PL163940B1 - Srodek konserwujacy zywnosc i dezynfekujacy PL PL PL PL - Google Patents

Srodek konserwujacy zywnosc i dezynfekujacy PL PL PL PL

Info

Publication number
PL163940B1
PL163940B1 PL90284095A PL28409590A PL163940B1 PL 163940 B1 PL163940 B1 PL 163940B1 PL 90284095 A PL90284095 A PL 90284095A PL 28409590 A PL28409590 A PL 28409590A PL 163940 B1 PL163940 B1 PL 163940B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
nisin
lysostafin
agent
compositions
surfactant
Prior art date
Application number
PL90284095A
Other languages
English (en)
Other versions
PL284095A1 (en
Inventor
Peter Blackburn
Sara-Ann Gusik
June Polak
Stephen D Rubino
Original Assignee
Applied Microbiology
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Applied Microbiology filed Critical Applied Microbiology
Publication of PL284095A1 publication Critical patent/PL284095A1/xx
Publication of PL163940B1 publication Critical patent/PL163940B1/pl

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/164Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/50Isolated enzymes; Isolated proteins
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04Antibacterial agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00Antineoplastic agents
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02ATECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Food Preservation Except Freezing, Refrigeration, And Drying (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

1. Srodek konserwujacy zywnosc i dezynfekujacy, zawierajacy nosnik i substancje czynna, która zawiera nizyne, znamienny tym, ze jako substancje czynna zawiera kompozycje zawierajaca obok nizyny równiez lizostafine i ewentualnie czynnik chelatu- jacy i/lub czynnik powierzchniowo czynny. PL PL PL PL

Description

Przedmiotem wynalazku jest środek konserwujący żywność i dezynfekujący.
Bakteriocyny, takie jak lizostafina i nizyna są białkami wytwarzanymi przez bakterie, hamującymi, a czasami zabijającymi bakterie blisko spokrewnione. Lizostafina jest bakteriocyną, która lizuje i zabija praktycznie wszystkie znane gatunki Staphylococcus, lecz nieaktywna jest wobec bakterii innych rodzajów. Lizostafina izolowana z przesączy hodowli Staphylococcus simulans (NRRL B-2628) hodowanego zgodnie z opublikowaną literaturą jest endopeptydazą rozcinającą łączniki poliglicynowe peptydoglikanu, znajdującego się w ścianach komórkowych Staphylococcus. Hodowle S. simulans, prowadzone w warunkach indukujących wytwarzanie lizostafiny, są odporne na bakteriocynę, podczas gdy takie same hodowle prowadzone w warunkach, w których lizostafina nie jest wytwarzana, są wrażliwe na bakteriocynę.
Lizostafinajest bakteriocyną występującą naturalnie, wydzielaną przezjeden znany szczep
S. simulans, pierwotnie wyizolowany i nazwany Staphylococcus staphylolyticus przez Schindlera i Schuhardta. Wytwarzanie lizostafiny opisano uprzednio w opisie patentowym St. Zjedn. Ameryki nr 3 278 378 i w Proceedings of the National Academy of Sciences, 51:414-421 (1964). Pojedynczy szczep S. staphylolyticus (NRRL B-2628) wytwarzający lizostafinę został ostatnio zidentyfikowany przez Sloana i innych, Int. J. System. Bacteriol., 32: 170-174 (1982) jako odmiana S. Simulans. Ponieważ nazwa S. staphylolyticus nie występuje w Approved List of Bacterial Names, organizm wytwarzający lizostafinę przemianowano na S.simulans.
Uprzednio wykazano, że penicylina i inne antybiotyki mogą wzmacniać działanie lizostafiny (patrz, będące jednocześnie przedmiotem postępowania patentowego, zgłoszenie patentowe St. Zjedn. Ameryki numer 188 183 Blackburna i innych złożone 28 kwietnia 1988 r.)
Nizynę, chociaż czasami określa się jako antybiotyk peptydowy, właściwiej określić należy jako bakteriocynę. Nizyna w przyrodzie wytwarzana jest przez różne szczepy bakterii Streptococcus lactis. Jest ona środkiem konserwującym żywność, stosowanym do hamowania
163 940 kiełkowania endospor pewnych gatunków Gram-dodatnich laseczek, włącznie z tymi pochodzącymi od Clostridium, które są odpowiedzialne za zatrucie żywności jadem kiełbasianym. Podsumowanie właściwości nizyny można znaleźć w Hurst, Advances in Applied Microbiology, 27:85-123 (1981). Publikacja ta opisuje to, co jest ogólnie wiadome o nizynie. Nizyna wytwarzana przez Streptococcus lactis jest dostępna w handlu w postaci nieoczyszczanego preparatu Nisaplin TM (Aplin and Barret Ltd., Dorset, Anglia).
Nizyna należy do klasy peptydów zawierających lantioninę. Klasa ta obejmuje także subtylinę, epiderminę, cynamycę, duramycynę, ankoweninę i Pep 5. Każdy z tych peptydów bakteriocynowych wytwarzany jest przez inny mikroorganizm. Jednakże, subtylina otrzymywana z pewnych hodowli B. subtilis i epidermina otrzymywana z pewnych hodowli Staphylococcus epidermis, posiadają strukturę molekularną bardzo podobną do struktury nizyny (Hurst, strony 85-86 i Schnell i inni, Nature 333: 276-278). Zgodnie z wynalazkiem stwierdzono, że podobne strukturalnie, zawierające lantioninę peptydy bakteriocynowe są skuteczne zamiast nizyny.
Nizynę stosowano skutecznie jako środek ochronny konserwujący sery i produkty mleczne. Zastosowanie nizyny w konserwacji serów było przedmiotem ostatnich patentów (opisy patentowe St. Zjed. Ameryki nr nr 4 584 199 i 4 597 972). Zastoswanie do hamowania kiełkowania pewnych Gram-dodatnich endospor bakteryjnych zostało dobrze udokumentowane. (Taylor, opisy patentowe St. Zjedn. Ameryki nr nr 5 584 199 i 4 597 972 Tsai i Sandin, Conjugal Transfer of Nisin Plasmid Genes from Streptococcus lactis 7962 to Leuconostoc dextranicum 181’, Applied and Environmental Microbiology, strona 3(1987); A Natural Preservative, Food Engineering International, strony 37-38 (1987); Focus on Nisin, Food Manufacture, strona 63 (1987). Naturalnie występująca nizyna jest czasami stwierdzana w niskich stężeniach w mleku i serze, i sądzi się, że jest całkowicie nietoksyczna i niealergenna dla ludzi. Nizyna została ostatnio uznana przez FDA za bezpieczną jako bezpośredni składnik pokarmowy w pasteryzowanych pastach serowych (pasteurized cheese spread); pasteryzowanych, konserwowanych pastach serowych lub pasteryzowanych, konserwowanych pastach serowych z owocami, warzywami lub mięsem. Ponieważ nizynajest białkiem, wszystkiejej cząsteczki w przyjętym pokarmie są szybko degradowane przez enzymy trawienne.
Ogólna akceptacja nizyny jako środka konserwującego żywność została ograniczona przez informację, że aktywność nizyny jako bakteriocyny jest organiczona tylko bakteriami Gram-dodatnich ściśle spokrewnionych z gatunkiem bakterii ją wytwarzającym. Ponadto, nie wykazano uprzednio aktywności bakteriobójczej nizyny wobec bakterii Gram-ujemnych. Ponieważ zanieczyszczenia i psucie się pokarmu są wynikiem występowania różnorodnych bakterii Gramdodatnich i Gram-ujemnych, nie jest zaskakujące, że nizyna uzyskała jedynie ograniczoną akceptację jako środek konserwujący żywność. Co więcej, z powodu dotychczas ograniczonej aktywności nizyny jako bakteriocyny, jej zastosowanie poza artykułami żywnościowymi nie było dotąd sygnalizowane.
Ostatnio wykazano, że kompozycja zawierająca nizynę i czynniki niebakteriobójcze, takie jak czynniki chelatujące lub powierzchniowo czynne, posiadają aktywność bakteriobójczą w stosunku do szerokiego zakresu bakterii Gram ujemnych i wzmocnioną aktywność w stosunku do szerokiego zakresu bakterii Gram-dodatnich. Wykazano, np. że na wzmocniony środek bakteriobójczy wrażliwe są bakterie Gram-ujemny, takie jak Salmonella typhimirium, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Bacterioides gingivalis i Actinobacillus actinomycetescomitans. Bakteriami Gram-dodatnimi, które jak wykazano, wrażliwe są na wzmocniony środek bakteriobójczy, są Staphylococcus aureus, Streptococcus mutans, Listeria monocytogenes, Streptococcus agalactiae i maczugowce. (Patrz, będące jednocześnie przedmiotem postępowania patentowego, zgłoszenie patentowe St.Zjed.Ameryki Blackburna i inych, zatytułowane Nisin Compositions For Use as Enhanced, Broad Range Bactericides, które jest kontynuacją w części zgłoszenia patentowego St.Zjed.Ameryki nr 209 861 złożonego 22 czerwca 1988 roku).
Stwierdzono nieoczekiwanie, że przez połączenie dwóch bakteriocyn można zaskakująco wzmocnić aktywność bakteriocyn, takich jak lizostafina i nizyna oraz zwiększyć ogólny zakres i szybkość ich działania. Właściwości nowych kompozycji bakteriocyn, zawierających jednocześnie lizostafinę i nizynę, powinny ulegać wzmocnieniu przez dodanie czynników chelatują4
163 940 cych i/lub powierzchniowo czynnych, które wzmacniają iposzerzają zakres aktywności zarówno nizyny jak i lizostafiny.
Nowy środek konserwujący żywność i dezynfekujący zawiera nośnik i substancję czynną, która zawiera nizynę, przy czym zgodnie z wynalazkiem jako substancję czynną zawiera kompozycję, zawierającą obok nizyny również lizostafinę i ewentualnie czynnik chelatujący i/lub czynnik powierzchniowo czynny. Substancja czynna jest rozpuszczona lub zawieszona w odpowiednim nośniku, np. rozpuszczalniku lub ciekłym, stałym bądź koloidalnym podłożu. Środek według wynalazku zawiera lizostafinę w ilości wystarczającej, aby był skuteczny wobec Staphylococcus, a nizynę w ilości wystarczającej do wzmocnienia wpływ bakteriobójczego lizostafiny wobec Staphylococci. Jak wspomniano, korzystnie środek według wynalazku zawiera lizostafinę, nizynę i czynnik chelatujący, a może zawierać także czynnik powierzchniowo czynny. W takim środku, lizostafina i nizyna obecne są w tym samym zakresie stężeń jak w środku zawierającym lizostafinę, nizynę i czynnik chelatujący który jest obecny w ilości wystarczającej do wzmacniania bakteriobójczego wpływu nizyny wobec bakterii, zarówno Gram-dodatnich jak i Gram-ujemnych. Korzystnie, środek według wynalazku zawiera lizostafinę, nizynę i czynnik powierzchniowo czynny, jak również nośnik. Nowy środek konserwujący żywność i dezynfekujący zawiera środek powierzchniowo czynny, w ilości wystarczającej do wzmocnienia bakteriobójczego wpływu nizyny i lizostafiny wobec bakterii Gram- dodatnich.
Kompozycję lizostafina/nizyna stosuje się do zwalczania i zapobiegania zanieczyszczeniom bakteryjnym, zarówno bezpośrednio, jak i przez jej rozpuszczenie w odpowiednim rozpuszczalniku lub zawieszenie w odpowiednim podłożu. Tak otrzymywany środek stosuje się na pozostający pod jego wpływem obszar lub przez dodanie go do innej kompozycji.
Większość chemicznych środków konserwujących żywność jest zbyt żrących lub w inny sposób zbyt toksycznych, aby mogły zostać użyte w przypadku żywności, natomiast większość antybiotyków działa zbyt wolno, aby były użyteczne jako środki dezynfekujące i konserwujące żywność i nie są dozwolone do stosowania w przypadku żywności z powodu ryzyka nabytej oporności na antybiotyki, która mogłaby towarzyszyć takim zastosowaniom. Nowy środek według wynalazku nie jest żrący ani toksyczny i jest odpowiedni do stosowania w przypadku żywności oraz skuteczny wobec bakterii opornych na antybiotyki, a także szybko działa na dzielące się i niedzielące się bakterie, tak że jest użyteczny także jako środek dezynfekujący.
Środek według wynalazku można stosować do czyszczenia instrumentów medycznych itp., i w okolicznościach gdzie pożądana jest dezynfekcja otoczenia, lub gdzie chemiczne środki bakteriobójcze wykluczone są z powodu żrących lub w inny sposób toksycznych właściwości. Można stosować go również w środkach konserwujących żywność, o szerokim zakresie działania, a szczególnie do traktowania mięsa, drobiu, jaj, serów i ryb, pakowania i przewozów żywności, oraz do zwalczania i zapobiegania zanieczyszczeniom surowych składników, przetworów i napojów przez patogeny bakteryjne i inne mikroorganizmy odpowiedzialne za psucie się żywności.
W przeciwieństwie do aktywności większości znanych środków o szerokim zakresie działania, która to aktywność ulega zakłócaniu przez obecność złożonej materii organicznej, środki według wynalazku są skuteczne w obecności materii organicznej, takiej jak mleko.
Środek według wynalazku, jak wspomniano, zawiera lizostafinę, nizynę, i czynnik chelatujący lub lizostafinę, nizynę, czynnik chelatujący i czynnik powierzchniowo czynny. W celu uzyskania wzmocnionego działania o szerokim zakresie, wspomniane kompozycje rozpuszcza się odpowiednim rozpuszczalniku lub zawiesza w odpowiednim podłożu.
Korzystne jest rozpuszczenie substancji czynnej środka w ciekłym nośniku lub zawieszenie w ciekłym, koloidalnym lub polimorficznym podłożu, tak że lizostafina obecna jest w zakresie stężeń od 0,1 do 100 gg/ml i jej działanie ulega wzmocnieniu przez obecność bakteriocyny nizyny w zakresie stężeń od 0,1 do 300 gg/ml. Taki środek według wynalazku jest znacznie skuteczniejszy wobec Staphylococcus niż sama lizostafina. Ponadto, całkowita aktywność bakteriobójcza nowego środka według wynalazku rozszerza się, zatem jst on silny i skuteczny wobec szerokiego zakresu gatunków bakterii zarówno Gram-ujemnych, jak i Gram-dodatnich jeśli działanie nizyny wzmacniane jest przez czynnik chelatujący. Połączenie lizostafiny, nizyny i czynnika chelatującego także osiąga szerszy zakres aktywności bakteriobójczej przez dodanie czynnika powierzchniowo czynnego.
Nizyna np. jest aktywowana i wzmacniana wobec szerokiego zakresu bakterii Gram-dodatnich przez czynniki chelatujące, takie jak kwas etylenodiaminotetraoctowy (EDTA) w zakresie stężeń od 0,1 do 20,0 mM. W obecności EDTA nizyna posiada aktywność bakteriobójczą wobec bakterii Gram-ujemnych, a jej aktywność wobec bakterii Gram-dodatnich jest wzmocniona - jest ona aktywna w szerszym zakresie pH i wobec szerszego zakresu bakterii Gram-dodatnich. Ponadto, obecność czynnika powierzchniowo czynnego w zakresie stężeń od 0,01% do 1% poprawia skuteczność nizyny wobec bakterii Gram-dodatnich. Odpowiednie niejonowe czynniki powierzchnioow czynne obejmują, lecz nie są ograniczone do polioksy alkilofenoli (np. Triton X-100), polioksyalkilosorbitanów (np. Tweeny) i acylogliceroli, czyli glicerydów (np. monolaurynin glicerolu, dioleinian glicerolu). Odpowiednie jonowe czynniki powierzchniowo czynne obejmują, lecz nie są organiczone do emulgatorów i kwasów tłuszczowych, związków czwartorzędowych i anionowych czynników powierzchniowo czynnych (np. sodowy siarczan dodecylu) i amfoterycznych środków powierzchniowo czynnych (np. betaina kokamidopropylu).
Odpowiednie nośniki wchodzące w skład środka według wynalazku obejmują, lecz nie są ograniczone do ogólnie znanych buforów wodnych. Odpowiednie podłoża do zawiesin nowych kompozycji obejmują, lecz nie są ograniczone do rozpuszczalników organicznych, zawiesin koloidalnych i polimerów, zgodnych ze środkiem według wynalazku.
Stosowaną w środku według wynalazku lizostafinę można wytwarzać techniką fermentacyjną, w której hoduje się S.simulans w hodowli płynnej. Takie techniki fermentacyjne opisano w opisie patentowym St. Zjedn. Ameryki nr 3 278 378 i w Proceedings of the National Academy of Sciences, 51:414 - 421 (1964). Uczyniono także różne ulepszenia w wytwarzaniu lizostafiny technikami fermentacyjnymi, jak udokumentowano w opisach patentowych St. Zjedn. Ameryki nr 3 398 056 i 3 594 284. Te ostatnie dwa odnośniki ujawniają ulepszenie podłoża hodowlanego i techniki inokulacji, dzięki czemu można przyspieszyć i ulepszyć wytwarzanie lizostafiny przez fermentację.
Ponadto lizostafinę wytwarzać mogąrekombinowane mikroorganizmy, włącznie ze szczepami Escherichia coli, Bacillus subtilis i Bacillus sphaericus. Metodę otrzymywania lizostafiny z mikroorganizmów stransformowanych rekombinowanymi plazmidami kodującymi gen lizostafiny w pełni ujawnia zgłoszenie patentowe St. Zjedn. Ameryki nr 034 464, które jest kontynuacją w części zgłoszenia patentowego St. Zjedn. Ameryki nr 852 407. Oba zgłoszenia są tu włączone jako odnośniki literaturowe. Korzystne jest otrzymywanie lizostafiny ze szczepu OOB sphaericus, zawierającego zrekombinowany plazmid, kierujący syntezę lizostafiny. Zapewnia to wytwarzanie wysokich ilości lizostafiny zasadniczo wolnych od immunogennych zanieczyszczeń stafylokokowych i ułatwia jej oczyszczenie, ponieważ akumuluje się ona bezpośrednio w pobliżu hodowlanym. Stwierdzono, że szczególnie odpowiednio do tego clu są transformanty B. sphaericus, zawierające plazmidy pBC16-1L lub pROJ6649-IL, chociaż inne szczepy są także użyteczne jako źródło lizostafiny. Plazmidy te w pełni opisano we wspomnianych powyżej, będących jednocześnie przedmiotem postępowania patentowego, zgłoszeniach.
Wytwarzana przez S. simulans, podczas fazy wzrostu wykładniczego, lizostafina ulega najpierw sekrecji w postaci nieaktywnego prekursora, który procesowany jest zewnątrzkomórkowo do dojrzałej, aktywnej bakteriocyny przez proteazę wytwarzaną w stacjonarnej fazie wzrostu. W przeciwieństwie do lizostafiny wytwarzanej naturalnie, lizostafina wytwarzana przez rekombinowany szczep B. sphaericus, jak opisano w zgłoszeniu patentowym St. Zjedn. Ameryki nr 034 464, akumuluje się zewnątrzkomórkowo jako dojrzałe, aktywne białko podczas fazy wzrostu wykładniczego.
Nizynę można otrzymać w handlu w postaci nieoczyszczanego preparatu Nisaplin z Aplin und Barret, Ltd., Dorset, Anglia lub też przez wyizolowanie nizyny występującej naturalnie z hodowli Streptococcus lactis i następnie zatężanie jej znanymi metodami. Donoszono także o metodzie wytwarzania nizyny przy użyciu zmienionych szczepów Streptococcus, (Gonzales i inni, opis patentowy St. Zjedn. Ameryki nr 4 716 115 (1987)). Powinno byż także możliwe wytwarzanie nizyny przez rekombinację DNA. Nizyna jest członkiem rodziny bakteriocyn
163 940 zawierających lantioninę. Przypuszcza się, z powodu podobieństwa strukturalnego, że bakteriocyny zawierające lantioninę będą równie skuteczne jak nizyna w połączeniu z lizostafiną.
Następujące przykłady zilustrują dalej wynalazek i wykażą skuteczność nowego środka konserwującego żywność i dezynfekującego według wynalazku. Środek według wynalazku zawierający kompozycje lizostafiny, nizyny i czynnika chelatującego ma wzmocnioną aktywność bakteriobójczą w porównaniu z kompozycją lizostafiny i nizyny.
Wszystkie testy w poniższych przykładach przeprowadzano w temperaturze 37°C. Skuteczność środków według wynalazku określano przez oznaczanie aktywności bakteriobójczej mierzonej jako procent bakterii przeżywających traktowanie tymi środkami. Ogólnie, po inkubacji zawiesiny 107 komórek na ml badanego gatunku z nowym środkiem według wynalazku przez wyszczególnione okresy czasu, bakterie zbierano przez wirowanie przez 2 minuty. Od osadu bakterii odpłukiwano środek buforem do odpłukiwania, nazwanym tutaj buforem fagowym (50 mM Tris-HCl pH 7,8 1 mM MgSO4, 4 mM CaCl2, 0,1 M NaCl i 1% żelatyna), osad ponownie zawieszano i wykonywano szereg rozcieńczeń buforem fagowym, po czym 100 μΐ zawieszonych bakterii rozprowadzano na płytki z agarem odżywczym. Przeżywające bakterie oznaczano przez liczenie jednostek tworzących kolonie (CFU) po inkubacji przez 24-48 godzin w temperaturze 37°C. Skutecznym środkiem według wynalazku jest ten, który pozwala przeżyć mniej niż 0,1% początkowej liczby żywych komórek bakteryjnych.
Przykład I. Lizostafina i nizyna.
Komórki Staphylococcus aureus zawieszono i inkubowano w mleku przez 2 godziny w temperaturze 37°C z różnymi stężeniami lizostafiny, nizyny lub z połączeniami lizostafiny i nizyny w mleku. Skuteczność bakteriobójczą oszacowano przez określenie procentu przeżywających bakterii, jak opisano powyżej. Wyniki tego doświadczenia podano w tabeli 1.
Tabela 1
Aktywność bakteriobójcza lizostafiny, nizyny i ich połączenia wobec Staphylococcus aureus.
Lizostafina μβ/ιηΐ Nizyna
0 0,2 0,5 1,0 2,0 4,0
% bakterii przeżywających 2 godzinya)
0 100 45 33 9 2,5 0,5
0,5
0,1 43 0,7 2,6 0,15 0,04 0,004
5,6 10'3
1,0 10’3 10'4 - - 10’4 -
I---1-«---1(a) początkowa liczba żywych komórek bakteryjnych: 5x10 cfu/ml
Sama nizyna w mleku ma małą praktyczną aktywność bakteriobójczą wobec Staphylococci. Sama lizostafina w mleku jest bakteriobójcza wobec S. aureus i może powodować obniżenie liczby bakterii o więcej niż 5 log przy stężeniu 1,0gg/mlŚrodek według wynalazku, zawierający lizostafinę w połączeniu z nizyną daje w mleku wynik wskazujący na aktywność bakteriobójczą, znacznie i zaskakująco przewyższającą aktywność każdej z samych bakteriocyn i wyższą od ich oczekiwanego efektu addytywnego. Jest to najlepiej zilustrowane przy ograniczającym stężeniu lizostafiny (0,1 g/ml, jak przedstawiono w tabeli 1. Zatem, jeśli stosowanie lizostafiny ograniczone jest przez jej dostępną aktywność, środek według wynalazku, zawierający kompozycję bakteriocyn zawierającą lizostafinę z nizyną w odpowiednim nośniku, takim jak mleko, wykazuje aktywność o szerokim zakresie działania.
Przykład Π. Lizostafina + nizyna + EDTA + czynnik powierzchniowo czynny
Dane w tabeli 2 ilustrują bakteriobójczą skuteczność działania środka zawierającego lizostafinę, nizyna, EDTA i monoacyloglicerolowy środek powierzchniowo czyny wobec S.aureus i S. agalactiae w mleku, złożonym podłożu pokarmowym. Uprzednio wykazano, że niskie
163 940 stężenia EDTA wzmacniają aktywność nizyny, podczas gdy jego wyższe stężenia hamują aktywność nizyny, patrz, będące jednocześnie przedmiotem postępowania patentowego zgłoszenie Blackburna i innych. W mleku, wyższe stężenia EDTA mają niższy wpływ hamujący na aktywność bakteriobójczą środka.
Tabela 2
Aktywność bakteriobójcza lizostafiny, nizyny, EDTA i monoacyloglicerolu w mleku w temperaturze 37°C wobec Staphylococcus aureus i Streptococcus agalactiae
0,23 L 0,1 L
Gatunek 1,0 N 1,0 N Kontrolac
0,1 %ML 1,0%ML
% bakterii przeżywających 2 godziny
S. agalactiaeb
(McDonald) 0,0001E 0,0007E 100
S.aureus3
(Newbould) 0,004e 0,002E 100
N=gg/ml nizyna; L=pg/ml lizostafiny; MN = monolaurynian glicerolu E = zawierająca 50 mM EDTA a = początkowa liczba komórek S. aureus: 8,1 x 10' komórek/ml b = początkowa liczba komórek S. agalactiae: 6,6 x 10', komórek/ml c = brak baktriocyny i monoacyloglicerolu.
163 940
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 90 egz. Cena 10 000 zł

Claims (7)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Środek konserwujący żywność i dezynfekujący, zawierający nośnik i substancję czynną, która zawiera nizynę, znamienny tym, że jako substancję czynną zawiera kompozycję zawierającą obok nizyny również lizostafinę i ewentualnie czynnik chelatujący i/lub czynnik powierzchniowo czynny.
  2. 2. Środek według zastrz. 1, znamienny tym, że jako czynnik chelatujący zawiera czynnik wybrany z grupy obejmującej tetraoctany alkilodiaminowe, CaEDTA, NaaCaEDTA, EGTA i cytrynian.
  3. 3. Środek według zastrz. 2, znamienny tym, że jako tetraoctan alkilodiaminowy zawiera kwas etylenodiaminotetraoctowy (EDTA).
  4. 4. Środek według zastrz. 1, znamienny tym, że jako czynnik powierzchniowo czynny zawiera czynnik wybrany z grupy obejmującej Tritony, Tweeny, glicerydy, emulgatory, kwasy tłuszczowe, związki czwartorzędowe oraz amfoteryczne i anionowe czynniki powierzchniowo czynne.
  5. 5. Środek według zastrz. 1, znamienny tym, że zawiera lizostafinę w stężeniu zawartym w zakresie od 0,1 do 100 pg/ml, nizynę w stężeniu zawartym w zakresie od 0,1 do 300 (tg/ml.
  6. 6. Środek według zastrz. 1, znamienny tym, że zawiera lizostafinę w stężeniu zawartym w zakresie od 0,1 do 100 pg/ml,nizynę w stężeniu zawartym w zakresie od 0,1 do 300 pg/ml, a czynnik chelatujący w stężeniu zawartym w zakresie od 0,1 mM do 20 mM.
  7. 7. Środek według zastrz. 1, znamienny tym, że zawiera czynnik powierzchniowo czynny w stężeniu zawartym w zakresie od 0,01% do 1,0% objętości końcowej.
PL90284095A 1989-03-01 1990-03-01 Srodek konserwujacy zywnosc i dezynfekujacy PL PL PL PL PL163940B1 (pl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US07/317,627 US4980163A (en) 1989-03-01 1989-03-01 Novel bacteriocin compositions for use as enhanced broad range bactericides and methods of preventing and treating microbial infection
PCT/US1990/001053 WO1990009739A1 (en) 1989-03-01 1990-02-27 Novel bacteriocin compositions for use as enhanced broad range bactericides and methods of preventing and treating microbial infection

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL284095A1 PL284095A1 (en) 1992-09-21
PL163940B1 true PL163940B1 (pl) 1994-05-31

Family

ID=23234535

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL90284095A PL163940B1 (pl) 1989-03-01 1990-03-01 Srodek konserwujacy zywnosc i dezynfekujacy PL PL PL PL

Country Status (21)

Country Link
US (1) US4980163A (pl)
EP (1) EP0424484B1 (pl)
JP (1) JP2984744B2 (pl)
KR (1) KR0145738B1 (pl)
AT (1) ATE109624T1 (pl)
AU (1) AU618714B2 (pl)
CA (1) CA2028140C (pl)
CZ (1) CZ279273B6 (pl)
DD (1) DD301903A9 (pl)
DE (1) DE69011460T2 (pl)
DK (1) DK0424484T3 (pl)
FI (1) FI103861B1 (pl)
HU (1) HU217574B (pl)
IE (1) IE64710B1 (pl)
IL (1) IL93527A (pl)
NO (1) NO304721B1 (pl)
NZ (1) NZ232700A (pl)
PL (1) PL163940B1 (pl)
RU (1) RU2048151C1 (pl)
WO (1) WO1990009739A1 (pl)
ZA (1) ZA901499B (pl)

Families Citing this family (58)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5858962A (en) * 1987-05-11 1999-01-12 Ambi Inc. Composition for treating mastitis and other staphylococcal infections
US5260271A (en) * 1988-06-22 1993-11-09 Applied Microbiology, Inc. Nisin compositions for use as enhanced broad range bactericides
DE3938140A1 (de) * 1989-11-16 1991-08-08 Beiersdorf Ag Desodorierende kosmetische mittel
NO911341L (no) * 1990-04-20 1991-10-21 Haarmann & Reimer Corp Fremgangsmaate for aa drepe gram-negative bakterier.
EP0589893B1 (en) * 1991-04-15 1996-08-21 Applied Microbiology, Inc. Use of a bacteriocin antimicrobial agent for the manufacture of a medicament for the treatment of gastric disorders associated with Helicobacter pylori.
GB9126686D0 (en) * 1991-12-17 1992-02-12 Smithkline Beecham Plc Novel compositions
US5342612A (en) * 1991-12-20 1994-08-30 American Cyanamid Company Compositions for the treatment of mammalian diseases
DE69220679T2 (de) * 1992-01-23 1997-10-23 Morinaga Milk Industry Co. Ltd., Tokio/Tokyo Antibakterielles mittel und behandlung von gegenständen mit diesem
DE4229707A1 (de) * 1992-09-05 1994-03-10 Beiersdorf Ag Germicide Wirkstoffkombinationen
CA2148255A1 (en) * 1992-10-29 1994-05-11 Rainer Denecke Preparation for therapeutic and especially prophylactic treatment of digestive tract disorders
DE4307352A1 (de) * 1992-10-29 1994-05-05 Denecke Rainer Dr Med Vet Präparat zur Therapie und insbesondere Prophylaxe von Erkrankungen des Verdauungstraktes
GB9224598D0 (en) * 1992-11-24 1993-01-13 Smithkline Beecham Plc Novel compositions
IL107887A (en) * 1992-12-08 2003-07-06 Ambi Inc Stabilized lanthionine containing bacteriocin compositions
US5368845A (en) * 1993-01-07 1994-11-29 Colgate Palmolive Company Oral composition
US5512269A (en) * 1993-06-09 1996-04-30 Burroughs Wellcome, Co. Method of treating retained pulmonary secretions
DK0789581T3 (da) * 1993-08-20 2001-09-17 Novartis Ag Fremgangsmåde til forebyggelse og behandling af bovin mastitis
CA2121989A1 (en) * 1993-11-18 1995-05-19 Aloysius Knipper Thermal abuse resistant egg
US5650320A (en) * 1994-04-20 1997-07-22 University Of Alabama At Birmingham Research Foundation Lanthionine antibiotic compositions and methods
RU2143489C1 (ru) * 1994-11-25 1999-12-27 Нижегородский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии Способ получения лизостафина
US5762948A (en) * 1995-06-07 1998-06-09 Ambi Inc. Moist bacteriocin disinfectant wipes and methods of using the same
CN1138560C (zh) * 1995-06-23 2004-02-18 Ambi股份有限公司 控制对抗生素耐药的革兰氏阳性细菌的方法和治疗感染的方法
US5703040A (en) * 1995-11-22 1997-12-30 Kansas State University Research Foundation Broad spectrum antibiotic peptide
US5804549A (en) * 1996-01-05 1998-09-08 Ambi Inc. Compositions with activity against helicobacter
US6086894A (en) * 1996-06-27 2000-07-11 Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. Recombinant vaccine for diseases caused by encapsulated organisms
NZ333580A (en) * 1996-07-03 2000-06-23 Alza Corp Non-Aqueous protic peptide formulations, preferably LHRH
US5916582A (en) * 1996-07-03 1999-06-29 Alza Corporation Aqueous formulations of peptides
US5932547A (en) * 1996-07-03 1999-08-03 Alza Corporation Non-aqueous polar aprotic peptide formulations
US5910479A (en) * 1996-10-18 1999-06-08 Ambi Inc. Method for the treatment of Streptococcus pneumoniae infection
US6238377B1 (en) 1997-01-27 2001-05-29 Jin-Zhou Liu Nasal-nasopharyngeal cleaning system
ZA984591B (en) * 1997-06-09 1998-12-08 Ambi Inc A method for the treatment of diarrheal disease and for elmininating particular bacterial populations from the colon
US6028051A (en) * 1997-07-23 2000-02-22 Ambi Inc. Method for the treatment of staphylococcal disease
US6315996B1 (en) 1999-04-09 2001-11-13 Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Topical lysostaphin therapy for staphylococcus ocular infections
US6187768B1 (en) 1999-06-01 2001-02-13 Becton, Dickinson And Company Kit for flushing medical devices and method of preparation
US6342385B1 (en) 2000-07-28 2002-01-29 The Uab Research Foundation Mutacin I biosynthesis genes and proteins
EP1362089B1 (en) * 2001-02-17 2007-01-03 Novozymes A/S Reduction of malodour from laundry
JP2006507850A (ja) * 2002-03-26 2006-03-09 バイオシネクサス インコーポレイテッド 細菌バイオフィルムの酵素破壊
RU2241339C2 (ru) * 2002-09-19 2004-12-10 Общество с ограниченной ответственностью "ЛЕНОК-М" Способ производства консервов "зелёный горошек" из сушёного зерна
WO2004037167A2 (en) * 2002-10-18 2004-05-06 Molichem Medicines, Inc. Methods of treating dry eye disease with lantibiotics
JP2006514944A (ja) * 2002-12-10 2006-05-18 バイオシネクサス インコーポレーテッド 局所用抗感染製剤
US20100221237A1 (en) * 2003-03-26 2010-09-02 Biosynexus Incorporated Enzyme disruption of bacterial biofilms
US6989370B2 (en) * 2003-05-01 2006-01-24 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Bacteriocins and novel bacterial strains
JP4926707B2 (ja) * 2003-08-22 2012-05-09 ダニスコ エイ/エス 封入化抗菌材料
MXPA06002060A (es) * 2003-08-22 2006-05-19 Danisco Composicion que comprende una bacteriocina y un extracto a partir de una planta de la familia labiatae.
US20050058673A1 (en) 2003-09-09 2005-03-17 3M Innovative Properties Company Antimicrobial compositions and methods
BRPI0608691A2 (pt) 2005-03-10 2010-12-07 3M Innovative Properties Company composição antimicrobiana, e, métodos para matar ou inativar microorganismos em tecido da mucosa de um mamìfero, para tratar uma lesão ou ferimento infectado, para descolonização de microorganismos, para proporcionar eficácia antimicrobiana residual sobre uma superfìcie e para tratar uma condição
WO2006099325A2 (en) 2005-03-10 2006-09-21 3M Innovative Properties Company Methods of treating ear infections
EP1858482B1 (en) 2005-03-10 2014-04-23 3M Innovative Properties Company Methods of reducing microbial contamination
US8124016B2 (en) * 2005-11-15 2012-02-28 Lg Electronics, Inc. Articles with antimicrobial property and manufacturing method thereof
EP2004215B1 (en) * 2006-03-31 2010-06-09 The University Court of the University of St. Andrews Anti-microbial compositions comprising a cationic peptide and a glycylglycine endopeptidase
US8747872B2 (en) * 2007-05-02 2014-06-10 The Regents Of The University Of Michigan Nanoemulsion therapeutic compositions and methods of using the same
WO2009114520A2 (en) * 2008-03-10 2009-09-17 Pharmain Corporation Compositions for treatment with metallopeptidases, methods of making and using the same
WO2009150171A1 (en) * 2008-06-10 2009-12-17 Profos Ag Method of treatment of inflammatory diseases
US8425968B2 (en) * 2009-06-19 2013-04-23 Pepsico., Inc. Beverage preservative system containing pimaricin-cyclodextrin complex
US9200251B1 (en) 2011-03-31 2015-12-01 David Gordon Bermudes Bacterial methionine analogue and methionine synthesis inhibitor anticancer, antiinfective and coronary heart disease protective microcins and methods of treatment therewith
US20140090833A1 (en) * 2012-09-28 2014-04-03 Halliburton Energy Services, Inc. Methods for Treating Wellbore and Wellbore Operation Fluids
RU2629819C1 (ru) * 2016-08-23 2017-09-04 Федеральное бюджетное учреждение науки "Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Антибактериальная композиция на основе хитозана и лизостафина
CN113396937A (zh) * 2020-03-17 2021-09-17 孟州云大高科生物科技有限公司 一种多酶与生物类杀菌剂的组合物
CN115515563A (zh) 2020-05-08 2022-12-23 费尔廷制药公司 用于经口递送活性成分的压塑包装

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2744827A (en) * 1951-03-07 1956-05-08 Nat Res Dev Manufacture and preservation of cheese
GB738655A (en) * 1952-05-09 1955-10-19 Aplin & Barrett Ltd A dry nisin preparation
US3278378A (en) * 1962-04-19 1966-10-11 Schindler Charles Alvin Staphylococcus-derived antibiotic
US3579354A (en) * 1968-08-01 1971-05-18 Beatrice Foods Co Preparation of an elastic cheese product
US3899594A (en) * 1971-09-13 1975-08-12 Dirigo Corp Food preservation
US3988307A (en) * 1974-09-06 1976-10-26 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health, Education And Welfare Solid phase synthesis of peptides with carboxyl-terminal amides
PL193146A1 (pl) * 1976-10-19 1978-04-24 Inst Przemyslu Mleczarskiego Preparat enzymatyczny do dojrzewania bialkowych produktow mleczarskich
US4318928A (en) * 1979-12-19 1982-03-09 Sing Edmond L Preparation of cottage cheese containing Streptococcus diacetilactis
US4477471A (en) * 1982-04-15 1984-10-16 Microlife Technics, Inc. Preservation of foods with non-lactose fermenting Streptococcus Lactis subspecies diacetilactis
US4597972A (en) * 1983-06-10 1986-07-01 Aplin & Barrett, Ltd. Nisin as an antibotulinal agent for food products
US4584199A (en) * 1983-06-10 1986-04-22 Aplin & Barrett, Ltd. Antibotulinal agents for high moisture process cheese products
US4716115A (en) * 1983-09-06 1987-12-29 Microlife Technics, Inc. Derived nisin producing microorganisms, method of production and use and products obtained thereby
US4485029A (en) * 1984-03-19 1984-11-27 Minnesota Mining And Manufacturing Company Disinfecting method and compositions
US4929445A (en) * 1988-01-25 1990-05-29 Microlife Technics, Inc. Method for inhibiting Listeria monocytogenes using a bacteriocin

Also Published As

Publication number Publication date
CZ279273B6 (cs) 1995-03-15
DE69011460D1 (de) 1994-09-15
JP2984744B2 (ja) 1999-11-29
ZA901499B (en) 1990-11-28
NO904729D0 (no) 1990-10-31
FI103861B (fi) 1999-10-15
WO1990009739A1 (en) 1990-09-07
NO904729L (no) 1990-11-15
EP0424484B1 (en) 1994-08-10
IE900721L (en) 1990-09-01
FI103861B1 (fi) 1999-10-15
FI905378A0 (fi) 1990-10-31
HU217574B (hu) 2000-02-28
NZ232700A (en) 1992-10-28
RU2048151C1 (ru) 1995-11-20
DE69011460T2 (de) 1994-12-22
NO304721B1 (no) 1999-02-08
DK0424484T3 (da) 1994-10-03
PL284095A1 (en) 1992-09-21
KR920700003A (ko) 1992-02-19
HU902849D0 (en) 1991-05-28
IL93527A0 (en) 1990-11-29
KR0145738B1 (ko) 1998-08-01
CA2028140C (en) 1996-12-03
ATE109624T1 (de) 1994-08-15
AU618714B2 (en) 1992-01-02
CA2028140A1 (en) 1990-09-02
JPH03504864A (ja) 1991-10-24
DD301903A9 (de) 1994-06-30
HUT55607A (en) 1991-06-28
EP0424484A1 (en) 1991-05-02
IL93527A (en) 1995-03-15
US4980163A (en) 1990-12-25
IE64710B1 (en) 1995-08-23
AU5285090A (en) 1990-09-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL163940B1 (pl) Srodek konserwujacy zywnosc i dezynfekujacy PL PL PL PL
EP0545911B1 (en) Lanthionine-containing bacteriocin compositions for use as bactericides
US5753614A (en) Nisin compositions for use as enhanced, broad range bactericides
US5135910A (en) Nisin compositions for use as enhanced, broad range bactericides
US5217950A (en) Nisin compositions for use as enhanced, broad range bactericides
JP4471837B2 (ja) 食料品及び食品加工工場においてリステリアモノサイトゲネスを制御するための病原性ファージ
RU2092180C1 (ru) Антимикробная композиция
Sirtori et al. Mode of action of antimicrobial peptide P45 on Listeria monocytogenes
KR0143423B1 (ko) 향상된, 광범위 살균제로서 사용하기 위한 니신 조성물
CA1340850C (en) Nisin compositions for use as enhanced, broad range bactericides

Legal Events

Date Code Title Description
LAPS Decisions on the lapse of the protection rights

Effective date: 20060301