PL186543B1 - Preparat leczniczy do podawania pozajelitowego wyciągów z jemioły - Google Patents
Preparat leczniczy do podawania pozajelitowego wyciągów z jemiołyInfo
- Publication number
- PL186543B1 PL186543B1 PL96327583A PL32758396A PL186543B1 PL 186543 B1 PL186543 B1 PL 186543B1 PL 96327583 A PL96327583 A PL 96327583A PL 32758396 A PL32758396 A PL 32758396A PL 186543 B1 PL186543 B1 PL 186543B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- mistletoe
- medicinal preparation
- preparation according
- lectin
- amount
- Prior art date
Links
- 235000014066 European mistletoe Nutrition 0.000 title claims abstract description 70
- 235000012300 Rhipsalis cassutha Nutrition 0.000 title claims abstract description 70
- 241000221012 Viscum Species 0.000 title claims abstract description 70
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 38
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 25
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 claims abstract description 37
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 claims abstract description 37
- 239000002523 lectin Substances 0.000 claims abstract description 37
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims abstract description 11
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims abstract description 8
- 150000008195 galaktosides Chemical class 0.000 claims abstract description 7
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 5
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 claims abstract description 4
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 claims description 19
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 claims description 18
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- -1 polyoxyethylene Polymers 0.000 claims description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 9
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 8
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 claims description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N Disodium Chemical class [Na][Na] QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 6
- 229920001515 polyalkylene glycol Polymers 0.000 claims description 5
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 claims description 4
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 claims description 4
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 4
- 229960001484 edetic acid Drugs 0.000 claims description 4
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 4
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims description 4
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 claims description 4
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 claims description 3
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 claims description 3
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 claims description 3
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 claims description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 3
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 claims description 3
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 claims description 3
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 claims description 3
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 claims description 3
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 claims description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 2
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 claims 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 claims 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 claims 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims 1
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 abstract description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 15
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 11
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinyl-2-pyrrolidone Chemical compound C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 5
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 3
- RAEOEMDZDMCHJA-UHFFFAOYSA-N 2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl-[2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl-(carboxymethyl)amino]ethyl]amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CCN(CC(O)=O)CC(O)=O)CC(O)=O RAEOEMDZDMCHJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FCKYPQBAHLOOJQ-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane-1,2-diaminetetraacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)C1CCCCC1N(CC(O)=O)CC(O)=O FCKYPQBAHLOOJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000006354 HLA-DR Antigens Human genes 0.000 description 2
- 108010058597 HLA-DR Antigens Proteins 0.000 description 2
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 2
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- 108090000829 Ribosome Inactivating Proteins Proteins 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- XONPDZSGENTBNJ-UHFFFAOYSA-N molecular hydrogen;sodium Chemical compound [Na].[H][H] XONPDZSGENTBNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CKRORYDHXIRZCH-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;dihydrate Chemical compound O.O.OP(O)(O)=O CKRORYDHXIRZCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BTRXYXNWHKNMAB-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;dodecahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.OP(O)(O)=O BTRXYXNWHKNMAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 2
- 108010045913 viscum album peptide Proteins 0.000 description 2
- OOSZCNKVJAVHJI-UHFFFAOYSA-N 1-[(4-fluorophenyl)methyl]piperazine Chemical compound C1=CC(F)=CC=C1CN1CCNCC1 OOSZCNKVJAVHJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VILCJCGEZXAXTO-UHFFFAOYSA-N 2,2,2-tetramine Chemical compound NCCNCCNCCN VILCJCGEZXAXTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000954 2-hydroxyethyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])O[H] 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- FTYWERPCRQACCQ-UHFFFAOYSA-L O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.[Na+].[Na+].OP(O)([O-])=O.OP(O)([O-])=O Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.[Na+].[Na+].OP(O)([O-])=O.OP(O)([O-])=O FTYWERPCRQACCQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N Propylene oxide Chemical class CC1CO1 GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000025747 Rheumatic disease Diseases 0.000 description 1
- 241000221013 Viscum album Species 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000011149 active material Substances 0.000 description 1
- 238000011319 anticancer therapy Methods 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- HJMZMZRCABDKKV-UHFFFAOYSA-N carbonocyanidic acid Chemical compound OC(=O)C#N HJMZMZRCABDKKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000013583 drug formulation Substances 0.000 description 1
- 238000003255 drug test Methods 0.000 description 1
- 231100000086 high toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011866 long-term treatment Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 239000003595 mist Substances 0.000 description 1
- 108010022050 mistletoe lectin I Proteins 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- 238000002638 palliative care Methods 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229940069328 povidone Drugs 0.000 description 1
- 230000008085 renal dysfunction Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 229940074545 sodium dihydrogen phosphate dihydrate Drugs 0.000 description 1
- 229920002994 synthetic fiber Polymers 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- OOLLAFOLCSJHRE-ZHAKMVSLSA-N ulipristal acetate Chemical class C1=CC(N(C)C)=CC=C1[C@@H]1C2=C3CCC(=O)C=C3CC[C@H]2[C@H](CC[C@]2(OC(C)=O)C(C)=O)[C@]2(C)C1 OOLLAFOLCSJHRE-ZHAKMVSLSA-N 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/168—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from plants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Botany (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
1. Preparat leczniczy do podawania pozajelitowego wyciagów z jemioly w postaci wyciagów wodnych z galezi jemioly, znamienny tym, ze stanowi roztwór wodny zawie- rajacy od 5 do 50 ng/ml immunologicznie czynnej lektyny jemioly wiazacej galaktozyd i ponizej 0,1 mg/ml stabilizatorów. PL
Description
Przedmiotem wynalazku jest preparat leczniczy do podawania pozajelitowego wyciągów z jemioły. Preparaty farmaceutyczne z wyciągów z jemioły według wynalazku, charakteryzują się tym, że w celu uniknięcia efektów ubocznych zawierają najmniejszą możliwą ilość immunologicznie czynnej lektyny jemioły oraz mają długi okres stabilności z powodu dodatków stabilizujących.
Jemioła (Viscus album) znana jest od dawna jako roślina lecznicza. Wyciągi z jemioły znajdują zastosowanie w wytwarzaniu preparatów do leczenia chorób reumatycznych i zwyrodnień stawów. Wodne preparaty jemioły stosuje się jako roztwory do wstrzyknięć w leczeniu paliatywnym nowotworów złośliwych. Właściwości wyciągów z jemioły hamujące nowotwór często badano i opisywano. Lektyny jemioły uznane są za skuteczny składnik czynny (patrz, Hajto, T., Hostanska, K., Gabius, W.J., Cancer Res. 49 (1989), 4803-4808 (1); Beuth, J„ Ko, H.L., Tungal, L„ Geisel, J., Pulverer, G., Arzneim. Forschung. 43 (1993), 166-169 (2)).
Lektyny jemioły wykazują nie tylko działanie cytotoksyczne, ale również właściwości immunomodulujące, tzn. w przypadku odpowiedniego dawkowania są w stanie wpłynąć pozytywnie na różne funkcje układu odpornościowego. Należą one do klasy substancji glikoproteinowych i składają się z podjednostki lekkiej (łańcuch A) o właściwościach inaktywujących rybosomy (RIP) i podjednostki ciężkiej (łańcuch B) wykazującej aktywność wiązania swoistego cukru. Podjednostki połączone są ze sobą mostkami disiarczkowymi (patrz, Luther, P., Becker, H., Die Mistel, Berlin, Springer-Verlag, 1987, 58-119 (4)).
186 543
Wysoka toksyczność ekstraktów z jemioły i ich składników wymaga dokładnego dawkowania w trakcie stosowania leczniczego, w celu zapewnienia zgodności preparatów jemioły i zapobieżenia immunosupresji spowodowanej przedawkowaniem. Optymalne dawkowanie opisywane dotychczas wynosiło 1 ng lektyny jemioły/kg ciężaru ciała (patrz, Hajto i in., (1,3) i Beuth i in., (2)).
W oparciu o obecny stan wiedzy, pozajelitowe leki zawierające wodne preparaty jemioły nie posiadają ustalonej dokładnej zawartości lektyny jemioły albo zawierają lektynę w ilości od 50 ng/ml do 350 ng/ml (patrz, EP 0 602 686 A2) albo jeszcze więcej, przykładowo Iscador Q 5 mg z 375 ng/ml.
Ważnymi składnikami wyciągów z jemioły, lektyn jemioły, są białka. Jako takie, mają one krótki okres stabilności w roztworach wodnych, które z zasady stosuje się do podawania pozajelitowego. Rozpuszczone białka są pod wieloma względami podatne na ewentualne zmiany chemiczne i fizyczne (patrz, Franks, F. (5,6,); Wang, V-CJ., Hanson M.A., (1988) (7)).
Stąd, istotne jest stabilizowanie białek stosowanych jako składnik czynny w wodnych roztworach leków.
W EP 0 602 686 A2 opisano możliwość stabilizacji roztworów lektyn jemioły o ustalonej zawartości lektyn jemioły. Przy użyciu wymienionych tam stabilizatorów, możliwe jest zapewnienie ograniczonej stabilności roztworu w odniesieniu do adsorpcji na powierzchniach, ale ma to miejsce jedynie przez okres, który jest zbyt krótki aby spełnić wymogi bezpiecznego lekarstwa, takie jak ustanowione, przykładowo, w wytycznych testowania leków (patrz, Bundesanzeiger, 1989; 41, 243 a (8)). Tak więc, stabilność nie jest osiągana w pożądanym czasie ani w przypadku temperatur przechowywania rzędu 25 °C ani w przypadku chłodzenia (4-8 °C) (Fig. 1). Leki wytworzone według EP 0 602 686 A2 odpowiadają jedynie przez zbyt krótkie okresy czasu ogólnym wymaganiom dotyczącym bezpieczeństwa leków, gdzie wymagane jest podawanie powtarzalnie czynnego materiału w trakcie okresu trwałości leku.
W DE 4221 836 ujawniono preparat medyczny obejmujący 50-150 ng/ml immunologicznie czynnej lektyny jemioły wiążącej galaktozyd ML-1 w roztworze wodnym. Taki roztwór wodny wykazuje stabilność przechowywania, która jest niewystarczająca w okresie trwałości odpowiedniego preparatu medycznego.
Stąd, celem niniejszego wynalazku jest dostarczenie środka farmaceutycznego do pozytywnego wpływania na parametry immunologiczne w terapii nowotworowej albo w przypadku chorób zakaźnych, który to środek obejmuje optymalnie skuteczną i bezpiecznie podawaną ilość składników czynnych z wyciągów jemioły, przy czym składniki czynne są w leku dostosowane w sposób powtarzalny i są stabilne w okresie trwałości leku.
Cel ten osiągnięto przez wytworzenie kompozycji farmaceutycznej z wyciągów jemioły, która zawiera wodny wyciąg z pędów jemioły, jest dostosowana do składnika immunologicznie czynnego lektyny jemioły i posiada długą stabilność spowodowaną dodatkami stabilizującymi w ilości <0,1 mg/ml.
Według wynalazku, preparat wyciągów z jemioły zawiera roztwór o zawartości od 5 do 50 ng/ml, korzystnie 20 do 30 ng/ml immunologicznie czynnej lektyny jemioły wiążącej galaktozyd w odpowiedniej ilości. Preparat zawiera także stabilizatory w ilości od 0,001 do 0,1 mg/ml, korzystnie 0,01 mg/ml, dzięki czemu ma niezbędną stabilność w odniesieniu do adsorpcji do powierzchni i stabilności podczas przechowywania.
Preparat według niniejszego wynalazku korzystnie zawiera jako stabilizatory alkenole, zwłaszcza poliole i węglowodany, polimery hydrofilowe, zwłaszcza poliwinylopirolidon, polialkohol winylowy, niejonowe środki powierzchniowo czynne, zwłaszcza poliglikole alkilenowe i polietoksylowane estry kwasów tłuszczowych i/lub białka, zwłaszcza albuminę, a szczególnie albuminę surowicy ludzkiej.
Preparat leczniczy według niniejszego wynalazku zawiera także środki chelatujące w ilości od 0,1 do 0,001 mg/ml, korzystnie około 0,01 mg/ml. Jako środki chelatujące w preparacie leczniczym według niniejszego wynalazku mogą być zastosowane sole metali alkalicznych kwasów nitryloalkanokarboksylowych, zwłaszcza kwas wersenowy, korzystnie w postaci soli disodowej.
186 543
Preparat leczniczy według niniejszego wynalazku korzystnie jest udostępniony w postaci zliofilizowanej.
Nieoczekiwanie, według wynalazku, stwierdzono, że w zakresie wyraźnie niższego dawkowania od 15 do 375 pg/kg ciężaru ciała, występuje optimum aktywności, które się ujawnia zwłaszcza po powtarzanym podawaniu podczas porównywalnie długiego czasu. Te małe dawki znacznie zmniejszają normalne objawy uboczne.
Preparaty lecznicze według wynalazku charakteryzują się również zawartością biologicznie czynnej lektyny jemioły przydatnej do jednostek dawkowania w ilości od 15 do 375 pg/kg ciężaru ciała.
Preparat leczniczy według wynalazku występuje w postaci jednostki dawkowania, o korzystnie analitycznie kontrolowanej zawartości lektyny jemioły swoistej wobec galaktozydu, do podawania w ilości od 25 do 200 pg/kg ciężaru ciała, a zwłaszcza 75 pg/kg ciężaru ciała.
Przy użyciu preparatów według wynalazku po raz pierwszy jest możliwe wytwarzanie w sposób powtarzalny leków pozajelitowych, które w okresie trwałości leku umożliwiają bezpieczne podawanie również za pomocą powszechnie stosowanych w handlu strzykawek jednorazowych, natomiast w innych przypadkach adsorpcja białka na powierzchniach lipofilnego materiału syntetycznego stanowi problem. Znalazły one zastosowanie w polepszaniu parametrów odporności ludzi i zwierząt w przypadkach terapii przeciwnowotworowej, jak również w przypadku chorób wirusowych.
Określenie optymalnie skutecznej zawartości lektyny jemioły.
Do badań klinicznych, wychodząc z wodnego wyciągu niezdrewniałych gałęzi jemioły wraz z liśćmi, wytworzono roztwór do wstrzyknięć o zawartości 30 ng lektyny jemioły wiążącej galaktozyd na ml - określony jako lektyna jemioły I. Okres podawania w przypadku pacjentów z nowotworem wynosił do 4 tygodni z dwoma podaniami tygodniowo.
Nieoczekiwanie stwierdzono, że w przypadku dawki 75 pg/kg ciężaru ciała, obserwuje się najsilniejsze zmiany parametrów odporności w surowicy pacjentów z nowotworem. Jest to nieoczekiwane w świetle stanu techniki, ponieważ uważano, że tylko istotnie wyższe dawkowanie, konkretnie 1 ng/kg, wywołuje pozytywne zmiany parametrów odporności. Testy porównawcze wykazały również, że nie tylko wyższe, ale również niższe dawkowanie (odpowiednio 15 pg/kg albo 375 pg/kg) wywołuje niewielkie zmiany w parametrach odporności takich jak liczba komórek CD3+, HLA-DR+ i LGL (wielkie ziarniste limfocyty) (patrz, Figury 2 i 3).
Stabilizacja preparatów lektyny jemioły
Jako stabilizatory wodnych preparatów lektyny jemioły zastosowano alkanole, przykładowo, poliole i węglowodany, polimery hydrofitowe, przykładowo poliwinylopirolidon, alkohol poliwinylowy, niejonowe środki powierzchniowo czynne, przykładowo, poliglikole alkilenowe (potoksamery), polioksyetylenowe estry kwasów tłuszczowych (polisorbitany) i białka, przykładowo albuminę, a zwłaszcza albuminę surowicy ludzkiej.
Dodatki stabilizujące preparatów lektyny jemioły znane są z EP 0 602 686 A2, gdzie stosowane były w zakresie stężeń od 0,1 mg/ml do 10 mg/ml, zaś korzystnie 5 mg/ml roztworu. W celu analizy roztworów według wynalazku, powołuje się w całości treść EP 0 602 686 A2.
Nieoczekiwanie, stwierdzono, że stężenia rzędu 0,01 mg/ml i mniejsze wymienionych stabilizatorów zachowują się w równoważny sposób w odniesieniu do działania stabilizującego. Przykładowo, można to wykazać dla znanych z literatury takich stabilizatorów jak poliwidon (PVP) i albuminy. Stabilizatory te zwiększają stabilność białka w odniesieniu do wiązania z powierzchniami lipofilnymi (patrz, Fig. 4). Ponadto, uzyskuje się porównywalną jakość pod względem stabilności podczas przechowywania przy zastosowaniu niższych stężeń substancji pomocniczej, przykładowo poliwidonu (patrz, Fig. 5).
Ponadto, nieoczekiwanie stwierdzono, że niejonowe środki powierzchniowo czynne, przykładowo poliglikole alkilenowe (polimery blokowe tlenku etylenu i tlenku propylenu, przykładowo Pluronic) i polioksyetylenowe estry kwasów tłuszczowych (przykładowo Tween 20) również działają stabilizująco w tych samych zakresach stężeń.
Wyciągi z jemioły stosuje się w długotrwałym leczeniu. Zmniejszenie ilości substancji wspomagającej stabilizację zapewnia istotne bezpieczeństwo leku, przykładowo, polimery,
186 543 takie jak poliwidon i poliglikole alkilenowe oparte na tlenkach etylenu i propylenu, po podaniu pozajelitowym, wydzielają, się znacznie wolniej w przypadku zaburzeń czynności nerek. Ponadto, istnieje niebezpieczeństwo gromadzenia się tych substancji. Niebezpieczeństwo to jest znacznie obniżone przez zmniejszenie stężenia, przykładowo do 0,01 mg/ml.
W preparatach według wynalazku, dodatki tworzące chelaty, przykładowo kwasy nitryloalkenokarboksylowe i ich pochodne, stosuje się w celu zwiększenia stabilności podczas przechowywania roztworów do wstrzyknięć. Przez zastosowanie, oprócz wyżej wymienionych stabilizatorów, tych związków, zwłaszcza soli metali alkalicznych, nieoczekiwanie uzyskuje się drastycznie wydłużony okres stabilności podczas przechowywania preparatów wyciągów z jemioły. W stanie techniki nie znany był wpływ dodatków chelatujących na preparaty wyciągów z jemioły, które uprzednio zastosowano w postaciach leków pozajelitowych głównie do kompleksowania metali (patrz, Wang, Hanson).
Odpowiednie związki obejmują NTA (kwas nitrylooctowy i jego sole), EDTA (kwas wersenowy i jego sole), CDTA (kwas 1,2-diaminocykloheksano-N,N'-tetraoctowy i jego sole), kwas N-(2-hydroksyetylo)-etylenodiamino-N,N,N'-trioctowy i jego sole, TTHA (kwas trietylenotetraamino-heksaoctowy i jego sole). Można zastosować jeden albo wiele poszczególnych związków.
Według najkorzystniejszego wykonania wynalazku, jako pochodną kwasu nitryloalkenylkarboksylowego korzystnie stosuje się kwas wersenowy, zwłaszcza w postaci soli disodowej. Wersenian disodowy stosuje się korzystnie w zakresie stężeń od 0,001 mg/ml do 0,1 mg/ml, szczególnie 0,01 mg/ml.
Wyższość kombinacji różnych substancji stabilizujących w porównaniu z jednym związkiem w odniesieniu do stabilności podczas przechowywania preparatów jemioły została jasno wykazana na podstawie zmniejszenia zawartości lektyny jemioły, przykładowo, dla poliwidonu albo poliwidonu z wersenianem disodowym (patrz, Fig. 7).
Dodanie stabilizatorów, przykładowo poliwidonu i wersenianu disodu, jak wykazano, nie wpływa na aktywność preparatów jemioły. Tak więc, preparaty jemioły o tej samej zawartości lektyny jemioły, zarówno z dodatkiem PVP i wersenianu disodu jak i bez dodatków, wykazują taką samą aktywność w teście cytotoksyczności MOLT-4, jak i w przypadku uwalniania cytokin z komórek krwi ludzkiej. Same dodatki nie wykazują aktywności w tych testach, co daje pewność, że dodatki nie wpływają na działanie farmakologiczne preparatów wyciągów z jemioły.
Poniżej przedstawiono przykłady postaci stabilnych preparatów wyjaśniające wynalazek bez ograniczania go.
Przykład 1
Roztwór do wstrzyknięć (5 1)
Wyciąg wodny (1:1.1 -1.5) z niezdrewniałych gałęzi jemioły z liśćmi, 6,2-6,Ί g odpowiadający 30 ng/ml aktywnej lektyny jemioły
Dodekahydrat monowodoro(orto)fosforanu (V) disodowego 22,13 g
Dihydrat diwodoro(orto)fosforanu(V) sodu 1,88 g chlorek sodu 33,5 g poliwidon K17PF 0,05 g wersenian disodu 0,00 g
Woda 4465 g
Przykład 2
Roztwór do wstrzyknięć (5 1)
Wyciąg wodny (1:1.1-1.5) z niezdrewniałych gałęzi jemioły z liśćmi, odpo- 0,2-0,7g wiadający 30 ng/ml aktywnej lektyny jemioły
Dodekahydrat monowodoro(orto)fosforanu(V) disodowego 22,11 g
Dihydrat diwodoro(orto)fosforanu (V) sodu 1,88 g chlorek sodu 37,50 g
Pluronic®F58 0,00 g wersenian disodu 0,00 g
Woda 4465 g
186 543
P rzykład 3 Roztwór do wstrzyknięć (5 1)
Wyciąg wodny (1:1.1-1.5) z niezdrewniałych gałęzi jemiofy z iiśćmi, odpo- Q,2-0J g wiadający 30 ng/ml aktywnej lektyny jemioły
Dodekahydrat monowodoro(orto)fosforanu(V) disodowego 20,13 g dihydrat diwodoro(orto)fosforanu(V) sodu 1,88 g chlorek sodu 37,50 g
Tween®20 0,05 g wersenian disodu 0,i05 g woda 4965 g
Krótki opis rysunków
Figura 1. Stabilność podczas przechowywania wodnego preparatu z wyciągu wodnego (1:1,1-1,5) z niezdrewniałych gałęzi jemioły z liśćmi, dostosowanego do 65 ng/ml zawierającego 0,1 mg poliwidonu K17PE/ml, oznaczenie lektyny jemioły przy użyciu zmodyfikowanego testu ELLA (9).
Figura 2. Wartość mediany komórek LGL podczas czterech tygodni podskórnego podawania PS76A2; dzień 0: przed początkiem podawania, dzień 28 zakończenia badania.
Figura 3. Mediany przebiegów aktywowanych limfocytów (CD3+HLA-DR+) podczas czterech tygodni podskórnego podawania PS76A2:
0: przed rozpoczęciem podawania,
1: 24 godziny po rozpoczęciu podawania,
2: 48 godzin po rozpoczęciu podawania,
3: 28 dni po rozpoczęciu podawania.
Figura 4. Zmniejszanie zawartości lektyny jemioły w roztworach do wstrzyknięć zawierających preparat wodnego wyciągu (1:1,1-1,5) z niezdrewniałych gałęzi jemioły z liśćmi, dostosowanego do 65 ng/ml zależnie od okresu czasu w jednorazowych strzykawkach (PE/PP) z tłokiem gumowym.
Figura 5. Stabilność podczas przechowywania preparatów jemioły w 20 mM buforze fosforanowym pH 7,4, mierzona na podstawie procentowej zawartości lektyny jemioły.
Figura 6. Stabilność podczas przechowywania preparatów jemioły w 20 mM buforze fosforanowym pH 7,4, mierzona na podstawie procentowej zawartości lektyny jemioły, temp. 4-8°C.
Figura 7. Stabilność podczas przechowywania preparatów lektyny jemioły w roztworach do wstrzyknięć zawierających preparat wodnego wyciągu (1:1,1-1,5) z niezdrewniałych gałęzi jemioły z liśćmi, dostosowanego do 65 ng/ml w 20 mM buforze fosforanowym pH 7,4, mierzona na podstawie procentowej zawartości lektyny jemioły, temp. 4-8°C.
Literatura
1. Hajto T., Hostanska K., Gabius H-J., Modulatory potency of the β-galactoside-specific lectin from mistletoe extract (Iscador) on the host defence system in vivo in rabbits and patients, Cancer Res., 1989; 49:4803-4808
2. Beuth J., Ko H.L., Tunggal L., Geisel J., Pulverer G., Vergljichjnde Untersuchungen żur immunaktiven Wirkung von Galaktosid-spezifischem Mistellektin (comparative investigations.for the immunoactive action of galactoside-specific mistletoe lectin), Arzneim. Forsch.. 1993; 43: 166-169 '
3. Hajto T., Hostanska K, inventors; Madaus AG applicant, Lektinkonzentrate aus Mistelextrakten und entsprechende, stabilisierte Mistellekti^praparate, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie diese enthaltende Arzneimittel und deren Verwendung zur Erhohung der naturlichen Immunresistenz und/oder in der Tumor-Therapie (lectin concentrates from mistletoe extracts and corresponding stabilised mistletoe lectin preparations, processes for their preparation, as well as medicaments containing these and their use for the increasing of the natural immune resistance and/or in tumour therapy), EP 0 602 686 A2, publication date 22.06,1994.
4. Luther P., Becker H., Die Mistel (mistletoe), Berlin: Springer-Verlag, 1987, 58-119.
5. Franks F., Conformational stability of proteins in Franks F., editor, Protein Biotechnology, Totowa, New Jersey: Humana Press, 1993: 395-436.
186 543
6. Franks F., Storage stabilization of proteins in Franks F., editor, Protein Biotechnology, Totowa, New Jerssy: Humana Press, 1993: 489-532.
7. Wang Y-CJ., Hanson M. A., Parenteral formulations of proteins and peptides: stability and stabilizers, Sci. Techn., 1988 suppl., 42: S3-S26.
8. Allgemeine Verwaltungsvorschrift zur Anwendung der Arzneimittelprufrichtlinien (general adrainistration regulations for the use of the medicament testing guidelines) of the 14th. December, 1989, Bundesanz., 1989; 41: 243a.
9. Vang O., PiiLarsen K., Bog-Hansen T.C., A new quantitative and highly specific assay for lectin-binding activity in Bog-Hansen T. C., van Driessche E., editors, Lectins Biology-Biochemistry-Clinical Biochemistry , Vol. 5, Berlin: W. de Gruyter, 1986: 637-644,
LGL (1/pl)
Fig. 2
pg/kg KG(n = 14) I-— 75 pg/kg KG(n = 17) — 375 pg/kg KG(n = 15)
Fig 3
186 543
Zawartość lektyny jemioły (%)
Fig. 4
Czas (tygodnie) l-<—PVP 0,1 mg/ml, 4-8° !_»_PVP 0,1 mg/ml, 25 ° |_*_PVP 0,01 mg/ml 4-8° |-o-PVP 0,01 mg/ml, 25° -θ-bez PVP, 4-8°
-o-bez PVP, 25°
Fig. 5
186 543
Zawartość lektyny jemioły (%) <5' Zawartość lektyny jemioły (%)
—•—Pluronic (R) 0,01 mg/ml
-e-Tween 20 (R) 0,01 mg/ml
—·—Polyvidon K17 PF 0,01 mg/ml —o—Polyvidon K17PF 0,01 mg/ml Na2 EDTA 0,01 mg/ml
Fig. 7
186 543
Fig. 1.
Departament Wydawnictw UP RP. Nakiad 50 egz. Cena 2,00 zł.
Claims (10)
- Zastrzeżenia patentowe1. Preparat leczniczy do podawania pozajelitowego wyciągów z jemioły w postaci wyciągów wodnych z gałęzi jemioły, znamienny tym, że stanowi roztwór wodny zawierający od 5 do 50 ng/ml immunologicznie czynnej lektyny jemioły wiążącej galaktozyd i poniżej 0,1 mg/ml stabilizatorów.
- 2. Preparat leczniczy według zastrz. 1, znamienny tym, że zawiera stabilizujący środek powierzchniowo czynny w ilości 0,01 mg/ml.
- 3. Preparat leczniczy według zastrz. 1, znamienny tym, że jako stabilizatory zawiera alkenole, zwłaszcza poliole i węglowodany, polimery hydrofilowe, zwłaszcza poliwinylopirolidon, polialkohol winylowy, niejonowe środki powierzchniowo czynne, zwłaszcza poliglikole alkilenowe i polietoksylowane estry kwasów tłuszczowych i/lub białka, zwłaszcza albuminę, a szczególnie albuminę surowicy ludzkiej.
- 4. Preparat leczniczy według zastrz. 1, znamienny tym, że jest w postaci liofilizowanej.
- 5. Preparat leczniczy według zastrz. 1, znamienny tym, że dodatkowo zawiera środki chelatujące w ilości od 0,1 do 0,001 mg/ml, a zwłaszcza około 0,01 mg/ml.
- 6. Preparat leczniczy według zastrz. 5, znamienny tym, że jest w postaci liofilizowanej.
- 7. Preparat leczniczy według zastrz. 5, znamienny tym, że jako środki chelatujące zawiera sole metali alkalicznych kwasów nitryloalkanokarboksylowych.
- 8. Preparat leczniczy według zastrz. 6, znamienny tym, że jako pochodną kwasu nitryloalkanokarboksylowego zawiera kwas wersenowy, korzystnie jako sól disodową.
- 9. Preparat leczniczy według zastrz. 1 albo 5, znamienny tym, że zawiera biologicznie czynną lektynę jemioły wiążącą galaktozyd, do podawania w ilości 15-375 pg/kg ciężaru ciała.
- 10. Preparat leczniczy według zastrz. 9, znamienny tym, że jest w postaci jednostki dawkowania, która zawiera biologicznie czynną lektynę do podawania w ilości 25- 200 pg/kg a zwłaszcza 75 pg/kg ciężaru ciała.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19548367A DE19548367A1 (de) | 1995-12-27 | 1995-12-27 | Immunologisch wirksame Mistelextraktzubereitungen |
| PCT/EP1996/005718 WO1997024136A1 (de) | 1995-12-27 | 1996-12-19 | Immunologisch wirksame mistelextraktzubereitungen |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL327583A1 PL327583A1 (en) | 1998-12-21 |
| PL186543B1 true PL186543B1 (pl) | 2004-01-30 |
Family
ID=7781171
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL96327583A PL186543B1 (pl) | 1995-12-27 | 1996-12-19 | Preparat leczniczy do podawania pozajelitowego wyciągów z jemioły |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0869811B1 (pl) |
| AT (1) | ATE273018T1 (pl) |
| AU (1) | AU1302997A (pl) |
| CZ (1) | CZ294604B6 (pl) |
| DE (2) | DE19548367A1 (pl) |
| HU (1) | HUP9903664A3 (pl) |
| PL (1) | PL186543B1 (pl) |
| SK (1) | SK285257B6 (pl) |
| WO (1) | WO1997024136A1 (pl) |
| ZA (1) | ZA9610839B (pl) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE19752597A1 (de) * | 1997-11-27 | 1999-06-10 | Madaus Ag | Verwendung von Lektinzubereitungen bei der Bekämpfung von Harnblasenkarzinomen |
| WO2003005804A1 (en) | 2001-07-09 | 2003-01-23 | University Of Copenhagen | Methods and cuttings for mass propagation of plant parasites |
| EP2314608A1 (de) * | 2009-10-26 | 2011-04-27 | EyeSense AG | Stabilisierung von Biosensoren für in vivo Anwendungen |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE4221836A1 (de) * | 1992-07-03 | 1994-01-05 | Gabius Hans Joachim Prof Dr | Das biochemisch aufgereinigte Mistel-Lektin (ML-1) als therapeutisch anwendbarer Immunmodulator |
| DE4242902A1 (de) * | 1992-12-18 | 1994-06-23 | Madaus Ag | Verfahren zur Herstellung von Lektinkonzentraten aus Mistelextrakten und daraus hergestellte standardisierte Präparate zur Erhöhung der natürlichen Immunresistenz und für die Verwendung in der Tumor-Therapie |
| DE4341476A1 (de) * | 1993-12-02 | 1995-06-08 | Uwe Dr Pfueller | Mittel zur Untersuchung und Beeinflussung zellulärer Veränderungen auf Lektinbasis |
-
1995
- 1995-12-27 DE DE19548367A patent/DE19548367A1/de not_active Withdrawn
-
1996
- 1996-12-19 HU HU9903664A patent/HUP9903664A3/hu unknown
- 1996-12-19 DE DE59611058T patent/DE59611058D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-12-19 EP EP96944599A patent/EP0869811B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-12-19 PL PL96327583A patent/PL186543B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1996-12-19 SK SK899-98A patent/SK285257B6/sk unknown
- 1996-12-19 AT AT96944599T patent/ATE273018T1/de active
- 1996-12-19 AU AU13029/97A patent/AU1302997A/en not_active Abandoned
- 1996-12-19 WO PCT/EP1996/005718 patent/WO1997024136A1/de active IP Right Grant
- 1996-12-19 CZ CZ19982061A patent/CZ294604B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1996-12-23 ZA ZA9610839A patent/ZA9610839B/xx unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE59611058D1 (de) | 2004-09-16 |
| AU1302997A (en) | 1997-07-28 |
| HUP9903664A2 (hu) | 2000-03-28 |
| EP0869811A1 (de) | 1998-10-14 |
| DE19548367A1 (de) | 1997-07-03 |
| WO1997024136A1 (de) | 1997-07-10 |
| PL327583A1 (en) | 1998-12-21 |
| SK285257B6 (sk) | 2006-10-05 |
| HUP9903664A3 (en) | 2000-04-28 |
| SK89998A3 (en) | 1999-05-07 |
| ZA9610839B (en) | 1997-06-27 |
| CZ294604B6 (cs) | 2005-02-16 |
| ATE273018T1 (de) | 2004-08-15 |
| EP0869811B1 (de) | 2004-08-11 |
| CZ206198A3 (cs) | 1998-10-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR100266146B1 (ko) | 긴 보장기간을 갖는 g-csf의 수성 약제 조성물 | |
| US8496943B2 (en) | Non-aqueous single phase vehicles and formulations utilizing such vehicles | |
| EP2440239B1 (en) | Hemoglobin compositions | |
| US4855134A (en) | Sustained-release preparation | |
| EP0674524A1 (de) | Stabile lyophilisierte pharmazeutische zubereitungen von g-csf | |
| CZ300636B6 (cs) | Balená souprava pro parenterální podávání interferonu-beta a kapalný farmaceutický prípravek obsahující interferon-beta | |
| EP0138216B1 (en) | Sustained-release ifn preparation for parenteral administration | |
| KR20040007413A (ko) | 단기 및 장기 약물 약량측정 방법 | |
| KR20180033276A (ko) | 신속-작용 인슐린 조성물 | |
| CA2304808A1 (en) | Liquid interferon-.beta. formulations | |
| US9827189B2 (en) | Stable parenteral DNJ compositions | |
| RU2242242C2 (ru) | Препаративная форма стабильного водного раствора интерферона, способ ее приготовления и использования | |
| EP3156071A1 (en) | Stable aqueous adalimumab preparation | |
| US8946161B2 (en) | Method of treatment using stable liquid formulation of G-CSF | |
| PL186543B1 (pl) | Preparat leczniczy do podawania pozajelitowego wyciągów z jemioły | |
| JP2008050320A (ja) | インターフェロン−β含有医薬組成物 | |
| KR100514009B1 (ko) | 1,2,4-벤조트리아진옥사이드제제 | |
| JPH0424331B2 (pl) | ||
| EP1843747A2 (en) | Method for reducing the level of peroxides in bopcompatible polymer preparations | |
| JPS63303931A (ja) | 経鼻投与用成長ホルモン放出活性物質製剤 | |
| JP2007045788A (ja) | グリチルリチン酸高濃度水溶液の調製法 | |
| RU2801099C1 (ru) | Препарат, содержащий человеческий альбумин, и способ его получения | |
| JP2020522470A (ja) | 迅速に作用するインスリン組成物 | |
| WO2014205077A1 (en) | Hemoglobin compositions |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Decisions on the lapse of the protection rights |
Effective date: 20081219 |