PL64436B1 - - Google Patents

Description

Pierwszenstwo: Opublikowano: 04.X.1967 (P 122 862) 29.11.1972 64436 KI. 12 q, 6/01 MKP C 07 c, 101/48 "CZ^ ,\\'A Wspóltwórcy wynalazku: Barbara Rzeszotarska, Grzegorz Palka Wlasciciel patentu: Tarchominskie Zaklady Farmaceutyczne „Polfa", Warszawa Warszawa (Polska) Sposób wytwarzania aralkiloksykarbonylo-aminokwasów lub ich estrów Przedmiotem wynalazku jest wytwarzanie aralkiloksy- karbonyloaminokwasów lub ich estrów.W syntezach peptydów grupe aminowa aminokwasu lub peptydu acylujacego chroni sie bardzo czesto za po¬ moca oslon aralkiloksykarbonylowych. Sposród tych oslon najczesciej stosowana jest oslona benzyloksykarbo- nylowa zwana oslona karbobenzoksy.Najstarszym, i do tej pory najczesciej stosowanym, sposobem wprowadzania tej ochrony jest dzialanie na aminokwas chloromrówczanem benzylu (chlorkiem kar¬ bobenzoksy) w srodowisku silnie alkalicznym. Wada tej metody jest niemoznosc uzyskania chloromrówczanu benzylu w stanie czystym, jego nietrwalosc i silnie lza¬ wiace wlasnosci. Silnie alkaliczne srodowisko, którego wymaga powyzsza reakcja Schotten-Baumana równiez nie zawsze jest korzystne.W poszukiwaniu lepszych sposobów wykorzystano ostatnio do wytwarzania karbobenzoksy-aminokwasów metody stosowane w chemii peptydów do syntezy wia¬ zan peptydowych, a mianowicie wykorzystano tu zdol¬ nosc ulegania latwej aminolizie estrów 4-nitrofenylo- wych, N-piperydylowych i N-sukcynimidylowych.W celu otrzymania karbobenzoksy-aminokwasów dzia¬ lano na sole lub estry aminokwasów mieszanymi wegla¬ nami, takimi jak weglan benzylowo-4-nitrofenylowy, benzylowo-N-piperydylowy i benzylowo-N-sukcynimidy- lowy. Zastosowanie wymienionych weglanów omija wprawdzie niedogodnosci uzycia chlorku karbobenzoksy, ale posiada inne wady. Przy uzyciu weglanu benzylo- wo-4-nitrofenylowego tworzy sie trudny do oddzielenia 10 15 20 25 30 od karbobenzoksy-aminokwasu 4-nitrofenol. Zastosowa¬ nie weglanu benzylowo N-piperydylowego wymaga bar¬ dzo dlugiego czasu reakcji, a weglanu benzylowo-N-suk- cynimidylowego drastycznych warunków reakcji i jest poza tym kosztowne.Okazalo sie, ze mozna do otrzymywania karbobenzo¬ ksy- i innych aralkiloksykarbonylo-aminokwasów wyko¬ rzystac zdolnosc ulegania latwej aminolizie estrów 8-chi- nolilowych, stosowanych do syntezy wiazan peptydo¬ wych, przy czym uzycie weglanów aralkilo-8-chinolilo- wych do syntezy aralkiloksykarbonylo-aminokwasów omija wady stosowania do tego celu powyzej wymienio¬ nych weglanów.Weglany aralkilowo-8-chinolilowe sa latwo dostepny¬ mi stalymi, trwalymi zwiazkami o ostrej temperaturze topnienia. Wprowadzanie za ich pomoca oslon aralkilo¬ ksykarbonylowych nastepuje szybko i w bardzo lagod¬ nych warunkach. Praktycznie reakcja jest juz skonczona , po uplywie 0,5 godziny w temperaturze pokojowej. Po¬ wstala w wyniku reakcji jako produkt uboczny 8-hydro- ksychinoline mozna ze wzgledu na jej wlasnosci zasa¬ dowe bardzo latwo oddzielic od aralkiloksykarbonylo- aminokwasu.Sposobem wedlug wynalazku weglan aralkilo-8-chino- lilowy rozpuszcza sie w dwumetyloformamidzie i wy¬ trzasa z wodnym roztworem soli sodowej, potasowej lub trójalkiloaminowej aminokwasu. Po kilku minutach na¬ stepuje ujednolicenie roztworu. Tak otrzymany roztwór pozostawia sie przez 0,5 godziny w temperaturze poko¬ jowej. Po tym okresie czasu dodaje sie wody i wyekstra- €443664436 howuje nieprzereagowany weglan aralkilo-8-chinolilowy i utworzona w reakcji 8-hydrksychinoline za pomoca rozpuszczalnika nie mieszajacego sie z woda, np. octa¬ nem etylu.Warstwe wodna zakwasza sie stezonym kwasem sol¬ nym i przeprowadza ekstrakcje aralkiloksykarbonyto- aminokwasu do octanu etylu. Po odparowaniu octanu etylu otrzymuje sie surowe produkty o zadawalajacym stopniu czystosci i w wysokiej wydajnosci. W przypad¬ ku wprowadzenia ochrony aralkiloksykarbonylowej do estrów aminokwasów reakcje prowadzi sie tylko w dwu- metyloformamidzie, a po skonczonej reakcji dodaje sie octanu etylu i wymywa nieprzereagowany weglan aral- kilo-8-chinolilowy i utworzona w reakcji 8-hydroksychi- nolina za pomoca 2n kwasu solnego, a octan etylu su¬ szy i odparowuje. Otrzymuje sie estry aralkiloksykarbo- nylo-amin okwasów w wysokiej wydajnosci i o zadawa¬ lajacym stopniu czystosci.Niektóre sposród otrzymanych wedlug wynalazku aral- kiloksykarbonyloaminokwasów i ich estrów sa podane w tablicy.Tablica Karbobenzoksy- i p-nitrokarbobenzoksy- aminokwasy Val Pro Leu Glu Lys — reszta valiny — reszta proliny — reszta leucyny — reszta kwasu glutamino¬ wego — reszta lizyny Lp. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12.Karbobenzoksy- i p-nitrokarbo- benzoksy- amino-kwasy Z-DL-Ala-OH*) Z-Gly-OH Z-L-Cys(SBZL)-OH Z-DL-Phe-OH Z-L-Val-OH Z-L-Pro-OH Z-DL-Leu-OH Z-DL-Glu(OH)-OH H-L-Lys(Z)-OH Z-L-Phe-OBut p-N02-Z-Gly p-N02-Z-DL-A1a-OH Wydaj¬ nosc % 83 90 91 99 86 80 91 72 33****) 92 98 84 Temperatura topnienia otrzyma¬ na 0C 110-111**) 116-118 91,5-94 99-101 57-58,5 73,5-75,5 olej***) 110 240 (rozklad) 77-99 119-122 128-129 literatu¬ rowa °C 114-115 120 93-94 103 57-59 77 olej 120 238 (rozklad) 81-82 122,5-124 132,5-134 *) wyjasnienie uzywanych w tablicy symboli **) wszystkie otrzymane sposobem wedlug wynalazku i wymienione w tablicy zwiazki nie daja depresji temperatury topnienia z autentycznymi zwiazkami opisanymi w literaturze ***) N obliczono 5,27% N znaleziono 5,14% ****) wydajnosc podana w literaturze okolo 40%.Wyjasnienie uzywanych w tablicy symboli: Z p-N02—Z BZL OBut Ala Gly Cys Phe — karbobenzoksy — p-nitrokarbobenzoksy — benzyl — ester IH-rzedowy butylowy — reszta alaniny — reszta glicyny — reszta cysteiny — reszta fenyloalaniny 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 P r z y k l a d I. 45 mg 0,5 mM/DL-alaniny rozpuszczo¬ no w 0,5 ml In NaOH (0,5 mM) i dodano 243 mg (0,75 mM) weglanu p-nitrobenzylowo-8-chinolilowego rozpuszczonego w dwumetyloformamidzie. Po zmiesza¬ niu roztworów i wstrzasnieciu odstawiono jednorodna mieszanine na 0,5 godziny w temperaturze pokojowej.Po uplywie tego czasu do mieszaniny poreakcyjnej do¬ dano 5 ml wody i wymywano octanem etylu nieprzerea¬ gowany weglan p-nitrobenzylowo-8-chinolilowy jak równiez powstajaca podczas reakcji 8-hydroksychinoline.Z warstwy wodnej, po wykwaszeniu stezonym kwasem solnym, ekstrahowano produkt octanem etylu. Ekstrakty octanowe po wysuszeniu bezwodnym siarczanem mag¬ nezu odparowano do sucha. Otrzymano 113 mg (84%) surowej p-nitrokarbobenzoksy-DL-alaniny o temperatu¬ rze topnienia 128—129°C (temperatura topnienia wedlug literatury 132—134°C) nie dajacej depresji temperatury topnienia z próbka p-nitrokarbobenzoksy-DL-alaniny otrzymana inna metoda.Przyklad II. 450 mg (5 mM) DL-alaniny rozpusz¬ czono w 5 ml In NaOH (5 mM) i dodano 2,09 g (7,5 mM) weglanu benzylowo-8-chinolilowego rozpusz¬ czonego w 7,5 ml dwumetyloformamidu. Po 5 minutach wstrzasania nastepowalo ujednolicenie roztworu. Roz¬ twór pozostawiono przez 0,5 godziny w temperaturze 20°C. Po tym okresie czasu dodano 20 ml wody i wy¬ ekstrahowano trzykrotnie do octanu etylu nieprzereago¬ wany weglan benzylowo-8-chinolilowy i utworzona w re¬ akcji 8-hydroksychinoline. Warstwe wodna wykwaszono stezonym kwasem solnym i wydzielony karbobenzoksy- aminokwas ekstrahowano do octanu etylu. Po wysusze¬ niu octan odparowano i otrzymano 926 mg (83%) suro¬ wej karbobenzoksy-DL-alaniny 0 temperaturze topnienia 110—111°C (temperatura topnienia wedlug literatury 114—115°C), nie dajacej depresji temperatury topnienia z próbka autentycznej karbobenzoksy-DL-alaniny. Z pierwszego wyciagu octanowego przez wymycie 0,1 11 kwasem solnym mozna usunac 8-hydroksychinoline i przez odparowanie octanu etylu zregenerowac nieprzere¬ agowany weglan benzylowo-8-chinolilowy.Przyklad III. 840 mg (3 mM) weglanu benzylo- wo-8-chinolilowego rozpuszczono w 1 ml dwumetylo¬ formamidu i dodano 550 mg (2,5 mM) estru Ill-rzed- butylowego L-fenyloalaniny rozpuszczonego w 7 ml dwumetyloformamidu. Po 0,5 godzinnej reakcji w tem¬ peraturze 20°C dodano 20 ml octanu etylu i warstwe octanowa wymywano 2n kwasem solnym i woda. Po wy¬ suszeniu octan odparowano pod zmniejszonym cisnie¬ niem. Uzyskano 880 mg estru Ill-rzed.-butylowego kar- bobenzoksy-L-fenyloalaniny o temperaturze topnienia 77—79°C (temperatura topnienia wedlug literatury 81—82°C). PL

Claims (1)

1. Zastrzezenie patentowe Sposób wytwarzania aralkiloksykarbonylo-aminokwa- sów znamienny tym, ze weglan aralkilowo-8-chinolilowy 65 ewentualnie rozpuszczony w dwumetyloformamidzie64436 poddaje sie reakcji z wodnym roztworem soli sodowej, potasowej lub trójalkiloamoniowej aminokwasu albo z estrem aminokwasu rozpuszczonym w dwumetyloforma- midzie, po czym z roztworu poreakcyjnego usuwa sie nieprzereagowany weglan aralkilo-8-chinolilowy i two¬ rzaca sie w czasie reakcji 8-hydroksychinoline przez wy¬ mywanie nie mieszajacymi sie z woda rozpuszczalnika¬ mi, takimi jak np. octan etylu, a uzyskany aralkiloksy- karbonylo-aminokwas ewentualnie w postaci estru wy¬ traca sie z warstwy wodnej za pomoca kwasu i ekstra¬ huje rozpuszczalnikiem nie mieszajacym sie z woda, ta¬ kim jak np. octanu etylu. PL