PL218884B1 - Kompozycja farmaceutyczna zawierająca podstawione pirolopirydyny, podstawione pirolopirydyny i ich zastosowania - Google Patents

Kompozycja farmaceutyczna zawierająca podstawione pirolopirydyny, podstawione pirolopirydyny i ich zastosowania

Info

Publication number
PL218884B1
PL218884B1 PL386205A PL38620500A PL218884B1 PL 218884 B1 PL218884 B1 PL 218884B1 PL 386205 A PL386205 A PL 386205A PL 38620500 A PL38620500 A PL 38620500A PL 218884 B1 PL218884 B1 PL 218884B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
pyrrolo
compound
methyl
compounds
indol
Prior art date
Application number
PL386205A
Other languages
English (en)
Inventor
Paul Joseph Cox
Tahir Nadeem Majid
Justine Yeun Quai Lai
Andrew David Morley
Sheller Amendola
Stephanie Deprets
Chris Edlin
Original Assignee
Aventis Pharma Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Aventis Pharma Ltd filed Critical Aventis Pharma Ltd
Publication of PL218884B1 publication Critical patent/PL218884B1/pl

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4985—Pyrazines or piperazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

Wynalazek dotyczy kompozycji farmaceutycznej zawierającej podstawione pirolopirydyny, podstawionych pirolopirydyn i ich zastosowań.
Wynalazek przedstawia podstawione pirolopirydyny, ich wytwarzanie, kompozycje farmaceutyczne zawierające te związki i ich farmaceutyczne zastosowania do leczenia stanów chorobowych, które można modulować przez hamowanie kinaz białkowych.
Kinazy białkowe uczestniczą w zdarzeniach sygnałowych kontrolujących aktywację, wzrost i różnicowanie komórek w odpowiedzi na mediatory zewnątrzkomórkowe i zmiany w otoczeniu. Ogólnie kinazy dzieli się na kilka grup; te, które preferencyjnie fosforylują reszty seryny i/lub treoniny i te, które preferencyjnie fosforylują reszty tyrozyny (S.K. Hanks i T. Hunter, FASEB.J., 1995, 9, strony 576-596). Kinazy serynowe/treoninowe obejmują na przykład izoformy kinazy białkowej C (A.C. Newton, J. Biol. Chem., 1995, 270, strony 28495-28498) i grupę zależnych od cykliny kinaz, takich jak cdc2 (J. Pines, Trends in Biochemical Science, 1995, 18, strony 195-197). Kinazy tyrozynowe obejmują transbłonowe receptory czynnika wzrostu, takie jak receptor czynnika wzrostu naskórka (S. Iwashita i M. Kobayashi, Cellular Signalling, 1992, 4, strony 123-132) i cytozolowe kinazy niereceptorowe, takie jak p56tck, p59fYn, ZAP-70 i kinazy csk (C. Chan i współp., Ann. Rev. Immunol., 1994, 12, strony 555-592).
Niewłaściwa wysoka aktywność kinazy białkowej wywołuje liczne choroby, wynikające z nieprawidłowej czynności komórkowej. Może to wynikać bezpośrednio lub pośrednio, na przykład z nieprawidłowego działania właściwych dla kinazy mechanizmów kontrolnych, związanych na przykład z mutacją, nadmierną ekspresją lub niewłaściwą aktywacją enzymu; lub przez nadmierne lub niedostateczne wytwarzanie cytokin lub czynników wzrostu, również uczestniczących w przetwarzaniu sygnałów dodatnich lub ujemnych kinazy. We wszystkich tych przypadkach można oczekiwać, że wybiórcze hamowanie działania kinazy ma korzystny wpływ.
Syk jest 72-kDa cytoplazmatyczną białkową kinazą tyrozynową, której ekspresję spotyka się w różnych komórkach hematopoetycznych i jest zasadniczym elementem w kilku kaskadach, które sprzęgają receptory antygenowe z odpowiedziami komórkowymi. Zatem, Syk odgrywa kluczową rolę w sygnałach wysokiego powinowactwa receptora IgE, FceRI, w mastocytach oraz w sygnałach receptorów antygenowych limfocytów T i B. Szlaki przetwarzania sygnału w mastocytach, komórkach T i B posiadają wspólne cechy. Wiążąca ligand domena receptora nie posiada wewnętrznej aktywności kinazy tyrozynowej. Jednak oddziałują one z podjednostkami przetwarzającymi, które zawierają motywy aktywacji immunoreceptorowej w oparciu o tyrozynę (ITAM) (M. Reth, Nature, 1989, 338, strony 383-384). Motywy te są obecne w obu podjednostkach β i γ FceRI, w podjednostce ζ, receptora komórki T (TCR) i w podjednostkach IgGa i IgGji receptora komórki B (BCR) (N.S. van Oers i A. Weiss, Seminars in Immunology, 1995, 7, strony 227-236). W czasie wiązania antygenu i multimeryzacji reszty ITAM są fosforylowane przez białkowe kinazy tyrozynowe z rodziny Src. Syk należy do wyjątkowej klasy kinaz tyrozynowych posiadających dwie tandemowe domeny homologiczne z Scr (SH2) i C-końcową domenę katalityczną. Te SH2 domeny wiążą ITAM z wysokim powinowactwem, a asocjacja Syk z aktywowanym, za pośrednictwem SH2, receptorem pobudza aktywność kinazy Syk i rozmieszczenie Syk w błonie plazmatycznej.
U myszy z deficytem Syk degranulacja mastocytów jest zahamowana, co sugeruje, że jest to ważny cel w rozwinięciu czynników stabilizujących mastocyty (P.S. Costello, Oncogene, 1996, 13, strony 2595-2605). Podobne badania wykazały krytyczną rolę Syk w sygnałach BCR i TCR (A.M. Cheng, Nature, 1995, 378, strony 303-306 i D. H. Chu i współp., Immunological Reviews, 1998, 165, strony 167-180). Wydaje się, że Syk również jest związany z przeżywalnością granulocytów kwasochłonnych w odpowiedzi na IL-5 i GMCSF (S. Yousefi i współp., J. Exp. Med., 1996, 183, strony 1407-1414). Pomimo kluczowej roli Syk w mastocytach, BCR oraz sygnale komórek T niewiele wiadomo o mechanizmie, za pomocą którego Syk przekazuje pobudzenie ujemne do efektorów (M. Ischiai i współp., Immunity, 1999, 10, strony 117-125 i L.R. Hendricks-Taylor i współp., J. Biol. Chem., 1997, 272, strony 1363-1367). Ponadto Syk wydaje się odgrywać ważną rolę na szlaku sygnałów CD40, który jest istotny w proliferacji komórek B (M. Faris i współp., J. Exp. Med., 1994, 179, strony 1923-1931).
Syk ponadto jest związane z aktywacją płytek, pobudzaną drogą receptora IgG o niskim powinowactwie (Fc gamma-RIIA) lub pobudzaną przez kolagen (F. Yanaga i współp., Biochem. J., 1995, 311, (Pt. 2) strony 471-478).
Kinaza ogniskowej adhezji (FAK) jest niereceptorową kinazą tyrozynową związaną ze szlakami przetwarzania sygnału za pośrednictwem integryny. FAK umiejscawia się wspólnie z integrynami
PL 218 884 B1 w miejscach ogniskowego kontaktu i aktywacja FAK i jej fosforylacja tyrozyny wykazuje w wielu typach komórek zależność od integryn, wiążących się z ich zewnątrzkomórkowymi ligandami. Wyniki kilku badań potwierdzają hipotezę, że inhibitory FAK mogą być zastosowane w leczeniu raka. Na przykład komórki z deficytem FAK migrują słabo w odpowiedzi na sygnały chemotaktyczne i nadmierna ekspresja C-końcowej domeny FAK blokuje rozprzestrzenianie komórkowe równie dobrze jak migrację chemotaktyczną (Sieg i współp., J. Cell Science, 1999, 112, 2677-2691; A. Richardson i T. Parsons, Cell, 1997, 97, 221-231); w dodatku komórki guza traktowane oligonukleotydami antysensownymi FAK traciły swoje wiązanie i ulegały apoptozie (Xu i współp., Cell Growth Differ. 1996, 4, 413-418). Donoszono o nadmiernej ekspresji FAK w raku prostaty, sutka, tarczycy, okrężnicy i płuca. Poziom ekspresji FAK jest pośrednio skorelowany z guzami wykazującymi bardziej agresywny fenotyp.
Angiogeneza lub tworzenie nowych naczyń krwionośnych poprzez wyrastanie z istniejącego uprzednio układu naczyniowego ma zasadnicze znaczenie dla rozwoju embrionalnego i organogenezy. Nieprawidłowe nasilenie neowaskularyzacji obserwuje się w reumatoidalnym zapaleniu stawów, retinopatii cukrzycowej i podczas wzrostu guza (Folkman, Nat. Med., 1995, 1, 27-31). Angiogeneza jest złożonym wieloetapowym procesem obejmującym aktywację, migrację, proliferację i przeżycie komórek śródbłonka. Obszerne badania z zakresu angiogenezy guzów, w ostatnich dwóch dekadach, zidentyfikowały kilka środków leczniczych, obejmujących kinazy, proteazy i integryny, powodujących ujawnienie wielu nowych czynników zapobiegających angiogenezie, włączając inhibitory KDR, z których pewne są aktualnie poddawane ocenie klinicznej (Jekunen i współp., Cancer Treatment Rev. 1997, 23, 263-286). Inhibitory angiogenezy mogą być zastosowane jako środki lecznicze pierwszego rzutu, jako środki wspomagające, a nawet zapobiegające powstaniu lub wznowię guza złośliwego.
Kilka białek związanych z rozejściem chromosomów i organizowaniem się wrzeciona zidentyfikowano u drożdży i muszki octowej. Uszkodzenie tych białek powoduje złe rozejście się chromosomów i jednobiegunowe lub uszkodzone wrzeciona. Wśród tych kinaz znajdują się kinazy Ip11 i Aurora, pochodzące odpowiednio od S.cerevisiae i muszki owocowej, wymagane do separacji centrosomowej i rozejścia się chromosomów. Jeden ludzki homolog drożdżowej Ip11 był niedawno sklonowany i scharakteryzowany w różnych laboratoriach. Kinaza ta określana jako Aurora 2, STK15 lub BTAK należy do rodziny kinaz serynowych/treoninowych. Bischoff i współp. wykazali, że Aurora 2 jest onkogenna i może powodować u ludzi rozwój raków okrężnicy i odbytnicy (EMBO J, 1998, 17, 3052-3065). Jest również wiązana z rakami obejmującymi guzy nabłonkowe takie jak rak sutka.
Ujawniono teraz nową grupę podstawionych pirolopirydyn, posiadającą cenne właściwości farmaceutyczne, w szczególności zdolność hamowania kinaz białkowych, szczególniej zdolność wybiórczego hamowania kinazy Syk.
Przedmiotem wynalazku jest kompozycja farmaceutyczna zawierająca substancję aktywną razem z jednym lub więcej niż jednym farmaceutycznie dopuszczalnym nośnikiem lub zaróbką, charakteryzująca się tym, że jako substancję aktywną zawiera skuteczną ilość hamującej selektywnie kinazę podstawionej pirolopirydyny o wzorze ogólnym (I):
w którym:
1
R1 oznacza indolil ewentualnie podstawiony przez jedną lub więcej grup wybranych spośród taΛ j ?
kich jak -C(=O)Me, hydroksyl, tetrazolil, 1,2,4-oksadiazolil, pirydyna, R4, -C(=O)-NY1Y2, -C(=O)-OH, -NH2, -NH-C(=O)-R7, -NH-SO2-R7, i -OR4;
PL 218 884 B1 2
R2 oznacza atom wodoru;
3
R3 oznacza atom wodoru;
R4 oznacza alkil, cykloalkil lub cykloalkiloalkil, każdy ewentualnie podstawiony przez podstawnik
2 7 wybrany spośród takich jak -C(=O)-NY1Y2, -C(=O)-OH, -OR7 oraz jedną lub więcej grup hydroksylowych;
R7 oznacza alkil;
X1 oznacza CH, C-Cl, C-CN, C-fenyl lub C-OMe;
Y1 i Y2 niezależnie oznaczają atom wodoru lub alkil ewentualnie podstawiony przez jedną lub więcej grup wybranych spośród takich jak triazolil, hydroksyl, -C(=O)-NY3Y4, -NY3Y4; lub grupa -NY1Y2 może tworzyć cykliczną aminę;
Y3 i Y4 niezależnie oznaczają atom wodoru, lub grupę -NY3Y4 może tworzyć cykliczną aminę; i w którym:
(a) „alkil oznacza alifatyczną grupę węglowodorową, która może być prostołańcuchowa lub rozgałęziona o 1 do 4 atomach węgla w łańcuchu;
(b) „cykloalkil oznacza nasycony jednopierścieniowy układ o 4 atomach węgla;
(c) „cykliczna amina oznacza 6-członowy monocykliczny cykloalkilowy układ pierścieniowy, w którym jeden z atomów węgla pierścienia jest zastąpiony przez atom azotu i jeden z atomów węgla w pierścieniu jest zastąpiony przez O;
i farmaceutycznie dopuszczalne sole tych związków.
Przedmiotem wynalazku jest także podstawiona pirolopirydyna o wzorze (I) jak określono wyżej.
1
Korzystnie w związku o wzorze ogólnym (I) ewentualne podstawniki przy R1 obejmują jedną lub więcej grup wybranych spośród takich jak karboksy, hydroksyl, tetrazolil, 1,2,4-oksadiazolil, pirydyna, R4, -C(=O)-NY1Y2, -C(=O)-OH, -NH2 i -OR4.
1
Korzystnie w związku o wzorze ogólnym (I) X1 oznacza CH.
1
Korzystnie w związku o wzorze ogólnym (I) X1 oznacza C-OMe.
1
Korzystnie w powyższym związku X1 oznacza C-fenyl.
1
W związku o wzorze ogólnym (I) korzystnie X1 oznacza C-Cl.
1
W związku o wzorze ogólnym (I) korzystnie X1 oznacza C-CN.
Związek według wynalazku korzystnie stanowi związek o wzorze (la):
w którym R2, R3, R4, R7 i X1 mają znaczenia podane dla związku o wzorze (I); R9 oznacza atom wodoru lub R4; R10 oznacza karboksy, hydroksyl, tetrazolil, 1,2,4-oksadiazolil, pirydynę, R4, -C(=O)NY1Y2, -OR4, -NH-SO2-R7 lub -NH2; i p oznacza liczbę zero, liczbę całkowitą 1 lub 2; oraz farmaceutycznie dopuszczalne sole związków o wzorze (la).
1
Korzystnie w powyższym związku o wzorze (la) X1 oznacza CH, C-OMe, C-fenyl, C-Cl lub C-CN.
Korzystnie w powyższym związku o wzorze (la) R9 oznacza:
(i) atom wodoru;
(ii) C1-4alkil;
(iii) C1-4alkil podstawiony przez -C(=O)-NY1Y2; lub (iv) cykloalkiloalkil podstawiony przez hydroksyl.
Korzystnie w powyższym związku o wzorze (la) R10 oznacza:
PL 218 884 B1 (i) hydroksyl;
(ii) -OR4, w którym R4 oznacza alkil;
(iii) -OR4, w którym R4 oznacza alkil lub cykloalkiloalkil, każdy podstawiony przez jedną lub więcej grup hydroksylowych;
(iv) -OR4, w którym R4 oznacza alkil podstawiony przez jedną lub więcej grup alkoksylowych;
(v) -OR4, w którym R4 oznacza cykloalkil podstawiony przez -C(=O)-NY1Y2;
(vi) -CONY1Y2;
(vii) karboksy;
(viii) 1,2,4-oksadiazolil;
(ix) pirydynę; lub (x) tetrazolil lub N-metylotetrazolil.
Korzystnie w związku o wzorze (la) R10 jest przyłączony w pozycji 5 pierścienia indolilowego. Korzystnie związek o wzorze (la) wybrany jest z grupy obejmującej:
amid kwasu 1-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]cyklobutanokarboksylowego;
2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyno-4-karbonitryl; i farmaceutycznie dopuszczalne sole takich związków.
Przedmiotem wynalazku jest także kompozycja jak określono wyżej do zastosowania w leczeniu chorób zapalnych.
Przedmiotem wynalazku jest również kompozycja jak określono wyżej do zastosowania w leczeniu astmy.
Przedmiotem wynalazku jest także kompozycja jak określono wyżej do zastosowania w leczeniu łuszczycy.
Przedmiotem wynalazku jest również kompozycja jak określono wyżej do zastosowania w leczeniu zapalenia stawów.
Przedmiotem wynalazku jest także kompozycja jak określono wyżej do zastosowania w leczeniu choroby zapalnej jelit.
Przedmiotem wynalazku jest również kompozycja jak określono wyżej do zastosowania w leczeniu raka.
Przedmiotem wynalazku jest także zastosowanie związku według wynalazku lub farmaceutycznie dopuszczalnej soli takiego związku do wytwarzania leku do leczenia astmy.
Przedmiotem wynalazku jest także zastosowanie związku według wynalazku lub farmaceutycznie dopuszczalnej soli takiego związku, do wytwarzania leku do leczenia łuszczycy.
Przedmiotem wynalazku jest również zastosowanie związku według wynalazku lub farmaceutycznie dopuszczalnej soli takiego związku do wytwarzania leku do leczenia zapalenia stawów.
Przedmiotem wynalazku jest również zastosowanie związku według wynalazku lub farmaceutycznie dopuszczalnej soli takiego związku, do wytwarzania leku do leczenia choroby zapalnej jelit.
Przedmiotem wynalazku jest także zastosowanie związku według wynalazku lub farmaceutycznie dopuszczalnej soli takiego związku, do wytwarzania leku do leczenia raka.
Zatem, w jednym aspekcie, obecny wynalazek dotyczy kompozycji farmaceutycznych zawierających związki o wzorze ogólnym (I):
w którym:
PL 218 884 B1 1
R1 oznacza indolil ewentualnie podstawiony przez jedną lub więcej grup wybranych spośród takich jak -C(=O)Me, hydroksyl, tetrazolil, 1,2,4-oksadiazolil, pirydyna, R4, -C(=O)-NY1Y2, -C(=O)-OH,
-NH2, -NH-C(=O)-R7, -NH-SO2-R7, i -OR4;
2
R2 oznacza atom wodoru;
3
R3 oznacza atom wodoru;
R4 oznacza alkil, cykloalkil lub cykloalkiloalkil, każdy ewentualnie podstawiony przez podstawnik 1 2 7 wybrany spośród takich jak -C(=O)-NY1Y2, -C(=O)-OH, -OR7 oraz jedną lub więcej grup hydroksylowych;
R7 oznacza alkil;
X1 oznacza CH, C-Cl, C-CN, C-fenyl lub C-OMe;
Y1 i Y2 niezależnie oznaczają atom wodoru lub alkil ewentualnie podstawiony przez jedną lub więcej grup wybranych spośród takich jak triazolil, hydroksyl, -C(=O)-NY3Y4, -NY3Y4; lub grupa -NY1Y2 może tworzyć cykliczną aminę;
Y3 i Y4 niezależnie oznaczają atom wodoru, lub grupa -NY3Y4 może tworzyć cykliczną aminę; i farmaceutycznie dopuszczalne sole takich związków; razem z jednym lub więcej farmaceutycznie dopuszczalnymi nośnikami lub zaróbkami.
W niniejszym opisie, termin „związki według wynalazku i równoważne mu wyrażenia obejmują związki o wcześniej opisanym wzorze ogólnym (I), który z kolei obejmuje, farmaceutycznie dopuszczalne sole, jeśli wynika to z kontekstu. Podobnie, nawiązanie do związków pośrednich, niezależnie od tego czy są one, czy też nie są objęte zakresem zastrzeżeń patentowych, obejmuje ich sole i solwaty, jeśli wynika to z kontekstu. Celem wyjaśnienia, konkretne przypadki, jeśli wynika to z kontekstu, są czasem wskazane w tekście, lecz te przypadki mają charakter jedynie ilustracyjny i nie wykluczają występowania innych przypadków, jeśli wynika to z kontekstu.
Następujące terminy stosowane powyżej i w dalszej części opisu wynalazku, jeśli nie wskazano tego inaczej, należy interpretować jako posiadające następujące znaczenia:
„Pacjent obejmuje zarówno człowieka i inne ssaki.
„Acyl oznacza grupę H-CO- lub alkil-CO-, przy czym grupa alkilowa ma znaczenie podane w opisie.
„Acyloamino oznacza grupę acyl-NH-, przy czym acyl ma zdefiniowane tu znaczenie.
„Alkenyl oznacza alifatyczną grupę węglowodorową zawierającą podwójne wiązanie węgiel-węgiel, która może być prostołańcuchowa lub rozgałęziona o 2 do 15 atomach węgla w łańcuchu. Korzystne grupy alkenylowe mają 2 do 12 atomów węgla w łańcuchu; a korzystniej 2 do 6 atomów węgla (np. 2 do 4 atomów węgla) w łańcuchu. Stosowany tu i w pozostałej części opisu termin „rozgałęziony oznacza, że jedna lub więcej niższych grup alkilowych takich jak metyl, etyl lub propyl jest przyłączonych do prostego łańcucha; tu prostego łańcucha alkenylowego. „Niższy alkenyl oznacza, że w łańcuchu, który może być prosty lub rozgałęziony, występuje około 2 do 4 atomów węgla. Przykładowe grupy alkenylowe obejmują etenyl, propenyl, n-butenyl, i-butenyl, 3-metylobut-2-enyl, n-pentenyl, heptenyl, oktenyl, cykloheksylobutenyl i decenyl.
„Alkoksyl oznacza grupę alkil-O-, w której grupa alkilowa ma znaczenie podane w opisie. Przykładowe grupy alkoksylowe obejmują difluorometoksyl, metoksyl, trifluorometoksyl, etoksyl, n-propoksyl, i-propoksyl, n-butoksyl i heptoksyl.
„Alkoksykarbonyl oznacza grupę alkil-O-CO-, w której grupa alkilowa ma znaczenie podane w opisie. Przykładowe grupy alkoksykarbonylowe obejmują metoksy- i etoksykarbonyl.
„Alkil oznacza, jeśli nie wyspecyfikowano tego inaczej, alifatyczną grupę węglowodorową, która może być prostołańcuchowa lub rozgałęziona o 1 do 4 atomach węgla w łańcuchu. Przykładowe grupy alkilowe obejmują metyl, etyl, n-propyl, i-propyl, n-butyl, s-butyl, t-butyl.
„Alkilen oznacza alifatyczny dwuwartościowy rodnik pochodzący od prostołańcuchowej lub rozgałęzionej grupy alkilowej, przy czym grupa alkilowa ma znaczenie podane w opisie. Przykładowe alkileny obejmują metylen, etylen i trimetylen.
„Alkilenodioksyl oznacza grupę -O-alkilen-O-, w której alkilen ma powyżej zdefiniowane znaczenie. Przykładowe grupy alkilenodioksylowe obejmują metylenodioksyl i etylenodioksyl.
„Alkilosulfinyl oznacza grupę alkil-SO-, w której grupa alkilowa ma wcześniej opisane znaczenie. Korzystne grupy alkilosulfinylowe obejmują te, w których grupą alkilową jest C1-4alkil.
„Alkilosulfonyl oznacza grupę alkil-SO2-, w której grupa alkilowa ma wcześniej opisane znaczenie. Korzystne grupy alkilosulfonylowe obejmują te, w których grupą alkilową jest C1-4alkil.
PL 218 884 B1 „Alkilotio oznacza grupę alkil-S-, w której grupa alkilowa ma wcześniej opisane znaczenie. Przykładowe grupy alkilotio obejmują metylotio, etylotio, izopropylotio i heptylotio.
„Aroil oznacza grupę aryl-CO-, w której grupa arylowa ma znaczenie podane w opisie. Przykładowe grupy aroilowe obejmują benzoil oraz 1- i 2-naftoil.
„Aroiloamino oznacza grupę aroil-NH-, w której aroil ma wcześniej opisane znaczenie.
„Aryl jako grupa lub część grupy oznacza: (i) ewentualnie podstawioną jednopierścieniową lub wielopierścieniową aromatyczną grupę karbocykliczną o 6 do 14 atomach węgla, taką jak fenyl lub naftyl; lub (ii) ewentualnie podstawioną częściowo nasyconą wielopierścieniową aromatyczną grupę karbocykliczną, w której aryl i cykloalkil lub cykloalkenyl są ze sobą skondensowane, tworząc strukturę cykliczną, taką jak tetrahydronaftyl, indenyl lub indanyl. Jeśli nie określono tego inaczej, grupy arylowe mogą być podstawione przez jeden lub więcej podstawników grupy arylowej, które mogą być takie same lub różne, przy czym „podstawnik grupy arylowej obejmuje np. acyl, acyloamino, alkoksyl, alkoksykarbonyl, alkilenodioksyl, alkilosulfinyl, alkilosulfonyl, alkilotio, aroil, aroiloamino, aryl, aryloalkiloksyl, aryloalkiloksykarbonyl, aryloalkilotio, aryloksyl, aryloksykarbonyl, arylosulfinyl, arylosulfonyl, arylotio, karboksyl, cyjano, atom fluorowca, heteroaroil, heteroaryl, heteroaryloalkiloksyl, heteroaroiloamino, heteroaryloksyl, hydroksyl, nitro, trifluorometyl, -NY3Y4, -CONY3Y4, -SO2NY3Y4, -NY3-C(=O)alkil, -NY3SO2alkil lub alkil ewentualnie podstawiony przez aryl, heteroaryl, hydroksyl lub -NY3Y4.
„Aryloalkil oznacza grupę aryl-alkil-, w której aryl i alkil mają wcześniej podane znaczenia. Korzystne grupy aryloalkilowe zawierają grupę C1-4alkilową. Przykładowe grupy aryloalkilowe obejmują benzyl, 2-fenetyl i naftlenometyl.
„Aryloalkiloksyl oznacza grupę aryloalkil-O-, w której grupa aryloalkilowa ma wcześniej opisane znaczenie. Przykładowe grupy aryloalkiloksylowe obejmują benzyloksyl i 1- lub 2-naftalenometoksyl.
„Aryloalkiloksykarbonyl oznacza grupę aryloalkil-O-CO-, w której grupa aryloalkilowa ma wcześniej opisane znaczenie. Przykładowym aryloalkiloksykarbonylem jest benzyloksykarbonyl.
„Aryloalkilotio oznacza grupę aryloalkil-S-, w której grupa aryloalkilowa ma wcześniej opisane znaczenie. Przykładową grupą aryloalkilotio jest benzylotio.
„Aryloksyl oznacza grupę aryl-O-, w której grupa arylowa ma wcześniej opisane znaczenie. Przykładowe grupy aryloksylowe obejmują fenoksyl i naftoksyl, każdy ewentualnie podstawiony.
„Aryloksykarbonyl oznacza grupę aryl-O-C(=O)-, w której grupa arylowa ma wcześniej opisane znaczenie. Przykładowe grupy aryloksykarbonylowe obejmują fenoksykarbonyl i naftoksykarbonyl.
„Arylosulfinyl oznacza grupę aryl-SO-, w której grupa arylowa ma wcześniej opisane znaczenie.
„Arylosulfonyl oznacza grupę aryl-SO2-, w której grupa arylowa ma wcześniej opisane znaczenie.
„Arylotio oznacza grupę aryl-S-, w której grupa arylowa ma wcześniej opisane znaczenie. Przykładowe grupy arylotio obejmują fenylotio i naftylotio.
„Cykliczna amina oznacza 6-członowy monocykliczny cykloalkilowy układ pierścieniowy, w którym jeden z atomów węgla pierścienia jest zastąpiony przez atom azotu i jeden z atomów węgla w pierścieniu jest zastąpiony przez O. Przykładowe cykliczne aminy obejmują morfolinę i grupy podobne.
„Cykloalkenyl oznacza niearomatyczny jednopierścieniowy lub wielopierścieniowy układ zawierający co najmniej jedno podwójne wiązanie węgiel-węgiel i 3 do 10 atomów węgla. Przykładowe jednopierścieniowe pierścienie cykloalkenylowe obejmują cyklopentenyl, cykloheksenyl i cykloheptenyl.
„Cykloalkil oznacza nasycony jednopierścieniowy układ o 4 atomach węgla.
„Cykloalkiloalkil oznacza grupę cykloalkil-alkil-, w której grupy cykloalkilowa i alkilowa mają wcześniej podane znaczenia. Przykładowe jednopierścieniowe grupy cykloalkilo-alkilowe obejmują cyklopropylometyl, cyklopentylometyl, cykloheksylometyl i cykloheptylometyl.
„Fluorowco lub „atom fluorowca oznacza atom fluoru, chloru, bromu lub jodu. Korzystne są atomy fluoru i chloru.
„Heteroaroil oznacza grupę heteroaryl-C(=O)-, w której grupa heteroarylowa ma znaczenie podane w opisie. Przykładowe grupy heteroarylowe obejmują pirydylokarbonyl.
„Heteroaroiloamino oznacza grupę heteroaroil-NH-, w której grupa heteroarylowa ma wcześniej opisane znaczenie.
„Heteroaryl jako grupa lub część grupy oznacza: (i) ewentualnie podstawioną aromatyczną jednopierścieniową lub wielopierścieniową grupę organiczną o 5 do 10 członach pierścienia, przy czym jeden lub więcej członów pierścienia stanowi/stanowią pierwiastek (pierwiastki) inne niż węgiel, np. azot, tlen lub siarka (przykłady takich grup obejmują benzoimidazolil, benztiazolil, furyl, imidazolil, indolil, indolizynyl, izoksazolil, izochinolinyl, izotiazolil, oksadiazolil, pirazynyl, pirydazynyl, pirazolil,
PL 218 884 B1 pirydyl, pirymidynyl, pirolil, chinazolinyl, chinolinyl, 1,3,4-tiadiazolil, tiazolil, tienyl i triazolil, ewentualnie podstawione przez jeden lub więcej podstawników grupy arylowej zdefiniowanych powyżej, jeśli nie określono tego inaczej); (ii) ewentualnie podstawioną częściowo nasyconą wielopierścieniową grupę heterokarbocykliczną, w której heteroaryl i cykloalkil lub cykloalkenyl są skondensowane ze sobą, tworząc strukturę cykliczną (przykłady takich grup obejmują grupy piryndanylowe ewentualnie podstawione przez jeden lub więcej „podstawników grupy arylowej zdefiniowanych powyżej, jeśli nie określono tego inaczej). Ewentualne podstawniki obejmują jeden lub więcej „podstawników grupy arylowej zdefiniowanych powyżej, jeśli nie określono tego inaczej.
„Heteroaryloalkil oznacza grupę heteroaryl-alkil-, w której grupy heteroarylowa i alkilowa mają wcześniej podane znaczenia. Korzystne grupy heteroaryloalkilowe zawierają C1-4alkil. Przykładowe heterogrupy aryloalkilowe obejmują pirydylometyl.
„Heteroaryloalkiloksyl oznacza grupę heteroaryloalkil-O-, w której grupa heteroaryloalkilowa ma wcześniej opisane znaczenie. Przykładowe grupy heteroaryloksylowe obejmują ewentualnie podstawiony pirydylometoksyl.
„Heteroaryloksyl oznacza grupę heteroaryl-O-, w której grupa heteroarylowa ma wcześniej opisane znaczenie. Przykładowe grupy heteroaryloksylowe obejmują ewentualnie podstawiony pirydyloksyl.
Odpowiednie estry związków o wzorze (I) zawierających grupę hydroksylową obejmują np. octany, cytryniany, mleczany, winiany, maloniany, szczawiany, salicylany, propioniany, bursztyniany, fumarany, maleiniany, metyleno-bis-3-hydroksynaftoesany, gentyzyniany, izetioniany, di-p-toluoilowiniany, metanosulfoniany, etanosulfoniany, benzenosulfoniany, p-toluenosulfoniany, cykloheksyloamidosulfoniany i chiniany.
Odpowiednie estry związków o wzorze (I) zawierających grupę karboksylową obejmują np. opisane przez F.J.Leinweber, Drug Metab. Res., 1987, 18, str. 379.
Odpowiednie estry związków o wzorze (I) zawierających i grupę karboksylową i grupę hydroksy1 lową w części -L1-Y obejmują laktony utworzone na drodze kondensacji z utratą wody wymienionych grup karboksylowej i hydroksylowej. Przykłady takich laktonów obejmują kaprolaktony i butyrolaktony.
Szczególnie przydatną klasę estrów związków o wzorze (I) zawierających grupę hydroksylową można utworzyć z zastosowaniem grup kwasowych wybranych spośród opisanych przez Bundgaard i in., J. Med. Chem., 1989, 32, str. 2503-2507, i obejmujących podstawione (aminometylo)benzoesany, np. dialkiloaminometylobenzoesany, w których dwie grupy alkilowe mogą być ze sobą połączone i/lub rozdzielone atomem tlenu lub ewentualnie podstawionym atomem azotu, np. alkilowanym atomem azotu, a zwłaszcza (morfolinometylo)benzoesany, np. 3- lub 4-(morfolinometylo)benzoesany, i (4-alkilopiperazyn-1-ylo)-benzoesany, np. 3- lub 4-(4-alkilopiperazyn-1-ylo)benzoesany.
Gdy związek według wynalazku zawiera grupę karboksylową, może on tworzyć sole addycyjne z zasadami, które stanowią bardziej dogodną formę do stosowania; w praktyce zastosowanie formy soli jest tożsame zastosowaniu formy wolnego kwasu. Zasady, które można stosować w celu otrzymania soli addycyjnych z zasadami, obejmują korzystnie te, które po połączeniu z wolnym kwasem tworzą farmaceutycznie dopuszczalne sole, tj. sole, których kationy są nietoksyczne dla pacjenta w dawkach farmaceutycznych, tak, aby korzystnego działania hamującego wolnej zasady nie zakłócały efekty uboczne związane z kationami. Farmaceutycznie dopuszczalne sole, obejmujące sole metali alkalicznych i ziem alkalicznych, objęte zakresem wynalazku obejmują pochodzące od następujących zasad: wodorek sodu, wodorotlenek sodu, wodorotlenek potasu, wodorotlenek wapnia, wodorotlenek glinu, wodorotlenek litu, wodorotlenek magnezu, wodorotlenek cynku, amoniak, etylenodiamina, N-metyloglukamina, lizyna, arginina, ornityna, cholina, N,N'-dibenzyloetylenodiamina, chloroprokaina, dietanoloamina, prokaina, N-benzylofenetyloamina, dietyloamina, piperazyna, tris(hydroksymetylo)aminometan, wodorotlenek tetrametyloamoniowy itp.
Niektóre związki według niniejszego wynalazku są zasadowe i takie związki są przydatne w postaci wolnej zasady lub w postaci jej farmaceutycznie dopuszczalnej soli addycyjnej z kwasem.
Sole addycyjne z kwasami są bardziej dogodną formą do zastosowania; a w praktyce zastosowanie formy soli jest tożsame zastosowaniu formy wolnej zasady. Kwasy, które można stosować w celu przygotowania soli addycyjnych z kwasami obejmują korzystnie te, które, po połączeniu z wolną zasadą, tworzą farmaceutycznie dopuszczalne sole, tj. sole, których aniony są nietoksyczne dla pacjenta w dawkach farmaceutycznych, tak, aby korzystnego działania hamującego wolnej zasady nie zakłócały efekty uboczne związane z anionami. Chociaż korzystne są farmaceutycznie dopuszczalne sole wymienionych związków zasadowych, wszystkie sole addycyjne z kwasami są przydatne
PL 218 884 B1 jako źródła formy wolnej zasady nawet, jeśli konkretna sól per se jest pożądana tylko jako produkt pośredni, jak np. gdy sól tworzy się tylko dla celów oczyszczania i identyfikacji lub gdy stosuje się ją jako związek pośredni do przygotowania farmaceutycznie dopuszczalnej soli metodami wymiany jonowej. Farmaceutycznie dopuszczalne sole objęte zakresem wynalazku obejmują pochodzące od kwasów nieorganicznych i organicznych, i obejmują fluorowcowodorki, np. chlorowodorki i bromowodorki, siarczany, fosforany, azotany, amidosulfoniany, octany, cytryniany, mleczany, winiany, maloniany, szczawiany, salicylany, propioniany, bursztyniany, fumarany, maleiniany, metyleno-bis^-hydroksynaftoesany, gentyzyniany, izetioniany, di-p-toluoilowiniany, metanosulfoniany, etanosulfoniany, benzenosulfoniany, p-toluenosulfoniany, cykloheksyloamido-sulfoniany i chiniany.
Oprócz tego, że są one same przydatne jako aktywne związki, sole związków według wynalazku są przydatne do celów oczyszczania związków, np. poprzez wykorzystywanie różnic rozpuszcza lności pomiędzy solami i macierzystymi związkami, produktami ubocznymi i/lub substancjami wyjściowymi z zastosowaniem technik dobrze znanych fachowcom w tej dziedzinie.
1
W nawiązaniu do powyższego wzoru (I) poniżej wymieniono konkretne i korzystne grupy: R1 oznacza indolil ewentualnie podstawiony jedną lub więcej grup wybranych spośród -C(=O)Me, hy4 1 2 4 1 droksylu, tetrazolilu, 1,2,4-oksadiazolilu, pirydyny, R4,-C(=O)-NY1Y2, -NH2 i -OR4. R1 korzystniej oznacza ewentualnie podstawiony indol-3-il.
1
X1 może zwłaszcza oznaczać CH.
1
X1 może także w szczególności oznaczać C-OCH3.
1
X1 może także w szczególności oznaczać C-fenyl.
1
X1 może także w szczególności oznaczać grupę C-Cl.
1
X1 może także w szczególności oznaczać C-CN.
Należy zauważyć, że ten wynalazek obejmuje wszystkie odpowiednie kombinacje poszczególnych i korzystnych grup tu wymienionych.
Przykładową korzystną grupą związków według wynalazku są związki o wzorze (la):
w którym R2, R3 i X1 mają wcześniej podane znaczenia; R9 oznacza atom wodoru lub R4; R10 oznacza karboksyl, hydroksyl, tetrazolil, 1,2,4-oksadiazolil, pirydynę, R4, -C(=O)-NY1Y2, -OR4, -NHSO2-R7 lub -NH2; i p oznacza zero, liczbę całkowitą 1 lub 2; oraz farmaceutycznie dopuszczalne sole związków o wzorze (la).
Korzystne są związki o wzorze (la), w którym R9 oznacza:
(i) atom wodoru;
(ii) C1-4alkil [np. -CH3];
(iii) C1-4alkil podstawiony przez -C(=O)-NY1Y2 [np.
-r*v
-CH.
], lub h2cCH OH (iv) cykloalkiloalkil podstawiony przez hydroksyl [np. ].
Szczególnie korzystne są związki o wzorze (la), w którym R9 oznacza atom wodoru lub -CH3.
PL 218 884 B1
Korzystne są związki o wzorze (la), w którym R10 oznacza:
(i) hydroksyl;
(ii) -OR4, w którym R4 oznacza alkil [np. -OCH3];
(iii) -OR4, w którym R4 oznacza alkil lub cykloalkiloalkil podstawiony przez jedną lub więcej grup hydroksylowych [np. -CH2CH2OH, -OCH2CH2CH2OH, -OCH(CH3)CH2OH, -OCH2CH(OH)CH3, h2c—ch2 -O““C—ch2 , CH20H -OCH(OH)CH2OH lub -OCH2CH(OH)CH2OH];
(iv) -OR4, w którym R4 oznacza alkil podstawiony przez jedną lub więcej grup alkoksylowych [np. -OCH(CH3)CH2OCH3];
(v) -OR4, w którym R4 oznacza cykloalkil podstawiony przez -C(=O)-NY1Y2 [np.
H7C CH. H C—CH | | 2 2 | | 2 -o—ę—ch2 lub -o—c—ch2 ] ;
conh2 conhch3 (vi) -CONY1Y2 [np. -CONH2, -CONHCH3, -CONHCH(CH2OH)2, -CONHCH2CH2OH, -CONHC(CH3)2CH2OH, -CONHCH2CH2OCH3, -CONHCH2CH2CO2H, -CONHCH2CH2CONH, lub
(vii) karboksyl;
(viii) 1,2,4-oksadiazolil;
(ix) pirydynę; lub (x) tetrazolil lub N-metylotetrazolil są korzystne.
Szczególnie korzystne są związki o wzorze (la), w których R oznacza -OCH3,
Gdy p oznacza liczbę 1, R10 jest korzystnie przyłączony w pozycji 5 pierścienia indolilowego.
Gdy p oznacza liczbę 2, grupy R10 są korzystnie przyłączone w pozycjach 5 i 6 pierścienia indo lilowego.
Korzystna grupa związków według wynalazku obejmuje związki o wzorze (la), w którym:
R oznacza (i) atom wodoru, (ii) C1-4alkil [np. -CH3], (iii) C1-4alkil podstawiony przez -C(=O)-NY Y‘
[np.
] lub
(iv) cykloalkiloalkil podstawiony przez hydroksyl [np.
... . , . .... ]; R oznacza (i) hydroksyl, (ii) -OR4, w którym R4 oznacza alkil [np. -OCH3], (iii) -OR4, w którym R4 oznacza alkil lub cykloalkiloalkil podstawiony przez jedną lub więcej grup hydroksylowych [np. -OCH2CH2OH, -OCH2CH2CH2OH,
OCH2CH(OH)CH2OH, -OCH2CH(OH)CH3, -OCH(CH3)CH2OH lub CH2OH ]; (iv) -OR4, w którym R4 oznacza alkil podstawiony przez jedną lub więcej grup alkoksylowych [np. -OCH(CH3)CH2OCH3];
PL 218 884 B1 tł Γ·_/*ΪΙ
Π 2
-o—c—ch2 (v) -OR4, w którym R4 oznacza cykloalkil podstawiony przez -C(=O)-NY1Y2 [np. CONH2 lub
H.C—CH,
Ί I 2 -o—e--- ch2
CONHCH3]; (vii) karboksyl, (viii) 1,2,4-oksadiazolil, (ix) pirydynę lub (x) tetrazolil lub N-metylotetrazolil; grupa R10 jest przyłączona w pozycji 5 pier10 ścienia indolilowego gdy p oznacza liczbę 1 i grupy R10 są przyłączone w pozycjach 5 i 6 pierścienia indolilowego gdy p oznacza liczbę 2; oraz farmaceutycznie dopuszczalne sole i takich związków.
Przykładowe związki według wynalazku o wzorze (la) wybiera się spośród związków utworzonych przez przyłączenie atomu węgla (C*) jednego spośród fragmentów azaindolu (A2, A3, A5, A13 i A28) przedstawionych w Tablicy 1 do atomu węgla (*C) w pięcioczłonowym pierścieniu jednego spośród fragmentów (B1 do B6, B8 do B14 i B16 do B19) przedstawionych w Tablicy 2, i przyłączenie atomu węgla (C*) pierścienia fenylowego w jednym spośród fragmentów (B1 do B6, B8 do B14 i B16 do B19) przedstawionych w Tablicy 2 do atomu tlenu (*O) jednego spośród fragmentów (C1 do C17 i C19) przedstawionych w Tablicy 3.
Przykładowe związki według wynalazku o wzorze (la) wybiera się także ze związków utworzonych przez przyłączenie atomu węgla (C*) jednego spośród fragmentów azaindolu (A2, A3, A5, A13 i A28) przedstawionych w Tablicy 1 do atomu węgla (*C) w pięcioczłonowym pierścieniu jednego spośród fragmentów (B1 do B6, B8 do B14 i B16 do B19) przedstawionych w Tablicy 2, i przyłączenie atomu węgla (C*) pierścienia fenylowego w jednym spośród fragmentów (B1 do B6, B8 do B14 i B16 do B19) przedstawionych w Tablicy 2 do atomu węgla (*C) jednego spośród fragmentów (C20 do C24, C26, C28 do C34, C36 do C40, C42 do C43) przedstawionych w Tablicy 3.
Przykładowe związki według wynalazku o wzorze (la) wybiera się także ze związków utworzonych przez przyłączenie atomu węgla (C*) jednego spośród fragmentów azaindolu (A2, A3, A5, A13 i A28) przedstawionych w Tablicy 1 do atomu węgla (*C) w pięcioczłonowym pierścieniu jednego spośród fragmentów (B1 do B6, B8 do B14 i B16 do B19) przedstawionych w Tablicy 2, i przyłączenie atomu węgla (C*) pierścienia fenylowego w jednym spośród fragmentów (B1 do B6, B8 do B14 i B16 do B19) przedstawionych w Tablicy 2 do atomu azotu (*N) fragmentu (C45) lub atomu wodoru (*H, fragment (C46)) przedstawionych w Tablicy 3.
PL 218 884 B1
TABLICA 1
Al A2 c* L / N \ H
A3 N III c ΛΐΛ* H
A5 0^3 1 C* H
A13 f| c + H
A28 Cl N c* / N \ H
PL 218 884 B1
TABLICA 2
BI .— C* tP N \ ca3 B2 Tp \ H
B3 .—-c* Tp \ 0£E Oli B4 r— C* •i-P \ ch2oh
B5 r— C* p-' \ ch2ch2oh B6 r— C* P*' N \ CHjCHjCH^OH
B8 r— C* yP 'N o^CHa N--_ i?
B9 ,—c* γΡ \ CH, O^/ nh2 B10 Ok r; s VVv * o
PL 218 884 B1
Bil C* •fp \ CH. N—o c OH B12 -C* *C'^\-==7 ^N H p
B13 z—C* ch λ,ΟΗ a B14 r—c* •tP N \ OH
B16 —c* JT 'τθ *c \ _ / \ ^'N \ ch3
B17 ,—c* ]/ V-o \ H B18 ĆM u...................,f *
B19 P\. ’ίτ7 N \ H
B43 , Z=»l zu
PL 218 884 B1
PL 218 884 B1
C19 v t-OH *0— HO C20 O II *c—ch3
C21 *CH—CH2-CO2H C22 *CH—CH2-CONH2
C23 fi *C—NH— CH3 C24 0 II *C—NH—CH2-CH2-CONH2
C26 0 II *c—NH—CH2-CH2-CON (HJ CH3
C28 o 11 *C—OH
C29 fi *c—nh2 C30 0 II *c—NH HO-f V OH
C31 0 II *C—NH ' \ OH C32 0 II *C—NH HO OH
C33 0 11 *C—NH HO-\h C34 o II *c— NH—CH2-CH2-0H
C36 H /Nx *\\ /? N—N
C37 O C38 *C U
C39 *C'^>N U C40 νΛ
PL 218 884 B1
A2-B1-C1; A2-B1-C2;
A2-B1-C3; A2-B1-C4; A2-B1-C5; A2-B1-C6; A2-B1-C7; A2-B1-C8;
A2-B1-C9; A2-B1-C10; A2-B1-C11; A2-B1-C12; A2-B1-C13; A2-B1-C14;
A2-B1-C15; A2-B1-C16; A2-B1-C17; A2-B1-C19; A2-B1-C20;
A2-B1-C21; A2-B1-C22; A2-B1-C23; A2-B1-C24; A2-B1-C26;
A2-B1-C28; A2-B1-C29; A2-B1-C30; A2-B1-C31; A2-B1-C32;
A2-B1-C33; A2-B1-C34; A2-B1-C36; A2-B1-C37; A2-B1-C38;
A2-B1-C39; A2-B1-C40; A2-B1-C42; A2-B1-C43;
A2-B1-C45; A2-B1-C46; A3-B1-C1; A3-B1-C2; A3-B1-C3; A3-B1-C4;
A3-B1-C5; A3-B1-C6; A3-B1-C7; A3-B1-C8; A3-B1-C9; A3-B1-C10;
A3-B1-C11; A3-B1-C12; A3-B1-C13; A3-B1-C14; A3-B1-C15; A3-B1-C16;
A3-B1-C17; A3-B1-C19; A3-B1-C20; A3-B1-C21; A3-B1-C22;
A3-B1-C23; A3-B1-C24; A3-B1-C26; A3-B1-C28;
A3-B1-C29; A3-B1-C30; A3-B1-C31; A3-B1-C32; A3-B1-C33; A3-B1-C34;
A3-B1-C36; A3-B1-C37; A3-B1-C38; A3-B1-C39; A3-B1-C40;
A3-B1-C42; A3-B1-C43; A3-B1-C45; A3-B1-C46;
A5-B1-C1; A5-B1-C2;
A5-B1-C3; A5-B1-C4; A5-B1-C5; A5-B1-C6; A5-B1-C7; A5-B1-C8;
A5-B1-C9; A5-B1-C10; A5-B1-C11; A5-B1-C12; A5-B1-C13; A5-B1-C14;
A5-B1-C15; A5-B1-C16; A5-B1-C17; A5-B1-C19; A5-B1-C20;
A5-B1-C21; A5-B1-C22; A5-B1-C23; A5-B1-C24; A5-B1-C26;
A5-B1-C28; A5-B1-C29; A5-B1-C30; A5-B1-C31; A5-B1-C32;
PL 218 884 B1
A5-B1-C33; A5-B1-C34; AS-B1-C36; A5-B1-C37; A5-B1-C38;
A5-B1-C39; A5-B1-C40; A5-B1-C42; A5-B1-C43;
A5-B1-C45; A5-B1-C46:
A13-BI-C1; A13-B1-C2; A13-B1-C3; A13-B1-C4; A13-B1-C5; A13-B1-C6;
A13-B1-C7; A13-B1-C8; A13-B1-C9; A13-B1-C10; A13-B1-C11; A13-B1-C12;
A13-B1-C13; A13-B1-C14; A13-B1-C15; A13-B1-C16; A13-B1-C17;
A13-B1-C19; A13-B1-C20; A13-B1-C21; A13-BI-C22; A13-B1-C23; A13-B1-C24;
A13-B1-C2Ó; A13-B1-C28; A13-B1-C29; A13-B1-C30;
A13-B1-C31; A13-B1-C32; A13-B1-C33; A13-B1-C34; A13-B1-C36;
A13-B1-C37; A13-B1-C38; A13-B1-C39; A13-B1-C40; A13-B1-C42;
A13-B1-C43; A13-B1-C45; A13-B1-C46;
A28-B1-C1; A28-B1-C2; A28-B1-C3; A28-B1-C4: A28-B1-C5; A28-B1-C6;
A28-B1-C7; A28-B1-C8; A28-B1-C9; A28-B1-C10; A28-B1-C11; A28-B1-C12;
A28-BI-C13; A28-B1-C14; A28-B1-C15; Α28-Β1Ό6; A28-B1-C17;
A28-B1-C19; A28-B1-C20; A28-B1-C21; A28-B1-C22; A28-B1-C23; A28-B1-C24;
A28-B1-C26; A28-B1-C28; A28-B1-C29; A28-B1-C30;
A28-B1-C31: A28-B1-C32; A28-B1-C33; A28-B1-C34; A28-B1-C36;
A28-B1-C37; A28-B1-C38; A28-B1-C39; A28-B1-C40; A28-B1-C42;
A28-B1-C43; A28-B1-C45; A28-B1-C46;
A2-B2-C1; A2-B2-C2; A2-B2-C3; A2-B2-C4;
A2-B2-C5; A2-B2-C6; A2-B2-C7; A2-B2-C8; A2-B2-C9; A2-B2-C10;
A2-B2-C11; A2-B2-C12; A2-B2-C13; A2-B2-C14; A2-B2-C15; A2-B2-C16;
A2-B2-C17; A2-B2-C19; A2-B2-C20; A2-B2-C21; A2-B2-C22;
A2-B2-C23; A2-B2-C24; A2-B2-C26; A2-B2-C28;
A2-B2-C29; A2-B2-C30; A2-B2-C31; A2-B2-C32; A2-B2-C33; A2-B2-C34;
A2-B2-C36; A2-B2-C37; A2-B2-C38; A2-B2-C39; A2-B2-C40;
A2-B2-C42; A2-B2-C43; A2-B2-C45; A2-B2-C46;
A3-B2-C1; A3-B2-C2; A3-B2-C3; A3-B2-C4; A3-B2-C5; A3-B2-C6;
A3-B2-C7; A3-B2-C8; A3-B2-C9; A3-B2-C10; A3-B2-C11; A3-B2-C12;
A3-B2-C13; A3-B2-C14; A3-B2-C15; A3-B2-C16; A3-B2-C17;
A3-B2-C19; A3-B2-C2C; A3-B2-C21; A3-B2-C22; A3-B2-C23; A3-B2-C24;
A3-B2-C26; A3-B2-C28; A3-B2-C29; A3-B2-C30;
A3-B2-C31; A3-B2-C32; A3-B2-C33; A3-B2-C34; A3-B2-C36;
A3-B2-C37; A3-B2-C38; A3-B2-C39; A3-B2-C40; A3-B2-C42;
A3-B2-C43; A3-B2-C45; A3-B2-C46;
A5-B2-C1; A5-B2-C2; A5-B2-C3; A5-B2-C4;
PL 218 884 B1
A5-B2-C5;
A5-B2-C11;
A5-B2-C17;
A5-B2-C23;
A5-B2-C29;
A13-B2-C3;
A13-B2-C9;
A13-B2-C15;
A13-B2-C21;
A13-B2-C33;
A13-B2-C39;
A13-B2-C45;
A28-B2-C3;
A28-B2-C9;
A28-B2-C15;
A28-B2-C21;
A28-B2-C33;
A28-B2-C39;
A28-B2-C45;
A2-B3-C1;
A2-B3-C7;
A2-B3-C13;
A2-B3-C19;
A2-B3-C31;
A2-B3-C37;
A2-B3-C43;
A3-B3-C3;
A3-B3-C9;
A3-B3-C15;
A5-B2-C6;
A5-B2-C12;
A5-B2-C24;
A5-B2-C30;
A5-B2-C36;
A5-B2-C42;
A13-B2-C4;
A13-B2-C10;
A13-B2-C16;
A13-B2-C22;
A13-B2-C28;
A13-B2-C34;
A13-B2-C40;
A13-B2-C46;
A28-B2-C4;
A28-B2-C10;
A28-B2-C16;
A28-B2-C22;
A28B2-C28;
A28B2-C34;
A28-B2-C40;
A28-B2-C46;
A2-B3-C2;
A2-B3-C8;
A2-B3-C14;
A2-B3-C20;
A2-B3-C26;
A2-B3-C32;
A2-B3-C38;
A3-B3-C4;
A3-B3-C10;
A3-B3-C16;
A5-B2-C7;
A5-B2-C13;
A5-B2-C19;
A5-B2-C31;
A5-B2-C37;
A5-B2-C43;
A13-B2-C5;
A13-B2-C11;
A13-B2-C17;
A13-B2-C23;
A13-B2-C29;
A28-B2-C5;
A28-B2-C11;
A28-B2-C17;
A28-B2-C23;
A28-B2-C29;
A2-B3-C3;
A2-B3-C9;
A2-B3-C15;
A2-B3-C21;
A2-B3-C33;
A2-B3-C39;
A2-B3-C45;
A3-B3-C5;
A3-B3-C11;
A3-B3-C17;
A5-B2-C8;
A5-B2-C14;
A5-B2-C20;
A5-B2-C26;
A5-B2-C32;
A5-B2-C38;
A13-B2-C6;
A13-B2-C12;
A13-B2-C24;
A13-B2-C30;
A13-B2-C36;
A13-B2-C42;
A28-B2-C6;
A28-B2-C12;
A28-B2-C24;
A28-B2-C30;
A28-B2-C36;
A28-B2-C42;
A2-B3-C4;
A2-B3-C10;
A2-B3-C16;
A2-B3-C22;
A2-B3-C28;
A2-B3-C34;
A2-B3-C40;
A2-B3-C46;
A3-B3-C6;
A3-B3-C12;
A5-B2-C9;
A5-B2-C15;
A5-B2-C21;
A5-B2-C33;
A5-B2-C39;
AS-B2-C45;
A13-B2-C1;
A13-B2-C7;
A13-B2-CI3;
A13-B2-CI9;
A13-B2-C31;
A13-B2-C37;
A13-B2-C43;
A28-B2-C1;
A28-B2-C7;
A28-B2-C13;
A28-B2-C19;
A28-B2-C31;
A28-B2-C37;
A28-B2-C43;
A2-B3-C5;
A2-B3-C11;
A2-B3-C17;
A2-B3-C23;
A2-B3-C29;
A3-B3-C1;
A3-B3-C7;
A3-B3-C13;
A3-B3-C19;
A5-B2-C10;
A5-B2-C16;
A5-B2-C22;
A5-B2-C28;
A5-B2-C34;
A5-B2-C40;
A5-B2-C46;
A13-B2-C2;
A13-B2-C8;
A13-B2-C14;
A13-B2-C20;
A13-B2-C26;
A13-B2-C32;
A13-B2-C38;
A28-B2-C2;
A28-B2-C8;
A28-B2-C14;
A28-B2-C20;
A28-B2-C26;
A28-B2-C32;
A28-B2-C38;
A2-B3-C6;
A2-B3-C12;
A2-B3-C24;
A2-B3-C30;
A2-B3-C36;
A2-B3-C42;
A3-B3-C2;
A3-B3-C8;
A3-B3-C14;
A3-B3-C20;
PL 218 884 B1
A3-B3-C21; A3-B3-C22; A3-B3-C23; A3-B3-C24; A3-B3-C26;
A3-B3-C28; A3-B3-C29; A3-B3-C30; A3-B3-C31; A3-B3-C32;
A3-B3-C33; A3-B3-C34; A3-B3-C36; A3-B3-C37; A3-B3-C38;
A3-B3-C39; A3-B3-C40; A3-B3-C42; A3-B3-C43;
A3-B3-C45; A3-B3-C46;
A5-B3-C1; A5-B3-C2; A5-B3-C3; A5-B3-C4; A5-B3-C5; A5-B3-C6;
A5-B3-C7; A5-B3-C8; A5-B3-C9; A5-B3-C10; A5-B3-C11; A5-B3-C12;
A5-B3-C13; A5-B3-C14; A5-B3-C15; A5-B3-C16; A5-B3-C17;
A5-B3-C19; A5-B3-C20; A5-B3-C21; A5-B3-C22; A5-B3-C23; A5-B3-C24;
A5-B3-C26 A5-B3-C28; A5-B3-C29; A5-B3-C30;
A5-B3-C31; A5-B3-C32; A5-B3-C33; A5-B3-C34; A5-B3-C36;
A5-B3-C37; A5-B3-C38; A5-B3-C39; A5-B3-C40; A5-B3-C42;
A5-B3-C43; A5-B3-C45; A5-B3-C46;
A13-B3-C1; A13-B3-C2; A13-B3-C3; A13-B3-C4;
A13-B3-C5; A13-B3-C6; A13-B3-C7; A13-B3-C8; A13-B3-C9; A13-B3-C10;
A13-B3-C11; A13-B3-C12; A13-B3-C13; A13-B3-C14; A13-B3-C15; A13-B3-C16;
A13-B3-C17; A13-B3-C19; A13-B3-C20; A13-B3-C21; A13-B3-C22;
A13-B3-C23; A13-B3-C24; A13-B3-C26; A13-B3-C28;
A13-B3-C29; A13-B3-C30; A13-B3-C31; A13-B3-C32; A13-B3-C33; A13-B3-C34;
A13-B3-C36; AI3-B3-C37; A13-B3-C38; A13-B3-C39; A13-B3-C40;
A13-B3-C42; AI3-B3-C43; A13-B3-C45; A13-B3-C46;
A28-B3-C1; A28-B3-C2; A28-B3-C3; A28-B3-C4;
A28-B3-C5; A28-B3-C6; A28-B3-C7; A28-B3-C8; A28-B3-C9; A28-B3-C10;
A28-B3-C11; A28-B3-C12; A28-B3-C13; A28-B3-C14; A28-B3-C15; A28-B3-C16;
A28-B3-C17; A28-B3-C19; A28-B3-C20; A28-B3-C21; A28-B3-C22;
A28-B3-C23; A28-B3-C24; A28-B3-C26; A28-B3-C28;
A28-B3-C29; A28-B3-C30; A28-B3-C31; A28-B3-C32; A28-B3-C33; A28-B3-C34;
A28-B3-C36; A28-B3-C37; A28-B3-C38; A28-B3-C39; A28-B3-C40;
A28-B3-C42; A28-B3-C43; A28-B3-C45; A28-B3-C46;
A2-B4-C1; A2-B4-C2;
A2-B4-C3; A2-B4-C4; A2-B4-C5; A2-B4-C6; A2-B4-C7; A2-B4-C8;
A2-B4-C9; A2-B4-C10; A2-B4-C11; A2-B4-C12; A2-B4-C13; A2-B4-C14;
A2-B4-C15; A2-B4-C16; A2-B4-C17; A2-B4-C19; A2-B4-C20;
A2-B4-C21; A2-B4-C22; A2-B4-C23; A2-B4-C24; A2-B4-C26;
A2-B4-C28; A2-B4-C29; A2-B4-C30; A2-B4-C31; A2-B4-C32;
A2-B4-C33; A2-B4-C34; A2-B4-C36; A2-B4-C37; A2-B4-C38;
PL 218 884 B1
A2-B4-C39; A2-B4-C40; A2-B4-C42; A2-B4-C43;
A2-B4-C45; A2-B4-C46; A3-B4-C1; A3-B4-C2; A3-B4-C3; A3-B4-C4;
A3-B4-C5; A3-B4-C6; A3-B4-C7; A3-B4-C8; A3-B4-C9; A3-B4-C10;
A3-B4-C11; A3-B4-C12; A3-B4-C13; A3-B4-C14; A3-B4-C15; A3-B4-C16;
A3-B4-C17; A3-B4-C19; A3-B4-C20; A3-B4-C21; A3-B4-C22;
A3-B4-C23; A3-B4-C24; A3-B4-C26; A3-B4-C28;
A3-B4-C29; A3-B4-C30; A3-B4-C31; A3-B4-C32; A3-B4-C33; A3-B4-C34;
A3-B4-C36; A3-B4-C37; A3-B4-C38; A3-B4-C39; A3-B4-C40;
A3-B4-C42; A3-B4-C43; A3-B4-C45; A3-B4-C46;
A5-B4-C1; A5-B4-C2;
A5-B4-C3; A5-B4-C4; A5-B4-C5; A5-B4-C6; A5-B4-C7; A5-B4-C8;
A5-B4-C9; A5-B4-C10; A5-B4-C11; A5-B4-C12; A5-B4-C13; A5-B4-C14;
A5-B4-C15; A5-B4-C16; A5-B4-CL7; A5-B4-C19; A5-B4-C20;
A5-B4-C21; A5-B4-C22; A5-B4-C23; A5-B4-C24; A5-B4-C26;
A5-B4-C28; A5-B4-C29; A5-B4-C30; A5-B4-C31; A5-B4-C32;
A5-B4-C33; A5-B4-C34; A5-B4-C36; A5-B4-C37; A5-B4-C38;
A5-B4-C39; A5-B4-C40; A5-B4-C42; A5-B4-C43;
A5-B4-C45; A5-B4-C46;
A13-B4-C1; A13-B4-C2; A13-B4-C3; A13-B4-C4; A13-B4-C5; A13-B4-C6;
A13-B4-C7; A13-B4-C8; A13-B4-C9; A13-B4-C10; A13-B4-C11; A13-B4-C12;
A13-B4-C13; A13-B4-C14; A13-B4-C15; A13-B4-C16; A13-B4-C17;
A13-B4-C19; A13-B4-C20; A13-B4-C21; A13-B4-C22; A13-B4-C23; A13-B4-C24;
A13-B4-C26; A13-B4-C28; A13-B4-C29; A13-B4-C30;
AI3-B4-C31; A13-B4-C32; A13-B4-C33; A13-B4-C34; A13-B4-C36;
A13-B4-C37; A13-B4-C38; A13-B4-C39; A13-B4-C40; A13-B4-C42;
A13-B4-C43; A13-B4-C45; A13-B4-C46;
A28-B4-C1; A28-B4-C2; A28-B4-C3; A28-B4-C4; A28-B4-C5; A28-B4-C6;
A28-B4-C7; A28-B4-C8; A28-B4-C9; A28-B4-C10; A28-B4-C11; A28-B4-C12;
A28-B4-C13; A28-B4-C14; A28-B4-C15; A28-B4-C16; A28-B4-C17;
A28-B4-C19; A28-B4-C20; A28-B4-C21; A28-B4-C22; A28-B4-C23; A28-B4-C24;
A28-B4-C26; A28-B4-C28; A28-B4-C29; A28-B4-C30;
A28-B4-C31; A28-B4-C32; A28-B4-C33; A28-B4-C34; A28-B4-C36;
A28-B4-C37; A28-B4-C38; A28-B4-C39; A28-B4-C40; A28-B4-C42;
A28-B4-C43; A28-B4-C45; A28-B4-C46;
A2-B5-C1; A2-B5-C2; A2-B5-C3; A2-B5-C4;
A2-B5-C5; A2-B5-C6; A2-B5-C7; A2-B5-C8; A2-B5-C9; A2-B5-C10;
PL 218 884 B1
A2-B5-C11; A2-B5-C17; A2-B5-C23; A2-B5-C29;
A3-B5-C1;
A3-B5-C7;
A3-B5-C13;
A3-B5-C19;
A3-B5-C31;
A3-B5-C37;
A3-B5-C43;
A5-B5-C5;
A5-B5-C11;
A5-B5-C17;
A5-B5-C23;
A5-B5-C29;
A13-B5-C3;
A13-B5-C9;
A13-B5-C15;
A13-B5-C21;
A13-B5-C33;
A13-B5-C39;
A13-B5-C45;
A28-B5-C3;
A28-B5-C9;
A28-B5-C15;
A28-B5-C21;
A2-B5-C12;
A2-B5-C24;
A2-B5-C30;
A2-B5-C36;
A2-B5-C42;
A3-B5-C2;
A3-B5-C8;
A3-B5-C14;
A3-B5-C29;
A3-B5-C26;
A3-B5-C32;
A3-B5-C38;
A5-B5-C6;
A5-B5-C12;
A5-B5-C24;
A5-B5-C30;
A5-B5-C36;
A5-B5-C42;
A13-B5-C4;
A13-B5-C10;
A13-B5-C16;
A13-B5-C22;
A13-B5-C28;
A13-B5-C34;
A13-B5-C40;
A13-B5-C46;
A28-B5-C4;
A28-B5-C10;
A28-B5-C16;
A28-B5-C22;
A2-B5-C13;
A2-B5-C19;
A2-B5-C31;
A2-B5-C37;
A2-B5-C43;
A3-B5-C3;
A3-B5-C9;
A3-B5-C15;
A3-B5-C21;
A3-B5-C33;
A3-B5-C39;
A3-B5-C45;
A5-B5-C1;
A5-B5-C7;
A5-B5-C13;
A5-B5-C19;
A5-B5-C31;
A5-B5-C37;
A5-B5-C43;
A13-BS-C5; A13-B5-C11; A13-B5-C17; A13-B5-C23; A13-B5-C29;
A28-B5-C5;
A28-B5-C1I;
A28-B5-C17;
A28-B5-C23;
A2-B5-C14;
A2-B5-C20;
A2-B5-C26;
A2-B5-C32;
A2-B5-C38;
A3-B5-C4;
A3-B5-C10;
A3-B5-C16;
A3-B5-C22;
A3-B5-C28;
A3-B5-C34;
A3-B5-C40;
A3-B5-C46;
A5-B5-C2;
A5-B5-C8;
A5-B5-C14;
A5-B5-C20;
A5-B5-C26;
A5-B5-C32;
A5-B5-C38;
A13-B5-C6;
A13-B5-C12;
A13-B5-C24;
A13-B5-C30;
A13-B5-C36;
A13-B5-C42;
A28-B5-C6;
A28-B5-C12;
A28-B5-C24;
A2-B5-C15;
A2-B5-C21;
A2-B5-C33;
A2-B5-C39;
A2-B5-C45;
A3-B5-C5;
A3-B5-C11;
A3-B5-C17;
A3-B5-C23;
A3-B5-C29;
A5-B5-C3;
A5-B5-C9;
A5-B5-C15;
A5-B5-C21;
A5-B5-C33;
A5-B5-C39;
A5-B5-C45;
A13-B5-C1;
A13-B5-C7;
A13-B5-C13;
A13-B5-C19;
A13-B5-C31;
A13-B5-C37;
A13-B5-C43;
A28-B5-C1;
A28-B5-C7;
A28-B5-C13;
A28-B5-C19;
A2-B5-C16;
A2-B5-C22;
A2-B5-C28;
A2-B5-C34;
A2-B5-C40;
A2-B5-C46;
A3-B5-C6;
A3-B5-C12;
A3-B5-C24;
A3-B5-C30;
A3-B5-C36;
A3-B5-C42;
A5-B5-C4;
A5-B5-C1O;
A5-B5-C16;
A5-B5-C22;
A5-B5-C28;
A5-B5-C34;
A5-B5-C40;
A5-B5-C46;
A13-B5-C2;
A13-B5-C8;
A13-B5-C14;
A13-B5-C20;
A13-B5-C26;
A13-B5-C32;
A13-B5-C38;
A28-B5-C2;
A28-B5-C8;
A28-B5-C14;
A28-B5-C20;
A28-B5-C26;
PL 218 884 B1
A28-B5-C33;
A28-B5-C39;
A28-B5-C45;
A2-B6-C1;
A2-B6-C7;
A2-B6-C13;
A2-B6-C19;
A2-B6-C31;
A2-B6-C37;
A2-B6-C43;
A3-B6-C3;
A3-B6-C9;
A3-B6-C15;
A3-B6-C2I;
A3-B6-C33;
A3-B6-C39;
A3-B6-C45;
A5-B6-C1;
A5-B6-C7;
A5-B6-C13;
A5-B6-C19;
A5-B6-C31;
A5-B6-C37;
A5-B6-C43;
A13-B6-C5;
A13-B6-C11;
A13-B6-C17;
A13-B6-C23;
AI3-B6-C29;
A28-B5-C28;
A28-B5-C34;
A28-B5-C40;
A28-B5-C46;
A2-B6-C2;
A2-B6-C8;
A2-B6-C14;
A2-B6-C20;
A2-B6-C26;
A2-B6-C32;
A2-B6-C38;
A3-B6-C4;
A3-B6-C10;
A3-B6-C16;
A3-B6-C22;
A3-B6-C28;
A3-B6-C34;
A3-B6-C40;
A3-B6-C46;
A5-B6-C2;
A5-B6-C8;
A5-B6-C14;
A5-B6-C20;
A5-B6-C26;
A5-B6-C32;
A5-B6-C38;
A13-B6-C6;
A13-B6-C12;
A13-B6-C24;
A13-B6-C30;
A13-B6-C36;
A13-B6-C42;
A28-B5-C29;
A2-B6-C3;
A2-B6-C9;
A2-B6-C15;
A2-B6-C21;
A2-B6-C33;
A2-B6-C39;
A2-B6-C45;
A3-B6-C5;
A3-B6-C11;
A3-B6-C17;
A3-B6-C23;
A3-B6-C29;
A5-B6-C3;
A5-B6-C9;
A5-B6-C15;
A5-B6-C21;
A5-B6-C33;
A5-B6-C39;
A5-B6-C45;
A13-B6-C1;
A13-B6-C7;
A13-B6-C13;
A13-B6-C19;
A13-B6-C31;
A13-B6-C37;
A13-B6-C43;
A28-B5-C30;
A28-B5-C36;
A28-B5-C42;
A2-B6-C4;
A2-B6-C10;
A2-B6-C16;
A2-B6-C22;
A2-B6-C28;
A2-B6-C34;
A2-B6-C40;
A2-B6-C46;
A3-B6-C6;
A3-B6-CI2;
A3-B6-C24;
A3-B6-C30;
A3-B6-C36;
A3-B6-C42;
A5-B6-C4;
A5-B6-C10;
A5-B6-C16;
A5-B6-C22;
A5-B6-C28;
A5-B6-C34;
A5-B6-C40;
A5-B6-C46;
A13-B6-C2;
A13-B6-C8;
A13-B6-C14;
A13-B6-C20;
A13-B6-C26;
A13-B6-C32;
A13-B6-C38;
A28-B5-C31;
A28-B5-C37;
A28-B5-C43;
A2-B6-C5;
A2-B6-C11;
A2-B6-C17;
A2-B6-C23;
A2-B6-C29;
A3-B6-C1;
A3-B6-C7;
A3-B6-C13;
A3-B6-C19;
A3-B6-C31;
A3-B6-C37;
A3-B6-C43;
A5-B6-C5;
A5-B6-C11;
A5-B6-C17;
A5-B6-C23;
A5-B6-C29;
A13-B6-C3;
A13-BÓ-C9;
A13-B6-C15;
A13-B6-C21;
A13-B6-C33;
A13-B6-C39;
A13-B6-C45;
A28-B5-C32;
A28-B5-C38;
A2-B6-C6;
A2-B6-C12;
A2-B6-C24;
A2-B6-C30;
A2-B6-C36;
A2-B6-C42;
A3-B6-C2;
A3-B6-C8;
A3-B6-C14;
A3-B6-C20;
A3-B6-C26;
A3-B6-C32;
A3-B6-C38;
A5-B6-C6;
A5-B6-C12;
A5-B6-C24;
A5-B6-C30;
A5-B6-C36;
A5-BÓ-C42;
A13-B6-C4;
A13-B6-C10;
A13-B6-C16;
A13-B6-C22;
A13-B6-C28;
A13-B6-C34;
A13-B6-C40;
A13-B6-C46;
PL 218 884 B1
A28-B6-C5;
A28-B6-C11;
A28-B6-C17;
A28-B6-C23;
A28-B6-C29;
A2-B8-C5;
A2-B8-C11;
A2-B8-C17;
A2-B8-C23;
A2-B8-C29;
A3-B8-C1;
A3-B8-C7;
A3-B8-C13;
A3-B8-C19;
A3-B8-C31;
A3-B8-C37;
A3-B8-C43;
A5-B8-C5;
A5-B8-C11;
A5-B8-C17;
A5-B8-C23;
A5-B8-C29;
A13-B8-C3;
A13-B8-C9;
A13-B8-C15;
A28-BÓ-C6;
A28-B6-C12;
A28-B6-C24;
A28-B6-C30;
A28-B6-C36;
A28-B6-C42;
A2-B8-C6;
A2-B8-C12;
A2-B8-C24;
A2-B8-C30;
A2-B8-C36;
A2-B8-C42;
A3-B8-C2;
A3-B8-C8;
A3-B8-C14;
A3-B8-C20;
A3-B8-C26;
A3-B8-C32;
A3-B8-C38;
A5-B8-C6;
A5-B8-C12;
A5-B8-C24;
A5-B8-C30;
A5-B8-C36;
A5-B8-C42;
A13-B8-C4;
A13-B8-C10;
A13-B8-C16;
A28-B6-C1;
A28-B6-C7;
A28-B6-C13;
A28-B6-C19;
A28-B6-C31;
A28-B6-C37;
A28-B6-C43;
A2-B8-C1;
A2-B8-C7;
A2-B8-C13;
A2-B8-C19;
A2-B8-C3I;
A2-B8-C37;
A2-B8-C43;
A3-B8-C3;
A3-B8-C9;
A3-B8-C15;
A3-B8-C21;
A3-B8-C33;
A3-B8-C39;
A3-B8-C45;
A5-B8-C1;
A5-B8-C7;
A5-B8-C13;
A5-B8-C19;
A5-B8-C31;
A5-B8-C37;
A5-B8-C43;
A13-B8-C5;
A13-B8-CH;
A13-B8-C17;
A28-B6-C2;
A28-B6-C8;
A28-B6-C14;
A28-B6-C20;
A28-B6-C26;
A28-B6-C32;
A28-B6-C38;
A2-B8-C2;
A2-B8-C8;
A2-B8-C14;
A2-B8-C20;
A2-B8-C26;
A2-B8-C32;
A2-B8-C38;
A3-B8-C4;
A3-B8-C10;
A3-B8-C16;
A3-B8-C22;
A3-B8-C28;
A3-B8-C34;
A3-B8-C40;
A3-B8-C46;
A5-B8-C2;
A5-B8-C8;
A5-B8-CI4;
A5-B8-C20;
A5-B8-C26;
A5-B8-C32;
A5-B8-C38;
AJ3-B8-C6;
A13-B8-C12;
A28-B6-C3;
A28-B6-C9;
A28-B6-C15;
A28-B6-C21;
A28-B6-C33;
A28-B6-C39;
A28-B6-C45;
A2-B8-C3;
A2-B8-C9;
A2-B8-C15;
A2-B8-C21;
A2-B8-C33;
A2-B8-C39;
A2-B8-C45;
A3-B8-C5;
A3-B8-C11;
A3-B8-C17;
A3-B8-C23;
A3-B8-C29;
A5-B8-C3;
A5-B8-C9;
A5-B8-C15;
A5-B8-C21;
A5-B8-C33;
A5-B8-C39;
A5-B8-C45;
A13-B8-C1;
A13-B8-C7;
A13-B8-C13;
A13-B8-C19;
A28-B6-C4;
A28-B6-C10;
A28-BÓ-C16;
A28-B6-C22;
A28-B6-C28;
A28-B6-C34;
A28-B6-C40;
A28-B6-C46;
A2-B8-C4;
A2-B8-C10;
A2-B8-C16;
A2-B8-C22;
A2-B8-C28;
A2-B8-C34;
A2-B8-C40;
A2-B8-C46;
A3-B8-C6;
A3-B8-C12;
A3-B8-C24;
A3-B8-C30;
A3-B8-C36;
A3-B8-C42;
A5-B8-C4;
A5-B8-C10;
A5-B8-C16;
A5-B8-C22;
A5-B8-C28;
A5-B8-C34;
A5-B8-C40;
A5-B8-C46;
A13-B8-C2;
A13-B8-C8;
A13-B8-C14;
A13-B8-C20;
PL 218 884 B1
A13-B8-C21; A13-B8-C22; A13-B8-C23; A13-B8-C24; A13-B8-C26;
A13-B8-C28; A13-B8-C29; A13-B8-C3O; A13-B8-C31; A13-B8-C32;
A13-B8-C33; A13-B8-C34; A13-B8-C36; A13-B8-C37; A13-B8-C38;
A13-B8-C39; A13-B8-C40; A13-B8-C42; A13-B8-C43;
A13-B8-C45; A13-B8-C46;
A28-B8-C1; A28-B8-C2;
A28-B8-C3; A28-B8-C4; A28-B8-C5; A28-B8-C6; A28-B8-C7; A28-B8-C8;
A28-B8-C9; A28-B8-C10; A28-B8-C11; A28-B8-C12; A28-B8-C13; A28-B8-C14;
A28-B8-C15; A28-B8-C16; A28-B8-C17; A28-B8-C19; A28-B8-C20;
A28-B8-C21; A28-B8-C22; A28-B8-C23; A28-B8-C24; A28-B8-C26;
A28-B8-C28; A28-B8-C29; A28-B8-C30; A28-B8-C31; A28-B8-C32;
A28-B8-C33; A28-B8-C34; A28-B8-C36; A28-B8-C37; A28-B8-C38;
A28-B8-C39; A28-B8-C40; A28-B8-C42; A28-B8-C43;
A28-B8-C45; A28-B8-C46;
A2-B9-C1; A2-B9-C2; A2-B9-C3; A2-B9-C4; A2-B9-C5; A2-B9-C6;
A2-B9-C7; A2-B9-C8; A2-B9-C9; A2-B9-C10; A2-B9-C11; A2-B9-C12;
A2-B9-C13; Α2-Β9Ό4; A2-B9-C15; A2-B9-C16; A2-B9-C17;
A2-B9-C19; A2-B9-C20; A2-B9-C21; A2-B9-C22; A2-B9-C23; A2-B9-C24;
A2-B9-C26; A2-B9-C28; A2-B9-C29; A2-B9-C30;
A2-B9-C31; A2-B9-C32; A2-B9-C33; A2-B9-C34; A2-B9-C36;
A2-B9-C37; A2-B9-C38; A2-B9-C39; A2-B9-C40; A2-B9-C42;
A2-B9-C43; A2-B9-C45; A2-B9-C46; A3-B9-C1; A3-B9-C2;
A3-B9-C3; A3-B9-C4; A3-B9-C5; A3-B9-C6; A3-B9-C7; A3-B9-C8;
A3-B9-C9; A3-B9-C10; A3-B9-C11; A3-B9-C12; A3-B9-C13; A3-B9-C14;
A3-B9-C15; A3-B9-C16; A3-B9-C17; A3-B9-C19; A3-B9-C20;
A3-B9-C21; A3-B9-C22; A3-B9-C23; A3-B9-C24; A3-B9-C26;
A3-B9-C28; A3-B9-C29; A3-B9-C30; A3-B9-C31; A3-B9-C32;
A3-B9-C33; A3-B9-C34; A3-B9-C36; A3-B9-C37; A3-B9-C38;
A3-B9-C39; A3-B9-C40; A3-B9-C42; A3-B9-C43;
A3-B9-C45; A3-B9-C46;
A5-B9-C1; A5-B9-C2; A5-B9-C3; A5-B9-C4; A5-B9-C5; A5-B9-C6;
A5-B9-C7; A5-B9-C8; A5-B9-C9; A5-B9-C10; A5-B9-C11; A5-B9-C12;
A5-B9-C13; A5-B9-C14; A5-B9-C15; A5-B9-C16; A5-B9-C17;
A5-B9-C19; A5-B9-C20; A5-B9-C21; A5-B9-C22; A5-B9-C23; A5-B9-C24;
A5-B9-C26; A5-B9-C28; A5-B9-C29; A5-B9-C30;
A5-B9-C31; A5-B9-C32; A5-B9-C33; A5-B9-C34; A5-B9-C36;
PL 218 884 B1
A5-B9-C37;
A5-B9-C43;
A13-B9-C5;
A13-B9-C11;
A13-B9-C17;
A13-B9-C23;
A33-B9-C29;
A28-B9-C5;
A28-B9-C11;
A28-B9-C17;
A28-B9-C23;
A28-B9-C29;
A2-BI0-C3;
A2-BI0-C9;
A2-B10-C15;
A2-B10-C21;
A2-B10-C33;
A2-B10-C39;
A2-B10-C45;
A3-B10-C5;
A3-B10-C11;
A3-B10-C17;
A3-B10-C23;
A3-B10-C29;
A5-B9-C38;
A13-B9-C6;
A13-B9-C12;
A13-B9-C24;
A13-B9-C30;
A13-B9-C36;
A13-B9-C42;
A28-B9-C6;
A28-B9-C12;
A28-B9-C24;
A28-B9-C30;
A28-B9-C36;
A28-B9-C42;
A2-B10-C4;
A2-B10-C10;
A2-B10-C16;
A2-B10-C22;
A2-B10-C28;
A2-B10-C34;
A2-B10-C40;
A2-B10-C46;
A3-B10-C6;
A3-B10-C12;
A3-B10-C24;
A3-B10-C30;
A3-B10-C36;
A3-B10-C42;
A5-B10-C4;
A5-B9-C39;
A5-B9-C45;
A13-B9-C1;
A13-B9-C7;
A13-B9-C13;
A13-B9-C19;
A13-B9-C31;
A13-B9-C37;
A13-B9-C43;
A28-B9-C1;
A28-B9-C7;
A28-B9-C13;
A28-B9-C19;
A28-B9-C31;
A28-B9-C37;
A28-B9-C43;
A2-B10-C5;
A2-BI0-C11;
A2-B10-C17;
A2-B10-C23;
A2-B10-C29;
A3-B10-C1;
A3-B10-C7;
A3-B10-C13;
A3-B10-C19;
A3-B10-C31;
A3-B10-C37;
A3-B10-C43;
A5-B10-C5;
A5-B9-C40;
A5-B9-C46;
A13-B9-C2;
A13-B9-C8;
A13-B9-C14;
A13-B9-C20;
A13-B9-C26;
A13-B9-C32;
A13-B9-C38;
A28-B9-C2;
A28-B9-C8;
A28-B9-C14;
A28-B9-C20;
A28-B9-C26;
A28-B9-C32;
A28-B9-C38;
A2-B10-C6;
A2-B10-C12;
A2-B10-C24;
A2-B10-C30;
A2-BI0-C36;
A2-B10-C42;
A3-B10-C2;
A3-B10-C8;
A3-B10-C14;
A3-B10-C20;
A3-B10-C26;
A3-B10-C32;
A3-B10-C38;
A5-B10-C6;
A13-B9-C3;
A13-B9-C9;
A13-B9-C15;
A13-B9-C21;
A13-B9-C33;
A13-B9-C39;
A13-B9-C45;
A28-B9-C3;
A28-B9-C9;
A28-B9-C15;
A28-B9-C21;
A28-B9-C33;
A28-B9-C39;
A28-B9-C45;
A2-B10-CI;
A2-B10-C7;
A2-B10-C13;
A2-B10-C19;
A2-B10-C31;
A2-B10-C37;
A2-B10-C43;
A3-B10-C3;
A3-B10-C9;
A3-B10-C15;
A3-B10-C21;
A3-B10-C33;
A3-B10-C39;
A3-B10-C45;
A5-B10-C1;
A5-B10-C7;
A5-B9-C42;
A13-B9-C4;
A13-B9-C10;
A13-B9-C16;
A13-B9-C22;
A13-B9-C28;
A13-B9-C34;
A13-B9-C40;
A13-B9-C46;
A28-B9-C4;
A28-B9-C10;
A28-B9-C16;
A28-B9-C22;
A28-B9-C28;
A28-B9-C34;
A28-B9-C40;
A28-B9-C46;
A2-B10-C2;
A2-B10-C8;
A2-B10-C14;
A2-B10-C20;
A2-B10-C26;
A2-B10-C32;
A2-B1O-C38;
A3-Bi0-C4;
A3-B10-C10;
A3-B10-C16;
A3-B10-C22;
A3-B10-C28;
A3-B10-C34;
A3-B10-C40;
A3-B10-C46;
A5-B10-C2;
A5-B10-C8;
A5-B10-C3;
PL 218 884 B1
A5-B10-C9;
A5-B10-C15;
A5-B10-C21;
A5-B10-C33;
A5-B10-C39;
A5-B10-C45;
A13-B10-C1;
A13-B10-C7;
A13-B10-C13;
A13-B10-C19;
A13-B10-C31;
A13-B10-C37;
A13-B10-C43;
A28-B10-C1;
A28-B10-C7;
A28-B10-CI3;
A28-B10-C19;
A28-B10-C31;
A28-B10-C37;
A28-B10-C43;
A2-B11-C5; A2-B11-C11; A2-B11-C17; A2-B11-C23; Α2-Β11-C29;
A3-B11-C1;
A3-B11-C7;
A3-B11-C13;
A3-B11-C19;
A5-B10-C10;
A5-B10-CI6;
A5-B10-C22;
A5-B10-C28;
A5-B10-C34;
A5-B10-C40;
A5-B10-C46;
A13-B10-C2;
A13-B1O-C8;
A13-B10-C14;
A13-B10-C20;
A13-B10-C26;
A13-B10-C32;
A13-B1O-C38;
A28-B10-C2;
A28-B10-C8;
A28-B10-C14;
A28-B10-C20;
A28-B10-C26;
A28-B10-C32;
A28-B10-C38;
A2-B11-C6;
A2-B11-C12;
A2-B11-C24;
A2-B11-C30;
A2-B11-C36;
A2-B11-C42;
A3-B11-C2;
A3-B11-C8;
A3-B11-C14;
A3-B11-C20;
A3-B11-C26;
A5-B10-C11;
A5-B10-C17;
A5-B1O-C23;
A5-B10-C29;
A13-B10-C3;
A13-B10-C9;
A13-B10-C15;
A13-B10-C21;
A13-B10-C33;
A13-B10-C39;
A13-B10-C45;
A28-B10-C3;
A28-B10-C9;
A28-B10-C15;
A28-B10-C21;
A28-B10-C33;
A28-B10-C39;
A28-B10-C45;
A2-B11-C1;
A2-B11-C7;
A2-B11-C13;
A2-B11-C19;
A2-B11-C31;
A2-B11-C37;
A2-B11-C43;
A3-B11-C3;
A3-B11-C9;
A3-B11-C15;
A3-B11-C21;
A5-B10-C12;
A5-B10-C24;
A5-B10-C30;
A5-B10-C36;
A5-B10-C42;
A13-B10-C4;
A13-B10-C10;
A13-B10-C16;
A13-B10-C22;
A13-B10-C28;
A13-B10-C34;
A13-B10-C40;
A13-B10-C4S;
A28-B10-C4;
A28-B10-C10;
A28-B10-C16;
A28-B10-C22;
A28-B10-C28;
A28-B10-C34;
A28-B10-C40;
A28-B10-C46;
A2-B11-C2;
A2-B11-C8;
A2-B11-C14;
A2-B11-C20;
A2-B11-C26;
A2-B11-C32;
A2-B11-C38;
A3-B11-C4;
A3-B11-C10;
A3-B11-C16;
A3-B11-C22;
A3-B11-C28;
A5-B1O-C13;
A5-B10-C19;
A5-B10-C31;
A5-B10-C37;
A5-B10-C43;
A13-B10-C5; A13-BI0-C11; A13-B10-C17; A13-B10-C23; A13-B10-C29;
A28-B10-C5;
A28-B10-C11;
A28-B10-C17;
A28-B10-C23;
A28-B10-C29;
A2-B11-C3;
A2-B11-C9;
A2-B11-C15;
A2-B11-C21;
A2-B11-C33;
A2-B11-C39;
A2-B11-C45;
A3-B11-C5;
A3-B11-C11;
A3-B11-C17;
A3-B11-C23;
A3-B11-C29;
A5-B10-C14;
A5-B10-C20;
A5-B10-C26;
A5-B10-C32;
A5-B10-C38;
A13-B10-C6;
A13-B10-C12;
A13-B10-C24;
A13-B10-C30;
A13-B10-C36;
A13-B10-C42;
A28-B10-C6;
A28-B10-C12;
A28-B10-C24;
A28-B10-C30;
A28-B10-C36;
A28-B10-C42;
A2-B11-C4;
A2-B11-C10;
A2-B11-C16;
A2-B11-C22;
A2-B11-C28;
A2-B11-C34;
A2-B11-C40;
A2-B11-C46;
A3-B11-C6;
A3-B11-C12;
A3-B11-C24;
A3-B11-C30;
PL 218 884 B1
A3-B11-C31; A3-B11-C32; A3-B11-C33; A3-B11-C34; A3-B11-C36;
A3-B11-C37; A3-B11-C38; A3-B11-C39; A3-B11-C40; A3-B11-C42;
A3-B11-C43; A3-B11-C45; A3-B11-C46;
A5-B11-C1; A5-B11-C2; A5-B11-C3; A5-B11-C4;
A5-B11-C5; A5-B11-C6; A5-B11-C7; A5-B11-C8; A5-B11-C9; A5-B11-C10;
A5-B11-C11; A5-B11-C12; A5-B11-C13; A5-B11-C14; A5-B11-C15; A5-B11-06;
A5-B11-C17; A5-B11-C19; A5-B11-C20; A5-B11-C21; A5-B11-C22;
A5-B11-C23; A5-B11-C24; A5-B11-C26; A5-B11-C28;
A5-B11-C29; A5-B11-C30; A5-B11-C31; A5-B11-C32; A5-B11-C33; A5-B11-C34;
A5-B11-C36; A5-B11-C37; A5-B11-C38; A5-B11-C39; A5-B11-C40;
A5-B11-C42; A5-B11-C43; A5-B11-C45; A5-B11-C46;
A13-B11-C1; A13-B11-C2;
A13-B11-C3; A13-B11-C4; AI3-B11-C5; A13-B11-C6; A13-B11-C7; A13-B11-C8;
A13-B11-C9; Α13-Β11-C10; A13-B11-C11; A13-B11-C12; A13-B11-C13; A13-B11-C14;
A13-B11-C15; A13-BU-C16; A13-B11-C17; A13-B11-C19; A13-B11-C20;
A13-B11-C21; A13-B11-C22; A13-B11-C23; A13-B11-C24; A13-B11-C26;
A13-B11-C28; A13-B11-C29; A13-B11-C30; A13-B11-C31; A13-B11-C32;
AI3-B11-C33; A13-B11-C34; A13-B11-C36; A13-B11-C37; A13-B11-C38;
A13-B11-C39; A13-B11-C40; A13-B11-C42; A13-B11-C43;
A13-B11-C45; A13-B11-C46;
A28-B11-C1; A28-B11-C2;
A28-B11-C3; A28-B11-C4; A28-B11-C5; A28-B11-C6; A28-B11-C7; A28-B11-C8;
A28-B11-C9; A28-B11-C10; A28-B11-C11; A28-B11-C12; A28-B11-C13; A28-B11-C14;
A28-B11-C15; A28-BU-C16; A28-B11-C17; A28-B11-C19; A28-B11-C20;
A28-B11-C21; A28-B11-C22; A28-B11-C23; A28-B11-C24; A28-B11-C26;
A28-B11-C28; A28-B11-C29; A28-BU-C30; A28-B11-C31; A28-B11-C32;
A28-B11-C33; A28-B11-C34; A28-B11-C36; A28-B11-C37; A28-B11-C38;
A28-B11-C39; A28-B11-C40; A28-B11-C42; A28-B11-C43;
A28-B11-C45; A28-B11-C46;
A2-B12-C1; A2-B12-C2; A2-B12-C3; A2-B12-C4; A2-B12-C5; A2-B12-C6;
A2-B12-C7; A2-B12-C8; A2-B12-C9; A2-B12-C10; A2-B12-C11; A2-B12-C12;
A2-B12-C13; A2-B12-C14; A2-B12-C15; A2-B12-C16; A2-B12-C17;
A2-B12-C19; A2-B12-C20; A2-B12-C21; A2-B12-C22; A2-B12-C23; A2-B12-C24;
A2-B12-C26; A2-B12-C28; A2-B12-C29; A2-B12-C30;
A2-B12-C31; A2-B12-C32; A2-B12-C33; A2-B12-C34; A2-B12-C36;
A2-B12-C37; A2-B12-C38; A2-B12-C39; A2-B12-C40; A2-B12-C42;
PL 218 884 B1
A2-B12-C43;
A3-B12-C3:
A3-B12-C9;
A3-B12-C15;
A3-B12-C21;
A3-B12-C33;
A3-B12-C39;
A3-B12-C45;
A5-B12-C1;
A5-B12-C7;
A5-B12-C13;
A5-B12-CI9;
A5-B12-C31;
A5-B12-C37;
A5-BI2-C43;
A13-BI2-C5;
A13-B12-C11;
A13-B12-C17;
A13-B12-C23;
A13-B12-C29;
A28-B12-C5;
A28-B12-C11;
A28-B12-C17;
A28-B12-C23;
A28-B12-C29;
A2-B13-C3;
A2-B13-C9;
A3-B12-C4;
A3-B12-C10;
A3-B12-C16;
A3-B12-C22;
A3-B12-C28;
A3-B12-C34;
A3-B12-C40;
A3-B12-C46;
A5-B12-C2;
A5-B12-C8;
A5-B12-C14;
A5-B12-C20;
A5-B12-C26;
A5-B12-C32;
A5-B12-C38;
A13-B12-C6;
A13-B12-C12;
A13-B12-C24;
A13-B12-C30;
A13-B12-C3Ó;
A13-B12-C42;
A28-BI2-C6;
A28-B12-C12;
A28-B12-C24:
A2R-B12-C30;
A28-B12-C36;
A28-B12-C42;
A2-B13-C4;
A2-B13-C10;
A2-B12-C45;
A3-B12-C5:
A3-BI2-C11;
A3-B12-C17;
A3-B12-C23;
A3-B12-C29:
A5-B12-C3;
A5-B12-C9;
AS-B12-C15;
A5-B12-C21;
A5-B12-C33;
A5-B12-C39;
A5-B12-C45;
A13-B12-C1;
A13-B12-C7;
A13-B12-03;
A13-B12-O9;
A13-B12-C31;
A13-B12-C37;
A13-B12-C43;
A28-B12-C1;
A28-B12-C7; A28-B12-03;
A28-B12-C19;
A28-B12-C31;
A28-B12-C37;
A28-B12-C43;
A2-B13-C5;
A2-B13-C11;
A2-B12-C46;
A3-B12-C6;
A3-B12-C12;
A3-B12-C24;
A3-B12-C30;
A3-B12-C36;
A3-B12-C42;
A5-B12-C4;
A5-B12-C10;
A5-B12-06;
A5-B12-C22;
A5-B12-C28;
A5-B12-C34;
A5-B12-C40;
A5-B12-C4Ó;
A13-B12-C2;
A13-B12-C8;
A13-B12-C20;
A13-B12-C26;
A13-B12-C32;
A13-B12-C38;
A28-B12-C2;
A28-B12-C8;
A28-BI2-C14;
A28-B12-C20;
A28-B12-C26;
A28-B12-C32;
A28-B12-C38;
A2-B13-C6; · A2-B13-02;
A3-B12-O;
A3-B12-C7;
A3-B12-C13;
A3-B12-C19;
A3-B12-C31;
A3-B12-C37;
A3-B12-C43;
A5-B12-C5;
A5-B12-CU;
A5-B12-C17;
A5-B12-C23;
A5-B12-C29;
A13-B12-C3;
A13-B12-C9;
A13-B12-C15;
A13-B12-C21;
A13-B12-C33;
A13-B12-C39;
A13-B12-C45;
A28-B12-C3;
A2S-B12-C9;
A28-B12-C15;
A28-B12-C21;
A28-B12-C33;
A28-B12-C39;
A28-B12-C45;
A2-B13-C1;
A2-B13-C7;
A2-B13-O3;
A3-B12-C2;
A3-B12-C8;
A3-B12-C14;
A3-B12-C20;
A3-B12-C26;
A3-B12-C32;
A3-B12-C38;
A5-B12-C6;
A5-B12-CI2;
A5-B12-C24;
A5-B12-C30;
A5-B12-C36;
A5-B12-C42;
A13-B12-C4;
Al 3-B 12-00;
.A.! 3-B12—C16,
A13-B12-C22;
A13-B12-C28;
A13-B12-C34;
A13-B12-C40;
A13B12C4Ó;
A28-B12-C4;
A28-B12-C10;
A28-B12-C16;
A28-B12-C22;
A28-B12-C28;
A28-B12-C34;
A28-B12-C40;
A28-B12-C46;
A2-B13-C2;
A2-B13-C8;
A2-B13-C14;
PL 218 884 B1
A2-B13-C15;
A2-B13-C21;
A2-B13-C33;
A2-B13-C39;
A2-B13-C45;
A3-B13-C5;
A3-B13-C11;
A3-BI3-C17;
A3-B13-C23;
A3-B13-C29;
A5-B13-C3; A5-B13-C9; Α5-Β13-05; A5-B13-C21;
A5-B13-C33;
A5-B13-C39;
A5-B13-C45;
A13-B13-C1;
A13-B13-C7;
A13-B13-C13;
A13-B13-C19;
A13-B13-C31;
A13-B13-C37;
A13-B13-C43;
A28-B13-C1;
A28-B13-C7;
Α28-Β13-Ο3;
A28-B13-C19;
A28-B13-C3I;
Α2-Β13-06;
A2-B13-C22;
A2-B13-C28;
A2-B13-C34;
A2-B13-C40;
A2-B13-C46;
A3-B13-C6;
A3-B13-C12;
A3-B13-C24;
A3-B13-C30;
A3-B13-C36;
A3-B13-C42;
A5-B13-C4;
A5-B13-C10;
A5-B13-C16;
A5-B13-C22;
A5-B13-C28;
A5-B13-C34;
A5-B13-C40;
A5-B13-C46;
A13-B13-C2;
A13-B13-C8;
A13-B13-C14;
A13-B13-C20;
A13-B13-C26;
A13-B13-C32;
A13-B13-C38;
A28-B13-C2;
A28-B13-C8;
A28-B13-C14;
A28-B13-C20;
A28-B13-C26;
A28-B13-C32;
A2-B13-C17;
A2-B13-C23;
A2-B13-C29;
A3-B13-C1;
A3-B13-C7:
A3-B13-C13;
A3-B13-C39;
A3-B13-C3I;
A3-B13-C37;
A3-BI3-C43;
A5-B13-C5;
A5-B13-C11;
Α5-Β13-07; A5-B13-C23; A5-B13-C29;
A13-B13-C3;
A13-B13-C9;
A13-B13-C15;
A13-B13-C21;
A13-B13-C33;
A13-B13-C39;
A13-B13-C45;
A28-B13-C3;
A28-B13-C9;
A28-B13-C15;
A28-B13-C21;
A28-B13-C33;
A2-B13-C24;
A2-B13-C30;
A2-B13-C36;
A2-B13-C42;
A3-B13-C2;
A3-B13-C8;
Α3-BI 3-0 4;
A3-B13-C20;
A3-B13-C26;
A3-B13-C32;
A3-B13-C38;
Aj.Bi3.cfi;
A5-B13-C12;
A5-B13-C24;
A5-B13-C30;
A5-B13-C36;
A5-B13-C42;
A13-B13-C4;
A13-B13-C10;
A13-B13-C16;
A13-B13-C22;
A13-B13-C28;
A13-B13-C34;
A13-B13-C40;
A13-B13-C46;
A28-B13-C4;
A28-B13-C10;
A28-B13-C16;
A28-B13-C22;
A28-B13-C28;
A28-B13-C34;
A2-B13-C19;
A2-B13-C31;
A2-B13-C37;
A2-B13-C43;
A3-B13-C3;
A3-B13-C9:
A3-B13-C15;
A3-B13-C21;
A3-B13-C33;
A3-B13-C39;
A3-B13-C45;
A5-B13-C1;
A5-B13-C7; A5-B13-03; A5-B13-C19;
A5-B13-C31;
A5-B13-C37;
A5-B13-C43;
A13-B13-C5;
A13-B13-C11;
A13-BI3-C17;
A13-B13-C23;
A13-B13-C29;
A28-B13-C5;
A28-B13-CU;
A28-B13-C17;
A28-B13-C23;
A28-B13-C29;
A2-B13-C20;
A2-B13-C26;
A2-B13-C32;
A2-B13-C38;
A3-B13-C4;
A3-B13-C10;
Λ3-Β13-Ο6;
A3-B13-C22;
A3-B13-C28;
A3-B13-C34;
A3-B13-C40;
A3-B13-C46;
A5-B13-C2;
A5-B13-C8;
A5-B13-C14;
A5-B13-C20;
A5-B13-C26;
A5-B13-C32;
A5-B13-C38;
A13-B13-C6; A13-B13-02;
A13-B13-C24;
A13-B13-C30;
A13-B13-C36;
A13-B13-C42;
A28-B13-C6;
A28-B13-C12;
A28-B13-C24;
A28-B13-C30;
A28-B13-C36;
PL 218 884 B1
A28-B13-C38;
A28-B13-C37;
A28-B13-C43;
A2-B14-C5; Α2-Β14-01; A2-B14-C17; A2-B14-C23; A2-B14-C29;
A3-B14-C1;
A3-B14-C7;
A3-B14-C13;
A3-B14-C19;
A3-B14-C31;
A3-B14-C37;
A3-B14-C43;
A5-B14-C5;
Α5-Β14-Ο1;
Α5-Β14-Ο7;
A5-B14-C23;
A5-B14-C29;
A13-B14-C3;
A13-B14-C9;
A13-B14-C15;
A13-B14-C21;
A13-B14-C33;
A13-B14-C39;
A13-B14-C45;
A2-B14-C6;
Α2-Β14-Ο2;
A2-B14-C24;
A2-B14-C30;
A2-B14-C36;
A2-B14-C42;
A3-B14-C2;
A3-B14-C8;
Α3-Β14-04;
A3-B14-C20;
A3-B14-C26;
A3-B14-C32;
A3-B14-C38;
A5-B14-C6;
A5-B14-C12;
A5-B14-C24;
A5-B14-C30;
A5-B14-C36;
A5-B14-C42;
A13-B14-C4;
A13-B14-C10;
Α13-Β14-Ο6;
A13-B14-C22;
A13-B14-C28;
A13-B14-C34;
A13-B14-C40;
A13-B14-C46;
A28-B13-C39;
A28-B13-C45;
A2-B14-C1;
A2-BI4-C7;
Α2-Β14-03;
A2-B14-C19;
A2-B14-C3I;
A2-B14-C37;
A2-B14-C43;
A3-B14-C3;
A3-B14-C9;
Α3-Β14-Ο5;
A3-BI4-C21;
A3-B14-C33;
A3-B14-C39;
A3-B14-C45;
Α5-Β14-Ο;
A5-B14-C7;
A5-B14-C13;
A5-B14-C19;
A5-B14-C31;
A5-B14-C37;
A5-B14-C43;
A13-B14-C5;
A13-B14-C11;
Α13-Β14-Ο7;
A13-B14-C23;
A13-B14-C29;
A28-B13-C40;
A28-B13-C46;
A2-B14-C2;
A2-B14-C8;
Α2-Β14-04;
A2-B14-C20;
A2-B14-C26;
A2-B14-C32;
A2-B14-C38;
A3-B14-C4;
A3-B14-C10;
A3-B14-C16;
A3-B14-C22;
A3-B14-C28;
A3-B14-C34;
A3-B14-C40;
A3-B14-C46;
A5-B14-C2;
A5-B14-C8;
A5-B14-C14;
A5-B14-C20;
A5-B14-C26;
A5-B14-C32;
A5-B14-C38;
A13-B14-C6;
A13-B14-C12;
A13-B14-C24;
A13-B14-C30;
A13-B14-C36;
A13-B14-C42;
A2-B14-C3;
A2-B14-C9;
Α2-Β14-Ο5;
A2-B14-C21;
A2-B14-C33;
A2-B14-C39;
A2-B14-C45;
A3-B14-C5;
Α3-Β14-Ο1;
Α3-Β14Ό7;
A3-B14-C23;
A3-B14-C29;
A5-B14-C3;
A5-B14-C9;
Α5-Β14-Ο5;
A5-B14-C21;
A5-BI4-C33;
A5-B14-C39;
A5-B14-C45;
Α13-Β14-Ο;
A13-B14-C7;
Α13-Β14-Ο3;
A13-B14-C19;
A13-B14-C31;
A13-B14-C37;
A13-B14-C43;
Α28-Β14-Ο;
A28-B13-C42;
A2-B14-C4;
A2-B14-C10;
Α2-Β14-Ο6;
A2-B14-C22;
A2-B14-C28;
A2-BI4-C34;
A2-B14-C40;
A2-B14-C46;
A3-B14-C6;
Α3-Β14-Ο2;
A3-B14-C24;
A3-B14-C30;
A3-B14-C36;
A3-B14-C42;
A5-B14-C4;
Α5-Β14-Ο0;
A5-B14-C16;
A5-B14-C22;
A5-B14-C28;
A5-B14-C34;
A5-B14-C40;
A5-B14-C46;
A13-B14-C2;
A13-B14-C8;
Α13-Β14-Ο4;
A13-B14-C20;
A13-B14-C26;
A13-B14-C32;
A13-B14-C38;
A28-B14-C2;
PL 218 884 B1
A28-B14-C3;
A28-B14-C9;
A28-B14-C15;
A28-B14-C21;
A28-B14-C33;
A28-B14-C39;
A28-B14-C45;
A2-B16-C3;
A2-B16-C9;
A2-B16-C15;
A2-B16-C21;
A2-B16-C33;
A2-B16-C39;
A2-B16-C45;
A3-B16-C5;
A3-B16-C11;
A3-B16-C17;
A3-B16-C23;
A3-B16-C29;
A5-B16-C3;
A5-B16-C9;
A5-B16-C15;
A5-B16-C21;
A5-B16-C33;
A5-BI6-C39;
A5-B16-C45;
A13-B16-C1;
A13-B16-C7;
A13-B16-C13;
A28-B14-C4;
A28-B14-C10;
A28-B14-C16;
A28-B14-C22;
A28-B14-C28;
A28-B14-C34;
A28-B14-C40;
A28-B14-C46;
A2-B16-C4;
A2-B16-C10;
A2-B16-C16;
A2-B16-C22;
A2-B16-C28;
A2-B16-C34;
A2-B16-C40;
A2-B16-C46;
A3-B16-C6;
A3-B16-C12;
A3-B16-C24;
A3-B16-C30;
A3-B16-C36;
A3-B16-C42;
A5-B16-C4;
A5-B16-C10;
A5-B16-C16;
A5-B16-C22;
A5-B16-C28;
A5-B16-C34;
A5-B16-C40;
A5-BI6-C46;
A13-B16-C2;
A13-B16-C8;
A13-B16-C14;
A28-B14-C5;
A28-B14-C11;
A28-B14-C17;
A28-B14-C23;
A28-B14-C29;
A2-B16-C5;
A2-B16-C11;
A2-B16-C17;
A2-B16-C23;
A2-B16-C29;
A3-B16-C1;
A3-B16-C7;
A3-B16-C13;
A3-B16-C19;
A3-B16-C31;
A3-B16-C37;
A3-B16-C43;
A5-B16-C5;
A5-B16-C11;
A5-B16-C17;
A5-B16-C23;
A5-B16-C29;
A13-B16-C3;
AI3-B16-C9;
A13-B16-C15;
A28-B14-C6;
A28-B14-C12;
A28-B14-C24;
A28-B14-C30;
A28-B14-C36;
A28-B14-C42;
A2-B16-C6;
A2-B16-C12;
A2-B16-C24;
A2-B16-C30;
A2-B16-C36;
A2-B16-C42;
A3-B16-C2;
A3-B16-C8;
A3-B16-C14;
A3-B16-C20;
A3-B16-C26;
A3-BI6-C32;
A3-B16-C38;
A5-B16-C6;
A5-B16-C12;
A5-B16-C24;
A5-B16-C30;
A5-B16-C36;
A5-B16-C42;
A13-B16-C4;
A13-B16-C10;
A13-B16-C16;
A28-B14-C7;
A28-B14-C13;
A28-B14-C19;
A28-B14-C31;
A28-B14-C37;
A28-B14-C43;
A2-B16-C1;
A2-B16-C7;
A2-B16-C13;
A2-B16-C19;
A2-B16-C31;
A2-B16-C37;
A2-B16-C43;
A3-B16-C3;
A3-B1Ó-C9;
A3-B16-C15;
A3-B16-C21;
A3-B16-C33;
A3-B16-C39;
A3-B16-C45;
A5-B16-C1;
A5-B16-C7;
A5-B16-C13;
A5-B16-C19;
A5-B16-C31;
A5-B16-C37;
A5-B16-C43;
A13-B16-C5;
A13-B16-C11;
A13-B16-C17;
A28-B14-C8;
A28-B14-C14;
A28-B14-C20;
A28-B14-C26;
A28-B14-C32;
A28-B14-C38;
A2-B16-C2;
A2-B16-C8;
A2-B16-C14;
A2-B16-C20;
A2-B16-C26;
A2-B16-C32;
A2-B16-C38;
A3-B16-C4;
A3-B16-C10;
A3-B16-C16;
A3-B16-C22;
A3-B16-C28;
A3-B16-C34;
A3-B16-C40;
A3-B1Ć-C46;
A5-B16-C2;
A5-B16-C8;
A5-B16-C14;
A5-B16-C20;
A5-B16-C26;
A5-B16-C32;
A5-B16-C38;
A13-B16-C6;
A13-B16-C12;
PL 218 884 B1
A13-B16-C19;
A13-B16-C31;
A13-B16-C37;
A13-B16-C43;
A28-B16-C1;
A28-B16-C7;
A28-B16-C13;
A28-B16-C19;
A28-B16-C31;
A28-B16-C37;
A28-B16-C43;
A2-B17-C5;
A2-B17-C11;
A2-B17-C17;
A2-B17-C23;
A2-B17-C29;
A3-B17-C1;
A3-B17-C7;
A3-B17-C13;
A3-B17-C19;
A3-B17-C31;
A3-B17-C37;
A3-B17-C43;
A5-B17-C5;
A5-B17-C11;
A5-B17-C17;
A5-B17-C23;
A5-B17-C29;
A13-B16-C20;
A13-B16-C26;
A13-B16-C32;
A13-B16-C38;
A28-B16-C2;
A28-B16-C8;
A28-B16-C14;
A28-B16-C20;
A28-B16-C26;
A28-B16-C32;
A28-B16-C38;
A2-B17-C6;
A2-B17-C12;
A2-B17-C24;
A2-B17-C30;
A2-B17-C36;
A2-B17-C42;
A3-B17-C2;
A3-B17-C8;
A3-B17-C14;
A3-B17-C20;
A3-B17-C26;
A3-B17-C32;
A3-B17-C38;
A5-B17-C6;
A5-B17-C12;
A5-B17-C24;
A5-B17-C30;
A5-B17-C36;
A13-B16-C21;
A13-B16-C33;
A13-B16-C39;
A13-B16-C45;
A28-B16-C3;
A28-B16-C9;
A28-B16-C15;
A28-B16-C21;
A28-B16-C33;
A28-B16-C39;
A28-B16-C45;
A2-B17-C1;
A2-B17-C7;
A2-B17-C13;
A2-B17-C19;
A2-BI7-C31;
A2-B17-C37;
A2-B17-C43;
A3-B17-C3;
A3-B17-C9;
A3-B17-C15;
A3-B17-C21;
A3-B17-C33;
A3-B17-C39;
A3-B17-C45;
A5-B17-C1;
A5-B17-C7;
A5-B17-C13;
A5-B17-C19;
A5-B17-C31;
A5-B17-C37;
A13-B16-C22;
A13-B16-C28;
A13-B16-C34;
A13-B16-C40;
A13-B16-C46;
A28-B16-C4;
A28-B16-C10;
A28-B16-C16;
A28-B16-C22;
A28-B16-C28;
A28-B16-C34;
A28-B16-C40;
A28-B16-C46;
A2-B17-C2;
A2-B17-C8;
A2-B17-C14;
A2-B17-C20;
A2-B17-C26;
A2-B17-C32;
A2-B17-C38;
A3-B17-C4;
A3-B17-C10;
A3-B17-C16;
A3-B17-C22;
A3-B17-C28;
A3-B17-C34;
A3-B17-C40;
A3-B17-C46;
A5-B17-C2;
A5-B17-C8;
A5-B17-C14;
A5-B17-C20;
A5-B17-C26;
A5-B17-C32;
A5-B17-C38;
A13-B16-C23;
A13-B16-C29;
A28-B16-C5;
A28-B16-C11;
A28-B16-C17;
A28-B16-C23;
A28-B16-C29;
A2-B17-C3;
A2-B17-C9;
A2-B17-C15;
A2-B17-C21;
A2-B17-C33;
A2-B17-C39;
A2-B17-C45;
A3-B17-C5;
A3-B17-C11;
A3-B17-C17;
A3-B17-C23;
A3-B17-C29;
A5-B17-C3;
A5-B17-C9;
A5-B17-C15;
A5-B17-C21;
A5-B17-C33;
A5-B17-C39;
A13-B16-C24;
A13-B16-C30;
A13-B16-C36;
A13-B16-C42;
A28-B16-C6;
A28-B16-C12;
A28-B16-C24;
A28-B16-C30;
A28-B16-C3Ó;
A28-B16-C42;
A2-B17-C4;
A2-B17-C10;
A2-B17-C16;
A2-B17-C22;
A2-B17-C28;
A2-B17-C34;
A2-B17-C40;
A2-B17-C46;
A3-B17-C6;
A3-B17-C12;
A3-B17-C24;
A3-B17-C30;
A3-B17-C36;
A3-B17-C42;
A5-B17-C4;
A5-B17-C10;
A5-B17-C16;
A5-B17-C22;
A5-B17-C28;
A5-B17-C34;
A5-B17-C40;
PL 218 884 B1
A13-B17-C3;
A13-B17-C9;
A13-B17-C15;
A13-B17-C21;
A13-B17-C33;
A13-B17-C39;
A13-B17-C45;
A28-B17-C3;
A28-B17-C9;
A28-B17-C15;
A28-B17-C21;
A28-B17-C33;
A28-B17-C39;
A28-B17-C45;
A2-B18-C1;
A2-B18-C7;
A2-B18-C13;
A2-B18-C19;
A2-B18-C31;
A2-B18-C37;
A2-B18-C43;
A3-BIS-C3;
A3-B18-C9;
A3-B18-C15;
A3-B18-C21;
A3-B18-C33;
A3-B18-C39;
A3-B18-C45;
A5-B18-C1;
A5-B17-C42;
A13-B17-C4;
A13-B17-C10;
A13-B17-C16;
A13-B17-C22;
A13-B17-C28;
A13-B17-C34;
A13-B17-C40;
A13-B17-C46;
A28-B17-C4;
A28-B17-C10;
A28-B17-C16;
A28-B17-C22;
A28-B17-C28;
A28-B17-C34;
A28-B17-C40;
A28-B17-C46;
A2-B18-C2;
A2-B18-C8;
A2-B18-C14;
A2-B18-C20;
A2-B18-C26;
A2-B18-C32;
A2-B18-C38;
A3-B18-C4;
A3-B18-C1O;
A3-B18-C16;
A3-B18-C22;
A3-B18-C28;
A3-B18-C34;
A3-B18-C40;
A3-B18-C46;
A5-B18-C2;
A5-B17-C43;
A13-B17-C5;
A13-B17-C11;
A13-B17-C17;
A13-B17-C23;
A13-B17-C29;
A28-B17-C5;
A28-B17-C11;
A28-B17-C17;
A28-B17-C23;
A28-B17-C29;
A2-B18-C3;
A2-B18-C9;
A2-B18-C15;
A2-B18-C21;
A2-B18-C33;
A2-B18-C39;
A2-B18-C45;
A3-B18-C5;
A3-B18-C11;
A3-B18-C17;
A3-B18-C23;
A3-B18-C29;
A13-B17-C6;
A13-B17-C12;
A13-B17-C24;
A13-B17-C30;
A13-B17-C36;
A13-B17-C42;
A28-B17-C6;
A28-B17-C12;
A28-B17-C24;
A28-B17-C30;
A28-B17-C36;
A28-B17-C42;
A2-B18-C4;
A2-B18-C10;
A2-B18-C16;
A2-B18-C22;
A2-B18-C28;
A2-B18-C34;
A2-B18-C40;
A2-B18-C46;
A3-B18-C6;
A3-B18-C12;
A3-B18-C24;
A3-B18-C30;
A3-B18-C36;
A3-B18-C42;
A5-B18-C4;
A5-B17-C45;
A13-B17-C1;
A13-B17-C7;
A13-B17-C13;
A13-B17-C19;
A13-B17-C31;
A13-B17-C37;
A13-B17-C43;
A28-B17-C1;
A28-B17-C7;
A28-B17-C13;
A28-B17-C19;
A28-B17-C31;
A28-B17-C37;
A28-B17-C43;
A2-B18-C5;
A2-B18-C11;
A2-B18-C17;
A2-B18-C23;
A2-B18-C29;
A3-B18-C1;
A3-B18-C7;
A3-B18-C13;
A3-B18-C19;
A3-B18-C31;
A3-B18-C37;
A3-B18-C43;
A5-B18-C5;
A5-B17-C46;
A13-B17-C2;
A13-B17-C8;
A13-B17-C14;
A13-B17-C20;
A13-B17-C26;
A13-B17-C32;
A13-B17-C38;
A28-B17-C2;
A28-B17-C8;
A28-B17-C14;
A28-B17-C20;
A28-B17-C26;
A28-B17-C32;
A28-B17-C38;
A2-B18-C6;
A2-B18-C12;
A2-B18-C24;
A2-B18-C3O;
A2-B18-C36;
A2-B18-C42;
A3-B18-C2;
A3-B18-C8;
A3-B18-C14;
A3-B18-C20;
A3-B18-C26;
A3-B18-C32;
A3-B18-C38;
A5-B18-C6;
A5-B18-C3;
PL 218 884 B1
A5-B18-C7; Α5-Β18-03; A5-B18-C19;
A5-B18-C31;
A5-B18-C37;
A5-B18-C43;
A13-B18-C5;
A13-B18-C11;
A13-B18-C17;
A13-B18-C23;
A13-BI8-C29;
A28-B18-C5;
Α28-Β18-ΟΙ;
A28-B18-C17;
A28-B18-C23;
A28-B18-C29;
A2-B19-C3;
A2-B19-C9;
Α2-Β19-Ο5;
A2-B19-C21;
A2-B19-C33;
A2-B19-C39;
A2-B19-C45;
A3-B19-C5;
Α3-Β19-Ο1;
Α3-Β19-07;
A3-B19-C23;
A5-B18-C8;
Α5-Β18-04;
A5-B18-C20;
A5-B18-C26;
A5-B18-C32;
A5-B18-C38;
A13-B18-C6;
A13-B18-C12;
A13-B18-C24;
A13-B18-C30;
A13-B18-C36;
A13-B18-C42;
A28-B18-C6;
Α28-Β18-Ο2;
A28-B18-C24;
A28-B18-C30;
A28-B18-C36;
A28-B18-C42;
A2-B19-C4;
A2-B19-C10;
A2-B19-C16;
A2-B19-C22;
A2-B19-C28;
A2-B19-C34;
A2-B19-C40;
A2-B19-C46;
A3-B19-C6;
Α3-Β19-Ο2;
A3-B19-C24;
A5-B18-C9;
Α5-Β18-Ο5;
A5-B18-C21;
A5-B18-C33;
A5-B18-C39;
A5-B18-C45;
A13-B18-C1;
A13-B18-C7;
A13-B18-C13;
A13-B18-C19;
A13-B18-C31;
A13-B18-C37;
A13-B18-C43;
A28-B18-C1;
A28-B18-C7;
A28-B18-C13;
Α28-Β18-Ο9;
A28-B18-C31;
A28-B18-C37;
A28-B18-C43;
A2-B19-C5;
A2-B19-C11;
A2-B19-C17;
A2-B19-C23;
A2-B19-C29;
A3-B19-C1;
A3-B19-C7;
A3-B19-C13;
Α3-Β19-Ο9;
A5-B18-C10;
Α5-Β18-Ο6;
A5-BI8-C22;
A5-B18-C28;
A5-B18-C34;
A5-B18-C40;
A5-B18-C46;
A13-B18-C2;
A13-B18-C8;
A13-B18-C14;
A13-B18-C20;
A13-B18-C26;
A13-B18-C32;
A13-B18-C38;
A28-B18-C2;
A28-B18-C8;
A28-B18-C14;
A28-B18-C20;
A28-B18-C26;
A28-B18-C32;
A28-B18-C38;
A2-B19-C6;
Α2-Β19-Ο2;
A2-B19-C24;
A2-B19-C30;
A2-B19-C36;
A2-B19-C42;
A3-B19-C2;
A3-B19-C8;
Α3-Β19-Ο4;
A3-B19-C20;
A3-B19-C26;
A5-B18-C11;
A5-B18-C17;
A5-B18-C23;
A5-B18-C29;
A13-B18-C3;
A13-B18-C9;
Α13-Β18-Ο5;
A13-B18-C21;
A13-B18-C33;
A13-B18-C39;
A13-B18-C45;
A28-B18-C3;
A28-B18-C9;
Α28-Β18-05;
A28-B18-C21;
A28-B18-C33;
A28-B18-C39;
A28-B18-C45;
A2-B19-C1;
A2-B19-C7;
Α2-Β19-Ο3;
Α2-Β19-Ο9;
A2-B19-C31;
A2-B19-C37;
A2-B19-C43;
A3-B19-C3;
A3-B19-C9;
A3-B19-C15;
A3-BI9-C21;
Α5-Β18-Ο2;
A5-B18-C24;
A5-B18-C30;
A5-B18-C36;
A5-B18-C42;
A13-B18-C4;
A13-B18-C10;
Α13-Β18-Ο6;
A13-B18-C22;
A13-B18-C28;
A13-B18-C34;
A13-B18-C40;
A13-B18-C46;
A28-B18-C4;
A28-B18-C10;
Α28-Β18-Ο6;
A28-B18-C22;
A28-B18-C28;
A28-B18-C34;
A28-B18-C40;
A28-B18-C46;
A2-B19-C2;
A2-B19-C8;
Α2-Β19-Ο4;
A2-BI9-C20;
A2-B19-C26;
A2-B19-C32;
A2-B19-C38;
A3-B19-C4; Α3-Β19-00; Α3-Β19-Ο6; A3-B19-C22; A3-B19-C28;
PL 218 884 B1
A3-B19-C29;
A5-B19-C3;
A5-B19-C9;
A5-B19-C15;
A5-B19-C21;
A5-B19-C33;
A5-B19-C39;
A5-B19-C45;
A13-B19-C1;
A13-B19-C7;
A13-B19-C13;
A13-B19-C19;
A13-B19-C31;
A13-B19-C37;
A13-B19-C43;
A28-B19-C1;
A28-B19-C7;
A28-B19-C13;
A28-B19-C19;
A28-B19-C31;
A28-B19-C37;
A28-B19-C43;
A3-B19-C30;
A3-B19-C36;
A3-B19-C42;
A5-B19-C4;
A5-B19-C10;
A5-B19-C16;
A5-B19-C22;
A5-B19-C28;
A5-B19-C34;
A5-B19-C40;
A5-B19-C46;
A13-B19-C2;
A13-B19-C8;
A13-B19-C14;
A13-B19-C20;
A13-B19-C26;
A13-B19-C32;
A13-B19-C38;
A28-B19-C2;
A28-B19-C8;
A28-B19-C14;
A28-B19-C20;
A28-B19-C26;
A28-B19-C32;
A28-B19-C38;
A3-B19-C31;
A3-B19-C37;
A3-B19-C43;
A5-B19-C5;
A5-B19-C11;
A5-BI9-C17;
A5-B19-C23;
A5-B19-C29;
A13-B19-C3;
A13-B19-C9;
A13-B19-C15;
A13-B19-C21;
A13-B19-C33;
A13-B19-C39;
A13-B19-C45;
A28-B19-C3;
A28-B19-C9;
A28-B19-C15;
A28-B19-C21;
A28-B19-C33;
A28-B19-C39;
A28-B19-C45;
A3-B19-C32;
A3-B19-C38;
A5-B19-C6;
A5-B19-C12;
A5-B19-C24;
A5-B19-C30;
A5-B19-C36;
A5-B19-C42;
A13-B19-C4;
A13-B19-C10;
A13-B19-C16;
A13-B19-C22;
A13-B19-C28;
A13-B19-C34;
A13-B19-C40;
A13-B19-C46;
A28-B19-C4;
A28-B19-C10;
A28-B19-C16;
A28-B19-C22;
A28-B19-C28;
A28-B19-C34;
A28-B19-C40;
A28-B19-C46;
A3-B19-C33;
A3-B19-C39;
A3-B19-C45;
A5-B19-C1;
A5-B19-C7;
A5-B19-C13;
A5-B19-C19;
A5-B19-C31;
A5-B19-C37;
A5-B19-C43;
A13-B19-C5;
A13-B19-C11;
A13-B19-C17;
A13-B19-C23;
A13-B19-C29;
A28-B19-C5;
A28-B19-C11;
A28-B19-C17;
A28-B19-C23;
A28-B19-C29;
A3-B19-C34;
A3-B19-C40;
A3-B19-C46;
A5-BI9-C2;
A5-B19-C8;
A5-B19-C14;
A5-B19-C20;
A5-B19-C26;
A5-B19-C32;
A5-B19-C38;
A13-B19-C6;
A13-B19-C12;
A13-B19-C24;
A13-B19-C30;
A13-B19-C36;
A13-B19-C42;
A28-B19-C6;
A28-B19-C12;
A28-B19-C24;
A28-B19-C30;
A28-B19-C36;
A28-B19-C42;
PL 218 884 B1
Przykładowe związki według wynalazku obejmują:
kwas [5-metoksy-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)indol-1-ilo]octowy;
4-metoksy-2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1H-pirolo-[2,3-b]pirydynę;
4-metoksy-2-(5-metoksy-1H-indol-3-ilo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę;
5-fenylo-2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1H-pirolo [2,3-b]pirydynę;
2-[5-metoksy-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)indol-1-ilo]-1-morfolin-4-yloetanon;
amid kwasu 1-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]cyklobutanokarboksylowego;
metyloamid kwasu 1-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]cyklobutanokarboksylowego;
metyloamid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowego; (2-hydroksyetylo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowego;
(2-morfolin-4-yloetylo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowego;
(2-karbamoiloetylo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowego;
bis-(2-hydroksyetylo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowego;
amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowego; (2-hydroksy-1,1-bis-hydroksymetyloetylo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowego;
(2-hydroksy-1-hydroksymetylo-1-metyloetylo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowego;
(2,3-dihydroksypropylo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowego;
(2-hydroksy-1,1-dimetyloetylo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowego;
(2-hydroksy-1-hydroksymetyloetylo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowego;
(2-karbamoiloetylo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-6-karboksylowego;
(2-hydroksyetylo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-6-karboksylowego;
(1H-[1,2,4]triazol-3-ilo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo-[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-6-karboksylowego;
(2-hydroksy-1-hydroksymetyloetylo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-6-karboksylowego;
kwas [1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]octowy;
kwas 2-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]propionowy;
kwas 1-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]cyklobutanokarboksylowy;
kwas 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowy;
1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-ol;
kwas 1-{1-(cyklobutanokarboksylo)-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}cyklobutanokarboksylowy; kwas 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-6-karboksylowy; kwas 3-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-ilo]propionowy;
2-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]etanol;
2-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]propan-1-ol;
{1-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]cyklobutylo}metanol;
2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę;
3-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]propano-1,2-diol;
3-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]propan-1-ol;
3-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]propano-2-ol;
2-[1-metylo-5-(2H-tetrazol-5-ilo)-1H-indol-3-ilo]-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę;
2-[1-metylo-5-(2-metylo-2H-tetrazol-5-ilo)-1H-indol-3-ilo]-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę;
PL 218 884 B1
2-[1-metylo-5-(1-metylo-1H-tetrazol-5-ilo)-1H-indol-3-ilo]-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę;
1- [1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-ilo]etanon;
2- (5,6-dimetoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę;
2-[5-(2-metoksy-1-metyloetoksy)-1-metylo-1H-indol-3-ilo]-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę;
2- [1-metylo-5-(5-metylo-[1,2,4]oksadiazol-3-ilo)-1H-indol-3-ilo]-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę;
3- [6-metoksy-1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]propano-1,2-diol;
6-metoksy-1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-ol;
2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-4-fenylo-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę;
2-[5-(pirydyn-4-ylo)-1-metylo-1H-indol-3-ilo]-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę;
2- (5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyno-4-karbonitryl;
4- chloro-2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę;
1- metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-ilo-aminę;
N-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-ilo]metanosulfonoamid;
N-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-ilo]acetamid;
{1-[5-(1-hydroksymetylo-cyklobutoksy)-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)indol-1-ilo]cyklobutylo}metanol;
3- fluoro-2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę;
2- (5-metoksy-1H-indol-3-ilo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyno-4-kabonitryl;
i farmaceutycznie dopuszczalne sole takich związków.
Korzystne związki według wynalazku obejmują:
amid kwasu 1-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]cyklobutankarboksylowego (związek oznaczony jako A2-B1-C31);
2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyno-4-karbonitryl (związek oznaczony jako A3-B1-C28);
i farmaceutycznie dopuszczalne sole takich związków.
Związki według wynalazku wykazują przydatną farmakologiczną aktywność i odpowiednio są włączane do kompozycji farmaceutycznych i stosowane do leczenia pacjentów cierpiących na pewne choroby. Wynalazek dotyczy zatem, zgodnie z dalszym aspektem, związków według wynalazku i kompozycji zawierających związki według wynalazku do zastosowania w leczeniu.
Związki wchodzące w zakres wynalazku blokują katalityczną aktywność kinazy, zgodnie z badaniami opisanymi w literaturze i opisanymi dalej procedurami in vitro, których wyniki wydają się korelować z aktywnością farmakologiczną u ludzi i innych ssaków. Zatem, w dalszej postaci wykonania, wynalazek dostarcza związków według wynalazku i kompozycji, zawierających związki według wynalazku do zastosowania w leczeniu pacjentów cierpiących lub narażonych na stany, które można poprawić poprzez podawanie inhibitorów kinazy białkowej (np. Syk, FAK, KDR lub Aurora 2). Na przykład związki według wynalazku są przydatne w leczeniu chorób zapalnych, na przykład astmy; dermatoz (łuszczycy, opryszczkowatego/opryszczkowego zapalenia skóry, wyprysku, martwiczego i skórnego zapalenia naczyń, choroby pęcherzowej); alergicznego nieżytu nosa i alergicznego zapalenia spojówek; zapalenia stawów, z włączeniem artretyzmu, reumatoidalnego zapalenia stawów i innych stanów artretycznych, takich jak reumatoidalne zapalenie kręgów, zapalenie stawu w przebiegu dny moczanowej, pourazowe zapalenie stawu, zapalenie stawu w przebiegu różyczki, łuszczycowe zapalenie stawów i zapalenie kości i stawów. Związki są również przydatne w leczeniu przewlekłej obturacyjnej choroby płuc (COPD), ostrego zapalenia błony maziowej, autoimmunologicznej cukrzycy, autoimmunologicznego zapalenia mózgu i rdzenia, zapalenia okrężnicy, miażdżycy tętnic, choroby naczyń obwodowych, choroby serca i naczyń, stwardnienia rozsianego, nawrotu zwężenia, zapalenia mięśnia sercowego, B-komórkowych chłoniaków, układowego tocznia rumieniowatego, w chorobie przeszczep przeciwko gospodarzowi i innych związanych z transplantacją przypadków odrzucania, raków i guzów (takich jak raki okrężnicy i odbytnicy, prostaty, piersi, tarczycy, okrężnicy i płuc) i choroby zapalnej jelit. Ponadto związki są przydatne jako czynniki przeciw nowotworzeniu naczyń guza.
Szczególną postacią obecnego wynalazku jest związek według wynalazku do stosowania w leczeniu astmy.
Inną szczególną postacią obecnego wynalazku jest związek według wynalazku do stosowania w leczeniu łuszczycy.
Inną szczególną postacią obecnego wynalazku jest związek według wynalazku do stosowania w leczeniu zapalenia stawu.
PL 218 884 B1
Inną szczególną postacią obecnego wynalazku jest związek według wynalazku do stosowania w leczeniu choroby zapalnej jelit.
Szczególną postacią obecnego wynalazku jest związek według wynalazku do stosowania w leczeniu raków i guzów.
Odniesienia do leczenia powinny być rozumiane jako obejmujące zarówno leczenie profilaktyczne, jak i leczenie ustalonych stanów.
Zakres wynalazku obejmuje również kompozycje farmaceutyczne zawierające co najmniej jeden ze związków według wynalazku razem z farmaceutycznie dopuszczalnym nośnikiem lub zaróbką.
Związki według wynalazku mogą być podawane w jakikolwiek odpowiedni sposób. W praktyce związki według wynalazku mogą być ogólnie podawane dożylnie, miejscowo, doodbytniczo, doustnie lub wziewnie, szczególnie drogą doustną.
Kompozycje według wynalazku mogą być wytwarzane zgodnie ze zwykłymi sposobami, z zastosowaniem jednego lub więcej farmaceutycznie dopuszczalnych adiuwantów lub zaróbek. Adiuwanty obejmują między innymi rozcieńczalniki, sterylne podłoża wodne i różne nietoksyczne rozpuszczalniki organiczne. Kompozycje mogą występować w formie tabletek, pigułek, granulek, proszków, roztworów wodnych lub zawiesin, roztworów do wstrzyknięć, eliksirów lub syropów i mogą zawierać jeden lub więcej czynników wybranych z grupy obejmującej słodziki, środki smakowe, barwniki lub czynniki stabilizujące, w celu otrzymania farmaceutycznie dopuszczalnych preparatów. Wybór podłoża i zawartość aktywnej substancji w podłożu są ogólnie określone zgodnie z rozpuszczalnością i chemicznymi właściwościami aktywnego związku, szczególną drogą podawania i zaopatrzenia obserwowanego w praktyce farmaceutycznej. Na przykład zaróbki takie jak laktoza, cytrynian sodu, węglan wapnia, fosforan dwuwapniowy i czynniki dezintegrujące, takie jak skrobia, kwasy alginowe i pewne złożone krzemiany, połączone ze środkami smarnymi takimi jak stearynian magnezu, laurylosulfonian sodu i talk, mogą być stosowane do wytwarzania tabletek. Do wytwarzania kapsułek korzystne jest stosowanie laktozy i glikoli polietylenowych o wysokiej masie cząsteczkowej. Stosowane zawiesiny wodne mogą zawierać czynniki emulgujące lub czynniki ułatwiające zawieszanie. Rozcieńczalniki takie jak sacharoza, etanol, glikol polietylenowy, glikol propylenowy, glicerol i chloroform lub ich mieszaniny również mogą być stosowane.
Do podawania pozajelitowego stosuje się emulsje, zawiesiny lub roztwory produktów według wynalazku w oleju roślinnym, na przykład oleju sezamowym, oleju z orzechów ziemnych lub oleju z oliwek, lub roztwory wodno-organiczne, takie jak woda i glikol propylenowy, nadające się do wstrzyknięć estry organiczne, takie jak oleinian etylu, jak również sterylne roztwory wodne farmaceutycznie dopuszczalnych soli. Roztwory soli produktów według wynalazku są szczególnie użyteczne we wstrzyknięciach domięśniowych i podskórnych. Roztwory wodne, obejmujące również roztwory soli w czystej wodzie destylowanej, mogą być stosowane do podawania dożylnego z zastrzeżeniem, że ich pH jest odpowiednio dostosowane, że są one rozsądnie buforowane i stworzone izotonicznymi, z wystarczającą ilością glukozy lub chlorku sodu, i że są sterylizowane przez ogrzewanie, naświetlanie lub mikrofiltrację.
Do podawania miejscowego mogą być stosowane żele (na bazie wody lub alkoholu), kremy lub maści zawierające związki według wynalazku. Związki według wynalazku mogą również być zawarte w żelu lub matrycy do aplikacji w plastrach, pozwalających na kontrolowane uwalnianie związku przez barierę przezskórną.
Do podawania w inhalacji związki według wynalazku mogą być rozpuszczane lub zawieszane w odpowiednich nośnikach do stosowania w rozpylaczu lub zawiesinie lub roztworze aerozolowym, lub mogą być absorbowane lub adsorbowane na odpowiednich nośnikach stałych do stosowania w inhalatorach suchego proszku.
Kompozycje stałe do stosowania doodbytniczego obejmują czopki wytworzone zgodnie ze znanymi metodami i zawierające co najmniej jeden związek według wynalazku.
Procent aktywnego składnika w kompozycjach według wynalazku może być różny, ważne aby stworzyć proporcje takie, by otrzymać odpowiednią dawkę. Oczywiście prawie w tym samym czasie może być stosowanych kilka postaci jednostkowego dawkowania. Stosowane dawki będą określane przez klinicystę i będą zależne od pożądanego skutku leczniczego, drogi podania i czasu trwania leczenia oraz stanu pacjenta. U dorosłego dawki wynoszą ogólnie od około 0,001 do około 50, korzystnie około 0,001 do około 5 mg/kg masy ciała dziennie drogą inhalacji, od około 0,01 do około 100, korzystnie 0,1 do 70, korzystniej 0,5 do 10 mg/kg masy ciała dziennie drogą doustną i od około 0,001 do około 10, korzystnie 0,01 do 1 mg/kg masy ciała dziennie drogą dożylną. W każdym szczególnym
PL 218 884 B1 przypadku dawki będą określane zgodnie z czynnikami wyróżniającymi leczoną jednostkę, takimi jak wiek, masa ciała, ogólny stan zdrowia i inne cechy charakterystyczne, które mogą wpływać na skuteczność medycznego produktu.
Związki według wynalazku mogą być podawane tak często jak to konieczne, w celu uzyskania pożądanego skutku leczniczego. Niektórzy pacjenci mogą odpowiadać szybko na wysoką lub niską dawkę i mogą wymagać utrzymania odpowiednio dużo słabszych dawek. U innych pacjentów może być konieczne leczenie długoterminowe 1 do 4 dawek dziennie, zgodnie z wymogami fizjologicznymi każdego pacjenta. Generalnie aktywny produkt może być podawany doustnie 1 do 4 razy dziennie. Oczywiście u niektórych pacjentów konieczne będzie przepisanie nie więcej niż jednej lub dwóch dawek dziennie.
Związki według wynalazku można wytworzyć stosując lub adaptując znane metody, które są metodami dotychczas stosowanymi lub opisanymi w literaturze, np. przez R.C.Larock w Comprehensive Organic Transformations, VCH publishers, 1989.
W reakcjach przedstawionych poniżej może być konieczne zabezpieczanie reaktywnych grup funkcyjnych, np. hydroksylowej, amino, imino, tio lub karboksylowej, jeśli ich obecność jest wymagana w produkcie końcowym, w celu uniknięcia ich niepożądanego udziału w reakcjach. Typowe grupy zabezpieczające można stosować zgodnie ze zwyczajową praktyką, np. patrz T.W. Greene i P.G.M.
Wuts „Protective Groups in Organic Chemistry John Wiley i Sons, 1991.
2 3 1
Związki o wzorze (I), w którym R1, R2 i R3 mają wcześniej podane znaczenia, a X1 oznacza CH, można wytworzyć stosując lub adaptując metody opisane przez Davis i in. w Tetrahedron, 1992, 48, str. 939-952, np.:
(i) reakcja związków o wzorze (III):
-j (III)
Ν
3 1 w którym R2 i R3 mają wcześniej podane znaczenia, a X1 oznacza CH, z odpowiednią zasadą, taką jak diizopropyloamidek litu (lub butylolit), w obojętnym rozpuszczalniku, takim jak tetrahydrofuran, i w temperaturze od około -26°C;
(ii) traktowanie uzyskanego anionu nitrylami o wzorze (IV):
R1-CN (IV) 1 w którym R1 ma wcześniej podane znaczenie, w temperaturze około -15°C do w przybliżeniu temperatury pokojowej.
1
Ta procedura jest szczególnie odpowiednia do wytwarzania związków o wzorze (I), w którym R1 2 3 1 oznacza ewentualnie podstawiony N-metyloindol-3-il, R2 i R3 oznaczają atom wodoru, a X1 oznacza CH.
2 3 1
Związki o wzorze (I), w którym R1, R2, R3 i X1 mają wcześniej podane znaczenia, może także wytworzyć stosując lub adaptując procedury opisane przez Chang i Bag, w J. Org. Chem., 1995, 21, str. 7030-7032, np. reakcja związków o wzorze (V):
2 3 1 2 w którym R1, R2, R3 i X1 mają wcześniej podane znaczenia, a X2 oznacza atom fluorowca, korzystnie atom jodu, lub trifluorometanosulfonian, z kwasem boronowym o wzorze (VI):
PL 218 884 B1
R1-B(OH)2 (VI) 1 w którym R1 ma wcześniej podane znaczenie. Reakcję sprzęgania można dogodnie prowadzić np. w obecności kompleksu katalizatora metalicznego takiego jak tetrakis(trifenylofosfino)pallad(0) i wodorowęglan sodowy, w wodnym roztworze dimetyloformamidu, w temperaturze aż do temperatury wrzenia rozpuszczalnika.
Związki według wynalazku można także wytworzyć na drodze transformacji innych związków według wynalazku.
Zatem np. związki o wzorze (I) zawierające grupę karboksylową można wytworzyć w wyniku hydrolizy odpowiednich estrów. Hydrolizę można dogodnie przeprowadzić jako hydrolizę alkaliczną, stosując zasadę taką jak wodorotlenek metalu alkalicznego, np. wodorotlenek litu, lub węglan metalu alkalicznego, np. węglan potasu, w obecności mieszaniny rozpuszczalników wodnego/organicznego, stosując organiczne rozpuszczalniki takie jak dioksan, tetrahydrofuran lub metanol, w temperaturze od w przybliżeniu temperatury otoczenia do temperatury wrzenia rozpuszczalnika. Hydrolizę estrów można także przeprowadzić jako hydrolizą kwasową, stosując kwas nieorganiczny, taki jak kwas chlorowodorowy, w obecności mieszaniny rozpuszczalników wodnego/obojętnego organicznego, stosując organiczne rozpuszczalniki takie jak dioksan lub tetrahydrofuran, w temperaturze od około 50°C do około 80°C.
Jako inny przykład, związki o wzorze (I) zawierające grupę karboksylową można wytworzyć metodą katalizowanego kwasem usunięcia grupy tert-butylowej odpowiednich estrów tert-butylowych, stosując standardowe warunki reakcji, np. reakcję z kwasem trifluorooctowym w temperaturze w przybliżeniu pokojowej.
Jako inny przykład, związki o wzorze (I) zawierające grupę karboksylową można wytworzyć poprzez uwodornienie odpowiednich estrów benzylowych. Reakcję można prowadzić w obecności mrówczanu amonu i odpowiedniego katalizatora metalicznego, np. palladu, na obojętnym nośniku takim jak węgiel, korzystnie w rozpuszczalniku takim jak metanol lub etanol i w temperaturze wrzenia rozpuszczalnika. Reakcję można alternatywnie prowadzić w obecności odpowiedniego katalizatora metalicznego, np. platyny lub palladu ewentualnie na obojętnym nośniku takim jak węgiel, korzystnie w rozpuszczalniku takim jak metanol lub etanol.
Jako inny przykład procesu wzajemnego przekształcania, związki o wzorze (I) zawierające gru12 pę -C(=O)-NY1Y2 można wytworzyć metodą sprzęgania związków o wzorze (I) zawierających grupę 12 karboksylową z aminą o wzorze -NY1Y2, tworząc wiązanie amidowe z zastosowaniem standardowych metod sprzęgania peptydów, np. sprzęgania w obecności heksafluorofosforanu O-(7-azabenzotriazol-1-ilo)-1,1,3,3-tetrametylouroniowego i trietyloaminy (lub diizopropyloetyloaminy), w tetrahydrofuranie (lub dimetyloformamidzie), w temperaturze pokojowej. Sprzęganie można także przeprowadzić na drodze reakcji związków o wzorze (I) zawierających grupę karboksylową z N-tlenkiem heksafluorofosforanu N-{(dimetyloamino) (1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]pirydyn-1-ylo)metyleno}-N-metylometanoamoniowego w obecności odpowiedniej zasady, takiej jak diizopropyloetyloamina, w obojętnym rozpuszczalniku, takim jak dimetyloformamid, i w temperaturze w przybliżeniu pokojowej, a następnie na drodze reakcji z aminą o wzorze HNY1Y2 (do wytwarzania związków o wzorze (I) zawierających grupę -C(=O)-NH2 można stosować chlorek amonu).
Jako inny przykład procesu wzajemnego przekształcania, związki o wzorze (I) zawierające grupę -CH2OH można wytworzyć przez redukcję odpowiednich związków o wzorze (I) zawierających grupę -CHO lub -CO2R7 (w której R7 oznacza niższy alkil). Np. redukcję można dogodnie prowadzić na drodze reakcji z wodorkiem litowoglinowym, w obojętnym rozpuszczalniku, takim jak tetrahydrofuran, i w temperaturze od w przybliżeniu temperatury pokojowej do temperatury wrzenia rozpuszczalnika.
1
Jako inny przykład procesu wzajemnego przekształcania, związki o wzorze (I), w którym R1 oznacza indolil podstawiony przez aryl (lub heteroaryl), można wytworzyć metodą traktowania związ1 ków o wzorze (I), w którym R1 oznacza indolil podstawiony przez hydroksyl N-fenylotrifluorometanosulfonoimidem jak to opisano tu powyżej, a następnie reakcji uzyskanego trifluorometanosulfonianu z estrem arylowym (lub heteroarylowym) kwasu boronowego w obecności odpowiedniego katalizatora (np. tetrakis(trifenylofosfino)palladu i wodnego roztworu diwęglanu sodowego, w obojętnym rozpuszczalniku, takim jak dimetyloformamid, i w temperaturze około 120-150°C.
1
Jako inny przykład procesu wzajemnego przekształcania, związki o wzorze (I), w którym R1 oznacza indolil podstawiony przez hydroksyl, można wytworzyć na drodze reakcji odpowiednich 1 związków o wzorze (I), w którym R1 oznacza indolil podstawiony przez metoksyl, z kwasem Lewisa,
PL 218 884 B1 takim jak tribromek boru, w obojętnym rozpuszczalniku, takim jak dichlorometan i w temperaturze od około 0°C do w przybliżeniu temperatury pokojowej.
1
Jako inny przykład procesu wzajemnego przekształcania, związki o wzorze (I), w którym R1 oznacza indolil podstawiony przez -OR4, można wytworzyć metodą alkilowania odpowiednich związ1 ków o wzorze (I), w którym R1 oznacza indolil podstawiony przez hydroksyl, z zastosowaniem związków o wzorze (VII):
R4-X3 (VII) w którym R4 ma wcześniej podane znaczenie i X3 oznacza atom fluorowca, korzystnie atom bromu, lub tosyl, stosując standardowe warunki alkilowania. Alkilowanie można np. prowadzić w obecności zasady, takiej jak węglan metalu alkalicznego (np. węglan potasu lub węglan cezu), alkoholanu metalu alkalicznego (np. tert-butanolanu potasu) lub wodorku metalu alkalicznego (np. wodorku sodu), w dimetyloformamidzie, lub sulfotlenku dimetylu, w temperaturze od około 0°C do około 100°C.
Alternatywnie związki o wzorze (I), w którym R1 oznacza indolil podstawiony przez -OR4, można 1 wytworzyć na drodze reakcji odpowiednich związków o wzorze (I), w którym R1 oznacza indolil podstawiony przez hydroksyl, z odpowiednim alkoholem o wzorze (VIII):
R4-OH (VIII) w którym R4 ma wcześniej podane znaczenie, w obecności triarylofosfiny, takiej jak trifenylofosfina, i acetylenodikarboksylanu dialkilu, takiego jak acetylenodikarboksylan diizopropylu lub acetylenodikarboksylan dimetylu, w obojętnym rozpuszczalniku, takim jak toluen, i w temperaturze w przybliżeniu pokojowej.
1
Jako inny przykład procesu wzajemnego przekształcania, związki o wzorze (I), w którym R1 oznacza indolil podstawiony przez -OR4, w którym R4 oznacza propyl podstawiony przez hydroksyl, można wytworzyć na drodze reakcji odpowiednich związków o wzorze (I), w którym R4 oznacza indolil podstawiony przez -OR4, w którym R4 oznacza propenyl, z borowodorem, a następnie na drodze reakcji z nadtlenkiem wodoru w obecności wodorotlenku sodu. Ta procedura jest szczególnie odpo1 wiednia do wytwarzania związków o wzorze (I), w którym R1 oznacza indolil podstawiony przez -OCH2CH(CH3)OH i -OCH2CH2CH2OH.
1
Jako inny przykład procesu wzajemnego przekształcania, związki o wzorze (I), w którym R1 oznacza indolil podstawiony przez-OR4, w którym R4 oznacza 1,3-dihydroksyalkilen, można wytworzyć na drodze reakcji odpowiednich związków, w których R4 oznacza alkenyl, z tetratlenkiem osmu w obecności N-tlenku 4-metylomorfoliny. Reakcję można dogodnie prowadzić w obojętnym rozpuszczalniku, takim jak aceton, i w temperaturze w przybliżeniu pokojowej.
Jako inny przykład procesu wzajemnego przekształcania, związki o wzorze (la), w którym R9 oznacza alkil, cykloalkil, lub alkil podstawiony przez -C(=O)NY1Y2 lub -OR6, -C(=O)-OH, -NY1Y2, można wytworzyć metodą alkilowania odpowiednich związków o wzorze (la), w którym R9 oznacza atom wodoru, z odpowiednim halogenkiem o wzorze (IX):
R9-X4 (IX) w którym R9 oznacza alkil, cykloalkil lub alkil podstawiony przez -C(=O)NY1Y2, -OR7, -C(=O)OH, a X4 oznacza atom fluorowca, korzystnie atom bromu, stosując standardowe warunki alkilowania, np. wcześniej tu opisane.
Jako inny przykład procesu wzajemnego przekształcania, związki o wzorze (I) zawierające wiązania sulfonowe można wytworzyć metodą utleniania odpowiednich związków zawierających wiązania -S- lub sulfotlenkowe. Utlenianie może np. dogodnie prowadzić na drodze reakcji z peroksykwasem, np. kwasem 3-chloronadbenzoesowym, korzystnie w obojętnym rozpuszczalniku, np. dichlorometanie, korzystnie w lub w pobliżu temperatury pokojowej.
Jako inny przykład procesu wzajemnego przekształcania, związki o wzorze (I) zawierające grupę cyjanową można wytworzyć na drodze reakcji odpowiednich związków o wzorze (I) zawierających grupę -C(=O)-NH2 z pentachlorkiem fosforu w obecności trietyloaminy. Reakcję można dogodnie prowadzić w obojętnym rozpuszczalniku, takim jak tetrahydrofuran, i w temperaturze wrzenia rozpuszczalnika.
Jako inny przykład procesu wzajemnego przekształcania, związki o wzorze (I) zawierające grupę tetrazolilową można wytworzyć na drodze reakcji odpowiednich związków o wzorze (I) zawierająPL 218 884 B1 cych grupę cyjanową z azydotributylocyną. Reakcję można dogodnie prowadzić w obojętnym rozpuszczalniku, takim jak toluen, i w temperaturze wrzenia rozpuszczalnika.
Należy zauważyć, że opisane związki mogą zawierać centra asymetryczne. Te centra asymetryczne mogą niezależnie mieć konfigurację R lub S. Dla fachowców w tej dziedzinie będzie oczywiste, że niektóre związki mogą także wykazywać izomerię geometryczną. Należy zauważyć, że opisane tutaj związki mogą występować jako pojedyncze izomery geometryczne oraz stereoizomery i ich mieszaniny, w tym mieszaniny racemiczne, związków o powyższym wzorze (I). Takie izomery można rozdzielać z ich mieszanin stosując lub adaptując znane metody, np. techniki chromatograficzne i krystalizacji, lub można je wytworzyć osobno z odpowiednich izomerów związków pośrednich.
Zgodnie z następną cechą wynalazku, sole addycyjne z kwasami związków według wynalazku można wytworzyć na drodze reakcji wolnej zasady z odpowiednim kwasem, stosując lub adaptując znane metody. Np. sole addycyjne z kwasami związków według wynalazku można wytworzyć metodą rozpuszczenia wolnej zasady w wodzie lub wodnym roztworze alkoholu lub innych odpowiednich rozpuszczalnikach zawierających odpowiedni kwas i wydzielić sól przez zatężenie roztworu, lub poprzez poddanie reakcji wolnej zasady i kwasu w organicznym rozpuszczalniku, w którym to przypadku sól wydziela się bezpośrednio lub poprzez zatężenie roztworu.
Sole addycyjne z kwasami związków według wynalazku można regenerować z soli, stosując lub adaptując znane metody. Np. macierzyste związki według wynalazku można regenerować z ich soli addycyjnych z kwasami, traktując je roztworem alkalicznym, np. wodnym roztworem wodorowęglanu sodowego lub wodnym roztworem amoniaku.
Związki według wynalazku można regenerować z ich soli addycyjnych z zasadami, stosując lub adaptując znane metody. Np. macierzyste związki według wynalazku można regenerować z ich soli addycyjnych z zasadami, traktując je kwasem np. kwasem solnym.
Związki według niniejszego wynalazku można dogodnie wytwarzać lub mogą one powstawać w sposobie wytwarzania jako solwaty (np. hydraty). Hydraty związków można dogodnie wytworzyć metodą krystalizacji z mieszaniny rozpuszczalników wodnego/ organicznego, stosując organiczne rozpuszczalniki takie jak dioksan, tetrahydrofuran lub metanol.
Zgodnie z następnym przedmiotem według wynalazku, sole addycyjne z zasadami związków według wynalazku można wytworzyć na drodze reakcji wolnego kwasu z odpowiednią zasadą, stosując lub adaptując znane metody. Np. sole addycyjne z zasadami związków według wynalazku można wytworzyć metodą rozpuszczenia wolnego kwasu w wodzie lub wodnym roztworze alkoholu lub innych odpowiednich rozpuszczalnikach zawierających odpowiednią zasadę i wydzielić sól przez zatężenie roztworu, lub poprzez poddanie reakcji wolnego kwasu i zasady w organicznym rozpuszczalniku, w którym to przypadku sól wydziela się bezpośrednio lub można ją uzyskać poprzez zatężenie roztworu.
Substancje wyjściowe i związki pośrednie można wytworzyć stosując lub adaptując znane metody, np. metody opisane w Przykładach porównawczych lub jednoznacznie im równoważne.
1
Związki o wzorze (IV), w którym R1 ma wcześniej podane znaczenie, można wytworzyć na drodze reakcji odpowiednich związków o wzorze (1):
R1-CHO (1) 1 w którym R1 ma wcześniej podane znaczenie, z chlorowodorkiem hydroksyloaminy w obojętnym rozpuszczalniku, takim jak dimetyloformamid, i w temperaturze około 150°C.
10
Związki o wzorze (IV), w którym R1 reprezentuje wzór (Ila), w którym R10 i p mają wcześniej 9 1 2 podane znaczenia, a R9 oznacza alkil, cykloalkil lub alkil podstawiony przez -C(=O)NY1Y2, -C(=O)-OH, 1 można wytworzyć metodą alkilowania odpowiednich 1H-indoli o wzorze (IV), w którym R1 reprezentuje wzór (Ila), w którym R10 i p mają wcześniej podane znaczenia, a R9 oznacza atom wodoru, z odpowiednim (ewentualnie podstawionym) halogenkiem alkilu lub cykloalkilu, stosując standardowe warunki alkilowania. Alkilowanie może np. prowadzić w obecności zasady, takiej jak węglan metalu alkalicznego, np. węglan potasu, lub wodorek metalu alkalicznego, np. wodorek sodu, w obojętnym rozpuszczalniku, takim jak dimetyloformamid lub sulfotlenek dimetylu, w temperaturze od w przybliżeniu temperatury pokojowej do około 100°C.
1
Związki o wzorze (IV), w którym R1 oznacza 5,6,7,8-tetrahydroindolizyn-1-yl można wytworzyć na drodze:
(i) reakcji kwasu piperydyno-2-karboksylowego z kwasem mrówkowym i bezwodnikiem octowym w temperaturze w przybliżeniu pokojowej;
PL 218 884 B1 (ii) traktowania uzyskanego 1-formylopiperydyno-2-karboksylanu sodu z chlorkiem 4-toluenosulfonylu w obojętnym rozpuszczalniku, takim jak dichlorometan, i w temperaturze w przybliżeniu pokojowej;
(iii) reakcji z akrylonitrylem w obecności trietyloaminy, w temperaturze w przybliżeniu pokojowej.
1
Związki o wzorze (1), w którym R1 ma wcześniej podane znaczenie, można wytworzyć metodą formylowania związków o wzorze (2):
R1-H (2) w którym R ma wcześniej podane znaczenie, z zastosowaniem standardowych warunków reakcji, np. stosując reakcję formylowania Vilsmeier-Haacka stosując oksychlorek fosforu w dimetyloformamidzie. Ta procedura jest szczególnie odpowiednia do wytwarzania związków o wzorze (1), 1 w którym R1 oznacza ewentualnie podstawiony N-metyloindol-3-il.
3 1 2
Związki o wzorze (V), w którym R1, R3 i X1 mają wcześniej podane znaczenia, a X2 oznacza atom jodu, można wytworzyć metodą jodowania związków o wzorze (3):
3 1 w którym R1, R3 i X1 mają wcześniej podane znaczenia. Reakcję jodowania można dogodnie prowadzić stosując lub adaptując procedury opisane przez Saulnier i Gribble, w J. Org. Chem., 1982,
47, 1982, np. traktując związki o wzorze (3) diizopropyloamidkiem litu w obojętnym rozpuszczalniku, takim jak tetrahydrofuran, i w temperaturze około -78°C, a następnie uzyskany anion poddać reakcji z jodem. Tę reakcję dogodnie prowadzi się z zabezpieczoną grupą NH indolu przez np. tosyl.
3 1
Związki o wzorze (3), w którym R1, R3 i X1 mają wcześniej podane znaczenia, można wytworzyć metodą cyklizacji związków o wzorze (4):
.CHO
Ν Ν Η
3 1 w którym R1, R3 i X1 mają wcześniej podane znaczenia. Reakcję cyklizacji można dogodnie prowadzić w obecności alkoholanu metalu alkalicznego, takiego jak etanolan sodu, w obojętnym rozpuszczalniku, takim jak etanol, i w temperaturze od w przybliżeniu temperatury pokojowej do temperatury wrzenia rozpuszczalnika.
1 2
Związki o wzorze (3), w którym R3 i X1 mają wcześniej podane znaczenia, a R2 oznacza atom wodoru, można wytworzyć metodą cyklizacji związków o wzorze (5):
w którym R3 i X1 mają wcześniej podane znaczenia. Reakcję cyklizacji można dogodnie prowadzić w obecności amidku sodu, w N-metyloanilinie i w temperaturze od około 120°C do około 200°C.
PL 218 884 B1
2 1
Związki o wzorze (3), w którym R3, R2 i X1 mają wcześniej podane znaczenia, można wytworzyć przez:
(i) reakcję związków o wzorze (7)
Ν NH (7)
1 6 w którym R3 i X1 mają wcześniej podane znaczenia, a X6 oznacza atom fluorowca, korzystnie atom jodu, z acetylenami o wzorze (8):
R2-CEC-SiMe3 (8) 2 w którym R2 ma wcześniej podane znaczenie, w obecności kompleksu katalizatora metalicznego takiego jak chlorek [1,1'-bis(difenylofosfino)ferroceno]palladu (II), chlorku litu i węglanu sodu, w obojętnym rozpuszczalniku, takim jak dimetyloformamid, i w temperaturze do około 100°C;
(ii) i destylację.
3 1
Związki o wzorze (4), w którym R1, R3 i X1 mają wcześniej podane znaczenia, można wytworzyć na drodze reakcji związków o wzorze (9):
(9)
3 1 w którym R2, R3 i X1 mają wcześniej podane znaczenia, z mieszaniną kwasu mrówkowego i bezwodnika octowego.
Związki o wzorze (5), w którym R3 i X1 mają wcześniej podane znaczenia, można wytworzyć na drodze reakcji odpowiednich związków o wzorze (9), w którym R3 i X1 mają wcześniej podane znacze2 nia, a R2 oznacza atom wodoru, z ortomrówczanem trietylu, w obecności katalizatora kwasowego, takiego jak chlorowodór, w etanolu i w temperaturze od w przybliżeniu temperatury pokojowej do temperatury wrzenia rozpuszczalnika.
Związki o wzorze (6), w którym R3, R11 i X1 mają wcześniej podane znaczenia, a X5 oznacza
1 6 atom fluorowca, można wytworzyć metodą alkilowania związków o wzorze (7), w którym R3, R1 i X6 mają wcześniej podane znaczenia, z zastosowaniem odpowiedniego halogenku alkenylu o wzorze (10):
R11CH=CH-CH2-X7 (10)
7 w którym R11 ma wcześniej podane znaczenie, a X7 oznacza atom fluorowca, korzystnie atom bromu. Alkilowanie można dogodnie prowadzić w obecności wodorku metalu alkalicznego, takiego jak wodorek sodu, w obojętnym rozpuszczalniku, takim jak tetrahydrofuran, i w temperaturze w przybliżeniu pokojowej.
1 6
Związki o wzorze (7), w którym R3 i X1 mają wcześniej podane znaczenia, a X6 oznacza atom bromu, można wytworzyć metodą bromowania związków o wzorze (11):
w którym R3 i X1 mają wcześniej podane znaczenia w sulfotlenku dimetylowym.
PL 218 884 B1
1 5
Związki o wzorze (7), w którym R3 i X1 mają wcześniej podane znaczenia, a X5 oznacza atom 31 jodu, można wytworzyć metodą jodowania związków o wzorze (11), w którym R3 i X1 mają wcześniej podane znaczenia. Jodowanie można prowadzić stosując lub adaptując metodę według W-W.Sy, Synth. Comm., 1992, 22, str. 3215-3219.
Związki o wzorze (V), w którym R1, R2, R3 i X1 mają wcześniej podane znaczenia, a X5 oznacza grupę trifluorometanosulfonianową, którą można wytworzyć na drodze reakcji związków o wzorze (12):
3 1 w którym R2, R3 i X1 mają wcześniej podane znaczenia, z bezwodnikiem trifluorometanosulfonowym w obecności zasady Hunigsa, w obojętnym rozpuszczalniku, takim jak dichlorometan, i w temperaturze około 0°C. Tę reakcję dogodnie prowadzi się przy zabezpieczonej grupie NH indolu przez np. tosyl.
3 1
Związki o wzorze (12), w którym R2, R3 i X1 mają wcześniej podane znaczenia, można wytworzyć na drodze reakcji związków o wzorze (13):
w którym R3 i X1 mają wcześniej podane znaczenia, z kwasem meta-chloronadbenzoesowym, w obojętnym rozpuszczalniku, takim jak dichlorometan, i w temperaturze około 5°C. Tę reakcję dogodnie prowadzi się przy zabezpieczonej grupie NH indolu przez np. tosyl.
Związki o wzorze (13), w którym R3 i X1 mają wcześniej podane znaczenia, można wytworzyć na drodze reakcji związków o wzorze (14):
w którym R3 i X1 mają wcześniej podane znaczenia, z diizopropyloamidkiem litu, w obojętnym rozpuszczalniku, takim jak tetrahydrofuran, a następnie przeprowadzając reakcję z dimetyloformamidem w temperaturze około -78°C. Tę reakcję dogodnie prowadzi się przy zabezpieczonej grupie NH indolu przez np. tosyl.
Związki o wzorze (14), w którym R3 i X1 mają wcześniej podane znaczenia, można wytworzyć 3 1 6 na drodze reakcji związków o wzorze (7), w którym R3 i X1 mają wcześniej podane znaczenia, a X6
PL 218 884 B1 oznacza atom jodu, z trimetylosililoacetylenem w obecności kompleksu katalizatora metalicznego takiego jak chlorek [1,1'-bis(difenylofosfino)ferroceno]palladu (II), a następnie zastosować destylację.
1
Związki o wzorze (VI), w którym R1 ma wcześniej podane znaczenie, można wytworzyć metodą reakcji związków o wzorze (15):
R1-X8 (15) w którym R ma wcześniej podane znaczenie i X8 oznacza atom fluorowca, korzystnie atom bromu, w obecności boranu tributylu, z odpowiednią zasadą, taką jak butylolit, w obojętnym rozpuszczalniku, takim jak tetrahydrofuran, i w temperaturze około -100°C.
1
Związki o wzorze (VI), w którym R1 ma wcześniej podane znaczenie, można także wytworzyć traktując związki o wzorze (15), w którym R1 ma wcześniej podane znaczenie, a X8 oznacza grupę -HgOAc, z borowodorem, w obojętnym rozpuszczalniku, takim jak tetrahydrofuran, i w temperaturze w przybliżeniu pokojowej.
Związki o wzorze (15), w którym R1 oznacza ewentualnie podstawiony indol-3-il, a X8 oznacza atom bromu, można wytworzyć na drodze reakcji ewentualnie podstawionych indoli z bromem w obojętnym rozpuszczalniku, takim jak dimetyloformamid, i w temperaturze w przybliżeniu pokojowej.
Związki o wzorze (13), w którym R1 oznacza ewentualnie podstawiony indol-3-il, a X8 oznacza grupę -HgOAc, można wytworzyć na drodze reakcji ewentualnie podstawionych indoli z octanem rtęci w lodowatym kwasie octowym w temperaturze w przybliżeniu pokojowej.
Poniżej zamieszczono Przykłady i Przykłady porównawcze, które ilustrują niniejszy wynalazek, w żadnym razie nie ograniczając jego zakresu.
1
Widma jądrowego rezonansu magnetycznego 400 M Hz 1H (NMR) rejestrowano na urządzeniu Varian Unity INOVA. W widmach jądrowego rezonansu magnetycznego (NMR) przesunięcia chemiczne (δ) wyrażono w ppm względem tetrametylosilanu. Skróty mają następujące znaczenia: s = singlet; d = dublet; t = triplet; m = multiplet; q = kwartet; dd = podwójny dublet; ddd = dublet podwójnego doubletu.
Czasy retencji w wysokociśnieniowej chromatografii cieczowej (HPLC: wartości RT) określono:
(i) Metodą A, kolumna C18 Phenomenex (150 x 4,6 mm), stosując elucję gradientem mieszaniny acetonitrylu i wody z 0,1% dodatkiem kwasu trifluorooctowego stanowiącej fazę ruchomą (0-1 minuty - 5% acetonitrylu; 1-12 minuty - płynnie aż do 95% acetonitrylu; 12-14,95 minuty - 95% acetonitrylu; 14,95-15 minuty - 0% acetonitrylu); lub Metodą B, kolumna YMC ODS-AQ (2 X 50 mm), stosując elucję gradientem mieszaniny acetonitrylu i wody z 0,1% dodatkiem kwasu mrówkowego stanowiącej fazę ruchomą [95/5/0,1% (A) do 5/95/0,1% (B)] i z szybkością przepływu 0,4 ml/minutę); lub Metodą C z zastosowaniem kolumny i elucji gradientem mieszaniny acetonitrylu i wody z 0,1% dodatkiem kwasu mrówkowego stanowiącej fazę ruchomą (95/5/0,1%, woda/acetonitryl/kwas mrówkowy przez 0,1 minuty gradient liniowy do 5/95/0,1%, woda/acetonitryl/kwas mrówkowy do 2 minut i zatrzymanie aż do 3,5 minuty).
Wartości RF w chromatografii cienkowarstwowej (TLC) określono z zastosowaniem płytek Merck'a pokrytych krzemionką.
P r z y k ł a d 13 (a) kwas [5-metoksy-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)indol-1-ilo]octowy
Mieszaninę estru etylowego kwasu {5-metoksy-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]indol-1-ilo}octowego [4,67 g, Przykład porównawczy 13(a)], metanolu (250 ml) i wodnego roztworu wodorotlenku potasu (5 M, 25 ml) ogrzewano w temperaturze wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 7 godzin. Metanol usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość potraktowano wodą (20 ml) i wartość pH tego roztworu uregulowano do 7 dodając stężony kwas chlorowodorowy. Uzyskane żółte ciało stałe przesączono i poddano szybkiej chromatografii na krzemionce, eluując mieszaniną octanu etylu i metanolu (7:3, objętościowo), uzyskując tytułowy związek (1,69 g) w postaci białego ciała stałego. MS: 320 (M-H+). HPLC (Metoda A): RT = 6,67 minuty.
(b) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie 13(a), lecz stosując 4-metoksy-2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę [Przykład porównawczy 2(1)] wytworzono 4-metoksy-2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci brązowego ciała stałego, temperatura topnienia 288-289°C. MS: 307(MH+).
(c) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie 13(a), lecz stosując 4-metoksy-2-(5-metoksy-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę (Przykład porównawczy 39) wytworzono 4-metoksy-2-(5-metoksy-1H-indol-3-ilo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci brązowego ciała stałego, temperatura topnienia 294-295°C. MS: 294 (MH+).
PL 218 884 B1
P r z y k ł a d 14 (a) 2-{[5-metoksy-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)indol-1-ilo]-1-morfolin-4-ylo}etanon
Zawiesinę kwasu [5-metoksy-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)indol-1-ilo]octowego [60 mg, Przykład 13(a)] w suchym dimetyloformamidzie (7 ml) potraktowano N-tlenkiem heksafluorofosforanu N-{(dimetyloamino)(1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]pirydyn-1-ylo)metyleno}-N-metylometanoaminy (71 mg) i diizopropyloetyloaminą (45 μΐ). Po wymieszaniu w temperaturze pokojowej przez 30 minut dodano morfolinę (18 μθ i mieszaninę mieszano w temperaturze otoczenia przez kolejne 12 godzin. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość zawieszono w nasyconym roztworze wodorowęglanu sodu. Wytrącone ciało stałe przesączono, po czym osuszono, uzyskując tytułowy związek (10 mg) w postaci fioletowego ciała stałego, temperatura topnienia 243-247°C. MS: 391 (MH+).
(b) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 14(a), lecz stosując kwas 1-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]cyklobutanokarboksylowy [Przykład 15 (c)] i chlorek amonu, wytworzono amid kwasu 1-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]cyklobutanokarboksylowego w postaci jasnoliliowego ciała stałego, temperatura topnienia 267-268°C. MS: 361 (MH+).
(c) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 14(a), lecz stosując kwas
1-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]cyklobutanokarboksylowy [Przykład 15 (c)] i metyloaminę, wytworzono metyloamid kwasu 1-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]cyklobutanokarboksylowego w postaci jasnoliliowego ciała stałego, temperatura topnienia
249-250°C. MS: 375 (MH+).
(d) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 14(a), lecz stosując kwas 1-metylo-3-(1H-pirolo-[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowy [Przykład 15(d)] i metyloaminę, wytworzono metyloamid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowego w postaci jasno pomarańczowego ciała stałego, temperatura topnienia 186°C. MS:
304 (MH+).
(e) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 14(a), lecz stosując kwas 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowy [Przykład 15(d)] i etanoloaminę, wytworzono (2-hydroksyetylo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowego w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 256-257°C. MS: 335 (MH+).
(f) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 14(a), lecz stosując kwas 1-metylo-3-(1H-pirolo-[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowy [Przykład 15(d)] i 2-aminoetylomorfolinę, wytworzono (2-morfolin-4-yloetylo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowego w postaci bezbarwnego ciała stałego, temperatura topnienia 268-270°C.
MS: 404 (MH+).
(g) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 14(a), lecz stosując kwas 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowy [Przykład 15(d)] i β-alaninoamid, wytworzono (2-karbamoiloetylo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowego w postaci bezbarwnego ciała stałego, temperatura topnienia 286-288°C. MS: 362 (MH+).
(h) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 14(a), lecz stosując kwas 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowy [Przykład 15(d)] i dietanoloaminę, wytworzono bis-(2-hydroksyetylo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowego w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 230-232°C. MS: 379 (MH+).
(i) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 14(a), lecz stosując kwas 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowy [Przykład 15(d)] i chlorek amonu, wytworzono amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowego w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 330-332°C. MS: 291 (MH+).
(j) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 14(a), lecz stosując kwas 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowy [Przykład 15(d)] i tris(hydroksymetylo)aminometan, wytworzono (2-hydroksy-1,1-bis-hydroksymetyloetylo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowego w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 205-206°C. MS: 395 (MH+).
(k) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 14(a), lecz stosując kwas 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowy [Przykład 15(d)] i 2-amino-2PL 218 884 B1
-metylo-1,3-propanodiol, wytworzono (2-hydroksy-1-hydroksymetylo-1-metyloetylo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowego w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 180-182°C. MS: 379 (MH+).
(l) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 14(a), lecz stosując kwas
1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowy [Przykład 15(d)] i 3-amino-1,2-propanodiol, wytworzono (2,3-dihydroksypropylo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo-[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowego w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 171-172°C. MS: 365 (MH+).
(m) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 14(a), lecz stosując kwas 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowy [Przykład 15 (d)] i 2-amino-2-metylo-1-propanol, wytworzono (2-hydroksy-1,1-dimetyloetylo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowego w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 161-162°C. MS: 365 (MH+).
(n) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 14(a), lecz stosując kwas 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowy [Przykład 15(d)] i serynol, wytworzono (2-hydroksy-1-hydroksymetyloetylo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowego w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 178-179°C. MS: 365,41 (MH+).
(o) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 14(a), lecz stosując kwas 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-6-karboksylowy [Przykład 15(g)] i chlorowodorek 3-aminopropionoamidu, wytworzono (2-karbamoiloetylo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-6-karboksylowego w postaci jasnożółtego ciała stałego, temperatura topnienia 277-280°C. MS: 362 (MH+).
(p) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 14(a), lecz stosując kwas 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-6-karboksylowy [Przykład 15(g)] i etanoloaminę, wytworzono (2-hydroksyetylo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-6-karboksylowego w postaci brązowego ciała stałego, temperatura topnienia 264-267°C. MS: 335 (MH+).
(q) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 14(a), lecz stosując kwas 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-6-karboksylowy [Przykład 15 (g)] i 1H-[1,2,4]triazol-3-iloaminę, wytworzono (1H-[1,2,4]-triazol-3-ilo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-6-karboksylowego w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 343-345°C. MS: 358 (MH+).
(r) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 14(a), lecz stosując kwas 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-6-karboksylowy [Przykład 15(g)] i serynol, wytworzono (2-hydroksy-1-hydroksymetyloetylo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-6-karboksylowego w postaci jasnobrązowego ciała stałego, temperatura topnienia 247-249°C. MS: 365 (MH+).
P r z y k ł a d 15 (a) kwas [1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]octowy
Roztwór estru etylowego kwasu (1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}octowego [500 mg, Przykład porównawczy 15(b)] w metanolu (25 ml) potraktowano wodorotlenkiem potasu (5 N, 3 ml), a następnie ogrzewano w temperaturze wrzenia przez 16 godzin. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość potraktowano wodą (10 ml). Wartość pH tej mieszaniny uregulowano do 7 dodając kwas octowy i uzyskane bezbarwne ciało stałe zebrano przez filtrację, a następnie osuszono, uzyskując tytułowy związek (170 mg) w postaci bezbarwnego ciała stałego, temperatura topnienia >300°C. MS: 322 (MH+).
(b) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 15(a), lecz stosując ester etylowy kwasu 3-(1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}propionowego [Przykład porównawczy 15(c)] wytworzono kwas 3-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]propionowy w postaci bezbarwnego ciała stałego, temperatura topnienia 177-178°C. MS: 336 (MH+).
(c) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 15(a), lecz stosując ester etylowy kwasu 1-(1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}cyklobutanokarboksylowego [Przykład porównawczy 15(d)] wytworzono kwas 1-[1-metylo-3-(1H-pi50
PL 218 884 B1 rolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]cyklobutanokarboksylowy w postaci bezbarwnego ciała stałego, temperatura topnienia 168-169°C. MS: 362 (MH+).
(d) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 15(a), lecz stosując ester metylowy kwasu 1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indolo-5-karboksylowego [Przykład porównawczy 19(a)] wytworzono kwas 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowy w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia > 300°C. MS: 291 (MH+).
(e) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 15(a), lecz stosując 1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-ol [Przykład porównawczy 14(a)] wytworzono 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-ol w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 199-200°C. MS: 264 (MH+).
(f) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 15(a), lecz stosując ester etylowy kwasu 1-{1-(cyklobutanokarboksylan etylu)-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}cyklobutanokarboksylowego [Przykład porównawczy 23(d)] wytworzono kwas 1-{1-(kwas cyklobutanokarboksylowy)-3-[1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}cyklobutanokarboksylowy w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 240°C (z rozkładem). MS: 444 (MH-).
(g) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 15(a), lecz stosując ester metylowy kwasu 1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indolo-6-karboksylowego [Przykład porównawczy 13(g)] wytworzono kwas 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-6-karboksylowy w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 359-361°C. MS: 292 (MH+).
(h) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 15(a), lecz stosując ester etylowy kwasu 3-(1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-ilo}propionowego [Przykład porównawczy 38(a)] wytworzono kwas 3-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-ilo]propionowy w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 268-270°C. MS: 320 (MH+).
P r z y k ł a d 16 (a) 2-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]etanol
Roztwór estru etylowego kwasu (1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}octowego [120 mg, Przykład porównawczy 15(b)] w suchym tetrahydrofuranie (5 ml) potraktowano wodorkiem litowoglinowym (1,0 M roztwór w tetrahydrofuranie, 50 μΐ) w temperaturze 0°C, w atmosferze azotu. Mieszaninę pozostawiono do ogrzania do temperatury otoczenia, następnie mieszano przez 3 godziny, po czym ostrożnie wylano do wody (75 ml). Mieszaninę ekstrahowano trzy razy octanem etylu (25 ml). Połączone ekstrakty organiczne przemyto solanką (75 ml), następnie osuszono nad siarczanem sodu, po czym zatężono, uzyskując tytułowy związek (45 mg) w postaci bezbarwnego ciała stałego, temperatura topnienia 209-210°C. MS: 308 (MH+).
(b) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 16(a), lecz stosując ester etylowy kwasu 3-(1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}propionowego [Przykład porównawczy 15(c)] wytworzono 3-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]propan-1-ol w postaci bezbarwnego ciała stałego, temperatura topnienia 164-165°C. MS: 320 (MH+).
(c) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 16(a), lecz stosując ester etylowy kwasu 1-(1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}cyklobutanokarboksylowego [Przykład porównawczy 15(d)] wytworzono {1-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]cyklobutylo}metanol w postaci bezbarwnego ciała stałego, temperatura topnienia 144-146°C. MS: 348 (MH+). HPLC (Metoda A): RT = 6,37 minuty.
P r z y k ł a d 17 (a) 2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyna
Roztwór 2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyny [1,45 g, Przykład porównawczy 13(b)] w metanolu (100 ml) potraktowano wodorotlenkiem potasu (5 N, 15 ml), a następnie ogrzewano w temperaturze wrzenia przez 2 godziny. Mieszaninę reakcyjną ochłodzono, po czym zatężono. Pozostałość potraktowano wodą (150 ml) i uzyskane ciało stałe przesączono, następnie osuszono, uzyskując tytułowy związek (0,75 g) w postaci brązowego ciała stałego, temperatura topnienia 226-227°C. MS: 278 (MH+).
PL 218 884 B1 (b) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 17(a), lecz stosując 3-(1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}propano-1,2-diol [Przykład porównawczy 16] wytworzono 3-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]propano-1,2-diol w postaci bezbarwnego ciała stałego, temperatura topnienia 202-203°C. MS: 338 (MH+).
(c) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 17(a), lecz stosując 3-(1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}propan-1-ol [Przykład porównawczy 17] wytworzono 3-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]propan-1-ol w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 192-193°C. MS: 322 (MH+).
(d) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 17(a), lecz stosując 3-(1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}propano-2-ol [Przykład porównawczy 17] wytworzono 3-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]propano-2-ol w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 201-202°C. MS: 322 (MH+).
(e) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 17(a), lecz stosując 2-[1-metylo-5-(1-trimetylocyno-1H-tetrazol-5-ilo)-1H-indol-3-ilo]-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę [Przykład porównawczy 20] wytworzono 2-[1-metylo-5-(2H-tetrazol-5-ilo)-1H-indol-3-ilo]-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 303°C. MS: 316 (MH+).
(f) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 17(a), lecz stosując 2-[1-metylo-5-(2-metylo-2H-tetrazol-5-ilo)-1H-indol-3-ilo]-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyna [Przykład porównawczy 21] wytworzono 2-[1-metylo-5-(2-metylo-2H-tetrazol-5-ilo)-1H-indol-3-ilo]-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci beżowego ciała stałego, temperatura topnienia 299-300°C (z rozkładem). MS: 330 (MH+).
(g) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 17(a), lecz stosując 2-[1-metylo-5-(1-metylo-1H-tetrazol-5-ilo)-1H-indol-3-ilo]-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę [Przykład porównawczy 21] wytworzono 2-[1-metylo-5-(1-metylo-1H-tetrazol-5-ilo)-1H-indol-3-ilo]-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci beżowego ciała stałego, temperatura topnienia 286-289°C (z rozkładem). MS: 330 (MH+).
(h) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 17(a), lecz stosując 1-[1-metylo-3-{(1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo}-1H-indol-5-ilo]-etanon [Przykład porównawczy 22] wytworzono 1-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-ilo]etanon w postaci beżowego ciała stałego, temperatura topnienia 210°C (z rozkładem). MS: 290 (MH+).
(i) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 17(a), lecz stosując
2-(5,6-dimetoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę [Przykład porównawczy 13(d)] wytworzono 2-(5,6-dimetoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci beżowego ciała stałego, temperatura topnienia 283-285°C (z rozkładem). MS: 308 (MH+).
(j) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 17(a), lecz stosując (S)-3-(1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}propano-1,2-diol [Przykład porównawczy 24(a)] wytworzono (S)-3-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]propano-1,2-diol w postaci bezbarwnego ciała stałego, temperatura topnienia 182-185°C. MS: 338 (MH+).
(k) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 17(a), lecz stosując (R) -3-(1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}propano-1,2-diol [Przykład porównawczy 24(b)] wytworzono (R)-3-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]propano-1,2-diol w postaci bezbarwnego ciała stałego, temperatura topnienia 153-156°C.
MS: 338 (MH+).
(l) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 17(a), lecz stosując 2-[5-(2-metoksy-1-metyloetoksy)-1-metylo-1H-indol-3-ilo]-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę [Przykład porównawczy 25] wytworzono 2-[5-(2-metoksy-1-metyloetoksy)-1-metylo-1H-indol-3-ilo]-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 150-151°C. MS: 336 (MH+).
(m) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 17(a), lecz stosując 2-[1-metylo-5-(5-metylo-[1,2,4]oksadiazol-3-ilo)-1H-indol-3-ilo]-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę [Przykład porównawczy 27] wytworzono 2-[1-metylo-5-(5-metylo-[1,2,4]oksadiazol-3-ilo)-1H-indol-3-ilo]-1H-pirolo[2,3-b]pirydyna w postaci kremowego ciała stałego, temperatura topnienia 290-294°C. MS: 330 (MH+).
(n) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 17(a), lecz stosując (S) -3-{6-metoksy-1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}propano-1,2-diol [Przykład porównawczy 24(c)] wytworzono (S)-3-[6-metoksy-1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]52
PL 218 884 B1 pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]propano-1,2-diol w postaci kremowego ciała stałego, MS: 368 (MH+). HPLC (Metoda A): RT 5,81 minuty.
(o) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 17(a), lecz stosując 2-(5-hydroksy-6-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę [Przykład porównawczy 28] wytworzono 6-metoksy-1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-ol w postaci brązowego ciała stałego, MS: 294 (MH+). HPLC (Metoda A): RT 6,37 minuty.
(p) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie 17(a), lecz stosując 2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-4-fenylo-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę [Przykład porównawczy 2(m)] wytworzono 2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-4-fenylo-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci żółtego ciała stałego. 1H NMR [(CD3)2SO]; (11,98(1H, s); 8,21(1H, d, J=3,5 Hz); 7,94(1H, s); 7,86(2H, d, J=8,8 Hz); 7,59(2H, t, J=8,8 Hz); 7,47(2H, m); 7,39(1H, d, J=1,9 Hz); 7,17(1H, d, J=3,5 Hz); 6,93(1H, dd, J=8,8, 1,9 Hz); 6,82(1H, s); 3,84(3H, s); 3,82(3H, s).
(q) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie 17(a), lecz stosując 2-[5-(pirydyn-4-ylo)-1-metylo-1H-indol-3-ilo]-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę (Przykład porównawczy 60) wytworzono 2-[1-metylo-5-(pirydyn-4-ylo)-1H-indol-3-ilo]-4-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 325-330°C. 1H NMR [(CD3)2SO]; (8,65(2H, d, J=7,2 Hz); 8,20 (1H, s); 8,15(1H, m); 8,04(1H, s); 7,88(3H, m); 7,72(2H, m); 7,03(1H, t, J=7,2 Hz); 6,96(1H, s); 3,93(3H, s).
(r) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie 17(a), lecz stosując 2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyno-4-karbonitryl [Przykład porównawczy 13(h)] wytworzono 2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyno-4-karboni1 tryl w postaci pomarańczowego ciała stałego, temperatura topnienia 304-305°C. 1H NMR [(CD3)2SO]: 12,60(1H, s); 8,24(1H, s); 8,07(1H, s); 7,50(3H, m); 6,96(1H, d, J=8,6 Hz); 6,88(1H, s); 3,91(3H, s); 3,86(3H, s).
(s) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie 17(a), lecz stosując 4-chloro-2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę [Przykład porównawczy 13(i)] wytworzono 4-chloro-2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci brązowego ciała stałego, temperatura topnienia 250-252°C. MS: 312 (MH+).
P r z y k ł a d 18
1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-ilo-amina
Mieszany roztwór estru tert-butylowego kwasu [1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-ilo]karbaminowego [0,2 g, Przykład porównawczy 30] w dichlorometanie potraktowano kwasem trifluorooctowym (2 ml). Po wymieszaniu w temperaturze otoczenia przez 16 godzin, mieszaninę reakcyjną zatężono. Pozostałość zawieszono w nasyconym roztworze wodorowęglanu sodu (10 ml) i uzyskane ciało stałe przesączono, a następnie osuszono, uzyskując tytułowy związek w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 247-248°C. MS: 263 (MH+).
P r z y k ł a d 19 (a) N-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-ilo]metanosulfonoamid
Roztwór 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloaminy [52,4 mg, Przykład 18] w dichlorometanie (5 ml) potraktowano trietyloaminą (30 ąl), a następnie chlorkiem metanosulfonylu (17 ąl). Po wymieszaniu w temperaturze otoczenia przez 16 godzin, mieszaninę reakcyjną rozcieńczono dichlorometanem (10 ml), następnie przemyto wodą (10 ml), po czym przemyto solanką (10 ml), ponadto osuszono nad siarczanem magnezu, a następnie zatężono. Pozostałe ciało stałe roztarto z eterem dietylowym, uzyskując tytułowy związek w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 223-224°C. MS: 341 (MH+).
(b) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 19(a), lecz stosując chlorek acetylu, wytworzono N-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-ilo]acetamid w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 220-221°C. MS: 305 (MH+).
P r z y k ł a d 20 (a) {1-[5-(1-hydroksymetylocyklobutoksy)-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)indol-1-ilo]cyklobutylo}metanol
Mieszany roztwór estru etylowego kwasu 1-(1-(cyklobutanokarboksylan etylu)-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}cyklobutanokarboksylowego [0,54 g, Przykład porównawczy 23(d)] w tetrahydrofuranie (50 ml), w temperaturze 0°C, w atmosferze azotu potraktowano kroplami roztworem tetrawodoroglinianu litu w tetrahydrofuranie (4,9 ml, 1,0 M). Po wymieszaniu przez 2 godziny w temperaturze 0°C, mieszaninę reakcyjną odstawiono w temperaturze otoczenia
PL 218 884 B1 przez kolejne 18 godzin, a następnie potraktowano kroplami wodą (20 ml), po czym przesączono poprzez ziemię okrzemkową Hyflo Super Cel®. Placek filtracyjny przemyto octanem etylu (20 ml), dwufazowy przesącz oddzielono i warstwę wodną ekstrahowano dwukrotnie octanem etylu (25 ml). Połączone fazy organiczne przemyto solanką (25 ml), następnie osuszono nad siarczanem magnezu, po czym zatężono. Pozostałość roztarto z eterem dietylowym i substancję nierozpuszczalną poddano szybkiej chromatografii kolumnowej na krzemionce, eluując mieszaniną dichlorometanu i metanolu (19:1, objętościowo), uzyskując tytułowy związek (0,19 g) w postaci kremowego ciała stałego, temperatura topnienia 165-166°C. MS: 418 (MH+).
P r z y k ł a d 21 (a) metanosulfonian 2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyny
Kwas metanosulfonowy (70 μΐ) dodano do roztworu 2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyny [300 mg, Przykład 17(a)] w tetrahydrofuranie (20 ml) w temperaturze otoczenia. Mieszaninę mieszano przez 45 minut i uzyskany osad wydzielono przez filtrację, uzyskując tytułowy związek (390 mg), w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 256-257°C. [Analiza elementarna: C-57,60; H-4,77; N-10,90%. Wartości obliczone dla C13H11N3O: C-57,90; H-5,13; N-11,25%].
(c) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 21(a), lecz stosując
2-[5-metoksy-3-(1H-pirolo-[2,3-b]pirydyn-2-ylo)indol-1-ilo]-1-morfolin-4-yloetanon [Przykład 14(a)] wytworzono metanosulfonian 2-[5-metoksy-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)indol-1-ilo]-1-morfolin-4-yloetanonu w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 214-215°C. MS: 391 (MH+).
(d) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 21(a), lecz stosując (2-hydroksy-1,1-dimetyloetylo)amid kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowego [Przykład 14(m)] wytworzono metanosulfonian (2-hydroksy-1 ,1 -dimetyloetylo)amidu kwasu 1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indolo-5-karboksylowego w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 190-192°C. MS: 363 (MH+).
P r z y k ł a d 32 i P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 100
2-(5-metoksy-1H-indol-3-ilo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyno-4-karbonitryl
Tytułowy związek wytworzono stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie porównawczym 12(a), lecz stosując 2-jodo-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyno-4-karbonitryl [Przykład porównawczy 62(a)], w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 303-304°C, TLC RF = 0,07 (octan etylu/heptan 1:1) i 2-(5-metoksy-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyno-4-karbonitryl [Przykład porównawczy 100] w postaci brązowego oleju. MS: 443 (MH+). TLC: RF = 0,38 (octan etylu/heptan 1:1).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 1 (a) 5-metoksy-1-metylo-1H-indolo-3-karbonitryl
5-metoksy-1-metylo-1H-indolo-3-karboaldehyd [76 g, Przykład porównawczy 2(a)] i chlorowodorek hydroksyloaminy (55,9 g) mieszano razem w dimetyloformamidzie (900 ml) w temperaturze wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 1 godzinę. Mieszaninę pozostawiono do ochłodzenia, następnie wylano do wody, po czym ekstrahowano octanem etylu. Połączone ekstrakty przemyto wodą, następnie zatężono, uzyskując tytułowy związek (53 g) w postaci jasnobrązowego ciała stałego, temperatura topnienia 100-104°C. 1H NMR [(CD3)2SO]: 8,17(1H, s); 7,54(1H, d, J=9,0 Hz); 7,09(1H, d, J=2,4 Hz); 6,97(1H, dd, J=9,0 i 2,4 Hz); 3,82 i 3,84 (6H, s).
(b) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 1(a), lecz stosując 1-metylo-5-fenylopirazolo-3-karboaldehyd [Przykład porównawczy 53(b)] wytworzono 1-metylo-3-cyjano-5-fenylopirazol.
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 2 (a) 5-metoksy-1-metylo-1H-indolo-3-karboaldehyd
Roztwór 5-metoksyindolo-3-karboaldehydu (80 g) w dimetyloformamidzie (1 l) w atmosferze azotu potraktowano porcjami wodorku sodu (20,1 g, 60% dyspersja w oleju mineralnym) w czasie 15 minut. Po wymieszaniu w temperaturze otoczenia przez 30 minut, mieszaninę potraktowano kroplami jodkiem metylu (31,3 ml) w czasie 10 minut, a następnie mieszanie kontynuowano przez kolejne 2 godziny. Mieszaninę reakcyjną wylano ostrożnie do wody, po czym ekstrahowano octanem etylu. Fazę organiczną przemyto wodą, następnie osuszono nad siarczanem sodu, po czym zatężono. Pozostałość roztarto z pentanem, uzyskując tytułowy związek (76 g) w postaci jasnobrązowego ciała stałego, temperatura topnienia 133-134°C. 1H NMR [(CD3)2SO]: 9,86(1H, s); 8,20(1H, s); 7,60(1H, d, J=2,6 Hz); 7,50(1H, d, J=8,9 Hz); 6,96(1H, dd, J=8,9 i 2,6 Hz); 3,86 i 3,80 (6H, s).
PL 218 884 B1 (b) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 2(a), lecz stosując indolo-3-karbonitryl, wytworzono 1-metylo-1H-indolo-3-karbonitryl, w postaci bezbarwnego krystalicznego ciała stałego, temperatura topnienia 61-63°C.
(c) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 2(a), lecz stosując indolo-5-karbonitryl, wytworzono 1-metylo-1H-indolo-5-karbonitryl, w postaci bezbarwnego krystalicznego ciała stałego, temperatura topnienia 77-79°C.
(d) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 2(a), lecz stosując indolo-3-karbonitryl i (3-bromopropoksy)tert-butylodimetylosilan, wytworzono 1-[3-(tert-butylodimetylosilanyloksy)propylo]-1H-indolo-3-karbonitryl, w postaci klarownego bezbarwnego oleju, TLC: RF = 0,6 (dichlorometan). 1H NMR (CDCI3): 7,70(1H, d, J=8 Hz); 7,56(1H, s); 7,39(1H, d, J=8 Hz); 7,27(1H, t, J=8 Hz); 7,22(1H, t, J=8 Hz); 4,25(2H, t, J=6 Hz); 3,49(2H, t, J=6 Hz); 1,95(2H, kwintet, J=6 Hz); 0,87(9H, s); 0,00(6H, s).
(e) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 2(a), lecz stosując 5-metoksy-1H-indolo-3-karbonitryl [Przykład porównawczy 1(a)] i (3-bromopropoksy)tert-butylodimetylosilan, wytworzono 1-[3-(tert-butylodimetylosilanyloksy)propylo]-5-metoksy-1H-indolo-31
-karbonitryl, w postaci klarownego bezbarwnego oleju, 1H NMR [(CD3)2SO]: 8,18(1H, s); 7,55(1H, d, J=9 Hz); 7,09(1H, d, J=2 Hz); 6,95(1H, dd, J=9 i 2 Hz); 4,27(2H, t, J=6 Hz); 3,82(3H, s); 3,53(2H, t, J=6 Hz); 1,95(2H, kwintet, J=6 Hz); 0,87(9H, s); 0,00(6H, s).
(f) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 2(a), lecz stosując indolo-3-karbonitryl i (2-bromoetoksy)tert-butylodimetylosilan, wytworzono 1-[2-(tert-butylodimetylosilanyloksy)etylo]-1H-indolo-3-karbonitryl, w postaci klarownego bezbarwnego oleju. TLC: RF = 0,65 (dichlorometan).
(g) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 2(a), lecz stosując 5-metoksy-1H-indolo-3-karbonitryl [Przykład porównawczy 1(a)] i bromek benzylu, wytworzono 1-benzylo-5-metoksy-1H-indolo-3-karbonitryl, w postaci brązowego ciała stałego, MS: 263,22 (MH+). TLC: RF = 0,8 (dichlorometan/metanol: 19/1).
(h) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 2(a), lecz stosując 5-metoksy-1H-indolo-3-karbonitryl [Przykład porównawczy 1(a)] i 2-bromoetoksy-dimetylo-tert-butylosilan, wytworzono 1-[2-(tert-butylodimetylosilanyloksy)etylo]-5-metoksy-1H-indolo-3-karbonitryl, w postaci jasnożółtego ciała stałego, MS: 331,23 (MH+). TLC: RF = 0,6 (pentan/octan etylu: 8/2).
(i) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 2(a), lecz stosując 1H-pirolo-3-karbonitryl (wytworzony według Tetrahedron Letters, 1972, 52, 5337-5340), wy+1 tworzono 1-metylo-1H-pirolo-3-karbonitryl, w postaci brązowego oleju, MS: 107 (MH+). 1H NMR [CDCI3]: 7,09(1H, m); 6,60(1H, m); 6,40(1H, m); 3,68(3H, s).
(j) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 2(a), lecz stosując 1H-pirolo-2-karbonitryl, wytworzono 1-metylo-1H-pirolo-2-karbonitryl w postaci bezbarwnej cieczy. MS: 106 (MH+). 1H NMR [CDCI3]: 6,80(1H, m); 6,67(1H, m); 6,15(1H, m); 3,79(3H, s).
(k) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 2(a), lecz stosując 2-fenylo-1H-pirolo-4-karbonitryl (wytworzony według Synthetic Communications, 25, (1995) 6, 795-802), wytworzono 1-metylo-2-fenylo-1H-pirolo-4-karbonitryl w postaci kremowego ciała stałego, temperatura topnienia 50-51°C. MS: 183 (MH+).
(l) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie porównawczym 2(a), lecz stosując 4-metoksy-2-(5-metoksy-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę (Przykład porównawczy 39) wytworzono 4-metoksy-2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci ciemnego oleju, HPLC (Metoda A): RT 9,49 minuty. TLC: RF 0,50 (pentan/ octan etylu: 1/1).
(m) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie porównawczym 2(a), lecz stosując 2-(5-metoksy-1H-indol-3-ilo)-4-fenylo-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę (Przykład porównawczy 12(g)) wytworzono 2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-4-fenylo-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci brązowego ciała stałego. 1H NMR [(CD3)2SO]; (8,39(1H, d, J=4,4 Hz); 7,71(2H, d, J=7,2 Hz); 7,63(3H, m); 7,52(2H, t, J=8,5 Hz); 7,44(3H, m); 7,29(2H, d, J=7,2 Hz); 6,94(1H, s); 6,86(1H, d, J=8,5 Hz); 6,82(1H, s); 3,86(3H, s); 3,71(3H, s); 2,29(3H, s).
PL 218 884 B1
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 3 (a) 6-{1-[3-(tert-butylodimetylosilanyloksy)propylo]-1H-indol-3-ilo}-5H-pirolo[2,3-b]pirazyna
Tytułowy związek wytworzono stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 1(a), lecz stosując 1-[3-(tert-butylodimetylosilanyloksy)propylo]-1H-indolo-3-karbonitryl [Przykład porównawczy 2(d)], w postaci ciała stałego, 1H NMR [(CD3)2SO]: 12,1-12,2(1H, szeroki s); 8,27(1H, d, J=2,7 Hz); 8,14(1H, s); 8,10, 7,59 (każdy 1H, d, J=7,8 Hz); 8,09(1H, d, J=2,7 Hz); 7,29, 7,23 (każdy 1H, td, J=7,1 i 1,1 Hz); 6,96(1H, s); 4,33(2H, t, J=7,1 Hz); 3,62(2H, t, J=6,0 Hz); 2,03(2H, kwintet, J=6,2 Hz); 0,89(9H, s); 0,00(6H, s). MS: 407 (MH+).
(b) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 1(a), lecz stosując 1-[3-(tert-butylodimetylosilanyloksy)propylo]-5-metoksy-1H-indolo-3-karbonitryl [Przykład porównawczy 2(e)] wytworzono 6-(1-[3-(tert-butylo-dimetylosilanyloksy)propylo]-5-metoksy-1H-indol-3-ilo}-5H-pirolo[2,3-b]pirazynę w postaci ciała stałego, TLC: RF = 0,4 (octan etylu/pentan: 1/1). 5H (d6 DMSO) 8,27(1H, d, 4 Hz); 8,08(2H, m); 7,50(2H, m); 6,96(1H, s); 6,91(1H, dd, 6, 2 Hz); 4,29(2H, t, 6 Hz); 3,89(3H, s); 3,61(2H, t, 6 Hz); 2,00(2H, m); 0,89(9H, s); 0,03(6H, s).
(c) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 1(a), lecz stosując 1-[2-(tert-butylodimetylosilanyloksy)etylo]-1H-indolo-3-karbonitryl [Przykład porównawczy 2(f)] wytworzono
6-(1-[3-(tert-butylodimetylosilanyloksy)etylo]-1H-indol-3-ilo}-5H-pirolo[2,3-b]pirazynę w postaci ciała stałego, TLC: RF = 0,3 (octan etylu/pentan:1/1). MS: 393 (MH+).
(d) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 1(a), lecz stosując 1-[2-(tert-butylodimetylosilanyloksy)etylo]-5-metoksy-1H-indolo-3-karbonitryl [Przykład porównawczy 2(h)] wytworzono 6-{1-[2-(tert-butylodimetylosilanyloksy)etylo]-5-metoksy-1H-indol-3-ilo}-5H-pirolo[2,3-b]pirazynę w postaci brązowego ciała stałego, TLC: RF = 0,4 (dichlorometan/metanol: 19/1). MS: 423 (MH+).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 4
Bromek 3-[3-(5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-6-ylo)indol-1-ilo]-propylu
Do roztworu 3-[3-(5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-6-ylo)indol-1-ilo]propan-1-ol [1 g, Przykład 2(a)] i tetrabromku węgla (1,59 g) w dichlorometanie (40 ml) w temperaturze otoczenia dodano roztwór trifenylofosfiny (1,1 g) w dichlorometanie (10 ml) w czasie 2 minut. Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze otoczenia przez 3 godziny, następnie odstawiono na 18 godzin, po czym zatężono, uzyskując tytułowy związek, który użyto bez dalszego oczyszczania.
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 5
Indolizyn-1-karbonitryl
Mieszaninę 2-pirydyloacetonitrylu (5 g) i aldehydu chlorooctowego (4,42 g roztwór 50% wagowych w wodzie) ogrzewano w temperaturze wrzenia w 1,4-dioksanie (25 ml) przez 5,5 godziny. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ochłodzenia do temperatury otoczenia, a następnie zatężono. Pozostałość podzielono pomiędzy octan etylu (100 ml) i kwas chlorowodorowy (100 ml, 1 M). Warstwę wodną ekstrahowano dwukrotnie octanem etylu (100 ml). Połączone fazy organiczne przemyto solanką (50 ml), następnie osuszono nad siarczanem magnezu, po czym zatężono. Pozostałość poddano szybkiej chromatografii kolumnowej na krzemionce, eluując dichlorometan, uzyskując tytułowy związek (1,83 g) w postaci bezbarwnego ciała stałego, temperatura topnienia 53-54°C. MS: 143 (MH+).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 6
3-metylo-indolizyn-1-karbonitryl
Roztwór aldehydu propionowego (36 ml) w eterze dietylowym (200 ml) i 1,4-dioksanie (1,7 ml) w temperaturze 5°C w atmosferze azotu potraktowano kroplami bromem (24,7 ml) w czasie 2 godzin, utrzymując temperaturę na poziomie 5°C. Po zakończeniu dodawania, mieszaninę reakcyjną mieszano przez następne 30 minut i następnie ostrożnie przemyto nasyconym roztworem wodorowęglanu sodu (100 ml). Fazę organiczną osuszono nad siarczanem sodu, następnie zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem w temperaturze 10°C, po czym dodano bezpośrednio do roztworu 2-pirydyloacetonitrylu (8,36 ml) w acetonie (50 ml). Uzyskaną mieszaninę ogrzewano w temperaturze wrzenia w atmosferze azotu przez 6 godzin, następnie pozostawiono do odstania w temperaturze otoczenia przez noc, po czym zatężono. Pozostałość podzielono pomiędzy octan etylu (500 ml) i kwas chlorowodorowy (100 ml, 1 M). Warstwę organiczną przemyto solanką (100 ml), a następnie zatężono. Pozostałość poddano szybkiej chromatografii kolumnowej na krzemionce eluując mieszaniną octanu etylu i pentanu (1:4, objętościowo), a następnie roztarto z eterem dietylowym, uzyskując tytułowy związek (4,0 g) w postaci białego ciała stałego, temperatura topnienia 98-100°C. MS: 157 (MH+).
PL 218 884 B1
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 7
1-formylopiperydyno-2-karboksylan sodu
Do roztworu kwasu piperydyno-2-karboksylowego (30 g) w kwasie mrówkowym (230 ml) dodano kroplami bezwodnik octowy (147 ml). Efekt egzotermiczny kontrolowano przez oziębienie mieszaniny reakcyjnej w łaźni lód/woda. Po wymieszaniu w temperaturze otoczenia przez 24 godziny, mieszaninę reakcyjną rozcieńczono wodą (20 ml), a następnie zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Uzyskany olej rozpuszczono w mieszaninie metanolu (50 ml) i acetonitrylu (500 ml). Dodano roztwór wodorotlenku sodu (10 M, 23 ml) i mieszaninę reakcyjną mieszano przez 8 godzin. Uzyskany osad przesączono, przemyto acetonitrylem i octanem etylu i osuszono w piecu próżniowym, uzyskując tytułowy związek w postaci białego ciała stałego, które użyto bezpośrednio bez dalszego oczyszczania.
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 8
5,6,7,8-tetrahydro-indolizyn-1-karbonitryl
Do roztworu 1-formylopiperydyno-2-karboksylanu sodu (2,0 g) (Przykład porównawczy 7) w dichlorometanie (50 ml), w temperaturze otoczenia, w atmosferze azotu, dodano chlorek para-toluenosulfonylu (2,31 g). Po wymieszaniu przez 10 minut, mieszaninę potraktowano kroplami akrylonitrylem (0,88 ml) i trietyloaminą (1,5 ml) i mieszanie kontynuowano przez kolejną 1 godzinę, po której dodano drugą część trietyloaminy (1,0 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 18 godzin i dichlorometan usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość rozpuszczono w wodzie (50 ml) i ekstrahowano octanem etylu (200 ml). Połączone ekstrakty organiczne zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość poddano szybkiej chromatografii kolumnowej na krzemionce, eluując mieszaniną octanu etylu i pentanu (1:4, objętościowo), uzyskując tytułowy związek (1,38 g) w postaci pomarańczowego oleju, MS: 147 (MH+). 1H NMR (CDCI3): 6,48(1H, d, J=3,1 Hz); 6,36(1H, d, J=3,1 Hz); 3,91(2H, t, J=6,0 Hz); 2,89(2H, t, J=6,0 Hz); 1,98(2H, m); 1,88(2H, m).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 9 (a) 1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyna
Do roztworu 7-azaindolu (25 g), chlorku paratoluenosulfonylu (44,5 g) i katalitycznej ilości siarczanu tetrabutyloammoniowego w suchym toluenie (300 ml) dodano wodorotlenek sodu (160 g w 500 ml wody). Roztwór dwufazowy mieszano w temperaturze otoczenia przez 3 godziny, następnie ekstrahowano dwukrotnie toluenem (100 ml). Połączone ekstrakty osuszono nad siarczanem magnezu, następnie zatężono pod silnie zmniejszonym ciśnieniem. Uzyskane ciało stałe roztarto z eterem dietylowym, a następnie osuszono w temperaturze 60°C pod silnie zmniejszonym ciśnieniem, uzyskując tytułowy związek (39,74 g) w postaci jasnożółtego ciała stałego, temperatura topnienia 136-138°C.
(b) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie porównawczym 9(a), lecz stosując
4-nitro-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę (wytworzoną według procedury opisanej przez A. Ippolito i in., J. Med. Chem. (1982), 25(10), 1258-61) wytworzono 4-nitro-1-(1-tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo-[2,3-b]pirydynę w postaci pomarańczowego ciała stałego, temperatura topnienia 145-146°C. HPLC (Metoda A): RT = 10,80 minuty.
(c) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie porównawczym 9(a), lecz stosując 4-chloro-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę (Przykład porównawczy 64) wytworzono 4-chloro-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci białego ciała stałego. MS: 307 (MH+). 1H NMR (CDCI3): 8,3(d, 1H), 8,05(d, 2H), 7,8(d, 1H), 7,3(d, 2H), 7,2(d, 1H), 6,7(d, 1H), 2,4(s, 3H).
(d) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie porównawczym 9(a), lecz stosując
5-bromo-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę wytworzono 5-bromo-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci białego ciała stałego, temperatura topnienia 138-140°C.
(e) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie porównawczym 9(a), lecz stosując 4-fenylo-1H-pirolo[2,3-b]pirazynę (Przykład porównawczy 42) wytworzono 4-fenylo-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirazynę w postaci białego ciała stałego. 1H NMR [(CD3)2SO]: 8,44(1H, d, J=4,5 Hz); 8,04(2H, d, J=8,2 Hz); 7,98(1H, d, J=4,5 Hz); 7,69(2H, d, J=6,8 Hz); 7,57(tt, J=6,2, 1,8 Hz); 7,51(1H, tt, J=6,8, 1,8 Hz); 7,44(2H, d, J=8,2 Hz); 7,42(1H, d, J=4,5 Hz); 6,92(1H, d, J=4,5 Hz), który użyto bez dalszego oczyszczania
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 10
2-jodo-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyna
Roztwór 1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyny [54,4 g, Przykład porównawczy 9(a)] w suchym tetrahydrofuranie (1200 ml) ochłodzono do temperatury -78°C, potraktowano roztworem butylolitu w heksanach (2,5 M, 92 ml) w czasie 20 minut. Roztwór utrzymywano w temperaturze -78°C przez 30 minut, następnie dodano roztwór jodu (101 g) w tetrahydrofuranie (600 ml) aż do uzyskania
PL 218 884 B1 trwałego zabarwienia jodem (około 300 ml). Mieszaninę pozostawiono do powolnego ogrzania do temperatury otoczenia i rozpuszczalnik usunięto pod silnie zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość podzielono pomiędzy octan etylu (1000 ml) i wodę (500 ml) i warstwę wodną ekstrahowano ponownie octanem etylu (2x500 ml). Ekstrakty organiczne połączono, osuszono nad siarczanem sodu i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, uzyskując żółte ciało stałe, które roztarto z eterem dietylowym, uzyskując tytułowy związek (79,6 g) w postaci jasnożółtego ciała stałego. Temperatura topnienia 105-107°C. MS: 399 (MH+].
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 11 (a) Ester tert-butylowy kwasu 3-bromo-5-metoksyindolo-1-karboksylowego
Roztwór 5-metoksyindolu (10 g) w suchym dimetyloformamidzie (150 ml) w temperaturze otoczenia potraktowano kroplami bromem (4 ml), zapewniając utrzymanie temperatury poniżej 30°C. Mieszaninę potraktowano bezpośrednio trietyloaminą (28 ml) i 4-dimetyloaminopirydyną (0,5 g), a następnie roztworem diwęglanu di-tert-butylu (18 g) w suchym dimetyloformamidzie (80 ml) i mieszanie kontynuowano przez kolejne 4 godziny. Mieszaninę reakcyjną zatężono i pozostałość podzielono pomiędzy octan etylu (250 ml) i wodę (200 ml). Warstwę wodną ekstrahowano octanem etylu (100 ml). Połączone fazy organiczne przemyto wodą (100 ml), następnie solanką (100 ml), po czym osuszono nad siarczanem magnezu, a następnie zatężono. Pozostałość poddano szybkiej chromatografii kolumnowej na krzemionce, eluując mieszaniną pentanu i octanu etylu (19/1, objętościowo), uzyskując tytułowy związek (23,4 g) w postaci bezbarwnego ciała stałego, temperatura topnienia 111-112°C.
(b) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 11(a), lecz stosując 5-cyjanoindol, wytworzono ester tert-butylowy kwasu 3-bromo-5-cyjanoindolo-1-karboksylowego w postaci szarego ciała stałego, temperatura topnienia 172-174°C. MS: 322(MH+).
(c) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 11(a), lecz stosując 5,6-dimetoksy-indol, wytworzono ester tert-butylowy kwasu 3-bromo-5,6-dimetoksyindolo-1-karboksylowego w postaci liliowego ciała stałego. TLC: RF = 0,6 (pentan/octan etylu: 19/1).
(d) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 11(a), lecz stosując 5-benzyloksy-6-metoksy-indol [wytworzony zgodnie ze sposobem opisanym przez Benigni, J. D. i Minnis, R.L., Heterocycles, 387, 2, 1965] wytworzono ester tert-butylowy kwasu 5-benzyloksy-3-bromo-6-metoksy-indolo-1-karboksylowego w postaci bezbarwnego ciała stałego. MS: 433 (MH+). HPLC (Metoda A): RT = 13,99 minuty.
(e) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 11(a), lecz stosując 5-amino-indol i nadmiar di-węglanu di-tert-butylu wytworzono ester tert-butylowy kwasu
3-bromo-5-tert-butoksykarbonyloamino-indolo-1-karboksylowego w postaci pomarańczowego oleju. MS: 412(MH+). TLC: RF = 0,8 (pentan/octan etylu: 9/1).
(f) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 11(a), lecz stosując ester metylowy kwasu 1H-indolo-6-karboksylowego [Przykład porównawczy 31] wytworzono 1-ester tert-butylowy 6-ester metylowy kwasu 3-bromo-indolo-1,6-dikarboksylowego w postaci jasnofioletowego ciała stałego, temperatura topnienia 117-119°C. MS: 355 (MH+).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 12 (a) 2-(5-metoksy-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyna
Mieszany roztwór estru tert-butylowego kwasu 3-bromo-5-metoksy-indolo-1-karboksylowego [50 g, Przykład porównawczy 11(a)] w tetrahydrofuranie (800 ml), w atmosferze azotu, potraktowano boranem tributylu (49,5 ml), następnie ochłodzono do temperatury -100°C, po czym potraktowano roztworem n-butylolitu w heksanach (94 ml, 2,5 M) utrzymując temperaturę poniżej -90°C. Po zakończeniu dodawania mieszaninę pozostawiono do powolnego ogrzania do temperatury pokojowej w ciągu 1 godziny i reakcję zatrzymano przez dodanie lodu (10 g). Części organiczne usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość podzielono pomiędzy octan etylu (500 ml) i wodę (400 ml). Warstwę organiczną osuszono nad siarczanem magnezu, a następnie zatężono. Uzyskany kwas boronowy, kremowe ciało stałe (28 g), rozpuszczono w dimetyloformamidzie (600 ml) i roztwór potraktowano 2-jodo-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyną [38,3 g, Przykład porównawczy 10], następnie nasyconym, wodnym wodorowęglanem sodu (200 ml), a następnie tetrakis(trifenylofosfino)palladem[0] (3 g). Mieszaninę ogrzewano w temperaturze wrzenia przez 4 godziny, następnie pozostawiono do ochłodzenia do temperatury otoczenia, po czym zatężono w celu usunięcia dimetyloformamidu. Pozostałość podzielono pomiędzy wodę (400 ml) i octan etylu (500 ml) i warstwę wodną ekstrahowano dwukrotnie octanem etylu (300 ml). Połączone części organiczne osuszono nad siarczanem sodu,
PL 218 884 B1 a następnie zatężono. Pozostałą brązową gumę roztarto z octanem etylu, uzyskując tytułowy związek (27 g) w postaci jasnozielonego ciała stałego. MS: 418,43 (MH+).
(b) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 12(a), lecz stosując ester tert-butylowy kwasu 3-bromo-5-cyjano-indolo-1-karboksylowego [Przykład porównawczy 11(b)] wytworzono 3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indolo-5-karbonitryl w postaci bezbarwnego ciała stałego, temperatura topnienia 209-214°C. MS: 413 (MH+).
(c) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 12(a), lecz stosując ester tert-butylowy kwasu 3-bromo-5,6-dimetoksy-indolo-1-karboksylowego [Przykład porównawczy 11(c)] wytworzono 2-(5,6-dimetoksy-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci brązowego ciała stałego, MS: 446 (M-H+).
(d) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 12(a), lecz stosując ester tert-butylowy kwasu 5-benzyloksy-3-bromo-6-metoksy-indolo-1-karboksylowego [Przykład porównawczy 11(d)] wytworzono 2-(5-benzyloksy-6-metoksy-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci bezbarwnego ciała stałego. MS: 524(MH+). HPLC (Metoda A): RT = 10,09 minuty.
(e) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 12(a), lecz stosując ester tert-butylowy kwasu 3-bromo-5-tert-butoksykarbonyloamino-indolo-1-karboksylowego [Przykład porównawczy 11(e)] wytworzono ester tert-butylowy kwasu {3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-ilo}karbaminowego w postaci brązowego ciała stałego. MS: 503 (MH+). TLC: RF = 0,62 (pentan/octan etylu: 1/1).
(f) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 12(a), lecz stosując 1-ester tert-butylowy 6-ester metylowy kwasu 3-bromo-indolo-1,6-dikarboksylowego [Przykład porównawczy 11(f)] wytworzono ester metylowy kwasu 3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indolo-6-karboksylowego w postaci jasnożółtego ciała stałego, temperatura topnienia 214-216°C. MS: 446 (MH+).
(g) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie porównawczym 12(a), lecz stosując
2-jodo-4-fenylo-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę [Przykład porównawczy 62(d)] wytworzono 2-(5-metoksy-1H-indol-3-ilo)-4-fenylo-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci białego ciała stałego. HPLC (Metoda A): RT = 11,63 minuty. MS: 494(MH+).
(h) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie porównawczym 12(a), lecz stosując
4-chloro-2-jodo-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę [Przykład porównawczy 62(b)] wytworzono 4-chloro-2-(5-metoksy-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci białego ciała stałego. MS: 452 (MH+). 1H NMR (CDCI3): 8,4(d, 1H), 7,6(d, 2H), 7,5(s, 1H), 7,35(d, 1H), 7,2(d, 2H), 6,9(m, 2H), 6,7(s, 1H), 3,8(s, 3H), 2,3(s, 3H).
(i) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie porównawczym 12(a), lecz stosując 2-jodo-5-fenylo-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę [Przykład porównawczy 62(c)] wytworzono 2-(5-metoksy-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-5-fenylo-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę. MS: 494 (MH+).
(j) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie porównawczym 12(a), lecz stosując 4-chloro-2-jodo-1-(paratoluenosulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę [Przykład porównawczy 62(b)] i kwas 4-tert-butylofenyloboronowy wytworzono 4-chloro-2-(4-tert-butylofenylo)-1-(para-toluenosulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci białego ciała stałego. MS: 439 (MH+). TLC RF = 0,78 (octan etylu/heptan, 1:1).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 13 (a) Ester etylowy kwasu {5-metoksy-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]indol-1-ilo}-octowego
Roztwór 2-(5-metoksy-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyny [6,6 g, Przykład porównawczy 12(a)] w dimetyloformamidzie (100 ml), w atmosferze azotu, potraktowano wodorkiem sodu (700 mg, 60% dyspersja oleju). Po wymieszaniu w temperaturze otoczenia przez 30 minut, mieszaninę potraktowano kroplami chlorooctanu etylu (2,0 ml, 23,75 mmola) i mieszanie kontynuowano jeszcze przez 4 godziny. Mieszaninę reakcyjną zatężono i pozostałość podzielono pomiędzy octan etylu i wodę. Fazę organiczną przemyto solanką, następnie osuszono nad siarczanem sodu, a następnie zatężono, uzyskując tytułowy związek (5,77 g) w postaci żółtego ciała stałego, MS: 504 (MH+). HPLC (Metoda A): RT = 11,88 minuty.
(b) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 13(a), lecz stosując jodek metylu, wytworzono 2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)PL 218 884 B1
-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę, w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 103-105°C. MS:
432 (MH+).
(c) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 13(a), lecz stosując 3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indolo-5-karbonitryl [Przykład porównawczy 12(b)] i jodek metylu, wytworzono 1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indolo-5-karbonitryl, w postaci bezbarwnego ciała stałego, temperatura topnienia
189-191°C. MS: 427 (MH+).
(d) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 13(a), lecz stosując 2-(5,6-dimetoksy-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę [Przykład porównawczy 12(c)] i jodek metylu, wytworzono 2-(5,6-dimetoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę, w postaci brązowego ciała stałego, MS: 462 (MH+).
(e) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 13(a), lecz stosując 2-(5-benzyloksy-6-metoksy-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyna [Przykład porównawczy 12(d)] i jodek metylu, wytworzono 2-(5-benzyloksy-6-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci bezbarwnego ciała stałego. MS: 538(MH+). HPLC (Metoda A): RT =11,57 minuty.
(f) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 13(a), lecz stosując ester tert-butylowy kwasu {3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-ilo}karbaminowego [Przykład porównawczy 12(e)] i jodek metylu, wytworzono ester tert-butylowy kwasu (1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-ilo}karbaminowego w postaci brązowego ciała stałego. MS: 517 (MH+). TLC: RF = 0,7 (pentan/octan etylu: 1/1).
(g) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 13(a), lecz stosując ester metylowy kwasu 3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indolo-6-karboksylowego [Przykład porównawczy 12(f)] i jodek metylu, wytworzono ester metylowy kwasu 1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indolo-6-karboksylowego w postaci brązowego ciała stałego. MS: 460 (MH+). TLC: RF = 0,6 (pentan/octan etylu: 1/1).
(h) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie porównawczym 13(a), lecz stosując 2-(5-metoksy-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyno-4-karbonitryl (Przykład porównawczy 100) wytworzono 2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyno-4-karbonitryl w postaci żółtego oleju. TLC: RF = 0,40 (octan etylu:heptan 1:1). MS: 457 (MH+).
(i) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie porównawczym 13(a), lecz stosując 4-chloro-2-(5-metoksy-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę [Przykład porównawczy 12(h)] i jodek metylu, wytworzono 4-chloro-2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1-(to+1 lueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci białawego ciała stałego. MS: 466 (MH+). 1H NMR (CDCI3): 8,35(d, 1H); 7,56(d, 2H), 7,39(s, 1H); 7,16-7,3(m, 2H), 7,05(d, 2H), 6,95-7,0 (m, 2H), 6,6(s, 1H), 3,9(s, 3H), 3,8(s, 3H), 2,3(s, 3H).
(j) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie porównawczym 13(a), lecz stosując 2-(5-metoksy-1H-indol-3-ilo)-5-fenylo-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę [Przykład porównawczy 12(i)] i jodek metylu, wytworzono 2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-5-fenylo-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia
181-183°C. MS: 508 (MH+).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 14 (a) 1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-ol
Do roztworu 2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyny [24,5 g, Przykład porównawczy 13(b)] w dichlorometanie (500 ml), w temperaturze 0°C w atmosferze azotu, dodano roztwór tribromku boru w dichlorometanie (60 ml, 1,0 M) i mieszaninę mieszano w temperaturze 0°C przez 1 godzinę. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do powolnego ogrzania do temperatury otoczenia i mieszanie prowadzono jeszcze przez 12 godzin. Do mieszaniny dodano roztwór węglanu sodu (1 M, 250 ml) i energiczne mieszanie kontynuowano przez 3 godziny. Wytrącone ciało stałe zebrano przez filtrację, przemyto dichlorometanem (100 ml) i osuszono, uzyskując tytułowy związek (18,75 g) w postaci bezbarwnego ciała stałego, temperatura topnienia 256-257°C. MS: 418 (MH+).
(b) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 14(a), lecz stosując 2-(5-metoksy-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę [Przykład
PL 218 884 B1 porównawczy 12(a)] wytworzono 3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-ol w postaci beżowego ciała stałego, temperatura topnienia 188-191°C. MS: 403 (MH+).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 15 (a) 2-(5-alliloksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyna
Roztwór 1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo-[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-olu [2,1 g,
Przykład porównawczy 14(a)] w suchym dimetyloformamidzie (50 ml) potraktowano tert-butanolanem potasu (620 mg) w temperaturze 0°C w atmosferze azotu. Po wymieszaniu przez 10 minut, mieszaninę potraktowano bromkiem allilu (480 μθ, a następnie pozostawiono do powolnego ogrzania do temperatury otoczenia. Mieszanie kontynuowano przez kolejne 6 godzin, po którym to czasie mieszaninę wylano ostrożnie do wody i fazę wodną ekstrahowano starannie octanem etylu. Połączone ekstrakty organiczne przemyto dwukrotnie solanką (100 ml), następnie osuszono nad siarczanem sodu, po czym zatężono. Pozostałość poddano szybkiej chromatografii kolumnowej na krzemionce, eluując mieszaniną octanu etylu i pentan (1:1, objętościowo), uzyskując tytułowy związek (1,2 g) w postaci żółtej pianki, temperatura topnienia 257-259°C. MS: 458 (MH+).
(b) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 15(a), lecz stosując 2-chlorooctan etylu wytworzono ester etylowy kwasu (1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy]octowego w postaci żółtego ciała stałego. TLC: RF = 0,45 (octan etylu/pentan: 1/1). MS: 504 (MH+).
(c) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 15(a), lecz stosując 2-bromopropionian etylu wytworzono ester etylowy kwasu 3-(1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}propionowego w postaci żółtego ciała stałego. TLC: RF = 0,47 (octan etylu/pentan: 1/1). MS: 519 (MH+).
(d) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 15(a), lecz stosując 1-bromocyklobutanokarboksylan etylu wytworzono ester etylowy kwasu 1-(1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}cyklobutanokarboksylowego w postaci bezbarwnego ciała stałego, temperatura topnienia 189-190°C. MS: 544 (MH+).
(e) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie porównawczym 15(a), lecz stosując 1-metylo-3-(5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-6-ylo)-1H-indol-5-ol (Przykład 7) i 1-bromocyklobutanokarboksylan etylu wytworzono ester etylowy kwasu {1-[1-metylo-3-(5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-6-ylo)-1H-indol-5-iloksy]cyklobutylokarboksylowego w postaci brązowego ciała stałego. TLC: RF = 0,23 (dichlorometan/metanol, 19:1). HPLC (Metoda A): RT = 7,71 minuty.
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 16
3-(1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}propano-1,2-diol
Roztwór 2-(5-alliloksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyny [45,7 mg, Przykład porównawczy 15(a)] w acetonie (10 ml) potraktowano roztworem N-tlenku 4-metylomorfoliny (6 mg) w wodzie (1 ml). Tę mieszaninę następnie potraktowano tetratlenkiem osmu (2,5% wagowych w tert-butanolu, 6 kropli) i mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 12 godzin. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono wodą (75 ml) i ekstrahowano starannie octanem etylu. Połączone części organiczne przemyto dwukrotnie solanką (75 ml), następnie osuszono nad siarczanem magnezu, po czym zatężono. Pozostałość poddano szybkiej chromatografii kolumnowej na krzemionce, eluując octanem etylu, uzyskując tytułowy związek (33 mg) w postaci bezbarwnego ciała stałego. TLC: RT = 0,25 (octan etylu). MS: 492 (MH+).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 17
3-(1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}propan-1-ol i 3-(1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}propano-2-ol
Roztwór 2-(5-alliloksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyny [91 mg, Przykład porównawczy 15(a)] w suchym tetrahydrofuranie (5 ml) potraktowano roztworem kompleksu borowodór-tetrahydrofuran w tetrahydrofuranie (1200 μ!, 1,0 M). Po wymieszaniu w temperaturze otoczenia przez 7 godzin, mieszaninę reakcyjną potraktowano etanolem (9 kropli), 5 N roztworem wodorotlenku potasu (4 krople) i nadtlenkiem wodoru (6 kropli) i mieszanie kontynuowano przez 12 godzin, podczas których wytrąciło się białe ciało stałe. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono wodą (50 ml) i wartość pH tej mieszaniny uregulowano do 10 dodając roztwór wodorotlenku potasu (1 M) przed staranną ekstrakcją octanem etylu. Połączone ekstrakty organiczne osuszono nad siarczanem sodu, a następnie zatężono. Pozostałość poddano szybkiej chromatografii kolumnowej na krzemionce, eluując mieszaniną octanu etylu i pentanu (2:1, objętościowo), uzyskując 3-(1-metylo-3PL 218 884 B1
-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}propan-1-ol (50 mg) w postaci bezbarwnego ciała stałego [TLC: RF = 0,15 (octan etylu). MS: 476(MH+)] i 3-(1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}propano-2-ol (8 mg) w postaci bezbarwnego ciała stałego. [TLC: RF = 0,3 (octan etylu); MS: 476 (MH+].
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 18 (a) Ester 1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-ilowy kwasu trifluorometanosulfonowego
Zawiesinę 1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo-[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-olu [398 mg, Przykład porównawczy 14(a)] w dichlorometanie (10 ml), ochłodzono do temperatury -78°C w atmosferze azotu, potraktowano trietyloaminą (0,15 ml), następnie N-fenyloilotrifluormetanosulfonoimidem (1,7 g). Uzyskaną mieszaninę pozostawiono do powolnego ogrzania do temperatury otoczenia, mieszanie kontynuowano przez kolejne 12 godzin, a następnie dodano nasycony wodorowęglan sodu (20 ml). Fazę organiczną oddzielono i fazę wodną ekstrahowano dwukrotnie dichlorometanem (20 ml). Połączone części organiczne osuszono nad siarczanem sodu, a następnie zatężono. Pozostałość poddano szybkiej chromatografii kolumnowej na krzemionce, eluując mieszaniną octanu etylu i pentanu (2:3, objętościowo), uzyskując tytułowy związek (380 mg) w postaci bezbarwnego ciała stałego. MS: 492 (MH+). HPLC (Metoda A): RT = 2,02 minuty.
(b) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie porównawczym 18(a), lecz stosując
1- metylo-3-(5H-pirolo-[2,3-b]pirazyn-6-ylo)-1H-indol-5-ol (Przykład 7) wytworzono 2-(1-metylo-5-trifluorometylosulfonyloksyindol-3-ilo)-1H-pirolo[2,3-b]pirazynę w postaci purpurowego ciała stałego. HPLC (Metoda A): RT = 8,12 minuty. 1H NMR [(CD3)2SO]: 12,30(1H, s); 8,32(1H, s); 8,27(1H, d, J=3,5 Hz); 8,23(1H, s); 7,97(1H, s); 7,76(1H, d, J=8,6 Hz); 7,08(1H, s); 3,96(3H, s).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 19 (a) Ester metylowy kwasu 1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indolo-5-karboksylowego
Roztwór estru 1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1 H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1 H-indol-5-ilowego kwasu trifluorometanosulfonowego [300 mg, Przykład porównawczy 18(a)] w mieszaninie suchego dimetyloformamidu (10 ml), metanolu (6 ml) i trietyloaminy (2 ml) potraktowano octanem palladu (24 mg) i 1,3 bis(difenylofosfino)propanem i mieszaninę mieszano w temperaturze otoczenia przez 30 minut. Do mieszaniny reakcyjnej wprowadzano monotlenek węgla poprzez membranę naczynia, ze stałą szybkością i mieszaninę ogrzewano w temperaturze 90°C aż do zaniku substancji wyjściowej, co stwierdzono metodą TLC (octan etylu/pentan: 2/3). Następnie mieszaninę zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość podzielono pomiędzy dichlorometan i wodę. Fazę organiczną przemyto nasyconym roztworem chlorku litu, następnie osuszono nad siarczanem sodu, po czym zatężono. Pozostałość poddano szybkiej chromatografii kolumnowej na krzemionce, eluując mieszaniną octanu etylu i pentanu (2:3, objętościowo), uzyskując tytułowy związek (200 mg) w postaci bezbarwnego ciała stałego. MS: 460(MH+). HPLC (Metoda A): RT = 10,23 minuty.
(b) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie porównawczym 19(a), lecz stosując
2- (1-metylo-5-trifluorometylosulfonyloksyindol-3-ilo)-1H-pirolo[2,3-b]pirazynę (Przykład porównawczy 18(b)) wytworzono 1-metylo-3-(5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-6-ylo)-1H-indolo-5-karboksylan metylu w postaci brązowego ciała stałego. MS 307 (MH+). HPLC (Metoda A): RT = 6,64 minuty.
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 20
2-[1-metylo-5-(1-trimetylocyno-1H-tetrazol-5-ilo)-1H-indol-3-ilo]-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyna
Roztwór 1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indolo-5-karbonitrylu [100 mg, Przykład porównawczy 13(c)] w toluenie (10 ml) potraktowano azydkiem trimetylocyny (56 mg, 0,28 mmola), następnie ogrzewano w temperaturze wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 14 godzin. Biały osad zebrano przez filtrację, przemyto toluenem (10 ml), a następnie osuszono, uzyskując tytułowy związek (125 mg) w postaci bezbarwnego ciała stałego, temperatura topnienia 240-243°C (z rozkładem). MS: 633 (MH+).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 21
2-[1-metylo-5-(1-metylo-1H-tetrazol-5-ilo)-1H-indol-3-ilo]-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyna i 2-[1-metylo-5-(2-metylo-2H-tetrazol-5-ilo)-1H-indol-3-ilo]-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyna
Jodek metylu (2,5 ml) dodano do roztworu 2-[1-metylo-5-(1-trimetylocyno-1H-tetrazol-5-ilo)-1H-indol-3-ilo]-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyny [620 mg, Przykład porównawczy 20] w tem62
PL 218 884 B1 peraturze otoczenia. Następnie mieszaninę mieszano w temperaturze otoczenia przez 4 godziny, po czym wylano do wody, a następnie ekstrahowano octanem etylu. Połączony ekstrakt przemyto solanką, następnie osuszono nad siarczanem magnezu, po czym zatężono. Pozostałość poddano szybkiej chromatografii na krzemionce, eluując mieszaniną octanu etylu i eteru naftowego (1:1, objętościowo), uzyskując 2-[1-metylo-5-(1-metylo-1H-tetrazol-5-ilo)-1H-indol-3-ilo]-1-(tolueno-4-sulfonylo)+ *1
-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę (191 mg) w postaci bezbarwnego ciała stałego, [MS: 506 (MNa+). 1H NMR [(CD3)2SO]: 8,39(dd, 1H, J=4,8 i 1,6 Hz); 7,97(m, 1H); 7,96(d, 1H, J=4,0 Hz); 7,90(s, 1H); 7,80(dd, 1H, J=8,7 i 0,6 Hz); 7,70(dd, 1H, J=8,7 i 1,8 Hz); 7,56(m, 2H); 7,30(dd, 1H, J=7,7 i 4,8 Hz); 7,22 (m, 2H); 6,82(s, 1H); 4,19(s, 3H); 4,0(s, 3H); 2,23(s, 3H)] i 2-[1-metylo-5-(2-metylo-2H-tetrazol-5-ilo)-1H-indol-3-ilo]-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę (77 mg) w postaci bezbarwnego ciała stałego, temperatura topnienia 215-218°C [MS: 506 (MNa+)].
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 22
1-(1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-ilo}etanon
Do suchego, odgazowanego dimetyloformamidu (110 ml) w atmosferze azotu, w temperaturze otoczenia, dodano kolejno ester 1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-ilowy kwasu trifluorometanosulfonowego [2,2 g, Przykład porównawczy 18], trietyloaminę (1,15 ml), eter n-butylowo winylowy (2,87 ml), 1,3-bis-(difenylofosfinopropan) (413 mg) i octan palladu (232 mg). Mieszaninę ogrzewano w temperaturze wrzenia przez 2 godziny, następnie ochłodzono do temperatury otoczenia, po czym dodano do kwasu chlorowodorowego (90 ml, 1 M). Tę mieszaninę ekstrahowano dichlorometanem (200 ml). Ekstrakt organiczny przemyto nasyconym, wodnym roztworem wodorowęglanu sodu, następnie solanką, po czym osuszono nad siarczanem magnezu, a następnie zatężono. Pozostałość poddano szybkiej chromatografii na krzemionce, eluując mieszaniną octanu etylu i pentanu (2:3, objętościowo), uzyskując tytułowy związek (1,1 g) w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 177-178°C. MS: 444 (MH+).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 23 (a) 2-[5-({S}-(+)-2,2-dimetylo-[1,3]dioksolan-4-ylometoksy)-1-metylo-1H-indol-3-ilo]-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo-[2,3-b]pirydyna
Roztwór 1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo-[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-olu [1,17 g, Przykład porównawczy 14(a)] w suchym dimetyloformamidzie (50 ml) potraktowano węglanem cezu (1,1 g) i wodorosiarczanem tetrabutyloamoniowym (40 mg). Po wymieszaniu w temperaturze otoczenia przez 30 minut, mieszaninę potraktowano (R)-(+)-2,2-dimetylo-1,3-dioksolan-4-ylometyloparatoluenosulfonianem (0,96 g), następnie ogrzewano w temperaturze 120°C przez noc. Mieszaninę reakcyjną zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość podzielono dwukrotnie pomiędzy dichlorometan (100 ml) i wodę (50 ml) i warstwy wodne ekstrahowano dichlorometanem (100 ml). Połączone fazy organiczne przemyto dwukrotnie solanką (150 ml), następnie osuszono nad siarczanem magnezu, po czym zatężono. Pozostałość poddano szybkiej chromatografii na krzemionce, eluując mieszaniną dichlorometanu i metanolu (199:1, objętościowo), uzyskując tytułowy związek (1,04 g) w postaci żółtego olej, MS: 532(MH+). 1H NMR [(CD3)2SO]: 1,30(3H, s); 1,37(3H, s); 2,29(3H, s); 3,76(1H, dd, J=8,3 i 6,5 Hz); 3,90(3H, s); 3,94-3,98(2H, m); 4,10(1H, dd, J=8,20 i 6,5 Hz); 4,41(1H, m); 6,74(1H, s); 6,91(1H, dd, J=8,8 i 2,3 Hz); 6,98(1H, d, J=2,4 Hz); 7,25(2H, d, J=7,9 Hz); 7,29(1H, dd, J=7,8 i 4,9 Hz); 7,44(1H, d, J=8,8 Hz); 7,56(1H, d, J=8,3 Hz); 7,63(1H, s); 7,81(2H, d, J=8,0 Hz); 7,92(1H, dd, J=7,7 i 1,6 Hz); 8,33(1H, dd, J=4,9 i 1,7 Hz).
(b) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 23(a), lecz stosując (S)-(-)-2,2-dimetylo-1,3-dioksolan-4-ylometyloparatoluenosulfonian wytworzono 2-[5-({R}-(-)-2,2-dimetylo-[1,3]dioksolan-4-ylometoksy)-1-metylo-1H-indol-3-ilo]-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci żółtego oleju, MS: 532 (MH+). 1H NMR [(CD3)2SO]: 1,33(3H, s); 1,37(3H, s); 2,29(3H, s); 3,77(1H, dd, J=8,3 i 6,5 Hz); 3,88(3H, s); 3,97-3,99(2H, m); 4,11(1H, dd, J=8,3 i 6,6 Hz); 4,41(1H, m); 6,74(1H, s); 6,94(1H, dd, J=8,8 i 2,3 Hz); 6,97(1H, d, J=2,3 Hz); 7,25(2H, d, J=8,1 Hz); 7,29(1H, dd, J=7,8 i 4,9 Hz); 7,44 (1H, d, J=8,8 Hz); 7,57(2H, d, J=8,4 Hz); 7,63(1H, s); 7,95(1H, dd, J=7,81 i 1,7 Hz); 8,33(1H, dd, J=4,88 i 1,7 Hz).
(c) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 23(a), lecz stosując 2-(5-hydroksy-6-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę [Przykład porównawczy 28(a)] wytworzono 2-[5-({S}-(+)-2,2-dimetylo-[1,3]dioksolan-4-ylometoksy)-6-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo]-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci kremowego ciała stałego. MS: 548(MH+). HPLC (Metoda A): RT = 11,60 minuty.
PL 218 884 B1 (d) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 23(a), lecz stosując 3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-ol [Przykład porównawczy 14(b)] i 1-bromocyklobutanokarboksylan etylu, wytworzono ester etylowy kwasu 1-(1-(cyklobutanokarboksylan etylu)-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}cyklobutanokarboksylowego w postaci kremowego ciała stałego. MS: 657 (MH+). 1H NMR [(CD3)2SO]: 8,35(1H, dd, J =4,8 i 1,6 Hz); 7,9(2H, m); 7,48(3H, m); 7,28(1H, dd, J=7,7 i 4,8 Hz); 7,24(2H, d, J=8,4 Hz); 6,71(1H, dd, J=8,9 i 2,4 Hz); 6,68(1H, s); 6,64(1H, d, J=2,4 Hz); 5,12(1H, dd, J=8,8 i 8,8 Hz); 4,13-4,03(4H, m); 3,66(1H, dd, J=9,4 i 9,4 Hz); 2,64-1,82(13H, m); 1,15(3H, t, J=7,1 Hz); 0,94(3H, t, J=7,1 Hz).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 24 (a) (S)-3-(1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo-[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}propano-1,2-diol
Roztwór 2-[5-({R}-(-)-2,2-dimetylo-[1,3]dioksolan-4-ylo-metoksy)-1-metylo-1H-indol-3-ilo]-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyny [1,04 g, Przykład porównawczy 23(b)] w metanolu (20 ml) potraktowano kwasem solnym (20 ml, 1 M), następnie ogrzewano w temperaturze wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 3 godziny. Mieszaninę reakcyjną zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość poddano szybkiej chromatografii na krzemionce, eluując mieszaniną octanu etylu i pentanu (2:1, objętościowo), uzyskując tytułowy związek (380 mg) w postaci klarownego oleju. TLC: RF = 0,2 (pentan/octan etylu: 1/2). MS: 492(MH+).
(b) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 24(a), lecz stosując 2-[5-({S}-(+)-2,2-dimetylo-[1,3]dioksolan-4-ylometoksy)-1-metylo-1H-indol-3-ilo]-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę [Przykład porównawczy 23(a)] wytworzono (R)-3-(1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}propano-1,2-diol w postaci klarownego oleju. MS: 492 (MH+). 1H NMR [(CD3)2SO]: 8,33(1H, dd, 4,9, J=1,7 Hz); 7,92(1H, dd, J=7,8 i 1,7 Hz); 7,62(1H, s); 7,56(2H, d, J=8,8 Hz); 7,45(1H, d, J=8,8 Hz); 7,29(1H, dd, J=7,8 i 4,8 Hz); 7,25(2H, d, J=8,1 Hz); 6,96(1H, d, J=2,3 Hz); 6,92(1H, dd, J=8,8 i 2,3 Hz); 6,75(1H, s); 4,93(1H, s); 4,66(1H, s); 5,13(1H, d, J=5,13 Hz); 3,88(3H, s); 3,80(2H, d, J=5,9 Hz); 3,46(2H, s); 2,23(3H, s).
(c) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 24(a), lecz stosując 2-[5-({S}-(+)-2,2-dimetylo-[1,3]dioksolan-4-ylometoksy)-6-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo]-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę [Przykład porównawczy 23(c)] wytworzono (R)-3-{6-metoksy-1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}propano-1,2-diol w postaci kremowego ciała stałego. MS: 522 (MH+). HPLC (Metoda A): RT = 8,15 minuty.
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 25
2-[5-(2-metoksy-1-metyloetoksy)-1-metylo-1H-indol-3-ilo]-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyna
Roztwór trifenylofosfiny (470 mg) i diazodikarboksylanu diizopropylu (350 μΐ) w suchym toluenie (15 ml) potraktowano 1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-olem [150 mg, Przykład porównawczy 14(a)], a następnie 1-metoksy-2-propanolem (150 μβ. Uzyskaną mieszaninę ogrzewano w temperaturze wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 5 godzin, następnie ochłodzono, po czym zatężono. Pozostałość poddano szybkiej chromatografii na krzemionce, eluując mieszaniną octanu etylu i pentan (1:1, objętościowo), uzyskując tytułowy związek (50 mg) w postaci klarownego oleju. TLC: RF = 0,65 (pentan/octan etylu: 1/1). MS: 480 (MH+).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 26
N-Hydroksy-1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indolo-5-karboksyamidyna
Roztwór 1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indolo-5-karbonitryl [2,11 g, Przykład porównawczy 13(c)] w etanolu (150 ml) w temperaturze otoczenia potraktowano chlorowodorkiem hydroksyloaminy (1,72 g) i węglanem potasu (3,43 g). Mieszaninę reakcyjną ogrzewano w temperaturze wrzenia, w atmosferze azotu przez 15 godzin, następnie przesączono. Przesącz zatężono, uzyskując tytułowy związek (2,8 g) w postaci ciemnozielonego ciała stałego. MS: 460 (MH+). HPLC (Metoda A): RT = 6,19 minuty.
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 27
2-[1-metylo-5-(5-metylo-[1,2,4]oksadiazol-3-ilo)-1H-indol-3-ilo]-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyna
Do zawiesiny N-hydroksy-1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indolo-5-karboksyamidyny [0,7 g, Przykład porównawczy 26] w toluenie (30 ml) w temperaturze otoczenia, w atmosferze azotu dodano bezwodnik octowy (0,467 g). Mieszaninę reakcyjną ogrzewano
PL 218 884 B1 w temperaturze wrzenia przez 4,5 godziny, następnie przesączono. Przesącz zatężono, uzyskując tytułowy związek (0,32 g) w postaci ciemnoczerwonego oleju, który użyto bezpośrednio bez dalszego oczyszczania.
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 28
2-(5-hydroksy-6-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyna
Roztwór 2-(5-benzyloksy-6-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyny [6,26 g, Przykład porównawczy 13(e)] w acetonitrylu (500 ml) potraktowano jodkiem sodu (4,38 g), następnie chlorkiem trimetylosililu (3,17 ml). Mieszaninę mieszano w temperaturze 40°C przez 3 godziny, następnie potraktowano następną porcją jodku sodu (4,38 g) i chlorku trimetylosililu (3,17 ml). Po wymieszaniu w temperaturze 40°C przez kolejne 12 godzin, mieszaninę reakcyjną zatężono. Pozostałość potraktowano wodą (200 ml) i mieszaninę ekstrahowano trzy razy octanem etylu (200 ml). Połączone ekstrakty osuszono nad siarczanem magnezu, następnie zatężono. Pozostałą brązową piankę roztarto z octanem etylu i eterem diizopropylowym, uzyskując tytułowy związek (3,04 g) w postaci jasnobrązowego ciała stałego, temperatura topnienia 211-214°C. HPLC (Metoda A): RT = 9,30 minuty.
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 29
Ester etylowy kwasu 1-{6-metoksy-1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-iloksy}cyklobutanokarboksylowego
Wodorek sodu (43 mg, 60% dyspersja w oleju mineralnym) dodano do mieszanego roztworu 2-(5-hydroksy-6-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyny [400 mg, Przykład porównawczy 28(a)] w suchym dimetyloformamidzie (20 ml), w atmosferze azotu, w temperaturze otoczenia. Mieszaninę mieszano przez 1 godzinę, następnie potraktowano 1-bromocyklobutanokarboksylanem etylu (216 μΐ) i mieszanie kontynuowano przez noc. Następnie dodano dodatkowe porcje wodorku sodu (43 mg, 60% dyspersja w oleju mineralnym) i 1-bromocyklobutanokarboksylanu etylu (216 μθ, a następnie mieszaninę ogrzewano w temperaturze 50°C przez 5 godzin. Ochłodzoną mieszaninę reakcyjną zatężono i pozostałość podzielono pomiędzy octan etylu i wodę. Fazę organiczną przemyto wodą, następnie solanką, następnie osuszono nad siarczanem magnezu, po czym zatężono. Żółtą pozostałość poddano szybkiej chromatografii na krzemionce, eluując mieszaniną octanu etylu i pentanu (2:3, objętościowo), uzyskując tytułowy związek (266 mg) w postaci żółtego oleju. MS: 576 (MH+). HPLC (Metoda A): RT = 11,07 minuty.
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 30
Ester tert-butylowy kwasu[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-ilo]karbaminowego
Roztwór estru tert-butylowego kwasu {1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]-pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-ilo}karbaminowego [0,3 g, Przykład porównawczy 13(f)] w metanolu (15 ml) potraktowano roztworem wodorotlenku potasu (5 N, 2 ml), a następnie ogrzewano w temperaturze wrzenia przez 4 godziny. Mieszaninę reakcyjną zatężono i pozostałość roztarto z wodą, uzyskując tytułowy związek (0,2 g) w postaci brązowego ciała stałego. MS: 263 (MH+). TLC: RF = 0,3 (octan etylu).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 31
Ester metylowy kwasu 1H-indolo-6-karboksylowego
Roztwór kwasu 1H-indolo-6-karboksylowego (10 g) w metanolu (300 ml) potraktowano stężonym kwasem siarkowym (0,5 ml), następnie ogrzewano na łaźni parowej przez 10 godzin. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość podzielono pomiędzy nasycony roztwór wodorowęglanu sodu (150 ml) i dichlorometan (150 ml). Następnie warstwę wodną ekstrahowano dwukrotnie dichlorometanem (150 ml). Połączone części organiczne osuszono nad siarczanem sodu, następnie zatężono. Pozostałość poddano szybkiej chromatografii na krzemionce, eluując mieszaniną octanu etylu i pentanu (7:3, objętościowo), uzyskując tytułowy związek (7,4 g) w postaci białego ciała stałego, temperatura topnienia 79-81°C. MS: 176 (MH+).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 32
Dimetylo-(6-fenylo-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylometylo)amina
Roztwór dimetyloaminy w tetrahydrofuranie (0,5 ml, 2,0 M) w temperaturze 0°C potraktowano lodowatym kwasem octowym (15 μθ, następnie formaldehydem (75 μ!, roztworu 40%). Po wymieszaniu w temperaturze 0°C przez 10 minut tę mieszaninę potraktowano 6-fenylo-5H-pirolo[2,3-b]pirazyną [0,195 g, Przykład 2(c)], a następnie tetrahydrofuranem (3 ml) w celu zapewnienia całkowitego rozpuszczenia. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania do temperatury otoczenia, następnie mieszano przez noc, po czym rozcieńczono octanem etylu (5 ml), a następnie ekstrahowano trzy razy
PL 218 884 B1 kwasem chlorowodorowym (5 ml, 1 N). Wartość pH połączonych ekstraktów kwasowych uregulowano do 6-7 dodając roztwór wodorotlenku potasu (5 N). Uzyskane jasnożółte ciało stałe przesączono, następnie przemyto wodą, po czym osuszono, uzyskując tytułowy związek (0,16 g) w postaci jasnożółtego ciała stałego, temperatura topnienia 191-192°C.
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 33
Jodek trimetylo-(6-fenylo-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylo-metylo)amoniowy
Roztwór dimetylo-(6-fenylo-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylometylo)aminy [5,1 g, Przykład porównawczy 32] w octanie etylu (100 ml) w temperaturze 0°C potraktowano roztworem jodometanu (40 ml) w etanolu (150 ml). Uzyskaną mieszaninę mieszano w temperaturze 0°C przez 2 godziny. Wytrącone ciało stałe przesączono, następnie przemyto octanem etylu (10 ml), oraz eterem dietylowym (20 ml), uzyskując tytułowy związek w postaci żółtego ciała stałego (4,5 g), temperatura topnienia 224-225°C.
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 34 (6-fenylo-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylo)acetonitryl
Roztwór cyjanku potasu (0,84 g) w wodzie (20 ml) dodano szybko do mieszanego roztworu jodku trimetylo-(6-fenylo-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylometylo)amoniowego [1,1 g, Przykład porównawczy 33] w dimetyloformamidzie (20 ml) i mieszaninę ogrzewano w temperaturze 75°C przez 6 godzin. Ochłodzony roztwór rozcieńczono wodą (100 ml) i wytrącone ciało stałe przesączono, uzyskując tytułowy związek w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 247-248°C.
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 35
Kwas (6-fenylo-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylo)octowy
Roztwór (6-fenylo-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylo)acetonitrylu [70 mg, Przykład porównawczy 34] w wodorotlenku potasu (10 M, 5 ml) ogrzewano w temperaturze 100°C przez 1,5 godziny. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ochłodzenia, następnie rozcieńczono wodą (25 ml), po czym zakwaszono do wartości pH 1 dodając stężony kwas chlorowodorowy. Uzyskane jasnożółte ciało stałe przesączono, następnie przemyto wodą, a następnie osuszono, uzyskując tytułowy związek (40 mg) w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 276-277°C.
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 36
1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indolo-5-karboaldehyd
Do roztworu 1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indolo-5-karbonitrylu [500 mg, Przykład porównawczy 13(c)] w tetrahydrofuranie (20 ml) w temperaturze 0°C dodano wodorek diizobutyloglinu (12 ml, 1 M w tetrahydrofuranie) w atmosferze azotu. Następnie uzyskany roztwór pozostawiono do ogrzania do temperatury otoczenia i mieszano w tej temperaturze przez 2 godziny. Następnie mieszaninę reakcyjną wylano do zimnego 1 N roztworu wodnego kwasu chlorowodorowego (20 ml). Po 1 godzinie mieszaninę zalkalizowano nasyconym wodnym roztworem wodorotlenku sodu i ekstrahowano octanem etylu (40 ml). Warstwę organiczną oddzielono i następnie wodny roztwór ekstrahowano octanem etylu (2x20 ml). Ekstrakty organiczne połączono, osuszono nad siarczanem magnezu i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, uzyskując tytułowy związek (221 mg) w postaci białego ciała stałego, temperatura topnienia 188-189°C. MS: 430 (MH+).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 37
Ester etylowy kwasu 3-(1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-ilo}akrylowego
Fosfonooctan trietylu (60 ml) dodano w temperaturze 0°C do zawiesiny wodorku sodu (22,4 mg, 60% dyspersja w oleju mineralnym) w dimetoksyetanie (3 ml). Uzyskaną zawiesinę mieszano w temperaturze otoczenia przez 1 godzinę. Dodano 1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indolo-5-karboaldehyd [120 mg, Przykład porównawczy 36] w dimetoksyetanie (2 ml) i mieszanie kontynuowano przez 3 godziny. Następnie mieszaninę reakcyjną wylano do wody i ekstrahowano octanem etylu (2x30 ml). Następnie połączone części organiczne przemyto solanką przed suszeniem nad siarczanem magnezu, po czym zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, uzyskując tytułowy związek (126 mg) w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 159-162°C. MS: 500 (MH+).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 38 (a) Ester etylowy kwasu 3-(1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-ilo}-propionowego
Do zawiesiny estru etylowego kwasu 3-(1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-ilo}akrylowego [100 mg, Przykład porównawczy 37] dodano pallad (15,7 mg, 10% na węglu aktywowanym) w przemysłowym spirytusie skażonym (25 ml). Następnie uzyskaną
PL 218 884 B1 zawiesina mieszano w atmosferze wodoru przez 16 godzin. Następnie mieszaninę reakcyjną przesączono poprzez warstwę celitu i przesącz zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Uzyskane ciało stałe roztarto z wodą, przesączono i osuszono, uzyskując tytułowy związek (92 mg) w postaci białego ciała stałego, temperatura topnienia 280-282°C. MS: 502 (MH+).
(b) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie 38 (a), lecz stosując
3-[2-dimetyloamino-5-(5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-6-ylo)fenylo]prop-2-enonian etylu (Przykład porównawczy 47), wytworzono 3-[2-dimetyloamino-5-(5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-6-ylo)fenylo]propionian etylu w po1 staci pomarańczowej gumy, którą użyto bezpośrednio w następnej reakcji. 1H NMR [(CD3)2SO]; 8,33 (1H, s); 8,17(1H, s); 7,94(1H, s); 7,82(1H, d, J=8,4 Hz); 7,20(1H, d, J=8,4 Hz); 7,03(1H, s); 4,07(2H, q, J=7,6 Hz); 3,38(2H, t, J=7,1 Hz); 3,00(2H, t, J=7,1 Hz); 2,70(6H, s); 1,19(3H, t, J=7,1 Hz).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 39
4-metoksy-2-(5-metoksy-1H-indol-3-ilo)-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyna
Tytułowy związek wytworzono w postaci brązowego ciała stałego stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie 18, lecz stosując 2-(1-N-tertbutyloksykarbonylo-5-metoksy-1H-indol-3-ilo)-4-metoksy-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę (Przykład porównawczy 40). HPLC (Metoda A): RT = 8,49 minuty. MS: 448 (MH+).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 40
2-(1-tert-butyloksykarbonylo-5-metoksy-1H-indol-3-ilo)-4-metoksy-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyna
Mieszany roztwór diizopropyloaminy (0,21 ml) w tetrahydrofuranie (5 ml), w temperaturze -70°C i w atmosferze azotu, potraktowano roztworem n-butylolitu w heksanach (0,6 ml, 2,5 M) w czasie 5 minut, utrzymując temperaturę poniżej -65°C. Po wymieszaniu przez 1 godzinę, mieszaninę dodano, w temperaturze -30°C, do roztworu 4-metoksy-1-(1-tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyny (Przykład porównawczy 41, 280 mg) w tetrahydrofuranie (10 ml), utrzymując temperaturę poniżej -25°C. Po umożliwieniu ogrzania do temperatury -15°C w ciągu 1 godziny dodano roztwór chlorku cynku w tetrahydrofuranie (2,8 ml, 0,5 M), utrzymując temperaturę poniżej -10°C. Po upływie 30 minut mieszaninę reakcyjną potraktowano tetrakls(trifenylofosfino)palladem[0] (54 mg) i estrem tert-butylowym kwasu 3-bromo-5-metoksyindolo-1-karboksylowego (Przykład porównawczy 11(a), 152 mg) i mieszano w temperaturze 60°C przez 16 godzin, a następnie potraktowano wodą (30 ml). Mieszaninę ekstrahowano octanem etylu (3 x 25 ml). Połączone części organiczne przemyto solanką (2 x 15 ml), osuszono nad siarczanem magnezu, a następnie zatężono. Pozostałość poddano szybkiej chromatografii na krzemionce, eluując mieszaniną octanu etylu i pentanu (1:1, objętościowo), uzyskując tytułowy związek (45 mg) w postaci białej pianki. TLC RF = 0,34 (octan etylu/pentan: 1/1). HPLC (Metoda A): RT = 9,72 minuty.
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 41
4-metoksy-1-(1-tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyna
Mieszaninę 4-nitro-1-(1-tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo-[2,3-b]pirydyny [Przykład porównawczy 9(b), 0,77 g] i suchego dimetyloformamidu (25 ml) potraktowano metanolanem sodu (0,17 g) i mieszano w temperaturze 50°C przez 16 godzin. Następnie dodano drugą część metanolanu sodu (0,085 g) i mieszanie prowadzono jeszcze przez 8 godzin, a następnie dimetyloformamid usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość rozpuszczono w octanie etylu (100 ml) i przemyto mieszaniną woda/solanka (1/1, 60 ml). Części organiczne osuszono nad siarczanem magnezu, a następnie zatężono. Pozostałość poddano szybkiej chromatografii na krzemionce, eluując octanem etylu, uzyskując 1 tytułowy związek w postaci kremowego ciała stałego. HPLC: RT = 9,73 minuty. 1H NMR [(CD3)2SO]: 8,22(1H, d, J=8,2 Hz); 7,96(2H, d, J=9,4 Hz); 7,71(1H, d, J=3,5 Hz); 7,39(2H, d, J=9,4 Hz); 6,89(1H, d, J=8,2 Hz); 6,72(1H, d, J=3,5 Hz); 3,93(3H, s); 2,30(3H, s).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 42
4-fenylo-1H-pirolo[2,3-b]pirydyna
Zawiesinę tetrafluoroboranu 1-(2,6-dimetylo-1,4-dihydropirydyn-4-ono)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyniowego (Przykład porównawczy 43, 1,0 g) w tetrahydrofuranie (100 ml) potraktowano roztworem bromku fenylomagnezowego w tetrahydrofuranie (9,6 ml, 1 M) i mieszano w temperaturze pokojowej przez 72 godziny przed dodaniem wody (100 ml) i tetrahydrofuran usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość ekstrahowano chloroformem (3 x 100 ml) i połączone części organiczne osuszono nad siarczanem sodu i zatężono. Pozostałość poddano szybkiej chromatografii na krzemionce, eluując mieszaniną dichlorometanu i metanolu (99:1 objętościowo), uzyskując tytułowy związek (83 mg)
PL 218 884 B1 w postaci białego ciała stałego. MS: 195 (MH+). 1H NMR [(CD3)2SO]: 8,27(1H, d, J=4,1 Hz); 7,78(2H, d, J=8,2 Hz); 7,57(3H, m); 7,48(1H, t, J=8,2 Hz); 7,19(1H, d, J=3,5 Hz); 6,60(1H, s).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 43
Tetrafluoroboran 1-(2,6-dimetylo-1,4-dihydropirydyn-4-ono)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyniowy
Mieszaninę O-2,4,6-trimetylosulfonyloacetohydroksamianu etylu (28,5 g) w kwasie nadchlorowym (160 ml, 70%) mieszano w temperaturze pokojowej przez 2 godziny, a następnie dodano dichlorometan (30 ml). Mieszaninę wylano do mieszaniny lód/woda (1 litr) i szybko ekstrahowano trzy razy dichlorometanem (100 ml). Połączone części organiczne przemyto dwukrotnie solanką (100 ml) i osuszono nad siarczanem sodu. Następnie części organiczne dodano powoli do roztworu 1H-pirolo[2,3-b]pirydyny (11,8 g) w dichlorometanie (100 ml). Filtracja dała 2,4,6-trimetylofenylosulfonian 1-amino-1H-pirolo[2,3-b]pirydyniowy, który użyto bezpośrednio w następnym etapie.
Mieszaninę 2,4,6-trimetylofenylosulfonianu 1-amino-1H-pirolo[2,3-b]pirydyniowego (16,6 g) i 3-acetylo-6-metylo-2H-piran-2,4(3H)dionu (8,8 g) w stężonym kwasie chlorowodorowym (40 ml) mieszano w temperaturze wrzenia przez 4 godziny, następnie ochłodzono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość rozpuszczono w etanolu (30 ml) i rozcieńczono roztworem kwasu tetrafluoroborowego w eterze dietylowym (54% objętościowych, 30 ml) i mieszano przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej. Filtracja dała tytułowy związek (15,0 g) w postaci białego ciała stałego, temperatura topnienia 247-248°C. 1H NMR [(CD3)2SO]: 9,24(1H, d, J=7,5 Hz); 9,13(1H, d, J=7,5 Hz); 8,08(1H, d, J=4,2 Hz); 7,93(1H, t, J=7,5 Hz); 7,22(1H, d, J=4,2 Hz); 6,83(2H, s); 1,96(6H, s).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 44 (a) 3-[6-(4-tert-butylofenylo-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylo]propiono-1,1-dikarboksylan dimetylu
Do roztworu malonianu dimetylu (1,3 g) rozpuszczonego w N-metylopirolidynonie (30 ml) w temperaturze 0°C w atmosferze azotu dodano wodorek sodu (0,39 g). Po 10 minutach dodano roztwór jodku [6-(4-tert-butylofenylo-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylo]metylotrimetyloamoniowego [1,12 g, Przykład porównawczy 45(a)] i mieszaninę reakcyjną ogrzano do temperatury pokojowej i pozostawiono z mieszaniem przez 3 godziny. Mieszaninę reakcyjną wylano do wody (200 ml) i ekstrahowano trzy razy octanem etylu (100 ml). Połączone frakcje organiczne osuszono nad siarczanem magnezu, a następnie zatężono. Pozostałość poddano szybkiej chromatografii kolumnowej na krzemionce, eluując mieszaniną octanu etylu i pentanu (1:1, objętościowo), uzyskując tytułowy związek (0,5 g) w postaci białego ciała stałego.
1H NMR (CDCl3): 9,48(1H, s); 8,42(1H, s); 8,16(1H, s); 7,64(2H, d, J=9,0 Hz); 7,58(2H, d, J=9,0 Hz); 4,45(1H, t, J=8,2 Hz); 3,63(2H, d, J=8,2 Hz); 3,58(6H, s); 1,40(9H, s).
(b) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 44(a), lecz stosując jodek [6-(4-(1-metylo)etoksy)fenylo-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-1-ylo]metylotrimetyloamoniowy [Przykład porównawczy 45(b)] wytworzono 3-[6-(4-(1-metylo)etoksyfenylo)-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylo]propiono-1,1-dikarboksylan dimetylu w postaci beżowego ciała stałego. MS: 398 (MH+). 1H NMR [CDCl3]: 10,1(szeroki s, 1H); 8,41(d, 1H, J=2,3 Hz); 8,16(d, 1H, J=2,3 Hz); 7,62(d, 2H, J=8,21 Hz); 7,03(d, 2H, J=8,20 Hz); 4,64(m, 1H); 4,45(t, 1H); 3,78(d, 1H); 3,60(s, 6H); 1,41(d, 6H, J=4,41 Hz).
(c) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 44(a), lecz stosując jodek [6-(4-fluorofenylo)-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylo]metylotrimetyloamoniowy [Przykład porównawczy 45 (c)] wytworzono 3-[6-(4-fluorofenylo)-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylo]propiono-1,1•1
-dikarboksylan dimetylu w postaci białawego ciała stałego. 1H NMR DMSO 12,2(s, 1H), 8,4(d, 1H), 8,2(d, 1H), 7,8(d, 2H), 7,4(d, 2H), 4,4(t, 1H), 3,7(s, 6H), 3,6(d, 2H). MS: 357 (MH+).
(d) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie porównawczym 44(a), lecz stosując jodek [6-(4-metoksyfenylo)-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylo]metylotrimetyloamoniowy [Przykład porównawczy 45 (d)] wytworzono 3-[6-(4-metoksyfenylo)-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylo]propiono-1,1-dikarboksylan dimetylu w postaci białawego ciała stałego. MS: 369 (MH+).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 45 (a) Jodek [6-(4-tert-butylofenylo-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylo]metylotrimetyloamoniowy
Do roztworu [6-(4-tert-butylofenylo-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylo]metylodimetyloaminy [0,8 g. Przykład porównawczy 46(a)] w tetrahydrofuranie (50 ml) w atmosferze azotu, w temperaturze 40°C dodano jodek metylu (4,5 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 4 godziny i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość przeprowadzono do toluenu (30 ml) i osuszono pod zmniejszonym ciśnieniem, uzyskując tytułowy związek w postaci żółtego ciała stałego, które użyto bezpośrednio bez dalszego oczyszczania w następnej reakcji.
PL 218 884 B1 (b) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 45(a), lecz stosując 6-(4-(1-metylo)etoksy)fenylo-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylo]metylodimetyloaminę [Przykład porównawczy 46(b)] wytworzono jodek [6-(4-(1-metylo)etoksy)fenylo-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylo]metylotrimetyloamoniowy w postaci beżowego ciała stałego, które użyto bezpośrednio bez dalszego oczyszczania.
(c) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 45 (a), lecz stosując [6-(4-fluorofenylo-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylo]metylodimetyloaminę [Przykład porównawczy 46 (c)] wytworzono jodek 6-(4-fluorofenylo)-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylo]metylotrimetyloamoniowy w postaci żółtego ciała stałego. 1H NMR [(CD3)2SO]: 13,0(s, 1H), 8,5(d, 1H), 8,4(d, 1H), 7,7(d, 2H), 7,6(d, 2H), 3,1(d, 2H), 2,9(s, 9H). MS: 285 (MH+).
(d) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 45 (a), lecz stosując [6-(4-metoksyfenylo-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylo]metylodimetyloaminę [Przykład porównawczy 46 (d)] wytworzono jodek 6-(4-metoksyfenylo)-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylo]metylotrimetyloamoniowy w postaci białawego ciała stałego. MS: 297 (MH+).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 46 (a) [6-(4-tert-butylofenylo-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylo]metylodimetyloamina
Do roztworu dimetyloaminy (15 ml 2M roztworu w tetrahydrofuranie) i kwasu octowego (0,45 ml) w temperaturze 0°C dodano formaldehyd (2,25 ml 40% roztworu wodnego). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 10 minut. Dodano roztwór 6-(4-tert-butylofenylo)-5H-pirolo[2,3-b]pirazyny [6,9 g, Przykład 1(w)] w tetrahydrofuranie (400 ml) i mieszaninę reakcyjną pozostawiono z mieszaniem w temperaturze pokojowej przez noc. Mieszaninę reakcyjną przemyto 1 N roztworem wodorotlenku sodu, solanką, osuszono nad siarczanem magnezu i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość poddano szybkiej chromatografii kolumnowej na krzemionce, eluując mieszaniną tetrahydrofuranu i metanolu (1:1, objętościowo), uzyskując tytułowy związek (0,8 g) w postaci żółtego ciała stałego. MS: 309 (MH+). HPLC (Metoda A): RT = 1,93 minuty.
(b) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 46(a), lecz stosując 6-[4-(1-metylo)etoksyfenylo]-5H-pirolo[2,3-b]pirazynę [Przykład 1 (aa)] wytworzono 6-(4-(1-metylo)etoksy)fenylo-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylo]metylodimetyloaminę w postaci beżowego ciała stałego.
(c) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 46 (a), lecz stosując 6-(4-fluorofenylo)-5H-pirolo [2,3-b]pirazynę [Przykład 1 (ae)] wytworzono [6-(4-fluoro1 fenylo-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylo]-metylodimetyloaminę w postaci białawego ciała stałego. 1H NMR [(CD3)2SO]: 12,0(s, 1H), 8,5(d, 1H), 8,2(d, 1H), 7,7(d, 2H), 7,6(d, 2H), 3,9(d, 2H), 2,9(s, 6H). MS: 270 (MH+).
(d) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 46 (a), lecz stosując 6-(4-metoksyfenylo)-5H-pirolo[2,3-b]pirazynę [Przykład 1(af)] wytworzono [6-(4-metoksyfenylo-5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-7-ylo]metylodimetyloaminę w postaci białawego ciała stałego. MS: 282 (MH +).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 47
3-[2-dimetyloamino-5-(5H-pirolo[2,3-b]pirazyn-6-ylo)fenylo]prop-2-enonian etylu
Do roztworu 6-(4-amino-3-bromo)fenylo-5H-pirolo[2,3-b]pirazyny [0,1 g, Przykład porównawczy 48] w suchym dimetyloformamidzie (10 ml) w probówce schlenka dodano akrylan etylu (0,25 ml), octan palladu(II) (0,05 g), tri-(2-metylofenylo)fosfinę (0,07 g) i tributyloaminę (0,8 g). Probówkę szczelnie zamknięto i ogrzewano w temperaturze 95°C przez 24 godziny, następnie pozostawiono do odstania w temperaturze pokojowej przez kolejne 24 godziny. Reakcję zatrzymano wodą (150 ml) i mieszaninę ekstrahowano octanem etylu (100 ml), przemyto solanką i osuszono nad siarczanem magnezu. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem uzyskaną pomarańczową gumę roztarto z toluenem, uzyskując tytułowy związek w postaci pomarańczowego ciała stałego (0,04 g). TLC: RF = 0,46 (octan etylu). 1H NMR [(CD3)2SO]: 12,40(1H, s); 8,38(1H, s); 8,34(1H, s); 8,02(1H, d, J=8,6 Hz); 7,89(1H, d, J=16,5 Hz); 7,22(1H, d, J=8,6 Hz); 7,19(1H, s); 6,81 91H, d, J=16,5 Hz); 4,23(2H, q, J=7,1 Hz); 2,78 (6H, s); 1,30(3H, t, J=7,1 Hz).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 48
6-(3-bromo-4-dimetyloamino)fenylo-5H-pirolo[2,3-b]pirazyna
Do mieszanego roztworu 4-(dimetyloamino)benzonitrylu (2,19 g) w chloroformie (15 ml) dodano kroplami pirydynę (1,2 ml) i roztwór bromu (0,75 ml) w chloroformie (15 ml) w ciągu 45 minut. Po całkowitym dodaniu, mieszaninę mieszano przez następne 30 minut. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono
PL 218 884 B1 dichlorometanem i przemyto wodą, solanką i zatężono, uzyskując żółty olej 3-bromo-4-dimetyloaminobenzonitryl, który rozpuszczono w tetrahydrofuranie (25 ml). Tymczasem, mieszany roztwór diizopropyloaminy (2,7 ml) w tetrahydrofuranie (50 ml), w temperaturze -15°C i w atmosferze azotu, potraktowano roztworem n-butylolitu w heksanach (7,70 ml, 2,5 M) w czasie 30 minut, utrzymując temperaturę poniżej -10°C. Po wymieszaniu przez 30 minut, mieszaninę potraktowano metylopirazyną (1,21 g) w czasie 15 minut, następnie mieszano przez 1 godzinę. Dodano roztwór 3-bromo-4-(dimetyloamino)benzonitrylu w ciągu 1 godziny, utrzymując temperaturę poniżej -10°C. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej w czasie 2 godzin, następnie odstawiono przez noc, po czym potraktowano wodą (10 ml). Tetrahydrofuran usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i uzyskaną mieszaninę potraktowano mieszaniną wody i octanu etylu (1:1 objętościowo) i mieszaninę mieszano przez 15 minut. Uzyskany osad zebrano przez filtrację i przemyto starannie mieszaniną woda/octan etylu (1:1 objętościowo), uzyskując tytułowy związek w postaci żółtego ciała stałego (1,0 g). TLC: RF = 0,41 (octan etylu).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 49
6-(3-tert-butylodimetylosililoksy-4-metoksy)fenylo-5H-pirolo[2,3-b]pirazyna
Mieszany roztwór diizopropyloaminy (3,6 ml) w tetrahydrofuranie (133 ml), w temperaturze -15°C i w atmosferze azotu, potraktowano roztworem n-butylolitu w heksanach (11,21 ml, 2,5 M) w czasie 30 minut, utrzymując temperaturę poniżej -10°C. Po wymieszaniu przez 30 minut mieszaninę potraktowano metylopirazyną (2,04 g) w czasie 15 minut, następnie mieszano przez 1 godzinę, po czym potraktowano roztworem 3-tert-butylodimetylosililoksy-4-metoksybenzonitrylu (5,7 g, Przykład porównawczy 50) w tetrahydrofuranie (20 ml) w czasie 1 godziny, utrzymując temperaturę poniżej -10°C. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej w czasie 2 godzin, następnie odstawiono przez noc, po czym potraktowano wodą (10 ml). Tetrahydrofuran usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i uzyskaną mieszaninę podzielono pomiędzy octan etylu i wodę. Dwie warstwy rozdzielono i warstwę wodną ekstrahowano octanem etylu. Połączone części organiczne osuszono nad siarczanem sodu i zatężono. Pozostałość poddano szybkiej chromatografii na krzemionce, eluując mieszaniną dichlorometanu i metanolu (32:1, objętościowo), uzyskując tytułowy związek (1,62 g) 1 w postaci brązowego ciała stałego, który użyto bezpośrednio w następnym etapie. 1H NMR [(CD3)2SO]: 8,12(1H, s); 7,96(1H, s); 7,44(1H, d, J=8,2 Hz); 7,33(1H, s); 6,93(1H, d, J=8,2 Hz); 6,84(1H, s); 3,63(3H, s); 0,82 (9H, s); 0,01(6H, s).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 50
3-tert-butylodimetylosililoksy-4-metoksy)benzonitryl
Roztwór izo-waniliny (10,0 g) w dimetyloformamidzie (100 ml) potraktowano chlorowodorkiem hydroksyloaminy (9,14 g) i ogrzewano w temperaturze wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 1 godzinę. Dimetyloformamid usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość podzielono pomiędzy octan etylu i wodę. Wodną frakcję starannie ekstrahowano octanem etylu i połączone frakcje organiczne osuszono nad siarczanem sodu i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, uzyskując brązowe ciało stałe, które rozpuszczono w tetrahydrofuranie (200 ml). Po potraktowaniu wodorkiem sodu (2,8 g), mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. Dodano roztwór chlorku tert-butylodimetylosililu (10,9 g) w tetrahydrofuranie (50 ml) i mieszaninę mieszano w atmosferze azotu przez noc. Mieszaninę podzielono pomiędzy wodę i eter dietylowy. Ekstrakt organiczny osuszono nad siarczanem sodu, zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i poddano szybkiej chromatografii kolumnowej na krzemionce, eluując mieszaniną pentanu i dichlorometanu (1:3, objętościowo), uzyskując tytułowy związek (14,7 g) w postaci bezbarwnego oleju, który użyto bezpośrednio w następnej reakcji. 1H NMR [(CD3)2SO]: 7,30(1H, d, J=8,0 Hz); 7,11(1H, s); 7,01(1H, s); 3,70(3H, s); 0,81(9H, s); 0,01 (6H, s).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 51
4-(1-metylo)etoksybenzonitryl
Roztwór 4-cyjanobenzenu (1 g) w heksametylenotetraaminie (10 ml) mieszano w temperaturze otoczenia aż do rozpuszczenia. Następnie dodano 25% wodny roztwór wodorotlenku sodu (2,7 ml) i uzyskany roztwór mieszano w temperaturze otoczenia przez 30 minut. Kroplami dodano jodek 1-metyloetylu (5,71 g) i uzyskany roztwór mieszano w temperaturze otoczenia przez 5 godzin, a następnie wylano do wody (30 ml). Mieszaninę ekstrahowano trzy razy octanem etylu (30 ml) i połączone ekstrakty organiczne przemyto wodą, następnie solanką, po czym osuszono nad siarczanem magnezu, a następnie zatężono. Pozostałość poddano szybkiej chromatografii na krzemionce, eluując mieszaniną octanu etylu i heptan (1:1, objętościowo), uzyskując tytułowy związek (1,2 g)
PL 218 884 B1 w postaci białego ciała stałego. MS: 162 (MH+). 1H NMR (CD3^SO: δ: 7,58(d, 2H, J=8,12 Hz); 6,84 (d, 2H, J=8,12 Hz); 4,62(m, 1H); 1,38(d, 6H, J=5,4 Hz).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 52
1H-5-Cyjano-1-metylo-2-(metylotio)imidazol
Roztwór 1H-1-metylo-2-(metylotio)imidazol-5-karboaldehydu (0,76 g) [Przykład porównawczy 53(a)] w dimetyloformamidzie (15 ml) potraktowano chlorowodorkiem hydroksyloaminy (0,68 g). Mieszaninę ogrzewano w temperaturze wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 4 godziny, ochłodzono do temperatury otoczenia i wylano do wody. Dodano octan etylu i warstwę organiczną przemyto wodą, solanką, osuszono nad siarczanem magnezu i zatężono, uzyskując tytułowy związek (0,47 g) w postaci beżowego ciała stałego, które użyto bez dalszego oczyszczania, temperatura topnienia 115°C. MS: 154 (MH+).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 53 (a) 1H-1-metylo-2-(metylotio)imidazolo-5-karboksyaldehyd
Mieszany roztwór 1H-1-metylo-2-(metylotio)imidazol-5-ilometanolu (8,1 g) [Przykład porównawczy 54] i ditlenku manganu (28,97 g) w dichlorometanie (160 ml) ogrzewano w temperaturze wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 7 godzin. Mieszaninę reakcyjną ochłodzono do temperatury otoczenia i przesączono poprzez warstwę celitu. Dichlorometan odparowano, uzyskując tytułowy związek (6,61 g) w postaci żółtego ciała stałego, które użyto bezpośrednio w następnej reakcji.
(b) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 53(a), lecz stosując 1-metylo-5-fenylopirazol-3-ilometanol [Przykład porównawczy 66] wytworzono 1-metylo-5-fenylopirazolo-3-karboaldehyd, temperatura topnienia 106-108°C.
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 54
1H-1-metylo-2-(metylotio)imidazol-5-ilometanol
Do mieszanej zawiesiny 1H-1-metylo-2-(tio)imidazol-5-ilometanolu (5 g) [Przykład porównawczy 55] w metanolu (500 ml) wkroplono 1 N roztwór wodorotlenku sodu (36 ml) w temperaturze pokojowej. Zawiesinę mieszano w temperaturze otoczenia przez 10 minut. Jodometan dodano kroplami i mieszanie kontynuowano przez 12 godzin. Po odparowaniu metanolu, pozostałość rozpuszczono w dichlorometanie i dodano wodę. Warstwę organiczną przemyto wodą, solanką, osuszono nad siarczanem magnezu i zatężono. Pozostałość krystalizowano z eteru, uzyskując tytułowy związek (4,3 g) w postaci białego ciała stałego, temperatura topnienia 51°C.
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 55
1H-1-metylo-2-(tio)imidazol-5-ilometanol
Mieszaninę 12,8 g dimeru dihydroksyacetonu, 20,7 g tiocyjanianu potasu i 12,4 g metyloaminy dodano do roztworu 16 ml kwasu octowego i 100 ml butanolu. Uzyskaną białą mieszaninę mieszano przez 70 godzin, po czym zawieszono ją w 50 ml wody i przesączono. Ciało stałe przemyto wodą (60 ml), następnie eterem dietylowym (60 ml) i osuszono pod zmniejszonym ciśnieniem, uzyskując tytułowy związek (16 g) w postaci białego ciała stałego, temperatura topnienia 204°C.
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 56 (a) 3-cyjano-1-metylo-1H-indazol
Wodorek sodu (0,37 g, 60% dyspersja w oleju mineralnym) dodano do roztworu 3-cyjano-1H-indazolu (1,20 g, Przykład porównawczy 57) w suchym dimetyloformamidzie (30 ml) w atmosferze azotu w temperaturze otoczenia. Mieszaninę mieszano przez 1 godzinę, następnie potraktowano jodkiem metylu (0,85 ml) i mieszanie kontynuowano przez 1 godzinę. Następnie mieszaninę reakcyjną wylano do wody z lodem (15 ml). Wytrącone ciało stałe przesączono, następnie przemyto wodą, po czym osuszono, uzyskując tytułowy związek (0,80 g) w postaci beżowego ciała stałego, temperatura topnienia 73°C. 1H NMR [(CD3)2SO]: 7,91(m, 2H); 7,60(t, 1H); 7,42(t, 1H); 4,21(s, 3H).
(b) Stosując sposób podobny do opisanego w powyższym Przykładzie porównawczym 56(a), lecz stosując 3-cyjano-4-fenylo-1H-pirol [Przykład porównawczy 58] wytworzono 3-cyjano-1-metylo-4-fenylo-1H-pirol.
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 57
3-cyjano-1H-indazol Roztwór cyjanku o-aminobenzylu (0,5 g) w wodnym 1 N roztworze kwasu chlorowodorowego (9,6 ml), potraktowano wodnym 1 N roztworem azotynu sodu (3,85 ml). Po wymieszaniu w temperaturze pokojowej przez 15 minut, mieszaninę reakcyjną przesączono. Ciało stałe rekrystalizowano z etanolu, uzyskując tytułowy związek (0,4 g) w postaci żółtego ciała stałego, temperatura topnienia 138-140°C. 1H NMR [CD3)2SO]: 7,89(d, 1H, J=7,7 Hz); 7,76(d, 1H, J=7,9 Hz); 7,48 (t, 1H); 7,41(t, 1H).
PL 218 884 B1
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 58
3- cyjano-4-fenylo-1H-pirol
Roztwór cynamonitrylu (16,53 g) i (para-toluenosulfonylo)metyloizocyjanku (25 g) w mieszaninie eteru i sulfotlenku dimetylu (450 ml, 2:1) dodano kroplami do mieszanej zawiesiny wodorku sodu (6,14 g, 60% dyspersja w oleju mineralnym) w eterze (50 ml). Zaszła reakcja egzotermiczna. Następnie mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 2 godziny, po czym rozcieńczono wodą (500 ml) i uzyskaną mieszaninę ekstrahowano trzy razy eterem (250 ml). Połączone ekstrakty przemyto solanką, następnie osuszono nad siarczanem magnezu, po czym zatężono. Pozostałość poddano chromatografii filtracyjnej na warstwie krzemionki, eluując mieszaniną octanu etylu i pentanu (1 l, 1:4, objętościowo), a następnie mieszaniną octanu etylu i pentanu (2 l, 2:3, objętościowo). Frakcje zawierające wymaganą substancję zatężono i pozostałość zawieszono w pentanie (500 ml), mieszając, następnie przesączono, uzyskując tytułowy związek w postaci ciała stałego, temperatura topnienia 120-122°C. MS: 167 (MH-).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 59
4- pirazynylo-1-buten
Roztwór diizopropyloaminolitu [wytworzonego z roztworu butylolitu w heksanach (100 ml, 2,5 M) i diizopropyloaminy (25,3 g) w temperaturze -35°C] potraktowano roztworem 2-metylopirazyny (23,5 g) w suchym tetrahydrofuranie (300 ml) w temperaturze -20°C. Mieszaninę mieszano w temperaturze -20°C przez 1 godzinę, następnie ochłodzono do temperatury -78°C i potraktowano roztworem bromku allilu (30,8 g) w suchym tetrahydrofuranie (300 ml). Tę mieszaninę ogrzano do temperatury pokojowej i mieszano w tej temperaturze przez 2 godziny, następnie pozostawiono przez noc, po czym potraktowano nasyconym roztworem chlorku amonu (50 ml), a następnie wodą (200 ml). Następnie mieszaninę ekstrahowano dwukrotnie eterem (200 ml). Połączone ekstrakty osuszono nad siarczanem magnezu, a następnie zatężono. Pozostałość destylowano, uzyskując tytułowy związek (22 g) w postaci bezbarwnego oleju, temperatura wrzenia 70°C/1 mm Hg.
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 60
2-[5-(pirydyn-4-ylo)-1-metylo-1H-indol-3-ilo]-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyna
Mieszaninę 2-[5-(1-benzyloksykarbonylo-1,2,5,6-tetrahydropirydyn-4-ylo)-1-metylo-1H-indol-3-ilo]-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyny (1,7 g, Przykład porównawczy 61), etanolu (53 ml) i palladu na węglu (0,35 g) mieszano w obecności wodoru przez 4 godziny, następnie pozostawiono do odstania w temperaturze pokojowej przez noc. Po następnym dniu dodano następną ilość palladu na węglu (0,18 g, 10%) i mieszanie kontynuowano w obecności wodoru przez kolejne 8 godzin. Po odstaniu w temperaturze pokojowej przez 4 dni, mieszaninę reakcyjną przesączono poprzez Hyflo i placek filtracyjny przemyto starannie etanolem. Połączone przesącz i popłuczyny potraktowano palladem na węglu (0,35 g) i mieszaninę mieszano w obecności wodoru. Mieszaninę przesączono poprzez Hyflo i placek filtracyjny przemyto starannie etanolem. Połączone przesącz i popłuczyny zatężono i pozostałość poddano szybkiej chromatografii na krzemionce, eluując mieszaniną octanu etylu i pentanu (4:1, objętościowo), uzyskując tytułowy związek w postaci jasnobrązowego ciała stałego, temperatura topnienia 82-85°C.
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 61
2-[5-(1-benzyloksykarbonylo-1,2,5,6-tetrahydropirydyn-4-ylo)-1-metylo-1H-indol-3-ilo]-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyna
Mieszaninę 1-[3,6-dihydro-4-(4,4,5,5-tetrametylo-1,3,2-dioksaborolan-2-ylo](2H)pirydynakarboksylanu benzylu (2 g, wytworzonego według procedury opisanej przez P. Eastwood, Tetrahedron Letters, 2000, 41, str. 3705-3708), dichloro-[1,1'-bis(difenylofosfino)ferroceno]palladu[II] (0,25 g) i węglanu potasu (2,42 g), w atmosferze azotu, potraktowano roztworem estru 1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-ilowego kwasu trifluorometanosulfonowego [1,6 g, Przykład porównawczy 18(a)] w dimetyloformamidzie (76 ml). Mieszaninę ogrzewano w temperaturze 80°C przez 4 godziny (TLC wciąż wykazywała obecność substancji wyjściowej), następnie potraktowano następną ilością estru 1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-ilowego kwasu trifluorometanosulfonowego (0,15 g), następnie ogrzewano w temperaturze wrzenia przez 4 godziny, po czym pozostawiono w temperaturze pokojowej przez noc. Dodano następną ilość estru 1-metylo-3-[1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo]-1H-indol-5-ilowego kwasu trifluorometanosulfonowego [0,15 g, Przykład porównawczy 18(a)] i mieszaninę ogrzewano w temperaturze wrzenia przez kolejne 4 godziny, po czym zatężono. Pozostałość podzielono pomiędzy octan etylu i wodę i warstwę wodną ekstrahowano trzy razy octanem etylu (50 ml). Połączone fazy
PL 218 884 B1 organiczne przemyto solanką, następnie osuszono nad siarczanem magnezu, po czym zatężono. Pozostałość poddano szybkiej chromatografii na krzemionce, eluując mieszaniną octanu etylu i pentan (1:1, objętościowo), uzyskując tytułowy związek w postaci jasnobrązowej lepkiej cieczy, którą użyto bez dalszego oczyszczania.
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 62 (a) 2-jodo-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyno-4-karbonitryl
Mieszany roztwór diizopropyloaminy (0,38 ml) w tetrahydrofuranie (7 ml), w temperaturze -70°C i w atmosferze azotu, potraktowano roztworem n-butylolitu w heksanach (1,06 ml, 2,5 M) w czasie 5 minut, utrzymując temperaturę poniżej -65°C. Po wymieszaniu przez 20 minut mieszaninę dodano, w temperaturze -70°C, do roztworu 1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyno-4-karbonitrylu (0,65 g, Przykład porównawczy 63) w tetrahydrofuranie (15 ml) i mieszano w temperaturze -70°C przez 45 minut. Następnie dodano roztwór jodu (0,9 g) w tetrahydrofuranie (10 ml) w temperaturze -70°C. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej w ciągu 1 godziny i mieszano przez 18 godzin, a następnie potraktowano wodą (10 ml). Mieszaninę reakcyjną zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość podzielono pomiędzy octan etylu (75 ml) i wodę (50 ml). Substancję nierozpuszczalną odsączono, przemyto eterem i osuszono pod zmniejszonym ciśnieniem, uzyskując tytułowy związek (0,45 g) w postaci białego ciała stałego. Przesącz oddzielono i części organiczne przemyto kolejno nasyconym roztworem tiosiarczanu sodu (2 x 30 ml), wodą (30 ml) i solanką (30 ml), osuszono nad siarczanem sodu i zatężono. Pozostałość roztarto z eterem dietylowym, uzyskując tytułowy związek (0,25 g) w postaci kremowego ciała stałego. TLC RF = 0,43 (octan etylu/heptan 1:1). MS: 424 (MH+).
(b) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie porównawczym 62(a), lecz stosując 4-chloro-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę [Przykład porównawczy 9(c)] wytworzono
4- chloro-2-jodo-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci białawej pianki. MS: 432 (MH+). 1H NMR (CDCI3): 8,25(d, 1H), 8,05(d, 2H), 7,3(d, 2H), 7,15(d, 1H), 7,1(s, 1H), 2,4(s, 3H).
(c) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie porównawczym 62(a), lecz stosując
5- fenylo-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę [Przykład porównawczy 67] wytworzono 2-jodo-5-fenylo-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci jasnobrązowego ciała stałego.
(d) Stosując sposób podobny do opisanego w Przykładzie porównawczym 62(a), lecz stosując 4-fenylo-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę [Przykład porównawczy 9(e)] wytworzono 2-jodo-4-fenylo-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydynę w postaci białego ciała stałego.
1H NMR [(CD3)2SO]; 8,43(1H, d, J=4,5 Hz); 8,04(2H, d, J=8,2 Hz); 7,98(1H, d, J=4,5 Hz); 7,69(2H, dd, J=7,2, 1,9 Hz); 7,56(2H, tt, J=7,2, 1,9 Hz); 7,44(2H, d, J=8,2 Hz); 7,42(1H, d, J=5,0 Hz), 6,92(1H, d, J=4,0 Hz), który użyto bez dalszego oczyszczania.
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 63
1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyno-4-karbonitryl
Mieszaninę tetrafluoroboranu 1-(2,6-dimetylo-1,4-di-hydropirydyn-4-ono)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyniowego (Przykład porównawczy 43, 5,0 g) i wodę (80 ml) potraktowano nasyconym wodnym roztworem cyjanku potasu (25 ml) i mieszano w temperaturze pokojowej przez 48 godzin. Dodano roztwór chlorku tolueno-4-sulfonylu (2,9 g) w toluenie (100 ml), roztwór wodorotlenku sodu (4,0 g) w wodzie (10 ml) i wodorosiarczan tetrabutylamoniowy (0,05 g) i mieszano w temperaturze pokojowej 72 godziny. Mieszaninę przesączono przez celit i podzielono. Części wodne ekstrahowano trzy razy octanem etylu (50 ml) i połączone części organiczne przemyto wodą (50 ml), solanką (50 ml), osuszono nad siarczanem magnezu i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość poddano szybkiej chromatografii na krzemionce, eluując mieszaniną octanu etylu i heptanu (3/7, objętościowo), uzyskując tytułowy związek (1,1 g) w postaci białego ciała stałego, TLC: RF = 0,60 (octan etylu/heptan, 3:7); 1H NMR [(CD3)2SO]: 8,54(1H, d, J=4,7 Hz); 8,08(2H, d, J=8,2 Hz); 7,95(1H, d, J=3,6 Hz); 7,44(1H, d,
J=4,3 Hz); 7,31(2H, d, J=8,2 Hz); 6,82(1H, d, J=3,3 Hz); 2,39(3H, s); i 1H-pirolo[2,3-b]pirydyno-41
-karbonitryl (0,13 g) w postaci białego ciała stałego, TLC RF = 0,24 (octan etylu/heptan 3:7); 1H NMR
[(CD3)2SO]: 10,19(1H, s); 8,44(1H, d, J=4,6 Hz); 7,59(1H, m); 7,40(1H, d, J=4,6 Hz), 6,78(1H, m).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 64
4-chloro-1H-pirolo[2,3-b]pirydyna
N-tlenek 1H-pirolo[2,3-b]pirydyny (Przykład porównawczy 65) (10,0 g) w tlenochlorku fosforu (75 ml) ogrzewano w temperaturze wrzenia przez 8 godzin. Nadmiar tlenochlorku fosforu odparowano i pozostałość rozpuszczono w wodzie i wartość pH roztworu doprowadzono do 8-9, uzyskany osad
PL 218 884 B1 przesączono i osuszono na powietrzu, uzyskując tytułowy związek w postaci białawego ciała stałego (10,2 g). MS: 152 (MH+). 1H NMR (CDCI3): 8,2(d, 1H), 7,5(d, 1H), 7,2(d, 2H), 6,6(d, 2H).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 65
7-tlenek 1H-pirolo[2,3-b]pirydyny
Roztwór kwasu 3-chloronadbenzoesowego (224,3 g) w dichlorometanie (1500 ml) ochłodzono do temperatury 0°C. Do tego roztworu dodano kroplami 1H-pirolo[2,3-b]pirydynę (59,1 g) w dichlorometanie (500 ml) w ciągu 30 minut. Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. Roztwór zatężono, rozcieńczono metanolem (1500 ml) i potraktowano 10% roztworem węglanu potasu w wodzie (300 ml). Zawiesinę przesączono i przesącz zatężono do suchej masy. Pozostałość poddano chromatografii na obojętnym tlenku glinu stosując 20% metanolu w dichloromet+1 anie, uzyskując tytułowy związek w postaci brązowego ciała stałego (47,0 g). MS: 135 (MH+). 1H NMR (CDCI3): 13,1(s, 1H), 8,2(d, 1H), 7,65(d, 1H), 7,4(d, 1H), 7,0(m, 1H), 6,55(d, 1H).
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 66
1-metylo-5-fenylopirazol-3-ilometanol
Mieszaną zawiesinę borowodorku sodu (1,28 g) w suchym tetrahydrofuranie (80 ml) potraktowano chlorkiem wapnia (1,88 g). Mieszaninę mieszano przez 1 godzinę, następnie potraktowano roztworem 1-metylo-5-fenylopirazol-3-ilo-karboksylanu etylu (5,2 g, wytworzony według procedury opisanej przez Martins i in., J. Heterocycl. Chem. (1999), 36(1), 217-220) w suchym tetrahydrofuranie (40 ml). Po wymieszaniu w temperaturze pokojowej przez 3 dni i w temperaturze wrzenia przez 8 godzin, mieszaninę potraktowano roztworem wodorotlenku sodu (50 ml, 1 N). Tę mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę, następnie zatężono w celu usunięcia rozpuszczalników organicznych, a następnie ekstrahowano trzy razy dichlorometanem (140 ml). Połączone ekstrakty przemyto wodą, następnie osuszono nad siarczanem magnezu, po czym zatężono, uzyskując tytułowy związek w postaci białego ciała stałego, temperatura topnienia 95-99°C.
P r z y k ł a d p o r ó w n a w c z y 67
5-fenylo-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyna
Mieszaninę kwasu fenyloboronowego (1,74 g), 5-bromo-1-(tolueno-4-sulfonylo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyny [5 g, Przykład porównawczy 9(d)], (tetrakis)trifenylofosfinopalladu[0] (0,49 g) i nasyconego wodnego roztworu wodorowęglanu sodu (133 ml) i dimetyloformamidu (266 ml), w atmosferze azotu, ogrzewano w temperaturze wrzenia przez noc. Mieszaninę reakcyjną przesączono poprzez Hyflo, a następnie zatężono. Pozostałość podzielono pomiędzy octan etylu (50 ml) i wodę (25 ml) i warstwę wodną ekstrahowano octanem etylu (25 ml). Połączone fazy organiczne przemyto wodą (25 ml), następnie solanką (20 ml), po czym osuszono nad siarczanem magnezu, a następnie zatężono. Pozostałość poddano chromatografii na krzemionce, eluując mieszaniną pentanu i eteru (1:1, objętościowo), uzyskując tytułowy związek w postaci białego ciała stałego, temperatura topnienia. 151-152°C. MS: 335 (MH+).
Procedury badania in vitro
A. Procedury badania Syk in vitro
1. Wpływy hamujące związków na kinazę Syk
Wpływy hamujące związków na kinazę Syk określono stosując rozłożoną w czasie próbę fluorescencyjną.
Domenę katalityczną kinazy Syk (reszty A340-N635) wyrażono jako białko fuzyjne w komórkach drożdżowych i oczyszczono do homogeniczności. Aktywność kinazy określono w 50 mM buforze Tris-HCl o pH 7,0 zawierającym 50 mM NaCl, 5 mM MgCl2, 5 mM MnCl2, 1 μΜ adenozynotrifosforanu i 10 μΜ syntetycznego peptydu Biotyna-(3-Alanina)3-DEEDYEIPP-NH2. Reakcje enzymatyczne zakończono przez dodanie buforu, zawierającego 0,4 M KF, 133 mM EDTA, o pH 7,0, zawierającego koniugat streptawidyna-XL665 i fosfoswoiste przeciwciało monoklonalne, sprzężone z kryptatem europu (Eu-K). Charakterystyki tych dwóch fluoroforów, XL-665 i Eu-K dostarczyli G. Mathis i współp., Anticancer Research, 1997, 17, strony 3011-3014. Specyficzny długotrwały sygnał XL-665, wytwarzany tylko gdy syntetyczny peptyd jest fosforylowany przez Syk, mierzono przy zastosowaniu analizatora Packard Discovery Microplate. Hamowanie aktywności Syk przez związki według wynalazku wyrażono jako procent hamowania aktywności kontrolnej, wykazywanej w nieobecności badanych związków. Szczególne związki według wynalazku hamują aktywność Syk z IC50 w zakresie 100 mikromoli do 10 nanomoli. Korzystne związki według wynalazku hamują aktywność Syk z IC50 w zakresie 100 nanomoli do 10 nanomoli.
PL 218 884 B1
2. Wywołana antygenem degranulacja szczurzych białaczkowych komórek zasadochłonnych 3 (RBL) mierzona przez uwalnianie [3H]5-hydroksytryptaminy (serotoniny)
2.1 Hodowla komórkowa, znakowanie komórek RBL-2H3 i wykonanie próby.
W każdej 24-studzienkowej płytce hodowlanej umieszczono 6 x 106 komórek RBL-2H3. Komór3 ki przemyto i zawieszono w 15 ml DMEM-10, zawierającym 25 μ! 1 mCi/ml [ H]-serotoniny (stężenie końcowe 0,5 μθί/ml) i 1 μg/ml (15 ml) IgE anty-DNP. 0,5 ml zawiesiny komórkowej dodano do każdej ze studzienek 24-studzienkowej płytki. Komórki inkubowano przez 2 dni w 37°C, aż do ich zlania. Podłoże ostrożnie aspirowano z każdej studzienki, a następnie komórki przemywano próbnym buforem. Końcową 200 ml objętość próbnego buforu (+ lub -badane związki w odpowiednich stężeniach) dodano następnie do każdej z trzech odtwarzalnych studzienek. 100 ng/ml DNP (antygen) dodano następnie do wszystkich studzienek (z wyjątkiem negatywnych studzienek kontrolnych tj. do pomiaru spon3 tanicznego uwalniania [3H]-serotoniny w nieobecności krzyżowego łączenia receptora). Komórki inkubowano przez 30 minut w 37°C i reakcję zatrzymano przez przeniesienie 100 μl supernatantu z każdej próbki na płynną scyntylacyjną płytkę do mikromiareczkowania trzymaną w lodzie. 200 μl scintillant-40 dodano następnie do każdej studzienki płytki do mikromiareczkowania i płytkę odczytano w liczniku scyntylacyjnym Topcount Liquid.
2.2 Obliczenie wyników (i) Obliczono średnią ± standardowy błąd średniej (s.e.m.) dla każdej serii potrójnych studzienek.
(ii) Maksymalna odpowiedź występowała w pozytywnych studzienkach kontrolnych zawierających antygen (10 ng/ml), ale nie związek.
(iii) Minimalna odpowiedź występowała w studzienkach kontrolnych nie zawierających ani antygenu, ani związku.
(iv) Stosując te wartości jako odpowiednio wartość maksymalną (100%) i minimalną (0%) dane znormalizowano podając procent maksymalnej odpowiedzi.
(v) Wykreślono krzywą dawka-odpowiedź i obliczono IC50 dla związku.
Związki według wynalazku hamują wywołaną antygenem degranulację szczurzych zasadochłonnych komórek białaczkowych z EC50 w zakresie 100 mikromoli do 0,01 mikromoli.
B. Procedury badania KDR in vitro
1. Wpływy hamujące związków na KDR
Wpływy hamujące związków w próbie fosforylacji substratu KDR określono stosując próbę na płytce FlashPlate (96-studzienkowe płytki, New England Nuclear).
Domenę cytroplazmiczną ludzkiego enzymu sklonowano jako fuzję S-transferazy glutationowej (GST) w wektorze ekspresji pFastBac-GST tag (ramka odczytu) B bakulowirusa. Białko wyrażono w komórkach SF21 i oczyszczono do około 60% homogeniczności.
Aktywność kinazy określono w 20 mM soli sodowej kwasu 4-morfolinopropanosulfonowego, 10 mM MgCl2, 10 mM MnCl2, 1 mM Ditiotreitolu, 2,5 mM kwasu etylenoglikolo-bis (beta-aminoetyloetero)-N,N'-tetraoctowego, 10 mM β-glicerofosforanu, pH 7,2 zawierających 10 mM MgCl2, 100 μΜ Na3VO4, 1 mM NaF. 10 μl związku dodano do 70 μl buforu kinazy, zawierającego 100 ng receptora domeny enzymu kinazy (KDR) w 4°C. Reakcję zapoczątkowano przez dodanie 20 μl roztworu zawierającego 2 μg substratu (fragment SH2-SH3 PLCy wyrażonego jako białko fuzyjne GST), 2 LiCi γ33Ρ[ΑΤΡ] i 2 μM zimnego ATP. Po 1 godzinie inkubacji w 37°C reakcję zatrzymano przez dodanie 1 objętości (100 μθ 200 mM EDTA. Bufor próbny następnie usunięto i studzienki przemyto trzykrotnie 300 μl roztworu soli buforowanego fosforanem. Radioaktywność zmierzono w każdej studzience stosując przyrząd Packard Model Top Count NXT.
Sygnał tła oszacowano w oparciu o pomiar radioaktywności w poczwórnych studzienkach, za33 wierających kompletny próbny koktajl (γ P-[ATP], KDR i substrat PLCg) w nieobecności badanego związku.
Hamowanie aktywności KDR związkiem według wynalazku wyrażono jako procentowe hamowanie aktywności kontrolnej wykazywanej w nieobecności badanego związku.
μM SU5614 (Calbiochem) umieszczono w poczwórnych studzienkach na każdej płytce jako kontrolę hamowania. Obliczono IC50 dla związków według wynalazku przez wykreślenie krzywej dawka-odpowiedź. IC50 odpowiadało stężeniu związku według wynalazku, które wywoływało 50% hamowanie aktywności kinazy.
Szczególne związki według wynalazku hamują aktywność KDR z IC50 w zakresie 100 mikromoli do 0,3 mikromoli.
PL 218 884 B1
2. Aktywność komórkowa na komórce śródbłonka
2.1 Hamowanie zależnej od śródbłonkowego czynnika wzrostu naczyń (VEGF) proliferacji ludzkich komórek śródbłonka mikronaczyniowego skóry (HDMEC).
Aktywność anty-KDR cząsteczek według wynalazku oceniono poprzez wychwyt [14C]tymidyny na HDMEC (ludzkie komórki śródbłonka mikronaczyniowego skóry) w odpowiedzi na VEGF. Pierwszego dnia 5000 komórek HDMEC na studzienkę (Promocell, pasaż 5 do 7) umieszczono w 100 μl na 96-studzienkowych płytkach Cytostar (Amersham) pokrytych czynnikiem wiążącym (AF, Cascad Biologics) w 37°C, 5% CO2. Drugiego dnia kompletne podłoże komórkowe (podłoże podstawowe uzupełnione 5% płodowego osocza cielęcego (FCS) i koktajlem czynników wzrostu) zastąpiono podłożem minimalnym (podłoże podstawowe uzupełnione 5% FCS) i komórki inkubowano przez kolejne 24 godziny. Trzeciego dnia podłoże zastąpiono 200 μl świeżego podłoża minimalnego uzupełnionego lub nie uzupełnionego 100 ng/ml VEGF (R&D System) i zawierającego lub nie zawierającego związki według wynalazku i 0,1 uCi [ C]-tymidyny. Komórki inkubowano w 37°C, 5% CO2 przez 4 dni. Wy14 chwyt [14C]-tymidyny określono ilościowo przez zliczenie radioaktywności. Próby przeprowadzono w potrójnych studzienkach. Końcowe stężenie DMSO w próbie wynosi 0,1%. % hamowania obliczono jako [cpm(+VEGF)-cpm(+VEGF+cpd)/cpm(+VEGF)-cpm(BM5%FCS)] x100.
2.2 Wpływ cząsteczek na zależny od VEGF wzrost HDMEC:
HDEMC (5000 komórek na studzienkę) umieszczono na kompletnym podłożu (CM) na 96-studzienkowych płytkach Cytostar (Amersham) pokrytych czynnikiem wiążącym (AF, Cascad Biologics) w 37°C, 5% CO2 pierwszego dnia. Następnie kompletne podłoże usunięto, a komórki inkubowano w 200 ul kompletnego podłoża zawierającego cząsteczki według wynalazku i [ C]-tymidynę (0,1 uCi). Wychwyt [14C]-tymidyny oceniono ilościowo stosując płytkę Wallac typu beta po 3 dniach inkubacji. % hamowania obliczono jako [cpm(CM) cpm(CM+cpd) /cpm(CM)] x100.
C. Procedury badań in vitro dla kinazy Aurora 2
1. Wpływy hamujące związków na kinazę Aurora 2
Wpływy hamujące związków na kinazę Aurora 2 określono stosując radioaktywną próbę na płytce FlashPlate z chelatem niklu.
Pełnej długości N-końcowo oznaczoną His tag rekombinowaną kinazę Aurora 2 wyrażono w E. coli i oczyszczono prawie do homogeniczności.
C-końcowy fragment (Q1687-H2101) N-końcowo oznaczonej His tag NuMA (białko jądrowe związane z aparatem mitotycznym) wyrażono w E. coli, oczyszczono chromatografią z zastosowaniem chelatu niklu i stosowano jako substrat w próbie kinazy Aurora 2. Dla określenia aktywności kinazy substrat NuMA był świeżo równoważony w buforze kinazy (50 mM Tris-HCl, pH 7,5, 50 mM NaCl, 10 mM MgCl2) uzupełnionej 10% (obj./obj.) glicerolem i 0,05% (masa/obj.) NP40 przez chromatografię na kolumnie Pharmacia PD10.
Aktywność kinazy Aurora 2 mierzono na płytce FlashPlate z chelatem niklu (New England Nuclear, model SMP107). Każda studzienka zawierała 100 ul następującego roztworu: 0,02 uM kinazy Aurora 2; 0,5 uM substratu NuMA; 1 uM ATP uzupełniony 0,5 uCi [y33P]-ATP. Roztwory inkubowano przez 30 minut w 37°C. Bufor próbny następnie usunięto, a studzienki przepłukano 300 ul buforu kinazy. Zmierzono radioaktywność w każdej studzience stosując przyrząd Packard Model Top Count NXT.
Sygnał tła oszacowano na podstawie pomiaru radioaktywności w podwójnych studzienkach, zawierających samo radioaktywne ATP w buforze kinazy, traktowanych w ten sam sposób jak inne próbki. Aktywność kontrolną oszacowano na podstawie pomiaru radioaktywności w podwójnych studzienkach, zawierających kompletny koktajl próbny (ATP, Aurora 2 i substrat NuMA) w nieobecności badanego związku.
Hamowanie aktywności kinazy Aurora 2 przez związek według wynalazku wyrażono jako procent hamowania aktywności kontrolnej w nieobecności badanego związku. Staurosporyna była umieszczona na każdej płytce jako kontrola hamowania.
IC50 obliczono dla związków według wynalazku przez wykreślenie krzywej dawka-odpowiedź. IC50 odpowiadało stężeniu związku według wynalazku, które wywoływało 50% hamowanie aktywności kinazy.
Szczególne związki według wynalazku hamują aktywność kinazy Aurora 2 z IC50 w zakresie 100 mikromoli do 0,3 mikromoli.
PL 218 884 B1
C. Procedury badania in vitro dla FAK
1. Wpływy hamujące związków na FAK
Wpływy hamujące związków na kinazę FAK - próba autofosforylacji - określono stosując rozłożoną w czasie próbę fluorescencyjną.
Pełnej długości cDNA ludzkiego enzymu klonowano w bakulowirusowym wektorze ekspresji pFastBac HTc. Białko wyrażono i oczyszczono do około 70% homogeniczności.
Aktywność kinazy określono w 50 mM Hepes pH 7,2, zawierającym 10 mM MgCl2, 100 ąM Na3VO4, 15 ąM adenozynotrifosforanu. Reakcje enzymatyczne zakończono przez dodanie buforu Hepes pH 7,0, zawierającego 0,4 M KF, 133 mM EDTA, 0,1% BSA zawierającego przeciwciało przeciw-6His znakowane XL665 (FAK jest His-tag) i monoklonalne tyrozynowe przeciwciało fosfoswoiste sprzężone z kryptanem europu (Eu-K). Charakterystyki dwóch fluoroforów, XL-665 i Eu-K dostarczył G. Mathis i współp., Anticancer Research, 1997, 17, strony 3011-3014. Swoisty długi sygnał XL-665, wytwarzany tylko wtedy gdy enzym FAK ulega autofosforylacji, mierzono z zastosowaniem analizatora Packard Discovery Microplate. Hamowanie aktywności FAK związkami według wynalazku wyrażono jako procent hamowania aktywności kontrolnej, wykazywanej w nieobecności badanych związków.
2. Proliferacja/przeżywalność ludzkich komórek czerniaka SK-Mel-28 mierzona przez wychwyt [14C]Tymidyny
2.1 Hodowla komórkowa, znakowanie komórek SK-Mel-28 i przeprowadzenie próby.
SK-Mel-28 umieszczono w ilości 5000 komórek na studzienkę na 96-studzienkowej płytce Cytostar (Amersham) w 37°C, 5% CO2 pierwszego dnia. Drugiego dnia podłoże komórkowe zastąpiono świeżym minimalnym podstawowym podłożem hodowlanym Eagle'a (MEM), uzupełnionym 10% FCS,
1% nie niezbędnymi aminokwasami, 1% pirogronianem sodu i zawierającym 0,1 ąCi [14C]Tymidyny plus wzrastające stężenia związków w 200 ąl objętości końcowej. Komórki inkubowano w 37°C, 5% CO2 przez 48 godzin po rozpoczęciu traktowania. Próby przeprowadzono w potrójnych studzienkach.
2.2 Obliczenie wyników (i) Obliczono średnią ± s.e.m. każdej serii potrójnych studzienek.
(ii) Maksymalna odpowiedź występowała w pozytywnych studzienkach kontrolnych zawierających komórki, ale nie związek.
(iii) Minimalna odpowiedź występowała w studzienkach kontrolnych nie zawierających ani komórek, ani związku.
(iv) Stosując te wartości jako odpowiednio wartość maksymalną (100%) i minimalną (0%) dane znormalizowano podając procent maksymalnej odpowiedzi.
(v) Wykreślono krzywą dawka-odpowiedź i obliczono IC50 związku (stężenie leku, które wywołu14 je 50% spadek wychwytu [14Ci]-tymidyny).
3. Migracja ludzkich komórek czerniaka SK-Mel-28 na fibronektynowej matrycy
3.1 Hodowla komórkowa i przeprowadzenie próby
SK-Mel-28 (250000 komórek) wstępnie potraktowano wzrastającymi stężeniami związków przez 15 minut w 37°C, 5% CO2. Następnie umieszczono je w obecności związku na górnej powierzchni 12 ąm 12-studzienkowych chemotaktycznych komór Boyden'a (Becton Dickinson) i umożliwiono migrację do dolnej komory, zawierającej fibronektynę (10 ąg/ml) jako chemoatraktant w podstawowym podłożu hodowlanym RPMI, przez 24 godziny w 37°C, 5% CO2. Komórki następnie utrwalono i barwiono w Diff-Quick (Diff-Quick Fix, roztwory I i II, Dade Behring), a komórki z górnej powierzchni komory usuwano. Barwnik komórek przylegających do dolnej powierzchni rozpuszczano, a migrację komórkową oceniano ilościowo przez pomiar gęstości optycznej. Próby przeprowadzano w podwójnych studzienkach.
3.2 Obliczanie wyników (i) Obliczono średnią ± s.e.m. każdej serii podwójnych studzienek.
(ii) Maksymalna odpowiedź występowała w pozytywnych studzienkach kontrolnych zawierających komórki, którym umożliwiono migrację na fibronektynie, ale nie związek.
(iii) Minimalna odpowiedź występowała w studzienkach kontrolnych zawierających komórki, którym umożliwiono migrację na podstawowym podłożu hodowlanym bez chemoatraktanta, ale nie związek.
(iv) Stosując te wartości jako odpowiednio wartość maksymalną (100%) i minimalną (0%) dane znormalizowano podając procent maksymalnej odpowiedzi.
(v) Wykreślono krzywą dawka-odpowiedź i obliczono IC50 związku (stężenie leku, które wywołuje 50% spadek migracji komórkowej).
PL 218 884 B1
Szczególne związki według wynalazku hamują aktywność FAK z IC50 w zakresie 100 mikromoli do 0,3 mikromoli.
Procedury badań in vivo
1. Badania hamowania zapalenia dróg oddechowych wywołanego antygenem przez doustne jedno- i wielodniowe podawanie.
Związki według wynalazku oceniono na szczurze Brown Norway cierpiącym na alergię. Modele stosowane w badaniach in vivo naśladują omawiane patologiczne cechy alergicznej choroby dróg oddechowych. Badania te wykazały, że związki według wynalazku hamują gromadzenie się komórek zapalnych w drogach oddechowych dwadzieścia cztery godziny po inhalacji antygenu. Zmierzono punkty końcowe przy pojawieniu się leukocytów zapalnych w płynie z płukania oskrzelowo-pęcherzykowego (BALF), w płynie po wytrawieniu tkanki płucnej, i w tkance, i dokonano oceny ilościowej poprzez analizę histopatologiczną.
Protokół uczulania i prowokacji
Szczury Brown Norway uczulano w dniu 0, 12 i 21 owoalbuminą (100 pg, i.p.) podawaną z wodorotlenkiem glinu (100 mg, i.p.). 30 dnia szczury poddano ekspozycji na 1% owoalbuminę w aerozolu przez okres 30 minut. Następnie zwierzęta przeniesiono z powrotem do klatek.
Protokół dawkowania
Badany lek podawano doustnie 1 godzinę przed rozpoczęciem prowokacji inhalacją alergenu. Cztery godziny po zakończeniu prowokacji inhalacją alergenu podano doustnie drugą dawkę leku. Dawki związku pomiędzy 3 i 100 mg/kg podawano w dwóch równych dawkach.
W oddzielnych badaniach lek podawano dwa razy dziennie przez 4 dni przed inhalacją a n tygenu. Ostatnią dawkę związku w tych badaniach podano 4 godziny po prowokacji antygenem.
Protokół przeprowadzania płukania oskrzelowo-pęcherzykowego (BAL)
Dwadzieścia cztery godziny po prowokacji inhalacją antygenu, komórki pozyskiwano ze światła dróg oddechowych, poddanych eutanazji zwierząt, poprzez płukanie oskrzelowo-pęcherzykowe i przemywanie płuc trzema wielokrotnościami 5 ml RPMI/FCS. Przemywania przeprowadzano z zatrzymaniem każdego w płucach przez 30 sekund przed delikatnym usunięciem. Zebrano trzy próbki i zmierzono liczbę całkowitą i zróżnicowaną białych komórek krwi w próbkach BAL. Do określenia wszystkich komórek i liczby zróżnicowanych komórek zastosowano układ ARGOS z zastosowaniem mikroskopii świetlnej wirowanych cytologicznie preparatów barwionych metodą Wright-Giemsa.
Protokół histopatologii płuc
Bezpośrednio po BAL w płuca wdmuchiwano 10% neutralną buforowaną formalinę (NBF), przy ciśnieniu 30 cm słupa wody. Płuca usuwano i umieszczano w słojach z 10% NBF. Po umieszczeniu w 10% NBF na minimum 24 godziny płuca poddano działaniu frakcjonowanego alkoholu i zatopiono w parafinie. Płuca rozcięto podłużnie i jeden 2 pm podłużny skrawek z każdego zwierzęcia cięto na poziomie oskrzeli głównych. Następnie skrawki barwiono hematoksyliną i eozyną. Przeprowadzono ocenę patologiczną skrawków i sklasyfikowano nabłonka oskrzelowego i warstwę podśluzówkową.
Protokół wytrawiania tkanki płucnej
W pewnych badaniach płuco poddawano wytrawianiu w celu uzyskania komórek zapalnych, zlokalizowanych w tkance. W tych badaniach komórki otrzymywano przez perfuzję lewego płuca RPMI/FCS w celu usunięcia komórek wynaczynionej krwi bezpośrednio po BAL. W badaniach tych prawe płuco nadmuchiwano i umieszczano w buforowanej formalinie do analizy histopatologicznej. Płuco poddawane wytrawianiu standaryzowano u zwierząt przez pobranie 300 mg skrawka tkanki płucnej i ekspozycje na trawienie kolagenazą. Uwalniało to komórki z tkanki płucnej i umożliwiało ich odzyskiwanie. Liczenie wszystkich komórek i komórek zróżnicowanych przeprowadzono na tych odzyskanych komórkach.
Wyniki (i) Po inhalacji antygenu znacząco wzrasta liczba leukocytów kwasochłonnych i leukocytów obojętnochłonnych w grupach nieleczonych. Wykazano zarówno w BAL i wytrawianej tkance płucnej, jak i wyniku badania histopatologicznego płuca, znaczne zwiększenie liczby leukocytów kwasochłonnych i obojętnochłonnych.
(ii) W BAL nie obserwowano zmian liczby makrofagów/monocytów przy prowokacji antygenem lub przy stosowaniu jakiegokolwiek leku.
(iii) Związek jako zdolny do znacznego hamowania infiltracji leukocytów obojętnochłonnych i kwasochłonnych, 24 godziny po prowokacji antygenowej, porównano z kontrolami nie leczonymi, jak
PL 218 884 B1 oszacowano we wszystkich trzech sposobach wymienionych powyżej. Zakres skutecznej dawki wynosił pomiędzy 3 a 100 mg/kg p.o.
(iv) W badaniach wielodniowego podawania leku występowało podobne, pod względem ilościowym, hamowanie napływu komórkowego, jak obserwowane przy badaniach jednodniowych.
Wyniki, uzyskane na szczurzym modelu infiltracji leukocytowej wywołanej antygenem, wskazują, że związki według wynalazku wykazują aktywność przeciwzapalną, gdy są podawane profilaktycznie.
2. Hamowanie wywołanego antygenem zapalenia dróg oddechowych - badania jednodniowego dawkowania i.p.
Protokół uczulania i prowokacji
Szczury Brown Norway uczulono w dniu 0, 12 i 21 owoalbuminą (100 μg, i.p.) podawaną z wodorotlenkiem glinu (100 mg, i.p.). 30 dnia szczury poddano ekspozycji na 1% owoalbuminę w aerozolu przez okres 30 minut. Następnie zwierzęta powróciły do klatek.
Protokół dawkowania
Badany lek podawano cztery razy raczej dootrzewnowo niż p.o., a regulamin dawkowania był następujący: 30 minut przed prowokacją i 2, 4 i 8 godzin po prowokacji inhalacją alergenu.
Protokół przeprowadzania płukania oskrzelowo-pęcherzykowego (BAL)
Dwadzieścia cztery godziny po prowokacji inhalacją antygenu komórki pozyskiwano ze światła dróg oddechowych poddanych eutanazji zwierząt, poprzez płukanie oskrzelowo-pęcherzykowe i przemywanie płuc trzema wielokrotnościami 5-ml RPMI/FCS. Przemywania przeprowadzano zatrzymując każde w płucach przez 30 sekund przed delikatnym usunięciem. Zebrano trzy próbki i zmierzono liczbę całkowitą i zróżnicowaną białych komórek krwi w próbkach BAL. Do określenia wszystkich komórek i liczby zróżnicowanych komórek zastosowano układ ARGOS z zastosowaniem mikroskopii świetlnej wirowanych cytologicznie preparatów barwionych metodą Wright-Giemsa.
Protokół histopatologii płuc
Bezpośrednio po BAL w płuca wdmuchiwano 10% neutralną buforowaną formalinę (NBF), przy ciśnieniu 30 cm słupa wody. Płuca usuwano i umieszczano w słojach z 10% NBF. Po umieszczeniu w 10% NBF na minimum 24 godziny płuca poddano działaniu frakcjonowanego alkoholu i zatapiano w parafinie. Płuca rozcięto podłużnie i jeden 2 μm podłużny skrawek z każdego zwierzęcia cięto na poziomie oskrzeli głównych. Następnie skrawki barwiono hematoksyliną i eozyną. Przeprowadzono ocenę patologiczną skrawków i klasyfikację nabłonka oskrzelowego i warstwy podśluzówkowej.
Protokół wytrawiania płuc
W pewnych badaniach płuco poddawano wytrawianiu w celu uzyskania komórek zapalnych, zlokalizowanych w tkance. W tych badaniach komórki otrzymywano przez perfuzję lewego płuca RPMI/FCS w celu usunięcia komórek wynaczynionej krwi bezpośrednio po BAL. W badaniach tych prawe płuco nadmuchiwano i umieszczano w buforowanej formalinie do analizy histopatologicznej. Płuco poddawane wytrawianiu standaryzowano u zwierząt przez pobranie 300 mg skrawka tkanki płucnej i ekspozycje na trawienie kolagenazą.
Uwalniało to komórki z tkanki płucnej i umożliwiało ich odzyskiwanie. Liczenie wszystkich komórek i komórek zróżnicowanych przeprowadzono na odzyskanych komórkach.
Wyniki (i) Po inhalacji antygenu znacząco wzrasta liczba leukocytów kwasochłonnych i leukocytów obojętnochłonnych w grupach nieleczonych. Wykazano znaczne zwiększenie liczby leukocytów kwasochłonnych i obojętnochłonnych zarówno w BAL i wytrawianej tkance, jak i wyniku badania histopatologicznego płuca.
(ii) Związki według wynalazku są zdolne do znacznego hamowania infiltracji przez leukocyty obojętnochłonne i kwasochłonne 24 godziny po prowokacji, porównując z kontrolami nie leczonymi, jak oszacowano we wszystkich trzech sposobach wymienionych powyżej. Zakres skutecznej dawki wynosił pomiędzy 3 a 100 mg/kg p.o.
Wyniki uzyskane na szczurzym modelu wywołanej antygenem infiltracji leukocytowej wskazują, że związki według wynalazku wykazują aktywność przeciwzapalną wtedy, gdy są stosowane profilaktycznie, zarówno doustnie jak i dootrzewnowo.
3. Hamowanie ostrego wywołanego antygenem skurczu oskrzeli u szczura cierpiącego na alergię
Protokół uczulania i prowokacji
Szczury Brown Norway uczulano w dniu 0, 12 i 21 owoalbuminą (100 μg, i.p.) podawaną z wodorotlenkiem glinu (100 mg, i.p.). W dniu badania szczury chirurgicznie przygotowano do pomiaru mechaniki płuc i mechanicznie wentylowano. Po pięciominutowym okresie równoważenia zwierzęta
PL 218 884 B1 otrzymały bolus owoalbuminy (1 mg na szczura). Zwierzęta były następnie utrzymywane przez 15 minut, a odpowiedź na prowokacje antygenową zarejestrowano jako maksimum zmian w porównaniu z poziomem podstawowym oporu.
Protokół dawkowania
Badany lek dostarczano zarówno p.o. lub i.p. 24 i 2 godziny przed iv wstrzyknięciem owoalbuminy w bolusie. W badaniach tych związek dostarczano w zakresie 10-100 mg/kg p.o.
Wyniki
Po prowokacji antygenowej u nieleczonych i leczonych kontrolnie budesonidem zwierząt, znacznie wzrósł opór w drogach oddechowych ponad poziom podstawowy. Przeciwnie, związki według wynalazku znacznie hamowały wywołany antygenem skurcz oskrzeli.
Wyniki te wskazują, że związki według wynalazku hamują wywołany antygenem skurcz oskrzeli.
4. Hamowanie wywołanego Sephadexem obrzęku płuc u szczura i ekspresja genu cytokiny u szczura z alergią
Protokół podawania Sephadexu
Szczury Sprague-Dawley płci męskiej (400 g) otrzymały i.t. rozczynnik (fizjologiczny roztwór soli) lub Sephadex (5 mg/kg) w objętości dawkowania 1 ml/kg w znieczuleniu halotanem (4% w tlenie przez 3 min).
Protokół dawkowania
Lek podawano p.o. 1 godzinę przed i 5 godzin po Sephadexie i.t. w objętości dawkowania 1 ml/kg.
Protokół oceny obrzęku w punkcie końcowym
Dwadzieścia cztery godziny po podaniu Sephadexu zwierzęta zabijano Euthatalem (1 ml/kg i.p.), serce i płuca usuwano en bloc. Zwiększenie mokrego ciężaru stosowano jako wskaźnik obrzęku. Określano mokry ciężar i następnie korygowano dla 100 g wyjściowej wagi ciała.
Protokół RT-PCR (pomiar ekspresji genu cytokiny)
RNA izolowano z tkanki płucnej techniką ekstrakcji tiocyjanian guanidyny-fenol-chloroform. Stosując odwrotną transkryptazę AMV RNA poddawano odwrotnej transkrypcji do cDNA. cDNA dla IL-5, IL-4, eotaksyny i GAPDH (gen kontrolny) amplifikowano przy zastosowaniu PCR, stosując sekwencje oligonukleotydowe syntetyzowane (Gibco) z opublikowanych sekwencji.
Reagenty PCR były powlekane olejem mineralnym, a amplifikacje prowadzono przez 25-35 cykli denaturacji w 95°C przez 1 minutę, startery przyłączano w 55-65°C przez 1 minutę i polimeryzowano w 72°C przez 7 minut. Produkty PCR, barwione bromkiem etydyny, poddano elektroforezie na 2% żelach agarozowych, w celu uwidocznienia pasm cDNA.
Pasma każdego docelowego fragmentu były uwidaczniane poprzez transiluminację ultrafioletem i fotografowane. Fotografie skanowano na densytometrze i całkowane gęstości optyczne (OD x mm) każdego pasma obliczano, stosując oprogramowanie do analizy obrazu (Imagemaster, Pharmacia). Dla każdego zwierzęcia ilość każdego cytokinowego produktu PCR normalizowano do ilości GAPDH produktu PCR.
Wyniki (i) Samo wkraplanie Sephadexu wywołuje znaczny obrzęk w 32% (ii) Związki według wynalazku hamowały obrzęk w sposób zależny od dawki przy dawkach 10, 30 i 100 mg/kg (iii) Sephadex powoduje wzrost ekspresji Th-2 cytokin IL-4 i IL-5 razem z CC chemokinową eotaksyną w płucu 24 godziny po prowokacji. Występowała tendencja do wzrostu ekspresji mRNA IL-5 i eotaksyny.
(iv) Ekspresja L-4 mRNA była hamowana przez związki według wynalazku zależnie od dawki.
Związki według wynalazku hamują obrzęk płuc u szczura wywołany Sephadexem, co jest związane z redukcją indukcji przez Sephadex IL-4.
5. Hamowanie wywołanego antygenem uwalniania histaminy u szczura Brown-Norway z alergią
Protokół uczulania i prowokacji
Szczury Brown Norway uczulano w dniu 0, 12 i 21 owoalbuminą (100 μg, i.p.) podawaną z wodorotlenkiem glinu (100 mg, i.p.). W dniu badania szczury chirurgicznie przygotowano do infuzji antygenu. Po pięciominutowym okresie równoważenia zwierzęta otrzymały bolus owoalbuminy (1 mg na szczura). Próbki krwi pobrano 2 minuty po prowokacji owoalbuminą, a poziomy histaminy w osoczu zmierzono stosując ELISA z histaminą.
PL 218 884 B1
Protokół dawkowania
Badany lek dostarczano i.p. 30 minut przed prowokacją owoalbuminą. W badaniu zastosowano tylko jednorazowo stężenie 30 mg/kg i.p.
Wyniki
Po prowokacji antygenem inhibitory kinazy Syk znacznie hamują wywołane antygenem uwalnianie histaminy, w porównaniu z grupą traktowaną rozczynnikiem.
Wyniki te wskazują, że związki według wynalazku hamują wywołane antygenem uwalnianie histaminy.
6. Hamowanie makrofagów pęcherzykowych ED1+ w tkance płucnej szczura
Protokół uczulania i prowokacji
Szczury Brown Norway uczulono w dniu 0, 12 i 21 owoalbuminą (100 μg, i.p.) podawaną z wodorotlenkiem glinu (100 mg, i.p.). 30 dnia szczury poddano ekspozycji na 1% owoalbuminę w aerozolu przez okres 30 minut. Następnie zwierzęta powróciły do klatek.
Protokół dawkowania
Badany lek dostarczano zarówno p.o., jak i i.p. 24 i 2 godziny przed wstrzyknięciem iv owoalbuminy w bolusie. W badaniach tych związek dostarczano w ilości 10-100 mg/kg p.o.
Protokół oceny ilościowej ED-1
Makrofagi pęcherzykowe poddano ocenie ilościowej po znakowaniach immunologicznych przeciwciałem ED-1 zatopionych w parafinie skrawków tkanki płucnej.
Wyniki (i) Prowokacja owoalbuminą powodowała 10-krotny wzrost liczby makrofagów ED1+ w zrębie pęcherzyków.
(ii) Hamowanie kinazy Syk znacznie zmniejszyło wywołany owoalbuminą wzrost makrofagów pęcherzykowych ED1 w sposób zależny od dawki.
Podawanie doustne związków według wynalazku powodowało zależne od dawki zmniejszenie ilości makrofagów pęcherzykowych ED-1+ po prowokacji owoalbuminą.
7. Hamowanie wywołanej antygenem neutrofilii dróg oddechowych u szczura Brown-Norway
Protokół uczulania i prowokacji
Szczury Brown Norway uczulono w dniu 0, 12 i 21 owoalbuminą (100 μg, i.p.) podawaną z wodorotlenkiem glinu (100 mg, i.p.). 30 dnia szczury poddano ekspozycji na 1% owoalbuminę w aerozolu przez okres 30 minut. Następnie zwierzęta powróciły do klatek.
Protokół dawkowania
Jedną godzinę przed prowokacją antygenową szczury otrzymały lek doustnie. W tych badaniach związek dostarczano w ilości 1-100 mg/kg p.o.
Protokół analizy komórkowej
Cztery godziny po prowokacji komórki pozyskano ze światła dróg oddechowych poprzez płukanie oskrzelowo-pęcherzykowe (RPMI/FCS jak opisano wcześniej). Bezpośrednio po płukaniu płuca poddano perfuzji RPMI/FCS w celu usunięcia komórek wynaczynionej krwi. 300 mg tkanki skrawano a komórki pozyskano przez enzymatyczną (kolagenaza) dezagregację. Zróżnicowane obliczenia komórkowe wykonano z zastosowaniem mikroskopii świetlnej wirowanych cytologicznie preparatów barwionych barwnikiem Wright-Giemsa.
Wyniki (i) Cztery godziny po prowokacji antygenem obserwowano znaczny wzrost granulocytów obojętnochłonnych zarówno w BAL, jak i tkance płucnej.
(ii) Wywołany owoalbuminą wzrost granulocytów obojętnochłonnych w BAL, ale nie w tkance płucnej, był znacznie przyhamowany przez związki według wynalazku.

Claims (25)

1 do zastosowania w leczeniu raka.
1 do zastosowania w leczeniu choroby zapalnej jelit.
1 do zastosowania w leczeniu zapalenia stawów.
1 do zastosowania w leczeniu łuszczycy.
1 do zastosowania w leczeniu astmy.
1 3 4 7 1 9 w którym R1, R3, R4, R7 i X1 mają znaczenia podane w zastrz. 1; R9 oznacza atom wodoru lub
R4; R10 oznacza karboksy, hydroksyl, tetrazolil, 1,2,4-oksadiazolil, pirydynę, R4, -C(=O)-NY1Y2, -OR4, -NH-SO2-R7, lub -NH2; i p oznacza liczbę zero, liczbę całkowitą 1 lub 2; oraz farmaceutycznie dopuszczalne sole związków o wzorze (la).
1. Kompozycja farmaceutyczna zawierająca substancję aktywną razem z jednym lub więcej niż jednym farmaceutycznie dopuszczalnym nośnikiem lub zaróbką, znamienna tym, że jako substancję aktywną zawiera skuteczną ilość hamującej selektywnie kinazy podstawionej pirolopirydyny o wzorze ogólnym (I):
PL 218 884 B1 w którym:
1
R1 oznacza indolil ewentualnie podstawiony przez jedną lub więcej grup wybranych spośród takich jak -C(=O)Me, hydroksyl, tetrazolil, 1,2,4-oksadiazolil, pirydyna, R4, -C(=O)-NY1Y2, -C(=O)-OH,
-NH2, -NH-C(=O)-R7, -NH-SO2-R7, i -OR4;
2
R2 oznacza atom wodoru;
3
R3 oznacza atom wodoru;
R4 oznacza alkil, cykloalkil lub cykloalkiloalkil, każdy ewentualnie podstawiony przez podstawnik 1 2 7 wybrany spośród takich jak -C(=O)-NY1Y2, -C(=O)-OH, -OR7 oraz jedną lub więcej grup hydroksylowych;
R7 oznacza alkil;
X1 oznacza CH, C-Cl, C-CN, C-fenyl lub C-OMe;
Y1 i Y2 niezależnie oznaczają atom wodoru lub alkil ewentualnie podstawiony przez jedną lub więcej grup wybranych spośród takich jak triazolil, hydroksyl, -C(=O)-NY3Y4, -NY3Y4; lub grupa -NY1Y2 może tworzyć cykliczną aminę;
Y3 i Y4 niezależnie oznaczają atom wodoru, lub grupa -NY3Y4 może tworzyć cykliczną aminę;
i w którym (a) „alkil oznacza alifatyczną grupę węglowodorową, która może być prostołańcuchowa lub rozgałęziona o 1 do 4 atomach węgla w łańcuchu;
(b) „cykloalkil oznacza nasycony jednopierścieniowy układ o 4 atomach węgla;
(c) „cykliczna amina oznacza 6-członowy monocykliczny cykloalkilowy układ pierścieniowy, w którym jeden z atomów węgla pierścienia jest zastąpiony przez atom azotu i jeden z atomów węgla w pierścieniu jest zastąpiony przez O;
i farmaceutycznie dopuszczalne sole tych związków.
2-(5-metoksy-1-metylo-1H-indol-3-ilo)-1H-pirolo[2,3-b]pirydyno-4-karbonitryl; i farmaceutycznie dopuszczalne sole takich związków.
2. Podstawiona pirolopirydyna o wzorze (I) jak określono w zastrz. 1.
1
3. Związek według zastrz. 2, w którym ewentualne podstawniki przy R1 obejmują jedną lub więcej grup wybranych spośród takich jak karboksy, hydroksyl, tetrazolil, 1,2,4-oksadiazolil, pirydyna, R4,
-C(=O)-NY1Y2, -C(=O)-OH, -NH2 i -OR4.
1
4 1 2 w którym R4 oznacza cykloalkil podstawiony przez -C(=O)-NY1Y2;
(v) -OR4 (vi) -CONY1Y2;
(vii) karboksy;
(viii) 1,2,4-oksadiazolil;
(ix) pirydynę; lub (x) tetrazolil lub N-metylotetrazolil.
4. Związek według zastrz. 2, w którym X1 oznacza CH.
1
5. Związek według zastrz. 2, w którym X1 oznacza C-OMe.
1
6. Związek według zastrz. 2, w którym X1 oznacza C-fenyl.
1
7. Związek według zastrz. 2, w którym X1 oznacza C-Cl.
1
8. Związek według zastrz. 2, w którym X1 oznacza C-CN.
9. Związek o wzorze (la):
PL 218 884 B1
10. Związek według zastrz. 9, w którym X1 oznacza CH, C-OMe, C-fenyl, C-Cl lub C-CN.
11. Związek według zastrz. 9 albo 10, w którym R9 oznacza:
(i) atom wodoru;
(ii) C1-4alkil;
(iii) C1-4alkil podstawiony przez -C(=O)-NY1Y2; lub (iv) cykloalkiloalkil podstawiony przez hydroksyl.
12. Związek według któregokolwiek z zastrz. 9-11, w którym R10 oznacza:
(i) hydroksyl;
(ii) -OR4, w którym R4 oznacza alkil;
(iii) -OR4, w którym R4 oznacza alkil lub cykloalkiloalkil, każdy podstawiony przez jedną lub więcej grup hydroksylowych;
(iv) -OR4, w którym R4 oznacza alkil podstawiony przez jedną lub więcej grup alkoksylowych;
13. Związek według zastrz. 12, w którym R10 jest przyłączony w pozycji 5 pierścienia indolilowego.
14. Związek według zastrz. 2 wybrany z grupy obejmującej:
amid kwasu 1-[1-metylo-3-(1H-pirolo[2,3-b]pirydyn-2-ylo)-1H-indol-5-iloksy]cyklobutanokarboksylowego;
15. Kompozycja według zastrz. 1 do zastosowania w leczeniu chorób zapalnych.
16.
17.
18.
19.
Kompozycja według zastrz. Kompozycja według zastrz. Kompozycja według zastrz. Kompozycja według zastrz.
Kompozycja według zastrz.
21. Zastosowanie związku jak określono w zastrz. 2 lub farmaceutycznie dopuszczalnej soli ta kiego związku do wytwarzania leku do leczenia astmy.
22. Zastosowanie związku jak określono w zastrz. 2 lub farmaceutycznie dopuszczalnej soli ta kiego związku, do wytwarzania leku do leczenia łuszczycy.
PL 218 884 B1
23. Zastosowanie związku jak określono w zastrz. 2 lub farmaceutycznie dopuszczalnej soli takiego związku do wytwarzania leku do leczenia zapalenia stawów.
24. Zastosowanie związku jak określono w zastrz. 2 lub farmaceutycznie dopuszczalnej soli takiego związku, do wytwarzania leku do leczenia choroby zapalnej jelit.
25. Zastosowanie związku jak określono w zastrz. 2 lub farmaceutycznie dopuszczalnej soli takiego związku, do wytwarzania leku do leczenia raka.
PL386205A 1999-12-24 2000-12-27 Kompozycja farmaceutyczna zawierająca podstawione pirolopirydyny, podstawione pirolopirydyny i ich zastosowania PL218884B1 (pl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB9930698.7A GB9930698D0 (en) 1999-12-24 1999-12-24 Chemical compounds
US21581800P 2000-07-05 2000-07-05

Publications (1)

Publication Number Publication Date
PL218884B1 true PL218884B1 (pl) 2015-02-27

Family

ID=10867079

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL386205A PL218884B1 (pl) 1999-12-24 2000-12-27 Kompozycja farmaceutyczna zawierająca podstawione pirolopirydyny, podstawione pirolopirydyny i ich zastosowania

Country Status (12)

Country Link
JP (1) JP4871474B2 (pl)
AT (2) ATE552258T1 (pl)
DE (1) DE60044946D1 (pl)
DK (2) DK1990343T3 (pl)
ES (2) ES2348861T3 (pl)
GB (1) GB9930698D0 (pl)
ME (1) MEP49908A (pl)
PL (1) PL218884B1 (pl)
PT (2) PT1263759E (pl)
RS (2) RS20100123A (pl)
UA (1) UA76410C2 (pl)
ZA (1) ZA200204126B (pl)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0422057D0 (en) * 2004-10-05 2004-11-03 Astrazeneca Ab Novel compounds
SI1962830T1 (sl) * 2005-12-23 2013-07-31 Glaxosmithkline Llc Azaindolni inhibitorji kinaz Aurora
CL2007002617A1 (es) * 2006-09-11 2008-05-16 Sanofi Aventis Compuestos derivados de pirrolo[2,3-b]pirazin-6-ilo; composicion farmaceutica que comprende a dichos compuestos; y su uso para tratar inflamacion de las articulaciones, artritis reumatoide, tumores, linfoma de las celulas del manto.
JP5274805B2 (ja) * 2006-09-20 2013-08-28 三菱化学株式会社 フッ素化芳香族化合物の製造方法
KR101361858B1 (ko) * 2008-12-05 2014-02-12 에프. 호프만-라 로슈 아게 피롤로피라지닐 우레아 키나아제 저해제
US8816085B2 (en) * 2009-08-26 2014-08-26 Takeda Gmbh Methylpyrrolopyridinecarboxamides
MX2015012899A (es) * 2013-03-14 2016-06-02 Abbvie Inc Pirrolo [2,3-b] piridina como inhibidores de quinasa cdk9.

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE69728688T2 (de) * 1996-11-19 2004-08-19 Amgen Inc., Thousand Oaks Aryl und heteroaryl substituierte kondensierte pyrrole als entzündunghemmende mittel
AU7132998A (en) * 1997-04-24 1998-11-13 Ortho-Mcneil Corporation, Inc. Substituted pyrrolopyridines useful in the treatment of inflammatory diseases
ES2221213T3 (es) * 1997-10-20 2004-12-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Inhibidores de kinasa biciclicos.

Also Published As

Publication number Publication date
ZA200204126B (en) 2003-08-25
ES2348861T3 (es) 2010-12-16
JP4871474B2 (ja) 2012-02-08
DE60044946D1 (de) 2010-10-21
UA76410C2 (en) 2006-08-15
ATE480537T1 (de) 2010-09-15
RS51303B (sr) 2010-12-31
ATE552258T1 (de) 2012-04-15
DK1263759T3 (da) 2011-01-10
PT1990343E (pt) 2012-05-22
ES2382759T3 (es) 2012-06-13
MEP49908A (en) 2011-02-10
GB9930698D0 (en) 2000-02-16
PT1263759E (pt) 2010-11-02
YU46202A (sh) 2005-06-10
RS20100123A (sr) 2010-12-31
DK1990343T3 (da) 2012-07-23
JP2003519144A (ja) 2003-06-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR100910488B1 (ko) 아자인돌
KR100915289B1 (ko) 아자인돌
PL218884B1 (pl) Kompozycja farmaceutyczna zawierająca podstawione pirolopirydyny, podstawione pirolopirydyny i ich zastosowania