PT100353A - Derivados de acido tiol-carboxiilico, sua preparacao e uso - Google Patents

Description

73 786 RJS/AW/P30030 -3-

MEMÓRIA DESCRITIVA 0 presente invento refere-se a novos derivados de ácido tiol-carboxílico, a processos para a sua preparação e ao seu uso em medicina. Em particular, o presente invento refere-se ao seu uso como inibidores de enzimas da família colagenase das metaloproteases neutras, para o tratamento de doenças artríticas e de outras doenças. A família das enzimas colagenase de mamífero compreende várias proteases, exemplificadas pela própria colagenase intersticial (tipo I), as estromalisinas (também conhecidas como proteoglicanases ou transinas), gelatinases de fibroblasto e de leucócitos polimorfonucleares (também conhecidas como colagen-IV-ases), e "pump-l" (metaloprotease 1 putativa, metaloprotease uterina) [Goldberg et al-, J. Biol. Chem. 2610, 6600, 1986; Whithman et al., Biochem J. 240, 913, 1986; Breathnach et al., Nucleic Acids Res. , 15, 1139, 1987; Muller et al., Biochem J. 253, 187, 1988; Collier et al-, J. Biol. Chem. 263, 6579, 1988; Murphy et al., Biochem J. 258, 463, 1989; Quantin et al., Biochem. (N.Y.), 28, 5327, 1989; Birkedal-Hansen, J. Oral Pathol., 17, 445, 1988; P. Basset et al., Nature 348, 699, 1990]. A pertença à família colagenase das proteases é evidente se se possuir um número de propriedades muito características e verificáveis experimentalmente tal como descritas na EPA 401963 (Beecham Group), as quais podem ser adoptadas como critério para a colocação nesta família de enzimas.

Como exemplo particular do valor terapêutico dos inibidores de enzimas da família das colagenases, tal como são apresentados no presente invento, as doenças artríticas crónicas que conduzem a uma perda extensiva dos componentes colagénio, proteoglicano e elastina da cartilagem, ossos e tendões das articulações deveriam ser tratáveis com inibidores das colagenases, proteoglicanases (estromalisinas) e gelatinases que são geralmente consideradas como as principais enzimas envolvidas. 73 786 RJS/AW/P30030 c

... ·& -' μ -4-

Estas enzimas têm sido detectadas em extractos de tecido sinuvial e de cartilagem e têm também sido extensivamente estudadas em culturas de tecido de uma vasta gama de tecidos conjuntivos. Para além do controlo da biossíntese, da secreção e da activação das enzimas, a produção endógena de inibidores tais como o Inibidores de Tecido de Metaloproteinases e macroglobulina alfa-2 é considerada a regulação natural mais importante destas enzimas em estados normais e de doença. Um desequilíbrio entre os níveis locais das enzimas proteolíticas e os dos seus inibidores naturais permitirá que ocorra uma destruição dos componentes do tecido conjuntivo.

Sendo os compostos, descritos no presente invento, inibidores, sintéticos e de baixo peso molecular, desta família de enzimas, oferecem uma via terapêuticamente útil pela qual pode ser restaurado um equilíbrio mais normal ou não patológico entre a inibição e a actividade enzímica: eles actuam assim para complementar e suplementar os inibidores endógenos das enzimas. De facto, em virtude de estas enzimas actuarem, geralmente, apenas dentro de ambientes pericelulares restritos, antes de serem inactivadas por inibidores que circulam no sangue e que estão presentes na maioria dos exsudados inflamatórios, os inibidores de baixo peso molecular revelados aqui podem ser mais eficazes do que os inibidores proteicos endógenos que são excluídos, pelo seu tamanho, das regiões localizadas de destruição do tecido conjuntivo. A EPA 273689 (Beecham Group) e a US 4235885 (Squibb) revelam derivados de ácido tiol-carboxílico possuindo actividade como inibidores da colagenase e sendo úteis no tratamento de artrite reumatóide e de doenças afins, nas quais a actividade colagenolítica é um factor contributivo.

Foi agora inventada uma nova classe de derivados de ácido tiol-carboxílico que são inibidores da colagenase e que têm, assim, potencial utilidade no tratamento de doenças em que esteja implicada actividade dos membros da família das colagenases de metaloproteases neutras. 73 786 RJS/AW/P30030

-5- ,'V·'. Λ* .·'

De acordo com o presente invento proporciona-se um composto de fórmula geral (I) ou um seu sal, solvato ou hidrato:

(I) na qual, R*l é -OH; alcoxi; ariloxi ou aralquiloxi? -NRgRy, onde cada um de Rg e Ry é, independentemente do outro, hidrogénio ou alquilo, ou Rg e Ry, em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados, formam um anel de 5, 6 ou 7 membros com um átomo de oxigénio, enxofre ou azoto opcionalmente substituído, adicional, no anel; ou um grupo:

O

II -nh-ch-c-r9

I R8 onde R8 é hidrogénio; alquilo, opcionalmente substituído por -OH, alcoxi, -NRgRy, guanidina, -C02H, CONH2# SH ou S-alquilo; ou -CH2-Ar onde Ar é arilo opcionalmente substituído; e R9 é alcoxi; OH; ou -NRgR7;

O O

II II R2 é hidrogénio; ou acilo, tal como -C-alquilo ou -C-Z, onde Z é arilo opcionalmente substituído; R3 é alquilo C3_g,· R4 é -(OT2)nNR10Ri:L, -(CH2)nNHCOR12, -(CH2)nNR13C(=NR14)NR10R11, -(CH2)nCONH(CH2)qNR10R11 ou -(CH2)n-R15 onde n é um número inteiro de 1 a 6 e q é um número inteiro de 2 a 4 e cada um de R10 e R1X é, independentemente do outro, hidrogénio ou alquilo, ou R^q e Rn/ em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados, formam um anel de 5, 6 ou 7 membros com um átomo de oxigénio ou enxofre opcional ou um segundo átomo de azoto, opcionalmente substituído, no anel, R12 é alquilo, alcoxi, aralquiloxi ou -(CH2 )mNR10Rn / onde m é 1 ou 2, R13 é 73 786 RJS/AW/P30030 -6-

hidrogénio ou alquilo, R14 é hidrogénio ou alquilo, ou R14 e R10, em conjunto com os átomos de azoto aos quais estão ligados, formam um anel de 5, 6 ou 7 membros, e R15 é um anel piperidilo opcionalmente substituído? e R5 é hidrogénio, alquilo, -CH2“(CH2)nOR1g, -CH2“(CH2)n“OCOR1y ou

R

0 onde n é um número inteiro de 1 a 6, Rjg, £3.7 e R18 s^o, independentemente uns dos outros, hidrogénio ou alquiloC^.g e Rig é hidroxi, -O-alquiloC^.g ou NR^qR^ onde R10 e R-^ são definidos como para R4. A não ser que se indique em contrário, cada grupo alquilo ou alcoxi é um grupo C-^g, mais preferivelmente 01-6 e pode ser uma cadeia linear ou ramificada. Uma porção arilo é preferivelmente fenilo.

Os substituintes opcionais para grupos arilo, fenilo e heteroarilo podem ser seleccionados de entre -OH, alquilo alcoxi C^_g e halogéneo.

Exemplos de anéis heterocíclicos formados pelos grupos R10 e R^ incluem anéis pirrolidina, piperidina, piperazina e morfolina.

Exemplos de Rj^ são hidroxi; alcoxiC1_6, tal como metoxi, etoxi, iso-propoxi ou t-butoxi? benziloxi; e -NRgRy em que Rg é hidrogénio e R7 é hidrogénio ou alquilo c1-8, tal como metilo ou etilo, ou -NRgRy pode ser N#-metil-N-piperazinilo ou N-morf olinilo. Outros exemplos de são -NH-CH2COOH, -NH-CH2-CONH2, -NH-CH2-C02Et, -NH-CH2-C02-tBU, -NH-CH-C02H e -NH-CH-COg-tBu.

I I iBu iBu R± é preferivelmente hidroxi, alcoxiC1_4, especialmente 73 786 RJS/AW/P30030 -7

metoxi ou iso-propoxi, ou amino. Mais preferivelmente é iso-propoxi.

O

II

Quando R2 é -C-Z, Z é preferivelmente um grupo fenilo opcionalmente substituído.

Exemplos preferidos de R2 são hidrogénio, acetilo e benzoílo. Mais preferivelmente R2 é hidrogénio ou acetilo. R3 é preferivelmente um grupo alquilo C4, tal como n-butilo, iso-butilo ou sec-butilo. Mais preferivelmente R3 é iso-butilo.

Preferivelmente R4 é -(CH2)nNR10R11/ onde R10 e Ri:l são hidrogénio ou metilo, -(CH2)nNHCOR12, onde R12 ® aralquiloxi ou “(ch2 )mNR10Rll > onde m é 1 e R10 e Rn são hidrogénio, -(CH2)nCONH(CH2)gNR10R11 onde q é 2 e R10 e Ri:l, em conjunto com 0 átomo de azoto ao qual estão ligados, formam um anel de 5, 6 ou 7 membros, ~(CHj) 11^13^(=®ΐ4)^RioRn, onde R]_q, rh# Ri3 ® R^4 são todos hidrogénio, -(CH2)nNR13C(=NR14)NR1QR11, onde R10 e R14, em conjunto com os átomos de azoto aos quais estão ligados, formam um grupo 2-imidazolinilo opcionalmente substituído, -(CH2)n-R15 onde R15 é piperidilo opcionalmente substituído e, em cada uma das definições anteriores, n é um número inteiro de 1 a 4.

Mais preferivelmente R4 é -(CH2)4NH2 ou -(CH2)4NHCOR^2 onde R12 é benziloxi.

Valores preferidos para R5 são hidrogénio, metilo ou hidroxietilo. Mais preferivelmente R5 é metilo.

Os compostos de fórmula (I) podem formar sais com bases, p. exp. hidróxido de sódio. Quando está presente um átomo de azoto básico, os compostos de fórmula (I) podem formar sais de adição de ácidos, p. exp. com ácido clorídrico. Estes compostos fazem parte do presente invento. 73 786 RJS/AW/P30030

c

-8-

Quando os compostos de fórmula (I), ou os seus sais, formam solvatos tais como hidratos, estes formam também um aspecto do presente invento.

Os compostos de fórmula (I) têm pelo menos um centro assimétrico e portanto existem em mais de uma forma estereo-isomérica. O invento estende-se a todas estas formas e às suas misturas, incluindo racematos, e misturas diastereoisoméricas.

Os isómeros preferidos são os que têm a configuração (S) no centro quiral marcado com um asterisco na fórmula (I).

Os compostos de fórmula (I) ou os seus sais, solvatos ou hidratos estão preferivelmente na forma farmaceuticamente aceitável ou substancialmente pura. Por forma farmaceuticamente aceitável entende-se, inter alia, com um nível de pureza farmaceuticamente aceitável excluindo aditivos farmacêuticos normais tais como diluentes e portadores, e não incluindo material considerado tóxico a níveis de dosagem normal. 0 presente invento proporciona os compostos de fórmula (I) ou os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis para uso como agentes terapêuticos activos, particularmente como agentes para o tratamento de desordens musculo-esqueléticas resultantes da actividade colagenolítica, particularmente doenças artríticas, e na remodelação de tecido, e também para a quimioterapia sistémica do cancro.

O SL O R4 O presente invento também proporciona um processo para a preparação de um composto de fórmula (I), na qual R2 é hidrogénio, processo este que compreende clivar um grupo L de um composto de fórmula (II) na qual L é que é um grupo protector de enxofre, 73 786 RJS/AW/P30030

9

convencional, ou L2 que é um grupo R-S- onde R é qualquer resíduo orgânico tal que o grupo R-S- proporcione uma ligação dissufeto clivável, e R-^ r3, r4 e R5 são definidos como para a fórmula (I).

Tipicamente, um grupo protector L é um grupo benzilo substituído, tal como alcoxibenzilo, p. exp. 4-metoxibenzilo, ou um grupo aril acilo ou alifático, tal como acetilo ou benzoílo. Quando L-l é acilo , ele é evidentemente idêntico a R2, de modo que estes compostos de fórmula (II) são também eles compostos do invento. Quando L é R-S-, então tipicamente o composto de fórmula (II) é um dímero do composto de fórmula (I) em que R2 é hidrogénio.

Quando L é / e é um grupo benzilo substituído protector de enxofre, tal como 4-metoxibenzilo, então pode ser removido por tratamento com acetato de mercúrio em ácido trifluoroacético contendo anisolo, seguido por reacção com sulfeto de hidrogénio em dimetilformamida, num procedimento análogo ao descrito em Chem. Pharm. Buli., 1978, 26, 1576.

Quando é um grupo acilo, ele pode ser removido por tratamento com uma base, por exemplo amoníaco aquoso ou hidróxido de sódio aquoso diluído, ou por tratamento com um ácido, por exemplo ácido clorídrico metanólico.

Quando L é L2, o composto dimerizado pode ser cindido na ligação dissulfeto por tratamento com zinco e ácido clorídrico ou por passagem de sulfeto de hidrogénio através da solução.

Podem também usar-se outros métodos convencionais para remover grupos protectores de enxofre ou para clivar pontes de dissulfeto.

Os compostos de fórmula (II) em que L é L-l podem ser preparados por tratamento de um composto de fórmula (III): (segue fórmula) 73 786 RJS/AW/P30030

-10- Ρ Ο R

NHRS Ο Ο R4 (III) na qual Rlf R3, R4 e R5 são definidos como para a fórmula (I), com um tiol de fórmula (IV): I^-SH (IV) na qual definido como para a fórmula (II). Quando L-l é R2, os compostos de fórmula (II) assim produzidos são compostos do invento.

Os compostos de fórmula (II) também podem ser preparados por tratamento de um composto de fórmula (V):

0 SL 0 (V) na qual L, R«l e R3 são definidos como para a fórmula (II), com um composto de fórmula (VI): n

(VI) na qual R4 e R5 são definidos como para a fórmula (I). A reacção é de preferência realizada na presença de um agente de acoplamento, tal como l^-carbonildiimidazol ou hidrocloreto de l-etil-3-[3-(dimetilamino)propil]carbodiimida na presença de 1-hidroxibenzotriazolo.

Os compostos de fórmula (II) em que L é L2 também podem ser preparados por acoplamento oxidativo, com iodo ou oxigénio, de um composto de fórmula (I) em que R2 é hidrogénio. 73 786 RJS/AW/P30030

-11-

Os compostos de fórmula (II) podem ser convertidos noutros compostos de fórmula (II) mantendo o mesmo grupo L, grupo este que pode por sua vez ser clivado para formar compostos do invento em que R2 é hidrogénio.

Por exemplo, os compostos de fórmula (II) em que R^ é hidroxi podem ser preparados sob condições ácidas por hidrólise de compostos em que é alcoxi, ariloxi ou aralquiloxi ou por hidrogenólise de compostos em que R2 é benziloxi ou benziloxi substituído na presença de um catalisador tal como negro de paládio.

Os compostos de fórmula (I) em que R^ é alcoxi podem ser preparados a partir de compostos em que R-l é hidroxi por esterificação. Por exemplo, por tratamento com um álcool apropriado na presença de um catalisador de ácido tal como BF3-Et20 (Synthesis, 316, 1972).

Os compostos de fórmula (II) em que R-l é -NR6R7 podem ser preparados a partir de compostos em que é hidroxi por tratamento destes últimos compostos com uma amina de fórmula NHRgRy na presença de um agente de acoplamento, tal como N,N-di-ciclo-hexil-carbodiimida ou l-etil-3-[3-(dimetilami-no)propil]-carbodiimida na presença de 1-hidroxibenzotriazolo ou cloroformato de etilo.

Os compostos de fórmula (II) em que R-]_ é -NH-CH(Rg)-COR9 podem ser analogamente preparados a partir de compostos em que R*L é OH por tratamento com derivados de amina de fórmula NH2CH(R8)CORg em que R9 é um grupo alcoxi ou amina, seguido por hidrólise para dar um grupo Rg hidroxi, se desejado.

Adicionalmente, os compostos do invento em que R2 é acilo podem ser convertidos noutros compostos do invento com clivagem concomitante do grupo acilo, para dar compostos de fórmula (I) em que R2 é hidrogénio.

Por exemplo, os compostos de fórmula (I) em que R«l é -OH e 73 786 RJS/AW/P30030 12

R2 é hidrogénio podem ser preparados por hidrólise de compostos em que é alcoxi, ariloxi ou aralquiloxi e R2 é acilo, sob condições básicas, tal como tratamento com hidróxido de sódio diluído.

Os compostos intermediários de fórmula (III) podem ser preparados por tratamento de um composto de fórmula (VII):

OH 0 (VII) na qual R-l e R3 são definidos como para a fórmula (I), com um composto de fórmula (VI) definido como acima.

Os tióis de fórmula (IV) são compostos conhecidos.

Os compostos intermediários de fórmula (V) podem ser preparados por tratamento de um composto de fórmula (VII), definido como acima, com um tiol de fórmula (IV).

Pode ser necessário ou conveniente proteger a função carboxilo de compostos de fórmula (VII), por exemplo por esterificação, antes do tratamento com o tiol de fórmula (IV) e subsequentemente remover o grupo protector sob condições ácidas. A preparação de alguns compostos de fórmula (VII) e (V) foi descrita na EPA 273689 (Beecham Group).

Os compostos de fórmula (VI) podem ser preparados a partir de derivados de aminoácidos, muitos dos quais estão disponíveis no comércio, por reacções de alquilação ou de acoplamento convencionais.

Assim, um composto de fórmula (VI) pode ser preparado a partir de um composto de fórmula (VIII):

73 786 RJS/AW/P30030 -13- Υ

NHRS Ο (VIII) na qual Q é -(CH2)n-Z/ -(CH2)nNH2, -(CH2)nNR13C(=NH)NH2, -(CH2)nNR-L3C(=NH)N02 ou -(CH2)nC02H, e n, Rg e R^3 são definidos como para a fórmula (I), Z é piridilo opcionalmente substituído e Y é um grupo protector de azoto, por conversão de Q em R4 e remoção do grupo protector de azoto, Y. Será de notar que a conversão de Q em R4 pode ser efectuada muito facilmente numa etapa posterior, por exemplo a conversão de (CH2)nNHC(=NH)NHN02 em (CH2)nNHC(=NH)NH2 por hidrogenação.

Um composto de fórmula (VI) em que R4 é -(CH2)nNR10Rii pode ser preparado por alquilação de um composto de fórmula (VIII) em que Q é -(CH2)nNH2 usando procedimentos de alquilação Standard.

Um composto de fórmula (VI) em que R4 é -(CH2)nNHCOR12 pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (VIII) em que Q é -(CH2)nNH2 com um ácido carboxílico R^2C02H, na presença de um agente de acoplamento.

Um composto de fórmula (VI) em que R4 é -(CH2)nCONH(CH2)gR10R11 pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (VIII) em que Q é -(CH2)nC02H com um derivado de amina, NH2(CH2)gNR10Rn na presença de um agente de acoplamento, e em seguida se R10 ou R·^ é hidrogénio, opcionalmente protecção do átomo de azoto básico.

Um composto de fórmula (VI) em que R4 é -(CH2)nNR13C(=NR14)NR10Ri;L pode ser preparado a partir de um composto de fórmula (VIII) em que Q é -(CH2)nNR13c(=NH)NH2 ou -(CH2)nNHR13 por N-alquilação e depois, opcionalmente, protecção dos átomos de azoto básicos.

Um composto de fórmula (VI) em que R4 é -(CH2)n-R15 em que R^5 é um grupo piperidilo opcionalmente substituído pode ser 73 786 RJS/AW/P30030 -14

C

preparado por hidrogenação de um composto de fórmula (VIII) em que Q é -(CH2)n-Z e depois, opcionalmente, protecção do átomo de azoto de piperidilo.

Grupos protectores de azoto adequados para Y e para qualquer função amino primária em R4 incluem grupos t-butoxicarbonilo (BOC) e benziloxicarbonilo. Quando R4 é -(CH2)n-R15 em que R15 é piperidilo, os grupos protectores de azoto adequados incluem grupos benziloxicarbonilo.

Os grupos protectores de azoto podem ser removidos por métodos Standard. Um grupo t-butoxicarbonilo pode ser removido por tratamento com ácido trifluoroacético a temperatura reduzida. Os grupos benziloxicarbonilo podem ser removidos por hidrogenação catalítica.

Um composto de fórmula (VIII) pode ser preparado a partir de um composto de fórmula (IX):

Y

NH

0 (IX) na qual Q' é Q sob a forma protegida ou Q' é um precursor de Q e Y e Q são definidos como para a fórmula (VIII). A reacção pode ser realizada por reacção com uma amina, NH2R5, usando procedimentos Standard para formar uma amida a partir de um ácido carboxílico e uma amina, por exemplo usando um agente de acoplamento tal como l,l#-carbonildiimidazol ou l-etil-3-[3-(dimetilamino)propil]carbodiimida na presença de 1-hidroxibenzotriazolo, ou cloroformato de etilo.

Os compostos de fórmula (IX) são compostos conhecidos ou podem ser preparados a partir de materiais de partida conhecidos, por métodos Standard.

73 786 RJS/AW/P30030

Por exemplo, o composto de fórmula (IX) em que Q' é (CH2) 4NHCO2CH2PI1 e Y é t-butoxicarbonilo é derivado de lisina e está disponível no comércio. 0 composto de fórmula (IX) em que Q' é CH2CO2CH2PI1 e Y é t--butoxicarbonilo é derivado de ácido aspártico e está disponível no comércio.

Quando puderem ser obtidos, os sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos de fórmula (I) podem ser formados convencionalmente por reacção com o ácido ou base apropriado. Os solvatos podem ser formados por cristalização no solvente apropriado.

Como se mencionou anteriormente, os compostos de fórmula (I) existem em mais do que uma forma diastereoisomérica. Quando os processos do invento produzem suas misturas, os isómeros individuais podem ser separados um do outro por cromatografia, p. exp. por cromatografia em coluna ou por HPLC.

Alternativamente, os compostos diastereoisoméricos separados de fórmula (I) podem ser obtidos usando materiais de partida estereo-isomericamente puros ou separando os isómeros desejados dos intermediários em qualquer etapa do processo sintético global, e convertendo estes intermediários em compostos de fórmula (I). 0 presente invento proporciona ainda uma composição farmacêutica compreendendo um composto de fórmula (I), ou um seu sal, solvato ou hidrato farmaceuticamente aceitáveis, e um portador farmaceuticamente aceitável. A composição deste invento é útil no tratamento de reumatismo e de artrite e no tratamento de outros estados colagenolíticos. A composição do invento que pode ser preparada por mistura, pode conter um diluente, ligante, carga, desintegrante, agente 73 786 RJS/AW/P30030

-16- aromatizante, agente colorante, lubrificante ou conservante, de maneira convencional. Estes excipientes convencionais podem ser empregues de maneira convencional, por exemplo na preparação de composições de inibidores de enzimas peptídicas afins, tais como o inibidor de ACE captopril. A composição do invento pode estar adaptada para administração oral, tópica, percutânea, rectal ou parentérica -intravenosa, intramuscular, sub-cutânea, intradérmica ou intra-articular, mas prefere-se a administração oral. A via preferida para administração dependerá da desordem para a qual o tratamento é necessário, e a composição está preferivelmente sob a forma de dosagem unitária ou sob uma forma que um paciente humano possa administrar a si próprio numa dosagem simples. A gama de dosagem adequada para os compostos do invento pode variar de composto para composto e pode depender do estado a ser tratado. Ela depende também, inter alia. da relação entre a potência e a absorbabilidade e do modo de administração escolhido.

As composições podem, por exemplo, estar sob a forma de comprimidos, cápsulas, saquetas, frascos, pós, grânulos, pastilhas, pós reconstituíveis ou preparações líquidas, por exemplo soluções ou suspensões, ou supositórios.

As composições, por exemplo as adequadas para administração oral, podem conter excipientes convencionais tais como agentes ligantes, por exemplo xarope, goma arábica, gelatina, sorbitol, tragacanta ou polivinilpirrolidona; cargas, por exemplo, lactose, açúcar, amido de milho, fosfato de cálcio, sorbitol ou glicina? lubrificantes para formação de comprimidos, por exemplo estearato de magnésio; desintegrantes, por exemplo amido, polivinilpirrolidona, glicolato de amido de sódio ou celulose microcristalina; ou agentes molhantes farmaceuticamente aceitáveis tais como sulfato de lauril e sódio.

As composições sólidas podem ser obtidas por métodos 73 786 RJS/AW/P30030 -17- convencionais de mistura, enchimento, formação de comprimidos ou semelhantes. Podem usar-se repetidamente operações de mistura para distribuir o ingrediente activo pelas composições que empregam grandes quantidades de cargas. Quando a composição está na forma de um comprimido, pó ou pastilha, pode usar-se qualquer portador adequado para formular composições farmacêuticas sólidas, sendo seus exemplos o estearato de magnésio, amido, glucose, lactose, sacarose, farinha de arroz e giz. Os comprimidos podem ser revestidos de acordo com métodos bem conhecidos na prática farmacêutica normal, em particular com um revestimento entérico. A composição também pode estar na forma de uma cápsula ingerível, por exemplo de gelatina, contendo o composto, se desejado com um portador ou outros excipientes. Por exemplo, uma cápsula de gelatina dura contendo a quantidade necessária de um composto do invento na forma de um pó ou granulado em mistura íntima com um lubrificante, tal como estearato de magnésio, uma carga, tal como celulose microcristalina, e um desintegrante, tal como glicolato de amido e sódio.

As composições para administração oral como líquidos podem estar na forma de, por exemplo, emulsões, xaropes ou elixires, ou podem ser apresentadas sob a forma de produto seco para reconstituição com água ou outro veículo adequado, antes da utilização. Estas composições líquidas podem conter aditivos convencionais tais como agentes de suspensão, por exemplo sorbitol, xarope, metil celulose, gelatina, hidroxietil celulose, carboximetil celulose, gel de estearato de alumínio, gorduras edíveis hidrogenadas? agentes emulsionantes, por exemplo lecitina, monooleato de sorbitano ou goma arábica? veículos aquosos ou não aquosos, que incluem óleos edíveis, por exemplo óleo de amêndoa, óleo de coco fraccionado, ésteres oleosos, por exemplo ésteres de glicerina ou propilenoglicol, ou álcool etílico, glicerina, água ou solução salina normal; conservantes, por exemplo p-hidroxibenzoato de metilo ou propilo ou ácido sórbico; e se desjado agentes aromatizantes ou corantes convencionais. 73 786 RJS/AW/P30030 -18-

Os compostos deste invento também podem ser administrados por uma via não oral. De acordo com o procedimento farmacêutico de rotina, as composições podem ser formuladas, por exemplo, para administração rectal em supositório ou para administração parentérica numa forma injectável. Para injecção, os compostos do invento podem apresentar-se numa solução, suspensão ou emulsão aquosa ou não aquosa, num líquido farmaceuticamente aceitável, p. exp. água estéril isenta de pirogénios ou um óleo parentericamente aceitável ou uma mistura de líquidos, que pode conter agentes bacteriostáticos, anti-oxidantes ou outros conservantes, tampões ou solutos para tomar a solução isotónica com o sangue, agentes de espessarnento, agentes de suspensão ou outros aditivos farmaceuticamente aceitáveis. Estas formas serão apresentadas sob a forma de dose unitária estéril, tal como âmpolas ou dispositivos de injecção descartáveis, ou sob formas multi-dose, tal como um frasco do qual pode ser retirada a dose apropriada, ou sob uma forma sólida ou concentrado que podem ser usados para preparar uma formulação injectável.

Para administração tópica e percutânea, as preparações também podem ser apresentadas sob a forma de um unguento, creme, loção, gel, pulverização, aerosol, lavagem, ou tintura ou emplastro para a pele.

Uma dose unitária para doenças inflamatórias conterá geralmente de 10 a 1000 mg e, de preferência conterá 10 a 500 mg, em particular 10, 50, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450 ou 500 mg. A composição pode ser administrada uma ou mais vezes ao dia, por exemplo 2, 3 ou 4 vezes ao dia , de modo que a dose diária total para um adulto de 70 kg estará normalmente na gama de 10 a 3000 mg. Uma tal dose corresponde a aproximadamente 0,15 a 50 mg/kg por dia. Alternativamente, em particular para injecção, a dose unitária conterá, adequadamente, de 2 a 20 mg de um composto do invento e será administrado várias vezes, se desejado, para perfazer a dose diária desejada. 0 presente invento proporciona adicionalmente um método para tratar um estado colagenolítico tal como reumatismo e/ou 73 786 RJS/AW/P30030 / 19

estados artríticos ou cancro, ou outras doenças nas quais a quebra de componentes de tecido conjuntivo, mediada por enzima, desempenha um papel em mamíferos, tal como seres humanos, o qual compreende administrar, ao mamífero, uma quantidade eficaz de vim composto de fórmula (I) ou de um seu sal, solvato ou hidrato farmaceuticamente aceitável. 0 presente invento também proporciona o uso de vim composto de fórmula (I) ou de um seu sal, solvato ou hidrato farmaceuticamente aceitável para o fabrico de um medicamento para uso como substância terapêutica activa, particularmente no tratamento de estados colagenolíticos tais como reumatismo, cancro, desordens dos ossos, doenças de pele, doenças periodontais ou ulceração córnea, em mamíferos.

As Descrições e Exemplos que se seguem ilustram a preparação dos compostos do invento.

Descrição 1 Ácido 4-isopropoxicarbonil-2- (2-metilpropil) but-2-enóico ( Dl)

Aqueceu-se sob refluxo, durante 8 h, uma solução de anidrido 2-(2-metilpropil)pent-2-enodicarboxílico (preparado como na EP-A-273689) em 2-propanol (100 lm). O solvente foi evaporado in vacuo para dar o composto do título sob a forma de um óleo castanho (31,7 g, 98%). 5(CDC13): 0,88 (6H, d, J=7Hz), 1,25 (6H, d, J=7Hz), 1,80 (1H, septupleto, J=7Hz), 2,18 (2H, d, J=7Hz), 3,60 (2H, d, J=7Hz), 5,05 (1H, septupleto, J=7Hz) e 6,30 (1H, t, J=7Hz). -20- /3 /V * / 73 786 // RJS/AW/P30030 Descrição 2 l^-terc-Butoxicarbonil-N^-benziloxicarbonil-(S)-lisina metilamida (D2)

Arrefeceu-se em gelo uma solução de Na-terc-butoxicarbonil-Nè-benziloxicarbonil-(S)-lisina (50 g , 0,13 mol) em diclorometano (500 ml) e tratou-se com l,l,-carbonildiimidazol (22 g, 0,136 mol). Passados 30 min, a mistura foi aquecida até à temperatura ambiente durante 15 min, e em seguida de novo arrefecida em gelo. Adicionou-se, gota a gota, uma solução de metilamina (4,5 g, 0,145 mol) em diclorometano (100 ml) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi lavada sucessivamente com ácido clorídrico 5N, água, carbonato de sódio a 10%, água e salmoura, e em seguida foi seca (Na2S04) e evaporada para dar o composto do título sob a forma de um sólido branco (37 g, 72%). δ(CDC13): 1,3-1,85 (6H, m), 1,42 (9H, S), 2,78 (3H, d), 3,19 (2H, q), 4,05 (1H, m), 4,88 (1H, m), 5,08 (2H, s), 5,15 (1H, m), 6,2 (1H, m), 7,35 (5H, m).

Descrição 3

Bistrifluoroacetato de -benziloxicarbonil-(S)-lisina metilami- da (D3)

Tratou-se uma solução, gelada, da amida (D2) (31,7 g, 81 mmol) em diclorometano (150 ml) com ácido trifluoroacético (150 ml). Depois de se agitar a 0-5° durante lh e em seguida à temperatura ambiente durante 3h, a solução foi evaporada in vacuo e azeotropada com tolueno, para dar o produto em bruto (45,5 g) que foi usado no passo seguinte sem mais purificação. ê. f~·

73 786 RJS/AW/P30030 -21-

Descrição 4 Ésteres isopropílicos de ácidos 4-[[5-(benziloxicarbonilamino)--1- ( S) - ( metilaminocarbonil) pentil ] aminocarbonil ] -6-metil-hept-2 ( e 3)-enóicos

Arrefeceu-se em gelo uma solução de ácido 4-isopropoxicarbonil-2-(2-metilpropil)but-2-enóico (Dl) (17/6 g, 78 mmol) em acetonitrilo (250 ml) e em seguida tratou-se com l,l'-carbonildiimidazol (13/9 g, 85 mmol). A solução foi agitada em gelo durante 30 min, à temperatura ambiente durante 15 min, e em seguida de novo arrefecida em gelo. Adicionou-se à solução anterior uma solução do derivado de lisina (D3) (45,5 g, 0,81 mmol) e diisopropiletilamina (33 ml, 190 mmol) em acetonitrilo (150 ml). A mistura foi agitada com arrefecimento em gelo durante lh e em seguida à temperatura ambiente durante 18h. A mistura foi filtrada e evaporada in vacuo deixando um óleo que foi dissolvido em acetato de etilo (500 ml) e foi lavada sucessivamente com carbonato de sódio a 10%, água, ácido cítrico a 10% e salmoura, e em seguida foi seca (Na2SO^) e evaporada in vacuo deixando um óleo vermelho-escuro. A cromatografia em sílica-gel (700 g), eluindo com 5% de isopropanol/clorofórmio deu o produto sob a forma de um óleo gomoso (16,9 g, 43%). <5(CDC13): 0,88 (6H, m), 1,22 (6H, m), 1,3-2,1 (8H, m), 2,20 (1H, d, J=7HZ), 2,36 (0,25H, d, J=7Hz), 2,78 (3H, m), 3,15 (4H, m), 4,45 (1H, m), 5,03 (2H, m), 5,08 (2H, s), 5,84 (0,25H, d, J=11HZ), 5,90 (0,25H, d, J=llHz), 6,40 (0,5H, t, J=7Hz), 6,65 (2H, m), 6,83 (0,25H, dd, J=3,8Hz), 6,9 (0,25H, dd, J=3,8Hz) e 7,33 (5H, S). -22- 73 786 RJS/AW/P30030 C·'

Ga

Exemplo l Ácido 3-acetilmercapto-4-[ [5-(benziloxicarbonilamino)-l-(S)-- ( metilaminocarbonil) pentil ] aminocarbonil ] —6-metil-lieptanóico , éster isopropílico (El)

Uma solução das amidas insaturadas (D4) (16,9 g, 33,6 mmol) em ácido tiolacético (100 ml) foi deixada de lado durante 23 dias, e em seguida o solvente foi evaporado e o resíduo foi azeotropado com tolueno. A cromatografia em coluna do produto em bruto, em sílica (750 g), eluindo primeiro com éter, e em seguida com 20% até 50% de acetato de etilo/éter, deu uma mistura de isómeros A e B (6,1 g) do composto do título.

Alternativamente, uma solução do mercaptano (E2) (1,8 g, 3,3 mmol) em clorofórmio gelado, purgado com azoto (100 ml), foi tratada com anidrido acético (1,5 ml, 15,9 mmol) e N--metilmorfolina (1,8 ml, 16,3 mmol). A reacção foi agitada em gelo durante lh e em seguida à temperatura ambiente durante a noite. A solução foi lavada com ácido cítrico a 10% e salmoura, e em seguida foi seca (Na2S04) e evaporada in vacuo para dar o composto do título sob a forma de uma espuma (1,8 g, 93%). <S(CDC13): 0,85 (6H, m), 1,20 (6H, m), 1,2-2,0 (9H, m), 2,3 (2H, S), 2,33 (1H, s), 2,5-2,9 (3H, m), 2,78 (3H, m), 3,2 (2H, m), 4,0 (1H, m), 4,35 (1H, m), 4,9-5,1 (2H, m), 5,08 (2H, S), 6,25 (1H, m), 6,43 (1H, m) e 7,35 (5H, s). 73 786

RJS/AW/P30030 -23-

Exemplo 2

Ácido

propílico (E2) h3c^° ch3 ch3

o

Uma solução de ísomeros A e B d.o composto acetilmercapto (El) (6,1 g, 10,5 mmol) em isopropanol (500 ml) foi purgada com azoto durante 15 min, em seguida foi arrefecida em gelo e tratada com amoníaco aquoso a 35% (50 ml). Depois de se agitar em gelo durante 1 h e à temperatura ambiente durante 2h, o solvente foi evaporado e o resíduo foi azeotropado com tolueno e em seguida éter para se obter uma espuma. A trituração com éter deu um sólido (3,02 g) e, por evaporação do éter, um óleo (3,28 g). A cromatografia em coluna do sólido, em sílica (íoo g), eluindo com acetato de etilo, e em seguida a trituração do produto com hexano deu uma mistura 3:1 de isómeros A e B do composto do título sob a forma de um pó branco (2,20 g), p.f. 87-89 °C.

Encontrado: C, 60,16; H, 8,10; N, 7,76. C27H43N306S requer: C, 60,31; H, 8,06; N, 7,81%. 5(CDC13): 0,85 (6H, m), 1,23 (6H, d, J=7Hz), 1,3-2,0 (9H, m), 1,85 (1H, d, J=8HZ), 2,5 (2H, m), 2,7-2,85 (1H, m), 2,77 (3H, d, J=5Hz), 3,08 (2H, m), 3,30 (1H, m), 4,38 (1H, m) , 4,9-5,1 (2H, m), 5,10 (2H, S), 6,3-6,55 (1H, m), 6,6 (1H, d largo) e 7,33 (5H, s). 73 786 RJS/AW/P30030 e.

-24-

Exemplo 3 Ácido 3—acetilmercapto—4—[[5—amino—1—(S)—(metilaminocarbonil)-pentil ] aminocarbonil ] —6—metil—heptanoico , hidrocloreto de éster isopropílico (E3) ch3

s >o ch3

Uma solução do composto benziloxicarbonilamino (El) (190 mg) em 5% ácido fórmico/metanol (3 ml) foi adicionada a uma suspensão agitada de negro de paládio (200 mg) no mesmo solvente (10 ml). Após 2h, a mistura foi filtrada através de terras de diatomáceas ("Kieselguhr") e evaporada até à secura. Uma solução do resíduo em clorofórmio foi tratada com cloreto de hidrogénio etéreo IN e os solventes foram evaporados e o resíduo foi triturado com éter para dar o composto do título sob a forma de um sólido (50 mg), p.f. 151-157°C.

Alternativamente, uma solução do composto benziloxicarbonilamino (El) (100 mg) em ácido acético glacial (1 ml) foi tratada com brometo de hidrogénio a 45% em ácido acético glacial (0,4 ml). Após 4h, a mistura foi diluída com éter e a goma que precipitou foi triturada com éter para dar o composto do título sob a forma do seu sal hidrobrometo. 6(CDC13): 0,90 (6H, m), 1,25 (6H, m), 1,2-2,2 (9H, m), 2,35 (3H, s), 2,5-3,1 (3H, m), 2,95 (3H, S largo), 3,18 (2H, m), 4,12 (1H, m), 4,77 (1H, m), 5,0 (1H, m) e 7,9 (3H, S largo). 73 786 RJS/AW/P30030 -25-

Exemplo 4 Ácido 4—[[5-amino-l-(S)-(metilaminocarbonil)pentil]aminocarbo-nil]—3—mercapto—6—metil—heptanóico, hidrocloreto de éster isopropílico (£4)

CH3 H,C

NH2 .HC1

Uma mistura do composto acetilmercapto (E3; hidrobrometo) e isopropanol foi purgada com azoto durante 15 min, em seguida foi arrefecida em gelo e tratada com amoníaco aquoso a 35%. Após 3h# o solvente foi evaporado e o resíduo foi dissolvido em clorofórmio e tratado com cloreto de hidrogénio etéreo IN. O solvente foi evaporado. A cromatografia em coluna em sílica, eluindo com 20% metanol/ acetato de etilo deu o composto do título. 6(CD3OD): 0,9 (6H, m), 1,25 (6H, d, J=7Hz), 1,3-1,9 (9H, m), 2,3-2,8 (3H, m), 2,72 (3H, s), 2,93 (2H, t, J=8Hz), 3,20 (1H, m), 4,30 (1H, m) e 5,0 (1H, m).

Exemplo 5

As composições farmacêuticas para administração oral podem ser preparadas por combinação dos seguintes materiais:

Formulação de Dosagem Sólida % p/p Composto do Exemplo l 10% Estearato de magnésio 0,5% Amido 2,0% Celulose HPM 1,0% Celulose microcristalina 86,5% 73 786 RJS/AW/P30030

-26- A mistura pode ser comprimida em comprimidos ou podem-se encher com ela cápsulas de gelatina dura. O comprimido pode ser revestido por aplicação de uma suspensão de formador de película (p. exp. celulose HPM), pigmento (p. exp. dióxido de titânio) e plastificante (p. exp. ftalato de dietilo) e secagem da película por evaporação do solvente. O revestimento de película pode compreender 2,0% a 6,0% do peso do comprimido, preferivelmente cerca de 3,0%. Cápsula % p/p 20% 80%

Composto do Exemplo 1 Polietilenoglicol O composto medicinal é disperso ou dissolvido no portador liquido, adicionando-se, se necessário, um agente espessante. A formulação é em seguida encerrada numa cápsula de gelatina macia por tecnologia apropriada.

Exemplo 6

Uma composição farmacêutica para administração parentérica pode ser preparada por combinação dos seguintes materiais: Nível Preferido

Composto do Exemplo 4 Solução salina A solução é esterilizada e selada em recipientes estéreis.

ENSAIO DO INIBIDOR DA COLAGENASE 0 teste é realizado essencialmente como em Cawston e Barrett, Anal. Biochem. 99, 340-345 (1979). Os compostos para 73 786 RJS/AW/P30030 /

..'vistiP -27- teste são dissolvidos em metanol por sonicação e adicionados a colagenase (purificada a partir dos sobrenadantes da cultura da linha de células de fibroblasto de pulmão humano, WI-38) em tampão. Para se assegurar que os inibidores de tiol colagenase permanecem não oxidados, pode-se incorporar, no solvente metanol e/ou nos tampões de diluente, /3-mercaptoetanol, para dar uma concentração final de 9,6 x 10"5M. O efeito directo mínimo do jS-mercaptoetanol na degradação do colagénio pela colagenase humana é controlado. Depois de uma pré-incubação de 5 min a 37°C, os tubos de ensaio são arrefecidos a 4°C e é adicionado colagénio do tipo I de pele de ratazana 3H-acetilado. Os tubos de ensaio são incubados a 37°C durante a noite. 0 3H-colagénio forma fibrilas insolúveis, as quais são o substrato para a enzima.

Para terminar o ensaio, os tubos de ensaio são rodados a 12000 rpm durante 15 minutos. Formam-se pelotas do 3H-colagénio não digerido, enquanto que o 3H-colagénio digerido é encontrado no sobrenadante sob a forma de péptidos solúveis. Retira-se uma amostra de sobrenadante para contagem por cintilação líquida. A actividade dos inibidores da colagenase (IC50: concentração inibitória de 50%) é expressa como a concentração do composto que inibe uma concentração conhecida (padrão) de enzima em 50%. 0 composto do Exemplo 4 tinha um valor de IC50 de Ι,ΙμΜ.

Claims (14)

1. 73 786 ,'·-1' r-:&jpp RJS/AW/P30030 ,J . —28— /. REIVINDICAÇÕES 1 - Composto ou um seu sal, solvato ou hidrato, caracteri-zado por ter a fórmula (I):

   O SR2 O r4 (I) na qual, R^ é -OH; alcoxi; ariloxi ou aralquiloxi; -NRgR7, onde cada um de Rg e R7 é, independentemente do outro, hidrogénio ou alquilo, ou Rg e R7, em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados, formam um anel de 5, 6 ou 7 membros com um átomo de oxigénio, enxofre ou azoto opcionalmente substituído, adicional, no anel; ou um grupo: 0 II -NH-CH-C-Rg I R8 onde R8 é hidrogénio; alquilo, opcionalmente substituído por -OH, alcoxi, -NR6R7, guanidina, -C02H, CONH2, SH ou S-alquilo; ou -CH2-Ar onde Ar é arilo opcionalmente substituído; e Rg é alcoxi; OH; ou -NRgR7; O 0 II II R2 é hidrogénio; ou acilo, tal como -C-alquilo ou -C-Z, onde Z é arilo opcionalmente substituído; R3 é alquilo C3_6; R4 é -(CH2)nMR10Rllf -(CH2)nNHCOR12, -(^)^30(=^4)^^, -(CH2)nCONH(CH2 JqNR^oRn ou -(CH2)n-R15 onãe n é um número inteiro de 1 a 6 e q é um número inteiro de 2 a 4 e cada um de R10 e RX1 é, independentemente do outro, hidrogénio ou alquilo, ou R10 e Rn, em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados, formam um anel de 5, 6 ou 7 membros com um átomo de oxigénio ou enxofre opcional ou um segundo átomo de azoto, opcionalmente substituído, no anel, R12 é alquilo, alcoxi, 73 786 RJS/AW/P30030

   ...T7;T:C!55 -29- aralquiloxi ou ”(CH2)mNR10Rll' onde m é 1 ou 2, R13 é hidrogénio ou alquilo, R14 é hidrogénio ou alquilo, ou R14 e R10, em conjunto com os átomos de azoto aos quais estão ligados, formam um anel de 5, 6 ou 7 membros, e R15 é um anel piperidilo opcionalmente substituído; e R5 é hidrogénio, alquilo, -CH2-(CH2)nOR16, -CH2-(CH2)n-0C0R17 ou

   O onde n é um número inteiro de 1 a 6, R18, R17 e R18 são, independentemente uns dos outros, hidrogénio ou alquiloC^g e Rig é hidroxi, -0-alquiloC1_6 ou NR10Rn onde R10 e Rn são definidos como para R4.
2. 2 - Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por R-l ser hidroxi, alcoxiC1_4 ou amino.
3. 3 - Composto de acordo com as reivindicações 1 ou 2, caracterizado por R2 ser hidrogénio, acetilo ou benzoílo.
4. 4 - Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado por R3 ser n-butilo, iso-butilo ou sec-butilo.
5. 5 - Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado por R4 ser -(CH2)nNR10R11, onde R10 e Rn são hidrogénio ou metilo, -(CH2)nNHCOR12 onde R12 é aralquiloxi ou -(CH2)mNR10Rn, onde m é 1 e R10 e Ri:l são hidrogénio -(CH2)nCONH(CH2)qNR10Ri:L onde q é 2 e R10 e R11# em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados, formam um anel de 5, 6 ou 7 membros, -(CH2)nNR13C(=NR14)NR10R11 onde R10, Rn, R13 e R14 são todos hidrogénio, -(CH2)nNR13C(=NR14)NR10R11 onde R10 e R14/ em conjunto com os átomos de azoto aos quais estão ligados, formam um grupo 2-imidazolinilo opcionalmente substituído, -(CH2)n-R15 onde R15 é piperidilo opcionalmente substituído e, em cada um dos anteriores, n é um número inteiro de 1 a 4. 73 786 RJS/AW/P30030

   .<ΰ -30-
6. 6 - Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado por R5 ser hidrogénio, metilo ou hidroxietilo.
7. 7 - Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por Rx ser iso-propoxi, R2 ser hidrogénio ou acetilo, R3 ser iso-butilo; R4 ser -(CH2)4*-NH2 ou -(CH2)4NHC0R*L2 onde R12 ® benziloxi e R5 é metilo.
8. 8 - Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado por o centro quiral marcado com um asterisco na fórmula (1) ter a configuração (S).
9. 9 - Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser: ácido 3-acetilmercapto-4-[[5-(benziloxicarbonilamino)-l-(S)--(metilaminocarbonil)pentil]aminocarbonil]-6-metil-heptanóico, éster isopropílico ácido 4-[[5-(benziloxicarbonilamino)-l-(S)-(metilaminocarbonil )pentil] aminocarbonil] -3-mercapto-6-metil—heptanóico , éster isopropílico ácido 3-acetilmercapto-4-[[5-(amino)-l-(S)-(metilaminocar-bonil)-pentil]aminocarbonil]-6-metil-heptanóico, hidrocloreto do éster isopropílico, e ácido 4-[[5-(amino)-l-(S)-(metilaminocarbonil)pentil]amino-carbonil]-3-mercapto-6-metil-heptanóico, hidrocloreto do éster isopropílico.
10. 10 - Processo de preparação de um composto tal como reivindicado na reivindicação 1, caracterizado por compreender: (a) a reacção de um composto de fórmula (III):

    O O R4 (III) na qual R·^ R3, R4 e R5 são definidos como para a fórmula (I), com um tiol de fórmula (IV):

    ..r' (b 73 786 RJS/AW/P30030 -31- I^-SH (XV) na qual ^ é um grupo protector de enxofre, convencional; ou (B) a reacção de um composto de fórmula (V): r3 /OH 0 SL O (v> na qual e R3 são definidos como para a fórmula (I) e L é que é um grupo protector de enxofre, convencional, ou L2 que é um grupo R-S- onde R é qualquer resíduo orgânico tal que o grupo R-S- proporcione uma ligação dissufeto clivável, com um composto de fórmula (VI):

    (VI) na qual R4 e R5 são definidos como para a fórmula (I), para dar um composto de fórmula (II):

    O SL O R4 (II) na qual R^ R3, R4 e R5 são definidos como para a fórmula (Ϊ), e L é ou L2; e subsequentemente, quando R2 num composto de fórmula (I) é hidrogénio, a clivagem do grupo L.
11. 11 - Processo de acordo com a reivindicação 10, caracterizado por L ser L^, sendo 1^ acetilo ou benzoílo.
12. 12 - Composição farmacêutica caracterizada por compreender -32- 73 786 RJS/AW/P30030 um composto tal como reivindicado em qualquer das reivindicações 1 a 9 e um portador farmaceuticamente aceitável.
13. 13 - Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9 para uso como uma substância terapêutica activa.
14. 14 - Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9 para uso no tratamento de estados colagenolíticos, tais como desordens do tecido conjuntivo, em mamíferos. Lisboa -l M 1992 Por SMITHKLINE BEECHAM plc =0 AGENTE 0FICIAL=