PT1079819E - Derivados de ácido hidroxâmico como antibacterianos - Google Patents

Description

ΡΕ1079819 ι DESCRIÇÃO "DERIVADOS DE ÁCIDO HIDROXÂMICO COMO ANTIBACTERIANOS"

Esta invenção relaciona-se com a utilização de derivados de ácido hidroxâmico como agentes antibacte-rianos .

Antecedentes da Invenção

Duma maneira geral, os patógenos bacterianos são classificados como Gram-positivo ou Gram-negativo. Muitos agentes antibacterianos (incluindo antibióticos) são específicos contra uma ou outra das classes Gram de patógenos. Os agentes antibacterianos eficazes contra os patógenos Gram-positivo e Gram-negativo são por isso geralmente vistos como tendo um espectro de actividade lato.

Conhece-se muitas classes de agentes antibacterianos, incluindo as penicilinas e cefalosporinas, tetraci-clinas, sulfonamidas, monobactamas, fluoroquinolonas e quinolonas, aminoglucósidos, glicopéptidos, macrólidos, polimixinas, lincosamidas, trimetoprima e cloranfenicol. Os mecanismos fundamentais de acção destas classes de antibacterianos variam. A resistência bacteriana a muitos dos anti- 2 ΡΕ1079819 bacterianos conhecidos é um problema crescente. Por conseguinte existe uma necessidade continua na técnica para agentes antibacterianos alternativos, especialmente para agentes que possuam mecanismos de acção fundamentalmente diferentes daqueles das classes conhecidas.

Entre os patógenos Gram-positivos, tais como estafilococos, estreptococos, micobactérias e enterococos, desenvolveram-se/surgiram estirpes resistentes que os tornam particularmente difíceis de erradicar. Exemplos de tais estirpes são Staphilococcus aureus resistente à meticilina (MRSA), estafilococos negativos à coagulase resistente à meticilina (MRCNS), Streptococcus pneumoniae resistentes à penicilina e Enterococcus faecium multi-resistentes.

As bactérias patogénicas são frequentemente resistentes aos antibióticos de tipo aminoglucósido, β-lactama (penicilinas e cefalosporinas) e cloranfenicol. Esta resistência envolve a inactivação enzimática do antibiótico por hidrólise ou por formação de derivados inactivos. A família β-lactama (penicilina e cefalosporina) de antibióticos é caracterizada pela presença de uma estrutura cíclica de β-lactama. A resistência a esta família de antibióticos em isolados clínicos é na maioria dos casos devida à produção de uma enzima "penicilinase" (β-lactamase) pela bactéria resistente que hidrolisa o anel de β-lactama eliminando desse modo a sua actividade antibacteriana. 3 ΡΕ1079819

Recentemente houve o aparecimento de estirpes de enterococos resistentes à vancomicina (Woodford N. 1998 Glycopeptide-resistant enterococci: a decade of experience. Journal of Medicai Microbiology. 47(10):849-62). Os enterococos resistentes à vancomicina são particularmente prejudiciais uma vez que eles são a causa frequente de infecções hospitalares e são inerentemente resistentes à maioria dos antibióticos. A vancomicina actua ligando-se aos resíduos D-Ala-D-Ala terminais do precursor peptidoglicano da parede celular. A resistência elevada à vancomicina é conhecida como VanA e é conferida por um gene localizado num elemento transponível que altera os resíduos terminais para D-Ala-D-lac reduzindo assim a afinidade para a vancomicina .

Tendo em consideração o aparecimento rápido de bactérias resistentes a vários fármacos é da maior importância o desenvolvimento de agentes antibacterianos com novos modos de acção que sejam eficazes contra o número crescente de bactérias resistentes, em particular contra os enterococos resistentes à vancomicina e as bactérias resistentes aos antibióticos de β-lactama, tal como o Staphilococcus aureus resistentes à meticilina.

Descrição Abreviada da Invenção

Esta invenção baseia-se na observação de que determinados derivados do ácido hidroxâmico têm actividade 4 ΡΕ1079819 antibacteriana e torna acessível uma nova classe de agentes antibacterianos. Os inventores constataram que os compostos com os quais esta invenção se relaciona são antibacterianos em relação a uma gama de organismos Gram-positivos e Gram-negativos.

Embora possa ser interessante estabelecer o mecanismo de acção dos compostos com os quais a invenção se relaciona, é a sua aptidão para inibir o crescimento bacteriano que os torna úteis. No entanto, actualmente julga-se que a sua actividade antibacteriana seja devida, pelo menos em parte, à inibição intracelular da enzima polipéptido desformilase bacteriana (PDF).

As polipéptido desformilases bacterianas (PDF) (EC 3.5.1.31), são uma família conservada de metaloenzimas (Revistas em: Meinnel T, Lazennec C, Villoing S, Blanquet S, 1997, Journal of Molecular Biology 267, 749-761) as quais são essenciais para a viabilidade bacteriana, sendo a sua função a remoção do grupo formilo do resíduo metionina N-terminal de proteínas sintetizadas por ribossomas em eubactérias. Mazel et al. (EMBO J. 13(4):914-923, 1994) clonaram e caracterizaram recentemente uma PDF de E. coli. Uma vez que a PDF é essencial para o crescimento de bactérias e que não existe nenhum homólogo eucariota para a PDF, Mazel et al. (ibid), Rajagopalan et al. (J. Am. Chem. Soc. 119:12418-12419, 1997) e Becker et al., (J. Biol Chem. 273(19):11413-11416, 1998) cada um deles propôs que a PDF é um excelente alvo antibacteriano. 5 ΡΕ1079819 0 antibiótico natural actinonina (ver por exemplo J.C.S Perkin I, 1975, 819) é um derivado de ácido hidro-xâmico de Estrutura (A) :

Çh2oh (A)

Além disso foi também demonstrado que vários análogos estruturais da actinonina têm actividade anti-bacteriana (ver por exemplo Broughton et al. (Devlin et al. Journal of the Chemical Society. Perkin Transactions 1 (9):830-841, 1975; Broughton et al. Journal of the Chemical Society. Perkin Transactions 1 (9):857-860, 1975).

Também se conhecem derivados de ácido hidroxâmico na área da inibição das metaloproteases da matriz (mmp). Muitos exemplos da classe foram sintetizados e as suas propriedades inibidoras de MMP descritas. Um número mais pequeno destes foi descrito como sendo activo em modelos animais de doenças mediadas pelas MMP, por exemplo vários cancros e artrite reumatóide. Para revisões da literatura de patentes sobre hidroxamatos inibidores da MMP, ver por exemplo Beckett, Exp. Opin. Ther. Patents (1996) 6, 1305-1315, e Beckett & Whittaker, Exp. Opin. Ther. Patents (1998), 8(3), 259-282, e os documentos ali citados. 6 ΡΕ1079819

Descrição da Invenção

De acordo com a presente invenção é proporcionada a utilização de um composto de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente ou veterinariamente aceitável deste na preparação de uma composição antibacteriana:

em que:

Ri representa alquilo Ci-C6, alquilo C\-Ce substituído com um ou mais átomos de halogéneo, amino, hidroxilo ou alcoxilo Ci-C6; R2 representa um grupo Rio- (X) n_ (ALC)m- em que

Rio representa hidrogénio, ou um grupo alquilo Ci-Cê, alcenilo C2-C6, alcinilo C2-C6, cicloalquilo, arilo ou heterociclilo, qualquer um dos quais pode estar não substituído ou substituído com alquilo(Ci—C6), alco- xilo(Ci-C6), hidroxilo, mercapto, alquil(C i-C6)tio, amino, halo (incluindo fluoro, cloro, bromo e iodo), trifluorometilo, ciano, nitro, -COOH, -CONH2, -coor\ -NHCORa, -CONHRa, -NHRa, -NRaRb ou -CONRaRb em que Ra e RB are independentemente um grupo alquilo(Ci-C6), e ALC representa um radical divalente alquileno Ci-C6, alcenileno C2-C6 ou alcinileno C2-C6 linear ou ramificado, e pode estar interrompido por um ou mais 7 ΡΕ1079819 ligações -NH-, -0- ou -S- não adjacentes, X representa -NH-, -0- ou -S-, e m e n são independentemente 0 ou 1; e A representa (i) um grupo de fórmula (IA) ou (ID)

(IA) (ID) nr5r6 em que: R3 representa hidrogénio ou alquilo Ci-C6 e R4 representa a cadeia lateral de um alfa-aminoácido natural ou não natural e, R5 e R6, representam independentemente hidrogénio, ou alquilo Ci-C8 opcionalmente substituído, cicloalquilo, arilo, aril(alquilo Ci-C6), heterocíclico, ou hete-rocíclico (alquilo Ci-C6), ou R5 e Rê quando tomados em conjunto com o átomo de azoto ao qual eles estão ligados formam um anel heterocíclico saturado opcionalmente substituído de 3 até 8 átomos anel esse que está opcionalmente fundido com um anel carbocíclico ou segundo anel heterocíclico.

De acordo com uma forma de realização preferida, os vários aspectos da invenção podem ser aplicados contra 8 ΡΕ1079819 as bactérias resistentes a vancomicina, quinolona e "β-lactama" e contra as infecções que elas provocam.

Na hipótese de que os compostos (I) actuam por inibição da PDF intracelular, o efeito antibacteriano mais potente pode ser conseguido utilizando compostos que passem eficazmente através da parede celular bacteriana. Assim, os compostos que são extremamente activos como inibidores da PDF in vitro e que penetram as células bacterianas são preferidos para serem utilizados de acordo com a invenção. Espera-se que a potência antibacteriana dos compostos que são inibidores potentes da enzima PDF in vitro, mas são maus penetradores celulares, possa ser melhorada pela sua utilização na forma de um pró-fármaco, i.e. um análogo estruturalmente modificado que é convertido na molécula parental de fórmula (I), por exemplo por acção enzimática, depois de ter passado através da parede celular bacteriana.

Como aqui utilizado, o termo "alquil(Ci-C6)" significa uma unidade alquilo de cadeia linear ou ramificada possuindo desde 1 até 6 átomos de carbono, incluindo por exemplo, metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-buti-lo, isobutilo, sec-butilo, t-butilo, n-pentilo e n-hexilo.

Como aqui utilizado, o termo "radical divalente alquileno(Ci-C6)" significa uma cadeia hidrocarboneto saturada possuindo desde 1 até 6 átomos de carbono e duas valências não preenchidas. 9 ΡΕ1079819

Como aqui utilizado, o termo "alcenilo (C2-C6)" significa uma unidade alcenilo de cadeia linear ou ramificada possuindo desde 2 até 6 átomos de carbono possuindo pelo menos uma ligação dupla de estereoquimica E ou Z onde aplicável. 0 termo inclui, por exemplo, vinilo, alilo, 1- e 2-butenilo e 2-metil-2-propenilo.

Como aqui utilizado, o termo "radical divalente alcenileno(C2-C6)" significa uma cadeia hidrocarboneto possuindo desde 2 até 6 átomos de carbono, pelo menos uma ligação dupla, e duas valências não preenchidas.

Como aqui utilizado, 0 termo "alcinilo C2- -C6" refere- se a grupos hidrocarboneto de cadeia linear ou cadeia ramificada possuindo desde dois até 6 átomos de carbono e possuindo além disso uma ligação tripla. Este termo incluiria por exemplo, etinilo, 1-propinilo, 1- e 2-butinilo, 2-metil-2-propinilo, 2-pentinilo, 3-pentinilo, 4-pentinilo, 2-hexinilo, 3-hexinilo, 4-hexinilo e 5-hexinilo.

Como aqui utilizado, o termo "radical divalente alcinileno(C2-C6)" significa uma cadeia hidrocarboneto possuindo desde 2 até 6 átomos de carbono, pelo menos uma ligação tripla e duas valências não preenchidas.

Como aqui utilizado, o termo "cicloalquilo" significa uma unidade alicíclica saturada possuindo desde 3-8 átomos de carbono e inclui, por exemplo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo, ciclo-heptilo e ciclooctilo. 10 ΡΕ1079819

Como aqui utilizado, o termo "cicloalcenilo" significa uma unidade aliciclica insaturada possuindo desde 3-8 átomos de carbono e inclui, por exemplo, ciclopro-penilo, ciclobutenilo, ciclopentenilo, ciclo-hexenilo, ciclo-heptenilo e ciclooctenilo. No caso de anéis cicloalcenilo de 5-8 átomos de carbono, o anel pode conter mais do que uma ligação dupla.

Como aqui utilizado, o termo "arilo" refere-se a um grupo aromático carbocíclico mono-, bi- ou tri-ciclico e a grupos consistindo de dois grupos monociclicos carbo-cíclicos aromáticos ligados covalentemente. São ilustrativos de tais grupos o fenilo, bifenilo e naftilo.

Como aqui utilizado, o termo "heteroarilo" refere-se a um anel aromático de 5 ou 6 membros contendo um ou mais heteroátomos, e opcionalmente fundido com um anel benzilo ou piridilo; e a grupos consistindo de dois anéis aromáticos de 5 ou 6 membros ligados covalentemente em que cada um contém um ou mais heteroátomos; e a grupos consistindo de um grupo monociclico carbocíclico aromático ligado covalentemente a um anel aromático de 5 ou 6 membros contendo um ou mais heteroátomos. São ilustrativos de tais grupos o tienilo, furilo, pirrolilo, imidazolilo, benzimi-dazolilo, tiazolilo, pirazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, triazolilo, tiadiazolilo, oxadiazolilo, piridinilo, piri-dazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, triazinilo, 4-([1,2,3]-tiadiazol-4-il)fenilo e 5-isoxazol-3-iltienilo. 11 ΡΕ1079819

Como aqui utilizado o termo não qualificado "heterociclilo" ou "heterocíclico" inclui "heteroarilo" como definido acima, e em particular significa um anel heterocíclico aromático ou não aromático de 5-7 membros contendo um ou mais heteroátomos seleccionados de S, Ne 0, e opcionalmente fundido com um anel de benzeno, incluindo por exemplo, os grupos pirrolilo, furilo, tienilo, piperi-dinilo, imidazolilo, oxazolilo, tiazolilo, tiadiazolilo, pirazolilo, piridinilo, pirrolidinilo, pirimidinilo, morfo-linilo, piperazinilo, indolilo, benzimidazolilo, maleimido, succinimido, ftalimido e 1,3-dioxo-l,3-di-hidro-isoindol-2-ilo.

Como aqui utilizado, o termo "acilo" significa um grupo R2oC(0)- em que R2o é alquilo (Ci~C6), alcenilo (C2-C6), cicloalquilo(C3-C7), fenilo, heterociclilo, fenil-alqui-lo(Ci-C6), heterociclilalquilo (Ci-Cô) , cicloalquil (C3-C7) alquilo (Ci-C6), fenilalcenilo(C2-C6) , heterociclil-alceni-lo(C2-C6), cicloalquil (C3-C7) alcenilo (C2-C6), em que qualquer um dos grupo R2o pode estar substituído. A menos que especificado de outro modo no contexto no qual ele ocorre, o termo "substituído" como aplicado a qualquer unidade aqui significa substituído com até quatro substituintes, cada um dos quais pode ser independentemente alquilo(Ci—C6) , benzilo, alcoxilo(Ci—C6), fenoxilo, hidroxilo, mercapto, alquil(C2—C6) tio, amino, halo (incluindo fluoro, cloro, bromo e iodo), trifluo- 12 ΡΕ1079819 rometilo, nitro, -COOH, -CONH2, -CORA, -COORA, -NHCORA, -CONHRa, -NHRa, -NRaRb ou -CONRaRb em que RA e RB são independentemente um grupo alquilo (Ci—Ce) . No caso em que "substituído" significa benzilo, o anel fenilo deste pode ele próprio estar substituído com qualquer um dos anteriores, excepto benzilo.

Como aqui utilizados, os termos "cadeia lateral de um alfa-aminoácido natural" e "cadeia lateral de um alfa-aminoácido não natural" significa o grupo Rx respectivamente num aminoácido natural e não natural de fórmula NH2-CH (Rx)-COOH.

Os exemplos de cadeias laterais de alfa-amino-ácido naturais incluem as de alanina, arginina, asparagina, ácido aspártico, cisteína, cistina, ácido glutâmico, histidina, 5-hidroxilisina, 4-hidroxiprolina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, prolina, serina, treonina, triptofano, tirosina, valina, ácido a-amino-adípico, ácido a-amino-n-butírico, 3,4-di-hidroxifenilalanina, homoserina, α-metilserina, ornitina, ácido pipe-cólico e tiroxina.

Nas cadeias laterais de alfa-aminoácidos naturais que contêm substituintes funcionais, por exemplo grupos amino, carboxilo, hidroxilo, mercapto, guanidilo, imidazo-lilo, ou indolilo como na arginina, lisina, ácido glutâmico, ácido aspártico, triptofano, histidina, serina, treonina, tirosina e cisteína, estes substituintes funcionais podem estar opcionalmente protegidos. 13 ΡΕ1079819

De modo semelhante, nas cadeias laterais de alfa-aminoácidos não naturais que contêm substituintes funcionais, por exemplo grupo amino, carboxilo, hidroxilo, mer-capto, guanidilo, imidazolilo, ou indolilo, estes substituintes funcionais podem estar opcionalmente protegidos. 0 termo "protegido" quando utilizado em relação a um substituinte funcional numa cadeia lateral de um alfa-aminoácido natural ou não natural significa um derivado de um tal substituinte o qual é essencialmente não funcional. 0 livro de texto muito utilizado de T. W. Greene e P. G. Wuts "Protective Groups in Organic Synthesis" Second Edition, Wiley, New York, 1991 revê o assunto. Por exemplo, os grupos carboxilo podem ser esterifiçados (por exemplo como um éster de alquilo Ci-C6), os grupos amino podem ser convertidos em amidas (por exemplo como uma NHCOalquil Ci-C6 amida) ou carbamatos (por exemplo como um carbamato NHC(=0)Oalquilo Ci-C6 ou NHC(=0)0CH2Ph), os grupos hidroxilo podem ser convertidos em éteres (por exemplo um éter de Oalquilo C1-C6 ou 0(alquil Ci-Ce) fenilo) ou ésteres (por exemplo um éster de OC (=0) alquilo Οι-Οε) e os grupos tiol podem ser convertidos em tioéteres (por exemplo um tioéter de terc-butilo ou benzilo) ou tioésteres (por exemplo um tioéster de SC(=0)alquilo Ci-C6) .

Os sais dos compostos da invenção incluem os sais de adição de ácido fisiologicamente aceitáveis por exemplo cloridratos, bromidratos, sulfatos, metanossulfonatos, p- 14 ΡΕ1079819 toluenossulfonatos, fosfatos, acetatos, citratos, succina-tos, lactatos, tartratos, fumaratos e maleatos. Os sais também podem ser preparados com bases, por exemplo sais de sódio, potássio, magnésio e cálcio.

Existem vários centros quirais efectivos ou potenciais nos compostos de acordo com a invenção devido à presença de átomos de carbono assimétricos. A presença de vários átomos de carbono assimétricos dá origem a um certo número de diastereoisómeros com estereoquimica R ou S em cada centro quiral. A invenção inclui todos esses diastereoisómeros e as misturas destes. Actualmente, a configuração estereoquimica preferida do átomo de carbono portador do grupo R2 é R; a do átomo de carbono portador do grupo R4 (quando assimétrico) é S; e a do átomo de carbono portador do grupo Ri (quando assimétrico) é R.

Nos compostos para serem utilizados de acordo com a invenção e nos novos compostos da invenção:

Ri pode ser, por exemplo, hidroxilo, metoxilo, metilo ou trifuorometilo. Hidrogénio é actualmente preferido. R2 pode ser, por exemplo: alquilo Ci-C6 opcionalmente substituído, alcenilo C3-C6, alcinilo C3-C6 ou cicloalquilo; fenil(alquilo Ci-C6)-, fenil(alcenilo C3-C6)- ou fenil-(alcinilo C3-C6)- opcionalmente substituído no anel de fenilo; cicloalquil(alquilo Ci-C6)-, cicloalquil(alcenilo C3- 15 ΡΕ1079819 C6)- ou cicloalquil(alcinilo C3-C6)- opcionalmente substituído no anel de cicloalquilo; heterociclil(alquilo Ci-C6)-, heterociclil(alcenilo C3-C6)- ou heterociclil(alcinilo C3-C6)- opcionalmente substituído no anel de heterociclilo; ou CH3 (CH2) p0 (CH2) q- ou CH3 (CH2) PS (CH2) q-, em que p é 0, 1, 2 ou 3 e q é 1, 2 ou 3.

Exemplos específicos de grupos R2 incluem metilo, etilo, n- e iso-propilo, n- e iso-butilo, n-penti-lo, iso-pentilo 3-metil-but-l-ilo, n-hexilo, n-heptilo, n-acetilo, n-octilo, metilsulfaniletilo, etilsulfanilmetilo, 2-metoxietilo, 2-etoxietilo, 2-etoximetilo, 3-hidroxi-propilo, alilo, 3-fenilprop-3-en-l-ilo, prop-2-in-l-ilo, 3-fenilprop-2-in-l-ilo, 3-(2-clorofenil)prop-2-in-l-ilo, but-2-in-l-ilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo, ciclopentilmetilo, ciclopentiletilo, ciclopentilpropilo, ciclo-hexilmetilo, ciclo-hexiletilo, ciclo-hexilpropilo, furan-2-ilmetilo, fu-ran-3-metilo, tetra-hidrofuran-2-ilmetilo, tetra-hidrofu-ran-2-ilmetilo, piperidinilmetilo, fenilpropilo, 4-cloro-fenilpropilo, 4-metilfenilpropilo, 4-metoxifenilpropilo, benzilo, 4-clorobenzilo, 4-metilbenzilo e 4-metoxibenzilo.

Os grupos actualmente preferidos em R2 são n-propilo, n-butilo, n-pentilo, benzilo e ciclopentilmetilo. R3 pode ser, por exemplo, hidrogénio ou metilo, sendo efectivamente preferido o hidrogénio. 16 ΡΕ1079819 R4 pode ser, por exemplo 0 grupo caracterizador de um α-aminoácido natural, por exemplo isopropilo, benzilo ou 4-hidroxifenilmetilo, no qual qualquer grupo funcional pode estar protegido, qualquer grupo amino pode estar acilado e qualquer grupo carboxilo presente pode estar aminado; ou um grupo -[Alc]nRg onde Alc é um grupo alquileno (Ci-C6) ou alcenileno(C2-C6) opcionalmente interrompido por um ou mais átomos de -0- ou -S- ou grupos -N(Ri2)- [em que Ri2 é um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo (Ci-C6) ], n é 0 ou 1, e Rg é hidrogénio ou um grupo fenilo, arilo, hetero-ciclilo, cicloalquilo ou cicloalcenilo opcionalmente substituído ou (apenas quando n é 1) Rg pode ser adicionalmente hidroxilo, mercapto, alquil(Ci-C6)tio, amino, halo, tri-f luorometilo, nitro, -C00H, -C0NH2, -C00RA, -NHC0RA, -C0NHRA, -NHRa, -NRaRb, -C0NRaRb em que RA e RB são independentemente um grupo alquilo(Ci-C6) ; ou um grupo benzilo substituído no anel de fenilo com um grupo de fórmula -OCH2COR8 onde R8 é hidroxilo, amino, alco-xilo(Ci-C6), fenilalcoxilo (Ci-C6), alquil (Ci—C6) amino, di (alquil (Ci—Ce) ) amino, fenilalquil (Ci-Cê) amino; ou um grupo heterocíclico-alquilo (Ci-C6), que está não substituído ou mono- ou di-substituído no anel heterocíclico com halo, nitro, carboxilo, alcoxilo(Ci-Cê), ciano, alcanoí-lo(Ci-Ce), trifluorometil-alquilo(Ci-C6), hidroxilo, formi-lo, amino, alquil (Ci—C6)amino, di-alquil (Ci-C6)amino, mercapto, alquil (Ci—C6) tio, hidroxialquilo (Ci-C6), mercaptoal-quilo(Ci-Ce) ou alquil(Ci—Cê)fenilmetilo; ou um grupo -CRaRbRc no qual: 17 ΡΕ1079819 cada um de Ra, Rb e Rc é independentemente hidrogénio, alquilo (Ci-C6), alcenilo (02-0δ), alcinilo (C2-C6), fenil-alquilo (Ci-C6), cicloalquilo (C3-C8) ; ou Rc é hidrogénio e Ra e Rb são independentemente fenilo ou heteroarilo tal como piridilo; ou

Rc é hidrogénio, alquilo (Ci-Cg), alcenilo (C2-C6), alcinilo (C2-C6), fenilalquilo (Ci-C6) ou cicloalquilo(C3-C8), e Ra e Rb em conjunto com 0 átomo de carbono ao qual eles estão ligados formam um cicloalquilo de 3 até 8 membros ou um anel heterociclico de 5 até 6 membros; ou

Ra, Rb e Rc em conjunto com o átomo de carbono ao qual eles estão ligados formam um anel triciclico (por exemplo adamantilo); ou

Ra e Rb são, cada um, independentemente alquilo (Ci-C6), alcenilo (C2-C6), alcinilo (C2-C6), fenilalquilo (Ci-C6), ou um grupo como definido para Rc abaixo que não hidrogénio, ou Ra e Rb em conjunto com o átomo de carbono ao qual eles estão ligados formam um cicloalquilo ou anel heterociclico, e Rc é hidrogénio, -OH, -SH, halogéneo, -CN, -C02H, perfluoroalquilo (C1-C4), -CH2OH, -C02alquilo (Ci-C6), -Oalquilo (Ci-C6), -Oalcenilo (C2-C6), -Salquilo (Ci-C6), -SOalquilo (Ci-C6), -S02alquilo (Ci-C6), -Salcenilo (C2-C6), -SOalcenilo (C2-C6), -S02alcenilo (C2-C6) ou um grupo -Q-W em que Q representa uma ligação ou -0-, -S-, -S0- ou —S02— e W representa um grupo fenilo, fenilalquilo, cicloalquilo(C3-C8), cicloal-quil (C3-C8) alquilo, cicloalcenilo (C4-C8), cicloalcenil-(C4-C8)alquilo, heteroarilo ou heteroarilalquilo, gru- 18 ΡΕ1079819 po W esse que pode estar opcionalmente substituído com um ou mais substituintes independentemente seleccio-nados de, hidroxilo, halogéneo, -CN, -C02H, -C02al-quilo (Ci-C6), -CONH2, -CONHalquilo (Ci-C6) , -CONH (alquilo Ci-C6)2í -CHO, -CH2OH, perf luoroalquilo (C1-C4), -Oal-quilo (Ci-Cg) , -Salquilo (Ci-C6), -SOalquilo (Ci-C6), -S02-alquilo (Ci-C6), -N02, -NH2, -NHalquilo (Ci-C6), -N(al-quil (Ci-Cô) ) 2, -NHCOalquilo (Ci-C6), alquilo (Ci-C6), al-cenilo (C2-Cg), alcinilo (C2-C6), cicloalquilo (C3-C8), cicloalcenilo(C4-C8), fenilo ou benzilo.

Exemplos de grupos particulares R4 incluem meti-lo, etilo, isopropilo, benzilo, 4-clorobenzilo, 4-hidroxi-benzilo, fenilo, ciclo-hexilo, ciclo-hexilmetilo, piridin-3-ilmetilo, terc-butoximetilo, naftilmetilo, iso-butilo, sec-butilo, terc-butilo, 1-benziltio-l-metiletilo, 1-metil-tio-l-metiletilo, 1-mercapto-l-metiletilo, 1-metoxi-l-me-tiletilo, 1-hidroxi-l-metiletilo, 1-fluoro-l-metiletilo, 4,4-dimetil-prop-l-en-4-ilo, 4,4-dimetil-prop-4-ilo, hidro-ximetilo, 2-hidroxietilo, 2-carboxietilo, 2-metilcarba-moiletilo, 2-carbamoiletilo e 4-aminobutilo. Presentemente, os grupos R4 preferidos incluem terc-butilo, iso-butilo, benzilo e metilo. benzilo,

Rs e R8 podem ser independentemente, por exemplo, hidrogénio, metilo, etilo, terc-butilo, n-heptilo, ciclo-pentilo, ciclo-hexilo, fenilo, 2-etoxicarbonil-et-2-ilo, pirid-2-ilo, 1,1,3,3-tetrametilbutilo, benzilo, 2,6-di- 19 ΡΕ1079819 metil-4-terc-butil-fenilo, difenilmetilo, 4-clorofenil-fe-nilmetilo, 2-fluorofenil-fenilmetilo, 1-(4—fluorofenil)-1-fenil-l-amino-metilo, 1,1-difenilprop-3-ilo, 3-fenil-tia-zolilo ou 2-hidroxietilo; ou R5 e R6 quando tomados em conjunto com o átomo de azoto ao qual eles estão liqados podem formar um anel monocíclico N-heterocíclico saturado de 5 até 8 membros, anel esse que está liqado através do átomo de N e o qual contém opcionalmente -N(Rn)-em que Rn é hidrogénio ou alquilo C1-C6, benzilo, acilo ou um grupo de protecção de amino, 0, S, SO ou S02 como um membro endociclico, e/ou está opcionalmente substituído em um ou mais átomos de C com hidroxilo, alquilo Ci-C6, hidro-xi(alquil Ci-C6)-, alcoxilo Ci-C6, oxo, oxo cetalisado, amino, mono(alquil Ci-C6)amino, di(alquil Ci-Cô) amino, carboxilo, alcoxi(Ci-Ce)carbonilo, hidroximetilo, alcoxi(Ci-C6)metilo, carbamoilo, mono(alquil Ci-Cô)carbamoilo, di(al-quil Ci-C6) carbamoilo ou hidroxiimino. São exemplos de tais anéis o 1-pirrolidinilo, piperidin-l-ilo, 1-piperazinilo, hexa-hidro-l-piridazinilo, morfolin-4-ilo, tetra-hidro-1,4-tiazin-4-ilo, 1-óxido de tetra-hidro-1,4-tiazin-4-ilo, 1,1-dióxido de tetra-hidro-1,4-tiazin-4-ilo, hexa-hidroazipino, ou octa-hidroazocino substituído ou não substituído. Exemplos substituídos dos anteriores são 2-(metilcarbamoil)-1-pirrolidinilo, 2-(hi-droximetil)-1-pirrolidinilo, 4-hidroxipiperidino, 2-(metilcarbamoil )piperidino, 4-hidroxiiminopiperidino, 4-meto-xipiperidino, 4-metilpiperidin-lilo, 4-benzilpiperidin-l-ilo, 4-acetilpiperidin-l-ilo,4-metil-l-piperazinilo, 4- 20 ΡΕ1079819 fenil-l-piperazinilo, 1,4-dioxa-8-azaespiro[4,5]decan-8-ilo, hexa-hidro-3-(metilcarbamoil)-2-piridazinilo e hexa-hidro-1-(benziloxicarbonil)-2-piridazinilo, deca-hidroiso-quinolin-2-ilo e 1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2-ilo.

Quando A é um grupo de fórmula (IA), é geralmente preferido que R5 seja metilo ou hidrogénio, e R.6 seja me-tilo.

Exemplos específicos de compostos com actividade inibidora da PDF e antibacteriana de acordo com a invenção incluem aqueles dos exemplos aqui fornecidos.

Os compostos para utilização de acordo com a invenção podem ser preparados por métodos descritos na literatura para a preparação de hidroxamatos inibidores da MMP, por exemplo as publicações de patente relacionadas com estes compostos citados em Beckeft, Exp. Opin. Ther. Patents (1996) 6, 1305-1315, e Beckett & Whittaker, Exp. Opin. Ther. Patents (1998), 8(3), 259-282.

As composições com as quais a invenção se relaciona podem ser preparadas para administração por qualquer via coerente com as propriedades farmacocinéticas da(s) substância(s) activa(s).

As composições administráveis por via oral podem estar na forma de comprimidos, cápsulas, pós, granulados, 21 ΡΕ1079819 pastilhas, preparações líquidas ou em gel, tais como soluções ou suspensões orais, tópicas ou parentéricas estéreis. Os comprimidos e cápsulas para administração oral podem estar na forma de apresentação de dose unitária, e podem conter excipientes convencionais tais como aglutinantes, por exemplo xarope, goma-arábica, gelatina, sorbitol, tragacanta, ou polivinil-pirrolidona; enchimentos por exemplo lactose, açúcar, amido de milho, fosfato de cálcio, sorbitol ou glicina; lubrificantes para preparação de comprimidos, por exemplo estearato de magnésio, talco, polietileno glicol ou sílica; desintegrantes por exemplo amido de batata, ou humectantes aceitáveis tais como laurilsulfato de sódio. Os comprimidos podem ser revestidos segundo métodos bem conhecidos na prática farmacêutica normal. As preparações líquidas orais podem estar na forma de, por exemplo, suspensões aquosas ou oleosas, soluções, emulsões, xaropes ou elixires, ou podem ser apresentadas na forma de um produto seco para reconstituição com água ou outro veículo adequado antes da utilização. Tais preparações líquidas podem conter aditivos convencionais tais como agentes de suspensão, por exemplo sorbitol, xarope, metilcelulose, xarope de glucose, gelatina, gorduras comestíveis hidrogenadas; emulsionantes, por exemplo lecitina, monooleato de sorbitano ou goma-arábica; veículos não aquosos (os quais podem incluir óleos comestíveis), por exemplo óleo de amêndoa, óleo de coco fraccionado, ésteres oleosos tais como glicerina, propileno glicol, ou álcool etílico; conservantes, por exemplo p-hidroxibenzoato de metilo ou propilo ou ácido sórbico, e se desejado aroma-tizantes ou corantes convencionais. 22 ΡΕ1079819

Para aplicação tópica na pele, a(s) substância(s) activa(s) podem ser transformadas num creme, loção ou pomada. As formulações em creme ou pomada que podem ser utilizadas para o fármaco são formulações convencionais bem conhecidas na técnica, por exemplo como descrito em textos clássicos de farmácia tal como The British Pharmacopoeia. A(s) substância(s) activa(s) também pode ser administrada por via parentérica num meio estéril. Dependendo do veiculo e concentração utilizada, o fármaco pode ser suspenso ou dissolvido no veículo. Vantajosamente pode dissolver-se adjuvantes tais como um anestésico local, um conservante e agentes tamponantes no veículo.

As dosagens seguras e eficazes para classes de doentes diferentes e para estados patológicos diferentes serão determinadas por ensaio clínico como é requerido na técnica. Entender-se-á que o nível de dose específico para qualquer doente particular dependerá de uma diversidade de factores incluindo da actividade do composto específico empregue, da idade, peso corporal, estado geral de saúde, género, dieta, momento de administração, via de administração, velocidade de excreção, associação de fármacos e da gravidade da doença particular submetida a terapia.

Os exemplos seguintes são de compostos de fórmula (I) acima com actividade inibidora da PDF e actividade antibacteriana de acordo com a invenção. 23 ΡΕ1079819

Os espectros de RMN de XH e 13C foram registados utilizando um espectrómetro Bruker AC 250E a 250,1 e 62,9 MHz, respectivamente. As microanálises elementares foram realizadas por MEDAC Ltd. Department of Chemistry, Brunel University, Uxbridge, Middlesex UB8 3PH. A L-terc-leucina-N-metilamida foi preparada segundo métodos estabelecidos na literatura.

Exemplo Preparativo Ilustrativo A N1-(lS-Metilcarbamoil-2-fenil-etil) -N4-hidroxi-2R-propil-succinamida

O composto em epígrafe foi preparado pelo método descrito na WO 92/13831 (Exemplo 1), substituindo o cloreto de 4-metilvalerilo por cloreto de valerilo. p.f. = 191-193 °C. RMN de 1E δ (CD3OD, troca parcial de D); 8,12 (0,5H, d, J=8,1Hz) , 7, 96-7, 87 (5H, m), 4, 55-4, 40 (1H, m), 3,11 (1H, dd, J=6,4, 13,7Hz), 2,89 (1H, dd, J=8,9, 13,7Hz), 2,65, 2,63 (3H, 2s), 2,60-2,50 (1H, m), 2,20 (1H, dd, J=8,0, 14,6Hz), 2,06 (1H, dd, J=6,7, 14,6Hz), 1,48-1,00 (4H, m) e 0,78 (3H, t, J=7,lHz). RMN de 13C δ (CD3OD) ; 24 ΡΕ1079819 177,0, 174,0, 170,8, 138,8, 130,3, 129,4, 127,7, 56,3, 44, 4, 38, 7, 36,4, 35, 6, 26,3 21,3 e 14,3. IV (KBr, vmax cm-1); 3292, 2957, 1637, 1560 e 1541. Observado: C 60,18, H 7,45, N 12,52%; C17H25N3O40,2H20 requer C 60,23, H 7,55, N 12,39%.

Exemplos

Através de métodos descritos na literatura análogos aos utilizados no Exemplo Preparativo Ilustrativo A acima preparou-se os compostos seguintes de fórmula (I) acima, em que A é um grupo de fórmula (IA):

Ri r2 r3 r4 Rs Re OH iso-butilo H terc-butilo H 2,6-dimetil-4-terc-butil-fenilo OH iso-butilo H terc-butilo H Difenilmetilo OH iso-butilo H terc-butilo H 4-clorofenil-fenilmetilo OH iso-butilo H terc-butilo H 1,1-difenilprop-3-ilo OH iso-butilo H terc-butilo H 3-fenil-tiazolilo OH iso-butilo H terc-butilo H 1-(4-fluorofenil)-1-fenil-1-amino-metilo OH iso-butilo H terc-butilo H 2-fluorofenil-fenilmetilo

Exemplo Biológico A i) Clonagem do gene da PDF de Escherichia coli

Clonou-se 0 gene da PDF de E. coli PDF em pET24a(+) (designado pET24-PDF) e utilizou-se para transformar células BL21 DE3 de Novagen Inc, (Madison, 25 ΡΕ1079819

Wisconsin). Seleccionou-se clones a 37 °C em placas de agar YT (8g/l tiptona, 5g/extracto de levedura, NaCl 5 g/1, agar 15 g/1) suplementado com 30 μρ/ηιΐ canamicina.

ii) Expressão de PDF

Utilizou-se 20 ml de uma cultura dum dia para o outro de células BL21 DE3 portadoras de pET24-PDF para infectar 500 ml de caldo 2xYT (16 g/1 de tiptona, 10 g/1 de extracto de levedura, NaCl 5 g/1) contendo 30 ug/ml canamicina num balão de 2 litros com deflector e cultivou-se a 37 °C com agitação até uma OD6oo de 0,6. Induziu-se depois a cultura ajustando o meio a o 1,0 mM de β-D tiogalacto-piranosido de isopropilo (IPTG). Deixou-se prosseguir a indução durante mais 3 horas a 37 °C, recolheu-se as células por centrifugação e lavou-se o sedimento de células com 250 ml de soro fisiológico tamponado com fosfato (PBS) e armazenou-se o sedimento a -70 °C. iii) Preparação da Fracção de Proteína Solúvel

Ressuspendeu-se as células de uma expressão de 1 litro em 2x 25 ml de soro fisiológico tamponado com fosfato gelado. Submeteu-se a suspensão de células a ultra-sons sobre gelo utilizando um MSE Soniprep 150 munido com uma sonda média e a uma amplitude de 20-25 mícrones em pulsos de 6x20 segundos. Clarificou-se então a suspensão resultante por centrifugação a 20 000xg durante 15 minutos. Utilizou-se em seguida o sobrenadante para purificação adicional da enzima. 26 ΡΕ1079819

iv) Purificação da PDF

Ajustou-se lisado de E. coli de uma cultura de 1 1 em soro fisiológico tamponado com fosfato (PBS) até sulfato de amónio 2M. Equilibrou-se uma coluna de 15 ml de fenil-sepharose com PBS/sulfato de amónio 2M a 4 °C. Carregou-se o lisado numa coluna e lavou-se com tampão de equilíbrio. Eluiu-se a coluna diminuindo a concentração de sulfato de amónio de 2M para OM ao longo de 10 volumes de coluna. Recolheu-se fracções de 5 ml e analisou-se por SDS-PAGE. Juntou-se as fracções contendo a maior parte da PDF de 20 kDa. Concentrou-se as fracções reunidas utilizando uma membrana de corte de 3 kDa até um volume de 5 ml. Transferiu-se então a fracção para uma coluna Superdex 75 (cromatografia de exclusão molecular) equilibrada em PBS. Eluiu-se a fracção de PDF concentrada a um ml/min a 4 °C e recolheu-se fracções de 5 ml e analisou-se por SDS-PAGE. Combinou-se as fracções mais puras e armazenou-se a -70 °C.

(v) Ensaio in vitro da PDF O ensaio foi realizado numa placa de 96 poços simples num volume final de 100 μΐ contendo: - 20 μΐ de PDF (4 μρ/ΓηΙ) - 20 μΐ Hepes 100 mM pH 7,0 + KC1 1M + 0,05% de Brij - 10 μΐ de diluição em série do composto de ensaio DMSO a 20% - 50 μΐ de formil-Met-Ala-Ser (8 mM) 27 ΡΕ1079819 0 ensaio foi incubado a 37 °C durante 30 minutos. O grupo amino livre do produto (Met-Ala-Ser) desformilado foi detectado utilizando fluorescamina, através das adições seguintes: - 50 μΐ de borato 0,2M, pH 9,5 - 50 μΐ de fluorescamina (150 pg/ml em dioxano seco) A fluorescência foi quantificada num leitor de placas SLT Fluostar utilizando um comprimento de onda de excitação de 390 nM e um comprimento de onda de emissão de 485 nM. As reacções de controlo padrão são uma reacção sem inibidor a qual proporciona o número correspondente à inibição zero e uma reacção sem enzima e sem inibidor a qual proporciona o número correspondente a 100% de inibição. Os dados foram analisados através da conversão das unidades de fluorescência em % de inibição e a concentração de inibidor foi representada contra a % de inibição. Os dados foram ajustados a uma função sigmóide: y = A+( (B-A) / (1+( (C/x) D) ) ), em que A representa zero de inibição, B representa 100% de inibição e C representa a IC50, D representa o declive, a IC50 representa a concentração de inibidor (nM) necessária para diminuir a activi-dade da enzima em 50%.

Constatou-se que os compostos de ensaio inibem a PDF bacteriana in vitro. 28 ΡΕ1079819

Exemplo Biológico B

As concentrações inibidoras mínimas (MIC) dos compostos de ensaio contra a estirpe de E. coli DH5a (Genótipo; F-(p80d/acZÁMA(lacZYA-argF)Ul69 deoR recAl endAl bsdRi7(rk“,mk+)pboA supE44X~ thi-1 gyrA96 relAl) obtida de GibcoBRL Life Technologies, foram determinadas como se segue. Preparou-se soluções-mães de compostos de ensaio por dissolução de cada composto em sulfóxido de dimetilo a 10 mM. Para a determinação da concentração inibidora mínima, preparou-se diluições por desdobramentos sucessivos em caldo 2xYT (tiptona 16 g/1, extracto de levedura 10 g/1, cloreto de sódio 5 g/1 obtido de BIO 101 Inc, 1070 Joshua Way, Vista, Calif. 92083, USA) para produzir 0,05 ml de meio contendo composto por poço. Preparou-se inóculos de culturas multiplicadas dum dia para o outro em caldo 2xYT a 37 °C. Ajustou-se as densidades celulares a uma absorvância a 660 nm de (Α660 ) = 0,1 ; as preparações padronizadas de densidade óptica foram diluídas a 1:1000 em caldo 2xYT; e cada poço foi inoculado com 0,05 ml das bactérias diluídas. Incubou-se placas microtítulo a 37 °C durante 18 horas num incubador humidificado. Os compostos de ensaio tinham MIC de 200 μΜ ou menos contra um ou ambos os organismos de ensaio.

Lisboa, 27 de Fevereiro de 2007

Claims (13)

1. ΡΕ1079819 1 REIVINDICAÇÕES 1. Utilização de composto de fórmula (I) ou de um seu sal farmaceuticamente ou veterinariamente aceitável para o fabrico de um medicamento para inibir o crescimento bacteriano:

   em que: Ri representa alquilo Ci-C6, alquilo Ci-C6 substituído com um ou mais átomos de halogéneo, amino, hidroxilo ou alcoxilo Ci-C6; R2 representa um grupo Ri0- (X) n- (ALC)m- em que Rio representa hidrogénio, ou um grupo alquilo Ci-C6, alcenilo C2-C6, alcinilo C2-C6, cicloalquilo, arilo ou hete-rociclilo, qualquer um dos quais pode estar não substituído ou substituído com alquilo Ci-C6, alcoxilo Ci-C6, hidroxilo, mercapto, alquil(Ci-C6)tio, amino, halo (incluindo fluoro, cloro, bromo e iodo), trifluorometilo, ciano, nitro, -COOH, -conh2, -COORa, -NHCORa, -CONHRa, -NHRa, -NRaRb OU -conrarb em que Ra e RB são independentemente um grupo alquilo C1-C6, e ALC representa um radical divalente alquileno C1-C6, alcenileno C2-C6 ou alcinileno C2-C6 linear ou ramificado, e pode estar interrompido por uma ou mais ligações -NH-, -Ciou -S- não adjacentes, x representa -NH-, -0- ou -S-, e 2 ΡΕ1079819 m e n são independentemente 0 ou 1; e A representa (i) um grupo de fórmula (IA) ou (ID)

   (IA) -nr5r6 (ID) em que: R3 representa hidrogénio ou alquilo Ci-Cê e R4 representa a cadeia lateral de um alfa-aminoácido natural ou não natura, e R5 e R6 representam independentemente hidrogénio, ou alquilo Ci-Cs opcionalmente substituído, cicloalquilo, arilo, aril(alquilo Ci-Cg), heterocíclico ou heterocíclico(alquilo Ci-C6), ou R5 e Rô quando tomados em conjunto com o átomo de azoto ao qual eles estão ligados formam um anel heterocíclico saturado opcionalmente substituído de 3 até 8 átomos, anel esse que está opcionalmente fundido com um anel carbocíclico ou a um segundo anel heterocíclico.
2. 2. Utilização como reivindicada na reivindicação 1, em que Ri representa alquilo Ci-Cê; R3 representa hidrogénio ou alquilo Ci-C6; R4 representa a cadeia lateral de um alf a-aminoácido natural ou não natural; R5 e R6 representam independentemente hidrogénio, alquilo Ci-Cê ou cicloalquilo, ou R5 e R6 tomas em conjunto com o átomo de 3 ΡΕ1079819 azoto ao qual eles estão ligados formam um anel heterocíclico saturado opcionalmente substituído de 3 até 8 átomos; e R7 representa hidrogénio ou um grupo acilo.
3. 3. Utilização como reivindicada na reivindicação 1 ou na reivindicação 2, em que Ri é metilo.
4. 4. Utilização como reivindicada em qualquer uma das reivindicações 1 até 3, em que R2 é: alquilo Ci-C6, alcenilo C3-C6 ou alcinilo C3-C6; fenil(alquilo Ci-C6)-, fenil(alcenilo C3-C6)- ou fe-nil(alcinilo C3-C6)- opcionalmente substituído no anel de fenilo; cicloalquil(alquilo Ci-C6)-, cicloalquil(alcenilo C3-Ce) - ou cicloalquil(alcinilo C3-C6)- opcionalmente substituído no anel de cicloalquilo; heterociclil(alquilo Ci-C6)-, heterociclil(alcenilo C3-Ce)- ou heterociclil(alcinilo C3-C6)- opcionalmente substituído no anel de heterociclilo.
5. 5. Utilização como reivindicada na reivindicação 3, em que R2 é metilo, etilo, n-propilo, n-butilo, n-pentilo, n-hexilo, 2-metoxietilo, prop-2-in-l-ilo, 3-fenilprop-2-in-l-ilo, 3-(2-clorofenil)prop-2-in-l-ilo, but-2-in-l-ilo, ciclopentilmetilo, ciclopentiletilo, ciclopen-tilpropilo, fenilpropilo, 4-clorofenilpropilo, 4-metilfe-nilpropilo ou 4-metoxifenilpropilo.
6. 6. Utilização como reivindicada na reivindi- 4 ΡΕ1079819 cação 3, em que R2 é n-butilo, benzilo ou ciclopentilmeti- lo.
7. 7. Utilização como reivindicada em qualquer uma das reivindicações 1 até 6, em que R3 é hidrogénio ou metilo.
8. 8. Utilização como reivindicada na reivindicação 1, em que R4 é: um grupo -[Alc]nR9 em que Alc é m grupo alquileno C1-C6 ou alcenileno C2-C6 opcionalmente interrompido por um ou mais átomos -0- ou -S- ou grupos -N(Ri2)- [onde Ri2 é um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo Ci-Cô] , n é 0 ou 1, e R9 é um grupo cicloalquilo ou ciclo-alcenilo opcionalmente substituído; ou um grupo benzilo substituído no anel de fenilo por um grupo de fórmula OCH2COR8 em que R8 é hidroxilo, amino, alcoxilo Ci-C6, fenilalcoxilo (Ci-C6), (al-quil Ci-C6) amino, di(alquil Ci-C6) amino, (fenil (alquil C1-C6))amino; ou um grupo heterocíclico-alquilo(Ci-Cê), o qual está não substituído ou mono- ou di-substituído no anel heterocíclico com halo, nitro, carboxilo, alcoxilo Ci-Cê, ciano, alcanoílo C1-C6, trifluoro-metilo, alquilo Ci-Cô, hidroxilo, formilo, amino, (alquil Ci-C6)amino, di-(alquil Ci-Cô)amino, mercapto, (alquil Ci-C6)tio, hidroxi(alquilo Ci-C6), mercapto (alquilo Ci-Cê) ou alquil (Ci-C6) fenilmetilo; ou um grupo -CRaRbRc no qual: 5 ΡΕ1079819 cada um de Ra, Rb e Rc é independentemente hidrogénio, alquilo Ci-C6, alcenilo C2-C6, alci-nilo C2-C6, fenil(alquilo Ci-C6), cicloalquilo(C3-C8); ou Rc é hidrogénio e Ra e Rb são independentemente fenilo ou heteroarilo tal como piridilo; ou Rc é hidrogénio, alquilo Ci-C6, alcenilo C2-C6, alcinilo C2-C6, fenil(alquilo Ci-C6) OU cicloalquilo C3-C8, e Ra e Rb em conjunto com o átomo de carbono ao qual eles estão ligados formam um cicloalquilo de 3 até 8 membros ou um anel heterociclico de 5 até 8 membros; ou Ra, Rb e Rc em conjunto com o átomo de carbono ao qual eles estão ligados formam um anel tricíclico (por exemplo adamantilo); ou Ra e Rb são, cada um, independentemente alquilo Ci-C6, alcenilo C2-C6, alcinilo C2-C6, fenil(alquilo Ci-C6) ou um grupo como definido para Rc abaixo que não hidrogénio, ou Ra e Rb em conjunto com o átomo de carbono ao qual eles estão ligados formam um anel cicloalquilo ou heterociclico, e Rc é hidrogénio, -OH, -SH, halogéneo, -CN, -C02H, perfluoroalquilo C1-C4, -CH2OH, -C02 (alquilo Ci-C6), -0(alquilo 02-06), -0(alcenilo C2-C6), -S(alquilo 0ι-0ε), SO(alquilo Οι-Οε), S02(alquilo Ci-C6), -S(alcenilo C2-C6), -SO(alcenilo C2-C6), -S02 (alcenilo C2-C8) ou um grupo -Q-W em que Q representa uma ligação ou -0-, -S-, -SO- ou -S02- e W representa um grupo fenilo, fenilalquilo, cicloalquilo C3-C8, cicloalquil (C3-C8) alquilo, cicloalcenilo C4-C8, 6 ΡΕ1079819 cicloalcenil(C4-C8)alquilo, heteroarilo ou heteroaril-alquilo, grupo W esse que pode estar opcionalmente substituído com um ou mais substituintes independentemente seleccionados de, hidroxilo, halogéneo, -CN, -C02H, -C02 (alquilo Ci-C6), -CONH2, -CONH (alquilo Ci- C6), -CONH(alquilo Ci-C6)2, -CHO, -CH2OH, perfluo-roalquilo C1-C4, -0(alquilo Ci-C6), -S(alquilo Ci-C6), -SOalquilo (Ci-Cô) , -S02 (alquilo Ci-Cô), -N02, -NH2, -NHalquilo (Ci-Cg) , -N(alquil Ci-C6)2, -NHCO (alquilo Ci-C6), alquilo Ci-C6, alcenilo C2-C6, alcinilo C2-C6, cicloalquilo C3-C8, cicloalcenilo C4-C8, fenilo ou ben-zilo.
9. 9. Utilização como reivindicada na reivindicação 8, em que R4 é fenilo, terc-butilo, isobutilo, benzilo, ciclo-hexilmetilo, piridin-3-ilmetilo, terc-buto-ximetilo, terc-butilo, 1-benziltio-l-metiletilo, 1-metil-tio-l-metiletilo ou 1-mercapto-l-metiletilo.
10. 10. Utilização como reivindicada na reivindicação 8, em que R4 é terc-butilo.
11. 11. Utilização como reivindicada em qualquer uma das reivindicações 1 até 10, em que R5 e Rô são independentemente hidrogénio, metilo, etilo ou ciclo-hexilo.
12. 12. Utilização como reivindicada na reivindicação 1, em que R5 e R6 quando tomados em conjunto com o átomo de azoto ao qual eles estão ligados formam um anel 7 ΡΕ1079819 monocíclico N-heterocíclico saturado de 5 até 8 membros o qual está ligado através do átomo de N e o qual contém opcionalmente NRn em que Rn é hidrogénio, alquilo Cq-C6, benzilo, acilo ou um grupo de protecção amino, com 0, S, SO ou S02 como um membro endociclico, e está opcionalmente substituído em um ou mais átomos de C com hidroxilo, alquilo Ci-C6, alcoxilo Ci-C6, oxo, oxo cetalisado, amino, mono(alquil Cq-Ce)amino, di(alquil Ci-C6)amino, carboxilo, alcoxi(Ci-Cê)carbonilo, hidroximetilo, alcoxi (Ci-Cg)metilo, carbamoilo, mono(alquil Ci-C6)carbamoilo, di(alquil cq-Ce)carbamoilo ou hidroxiimino.
13. 13. Utilização como reivindicada na reivindicação 10 em que R5 e R6 quando tomados em conjunto com o átomo de azoto ao qual eles estão ligados formam um anel 1-pirrolidinilo, piperidin-l-ilo, 1-piperazinilo, hexa-hidro-1-piridazinilo, morfolin-4-ilo, tetra-hidro-1,4-tiazin-4-ilo, 1-óxido de tetra-hidro-1,4-tiazin-4-ilo, 1,1-dióxido de tetra-hidro-1,4-tiazin-4-ilo, hexa-hidroazipino ou octa-hidroazocino substituído ou não substituído. Lisboa, 27 de Fevereiro de 2007