PL199433B1 - Związki przeciwzakrzepowe, kompozycja farmaceutyczna i zastosowanie tych związków - Google Patents
Związki przeciwzakrzepowe, kompozycja farmaceutyczna i zastosowanie tych związkówInfo
- Publication number
- PL199433B1 PL199433B1 PL345238A PL34523899A PL199433B1 PL 199433 B1 PL199433 B1 PL 199433B1 PL 345238 A PL345238 A PL 345238A PL 34523899 A PL34523899 A PL 34523899A PL 199433 B1 PL199433 B1 PL 199433B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- alkyl
- compound
- compounds
- residue
- formula
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 80
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 title claims description 8
- 230000002785 anti-thrombosis Effects 0.000 title abstract description 4
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 22
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 claims abstract description 18
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 claims abstract description 18
- 150000002482 oligosaccharides Polymers 0.000 claims abstract description 16
- -1 1,2,3,4-tetrahydronaphthyl Chemical group 0.000 claims abstract description 14
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims abstract description 7
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 6
- 125000002943 quinolinyl group Chemical group N1=C(C=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 claims abstract description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 6
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 5
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims abstract description 5
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 claims abstract description 4
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 claims abstract description 4
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 claims abstract description 4
- DSSYKIVIOFKYAU-XCBNKYQSSA-N (R)-camphor Chemical group C1C[C@@]2(C)C(=O)C[C@@H]1C2(C)C DSSYKIVIOFKYAU-XCBNKYQSSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 125000003016 chromanyl group Chemical group O1C(CCC2=CC=CC=C12)* 0.000 claims abstract description 3
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 claims abstract description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 3
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 claims abstract description 3
- 125000001483 monosaccharide substituent group Chemical group 0.000 claims abstract 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 20
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 claims description 8
- 230000001858 anti-Xa Effects 0.000 claims description 6
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 claims description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 6
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims description 6
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 5
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 claims description 4
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 3
- 241000723346 Cinnamomum camphora Species 0.000 claims description 2
- 229960000846 camphor Drugs 0.000 claims description 2
- 229930008380 camphor Natural products 0.000 claims description 2
- 125000003386 piperidinyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 2
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000000320 amidine group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 abstract 1
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 51
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 49
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 37
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 23
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 23
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 18
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 18
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 12
- 239000004019 antithrombin Substances 0.000 description 11
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 11
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N Tert-Butanol Chemical compound CC(C)(C)O DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 9
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 9
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 9
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 9
- 108010080798 N(alpha)-(2-naphthylsulfonylglycyl)-4-amidinophenylalanine piperidide Proteins 0.000 description 8
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 8
- FYGDTMLNYKFZSV-BYLHFPJWSA-N β-1,4-galactotrioside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@H](CO)O[C@@H](O[C@@H]2[C@@H](O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-BYLHFPJWSA-N 0.000 description 8
- DBTMGCOVALSLOR-UHFFFAOYSA-N 32-alpha-galactosyl-3-alpha-galactosyl-galactose Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(OC2C(C(CO)OC(O)C2O)O)OC(CO)C1O DBTMGCOVALSLOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- RXVWSYJTUUKTEA-UHFFFAOYSA-N D-maltotriose Natural products OC1C(O)C(OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 RXVWSYJTUUKTEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- FYGDTMLNYKFZSV-UHFFFAOYSA-N mannotriose Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(CO)OC(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)C(O)C1O FYGDTMLNYKFZSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 7
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 6
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 108010074860 Factor Xa Proteins 0.000 description 5
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 5
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 5
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 5
- HDFFVHSMHLDSLO-UHFFFAOYSA-M dibenzyl phosphate Chemical compound C=1C=CC=CC=1COP(=O)([O-])OCC1=CC=CC=C1 HDFFVHSMHLDSLO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 5
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 5
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 5
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 5
- XXJGBENTLXFVFI-UHFFFAOYSA-N 1-amino-methylene Chemical compound N[CH2] XXJGBENTLXFVFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 4
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 4
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 4
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 4
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 4
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 4
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 4
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 4
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- HXFZLXXCFVSZAA-INIZCTEOSA-N (2R)-2-(naphthalen-2-ylsulfonylamino)-3-(pyridin-2-yldisulfanyl)propanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NS(=O)(=O)C=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)SSC1=CC=CC=N1 HXFZLXXCFVSZAA-INIZCTEOSA-N 0.000 description 3
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Substances CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N Dicyclohexylamine Chemical compound C1CCCCC1NC1CCCCC1 XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 101100073357 Streptomyces halstedii sch2 gene Proteins 0.000 description 3
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical group 0.000 description 3
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 3
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 3
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 3
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 3
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 3
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 3
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 3
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 3
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 3
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 3
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 3
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 3
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Inorganic materials [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229910001415 sodium ion Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 3
- 239000003868 thrombin inhibitor Substances 0.000 description 3
- GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N (2S,3R)-N-[(2S)-3-(cyclopenten-1-yl)-1-[(2R)-2-methyloxiran-2-yl]-1-oxopropan-2-yl]-3-hydroxy-3-(4-methoxyphenyl)-2-[[(2S)-2-[(2-morpholin-4-ylacetyl)amino]propanoyl]amino]propanamide Chemical compound C1(=CCCC1)C[C@@H](C(=O)[C@@]1(OC1)C)NC([C@H]([C@@H](C1=CC=C(C=C1)OC)O)NC([C@H](C)NC(CN1CCOCC1)=O)=O)=O GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N 0.000 description 2
- JDUUFHDURMALTC-HKBQPEDESA-N (2r)-3-[(4-methoxyphenyl)-diphenylmethyl]sulfanyl-2-(naphthalen-2-ylsulfonylamino)propanoic acid Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C(C=1C=CC=CC=1)(C=1C=CC=CC=1)SC[C@@H](C(O)=O)NS(=O)(=O)C1=CC=C(C=CC=C2)C2=C1 JDUUFHDURMALTC-HKBQPEDESA-N 0.000 description 2
- WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N (2s)-2-[[2-benzyl-3-[hydroxy-[(1r)-2-phenyl-1-(phenylmethoxycarbonylamino)ethyl]phosphoryl]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound N([C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)O)C(=O)C(CP(O)(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)OCC=1C=CC=CC=1)CC1=CC=CC=C1 WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N 0.000 description 2
- IWZSHWBGHQBIML-ZGGLMWTQSA-N (3S,8S,10R,13S,14S,17S)-17-isoquinolin-7-yl-N,N,10,13-tetramethyl-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-amine Chemical compound CN(C)[C@H]1CC[C@]2(C)C3CC[C@@]4(C)[C@@H](CC[C@@H]4c4ccc5ccncc5c4)[C@@H]3CC=C2C1 IWZSHWBGHQBIML-ZGGLMWTQSA-N 0.000 description 2
- HTSGKJQDMSTCGS-UHFFFAOYSA-N 1,4-bis(4-chlorophenyl)-2-(4-methylphenyl)sulfonylbutane-1,4-dione Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)C(C(=O)C=1C=CC(Cl)=CC=1)CC(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 HTSGKJQDMSTCGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KQZLRWGGWXJPOS-NLFPWZOASA-N 1-[(1R)-1-(2,4-dichlorophenyl)ethyl]-6-[(4S,5R)-4-[(2S)-2-(hydroxymethyl)pyrrolidin-1-yl]-5-methylcyclohexen-1-yl]pyrazolo[3,4-b]pyrazine-3-carbonitrile Chemical compound ClC1=C(C=CC(=C1)Cl)[C@@H](C)N1N=C(C=2C1=NC(=CN=2)C1=CC[C@@H]([C@@H](C1)C)N1[C@@H](CCC1)CO)C#N KQZLRWGGWXJPOS-NLFPWZOASA-N 0.000 description 2
- ONBQEOIKXPHGMB-VBSBHUPXSA-N 1-[2-[(2s,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxy-4,6-dihydroxyphenyl]-3-(4-hydroxyphenyl)propan-1-one Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=CC(O)=C1C(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 ONBQEOIKXPHGMB-VBSBHUPXSA-N 0.000 description 2
- KJUGUADJHNHALS-UHFFFAOYSA-N 1H-tetrazole Chemical compound C=1N=NNN=1 KJUGUADJHNHALS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YEDUAINPPJYDJZ-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxybenzothiazole Chemical compound C1=CC=C2SC(O)=NC2=C1 YEDUAINPPJYDJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000549 4-dimethylaminophenol Drugs 0.000 description 2
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 208000005189 Embolism Diseases 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 108010029144 Factor IIa Proteins 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004211 Platelet factor 4 Human genes 0.000 description 2
- 108090000778 Platelet factor 4 Proteins 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000012505 Superdex™ Substances 0.000 description 2
- 229940122388 Thrombin inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 206010047249 Venous thrombosis Diseases 0.000 description 2
- CYAYKKUWALRRPA-RGDJUOJXSA-N [(2r,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-triacetyloxy-6-bromooxan-2-yl]methyl acetate Chemical group CC(=O)OC[C@H]1O[C@H](Br)[C@H](OC(C)=O)[C@@H](OC(C)=O)[C@@H]1OC(C)=O CYAYKKUWALRRPA-RGDJUOJXSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- HAXFWIACAGNFHA-UHFFFAOYSA-N aldrithiol Chemical compound C=1C=CC=NC=1SSC1=CC=CC=N1 HAXFWIACAGNFHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001409 amidines Chemical group 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 2
- PXXJHWLDUBFPOL-UHFFFAOYSA-N benzamidine Chemical group NC(=N)C1=CC=CC=C1 PXXJHWLDUBFPOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 229940125797 compound 12 Drugs 0.000 description 2
- 229940126142 compound 16 Drugs 0.000 description 2
- 229940126208 compound 22 Drugs 0.000 description 2
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 2
- 229940125877 compound 31 Drugs 0.000 description 2
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 2
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 2
- 125000001511 cyclopentyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 2
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 2
- 239000001307 helium Substances 0.000 description 2
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 description 2
- SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N helium atom Chemical compound [He] SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- YYHPEVZFVMVUNJ-UHFFFAOYSA-N n,n-diethylethanamine;sulfur trioxide Chemical compound O=S(=O)=O.CCN(CC)CC YYHPEVZFVMVUNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 2
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 2
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OHEDMAIVEXQCOZ-UHFFFAOYSA-N piperidine;dihydrochloride Chemical compound Cl.Cl.C1CCNCC1 OHEDMAIVEXQCOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- CIHOLLKRGTVIJN-UHFFFAOYSA-N tert‐butyl hydroperoxide Chemical compound CC(C)(C)OO CIHOLLKRGTVIJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TUQOTMZNTHZOKS-UHFFFAOYSA-N tributylphosphine Chemical compound CCCCP(CCCC)CCCC TUQOTMZNTHZOKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N (1s,2s,3s,5r)-1-(carboxymethyl)-3,5-bis[(4-phenoxyphenyl)methyl-propylcarbamoyl]cyclopentane-1,2-dicarboxylic acid Chemical compound O=C([C@@H]1[C@@H]([C@](CC(O)=O)([C@H](C(=O)N(CCC)CC=2C=CC(OC=3C=CC=CC=3)=CC=2)C1)C(O)=O)C(O)=O)N(CCC)CC(C=C1)=CC=C1OC1=CC=CC=C1 SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N 0.000 description 1
- BQWBEDSJTMWJAE-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-[(2-iodoacetyl)amino]benzoate Chemical compound C1=CC(NC(=O)CI)=CC=C1C(=O)ON1C(=O)CCC1=O BQWBEDSJTMWJAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DQJCDTNMLBYVAY-ZXXIYAEKSA-N (2S,5R,10R,13R)-16-{[(2R,3S,4R,5R)-3-{[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy}-5-(ethylamino)-6-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy}-5-(4-aminobutyl)-10-carbamoyl-2,13-dimethyl-4,7,12,15-tetraoxo-3,6,11,14-tetraazaheptadecan-1-oic acid Chemical class NCCCC[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@@H](C)NC(=O)C(C)O[C@@H]1[C@@H](NCC)C(O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 DQJCDTNMLBYVAY-ZXXIYAEKSA-N 0.000 description 1
- QAINHNNAIDVCEZ-NRFANRHFSA-N (2r)-2-azaniumyl-3-[(4-methoxyphenyl)-diphenylmethyl]sulfanylpropanoate Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C(SC[C@H]([NH3+])C([O-])=O)(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 QAINHNNAIDVCEZ-NRFANRHFSA-N 0.000 description 1
- YDMBNDUHUNWWRP-VJBWXMMDSA-N (2s)-1-[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]-n-[(2s)-5-(diaminomethylideneamino)-1-(4-nitroanilino)-1-oxopentan-2-yl]piperidine-2-carboxamide Chemical compound C([C@@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCCC1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NC=1C=CC(=CC=1)[N+]([O-])=O)C1=CC=CC=C1 YDMBNDUHUNWWRP-VJBWXMMDSA-N 0.000 description 1
- MVTHUEOHHHQQKY-QMMMGPOBSA-N (2s)-2-(diaminomethylideneamino)-3-phenylpropanoic acid Chemical compound NC(N)=N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 MVTHUEOHHHQQKY-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KQJTXYQXRHCWKW-PJSBSAQXSA-N (4s)-4-[[(2s,3s)-2-benzamido-3-methylpentanoyl]amino]-5-[[2-[[(2s)-5-(diaminomethylideneamino)-1-(4-nitroanilino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-5-oxopentanoic acid;hydrochloride Chemical compound Cl.N([C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NC=1C=CC(=CC=1)[N+]([O-])=O)C(=O)C1=CC=CC=C1 KQJTXYQXRHCWKW-PJSBSAQXSA-N 0.000 description 1
- WZZBNLYBHUDSHF-DHLKQENFSA-N 1-[(3s,4s)-4-[8-(2-chloro-4-pyrimidin-2-yloxyphenyl)-7-fluoro-2-methylimidazo[4,5-c]quinolin-1-yl]-3-fluoropiperidin-1-yl]-2-hydroxyethanone Chemical compound CC1=NC2=CN=C3C=C(F)C(C=4C(=CC(OC=5N=CC=CN=5)=CC=4)Cl)=CC3=C2N1[C@H]1CCN(C(=O)CO)C[C@@H]1F WZZBNLYBHUDSHF-DHLKQENFSA-N 0.000 description 1
- CULQNACJHGHAER-UHFFFAOYSA-N 1-[4-[(2-iodoacetyl)amino]benzoyl]oxy-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonic acid Chemical compound O=C1C(S(=O)(=O)O)CC(=O)N1OC(=O)C1=CC=C(NC(=O)CI)C=C1 CULQNACJHGHAER-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UPQQXPKAYZYUKO-UHFFFAOYSA-N 2,2,2-trichloroacetamide Chemical compound OC(=N)C(Cl)(Cl)Cl UPQQXPKAYZYUKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ICUIZKMGHRMMDZ-UHFFFAOYSA-N 2-[2-[2-[2-[2-(2-aminoethoxy)ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethanol Chemical compound NCCOCCOCCOCCOCCOCCO ICUIZKMGHRMMDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YSUIQYOGTINQIN-UZFYAQMZSA-N 2-amino-9-[(1S,6R,8R,9S,10R,15R,17R,18R)-8-(6-aminopurin-9-yl)-9,18-difluoro-3,12-dihydroxy-3,12-bis(sulfanylidene)-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3lambda5,12lambda5-diphosphatricyclo[13.2.1.06,10]octadecan-17-yl]-1H-purin-6-one Chemical compound NC1=NC2=C(N=CN2[C@@H]2O[C@@H]3COP(S)(=O)O[C@@H]4[C@@H](COP(S)(=O)O[C@@H]2[C@@H]3F)O[C@H]([C@H]4F)N2C=NC3=C2N=CN=C3N)C(=O)N1 YSUIQYOGTINQIN-UZFYAQMZSA-N 0.000 description 1
- NPRYCHLHHVWLQZ-TURQNECASA-N 2-amino-9-[(2R,3S,4S,5R)-4-fluoro-3-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-7-prop-2-ynylpurin-8-one Chemical compound NC1=NC=C2N(C(N(C2=N1)[C@@H]1O[C@@H]([C@H]([C@H]1O)F)CO)=O)CC#C NPRYCHLHHVWLQZ-TURQNECASA-N 0.000 description 1
- QBWKPGNFQQJGFY-QLFBSQMISA-N 3-[(1r)-1-[(2r,6s)-2,6-dimethylmorpholin-4-yl]ethyl]-n-[6-methyl-3-(1h-pyrazol-4-yl)imidazo[1,2-a]pyrazin-8-yl]-1,2-thiazol-5-amine Chemical compound N1([C@H](C)C2=NSC(NC=3C4=NC=C(N4C=C(C)N=3)C3=CNN=C3)=C2)C[C@H](C)O[C@H](C)C1 QBWKPGNFQQJGFY-QLFBSQMISA-N 0.000 description 1
- HVCNXQOWACZAFN-UHFFFAOYSA-N 4-ethylmorpholine Chemical compound CCN1CCOCC1 HVCNXQOWACZAFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004411 Antithrombin III Human genes 0.000 description 1
- 108090000935 Antithrombin III Proteins 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical class [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 1
- 206010051055 Deep vein thrombosis Diseases 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 229940123900 Direct thrombin inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 1
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 1
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 1
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Natural products NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000610640 Homo sapiens U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp3 Proteins 0.000 description 1
- 206010022998 Irritability Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- DBTDEFJAFBUGPP-UHFFFAOYSA-N Methanethial Chemical compound S=C DBTDEFJAFBUGPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012901 Milli-Q water Substances 0.000 description 1
- 101100170604 Mus musculus Dmap1 gene Proteins 0.000 description 1
- OPFJDXRVMFKJJO-ZHHKINOHSA-N N-{[3-(2-benzamido-4-methyl-1,3-thiazol-5-yl)-pyrazol-5-yl]carbonyl}-G-dR-G-dD-dD-dD-NH2 Chemical compound S1C(C=2NN=C(C=2)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(N)=O)=C(C)N=C1NC(=O)C1=CC=CC=C1 OPFJDXRVMFKJJO-ZHHKINOHSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 101800004937 Protein C Proteins 0.000 description 1
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 description 1
- 102100027378 Prothrombin Human genes 0.000 description 1
- 208000010378 Pulmonary Embolism Diseases 0.000 description 1
- 206010038563 Reocclusion Diseases 0.000 description 1
- 108010039286 S 2238 Proteins 0.000 description 1
- 101001110823 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) 60S ribosomal protein L6-A Proteins 0.000 description 1
- 101000712176 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) 60S ribosomal protein L6-B Proteins 0.000 description 1
- 101800001700 Saposin-D Proteins 0.000 description 1
- 102400000827 Saposin-D Human genes 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Chemical class 0.000 description 1
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DRUIESSIVFYOMK-UHFFFAOYSA-N Trichloroacetonitrile Chemical compound ClC(Cl)(Cl)C#N DRUIESSIVFYOMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 102100040374 U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp3 Human genes 0.000 description 1
- LNUFLCYMSVYYNW-ZPJMAFJPSA-N [(2r,3r,4s,5r,6r)-2-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[[(3s,5s,8r,9s,10s,13r,14s,17r)-10,13-dimethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl]oxy]-4,5-disulfo Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1C[C@@H]2CC[C@H]3[C@@H]4CC[C@@H]([C@]4(CC[C@@H]3[C@@]2(C)CC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H]1O[C@H](COS(O)(=O)=O)[C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]1OS(O)(=O)=O LNUFLCYMSVYYNW-ZPJMAFJPSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 1
- YFHNDHXQDJQEEE-UHFFFAOYSA-N acetic acid;hydrazine Chemical compound NN.CC(O)=O YFHNDHXQDJQEEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 125000004453 alkoxycarbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000002399 angioplasty Methods 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 229940069428 antacid Drugs 0.000 description 1
- 239000003159 antacid agent Substances 0.000 description 1
- 230000001458 anti-acid effect Effects 0.000 description 1
- 229960005348 antithrombin iii Drugs 0.000 description 1
- 239000012300 argon atmosphere Substances 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- XRWSZZJLZRKHHD-WVWIJVSJSA-N asunaprevir Chemical compound O=C([C@@H]1C[C@H](CN1C(=O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C(C)(C)C)OC1=NC=C(C2=CC=C(Cl)C=C21)OC)N[C@]1(C(=O)NS(=O)(=O)C2CC2)C[C@H]1C=C XRWSZZJLZRKHHD-WVWIJVSJSA-N 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- CSKNSYBAZOQPLR-UHFFFAOYSA-N benzenesulfonyl chloride Chemical compound ClS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 CSKNSYBAZOQPLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010031969 benzoyl-Ile-Glu-Gly-Arg-p-nitroanilide Proteins 0.000 description 1
- MJSHDCCLFGOEIK-UHFFFAOYSA-N benzyl (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) carbonate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)OCC1=CC=CC=C1 MJSHDCCLFGOEIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- KGNDCEVUMONOKF-UGPLYTSKSA-N benzyl n-[(2r)-1-[(2s,4r)-2-[[(2s)-6-amino-1-(1,3-benzoxazol-2-yl)-1,1-dihydroxyhexan-2-yl]carbamoyl]-4-[(4-methylphenyl)methoxy]pyrrolidin-1-yl]-1-oxo-4-phenylbutan-2-yl]carbamate Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1CO[C@H]1CN(C(=O)[C@@H](CCC=2C=CC=CC=2)NC(=O)OCC=2C=CC=CC=2)[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)(O)C=2OC3=CC=CC=C3N=2)C1 KGNDCEVUMONOKF-UGPLYTSKSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- KDPAWGWELVVRCH-UHFFFAOYSA-M bromoacetate Chemical compound [O-]C(=O)CBr KDPAWGWELVVRCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- HQABUPZFAYXKJW-UHFFFAOYSA-N butan-1-amine Chemical compound CCCCN HQABUPZFAYXKJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- FJDQFPXHSGXQBY-UHFFFAOYSA-L caesium carbonate Chemical compound [Cs+].[Cs+].[O-]C([O-])=O FJDQFPXHSGXQBY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000024 caesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Chemical class 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Chemical class 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 1
- 229940125773 compound 10 Drugs 0.000 description 1
- 229940126543 compound 14 Drugs 0.000 description 1
- 229940126086 compound 21 Drugs 0.000 description 1
- 229940125833 compound 23 Drugs 0.000 description 1
- 229940125961 compound 24 Drugs 0.000 description 1
- 229940125846 compound 25 Drugs 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000010779 crude oil Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 125000001995 cyclobutyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000582 cycloheptyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000640 cyclooctyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001559 cyclopropyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C1([H])* 0.000 description 1
- 150000001944 cysteine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000006196 deacetylation Effects 0.000 description 1
- 238000003381 deacetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 description 1
- MQUBEBJFHBANKV-UHFFFAOYSA-N di(propan-2-yl)silicon Chemical compound CC(C)[Si]C(C)C MQUBEBJFHBANKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-O dicyclohexylazanium Chemical compound C1CCCCC1[NH2+]C1CCCCC1 XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000011087 fumaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 1
- IIRDTKBZINWQAW-UHFFFAOYSA-N hexaethylene glycol Chemical compound OCCOCCOCCOCCOCCOCCO IIRDTKBZINWQAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004051 hexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N jdtic Chemical compound C1([C@]2(C)CCN(C[C@@H]2C)C[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]2NCC3=CC(O)=CC=C3C2)=CC=CC(O)=C1 ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000011551 log transformation method Methods 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical group 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylpyridin-2-amine Chemical compound CN(C)C1=CC=CC=N1 PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OPECTNGATDYLSS-UHFFFAOYSA-N naphthalene-2-sulfonyl chloride Chemical compound C1=CC=CC2=CC(S(=O)(=O)Cl)=CC=C21 OPECTNGATDYLSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006225 natural substrate Substances 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 1
- 125000002347 octyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 1
- 101800002712 p27 Proteins 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000000612 phthaloyl group Chemical group C(C=1C(C(=O)*)=CC=CC1)(=O)* 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229940057847 polyethylene glycol 600 Drugs 0.000 description 1
- 229940093429 polyethylene glycol 6000 Drugs 0.000 description 1
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 1
- LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N potassium tert-butoxide Chemical compound [K+].CC(C)(C)[O-] LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229960000856 protein c Drugs 0.000 description 1
- 229940039716 prothrombin Drugs 0.000 description 1
- 230000003331 prothrombotic effect Effects 0.000 description 1
- 125000004076 pyridyl group Chemical group 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 230000006340 racemization Effects 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 208000037803 restenosis Diseases 0.000 description 1
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000011894 semi-preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Chemical class 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 235000011149 sulphuric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000012622 synthetic inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- HWCKGOZZJDHMNC-UHFFFAOYSA-M tetraethylammonium bromide Chemical compound [Br-].CC[N+](CC)(CC)CC HWCKGOZZJDHMNC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- UWHCKJMYHZGTIT-UHFFFAOYSA-N tetraethylene glycol Chemical compound OCCOCCOCCOCCO UWHCKJMYHZGTIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- 229960003766 thrombin (human) Drugs 0.000 description 1
- 230000002537 thrombolytic effect Effects 0.000 description 1
- 201000005060 thrombophlebitis Diseases 0.000 description 1
- 230000001732 thrombotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- AVBGNFCMKJOFIN-UHFFFAOYSA-N triethylammonium acetate Chemical compound CC(O)=O.CCN(CC)CC AVBGNFCMKJOFIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FTVLMFQEYACZNP-UHFFFAOYSA-N trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate Chemical compound C[Si](C)(C)OS(=O)(=O)C(F)(F)F FTVLMFQEYACZNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000281 trometamol Drugs 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K9/00—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H3/00—Compounds containing only hydrogen atoms and saccharide radicals having only carbon, hydrogen, and oxygen atoms
- C07H3/06—Oligosaccharides, i.e. having three to five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/14—Peptides containing saccharide radicals; Derivatives thereof, e.g. bleomycin, phleomycin, muramylpeptides or vancomycin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K9/00—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K9/001—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof the peptide sequence having less than 12 amino acids and not being part of a ring structure
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Immunology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
Abstract
Wynalazek dotyczy zwi azków przeciwzakrzepowych o wzorze (I), w którym R 1 oznacza grup e fenylow a, naftylow a, 1,2,3,4-tetrahydronaftylow a, (izo)chinolinylow a, tetrahydro(izo)- chinolinylow a, 3,4-dihydro-1H-izochinolinylow a, chromanylow a lub kamforow a, które ewentualnie mog a by c podstawione jednym lub wi ecej podstawnikami wybranymi z grupy obejmu- j acej (1-8C)alkil lub (1-8C)alkoksyl; R 2 i R 3 niezale znie ozna- czaj a H lub (1-8C)alkil; R 4 oznacza (1-8C)alkil lub (3- 8C)cykloalkil; albo R 3 i R 4 razem z atomem azotu, z którym s a zwi azane, oznaczaj a niearomatyczny (4-8)-cz lonowy pier scie n ewentualnie zawieraj acy inny heteroatom i ewentualnie pod- stawiony przez (1-8C)alkil lub SO 2 -(1-8C)alkil; Q oznacza lacznik o wzorze (III): -[(CH 2 ) 2 O] m -[(CH 2 ) n -NR 3 -C(O)] p -W-(CH 2 ) s - ,w którym W oznacza -[1,4-fenyleno-NR 3 -(CO)] q -(CH 2 ) r -S- lub - (CH 2 ) t -S-(CH 2 ) u -[O(CH 2 ) 2 ] v -O-(CH 2 ) w -C (O)-NR 3 -; a R 3 niezale z- nie oznacza H lub (1-8C)alkil; m = 1-12; n = 1-8; p = 0-4; q = 0 lub 1; r = 1-8; s = 1-8; t = 1-8; u = 1-8; v = 1-12; w = 1-8; laczna liczba atomów wynosi 10-70; a reszta -[(CH 2 ) 2 O] m -stanowi koniec, w którym Q jest zwi azany z Z, a Z oznacza reszt e oligosacharydu o ladunku ujemnym obejmuj ac a dwie do sze- sciu jednostek monosacharydowych, której ladunek jest zrów- nowa zony przez dodatnio na ladowane przeciwjony; lub ich farmaceutycznie dopuszczalnych soli albo proleków, to znaczy zwi azki o wzorze (I), w których grupa aminowa w reszcie amidynowej jest chroniona, przyk ladowo przez grup e hydroksy- low a lub (1-6)-alkoksykarbonylow a. Wynalazek obejmuje te z kompozycj e farmaceutyczn a zawieraj ac a zwi azek wed lug wynalazku i zastosowanie takiego zwi azku ……….. PL PL PL PL PL
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku są związki przeciwzakrzepowe, kompozycja farmaceutyczna i zastosowanie tych związków.
Proteazy serynowe są enzymami, które odgrywają ważną rolę w kaskadzie krzepnięcia krwi. Członkami tej grupy proteaz są, na przykład, trombina, trypsyna, czynniki VIIa, IXa, Xa, XIa, XIIa i białko C.
W kaskadzie krzepnię cia koń cowym enzymem, proteazą serynową , jest trombina. Gł ówną funkcją trombiny jest rozszczepianie fibrynogenu, z wytworzeniem monomerów fibryny, które są sieciowane i tworzą nierozpuszczalny żel. Ponadto, trombina reguluje swe własne wytwarzanie przez aktywowanie czynników V i VIII wcześniejszych w kaskadzie. Ma ona również ważne działanie na poziomie komórkowym, gdzie działa na konkretne receptory powodując agregację płytek, aktywację komórek śródbłonka i proliferację fibroblastu. A zatem, trombina odgrywa główną rolę regulującą w hemostazie i tworzeniu się skrzepliny. W dziedzinie tej prowadzi się intensywne badania z uwagi na szeroki zakres terapeutycznych zastosowań inhibitorów trombiny.
Inna ważna proteaza serynowa, czynnik Xa, katalizuje konwersję protrombiny do trombiny.
W pracach nad syntetycznymi inhibitorami proteaz serynowych, a bardziej konkretnie trombiny, jedną z kluczowych struktur stanowi reszta benzamidynowa. Naśladuje ona protonowany łańcuch boczny zasadowych aminokwasów Arg i Lys w jej naturalnych substratach. Prowadzono intensywne i wielokrotne badania nad związkami z taką resztą. Bardzo silnym przedstawicielem tego rodzaju inhibitorów trombiny jest pochodna aminokwasowa, Na-(2-naftylosulfonylo)-glicylo-4-amidynofenyloalaninopiperydyna (NAPAP) (J. Stiirzebecher i in., Thromb. Res. 29, 635-642, 1983). Jednakże profil NAPAP nie jest atrakcyjny dla zastosowań terapeutycznych: na przykład związek ten ma małą swoistość wobec trombiny i jest słabo rozpuszczalny. Wytworzono następnie pochodne NAPAP, takie jak pochodne podstawione N-alkilem, ujawnione w EP 0,236,163 lub pochodne glikopeptydowe ujawnione w EP 0,558,961, Proc. Am. Pept. Symp. 13 (60LXAW); 94; str. 643-5 (W. Stiiber i in., Pept.: Chem., Struct. Biol.,), Proc. Int. Symp. Controlled Release Bioact. Mater. (PCRMEY, 10220178); 94; vol. 21; str. 712-12 (E. Walter i in.) oraz w EP 0,513,543. Jednakże, aczkolwiek pochodne te mogą prowadzić do ulepszeń profilu farmakologicznego w porównaniu z NAPAP, wszystkie takie pochodzące od NAPAP związki nadal są aktywne jedynie jako bezpośrednie inhibitory trombiny i mają ograniczony półokres trwania w osoczu i szybki klirens (a zatem mają aktywność antytrombinową tylko w ciągu krótkiego czasu).
Stwierdzono obecnie, że związki według wynalazku o wzorze (I)
w którym R1 oznacza grupę fenylową, naftylową, 1,2,3,4-tetrahydronaftylową, (izo)chinolinylową, tetrahydro(izo)chinolinylową, 3,4-dihydro-1H-izochinolinylową, chromanylową lub kamforową, które ewentualnie mogą być podstawione jednym lub więcej podstawnikami wybranymi z grupy obejmującej (1-8C)alkil lub (1-8C)alkoksyl;
R2 i R3 niezależnie oznaczają H lub (1-8C)alkil;
R4 oznacza (1-8C)alkil lub (3-8C)cykloalkil;
albo R3 i R4 razem z atomem azotu, z którym są związane, oznaczają niearomatyczny (4-8)-członowy pierścień ewentualnie zawierający inny heteroatom i ewentualnie podstawiony przez (1-8C)alkil lub SO2-(1-8C)alkil;
PL 199 433 B1
Q oznacza łącznik o wzorze (III)
-[(CH2)2O]m-[(CH2)n-NR3-C(O)]p-W-(CH2)s- (III), w którym
W oznacza -[1,4-fenyleno-NR3-(CO)]q-(CH2)r-Slub
-(CH2)t-S-(CH2)u-[O(CH2)2]v-O-(CH2)w-C(O)-NR3-; a R3 niezależ nie oznacza H lub (1-8C)alkil;
m = 1-12; n = 1-8; p = 0-4; q = 0 lub 1; r = 1-8; s = 1-8; t = 1-8; u = 1-8; v = 1-12; w = 1-8; łączna liczba atomów wynosi 10-70; a reszta -[(CH2)2O]m- stanowi koniec, którym Q jest związany z Z, a
Z oznacza resztę oligosacharydu o ładunku ujemnym obejmującą dwie do sześciu jednostek monosacharydowych, której ładunek jest zrównoważony przez dodatnio naładowane przeciwjony;
lub ich farmaceutycznie dopuszczalne sole albo proleki, to znaczy związki o wzorze (I), w których grupa aminowa w reszcie amidynowej jest chroniona, przykładowo przez grupę hydroksylową lub (1-6)-alkoksykarbonylową, są silnymi i wysoce wszechstronnymi środkami przeciwzakrzepowymi. Związki według wynalazku mają aktywność przeciwtrombinową, ale również ich strukturę można selektywnie modyfikować, tak aby miały możliwy do wyregulowania mieszany profil i wykazywały aktywność bez pośrednictwa trombiny, bezpośrednią aktywność przeciwko trombinie (czynnikowi IIa) oraz aktywność przeciw-Xa za pośrednictwem antytrombiny III (AT-III). Tak więc, związki według wynalazku są podwójnymi inhibitorami. Związki według wynalazku mają długi półokres trwania w osoczu, czego wynikiem jest ich przedłużona aktywność antytrombinowa w porównaniu z NAPAP lub jej opisanymi powyżej pochodnymi. Ponadto związki według wynalazku mogą pobudzić działanie zobojętniające czynnika płytkowego 4 (PF4). Korzystną cechą związków według wynalazku jest również ich niska toksyczność.
W EP 0,649,854 ujawniono inny rodzaj podwójnych inhibitorów. W przeciwień stwie do zwią zków według wynalazku, ujawnione skoniugowane związki sacharydowe, oprócz aktywności anty-Xa za pośrednictwem AT-III, mają pośrednie działanie antytrombinowe związane z AT-III.
Związki według niniejszego wynalazku są użyteczne do leczenia i zapobiegania chorobom, w których bierze udział trombina i chorobom zwią zanym z trombiną . Choroby te obejmują wiele stanów zakrzepowych i prozakrzepowych, w których aktywuje się kaskada krzepnięcia, i do których należą, ale nie wyłącznie zakrzepica żył głębokich, zator płucny, zakrzepowe zapalenie żył, zamknięcie tętnic wskutek zakrzepicy lub zatoru, reokluzja tętnic podczas lub po angioplastyce lub na skutek trombolizy, restenoza wskutek uszkodzenia tętnic lub inwazyjnych zabiegów kardiologicznych, pooperacyjna zakrzepica lub zator żylny, ostra i przewlekła miażdżyca tętnic, udar, zawał serca, nowotwór i przerzuty oraz choroby neurodegeneracyjne. Związki wedł ug wynalazku moż na również stosować jako antykoagulanty w pozaustrojowych obiegach krwi, jakie konieczne są w dializie i chirurgii. Związki według wynalazku można również stosować jako antykoagulanty in vitro.
Mieszany profil związków według wynalazku można regulować przez zmianę charakteru reszty oligosacharydowej Z i długości łącznika Q. W ten sposób uzyskuje się szeroki zakres profili.
W związkach według wynalazku uż yteczna jest każda ujemnie naładowana reszta oligosacharydową zawierająca 2 do 6 jednostek sacharydu. Odpowiednimi związkami według wynalazku są związki, w których Z oznacza siarczanowaną lub fosforylowaną resztę oligosacharydową. Korzystnie reszta oligosacharydową Z pochodzi od oligosacharydu, który jako taki wykazuje aktywność anty-Xa za pośrednictwem AT-III, takiego jak sacharydy ujawnione w EP 0,454,220 i EP 0,529,715. Szczególnie korzystnymi resztami oligosacharydowymi są reszty pentasacharydu. Najkorzystniej Z jest przedstawiony wzorem (II)
5w którym R5 niezależnie oznacza OSO3- lub (1-8C)alkoksyl.
PL 199 433 B1
Innymi korzystnymi związkami według wynalazku są związki o wzorze I, w którym R1 oznacza fenyl, 4-metoksy-2,3,6-trimetylofenyl lub naftyl, NR3R4 oznacza grupę piperydynylową, a R2 oznacza H.
Dla aktywności przeciwzakrzepowej związków według wynalazku struktura chemiczna łącznika ma mniejsze znaczenie lub jest bez znaczenia, jednakże nie może być ona całkowicie sztywna. Wysoce elastyczne łączniki są bardziej odpowiednie niż inne.
Ponadto, ze względu na syntezę, niektóre łączniki są bardziej odpowiednie niż inne.
Korzystne są następujące łączniki:
-[(CH2)2O]5-(CH2)2-NH-C(O)-CH2-S-CH2-;
-[(CH2)2O]5-(CH2)2-NH-C(O)-CH2-S-(CH2)2-[O(CH2)2]3-O-CH2-C(O)-NH-(CH2)4-; oraz
-[(CH2)2O]3-(CH2)2-NH-C(O)-1,4-fenyleno-NH-C(O)-CH2-S-CH2-.
W opisie związku o wzorze (I) stosuje się następujące określenia.
Określenie „(1-8C)alkil” oznacza rozgałęzioną lub nierozgałęzioną grupę alkilową zawierającą 1-8 atomów węgla, na przykład metyl, etyl, propyl, izopropyl, butyl, sec-butyl, tert-butyl, heksyl i oktyl. Korzystnymi grupami alkilowymi są metyl i etyl.
Określenie „(1-8C)alkoksyl” oznacza grupę alkoksylową zawierającą 1-8 atomów węgla, w której reszta alkilowa ma uprzednio podane znaczenie. Korzystną grupą alkilową jest metoksyl.
Określenie „(3-8C)cykloalkil” oznacza grupę cykloalkilową zawierającą 3-8 atomów węgla, taką jak cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cykloheksyl, cykloheptyl lub cyklooktyl. Korzystnymi grupami cykloalkilowymi są cyklopentyl i cykloheksyl.
Długość łącznika oznacza liczbę atomów w łączniku, liczoną od najkrótszego łańcucha pomiędzy Z i peptydową częścią cząsteczki, nie licząc atomu tlenu w oligosacharydzie Z, który jest związany z łącznikiem.
Określenie „prolek” oznacza związek według wynalazku, w którym grupa aminowa w reszcie amidynowej jest chroniona, na przykład grupą hydroksylową lub (1-6C)alkoksykarbonylową.
Związki według wynalazku wytwarza się przez derywatyzowanie NAPAP (lub analogu NAPAP) w pozycji glicyny cysteiną lub lizyną , sposobami ogólnie znanymi w technice, a nastę pnie zwią zek (a) sprzęga się z resztą oligosacharyd-łącznik lub (b) sprzęga się z łącznikiem, który następnie derywatyzuje się grupą tiolową, a potem sprzęga z resztą oligosacharydu. Do tego celu można stosować dowolny odpowiedni oligosacharyd, na przykład oligosacharydy znane z literatury (np. z EP 0,454,220 i EP 0,529,715, ale nie wyłącznie) lub dostę pne na rynku. Oligosacharydy można fosforylować w odpowiednim etapie sposobu, np. jak opisali R. Buijsman i in., (Abstracts of papers, 9th European Carbohydrate Symposium Utrecht 1997, Abstract A150). Łącznik można sprzęgać z oligosacharydem sposobami opisanymi na przykład w EP 0,649,854.
Sprzęganie peptydów, stanowiące jeden z etapów sposobu wytwarzania związków według wynalazku, można prowadzić powszechnie znanymi metodami sprzęgania - lub kondensacji - fragmentów peptydowych, takimi jak metoda azydkowa, metoda z użyciem mieszanego bezwodnika, metoda z aktywowanym estrem, lub, korzystnie, metodą, w której stosuje się karbodiimid, a szczególnie metodą addycji związku katalitycznego i zapobiegającego racemizacji, takiego jak N-hydroksysukcynimid lub N-hydroksybenzotriazol. Przegląd tych metod podano w The Peptides Analysis, Synthesis, Biology, Vol. 3, E, Gross i J. Meienhofer, wyd. (Academic Press, Nowy Jork, 1981).
Obecne w związku aminowe grupy funkcyjne można chronić w czasie syntezy grupą ochronną dla N, która jest powszechnie stosowana w chemii peptydów jako grupa blokująca grupę α-aminową, taką jak grupa tert-butyloksykarbonylowa (Boc), grupa benzyloksykarbonylowa (Z), grupa 9-fluorenylometyloksykarbonylowa (Fmoc) lub grupa ftaloilowa (Phth). Grupy ochronne można usunąć różnymi sposobami, w zależności od charakteru stosowanych grup. Usuwanie grup ochronnych przebiega zazwyczaj w warunkach kwasowych w obecności zmiataczy. Przegląd grup ochronnych dla grupy aminowej oraz sposobów ich usuwania podano w uprzednio wymienionej publikacji The Peptides Analysis, Synthesis, Biology, Vol. 3.
Związki według wynalazku mogą występować jako wolna zasada i wówczas można je wyodrębnić z mieszaniny reakcyjnej w postaci farmaceutycznie dopuszczalnej soli. Farmaceutycznie dopuszczalne sole można również otrzymać przez działanie na wolną zasadę o wzorze (I) organicznym lub nieorganicznym kwasem, takim jak HCl, HBr, HJ, H2SO4, H3PO4, kwas octowy, kwas propionowy, kwas glikolowy, kwas maleinowy, kwas malonowy, kwas metanosulfonowy, kwas fumarowy, kwas bursztynowy, kwas winowy, kwas cytrynowy, kwas askorbinowy, itp.
Związki według wynalazku zawierają chiralne atomy węgla, a zatem można je otrzymać w postaci czystego enancjomeru lub jako mieszaninę enancjomerów, albo jako mieszaninę zawierającą
PL 199 433 B1 diastereomery. Sposoby otrzymywania czystych enancjomerów są dobrze znane w technice i obejmują, na przykład, krystalizację soli uzyskanych z optycznie czynnych kwasów i mieszaniny racemicznej, lub chromatografię na chiralnych kolumnach. Dla diastereomerów można stosować kolumny z fazą prostą lub odwróconą.
Związki według wynalazku można podawać dojelitowo lub pozajelitowo. Odpowiednia dawka i schemat podawania zwią zków i zawierają cych je kompozycji zależ ne bę d ą od potrzeb konkretnego pacjenta, któremu ma być podawany lek, zaawansowania lub wymagań związanych z chorobą i oceny lekarza prowadzącego. Podawanie pozajelitowe wymaga zwykle niższych dawek niż inne sposoby podawania, które są bardziej zależne od absorpcji. Jednakże, dziennie dawki dla ludzi korzystnie wynoszą 0,001-100 mg na kg ciężaru ciała, a bardziej korzystnie 0,01-10 mg na kg ciężaru ciała.
Wynalazek obejmuje też kompozycję farmaceutyczną, która zawiera związek przeciwzakrzepowy według wynalazku oraz farmaceutycznie dopuszczalne substancje pomocnicze, oraz zastosowanie związku według wynalazku do wytwarzania leku do leczenia lub zapobiegania zakrzepicy lub innych chorobom związanym z trombiną.
Lek wytworzony ze związków według wynalazku można również stosować jako substancję pomocniczą w ostrej terapii przeciwzakrzepowej. W takim przypadku, lek podaje się razem z innym związkiem użytecznym w leczeniu takich stanów chorobowych.
Po zmieszaniu z farmaceutycznie dopuszczalnymi substancjami dodatkowymi, np. jak opisane w standardowym podręczniku Gennaro i in., Remington's Pharmaceutical Sciences (wyd. 18, Mack Publishing Company, 1990, patrz zwłaszcza Część 8: Pharmaceutical Preparations and Their Manufacture), związki można sprasować do stałych postaci użytkowych, takich jak pigułki, tabletki, lub można z nich wytworzyć kapsułki lub czopki. Stosując farmaceutycznie odpowiednie ciecze, związki można również podawać w postaci roztworu, zawiesiny, emulsji, np. jako preparaty do wstrzyknięć, lub w postaci sprayu, np. do stosowania do nosa.
Przy wytwarzaniu postaci użytkowych, np. tabletek, bierze się pod uwagę stosowanie konwencjonalnych dodatków, takich jak wypełniacze, barwniki, polimerowe środki wiążące. Zasadniczo można stosować każdą farmaceutycznie dopuszczalną substancję pomocniczą, która nie zakłóca działania związku czynnego.
Odpowiednie nośniki, z którymi można podawać kompozycje według wynalazku, obejmują laktozę, skrobię, pochodne celulozy itp., oraz ich mieszaniny, i stosuje się je w odpowiednich ilościach.
Wynalazek zostanie dalej zilustrowany następującymi przykładami.
PRZYKŁADY
Stosowano następujące skróty:
DMAP = N,N-dimetyloaminopirydyna
TEA = trietyloamina
Z = benzyloksykarbonyl
Ac = acetyl
MMTr = monometoksytrityl
Bn = benzyl
DCHA = dicykloheksyloamoniowy
EDCI = chlorowodorek 1-(3-dimetyloaminopropylo)-3-etylokarbodiimidu
HOBT = 1-hydroksybenzotriazol
DiPEA = diizopropyloetyloamina
Pyr = pirydynyl
TEG = glikol tetraetylenowy
HEG = glikol heksaetylenowy
APA = amidynofenyloalanina
Cys = cysteina
Numery związków odnoszą się do związków zamieszczonych na schematach.
Trichloroacetoimidan 4-0-(4-0-(2,3,4,6-tetra-0-acetylo-a-D-glukopiranozylo)-2,3,6-tri-0-acetylo-a-D-glukopiranozylo)-2,3,6-tri-0-acetylo-a/e-D-glukopiranozylu (4)
Do roztworu maltotriozy (1) (2,0 g, 4,0 mmola) w pirydynie (100 ml) podczas mieszania dodano bezwodnika octowego (6,2 ml, 65 mmola) i katalityczną ilość DMAP (0,79 g, 6,5 mmola). Po 5 godzinach mieszaninę reakcyjną przelano do wodnego roztworu wodorowęglanu sodu (1M, 250 ml) i ekstrahowano trzy razy octanem etylu (200 ml). Połączone warstwy organiczne wysuszono nad siarczanem magnezu i zatężono pod próżnią. Produkt oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej (lekka
PL 199 433 B1 frakcja ropy naftowej/octan etylu, 1/1 do 0/1 obj./obj.) i otrzymano produkt 2 w postaci białej piany (91% wydajności, 3,5 g). Anomeryczne deacetylowanie prowadzono przez działanie przez 1 godzinę na produkt 2 (3,0 g, 3,1 mmola) 0,1M roztworem octanu hydrazyny w dimetyloformamidzie (34 ml, 3,4 mmola). Po zatężeniu pod próżnią mieszaninę reakcyjną rozcieńczono octanem etylu (50 ml), przemyto wodorowęglanem sodu (1M, 3 x 25 ml), wysuszono (siarczan magnezu) i zatężono. Po oczyszczeniu metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (lekka frakcja ropy naftowej/octan etylu, 3/2 do 1/0, obj./obj.) otrzymano związek 3 (92% wydajności, 2,7 g). Związek 3 (2,7 g, 3,1 mmola) rozpuszczono w dichlorometanie (15 ml) i dodano trichloroacetonitrylu (1,7 ml) i katalityczną ilość węglanu cezu (0,2 g, 0,62 mmola). Po 1 godzinie mieszaninę reakcyjną przesączono i przesącz zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po oczyszczeniu surowego produktu 4 metodą chromatografii kolumnowej (lekka frakcja ropy naftowej/octan etylu/TEA, 50/49/1 do 0/99/, obj./obj./obj.) otrzymano czysty związek 4 w postaci białej piany (1,9 g, 71%).
W-benzyloksykarbonylo-1-aminoheksaetyleno-glikolo-4-0-(4-0-(2,3,4,6-tetra-0-acetylo-a-D-glukopiranozylo)-2,3,6-tri-0-acetylo-a-D-glukopiranozylo)-2,3,6-tri-0-acetylo-e-D-glukopiranozyd (6)
Roztwór donora 4 (0,69 g, 0,76 mmola) i akceptora 5 (0,31 g, 0,76 mmola) w dichlorometanie (1,5 ml) mieszano przez 1 godzinę pod strumieniem argonu w obecności aktywnych sit molekularnych 4 A (250 mg). Roztwór oziębiono do temperatury -20°C i do mieszaniny reakcyjnej wkroplono roztwór trifluorometanosulfonianu trimetylosililu (15 μθ w dichlorometanie (0,6 ml). Po 10 minutach analiza TLC (5% metanolu w dichlorometanie) wykazała obecność jednego produktu. Do mieszaniny reakcyjnej dodano stałego wodorowęglanu sodu (0,3 g) i całość mieszano przez 10 minut, a następnie przesączono. Przesącz rozcieńczono dichlorometanem (50 ml), następnie przemyto wodnym roztworem wodorowęglanu sodu (1M, 2 x 25 ml), wysuszono (siarczan magnezu) i zatężono pod próżnią. Pozostałość poddano chromatografii na żelu krzemionkowym (0-4% metanol w octanie etylu) i otrzymano czysty związek 6 (0,57 g, 56% wydajności).
W-benzyloksykarbonylo-1-aminoheksaetyleno-glikolo-4-0-(4-0-(a-D-glukopiranozylo)-a-D-glukopiranozylo)-e-D-glukopiranozyd (7)
Związek 6 (0,57 g, 0,43 mmola) potraktowano roztworem tert-butanolanu potasu (43 mg, 10 mg na mmol Ac) w metanolu (15 ml). Po 1 godzinie analiza TLC (octan etylu/pirydyna/kwas octowy/woda, 5/7/4/1,5, obj./obj./obj./obj.) wykazała konwersję związku 6 do 7. Mieszaninę reakcyjną zobojętniono żywicą Dowex 50 WX4-H+. Żywicę usunięto przez odsączenie i przesącz zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, uzyskując związek 7 (0,37 g, 95% wydajności), który stosowano bez dalszego oczyszczania.
W-benzyloksykarbonylo-1-aminoheksaetyleno-glikolo-4-0-(4-0-(a-D-glukopiranozylo-2,3,4,6-tetrakis-(dibenzylofosforano)-a-D-glukopiranozylo-2,3,6-tris(dibenzylofosforano)-e-D-glukopiranozydo-2,3,6-tris(dibenzylofosforan) (9)
Do mieszaniny związku 7 (86 mg, 95 μmoli) i związku 8 (450 mg, 1,4 mmola) w układzie acetonitryl/dioksan (2/1, obj./obj., 2 ml) dodano roztworu 1H-tetrazolu (54 mg, 0,77 mmola) w acetonitrylu (1 ml). Po 1 godzinie mieszania w temperaturze 20°C mieszaninę reakcyjną oziębiono w łaźni lodowej i dodano wodoronadtlenku tert-butylu (0,75 ml). Całość mieszano jeszcze przez 45 minut, po czym analiza TLC wykazała obecność jednego głównego produktu. Po oczyszczeniu metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (100/0 do 95/5, dichlorometan/metanol, obj./obj.) otrzymano związek 9 (311 mg, 92% wydajności).
1-aminoheksaetyleno-glikolo 4-0-(4-0-(a-D-glukopiranozylo-2,3,4,6-tetrakisfosforano)-a-D-glukopiranozylo-2,3,6-trifosforano)-e-D-glukopiranozydo-2,3,6-trifosforan (10)
Związek 9 (311 mg, 87 pmoli) rozpuszczono w układzie tert-butanol/woda (6/1, obj./obj., 20 ml) zawierającym kilka kropel kwasu octowego. Roztwór mieszano pod ciągłym strumieniem wodoru w obecności 10% Pd/C (100 mg). Po 3 godzinach katalizator Pd/C usunięto przez odsączenie i przesącz zatężono pod próżnią. Po działaniu żywicą jonowymienną Dowex 50 WX4-Na+ otrzymano związek 10 (179 mg, 98% wydajności).
N-2-naftalenosulfonylo-S-4-monometoksytritylo-(L)-cysteina (12)
Do mieszaniny dostępnej na rynku S-4-monometoksytritylo-(L)-cysteiny (11), dioksanu (5 ml) i 10% wodnego roztworu węglanu sodu (5 ml) podczas mieszania dodano chlorku 2-naftalenosulfonylu (0,25 g, 1,1 mmola). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 1 godzinę, po czym zakwaszono dodatkiem 5% wodnego kwasu cytrynowego (50 ml) i ekstrahowano octanem etylu (2 x 50 ml). Połączone warstwy organiczne wysuszono (siarczan magnezu) i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt poddano chromatografii na żelu krzemionkowym (metanol/dichlorometan/trietyloamina, 0/99/1, obj./obj./obj.) i otrzymano związek 12 (76% wydajności, 0,44 g).
PL 199 433 B1
N-2-naftalenosulfonylo-S-2-pirydynosulfenylo-(L)-cysteina (14)
Do związku 12 (0,44 g, 0,76 mmola) dodano roztworu kwasu trifluorooctowego i diizopropylosilanu w dichlorometanie (1/1/18, obj./obj./obj.). Całość mieszano przez 20 minut, po czym mieszaninę przelano do wody i ekstrahowano dichlorometanem (2 x 50 ml). Połączone warstwy organiczne wysuszono nad siarczanem magnezu i zatężono pod próżnią. Ślady kwasu trifluorooctowego w surowej mieszaninie usunięto przez odparowanie z toluenem. Wytworzony wolny tiol 13 rozpuszczono w izopropanolu (2,5 ml) i wkroplono do roztworu Aldrithiol™ (1,7 g, 7,6 mmola) w układzie izopropanol/2N wodny kwas octowy (1/1, obj./obj., 20 ml). Po 1 godzinie analiza TLC wykazała zakończenie reakcji i mieszaninę zatężono pod zmniejszonym ciś nieniem. Ś lady kwasu octowego w pozostał o ś ci usunię to przez odparowanie z toluenem. Surowy produkt rozpuszczono w acetonie (10 ml) i do otrzymanego roztworu dodano dicykloheksyloaminy (0,3 ml), w wyniku czego z mieszaniny reakcyjnej wytrącił się związek 14 w postaci soli DCHA. Osad wyodrębniono, rozpuszczono w octanie etylu (50 ml) i przemyto 5% wodnym kwasem cytrynowym (2 x 30 ml). Warstwę organiczną wysuszono (siarczan magnezu) i zatężono pod zmniejszonym ciś nieniem, uzyskują c czysty zwią zek 14 (55% wydajnoś ci, 0,25 g).
WfWfWa-2-naftalenosulfonylo-S-2-pirydynosulfenylo-(L)-cysteinylo)-(D,L)-4-amidynofenyloalanylo)piperydyna (16)
Do roztworu dichlorowodorku N-((D,L)-4-amidynofenyloalanylo)piperydyny (15) (0,13 g, 0,39 mmola) i pochodnej cysteiny 14 (0,16 g, 0,39 mmola) w dimetyloformamidzie (2 ml) dodano HOBT (58 mg, 0,42 mmola), EDCI (82 mg, 0,42 mmola) i N-etylomorfoliny (110 μ|, 0,78 mmola). Po mieszaniu przez 16 godzin mieszaninę rozcieńczono dichlorometanem (20 ml) i przemyto wodą (2 x 10 ml). Warstwę organiczną wysuszono (siarczan magnezu) i zatężono pod próżnią. Pozostałość oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (najpierw 10%-20% metanol w dichlorometanie w celu usunięcia zanieczyszczeń, a następnie octan etylu/pirydyna/kwas octowy/woda (16/7/1,6/4, obj./obj./obj./obj.), aby uwolnić produkt), a następnie poddano filtracji żelowej na Sephadex LH-20 (eluent: metanol/dichlorometan, 4/1, obj./obj.) i otrzymano homogeniczny związek 16 (70%, 0,19 g).
Sprzęganie na drodze kondensacji maltotriozy-dekafosforanu 18 z peptydem 16
Do roztworu maltotriozy-dekafosforanu 18 (21 mg, 9,8 μ^Ό^) w 0,1M buforze Na2HPO4 (1,0 ml, pH 7,5) dodano roztworu 2-bromooctanu N-hydroksysukcynimidylu w metanolu (1 ml). Całość mieszano przez 2 godziny, po czym mieszaninę reakcyjną naniesiono na kolumnę Sephadex G25 eluowaną 10% acetonitrylem w wodzie. Odpowiednie frakcje zebrano i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem w niskiej temperaturze (25°C), uzyskując związek 19. Analog NAPAP 16 (10 mg, 15 μmoli) rozpuszczono w mieszaninie metanolu (1 ml) i 0,1 buforu Na2HPO4 (0,75 ml, pH 7,0) odgazowanej przez przepuszczenie przez hel i sonikację. Do roztworu tego dodano tributylofosfiny (4,1 μ^ 16 μmoli) i mieszaninę reakcyjną mieszano w atmosferze argonu. Po 1 godzinie analiza HPLC (kolumna Lichrospher® RP18) wykazała całkowite odszczepienie grupy 2-pirydynosulfenylowej i do mieszaniny reakcyjnej dodano roztworu związku 19 w dimetyloformamidzie (0,25 ml) i 0,1M buforze Na2HPO4 (0,50 ml, pH 7,0). Mieszaninę mieszano przez 3 godziny, po czym surową mieszaninę oczyszczono metodą filtracji żelowej (Fractogel HW-40; eluent: 0,15M TEAB). Po zatężeniu odpowiednich frakcji, a następnie po wymianie jonowej na żywicy Dowex 50 WX-Na+ i po liofilizacji otrzymano homogeniczny koniugat I (10,1 mg, 47%). Dwa diastereoizomery rozdzielono metodą półpreparatywnej chromatografii HPLC (kolumna LiChrospher® RP-18, gradient: 17,5%-22,5% CH3CN w 0,05M wodnym roztworze TEAA) i otrzymano diastereoizomer I-a (czas retencji: 28,6 min.) i diastereoizomer I-b (czas retencji: 33,0 min.). Te dwa izomery odsolono przez filtrację żelową (Sephadex G-25 DNA-grade Superfine) i przeprowadzono w postać Na+, stosując żywicę jonowymienną Dowex 50 WX-Na+.
Diastereoizomer I-a: 1H-NMR (D2O, 600 MHz, HH-COSY):
maltotrioza: (koniec redukujący) 4,65 (bs, 1H, H1), 3,85 (m, 1H, H2), 4,35 (m, 1H, H3), 3,76 (m, 1H, H4); 5,50 (bs, 1H, H1'), 4,18 (m, 1H, H2'), 4,10 (m, 1H, H4'); (koniec nieredukujący) 5,71 (bs, 1H, H1), 4,09 (m, 1H, H2), 4,45 (m, 1H, H3), 4,15 (m, 1H, H4), 3,95-3,84 (H5, maltotrioza);
łącznik: 3,65-3,51 (m, 22H, OCH2 HEG), 3,35 (m, 2H, CH2NH2), 3,15 (s, 2H, SCH2(O)); peptyd: 8,31 (s, 1H, Harom NAS), 8,06-7,67 (m, 6H, Harom NAS), 7,70, 7,17 (2 x d, 4H, Harom APA,
J = 7,8 Hz), 4,28 (m, 1H, aCH APA), 3,91 (m, 1H, aCH, Cys), 3,30-3,04 (m, 4H, CH2N piperydyna), 2,82-2,62 (m, 3H, eCH2 Cys, eCH APA), 2,57 (m, 1H, eCH' APA), 1,45-1,25 (m, 6H, CH2 piperydyna);
ES-MS: [M-3H]3- 724,1, [M-2H]2- 1086,7.
Diastereoizomer I-b: 1H-NMR (D2O, 600 MHz, HH-COSY):
PL 199 433 B1 maltotrioza: (koniec redukujący) 3,80 (m, 1H, H2), 4,32 (1H, H3), 3,89 (m, 1H, H4); 5,49 (bs, 1H, H1'), 4,22 (m, 1H, H2'), 4,11 (m, 1H, H4'); (koniec nieredukujący), 5,70 (bs, 1H, H1), 4,22 (m, 1H, H2), 4,52 (m, 1H, H3), 4,24 (m, 1H, H4); 3,91-3,84 (H5, maltotrioza);
łącznik: 3,63-3,52 (m, 22H, OCH2 HEG), 3,35 (t, 2H, CH2NH2); 3,17 (AB, 2H, SCH2(O)); peptyd: 8,35 (s, 1H, Harom NAS), 8,07-7,65 (m, 6H, Harom NAS), 7,77, 7,22 (2 x d, 4H, Harom APA,
J = 7,8 Hz), 4,62 (t, 1H, aCH, APA, JaCH,ecH = 7,3 Hz), 4,05 (m, 1H, aCH Cys), 3,05-3,00 (m, 4H, CH2N piperydyna), 2,85-2,67 (m, 4H, pCH2 Cys, pCH2 APA), 1,88-1,24 (m, 6H, CH2 piperydyna);
ES-MS: [M-3H]3- 724,0, [M-2H]2- 1086,2.
14-S-2-pirydynosulfenylo-14-merkapto-3,6,9,12-tetraoksatetradekanian N-hydroksysukcynimidylu (22)
Łącznik 20 (0,75, 2,4 mmola) (P. Westerduin i in., Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1996, 35, 3, str. 331-333) i Aldrithiol™ (2,6 g, 12,1 mmola) rozpuszczono w dichlororaetanie (20 ml) i potraktowano n-butyloaminą (4 ml). Całość mieszano przez 2 godziny, po czym mieszaninę reakcyjną zatężono pod próżnią, ponownie rozpuszczono w dichlorometanie (50 ml) i przemyto 5% wodnym roztworem kwasu cytrynowego (2 x 50 ml). Warstwę organiczną wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość poddano chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (metanol/kwas octowy/dichlorometan, 0/1/99 do 6/1/93, obj./obj./obj.) otrzymano czysty związek 21 (0,80 g, 88% wydajności). Związek 21 (0,80 g, 2,1 mmola) rozpuszczono w dichlorometanie (10 ml) i do roztworu dodano N-hydroksysukcynimidu (0,26 g, 2,3 mmola) i EDCI (0,45 mg, 2,3 mmola). Po 1 godzinie mieszaninę reakcyjną rozcieńczono dichlorometanem (50 ml), przemyto trzy razy wodą z lodem (20 ml) wysuszono (siarczan magnezu) i zatężono, uzyskując związek 22 (0,98 mg, 98% wydajności), który stosowano bez dalszego oczyszczania.
W£-tert-butyloksykarbonylo-W°-benzenosulfonylo-(L)-lizyna (24)
Wytworzona jak opisano dla związku 12, przy użyciu związku 23 i chlorku benzenosulfonylu jako materiałów wyjściowych (0,86 g, 75% wydajności).
W£-(14-S-2-pirydynosulfenylo-14-merkapto-3,6,9,12-tetraoksatetradekanoilo)-W°-benzenosulfonylo-(L)-lizyna (26)
Związek 24 (0,86 g, 2,2 mmola) potraktowano 3N chlorowodorem w octanie etylu. Po 15 minutach mieszaninę reakcyjną zatężono pod próżnią. Ślady kwasu w pozostałości usunięto przez odparowanie z toluenem. Surowy związek 25 rozpuszczono w mieszaninie dioksan/woda (4/1, obj./obj., 2,5 ml) i do roztworu tego dodano związku 22 (0,98 g, 2,1 mmola) i DiPEA (1,1 ml, 6,6 mmola). Po 1 godzinie mieszaninę reakcyjną rozcieńczono dichlorometanem (100 ml) i przemyto 5% wodnym roztworem kwasu cytrynowego (2 x 50 ml). Warstwę organiczną wysuszono (siarczan magnezu) i zatężono pod próżnią. Resztkowy olej oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (0-10% metanol/octan etylu) i otrzymano homogeniczny związek 26 (0,95 g, 67% wydajności).
WfWfW£-(14-S-2-pirydynosulfenylo-14-merkapto-3,6,9,12-tetraoksatetradekanoilo)-W°-benzenosulfonylo-(L)-lizynylo)-(D,L)-4-amidynofenyloalanylo)piperydyna (27)
Wytworzona jak opisano dla związku 16, przy użyciu związków 26 i 15 jako materiałów wyjściowych (87 mg, 70% wydajności).
Sprzęganie na drodze kondensacji maltotriozy-dekafosforanu 18 z peptydem 27 (II)
Związek wytworzono jak opisano dla związku I, stosując związki 18 i 27 jako materiały wyjściowe. Surowy związek II oczyszczono metodą półpreparatywnej HPLC (kolumna LiChrospher® RP-18). Po odsoleniu przez filtrację żelową (Sephadex G-25 DNA-grade Superfine), transformacji do postaci Na+ przy użyciu żywicy jonowymiennej Dowex 50 WX4-Na+ i liofilizacji otrzymano czysty związek II w postaci białej puszystej substancji stałej (8,5 mg, 23% wydajności ze związku 18).
1H NMR (D2O, 600 MHz, HH-COSY):
maltotrioza: (koniec redukujący) 4,67 (m, 1H, H1), 4,07 (m, 1H, H2), 4,40 (m, 1H, H3), 4,06 (m, 1H, H4); 5,49 (bs, 1H, H1'), 4,24 (m, 1H, H2'), 4,66 (m, 1H, H3'), 4,10 (m, 1H, H4'); (koniec nieredukujący) 5,73 (bs, 1H, H1), 4,17 (m, 1H, H2), 4,38 (m, 1H, H3), 4,22 (m, 1H, H4); 3,95-3,82 (H5, maltotrioza);
łącznik: 4,03, 4,02 (2 x s, 2H, OCH2C(O)), 3,73-3,59 (m, 36H, OCH2, TEG, HEG), 3,38 (t, 2H, CH2NH2), 3,27, 3,26 (2 x s, 2H, SCH2(O)), 2,75 (2 x 5, 2H, CH2S);
peptyd: 7,81-7,52 (m, 5H, Harom BS), 7,79, 7,76, 7,42, 7,41 (4 x d, 4H, Harom APA), 4,87, 4,66 (2 x 5, 1H, aCH APA, JaCH,eCH = 7,4 Hz), 4,07 (m, 1H, aCH, Lys), 3,37-3,73 (m, 8H, ε^2 Lys, pCH2 APA, CH2N piperydyna), 1,96-1,46 (m, 12H, CH2 piperydyna, β/γ,δ^2 Lys);
ES-MS: [M+3H]3+ 801,2, [M+2H]2+ 1200,8.
PL 199 433 B1
Częściowo chroniony pentasacharyd 30
Znany pentasacharyd 29 (53 mg, 49 μmoli) (R.C. Buijsman i in., Chem. Eur. J. 1995, 2, 12, str. 1572-1577) rozpuszczono w dimetyloformamidzie (0,25 ml) i wodzie (1 ml) i potraktowano N-(benzyloksykarbonyloksy)-sukcynimidem (18 mg, 72 μmoli) i W-etylomorfoliną (18,6 ml). Po mieszaniu przez 15 minut analiza TLC (octan etylu/pirydyna/kwas octowy/woda = 5/7,1,6/4, obj./obj./obj./obj.) wykazała zakończenie reakcji i mieszaninę reakcyjną naniesiono bezpośrednio na kolumnę RP-18, którą eluowano układem woda/metanol (90/10 do 60/40). Odpowiednie frakcje zebrano i zatężono do małej objętości i wprowadzono do kolumny jonowymiennej Dowex 50 WX4-H+ z wodą. Eluat zatężono pod próżnią i otrzymano czysty związek 30 (54 mg, 91% wydajności).
Siarczanowany pentasacharyd 32
Związek 30 (54 mg, 45 μmoli) rozpuszczono w dimetyloformamidzie (1 ml). Dodano kompleksu trietyloamina-tritlenek siarki (0,51 g, 5 równoważników na każdą grupę hydroksylową) i mieszaninę mieszano w atmosferze azotu w temperaturze 55°C przez 16 godzin. Następnie mieszaninę oziębiono do temperatury 0°C i dodano wodnego roztworu wodorowęglanu sodu (5 równoważników na każdy równoważnik kompleksu trietyloamina-tritlenek siarki). Mieszaninę mieszano przez 1 godzinę, zatężono do małej objętości i wprowadzono na kolumnę Sephadex G-25, którą eluowano 10% acetonitrylu w wodzie. Odpowiednie frakcje zebrano i zatężono do małej objętości, a następnie przepuszczono przez kolumnę Dowex 50 WX4 (postać Na+) eluowaną wodą. Eluat zatężono i ponownie rozpuszczono w 0,2N chlorowodorze (1 ml) i pozostawiono do odstania na 16 godzin w temperaturze 4°C. Mieszaninę reakcyjną zobojętniono 0,1N wodorotlenkiem sodu, odsolono na kolumnie Sephadex G-25 i eluowano 10% acetonitrylu w wodzie, uzyskując homogeniczny związek 31. Związek 31 rozpuszczono w układzie tert-butanol/woda (6/1, obj./obj., 20 ml) zawierającym kilka kropel kwasu octowego. Roztwór mieszano pod ciągłym strumieniem wodoru w obecności 10% Pd/C (100 mg), po 3 godzinach katalizator Pd/C usunięto przez odsączenie i przesącz zatężono pod próżnią, uzyskując czysty związek 32 (60 mg, 60% wydajności).
Sprzęganie na drodze kondensacji pentasacharydu 32 z peptydem 16
Pentasacharyd 32 (15 mg, 6,5 μmola) rozpuszczono w 0,1M buforze NaH2PO4 (2 ml, pH 7,5) i do roztworu tego dodano sulfo-SIAB™ (16 mg, 33 pmole). Po mieszaniu przez 3 godziny w ciemności analiza HPLC (aniowymienna monoQ) wykazała zakończenie reakcji i surowy produkt 34 oczyszczono na kolumnie Superdex 30 (10% acetonitryl w wodzie). Odpowiednie frakcje zebrano i zatężono pod próżnią w niskiej temperaturze (25°C). Do roztworu analogu NAPAP 16 (9 mg, 14 μmoli) w mieszaninie metanolu (1 ml) i 0,1M buforu Na2HPO4 (0,75 ml, pH 7,0), który przed użyciem odgazowano przez przepuszczenie przez hel i sonifikację, dodano tributylofosfiny (3,9 pl, 15 μmoli). Po mieszaniu przez 1 godzinę w atmosferze argonu analiza HPLC (kolumna Lichrospher® RP-18) wykazała, że zakończyło się odszczepienie grupy 2-pirydynosulfenylowej. Dodano roztworu derywatyzowanego pentasacharydu 34 w dimetyloformamidzie (0,25 ml) i 0,1M buforze Na2HPO4 (0,50 ml, pH 7,0) i mieszaninę mieszano przez 3 godziny. Surowy produkt wprowadzono na kolumnę Sephadex G-50, którą eluowano 10% acetonitrylu w wodzie. Odpowiednie frakcje zebrano, zatężono do małej objętości i odsolono na kolumnie Superdex 30, eluowanej 10% metanolu w wodzie. Po zatężeniu i liofilizacji otrzymano koniugat III w postaci białej substancji stałej (9 mg, 52%).
1H NMR (D2O, 600 MHz, HH-COSY): δ 3,50, 3,53, 3,43 (3 x s, 9H, CH3OE,G,H);
pierścień D: 5,53 (m, 1H, H1), 4,15 (m, 1H, H2), 4,58 (m, 1H, H3), 3,56 (m, 1H, H4), 3,92 (m,
1H, H5), 4,26, 4,13 (2 x m, 2H, H6, H6');
pierścień E: 3,70 (d, 1H, H1, J1/2 = 8,1 Hz), 4,21 (m, 1H, H2), 3,62 (m, 1H, H3), 3,92 (m, 1H, H4), 3,74 (m, 1H, H5);
pierścień F: 5,39 (d, 1H, H1, J1/2 = 3,8 Hz), 4,22 (m, 1H, H2), 4,56 (m, 1H, H3), 3,83 (t, 1H, H4, J3/4=J4/5 = 9,8 Hz), 4,12 (m, 1H, H5);
pierścień G: 5,15 (bs, 1H, H1), 4,35 (m, 1H, H2), 3,76 (m, 1H, H3), 4,21 (m, 1H, H4), 4,80 (m, 1H, H5); pierścień H: 5,10 (d, 1H, H1, J1/2 = 3,6 Hz), 4,31 (m, 1H, H2), 4,54 (m, 1H, H3), 4,21 (m, 1H, H4); łącznik: 7,51, 7,53, 7,13, 712 (4 x d, 4H, Harom SIAB), 3,73 (m, 2H, CH2CH2NH2), 3,66 m (m,
12H, OCH2 TEG), 3,31 (m, 2H, CH2NH2);
peptyd: 8,27, 8,22 (2 x s, 1H, Harom NAS), 7,98-7,60 (m, 6H, Harom NAS), 7,71, 7,64, 7,46, 7,44 (4 x d, 4H, Harom APA), 4,60, 4,45 (2 x t, 1H, aCH APA, JaCH,eCH = 6,6 Hz), 4,00, 3,97 (2 x m, 1H, aCH Cys), 3,10-2,85 (m, 4H, CH2N piperydyna), 2,82-2,70 (m, 3H, pCH2 Cys, pCH APA), 2,61 (m, 1H, pCH', APA), 1,55-1,15 (m, 6H, CH2 piperydyna);
ES-MS: [M-H]+ 2680,6.
PL 199 433 B1
Podobnymi sposobami wytworzono następujące związki:
PL 199 433 B1
Aktywność biologiczną związków według wynalazku oznaczano następującymi metodami.
I. Badanie antytrombinowe
Trombina (Czynnik IIa) jest czynnikiem w kaskadzie krzepnięcia.
Aktywność antytrombinową związków według niniejszego wynalazku badano przez spektrofotometryczny pomiar szybkości hydrolizy chromogenicznego substratu s-2238 dla trombiny. Badanie aktywności antytrombinowej w układzie buforowym stosowano do wyznaczenia wartości IC50 badanego związku.
Ośrodek do badań bufor trometamina-NaCl-glikol polietylenowy 600 (TNP)
Związek porównawczy: 12581 (Kabi)
Nośnik: Bufor TNP
Rozpuszczalność można uzyskać stosując sulfotlenek dimetylu, metanol, etanol, acetonitryl lub alkohol tert-butylowy, które w stężeniach do 2,5% nie wywierają skutków ubocznych na końcową mieszaninę reakcyjną.
Technika:
Reagenty*:
1. Bufor trometamina-NaCl (TN)
2. Skład buforu:
Trometamina (Tris) 6,057 g (50 mmoli)
NaCl 5,844 g (100 mmoli)
Woda do 1 1 pH roztworu doprowadzono do wartości 7,4 w temperaturze 37°C stosując HCl (10 mmoi-i'-1)
2. Bufor TNP
Glikol polietylenowy 6000 rozpuszczono w buforze TNP do stężenia 3 gT
3. Roztwór S-2238
Jedną fiolkę S-2238 (25 mg; Kabi Diagnostica, Szwecja) rozpuszczono w 20 ml buforu TN do stężenia 1,25 mgf1 (2 mmolT1).
4. Roztwór trombiny
Ludzką trombinę (16 000 nKaffiolka-1; Centraal Laboratorium voor Boedtransfusie, Amsterdam, Holandia) rozpuszczono w buforze TNF, uzyskując roztwór podstawowy 835 nKafml-1.
Bezpośrednio przed użyciem roztwór ten rozcieńczono buforem TNP do stężenia 3,34 nKatml- .
* Wszystkie stosowane składniki mają gatunek analityczny
- Do roztworów wodnych stosuje się ultraczystą wodę (o jakości Milli-Q).
Przygotowanie roztworów związku badanego i porównawczego
Związki badany i porównawczy rozpuszczono w wodzie Milli-Q, uzyskując podstawowe stężenia 10-2 moH'1. Każde ze stężeń rozcieńczano stopniowo nośnikiem, uzyskując stężenia 10-3, 10-4 i 10-5 moH'1. W badaniach stosowano wymienione rozcieńczenia, łącznie z roztworem podstawowym (końcowe stężenia w mieszaninie reakcyjnej: 3·10-3; 10'3; 3·10-4; 10'4; 3·10-5; 10'5; 3·10-6 i 10'6 molaf1, odpowiednio).
Procedura
W temperaturze pokojowej 0,075 ml i 0,025 ml roztworu związku badanego i związku porównawczego albo, alternatywnie, nośnika, wprowadzano pipetą do studzienek płytki do mikromiareczkowania i roztwory te rozcieńczano odpowiednio 0,115 i 0,0165 ml buforu TNP. Do każdej studzienki dodano porcję 0,030 ml roztworu S-2238 i płytkę wstępnie ogrzano i preinkubowano przez wytrząsanie w inkubatorze (Amersham) przez 10 minut w temperaturze 37°C. Po preinkubowaniu zapoczątkowano hydrolizę S-2238 przez dodanie do każdej studzienki 0,030 ml roztworu trombiny. Płytkę inkubowano (wytrząsając przez 30 sekund) w temperaturze 37°C. Absorbancję każdej próbki przy 405 nm mierzono co 2 minuty od 1 minuty po rozpoczęciu inkubacji przez 90 minut, stosując kinetyczny czytnik płytek do mikromiareczkowania (Twinreader plus, Flow Laboratories).
Wszystkie dane zebrano w komputerze osobistym IBM stosując program LOTUS-MEASURE. Stężenie dla każdego związku (wyrażone w moll-1 mieszaniny reakcyjnej) i absorbancję dla ślepej próby wykreślono w funkcji czasu reakcji w minutach. Ocena odpowiedzi: Z wykresu z badania obliczono maksymalną absorbancję dla każdego stężenia końcowego. Wartości IC50 (stężenie końcowe, wyrażone w pmoH·1, powodujące 50% zahamowania maksymalnej absorbancji dla ślepej próby) obliczono stosując analizę transformacji logarytmicznej, zgodnie z metodą Hafnera i in. (Arzneim. -Forsch./Drug Res. 1977; 27(II): 1871-3).
PL 199 433 B1
Aktywność antytrombinowa:
| Przykład | IC50 (mol-l-1) |
| I (jeden diastereomer) | 2 x 107 |
| II | 8 x 106 |
| III | 3,5 x 107 |
II. Test przeciwko czynnikowi Xa
Aktywowany Czynnik X (Xa) jest czynnikiem w kaskadzie krzepnięcia. Aktywność anty-Xa związków według wynalazku oceniono przez spektrofotometryczny pomiar szybkości hydrolizy chromogenicznego substratu s-2222 dla Xa. Badanie aktywności anty-Xa w układzie buforowym stosowano do wyznaczenia wartości IC50 badanego związku.
W zasadzie stosowano analogiczną procedurę i warunki badania, jak w opisanym powyżej badaniu aktywności antytrombinowej. Różnice wskazano poniżej.
Związek porównawczy: benzamidyna
Nośnik: Bufor TNP
Rozpuszczalność można uzyskać stosując sulfotlenek dimetylu, metanol, etanol, acetonitryl lub alkohol tert-butylowy, które w stężeniach do 1% (dla DMSO) i 2,5% (dla innych rozpuszczalników) nie wywierają skutków ubocznych na końcową mieszaninę reakcyjną.
Technika:
Reagenty*:
3. Roztwór S-2222
Jedną fiolkę S-2222 (15 mg; Kabi Diagnostica, Szwecja) rozpuszczono w 10 ml wody do stężenia 1,5 mg-l-1 (2 mmolT1).
4. Roztwór Xa
Bydlęcy ludzki Czynnik Xa (71 nKat-Fiolka ; Kabi Diagnostica) rozpuszczono w 10 ml buforu TNP, a następnie dalej rozcieńczano 30 ml buforu TNP do stężenia 1,77 nKat-fiolka'1. Rozcieńczenia muszą być świeżo przygotowywane.
Procedura
Zamiast roztworu S-2238 (w badaniu antytrombinowym), w badaniu tym do każdej studzienki dodawano powyższego roztworu S-2222.
Aktywność przeciwko czynnikowi Xa
| Przykład | U/mg |
| III | 885 |
PL 199 433 B1
DUL)
PL 199 433 B1
PL 199 433 B1
Claims (9)
- Zastrzeżenia patentowe1. Związki przeciwzakrzepowe o wzorze (I)PL 199 433 B1 w którym R1 oznacza grupę fenylową, naftylową, 1,2,3,4-tetrahydronaftylową, (izo)chinolinylową, tetrahydro(izo)chinolinylową, 3,4-dihydro-1H-izochinolinylową, chromanylową lub kamforową, które ewentualnie mogą być podstawione jednym lub więcej podstawnikami wybranymi z grupy obejmującej (1-8C)alkil lub (1-8C)alkoksyl;R2 i R3 niezależnie oznaczają H lub (1-8C)alkil;R4 oznacza (1-8C)alkil lub (3-8C)cykloalkil;albo R3 i R4 razem z atomem azotu, z którym są związane, oznaczają niearomatyczny (4-8)-członowy pierścień ewentualnie zawierający inny heteroatom i ewentualnie podstawiony przez (1-8C)alkil lub SO2-(1-8C)alkil;Q oznacza łącznik o wzorze (III)-[(CH2)2O]m-[(CH2)n-NR3-C(O)]p-W-(CH2)s- (III), w którymW oznacza -[1,4-fenyleno-NR3-(CO)]q-(CH2)r-Slub-(CH2)t-S-(CH2)u-[O(CH2)2]v-O-(CH2)w-C(O)-NR3-; a R3 niezależnie oznacza H lub (1-8C)alkil;m = 1-12; n = 1-8; p = 0-4; q = 0 lub 1; r = 1-8; s = 1-8; t = 1-8; u = 1-8; v = 1-12; w = 1-8; łączna liczba atomów wynosi 10-70; a reszta -[(CH2)2O]m- stanowi koniec, którym Q jest związany z Z, a Z oznacza resztę oligosacharydu o ładunku ujemnym obejmującą dwie do sześciu jednostek monosacharydowych, której ładunek jest zrównoważony przez dodatnio naładowane przeciwjony;lub ich farmaceutycznie dopuszczalne sole albo proleki, to znaczy związki o wzorze (I), w których grupa aminowa w reszcie amidynowej jest chroniona, przykładowo przez grupę hydroksylową lub (1-6)-alkoksykarbonylową.
- 2. Związek według zastrz. 1, znamienny tym, że Z pochodzi od oligosacharydu, który sam ma aktywność przeciw Xa za pośrednictwem AT-III.
- 3. Związek według zastrz. 2, w którym Z oznacza resztę pentasacharydu.
- 4. Związek według zastrz. 3, w którym Z przedstawiony jest wzorem (II) w którym R5 niezależnie oznacza OSO3- lub (1-8C)alkoksyl.
- 5. Związek według zastrz. 1, w którym R1 oznacza fenyl, 4-metoksy-2,3,6-trimetylofenyl lub naftyl, R2 oznacza H; a NR3R4 oznacza grupę piperydynylową.
- 6. Związek według zastrz. 1-5, w którym Q jest wybrany z grupy obejmującej -[(CH2)2O]5-(CH2)2-NH-C(O)-CH2-S-CH2-;-[(CH2)2O]5-(CH2)2-NH-C(O)-CH2-S-(CH2)2-[O(CH2)2]3-O-CH2-C(O)-NH-(CH2)4-; oraz -[(CH2)2O]3-(CH2)2-NH-C(O)-1,4-fenyleno-NH-C(O)-CH2-S-CH2-.
- 7. Kompozycja farmaceutyczna, znamienna tym, że zawiera związek określony w zastrz. 1 oraz farmaceutycznie dopuszczalne substancje pomocnicze.
- 8. Związek określony w zastrz. 1 do stosowania do leczenia.
- 9. Zastosowanie związku określonego w zastrz. 1 do wytwarzania leku do leczenia lub zapobiegania zakrzepicy lub innym chorobom związanym z trombiną.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP98202037 | 1998-06-17 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL345238A1 PL345238A1 (en) | 2001-12-03 |
| PL199433B1 true PL199433B1 (pl) | 2008-09-30 |
Family
ID=8233825
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL345238A PL199433B1 (pl) | 1998-06-17 | 1999-06-11 | Związki przeciwzakrzepowe, kompozycja farmaceutyczna i zastosowanie tych związków |
Country Status (30)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6486129B1 (pl) |
| EP (1) | EP1087992B1 (pl) |
| JP (1) | JP4369052B2 (pl) |
| KR (1) | KR100790910B1 (pl) |
| CN (1) | CN1261450C (pl) |
| AR (1) | AR019674A1 (pl) |
| AT (1) | ATE405580T1 (pl) |
| AU (1) | AU756493B2 (pl) |
| BR (1) | BR9911300A (pl) |
| CA (1) | CA2334863C (pl) |
| CO (1) | CO5080750A1 (pl) |
| CY (1) | CY1108567T1 (pl) |
| CZ (1) | CZ299382B6 (pl) |
| DE (1) | DE69939378D1 (pl) |
| DK (1) | DK1087992T3 (pl) |
| ES (1) | ES2312210T3 (pl) |
| HU (1) | HU229088B1 (pl) |
| ID (1) | ID26614A (pl) |
| IL (2) | IL139955A0 (pl) |
| NO (1) | NO326057B1 (pl) |
| NZ (1) | NZ508623A (pl) |
| PE (1) | PE20000700A1 (pl) |
| PL (1) | PL199433B1 (pl) |
| PT (1) | PT1087992E (pl) |
| RU (1) | RU2225869C2 (pl) |
| SK (1) | SK286755B6 (pl) |
| TR (1) | TR200003710T2 (pl) |
| TW (1) | TWI221156B (pl) |
| WO (1) | WO1999065934A1 (pl) |
| ZA (1) | ZA200007075B (pl) |
Families Citing this family (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1087992B1 (en) * | 1998-06-17 | 2008-08-20 | N.V. Organon | Antithrombotic compounds |
| TWI289566B (en) * | 1999-12-07 | 2007-11-11 | N.V.Organon | Antithrombotic compound |
| DE10049937A1 (de) * | 2000-10-06 | 2002-04-11 | Knoll Ag | Niedermolekulare Inhibitoren von Serinproteasen mit Polyhydroxyalkyl- und Polyhydroxycycloalkylresten |
| DE10300049A1 (de) * | 2003-01-03 | 2004-07-15 | Morphochem AG Aktiengesellschaft für kombinatorische Chemie | Neue Verbindungen, die Faktor VIIa inhibieren |
| BR0307266A (pt) * | 2002-01-31 | 2004-12-07 | Morphochem Ag Komb Chemie | Compostos que inibem a atividade do fator xa |
| DE10330900B4 (de) * | 2003-07-01 | 2006-09-14 | Leibniz-Institut Für Polymerforschung Dresden E.V. | Biomaterial mit einem modularen Beschichtungssystem zur Anwendung in Medizinprodukten mit direktem Blutkontakt |
| EP1574516A1 (en) * | 2004-03-05 | 2005-09-14 | Sanofi-Aventis | Antithrombotic compound |
| TW200621794A (en) * | 2004-10-06 | 2006-07-01 | Akzo Nobel Nv | Pulmonary administration of an antithrombotic compound |
| TWI403334B (zh) * | 2004-12-23 | 2013-08-01 | Merck Sharp & Dohme | 包含生物素殘基之抗血栓雙重抑制劑 |
| TWI376234B (en) * | 2005-02-01 | 2012-11-11 | Msd Oss Bv | Conjugates of a polypeptide and an oligosaccharide |
| GB0507577D0 (en) | 2005-04-14 | 2005-05-18 | Novartis Ag | Organic compounds |
| EP1991271B1 (en) * | 2005-10-10 | 2011-03-09 | N.V. Organon | Anticoagulant antithrombotic dual inhibitors comprising a biotin label |
| JP2009511544A (ja) * | 2005-10-10 | 2009-03-19 | ナームローゼ・フエンノートチヤツプ・オルガノン | 抗血栓化合物 |
| UA94593C2 (ru) * | 2005-10-10 | 2011-05-25 | Н.В. Органон | Антитромбозные двойные ингибиторы с биотиновой меткой |
| ES2634454T3 (es) * | 2008-10-03 | 2017-09-27 | Glycan Biosciences Llc | Conjugados de oligosacárido aniónico |
| HUE069680T2 (hu) | 2019-07-01 | 2025-04-28 | Tonix Pharma Ltd | Anti-CD154 antitestek és felhasználásuk |
| US20240059781A1 (en) | 2021-01-06 | 2024-02-22 | Tonix Pharma Limited | Methods of inducing immune tolerance with modified anti-cd154 antibodies |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PT84170B (pt) | 1986-01-24 | 1989-03-30 | Sanofi Sa | Processo para a preparacao de derivados n alfa-substituidos das n alfa-aril-sulfonilaminoacil d-amidinofenil-alaninamidas |
| DE4115468A1 (de) * | 1991-05-11 | 1992-11-12 | Behringwerke Ag | Amidinophenylalaninderivate, verfahren zu deren herstellung, deren verwendung und diese enthaltende mittel als antikoagulantien |
| DE4206858A1 (de) * | 1992-03-05 | 1993-09-09 | Behringwerke Ag | Glycopeptid-derivate, verfahren zu ihrer herstellung und diese verbindungen enthaltende pharmazeutische mittel |
| NZ264340A (en) * | 1993-09-01 | 1995-04-27 | Akzo Nobel Nv | Bisconjugate comprising two saccharides and a spacer, use in pharmaceutical compositions |
| IL120722A (en) | 1996-05-08 | 1999-07-14 | Akzo Nobel Nv | Polysulfated tetrasaccharide derivatives and pharmaceutical compositions containing them |
| EP1087992B1 (en) * | 1998-06-17 | 2008-08-20 | N.V. Organon | Antithrombotic compounds |
-
1999
- 1999-06-11 EP EP99927976A patent/EP1087992B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-11 DK DK99927976T patent/DK1087992T3/da active
- 1999-06-11 CZ CZ20004735A patent/CZ299382B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1999-06-11 TR TR2000/03710T patent/TR200003710T2/xx unknown
- 1999-06-11 SK SK1922-2000A patent/SK286755B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1999-06-11 KR KR1020007014317A patent/KR100790910B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1999-06-11 DE DE69939378T patent/DE69939378D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-11 US US09/719,841 patent/US6486129B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-11 ID IDW20002653A patent/ID26614A/id unknown
- 1999-06-11 AT AT99927976T patent/ATE405580T1/de active
- 1999-06-11 HU HU0102764A patent/HU229088B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1999-06-11 IL IL13995599A patent/IL139955A0/xx active IP Right Grant
- 1999-06-11 CN CNB998073997A patent/CN1261450C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1999-06-11 PT PT99927976T patent/PT1087992E/pt unknown
- 1999-06-11 ES ES99927976T patent/ES2312210T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-11 AU AU45129/99A patent/AU756493B2/en not_active Expired
- 1999-06-11 NZ NZ508623A patent/NZ508623A/xx not_active IP Right Cessation
- 1999-06-11 PL PL345238A patent/PL199433B1/pl unknown
- 1999-06-11 RU RU2001101556/04A patent/RU2225869C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1999-06-11 CA CA2334863A patent/CA2334863C/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-11 JP JP2000554759A patent/JP4369052B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-11 WO PCT/EP1999/004100 patent/WO1999065934A1/en active IP Right Grant
- 1999-06-11 BR BR9911300-7A patent/BR9911300A/pt active Search and Examination
- 1999-06-14 TW TW088109931A patent/TWI221156B/zh not_active IP Right Cessation
- 1999-06-16 AR ARP990102871A patent/AR019674A1/es active IP Right Grant
- 1999-06-16 PE PE1999000534A patent/PE20000700A1/es not_active Application Discontinuation
- 1999-06-17 CO CO99037966A patent/CO5080750A1/es unknown
-
2000
- 2000-11-27 IL IL139955A patent/IL139955A/en not_active IP Right Cessation
- 2000-11-30 ZA ZA200007075A patent/ZA200007075B/en unknown
- 2000-12-12 NO NO20006317A patent/NO326057B1/no not_active IP Right Cessation
-
2008
- 2008-11-14 CY CY20081101313T patent/CY1108567T1/el unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| PL199433B1 (pl) | Związki przeciwzakrzepowe, kompozycja farmaceutyczna i zastosowanie tych związków | |
| JP4820517B2 (ja) | 抗血栓性化合物 | |
| JP5632886B2 (ja) | ビオチン残基を含む抗血栓性デュアルインヒビター | |
| JP2008500960A (ja) | 抗血栓化合物 | |
| HK1034266B (en) | Antithrombotic compounds | |
| MXPA00012554A (en) | Antithrombotic compounds | |
| MXPA02005278A (en) | Antithrombotic compound | |
| HK1106712B (en) | Antithrombotic dual inhibitors comprising a biotin residue |