Asp Lys Lys Tyr Ala Lys Lys Met Thr 165 170 175

Glu Ile Ile Asp Leu Tyr Asp Leu Thr Arg Tyr Asp Lys 180 185 <210> 20 <211> 978 < 212 > ADN <213> Streptococcus do Grupo B < 2 2 0 > <221> CDS < 2 2 2 > (1)..(978) 29

ΕΡ 1 141 308 /PT <400> 20 atg ctt gtc ate att ttg ate att gta cta gct agt ctg aca gtg acg 48 Met Leu Vai Ile Ile Leu Ile Ile Vai Leu Ala Ser Leu Thr Vai Thr 1 5 10 15 ata att tct tac cca aaa atg acg gaa tta aca aag tcc gtt gaa aaa 96 Ile Ile Ser Tyr Pro Lys Met Thr Glu Leu Thr Lys Ser Vai Glu Lys 20 25 30 caa ctt gaa gat aat gct gat aat cta tca gac caa ctg aca tat cag 144 Gin Leu Glu Asp Asn Ala Asp Asn Leu Ser Asp Gin Leu Thr Tyr Gin 35 40 45 ata gaa gtg gcg caa aaa gat caa ate tac gtg act aat cag cta aac 192 Ile Glu Vai Ala Gin Lys Asp Gin Ile Tyr Vai Thr Asn Gin Leu Asn 50 55 60 cgt atg caa cag gaa att ate agt cgc tta ccg ata tgc gta cag aat 240 Arg Met Gin Gin Glu Ile Ile Ser Arg Leu Pro Ile Cys Vai Gin Asn 65 70 75 80 aaa tca gca tta acg gag agt cga gat cga tca gac aaa cgc ttg gaa 288 Lys Ser Ala Leu Thr Glu Ser Arg Asp Arg Ser Asp Lys Arg Leu Glu 85 90 95 ttg att aac tcc aat tta tct cag tca gtt cag aaa atg caa gat tca 336 Leu Ile Asn Ser Asn Leu Ser Gin Ser Vai Gin Lys Met Gin Asp Ser 100 105 110 atg aaa aac gct tgg ate aaa tgc gee aaa ctg ttg agg aaa age tgg 384 Met Lys Asn Ala Trp Ile Lys Cys Ala Lys Leu Leu Arg Lys Ser Trp 115 120 125 aaa aaa cgc tac aaa cgc gtt gca aac ttc ttt gaa act gta teg cgt 432 Lys Lys Arg Tyr Lys Arg Vai Ala Asn Phe Phe Glu Thr Vai Ser Arg 130 135 140 caa cta gag age gtc aat caa ggt ctg ggt aga tgg aaa ctg tgc caa 480 Gin Leu Glu Ser Vai Asn Gin Gly Leu Gly Arg Trp Lys Leu Cys Gin 145 150 155 160 gat gtt ggt acc act gaa caa agt ctg tca aat act aag aca agg gga 528 Asp Vai Gly Thr Thr Glu Gin Ser Leu Ser Asn Thr Lys Thr Arg Gly 165 170 175 ata tta ggg gag tta caa ctc ggt caa att ata gaa gat att atg aca 576 Ile Leu Gly Glu Leu Gin Leu Gly Gin Ile Ile Glu Asp Ile Met Thr 180 185 190 30

ΕΡ 1 141 308 /PT gtt agt caa tat gag aga gaa ttt cct acg gtg tct ggc tct tct gag 624 Vai Ser Gin Tyr Glu Arg Glu Phe Pro Thr Val Ser Gly Ser Ser Glu 195 200 205 cgt gtt gaa tat gct att aaa tac ctg gaa atg gtc agg gag att ata 672 Arg Vai Glu Tyr Ala Ile Lys Tyr Leu Glu Met Val Arg Glu Ile Ile 210 215 220 tct att tgc cta ttg act cta agt ttc tct aga aga tta tta ccg att 720 Ser Ile Cys Leu Leu Thr Leu Ser Phe Ser Arg Arg Leu Leu Pro Ile 225 230 235 240 ggg aga tgc tta tgg aat tgg gtg acc agg ttc aaa tgg aac tct att 768 Gly Arg Cys Leu Trp Asn Trp Vai Thr Arg Phe Lys Trp Asn Ser Ile 245 250 255 cgt aat ctt tac tgg gca agt att cgt aaa ttt gca aaa gat ata aac 816 Arg Asn Leu Tyr Trp Ala Ser Ile Arg Lys Phe Ala Lys Asp Ile Asn 260 2 65 270 aat aag tac tta aat cct cct gaa acg aca aat ttt ggt ate atg ttc 864 Asn Lys Tyr Leu Asn Pro Pro Glu Thr Thr Asn Phe Gly Ile Met Phe 275 280 285 tta cca act gaa ggg ctc tat tct gaa gtg gta aga aat gca aca ttc 912 Leu pro Thr Glu Gly Leu Tyr Ser Glu Vai Val Arg Asn Ala Thr Phe 290 295 300 ttt gat agt cta aga cgt gac gaa aat att gta gta gct gga ccg tea 960 Phe Asp Ser Leu Arg Arg Asp Glu Asn Ile Val Val Ala Gly Pro Ser 305 310 315 320 acc tta tct gct tac taa 978 Thr Leu Ser Ala Tyr 325 <210> 21 <211> 325

< 212 > PRT

<213> Streptococcus do Grupo B < 4 0 0 > 21

Met Leu Vai Ile Ile Leu Ile Ile Vai Leu Ala Ser Leu Thr Vai Thr 15 10 15

Ile Ile Ser Tyr Pro Lys Met Thr Glu Leu Thr Lys Ser Vai Glu Lys 20 25 30 31

ΕΡ 1 141 308 /PT

Gin Leu Glu Asp Asn Ala Asp Asn 35 40

Ile Glu Vai Ala Gin Lys Asp Gin 50 55

Arg Met Gin Gin Glu Ile Ile Ser 65 70

Lys Ser Ala Leu Thr Glu Ser Arg 85

Leu Ile Asn Ser Asn Leu Ser Gin 100

Leu Ser Asp Gin Leu Thr Tyr Gin 45

Ile Tyr Vai Thr Asn Gin Leu Asn 60

Arg Leu Pro Ile Cys Vai Gin Asn 75 80

Asp Arg Ser Asp Lys Arg Leu Glu 90 95

Ser Vai Gin Lys Met Gin Asp Ser 105 110

Met Lys Asn Ala Trp Ile Lys Cys 115 120

Lys Lys Arg Tyr Lys Arg Vai Ala 130 135

Gin Leu Glu Ser Vai Asn Gin Gly 145 150

Asp val Gly Thr Thr Glu Gin Ser 165

Ile Leu Gly Glu Leu Gin Leu Gly 180

Ala Lys Leu Leu Arg Lys Ser Trp 125

Asn Phe Phe Glu Thr Val Ser Arg 140

Leu Gly Arg Trp Lys Leu Cys Gin 155 160

Leu Ser Asn Thr Lys Thr Arg Gly 170 175

Gin Ile Ile Glu Asp Ile Met Thr 185 190

Val Ser Gin Tyr Glu Arg Glu Phe Pro Thr Val Ser Gly Ser Ser Glu 195 200 205

Arg Val Glu Tyr Ala Ile Lys Tyr Leu Glu Met Val Arg Glu Ile Ile 210 215 220

Ser Ile Cys Leu Leu Thr Leu Ser Phe Ser Arg Arg Leu Leu Pro lie 225 230 235 240

Gly Arg Cys Leu Trp Asn Trp Val Thr Arg Phe Lys Trp Asn Ser Ile 245 250 255

Arg Asn Leu Tyr Trp Ala Ser Ile Arg Lys Phe Ala Lys Asp Ile Asn 260 265 270

Asn Lys Tyr Leu Asn Pro Pro Glu Thr Thr Asn Phe Gly Ile Met Phe 275 280 285 32

ΕΡ 1 141 308 /PT

Leu Pro Thr Glu Gly Leu Tyr Ser Glu Vai Vai Arg Asn Ala Thr Phe 290 295 300

Phe Asp Ser Leu Arg Arg Asp Glu Asn Ile Vai Vai Ala Gly Pro Ser 305 310 315 320

Thr Leu Ser Ala Tyr 325

<210> 22 <211> 579 <212> ADN

<213> Streptococcus do Grupo B <220> <221> CDS <222> (1)..(579) <400> 22 atg cga aaa gaa gtg aca cca gag atg ctt aac tat aat aag tat cct 48 Met Arg Lys Glu Vai Thr Pro Glu Met Leu Asn Tyr Asn Lys Tyr Pro 1 5 10 15 ggc cca cag ttt att cac ttt gaa aat ate gtt aaa agt gat gat att 96 Gly Pro Gin Phe Ile His Phe Glu Asn Ile Vai Lys Ser Asp Asp Ile 20 25 30 gaa ttt caa ctt gtt att aat gaa aaa tea gct ttt gat gtg act gtc 144 Glu Phe Gin Leu Vai Ile Asn Glu Lys Ser Ala Phe Asp Vai Thr Vai 35 40 45 ttt gga caa cgt ttt tet gag att tta tta aaa tat gat ttt ate gtt 192 Phe Gly Gin Arg Phe Ser Glu Ile Leu Leu Lys Tyr Asp Phe Ile Val 50 55 60 ggc gat tgg ggt aac gag cag ttg agg cta aga ggc ttt tac aaa gat 240

Gly Asp Trp Gly Asn Glu Gin Leu Arg Leu Arg Gly Phe Tyr Lys Asp 65 70 75 80 gct agt acg att aga aaa aat age cgg att tea cgt tta gaa gat tat 288

Ala Ser Thr Ile Arg Lys Asn Ser Arg Ile Ser Arg Leu Glu Asp Tyr 85 90 95 att aaa gag tat tgt aac ttt ggt tgt gct tat ttt gtg ttg gag aat

Ile Lys Glu Tyr Cys Asn Phe Gly Cys Ala Tyr Phe Vai Leu Glu Asn 336 384 33

ΕΡ 1 141 308 /PT 100 105 110 cca aat cct aga gat att aaa ttt gat gat gaa aga cct cat aag cgt Pro Asn Pro Arg Asp Ile Lys Phe Asp Asp Glu Arg Pro His Lys Arg 115 120 125 cgt aag tca aga tcc aaa tca caa tca tca aag tca caa act aga aat Arg Lys Ser Arg Ser Lys Ser Gin Ser Ser Lys Ser Gin Thr Arg Asn 130 135 140 aat cgt tcc cag tca aat gcc aat gct cat ttt aca agt aaa aag cgt Asn Arg Ser Gin Ser Asn Ala Asn Ala His Phe Thr Ser Lys Lys Arg 145 150 155 160 aaa gac aca aaa cgc cgt caa gaa cgt cat att aaa gaa gag caa gat Lys Asp Thr Lys Arg Arg Gin Glu Arg His Ile Lys Glu Glu Gin Asp 165 170 175 aag gaa atg acc tct gca aag cag cat ttg tta ttc gta aga aaa aat Lys Glu Met Thr Ser Ala Lys Gin His Leu Leu Phe Vai Arg Lys Asn 432 480 528 576 180 185 190 579 taa

<210> 23 <211> 192 <212> PRT <213> Streptococcus do Grupo B <400> 23

Met Arg Lys Glu Vai Thr Pto Glu Met Leu Asn Tyr Asn Lys Tyr Pro 15 10 15

Gly Pro Gin Phe Ile His Phe Glu Asn Ile Vai Lys Ser Asp Asp Ile 20 25 30

Glu Phe Gin Leu Vai Ile Asn Glu Lys Ser Ala Phe Asp Vai Thr Vai 35 40 45

Phe Gly Gin Arg Phe Ser Glu Ile Leu Leu Lys Tyr Asp Phe Ile Vai 50 55 60

Gly Asp Trp Gly Asn Glu Gin Leu Arg Leu Arg Gly Phe Tyr Lys Asp 65 70 75 80

Ala ser Thr Ile Arg Lys Asn Ser Arg Ile Ser Arg Leu Glu Asp Tyr 34

ΕΡ 1 141 308 /PT 85 90 95

Ile Lys Glu Tyr cys Asn Phe Gly Cys Ala Tyr Phe Vai Leu Glu Asn 100 105 110

Pro Asn Pro Arg Asp Ile Lys Phe Asp Asp Glu Arg Pro His Lys Atg 115 120 125

Arg Lys Ser Arg Ser Lys Ser Gin Ser Ser Lys ser Gin Thr Arg Asn 130 135 140

Asn Arg Ser Gin Ser Asn Ala Asn Ala His Phe Thr Ser Lys Lys Arg 145 150 155 160

Lys Asp Thr Lys Arg Arg Gin Glu Arg His Ile Lys Glu Glu Gin Asp 165 170 175

Lys Glu Met Thr Ser Ala Lys Gin His Leu Leu Phe Vai Arg Lys Asn 180 185 190 <210> 24 <211> 609 <212> ADN <213> Streptococcus do Grupo B <220> <221> CDS <222> (1) . . (609) < 4 0 0 > 24 atg a ca ata aaa aaa gtg tta agt gta aca gga att att tta gtg aca 48 Met Thr Ile Lys Lys Val Leu Ser Val Thr Gly Ile Ile Leu Val Thr 1 5 10 15 gta gcg tct cta gct gct tgt age tea aaa tct cat act act aag acg 96 Vai Ala Ser Leu Ala Ala Cys ser Ser Lys Ser HiS Thr Thr Lys Thr 20 25 30 ggc aaa aaa gaa gtt aat ttt gea act gtt gga aca acg gea cct ttt 144 Gly Lys Lys Glu Vai Asn Phe Ala Thr Val Gly Thr Thr Ala Pro Phe 35 40 45 tct tat gtg aag gat ggg aaa ctg act ggc ttt gat att gaa gta gee 192 Ser Tyr Vai Lys Asp Gly Lys Leu Thr Gly Phe Asp Ile Glu Val Ala 50 55 eo 35

ΕΡ 1 141 308 /PT aaa gct gtt ttt aaa ggt tca gat aac tat aaa gtc act ttt aas aaa 240 Lys Ala Vai Phe Lys Gly Ser Asp Asn Tyr Lys Vai Thr Phe Lys Lys 65 70 75 80 a ca gaa tgg tca tcg gta ttt acc ggc att gat tca gga aag ttt caa 288 Thr Glu Trp Ser Ser vai Phe Thr Gly Ile Asp Ser Gly Lys Phe Gin 85 90 95 atg ggt gga aat aat att tet tat tca tca gag aga tet caa aaa tay 336 Met Gly Gly Asn Asn Ile Ser Tyr Ser Ser Glu Arg Ser Gin Lys Tyr 100 105 110 tta ttt tca tac cca ata ggc tet act cct tca gtt tta gea gtt cct 384 Leu Phe Ser Tyr Pro Ile Gly Ser Thr Pro Ser Val Leu Ala Val Pro 115 120 125 aag aat agt aat ate aaa gct tat aat gat att agt ggt cat aaa aca 432 Lys Asn Ser Asn Ile Lys Ala Tyr Asn Asp Ile Ser Gly His Lys Thr 130 135 140 cag gtt gtc caa gga acg aca act gee aag caa tta gaa aat ttc aat 480 Gin Vai Vai Gin Gly Thr Thr Thr Ala Lys Gin Leu Glu Asn Phe Asn 145 150 155 160 aaa gag cat cag aaa aat cct gtt act cta aaa tat act aat gaa aat 528 Lys Glu His Gin Lys Asn Pro Vai Thr Leu Lys Tyr Thr Asn Glu Asn 165 170 175 att aca cag att cta acg aat ttg agt gat gga aaa gct gat ttt aaa 576 lie Thr Gin Ile Leu Thr Asn Leu Ser Asp Gly Lys Ala Asp Phe Lys 180 185 190 ctt ttg acg gac caa ctg tta acg cta tta taa 609 Leu Leu Thr Asp Gin Leu Leu Thr Leu Leu 195 200

<210> 25 <211> 202 < 212 > PRT <213> Streptococcus do Grupo B <400> 25

Met Thr Ile Lys Lys Vai Leu Ser Vai Thr Gly Ile Ile Leu Vai Thr 15 10 15

Vai Ala Ser Leu Ala Ala cys Ser Ser Lys Ser His Thr Thr Lys Thr 20 25 30 36

ΕΡ 1 141 308 /PT

Gly Lys Lys Glu Vai Asn Phe Ala Thr Vai Gly Thr Thr Ala Pro phe 35 40 45 ser Tyr Vai Lys Asp Gly Lys Leu Thr Gly Phe Asp Ile Glu Vai Ala 50 55 60

Lys Ala Vai Phe Lys Gly Ser Asp Asn Tyr Lys Vai Thr Phe Lys Lys 65 70 75 80

Thr Glu Trp Ser Ser Vai Phe Thr 85

Met Gly Gly Asn Asn lie Ser Tyr 100

Leu Phe Ser Tyr Pro Ile Gly Ser 115 120

Lys Asn Ser Asn Ile Lys Ala Tyr 130 135

Gin Vai Vai Gin Gly Thr Thr Thr 145 150

Gly Ile Asp Ser Gly Lys Phe Gin 90 95

Ser Ser Glu Arg Ser Gin Lys Tyr 105 110

Thr Pro Ser Vai Leu Ala Vai Pro 125

Asn Asp Ile Ser Gly His Lys Thr 140

Ala Lys Gin Leu Glu Asn Phe Asn 155 160

Lys Glu His Gin Lys Asn Pro Vai Thr Leu Lys Tyr Thr Asn Glu Asn 165 170 175 lie Thr Gin Ile Leu Thr Asn Leu Ser Asp Gly Lys Ala Asp Phe Lys 180 185 190

Leu Leu Thr Asp Gin Leu Leu Thr Leu Leu 195 200 <210> 26 <211> 357 <212> ADN <213> Streptococcus do Grupo B < 2 2 0 > <221> CDS <222> (1) . . (357) < 4 0 0 > 26

atg aag aat ata aca aag cta tca act gtt gct tta age cta cta ctt 4B

Met Lys Asn Ile Thr Lys Leu Ser Thr Vai Ala Leu Ser Leu Leu Leu 37

ΕΡ 1 141 308 /PT 1 5 tgt acg gcg tgt gct gea tea aac acg Cys Thr Ala Cys Ala Ala Ser Asn Thr 20 25 cat cat cct aaa caa act aaa ctc aca His His Pro Lys Gin Thr Lys Leu Thr 35 40 aaa aac aaa gaa gct gct gat caa gag Lys Asn Lys Glu Ala Ala Asp Gin Glu 50 55 gat ttg aca aaa tat aag gea aaa ccg Asp Leu Thr Lys Tyr Lys Ala Lys Pro 65 70 ate gat gtt ggt gat ggc aag aaa atg Ile Asp Vai Gly Asp Gly Lys Lys Met 85 gga aaa att cca att gtt ttt att cct Gly Lys Ile Pro Ile Vai Phe Ile Pro 100 105 gct atg ctt ata aga att taa Ala Met Leu Ile Arg Ile 115 10 15 tet aca tet aaa aca cag tet 96 Ser Thr Ser Lys Thr Gin Ser 30 gat aag caa aaa gaa gaa ccc 144 Asp Lys Gin Lys Glu Glu Pro 45 atg cat ccc caa ggc gct gtt 192 Met His Pro Gin Gly Ala Vai 60 gtc aaa gat tat gga aaa aaa 240 vai Lys Asp Tyr Gly Lys Lys 75 80 aac att tat gaa act ggt cag 288 Asn Ile Tyr Glu Thr Gly Gin 90 9b ggt caa gct gag att ege cac 336 Gly Gin Ala Glu Ile Arg His 110 357

<210> 27 <211> 118 <212> PRT <213> Streptococcus do Grupo Β <400> 27

Met Lys Asn Ile Thr Lys Leu Ser Thr Vai Ala Leu Ser Leu Leu Leu 15 10 15

Cys Thr Ala Cys Ala Ala Ser Asn Thr Ser Thr Ser Lys Thr Gin Ser 20 25 30

Glu Glu Pro

Gly Ala Vai

His His Pro Lys Gin Thr Lys Leu Thr Asp Lys Gin Lys 35 40 45

Lys Asn Lys Glu Ala Ala Asp Gin Glu Met His Pro Gin 50 55 60 55 38

ΕΡ 1 141 308 /PT

Asp Leu Thr Lys Tyr Lys Ala Lys Pro Vai Lys Asp Tyr Gly Lys Lys 65 70 75 80 Ile Asp Vai Gly Asp Gly Lys Lys Met Asn Ile Tyr Glu Thr Gly Gin 85 90 95 >1 U> Lys Ile Pro Ile Vai Phe Ile Pro Gly Gin Ala Glu Ile Arg His 100 105 110 Ala Met Leu Ile Arg Ile 115 <210> 28 <211> 1191 <212> ADN <213> Streptococcus do Grupo B <22 0> <221> CDS <222> (1) . . . (1191) 1 <400> 28 gtg aat gaa teg acc ate aga aaa gaa ttt aaa ata gtt gtt ttt aaa 48 Vai Asn Glu Ser Thr Ile Arg Lys Glu Phe Lys Ile Vai Vai Phe Lys 1 5 10 15 tgg ate tta aat aat caa gea gtt att gct ctc atg att acc ttt ttg 96 Trp Ile Leu Asn Asn Gin Ala Vai Ile Ala Leu Met Ile Thr Phe Leu 20 25 30 gta ttt tta acg att ttt att ttt acc aaa ate tet ttt atg ttt aaa 144 Vai Phe Leu Thr Ile Phe Ile Phe Thr Lys Ile Ser Phe Met Phe Lys 35 40 45 cct gtg ttt gat ttt ctt gct gtg ctg ata ttg ccg ctt gta att tet 192 Pro Vai Phe Asp Phe Leu Ala Vai Leu Ile Leu Pro Leu Vai Ile Ser 50 55 60 ggc ttg ctt tat tac cta tta aaa cct atg gtt aca ttt tta gag aag 240 Gly Leu Leu Tyr Tyr Leu Leu Lys Pro Met vai Thr Phe Leu Glu Lys 65 70 75 80 cgg gga att aag cgt gta aca gcg ata tta tea gtt ttt act att ata 28B Arg Gly Ile Lys Arg Vai Thr Ala Ile Leu Ser Vai Phe Thr Ile Ile 85 90 95 39

ΕΡ 1 141 308 /PT ate ctt ctg tta att tgg gea atg tet agt ttt att ccc atg atg agt 336 Ile Leu Leu Leu Ile Trp Ala Met Ser Ser Phe Ile Pro Met Met Ser 100 105 110 aat caa tta ege cat ttt atg gaa gat ctc cct tea tat gtg aat aaa 384 Asn Gin Leu Arg His Phe Met Glu Asp Leu Pro Ser Tyr Val Asn Lys 115 120 125 gtg caa atg gaa aca agt teg ttt ata gat cac aac cct tgg tta aaa 432 Vai Gin Met Glu Thr Ser Ser Phe Ile Asp His Asn Pro Trp Leu Lys 130 135 140 tet tat aaa ggg gaa ata teg age atg tta tet aat ate agt age caa 480 Ser Tyr Lys Gly Glu Ile Ser Ser Met Leu Ser Asn Ile Ser Ser Gin 145 150 155 160 gcg gtc tet tat gct gaa aaa ttt tea aag aat gtt tta gat tgg gea 528 Ala Vai Ser Tyr Ala Glu Lys Phe Ser Lys Asn Val Leu Asp Trp Ala 165 170 175 gga aat tta gct agt aca gtt gea cgt gtg aca gta gea aca ate atg 576 Gly Asn Leu Ala Ser Thr val Ala Arg val Thr Val Ala Thr Ile Met 180 185 190 gct ccc ttt att ttg ttt tat ctt tta aga gat agt ege aac atg aag 624 Ala Pro Phe Ile Leu Phe Tyr Leu Leu Arg Asp Ser Arg Asn Met Lys 195 200 205 aat ggt ttc tta atg gtt tta cca acc aaa cta ege caa cca gct gat 672 Asn Gly Phe Leu Met Val Leu Pro Thr Lys Leu Arg Gin Pro Ala Asp 210 215 220 cgt att ttg cga gaa atg aat agt caa atg tea gga tat gtg caa gga 720 Arg Ile Leu Arg Glu Met Asn Ser Gin Met Ser Gly Tyr Val Gin Gly 225 230 235 240 caa ate att gtt gct att act gtt ggt gtt att ttt tea ata atg tat 768 Gin Ile Ile Vai Ala Ile Thr Val Gly Val Ile Phe Ser Ile Met Tyr 245 250 255 agt att ata ggc ctt aga tat ggc gtg aca tta ggg att att gee ggt 816 Ser Ile Ile Gly Leu Arg Tyr Gly Val Thr Leu Gly Ile Ile Ala Gly 260 265 270 gtg tta aat atg gtt ccc tat ttg gga agt ttt gtc gee caa att cca 864 Vai Leu Asn Met Val Pro Tyr Leu Gly Ser Phe Val Ala Gin Ile Pro 275 280 285 40

ΕΡ 1 141 308 /PT gtg ttt ate tta gcg ctt gtc gea gga cct gtt atg gtt gtt aaa gtt 912 vai Phe Ile Leu Ala Leu vai Ala Gly Pro Vai Met Val Val Lys Val 290 295 300 gcg att gtt ttt gtt att gag caa act cta gag gga ege ttt gtc tea 960 Ala Ile Vai Phe Vai Ile Glu Gin Thr Leu Glu Gly Arg Phe Val Ser 305 310 315 320 cct ttg gtt tta ggt aat aaa ctt age att cat cea att aca att atg 1008 Pro Leu Vai Leu Gly Asn Lys Leu Ser Ile His Pro Ile Thr Ile Met 325 330 335 ttt att tta tta acc tet gga gcg atg ttt ggt gtt tgg gga gta ttc 1056 Phe Ile Leu Leu Thr Ser Gly Ala Met Phe Gly Vai Trp Gly Val Phe 340 345 350 ctc agt att ccg att tat gea tet ate aaa gtt gtt gtt aaa gaa ttg 1104 Leu Ser Ile Pro Ile Tyr Ala Ser Ile Lys Vai Vai Val Lys Glu Leu 355 360 365 ttt gat tgg tac aaa gct gtc agt ggg cta tat aca ata gat gtt gtt 1152 Phe Asp Trp Tyr Lys Ala Vai Ser Gly Leu Tyr Thr Ile Asp Val Val 370 375 380 act gaa gaa aga agt gaa gaa gtt aaa aat gtt gaa tag 1191 Thr Glu Glu Arg Ser Glu Glu Vai Lys Asn Vai Glu 385 390 395

<210> 29 <211> 396 <212> PRT <213> Streptococcus do Grupo Β <400> 29

Val Asn Glu Ser Thr Ile Arg Lys Glu Phe Lys Ile Val Val Phe Lys 1 5 10 15 Trp Ile Leu Asn Asn Gin Ala Val Ile Ala Leu Met Ile Thr Phe Leu 20 25 30 Val Phe Leu Thr Ile Phe Ue Phe Thr Lys Ile Ser Phe Met Phe Lys 35 40 45 Pro Val Phe Asp Phe Leu Ala Val Leu Ile Leu Pro Leu Val Ile Ser 50 55 60 41

ΕΡ 1 141 308 /PT

Gly Leu Leu Tyr Tyr Leu Leu Lys Pro Met Vai Thr Phe Leu Glu Lys 65 70 75 00

Arg Gly lie Lys Arg Vai Thr Ala Ile Leu Ser Vai Phe Thr Ile Ile 85 90 95

Ile Leu Leu Leu Ile Trp Ala Met Ser Ser Phe Ile Pro Met Met Ser 100 105 110

Asn Gin Leu Arg His Phe Met Glu Asp Leu Pro Ser Tyr Vai Asn Lys 115 120 125

Vai Gin Met Glu Thr Ser Ser Phe Ile Asp His Asn Pro Trp Leu Lys 130 135 140

Ser Tyr Lys Gly Glu Ile Ser Ser Met Leu Ser Asn Ile Ser Ser Gin 145 150 155 160

Ala Vai Ser Tyr Ala Glu Lys Phe Ser Lys Asn Vai Leu Asp Trp Ala 165 170 175

Gly Asn Leu Ala Ser Thr Vai Ala Arg Vai Thr Vai Ala Thr Ile Met 180 185 190

Ala Pro Phe Ile Leu Phe Tyr Leu Leu Arg Asp Ser Arg Asn Met Lys 195 200 205

Asn Gly Phe Leu Met Vai Leu Pro Thr Lys Leu Arg Gin Pro Ala Asp 210 215 220

Arg Ile Leu Arg Glu Met Asn Ser Gin Met Ser Gly Tyr Vai Gin Gly 225 230 235 240

Gin Ile Ile vai Ala Ile Thr Vai Gly Vai Ile Phe Ser Ile Met Tyr 245 250 255

Ser Ile Ile Gly Leu Arg Tyr Gly Vai Thr Leu Gly Ile Ile Ala Gly 260 265 270

Vai Leu Asn Met Vai Pro Tyr Leu Gly Ser Phe Vai Ala Gin Ile Pro 275 280 285

Vai Phe Ile Leu Ala Leu Vai Ala Gly Pro Vai Met Vai Vai Lys Vai 290 295 300

Ala Ile Vai Phe Vai Ile Glu Gin Thr Leu Glu Gly Arg Phe Vai Ser 305 310 315 320 42

ΕΡ 1 141 308 /PT

Pro Leu Vai Leu Gly flsn Lys Leu Ser Ile His Pro Ile Thr Ile Met 325 330 335

Phe Ile Leu Leu Thr Ser Gly Ala Met Phe Gly Vai Trp Gly Vai Phe 340 345 350

Leu Ser Ile Pro Ile Tyr Ala Ser Ile Lys Vai Vai Vai Lys Glu Leu 355 360 365

Phe Asp Trp Tyr Lys Ala Vai Ser Gly Leu Tyr Thr Ile Asp Vai Vai 370 375 380

Thr Glu Glu Arg Ser Glu Glu Vai Lys Asn Vai Glu 385 390 395

<210> 30 <211> 1230 <212> ADN

<213> Streptococcus do Grupo B < 2 2 0 > <221> CDS <222> (1) . . (1230) <400> 30 atg ttt atg gga ate cea caa tat ttc ttc tac ctt ate tta gct gtc 48 Met Phe Met Gly Ile Pro Gin Tyr Phe Phe Tyr Leu Ile Leu Ala Val 1 5 10 15 cta cca att tac ate ggc tta ttc ttt aag aag cgt ttt gee tta tat 96 Leu Pro Ile Tyr Ile Gly Leu Phe Phe Lys Lys Arg Phe Ala Leu Tyr 20 25 30 gag att att ttt agt cta agt ttt att gta atg atg ttg act ggt agt 144 Glu Ile Ile Phe Ser Leu Ser Phe Ile Val Met Met Leu Thr Gly Ser 35 40 45 act ttt aat caa ttg aag tea cta ttg gea tac gtt gtc gga cag tct 192 Thr Phe Asn Gin Leu Lys Ser Leu Leu Ala Tyr Val Val Gly Gin Ser 50 55 υυ ctg cta gtt ttt ate tat aaa gct tac cgg aaa cga ttt aat cat act 240 Leu Leu Vai Phe Ile Tyr Lys Ala Tyr Arg Lys Arg Phe Asn His Thr 65 70 75 80 ttg gtc ttt tat gta acg gtt tgt tta tct att ttt ccg cta ttt ttg 288 336 43

ΕΡ 1 141 308 /PT

Leu Vai Phe Tyr Val Thr Val Cys Leu Ser Ile Phe Pro Leu Phe Leu 85 90 95 gta aaa tta att cca gct ata tct gag gat ggg cat cag tea ctt ttt Vai Lys Leu Ile Pro Ala Ile Ser Glu Asp Gly His Gin Ser Leu Phe 100 105 110 ggg ttt cta gga att tct tac ctt act ttt aga gct gtt gct atg att Gly Phe Leu Gly Ile Ser Tyr Leu Thr Phe Arg Ala Val Ala Met Ile 115 120 125 att gaa atg aga gac ggt gtc ttg aaa gaa ttt act tta tgg gaa ttc Ile Glu Met Arg Asp Gly Val Leu Lys Glu Phe Thr Leu Trp Glu Phe 130 135 140 tta aga ttt tta ctc ttc ttt cca act ttc tea agt gga cca att gat Leu Arg Phe Leu Leu Phe Phe Pro Thr Phe Ser Ser Gly Pro Ile Asp 145 150 155 160 cgt ttt aaa cga ttc aat gag gat tac att aat ate cca gat cga aac Arg Phe Lys Arg Phe Asn Glu Asp Tyr Ile Asn Ile Pro Asp Arg Asn 165 170 175 gaa ctc cta gat atg tta ggt caa gcg att cat tat ttg atg tta ggt Glu Leu Leu Asp Met Leu Gly Gin Ala Ile His Tyr Leu Met Leu Gly ISO 185 190 ttt ctc tat aag ttt att tta gcc tat att ttt gga agt ctg att atg Phe Leu Tyr Lys Phe Ile Leu Ala Tyr Ile Phe Gly Ser Leu Ile Met 195 200 205 cct cct cta aaa gaa tta gcg cta gaa cag ggt ggt gtg ttt aat tgg Pro Pro Leu Lys Glu Leu Ala Leu Glu Gin Gly Gly Val Phe Asn Trp 210 215 220 cca aca ctt ggg gtt atg tat gcc ttt ggt ttt gat ttg ttc ttt gat Pro Thr Leu Gly Val Met Tyr Ala Phe Gly Phe Asp Leu Phe Phe Asp 225 230 235 240 ttt gca ggt tac aca atg ttt gcg ttg gct att tct aac cta atg ggg Phe Ala Gly Tyr Thr Met Phe Ala Leu Ala Ile Ser Asn Leu Met Gly 245 250 255 att aag tct ccg att aac ttt gac aaa cct ttc aaa tea ege gac cta Ile Lys Ser Pro Ile Asn Phe Asp Lys Pro Phe Lys Ser Arg Asp Leu 260 265 270 aaa gaa ttt tgg aat aga tgg cat atg age ctt tct ttc tgg ttt aga 384 432 480 528 576 624 672 720 768 816 864 44

ΕΡ 1 141 308 /PT

Lys Glu Phe Trp Asn Arg Trp His Met Ser Leu Ser Phe Trp Phe Arg 275 280 285 gac ttt gtt ttc atg agg ctt gtt aag ctt tta gtt aaa aat aaa gtt 912 Asp Phe Vai Phe Met Arg Leu Vai Lys Leu Leu Vai Lys Asn Lys Vai 290 295 300 ttt aaa aac cgt aat gtt act tca agt gta gct tat att ate aat atg 960 Phe Lys Asn Arg Asn Vai Thr Ser Ser Vai Ala Tyr Ile Ile Asn Met 305 310 315 320 ctt ctt atg gga ttc tgg cat ggg tta act tgg tac tat ata gee tat 1008 Leu Leu Met Gly Phe Trp His Gly Leu Thr Trp Tyr Tyr Ile Ala Tyr 325 330 335 ggt ctc ttt cat ggg att ggc cta gtt att aat gac gct tgg gta cgt 1056 Gly Leu Phe Hls Gly Ile Gly Leu Vai lie Asn Asp Ala Trp Vai Arg 340 345 350 aag aag aaa aat ayt aat aaa gaa aga aga ttg gct aaa aaa cca ctt 1104 Lys Lys Lys Asn Xaa Asn Lys Glu Arg Arg Leu Ala Lys Lys Pro Leu 355 360 365 tta cca gaa aac aaa tgg act tat gct ttg ggt gtc ttc ate acc ttt 1152 Leu Pro Glu Asn Lys Trp Thr Tyr Ala Leu Gly Vai Phe Ile Thr Phe 370 375 380 aat gta gtt atg ttt tct ttc ttg att ttt tca gga ttt tta gat ctt 1200 Asn Vai Vai Met Phe Ser Phe Leu Ile Phe ser Gly Phe Leu Asp Leu 385 390 395 400 ttg tgg ttc cca caa ccg cat aac aaa taa 1230 Leu Trp Phe Pro Gin Pro His Asn Lys 405 410 <210> 31 <211> 409

< 212 > PRT

<213> Streptococcus do Grupo B < 4 0 0 > 31

Met Phe Met Gly He Pro Gin Tyr Phe Phe Tyr Leu Ile Leu Ala vai 15 10 15

Leu PrD lie Tyr Ile Gly Leu Phe Phe Lys Lys Arg Phe Ala Leu Tyr 20 25 30 45

ΕΡ 1 141 308 /PT

Glu Ile Ile Phe Ser Leu Ser Phe Ile Vai Met Met Leu Thr Gly Ser 35 40 45

Thr Phe Asn Gin Leu Lys Ser Leu Leu Ala Tyr Vai Vai Gly Gin Ser 50 55 60

Leu Leu Vai Phe Ile Tyr Lys Ala 65 70

Leu Vai Phe Tyr Vai Thr Vai Cys 85

Vai Lys Leu Ile Pro Ala Ile Ser 100

Gly Phe Leu Gly Ile Ser Tyr Leu 115 120

Tyr Arg Lys Arg Phe Asn His Thr 75 80

Leu Ser Ile Phe Pro Leu Phe Leu 90 95

Glu Asp Gly His Gin Ser Leu Phe 105 110

Thr Phe Arg Ala Vai Ala Met lie 125

Ile Glu Met Arg Asp Gly Vai Leu Lys Glu Phe Thr Leu Trp Glu Phe 130 135 140

Leu Arg Phe Leu Leu Phe Phe Pro Thr Phe Ser Ser Gly Pro Ile Asp 145 150 155 160

Arg Phe Lys Arg Phe Asn Glu Asp Tyr Ile Asn Ile Pro Asp Arg Asn 165 170 175

Glu Leu Leu Asp Met Leu Gly Gin Ala Ile His Tyr Leu Met Leu Gly 1BQ 185 190

Phe Leu Tyr Lys Phe Ile Leu Ala Tyr Ile Phe Gly Ser Leu Ile Met 195 200 205 pro Pro Leu Lys Glu Leu Ala Leu Glu Gin Gly Gly Vai Phe Asn Trp 210 215 220

Pro Thr Leu Gly Vai Met Tyr Ala Phe Gly Phe Asp Leu Phe Phe Asp 225 230 235 240

Phe Ala Gly Tyr Thr Met Phe Ala Leu Ala Ile Ser Asn Leu Met Gly 245 250 255

Ile Lys Ser Pro Ile Asn Phe Asp Lys Pro Phe Lys Ser Arg Asp Leu 260 265 270

Lys Glu Phe Trp Asn Arg Trp His Met Ser Leu Ser Phe Trp Phe Arg 275 280 285 46

ΕΡ 1 141 308 /PT

Asp Phe Vai Phe Met Arg Leu Vai Lys Leu Leu Vai Lys Asn Lys Vai 290 295 300

Phe Lys Asn Arg Asn Vai Thr Ser Ser vai Ala Tyr ile Ile Asn Met 305 310 315 320

Leu Leu Met Gly Phe Trp His Gly Leu Thr Trp Tyr Tyr Ile Ala Tyr 325 330 335

Gly Leu Phe His Gly Ile Gly Leu Vai Ile Asn Asp Ala Trp Vai Arg 340 345 350

Lys Lys Lys Asn Xaa Asn Lys Glu Arg Arg Leu Ala Lys Lys Pro Leu 355 360 365

Leu Pro Glu Asn Lys Trp Thr Tyr Ala Leu Gly Vai Phe Ile Thr Phe 370 375 380

Asn Vai Vai Met Phe Ser Phe Leu Ile Phe Ser Gly Phe Leu Asp Leu 385 390 395 400

Leu Trp Phe Pro Gin Pro His Asn Lys 405 <210> 32 <211> 100 <212> ADN <213> Streptococcus do Grupo B < 2 2 0 > <221> CDS <222> (D · · (99) < 4 0 0 > 32 atg aat aaa ata acg aca tta tca acc ate gcc ctg act tta atg ctt 48 Met Asn Lys Ile Thr Thr Leu Ser Thr Ile Ala Leu Thr Leu Met Leu 1 5 10 15 tgc gtt gga tgt tct gcc aat aaa gat aat caa aaa act aaa act gag 96 Cys Vai Gly Cys Ser Ala Asn Lys Asp Asn Gin Lys Thr Lys Thr Glu 20 25 30 gat c Asp

<210> 33 <211> 33 <212> PRT

<213> Streptococcus do Grupo B 100

47 ΕΡ 1 141 308 /PT <400> 33 Met Asn Lys Ile Thr Thr Leu Ser Thr Ile Ala Leu Thr Leu Met Leu 15 10 15 Cys Vai Gly Cys Ser Ala Asn Lys Asp Asn Gin Lys Thr Lys Thr Glu 20 25 30 Asp <210> 34 <211> 654 <212> ADN < 213 > Streptococcus do Grupo B < 2 2 0 > <221> CDS <222> (1)..(654) <400> 34 gat cga ggc tat caa gaa gca atg gct aaa cta agg aaa act tac ggc Asp Arg Gly Tyr Gin Glu Ala Met Ala Lys Leu Arg Lys Thr Tyr Gly 15 10 15 gaa tat ggt tta ggg gtt tct aca gga tta gat tta cct gaa tca gaa Glu Tyr Gly Leu Gly Vai Ser Thr Gly Leu Asp Leu Pro Glu Ser Glu 20 25 30 ggt tat gta cct gga aaa tac age tta gga aca act cta atg gaa teg Gly Tyr Vai Pro Gly Lys Tyr Ser Leu Gly Thr Thr Leu Met Glu Ser 35 40 45 ttc ggt cag tat gat gee tat aca cca atg caa ctt ggt cag tat ate Phe Gly Gin Tyr Asp Ala Tyr Thr Pro Met Gin Leu Gly Gin Tyr Ile 50 55 60 tca act att gcg aat aat ggg aat cgt tta gca cct cac gtg gtt tca Ser Thr Ile Ala Asn Asn Gly Asn Arg Leu Ala Pro His Vai Vai Ser 65 70 75 80 gat ate tat gaa ggg aat gat tct aat aag ttc gct caa ttg gtt cgt 48 96 144 192 240 288 48

ΕΡ 1 141 308 /PT

Asp Ile Tyr Glu Gly Asn Asp Ser Asn Lys Phe Ala Gin Leu Val Arg 85 90 95 tca ate act cct aaa aca cta aat aag ata gct ate tca gat caa gag 336 Ser Ile Thr Pro Lys Thr Leu Asn Lys Ile Ala Ile Ser Asp Gin Glu 100 105 110 tta gee att att caa gaa ggt ttt tat aac gtt gtc aat agt gga agt 384 Leu Ala lie lie Gin Glu Gly Phe Tyr Asn Val Val Asn Ser Gly Ser 115 120 125 ggc tat gea act ggt acg tca atg agg ggg aat gtg aca acc att agy 432 Gly Tyr Ala Thr Gly Thr Ser Met Arg Gly Asn Val Thr Thr Ile Xaa 130 135 140 ggt aaa act ggt acc gct gaa aca ttt gct aaa aat ata aat gga caa 480 Gly Lys Thr Gly Thr Ala Glu Thr Phe Ala Lys Asn Ile Asn Gly Gin 145 150 155 160 aca gtt tet acc tac aac tta aac gct att gee tac gat act aat cgt 528 Thr Vai Ser Thr Tyr Asn Leu Asn Ala Ile Ala Tyr Asp Thr Asn Arg 165 170 175 aaa ata gea gta gcg gta atg tat ccg cat gtt aca act gat aca aca 576 Lys lie Ala val Ala Val Met Tyr Pro His Val Thr Thr Asp Thr Thr 180 185 190 aaa tcc cat caa tta gtt gea cga gat atg att gat caa tat att tca 624 Lys Ser His Gin Leu Val Ala Arg Asp Met Ile Asp Gin Tyr Ile Ser 195 200 205 cag tca cag gac aat aag aga gga cat tga 654 Gin Ser Gin Asp Asn Lys Arg Gly His 210 215 <210> 35 < 211> 217

< 212 > PRT <213> Streptococcus do Grupo B <400> 35

Asp Arg Gly Tyr Gin Glu Ala Met Ala Lys Leu Arg Lys Thr Tyr Gly 15 10 15

Pro Glu Ser Glu 30

Glu Tyr Gly Leu Gly Vai Ser Thr Gly Leu Asp Leu 20 25 49

ΕΡ 1 141 308 /PT

Gly Tyr Vai Pro Gly Lys Tyr Ser Leu Gly Thr Thr Leu Met Glu Ser 35 40 45

Phe Gly Gin Tyr Asp Ala Tyr Thr Pro Met Gin Leu Gly Gin Tyr Ile 50 55 60

Ser Thr Ile Ala Asn Asn Gly Asn Arg Leu Ala Pro His Vai Vai Ser 65 70 75 80

Asp Ile Tyr Glu Gly Asn Asp Ser Asn Lys Phe Ala Gin Leu Vai Arg 85 90 95

Ser Ile Thr Pro Lys Thr Leu Asn Lys Ile Ala Ile Ser Asp Gin Glu 100 105 110

Leu Ala Ile Ile Gin Glu Gly Phe Tyr Asn Vai Vai Asn Ser Gly Ser 115 120 125

Gly Tyr Ala Thr Gly Thr Ser Met Arg Gly Asn Vai Thr Thr Ile Xaa 130 135 140

Gly Lys Thr Gly Thr Ala Glu Thr Phe Ala Lys Asn Ile Asn Gly Gin 145 150 155 160

Thr Vai Ser Thr Tyr Asn Leu Asn Ala Ile Ala Tyr Asp Thr Asn Arg 165 170 175

Lys Ile Ala Vai Ala Vai Met Tyr Pro His Vai Thr Thr Asp Thr Thr 180 185 190

Lys Ser His Gin Leu Vai Ala Arg Asp Met Ile Asp Gin Tyr Ile Ser 195 200 205

Gin Ser Gin Asp Asn Lys Arg Gly His 210 215

Lisboa

Claims (9)

1. ΕΡ 1 141 308 /PT 1/1 REIVINDICAÇÕES 1. Péptido compreendendo a sequência de aminoácidos aqui identificada como SEQ id NO:23, ou um seu homólogo ou fragmento, em que o referido homólogo ou fragmento é capaz de criar anticorpos com afinidade para com o referido péptido, para utilização terapêutica.
2. 2. Péptido de acordo com a reivindicação 1, compreendendo a sequência de aminoácidos aqui identificada como SEQ ID NO:23.
3. 3. Polinucleótido que codifica um péptido de acordo com a reivindicação 1 ou a reivindicação 2, para utilização terapêutica.
4. 4. Vacina compreendendo um péptido de acordo com a reivindicação 1 ou a reivindicação 2.
5. 5. Utilização de um produto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, para pesquisa de fármacos potenciais ou para a detecção de virulência.
6. 6. Utilização de um produto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, para o fabrico de um medicamento para utilização no tratamento ou prevenção de infecção por um microorganismo estreptococo do grupo B.
7. 7. Utilização de acordo com a reivindicação 6, em que a infecção é uma infecção focal.
8. 8. Utilização de acordo com a reivindicação 6, em que a infecção é uma infecção do tracto urinário.
9. 9. Anticorpo criado contra um péptido de acordo com a reivindicação 1 ou a reivindicação 2. Lisboa