PT1025088E - Derivados de imidazole e sua utilizacao como inibidores de farnesil proteino transferase - Google Patents

Derivados de imidazole e sua utilizacao como inibidores de farnesil proteino transferase Download PDF

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PT1025088E
PT1025088E PT80103281T PT98947694T PT1025088E PT 1025088 E PT1025088 E PT 1025088E PT 80103281 T PT80103281 T PT 80103281T PT 98947694 T PT98947694 T PT 98947694T PT 1025088 E PT1025088 E PT 1025088E
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Description

1
DESCRIÇÃO "DERIVADOS DE IMIDAZOLE E SUA UTILIZAÇÃO COMO INIBIDORES DE FARNESIL PROTEÍNO TRANSFERASE"
Esta invenção relaciona-se com compostos que inibem a farnesilação de produtos de genes ras mutantes através da inibição da enzima farnesil-proteíno transferase (FPTase). A invenção também se relaciona com métodos para o fabrico dos compostos, com composições farmacêuticas e com métodos de tratamento de doenças, especialmente cancro, que são mediadas através da farnesilação de ras.
Crê-se que o cancro envolve a alteração da expressão ou função dos genes que controlam o crescimento e a diferenciação celulares. Embora não se pretenda ficar limitado por considerações teóricas o texto seguinte apresenta os antecedentes científicos de ras no cancro. Os genes ras frequentemente sofrem mutação em tumores. Os genes ras codificam proteínas de ligação ao trifosfato de guanosina (GTP) que se crê estarem envolvidas na transdução de sinais, proliferação e transformação maligna. Os genes ras Η, K, e N foram identificados como formas mutantes de ras (Barbacid M., Ann. Rev. Biochem. 1987, 56:779-827). A modificação pós- translacional de proteína de ras é necessária para a actividade biológica. Crê-se que a farnesilação de ras catalisada por FPTase é um passo essencial no processamento de ras. Ocorre por transferência do grupo farnesilo do pirofosfato de farnesilo (FPP) para uma cisteína no tetrapéptido C-terminal de ras num motivo estrutural chamado a caixa CAAX. Após modificações pós-translacionais adicionais, incluindo clivagem proteolítica no resíduo de cisteína da caixa CAAX e metilação do carboxilo da cisteína, o ras é capaz de se ligar à membrana celular para transmissão de sinais de crescimento para o interior da célula. 2
Em células normais crê-se que o ras activado actua em conjunto com factores do crescimento para estimular o crescimento celular. Em células tumorais crê-se que as mutações no ras fazem com que este estimule a divisão celular mesmo na ausência de factores do crescimento (Travis J. , Science 1993, 260:1877-1878), possivelmente por estar permanentemente na forma activada por GTP em vez de ser reciclado à forma inactivada por GDP. A inibição da farnesilação de produtos de gene ras mutantes terminará ou reduzirá a activação.
Uma classe de inibidores conhecidos de farnesil transferase baseia-se em análogos de pirofosfato de farnesilo; ver por exemplo pedido de patente Europeia EP 534546 da Merck. Foram descritos inibidores de farnesil transferase baseados no mimetismo da caixa CAAX. Reiss (1990) em Cell 62:81-8 descreve tetrapeptidos tais como CVIM (Cys-Val-Ile-Met). James (1993) em etsiçmem ICO11*37-1943 dtiemv eempoefeee pepfeidemiméfeiee* baseados em benzodiazepinas. Lerner (1995) em J. Biol. Chem. 270:26802 e Eisai no Pedido de Patente Internacional WO 95/25086 descrevem compostos peptidomiméticos adicionais baseados em Cys como o primeiro resíduo. A Bristol-Myers Squibb no Pedido de Patente Europeia EP 696593 descreveram inibidores de farnesil transferase com um resíduo de 4-sulfanilpirrolidina na primeira posição.
De acordo com um aspecto da presente invenção é proporcionado um composto de Fórmula (1):
Ar Í12)R13
Ar'
(CH2) p-Ar Fórmula 1 em que Ar^ representa: 3
r6 é hidrogénio, Ci_4alquilo, hidroxiCi-4alquilo, halogenoCi-4alquilo, dihalogenoCi-4alquilo, Ci-4alcoxi, Ci-4alcoxiCi- 4alquilo, sulfanilCi-4alquilo, aminoCi_4alquilo, N- (Ci_4_ alquil)aminoCi-4alquilo, N,N-di(Ci_4alquil)aminoCi_4alquilo ou fenilCi-4alquilo; m é 0, 1 ou 2;
Rl2 e R13 são independentemente hidrogénio ou Ci-4alquilo;
Ar2 é fenilo ou heteroarilo;
p é 0 ou 1;
Ar3 é fenilo, piridinilo, piridazinilo, ' pirimidilo ou pirazinilo, sendo o anel substituído nos átomos de carbono do anel por R2 e -(0¾) nR3 e em que Ar3 está ligado a
Ar1C(R12)R13CH(Ar2)0- por um átomo de carbono do anel; R2 é um grupo de Fórmula (2):
em que R7 é hidrogénio ou Ci_4alquilo, R8 ê -(CH2)q-R10 em que q é 0-4 e R10 é Ci_4alquilsulfanilo, Ci-4alquilsulfinilo, Ci_ 4 4alquilsulfonilo, hidroxilo, Ci-4alcoxi, carbamoílo, N-C ±-4alquil carbamoílo, N,N- (diCi-4alquil)carbamoílo, Ci-4alquilo, fenilo, tienilo, ou Ci_4alcanoílamino, R9 é hidroxilo, Ci-6alcoxi, C3_9cicloalquiloxi, heterocicliloxi, heterociclilCi-4alcoxi ou -NH-SO2-R11 em que R11 representa trifluorometilo, Ci_4alquilo, fenilo, heteroarilo, arilCi-4alquilo ou heteroarilCi-4alquilo; ou R2 representa uma lactona de Fórmula (3)
Fórmula (3 tendo o grupo de Fórmula (2) ou (3) a configuração L ou D no carbono alfa quiral no correspondente amino ácido livre; n é 0, 1 ou 2; R3 é fenilo ou heteroarilo; os anéis fenilo e heteroarilo em R3, R5, R6, R9, R11 e Ar2 são independentemente opcionalmente substituídos em átomos de carbono do anel por até três substituintes seleccionados de Cl-4alquilo, halogéneo, hidroxilo, Ci-4alcoxi, Ci-4alcoxicarbonilo, Ci-4alcanoílo, Ci-4alcanoíloxi, amino, Ci_ 4alquilamino, di(Ci-4alquil)amino, Ci-4alcanoílamino, nitro, ciano, carboxilo, tiol, Ci-4alquilsufanilo, Ci_ 4alquilsulfinilo, Ci-4alquilsulfonilo, Ci-4alcanossulfonamido, N- (Ci_4alquilsulfonil)-JV-Ci-4alquil-amino, aminossulfonilo, W(Ci-4alquil)aminossulfonilo, N, N-di(Ci_4alquil) aminossulfonilo, carbamoílo, N- (Ci_4alquil)-carbamoílo, N,N-(diCi-4alquil)carbamoílo, carbamoílCi-4alquilo, N-(Ci_4alquil) carbamoílCi-4alquilo, N, N- (diCi-4alquil)carbamoíl-Ci-4-al- quilo, hidroxiCi-4alquilo e Ci-4alcoxiCi-4alquilo e nos grupos NH do anel (substituindo hidrogénio) por Ci-4alquilo, Ci_ 5 4alcanoílo, Ci-4alquilsulfonilo, halogenoCi_4alquilo/ difluoro -metilo ou trifluorometilo; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco ou solvato.
Nesta especificação o termo genérico "alquilo" inclui grupos alquilo tanto de cadeia linear como de cadeia ramificada. Contudo as referências a grupos alquilo individuais tais como "propilo" são específicas apenas para a versão de cadeia linear e as referências a grupos alquilo de cadeia ramificada individuais tais como "isopropilo" são específicas apenas para a versão de cadeia ramificada. Aplica-se uma convenção análoga a outros termos genéricos.
Entender-se-á que, na medida em que certos dos compostos de Fórmula (1) definidos acima podem existir em formas opticamente activas ou racémicas devido a um ou mais átomos de carbono assimétricos, a invenção inclui na sua definição qualquer dessas formas opticamente activas ou racémicas que possui a propriedade de inibir FTPase. A síntese de formas opticamente activas pode ser realizada por técnicas correntes da qúímica orgânica bem conhecidas na arte, por exemplo por síntese a partir de materiais de partida opticamente activos ou por resolução de uma forma racémica. Analogamente, as propriedades inibidoras contra FTPase podem ser avaliadas utilizando as técnicas laboratoriais correntes aqui referidas adiante. O termo "heterociclilo" refere-se a um anel monocíclico com 5 ou 6 membros contendo 1 até 3 heteroátomos seleccionados de azoto, oxigénio e enxofre. O termo "heteroarilo" refere-se a um anel heterocíclico monocíclico com 5-10 membros contendo até 3 heteroátomos seleccionados de azoto, oxigénio e enxofre. 6 O termo "halogéneo" refere-se a flúor, cloro, bromo e iodo. 0 termo "carbamoílo" refere-se a -C(0)NH2. 0 termo "BOC" refere-se a terc-butoxicarbonilo.
Exemplos de Ci-4alquilo incluem metilo, etilo, propilo, isopropilo, sec-butilo e terc-butilo; exemplos de Ci_4alcoxi incluem metoxi, etoxi e propoxi; exemplos de Ci_4alcanoílo incluem formilo, acetilo e propionilo; exemplos de Ci_ 4alcanoíloxi incluem acetoxi e propioniloxi; exemplos de Ci_ 4alquilamino incluem metilamino, etilamino, propilamino, isopropilamino, sec-butilamino e terc-butilamino; exemplos de di(Ci_4alquil)amino incluem di-metilamino, di-etilamino e N-etil-i^-metilamino; exemplos de Ci_4alcano£lamino incluem acetamido e propionilamino; exemplos de Ci-4alcoxicarbonilo incluem metoxicarbonilo, etoxicarbonilo e propoxicarbonilo; exemplos de Ci_4alquilsulfanilo incluem metilsulfanilo, etilsulfanilo, propilsulfanilo, isopropilsulfanilo, sec-butil-sulfanilo e terc-butilsulfanilo; exemplos de Ci-4alquilsul- finilo incluem metilsulfinilo, etilsulfinilo, propilsulfi-nilo, isopropilsulfinilo, sec-butilsulfinilo e terc-butil-sulfinilo; exemplos de Ci_4alquilsulfonilo incluem metil- sulfonilo, etilsulfonilo, propilsulfonilo, isopropilsulfoni-lo, sec-butilsulfonilo e terc-butilsulfonilo; exemplos de N-(Ci-4alquil) carbamoílo incluem N-metilcarbamoílo e Tí-etil-carbamoílo; exemplos de N,N-(diCi_4alquil)carbamoílo incluem N, N-dimetilcarbamoílo e N-metil-N-etilcarbamoilo; exemplos de Ci_4alcanossulfonamido incluem metanossulfo-namido, etanossul-fonamido e propanossulfonamido; exemplos de Ci_4alquilsul-fonil-W-Ci_4alquilamino incluem metilsulfonil-W-metilamino, etilsulfonil-W-metilamino e propilsulfonil-ií-metilamino; exemplos de fluoroCi-4alquilo incluem fluorometilo, 2-fluoro-etilo e 3-fluoropropilo; exemplos de difluoroCi_4alquilo incluem di- fluorometilo, 2,2-difluoroetilo e 3,3-difluoro-propilo; exemplos de carbamoílCi_4alquilo incluem carbamoíl-metilo, carba- moíletilo e carbamoílpropilo; exemplos de N-(Ci_4alquil)- carbamoílCl-4alquilo incluem W-metil-carbamo£lmetilo e N- 7 etil-carbamoíletilo; exemplos de N,N- (diCi_4alquil)-carbamoíl-
Ci_4alquilo incluem N, JV-dimetilcarbamoíletilo e N-metil-N-etilcarbamoíletilo; exemplos de hidroxiCi_4alquilo incluem hidroximetilo, hidroxietilo, hidroxipropilo, 2-hidroxipropilo, 2 -(hidroximetil)propilo e hidroxibutilo; exemplos de Ci_ 4alcoxiCi_4alquilo incluem metoxibutilo; exemplos de sulfanilmetilo, sulfaniletilo, N-(Ci-4alguil)aminoCi-4alguilo N-etil-aminoetilo. metoxietilo, etoxietilo e sulfanilCi_4alquilo incluem sulfanilpropilo; e exemplos de incluem N-metil-aminometilo e
Exemplos de sistemas anelares heteroarílicos com 5 ou 6 membros incluem imidazole, triazole, pirazina, pirimidina, piridazina, piridina, isoxazole, oxazole, isotiazole, tiazole e tiofeno.
Preferencialmente o grupo NH no imidazole está não-substituído ou substituído por Ci-4alquilo.
Exemplos de anéis heterociclilo incluem pirrolidinilo, morfolinilo, piperidinilo, dihidropiridinilo e dihidro- pirimidinilo.
Os heteroátomos preferidos são N e S, especialmente N. Em geral, a ligação de anéis heterocíclicos a outros grupos é feita através de átomos de carbono.
Exemplos de valores para R8 na Fórmula (2) são cadeias laterais de amino ácidos lipófilos incluindo por exemplo metionina, fenilglicina, fenilalanina, serina, leucina, isoleucina ou valina. É preferida a configuração L no amino ácido livre correspondente. Exemplos de cadeias laterais de amino ácidos estão apresentados a seguir. δ
Amino Ácido Cadeia Lateral metionina -CH2-CH2-S-CH3 fenilglicina Ph fenilalanina -CH2-Ph tienilalanina -CH2-tien-2-ilo serina -CH2OH ou um seu éter Ci-4alquílico (preferencialmente metílico) leucina -CH2-CHMe2 homoserina -CH2-CH2-OH ou um seu éter Ci_4alquílico (preferencialmente metílico) N-acetil-lisina -CH2-CH2-CH2-CH2-NH-CO-CH3 A lactona de Fórmula (3) pode ser formada a partir de um grupo de Fórmula (2) quando R^ é OH para dar um carboxilo e R® é -CH2-CH2-OH em que R® e R® conjuntamente perdem uma molécula de água para formar parte de um anel heterocíclico de dihidrofuran-2-ona.
Preferencialmente R^-2 e R^® são independentemente hidrogénio ou metilo.
Mais preferencialmente e R1® são hidrogénio.
Preferencialmente Ar1 tem a fórmula (A) ou (B).
Preferencialmente R® é hidrogénio, Ci_4alquilo, hidroxiCi_4alquilo, aminoCi_4alquilo, fluoroCi-4-alquilo, difluoroCi_4alquilo, Ci-4alcoxi ou Ci-4alcoxiCi_4alquilo.
Mais preferencialmente R® é hidrogénio, metilo, fluorometilo, difluorometilo, metoxi ou metoximetilo.
Mais preferencialemente ainda R6 é hidrogénio ou metilo.
Preferencialmente m é 0 ou 1. 9
Preferencialmente R5 é hidrogénio ou metilo.
Mais preferencialmente r5 é hidrogénio.
Num aspecto particular Ar1 é l-metilimidazol-5-ilo.
Valores preferidos de heteroarilo para Ar2 são tiazolilo, piridilo, triazolilo, pirimidilo, pirazinilo ou piridazinilo, especialmente tiazol-2-ilo. Quando Ar2 é fenilo, é preferencialmente não-substitu£do ou monossubstituído. Num aspecto, quando Ar2 é fenilo, é não-substituído. Noutro aspecto quando Ar2 é fenilo, é monossubstituído na posição para.
Substituintes preferidos para átomos de carbono em Ar2 incluem Ci_4alquilo, halogéneo, nitro, ciano e Ci-4alcoxiCi-4alquilo.
Substituintes mais preferidos para átomos de carbono do anel em Ar2 incluem metilo, etilo, flúor, cloro, ciano, metoximetilo e etoxietilo.
Quando Ar2 é fenilo é preferencialmente substituído por flúor.
Quando Ar2 é tiazolilo é preferencialmente não-substituído.
Preferencialmente Ar2 é 4-fluorofenilo ou tiazolilo.
Mais preferencialmente Ar2 é 4-fluorofenilo ou tiazol-2- ilo.
Preferencialmente Ar2 é fenilo ou piridilo.
Mais preferencialmente Ar2 é fenilo. 10
Preferencialmente, quando n é 0, Ar3 é substituído por R2 na posição 4 e -(CH2)nR3 na posição 3 ou 5 e quando n é 1 ou 2, Ar3 é substituído por R2 na posição 3 ou 5 e -(CH2)nR3 na posição 4. As posições indicadas são em relação ao ponto de ligação de Ar3 a -(CH2)p-.
Preferencialmente n é 0 ou 2.
Num aspecto particular n é 0.
Num aspecto p é 0.
Noutro aspecto p é 1.
Preferencialmente R2 é um grupo de fórmula:
R O r7 é preferencialmente hidrogénio ou metilo, especialmente hidrogénio. Em R®, q preferencialmente é 1-4, mais preferencialmente 1 ou 2, especialmente 2.
Dentro de R®, RÍ® é preferencialmente Ci-4alquilsulfanilo, Ci-4alquilsulfinilo, Ci-4alquilsulfonilo, hidroxilo ou Ci_4alcoxi. Mais preferencialmente R3® é metilsulfanilo ou metilsulfonilo. R® é preferencialmente hidroxilo, Ci-4alcoxi, C3-9Cicloalquiloxi, heterocicliloxi ou heterociclilCi_4alcoxi.
Mais preferencialmente R® é hidroxilo, metoxi, propoxi, butoxi, terc-butoxi, ciclopentiloxi, piperidin-4-iloxi ou morfolinoCi-4alquilo. Mais preferencialmente, R® é metoxi, propoxi, butoxi, terc-butoxi ou ciclopentiloxi. 11
Preferencialmente em R9 é fenilo.
Substituintes preferidos para grupos NH em grupos heterocíclicos em incluem metilo, etilo, acetilo, propionilo, fluorometilo, difluorometilo e trifluorometilo.
Substituintes mais preferidos para grupos NH em grupos heterocíclicos em R^ incluem metilo e acetilo.
Substituintes preferidos para átomos de carbono do anel em grupos fenilo ou heteroarilo em R^1 incluem metilo, halogéneo, Ci-4alcanoílo, nitro, ciano, Ci-4alquilsulfinilo, Ci-4alquilsulfonilo, carbamoílo, Ci-4alquilcarbamoílo e diCi-4alquilcarbamoílo.
Preferencialmente R3 é fenilo, piridilo ou tiazolilo.
Mais preferencialmente R3 é fenilo.
Substituintes preferidos para átomos de carbono do anel em R3 incluem Ci_4alquilo, halogéneo, Ci-4alcoxi, nitro, ciano e Ci_4alcoxiCi_4alquilo.
Substituintes mais preferidos para átomos de carbono do anel em R3 incluem metilo, flúor, cloro, metoxi, ciano e metoximetilo.
Um substituinte preferido para um grupo NH do anel num grupo heteroarilo em R3 é Ci-4alquilo, particularmente metilo.
Quando R3 é fenilo preferencialmente está substituído na posição 4.
Preferencialmente n é 0 ou 2. 12
Um composto preferido da invenção é um composto de Fórmula (1) em que:
Ar1 tem a fórmula (A) ou (B); R5 é hidrogénio ou metilo; R6 é hidrogénio, Ci-4alquilo, fluoroCi-4alquilo, difluoroCi-4alquilo, Ci_4alcoxi ou Ci_4alcoxiCi-4alquilo; m é 0 ou 1; R12 e R13 são independentemente hidrogénio ou metilo;
Ar2 é fenilo ou tiazolilo;
Ar3 é fenilo ou piridilo, sendo o anel substituído nos átomos de carbono do anel por R2 e -(CH2) nR3 e em que Ar3 está ligado a Ar^C(R12)R13CH(Ar2)0- por um átomo de carbono do anel; e n é 0, 1 ou 2; R2 tem a fórmula (2) em que R7 é hidrogénio ou metilo; R3 é - (CH2) q-R·'·3 em que q é 0-4 e R^3 é Ci-4alquilsulfanilo, Ci-4alquilsulfinilo, Ci-4alquilsulfonilo, hidroxilo ou Ci-4alcoxi; R9 é hidroxilo, Ci_4alcoxi, C3_9CÍcloalquiloxi, heterocic-liloxi ou heterociclilCi_4alcoxi; ou R2 tem a fórmula (3); R3 é fenilo, piridilo ou tiazolilo; e os anéis fenilo, heteroarilo e heterociclilo em R3, R9 e Ar2 são 13 independentemente opcionalmente substituídos em átomos de carbono do anel por um ou dois substituintes seleccionados de Cl-4alquilo, halogéneo, Ci_4alcoxi, Ci-4alcanoílo, nitro, ciano, Ci_4alquilsulfinilo, Ci_4alquilsulfonilo, carbamoílo, (Ci_4alquil)carbamoílo e diCi_4alquilcarbamoílo; e opcionalmente substituídos nos grupos NH do anel por Ci^alquilo, Ci-4alcanoílo, fluorometilo, difluorometilo ou trifluorometilo; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco ou solvato.
Um composto mais preferido da invenção é um composto de Fórmula (1) em que:
Ar1 tem a fórmula (A) ou (B); r5 é hidrogénio ou metilo; r6 é hidrogénio, metilo, fluorometilo, difluorometilo, metoxi ou metoximetilo; m é 0 ou 1; R12 e R13 são independentemente hidrogénio ou metilo;
Ar2 ê fenilo ou tiazolilo, opcionalmente substituído nos átomos de carbono do anel por um ou dois substituintes seleccionados de Ci_4alquilo, halogéneo, nitro, ciano e Ci-4alcoxiCi_4alquilo;
Ar2 é fenilo ou piridilo; sendo o anel substituído nos átomos de carbono do anel por R2 e -(CH2)nR3 e em que Ar3 está ligado a Ar^-C (R3-2) R13CH (Ar2) O- por um átomo de carbono do anel; e n é 0, 1 ou 2; R2 tem a fórmula (2) em que R^ é hidrogénio ou metilo; 14 R8 é -(CH2)q-R10 era que q é 1 ou 2, e R10 é metilsulfanilo ou metilsulfonilo; é hidroxilo, metoxi, propoxi, butoxi, terc-butoxi, ciclopentiloxi, piperidin-4-iloxi, ou morfolinoCi_4alquilo; ou R2 tem a fórmula (3) ; R·2 é fenilo opcionalmente substituído por um ou dois substituintes seleccionados de Ci-4alquilo, halogéneo, Ci_ 4alcoxi, nitro, ciano e Ci-4alcoxiCi-4alquilo; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco ou solvato.
Um composto ainda mais preferido da invenção é um composto de fórmula (1) em que:
Ar1 tem a fórmula (A) ou (B) R^ é hidrogénio ou metilo; r6 é hidrogénio ou metilo; m é 0 ou 1; rH e r12 são hidrogénio;
Ar2 é fenilo ou tiazol-2-ilo em que o anel fenilo está opcionalmente substituído por flúor;
Ar2 é fenilo; sendo o anel substituído nos átomos de carbono do anel por R2 e -(CH2)nR3 e em que Ar2 está ligado a
Ar^C(r!2)r13ch(Ar2)O- por um átomo de carbono do anel; e n é 0, 1 ou 2; 15 R2 tem a fórmula (2) em que R7 é hidrogénio; R8 é -(CH2)q-R10 em que q é 2, e R10 é metilsulfanilo ou metilsulfonilo; R^ é hidroxilo, metoxi, propoxi, butoxi, terc-butoxi, ciclopentiloxi, piperidin-4-iloxi, ou 2-morfolinoprop-2-ilo; R3 é fenilo opcionalmente substituído por flúor; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco ou solvato.
Compostos particulares da presente invenção incluem: (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-[2-(imidazol-l-il)-1-(4-fluoro-fenil)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de metilo; ácido (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-[2-(imidazol-l-il)-1- (4-fluorofenil)etoximetil]benzoílamino)-4-metilsulfanilbutírico; (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-[2-(imidazol-l-il)-1-(4-fluoro-fenil)etoximetil]benzilamino)-4-metilsulfanilbutirato de terc- butilo; ácido (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-[2-(imidazol-l-il)-1-(4-fluorofenil)etoximetil]benzoílamino)-4-metilsulfanilbutírico; ácido (2S) -2-(2-(4-fluorofenil)-4-[2-(imidazol-l-il)-1-(tiazol-2-il)etoximetil]benzoílamino)-4-metilsulfanilbutírico; (2 S)-2-(2-(4 -fluorofenetil)-5-[2-(imidazol-l-il)-1-(4-fluorofenil) etoximetil]benzoílamino)-4-metilsulfanilbutirato de metilo; 16 ácido (2S)-2-{2-(4-fluorofenetil)-5-{2-(imidazol-l-il)-1- (4-fluorofenil)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanilbutírico; (2S)-2-{2-(4-fluorobenzil)-5-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il) etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de metilo; ácido (2S)-2-{2-(4-fluorobenzil)-5-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanilbutírico; (2S)-2-{2-fenil-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoximetil] benzoílamino} -4-metilsulfanilbutirato de metilo; ou ácido (2S)-2-{2-fenil-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)-etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanilbutírico; (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il) etoximetil]benzoílamino}-2-metil-4-metilsulfanilbutirato de metilo; ácido (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoximetil]benzoílamino}-2-metil-4-metil-sulfanilbutírico; N- (4-clorobenzenossulfonil)-(2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanilbutiramida; (2S)-2-{2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il) etoximetil] benzoílamino} -4-metilsulfanilbutirato de 2-(morfolinometil)prop-2-ilo; (2S)-2-{5-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2- (4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de metilo; ácido (2S)-2-{5-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfanilbutírico; 17 (2S)-2-{5 - [1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2-(4 -fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de terc- butilo; (2S)-2-{5 - [1- (4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de ciclopentilo; (2S)-2-{5- [1- (4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfonilbutirato de terc- butilo; ácido 2-{5-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2- (4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfonilbutírico; (2S)-2-(5- [1- (tiazol-2-il)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de metilo; ácido (2S)-2-{5-[l-(tiazol-2-il)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2- (4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfanilbutírico; (2S)-2-{5-[1-(tiazol-2-il)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2-(4-fluoro-fenetil)benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de terc- butilo,- (2S)-2-{5-[1-(tiazol-2-il)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2- (4-fluoro-fenetil)benzoílamino}-4-metilsulfonilbutirato de terc- butilo; ácido (2S)-2-{5-[1-(tiazol-2-il)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2- (4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfonilbutírico; (2S)-2 -{5 -[1-(4-fluorofenil)-2-(2-metilimidazol-l-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de metilo; ácido (2S)-2-(5-[1-(4-fluorofenil)-2-(2-metilimidazol-l-il)-etoxi]-2- (4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfanilbutírico; 18 (2S)-2-{4-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2- (4-fluorofenil)benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de terc- butilo; (2S)-2-{4-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2-(4-fluorofenil)benzoílamino}-4-metilsulfonilbutirato de terc- butilo; ácido 2-{4- [1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2-(4-fluorofenil)benzoílamino}-4-metilsulfonilbutírico; (2S)-2-{5-[2-(4-metilimidazol-l-il)-1-(tiazol-2-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de metilo; (2S)-2-{5-[2-(4-metilimidazol-l-il)-1-(tiazol-2-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfonilbutirato de terc-butilo; ácido (2S)-2-{5-[2-(4-metilimidazol-l-il)-1-(tiazol-2-il)etoxi]-2-(4 -fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfanilbutírico; (2S)-2-{2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(4-fluorofenil)-2-(1-metil-imidazol-5-il)etoxi]benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de terc-butilo; (2S)-2-{2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(4-fluorofenil)-2-(1-metil-imidazol-5-il)etoxi]benzoílamino}-4-metilsulfonilbutirato de terc-butilo; (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(1-metil-imidazol-5-il)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de terc-butilo; (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(1-metil-imidazol-5-il)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfonilbutirato de terc-butilo; 19 ácido (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-6-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]pirid-3-oílamino}4-metilsulfanilbutírico; (2S)-2~{2- (4-fluorofenil)-6-[1-(4-fluorofenil)-2-(1-metil-imidazol-5-il)etoximetil]pirid-3-oílamino}-4-metilsulfanil-butirato de terc-butilo; (2S)-2-{3- (4-fluorofenetil)-6- [1-(4-fluorofenil)-2-(1-metil-imidazol-5-il)etoxi] pirid-2-oílamino}-4-metilsulfanilbutirato de terc-butilo; (2S)-2-{3-(4-fluorofenetil)-6-[1-(4-fluorofenil) -2-(1-metil-imidazol-5-il)etoxi]pirid-2-o£lamino}-4-metilsulfanilbutirato de ciclopentilo; ácido (2S)-2-{2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(tiazol-2-il)-2-(1-metilimidazol-5-il)etoxi]benzoílamino}-4-metilsulfanilbu-tírico; ácido (2S)-2-{2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(tiazol-2-il)-2-(1-metilimidazol-5-il)etoxi]benzoílamino}-4-metilsulfonilbu-tírico; (2S)-2-{2- (4-fluorofenetil)-5-[1-(tiazol-2-il)-2-(1-metil-imi-dazol-5-il)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de terc-butilo; (2S)-2-{2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(tiazol-2-il)-2-(1-metil-imi-dazol-5-il)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfonilbutirato de terc-butilo; (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-[1-(tiazol-2-il)-2-(1-metilimida-zol-5-il)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de terc-butilo; e (2S)-2-{2- (4-fluorofenil)-4-[1-(tiazol-2-il) -2-(1-metilimida-zol-5-il)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfonilbutirato de terc-butilo; 20 e os seus sais farmaceuticamente aceitáveis.
Noutro aspecto a invenção proporciona um inibidor da farnesilação de ras de Fórmula (1):
Ar1CH,
Ar '(CH2)P-Ar Fórmula 1 em que Ar1 representa:
(A) (B)
R6 (C)
Ar2 é fenilo ou heteroarilo; p é 0 ou 1;
Ar3 é fenilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidilo ou pirazinilo, sendo o anel substituído nos átomos de carbono do anel por R2 e -(CH2)nR3 e em que Ar3 está ligado a
Ar1C(R12)R13CH(Ar2)O- por um átomo de carbono do anel; R2 ê um grupo de Fórmula (2):
Fórmula (2 21 em que R7 é hidrogénio ou Ci-4alquilo, R8 é -(0¾) q-R10 em que q é 0-4 e R10 é Ci-4alquilsulfanilo, Ci-4alquilsulfinilo, Ci_ 4alquilsulfonilo, hidroxilo, C]__4alcoxi, carbamoílo, N-Ci-4alquil carbamoílo, N, N- (diCi_4alquil)carbamoílo, Ci-4alquilo, fenilo, tienilo, ou Ci-4alcanoílamino, R^ é hidroxilo, Ci-galcoxi, C3-9CÍcloalquiloxi, heterocicliloxi, heterociclilCi-4alcoxi ou -NH-S02-R^·^· em que R^1 representa trifluorometilo, Ci-4alquilo, fenilo, heteroarilo, arilCi_4alquilo ou heteroarilCi_4alquilo; ou R^ representa uma lactona de Fórmula (3)
Fórmula (3 0 0' tendo o grupo de Fórmula (2) ou (3) a configuração L ou D no carbono alfa quiral no correspondente amino ácido livre; n é 0, 1 ou 2; R3 é fenilo ou heteroarilo; R3 e Ar·3 são independentemente opcionalmente substituídos por até três substituintes seleccionados de Ci-4alquilo, halogéneo, hidroxilo, Ci-4alcoxi, Ci_4alcoxicarbonilo, Ci-4alcanoílo, Ci_4alcanoíloxi, amino, Ci_4alquilamino, di(Ci-4alquil)amino, Ci_4alcanoílamino, nitro, ciano, carboxilo, tiol, Ci_4alquilsufanilo, Ci-4alquilsulfinilo, Ci- 4alquilsulfonilo, Ci_4alcanossulfonamido, N- (Ci_ 4alquilsulfonil)-J\T-Ci-4alquil-amino, aminossulfonilo, N-(Ci-4alquil)aminossulfonilo, N,N- di(Ci-4alquil)aminossulfonilo, carbamoílo, N-(Ci-4alquil)carbamoílo, N,N-{diCi- 4alquil)carbamoílo, carbamoílCi-4alquilo, N- (Ci_ 4alquil)carbamoílCi-4alquilo, N,N- (diCi_4alquil)carbamoílCi-4_ alquilo, hidroxiCi-4alquilo e Ci_4alcoxiCi-4alquilo; 22 R5 é hidrogénio, Ci-4alquilo, arilCi-4alquilo,- R6 é hidrogénio, Ci_4alquilo, hidroxiCi-4alquilo, sulfanilCi-4alquilo, N- (Ci-4-alquil)aminoCi_4alquilo ou arilCi_4alquilo; m é 0, 1 ou 2; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco ou solvato.
Num aspecto p é 0.
Noutro aspecto p é 1.
Os compostos de Fórmula (1) podem formar sais que estão dentro do âmbito da invenção. São preferidos os sais farmaceuticamente aceitáveis embora outros sais possam ser úteis, por exemplo, no isolamento e purificação de compostos.
Quando um composto contém uma unidade básica pode formar sais farmaceuticamente aceitáveis com uma variedade de ácidos inorgânicos ou orgânicos, por exemplo ácido clorídrico, bromidrico, sulfúrico, fosfórico, trifluoroacético, cítrico ou maleico. Um sal farmaceuticamente aceitável adequado da invenção quando o composto contém uma unidade ácida é um sal de um metal alcalino, por exemplo um sal de sódio ou de potássio, um sal de um metal alcalino-terroso, por exemplo um sal de cálcio ou de magnésio, um sal de amónio ou um sal com uma base orgânica que dá um catião fisiologicamente aceitável, por exemplo um sal com metilamina, dimetilamina, trimetilamina, piperidina, morfolina opu tris-(2-hidroxietil)amina.
Os solvatos, por exemplo hidratos, também estão dentro do âmbito da invenção e podem ser preparados por métodos geralmente conhecidos. 23
Na arte são conhecidas várias formas de pró-fármacos. Para exemplos desses derivados pró-fármacos, ver: a) Design of Prodrugs, editado por H. Bundgaard, (Elsevier, 1985) e Methods in Enzymology, Vol. 42, p. 309-396, editado por K. Widder, et al. (Academic Press, 1985); b) A Textbook of Drug Design and Development, editado por Krogsgaard-Larsen e H. Bundgaard, Capítulo 5 "Design and Application of Prodrugs", por H. Bundgaard, p. 113-191 (1991); c) H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8, 1-38 (1992); d) H. Bundgaard, et al., Journal of Pharmaceutical Sciences, 77, 285 (1988); e e) N. Kakeya, et al., Chem. Pharm. Buli., 32, 692 (1984) .
Exemplos de pró-fármacos incluem ésteres hidrolisáveis in vivo de um composto de Fórmula I. Ésteres farmaceuticamente aceitáveis para carboxilo incluem ésteres Ci-salquílicos, ésteres Cs-scicloalquílicos, ésteres de aminas cíclicas, ésteres Ci_6alcoximetílicos por exemplo metoximetílicos, ésteres Ci-6alcanoíloximetílicos por exemplo pivaloíloxi-metílicos, ésteres ftalidílicos, ésteres C3-8cicloalcoxi-carboniloxiCi_6alquílicos por exemplo 1-ciclohexilcarboni- loxietílico,· ésteres 1,3-dioxolen-2-onilmetílicos por exemplo 5-metil-l,3-dioxolen-2-onilmetílico; e ésteres Ci_6alcoxicar- boniloxietílicos por exemplo 1-metoxicarboniloxietílico em que os grupos alquilo, cicloalquilo e amino cíclico são opcionalmente substituídos por, por exemplo, fenilo, heterociclilo, alquilo, amino, alquilamino, dialquilamino, hidroxilo, alcoxi, ariloxi ou benziloxi, e pode ser formado em qualquer grupo carboxilo nos compostos desta invenção. 24
De acordo com outro aspecto da invenção é proporcionada uma composição farmacêutica compreendendo um composto tal como definido na Fórmula (1) ou um composto individual listado acima conjuntamente com um diluente ou veículo farmaceu-ticamente aceitável. Uma composição farmacêutica preferida está na forma de comprimido.
As composições da invenção podem estar numa forma adequada para utilização oral (por exemplo como comprimidos, pastilhas, cápsulas duras ou moles, suspensões aquosas ou oleosas, emulsões, pós dispersáveis ou grânulos, xaropes ou elixires), para utilização tópica (por exemplo como cremes, pomadas, geles, ou soluções ou suspensões aquosas ou oleosas), para administração por inalação (por exemplo como um pó finamente dividido ou como um aerossol líquido), para administração por insuflação (por exemplo como um pó finamente dividido) ou para administração parentérica (por exemplo como uma solução aquosa ou oleosa estéril para administração intravenosa, subcutânea, intramuscular ou intramuscular ou como um supositório para administração rectal).
As composições da invenção podem ser obtidas por procedimentos convencionais utilizando excipientes farmacêuticos convencionais, bem conhecidos na arte. Assim, as composições destinadas para utilização oral podem conter, por exemplo, um ou mais agentes corantes, edulcorantes, aromatizantes e/ou conservantes.
Excipientes farmaceuticamente aceitáveis para uma formulação em comprimidos incluem, por exemplo, diluentes inertes tais como lactose, carbonato de sódio, fosfato de cálcio ou carbonato de cálcio, agentes de granulação e desintegrantes tais como amido de milho ou ácido algínico; agentes ligantes tais como amido; agentes lubrificantes tais como estearato de magnésio, ácido esteárico ou talco; agentes conservantes tais como p-hidroxi- benzoato de etilo ou de propilo, e antioxidantes, 25 tais como ácido ascórbico. As formulações em comprimidos podem ser não-revestidas ou revestidas ou para modificar a sua desintegração e a absorção subsequente do principio activo no tracto gastrointestinal, ou para melhorar a sua estabilidade e/ou aspecto, em qualquer dos casos, utilizando agentes de revestimento convencionais e procedimentos bem conhecidos na arte.
As composições para utilização oral podem estar na forma de cápsulas de gelatina dura em que o princípio activo é misturado com um diluente sólido inerte, por exemplo, carbonato de cálcio, fosfato de cálcio ou caulino, ou de cápsulas de gelatina mole em que o princípio activo é misturado com água ou um óleo tal como óleo de amendoim, parafina líquida, ou azeite.
As suspensões aquosas geralmente contêm o princípio activo na forma de pó fino conjuntamente com um ou mais agentes de suspensão, t^is como carboximetilcelulose sódica, metilcelulose, hidroxipropilmetilcelulose, alginato de sódio, polivinil-pirrolidona, goma tragacanta e goma acácia,· agentes dispersantes ou molhantes tais como lecitina ou produtos de condensação de um óxido de alcileno com ácidos gordos (por exemplo estearato de polioxietileno), ou produtos de condensação de óxido de etileno com álcoois alifáticos de cadeia longa, por exemplo heptadecaetilenooxicetanol, ou produtos de condensação de óxido de etileno com ésteres parciais derivados de ácidos gordos e um hexitol tal como monooleato de polioxietileno sorbitol, ou produtos de condensação de óxido de etileno com álcoois alifáticos de cadeia longa, por exemplo heptadeca-etilenooxicetanol, ou produtos de condensação de óxido de etileno com éteres parciais derivados de ácidos gordos e um hexitol tal como monooleato de polioxietileno sorbitol, ou produtos de condensação de óxido de etileno com ésteres parciais derivados de ácidos gordos e anidridos de hexitol, por exemplo monooleato de polietileno sorbitano. As suspensões aquosas também podem conter um ou mais conservantes (tais como p- 26 hidroxibenzoato de etilo ou de propilo), antioxidantes (tais como ácido ascórbico), agentes corantes, agentes aromatizantes, e/ou agentes edulcorantes (tais como sacarose, sacarina ou aspartamo).
As suspensões oleosas podem ser formuladas por suspensão do princípio activo num óleo vegetal (tal como óleo de amendoim, azeite, óleo de sésamo ou óleo de côco) ou num óleo mineral (tal como parafina líquida). As suspensões oleosas podem conter também um agente espessante tal como cera de abelhas, parafina dura ou álcool cetílico. Podem ser adicionados agentes edulcorantes tais como os referidos acima, e agentes aromatizantes para proporcionar uma preparação oral saborosa. Estas composições podem ser conservadas pela adição de um antioxidante tal como ácido ascórbico.
Os pós dispersáveis e os grânulos adequados para a preparação de uma suspensão aquosa pela adição de água geralmente contêm o princípio activo conjuntamente com um agente dispersante ou molhante, agente de suspensão e um ou mais conservantes. Agentes dispersantes ou molantes adequados e agentes de suspensão são exemplificados pelos já referidos acima. Também podem estar presentes excipientes adicionais tais como agentes edulcorantes, aromatizantes e corantes.
As composições farmacêuticas da invenção também podem estar na forma de emulsões óleo-em-água. A fase oleosa pode ser um óleo vegetal, tal como azeite ou óleo de amendoim, ou um óleo mineral, tal como por exemplo parafina líquida ou uma mistura de quaisquer destes. Agentes emulsionantes adequados podem ser, por exemplo, gomas de ocorrência natural tais como goma acácia ou goma tragacanta, fosfatidos de ocorrência natural tais como feijão de soja, lecitina, ésteres ou ésteres parciais dericados de ácidos gordos e anidridos de hexitol (por exemplo monooleato de sorbitano) e produtos de condensação dos referidos ésteres parciais com óxido de etileno tais como monooleato de 27 polioxietileno sorbitano, As emulsões também podem conter agentes edulcorantes, aromatizantes e conservantes.
Os xaropes e elixires podem ser formulados com agentes edulcorantes tais como glicerol, propileno glicol, sorbitol, aspartamo ou sacarose, e também podem conter um agente calmante, conservante, aromatizante e/ou corante.
As composições farmacêuticas também podem estar na forma de uma suspensão aquosa ou oleosa injectãvel estéril, que pode ser formulada de acordo com procedimentos conhecidos utilizando um ou mais dos agentes dispersantes ou molhantes ou agentes de suspensão apropriados, que foram referidos acima. Uma preparação injectável estéril também pode ser uma solução ou suspensão injectãvel estéril num diluente ou solvente não-tóxico parentericamente aceitável, por exemplo uma solução de 1,3-butanodiol.
As formulações para supositórios podem ser preparadas por mistura do princípio activo com um excipiente não-irritante adequado que é sólido a temperaturas correntes mas líquido à temperatura rectal e fundirá portanto no recto para libertar o fármaco. Excipientes adequados incluem, por exemplo, manteiga de cacau e polietileno glicóis.
As formulações tópicas, tais como cremes, pomadas, geles e soluções aquosas ou oleosas, podem geralmente ser obtidas por formulação do princípio activo com um veículo ou diluente convencional, topicamente aceitável, utilizando um procedimento convencional bem conhecido na arte.
As composições para administração por insuflação podem estar na forma de um pó finamente dividido contendo partículas com um diâmetro médio de, por exemplo, 30 μ ou muito menos, compreendendo o pó propriamente dito o princípio activo só ou diluído com um ou mais veículos fisiologicamente aceitáveis tais 28 como lactose. O pó para insuflação é então convenientemente inserido numa cápsula contendo, por exemplo, 1 até 50 mg de princípio activo para utilização num dispositivo turbo-inalador, tal como é utilizado para insuflação do agente cinhecido cromoglicato de sódio.
As composições para administração por inalação podem estar na forma de um aerossol pressurizado convencional preparado para administrar o princípio activo como um aerossol contendo sólido finamente dividido ou gotículas de líquido. Podem ser utilizados propulsores convencionais para aerossoles tais como hidrocarbonetos fluorados ou hidrocarbonetos voláteis e o dispositivo para aerossol é convenientemente preparado para administrar uma quantidade medida de princípio activo.
Para informação adicional sobre Formulação remete-se o leitor para o Capítulo 25.2 no Volume 5 de Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board), Pergamon Press 1990. A quantidade de princípio activo que é combinada com um ou mais excipientes para produzir uma forma de dosagem única variará necessariamente dependendo do hospedeiro a ser tratado e da via de administração particular. Por exemplo, uma formulação destinada a administração oral a seres humanos conterá geralmente, por exemplo, desde 0,5 mg até 2 g de princípio activo combinado com uma quantidade apropriada e conveniente de excipientes que pode variar desde cerca de 5 até cerca de 98 por cento em peso da composição total. As formas de dosagem unitárias conterão geralmente cerca de 1 mg até cerca de 500 mg de um princípio activo. Para informação adicional sobre Vias de Administração e Regimes de Dosagem remete-se o leitor para o Capítulo 25.3 no Volume 5 de Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board), Pergamon Press 1990. 29 0 tamanho da dose para fins terapêuticos ou profiláticos de um composto de Fórmula (1) variará naturalmente de acordo com a natureza e gravidade das patologias, a idade e sexo do animal ou doente e a via de administração, de acordo com princípios bem conhecidos da medicina. Tal como referido acima, os compostos de Fórmula (1) são úteis no tratamento de doenças ou patologias médicas que são devidas só ou em parte aos efeitos da farnesilação de ras.
Na utilização de um composto de Fórmula (1) para fins terapêuticos ou profiláticos ele será geralmente administrado de modo a que a dose diária recebida esteja na gama de, por exemplo, 0,5 mg até 75 mg por kg de peso corporal, se necessário administrada em doses divididas. Em geral serão administradas doses mais baixas quando se utiliza uma via parentérica. Assim, por exemplo, para administração intravenosa, será geralmente utilizada uma dose na gama de, por exemplo, 0,5 mg até 30 mg por kg de peso corporal. Analogamente, para administração por inalação, será utilizada uma dose na gama de, por exemplo, 0,5 mg até 25 mg por kg de peso corporal. Contudo é preferida a administração oral.
Os compostos desta invenção podem ser úteis em combinação com agentes anticancerígenos e citotóxicos conhecidos. Se formulados como uma dose fixa esses produtos de combinação utilizam os compostos desta invenção dentro da gama de dosagem aqui descrita e o outro princípio farrnaceuticamente activo dentro da sua gama de dosagem aprovada. Está contemplada a utilização sequencial quando é desapropriada uma formulação em combinação.
De acordo com outro aspecto da invenção é proporcionado um composto de Fórmula (1) ou um seu sal farrnaceuticamente aceitável, para utilização como medicamento. 30
De acordo com outro aspecto da invenção é proporcionado um composto de Fórmula (1) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para utilização na preparação de um medicamento para o tratamento de uma doença mediada pela farnesilação de ras.
De acordo com outro aspecto da invenção é proporcionado um método para o tratamento de doenças mediadas por ras, especialmente cancro, por administração de uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula (1) ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável, a um mamífero necessitado desse tratamento.
As doenças ou patologias médicas podem ser mediadas só ou em parte por ras farnesilado. Uma doença particular com interesse é o cancro. Cancros específicos de interesse incluem: - carcinoma, incluindo o da bexiga, mama, cólon, rim, fígado, pulmão, ovário, pâncreas, estômago, cervix, tiróide e pele; - tumores hematopoiéticos de linhagem linfóide, incluindo leucemia linfocítica aguda, linfoma das células B e linfoma de Burkitt; - tumores hematopoiéticos de linhagem mielóide, incluindo leucemias mielóides agudas e crónicas e leucemia promielocítica; tumores com origem no mesênquima, incluindo fibrossarcoma e rabdossarcoma; e outros tumores, incluindo melanoma, seminoma, teratocarcinoma, neuroblastoma e glioma.
Os compostos de Fórmula (1) são especialmente úteis no tratamento de tumores com incidência elevada de mutação de ras, tais como os tumores do cólon, pulmão, e do pâncreas. Por administração de uma composição contendo um (ou uma combinação) 31 dos compostos desta invenção, é reduzido o desenvolvimento de tumores num hospedeiro mamífero.
Os compostos de Fórmula (1) também podem ser úteis no tratamento de doenças que não o cancro que podem ser associadas a vias de transdução de sinais que operam através de Ras, e.g., neuro-fibromatose.
Os compostos de Fórmula (1) também podem ser úteis no tratamento de doenças associadas a proteínas contendo CAAX que não Ras (e.g., lâminas nucleares e transducina) que também são modificadas pós-translacionalmente pela enzima farnesil proteíno transferase.
Embora os compostos de Fórmula (I) tenham valor principalmente como agentes terapêuticos para utilização em animais de sangue quente (incluindo o homem), também são úteis sempre que é necessário inibir os efeitos da activação de ras por farnesilação. Assim, são úteis como padrões farmacológicos para utilização no desenvolvimento de novos ensaios biológicos e na procura de novos agentes farmacológicos.
Noutro aspecto a presente invenção proporciona um processo para a preparação de um composto de Fórmula (1) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco ou solvato, processo esse que compreende: desprotecção de um composto de fórmula (4)
(4) em que Ar1' é Ar1 ou Ar1 protegido, Ar2' é Ar2 ou Ar2 protegido e Ar3' é Ar3 ou Ar3 protegido; em que está presente pelo menos um grupo protector; e em seguida se necessário: 32 (i) formação de um sal farmaceuticamente aceitável, (ii) formação de um pró-fãrmaco, (iii) formação de um solvato.
Os grupos protectores podem em geral ser escolhidos de qualquer dos grupos descritos na literatura ou conhecidos pelo químico experiente como sendo adequados para a protecção do grupo em questão, e podem ser introduzidos por métodos convencionais.
Os grupos protectores podem ser removidos por qualquer método conveniente tal como descrito na literatura ou conhecido pelo químico experiente como sendo adequado para a remoção do grupo protector em questão, sendo esses métodos escolhidos de modo a efectuar a remoção do grupo protector com perturbação mínima de grupos noutros pontos da molécula.
Para conveniência apresenta-se adiante exemplos específicos de grupos protectores, em que "inferior" significa que o grupo ao qual se aplica preferencialmente tem 1-4 átomos de carbono. Entender-se-á que estes exemplos não são exaustivos. Quando adiante se apresenta exemplos de métodos para a remoção de grupos protectores estes analogamente não são exaustivos. A utilização de grupos protectores e métodos de desprotecção não referida especificamente está, é claro, dentro do âmbito da invenção.
Um grupo protector de carboxilo pode ser o resíduo de um álcool alifãtico ou aralifático capaz de formar um éster ou um silanol capaz de formar um éster (contendo o referido álcool ou silanol preferencialmente 1-20 átomos de carbono).
Exemplos de grupos protectores de carboxilo incluem grupos Ci-i2alquilo de cadeia linear ou ramificada (por exemplo isopropilo, t-butilo); grupos alcoxi inferior-alquilo inferior (por exemplo metoximetilo, etoximetilo, isobutoximetilo);grupos 33 aciloxi alifático inferior-alquilo inferior (por exemplo acetoximetilo, propioniloximetilo, butiriloximetilo, pivaloíloximetilo) ; grupos alcoxi inferior carboniloxi-alquilo inferior (por exemplo 1-metoxicarboniloxietilo, 1-etoxicarboniloxietilo) ; grupos fenil alquilo inferior (por exemplo benzilo, p-metoxibenzilo, o-nitrobenzilo, p- nitrobenzilo, benzidrilo e ftalidilo); grupos tri(alquil inferior)sililo (por exemplo trimetilsililo e t- butildimetilsililo) ; grupos tri(alquil inferior)silil-alquilo inferior (por exemplo trimetilsililetilo) ; e grupos C2-ôalcenilo (por exemplo alilo e viniletilo). Métodos particularmente apropriados para a remoção de grupos protectores de carboxilo incluem por exemplo hidrólise catalisada por ácidos, bases, metais ou enzimaticamente.
Exemplos de grupos protectores de hidroxilo incluem grupos alquilo inferior (por exemplo t-butilo), grupos alcenilo inferior (por exemplo alilo); grupos alcanoílo inferior (por exemplo acetilo); grupos alcoxi inferior carbonilo (por exemplo t-butoxicarbonilo); grupos alceniloxi inferior carbonilo (por exemplo aliloxicarbonilo) ; grupos fenil alcoxi inferior carbonilo (por exemplo benzoíloxicarbonilo, p-metoxibenziloxi-carbonilo, o-nitrobenziloxicarbonilo, p-nitrobenziloxi- carbonilo); grupos tri(alquil inferior)sililo (por exemplo trimetilsililo, t-butildimetilsililo) e grupos fenil alquilo inferior (por exemplo benzilo).
Exemplos de grupos protectores de amino incluem formilo, grupos aralquilo (por exemplo benzilo e benzilo substituído, p-metoxibenzilo, nitrobenzilo e 2,4-dimetoxibenzilo, e tri-fenilmetilo); grupos di-p-anisilmetilo e furilmetilo; alcoxi inferior carbonilo (por exemplo t-butoxicarbonilo) ; alceniloxi inferior carbonilo (por exemplo aliloxicarbonilo) ; grupos fenil alcoxicarbonil inferior (por exemplo benziloxicarbonilo, p-metoxibenziloxicarbonilo, o-nitro-benziloxicarbonilo, p-nitro- 34 34 benziloxicarbonilo); trialquilsililo (por exemplo trimetilsililo e t-butildimetilsililo); alcilideno (por exemplo metilideno); grupos benzilideno e benzilideno substituído. Métodos apropriados para a remoção de grupos protectores de hidroxilo e de amino incluem, por exemplo, hidrólise catalisada por ácidos, bases, metais ou enzimaticamente, para grupos tais como p-nitrobenziloxicarbonilo, hidrogenação e para grupos tais como o-nitrobenziloxicarbonilo, fotoliticamente.
Remete-se o leitor para Advanced Organic Chemistry, 45th Edition, por Jerry March, publicado por John Wiley & Sons 1992, para orientação genérica sobre condições reaccionais e reagentes. Remete-se o leitor para Protective Groups in Organic Synthesis, 2nd Edition, por Green et al., publicado por John
Wiley & Sons para orientação genérica sobre grupos protectores.
Os compostos de fórmula (1) e (4) podem ser formados por: (i) reacção de um composto de fórmula (5) com um composto de fórmula (6)
(5)
ou (ii) conversão de um valor de R9 em R2 noutro valor de R9,-ou (iii) reacção de um composto em que R2 em Ar3' é carboxilo com um composto de fórmula (7): 35
em que p. Ar11, Ar2', Ar3', R7 e R8 são como aqui definidos acima, R21 é R9 ou um grupo protector de carboxilo e quando p é I, L é um grupo de saída, e quando p é 0, L é hidroxilo; e em seguida se necessário: (i) remoção de quaisquer grupos protectores; (ii) formação de um seu sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco ou solvato,
Quando p é 1, os compostos de fórmula (5) e (6) reagem convenientemente entre si na presença de uma base tal como hidreto de sódio, butil lítio ou terc-butóxido de potássio, num solvente aprótico tal como tetrahidrofurano (THF), dimetilformamida (DMF) ou dimetilacetamida (DMA), a uma temperatura não-extrema por exemplo 0°C até à temperatura ambiente. L é preferencialmente halogéneo, mesiloxi ou tosiloxi.
Quando p é 0, os compostos de fórmula (5) e (6) reagem convenientemente entre si em condições conhecidas como reacção de Mitsunobu. Esta tipicamente envolve a reacção dos reagentes entre si na presença de azodicarboxilato de di(Ci-4alquilo) ou II, 11 - (azodicarbonil)dipiperidina e um reagente de fósforo tal como tributilfosfina ou trifenilfosfina num solvente inerte tal como tolueno, benzeno, tetrahidrofurano (THF) ou éter dietílico, a temperaturas não-extremas tais como na gama de -20°C até à temperatura ambiente (ver Progress in the Mitsunobu Reaction. A Review, David L. Hughes, Organic Preparations and Procedures Int., 28(2), 127-164 (1996)). 36
Um composto de fórmula (5) pode ser preparado por redução de um composto de fórmula (8): 36 Ar1
2 ' (8 em que Ar-*-' e Ar2' são como aqui definidos acima. Agentes redutores adequados incluem borohidreto de sódio e hidreto de alumínio e lítio. Tipicamente, quando o agente redutor é borohidreto de sódio, utiliza-se um álcool como solvente numa gama de temperatura desde a temperatura ambiente até 60°C, e quando se utiliza hidreto de lítio utiliza-se como solventes éter dietílico ou THF.
Um composto de fórmula (8) pode ser preparado por introdução de Ar1' num composto de fórmula (9):
(9 em que Ar21 é como aqui definido acima e L1 é um grupo de saída tal como mesiloxi, tosiloxi, triflato ou halogéneo, preferencialmente bromo. A reacção é convenientemente realizada na presença de uma base tal como hidreto de sódio, butil lítio ou carbonato de potássio. Nalguns casos pode não ser necessária uma base.
Um composto de fórmula (9) é convenientemente formado a partir de um composto de fórmula (10):
(10 2' 37 CH
em que Ar^' é como aqui definido acima. 0 composto de fórmula (10) pode ser convertido num composto em que L^- é bromo por bromação com, por exemplo, N- bromossuccinimida, tetrabrometo de carbono ou bromo ou num composto em que ΐΛ é cloro por cloração com por exemplo cloro. Quando iA é mesiloxi ou tosiloxi por oxidação do composto de fórmula (10) a um álcool e conversão do grupo hidroxilo em mesiloxi ou tosiloxi utilizando um halogeneto de mesilo ou um halogeneto de tosilo.
Quando pé 1, um composto de fórmula (6) é tipicamente formado por introdução de um grupo de saída num composto de fórmula Ar^'-CH3. Quando L é bromo Ar^'-CH3 pode ser bromado utilizando por exemplo N-bromossuccinimida, tetrabrometo de carbono ou bromo. Quando L é cloro, pode utilizar-se um agente clorante tal como cloro e quando L é mesiloxi ou tosiloxi, o grupo metilo em Ar3'-CH3 é geralmente oxidado ao álcool (ou oxidado ao ácido carboxílico e depois reduzido ao álcool) e o grupo hidroxilo convertido em mesiloxi ou tosiloxi com, por exemplo, cloreto de mesilo ou cloreto de tosilo. O composto de fórmula Ar^'-CH3 pode ser formado por introdução de -(CH2)nR3 num composto de fórmula (11):
(11 38 em que R2 ' é como aqui definido acima, A ê fenilo, piridilo, pirazinilo, pirimidinilo ou piridazinilo e L2 é um grupo de saída.
Quando n é 0 e R2 é fenilo, faz-se reagir o composto (11) convenientemente com ácido fenil borónico na presença de um catalisador de paládio tal como tetraquis(trifenilfosfina)-paládio(0) em condições conhecidas para a reacção de Suzuki (Synth. Coimnun. 11, 513 (1981)). Geralmente utiliza-se um solvente orgânico tal como éter dimetílico (DME), sulfóxido de dimetilo (DMSO) ou THF e uma base tal como bicarbonato de sódio, carbonato de sódio e por vezes hidróxido de sódio. Poder-se-ia utilizar um fluoreto tal como fluoreto de césio em vez da base (J. Org. Chem. 1994, 59, 6095-6097) .
Preferencialmente L2 é bromo ou triflato.
Quando n é 1 e R3 é fenilo, faz-se reagir o composto de fórmula (11), bromo ou cloro, convenientemente com um cloreto de benzilzinco ou brometo de benzilmagnésio na presença de um catalisador de níquel ou de paládio, tal como cloreto de bis(trifenilfosfina)paládio(II) ou Pd2(dba)3, num solvente orgânico inerte tal como tetrahidrofurano (THF). Por exemplo ver as condições utilizadas para a reacção de "Nagishi" (J. Org. Chem. 42(10), 1821-1822, 1977).
Quando n é 2 e R3 é fenilo, faz-se reagir o composto de fórmula (11) convenientemente com um estireno em condições conhecidas para a reacção de Heck. Sumariamente esta envolve uma base inorgânica ou orgânica tal como trietilamina, um catalisador de paládio tal como cloreto de bis(o-tolilfosfina)paládio(II) em água. (Acc. Chem. Res. 12, 146-151 (1979), J. Organometallic Chem. 486, 259-262 (1995)). O alceno resultante pode ser então reduzido utilizando métodos correntes conhecidos na arte, por exemplo, hidrogenação catalítica. 39
Alternativamente o alcino podia ser formado por reacção de um composto de fórmula (11) em que L2 é triflato ou bromo com um fenil acetileno na presença de uma base orgânica tal como trietilamina e um catalisador de paládio tal como tetraquis (trifenilfosfina) paládio. Por exemplo ver as condições utilizadas para a reacção de Sonogashira (J. Org. Chem. 1993, 58, 6614-6619). 0 alcino resultante pode ser reduzido utilizando métodos correntes conhecidos na arte, por exemplo, hidrogenação catalítica.
Quando p é 0, o composto de fórmula (6) pode ser formado por introdução de - (0¾ )nR3 num composto de fórmula (12):
em que R2', A e L2 são como aqui definidos anteriormente, e P1 é um grupo protector de hidroxilo.
Quando n é 0 e R3 é fenilo, convenientemente faz-se reagir o composto de fórmula (12) com ácido fenil borónico na presença de um catalisador de paládio tal como descrito acima para quando p é 1.
Quando pé 0, L2 é preferencialmente bromo.
Quando n é 1, e R3 é fenilo, convenientemente faz-se reagir o composto de fórmula (12) em que L2 é preferencialmente bromo ou cloro, com cloreto de benzilzinco ou brometo de benzilmagnésio em condições semelhantes às descritas acima para quando p é 1. 40
Quando n é 2, convenientemente faz-se reagir o composto de fórmula (12) com estireno em condições connhecidas para a reacção de Heck. O alceno resultante pode ser então reduzido utilizando métodos correntes conhecidos na arte, por exemplo, hidrogenação catalítica.
Alternativamente, o alcino podia ser formado por reacção de um composto de fórmula (12) em que L2 é triflato ou bromo com um fenil acetileno na presença de uma base orgânica tal como trietileno e um catalisador de paládio tal como tetraquis(trifenilfosfina)paládio. Por exemplo ver as condições utilizadas para a reacção de Sonogashira (<J. Org. Chem. 1993, 58, 6614-6619). 0 alcino resultante pode ser reduzido utilizando métodos correntes conhecidos na arte, por exemplo, hidrogenação catalítica. O grupo protector P1 pode ser então removido para dar um composto de fórmula (6).
Um composto de fórmula (1) ou (4) pode ser preparado através de uma sequência de passos a partir de um composto de fórmula (12):
A
(12
Quando p é 1, um composto de fórmula (1) ou (4) pode ser preparado através de uma sequência de passos a partir de um composto de fórmula (13): 41
em que e A são como aqui definidos acima e P é um grupo pro-tector de carboxilo. L2 pode ser substituído pelo grupo -(CH2)nR3 utilizando a metodologia descrita acima. O grupo metilo pode ser então com-vertido num grupo -CH2L e fazer reagir o composto resultante com um composto de fórmula (5) . O grupo carboxilo no produto resultante pode ser então desprotegido e reagir com o derivado de amino ácido apropriado para formar R2, em condições aqui descritas adiante, e formar assim um composto de fórmula (1) ou (4) .
Quando p é 0, um composto de fórmula (1) ou (4) pode ser preparado a partir de um composto semelhante ao de fórmula (13) mas em que o grupo metilo é substituído por um grupo protector de hidroxilo. L2 pode ser então convertido em -(CH2)nR3/ 0 grupo hidroxilo removido e fazer reagir o composto resultante com um composto de fórmula (5) . Os passos subsequentes também são semelhantes aos descritos acima para quando p é 1.
Um composto de fórmula (1) em que R9 em R2 é alcoxi pode ser convenientemente hidrolizado a outro composto de fórmula(1) em que R9 é hidroxilo utilizando métodos correntes conhecidos na arte. Por exemplo, o grupo alcoxi pode ser submetido a hidrólise ácida ou básica com, por exemplo, no caso de hidrólise básica, solução aquosa de hidróxido de sódio num solvente orgânico tal como um álcool numa gama de temperaturas desde a temperatura ambiente até 60°C. Quando R9 é um grupo hidroxilo o grupo carboxilo num composto de fórmula (1) pode ser convertido numa acilsulfonamida por reacção do grupo carboxilo com o grupo sulfonamido apropriado na presença de uma base orgânica tal como 42 trietilamina ou dimetilaminopiridina, num solvente orgânico inerte tal como dimetilformamida (DMF) , numa gama de temperatura desde -20°C até à temperatura ambiente. A reacção entre um composto em que R2 em Ar3' é carboxilo e um composto de fórmula (7) é geralmente realizada na presença de um reagente que converte o grupo carboxilo num éster reactivo, por exemplo uma carbodiimida tal como l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (EDC) ou pentafluorofe-nilo, e na presença de uma base orgânica tal como J7-metil- morfolina ou dimetilaminopiridina (DMAP). A reacção é normal-mente realizada na gama de temperaturas de -20°C até à temperatura ambiente. Frequentemente adiciona-se o reagente 1-hidro-xibenzotriazole para auxiliar a reacção (ver Chem. Ber. 103, 788, 2024 (§970), J. Am. Chem. Soc. 93, 6318 (1971), Helv. Chim. Acta 56, 717 (1973)) . Solventes adequados incluem DMF e diclorometano.
Um composto de fórmula (1) em que R2 em Ar3' é carboxilo pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (5) com um composto de fórmula (6) em que R2 em Ar31 é um carboxilo protegido e subsequentemente removendo o grupo protector.
Opcionalmente os substituintes num composto de fórmula(1) ou (4) ou intermediários na sua preparação podem ser convertidos noutros substituintes opcionais. Por exemplo um grupo al-quiltio pode ser oxidado a um grupo alquilsulfinilo ou alquil-sulfonilo, um grupo nitro pode ser reduzido a um grupo amino, um grupo hidroxilo alquilado a um grupo metoxi, ou um grupo bromo convertido num grupo alquiltio.
Podem ser introduzidos vários substituintes em compostos de fórmulas (1) e (4) e intermediários nesta preparação, quando apropriado, utilizando métodos correntes conhecidos na arte. Por exemplo, pode ser introduzido um grupo acilo ou um grupo alquilo num anel de benzeno activado utilizando reacçóes de Friedel- 43
Crafts, um grupo formilo por formilação com tetracloreto de titânio e éster diclorometil etílico, um grupo nitro por nitração com ácido nítrico concentrado-ácido sulfúrico concentrado e bromação com bromo ou tribrometo de tetra(n- butil)amónio.
Alternativamente, um composto semelhante a um composto de fórmula (12) mas que contém um grupo metilo em vez do grupo -COOP poderia ser utilizado como material de partida e ambos os grupos metilo oxidados a ácidos carboxílicos, um reduzido selectivamente a um álcool com um agente redutor tal como borano em THF, e o hidroxilo convertido num grupo de saída.
Entender-se-á que, em certos passos da sequência reaccional para a formação de compostos de fórmula (1) , será necessário proteger certos grupos funcionais em intermediários de forma a impedir reacções secundárias. A desprotecção pode ser realizada num estádio conveniente na sequência reaccional uma vez que a potecção já não seja necessária. A actividade biológica foi testada como se segue: (i) Ensaio in vitro
Utilizou-se as seguintes soluçóes-mães e os ensaios foram realizados em placas com 96 poços: tampão TRIS (500 mM de TRIS, 50 mM de MgCl2.6H20, pH = 8,0); Pirofosfato de farnesilo (6,4 mg/mL); Aprotinina (1,9 mg/mL); Ki-ras (0,5 mg/mL, armazenada a -80°C); Etanol acidificado (850 mL de etanol absoluto + 150 mL de HCl concentrado). A farnesil proteíno transferase (FPT) foi parcialmente purificada por fraccionamento com sulfato de amónio seguido por uma única cromatografia de permuta aniónica em Q-Sepharose$ (Pharmacia, Inc.) essencialmente tal como descrito por Ray e Lopez-Belmonte (Ray, K. P. e Lopez-Belmonte, J. (1992) 44
Biochemical Society Transactions 20 494-497). O substrato para FRT foi Kras (sequência terminal C CVIM) . O cDNA para a variante vai12 oncogénica de cKi-ras-2 4B humana foi obtido do plasmídeo pSWll-1 (ATCC). Este foi então subclonado no poliligante de um vector de expressão adequado e.g. pIC147. O Kras foi obtido após expressão na estirpe E. coli BL12. A expressão e purificação de c-KI-ras-2 4B e da variante vall2 em E. coli também foi descrita por Lowe et al. (Lowe P. N. et al., J. Biol. Chem. (1991) 266 1672-1678). A preparação de enzima farnesil proteíno transferase foi armazenada a -80°C. A solução de farnesil transferase para o doseamento continha o seguinte: ditiotreitol (DTT) (0,6 mL de 7,7 mg/mL), tampão TRIS (0,6 mL), aprotinina (0,48 mL), água destilada (1,2 mL) , farnesil transferase (0,6 mL de preparação de enzima em bruto preparada tal como descrito acima), cloreto de zinco (12 μΒ de 5 mM) . Esta foi deixada à temperatura ambiente durante 30 minutos. Após esta incubação adicionou-se 60 μΒ de solução de Ki-ras e o conjunto foi deixado em incubação durante mais 60 minutos antes da utilização no doseamento.
Os doseamentos foram realizados em placas com 96 poços como se segue: adicionou-se 10 μL de solução de composto de teste a cada poço. Em seguida adicionou-se 30 μΒ de solução de farnesil transferase (acima) e a reacção foi iniciada pela adição de 10 μΒ de solução de pirofosfato de farnesilo radiomarcado. Após 20 minutos a 37°C a reacção foi parada com 100 μΒ de etanol acidificado (tal como descrito em Pompliano, D. L. et al. (1992) 31 3800-3807). A placa foi então mantida durante 1 hora a 4°C. A proteína precipitada foi então recolhida em filtros de fibra de vidro (B) utilizando um colector de células Tomte^ e o marcador tritiado foi medido num contador de cintilações líquidas Wallac$ 1204 Betaplate. Os compostos de teste foram adicionados a concentrações apropriadas em DMSO (concentração final de 3% no teste e no controlo do veículo). 45 (ii) Doseamento da farnesilação intracelular Células HER313A (Grand et al. , 1987 Oncogene 3 305-314) foram cultivadas em rotina em Meio Essencial Modificado da Dulbeco (DEMEM) mais 10% de soro fetal de vitela (FCS) . Para o doseamento semeou-se células HER313A a 200.000 células/poço num volume de 2,5 mL numa placa de 6 poços para cultura de tecidos. Após incubação de um dia para o outro a 37°C em 10% de CO2 o meio foi retirado e substituído por meio essencial mínimo isento de metionina (MEM) e as células foram incubadas como acima durante 2 horas. Após este período o meio foi retirado e substituído por MEM isento de metionina (1 mL) e composto de teste (1-3 /iL) . As placas foram então incubadas durante mais 2 horas tal como descrito acima e em seguida adicionou-se 30 μΟ. de ^S-metionina a cada poço. A placa foi então incubada de um dia para o outro tal como descrito acima. 0 meio foi então removido e as células foram lisadas com tampão de lise (1 mL) (constituído por 1000 mL de soro fisiológico tamponado com fosfato, 100 mL de Triton X-100, 5 g de desoxicolato de sódio, 1 g de dodecilsulfato de sódio) contendo aprotinina (10 μL/mL), a placa foi raspada e depois deixada durante 10 minutos a 4°C. o lisado foi então clarificado por centrifugação. A 0,8 mL do lisado clarificado adicionou-se 80 μL de anticorpo pan-Ras Y13-259 (isolado do hibridoma - American Tissue Culture Collection Accession Number CRL-1742) (concentração final de aproximadamente 1 μg/mL, sendo a concentração de trabalho exacta optimizada pela cada lote de anticorpo isolado) e pérolas de proteína G (30 μL de 0,5 μg/mL) e a mistura foi incubada de um dia para o outro com agitação constante. O sedimento foi então recolhido por centrifugação, lavado e separado por SDS PAGE utilizando um gel a 15%. As bandas radioactivas foram detectadas utilizando um sistema de fosforoimagiologia. 46 (iii) Morfologia e doseamento da proliferação Células MIA PaCa 2 (American Tissue Culture Collection Accession Number: CRL-1420) foram cultivadas em rotina em Meio Essencial Modificado da Dulbeco (DMEM) mais 10% de FCS num frasco para cultura de tecidos de 162 cm2. Para o doseamento as células foram cultivadas a 16.000 células/poço, em placas com 12 poços, em DMEM contendo 5% de FCS purificado tratado com dextrano e carvão activado (1 mL) (obtido de Pierce e Warriner). As células foram então incubadas de um dia para o outro a 37°C em 10% de CO2. O composto de teste foi então adicionado (10 μΐι) e as células incubadas durante 6 dias tal como descrito acima. Aos dias 1, 2, 3 e 6 as células foram monitorizadas quanto a sinais de alteração morfológica e toxicidade. Ao dia 6 as células foram retiradas da placa utilizando tripsina/EDTA e contadas para determinar a velocidade de proliferação.
Embora as propriedades farmacológicas dos compostos de Fórmula (1) variem com alterações estruturais tal como esperado, em geral os compostos de Fórmula (1) possuem uma IC50 no ensaio acima referido na gama de, por exemplo, 0,0005 até 50 μΜ. Assim a título de exemplo o composto de Fórmula (2) tem neste ensaio uma IC50 de aproximadamente 0,001 μΜ. Não se observou toxicidade fisiologicamente inaceitável na dose eficaz para os compostos testados da presente invenção. A invenção será agora ilustrada pelos seguintes Exemplos não-limitativos em que, a não ser que seja afirmado o contrário: (i) as evaporações foram realizadas por evaporação rotativa sob vácuo e os procedimentos de processamento foram realizados após remoção por filtração de sólidos residuais; (ii) as operações foram realizadas à temperatura ambiente, isto é na gama de 18-25°C e sob atmosfera de um gás inerte tal como azoto ou árgon; 47 (iii) a cromatografia em coluna (pelo procedimento "flash") e a cromatografia líquida de média pressão (MPLC) foram realizadas em sílica Merck Kieselgel (art. 9385) ou sílica de fase reversa Merck Lichroprep RP-18 (Art. 9303) obtidas de E. Merck, Darmstadt, Alemanha, ou a separação por cromatografia líquida de alta pressão (HPLC) em sílica de fase reversa C18. (iv) os rendimentos são apresentados apenas para ilustração e não são necessariamente o máximo atingível; (v) os produtos finais de Fórmula (1) têm microanálises satisfatórias e as suas estruturas foram confirmadas por técnicas de ressonância magnética nuclear (RMN) e de espectrometria de massa; os valores dos desvios químicos foram medidos na escala de delta; utilizou-se as seguintes abreviaturas: s, singuleto; d, dupleto; t ou tr, tripleto; m, multipleto; br, largo; (vi) os intermediários geralmente não foram completamente caracterizados e a pureza foi avaliada por análise por cromatografia em camada fina, HPLC, infravermelhos(IV) ou RMN; (vii) os pontos de fusão não estão corrigidos e foram determinados utilizando um aparelho automático para pontos de fusão Mettler SP62 ou um aparelho com banho de óleo; os pontos de fusão dos produtos finais de Fórmula (1) foram determinados após cristalização de um solvente orgânico adequado tal como etanol, metanol, acetona, éter ou hexano, sós ou em mistura; e (viii) utilizou-se as seguintes abreviaturas:
ADDP DEAD DMAP DMF EDC 1,1'-(azodicarbonil)dipiperidina azodicarboxilato de dietilo 4-dimetilaminopiridina dimetilformamida 1-(3-dimetilaminopropil) -3-etil-carbodiimida 48 48 ΗΟΒΤ Pd(dppb)Cl2
MC PB A NMM TEA TFA THF 1-hidroxibenzotriazole dicloreto de [1,4-bis(difenilfosfino)butano]- paládio(II) ácido m-cloroperbenzóico N-metilmorfolina trietilamina ácido trifluoroacético tetrahidrofurano
Exemplo 1 (2S)-2-(2-(4-Fluorofenil)-4-[2-(imidazol-l-il)-1- (4-fluorofenil)etoximetil]benzoílamino)-4-metilsulfanil-butirato de metilo
Uma mistura de ácido 2-(4-fluorofenil)-4-[2-(imidazol-l-il) -1-(4-fluorofenil)etoximetil]benzóico (0,522 g; 1,2 mmol), cloridrato de (2S)-amino-4-metilsulfanil)butanoato de metilo (cloridrato do éster metílico de L-metionina) (0,24 g; 1,2 mmol), HOBT (0,163 g; 1,2 mmol), EDC (0,23 g; 1,2 mmol) e N-metilmorfolina (0,132 mL; 1,2 mmol) em diclorometano (15 mL) foi agitada sob uma atmosfera de árgon durante 5 horas. Após evaporação até à secura, o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna "flash" eluindo com éter de petróleo/etanol (98:2). 0 composto resultante foi dissolvido em diclorometano (2 mL) , tratado a 0°C com uma solução de HCl em éter 3,8 N (0,265 mL) e diluído com éter (100 mL) para precipitar o sal cloridrato que foi filtrado e seco para dar o composto em epígrafe.
Rendimento: 75% !h RMN (DMSO-dg + CF3COOD, 400 MHz) δ: 1,8-1,95 (2H, m); 2 (3H, s); 2,15-2,35 (2H, m); 3,64 (3H, s); 4,3-4,55 (5H, m); 4,9 (1H, m); 7,1-7,7 (13H, m); 8,6 (1H, d); 9,05 (1H, s).
Anál. Calculada para C31H31F2N3O4S, 0,9 HCl C 60,44 H 5,28 N 6,82 S 5,20
Encontrada C 60,07 H 5,39 N 6,69 S 4,95 MS (ESI) m/z 580 (MH+) 49 0 material de partida foi preparado como se segue:
Adicionou-se anidrido tríflico (170 mL; 1,01 mol) a uma solução de 2-hidroxi-4-metilbenzoato de metilo (153 g,· 0,92 mol) em piridina (1,5 L) , a 0°C. A mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Após evaporação da piridina, o resíduo foi acidificado até pH 3,5 com HC1 6 N e extraído com éter. A fase orgânica foi evaporada e o resíduo purificado por cromatografia "flash" eluindo com um gradiente de 0-5% de acetato de etilo/éter de petróleo para dar 2-trifluorometilsulfoniloxi-4-metilbenzoato de metilo (245 g; 90%) . 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ: 1,55 (3H, s) ; 2,45 (3H, s) ; 3,94 (3H, s); 7,26 (1H, s); 7,98 (1H, d).
Adicionou-se tetraquis(trifenilfosfina)paládio (9 g; 7,8 mmol) e etanol (780 mL) a uma suspensão de 4-metil-2-trifluorometanossulfoniloxibenzoato de metilo (58 g; 0,195 mmol), solução aquosa de bicarbonato de sódio 2 M (250 mL; 0,5 mol), ácido 4-fluorofenilborónico (30 g; 0,214 mol) e cloreto de lítio (16,5 g; 0,39 mol) em tolueno (1,65 mL), sob atmosfera de árgon. A mistura foi aquecida a refluxo durante 4 horas, diluída com acetato de etilo (1 L) e lavada com solução aquosa de hidróxido de sódio 1 N (1 L). A fase orgânica foi evaporada e o resíduo purificado por cromatografia em coluna "flash" utilizando acetato de etilo/éter de petróleo (95:5) para dar 2-(4-fluorofenil)-4-metilbenzoato de metilo (46,8 g; 99%). l-H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ: 2,41 (3H, s) ; 3,64 (3H, s) ; 7-7,03 (6H, m); 7,7 (1H, d).
Aqueceu-se a refluxo durante 6 horas uma solução de 2-(4-fluorofenil)-4-metilbenzoato de metilo (54,18 g; 0,22 mol), N-bromossuccinimida (39,6 g; 0,22 mol), 2,21-azobis (2- metilpropionitrilo) (0,25 g,- 1,5 mmol) e peróxido de benzoílo (0,25 g; 1 mmol) em tetraclorometano (550 mL). 0 sólido foi 50 filtrado e o filtrado foi evaporado para dar 4-bromometil-2-(4-fluorofenil)benzoato de metilo como um óleo (79,7 g; 79%) que foi utilizado no passo seguinte sem purificação. 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ: 3,65 (3H, s) ; 4,51 (2H, s) ; 7-7,5 (6H, m); 7,82 (1H, m). A uma solução de 1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-1-il)etanol (0,628 g; 3 mmol) em THF (30 mL) adicionou-se hidreto de sódio, sob atmosfera de árgon, (015 g; 3,6 mmol) . Após agitação durante 10 minutos, adicionou-se 4-bromometil-2- (4-fluorofenil)benzoato de metilo (2 g; 6,09 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Após evaporação até à secura, o resíduo foi extraído com acetato de etilo e purificado por cromatografia em coluna "flash" eluindo com diclorometano/etanol (97:3) para dar 2-(4-fluorofenil)-4-[2-(imidazol-l-il)-1-(4-(fluorofenil)etoximetil]benzoato de metilo como um óleo (0,635 g; 46%) . l-H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ: 3,65 (3H, s) ; 4-4,6 (5H, m) ; 6,87 (1H, s); 6.98 (1H, s); 7-7,3 (10H, m); 7,41 (1H, d); 7,80 (1H, d) .
Tratou-se 2-(4-fluorofenil)-4-[2-(imidazol-l-il)1-(4- fluorofenil)etoximetil]benzoato de metilo (0,635 g; 1,41 mmol) em metanol (15 mL) com solução aquosa de hidróxido de sódio 2 N (1,77 mL; 3,54 mmol) à temperatura ambiente durante 8 horas. Após evaporação do metanol, o resíduo foi retomado em água, o pH ajustado para 4,8 com HCl 2 N e extraído com diclorometano para dar ácido 2-(4-fluorofenil)-4-[2-(imidazol-l-il)-1-(4-fluoro-fenil)etoximetil]benzóico após evaporação como uma espuma (0,522 g; 85%). l-H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ: 4-4,25 (3H, m) ; 4,4-4,7 (2H, m) ; 6,9-7,5 (12H, m); 7,8 (2H, m). 51 51 Exemplo 2 Ácido (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-[2-(imidazol-l-il)-1-(4-fluorofen.il) etoximetil] benzoílamino}-4-metilsulfanil-butírico
Uma solução de (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-[2-(imidazol-l-il) -1- (4-fluorofenil)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanil-butirato de metilo (0,135 g; 0,23 mmol) em metanol (10 mL) foi tratada com solução aquosa de hidróxido de sódio 2 N (0,24 mL) e aquecida a 60°C durante 4 horas. Após evaporação do metanol, a mistura reaccional aquosa foi acidificada até pH 7,5 com HC1 6 N e purificada em sílica de fase reversa eluindo com um gradiente de 50-60% de metanol/tampão de carbonato de amónio (2 g/L, pH 7). As fracções apropriadas foram concentradas e liofilizadas para dar o composto em epígrafe como um sólido.
Rendimento: 65% !η RMN (DMS0-d6, 400 MHz) Ô: 1,7-1,9 (2H, m) ; 2 (3H, s); 2,15-2,35 (2H, m); 4,2-4,5 (5H, m); 4,8 (1H, m); 6,83 (1H, m); 7,1- 7,6 (14H, m); 8,4 (1H, s).
Anál. Calculada para C30H29F2N3O4S, H2O C 61,74 H 5,35 N 7,2 S 5,49
Encontrada C 61,97 H 5,26 N 7,14 S 5,05 MS (ESI) m/z 566 (MH+)
Exemplo 3 (2S)-2-{2-(4-Fluorofenil)-4-[2-(imidazol-l-il)-1-(4-fluorofenil) etoximetil] benzoí lamino)-4 -metilsulfanil-butirato de terc-butilo (2S)-2-{2-(4-Fluorofenil)-4- [2-(imidazol-l-il)-1-(4-fluorofenil)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de terc-butilo foi preparado por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 1, mas utilizando (2S)-2-amino-4-metil-sulfanil)butanoato de terc-butilo (éster terc-butílico de L-metionina) em vez de éster metílico de L-metionina. 52 O composto foi purificado por cromatografia em coluna "flash" com diclorometano/etanol (98:2), e adicionalmente purificado em sílica de fase reversa eluindo com um gradiente de 60-80% de metanol/tampão de carbonato de amónio (2 g/L, pH 7) -
Rendiment o: 5 2 % iH RMN (CDCI3, 400 MHz) δ: 1,42 (9H, s); 1,7-2 (2H, m) ; 2,15- 2,25 (2H, m); 4-4,3 (3H, m) ; 4,45-4,6 (3H, m) ; 6 (1H, m) ; 6,8- 7,6 (14H, m).
Anál. Calculada para C34H37F2N3O4S C 65,68 H 6,0 N 6,76 S 5,16
Encontrada C 65,33 H 6,11 N 6,66 S 4,84 MS (ESI) m/z 622 (MH+)
Exemplo 4 (2S)-2 -{2 -(4-Fluorofenil)-4-[2-(imidazol-l-il)-1-(tiazol-2-il) etoximetil]benzoílamino)-4-metilsulfanil-butirato de metilo O composto em epígrafe foi preparado por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 1, mas utilizando 1-(tiazol-2-il)-2-(imidazol-l-il)-etanol em vez de 1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)-etanol.
Rendimento: 7 6 % 1- H RMN (DMSO-d6+ AcOD) δ: 1,75-2 (2H, m) ; 2 (3H, s) ; 2,15-2,35 (2H, m) ; 3,64 (3H, s) ; 4,37 (1H, m) ; 4,65-4,9 (4H, m) ; 5,37 (1H, m); 7,15-7,95 (11H, m); 8,62 (1H, d); 9,09 (1H, s).
Anál. Calculada para C28H29FN4O4S2, 0,8 H2O, 1 HCl C 54,28 H 5,14 N 9,04 S 10,35
Encontrada C 54,30 H 5,16 N 9,30 S 10,24 MS (ESI) m/z 569 (MH+)
Exemplo 5 Ácido (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-[2-(imidazol-l-il)-1-(tiazol- 2- il)etoximetil]benzoilamino)-4-metilsulfanil-butirico 53 O composto em epígrafe foi preparado por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 2.
Rendimento: 78% l-H RMN (DMS0-d6 + CF3COOD, 400 MHz) δ: 1,8-2 (2H, m) ; 2 (3H, s) ; 2,2-2,4 (2H, m) ; 4,3 (1H, m) ; 4,6-4,9 (4H, m) ; 5,35 (1H, m) ; 7,1-7,4 (6H, m) ; 7,5-7,7 (2H, m) ; 7,8 (1H, m) ; 7,9 (1H, m) ; 9, 09 (1H, s) .
Anál. Calculada para C27H27FN4O4S2, 0,5 H2O C 57,53 H 5,01 N 9,94 S 11,38
Encontrada C 57,15 H 4,95 N 9,98 S 10,73 MS (ESI) m/z 555 (MH+)
Exemplo 6 (2S)-2 -{2 -(4-Fluorofenetil)-5-[2-(imidazol-l-il)-1-(4-fluorofenil)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanil-butirato de metilo O composto em epígrafe foi preparado por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 1, mas utilizando 5-bromometil-2-(4-fluorofenetil)benzoato de metilo em vez de 4-bromometil-2-(4-fluorofenil)benzoato de metilo.
Rendimento: 71% ^•H RMN (DMSO-dg + CF3COOD, 400 MHz) δ: 1,9-2,15 (2H, m) ; 2,05 (3H, s); 2,4-2,7 (2H, m); 2,75-3,1 (4H, m); 3,66 (3H, m); 4,25-4,7 (5H, m) ; 4,95 (1H, m) ; 7-7,30 (9H, m) ; 7,3-7,75 (4H, m) ; 9,04 (1H, s).
Anál. Calculada para C33H35F2N3O4S, 0,5 H2O, 1 HC1 C 60,68 H 5,71 N 6,43 S 4,91
Encontrada C 60,29 H 5,88 N 6,37 S 4,58 MS (ESI) m/z 608 (MH+) 0 material de partida foi preparado como se segue:
Uma mistura de 4-bromoisoftalato de dimetilo (54,75 g; 200,5 mmol) , água (330 mL) , tributilamina (55,63 g, 300,7 mmol), 4-fluoroestireno (55,63 g, 300,7 mmol) e cloreto de 54 bis(trifenilfosfina)paládio (II) (2,81 g, 4,01 mmol) foi aquecida a refluxo com agitação sob atmosfera inerte durante 6 horas. A reacção foi arrefecida até a temperatura ambiente e acidificada até pH 2 com HCl 2 M (700 mL). A camada aquosa foi removida e o sólido residual lavado com água (2 L) , dissolvido em diclorometano (1 L) e passado através de uma camada de sílica, eluindo com mais diclorometano (2 L) . A evaporação do diclorometano deu um sólido, que foi lavado com iso-hexano (1 L) e seco para dar 4-[2-(4-fluorofenil)etenil]-3-metoxicarbo-nil-benzoato de metilo (56,75 g) como um sólido amarelo pálido. Dados de RMN (CDCI3) δ: 3,96 (6H, 2s) , 7,01-7,10 (3H, m) , 7,49- 7,57 (2H, m) , 7,80 (1H, d), 7,97 (1H, d), 8,16 (1H, dd) , 8,60 (1H, s). MS m/e 315,3 (M+H)+.
Uma mistura de 4-[2-(4-fluorofenil)etenil]-3-metoxi-carbonilbenzoato de metilo (56,75 g, 180,6 mmol), acetato de etilo (900 mL) , paládio a 10% sobre carvão (6 g) foi agitada sob atmosfera de hidrogénio durante 6 horas. 0 catalisador foi filtrado e substituído por catalisador fresco (6 g) . A reacção foi então agitada sob atmosfera de hidrogénio durante 16 horas. O catalisador foi filtrado e o filtrado foi evaporado até à secura para dar, como uma goma incolor, 4-(4-fluorofenetil)-3-metoxicarbonilbenzoato de metilo (55,00 g).
Dados de RMN (CDCI3) δ: 2,84-2,93 (2H, m) , 3,25-3,33 (2H, m) , 3,93 (6H, 2s), 6,90-7,00 (2H, m), 7,09-7,16 (2H, m), 7,22-7,28 (1H, m), 8,05 (1H, dd), 8,57 (1H, s). MS m/e 317,3 (M+H)+.
Uma mistura de 4-(4-fluorofenetil)-3-metoxicarbonil-benzoato de metilo (51,00 g, 161,22 mmol), dioxano (650 mL) , metanol (650 mL) , hidróxido de sódio (7,10 g, 177,35 mmol) e água (100 mL) foi agitada à temperatura ambiente sob atmosfera inerte durante 16 horas. A reacção foi evaporada até à secura, adicionou-se água (500 mL) ao resíduo e a mistura foi extraída com éter dietílico. Os extractos orgânicos foram secos e 55 evaporados até à secura para dar 4-(4-fluorofenetil)-3-metoxicarbonilbenzoato de metilo (7 g) recuperado. A camada aquosa foi acidificada até pH 2 com HCl 2 M (300 mL) e extraída com acetato de etilo (300 mL) . Os extractos orgânicos foram secos, filtrados e evaporados até à secura para dar, como um sólido branco, ácido 4-(4-fluorofenetil)-3-metoxicarbonil-benzóico (42,00 g).
Dados de RMN (DMSO-dg) δ: 2,77-2,85 (2H, m) , 3,16-3,24 (2H, m) , 3,85 (3H, s), 7,04-7,12 (2H, m) , 7,17-7,25 (2H, m) , 7,45 (1H, d), 8,00 (1H, dd), 8,535 (1H, s) . MS m/e 301,4 (M-H)".
Uma mistura de ácido 4-(4-fluorofenetil)-3-metoxicarbonil-benzóico (16,5 g, 54,88 mmol), tetrahidrofurano (500 mL) e borano em tetrahidrofurano (complexo. 1 M, 218 mL, 218 mmol) foi agitada sob atmosfera inerte a refluxo durante 6 horas. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente e adicionou-se metanol (1 L) . Foi então evaporada até à secura para dar um óleo escuro que foi purificado por cromatografia em coluna "flash" utilizando iso-hexano/acetato de etilo (1:1) como eluente para dar, como uma goma transparente, 2-(4-fluorofenetil)-5-hidroxi-metilbenzoato de metilo (13,10 g). Dados de RMN (DMS0-d6) δ: 1,74 (1H, t) , 2,82-2,92 (2H, m) , 3,17-3,27 (2H, m) , 3,91 (3H, s), 4,71 (2H, d), 6,91-6,99 (2H, m) , 7,11-7,20 (3H, m) , 7,41 (1H, d), 7,91 (1H, s) . MS m/e 289 (M+H)+.
Uma mistura de 2-(4-fluorofenetil)-5-hidroximetilbenzoato de metilo (13,10 g, 45,43 mmol), tetrabrometo de carbono (18,08 g, 54,52 mmol) e trifenilfosfina (14,30 g, 54,52 mmol) em diclorometano (400 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. Adicionou-se mais tetrabrometo de carbono (7,54 g, 23,00 mmol) e trifenilfosfina (5,96 g, 23,00 mmol) em diclorometano (50 mL). A reacção foi directamente aplicada numa coluna "flash" de sílica e eluída com iso-hexano/acetato de 56 etilo (92,5:7,5) para dar 2-(4-fluorofenetil)-5-bromometil-benzoato de metilo (9,30 g) como uma goma transparente.
Dados de RMN (DMSO-dõ) δ: 2,81-2,91 (2H, m), 3,19-3,27 (2H, m) , 3.91 (3H, s), 4,48 (2H, s), 6,91-7,00 (2H, m), 7,12-7,17 (3H, m), 7,44 (1H, dd), 7,95 (1H, s). MS m/e's 351 e 353 (M+HJ+.
Exemplo 7 Ácido_(2S)-2-(2 -(4-fluorofenetil)-5-[2-(imidazol-l-il)-1-(4- fluorofenil)etoximetil]benzoílamino)-4-metil-sulfanilbutírico O composto em epígrafe foi preparado por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 2.
Rendimento: 73% !η RMN (DMS0-dg+ CF3COOD, 400 MHz) δ: 1,9-2,15 (2H, m) ; 2,04 (3H, s) ; 2,5-2,7 (2H, m) ; 2,75-3,1 (4H, m) ; 4,2-4,6 (5H, m) ; 4.91 (1H, m); 7-7,75 (13H, m); 9,03 (1H, s).
Anál. Calculada para C32H33F2N3O4S, H2O C 62,83 H 5,77 N 6,87 S 5,24
Encontrada C 62,48 H 5,66 N 6,87 S 5,06 MS (ESI) m/z 594 (MH+)
Exemplo 8 (2S)-2 -{2 -(4-Fluorobenzil)-5-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il) etoximetil]benzoílamino)-4-metilsulfanil-butirato de metilo 0 composto em epígrafe foi preparado por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 1, mas utilizando 5-bromometil-2-(4-fluorobenzil)benzoato de metilo em vez de 4-bromometil-2-(4-fluorofenil)benzoato de metilo.
Rendimento: 4 8 % 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ: 2-2,25 (2H, m); 2 (3H, s); 2,45-2,65 (2H, m) ; 3,78 (3H, a); 4,1-4,9 (8H, m) ; 6,9-7,45 (14H, m) ; 9 (1H, d) . 57
Anál. Calculada para C32H33F2N304S, 0,5 Η2θ, 1 HC1 C 60,13 H 5,52 N 6,57 S 5,02
Encontrada C 60,00 H 5,57 N 6,61 S 4,87 MS (ESI) m/z 594 (MH+) O material de partida foi preparado como se segue:
Adicionou-se uma solução 2 M de brometo de 4-fluorobenzil zinco em tetrahidrofurano (95 mL, 190 mmol; Negishi, E-i. e King, A. O., iT.O.C. 1977, 42, 1821) gota a gota ao longo de 20 minutos a uma solução com agitação de 4-bromoisoftalato de dimetilo (20,0 g, 73,2 mmol) e tris(dibenzilidenoacetona)-dipaládio(O) (0,67 g, 0,73 mmol) em tetrahidrofurano (270 mL) à temperatura ambiente em atmosfera inerte. Durante a adição a temperatura interna subiu para 40°C. A mistura reaccional foi agitada durante 3 horas e depois vertida em HCl 2 M (1500 mL) arrefecido num banho de gelo e o produto foi extraído com acetato de etilo (3 x 700 mL) . Os extractos foram lavados com água (500 mL) , solução saturada de cloreto de sódio (500 mL) , secos e o solvente evaporado a pressão reduzida. O resíduo foi retomado numa pequena quantidade de diclorometano, adicionou-se isohexano, e o sólido, que cristalizou da solução, foi filtrado e seco para dar 4-(4-fluorobenzil)-3-metoxicarbonilbenZoato de metilo (10,5 g).
Dados de RMN (CDCI3) δ: 3,87 (3H, s), 3,95 (3H, s), 4,40 (2H, s) , 6,93-7,00 (2H, m) , 7,06-7,15 (2H, m) , 7,29 (1H, d), 8,07 (1H, dd), 8,58 (1H, d). MS m/e 303 (M+H) + . 4-(4-Fluorobenzil)-3-metoxicarbonilbenzoato de metilo (16,9 g, 56,0 mmol) em metanol (270 mL) foi aquecido levemente para se obter uma solução. Adicionou-se hidróxido de sódio 2,5 M (27 mL, 67,5 mmol) e a mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante 5 horas. A mistura reaccional foi vertida em água (1200 mL) , acidificada com HCl concentrado e o produto extraído com diclorometano (3 x 400 mL) . Os extractos 58 combinados foram lavados com solução saturada de cloreto de sódio, secos e o solvente evaporado a pressão reduzida para dar uma mistura de ácido 4-(4-fluorobenzil)-3-metoxicarbonilben-zóico e do monoêster isomérico, como um sólido creme (15,8 g) . Dados de RMN (CDCI3) δ: 3,85-3,98 (3H, m) , 4,04-4,52 (2H, m) , 6,94-7,02 (2H, m), 7,07-7,17 (2H, m), 7,32-7,38 (1H, m), 8,15- 8,19 (1H, m), 8,63-8,75 (1H, m). MS m/e 287 (M-H)".
Uma solução 1,0 M de borano em tetrahidrofurano (100 mL, 100 mmol) foi lentamente adicionada a uma solução com agitação da mistura de monoêster (15,8 g, 54,7 mmol) à temperatura ambiente sob atmosfera inerte. Após a adição a mistura reaccional foi aquecida a refluxo durante 2 horas, arrefecida até à temperatura ambiente e adicionou-se metanol (100 mL) . 0 solvente foi evaporado a pressão reduzida e o produto foi purificado por cromatografia em coluna eluindo com acetato de etilo/isohexano (35:65 e 40:60) para dar 5-hidroximetil-2-(4-fluorobenzil)benzoato de metilo como um óleo amarelo claro (9,3 9) ·
Dados de RMN (CDCI3) δ: 1,82 (1H, t), 3,82 (3H, s), 4,35 (2H, s) , 4,68-4,74 (2H, m) , 6,90-6,99 (2H, m) , 7,05-7,13 (2H, m) , 7,21 (1H, d), 7,46 (1H, dd), 7,90 (1H, d). MS m/e 275 (M+H)+.
Adicionou-se trifenilfosfina (9,7 g, 37,0 mmol) e depois tetrabrometo de carbono (12,3 g, 37,0 mmol) a uma solução com agitação de 5-hidroximetil-2-(4-fluorobenzil)benzoato de metilo (4,6 g, 16,8 mmol) em éter anidro (150 mL) à temperatura ambiente. Após 4 horas a reacção foi filtrada e o filtrado concentrado a pressão reduzida. O produto foi purificado por cromatografia em coluna eluindo com acetato de etilo/isohexano (5:95) para dar 5-bromometil-2 -(4-fluorobenzil)benzoato de metilo como um óleo incolor (5,05 g). 59
Dados de RMN (CDC13) δ: 3,83 (3H, s), 4,37 (2H, s), 4,50 (2H, s) , 6,92-6,99 (2H, m) , 7,06-7,13 (2H, m) , 7,19 (1H, d), 7,43 (1H, dd), 7,95 (1H, d).
Exemplo 9 Ácido_(2S) -2-(2- (4-fluorobenzil) -5- [1- (4-fluorofenil) -2- (imidazol-l-il)etoximetil]benzoílamino)-4-metilsulfanil-butírico O composto em epígrafe foi preparado por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 2.
Rendimento: 77% 1H RMN (DMSO-dg + CF3COOD, 400 MHz) δ: 1,9-2,15 (2H, m); 2,04 (3H, s) ; 2,4-2,7 (2H, m) ; 4-4,75 (7H, m) ; 4,9 (1H, m) ; 7-7,7 (13H, m); 9,02 (1H, s).
Anál. Calculada para C31H31F2N3O4S, 1,5 H2O C 61,37 H 5,65 N 6,93 S 5,29
Encontrada C 61,31 H 5,72 N 7,17 S 5,09 MS (ESI) m/z 580 (MH+).
Exemplo 10 (2S)-2-(2-Fenil-4- [1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-1- il)etoximetil]benzoílamino)-4-metilsulfanilbutirato de metilo O composto em epígrafe foi preparado por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 1, mas utilizando 4-bromometil-2-fenilbenzoato de metilo em vez de 4-bromometil-2-(4-fluorofenil)benzoato de metilo.
Rendimento: 81% iH RMN (DMSO-dg + CF3COOD, 400 MHz) δ: 1,75-2 (2H, m); 2 (3H, S); 2,15-2,30 (2H, m); 3,64 (3H, s), 4,30-4,60 (5H, m); 7,1-7,8 (14H, m); 9,03 (1H, s).
Anál. Calculada para C31H32FN3O4S, 5,1 H2O C 62,25 H 5,56 N 7,03 S 5,36
Encontrada C 61,90 H 5,67 N 7,05 S 5,211 60 MS (ESI) m/z 562 (MH+). O material de partida foi preparado por um método semelhante ao utilizado para o 4-bromometil-2-(4- fluorofenil)benzoato de metilo no Exemplo 1.
Exemplo 11 Ácido_(2S)-2-{2-fenil-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-1- il)etoximetil]benzoílamino)-4-metilsulfanilbutírico O composto em epígrafe foi preparado por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 2.
Rendimento: 90% !h RMN (DMSO-dg + CF3C00D, 400 MHz) δ: 1,8-2 (2H, m) ; 2 (3H, S) ; 2,1-2,35 (2H, m) ; 4,25-4,60 (5H, m) ; 4,9 (1H, m) ; 7,1-7,8 (14H, m) ; 9,07 (1H, s) .
Anál. Calculada para C30H30FN3O9S, 0,12 H2O C 65,54 H 5,54 N 7,64 S 5,83
Encontrada C 65,13 H 5,47 N 7,71 S 5,86 MS (ESI) m/z 548 (MH+).
Exemplo 12 (2S)-2 -(2 -(4-Fluorofenil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2 -(imidazol-1-il) etoximetil] benzoílamino)-4-metilsulfon.il-butirato de metilo
Uma solução de (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2 -(imidazol-l-il)etoximetil]benzoílamino}-4-meti1-sulfanilbutirato de metilo (composto do Exemplo 1) (0,604 g; 10,4 mmol) e MCPBA a 70% (0,650 g; 2,6 mmol) em diclorometano (15 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 5 horas. A solução foi lavada com bicarbonato de sódio saturado e solução saturada de cloreto de sódio e evaporada até à secura. 0 resíduo foi purificado em sílica de fase reversa eluindo com um gradiente de 60-70% de metanol/tampão de carbonato de amónio (2 61 g/L; pH 7) . As fracções apropriadas foram concentradas e liofilizadas para dar o composto em epígrafe.
Rendimento: 63% 0 sal cloridrato foi preparado por adição de HCl 3,86 N em éter (180 μ!>) a uma solução do composto acima referido (0,32 g; 0,52 mmol) em diclorometano (3 mL) . A mistura foi diluída com éter (100 mL) e o precipitado resultante foi filtrado e seco. ^•H KMN (DMS0-d6 + CF3COOD, 400 MHz) δ: 2-2,3 (2H, m) ; 2,9-3,2 (2H, m) ; 3,02 (3H, s) ; 4,4-4,7 (5H, m) ; 5 (1H, m) ; 7,15-7,85 (13H, m); 8,85 (1H, d); 9,15 (1H, s).
Anál. Calculada para C31H31F2N3O6S, 0,9 HCl, 0,6 H2O C 56,82 H 5,09 N 6,41 S 4,99 Cl 4,87
Encontrada C 57,27 H 5,55 N 6,03 S 4,57 Cl 5,07 MS (ESI) m/z: 612 (MH+)
Exemplo 13 Ácido_(2S) -2-(2- (4-fluorofenil) -4- [1- (4-fluorofen.il) -2- (imidazol -1 - il) etoximetil] benzoí lamino} - 4 -met ilsulf onil -butirico 0 composto em epígrafe foi preparado a partir do Exemplo 12 por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 2. Rendimento: 84% iH RMN (DMS0-d6 + CF3COOD, 400 MHz) Ô: 1,9-3,2 (2H, m); 2,8-3,2 (2H, m) ; 2,96 (3H, s) ; 4,3-4,6 (5H, m) ; 4,96 (1H, m) ; 7,1-7,8 (13H, m); 8,8 (1H, d); 9,08 (1H, s).
Anál. Calculada para C30H29F2N3O5S, 1,2 H2O C 58,19 H 5,11 N 6,79 S 5,18
Encontrada C 58,22 H 5,24 N 6,78 S 4,93 MS (ESI) m/z: 598 (MH+)
Exemplo 14 (2S)-2 -(2-(4-Fluorofenil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2 -(imidazol-1-il)etoximetil]benzoílamino)-4-metilsulfonil-butirato de terc-butilo 62 O composto em epígrafe foi preparado a partir do Exemplo 3 por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 12. Rendimento: 67% 1H RMN (CDCI3 + CF3COOD, 400 MHz) Ô: 1,43 (9H, s); 2-2,4 (2H, m) ; 2,7-3 (2H, m) ; 2,90 (3H, s) ; 4,2-4,8 (6H, m) ; 6,95-7,4 (12H, m) ; 7,56 (1H, m); 8,34 (1H, s) .
Anál. Calculada para C34H37F2N3O6S C 62,47 H 5,7 N 6,43 S 4,9
Encontrada C 62,31 H 6,13 N 6,26 S 4,46 MS (ESI) m/z: 654 (MH+)
Exemplo 15 (2S)-2-{2 -(4-Fluorofenil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-1-il)etoximetil]benzoílamino)-4-metilsulfanil-butirato de N- metilpiperidin-4-ilo O composto em epígrafe foi preparado a partir de ácido 2-(4-fluorofenil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi-metil]benzóico por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 1 mas utilizando (2S)-2-amino-4- (metilsulfanil)butanoato de N-metilpiperidin-4-ilo (éster N-metilpiperidin-4-ílico de L-metionina) em vez de éster metílico de L-metionina.
Rendimento: 72,5% !h RMN (CDCI3, 400 MHz) δ: 1,6-2,1 (6H, m); 2,03 (3H, s); 2,1-2,70 (6H, m) ; 2,27 (3H, s) ; 4,05-4,30 (3H, m) ; 4,45-4,80 (4H, m); 6,05 (1H, m); 6,8-7,6 (14H, m).
Anál. Calculada para C 65,24 H 6,08 N 8,45 S 4,81
Encontrada C 64,89 H 6,33 N 8,38 S 4,54 MS (ESI) m/z: 663 (MH+)
Exemplo 16 (2S)-2-(2- (4-Fluorofenil)-4-[1-(tiazol-2-il)-2-(imidazol-l-il) etoximetil] benzoílamino)-4-metilsulfanil-butirato de fcerc- butilo 63 0 composto em epígrafe foi preparado a partir de ácido 2-(4-fluorofenil)-4-[1-(tiazol-2-il)-2-(imidazol-l-il)etoxi-metil]benzóico por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 1 mas utilizando éster terc-butílico de L-metionina em vez de éster metílico de L-metionina.
Rendimento: 63% P.f . : 50- 53 °C iH RMN (CDCI3, 400 MHz) δ: 1, ,42 (9H, s) ; 1,7-2,3 (4H, m); 2,04 (3H, s) ; tf* to 1 tf* , 7 5 (5H, m) ; 5, ,01 (1H, m) ; 6,18 (1H, m); 6,9-7,5 (10H, m) ; 7,60 (1H, , m) ; 7,82 (1H, m) .
Anál. Calculada para C31H35FN4O4S2 C 60,96 H 5,78 N 9,17 S 10,50
Encontrada C 60,57 H 5,89 N 9,41 S 9,88 MS (ESI) m/z: 611 (MH+)
Exemplo 17 (2S)-2-{2-(4-Fluorofenil)-4-[1-(tiazol-2-il)-2 -(imidazol-l-il) etoximetil] benzoílamino)-4-metilsulfonil-butirato de terc-butilo O composto em epígrafe foi preparado a partir de ácido 2-(4-fluorofenil)-4-[1-(tiazol-2-il)-2-(imidazol-l-il) etoximetil] -benzóico por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 1 mas utilizando o composto de sulfonilo apropriado em vez de éster metílico de L-metionina.
Rendimento: 76%
P.f.: 90-100°C iH RMN (CDCI3, 400 MHz) δ: 1,43 (9H, s); 2,2-2,4 (2H, m); 2,6-2,9 (2H, m) ; 2,87 (3H, s) ; 4,20-4,60 (4H, m) ; 4,99 (1H, m) ; 6,35 (1H, m) ; 6,85-7,45 (10H, m) ; 7,57 (1H, m) ; 7,84 (1H, m) . Anál. Calculada para C31H35FN4O6S2 C 57,93 H 5,49 N 8,72 S 9,98
Encontrada C 58,05 H 5,87 N 8,81 S 9,92 MS (ESI) m/z: 643 (MH+). 64
Exemplo 18 (2S)-2-(2- (4-Fluorofenil)-4-[1-(tiazol-2-il)-2-(imidazol-1-il) etoximetil] benzoílamino)-4-metilsulfon.il-butirato de metilo 0 composto em epígrafe foi preparado a partir do Exemplo 4 por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 12. Rendimento: 71%
P.f.: 50-53°C 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ: 2-2,4 (2H, m) ; 2,7-3 (2H, m) ; 2,87 (3H, s) ; 3,72 (3H, s) ; 4,20-4,80 (5H, m) ; 5 (1H, m) ; 6,5 (1H, m) ; 6,93 (1H, d); 7,1-7,4 (9H, m) ; 7,56 (1H, m) ; 7,84 (1H, m) .
Anál. Calculada para C28H29FN4O6S2, 0,4 H2O C 55,32 H 4,94 N 9,22 S 10,55
Encontrada C 55,07 H 5,11 N 8,88 S 10,24 MS (ESI) m/z: 601 (MH+).
Exemplo 19 Ácido (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-[1-(tiazol-2-il)-2 -(imidazol-1-il)etoximetil]benzoxlamino}-4-metilsulfonil-butírico 0 composto em epígrafe foi preparado a partir do Exemplo 18 por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 2, mas aquecendo à temperatura ambiente durante 1 hora em vez de a 60°C durante 4 horas.
Rendimento: 85% !η RMN (DMS0-d6 + CF3COOD, 400 MHz) δ: 1,95-2,3 (2H, m) ; 2,85- 3,15 (2H, m) ; 2,96 (3H, s) ; 4,35 (1H, m) ; 4,6-4,90 (4H, m) ; 5,40 (1H, m); 7,15-8 (11H, m); 9,11 (1H, s).
Anál. Calculada para C27H27FN4O6S2, 2 H2O, 0,7 CH3COONH4 C 50,41 H 5,35 N 9,73 S 9,48
Encontrada C 50,74 H 5,32 N 9,37 S 9,18 MS (ESI) m/z: 587 (MH+). 65
Exemplo 20 (2S)-2-{2-(4-Fluorofenil)-4-[1-(tiazol-2-il)-2-(imidazol-1-il) etoximetil] benzoílamino)-4-metilsulfanil-butirato de N-metilpiperidin-4-llo O composto em epígrafe foi preparado por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 1 mas utilizando éster N-metilpiperidin-4-ílico de L-metionina em vez de éster metílico de L-metionina.
Rendimento: 5 0 %
P.f.: 90-100°C ΧΗ RMN (CDCI3, 400 MHz) δ: 1,652,1 (6H, m); 2,03 (3H, s); 2,1-2,7 (6H, m) ; 2,17 (2H, s) ; 4,25-4,80 (6H, m) ; 5,01 (1H, m) ; 6,25 (1H, m); 6,85-7,4 (10H, m); 7,6 (1H, m); 7,81 (1H, m).
Anál. Calculada para C33H38FN5O4S2, 0,7 H2O C 59,63 H 5,98 N 10,54 S 9,65
Encontrada C 59,72 H 5,90 N 10,37 S 9,16 MS (ESI) m/z: 652 (MH+).
Exemplo 21 (2S)-2 -{2 -(4-Fluorofenetil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2 -(imidazol-1-il) etoximetil] benzoílamino-)·-4-metilsulfonil-butirato de terc-butilo 0 composto em epígrafe foi preparado a partir de ácido 2-(4 -fluorofenetil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoximetil] benzóico por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 1 mas utilizando o éster sulfonil terc-butílico apropriado ((2S)-2-amino-4-(metilsulfonil)butanoato de terc-butilo) em vez de éster metílico de L-metionina.
Rendimento: 30% !η RMN (DMSO-dô/ 400 MHz) Ô: 1,40 (9H, s) ; 2,1-2,4 (2H, m) ; 2,7-3,05 (4H, m); 3,08 (3H, s); 3,3-3,4 (2H, m); 4,20-4,50 (5H, m); 6,85 (1H, s); 7-7,55 (14H, m); 8,75 (1H, m).
Anál. Calculada para C36H41F2N3O6S, 0,3 H2O C 62,92 H 6,10 N 6,11 S 4,67 66
Encontrada C 62,57 H 6,26 N 6,06 S 4,33 MS (ESI) m/z: 682 (MH+).
Exemplo 22 (2S)-2 -(2 -(4-Fluorofenetil)-4-[1-(4-£luorofenil)-2 -(imidazol-1-il)etoximetil]benzoílamino}-4-metil3ulfanil-butirato de tere-butilo 0 composto em epígrafe foi preparado a partir de ácido 2-{2-(4-fluorofenetil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-1-il)etoximetil]benzóico por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 3.
Rendimento: 31% l-H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ: 1,50 (9H, s) ; 2,10 (3H, s) ; 2,05-2,35 (2H, m) ; 2,64 (2H, m) ; 2,85-3,15 (4H, m) ; 4-4,15 (3H, m) ; 4,4-4,55 (2H, m)j 4,80 (1H, m); 6,8-7,45 (14H, ).
Anál. Calculada para C36H41F2N3O4S, 0,3 H2O C 65,99 H 6,40 N 6,41 S 4,89
Encontrada C 65,99 H 6,78 N 6,41 S 4,55 MS (ESI) m/z: 650 (MH+)
Exemplo 23 Ácido_(2S)-2-{2 -(4-fluorofenetil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2 - (imidazol-l-il)etoximetil]benzoilamino)-4-metil-sulfonilbutírico
Uma solução do Exemplo 21 (0,1 g; 0,15 mmol) em solução em diclorometano (0,5 mL) e TFA (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Após evaporação até à secura, o resíduo foi purificado em sílica de fase reversa eluindo com um gradiente de 50-60% de metanol/tampão de carbonato de amónio (2 g/L, pH 7) . As fracções apropriadas foram concentradas e liofilizadas para dar o composto em epígrafe.
Rendimento: 4 5 % 67 1H RMN (DMSO-dg+ CF3COOD, 400 MHz) δ: 2,1-2,4 (2H, m); 2,75-3,1 (2H, m); 2,99 (3H, s) ; 3,1-3,4 (4H, m) ; 4,25-4,60 (5H, m) ; 4,90 (1H, m) ; 7-7,75 (13H, m); 9,03 (1H, s) .
Anál. Calculada para C32H33F2N3O6S, 2 H2O C 58,08 H 5,64 N 6,35 S 4,85
Encontrada C 57,88 H 5,30 N 6,27 S 4,97 MS (ESI) m/z: 626 (MH+).
Exemplo 24 (2S)-2-{2-(4-Fluorofenil)-4- [1- (4-fluorofenll)-2-(2-hidroximetilimidazol-l-il)etoximetil]benzoílamino)-4-metilsulfanilbutirato de terc-butilo O composto em epígrafe foi preparado por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 1 mas utilizando o éster terc-butílico de L-metionina em vez do éster metílico de lime tionina .
Rendimento: 60% l-H RMN (DMSO, 400 MHz) δ: 1,40 (9H, s) ; 1,7-2,3 (4H, m) ; 1,99 (3H, s) ; 4,15-4,50 (7H, m) ; 4,85 (1H, m) ; 5,26 (1H, m) ; 6,74 (1H, m); 7,05-7,5 (12H, m); 8,52 (1H, d).
Anal. Calculada para C35H39F2N3O5S C 64,5 H 6,03 N 6,45 S 4,92
Encontrada C 64,74 H 6,05 N 6,23 S 4,57 MS (ESI) m/z: 652 (MH+). 0 material de partida foi preparado como se segue:
Uma solução de 2-hidroximetilimidazole (1,96 g; 0,02 mol) , imidazole (3,4 g; 0,05 mol) , cloreto de terc- butildifenilsililo (6,6 g; 0,024 mol) em DMF (20 mL) foi agitada sob atmosfera de árgon durante 16 horas. A mistura foi extraída com acetato de etilo e purificada por cromatografia em coluna "flash" eluindo com um gradiente de 50-70% de acetato de etilo/éter de petróleo para dar 2-(terc- butildifenilsililoximetil)imidazole como um sólido. 68
Rendimento: 82% 1h RMN (CDC13# 400 MHz) Ô: 1,1 (9H, s) ; 4,85 (2H, s) ; 6,99 (2H, S); 7,3-7,5 (6H, m); 7,65 (4H, m).
Uma solução de 2-(terc-butildifenilsililoximetil) imida-zole (3,37 g; 0,01 mol), bromometil acetona (2,17 g; 0,01 mol) e TEA (1,67 mL; 0,012 mol) em acetato de etilo (40 mL) foi aquecida a refluxo sob atmosfera de árgon durante 6 horas. Após filtração do material insolúvel e evaporação até à secura, o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna "flash" eluindo com acetato de etilo/éter de petróleo (50:50) para dar 1- (4-fluoroben-zoílmetil)-2-(terc-butildifenilsililoximetil) imidazole.
Rendimento: 71% iH RMN (CDCI3, 400 MHz) δ: 0,96 (9H, s) ; 7,78 (2H, s) ; 5,53 (2H, s); 6,8-7,6 (14H, m); 7,95 (2H, m).
Adicionou-se borohidreto de sódio (0,41 g; 1,06 mmol) em porções a 0°C a uma solução de 1-(4-fluorobenzoílmetil)-2-(terc-butildifenilsililoximetil)imidazole (4,81 g; 1,01 mmol) em metanol (100 mL) . A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 16 horas. Adicionou-se HCl 12 N (0,84 mL) e em seguida evaporou-se até à secura e purificou-se por cromatograf ia em coluna "flash" eluindo com diclorometano /etanol (96:4) para dar 1-[2-(4-fluorofenil)-2-hidroxietil]-2-(terc- butildifenil-sililoximetil)imidazole.
Rendimento: 63% RMN (CDCI3, 400 MHz) δ: 1,10 (9H, s) ; 4,19 (2H, m) ; 4,61 (2H, s); 4,95 (1H, m); 6,8-7,8 (16H, m).
Preparou-se 2-(4-fluorofenil)-4-{l-(4-fluorofenil)-2-[2-(terc-butildifenilsililoximetil)imidazol-l-il] etoximetil}-ben- zoato de metilo por um método semelhante ao utilizado no Exemplo 1 mas utilizando 1-[2-(4-fluorofenil)-2-hidroxietil]-2-(terc-butildifenilsililoximetil)imidazole em vez de 1-(4-fluorofenil) -2-(imidazol-l-il)etanol.
Rendimento: 90% 69 1H RMN (CDCI3/ 400 ΜΗζ) δ: 1,01 (9Η, s) ; 3,65 (3Η, s); 4,1-4,45 (4Η, m) ; 4,60 (3H, τη) ; 6,90-7,8 (23H, τη).
Tratou-se 2-(4-fluorofenil) -4-{l-(4-fluorofenil)-2-[2- (terc-butildifenilsililoximetil)imidazol-l-il]etoximetil}- benzoato de metilo (4 g; 5,58 mmol) em metanol (50 mL) com solução aquosa de hidróxido de sódio 2 N (5 mL; 11,1 mmol) a 80°C durante 7 horas. Após evaporação do metanol, o resíduo foi retomado em água, o pH ajustado para 5 com HC1 6 N e extraído com diclorometano/etanol (95/5) para dar ácido 2-(4-fluorofenil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(2-hidroximetilimidazol-l-il)etoximetil]benzóico.
Rendimento: 8 3 % !η RMN (DMSO + CF3COOD) δ: 4,2-4,4 (4H, m) ; 4,5-5 (3H, m) ; 7- 7,7 (13H, m).
Exemplo 25 (2S)-2 -{2 -(4-Fluorofenil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(2-hidroximetilimidazol-l-il) etoximetil] benzoílamino')·-4-metilsulfanilbutirato de metilo O composto em epígrafe foi preparado a partir de ácido 2-(4-fluorofenil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(2-hidroximetilimidazol-1-il)etoximetil]benzóico por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 1.
Rendimento: 6 0 % lH RMN (CDCI3, 400 MHz) Ô: 1,7-2,3 (4H, m) ; 2,02 (3H, s) ; 3,68 (3H, s) ; 4,1-4,30 (3H, m) ; 4,45-4,8 (5H, m) ; 6,1-6,2 (1H, m) ; 6,84 (2H, m) ; 7,05-7,20 (6H, m) ; 7,22-7,4 (4H, m) ; 7,57 (1H, m) .
Anál. Calculada para C32H33F2N3O5S C 63,04 H 5,46 N 6,89 S 5,26
Encontrada C 63,40 H 5,64 N 6,64 S 4,84 MS (ESI) m/z: 610 (MH+). 70
Exemplo 26 Ácido_(2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(2- hidroximetilimidazol-l-il)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanilbutírico 0 composto em epígrafe foi preparado a partir do Exemplo 25 por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 2. Rendimento: 80% l-H RMN (CDCI3 + CF3COOD, 400 MHz) δ: 1,8-2,5 (4H, m) ; 2,06 (3H, s) ; 4,2-4,4 (3H, m) ; 4,5-5 (5H, m) ; 7-7,4 (12H, m) ; 7,6 (1H, m) .
Anál. Calculada para C31H31F2N3O5S, 0,5 H2O C 61,58 H 5,33 N 6,95 S 5,30
Encontrada C 61,63 H 5,55 N 6,85 S 4,91 MS (ESI) m/z: 596 (MH+).
Exemplo 27 (2S)-2-(2 -(4-Fluorofenil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(2-hidroximetilimidazol-l-il)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfonilbutirato de terc-butilo O composto em epígrafe foi preparado a partir de ácido 2-(4-fluorofenil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(2-hidroximetilimidazol-1-il)etoximetil]benzóico e do éster terc-butílico apropriado por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 1. Rendimento: 42% l-H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ: 1,4 (9H, s) ; 1,9-2,4 (2H, m) ; 2,6-2,95 (2H, m) ; 2,86 (3H, s) ; 4,1-4,3 (3H, m) ; 4,45-4,7 (5H, m) ; 6,15-6,25 (1H, m); 6,85 (2H, m); 7,05-7,4 (10H, m); 7,55 (1H, m) .
Anál. Calculada para C35H39F2N3O7S C 61,48 H 5,75 N 6,15 S 4,69
Encontrada C 60,99 H 6,09 N 6,04 S 4,92 MS (ESI) m/z: 684 (MH+). 71
Exemplo 28 (2S)-2-{2 -(4-Fluorofenil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2 -(imidazol-1-il) etoximetil]benzoílamino}-2-metil-4-metilsulfanilbutirato de metilo O composto em epígrafe foi preparado por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 1 mas utilizando éster metllico de a-metil-L-metionina.
Rendimento: 60% !h RMN (CDCI3, 400 MHz) δ: 1,47 (3H, s) ; 1,9-2,6 (4H, m) ; 2,03 (3H, s); 3,70 (3H, s); 4,05-4,6 (5H, m); 6,34 (1H, s); 6,8-7,6 (14H, m) .
Anãl. Calculada para C32H33F2N3O4S, 0,3 H2O C 64,16 H 5,65 N 7,01 S 5,35
Encontrada C 63,95 H 5,65 N 6,84 S 4,80 MS (ESI) m/z: 594 (MH+).
Exemplo 2 9 Ácido_(2S) -2-{2- (4-fluorofenil) -4- [1- (4-fluorofenil) -2- (imidazol-l-il)etoximetil]benzoílamino)-2-metil-4-metilsulfanilbutírico O composto em epígrafe foi preparado por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 2.
Rendimento: 42% iH RMN (CDCI3, 400 MHz) δ: 1,57 (3H, d); 2,02 (3H, d); 2,05-2,3 (2H, m) ; 2,6-2,8 (2H, m) ; 4,05-4,25 (3H, m) ; 4,45-4,65 (2H, m) ; 6,8-7,35 (12H, m); 7,54 (1H, m); 7,86 (1H, s).
Anál. Calculada para C31H31F2N3O4S, 0,6 H2O MS (ESI) m/z: 580 (MH+).
Exemplo 30 N- (4-Clorobenzenossulfonil)-(2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoximetil]benzoíl-amino}-4-metilsulfanilbutiramida 72 O composto em epígrafe foi preparado por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 1 mas utilizando N- (4-clorobenzenossulfonil)-(2S)-2-amino-4-metilsulfanilbutiramida. Rendimento: 42% !η RMN (CDCI3 + CD3COOD, 400 MHz) δ: 1,6-2,2 (4H, m); 1,95 (3H, d); 4,15-4,35 (2H, m) ; 4,45-4,70 (3H, m) ; 6,9-7,5 (15H, m) ; 7,90 (2H, m); 8,42 (1H, d).
Anãl. Calculada para C26H33CIF2N4O5S2, 0,3 H2O C 58,04 H 4,55 N 7,52 S 8,61
Encontrada C 57,96 H 4,70 N 7,4 0 S 8,27 MS (ESI) m/z: 739 (MH+).
Exemplo 31 (2S)-2 -{2 -(4-Fluorofenetil)-5-[1-(4 — £luorofenil)-2-(imidazol-1-il)etoximetil]benzoilamino}-4-metilsulfanil-butirato de 2-(morfolinometil)prop-2-ilo
Uma mistura de ácido 2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(4- fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoximetil]benzóico (0,462 g, 1 mmol), EDC (0,211 g, 1 mmol), l-hidroxi-7-azabenzotriazole (0,148 g, 1,1 mmol), DMAP (0,122 g, 1 mmol) e (2S)-2-amino-4-metilsulfanilbutirato de 2-(morfolinometil)prop-2-ilo (0,29 g, 1 mmol) em diclorometano (10 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 16 horas. A mistura foi extraída com diclorometano, evaporada até à secura e purificada por cromatografia em coluna "flash" eluindo com diclorometano/etanol (97:3) para dar o composto em epígrafe. Rendimento: 6 0 % ÍH RMN (CDCI3, 400 MHz) δ: 1,52 (6H, m); 2-2,34 (2H, m); 2,11 (3H, m) ; 2,51-2,79 (8H, m) ; 2,80-3,14 (4H, m) ; 3,67 (4H, m) ; 3,98-4,17 (3H, m) ; 4,4-4,53 (2H, m) ; 4,77 (1H, m) ; 6,81-7,48 (14H, m).
Anál. Calculada para C40H48F2N4O5S C 65,37 H 6,58 N 7,60 S 4,36
Encontrada C 65,2 0 H 6,96 N 7,77 S 4,69 MS (ESI) m/z: 735 (MH+). 73 O material de partida (2S)-2-amino-4-metilsulfanilbuti-rato de 2-(morfolinometil)prop-2-ilo foi preparado como se segue:
Adicionou-se uma solução de N- (2-oxopropil)morfolina (82 g, 0,57 mmol) em éter dietílico (400 mL) a uma solução de CH3MgBr 3 M (500 mL, 1,5 mL) em éter dietílico anidro (2 L) e agitou-se a 0°C sob atmosfera de árgon. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 16 horas, tratada com HC1 12 N (50 mL) e extraída com acetato de etilo. 0 produto foi purificado por cromatografia em coluna "flash" eluindo com acetato de etilo para dar N- (2-hidroxi-2-metilpropil)morfolina.
Rendimento: 3 3 % 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ: 1,05-1,4 (6H, m) ; 2,32 (2H, s) ; 2,55-2,72 (4H, m); 2,98 (1H, br); 3,6-4,82 (4H, m).
Uma solução de N- (2-hidroxi-2-metilpropil)morfolina (9,8 g, 62 mmol), N-benziloxicarbonil-L-metionina (12,6 g, 44 mmol), hexafluorofosfato de bromo-tris-pirrolidino-fosfónio (25 g, 54 mmol), DMAP (5,4 g, 44 mmol) em diclorometano (250 mL) foi agitada, na presença de crivos moleculares 4 Â (5 g), à temperatura ambiente durante 48 h. Após evaporação até à secura, a mistura foi retomada em éter dietílico e o material insolúvel eliminado por filtração. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogeno carbonato de sódio e uma solução saturada de cloreto de sódio, evaporada até à secura e purificada por cromatografia em coluna "flash" eluindo com diclorometano/etanol (98:2) para dar (2S)-2-(benzilo-xicarbonil-amino)-4-metilsulfanilbutirato de 2-(morfolinometil) prop-2-ilo (40%) . !η RMN (CDCI3, 400 MHz) δ: 1,51 (6H, m) ; 1,85-2,27 (2H, m) ; 2.09 (3H, s) ; 2,45-2,70 (8H, m) ; 3,66 (4H, m) ; 4,36 (1H, m) ; 5.10 (2H, m); 5,25-5,40 (1H, m); 7,3-7,5 (5H, m).
Adicionou-se uma solução de HCO2NH4 (5,6 g, 88,5 mmol) em água (10 mL) gota a gota a uma suspensão do composto (2S)-2- 74 (benziloxicarbonilami.no) -4-metilsulfanilbutirato de 2-(morfo-linometil)prop-2-ilo (7,5 g, 17,7 mmol) e paládio a 10% sobre carvão (7,5 g) em DMF (80 mL) . A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 18 horas. Após filtração através de Celite, o filtrado foi evaporado até à secura, neutralizado com amoníaco em éter dietílico até pH 9 e extraído com mais éter. Após evaporação o composto foi purificado por cromatografia em coluna "flash" eluindo com um gradiente de 1-5% de etanol/diclorometano para dar (2S)-2-amino-4- metilsulfanil-butirato de 2-(morfolinometil)prop-2-ilo (50%). !h RMN (CDCI3, 400 MHz) δ: 1,51 (6H, m) ; 1,6-2,08 (2H, m) ; 2,12 (3H, s) ; 2,50-2,80 (8H, m); 3,47 (1H, m) ; 3,62-3,77 (4H, m) . Exemplo 32 (2S)-2-{4-[1-(4-Fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2- (4-fluorofen.il)benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de metilo
Adicionou-se ADDP (0,404 mg; 1,53 mmol) a uma solução de 1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etanol (0,3 g; 1,45 mmol), (2S)-2-[2-(4-fluorofenil)-4-hidroxibenzoílamino]-4-metilsulfanilbutirato de metilo (0,49 g; 1,45 mmol) e trifenilfosfina (0,4 g; 1,52 mmol) em THF (8 mL). A mistura foi agitada durante 16 horas à temperatura ambiente. Após evaporação até â secura, o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna "flash" eluindo com um gradiente de 1-20% de etanol/diclorometano. 0 produto foi adicionalmente purificado em sílica de fase reversa eluindo com 60% de metanol (tampão de carbonato de amónio (2 g/L, pH 7) . As fracções apropriadas foram evaporadas, redissolvidas em diclorometano (2 mL) , tratadas a 0°C com uma solução de HCl 3,8 N em éter dietílico, diluídas com éter dietílico (100 mL) para precipitar o sal cloridrato que foi filtrado e seco para dar o composto em epígrafe (25%) . 1H RMN (CDCI3, 400 MHz) δ: 1,7-2,1 (2H, m) ; 2 (3H, s) ; 2,1-2,25 (2H, m) ; 3,65 (3H, s) ; 4,35 (2H, m) ; 4,60 (1H, m) ; 5,36 (1H, m); 5,82 (1H, d); 6,7-7,5 (14H, m). 75 MS (ESI) m/z: 566 (MH+). O material de partida foi preparado como se segue:
Adicionou-se trietilamina (29 mL; 0,206 mol) a uma solução de 4-metoxissalicilato de metilo (25,0 g; 0,137 mol) em diclorometano (500 mL) e a solução foi arrefecida a 0°C. Adicionou-se anidrido trifluorometanossulfónico (29 mL; 0,172 mol) gota a gota e a reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. Adicionou-se mais porções de trietilamina e anidrido tríflico ao longo de 16 horas até que a HPLC mostrou a ausência de material de partida. A reacção foi lavada com HC1 2 N e a fase orgânica foi evaporada para dar um óleo castanho. Purificação por cromatografia em coluna "flash" eluindo com acetato de etilo/iso-hexano (1:1) deu 4-metoxi-2-trifluoro- metilsulfoniloxibenzoato de metilo como um óleo amarelo pálido (23,4 g) .
Rendimento: 7 6% !η RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 3,88 (3H, s) ; 3,93 (3H, s) ; 6,79 (1H, d); 6,96 (1H, dd); 8,06 (1H, d). MS (ESI) m/z: 315 (MH+).
Adicionou-se solução aquosa saturada de hidrogeno carbonato de sódio (50 mL) a uma solução de 4-metoxi-2-trifluorometilsulfoniloxibenzoato de metilo (6,3 g; 0,02 mol) e ácido 4-fluorobenzenoborónico (3,36 g; 0,024 mol) em DME (150 mL) à temperatura ambiente sob atmosfera de árgon. Adicionou-se então tetraquis(trifenilfosfina)paládio (928 mg; 0,8 mmol) e a reacção foi aquecida a refluxo durante 3,5 horas para dar uma solução homogénea. Após arrefecimento até à temperatura ambiente, a reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A fase orgânica foi lavada com HC1 2 N, água e solução saturada de cloreto de sódio, filtrada através de papel de filtro 1PS e o solvente removido sob vácuo para dar 4-metoxi-2-(4-fluorofenil)benzoato de metilo como um sólido oleoso amarelo (7,2 g) que foi utilizado sem purificação adicional. 76 ^H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 3,65 (3H, s) ; 3,87 (3H, s) ; 6,79 (1H, d); 6,91 (1H, dd); 7,08 (2H, dd); 7,25 (2H, dd); 7,90 (1H, d) . MS (ESI) m/z: 261 (MH+). A uma solução de 4-metoxi-2-(4-fluorofenil)benzoato de metilo (9,8 g; 0,029 mol) em metanol (75 mL) adicionou-se solução aquosa de hidróxido de sódio 2 N (45 mL) e a mistura foi aquecida a refluxo durante 1,5 h. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente, filtrada e o filtrado concentrado sob vácuo para remover o metanol. A fase aquosa residual foi lavada com éter dietílico, acidificada até pH 1 com HCl concentrado e extraída com acetato de etilo. Os extractos orgânicos foram secos (MgS04) e o solvente removido sob vácuo para dar ácido 4-metoxi-2-(4-fluorofenil)benzóico como um sólido branco (7,7 g) , que foi utilizado sem purificação adicional. 1H RMN (DMSO dg, 300 MHz) δ: 3,80 (3H, s); 6,80 (1H, dd); 7,18 (2H, dd) ; 7,31 (2H, dd) ; 7,76 (1H, d). MS (ESI) m/z: 247 (MH+).
Adicionou-se uma solução de tribrometo de boro (0,066 mol) em diclorometano (66 mL) gota a gota a uma solução de ácido 4-metoxi-2-(4-fluorofenil) benzóico (7,7 g; 0,029 mol) em diclorometano seco (215 mL) sob árgon a 0°C. A reacção foi agitada durante 1 hora a 0°C e deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada durante mais 16 horas. Foi então vertida em água gelada e extraída primeiro com diclorometano e depois com acetato de etilo. Os extractos orgânicos combinados foram lavados com hidrogeno carbonato de sódio aquoso saturado e a fase aquosa acidificada até pH 1 com HCl concentrado e extraída com acetato de etilo. Os extractos de acetato de etilo foram secos (MgS04) e concentrados sob vácuo para dar ácido 4- hidroxi-2-(4-fluorofenil) benzóico como um óleo amarelo (4,5 g) , que foi utilizado sem purificação adicional. ΧΗ RMN (DMS0-d6, 300 MHz) δ: 6,63 (1H, d); 6,80 (1H, dd); 7,15 (2H, dd) ; 7,26 (2H, dd) ; 7,71 (1H, d). MS (ESI) m/z: 233 (MH+). 77 A uma solução de ácido 4-hidroxi-2-(4-fluorofenil)ben-zóico (4,5 g; 0,019 mol) em DMF (90 mL) arrefecida a 0°C sob atmosfera de árgon adicionou-se sequencialmente NMM (6,4 mL; 0,058 mol), cloridrato do éster metílico de L-metionina (4,0 g; 0,020 mol), EDC (4,47 g; 0,023 mol) e HOBT (2,7 g; 0,020 mol) e a reacção foi aquecida até à temperatura ambiente e agitada durante 3 horas. A DMF foi removida sob vácuo e o resíduo partilhado entre acetato de etilo e água. A fase orgânica foi lavada com água e solução saturada de cloreto de sódio, filtrada através de papel de filtro PS1 e concentrada sob vácuo para dar um óleo amarelo. A purificação por cromatografia em coluna "flash" eluindo com acetato de etilo/iso-hexano (1:1) deu (2S)-2-[4-hidroxi-2-(4-fluorofenil)benzoílamino]-4- metilsulfanilbutirato de metilo como uma espuma branca (5,7 g) . Rendimento: 51% (de quatro etapas) ÍH RMN (DMSO-d6, 300 MHz) δ: 1,80 (1H, m) ; 1,95 (1H, m) ; 2,03 (3H, s) ; 2,20 (2H, dd) ; 3,70 (3H, s) ; 4,65 (1H, m) ; 5,97 (1H, d); 6,70 (1H, d); 6,78 (1H, dd) ; 6,82 (1H, br s) ; 7,07 (2H, dd); 7,30 (2H, dd); 7,55 (1H, d).
Anál. Calculada para Ci9H20FNO4s C 60,46 H 5,34 N 3,71 S 8,50 F 5,03
Encontrada C 60,1 H5,4 N3,6 S8,3 F5,2 MS (ESI) m/z: 378 (MH+).
Exemplo 33 Ácido (2S)-2 -f 4 -[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)-etoxi]-2 -(4 -fluorofenil)benzoílamino)-4-metilsulfanil-butírico
Tratou-se uma solução de (2S)-2-{4-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2-(4-fluorofenil)benzoílamino}-4-metil-sulfanilbutirato de metilo (0,037 g; 0,061 mmol) em metanol (3 mL) com solução aquosa de hidróxido de sódio 2 N (0,32 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Após evaporação do metanol, o resíduo aquoso foi acidificado até pH 78 7,5 com HCl 6 N e purificado em sílica de fase reversa eluindo com um gradiente de 50-60% de metanol/tampão de carbonato de amónio (2 g/L, pH 7) . As fracções apropriadas foram concentradas e liofilizadas para dar o composto em epígrafe como um sólido.
Rendimento: 42% % RMN (DMSO-d6, 400 MHz) δ: 1,7-2 (2H, m); 2 (3H, s); 2,1-2,3 (2H, m) ; 4,16 (1H, s); 4,42 (2H, m); 5,8 (1H, m) ; 6,8-7,7 (14H, m); 8,25 (1H, m).
Anál. Calculada para C29H27F2N3O4S, 0,9 H2O C 61,34 H 5,11 N 7,4 S 5,65
Encontrada C 61,27 H 4,75 N 7,20 S 5,36 MS (ESI) m/z: 552 (MH+).
Exemplo 34 (2S)-2-{5-[1-(4-Fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2- (4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de metilo
Uma mistura de ácido 5-(1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il) etoxi)-2-(4-fluoro-fenetil)benzóico (570 mg, 1,27 mmol), éster metílico de L-metionina (510 mg; 2,5 mmol), cloridrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-2-etilcarbodiimida (EDC) (370 mg, 1,9 mmol) em diclorometano (50 mL) , foi agitada à temperatura ambiente durante 16 horas. Foi então lavada com ácido cítrico aquoso (2 x 40 mL, 1 M), solução saturada de cloreto de sódio, seca (MgS04) e evaporada até à secura e o resíduo assim obtido purificado por cromatografia em sílica (coluna Dynamax de 40 g, eluição de gradiente com 2-6% de metanol/diclorometano) . As fracções relevantes foram combinadas e evaporadas para dar 640 mg de um produto que foi redissolvido em diclorometano, lavado com ácido cítrico aquoso (4 x 30 mL, 1 M), solução saturada de cloreto de sódio e evaporado para dar um resíduo. Este foi redissolvido em diclorometano (40 mL) a 0°C, tratado com HCl 1 M/Et20 (10 mL) , agitado durante 2 horas, a solução evaporada até à secura e o resíduo triturado com éter para dar o sal 79 cloridrato do composto em epígrafe como um sólido branco (343 mg) . l-H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 2-2,1 (4H, m) ; 2,15-2,32 (1H, m) ; 2,55 (2H, t) ; 2,72-2,82 (2H, m) ; 2,84-2,98 (2H, m) ; 3,78 (3H, d); 4,2-4,4 (2H, m) ; 4,78-4,86 (1H, m) ; 5,25-5,3 (1H, m) ; 6,34 (1H, d); 6,7 (1H, dd) ; 6,8-6,83 (1H, m) ; 6,84-7,00 (4H, m) ; 7,0-7,12 (5H, m); 7,2-7,3 (2H, m); 7,44 (1H, s). MS (ES+) m/z 594,3 (MH+)
Anál. Calculada para C32H33F2N3O4S.HCl.H2O C 59,3 H 5,6 N 6,5 S 4,9
Encontrada C 59,3 H5,5 N6,l S5,2%
Exemplo 35 Ácido (2S)-2-{5- [1- (4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)-etoxi]- 2 -(4-fluorofenetil)benzoílamino)-4-metilsulfanil-butírico
Tratou-se uma solução de (2S)-2-{5-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il) etoxi] -2- (4-fluorofenetil) benzoílamino} -4-metil-sulfanilbutirato de metilo (140 mg, 0,24 mmol) em metanol (5 mL) com hidróxido de sódio (190 mg, 4,7 mmol) em água (1 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 6 horas. A mistura foi acidificada até pH 1 com HC1 1 M e evaporada até à secura. O resíduo foi lavado com água (3x2 mL) e a goma resultante foi triturada com éter dietílico para dar o composto em epígrafe como um sólido branco (43 mg). 1H RMN (DMSO-dg, 300 MHz) δ: 1,85-2,05 (5H, m); 2,4-2,6 (sinal parcialmente obscurecido por sinais do solvente, m) ; 2,6-2,75 (2H, m) ; 2,75-2,86 (2H, m) ; 4,4-4,8 (1H, m) ; 4,6-4,7 (2H, m) ; 5,82 (1H, t) ; 6,76-6,86 (2H, m) ; 6,96-7,08 (3H, m) ; 7,12-7,28 (4H, m) ; 7,44-7,5 (2H, dd) ; 7,62 (1H, s) ; 7,69 (1H, s) ; 8,58 (1H, t); 9,12 (1H, s). MS (ES+) m/z 580,3 (MH+)
Anál. Calculada para C31H31F2N3O4S.HCI.0,9 NaCl C 55,7 H 4,8 N 6,3%
Encontrada C 55,9 H4,8 N 6,1% 80
Exemplo 36 (2S)-2-(5- [1-(4-Fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de terc-butilo O composto em epígrafe foi preparado com 80% de rendimento a partir de ácido 5-(1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il) etoxi) -2- (4-fluorofenetil) benzóico e éster terc-butílico de L-metionina por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 34. lH RMN (DMSO-d6, 300 ΜΗζ) δ: 1,38 (9H, s) ; 1,88-2,0 (2H, m) ; 2,02 (3H, d); 2,62-2,75 (2H, m) ; 2,75-2,9 (2H, m) ; 4,32-4,42 (1H, m); 4,68 (2H, d); 5,83 (1H, m); 6,79-6,83 (2H, md); 6,95-7,1 (3H, m) ; 7,1-7,28 (4H, m) ; 7,45-7,52 (2H, dd) ; 7,61 (1H, s); 7,68 (1H, s); 8,62 (1H, t); 9,08 (1H, s). MS (ES+) m/z 636,4 (MH+)
Anál. Calculada para C35H39F2N3O4S.2,7 H2O C 61,4 H 6,5 N 6,1%
Encontrada C 61,1 H6,2 N5,7%
Exemplo 37 (2S)-2 -{5-[1-(4-Fluorofenil)-2 -(imidazol-l-il)etoxi]-2-(4- f luorof enetil) benzoílamlno}-4-metilsulf anilbutirato_de ciclopentilo O composto em epígrafe foi preparado com 72% de rendimento a partir de ácido 5-(1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il) etoxi) -2- (4-fluorofenetil) benzóico e (2S)-2-amino-4-(metilsulfanil)-butanoato de ciclopentilo (éster ciclopentílico de L-metionina) por um método semelhante ao utilizado para o
Exemplo 34. !h RMN (DMS0-d6, 300 ΜΗζ) δ: 1,44-1,65 (6H, m); 1,7-1,86 (2H, m) ; 1,9-2,0 (2H, m); 2,02 (3H, d); 2,5-2,6 (sinais parcialmente obscurecidos pelos sinais do solvente, m) ; 2,62-2,9 (4H, m) ; 4,4-4,5 (1H, dd); 4,65 (2H, d); 5,04-5,1 (1H, m); 5,82 (1H, br 8); 6,78-6,84 (2H, m) ; 6,97-7,1 (3H, dd) ; 7,12-7,3 (4H, m) ; 81 7,42-7,5 (2Η, bds) ; 7,74 (1H, bds) ; 8,68 (1H, t) ; 8,98 (1H, bds) . MS (ES+) m/z 648,4 (MH+)
Anãl. Calculada para C36H39F2N3O4S.2,8 H2O C 61,9 H 6,4 N 6,0
Encontrada C 61,7 H6,0 N5,6
Exemplo 38 (2S)-2-{5- [1-(4-Fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi] -2-(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-nietilsulfonilbutirato de terc-butilo
Uma mistura de ácido 5-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il) etoxi] -2- (4-fluorofenetil) benzóico (800 mg, 1,79 mmol) , (2S)-2-amino-4-(metilsulfonil)butanoato de terc-butilo (éster terc-butílico da sulfona de Ii-metionina) (630 mg, 2,68 mmol), e DMAP (870 mg, 7,1 mmol), foi tratada com EDC.HC1 (510 mg, 2,7 mmol) agitada à temperatura ambiente durante 16 horas. A mistura reaccional foi lavada com ácido cítrico aquoso (1 M, 2 x) , solução saturada de cloreto de sódio, seca (MgSC>4) e evaporada até à secura. 0 resíduo foi purificado por cromatografia em sílica (coluna Dynamax de 40 g, eluição de gradiente com 2-10% de metanol/diclorometano) para dar uma goma que, quando triturada com éter dietílico/iso-hexano, deu o composto em epígrafe como um sólido creme (889 mg, 74%). 1H RMN (DMSO-d6 + HOAc-d4, 300 MHz) δ: 1,38 (9H, s) ; 2-2,25 (2H, m) ; 2,62-2,82 (4H, m) ; 2,97 (3H, d); 3,02-3,28 (2H, m) ; 4,36-4,42 (1H, dd); 4,6-4,67 (2H, d); 5,76-5,82 (1H, m); 6,78-6,84 (1H, m) ; 6,86-6,92 (1H, m) ; 6,92-7,05 (3H, m) ; 7,1-7,24 (4H, m) ; 7,4-7,58 (3H, m) ; 7,64-7,7 (1H, bds); 8,88-9,0 (1H, bds) . MS (ES+) m/z 668,3 (MH+)
Anál. Calculada para C35H39F2N3O6S.3 H2O C 58,2 H 6,2 N 5,8
Encontrada C 58,1 H6,0 N5,6 0 material de partida foi preparado como se segue: 82
Uma mistura de 2-bromo-5-metoxibenzoato de metilo (28,3 g, 115 mmol) , 4-fluoroestireno (20,6 mL, 173,3 mmol), terc-n-butilamina (2,7 mL, 11,5 mmol), Pd [ (o-tolil)3P]2CI2 (0,9 g, 1,15 mmol), e NaHC03 (14,6 g, 173,3 mmol), e água (220 mL) foi agitada e aquecida a refluxo durante 16 horas. A mistura reaccional foi diluída com água (200 mL) e extraída com acetato de etilo (2 x 400 mL) . Os extractos foram lavados com HC1 2 M (100 mL) , água (100 mL) , solução saturada de cloreto de sódio (100 mL) , secos (MgSOzj) , filtrados e evaporados até à secura. A goma castanha obtida foi purificada por cromatografia em sílica (90 g, coluna Biotage), eluindo com um gradiente de acetato de etilo em iso-hexano (0%-20% de acetato de etilo). As fracções relevantes foram combinadas e evaporadas para dar 2- [2- (4-fluorofenil)etenil)]-5-metoxibenzoato de metilo (43,5 g). iH RMN (CDCI3, 250 MHz) δ: 3,86 (3H, s) ; 3,94 (3H, s) ; 6,86 (1H, d); 7,02 (1H, d); 7,04-7,12 (3H, m) ; 7,42-7,52 (3H, m) ; 7,64 (1H, d), 7,83 (1H, d). MS (ES+) m/z 287 (MH+).
Agitou-se 2-[2-(4-fluorofenil)etenil)]-5-metoxibenzoato de metilo (43 g, 150 mmol) em acetato de etilo (3,5 L) com paládio a 10% sobre carvão (4 g) sob atmosfera de hidrogénio (pressão de 5 bar), à temperatura ambiente durante 18 horas. O catalisador gasto foi removido por filtração através de uma camada de Celite, a camada foi lavada com acetato de etilo e o filtrado foi evaporado até à secura para dar 2-(4- fluorofenetil)-5-metoxibenzoato de metilo (33,8 g, 80% de rendimento). ÍH RMN (CDCI3, 300 MHz) Ô: 2,84 (2H, t); 3,16 (2H, t) ; 3,8 (3H, s); 3,88 (3H, s); 6,86-7,0 (3H, m) ; 7,06 (1H, d) ; 7,08-7,2 (2H, m) , 7,43 (1H, d) . MS (ES+) m/z 289 (MH+).
Aqueceu-se uma mistura de 2-(4-fluorofenetil)-5-metoxibenzoato de metilo (33,8 g, 117 mmol) e cloridrato de piridina (170 g) a 220°C durante 2 horas. A mistura reaccional negra foi arrefecida, vertida em HC1 2 N (1 L) , e o sólido 83 castanho claro extraído com acetato de etilo (2 x 450 mL) . Os extractos foram lavados com HCl 2 N (500 mL) , solução saturada de cloreto de sódio (200 mL) , secos (MgS04) e evaporados para dar ácido 2-(4-fluorofenetil)-5-hidroxibenzóico (30 g, quantitativo) . 1H RMN (DMSO-d6, 300 MHz) δ: 2,74 (2H, t) ; 3,04 (2H, t) ; 6,81 (1H, dd); 7,12 (3H, t); 7,15-7,24 (3H, m).
Uma solução de ácido 2-(4-fluorofenetil)-5-hidroxibenzóico (30 g, 115,4 mmol) em metanol (900 mL) e a solução agitada tratada gota a gota com cloreto de sulfurilo (1,6 mL, 19,6 mmol) agitada e aquecida a refluxo durante 16 horas. A mistura foi evaporada até à secura, o resíduo dissolvido em acetato de etilo (500 mL) , lavado com NaHCC>3 aquoso saturado (x2), água e solução saturada de cloreto de sódio. Após secagem (MgSC>4) a solução foi evaporada até à secura para dar um óleo castanho que quando triturado com iso-hexano deu 2-(4-fluorofenetil)-5-hidroxibenzoato de metilo (21,02 g, 66%). 1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 2,84 (2H, t) ; 3,15 (2H, t) ; 4,8-5,2 (1H, largo); 7,85-7,0 (3H, m) ; 7,02 (1H, d); 7,12 (2H, dd) ; 7,39 (1H, d). MS (ES+) m/z 275 (MH+).
Anál. Calculada para C16H15FO3 C 70,06 H 5,51
Encontrada C 70,0 H 5,6
Uma mistura de 1-(4-fluorofenil)-2-imidazol-l-il)etanol (5,0 g, 24 mmol), 2-(4-fluorofenetil)-5-hidroxibenzoato de metilo (7,3 g, 27 mmol), DEAD (4,2 mL, 4,65 g, 27 mmol), e trif enilfosf ina (7,0 g, 27 mmol) em THF seco (150 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 16 horas. A reacção foi evaporada até à secura e o resíduo foi purificado por cromatografia em sílica (90 g, coluna Biotage, eluição de gradiente com 1-20% de metanol/diclorometano). As fracções relevantes foram combinadas e evaporadas para dar 5- [1- (4-fluorofenil)-2-imidazol-l-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoato 84 de metilo (13,46 g) . O material foi utilizado sem purificação adicional na reacção seguinte. MS (ES+) m/z 463 (MH+).
Dissolveu-se {5- [1-(4-fluorofenil)-2-imidazol-l-il)etoxi] -2-(4-fluorofenetil)benzoato de metilo (13,46 g, ~29 mmol) em metanol (100 mL) e agitou-se à temperatura ambiente com solução aquosa de hidróxido de sódio 2 N (73 mL, 146 mmol) durante 4 dias. O metanol foi removido por evaporação e a solução aquosa residual foi ajustada para pH 7 com HCl 2 N antes de ser evaporada até à secura. O sólido branco resultante foi purificado por cromatografia em sílica (90 g, coluna Biotage, eluição de gradiente com 2-20% de metanol/diclorometano) para dar ácido 5-[1-(4-fluorofenil)-2-imidazol-l-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzóico (4,0 g), como uma espuma incolor. RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 2,84 (2H, t) ; 3,16 (2H, t) ; 4,34 (2H, d); 5,26-5,37 (1H, m) ; 6,66 (1H, dd) ; 6,88 (3H, t) ; 7,0-7,18 (5H, m); 7,22-7,35 (2H, m); 7,54 (1H, d); 7,92 (1H, s). MS (ES-) m/z 447 (MH").
Exemplo 39 Ácido (2S)-2 -{5-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)-etoxi]-2-(4 -fluorofenetil)benzoílamino)-4-metilsulfonil-butírico
Uma solução de (2S)-2-{5-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il) etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfonil-butirato de terc-butilo (88 mg, 0,13 mmol) em TFA (2 mL) foi agitada e arrefecida num banho de gelo durante 3 horas. 0 TFA foi removido por evaporação, o resíduo foi dissolvido em acetato de etilo e HCl 1 M/éter dietílico (5 mL) . A remoção do solvente deu um óleo castanho que por trituração com éter dietí lico/iso-hexano (3 x) deu o sal de HCl do composto em epígrafe como um sólido branco pegajoso (40 mg). iH RMN (DMS0-d6, 373°K, 250 MHz) δ: 2,1-2,42 (2H, m); 2,75-2,94 (2H, m) ; 2,95 (3H, d); 3,05-3,35 (2H, m) ; 4,5-4,6 (1H, m) ; 4,62- 85 4,68 (2Η, m) ; 5,73 (1H, t) ; 6,78-6,88 (1H, dd) ; 6,9-7,1 (4H, m) ; 7,1-7,25 (4H, m) ; 7,3-7,65 (4H, m) ; 8,09 (1H, d); 8,59 (1H, bds) . MS (ES+) m/z 612,3 (MH+).
Exemplo 40 (2S)-2-(5-[1-(Tiazol-2-il)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de metilo
Uma mistura de ácido 5- [1-(tiazol-2-il)-2-(imidazol-l-il) etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzóico (1,1 g, 2,52 tranol), éster metílico de L-metionina.HC1 (1,0 g, 5,0 mmol) , e DMAP (1,54 g, 12,6 mmol) em diclorometano (40 mL) e EDC.HCl (0,72 g, 3,8 mmol) foi agitada durante 16 horas. A mistura foi lavada com ácido cítrico 1 M (2 x) e solução saturada de cloreto de sódio, seca (MgSO.4) , evaporada até à secura e o resíduo obtido purificado por cromatografia em sílica (coluna Biotage de 40 g, eluição de gradiente com 2-10% de metanol/diclorometano). As fracções apropriadas foram combinadas e evaporadas para dar o composto em epígrafe (0,14 g, 64%). iH RMN (DMSO-dô, 300 MHz) δ: 1,94-2,04 (5H, τη) ; 2,52-2,6 (2H, m) ; 2,65-2,85 (4H, m) ; 3,6 (3H, a); 4,52-4,65 (3H, m) ; 5,98- 6.05 (1H, m) ; 6,82 (1H, s) ; 6,88-6,96 (2H, m) ; 7,0-7,2 (6H, m) ; 7.5 (1H, d); 7,76 (1H, d); 7,86 (1H, d); 8,64 (1H, t). MS (ES+) m/z 583,3 (MH+)
Anál. Calculada para C29H31FN4O4S2·0,3 H2O C 59,2 H 5,4 N 9,5
Encontrada C 59,2 H5,3 N9,3 O material de partida foi preparado como se segue:
Uma mistura de 2-bromo-l-(tiazol-2-il)-etanona (2,5 g; 12 mmol), acetonitrilo (70 mL) e imidazole (1,65 g; 24 mmol) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura foi evaporada até à secura e o resíduo partilhado entre 86 diclorometano e água. A fase orgânica foi separada, lavada com solução saturada de cloreto de sódio e evaporada para dar 2-(imidazol-l-il)-1-(tiazol-2-il)etanona como um sólido castanho (1,17 g; 50%).
P.f.: 109-112°C ^H RMN (DMSO-d6, 400 MHz) δ: 5,6 (2H, s) ; 6,85-8,1 (5H, m) . 2-(Imidazol-l-il)-1-(tiazol-2-il)etanona foi reduzida com borohidreto de sódio em metanol para dar 2-(imidazol-l-il)-1-(tiazol-2-il)etanol com 60% de rendimento. !h RMN (CDCI3, 300 MHz) Ô: 4,15 (1H, dd) ; 4,57 (1H, dt) ; 5,2 (1H, dd) ; 6,75 (1H, s) ; 6,89 (1H, s) ; 7,32-7,41 (2H, m) ; 7,79 (1H, d) . MS (ES+) m/z 196 (MH)+.
Preparou-se 5- (2- (imidazol-l-il)-1-(tiazol-2-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoato de metilo a partir de 2-(imidazol-l-il) -1- (tiazol-2-il) etanol e 2-(4-fluorofenetil)-5-hidroxi-benzoato de metilo pela metodologia de Mitsunobu utilizada para a preparação de 5-[2-(2-metilimidazol-l-il)-1-(4-fluorofenil)-etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoato de metilo no Exemplo 45. !η RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 2,8 (2H, t) ; 3,12 (2H, t); 3,88 (3H, s); 4,52 (1H, dd); 4,62 (1H, dd); 5,76 (1H, dd); 6,85-6,97 (4H, m); 7,0-7,15 (4H, m); 7,34 (1H, d); 7,45 (1H, d); 7,48 (1H, s) ; 7,86 (1H, d). MS (ES+) m/z 452 (MH)+.
Hidrolizou-se 5-(2-(imidazol-l-il)-1-(tiazol-2-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoato de metilo utilizando solução aquosa de hidróxido de sódio para dar ácido 5-(2-(imidazol-l-il)-1-(tiazol-2-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzóico. iH RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 2,85 (2H, t); 3,2 (2H, t); 4,54 (1H, dd) ; 4,68 (1H, dd) ; 5,82 (1H, dd) ; 6,86-7, 04 (5H, m) ; 7,04-7,16 (3H, m); 7,36 (1H, d); 7,59 (1H, d); 7,88 (2H, t). MS (ES+) m/z 438 (MH)+. 87
Exemplo 41 Ácido (2S)-2-{5-[1-(tiazol-2-il)-2-(imidazol-l-il)-etoxi]-2- (4-fluorofenetil)benzoílamino)-4-metilsulfanil-butírico
Dissolveu-se (2S)-2-{5-[1-(tiazol-2-il)-2-(imidazol-l-il) -etoxi]-2-(4-fluorofenetil) benzoílamino}-4-metilsulfanilbutira-to de metilo (140 mg, 0,24 mmol) em metanol (3 mL), e tratou-se com NaOH (190 mg, 4,8 mmol) em H2O (1 mL) . Após 4 horas à temperatura ambiente, a mistura foi acidificada até pH 1 com HCl 1 M e a mistura foi evaporada até à secura. O residuo foi lavado com água (3x2 mL) e a goma resultante triturada com is-hexano para dar o sal de HCl do composto em epígrafe (94 mg, 69%) como um sólido branco. !η RMN (DMSO-d6, HOAc-d4, 300 MHz) δ: 1,84-2,1 (5H, m); 2,5-2,6 (sinais parcialmente obscurecidos pelos sinais do solvente, m) ; 2,65-2,78 (2H, m) ; 2,78-2,9 (2H, m) ; 4,4-4,51 (1H, dd) ; 4,8- 4,98 (2H, m) ; 6,18-6,24 (1H, m) ; 6,8-7,04 (4H, m) ; 7,06-7,2 (3H, m) ; 7,59 (1H, s) ; 7,74 (1H, d); 7,86 (1H, d); 9,14 (1H, m) . MS (ES+) m/z 569,2 (MH+)
Anál. Calculada para C32H37FN4O6S2.HCl.1,1 H2O.0,5 NaCl: C 51,4 H 5,0 N 8,6
Encontrada C 51,5 H4,7 N8,5
Exemplo 42 (2S)-2-{5-[1-(tiazol-2-il) -2-(imidazol-l-il)etoxi] -2-(4-fluoro-fenetil)benzoílamino)-4-metilsulfanilbutirato de terc-butilo O composto em epígrafe foi preparado com 42% de rendimento a partir de ácido 5-[1-(tiazol-2-il)-2-(imidazol-l-il) etoxi]-2-(4-fluorofeniletil)benzóico e éster terc-butílico de L-metionina por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 40. l-H RMN (DMS0-d6, 300 MHz) δ: 1,39 (9H, s) ; 1,9-2,0 (2H, m) ; 2,5-2,6 (2H, m); 2,68-2,78 (2H, m); 2,78-2,9 (2H, m); 4,36-4,45 (1H, m); 4,58-4,7 (2H, m); 6,0-6,05 (1H, m); 6,86-6,96 (2H, m); 6,98- 88 7,08 (2Η, t) ; 7,1-7,2 (4H, m) ; 7,5-7,65 (2H, m) ; 7,73 (1H, d); 7,86 (1H, d); 8,63 (1H, t). MS (ES+) m/z 625,3 (MH+)
Anál. Calculada para C32H37FN4O4S21/25 C6H8O7 (Ácido cítrico) C 54,9 H 5,5 N 6,5
Encontrada C 54,9 H5,5 N6,7
Exemplo 43 (2S)-2-{5-[1-(tiazol-2-il) -2-(imidazol-l-il)etoxi] -2-(4-fluoro-fenetil)benzoílamino)-4-metilsulfonilbutirato de terc-butilo O composto em epígrafe foi preparado com 75% de rendimento a partir de ácido 5-[1-(tiazol-2-il) -2-(imidazol-l-il) etoxi] -2-(4-fluorofenetil)benzóico e éster terc-butílico da sulfona de L-metionina por uma metodologia semelhante à utilizada para o Exemplo 40. !h RMN (DMSO- d6, H0Ac-d4 , : 300 MHz) 1 δ: 1,37 (9H, s) ; 2,0- -2,26 (2H, rn) ; 2,6- 2,8 (4H, dd) ; 2, 75-2 ,94 (3H, m) ; 2,98 (3H, d) ; 3,1-3 ,38 (3H, m) ; 4,35-4, 44 (1H , m) ; 4, 7-4,84 (2H , m) ; 6,1- -6,18 (1H, dd) ; 6,S »-7, 05 (3H, m) ; 7 , 08- 7,2 (4H, m) ; 7,24 (1H, s) ; 7,48 (1H, s) ; 7, 74 (1H, d) ; 7 , 88 (1H, - d) ; 8,4 (1H, s) ; 8,72
(1H, t) . MS (ES+) m/z 657,3 (MH+)
Anál. Calculada para C28H29FN4C>4S2 · 1/2 C6H8O7 (Ácido cítrico).2,6 H2O: C 50,4 H 5,6 N 6,0
Encontrada C 50,1 H5,4 N6,3
Exemplo 44 Ácido (2S)-2-(5-[1-(tiazol-2-il)-2-(imidazol-l-il) -etoxi]-2- (4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfonil-butírico 0 tratamento de (2S)-2-{5-[1-(tiazol-2-il)-2-(imidazol-l-il) etoxi]-2 -(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfonil -butirato de terc-butilo com TFA por um método semelhante ao 89 utilizado para o Exemplo 3 9 deu o sal de HCl do composto em epígrafe com 73% de rendimento. iH RMN (DMSO-de, 250 MHz) δ: 2,0-2,3 (2H, m) ; 2,45-2,55 (parcialmente obscurecido pelos sinais do solvente, m) ; 2,55-2,9 (7H, m) ; 2,94 (3H, d); 3,1-3,28 (2H, m) ; 4,48-4,5 (1H, m) ; 4,82-4,94 (2H, m); 6,2-6,3 (1H, m); 6,88-7,02 (4H, m); 7,05-7,2 (3H, m) ; 7,62 (1H, t) ; 7,75 (2H, m) ; 7,86 (1H, d); 8,64-8,72 (1H, t); 9,16 (1H, m). MS (ES-) m/z 599,1 (MH")
Anál. Calculada para C28H2 9FN4C>6S2 · 0,4 H2O.l,0 C6H8O7 (Ácido cítrico): C 45,3 H 5,1 N 6,2
Encontrada C 45,2 H4,7 N6,l
Exemplo 45 (2S)-2-(5-[1-(4-Fluorofenil)-2-(2-metilimidazol-l-il)-etoxi]-2 - (4 - f luorof enetil) benzoí lamino) -4 -metilsulf anil-butirato_de metilo O composto em epígrafe foi obtido a partir de ácido 2 -(4 -fluorofenetil)-5-metoxibenzóico e éster metílico de L-metionina com 54% de rendimento por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 40. iH RMN (DMS0-d6, 300 MHz) δ: 1,87-2,08 (5H, m) ; 2,54 (3H, s) ; 2,58-2,9 (6H, m) ; 3,6 (3H, s) ; 4,44-4,65 (3H, m) ; 5,76-5,84 (1H, m) ; 6,78-6,82 (2H, m) ; 6,95-7,06 (3H, m) ; 7,1-7,2 (4H, m) ; 7,4-7,58 (3H, m); 7,6 (1H, d); 8,72 (1H, t). MS (ES+) m/z 608,4 (MH+) O material de partida foi preparado como se segue:
Uma mistura de 2-metilimidazole (8,0 g, 97,5 mmol) e brometo de 4-fluorofenacilo (21,16 g, 97,5 mmol) dissolvida em acetato de etilo (40 mL) à temperatura ambiente foi tratada com trietilamina (16,4 mL, 117 mmol) e a mistura turva foi aquecida a refluxo durante 16 horas. A mistura foi arrefecida até à 90 temperatura ambiente e diluída com acetato de etilo e água, lavada com água e solução saturada de cloreto de sódio, seca e evaporada até à secura. O resíduo foi recristalizado (3x) de diclorometano/metanol/isohexano para dar 1-(4-fluorofenil)-2-(2-metilimidazol-l-il)etanona (1,90 g, 42%). ÍH RMN (DMSO-d6, 300 MHz) δ: 2,12 (3H, s) ; 5,64 (2H, s) ; 6,72 (1H, s) ; 6,96 (1H, s) ; 7,34 (2H, t) ; 8,12 (2H, dd) . MS (ES+) m/z 219 (MH)+.
Uma solução arrefecida (banho de gelo) de 1- (4-fluorofenil)-2-(2-metilimidazol-l-il) etanona (9,0 g, 41,3 mmol) em metanol (60 mL) foi tratada em porções com borohidreto de sódio (1,56 g, 41,3 mmol) e a mistura agitada à temperatura ambiente durante 16 horas. A maior parte do metanol foi removida e adicionou-se água e acetato de etilo. A camada orgânica foi separada, a camada aquosa extraída com acetato de etilo (2x) e os extractos orgânicos combinados foram lavados com água, solução saturada de cloreto de sódio, secos, filtrados e evaporados para dar um resíduo que foi triturado com éter dietílico para dar 1-(4-fluorofenil)-2-(2-metilimidazol-l-il)etanol (7,7 g, 84%). 1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 2,14 (3H, s) ; 3,98 (2H, d); 4,88 (1H, t) ; 6,74 (1H, s) ; 6,8 (1H, s) ; 7,04 (2H, t) ; 7,21-7,32 (2H, m) . MS (ES+) m/z 221 (MH)+.
Adicionou-se DEAD (1,95 g, 12 mmol) a uma mistura de 1-(4-fluorofenil)-2-(2-metilimidazol-l-il)etanol (2,48 g, 11 mmol), 2-(4-fluorofenetil)-5-hidroxibenzoato de metilo (3,4 g, 12 mmol), e trifenilfosfina (3,3 g, 12 mmol), em THF (60 mL). A mistura foi arrefecida num banho de gelo. Após agitação durante 16 horas a mistura foi evaporada até à secura e o resíduo purificado por cromatografia em sílica (coluna Biotage 90b, eluição com gradiente de 1-20% de metanol/diclorometano). As fracções apropriadas foram recolhidas e evaporadas para dar 5-[1-(4-fluorofenil)-2-(2-metilimidazol-l-il)etoxi]-2-(4-fluoro- 91 fenetil)benzoato de metilo (4,2 g, ~75%) que foi utilizado sem purificação adicional. 1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 2,21 (3H, s); 2,76 (2H, t) ; (2H, t) ; 4,12-4,32 (1H, m) ; 5,3 (1H, t) ; 6,72 -6,8 (1H, 6,84-6,98 (5H, m) ; 7,0-7,14 (4H, m) ; 7,16-7,24 (2H, m) ; (1H, d) . MS (ES+) m/z 477 (MH)+; 279 (MH) + para PI13O.
Hidrolizou-se 5- [1-(4-fluorofenil)-2-(2-metilimidazol-l-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoato de metilo (4,2 g, ~8,8 mmol) com solução aquosa de hidróxido de sódio nas condições habituais para dar ácido 5-[1-(4-fluorofenil)-2-(2-metil-imidazol-l-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzóico (1,84 g, ~45%) como uma goma incolor. 1H RMN (DMS0-d6, 300 MHz) δ: 2,52 (3H, s) ; 2,68 (2H, t) ; 3,0 (2H, dd); 4,48-2,04 (2H, m); 5,76-5,86 (1H, m); 6,9-6,98 (1H, m) ; 7,0-7,28 (9H, m) ; 7,48 (2H, t) ; 7,62 (1H, d). MS (ES+) m/z 463 (MH)+.
Exemplo 46 Ácido_(2S) -2-(5- [1- (4-fluorofenil) -2- (2-metilimidazol-l- il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metil-sulfanilbutírico O tratamento de (2S)-2-{5-[1-(4-fluorofenil)-2-(2-metil-imidazol-l-il)-etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metil-sulfanilbutirato de metilo com hidróxido de sódio aquoso seguido pelo procedimento de isolamento usual deu o sal cloridrato do composto em epígrafe como um sólido branco com 64% de rendimento. !h RMN (DMSO-dg, 300 MHz) δ: 1,9-2,05 (5H, m) ; 2,57 (3H, s) ; 2,6-2,72 (2H, m); 2,75-2,85 (2H, m); 4,4-4,7 (3H, m); 5,78-5,86 (1H, m) ; 6,78-6,84 (2H, m) ; 6,95-7,08 (3H, m) ; 7,14-7,28 (4H, m) ; 7,45-7,55 (3H, m) ; 7,66 (1H, s) ; 8,58 (1H, t) . MS (ES+) m/z 592 (MH+). 92 f\
Exemplo 47 (2S)-2-{4- [1- (4-Fluorofenll)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2-(4-fluorofenil)benzoílamino}-4 -metilsulfanilbutirato de fcerc- butilo O composto em epígrafe foi preparado, com 33% de rendimento, a partir de ácido 5-(1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il) etoxi) -2 - (4- fluorof enil) benzóico e éster terc-butílico de L-metionina por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 38. 1H RMN (DMS0-d6, H0Ac-d4, 300 MHz) δ: 1,34 (9H, s) ; 1,64-1,8 (2H, m) ; 1,92 (3H, d); 2,04-2,28 (2H, m) ; 2,6-2,74 (4H, dd) ; 4,08-4,18 (1H, m) ; 4,48 (2H, bds) ; 5,82 (2H, bds) ; 6,82-6,94 (2H, m); 7,04-7,2 (6H, m); 7,2-7,38 (4H, m); 7,4-7,52 (2H, m). MS (ES+) m/z 608,3 (MH+)
Anál. Calculada para C33H35F2N3O4S.0,9C6H8O7 (Ácido cítrico).1,4 H2O: C 57,2 H 5,6 N 5,2
Encontrada C 57,1 H5,2 N5,3 O material de partida foi preparado como se segue:
Adicionou-se cloreto de sulfurilo (4,4 mL) cuidadosamente a uma solução de ácido 4-hidroxi-2-(4-fluorofenil)benzóico (20,8 g, 0,0896mol) (do Exemplo 32) em metanol (220 mL) e a mistura foi aquecida a refluxo durante 16 horas. O solvente foi removido a pressão reduzida e o resíduo partilhado entre acetato de etilo e NaHCC>3 aquoso (pH~8) . A fase orgânica foi lavada com água, solução saturada de cloreto de sódio, seca (MgSC>4) , filtrada e evaporada para dar um sólido castanho pegajoso que, por trituração com iso-hexano, deu 4-hidroxi-2-(4-fluorofenil)benzoato de metilo (14,34 g, 65% de rendimento). 1H RMN (CDCI3, 300 MHz) Ô: 3,64 (3H, s) ; 5,56 (1H, s) ; 6,74 (1H, d); 6,84 (1H, dd) ; 7,03-7,12 (2H, m) ; 7,16-7,28 (2H, m) ; 7,84 (1H, d). MS (ES+) m/z 247 (MH+). 93
Preparou-se 4-[2-(imidazol-l-il)-1-(4-fluorofenil)etoxi]-2-(4-fluorofenil)benzoato de metilo a partir de 2-(4-fluorofenil) -4 -hidroxibenzoato de metilo e 2-(imidazol-l-il)-1-(4-fluorofenil)etanol utilizando a reacção de Mitsunobu tal como descrito para a preparação de 5-[2-(2-metilimidazol-l-il)-1-(4-fluorofenil)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoato de metilo. !η RMN (CDCI3, 300 MHz) Ô: 3,6 (3H, s) ; 4,25-4,44 (2H, m) ; 5,4 (1H, t); 6,7-6,78 (2H, m); 6,92 (1H, s); 7,0-7,3 (10H, m); 7,44 (1H, s); 7,76 (1H, d). MS (ES+) m/z 435 (MH)+.
Preparou-se ácido 4-[2-(imidazol-l-il)-1-(4-fluorofenil)-etoxi]-2- (4-fluorofenil)benzóico a partir de 4-[2-(imidazol-l-il) -1-(4-fluorofenil)etoxi] -2-(4-fluorofenil)benzoato de metilo por tratamento com hidróxido de sódio em metanol e utilizou-se sem purificação adicional. iH RMN (DMSO-dç, 300 MHz) δ: 4,7 (2H, d); 6,02 (1H, t) ; 6,82- 6,94 (2H, m) ; 7,1-7,26 (6H, m) ; 7,47 (2H, dd) ; 7,62-7,68 (2H, m); 7,77 (1H, s); 9,16 (1H, s). MS (ES+) m/z 421 (MH)+.
Exemplo 48 (2S)-2-{4- [1- (4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2- (4-fluorofenil)benzoílamino}-4-metilsulfonilbutirato de terc -butilo O composto em epígrafe foi preparado, com 59% de rendimento, a partir de ácido 5-(1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il) etoxi)-2-(4-fluorofenetil)benzóico e éster terc-butílico da sulfona de L-metionina por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 34. ^•H RMN (DMSO-dg, H0Ac-d4, 300 MHz) δ: 1,36 (9H, s) ; 1,8-1,94 (1H, m) ; 1,96-2,12 (1H, m) ; 2,62-2,8 (1H, m) ; 2,86 (3H, d); 2,9-3,0 (1H, m) ; 4,1-4,2 (1H, m) ; 4,64 (2H, s) ; 5,9 (1H, m) ; 6,8-6,9 (2H, m) ; 7,05-7,3 (8H, m) ; 7,4-7,5 (3H, m) ; 7,64 (1H, m) ; 8,84 (1H, m) . 94 MS (ES+) m/z 640,3 (MH+)
Anál. Calculada para C33H35F2N3O5S.6H2O: C 56,3 H 6,00 N 6,00
Encontrada C 56,1 H 5,60 N 5,80
Exemplo 49 Ácido_2-{4-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2-(4- fluorofen.il) benzoí lamino)-4 -metilsulfonilbutírico
Uma solução de (2S)-2-{4-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il) etoxi]-2- (4-fluorofenil)benzoílamino}-4-metilsulfonilbuti-rato de terc-butilo (94 mg, 0,15 mmol) em TFA (4 mL) foi agitada num banho de gelo durante 3 horas. O TFA foi evaporado a pressão reduzida, o resíduo foi dissolvido numa quantidade mínima de acetato de etilo/metanol, e adicionou-se HCl 1 M/éter dietílico (5 mL) . 0 precipitado amarelo pálido obtido foi triturado com iso-hexano, filtrado, lavado com iso-hexano e seco sob vácuo para dar o composto em epígrafe (2 9 mg) . 1H RMN (DMSO-dg, 373°K, 250 MHz) δ: 1,9-2,27 (2H, m); 2,82-3,1 (5H, m) ; 3,65 (3H, s) ; 4,25-4,45 (1H, m) ; 4,69 (2H, d); 5,94 (1H, t) ; 6,82-6,98 (2H, m) ; 7,05-7,25 (4H, m) ; 7,26-7,4 (3H, m) ; 7,4-7,55 (3H, m) ; 7,6 (1H, s) ; 7,88 (1H, d); 8,76 (1H, bds) . MS (ES+) m/z 584,2 (MH+) para o ácido, 598,2 (MH+) para o éster metílico.
Exemplo 50 (2S)-2-(5-[2-(4-metillmidazol-l-il)-1-(tiazol-2-il)-etoxi]-2- (4 - fluorofenetil) benzoí lamino-} - 4 -metilsulf anil -butirato_de metilo
Uma mistura de ácido 5-[2-(4-metilimidazol-l-il)-1-(tia-zol-2-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzóico (0,4 g, 0,89 mM) , cloridrato do éster metílico de L-metionina (0,27 g, 1,35 mM) e DMAP (0,54 g, 4,43 mM) foi agitada até à dissolução e adicionou-se EDC (0,026 g, 1,35 mM) em diclorometano e a mistura foi agitada durante 18 horas. Purificou-se em sílica utilizando 95 diclorometano e depois metanol/diclorometano (5:95) como eluente para dar o composto em epígrafe (0,47 g, 89%) como uma espuma. iH RMN (CDC13, 300 MHz) δ: 2,09 (3H, d); 2,15 (3H, d); 2,12 (1H, m) ; 2,25 (1H, m) ; 2,60 (2H, m) ; 2,81 (2H, m) ; 2,95 (2H, m) ; 3,68 (3H, d); 4,42 (1H, dq) ; 4,55 (1H, dt) ; 4,84 (1H, m) ; 5,71 (1H, m) ; 6,50 (1H, dd) ; 6,65 (1H, s) ; 6,82 (1H, q) ; 6,91 (3H, m) ; 7,07 (3H, m) ; 7,38 (2H, m); 7,85 (1H, d). MS (ES+) m/z 597,4 (M+l de C30H33FN4O4S2 596+1=597) O material de partida foi preparado como se segue:
Uma mistura de 4-metilimidazole (8,2 g, 0,1 M), carbonato de potássio anidro (13,8 g, 0,1 M), hidróxido de potássio (5,6 g, 0,1 M) e cloreto de tetrabutilamónio (1,13 g, 3,51 mM) em cloreto de metileno (170 mL) a 0 °C foi tratada com 2-bromoacetato de etilo (8,35 g, 50 mM) . A mistura foi agitada a 0°C durante 1 hora e à temperatura ambiente durante 18 horas. Foi então filtrada e evaporada até à secura. O produto foi purificado em sílica utilizando acetato de etilo como eluente para dar 4-metilimidazol-l-ilacetato de etilo e 5- metilimidazol-l-ilacetato de etilo (6,89 g, 82%) como uma mistura 2:1. ÍH RMN (CDCI3, 300 MHz) Ò: 1,39 (t, 3H) , 2,16 (s, 3H) , 5-Me, 2,23 (s, 3H) , 4-Me, 4,24 (2M, q) , 4,58 (s, 2H) , isómero 5-Me 4,60 (s, 2H) , isómero 4-Me, 6,65 (s, 1H) , isómero 4-Me, 6,80 (s, 1H) , isómero 5-Me, 7,37 (s, 1H) , isómero 4-Me, 7,42 (s, 1H), isómero 5-Me.
Uma solução de n-butil lítio (1,6 M em hexanos) (21,7 mL, 34,72 mM) em éter dietílico seco (25 mL) foi tratada lentamente com uma solução de 2-bromotiazole (2,84 mL, 31,5 mM) em éter dietílico seco (50 mL) a uma velocidade tal que a temperatura não excedeu -65°C. Adicionou-se então uma solução de 4- e 5-metilimidazol-l-ilacetato de etilo (6,89 g, 41 mM) em éter dietílico seco (25 mL). A mistura foi agitada a -70°C durante 1 1/2 horas, deixada aquecer até à temperatura ambiente ao longo de 3 horas e agitada durante mais 18 horas. Adicionou-se 96 lentamente solução saturada de cloreto de amónio (120 mL) com agitação e separou-se a camada de éter dietílico. A camada aquosa foi extraída com éter dietílico e os extractos orgânicos combinados foram secos (MgSC>4) e evaporados para dar um óleo castanho (5,85 g) . Este foi purificado em sílica utilizando isohexano/acetato de etilo como eluente para dar 2-(4-metilimidazol-l-il)-1-(tiazol-2-il)etanona (1,98 g, 30%) como um óleo que cristalizou em repouso. !h RMN (CDCI3, 300 MHz) Ô: 2,26 (s, 3H), 5,49 (s, 2H), 6,69 (s, 1H), 7,44 (s, 1H), 7,80 (s, 1H), 8,07 (d, 1H).
Ms m/z 208,0 (C9H9N3OS de M++1 requer 208)
Uma solução de 2-(4-metilimidazol-l-il)-1-(tiazol-2-il)-etanona (1,96 g, 9,47 mM) em metanol (30 mL) foi arrefecida num banho de gelo, tratada com NaBH4 (0,358 g, 9,47 mM) e agitada durante 18 horas. Adicionou-se então acetato de etilo (60 mL) , e a mistura foi lavada com solução aquosa saturada de NaHC03, água, solução saturada de cloreto de sódio, seca (MgSC>4) e evaporada para dar o produto (0,56 g) . A camada aquosa foi re-extraída com acetato de etilo para dar produto adicional. O produto foi purificado em sílica eluindo com metanol/ diclorometano (10:90) para dar 2 -(4-metilimidazol-l-il)-1-(tiazol-2-il)etanol (1,35 g, 68%). ÍH RMN (DMSO-dg, 300 MHz) δ: 2,03 (s, 3H) , 3,15 (d, 1H), 4,08 (q, 1H) , 4,34 (dd, 1H) , 5,05 (m, 1H) , 6,76 (s, 1H) , 7,34 (s, 1H), 7,64 (t, 1H), 7,98 (t, 1H). MS m/z 210,2 (C9H11N3OS requer 210 para M++1).
Uma mistura com agitação de 2 -(4-metilimidazol-l-il)-1-(tiazol-2-il)etanol (1,35 g, 6,46 mM) , 2-(4-fluorofenetil)-5- hidroxibenzoato de metilo (1,95 g, 7,1 mM) e trifenilfosfina (1,86 g, 7,1 mM), em THF seco foi arrefecida num banho de gelo, e tratada com DEAD (1,24 g, 7,1 mM) . A mistura foi deixada aquecer até à temperatura ambiente, agitada durante 18 horas e evaporada até à secura. O produto foi purificado em sílica utilizando metanol/diclorometano (3-*10%) como eluente dar 5-[2- 97 (4-metilimidazol-l-il) -1-(tiazol-2-il)etoxi]-2-(4-fluoro-fenetil)benzoato de metilo (1,45 g, 48%).
Este foi então dissolvido em metanol (9 mL) , tratado com NaOH 2 M (9,4 mL) , agitado durante 18 horas, evaporado até à secura, redissolvido em água (25 mL) e adicionou-se gota a gota HCl concentrado até pH 6. A mistura foi extraída com acetato de etilo (3 x 30 mL), que foi então lavado com solução saturada de cloreto de sódio, seco (MgS04) e evaporado até à secura. O produto foi purificado em sílica utilizando metanol/diclo- rometano (10—>20%) dar 5-[2-(4-metilimidazol-l-il)-1-(tiazol-2-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoato como uma espuma branca por evaporação até à secura (0,96 g, 68%). 1H RMN (CDCI3, 300 MHz) Ô: 2,21 (3H, s) ; 2,85 (2H, t) ; 3,18 (2H, t); 4,44 (1H, q); 4,59 (1H, dd); 5,75 (1H, dd); 6,58 (1H, S) ; 6,80-6,94 (3H, m) ; 6,95 (1H, d); 7,12 (2H, dd) ; 7,37 (1H, d); 7,54 (1H, d); 7,85 (2H, d). MS m/z 450,3 (C24H22FN303S = 451, M" requer 451).
Exemplo 51 (2S)-2-(5- [2- (4-Metilimidazol-l-il)-1-(tiazol-2-il)-etoxi]- 2 -(4-fluorofenetil)benzo£lamino)-4-metilsulfonil-butirato de terc -butilo
Uma mistura de 5-[2-(4-metilimidazol-l-il)-1-(tiazol-2-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoato (0,56 g, 1,24 mM) , éster terc-butílico de L-metionina (1,02 g, 3,73 mM) , EDC (0,48 g, 2,5 mM) , N-metilmorfolina (0,68 mL, 7,31 mM) e 1-hidroxi-ben-zotriazole (0,25 g, 1,85 mM) foi agitada em DMF seca (22 mL) durante 17 horas. Foi então evaporada até à secura e o resíduo dissolvido em diclorometano, lavado com NaHCC>3 aquoso saturado e purificado em sílica eluindo com metanol/diclorometano (5:95) para dar o composto em epígrafe como uma espuma branca (0,68 g, 82%) . ÍH RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 1,50 (9H, s) , 2,14 (3H, d), 2,30 (1H, m) , 2,52 (1H, m) , 2,81 (2H, t) , 2,92 (3H + 2H, s + m) , 3,12 (1H, 98 m) , 3,27 (1H, m) , 4,22 (1H, m) , 4,55 (1H, dd) , 5,72 (1H, m) , 6,64 (2H, t) , 6,80-6,94 (4H, m) , 7,00-7,13 (3H, m) , 7,37 (1H, t), 7,42 (1H, d), 7,84 (1H, d). MS ra/z 669,3 (C33H39FN4O6S2 = 670-1, M"=669).
Exemplo 52 Ácido (2S)-2-{5-[2-(4-metilimidazol-l-il)-1-(tiazol-2-il)etoxi] -2 -(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metil-sulfanilbutxrico
Uma mistura do Exemplo 50 (70 mg, 0,12 mM) , e solução de hidróxido de sódio 2 M (0,7 mL, 0,7 mM) em metanol (2 mL) foi agitada durante 18 horas. Foi então evaporada até à secura e dissolvida em éter dietílico. Adicionou-se ácido clorídrico (1 M) até pH 1 e depois adicionou-se excesso de NH4OH (0,8%) até pH 10. A mistura foi evaporada até à secura, extraída com diclorometano, filtrada e evaporada para dar o produto em epígrafe como uma espuma (44,4 mg, 65%). 1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 2,06 (3H, d), 2,13 (1H, m) , 2,22 (3H, d), 2,33 (1H, m) , 2,61 (2H, m) , 2,72 (2H, m) , 2,92 (2H, m) , 4,51 (2H, m) , 4,77 (1H, m) , 5,74 (1H, m) , 6,30 (1H, d), 6,73 (1H, qd) , 6,86 (2H, t) , 6,93-7,08 (5H, m) , 7,37 (1H, m) , 7,83 (1H, m), 7,92 (1H, d). MS m/z 581,3 (C29H31FN4O4S2 = 582-1 = 581 para M-) .
Exemplo 53 (2S)-2-{2-(4-Fluorofenetil)-5- [1-(4-fluorofenil)-2-(1-metilimidazol-5-il)etoxi]benzoílamino)-4-metilsulfanil-butirato de terc-butilo
Uma mistura de éster terc-butílico de L-metionina (0,240 g), (8) (0,175 g), DMAP (0,237 g), EDC (0,149 g) e DMF (10 mL) foi agitada sob atmosfera inerte durante 16 horas. A DMF foi removida por evaporação e o resíduo partilhado entre ácido cítrico aquoso 1 M (10 mL) e diclorometano (10 mL) . A camada orgânica foi separada, seca e directamente aplicada numa coluna 99 "flash" de sílica que foi então eluída com acetato de etilo/metanol (9:1). 0 produto foi convertido no sal cloridrato para dar (2S)-2-{2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(4-fluorofenil)-2-(1-metilimidazol.5-il)etoxi]benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de terc-butilo como um sólido branco (0,145 g) . iH. RMN (DMSO- d6, 300 MHz) δ: 1,4 (9H, s), 1,96 (2H, m) , 2,05 (3H / s) , 2,5 (2H, m) , , 2,7 (2H, m) , 2, 8 (2H, m) , 3,3 (2H, m) , 3,8 (3H, s) , 4,4 (1H, m) , 5,7 (1H, r m) , 6,8-7,66 (12H, m) , 8,6 (1H , dd) , 9,0 (1H, , s) .
Anál. Calculada incluindo 1 HCl, 0,5 H2O: C 62,2 H 6,2 N 6,0
Encontrada C 62,3 H 6,6 N5,7 MS (MH+) 650
Exemplo 54 (2S) -2-{2- (4-Fluorofenet.il) -5- [1- (4-fluorofenil) -2- time tilimidazol-5-il) etoxi]benzoílamino}-4 -metilsulfonil-butirato de terc-butilo
Preparou-se (2S)-2-{2- (4-fluorofenetil)-5-[1-(4-fluoro-fenil)-2-(l-metilimidazol-5-il)etoxi]benzoílamino}-4-metil-sul-fonilbutirato de terc-butilo utilizando um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 53 excepto que se utilizou éster terc-butílico da sulfona de L-metionina em vez de éster terc-butílico de L-metionina. ÍH RMN (DMSO-dg) δ: 1,39 (9H, s) , 2,16 (2H, m) , 2,7 (2H, m) , 2,85 (2H, m) , 3,0 (3H, d), 3,25 (4H, m) , 3,8 (3H, s) , 4,4 (1H, m) , 5,7 (1H, m) , 6,82-7,55 (12H, m) , 8,68 (1H, dd) , 8,93 (1H, s) . MS (MH+) 682
Anál. Calculada incluindo 1 HCl, 1,5 H2O: C 58,0 H 6,0 N 5,6
Encontrada C 58,2 H6,0 N5,4. O material de partida foi preparado como se segue: 100
Uma mistura de 1-(4-fluorofenil)-2-(l-metilimidazol-5-il)etanona (1,3 g), borohidreto de sódio (0,25 g) e metanol (50 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas sob atmosfera inerte. O metanol foi removido por evaporação e adicionou-se água (30 mL) ao resíduo. A mistura foi filtrada e o sólido lavado com mais água e seco para dar 1- (4-fluorofenil)-2-(l-metilimidazol-5-il)etanol (1,18 g). 1- H RMN (DMSO-dô) δ: 2,84 (2H, s) , 3,4 (3H, s) , 4,75 (1H, m) , 5,43 (1H, d), 6,56 (1H, s) , 7,2 (2H, m) , 7,32 (2H, m) , 7,48 (1H, s) . MS (MH+) 221
Adicionou-se DEAD (0,85 g) ao longo de 10 minutos a uma solução de 1- (4-fluorofenil)-2-(l-metilimidazol-5-il)etanol (0,9 g), 2-(4-fluorofenetil)-5-hidroxibenzoato de metilo e tri-fenilfosfina (1,3 g) em tetrahidrofurano (30 mL) , arrefecida a 15 °C sob atmosfera inerte. A reacção foi então agitada à temperatura ambiente durante mais 16 horas. O THF foi removido por evaporação e o resíduo foi dissolvido em diclorometano e aplicado directamente numa coluna "flash" de sílica que foi então eluída primeiramente com acetato de etilo e depois com acetato de etilo/metanol (9:1) para dar 2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(4-fluorofenil)-2-(l-metilimidazol-5-il)etoxi]benzoato como uma goma incolor (1,5 g). !η RMN (CDCI3) δ: 2,78 (2H, m) , 3,1 (3H, m), 3,23 (1H, m) , 3,4 (3H, s), 3,85 (3H, s), 5,29 (1H, t), 6.75-7,75 (13H, m). MS (MH+) 477,4
Uma mistura de 2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(4-fluorofenil)- 2- (l-metilimidazol-5-il)etoxi]benzoato (1,5 g) , hidróxido de sódio (0,62 g), metanol (200 mL) e água (30 mL) foi agitada a refluxo durante 16 horas. A mistura foi então arrefecida, o metanol removido por evaporação e o resíduo diluído com água (100 mL) . Foi então lavado com diclorometano e a fase aquosa foi separada, acifidicada com ácido cítrico aquoso 1 M (25 mL) e extraída com diclorometano. Os extractos foram secos e evaporados até à 101 secura para dar ácido 2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(4-fluorofenil)-2-(l-metilimidazol-5-il)etoxi]benzóico como uma espuma branca (1,1 g)-
Exemplo 55 (2S)-2-(2- (4-Fluorofenil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(1-metilimida-zol-5-il)etoximetil]benzoílamino)-4-metil-Bulfanilbutirato de terc-butilo e (2S)-2-(2- (4-Fluorofenil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(1-metilimida-zol-5-il)etoximebil]benzo£lamino}-4-metil-sulfonilbutirato de terc-butilo
Os compostos em epígrafe foram sintetizados a partir de ácido 2- (4-fluorofenetil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(1-metil-imi-dazol-5-il)etoximetil]benzóico utilizando um método semelhante ao descrito no Exemplo 53. (2S)-2-{2-(4-Fluorofenil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(1-metil-imidazol-5-il)etoximetil] benzoxlamino}-4-metil-sulfanilbutirato de terc-butilo l-H RMN (DMSO- d6) δ: 1,39 (9H, s) , 1,82 (2H, m) , 1,99 (3H, s) , 2, 21 (2H, m) , 3,14 (2H, m) , 3,7 (3H, s), 4,2 (1H, m) , 4,4 (2H, s) , 4,78 (1H, m) , 7 ,1-7,55 (12H, m), 8,5 (1H, d), 8,91 (1H, s) . MS (MH+) 682
Anál. Calculada incluindo 1 HCl, 1 H2O: C 60,8 H 6,1 N 6,1
Encontrada C 60,8 H5,8 N5,9. MS (MH+) 636,4 (2S)-2-{2 - (4-Fluorofenil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(1-metil-imidazol-5-il)etoximetil]benzoílamino}-4-metil-sulfonilbutirato de terc-butilo 1H RMN (DMSO-dg) δ: 1,4 (9H, s) , 2,0 (1H, m) , 2,1 (1H, m) , 2,7-3,5 (4H, m) , 2,92 (3H, s) , 3,72 (3H, s) , 4,28 (1H, m) , 4,41 (2H, s), 4,8 (1H, m), 7,1-7,58 (12H, m), 8,7 (1H, d), 8,97 (1H, s), 14,35 (1H, br s). 102 MS (MH+) 682
Anál. Calculada incluindo 1 HCl, 1,5 H2O: C 57,4 H 5,7 N 5,7
Encontrada C 57,6 H5,8 N 5,6. MS (MH+) 668,3 O material de partida foi preparado como se segue:
Adicionou-se hidreto de sódio (0,089 g, dispersão em óleo a 60%) a uma suspensão de 1-(4-fluorofenil)-2-(1-metilimidazol-5-il)etanol (0,27 g) em THF (50 mL) e DMF (7 mL) com agitação sob atmosfera inerte. A mistura foi agitada durante mais 30 minutos. Adicionou-se então uma solução de 4-bromometil-2-(4-fluorofenil)benzoato de metilo (0,432 g) em THF (20 mL) seguida por iodeto de tetrabutilamónio (0,045 g) e a mistura foi agitada durante mais 30 minutos. Foi então vertida em gelo/solução saturada de cloreto de amónio e extraída com acetato de etilo. Os extractos foram secos, evaporados até à secura e o produto foi purificado por cromatografia em coluna "flash" eluindo primeiramente com acetato de etilo, depois com acetato de etilo/ metanol (9:1) para dar 2-(4-fluorofenil|)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(l-metilimidazol-5-il)etoximetil]benzoato como uma goma incolor (0,38 g).
Hidrolizou-se 2-(4-fluorofenil|)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(l-metilimidazol-5-il)etoximetil]benzoato para dar ácido 2-(4-fluorofenil|)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(l-metilimidazol-5-il)-etoximetil]benzóico, utilizando um método semelhante ao utilizado para preparar ácido 2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(4-fluorofenil)-2-(l-metilimidazol-5-il)etoxi] benzóico no Exemplo 54.
Exemplo 56 Ácido_(28) -2-{2- (4-fluorofenil) -6- [1- (4-f luorogenil) -2- (imidazol-l-il)etoxi]pirid-3-oílamino-4-metilsulfanil-butírico 103
Uma solução de (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-6-[1-(4-fluoro-fenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]pirid-3-oílamino}-4-metil-sulfa-nilbutirato de terc-butilo (0,1 g) em TFA (20 mL) foi agitada à temperatura ambiente sob atmosfera inerte durante 30 minutos. O TFA foi removido por evaporação e o resíduo foi convertido no sal cloridrato para dar ácido (2S)-2-(2-(4-fluorofenil)-6-[1-(4 -fluorogenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]pirid-3-oílamino-4- metilsulfanilbutírico como um sólido branco (0,092 g) . 1H RMN (DMSO -d6) δ: 1,95 (2H, m) , 2,1 (3H, s) , 2,3 (1H, m) , 2,48 (1H , m) , 4,4 (1H, m) , 4,9 (2H, m), 6,65 (1H, m) , 7,06 (1H, d), 7,2- 7,5 (4H, m) , 7,55 -7,8 (5H, m) , 7,85 (1H, d), 7,9 (1H, m) , 8,74 (1H, dd) , 9,29 (1H, d).
Anál. Calculada incluindo 2 HCl, 0,25 Et20: C 54,0 H 4,7 N 8,7 S5,0
Encontrada C 54,5 H4,7 N9,0 S5,3. MS (MH+) 553,3 0 material de partida foi preparado como se segue:
Adicionou-se cloreto de tionilo (3,8 g) gota a gota, ao longo de 10 minutos, a uma solução de sal de HCl do ácido 2-cloropiridino-3-carboxílico (1,0 g) em metanol, agitada sob atmosfera inerte e arrefecida num banho de gelo/sal. A reacção foi agitada durante mais 5 dias à temperatura ambiente. O metanol foi removido por evaporação e o resíduo foi tratado com solução saturada de bicarbonato de sódio e extraído com acetato de etilo. Os extractos foram secos e evaporados até à secura para dar 2-cloropiridino-3-carboxilato de metilo como um líquido incolor (0,9 g). !η RMN (DMSO-d6) δ: 3,87 (3H, s), 7,57 (1H, dd), 8,25 (1H, dd) , 8,6 (1H, dd). MS (MH+) 172 104
Uma mistura de 2-cloropiridino-3-carboxilato de metilo (6,8 g) , ácido 4-fluorobenzenoborónico (7,2 g), carbonato de sódio aquoso 1 M (40 mL), Pd(dppb)Cl2 (1/2 g), etanol (10 mL) e tolueno (150 mL) foi agitada a refluxo sob atmosfera inerte durante 5 h. A reacção foi então arrefecida, a camada orgânica separada, a camada aquosa extraída com tolueno e em seguida os extractos combinados foram secos e evaporados até à secura. O produto foi purificado por cromatografia em coluna "flash" eluindo com acetato de etilo/iso-hexano (9:1, 8:2, 7:3) para dar 2-(4-fluorofenil)piridin-3-carboxilato de metilo como um sólido branco (7,5 g). !h RMN (DMSO-d6) δ: 3,71 (3H, s) , 7,1 (2H, t) , 7,32 (1H, dd) , 7,52 (2H, m), 8,1 (1H, dd), 8,76 (1H, dd). MS (MH+) 232.
Uma mistura de 2-(4-fluorofenil)piridin-3-carboxilato de metilo (10,5 g) e MCPBA (12,33 g, 65%) em diclorometano foi agitada a 0°C durante 1 hora e depois à temperatura ambiente durante 2 horas. Foi então lavada com solução saturada de bicarbonato de sódio (300 mL) , seca e aplicada directamente numa coluna "flash" de sílica que foi eluída primeiramente com acetato de etilo/iso-hexano (1:1), acetato de etilo e acetato de etilo/metanol (9:1) para dar 1-óxido de 2-(4-fluorofenil)-3-(metoxicarbonil)piridina como um sólido branco (10,5 g). iH RMN (CDCI3) δ: 3,63 (3H, s) , 7,18 (2H, t) , 7,31 (1H, dd) , 7,41 (2H, t), 7,66 (1H, d), 8,42 (1H, d). MS (MH+) 248.
Uma solução de 1-óxido de 2-(4-fluorofenil)-3-(metoxi-carbonil)piridina (10,5 g) em anidrido acético (500 mL) foi agitada a refluxo durante 17 h, arrefecida, evaporada até à secura e o resíduo partilhado entre solução saturada de bicarbonato de sódio e acetato de etilo. A camada orgânica foi separada, seca e evaporada até à secura. A goma obtida foi dissolvida em metanol (400 mL), tratada com uma solução de carbonato de potássio (11,7 g) em água (100 mL) e agitada â 105 temperatura ambiente durante 2 horas. 0 metanol foi removido por evaporação, o resíduo aquoso foi diluído com mais água (200 mL) e a mistura filtrada para dar 2-(4-fluorofenil)-6-hidro-xipiridino-3-carboxilato de metilo (8,0 g) como um sólido castanho. 2Η RMN (CDCI3) δ: 3,62 (3H, s) , 6,46 (1H, d), 7,14 (2H, t), 7,4 (2H, dd), 7,98 (1H, d), 10,93 (1H, br s). MS (MH+) 248,2
Fez-se reagir 2-(4-fluorofenil)-6-hidroxipiridino-3-carboxilato de metilo com 2-(imidazol-l-il)-1-(4-fluorofenil)-eta-nol pelo procedimento descrito para a preparação de 2- (4-fluorofenetil)-5- [1-(4-fluorofenil)-2-(l-metilimidazol-5-il)-etoxi]benzoato para dar 2-(4-fluorofenil)-6-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]piridino-3-carboxilato de metilo. !h RMN (CDCI3) δ: 3,68 (3H, s) , 4,32 (1H, dd) , 4,44 (1H, dd) , 6,31 (1H, t) , 6,82 (1H, d), 6,83 (1H, s) , 7,08 (5H, m) , 7,38 (1H, s), 7,69 (4H, m), 8,07 (1H, d). MS (MH+) 436,4
Hidrolizou-se 2-(4-fluorofenil)-6-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]piridino-3-carboxilato de metilo utilizando hidróxido de sódio para dar ácido 2-(4-fluorofenil)-6-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]piridino-3-carboxílico. 1H RMN (DMSO-d6) δ: 4,48 (1H, dd) , 4,58 (1H, dd) , 6,37 (1H, dd) , 6,86 (1H, s) , 6,94 (1H, d), 7,22 (5H, m) , 7,43 (4H, m) , 7,65 (1H, S), 8,05 (1H, d). MS (MH+) 422,1
Converteu-se o ácido 2-(4-fluorofenil)-6-[1-(4-fluorofenil) -2 - (imidazol-l-il) etoxi] piridino-3-carboxílico em (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-6-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi] -pirid-3-oílamino}4-metilsulfanilbutirato de terc-butilo por um método semelhante ao descrito para a preparação de (2S)-2-(2-(4-fluorofenetil)-5- [1-84-fluorofenil)-2-(l-metilimidazol-5-il) -etoxi]benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de terc-butilo. 106 !η RMN (DMSO-dg) δ: 1,39 (9H, d), 1,8 (2H, m) , 2,0 (3H, d), 2,18 (1H, m) , 2,35 (1H, m) , 4,25 (1H, m) , 4,76 (2H, m) , 6,55 (1H, m) , 6,98 (1H, d), 7,12-7,38 (4H, m) , 7,42-7,7 (5H, m) , 7,74 (1H, d), 7,8 (1H, m), 8,62 (1H, dd), 9,15 (1H, d). MS (MH+) 609,3
Anál. Calculada incluindo: 2,0 HC1, 0,25 i.hexano: C 57,2 H 5,6 N 8,0 S4,6
Encontrada C 57,5 H5,5 N8,2 S4,9.
Exemplo 57 (2S)-2 -{2 -(4-Fluorofenil)-6-[1-(4-fluorofenil)-2-(1-metilimidazol-5-il)etoximetil]pirid-3-oílamino-4-metilsulfanilbutirato de fcer-butilo
Uma mistura de ácido 2-(4-fluorofenil)-6- [1-(4-fluorofenil)-2-(l-metilimidazol-5-il)etoximetil] pirido-3-carboxílico (0,39 g) e éster terc-butílico de L-metionina.HCl (0,42 g) foi dissolvida em DMF (50 mL) e em seguida adicionou-se DMAP (0,63 g) , EDC (0,25 g) e HOBT (0,12 g) sob atmosfera inerte à temperatura ambiente. Após 16 horas a solução foi evaporada a pressão reduzida, o resíduo obtido foi diluído com ácido cítrico 1 M (10 mL) e extraído com 2% de metanol/diclorometano (1 x 100 mL, 1 x 60 mL) . Os extractos combinados foram secos, filtrados e concentrados a pressão reduzida para dar um óleo amarelo. A purificação por cromatografia em coluna "flash" eluindo com metanol/acetato de etilo (9:1) deu (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-6-[1-(4-fluorofenil)-2-(l-metilimidazol-5-il)etoximetil]pirid-3-oílamino-4-metilsul-fanilbutirato de ter-butilo como uma espuma incolor (0,34 g) . iH RMN (CDCI3) δ: 1,43 (9H, s) , 1,82-1,95 (2H, m) , 2,04 (3H, s) , 2,20-2,29 (2H, m) , 2,88-2,99 (1H, m) , 3,02 -3,14 (1H, m) , 3,20 (2H, s) , 4,41-4,49 (1H, m) , 4,55-4,66 (3H, m) , 6,48 (1H, dd) , 6,76 (1H, s) , 7,00- -7,15 (4H, m), 7,23- 7,31 (4H, m) , 7 ,58- 7,66 (2H, m), 7,90 (1H, dd).
Anál. Calculada incluindo 0,5 H2O: C 63,2 H 6,1 N 8,7 107
Encontrada C 63,0 H5,8 N8,7 MS (MH+) 637,4 0 material de partida foi preparado como se segue.
Adicionou-se iodeto de metilo (10,33 mL) a uma suspensão com agitação de ácido 2-cloro-6-nicotínico (22,8 g) e carbonato de potássio (36,8 g) em DMF (190 mL) , sob atmosfera inerte à temperatura ambiente. Após agitação vigorosamente durante 16 horas a suspensão foi filtrada e o resíduo sólido lavado com 10% de metanol/diclorometano (100 mL) . O filtrado foi então concentrado a pressão reduzida e o resíduo diluído com água (250 mL) , extraído com diclorometano (3 x 150 mL) e os extractos combinados foram secos e concentrados a pressão reduzida. A destilação em forno de bolas (140°C a 0,05 mmHg) deu 2-cloro-6-nicotinoato de metilo como um sólido branco (23,6 g) · iH RMN (CDCI3) δ: 2,50 (3H, s) , 3,85 (3H, s) , 7,10 (1H, d), 8,00 (1H, d). MS (MH+) 186
Dissolveu-se 2-cloro-6-nicotinoato de metilo (23,1 g) e ácido 4-fluorobenzenoborónico (22,6 g) em etanol (25 mL) e tolueno (350 mL) e adicionou-se Pd(dppb)Cl2 (3,76 g) sob atmosfera inerte. Adicionou-se uma solução aquosa de carbonato de sódio 1 M (124 mL) e a suspensão foi aquecida a refluxo durante 4 horas e arrefecida até à temperatura ambiente. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com diclorometano (3 x 100 mL). Os extractos orgânicos combinados foram secos, filtrados e concentrados a pressão reduzida para dar um óleo amarelo. A purificação por cromatografia em coluna "flash" eluindo com acetato de etilo/iso-hexano (4:6) deu 2-(4-fluorofenil)-6-metilpiridino-3-carboxilato de metilo como um sólido amarelo pálido (27,8 g). ^ RMN (CDCI3) δ: 2,64 (3H, s) , 3,68 (3H, s) , 7,05-7,14 (2H, m) , 7,18 (1H, d), 7,45-7,53 (2H, m) , 8,03 (1H, d). MS (MH+) 246. 108
Dissolveu-se 2-(4-fluorofenil) -6-metilpiridino-3-carbo-xilato de metilo (17,3 g) em diclorometano (600 mL) , a solução foi arrefecida a 0°C e adicionou-se MCPBA (24,3 g) em porções ao longo de 25 minutos. A solução foi então aquecida até à temperatura ambiente e agitada durante 16 horas, lavada com bicarbonato de sódio aquoso saturado (500 mL) , seca e com-centrada a pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cro-matografia em coluna "flash", eluindo com metanol/acetato de etilo (1:12) para dar 1-óxido de 2-(4-fluorofenil)-3-(meto-xicarbonil)-6-metilpiridina como um óleo amarelo pálido que cristalizou em repouso (18,6 g). !h RMN (CDC13) δ: 2,58 (3H, s) , 3,62 (3H, s) , 7,11-7,18 (2H, m) , 7,33-7,42 (3H, m) , 7,63 (1H, d). MS (MH+) 261.
Adicionou-se cloreto de metano sulfonilo (7,11 mL) a uma solução com agitação de 1-óxido de 2-(4-fluorofenil)-3-(meto-xicarbonil)-6-metilpiridina (12,0 g) em tolueno (300 mL) e a mistura foi aquecida a refluxo sob atmosfera inerte durante 16 horas. A solução foi parcialmente concentrada a pressão reduzida e depois aplicada directamente numa coluna "flash" de sílica e eluída com acetato de etilo/iso-hexano (1:5) para dar 2-(4-fluorofenil)-6-clorometilpiridino-3-carboxilato de metilo como um sólido cristalino branco (13,6 g). !h RMN (CDC13) δ: 3,72 (3H, s) , 4,72 (2H, s) , 7,08-7,16 (2H, m) , 7,49-7,58 (3H, m) , 8,14 (1H, d). MS (MH+) 280.
Adicionou-se hidreto de sódio (0,096 g) a uma solução com agitação de 1-(4-fluorofenil)-2-(l-metilimidazol-5-il)etanol (0,53 g) em DMF (2 0 mL) sob atmosfera inerte à temperatura ambiente. Após 30 minutos a solução foi arrefecida a -40°C e adicionou-se uma solução de 2- (4-fluorofenil)-6-clorometil-pi-ridino-3-carboxilato de metilo (0,67 g) em DMF (5 mL) antes de se aquecer até 0°C ao longo de 90 minutos. Adicionou-se solução aquosa saturada de cloreto de amónio (1 mL) e a suspensão foi 109 concentrada a pressão reduzida para dar um resíduo amarelo. Adicionou-se solução saturada de cloreto de sódio (15 mL) e a mistura foi extraída com 3% de metanol/diclorometano (5 x 25 mL) . Os extractos combinados foram secos, e concentrados a pressão reduzida. A purificação por cromatografia em coluna "flash" eluindo com metanol/diclorometano (1:12) deu 2-(4-fluorofenil)-6-[1-(4-fluorofenil)-2-(l-metilimidazol-5-il)etoxi-metil]pirido-3-carboxilato de metilo como uma goma amarela (0,30 g). 1H RMN (CDC13) δ: 2,95-3,17 (2H, m) , 3,38 (3H, s) , 3,71 (3H, s) , 4,45-4,65 (3H, m) , 6,86 (2H, s) , 6,97-7,16 (4H, m) , 7,21-7,33 (3H, m), 7,36 (1H, s), 7,40-7,50 (2H, m), 8,09 (1H, d). MS (MH+) 464
Uma mistura de 2-(4-fluorofenil)-6-[1-(4-fluorofenil)-2-(l-metilimidazol-5-il)etoximetil]pirido-3-carboxilato de metilo (0,47 g) , hidróxido de sódio (0,20 g) , água (6 mL) e metanol (30 mL) foi aquecida a refluxo durante 3 horas e depois arrefecida até à temperatura ambiente. A mistura foi concentrada a pressão reduzida, adicionou-se ácido cítrico 1 M (6 mL) e água (6 mL) e a mistura foi extraída com 5% de metanol/diclorometano (3 x 50 mL) . Os extractos foram secos e concentrados a pressão reduzida para dar ácido 2-(4-fluorofenil)-6-[1- (4-fluorofenil)-2-(l-metilimidazol-5-il)etoximetil] pirido-3-carboxílico como uma goma amarela (0,39 g). MS (MH+) 450
Exemplo 58 (2S)-2-(3-(4-Fluorofenetil)-6-[1-(4-fluorofenil)-2 -(1-metilimi-dazol-5-il) etoxi]pirid-2-oílamino')-4-metil-sulfanilbutirato de terc-butilo
Dissolveu-se ácido 3-(4-fluorofenetil)-6-[1-(4-fluorofenil) -2-(l-metilimidazol-5-il)etoxi]piridino-2-carboxílico (0,61 g) e éster terc-butílico de L-metionina.HCl (0,64 g) em diclorometano (50 mL) em seguida adicionou-se DMAP (0,96 g) e 110 EDC (0,38 g) sob atmosfera inerte à temperatura ambiente. Após agitação durante 16 horas a solução foi lavada com ácido cítrico 1 M (60 mL) e a camada orgânica foi seca e concentrada a pressão reduzida. A purificação numa coluna "flash" de sílica com acetato de etilo deu (2S)-2-{3-(4-fluorofenetil)-6-[1-(4-fluorofenil)-2-(l-metilimidazol-5-il)etoxi]pirid-2-oílamino}-4-metilsulfanilbutirato de terc-butilo como uma espuma incolor (0,27 g). (2H, m) , 2,05 (3H, 2,76-2,88 (2H, m) , (1H, m), 6,05-6,21 m), 7,26-7,42 (4H, ÍH RMN (CDCI3) δ: 1,54 (9H, d), 1,75-1,98 S) , 2,12-2,29 (1H, m) , 2,33-2,63 (1H, m) , 3,06-3,30 (4H, m), 3,42 (3H, s), 4,63-4,73 (1H, m) , 6,76-7,03 (5H, m) , 7,06-7,16 (2H, m) , 8,06-8,14 (1H, m) .
Anál. Calculada incluindo 1,5 HC1: C 59,6 H 5,9 N 7,9 Encontrada C 59,8 H5,9 N7,7 MS (MH+) 651 0 material de partida foi preparado como se segue:
Preparou-se 3-(trifluorometanossulfoniloxi)piridino-2-carboxilato de metilo em dois passos a partir de ácido 2-hidroxipicolínico utilizando o procedimento de Subramanyam, C.; Chattarjee, S.,· Mallamo, J. P., Tetrahedron Lett., 1996, 37, 459 . 3-Hidroxipiridino-2-carboxilato de metilo: ÍH RMN (CDCI3) δ: 4,08 (3H, s), 7,40 (2H, m), 8,28 (1H, dd). MS (MH+) 154 3-(Trifluorometanossulfoniloxi)piridino-2-carboxilato de metilo: 1H RMN (CDCI3) δ: 4,07 (3H, s) , 7,61 (1H, dd) , 7,74 (1H, dd) , 8,76 (1H, d). MS (MH+) 286 111
Adicionou-se tributilamina (24,6 mL) a uma mistura com agitação de 3-(trifluorometanossulfoniloxi)piridino-2-carboxi-lato de metilo (19,6 g) , cloreto de bis(triortotolilfosfi-na)paládio(II) (1,08 g), iodeto de cobre(I) e 4-fluoro-estireno (12,3 mL) em DMF (300 mL) . A solução foi aquecida sob atmosfera inerte a 90°C durante 26 horas depois foi arrefecida até à temperatura ambiente e concentrada a pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em diclorometano (300 mL), o sólido foi filtrado e o filtrado lavado com ácido cítrico 1 M (3 x 100 mL) , bicarbonato de sódio aquoso saturado (150 mL) , seco e con centrado a pressão reduzida. O óleo castanho obtido foi pré-adsorvido em sílica e depois purificado numa coluna de sílica "flash" eluindo com acetato de etilo/isohexano (4:6) para dar 3-[2-(4-fluorofenil)etenil]piridino-2-carboxilato de metilo como um sólido amarelo pálido (12,4 g) . !h RMN (CDCI3) δ: 4,02 (3H, s) , 7,01 (1H, d), 7,04-7,11 (2H, m) , 7,46 (1H, dd) ; 7,49-7,56 (2H, m) , 7,83 (1H, d), 8,05 (1H, d), 8,59 (1H, d). MS (MH+) 258
Agitou-se vigorosamente uma suspensão de paládio a 10% sobre carbono (2,5 g) e 3-[2-(4-fluorofenil)etenil]piridino-2-carboxilato de metilo (12,4 g) em acetato de etilo (200 mL) sob atmosfera de hidrogénio à temperatura ambiente durante quatro horas. A suspensão foi filtrada através de Celite e o filtrado foi concentrado a pressão reduzida para dar 3-(4-fluorofe- netil)piridino-2-carboxilato de metilo como um óleo amarelo pálido, móvel (11,72 g).
Dados de RMN (CDCI3) δ: 2,89 (2H, dd), 3,21 (2H, dd), 3,97 (3H, s), 6,89-7,00 (2H, m), 7,06-7,16 (2H, m), 7,33 (1H, dd), 7,49 (1H, d), 8,58 (1H, dd). MS (MH+) 260
Dissolveu-se 3-(4-fluorofenetil)pirídino-2-carboxilato de metilo (11,7 g) em diclorometano (600 mL) , arrefeceu-se a 0°C e adicionou-se MCPBA (14,7 g) em porções ao longo de 20 minutos. A 112 solução foi então aquecida até à temperatura ambiente e agitada durante 16 horas. A mistura foi lavada com bicarbonato de sódio aquoso saturado (2 x 200 mL) , seca e depois concentrada a pressão reduzida. O resíduo foi purificado numa coluna "flash" de sílica eluindo com metanol/diclorometano (1:12) para dar 1-óxido de 3-(4-fluorofenetil)-2 - (metoxicarbonil)piridina como um óleo amarelo pálido que cristalizou de éter dietílico (10,5 g). !η RMN (CDCI3) δ: 2,77-2,92 (4H, m), 6,91-7,01 (3H, m), 7,03-7,09 (2H, m), 7,16 (1H, d), 8,14 (1H, d), MS (MH+) 276.
Uma solução de 1-õxido de 3-(4-fluorofenetil)-2-(metoxicarbonil) piridina (7,96 g) em DMF (100 mL) e anidrido trifluoroacético (40,9 mL) foi agitada sob atmosfera inerte à temperatura ambiente durante 24 horas. A mistura reaccional foi concentrada a pressão reduzida, diluída com bicarbonato de sódio aquoso saturado (150 mL) e extraída com diclorometano (3 x 100 mL). Os extractos orgânicos combinados foram secos e concentrados a pressão reduzida e o resíduo purificado numa coluna "flash" de sílica eluindo com metanol/diclorometano (1:9) para dar 3-(4-f luorofenetil)-6-hidroxipiridino-2-carboxilato de metilo como um sólido creme (7,7 g). 1H RMN (CDCI3) δ: 2,80 (2H, dd) , 3,08 (2H, dd) , 3,95 (3H, s) , 6,71 (1H, d), 6,92-7,01 (2H, m), 7,06-7,11 (2H, m), 7,28 (1H, d), 9,63 (1H, br s). MS (MH+) 276
Adicionou-se DEAD (0,85 mL) gota a gota ao longo de 2 minutos a uma suspensão com agitação de 3-(4-fluorofenetil)-6-hidroxipiridino-2-carboxilato de metilo (1,0 g), 2-(1-metil- imidazol-5-il)-1-(4-fluorofenil)etanol (0,80 g) e trifenil-fosfina (1,43 g) em THF (70 mL) sob atmosfera inerte à temperatura ambiente. Após agitação durante 16 horas a solução foi concentrada a pressão reduzida e carregada directamente numa coluna "flash" de sílica eluindo com metanol/diclorometano (1:20) para dar 3-(4-fluorofenetil)-6-[1-(4-fluorofenil)-2-(1- 113 metilimidazol-5-il)etoxi]piridino-2-carboxilato de raetilo como um óleo incolor (1,56 g). 1H RMN (CDCI3) Ô: 2,81 (2H, dd) , 3,01-3,12 (3H, m) , 3,35 (1H, dd) , 3,91 (3H, s), 6,21 (1H, t), 6,68-6,81 (2H, m) , 6,87-7,20 (5H, m) , 7,26-7,37 (3H, m) , 7,40-7,45 (1H, m) . MS (MH+) 478
Uma mistura de 3-(4-fluorofenetil)-6-[1-(4-fluorofenil)-2 -(1-metilimidazol-5-il)etoxi]piridino-2-carboxilato de metilo (1,56 g) , hidróxido de sódio (0,65 g) , água (12 mL) e metanol (80 mL) foi aquecida a refluxo durante 16 horas e depois arrefecida até à temperatura ambiente. A mistura foi concentrada a pressão reduzida, adicionou-se ácido cítrico 1 M (17 mL) e a mistura foi extraída com 10% de metanol/diclorometano (1 x 50 mL, 2 x 30 mL) . Os extractos foram secos e concentrados a pressão reduzida para dar ácido 3-(4-fluorofenetil)-6-[1-(4-fluorofenil)-2-(l-metilimidazol-5-il)etoxi]piridino-2-carboxílico como uma espuma amarela pálida (1,22 g).
Exemplo 59 (2S)-2-{3-(4-Fluorofenetil)-6- [1-(4-fluorofenil)-2-(1-metllimidazol-5-il)etoxi]pirid-2-oílamino)-4-metil-sulfanilbutirato de ciclopentilo 0 composto em epígrafe foi preparado a partir de 3-(4-fluorofenetil)-6-[1-(4-fluorofenil)-2-(l-metilimidazol-5-il)-etoxi]piridino-2-carboxílico por uma via semelhante à descrita para a preparação de (2S)-2-{3-(4-fluorofenetil)-6-[1-(4-fluorofenil)-2-(l-metilimidazol-5-il)etoxi]pirid-2-oílamino}-4-metilsulfanilbutirato de terc-butilo mas utilizando éster ciclopentílico de L-metionina em vez de éster terc-butílico de L-metionina. 1H RMN (CDCI3) δ: 1,58-1,81 (7H, m) , 1,84-1,99 (3H, m) , 2,03- 2,16 (1H, m) sobreposto com 2,07 (3H, d), 2,17-2,43 (3H, m) , 2,58 (1H, m) , 2,81 (2H, m) , 3,08-3,37 (4H, m) , 3,39 (3H, s) , 114 4,64-4,78 (1Η, m) , 5,28 (1H, m) , 6,05-6,18 (1H, m) , 6,76-7,03 (6H, m), 7,11 (2H, m), 7,34 (3H, m) , 8,10 (1H, m) .
Anál. Calculada incluindo 0,5 H2O C 64,4 H 6,1 N 8,3
Encontrada C 64,4 H 6,1 N 8,2; MS (MH+) 663 O material de partida foi preparado como se segue:
Uma mistura de N- terc-butoxicarbonil L-metionina (30 g) , ciclopentanol (31 g) , DMAP (44 g) , EDC (30 g) e diclorometano (200 mL) foi agitada sob atmosfera inerte durante 16 horas. Foi então lavada com ácido cítrico aquoso 1 M (2 00 mL) , solução saturada de carbonato de sódio (100 mL) e solução saturada de cloreto de sódio, seca e evaporada até à secura para dar éster ciclopentílico de N- terc-butoxicarbonil L-metionina como uma goma (36 g) . !h RMN (CDCI3) δ: 1,44 (9H, s), 1,52-2,0 (9H, m) , 2,0-2,2 (1H, m) , 2,1 (3H, s) , 2,54 (2H, m) , 4,34 (1H, m) , 5,1 (1H, br s) , 5,2 (1H, m). MS (MH+) 318
Uma mistura de éster ciclopentílico de N-terc-butoxicarbonil L-metionina (53 g), TFA (200 mL) , trietilsilano (39 g) e diclorometano (2 L) foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas, evaporada até à secura e depois convertida no sal cloridrato para dar éster ciclopentílico de L-metionina como um sólido cristalino branco (40,5 g). !h RMN (DMSO-d6) δ: 1,47-1,95 (8H, m), 1,95-2,2 (2H, m), 2,05 (3H, S) , 2,45-2,75 (2H, m) , 4,01 (1H, t) , 5,18 (1H, m) , 8,7 (3H, br S). MS (MH+) 218 115
Exemplo 60 Ácido_(2S)-2 -(2 -(4-fluorofenetil)-5-[1-(tiazol-2-il)-2 -(1- metilimidazol-5-il)etoxi]benzoílamino}-4-metil-sulfanilbutírico
Uma mistura de (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-5-[1-(tiazol-2-il)-2 -(l-metilimidazol-5-il)etoxi]benzoílamino}-4-metilsulfanil- butirato de terc-butilo (0,050 g, 0,078 mmol) em TFA foi agitada à temperatura ambiente sob atmosfera de azoto durante 4 horas. O TFA foi removido por evaporação e o resíduo foi basificado com solução saturada de bicarbonato de sódio, reacidif içado com HCl 2 N até pH 6 e extraído com diclorometano. Os extractos foram secos e evaporados até à secura. O resíduo foi seco sob alto vácuo para dar o composto em epígrafe como um sólido branco (0,040 g, 89%) . 1H RMN (CDCI3 + DMS0-d6) δ: 2,05-2,15 (5H, m), 2,15-2,20 (1H, m) , 2,20-2,30 (1H, m) , 2,50-2,68 (2H, m) , 2,81-2,90 (2H, d), 2,95-3,30 (2H, d), 3,50-3,61 (2H, m), 3,86-3,95 (3H, s), 4,73- 4,83 (1H, m) , 5,90-6,01 (1H, m) , 6,83-6,96 (3H, m) , 7,01-7,17 (4H, m) , 7,18-7,28 (1H, m) , 7,35-7,47 (3H, m) , 7,83-7,87 (1H, s), 9,08-9,13 (1H, m).
Anál. Calculada incluindo 5,5HC1: C 44,47 H 4,70 N 7,15 S 8,19
Encontrada C 44,40 H 4,70 N 7,10 S 7,80 MS (MH+) 583,3 O material de partida foi preparado como se segue:
Uma mistura de 2-tiazole carboxaldeído (25 g, 221 mmol), ortoformato de trietilo (46 mL, 276 mmol) e ácido para- toluenossul fónico (1,52 g, 9 mmol) em etanol (200 mL) foi agitada durante 16 horas sob atmosfera de azoto à temperatura ambiente. Adicionou-se mais quantidade de ácido para- toluenossulfónico (2 g, 11 mmol) e a reacção foi agitada durante mais 16 horas. A mistura foi tratada com bicarbonato de sódio até pH 9, agitada durante mais 5 minutos e depois filtrada e o 116 filtrado foi evaporado até à secura para dar 2-(1,1-dietoximetil)tiazole como um óleo límpido, que foi utilizado sem purificação adicional (41 g, 99%). ÍH RMN (CDCI3) δ: 1,28 (6H, t) , 3,60-3,80 (4H, m) , 5,74 (1H, s), 7,34 (1H, d), 7,80 (1H, d). MS (MH+) 187,4
Adicionou-se eterato de trifluoreto de boro (21 g, 18 mL, 148 mmol) gota a gota a uma mistura de 2-(1,1-dietoximetil)-tiazole (27,6 g, 148 mmol) e fosfito de trietilo (24,5 g, 25 mL, 148 mmol) em diclorometano (300 mL) e a mistura foi aquecida a refluxo durante 12 horas sob atmosfera de azoto. A reacção foi deixada arrefecer até à temperatura ambiente, tratada com água (100 mL) e agitada durante mais 10 minutos. A fase orgânica foi separada, seca, filtrada e evaporada até à secura. A purificação por cromatografia em coluna "flash" eluindo com acetato de etilo e acetato de etilo/metanol (9:1 e 4:1) deu etoxi(1,3-tiazol-2-il)metil fosfonato de dietilo como um óleo castanho (7 g, 30%). l-H RMN (CDCI3) δ: 1,23-1,36 (9H, m) , 3,65-3,73 (2H, m) , 4,07- 4,30 (4H, m), 5,05 (1H, d), 7,42 (1H, d), 7,80 (1H, d). MS (MH+) 280,2
Adicionou-se uma solução de n-butil lítio (1,6 M em hexano) (30 mL, 47 mmol) gota a gota ao longo de 5 minutos a uma solução de etoxi(1,3-tiazol-2-il)metil fosfonato de dietilo (15,21 g, 55 mmol) em tetrahidrofurano (400 mL) arrefecida a -78°C sob atmosfera de azoto e a mistura foi então agitada durante mais 10 minutos. Adicionou-se então à reacção uma solução de l-metil-lH-imidazole-5-carboxaldeído (4) (4 g, 36 mmol) em tetrahidrofurano (20 mL) ao longo de 10 minutos que foi então agitada durante mais 20 minutos, depois de a adição estar completa. A reacção foi tratada com água (50 mL) , deixada aquecer até à temperatura ambiente, acidificada com ácido clorídrico (10 N, 50 mL) e aquecida a refluxo durante 18 horas sob atmosfera de azoto. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente, basifiçada com bicarbonato de sódio aquoso 117 saturado até pH 8, o tetrahidrof urano foi evaporado e os resíduos aquosos extraídos com acetato de etilo (2 x 250 mL). Os extractos orgânicos combinados foram lavados com solução saturada de cloreto de sódio, secos e evaporados até à secura, a purificação por cromatografia em coluna "flash" eluindo com acetato de etilo/metanol (9:1 e 4:1) deu 2-(l-metilimidazol-5-il)-1-(tiazol-2-il)etanona como um sólido amarelo (7,3 g, 97%). ^-H RMN (CDCI3) δ: 3,65 (3H, s) , 4,48 (2H, a) , 7,00 (1H, s) , 7,45 (1H, s), 7,73 (1H, s), 8,05 (1H, s). MS (MH+) 208
Adicionou-se borohidreto de sódio (0,56 g, 14,9 mmol) a uma solução de 2-(l-metilimidazol-5-il)-1-(tiazol-2-il)etanona em metanol (100 mL) e a mistura foi agitada sob atmosfera de azoto à temperatura ambiente durante 2 horas. A reacção foi evaporada até à secura e a goma resultante foi tratada com água (15 mL) e agitada durante 30 minutos para dar um precipitado sólido que foi filtrado e seco para dar 2-(l-metilimidazol-5-il)-1-(tiazol-2-il)etanol (2,67 g, 95%). !h RMN (CDC13) δ: 2,88-2,99 (1H, q), 3,11-3,20 (1H, dd), 3,28 (2H, s) , 3,52 (3H, s) , 4,96-5,04 (1H, m) , 6,36 (1H, s) , 6,59 (1H, s), 7,60 (1H, d), 7,73 (1H, s). MS (MH+) 210,3
Uma mistura de 2-(4-fluorofenetil)-5-hidroxibenzoato de metilo (1,83 g, 6,7 mmol), 2-(l-metilimidazol-5-il)-1-(tiazol-2-il)etanol (1,40 g, 6,68 mmol) e trifenilfosfina (2,10 g, 8,0 mmol) em tetrahidrof urano (25 mL) foi agitada à temperatura ambiente sob atmosfera de azoto. Adicionou-se DEAD (1,39 g, 1,25 mL, 8,0 mmol) gota a gota à solução. (A reacção foi mantida à temperatura ambiente ± 2°C). A solução cor de laranja foi então agitada â temperatura ambiente sob atmosfera de azoto durante 16 horas. A solução de tetrahidrofurano foi evaporada até à secura para dar um óleo. A purificação por cromatografia em coluna "flash" eluindo com acetato de etilo, acetato de etilo/metanol (9:1 e 4:1) deu 2-(4-fluorofenetil)-5-[2-(1-metilimidazol-5-il) - 118 1- (tiazol-2-il)etoxi]benzoato de metilo (2,07 g, 67%) como um óleo límpido. 1H RMN (CDCI3) δ: 2,76 (2H, t) , 3,10 (2H, t) , 3,30-3,45 (2H, m) , 3,60 (3H, s) , 3,90 (3H, s) , 5,70-5,75 (1H, m) , 6,90-7,50 (10H, m), 7,77 (1H, d) . MS (MH+) 466,4
Uma mistura de 2-(4-fluorofenetil)-5-[2-(1-metilimidazol-5-il)-1-(tiazol-2-il)etoxi]benzoato de metilo (2,07 g, 4,4 mmol) e hidróxido de sódio (0,89 g, 22,23 mmol) em metanol (100 mL) e água (9 mL) foi agitada sob atmosfera de azoto a refluxo durante 18 horas, em seguida arrefecida até à temperatura ambiente e o metanol removido por evaporação. O resíduo foi tratado com ácido cítrico aquoso (1 M, 40 mL) e extraído com diclorometano. Os extractos orgânicos foram secos e evaporados até a secura para dar ácido 2-(4-fluorofenetil)-5-[2-(1-metilimidazol-5-il)-1-(tiazol-2-il)etoxi]benzóico como uma espuma branca (1,48 g, 75%). !h RMN (CDCI3) δ: 2,83 (2H, t) , 3,20 (2H, t) , 3,27-3,53 (2H, m), 3,56 (3H, s), 4,30-4,60 (1H, br), 5,70-5,80 (1H, m), 6,83- 7,16 (7H, m), 7,30-7,66 (3H, m), 7,80 (1H, d). MS (MH+) 452,4
Uma mistura de ácido 2-(4-fluorofenetil)-5-[2-(1-meti-limidazol-5-il)-1-(tiazol-2-il)etoxi]benzóico (0,74 g, 1,63 mmol), DMAP (1,0 g, 8,2 mmol), éster terc-butílico de L-metio- nina. HCl (1,0 g, 4,92 mmol), EDC (0,63 g, 3,27 mmol) e HOBT (0,22 g, 1,63 mmol) em DMF (50 mL) foi agitada à temperatura ambiente sob atmosfera de azoto durante 16 horas. A reacção foi evaporada até à secura e lavada com ácido cítrico aquoso (1 M, 2 0 mL) e extraída com diclorometano (20 mL) . Os extractos foram lavados com solução saturada de cloreto de sódio e secos e aplicados directamente numa coluna "flash" de sílica que foi eluída com acetato de etilo/metanol (9:1 e 4:1) para dar (2S)- 2- {2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(tiazol-2-il)-2-(l-metilimidazol-5-il)etoxi]benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de terc-butilo. 119 0 produto foi dissolvido em acetato de etilo e tratado com HCl etéreo 1 M (10 mL) . O sólido resultante foi isolado por centrifugação, lavagem adicional com éter dietílico e finalmente secagem sob alto vácuo para dar (2S)-2-{2-(4- fluorofenetil)-5-[1-(tiazol-2-il)-2-(l-metilimidazol-5-il)etoxi]benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de terc-butilo como um sólido branco (0,57 g, 54% de rendimento). l-H RMN (CDCI3) δ: 1,45-1,53 (9H, s) , 1,99-2,10 (1H, m) , 2,08 (3H, s), 2,16-2,31 (1H, m), 2,51-2,63 (2H, t), 2,78-2,97 (2H, m) , 2,92-3,00 (2H, m) , 3,30-3,4 (2H, m) , 3,57 (3H, s) , 4,66- 4,78 (1H, m), 5,68-5,73 (1H, m), 6,47-6,55 (1H, t), 6,77-7,13 (8H, m) , 7,40-7,45 (2H, m), 7,80 (1H, d).
Anál. Calculada incluindo 2 HCl 2 H2O: C 53,00 H 6,07 N 7,49 S 8,58
Encontrada C 53,00 H 6,20 N 7,00 S 8,70 MS (MH+) 439,4
Exemplo 61 Ácido_(2S)-2-{2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(tiazol-2-il)-2- (1- metilimidazol-5-il)etoxi]benzoílamino}-4-metil-sulfonilbutírico
Preparou-se ácido (2S)-2-{2-(4-fluorofenetil)-5-[1- (tiazol-2-il)-2-(l-metilimidazol-5-il) etoxi]benzoílamino}-4-metilsulfonilbutírico a partir de (2S)-2-{2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(tiazol-2-il)-2-(l-metilimidazol-5-il)etoxi]benzoílamino}-4-metilsulfonilbutirato de terc-butilo por um método semelhante ao utilizado para o Exemplo 60. ÍH RMN (CDCI3 + DMSO-dg) δ: 2,48-2,56 (1H, m), 2,78-2,99 (2H, m) , 2,92-3,03 (4H, m) , 3,25-3,34 (1H, m) , 3,51-3,60 (1H, m) , 3,88-3,97 (3H, s), 5,93-6,05 (1H, m), 6,05-6,15 (1H, m), 6,88-6,98 (3H, m), 7,03-7,18 (3H, m), 7,25-7,54 (3H, m), 7,68-7,95 (2H, m), 8,93-9,04 (1H, m).
Anál. Calculada incluindo 1 H2O, 4 HCl: C 44,73 H 4,79 N 7,20 S 8,2
Encontrada C 44,90 H 5,00 N 6,80 S 7,00 120 MS (MH+) 615,3 O material de partida foi preparado como se segue:
Uma mistura de ácido 2-(4-fluorofenetil)-5-[2-(l-metilimidazol-5-il)-1-(tiazol-2-il)etoxi]benzóico (0,74 g, 1,63 mmol), DMAP (1,40 g, 11,5 mmol), éster terc-butílico da sulfona L-metionina.HCl (1,34 g, 4,92 mmol), EDC (0,63 g, 3,27 mmol) e HOBT (0,22 g, 1,63 mmol) em DMF (50 mL) foi agitada à temperatura ambiente sob atmosfera de azoto durante 16 horas. A reacção foi evaporada até à secura e lavada com ácido cítrico aquoso (1 M, 20 mL) e extraída com diclorometano (20 mL) . Os extractos foram lavados com solução saturada de cloreto de sódio, secos e evaporados até à secura. A purificação por cromatografia em coluna "flash" eluindo com diclorometano/ metanol (95:5, 9:1/85:15) deu uma goma. Esta foi redissolvida em acetato de etilo e tratada com HCl etéreo 1 M (10 mL) . O precipitado sólido resultante foi isolado por centrifugação, lavagem adicional com éter dietílico e secagem sob alto vácuo para dar (2S)-2-{2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(tiazol-2-il)-2-(1-metilimidazol-5-il)etoxi]benzoílamino}-4-metilsulfonilbutirato de terc-butilo como um sólido branco (0,66 g, 60% de rendimento). !η RMN (CDCI3) δ: 1,51 (9H, s) , 2,22-2,38 (1H, m) , 2,46-2,61 (1H, m) , 2,77-2,88 (2H, m) , 2,92 (3H, s) , 2,92-3,04 (2H, m) , 3,08-3,42 (6H, m) , 3,58 (3H, s), 4,65-4,77 (1H, m) , 5,66-5,73 (1H, m), 6,77-7,13 (11H, m), 7,25-7,35 (3H, m), 7,42-7,51 (1H, m) , 7,76-7,83 (1H, m) .
Anál. Calculada incluindo 2 HCl: C 53,29 H 5,56 N 7,53 S 8,62
Encontrada C 53,00 H 5,60 N 8,10 S 7,80 MS (MH+) 671,4 121 121
Exemplo 62 (2S)-2-(2- (4-Fluorofenetil)-5-[1-(tiazol-2-il)-2-(1-metllimidazol-5-il)etoximetil]benzoílamino}-4-metil-sulfanilbutirato de terc-butilo
Uma mistura de ácido 2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(tiazol-2-il)-2 -(l-metilimidazol-5-il)etoximetil]benzóico (0,47 g, 1,06 mmol) (do Exemplo 63), DMAP (0,62 g, 5,05 mmol) , éster terc-butílico de L-metionina.HCl (0,62 g, 3,02 mmol), EDC (0,39 g, 2,02 mmol) e HOBT (0,137 g, 1,01 mmol) em DMF (25 mL) foi agitada à temperatura ambiente sob atmosfera de azoto durante 16 horas. A reacção foi evaporada até à secura e lavada com ácido cítrico aquoso (1 M, 10 mL) e extraída com diclorometano (20 mL) . Os extractos foram lavados com solução saturada de cloreto de sódio, secos e filtrados. A purificação por cromatografia em coluna "flash" eluindo com diclorometano/metanol (95:5, 9:1 e 85:15) deu uma goma. Esta foi dissolvida em acetato de etilo e tratada com HCl etéreo 1 M (10 mL) . O precipitado sólido resultante foi isolado por centrifugação, lavagem adicional com éter dietílico e secagem sob alto vácuo para dar (2S)-2-{2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(tiazol-2-il)-2-(l-metilimidazol-5-il)etoxi-metil]benzoílamino} -4-metilsulfanilbutirato de terc-butilo como um sólido branco (0,366 g, 55%). lH RMN (CDCI3) δ: 1,51 (9H, s) , 1,92-2,08 (1H, m) , 2,15-2,33 (1H, m) , 2,59-2,70 (2H, m), 2,85-2,98 (5H, m) , 3,00-3,23 (4H, m) , 3,46 (3H, d), 4,34 (1H, d), 4,52 (1H, dd) , 4,70-4,83 (1H, m), 4,83-4,90 (1H, m), 6,77 (1H, d), 6,99-7,08 (3H, m) , 7,12-7,21 (5H, m), 7,38 (1H, d), 7,80 (1H, d).
Anál. Calculada incluindo 2,75 H2O, 1 HCl: C 55,27 H 6,48 N 7,58 S 8,68
Encontrada C 55,00 H 6,70 N 7,50 S 9,00 MS (MH+) 653,4 122
Exemplo 63 (2S)-2-(2-(4-Fluorofenetil)-5-[1-(tiazol-2-il)-2-(1-metilimidazol-5-il)etoximetll]benzoílamino}-4-metil-sulfonilbutirato de terc-butilo
Uma mistura de ácido 2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(tiazol-2-il)-2-(l-metilimidazol-5-il)etoximetil]benzóico (0,47 g, 1,01 mmol), DMAP (0,86 g, 7,07 mmol), éster terc-butílico da sulfona de L-metionina.HCl (0,83 g, 3,03 mmol), EDC (0,39 g, 2,02 mmol) e HOBT (0,138 g, 1,01 mmol) em DMF (25 mL) foi agitada à temperatura ambiente sob atmosfera de azoto durante 16 horas. A reacção foi evaporada até à secura e lavada com ácido cítrico aquoso (1 M, 10 mL) e extraída com diclorometano (20 mL) . Os extractos foram lavados com solução saturada de cloreto de sódio e secos. A purificação por cromatografia em coluna "flash" eluindo com diclorometano/metanol (95:5, 9:1 e 85:15) deu uma goma. Esta foi dissolvida em acetato de etilo e tratada com HC1 etéreo 1 M (10 mL). O precipitado sólido resultante foi isolado por centrifugação, lavagem adicional com éter dietílico e secagem sob alto vácuo para dar (2S)-2-(2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(tiazol-2-il)-2-(l-metilimidazol-5-il)etoximetil]benzoí1-amino}-4-metilsulfonilbutirato de terc-butilo como um sólido branco (0,506 g, 73%). 1H RMN (CDCI3) δ: 1,51 (9H, s), 2,30 -2,65 (2H, m) , 2,87-3,43 (7H, m), 2,94 (3H, s), 3,45 (3H, s) , 4,30 (1H, d) , . 4,65 (1H, dd), 4,70-4,87 (2H, m) , 6,73 (1H, d), 6,89-7,02 (2H , m), 7,10- 7,20 (4H, m), 7 ,25 (2H, d) , 7 , 34-7,55 (2H, m) , 7, 83 (1H, d) .
Anál. Calculada incluindo 2 H2O, 1,5 HC1: C 52,65 H 6,04 N 7,22 S 8,27 Encontrada C 53,00 H 6,30 N 7,20 S 8,30 MS (MH+) 685,4 0 material de partida foi sintetizado como se segue:
Lavou-se hidreto de sódio, dispersão a 60% em óleo mineral (0,44 g, 11 mmol) com isohexano e suspendeu-se em DMF (25 mL) . 123
Adicionou-se uma solução de 2-(l-metilimidazol-5-il)-1-(tiazol-2-il)etanol (21,0 g, 10 mmol) em DMF (75 mL) gota a gota e a mistura foi agitada sob atmosfera de azoto à temperatura ambiente durante 10 minutos. Adicionou-se à reacção uma solução de 5-bromometil-2-(4-fluorofenetil)benzoato de metilo (3,51 g, 10 mmol) em DMF (50 mL) gota a gota seguido por iodeto de tetrabutilamónio (0,37 g, 1 mmol) e a mistura foi então agitada à temperatura ambiente durante 16 horas. A reacção foi evaporada até à secura e o resíduo foi tratado com água (100 mL) e extraído com diclorometano (10 0 mL) . Os extractos foram lavados com solução saturada de cloreto de sódio e evaporados até à secura. A purificação por cromatografia em coluna "flash" eluindo com diclorometano/metanol (95:5 e 9:1) deu 2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(tiazol-2-il)-2-(l-metilimidazol-5- il)etoxi-metil]benzoato de metilo como uma goma amarela (3,32 g, 69%). lH RMN (CDCI3) Ô: 2,85 (2H, t), 3,12-3,30 (4H, m) , 3,50 (3H, s) , 3,93 (3H, s) , 4,45 (1H, d), 4,62 (1H, d), 4,90-4,97 (1H, m) , 6,87 (1H, s) , 6,95- -7,05 (3H, m) , 7,13 (3H, m) , 7,40 (2H, d) , 7,80 (2H, m) . MS (MH+) 480,4
Uma mistura de 2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(tiazol-2-il)-2-(l-metilimidazol-5-il)etoximetil]benzoato de metilo (3,32 g, 6,92 mmol), hidróxido de sódio (1,38 g, 34,61 mmol) em metanol (150 mL) e água (15 mL) foi agitada sob atmosfera de azoto a refluxo durante 18 horas, arrefecida até à temperatura ambiente e o metanol removido por evaporação. 0 resíduo foi tratado com ácido cítrico aquoso (1 M, 40 mL) e extraído com diclorometano. Os extractos orgânicos foram secos e evaporados até à secura para dar ácido 2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(tiazol-2-il)-2-(1-metilimidazol-5-il)etoximetil]benzóico como uma espuma amarela (2,85 g, 88%). 1H RMN (CDCI3) δ: 2,85-2,98 (2H, m) , 3,04-3,34 (4H, m) , 4,34 (1H, d), 4,72 (1H, d), 4,89 (1H, dd), 6,95-7,05 (2H, m), 7,04-7,22 (4H, m) , 7,33-7,45 (2H, m) , 7,57 (1H, s) , 7,83 (2H, d), 8,00 (1H, br). 124 MS (MH+) 466,4 Exemplo 64 (2S)-2-(2-(4-Fluorofenil)-4-[1-(tiazol-2-il)-2-(1-metilimidazol-5-il)etoximetil]benzoílamino)-4-metil-sulfanilbutirato de bera-butilo
Uma mistura de ácido 2-(4-fluorofenil)-4-[1-(tiazol-2-il)-2-(l-metilimidazol-5-il)etoximetil]benzóico (0,44 g, 1,07 mmol) (do Exemplo 65), DMAP (0,62 g, 5,03 mmol) , éster terc- butílico de L-metionina.HCl (0,62 g, 5,03 mmol), EDC (0,39 g, 2,01 mmol) e HOBT (0,138 g, 1,01 mmol) em DMF (25 mL) foi agitada à temperatura ambiente sob atmosfera de azoto durante 16 horas. A reacção foi evaporada até à secura, o resíduo foi tratado com ácido cítrico aquoso (1 M, 10 mL) e depois extraído com diclorometano (20 mL) . Os extractos foram lavados com solução saturada de cloreto de sódio, secos e aplicados directamente numa coluna "flash" de sílica eluindo com diclorometano/metanol (95:5, 9:1 e 85:15) para dar uma goma.
Esta foi dissolvida em acetato de etilo e tratada com HC1 etéreo 1 M (10 mL) . 0 sólido resultante foi isolado por centrifugação, lavagem adicional com éter dietílico e secagem sob alto vácuo para dar (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-[1- (tiazol-2-il)-2 -(l-metilimidazol-5-il)etoxi-metil] benzoílamino}-4 -metilsulfanilbutirato de terc-butilo como um sólido branco (0,373 g, 59%) . 1H RMN (DMSO-dg) δ: 1,49 (9H, s) , 1,80-2,00 (2H, m) , 2,06 (3H, s) , 2,20-2,40 (2H, m) , 3,13-3,31 (4H, m) , 4,22-4,32 (1H, m) , 4,70 (2H, q) , 5,11 (1H, q) , 6,63 (1H, s) , 7,20-7,30 (2H, m) , 7,30-7,51 (7H, m), 7,80 (1H, d), 7,89 (1H, d), 8,53 (1H, d). Anál. Calculada incluindo: 1,5 H2O, 1,5 HCl: C 54,40 H 5,92 N 7,93 S 9,08
Encontrada C 54,40 H 6,00 N 7,80 S 9,00 MS (MH+) 625,4 125
Exemplo 65 (2S)-2-(2-(4-Fluorofenil)-4-[1-(tiazol-2-il)-2 -(1-metilimidazol -5-il) etoximetil] benzoílaitiino}-4-metil-Bulfonilbutirato de terc -butilo
Uma mistura de ácido 2-(4-fluorofenil)-4-[1-(tiazol-2-il)-2-(l-metilimidazol-5-il)etoximetil]benzóico (0,44 g, 1,07 mmol), DMAP (0,61 g, 5,04 mmol), éster terc-butílico de L-me- tionina.HCl (0,71 g, 3,03 mmol), EDC (0,39 g, 2,01 mmol) e HOBT (0,138 g, 1,01 mmol) em DMF (25 mL) foi agitada à temperatura ambiente sob atmosfera de azoto durante 16 horas. A reacção foi evaporada até à secura e lavada com ácido cítrico aquoso (1 M, 10 mL) e depois extraída com diclorometano (20 mL). Os extractos foram lavados com solução saturada de cloreto de sódio, secos e filtrados. A purificação por cromatografia em coluna "flash" eluindo com diclorometano/metanol (95:5, 9:1 e 85:15) deu uma goma. Esta foi dissolvida em acetato de etilo e tratada com HCl etéreo 1 M (10 mL) . O sólido resultante foi isolado por centrifugação, lavagem adicional com éter dietílico e secagem sob alto vácuo para dar (2S) -2-{2-(4-fluorofenil)-4-[1-(tiazol-2-il)-2-(1-metilimidazol-5-il)etoximetil]benzoílamino} -4-metilsulfonilbutirato de terc-butilo como um sólido branco (0,406 g, 62%). íh rmn (DMS0-d6) δ: 1,40 (9H, s), 1,82 -2,02 (1H, m) , to o to -2,12 (1H, m) , 2,73 -2,89 (1H, m) , 2,93 (3H, s) , 2,95- -3,1C ' (2H, m) , 3,10 -3, 25 (2H, . m) , 3,45 (3H , s) , 4,18- 4,28 (1H, m) , 4,63 (2H, q) / 5,02 (1H, q), 6,60 (1H, s) , 7,10- 7,25 (2H, m) , 7,25- -7,50 (7H, m) , 7,71 (1H, d) , 7, 81 (1H, d) , 8, 79 (1H, d) . Anál . Calculada incluindo: 1 ,5 H20, 1,5 HCl: C 52,04 H 5 , 66 N 7,59 S 8,68 Encontrada C 51,90 H 5 ,40 N 7,40 S 8,70 MS (MH+) 657,4 0 material de partida foi preparado como se segue:
Lavou-se hidreto de sódio, dispersão a 60% em óleo mineral (0,17 g, 4,34 mmol) com isohexano e suspendeu-se em DMF (25 mL) . 126
Adicionou-se uma solução de 2-(l-metilimidazol-5-il)-1-(tiazol-2-il)etanol (0,83 g, 3,94 mmol) em DMF (30 mL) gota a gota e a mistura foi agitada sob atmosfera de azoto à temperatura ambiente durante 10 minutos. Adicionou-se à reacção uma solução de 4-bromometil-2-(4-fluorofenil)benzoato de metilo (1,28 g, 3,94 mmol) em DMF (25 mL) gota a gota seguido por iodeto de tetrabutilamónio (0,15 g, 0,394 mmol) e a mistura foi então agitada sob atmosfera de azoto à temperatura ambiente durante 16 horas. A reacção foi evaporada até à secura, o resíduo foi tratado com água (20 mL) e extraído com diclorometano (50 mL). Os extractos foram lavados com solução saturada de cloreto de sódio, secos e filtrados. A purificação por cromatografia em coluna "flash", eluindo com diclorometano/metanol (95:5 e 9:1) deu 4- [1-(tiazol-2-il)-2-(l-metilimidazol-5-il)etoximetil]-2- (4-fluorofenil)benzoato de metilo (1,45 g, 82%) como uma goma amarela. ÍH RMN (CDCI3) Ô: 3,10-3,25 (2H, m) , 3,49 (3H, s) , 3,66 (3H, s) , 4,50 (1H, d) , 4,68 (1H, d) , 4,98 (1H, q), 6,86 (1H, s) , 7,03-7,13 (2H, m) , 7,17-7,30 (4H, m), 7,32 (1H, s) , 7,47 (1H, d), 7,78 (1H, d), 7,78-7,83 (1H, m) . MS (MH+) 451
Uma mistura de 4-[1-(tiazol-2-il)-2-(l-metilimidazol-5-il)etoximetil]-2-(4-fluorofenil)benzoato de metilo (1,45 g, 3,21 mmol) e hidróxido de sódio (0,64 g, 16,05 mmol) em metanol (75 mL) e água (7 mL) foi agitada sob atmosfera de azoto a refluxo durante 18 horas, arrefecida até à temperatura ambiente e o metanol removido por evaporação. O resíduo foi tratado com ácido cítrico aquoso (1 M, 5 mL) e extraído com diclorometano. Os extractos orgânicos foram secos e evaporados até à secura para dar ácido 2-(4-fluorofenil)-4-[1-(tiazol-2-il)-2-(1-metil-imidazol-5-il)etoximetil]benzóico como uma espuma branca (0,877 g, 63%) . 127 lH RMN (cdci3: > δ: 2,94-3,11 (2H, m) , 3,43 (3H, s), 4,33 (1H, d) , 4,66 (1H, d) , 4,84 (1H, dd), 6,72 (1H, s), 6,89-7,13 (5H, m) , 7,22 -7,32 (3H, m) , 7,55 (1H, s), 7,70-7, 76 (2H, m). MS (MH+) 438,4
Lisboa, 05 de Novembro de 2001
/ AGENTE OFICIAL DA PROPRIEDADE INDUSTRIAL

Claims (15)

1 REIVINDICAÇÕES 1. Composto de Fórmula (1): Ar1' (R12)R 13 Ar2' ÍCHj)p-Ar Fórmula 1 em que Ar1 representa:
r5 é hidrogénio, Ci_4alquilo, fenilCi_4alquilo; R6 é hidrogénio, Ci_4alquilo, hidroxiCi_4alquilo, halo-genoCi-4alquilo, dihalogenoCi-4alquilo, Ci-4alcoxi, cl-4alcoxiCi-4alquilo, sulfanilCi-4alquilo, aminoCi-4alclul lo, Jí-(Ci-4-alquil) aminoCi-4alquilo, ^7,.17-01(01-43^¾111-^ aminoCi-4alquilo ou fenilCi-4alquilo; m é 0, 1 ou 2; r12 e r!3 sã0 independentemente hidrogénio ou 01-43^¾111-lo; Ar^ é fenilo ou heteroarilo; p é 0 ou 1; 2 Ar3 é fenilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidilo ou pirazinilo, sendo o anel substituído nos átomos de carbono do anel por R2 e -(CH2)nR3 e em que Ar3 está ligado a Ar^-C (R12) R13CH (Ar2) 0- por um átomo de carbono do anel; R2 é um grupo de Fórmula (2):
O Fórmula (2 R9 em que R7 é hidrogénio ou Ci-4alquilo, R8 é -(CH2)q-R10 em que q é 0-4 e R10 é Ci-4alquilsulfanilo, Ci_ 4alquilsulfinilo, Ci-4alquilsulfonilo, hidroxilo, Ci-4alcoxi, carbamoílo, N-Ci-4alquil carbamoílo, N,N-(diCi-4alquil)carbamoílo, Ci-4alquilo, fenilo, tienilo, ou Ci-4alcanoílamino, R9 é hidroxilo, Ci-galcoxi, C3-9CÍC-loalquiloxi, heterocicliloxi, heterociclilCi-4alcoxi ou -NH-SO2-R11 em que R^·1 representa trifluorometilo, Ci_ 4alquilo, fenilo, heteroarilo, arilCi_4alquilo ou hete-roarilCi-4alquilo; ou R2 representa uma lactona de Fórmula (3)
Fórmula (3 tendo o grupo de Fórmula (2) D no carbono alfa quiral no 1ivre; ou (3) a configuração L ou correspondente amino ácido n é 0, 1 ou 2; R3 é fenilo ou heteroarilo; 3 os anéis fenilo e heteroarilo em R3, R5, R6, R9, R11 e Ar2 são independentemente opcionalmente substituídos em átomos de carbono do anel por até três subst ituintes seleccionados de Cl-4alquilo, halogéneo, hidroxilo, Ci_ 4alcoxi, Ci-4alcoxicarbonilo, Ci-4alcanoílo; Ci-4alca-noíloxi, amino, Ci-4alquilamino, di(Ci-4alquil)amino, Ci-4alcanoilamino, nitro, ciano, carboxilo, tiol, C]__ 4alquilsufanilo, Ci-4alquilsulfinilo, Ci-4alquilsulfoni-lo, Ci_4alcanossulfonamido, N-(Ci-4alquilsulfonil)-N-Ci-4-alquilamino, aminossulfonilo, N- (Ci-4alquil)aminossul-fonilo, N, N-ál (Ci-4alquil)aminossulfonilo, carbamollo, N- (Ci-4alquil)carbamollo, N,N-(diCi-4alquil)carbamoílo, carbamoílCi-4alquilo, N- (Ci_4alquil) carbamoílCi^alquilo, N, N- (diCi_4alquil)carbamoílCi-4-alquilo, hidroxiCi-4-alquilo e Ci-4alcoxiCi_4alquilo e nos grupos NH do anel (substituindo hidrogénio) por Ci_4alquilo, Ci_4al-canoílo, Ci-4alquilsulfonilo, halogenoCi-4alquilo, di-fluorometilo ou trifluorometilo; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco ou solvato.
2. Composto de acordo com a reivindicação 1 em que Ar1 tem a fórmula (A) ou (B):
(A) (B) em que R5 é hidrogénio ou metilo; R6 é hidrogénio, Ci_ 4alquilo, hidroxiCi-4alquilo, aminoCi_4alquilo, fluoroCi 4 _4-alquilo, difluoroCi-4alquilo, Ci-4alcoxi ou Ci-4alcoxiCi_4alquilo e m está de acordo com a reivindicação 1.
3. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2 em que Ar2 é fenilo, tiazolilo, piridilo, triazolilo, pirimidilo, pirazinilo ou piridazinilo opcionalmente substituído nos átomos de carbono do anel por Ci-4alquilo, halogéneo, nitro, ciano ou Ci-4alcoxiCi-4alquilo.
4. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2 em que Ar2 é fenilo ou tiazolilo opcionalmente substituído nos átomos de carbono do anel por Ci_4alquilo, halogéneo, nitro, ciano ou Ci-4alcoxiCi-4alquilo.
5 em que R7 é hidrogénio ou metilo; R8-(CH2) q-R10 em que q é 1 ou 2; R10 é Ci_4alquil- sulfanilo, Ci-4alquilsulfinilo, Ci_4alquilsulfonilo, hidroxilo ou Ci-4alcoxi; R9 é hidroxilo, Ci-4alcoxi, C3-9CÍcloalquiloxi, heterocicliloxi ou heterociclilCi-4alcoxi ou tem a fórmula -NHSO2R·*··*· em que RH é fenilo; em que os grupos NH nos grupos heterocíclicos em R9 estão opcionalmente substituídos por metilo, etilo, acetilo, propionilo, fluorometilo, difluorometilo ou trifluorometilo e os átomos de carbono do anel em grupos fenilo e heteroarilo em Rll estão opcionalmente substituídos por metilo, halogéneo, Ci-4alcanoílo, nitro, ciano, Ci_4alquil-sulfinilo, Ci_4alquilsulfonilo, carbamoílo, Ci_4alquil-carbamoílo ou diCi_4alquilcarbamoílo; ou em que R2 tem a fórmula (3) de acordo com a reivindicação 1.
5. Composto de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 4 em que Ar3 é fenilo ou piridilo, sendo o anel substituído por átomos de carbono do anel por R2 e -(CH2)nR3 e em que Ar3 está ligado a Ar1C(R12)R13CH(Ar2)O- por um átomo de carbono do anel.
6. Composto de acordo com a reivindicação 5 em que, quando n é 0, o anel fenilo ou piridilo está substituído por R2 na posição 4 e -(CH2)nR3 na posição 3 ou 5 e quando n é 1 ou 2, o anel fenilo ou piridilo está substituído por R2 na posição 3 ou 5 e -(CH2)nR3 na posição 4 e em que as posições indicadas são em relação ao ponto de ligação de Ar3 a -(CH2)p-.
7. Composto de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 6 em que R2 tem a fórmula (2):
8. Composto de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 7 em que R3 é fenilo, piridilo ou tiazolilo e os átomos de carbono do anel em R3 estão opcionalmente substituídos por Ci-4alquilo, halogéneo, Ci-4alcoxi, nitro, ciano ou Ci-4alcoxiCi_4alquilo e um grupo NH do anel num grupo heteroarilo em R3 está opcionalmente substituído por Ci-4alquilo.
9. Composto de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 8 em que R11 e R12 são independentemente hidrogénio ou metilo.
10 . Composto de acordo com a reivindicação 1 que é: 6 (2S)-2 -{2 -(4-fluorofenil)-4-[2-(imidazol-l-il)-1-(4-fluorofenil)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanil-butirato de metilo; ácido (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-[2-(imidazol-l-il)-1-(4-fluorofenil)etoximetil]benzilamino}-4-metilsulfanil-butírico; (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-[2-(imidazol-l-il)-1-(4-fluorofenil)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanil-butirato de terc-butilo; ácido metil (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-[2-(imidazol-l-il) -1- (4-fluorofenil)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulf anilbutí rico; ácido (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-[2-(imidazol-l-il)-1-(tiazol-2-il)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanilbutí rico; (2S)-2-{2-(4-fluorofenetil)-5-[2-(imidazol-l-il)-1-(4-fluorofenil)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanil-butirato de metilo; ácido (2S)-2-{2-(4-fluorofenetil)-5-{2-(imidazol-l-il) -1-(4-fluorofenil)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanil-butírico; (2S)-2-{2-(4-fluorobenzil)-5-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanil butirato de metilo; ácido (2S) -2-{2-(4-fluorobenzil)-5-[1-(4-fluorofenil) -2 (imidazol-l-il) etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanil butírico; 7 (2S)-2-{2-fenil-4-[1-(4-fluorofenil)-2- (imidazol-1-il)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de metilo; ou ácido (2S)-2-{2-fenil-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-1-il)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanilbutírico; (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoximetil]benzoílamino}-2-metil-4-metil sulfanilbutirato de metilo; ácido (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoximetil]benzoílamino}-2-metil-4-metil sulfanilbutírico; N- (4-clorobenzenossulfonil)-(2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4 [1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoximetil]benzoílamino }-4-metilsulfanilbut i ramida; (2S)-2-{2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanil butirato de 2-(morfolinometil)prop-2-ilo; (2S)-2-{5-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de metilo; ácido (2S)-2-{5-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)-etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfanil butírico; (2S)-2-(5-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de terc-butilo; 8 (2S)-2-{5-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de ciclopentilo; (2S)-2-(5-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfonilbutirato de terc-butilo; ácido 2-{5-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfonilbutírico; (2S)-2-{5- [1-(tiazol-2-il)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de metilo; ácido (2S)-2-{5-[1-(tiazol-2-il)-2-(imidazol-l-il)etoxi] -2 -(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfanilbutíri-co; (2S)-2-{5-[1-(tiazol-2-il)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2- (4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de terc-butilo; (2S)-2-{5-[1- (tiazol-2-il)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2- (4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfonilbutirato de terc-butilo; ácido (2S)-2-{5- [1-(tiazol-2-il)-2-(imidazol-l-il)etoxi] -2-(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfonilbutírico; (2S) -2-{5-[1-(4-fluorofenil)-2-(2-metilimidazol-l-il)-etoxi] -2-(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfanil-butirato de metilo; ácido (2S)-2-{5- [1-(4-fluorofenil)-2-(2-metilimidazol-l-il) etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metil-sul-fanilbutírico; 9 (2 S)-2-{4-[1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2-(4-fluorofenil)benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de terc-butilo; (2S)-2-{4- [1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2-(4-fluorofeni1)benzo í1amino}-4-met i1sulfonilbut i rat o de terc-butilo; ácido 2-{4- [1-(4-fluorofenil)-2-(imidazol-l-il)etoxi]-2 (4-fluorofenil)benzoílamino}-4-meti1sulfonilbutírico; (2S)-2-{5-[2-(4-metilimidazol-l-il)-1-(tiazol-2-il)etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfanilbutirato de metilo; (2S)-2-{5- [2-(4-metilimidazol-l-il)-1-(tiazol-2-il)etoxi]-2 -(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfonilbutirato de terc-butilo; ácido (2S)-2-{5-[2-(4-metilimidazol-l-il)-1-(tiazol-2-il)-etoxi]-2-(4-fluorofenetil)benzoílamino}-4-metilsulfanil-butírico; (2S)-2-{2- (4-fluorofenetil)-5-[1-(4-fluorofenil)-2-(1-metilimidazol-5-il)etoxi]benzoílamino}-4-metilsulfanil-butirato de terc-butilo; (2S)-2-{2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(4-fluorofenil)-2- (1-metilimidazol-5-il)etoxi]benzoílamino}-4-metilsulfonil-butirato de terc-butilo; (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-[1-(4-fluorofenil)-2-(1-metil-imidazol-5-il)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanil-butirato de terc-butilo; 10 (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4- [1-(4-fluorofenil)-2- (1-metil-imidazol-5-il)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfonil-butirato de terc-butilo; ácido (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-6-[1-(4-fluorofenil)-2 (imidazol-l-il)etoxi] pirid-3-oílamino}4-metilsulfanil-butírico; (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-6-[1-(4-fluorofenil)-2-(1-metil-imidazol-5-il)etoximetil]pirid-3-oílamino}-4-metil-sulfanilbutirato de terc-butilo; (2S)-2-{3-(4-fluorofenetil)-6-[1-(4-fluorofenil)-2- (1-metilimidazol-5-il)etoxi]pirid-2-oilamino}-4-metil-sulfanilbutirato de terc-butilo; (2S)-2 — {3-(4-fluorofenetil)-6-[1-(4-fluorofenil)-2- (1-metilimidazol-5-il)etoxi]pirid-2-o£lamino}-4-metil-sulfanilbutirato de ciclopentilo; ácido (2S)-2-{2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(tiazol-2-il)-2 (l-metilimidazol-5-il)etoxi]benzoílamino}-4-meti1sulfanil-butírico; ácido (2S)-2-{2-(4-fluorofenetil)-5-[1-(tiazol-2-il)-2 (l-metilimidazol-5-il)etoxi]benzoílamino}-4-metilsulfonil-butírico; (2S)-2-{2-(4-fluorofenetil)-5 - [1-(tiazol-2-il)-2- (1-metil-imidazol-5-il)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanil-butirato de terc-butilo; (2S)-2-{2-(4-fluorofenetil)-5- [1-(tiazol-2-il)-2- (1-metil-imidazol-5-il)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfonil-butirato de terc-butilo; 11 (2S)-2-{2-(4-fluorofenil)-4-[1-(tiazol-2-il) -2-(1-metil-imidazol-5-il)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfanil-butirato de terc-butilo; ou (2S)-2 -{2 -(4-fluorofenil)-4-[1-(tiazol-2-il)-2-(1-metil-imidazol-5-il)etoximetil]benzoílamino}-4-metilsulfonil-butirato de terc-butilo; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
11. Composição farmacêutica que compreende um composto de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 10 e um veículo farmaceuticamente aceitável.
12. Composto de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 10 para utilização como medicamento.
13. Composto de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 10 para utilização na preparação de um medicamento para o tratamento de uma doença mediada pela farnesilação de ras mutante.
14. Processo para a preparação de um composto de Fórmula I ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco ou solvato, processo esse que compreende: desprotecção de um composto de fórmula (4) Ar1'^"
(CH2)p-Ar3 (4) em que Ar1 ’ é Ar1 de acordo com a reivindicação 1 ou Ar1 protegido, Ar2' é Ar2 de acordo com a reivindicação 1 ou Ar2 protegido e Ar3' é Ar3 de acordo com a reivindicação 12 1 ou Ar3 protegido; em que está presente pelo menos um grupo protector; e em seguida se necessário: (i) formação de um sal farmaceuticamente aceitável, (ii) formação de um pró-fãrmaco, (iii) formação de um solvato.
15. Processo para a preparação de um composto de Fórmula I ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco ou solvato, processo esse que compreende: (i) reacção de um composto de fórmula (5) com um composto de fórmula (6)
Ar3' (CH2) pL (6 ou (ii) conversão de um valor de R9 em R2 noutro valor de R9; ou (iii) reacção de um composto em que R2 em Ar3' é carboxilo com um composto de fórmula (7):
O R21 (7 em que p, R7 e R8 estão de acordo com a reivindicação 1, Ar1', Ar2', Ar3', R7 e R8 estão de acordo com a reivindicação 15, R21 é R9 de acordo com a reivindicação 1 13 ou um grupo protector de carboxilo e quando p é 1, L é um grupo de saída, e quando p é 0, L é hidroxilo; e em seguida se necessário: (i) remoção de quaisquer grupos protectores; (ii) formação de um seu sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco ou solvato. # # Lisboa, 05 de Novembro de 2001
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