PL175059B1 - Sposób wytwarzania inaktywowanej szczepionki przeciw grzybicy skóry - Google Patents
Sposób wytwarzania inaktywowanej szczepionki przeciw grzybicy skóryInfo
- Publication number
- PL175059B1 PL175059B1 PL92299982A PL29998292A PL175059B1 PL 175059 B1 PL175059 B1 PL 175059B1 PL 92299982 A PL92299982 A PL 92299982A PL 29998292 A PL29998292 A PL 29998292A PL 175059 B1 PL175059 B1 PL 175059B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- dsm
- vkpgf
- strain
- vkfgf
- trichophyton
- Prior art date
Links
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims description 45
- 208000007163 Dermatomycoses Diseases 0.000 title claims 2
- 201000003929 dermatomycosis Diseases 0.000 title 1
- 241000893980 Microsporum canis Species 0.000 claims abstract description 41
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 27
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims abstract description 21
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims abstract description 21
- 241001480043 Arthrodermataceae Species 0.000 claims abstract description 19
- 230000037304 dermatophytes Effects 0.000 claims abstract description 19
- 241000893966 Trichophyton verrucosum Species 0.000 claims abstract description 18
- 241000893976 Nannizzia gypsea Species 0.000 claims abstract description 14
- 241001045770 Trichophyton mentagrophytes Species 0.000 claims abstract description 14
- 229940055035 trichophyton verrucosum Drugs 0.000 claims abstract description 11
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 8
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims abstract description 4
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 claims abstract description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims abstract 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 24
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 17
- 206010039509 Scab Diseases 0.000 claims description 15
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 13
- 208000002474 Tinea Diseases 0.000 claims description 12
- 241000223238 Trichophyton Species 0.000 claims description 9
- 206010012504 Dermatophytosis Diseases 0.000 claims description 8
- 241001460074 Microsporum distortum Species 0.000 claims description 8
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 claims description 6
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 claims description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 5
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 claims description 5
- 102000008934 Muscle Proteins Human genes 0.000 claims description 5
- 108010074084 Muscle Proteins Proteins 0.000 claims description 5
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 5
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 claims description 5
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 5
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 claims description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 3
- 208000033809 Suppuration Diseases 0.000 claims description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 claims 2
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 claims 1
- 206010020565 Hyperaemia Diseases 0.000 claims 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 claims 1
- 239000000417 fungicide Substances 0.000 claims 1
- 208000024963 hair loss Diseases 0.000 claims 1
- 230000003676 hair loss Effects 0.000 claims 1
- KQPYUDDGWXQXHS-UHFFFAOYSA-N juglone Chemical compound O=C1C=CC(=O)C2=C1C=CC=C2O KQPYUDDGWXQXHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 206010040872 skin infection Diseases 0.000 claims 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 abstract description 13
- 241000893962 Trichophyton equinum Species 0.000 abstract description 8
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 abstract description 7
- 208000024386 fungal infectious disease Diseases 0.000 abstract description 6
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 abstract 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 58
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 58
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 58
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 45
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 18
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 18
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 16
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 15
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 15
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 14
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 14
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 14
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 14
- 239000000463 material Substances 0.000 description 12
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 12
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 11
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 11
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 11
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 10
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 10
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 9
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 9
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 9
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 9
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 8
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 8
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 8
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 7
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 7
- 210000001217 buttock Anatomy 0.000 description 7
- 230000009851 immunogenic response Effects 0.000 description 7
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 7
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 7
- 230000004044 response Effects 0.000 description 7
- FQPPVRBDGWOFJS-UHFFFAOYSA-N 5-amino-4-chloro-2-phenylpyridazin-3-one;7-chloro-3-methylquinoline-8-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=C(Cl)C=CC2=CC(C)=CN=C21.O=C1C(Cl)=C(N)C=NN1C1=CC=CC=C1 FQPPVRBDGWOFJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 6
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 229960004906 thiomersal Drugs 0.000 description 6
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 5
- 241000282465 Canis Species 0.000 description 4
- 241000282376 Panthera tigris Species 0.000 description 4
- 239000010425 asbestos Substances 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 229910052895 riebeckite Inorganic materials 0.000 description 4
- YCHXNMPJFFEIJG-UHFFFAOYSA-N 3-methyloxiran-2-one Chemical compound CC1OC1=O YCHXNMPJFFEIJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- 241000282313 Hyaenidae Species 0.000 description 3
- 206010022078 Injection site inflammation Diseases 0.000 description 3
- 206010067409 Trichophytosis Diseases 0.000 description 3
- 210000000576 arachnoid Anatomy 0.000 description 3
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 3
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 3
- 241000282832 Camelidae Species 0.000 description 2
- 241000282320 Panthera leo Species 0.000 description 2
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 2
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 2
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 231100000033 toxigenic Toxicity 0.000 description 2
- 230000001551 toxigenic effect Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000002198 Annona diversifolia Nutrition 0.000 description 1
- 241000272517 Anseriformes Species 0.000 description 1
- 241000282817 Bovidae Species 0.000 description 1
- 241000282421 Canidae Species 0.000 description 1
- 241000282994 Cervidae Species 0.000 description 1
- 241000272470 Circus Species 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 241000282323 Felidae Species 0.000 description 1
- 241000282375 Herpestidae Species 0.000 description 1
- 241000282838 Lama Species 0.000 description 1
- 241001455213 Leopardus pardalis Species 0.000 description 1
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 1
- 241000282336 Nasua Species 0.000 description 1
- 241001416149 Ovis ammon Species 0.000 description 1
- 241000282373 Panthera pardus Species 0.000 description 1
- 241000282456 Procyonidae Species 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 208000035415 Reinfection Diseases 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 241000282443 Ursidae Species 0.000 description 1
- 241000282319 Viverridae Species 0.000 description 1
- 241000282487 Vulpes Species 0.000 description 1
- 241000350580 Zenia Species 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 238000012550 audit Methods 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000007688 edging Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000000937 inactivator Effects 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 1
- 235000008954 quail grass Nutrition 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/145—Fungal isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0002—Fungal antigens, e.g. Trichophyton, Aspergillus, Candida
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/10—Antimycotics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
- A61K2039/552—Veterinary vaccine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Botany (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Hall/Mr Elements (AREA)
Abstract
Sposób wytwarzania inaktywowanej szczepionki przeciw grzybicy skóry, polegajacy na hodowli szczepów na pozywce agar/brzeczka piwna, znamienny tym, ze co najmniej jeden z ponizszych szczepów dermatofitów Trichophyton verrucosum nr VKPGF-931/410 (DSM nr 7277) albo Trichophyton mentagrophytes nr VKFGF-930/1032 (DSM nr 7279) albo Trichophyton equinum nr VK P G F-929/381 (DSM 7276) albo Microsporum canis nr VKFGF- 928/1393 (DSM nr 7281) albo Microsporum canis var obesum nr VKFGF 727/1311 (DSM nr 7280) albo Microsporum canis var distortum nr VKFGF-728/120 (DSM nr 7275) albo Microsporum gypseum nr VKFGF-729/59 (DSM nr 7274) hoduje sie na stalej pozywce agar/brzeczka piwna, nastepnie homogenizuje mase grzyba w roztworze wodnym, fizjologi- cznie dopuszczalnym rozpuszczalniku, homogenizat zawierajacy zywa mase komórkowa ustawia sie na stezenie wynoszace 40 do 120 milionów mikrokonidiów w 1 cm3, inkubuje jeden do dwóch dni w temperaturze pokojowej i nastepnie inaktywuje C9 H9O2SNaHg. PL PL PL PL
Description
Wady tych sposobów leczenia są następujące:
175 059
- są one mało skuteczne;
- wymagają zastosowania kwarantanny i dezynfekcji pomieszczeń gdzie żyją zwierzęta (zagrody hodowlane, zwierzętarnie, fermy, ogrody zoologiczne, cyrki itp);
- wymagają znacznych nakładów finansowych na leki i leczenie weterynaryjne;
- nastręczają trudności w unieruchomieniu zwierząt (dotyczy to dzikich zwierząt trzymanych w niewoli).
Następnie opracowano szczepionki do leczenia trichofitozy u bydła (patent ZSRR nr 268593, 1970), zwierząt futerkowych i królików (patent ZSRR nr 835446, 1980), wielbłądów (patent ZSRR nr 1190547, 1985) i innych.
Opracowano również wcześniej szczepionkę dla zapobiegania i leczenia trichofitozy koni: S-P-I (patent ZSRR nr 548947, 1976) (2).
Szczepionka S-P-I zawiera szczep szczepionkowy Trichophyton equinum nr 2251/71 zdeponowany we Wszechzwiązkowym Państwowym Instytucie Naukowym Kontroli Preparatów Weterynaryjnych, który hoduje się na brzeczce z agarem przez 20-25 dni w temperaturze 26-28°C. Masę grzyba zbiera się następnie z powierzchni pożywki, miesza się z jałową wodą destylowaną i homogenizuje, doprowadzając stężenie komórek do 600-900 milionów w ml. Homogenat przenosi się do oddzielnej butelki i stabilizuje się mieszaniną zawierającą 2-8% żelatynę (gelatose) i 10-40% sacharozę w stosunku 1:1 ± 25%, a następnie liofilizuje się.
W celach profilaktycznych i leczniczych szczepionkę wstrzykuje się w tkankę mięśniową okolicy szyi młodych i dorosłych koni, w dawkach 1-2 ml, zależnie od wieku konia, w odstępie 10-14 dni. Przy użyciu w celach leczniczych dawkę podwaja się.
Znany jest również z europejskiego opisu patentowego nr EP 393371 sposób wytwarzania szczepionki przeciw grzybicy polegający na hodowli grzybów na pożywce ciekłej przez około 4 dni, następnie inaktywacji i homogenizacji inaktywowanej hodowli. Sposób ten odróżnia się od obecnego wynalazku szczególnie tym, że prowadzi się hodowlę innych szczepów na pożywce ciekłej, kolejność prowadzonych czynności jest inna, a otrzymana szczepionka nie spełnia oczekiwań.
Szczepionki otrzymane tymi znanymi sposobami mają tę wadę, że nie zapewniają odporności na mikrosporiazy i trichofitiazy wywołane przez inne czynniki. Należy również zauważyć, że miejsca wstrzyknięcia żywej szczepionki mogą stać się swoistym ogniskiem, w którym mogą następować wysiewy szczepów szczepionkowych. Szczepy szczepionkowe posiadają resztkową zjadliwość. Ponieważ niektóre gatunki zwierząt domowych wchodzą często w kontakt z ludźmi, występowanie takich swoistych ognisk jest nie do przyjęcia.
Obecny wynalazek przedstawia sposób wytwarzania szczepionek uniwersalnych do swoistego leczenia i zapobiegania grzybic skóry u zwierząt, a także odpowiednie immunogenne szczepy grzybów.
Sposób wytwarzania szczepionek według wynalazku polega na tym, że co najmniej jeden z poniższych szczepów dermatofitów Trichophyton verrucosum nr VKPGF-931/410 (DSM nr 7277) albo Trichophyton mentagrophytes nr VkFGF-930/1032 (DSM nr 7279) albo Trichophyton equinum nr VKFGF-929/381 (DSM 7276) albo Microsporum canis nr VKFGF-928/1393 (DSM nr 7281) albo Microsporum canis var obesum nr VKFGF 727/1311 (DSM nr 7280) albo Microsporum canis var distortum nr VKFGF-728/120 (DSM nr 7275) albo Microsporum gypseum nr VKFGF-729/59 (DSM nr 7274) hoduje się na stałej pożywce agar/brzeczka piwna, następnie homogenizuje masę grzyba w roztworze wodnym, fizjologicznie dopuszczalnym rozpuszczalniku. Homogenizat zawierający żywą masę komórkową ustawia się na stężenie wynoszące 40 do 120 milionów mikrokonidiów w 1 cm3 i inkubuje jeden do dwóch dni w temperaturze pokojowej, a następnie inaktywuje C9H9O2SNaHg.
Korzystnie w sposobie wytwarzania szczepionek stosuje się roztwór wodny zawierający 0,2-2% wagowe sfermentowanego zhydrolizowanego białka mięśni, 5-12% wagowych glukozy i 0,1-1,2% wagowych wyciągu z drożdży.
Korzystnie w sposobie wytwarzania szczepionek stężenie mikrokonidiów ustawia się na wartość 90 milionów w 1 cm).
Korzystnie w przypadku gdy stosuje się więcej niż jeden szczep dermatofitów to wszystkie etapy sposobu prowadzi się oddzielnie dla każdego szczepu i tak po zmieszaniu razem wytwarza się szczepionkę.
Korzystnie miesza się następujące dermatofity Trichophyton verrucosum nr VKPGF931/410 (DSM nr 7277 i Trichophyton mentagrophytes nr VKPGF-93O/.1O32 (DSM nr 7279) j Trichophyton sarkisovii nr VKPGF-551/68 (DsM nr 7278).
Korzystnie ewentualnie miesza się następujące dermatofity Trichrphytrn verrucosum nr VKPGF-931'/410 (DSM nr 7277) i Trichophyton mentagrophytes nr VKPGF-930/1032 (DSM nr 7279) i Tritichophyton equinum nr VKpGf-929/381 , DSM nr 7276, i Trichophyton, sarkisoviij nr VKPGF-551/68 (DSM nr 7278) i Microsporum canis nr VKPGF-928/1393 (DSM nr 7281) i Microsporum canis var. obesum nr VKPGF-727/1311 (DSM nr 7280) i Microsporum canis var. distortum nr VKPGF-728/120 (DSM nr 7275) i Microsporum gypseum nr VKPGF-729/59 DSM nr 7274).
Jako szczepionkowe stosuje się następujące szczepy grzybów: Trichophyton verrucosum nr VKPGF-931/410, T. mentagrophytos nr VKPGF-930/1032 T. equinum nr VKPGF-929/381, T. sarkisovii VKPGF-551/68, Microsporum canis nr VKPGF-928/1393, Microsporium canis oar.obesum nr VKPGF-727/1311, Microsporium canis var. distortum nr VKPGF-728/120, M. gypseum nr VKPGF-729/59. Szczepionki można wytwarzać, stosując różne kombinacje materiału antygenowego z powyższych szczepów, wraz z odpowiednim nośnikiem.
Korzystna kombinacja, zwłaszcza do stosowania u psów, kotów i koni, składa się z Trichophytan verrucosum nr VKPGF-93 10, Trichrphytrn mentagrophytes nr VKPGF-930/1032, Trichophyton equinum nr VKPGF-551/68, Microsporum canis nr VKPGF-928/1393, Microsporum canis var.obesum nr VKPGF-727/1311, Microsporium canis var. distortum nr VKPGF728/120, Microsporum gypseum nr VKPGF-729/59.
Inna korzystna kombinacja szczepów szczepionkowych składa się z Trichophyton verrucosum nr VKPGF-931/410, Trichrphytrn mentagrophytes nr VKPGF-930/1032, Trichophyton sarkisovii nr VKPGF-551/68, zwłaszcza do stosowania u bydła.
Materiałem antygenowym może być pojedynczy antygen z co najmniej jednego, lub lepiej ze wszystkich wymienionych dermatofitów, albo liczne antygeny pod warunkiem, że pobudzona zostaje odpowiedź immunologiczna wystarczająca dla wytworzenia odporności na zakażenie grzybicze. Materiał antygenowy można przygotować przez homogenizację wyżej wymienionych dermatofitów lub ich części, frakcjonowanie preparatów dermatofitów, wytworzenie materiału antygenowego dermatofitów techniką rekombinacji DNA, przy czym stosuje się homogenizowany materiał z hodowli o stężeniu 40 do 120 milionów, korzystnie 90 milionów mikrokonidiów.
Odpowiednie, fizjologicznie dopuszczalne nośniki do podawania szczepionek są znane według stanu techniki; mogą to być bufory, żele, mikrocząsteczki, wszczepialne materiały stałe, roztwory i inne adjuwanty.
W celu zabicia dermatofitów stosuje się tiomersal (CULOoSNaPIg). Można ewentualnie również wprowadzić formaldehyd, albo 2-propiolakton.
Celem wytworzenia szczepionki można zastosować przykładowo następującą procedurę:
Hodowle szczepów homogenizuje się w roztworze wodnym, zawierającym 0,2 do 2,0% sfermentowanego, zhydrolizowanego białka mięśni (FGM-s), 5 do 12% glukozy i 0,1 do 1,2% wyciągu z drożdży. Stężenie mikrokonidiów ustala się na 40 do 120 milionów w mililitrze i po 1-2 dniach mieszaninę inaktywuje się tiomersalem (CgH^SNaHg) w stosunku 1:10000 do 1:125000. Otrzymaną zawiesinę pakuje się jako gotową do stosowania u zwierząt.
Wytwarzanie szczepionek, dawkowanie oraz sposób podawania dla zapobiegania i leczenia są wyjaśnione w przykładach 1 do 3.
Obecny wynalazek umożliwia przygotowanie inaktywowanej szczepionki, która zmniejsza prawdopodobieństwo reinfekcji a także powoduje wysoki stopień odporności. W przeciwieństwie do znanych szczepionek, szczepionka otrzymana sposobem według wynalazku daje odporność na wszystkie ważne czynniki przyczynowe grzybic skóry u zwierząt.
W skrócie, szczepionka przedstawia następujące zalety:
175 059
- u wielu gatunków zwierząt wrażliwych na zakażenie daje odporność po wstrzyknięciu domięśniowym,
- daje odporność przeciw prawie wszystkim czynnikom przyczynowym grzybic skóry u zwierząt,
- ma trwałe własności immunogenne,
- jest łatwa do przygotowania,
- posiada kompletny zestaw egzo- i endoantygenów hodowli dermatofitów i nie wywołuje objawów ubocznych u zwierząt.
Szczepionkę testowano z powodzeniem na ponad 500 zwierzętach różnych gatunków, głównie w rejonach dotkniętych zakażeniem.
Szczepy używane do produkcji szczepionki zostały zdeponowane we Wszechzwiązkowej Kolekcji Grzybów Chorobotwórczych, Centrum Grzybic Głębokich, Ministerstwa Zdrowia ZSRR, w Leningradzie, oraz w DSM - Niemiecka Kolekcja Drobnoustrojów i Hodowli Komórkowych, Maschroder Weg IB, W-3300 Braunschweig, Niemcy.
Ich charakterystyka jest przedstawiona niżej:
Trichophyton verrucosum nr VKPGF-931/410
Szczep został zdeponowany w DSM - Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen (Niemiecka Kolekcja Drobnoustrojów i Hodowli Komórkowych) Mascheroder Weg IB, W-3300 Braunschweig, Niemcy, dnia 1.10.92 pod numerem DSM 7277.
Szczep otrzymano przez kierowaną selekcję, opartą na wytwarzaniu zarodników i atenuacji szczepu epizootycznego nr 1032, który wykryto u jelenia w 1978. Szczep zidentyfikowano przy użyciu klucza Rebell-Taplin (Rebell G, Taplin D: Dermatophytes, their recognition and identification, 1978 - Dermatofity, ich rozpoznawanie i identyfikacja), oraz według Kashkin P.N. i in. (Opredielitiel patogennych toksigennych vrednych dla cheloveka gribov - Oznaczanie grzybów patogennych, toksynogennych szkodliwych dla człowieka, 1979).
Właściwości biologiczne szczepu są opisane w tabeli 1.
Szczep nr VKPGF-931/410 różni się od szczepu epizootycznego szybszym wzrostem w pożywce, bardzo wysokim wytwarzaniem mokrokonidiów, niższą zjadliwością i brakiem reakcji z jego antygenami.
Trichophyton mentagrophytes nr VKPGF-930/1032
Szczep został zdeponowany w DSM - Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen (Niemiecka Kolekcja Drobnoustrojów i Hodowli Komórkowych) Mascheroder Weg 1B, W-3300 Braunschweig, Niemcy, dnia 1.10.92 pod numerem DSM 7279.
Szczep otrzymano przez kierowaną selekcję, na podstawie wytwarzania zarodników oraz atenuacji szczepu epizootycznego nr 1032, który wykryto u konia w 1985. Szczep zidentyfikowano i opisano jak wyżej (Rebell, Taplin loc.cit., Kashkin, loc cit.). Własności biologiczne są opisane w tabeli 2.
Szczep nr VKPGF-930/1032 różni się od szczepu epizootycznego szybszym wzrostem w pożywce, bardzo wysokim wytwarzaniem mikrokonidiów, niższą zjadliwością i brakiem reakcji z jego antygenami.
Trichophyton equinum nr VKPGF-929/381
Szczep został zdeponowany w DSM - Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen (Niemiecka Kolekcja Drobnoustrojów i Hodowli Komórkowych), Mascheroder Weg 1B, W-3300 Braunschweig, Niemcy, dnia 1.10.92 pod numerem DSM 7276.
Szczep otrzymano przez kierowaną selekcję na podstawie wytwarzania zarodników oraz atenuacji szczepu epizootycznego nr 381, który wykryto u konia w 1986. Szczep zidentyfikowano jak opisano wyżej (Rebell, Taplin loc.cit., oraz Kashkin, loc cit.). Własności biologiczne szczepu są opisane w tabeli 3.
Szczep nr VKPGF-929/381 różni się od szczepu epizootycznego szybszym wzrostem na pożywce, niższą zjadliwością i brakiem reakcji z jego antygenami.
Microsporum canis nr VKPGF-928/1393
Szczep został zdeponowany w DSM - Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen (Niemiecka Kolekcja Drobnoustrojów i Hodowli Komórkowych), Mascheroder Weg 1B, W-3300 Braunschweig, Niemcy, dnia 1.10.92 pod numerem DSM 7281.
175 059
Szczep otrzymano przez kierowaną selekcję, opartą na wytwarzaniu zarodników oraz atenuacji szczepu epizootycznego nr 1393, który wykryto u kota w 1988. Szczep zidentyfikowano jak opisano wyżej (Rebell, Taplin loc.cit., Kashkin, loc. cit.). Własności biologiczne są opisane w tabeli 4.
Szczep nr VKPGF-928/1393 różni się od szczepu epizootycznego szybszym wzrostem w pożywce, bardzo wysoką produkcją zarodników, niższą zjadliwością i brakiem reakcji z jego antygenami.
Microsporum canis var. obesum nr VKPGF-727/1311
Szczep został zdeponowany w DSM - Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen (Niemiecka Kolekcja Drobnoustrojów i Hodowli Komórkowych), Mascheroder Weg 1B, W-3300 Braunschweig, Niemcy, dnia 1.10.92 pod numerem DSM 7280.
Szczep otrzymano przez kierowaną selekcję, na podstawie wytwarzania zarodników oraz atenuacji szczepu epizootycznego nr 1311, który wykryto u tygrysa w 1986. Szczep zidentyfikowano jak opisano wyżej (Rebell, Taplin loc.cit., oraz Kashkin, loc cit.). Własności biologiczne są opisane w tabeli 5.
Szczep nr VKPGF-727/1311 różni się od szczepu epizootycznego szybszym wzrostem w pożywce, bardzo wysokim wytwarzaniem zarodników, niższą zjadliwością i brakiem reakcji z jego antygenami.
Microsporum canis var. distortum nr VKPGF-728/120
Szczep został zdeponowany w DSM - Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen (Niemiecka Kolekcja Drobnoustrojów i Hodowli Komórkowych), Mascheroder Weg 1B, W-3300 Braunschweig, Niemcy, dnia 1.10.92 pod numerem DSM 7275.
Szczep otrzymano przez kierowaną selekcję, na podstawie wytwarzania zarodników oraz atenuacji szczepu epizootycznego nr 120, który wykryto u czarnej pantery w 1987. Szczep zidentyfikowano jak opisano wyżej (Rebell, Taplin loc.cit., oraz Kashkin, loc. cit.). Własności biologiczne są opisane w tabeli 6.
Szczep nr VKPGF-728/120 różni się od szczepu epizootycznego szybszym wzrostem w pożywce, bardzo wysoką produkcją mikrokonidiów, niższą zjadliwością i brakiem reakcji z jego antygenami.
Microsporum gypseum nr VKPGF-729/59
Szczep został zdeponowany w DSM - Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen (Niemiecka Kolekcja Drobnoustrojów i Hodowli Komórkowych), Mascheroder Weg 1B, W-3300 Braunschweig, Niemcy, dnia 1.10.92 pod numerem DSM 7274.
Szczep otrzymano przez kierowaną selekcję, opartą na wytwarzaniu zarodników oraz atenuacji szczepu epizootycznego nr 59, który wykryto u konia w 1985. Szczep zidentyfikowano jak opisano wyżej (Rebell, Taplin loc.cit.,oraz Kashkin, loc. cit.). Własności biologiczne są opisane w tabeli 7. y-ycjlyg
Szczep nr VKPGF-729/S9 różni się od szczepu epizootycznego szybszym wzrostem w pożywce, bardzo wysokim wytwarzaniem mikrokonidów, niższą zjadliwością i brakiem reakcji z jego antygenami.
Tabela 1
| Własności i charakterystyka szczepu | Szczep nr VKPGF-931/410 | Szczep epizootyczny nr 410 |
| 1 | 2 | 3 |
| Opis hodowli | Dojrzała 10-15 dniowa jednozarodnikowa kolonia w brzeczce z agarem; biała aksamitna, wypukła, wąsko rosnące obrzeże podpowierzchniowo bezbarwne, średnica kolonii 10-15 mm | Dojrzała 25-30 dniowa kolonia w brzeczce z agarem, kremowa skórzasto/aksamitna, pofałdowana, podpowierzchniowo bezbarwna, średnica kolonii 9-13 mm |
175 059 cd. tabeli 1
| 1 | 2 | 3 |
| Cechy morfologiczne | Dojrzała 10-15 dniowa hodowla z podzielonymi przegrodami strzępkami rozgałęzionymi szerokości 1 do 3 pm, liczne owalne gruszkowate mikrokonidia w 1,5-3 x 3-5 pm, brak makrokonidiów | Dojrzała 25-30 dniowa hodowla z podzieloną przegrodami rozgałęzioną grzybnią szerokości 1-3 pm, nieliczne owalne, gruszkowate cylindryczne mikrokonidia o wymiarach 1-3 x 3-7 pm, pojedyncze wydłużone o nieregularnym kształcie makrokonidia z 2-5 przegrodami o wymiarach 3-5 x 25-30 pm, liczne artrospory w łańcuszkach średnicy 6-8 pm, chla- mydospory średnicy 10-12 pm. |
| Cechy patogenne | Wynik 12 do 15 dni po podaniu dawki 500-600 tysięcy komórek materiału grzyba na cm skaryfikowanej skóry królika: cienkie nekrotyczne strupy. Samoistne wyleczenie po: 19-20 dniach | Wynik 12 do 15 dni po podaniu dawki 500-600 tysięcy komórek materiału grzyba na cm skaryfikowanej skóry królika: Grube strupy podobne do azbestu, możliwe ropienie. Samoistne wyleczenie po: 25-30 dniach |
| Reakcja | Wyniki podskórnego i domięśniowego wstrzyknięcia inaktywowanych cząsteczkowych antygenów z hodowli: nie obserwowano zmian stanu klinicznego | Wyniki podskórnego i domięśniowego wstrzyknięcia inaktywowanych cząsteczkowych antygenów z hodowli: stan zapalny w miejscu wstrzyknięcia , obrzęk |
| Odpowiedź na antygen | 20 do 25 dni po wstrzyknięciu królikom antygenów cząsteczkowych, miana przeciwciał stwierdzone w surowicy krwi: odczyn hemaglutynacji biernej (PHR): 1:320 do 1:640 Test ELISA: 1:400 do 1:1600 | 20 do 25 dni po wstrzyknięciu królikom antygenów cząsteczkowych, miana przeciwciał stwierdzone w surowicy krwi: odczyn hemaglutynacji biernej (PHR): 1:320 do 1:640 Test ELISA: 1:400 do 1:1600 |
| Odpowiedź immunogenna | Wyniki immunizacji grupy królików inaktywowanymi antygenami z hodowli (powtórzonej nie mniej niż 5 razy): wytworzenie odporności | Wyniki immunizacji grupy królików inaktywowanymi antygenami z hodowli (powtórzonej nie mniej niż 5 razy): wytworzenie odporności |
Tabela 2
| Własności i charakterystyka szczepu | Szczep nr VKPGF-930/1032 | Szczep epizootyczny nr 1032 |
| 1 | 2 | 3 |
| Opis hodowli | Dojrzała 10-15 dniowa kolonia w brzeczce z agarem; kremowa, aksamitno/matowa, płaska z małym centralnym wzniesieniem, obrzeże wąsko rosnące, frędzlowate, podpowierzchniowo lekko brązowa, s'rednica kolonii 25-30 mm | Dojrzała 25-30 dniowa kolonia w brzeczce z agarem, biała, płaska, obrzeże wąsko rosnące, podpowierzchniowo czerwonawo-brązowa, średnica kolonii 1520 mm |
| Cechy morfologiczne | Przegrodzone, rozgałęzione strzępki szerokości 1 do 3 pm, liczne gruszkowate owalne mikrokonidia o wymiarach 1-3 x 2-6 pm, brak makrokonidiów | Przegrodzone, rozgałęzione proste i spiralne strzępki szerokości 1-3 pm, okrągłe spłaszczone gruszkowate mikrokonidia o wymiarach 1-3 x 2-6 pm, nieliczne wydłużone-owalne makrokonidia z 2-5 przegrodami, o wymiarach 2-6 x 1525 pm |
175 059 cd tabeli 2
| 1 | 2 | 3 |
| Cechy patogenne | Wynik 9 do 10 dni po podaniu dawki 500-600 tysięcy komórek substancji grzyba na cm2 skaryfikowanej skóry królika: nekrotyczne strupy. Samoistne wyleczenie po: 22-25 dniach | Wynik 9 do 10 dni po podaniu dawki 500-600 tysięcy komórek substancji grzyba na cm skaryfikowanej skóry królika: grube strupy podobne do azbestu. Samoistne wyleczenie po: 30-35 dniach |
| Reakcja | Wyniki podskórnego i domięśniowego wstrzyknięcia inaktywowanych cząsteczkowych antygenów z hodowli: nie obserwowano zmian stanu klinicznego | Wyniki podskórnego i domięśniowego wstrzyknięcia inaktywowanych cząsteczkowych antygenów z hodowli: stan zapalny w miejscu wstrzyknięcia, obrzęk |
| Odpowiedź na antygen | 20 do 25 dni po wstrzyknięciu królikom antygenów cząsteczkowych, miana przeciwciał stwierdzone w surowicy krwi: odczyn PHR: 1:320 do 1:640 Test ELISA: 1:400 do 1:1600 | 20 do 25 dni po wstrzyknięciu królikom antygenów cząsteczkowych, miana przeciwciał stwierdzone w surowicy krwi: odczyn PHR: 1:320 do 1:640 Test ELISA: 1:400 do 1:1600 |
| Odpowiedź immunogenna | Wynik immunizacji grupy królików inaktywowanymi antygenami hodowli (powtórzonej nie mniej niż 5 razy:) wytworzenie odporności | Wynik immunizacji grupy królików inaktywowanymi antygenami hodowli (powtórzonej nie mniej niż 5 razy:) wytworzenie odporności |
Tabela 3
| Własności i charakterystyka szczepu | Szczep nr VKPGF-929/381 | Szczep epizootyczny nr 381 |
| 1 | 2 | 3 |
| Opis hodowli | Dojrzała 10-15 dniowa kolonia w brzeczce z agarem; biała, aksamitno/matowa, płaska z małym centralnym wzniesieniem, obrzeże wąsko rosnące, frędzlowate, podpowierzchniowo jasno brązowa, średnica kolonii 15-20 mm | Dojrzała 15 - dniowa kolonia w brzeczce z agarem, biała, aksamitna, środek lekko pofałdowany, obrzeże wąsko rosnące, podpowierzchniowo czerwonawo-brązowe, średnica kolonii 13-15 mm |
| Cechy morfologiczne | Podzielone przegrodami rozgałęzione strzępki szerokości 1 do 3 pm, liczne gruszkowate owalne mikrokonidia o wymiarach 2-3 x 3-6 pm, brak makrokonidiów | Podzielone przegrodami, rozgałęzione strzępki ze spiralnym końcem, szerokości 1-4 pm, nieliczne owalne gruszkowate mikrokonidia o wymiarach 3 x 3-7 pm, płatowate makrokonidia o wymiarach 47 x 15-25 pm |
| Cechy patogenne | Wynik 10 do 12 dni po podaniu dawki 500-600 tysięcy komórek substancji grzyba na cm skaryfikowanej skóry królika: nekrotyczne strupy. Samoistne wyleczenie po: 20-22 dniach | Wynik 10 do 12 dni po podaniu dawki 500-600 tysięcy komórek substancji grzyba na cm2 skaryfikowanej skóry królika: strupy podobne do azbestu. Samoistne wyleczenie po: 25-30 dniach |
| Reakcja | Wyniki podskórnego i domięśniowego wstrzyknięcia inaktywowanego cząsteczkowego antygenu z hodowli: nie obserwowano zmian w stanie klinicznym | Wyniki podskórnego i domięśniowego wstrzyknięcia inaktywowanego cząsteczkowego antygenu z hodowli: stan zapalny w miejscu wstrzyknięcia, obrzęk |
175 059 cd. tabeli 3
| 1 | 2 | 3 |
| Odpowiedź na antygen | 20 do 25 dni po wstrzyknięciu królikom maktywowanych antygenów cząsteczkowych, miana przeciwciał stwierdzone w surowicy krwi: odczyn PHR: 1:320 do 1:640 Test ELISA: 1:800 do 1:1600 | 20 do 25 dni po wstrzyknięciu królikom inaktywowanych antygenów cząsteczkowych, miana przeciwciał stwierdzone w surowicy krwi: odczyn PHR: 1:320 do 1:640 Test ELISA: 1:800 do 1: 1600 |
| Odpowiedź immunogenna | Wynik immunizacji grupy królików inaktywowanymi antygenami z hodowli (powtórzonej nie mniej niż 5 razy:) wytwo- rzenie odporności | Wynik immunizacji grupy królików inaktywowanymi antygenami hodowli (powtórzonej nie mniej niż 5 razy:) wytworzenie odporności |
Tabela 4
| Własności i charakterystyka szczepu | Szczep nr VKPGF-928/1393 | Szczep epizootyczny nr 1393 |
| Opis hodowli | Dojrzała 10-15 dniowa kolonia w brzeczce z agarem; biała, puszysta, wypukła, obrzeże rosnące wąsko, arachnoidalne, podpowierzchniowo brązowa, średnica kolonii 30-35 mm | Dojrzała 15- dniowa kolonia w brzeczce z agarem, szaro-beżowa, arachnoidalna, matowa w centrum, rosnące obrzeże frędzlowate, podpowierzchniowo żółtawa, średnica kolonii 20-25 mm |
| Cechy morfologiczne | Podzielone przegrodami rozgałęzione strzępki szerokości 1 do 4 gm, liczne gruszkowate cylindryczne mikrokonidia z 3-11 przegrodami o wymiarach 10-20 x 40-75 gm | Podzielone przegrodami, rozgałęzione strzępki 2-6 gm, nieliczne gruszkowate cylindryczne mikrokonidia o wymiarach 1-3 x 3-7 gm, liczne wrzecionowate makrokonidia o wymiarach z 3 - 11 przegrodami o wymiarach 10-20 x 45-85 gm |
| Cechy patogenne | Wynik 9 do 11 dni po podaniu dawki 500-600 tysięcy komórek substancji grzyba na cm skaryfikowanej skóry królika: strupy nekrotyczne. Samoistne wyleczenie po: 20-24 dniach | Wynik 9 do 11 dni po podaniu dawki 500-600 tysięcy komórek substancji grzyba na cm skaryfikowanej skóry królika: grube strupy podobne do azbestu. Samoistne wyleczenie po: 25-45 dniach |
| Reakcja | Wyniki podskórnego i domięśniowego wstrzyknięcia inaktywowanego antygenu cząsteczkowego z hodowli: nie obserwowano zmian w stanie klinicznym | Wyniki podskórnego i domięśniowego wstrzyknięcia inaktywowanego cząsteczkowego antygenu z hodowli: stan zapalny i obrzęk w miejscu wstrzyknięcia |
| Odpowiedź na antygen | 20 do 25 dni po wstrzyknięciu królikom antygenów cząsteczkowych, miana przeciwciał stwierdzone w surowicy krwi: odczyn PHR: 1:320 do 1:640 Test ELISA: 1:400 do 1:1600 | 20 do 25 dni po wstrzyknięciu królikom antygenów cząsteczkowych, miana przeciwciał stwierdzone w surowicy krwi: odczyn PHR: 1:320 do 1:640 Test ELISA: 1:400 do 1:1600 |
| Odpowiedź immunogenna | Wynik immunizacji grupy królików inaktywowanymi antygenami z hodowli (powtórzonej nie mniej niż 5 razy:) wytwo- rzenie odporności | Wynik immunizacji grupy królików inaktywowanymi antygenami hodowli (powtórzonej nie mniej niż 5 razy:) wytworzenie odporności |
175 059
Tabela 5
| Własności i charakterystyka szczepu | Szczep nr VKPGF-727/131 | Szczep epizootyczny nr 1311 |
| Opis hodowli | Dojrzała 10-15 dniowa kolonia w brzeczce z agarem; biała, puszysta, płaska z centralnym grubszym kopulastym wzniesieniem, obrzeże rosnące wąsko, frędzlowate, podpowierzchniowo bezbarwne z brązowym środkiem, średnica kolonii 3035 mm | Dojrzała 15- dniowa kolonia w brzeczce z agarem, szara, pęczkowa/arachnoidalna z fragmentami białej bawełniastej grzybni, podpowierzchniowo brązowa, średnica kolonii 23-28 mm |
| Cechy morfologiczne | Podzielone przegrodami rozgałęzione strzępki szerokości 1 do 3 pm, liczne groszkowate owalne i cylindryczne makrokonidia o wymiarach 1-3 x 3-7 pm, nieliczne krótkie, eliptyczne, wrzecionowate wydłużone-owalne makrokonidia, niektóre o nieregularnym kształcie, rzadziej spiczaste, z 2-5 przegrodami o wymiarach 11-20 x 25-50 pm | Podzielone przegrodami, rozgałęzione strzępki o szerokości 1-5 pm, nieliczne owalne, cylindryczne mikrokonidia o wymiarach 1-3 x 3-8 pm, liczne eliptyczne, wrzecionowate wydłużone-owalne lub o nieregularnym kształcie makrokonidia z z 2-5 przegrodami o wymiarach 11-20 x 25-55 pm |
| Cechy patogenne | Wynik 12 do 15 dni po podaniu dawki 500-600 tysięcy komórek substancji u o grzyba na cm skaryfikowanej skóry królika: cienkie strupy nekrotyczne. Samoistne wyleczenie po: 10-25 dniach | Wynik 12 do 15 dni po podaniu dawki 500-600 tysięcy komórek substancji grzyba na cm skaryfikowanej skóry królika: grube strupy podobne do azbestu. Samoistne wyleczenie po: 25-30 dniach |
| Reakcja | Wyniki podskórnego i domięśniowego wstrzyknięcia inaktywowanych cząsteczkowych antygenów z hodowli: nie obserwowano zmian w stanie klinicznym | Wyniki podskórnego i domięśniowego wstrzyknięcia inaktywowanych cząsteczkowych antygenów z hodowli: stan zapalny i obrzęk w miejscu wstrzyknięcia |
| Odpowiedź na antygen | 20 do 25 dni po wstrzyknięciu królikom antygenów cząsteczkowych, miana przeciwciał stwierdzone w surowicy krwi: odczyn PHR: 1:320do 1:640TestELISA: 1:800 do 11600 | 20 do 25 dni po wstrzyknięciu królikom antygenów cząsteczkowych, miana przeciwciał stwierdzone w surowicy krwi: odczyn PHR: 1:320 do 1:640 Test ELISA: 1:800 do 1:1600 |
| Odpowiedź immunogenna | Wynik immunizacji grupy królików inaktywowanymi antygenami z hodowli (powtórzonej nie mniej niż 5 razy:) wytworzenie odporności | Wynik immunizacji grupy królików inaktywowanymi antygenami z hodowli (powtórzonej nie mniej niż 5 razy:) wytworzenie odporności |
Tabela 6
| Własności i charakterystyka szczepu | Szczep nr VKPGF-728/120 | Szczep epizootyczny nr 120 |
| 1 | 2 | 3 |
| Opis hodowli | Dojrzała 10-15 dniowa kolonia w brzeczce z agarem; kremowa, aksamitno/matowa, guzikowate centralne wzniesienie, wąsko rosnące obrzeże, drobnofrędzlowate, podpowierzchniowo jasnobrązowa, z ciemno-brązowym środkiem, średnica kolonii 25-30 mm | Dojrzała 15- dniowa kolonia w brzeczce z agarem; jasno-beżowa, matowa, wypukła w środku, wąsko rosnące obrzeże, podpowierzchniowo brązowa, średnica kolonii 18-20 mm |
175 059 cd. tabeli 6
| 1 | 2 | 3 |
| Cechy morfologiczne | Podzielone przegrodami rozgałęzione strzępki szerokości 1 do 3 pm, liczne gruszkowate owalne, cylindryczne makrokonidia o wymiarach 1-3 x 3-8 pm, nie- liczne nieregularne zniekształcone makrokonidia, skrzywione lub wrzecionowate z 2-9 przegrodami o wymiarach 8-20 x 25-70 pm | Podzielone przegrodami, rozgałęzione strzępki o szerokości 1-3 pm, nieliczne gruszkowate, owalne, cylindryczne mikrokonidia o wymiarach 1-3 x 3-8 pm, liczne nieregularne zdeformowane wrzecionowate makrokonidia z 2-9 przegrodami o wymiarach 8-20 x 25-80 pm |
| Cechy patogenne | Wynik 12 do 15 dni po podaniu dawki 500-600 tysięcy komórek substancji grzyba na cm2 skaryfikowanej skóry królika: cienkie strupy nekrotyczne. Samoistne wyleczenie po: 20-25 dniach | Wynik 12 do 15 dni po podaniu dawki 500-600 tysięcy komórek substancji grzyba na cm2 skaryfikowanej skóry królika: strupy podobne do azbestu. Samoistne wyleczenie po: 27-45 dniach |
| Reakcja | Wyniki podskórnego i domięśniowego wstrzyknięcia inaktywowanego antygenu cząsteczkowego z hodowli: nie obserwowano zmian w stanie klinicznym | Wyniki podskórnego i domięśniowego wstrzyknięcia inaktywowanego cząsteczkowego antygenu z hodowli: stan zapalny i obrzęk w miejscu wstrzyknięcia |
| Odpowiedź na antygen | 20 do 25 dni po wstrzyknięciu królikom antygenów cząsteczkowych, miana przeciwciał stwierdzone w surowicy krwi: odczyn PHR: 1:320 do 1:640 Test ELISA: 1:400 do 1:1600 | 20 do 25 dni po wstrzyknięciu królikom antygenów cząsteczkowych, miana przeciwciał stwierdzone w surowicy krwi: odczyn PHR: 1:320 do 1:640 Test ELISA: 1:400 do 1:1600 |
| Odpowiedź immunogenna | Wynik immunizacji grupy królików inaktywowanymi antygenami z hodowli (powtórzonej nie mniej niż 5 razy:) wytwo- rzenie odporności | Wynik immunizacji grupy królików inaktywowanymi antygenami z hodowli (powtórzonej nie mniej niż 5 razy:) wytwo- rzenie odporności |
Tabela 7
| Własności i charakterystyka szczepu | Szczep nr VKPGF-729/59 | Szczep epizootyczny nr 59 |
| 1 | 2 | 3 |
| Opis hodowli | Dojrzała 10-15 dniowa kolonia w brzeczce z agarem; biała, aksamitna/puszysta, płaska z małym wzniesieniem w centrum kolonii, płasko rosnące obrzeże, podpowierzchniowo brązowawa, średnica kolonii 25-30 mm | Dojrzała 15 dniowa kolonia w brzeczce z agarem; kremowa, aksamitna/matowa, płaska w puszystą białą grzybnią w centrum, cienko rosnące obrzeże, podpowierzchniowo brązowawa, średnica kolonii 20-22 mm |
| Cechy morfologiczne | Podzielone przegrodami rozgałęzione strzępki szerokości 2 do 3 pm, liczne owalne gruszkowate cylindryczne makrokonidia o wymiarach 2-4 x 3-6 pm, brak lub nie-makrokonidia, eliptyczne o kształcie wydłużonym owalnym z 2-5 przegrodami o wymiarach 7-15 x 2540 pm | Podzielone przegrodami, rozgałęzione strzępki o szerokości 2-5 pm, nieliczne owalne gruszkowate, cylindryczne mikrokonidia o wymiarach 2-4 x 3-7 pm, liczne eliptyczne, wyciągnięte-owalne makrokonidia z 2-5 przegrodami, o wymiarach 7-15 x 25-50 pm |
175 059 cd. tabeli 7
| 1 | 2 | 3 |
| Cechy patogenne | Wynik 12 do 15 dni po podaniu dawki 500-600 tysięcy komórek substancji grzyba na cm skaryfikowanej skóry królika: cienkie strupy nekrotyczne. Samoistne wyleczenie po: 20-22 dniach | Wynik 12 do 15 dni po podaniu dawki 500-600 tysięcy komórek substancji grzyba na cm skaryfikowanej skóry królika:grube strupy podobne do azbestu. Samoistne wyleczenie po: 25-28 dniach |
| Reakcja | Wyniki podskórnego i domięśniowego wstrzyknięcia inaktywowanego antygenu cząsteczkowego z hodowli: nie obserwowano zmian w stanie klinicznym | Wyniki podskórnego i domięśniowego wstrzyknięcia inaktywowanego cząsteczkowego antygenu z hodowli: stan zapalny w miejscu wstrzyknięcia |
| Odpowiedź na antygen | 20 do 25 dni po wstrzyknięciu królikom antygenów cząsteczkowych, miana przeciwciał stwierdzone w surowicy krwi: odczyn PHR: 1:320 do 1:640 Test ELISA: 1:400 do 1:1600 | 20 do 25 dni po wstrzyknięciu królikom antygenów cząsteczkowych, miana przeciwciał stwierdzone w surowicy krwi: odczyn PHR: 1:320 do 1:640 Test ELISA: 1:400 do 11600 |
| Odpowiedź immunogenna | Wynik immunizacji grupy królików inaktywowanymi antygenami z hodowli (powtórzonej nie mniej niż 5 razy:) wytworzenie odporności | Wynik immunizacji grupy królików inaktywowanymi antygenami z hodowli (powtórzonej nie mniej niż 5 razy:) wytworzenie odporności |
Szczepionkę można przygotować przy użyciu szczepu Trichophyton sarkisovii nr 551/68. Jest on opisany na przykład w opisie patentowym ZSRR Nr 117797 z dnia 08.05.1985, do którego można się odnieść w całości.
Szczep został także zdeponowany w DSM - Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen ' (Niemiecka Kolekcja Drobnoustrojów i Hodowli Komórkowych), Mascheroder Weg 1B, W-3300 Braunschweig, Niemcy, dnia 1.10.92 pod numerem DSM 7278.
W szczególności, wynalazek dotyczy sposobu otrzymywania:
- szczepionki przeciw grzybicy skóry, znamiennej tym, że zawiera ona materiał antygenowy z co najmniej jednego z następujących dermatofitów:
- Trichophyton verrucosum w szczególności Trichophyton verrucosum szczep nr VKPGF931/410, i/lub
- Trichophyton mentagrophytes, w szczególności Trichophyton mentagrophytes szczep nr VKPGF-930/1032, i/lub
- Trichophyton sarkisovii w szczególności Trichophyton sarkisovii szczep nr VKPGF551/68,
- Microsporum canis w szczególności Microsporum canis szczep nr VKPGF-928/1393,
- Microsporum canis var. obesum, w szczególności Microsporum canis var. obesum szczep nr VKPGF-727/1311, i/lub
- Microsporum canis var. distortum, w szczególności Microsporum canis var. distortum, szczep nr VkPgF-728/120, i/lub
- Microsporum gypseum, w szczególności Microsporum gypseum szczep nr VKPGF729/59, oraz fizjologicznie dopuszczalny nośnik.
- szczepionki przeciw grzybicy skóry, w szczególności jako środka do leczenia psów, kotów i koni, znamiennej tym, że zawiera ona materiał antygenowy ze szczepów dermatofitów Trichophyton verrucosum nr VKPGF-931/410, Trichophyton mentagrophytes nr VKPGF-930/1032, Trichophyton equinum nr VKPGF-929/381, Trichophyton sarkisovii nr VKPGF-51/68, Microsporum canis nr VKPGF-928/1393, Microsporum canis var. obesum nr VKPGF-727/1311,
S75 059
Microsporum canis var. distortum nr VKPGF-728/120, oraz Microsporum gypseum nr VKPGF729/59, wraz z fizjologicznie dopuszczalnym nośnikiem.
- szczepionki przeciw grzybicy skóry, w szczególności jako środka do leczenia bydła, znamiennej tym, że zawiera ona materiał antygenowy ze szczepów dermatofitów Trichophyton verrucosum nr VKPGF-931/410, Trichophytonmentagrophytes nr VKPGF-930/1032, i Trichophyton sarkisovii nr VKPGF-51/68, wraz z fizjologicznie dopuszczalnym nośnikiem.
- szczepionki przeciw grzybicy skóry jak opisano wyżej, znamiennej tym, że zawiera ona 40 do 120 milionów, korzystnie 90 milionów mikrokonidiów.
- szczepionki przeciw grzybicy skóry jak opisano wyżej, znamiennej tym, że jako inaktywator zawiera ona tiomersal albo formaldehyd albo 2-propiolakton.
szczepionki przeciw grzybicy skóry jak opisano wyżej, znamiennej tym, że stosowany fizjologicznie dopuszczalny nośnik jest wodnym roztworem, zawierającym 0,2 do 2,0% wagowo sfermentowanego, zhydrolizowanego białka mięśni, 5 do 12% wagowo glukozy i 0,1 do 1,2% wagowo wyciągu z drożdży.
- szczepów dermatofitów:
Trichophyton verrucosum szczep nr VKPGF-931/410,
Trichophyton mentagrophytes szczep nr VKPGF-930/1032,
Trichophyton equinum szczep nr VKPGF-929/381,
Microsporum canis szczep nr VKPGF-928/1393,
Microsporum canis var. obesum szczep nr VKPGF-727/1311,
Microsporum canis var. distortum szczep nr VKPGF-728/120, i
Microsporum gypseum szczep nr VKPGF-729/59.
- sposobu wytwarzania szczepionki, znamiennego tym, że
a. materiał antygenowy otrzymuje się z co najmniej jednego z następujących szczepów:
Trichophyton verrucosum nr VKPGF-931/410
Trichophyton mentagrophytes nr VKPGF-551/68
Trichophyton sarkisovii nr VKPGF-551/68
Microsporum canis nr VKPGF-928/1393
Microsporum canis var. distortum, nr VKPGF-728/120
Microsporum canis var. obesum nr VKPGF-727/1311
Microsporum gypseum nr VKPGF-729/59 i
b. materiał antygenowy miesza się z fizjologicznie dopuszczalnym nośnikiem.
- sposobu jak opisano wyżej, znamiennego tym, że dodaje się czynnik inaktywujący dermatofity, w szczególności tiomersal, formaldehyd albo 2-propiolakton.
Wynalazek ilustrują podane niżej przykłady.
Przykład 1.
Dla wytworzenia 1 litra szczepionki, szczepy VKPGF-931/410, 930/1032, 929/381, 551/68,928/1393,727/1311,728/120 i 729/59 hoduje się w brzeczce z agarem w 26°C przez 15 dni. Każdy szczep jest hodowany w 8 płaskich butelkach (mattress flasks). Masę grzyba zdejmuje się, homogenizuje w 200 ml roztworu dodanego do każdego miksera. Stosowany roztwór jest to wodny roztwór, zawierający 1 % sfermentowanego, zhydrolizowanego białka mięśni, 10% glukozy i 1% wyciągu z drożdży. Stężenie mikrokonidiów doprowadza się do 90 milionów naml homogenatu. Po 2 dniach 125 ml każdej zawiesiny hodowli miesza się w jednym pojemniku. Szczepionkę można przygotować mieszając razem różne kombinacje podanych szczepów.
Celem inaktywacji mieszaniny homogenatów, bezpośrednio do zawiesiny komórek dodaje się tiomersal w stosunku 1:20 000. Na każdy litr homogenatu dodaje się 50 mg tiomersalu. Mieszaninę komórek odstawia się na 2 dni w temperaturze pokojowej.
Otrzymaną szczepionkę rozlewa się do butelek, zgodnie z przyjętymi sposobami sprawdza się na jałowość, nieszkodliwość i własności immunogenne i przechowuje w chłodni w 4°C.
Szczepionkę wytworzoną tym sposobem użyto do immunizacji zwierząt. Do celów profilaktycznych i leczniczych szczepionkę zastosowano w następujących dawkach (patrz tabela 8):
175 059
Tabela 8
| Rodzina zwierząt | Wiek | Miejsce wstrzyknięcia | Dawkowanie (ml) | |
| Profilak- tyka | Leczenie | |||
| Felidae | 1-6 miesięcy | mięśnie pośladkowe | 2 do 5 | 3 do 6 |
| średnie/duże koty | 6 miesięcy + | mięśnie pośladkowe | 3 do 7 | 4 do 10 |
| Małe koty | 1-5 miesięcy 5 miesięcy + | mięśnie pośladkowe mięśnie pośladkowe | 1 do 1,5 1 do 2 | 1 do 1,5 1 do 2 |
| Ursidae | 1-12 miesięcy 12 miesięcy + | mięśnie pośladkowe mięśnie pośladkowe | 1 do 3 3 do 5 | 3 do 5 5 do 6 |
| Procyonidae | 1-10 miesięcy | mięśnie pośladkowe | 0,3 do 0,5 | 0, 5 |
| 10 miesięcy + | mięśnie pośladkowe | 0,3 do 0,5 | 0,5 do 1,0 | |
| Viverridae | 1-12 miesięcy | mięśnie pośladkowe | 0,3 do 0,5 | 0,5 |
| 12 miesięcy + | mięśnie pośladkowe | 0,5 do 1,0 | 0,5 do 1,0 | |
| Hyaenidae | 1-12 miesięcy 12 miesięcy + | mięśnie pośladkowe mięśnie pośladkowe | 1 do 3 3 do 5 | 1 do 3 5 do 6 |
| Canidae | 1-10 miesięcy | mięśnie pośladkowe | 0,3 do 0,5 | 0,5 do 1,0 |
| 10 miesięcy + | i łopatkowe | 0,3 do 1,0 | 0,5 do 1,0 | |
| Equidae | 3-12 miesięcy 12 miesięcy + | okolica karku okolica karku | 0,3 do 0,5 0,5 | 0,5 do 1,0 0,5 do 1,0 |
| Tyropodae | 1-6 miesięcy 6 miesięcy + | okolica łopatki i karku | 3 do 5 5 do 8 | 5 do 10 7 do 10 |
| Bovidae | 1-12 miesięcy 12 miesięcy + | okolica karku okolica karku | 3 do 5 5 do 8 | 5 do 10 7 do 10 |
175 059
Przykład 2.
Szczepionkę wytworzoną sposobem opisanym w przykładzie 1 badano na zwierzętach laboratoryjnych i różnych innych zwierzętach, skuteczność w zapobieganiu i leczeniu choroby. Wyniki są podane w tabeli 9.
Przykład 3.
Szczepionkę watorzoną sposobem opisanym w przykładzie 1 zastosowano do leczenia zwierząt chorych na grzybicę. Wyniki są podane w tabeli 10.
Tabela 9
| Zwierzęta | Liczba | Dawka (cm3) | Skuteczność |
| Króliki | 10 | 1/0 | Brak objawów choroby po za- |
| Psy | 5 | 0,3 | każeniu zjadliwymi hodowlami |
| Koty domowe | 3 | 1/0 | ggrzybów T.mentagooohvtes, T.verrucosum, T.eouinum M^canis, M.gypseum |
| Konie | 5 | 0,5 | Brak,grzybicy związanej |
| Kucyki | 3 | 0,3 | z grzybami M.canis i T.men- |
| Wielbłądy | 2 | 5, 0 | tagrophytes po bezpośrednim |
| Niedźwiedzie | 2 | 3,0 | kontakcie z chorymi zwierzę- |
| Lamparty | 2 | 4,0 | tami |
| Hieny | 2 | 2,0 | Brak grzybicy związanej |
| Serwale | 2 | 3, 0 | z Grzybami M.canis i T.men- |
| Oceloty | 2 | 2,0 | tagrophytes po bezpośrednim |
| Lwy | 2 | 3,0 | kontakcie ze źródłami zaka- |
| Tygrysy | 3 | 7,0 | żenia |
| Nasua | 3 | 0,5 | |
| Cywety | 2 | 1,0 | |
| Króliki | 7 | 1/5 | Brak objawów choroby po za- |
| Psy | 3 | 0,5 | każeniu zjadliwymi hodowlami |
| Koty domowe | 3 | 1,5 | grzybów T.sarkisovii i M.gypseum |
| Czarne pantery | 2 | 5, 0 | Brak grzybicy związanej |
| Tygrysy | 5 | 7,0 | z grzybami M.canis, T.menta- |
| Gęsi | 6 | 3,0 | grpphyte.s i T.Verrucosum po |
| Niedźwiedzie | 3 | 1,0 | bezpośrednim kontakcie ze |
| Psy | 8 | 0,5 | źródłami zakażenia |
| Lamy | 2 | 3,0 |
175 059
Tabela 10
| Zwierzęta | Liczba | Dawka (cm3) | Skuteczność |
| Czarne pantery | 5 | 7,0 | Chore na mikrosporozę zwią- |
| Czarne pantery | 3 | 4,0 | zaną z grzybem M. canis. Wy- |
| Konie | 3 | 1/0 | leczenie nastąpiło 12 do 25 |
| Kucyki | 2 | 0,5 | dni po immunizacji |
| Lwy | 3 | 10 | |
| Tygrysy | 3 | 10 | |
| Psy | 4 | 0,5 | |
| Niedźwiedź | 1 | 5,0 | |
| Hiena | 1 | 5,0 | |
| Koty domowe | 15 | 1,5 | Chore na mikrosporozę zwią- |
| Psy | 5 | 0,5 | zaną z grzybem M.canis. Wy- |
| Konie | 5 | 0,7 | leczenie nastąpiło 10 do 20 dni po immunizacji |
| Czarna pantera | 1 | 6, 0 | Chore na trichofitozę zwią- |
| Rude lisy | 4 | 1,0 | zaną z grzybem T.mentagrop- |
| Niedźwiedzie | 2 | 5,0 | hytes. Wyleczenie nastąpiło |
| Owca górska | 1 | 7,0 | 12 do 15 dni po immunizacji |
| Konie | 15 | 1,0 | Chore na mikrosporozę związana z grzybem M.eouinum. Wyleczenie nastąpiło 12 do 20 dni po immunizacji |
Piśmiennictwo (1) Aisenberg A. a. Noskow A. I, Kolovatsky P. P. Primenienie Yuglona v Veterinarii (Zastosowanie Youglonu w Weterynarii) w Naukowo-Technicznym Biuletynie Informacyjnym Państwowego Naukowego Komitetu Kontroli Rady Ministrów Mołdawii, (1958) str. 88 (2) Patent ZSRR nr 548947(1976)
Claims (6)
1. Sposób wytwarzania inaktywowanej szczepionki przeciw grzybicy skóry, polegający na hodowli szczepów na pożywce agar/brzeczka piwna, znamienny tym, że co najmniej jeden z poniższych szczepów dermatofitów Trichophyton verrucosum nr VKPGF-931/410 (DSM nr 7277) albo Trichophyton mentagrophytes nr VKFGF-930/1032 (DSM-nr 7279) albo Trichopjhyton equinum nr VKFGF-929/381 (DSM 7276) albo Microsporum canis nr VKFGF-928/1393 (DSM nr 7281) albo Microsporum canis var obesum nr VKFGF 727/1311 (DSM nr 7280) albo Microsporum canis var distortum nr VKFGF-728/120 (DSM nr 7275) albo Microsporum gypseum nr VKFGF-729/59 (DSM nr 7274) hoduje się na stałej pożywce agar/brzeczka piwna, następnie homogenizuje masę grzyba w roztworze wodnym, fizjologicznie dopuszczalnym rozpuszczalniku, homogenizat zawierający żywą masę komórkową ustawia się na stężenie wynoszące 40 do 120 milionów mikrokonidiów w 1 cm3, inkubuje jeden do dwóch dni w temperaturze pokojowej i następnie inaktywuje CgH^SNaHg.
2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że stosuje się roztwór wodny zawierający 0,2-2% wagowe sfermentowanego zhydrolizowanego białka mięśni, 5-12% wagowych glukozy i 0,1-1,2% wagowych wyciągu z drożdży.
3. Sposób według zastrz. 1 albo 2, znamienny tym, że stężenie mikrokonidiów ustawia się na wartość 90 milionów w 1 cm3.
4. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że w przypadku gdy stosuje się więcej niż jeden szczep dermatofitów to wszystkie etapy sposobu prowadzi się oddzielnie dla każdego szczepu i tak po zmieszaniu razem wytwarza się szczepionkę.
5. Sposób według zastrz. 4, znamienny tym, że miesza się następujące dermatofity Trichophyton verrucosum nr VKPGF-931/410 (DSM nr 7277 i Trichophyton mentagrophytes nr VKPGF-930/1032 (DSM nr 7279) i Trichophyton sarkisovii nr VKPGF-551/68 (DSM nr 7278).
6. Sposób według zastrz. 4 albo 5, znamienny tym, że ewentualnie miesza się następujące dermatofity Trichophyton verrucosum nr VKPGF-931/410 (DSM nr 7277) i Trichophyton mentagrophytes nr VKPGF-930/1032 (DSM nr 7279) i Tritichophyton equinum nr VKPGF929/381, DSM nr 7276, i Trichophyton sarkisovii nr VKPGF-551/68 (DSM nr 7278) i Microsporum canis nr VKPGF-928/1393 (DSM nr 7281) i Microsporum canis var. obesum nr VKPGF-727/1311 (DSM nr 7280) i Microsporum canis var. distortum nr VKPGF-728/120 (DSM nr 7275) i Microsporum gypseum nr VKPGF-729/59 DSM nr 7274).
Niniejszy wynalazek dotyczy sposobu wytwarzania szczepionek przeciw grzybicy skóry.
Grzybice skóry u zwierząt są to antropozoonozy skóry i związanych z nią tkanek. Objawy kliniczne charakteryzują się utratą owłosienia w dotkniętych okolicach, przekrwieniem, łuszczenie się i strupami podobnymi do azbestu. Stanowi zapalnemu często towarzyszy ropienie. Grzybice skóry często również odznaczają się miejscowym zakażeniem skóry.
Dermatomykozy zwierząt mają istotne znaczenie socjoekonomiczne. Chore zwierzęta wymagają długiego leczenia i mogą rozprzestrzeniać zakażenie na inne zwierzęta jak i ludzi.
Dotychczas grzybice skóry leczono różnego rodzaju lekami, stosowanymi miejscowo na dotknięte okolice skóry. Obejmowały one maści YaM, Yuglon(I), oraz szereg innych maści, przymoczek, roztworów i innych środków zawierających fungicydy i czynniki fungistatyczne.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU915006861A RU2020959C1 (ru) | 1991-10-21 | 1991-10-21 | Вакцина поливак-тм для профилактики и лечения дерматофитозов животных |
| PCT/EP1992/002391 WO1993007894A1 (de) | 1991-10-21 | 1992-10-17 | Dermatomykose-vakzine |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL299982A1 PL299982A1 (en) | 1994-04-18 |
| PL175059B1 true PL175059B1 (pl) | 1998-10-30 |
Family
ID=21587621
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL92299982A PL175059B1 (pl) | 1991-10-21 | 1992-10-17 | Sposób wytwarzania inaktywowanej szczepionki przeciw grzybicy skóry |
Country Status (23)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US6872399B2 (pl) |
| EP (1) | EP0564620B1 (pl) |
| JP (2) | JP3701304B2 (pl) |
| KR (1) | KR100262980B1 (pl) |
| AT (1) | ATE177009T1 (pl) |
| BG (1) | BG63064B2 (pl) |
| CA (1) | CA2097702C (pl) |
| CZ (1) | CZ287995B6 (pl) |
| DE (3) | DE19975045I2 (pl) |
| DK (1) | DK0564620T3 (pl) |
| ES (1) | ES2127761T3 (pl) |
| GR (1) | GR3029663T3 (pl) |
| HK (1) | HK1010682A1 (pl) |
| HU (1) | HU219263B (pl) |
| LU (1) | LU91007I2 (pl) |
| MX (1) | MX9206000A (pl) |
| NL (1) | NL300112I2 (pl) |
| PL (1) | PL175059B1 (pl) |
| PT (1) | PT100989B (pl) |
| RU (1) | RU2020959C1 (pl) |
| SG (1) | SG49872A1 (pl) |
| SK (1) | SK280570B6 (pl) |
| WO (1) | WO1993007894A1 (pl) |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2020959C1 (ru) | 1991-10-21 | 1994-10-15 | Игорь Дмитриевич Поляков | Вакцина поливак-тм для профилактики и лечения дерматофитозов животных |
| GB2304347A (en) | 1995-08-11 | 1997-03-19 | Boeringer Ingelheim Vetmedica | Antigenic preparations |
| EP0834322A3 (en) | 1996-10-04 | 1998-04-22 | BOEHRINGER INGELHEIM INTERNATIONAL GmbH | Mycosis vaccine |
| WO2001015725A1 (en) * | 1998-09-24 | 2001-03-08 | Alpharma As | Vaccine for the protection of a vertebrate animal against fungal skin infection |
| CZ20012732A3 (cs) * | 2001-07-27 | 2002-08-14 | Bioveta, A.S. | Vakcína proti dermatofytózám a způsob její výroby |
| EA025263B1 (ru) * | 2014-06-23 | 2016-12-30 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Производственный Центр Пробиотех" | Разбавитель-адъювант для сухой живой вакцины против трихофитии крупного рогатого скота |
| HRP20211604T1 (hr) | 2016-03-15 | 2022-01-21 | Igor Polyakov | Kompozicije za liječenje i prevenciju bolesti kopita i kandži |
| CN107988134B (zh) * | 2018-01-19 | 2021-07-27 | 中国农业大学 | 一种提高芽孢杆菌产芽孢率的菌种驯化方法 |
| RU2727766C1 (ru) * | 2019-12-16 | 2020-07-23 | Александр Юрьевич Ханис | Способ изготовления инактивированной вакцины против дерматофитозов животных |
Family Cites Families (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU548947A1 (ru) | 1975-09-05 | 1980-02-05 | Всесоюзный Ордена Ленина Институт Экспериментальной Ветеринарии Васхнил | Вакцина дл специфической профилактики и трерапии трихофитии лошадей |
| US4129647A (en) | 1977-10-17 | 1978-12-12 | Edmund Klein | Treatment of acne |
| NO153458C (no) * | 1978-06-07 | 1986-03-26 | Inst Experimentalnoi Veterinar | Fremgangsm¨te for fremstilling av vaksine for profylakse o g behandling av ringorm hos pelsdyr og kaniner for¨rsaket av trichophyton mentagrophytes. |
| US4657761A (en) | 1985-06-05 | 1987-04-14 | Pinto Cesar M | Polyvalent non-specific immuno-stimulating vaccine and method |
| CA2011896C (en) * | 1989-04-21 | 2001-05-08 | Mark Werner | Ringworm vaccine |
| US5277904A (en) * | 1990-10-26 | 1994-01-11 | Pier Allan C | Broad spectrum dermatophyte vaccine |
| US5284652A (en) * | 1990-10-26 | 1994-02-08 | Pier Allan C | Dermatophyte vaccine |
| RU2020959C1 (ru) * | 1991-10-21 | 1994-10-15 | Игорь Дмитриевич Поляков | Вакцина поливак-тм для профилактики и лечения дерматофитозов животных |
| GB2304347A (en) * | 1995-08-11 | 1997-03-19 | Boeringer Ingelheim Vetmedica | Antigenic preparations |
| EP0834322A3 (en) * | 1996-10-04 | 1998-04-22 | BOEHRINGER INGELHEIM INTERNATIONAL GmbH | Mycosis vaccine |
| ATE493139T1 (de) * | 1997-04-18 | 2011-01-15 | Ganeden Biotech Inc | Oberflächige verwendung von probiotischen bacillussporen zur verhinderung oder bekämpfung von mikrobiellen infektionen |
| US6645506B1 (en) * | 1997-04-18 | 2003-11-11 | Ganeden Biotech, Inc. | Topical compositions containing extracellular products of Pseudomonas lindbergii and Emu oil |
| WO2001015725A1 (en) * | 1998-09-24 | 2001-03-08 | Alpharma As | Vaccine for the protection of a vertebrate animal against fungal skin infection |
| DE69942420D1 (de) * | 1998-10-09 | 2010-07-08 | Mitsui Sugar Co | Präventiva/mittel für infektion, anti-endotoxin mittel, impfstoff-adjuvanzien sowie wachstumspromotoren |
| US6436926B1 (en) * | 1999-05-10 | 2002-08-20 | Medpointe, Inc. | Compositions and methods for treating superficial fungal infections |
| RU2192885C2 (ru) * | 2001-01-30 | 2002-11-20 | Ханис Александр Юрьевич | Способ изготовления вакцины для профилактики и лечения дерматофитозов домашних и лабораторных животных |
-
1991
- 1991-10-21 RU SU915006861A patent/RU2020959C1/ru active
-
1992
- 1992-10-17 DK DK92921537T patent/DK0564620T3/da active
- 1992-10-17 EP EP92921537A patent/EP0564620B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-10-17 WO PCT/EP1992/002391 patent/WO1993007894A1/de active IP Right Grant
- 1992-10-17 SK SK710-93A patent/SK280570B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1992-10-17 DE DE1999175045 patent/DE19975045I2/de active Active
- 1992-10-17 PL PL92299982A patent/PL175059B1/pl unknown
- 1992-10-17 CZ CZ19931448A patent/CZ287995B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1992-10-17 ES ES92921537T patent/ES2127761T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-10-17 AT AT92921537T patent/ATE177009T1/de active
- 1992-10-17 CA CA002097702A patent/CA2097702C/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-10-17 KR KR1019930701798A patent/KR100262980B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1992-10-17 DE DE9218921U patent/DE9218921U1/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-10-17 SG SG1996007973A patent/SG49872A1/en unknown
- 1992-10-17 HU HU9301798A patent/HU219263B/hu unknown
- 1992-10-17 JP JP50743793A patent/JP3701304B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1992-10-17 DE DE59209641T patent/DE59209641D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-10-19 MX MX9206000A patent/MX9206000A/es unknown
- 1992-10-20 PT PT100989A patent/PT100989B/pt not_active IP Right Cessation
-
1993
- 1993-10-07 BG BG98143A patent/BG63064B2/bg not_active Expired - Lifetime
-
1998
- 1998-10-21 HK HK98111435A patent/HK1010682A1/xx not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-03-12 GR GR990400747T patent/GR3029663T3/el unknown
-
2002
- 2002-02-28 US US10/085,703 patent/US6872399B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2003
- 2003-01-21 NL NL300112C patent/NL300112I2/nl unknown
- 2003-01-31 LU LU91007C patent/LU91007I2/fr unknown
-
2004
- 2004-04-21 US US10/828,790 patent/US7235246B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2004-10-27 JP JP2004312599A patent/JP2005029578A/ja not_active Withdrawn
-
2007
- 2007-05-15 US US11/748,786 patent/US7666440B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7666440B2 (en) | Dermatomycosis vaccine | |
| AU615470B2 (en) | Intranasal vaccination of horses with inactivated microorganisms or antigenic material | |
| RU2442603C2 (ru) | Вакцина против вируса синего языка и иммуногенные композиции, способы их применения и способы их получения | |
| CN108721616B (zh) | 一种禽巴氏杆菌荚膜多糖-蛋白结合疫苗及其制备方法 | |
| SU548947A1 (ru) | Вакцина дл специфической профилактики и трерапии трихофитии лошадей | |
| US4386065A (en) | Vaccine against EAE | |
| CN105497885B (zh) | 一种亚单位疫苗及其制备方法和应用 | |
| KR101209964B1 (ko) | 돼지 다발성 장막염 예방용 백신 조성물 및 그 제조방법 | |
| KR101210082B1 (ko) | 돼지 다발성 장막염 예방용 백신 조성물 및 그 제조방법 | |
| DK2376113T3 (en) | PREPARATIONS AND DOSAGE REGIMES WHICH INCLUDES A CLOSTRIDIUM VACCINE AND levamisole | |
| SU955571A1 (ru) | Вакцина ТФ-130 (К) против трихофитии крупного рогатого скота и способ профилактики лечени трихофитии крупного рогатого скота | |
| CN103937706B (zh) | 猪鼻支原体菌株及其灭活疫苗和应用 | |
| SU835446A1 (ru) | Вакцина дл специфической профилактики и лЕчЕНи ТРиХОфиТии пушНыХ зВЕРЕй иКРОлиКОВ-MEHTABAK,СпОСОб изгОТОВлЕНи ВАКциНы и СпОСОб EE иСпОльзОВАНи | |
| RU2504400C1 (ru) | Вакцина ассоциированная против парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рогатого скота эмульсионная инактивированная | |
| CN107299088B (zh) | 牛传染性鼻气管炎病毒ibrv-b株及其应用 | |
| RU2018321C1 (ru) | Вакцина против трихофитии животных | |
| Spiridonov et al. | Clinical trial results of an associated vaccine against cattle clostridiosis and escherichiosis | |
| RU2013445C1 (ru) | Штамм гриба trichophyton mentagrophytes, используемый для изготовления вакцины против трихофитии животных | |
| US20040151726A1 (en) | Novel vaccine for prophylaxis and theraphy in vetirinary and human medicine | |
| Ibrahim et al. | Use of Carbopol as an adjuvant in preparation of inactivated rabbit pasteurellosis vaccine | |
| KR101159921B1 (ko) | 돼지 다발성 장막염 예방용 백신 | |
| Kita et al. | Evaluation of the attenuated Vaccine Para‐Ribovac | |
| CN1759886A (zh) | 动物免疫增强剂细胞因子佐剂鸡新城疫活疫苗（cc株） |