NO304721B1 - Forsterket bredspektret baktericid sammensetning - Google Patents

Forsterket bredspektret baktericid sammensetning Download PDF

Info

Publication number
NO304721B1
NO304721B1 NO904729A NO904729A NO304721B1 NO 304721 B1 NO304721 B1 NO 304721B1 NO 904729 A NO904729 A NO 904729A NO 904729 A NO904729 A NO 904729A NO 304721 B1 NO304721 B1 NO 304721B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
enhanced
lysostaphin
broad
nisin
bactericide
Prior art date
Application number
NO904729A
Other languages
English (en)
Other versions
NO904729L (no
NO904729D0 (no
Inventor
Peter Blackburn
Sara-Ann Gusik
June Polak
Stephen D Rubino
Original Assignee
Ambi Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ambi Inc filed Critical Ambi Inc
Publication of NO904729D0 publication Critical patent/NO904729D0/no
Publication of NO904729L publication Critical patent/NO904729L/no
Publication of NO304721B1 publication Critical patent/NO304721B1/no

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/164Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/50Isolated enzymes; Isolated proteins
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04Antibacterial agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00Antineoplastic agents
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02ATECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Food Preservation Except Freezing, Refrigeration, And Drying (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Description

Foreliggende søknad vedrører forsterket bredspektret baktericid sammensetning.
Bakteriociner så som lysostafin og nisin er proteiner produsert av bakterier som hemmer veksten av, og noen ganger dreper, bakterier nær beslektet med arter med deres opprinnelse. Lysostafin er et bakteriocin som lyserer og dreper nesten alle kjente arter av Staphylococcus, men er inaktiv mot bakterier fra andre slekter. Lysostafin, isolert fra kulturfiltrater av Staphylococcus simulans (NRRL B-2628) dyrket ifølge publiserte referanser, er en endopeptidase som spalter polyglycinkryssbindingene til peptidoglykan funnet i celleveggene til Staphylococcus. Kulterer av S. simulans dyrket under betingelser som induserer produksjon av lysostafin er immune for bakteriocin, mens samme kulturer dyrket under betingelser hvorved lysostafin ikke blir produsert, er følsomme overfor bakteriocin.
Lysostafin er et naturlig forekommende bakteriocin utskilt av en enkelt kjent S. simulans-stamme, opprinnelig isolert og betegnet Staphylococcus staphylolyticus av Schindler og Schuhardt. Produksjonen av lysostafin ved S. staphylolyticus er tidligere blitt beskrevet i US-patent nr. 3.278.378, utstedt 11. oktober 1966 og i Proceedings of the National Academy of Sciences, 51:414-421 (1964). Enkeltorganismen S. staphylolyticus (NRRL B-2628) som produserte lysostafin, ble nylig identifisert som en biovar av S. simulans av Sloan et al., Int. J. System. Becteriol., 32:170-174 (1982). På grunn av at navnet S. staphylolyticus ikke er på den godkjente listen for bakterielle navn, er organismen som produserer lysostafin blitt betegnet på nytt som S. simulans.
Det er tidligere blitt vist at virkningen av lysostafin kan bli forsterket av penicillin og andre antibiotika. Se inngitte US-patent nr. 4.980.163 til Blackburn et al.
Nisin, som noen ganger blir betegnet som et peptidanti-biotika, kan heller bli betegnet som et bakteriocin. Nisin blir produsert i naturen av forskjellige stammer av bakterien Streptococcus lactis. Det er et matkonserveringsmiddel anvendt for å hemme dannelsen av sporer fra visse arter av gram positive bacilli, inkludert de som oppstår fra Clostridium-stammene, kjent for å være ansvarlig for Botulisme-matvareforgiftning. En oppsummering av nisins egenskaper fremkommer i Hurst, Advances in Applied Microbiology, 27:85-123 (1981). Publikasjonen beskriver hva som generelt er kjent om nisin. Nisin, produsert av Streptococcus lactis, er kommersielt tilgjengelig som et urent preparat, Nisaplin, (Aplin & Barret Ltd., Dorset, England).
Nisin hører til klassen av peptider inneholdende lantionin. Også innbefattet i den klassen er subtilin, epidermin, cinnamycin, duramycin, ancovenin og Pep 5. Disse bakteriocin-peptidene blir alle produsert av forskjellige mikroorganismer. Subtilin tilveiebragt fra visse kulturer av B. subtilis og epidermin tilveiebragt fra visse kulturer Staphylococcus epidermis, har derimot molekylære strukturer som er meget lik de til nisin, Hurst, s. 85-86; og Schnell et al. Nature 333:276-278. Strukturelt like lantionininneholdende peptid-bakteriociner antas å være effektive i steden for nisin i foreliggende oppfinnelse.
Nisin er blitt anvendt effektivt som et konserveringsmiddel i bearbeidet ost og meieriprodukter. Anvendelse av nisin i bearbeidede osteprodukter er blitt gjenstand for nye patenter. Se US-patent nr. 4.584.199 og 4.597.972. Anvendelse av nisin for å hemme utveksten av visse gram positive bakterielle sporer er blitt godt dokumentert. Se Taylor, US-patent nr. 5.584.199 og Taylor, US-patent nr. 4.597.972, Tsai og Sandin, "Conjugal Transfer of Nisin Plasmid Genes from Streptococcus lactis 7962 til Leuconostoc dextranicum 181", Applied and Enviromental Microbiology, s. 352 (1987); "A Natural Preservative", Food Engineering International, s. 37- 38 (1987); "Focus on Nisin", Food Manufacture, s. 63 (1987). Nisin blir noen ganger funnet naturlig forekommende i lav konsentrasjon I melk og ost og ansees å være fullstendig ikke-toksiske og ikke-allergeniske overfor mennesker. Nisin er nylig blitt godkjent som trygg av FDA som en direkte matingrediens i pasteurisert smøreost, pasteurisert bearbeidet smøreost og pasteurisert eller pasteurisert bearbeidet smøreost med frukter, grønnsaker eller kjøtt. På grunn av at nisin er proteinholdig, blir en hvilken som helst rest i inntatte matvarer hurtig nedbrutt av fordøyel-sesenzymer .
Den generelle godtagbarheten av nisin som et matvarekonserveringsmiddel har vært begrenset til læringen om at, som et bakteriocin, var aktiviteten til nisin begrenset til bare å omfatte de gram positive bakteriene som er nær beslektet med bakterielle arter med dets opprinnelse. Nisin er ikke tidligere blitt vist å ha baktericid aktivitet overfor gram negative bakterier. På grunn av at matvarekontaminasjon og ødeleggelse er et resultat av forskjellige gram positive og gram negative bakterier, er det derfor ikke overraskende at nisin bare har ført til begrenset godtagbarhet som et matvarekonserveringsmiddel. På grunn av at den inntil nå begrensede aktiviteten til nisin som et bakteriocin, er anvendelse .derav utenfor matvareområde ikke vært angitt.
Det er nylig blitt demonstrert at en sammensetning omfattende nisin og ikke-baktericidale midler så som chelateringsmidler og overflateaktive midler har baktericid aktivitet overfor et stort område av gram negative bakterielle arter og forsterket aktivitet mot et stort område av gram positive bakterielle arter. Gram negative bakterier som er blitt vist å være følsomme overfor det forsterkede baktericidet er Salmonella typhimirium, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Bacterioides gingivalis og Actinobacillus actinomycetescomitans. Gram positive bakterier som er vist å være følsomme overfor de forsterkede baktericidene er Staphylococcus aureus, Streptococcus mutans, Listeria monocytogenes, Streptococcus agalactiae og coryne-formbakterier. Se inngitte Blackburn et al., US-patentsøknad med tittel Nisin Compositions For Use as Enhanced, Broad Range Bactericides som er en CIP av US-patentsøknad serie nr. 209.861, inngitt 22. juni 1988, som herved er inkorporert som referanse.
Det er blitt vist at aktiviteten til bakteriociner så som lysostafin og nisin kan bli overraskende forsterket, og det helhetlige område og hastigheten til deres aktivitet kan bli økt ved kombinering av de to bakteriocinene. Egenskapene til de nye bakteriocinsammensetningene inneholdende lysostafin og nisin kan også bli ytterligere forsterket ved tilsetning av chelateringsmidler og/eller overflateaktive midler som forsterker og utvider området til nisin og lysostafin-aktiviteten.
Foreliggende oppfinnelse vedrører følgelig forsterket bredspektret baktericid sammensetning,karakterisert vedat den omfatter lysostafin og et lantionin inneholdende bakteriocin.
De nye baktericidene inneholder lysostafin i en mengde som er tilstrekkelig for å være effektiv som et baktericid mot Staphylococcus, og nisin er tilstede i en mengde som er tilstrekkelig for å forsterke den baktericidale virkningen av lysostafin mot Staphylococci. Andre sammensetninger omfatter lysostafin, nisin og et chelateringsmiddel, og kan også inneholde et overflateaktivt middel. Denne sammensetningen i en bærer tilveiebringer et nytt baktericid hvori lysostafin og nisin er tilstede i samme konsentrasjonsområde som lysostafin/nisinsammensetningen, og chelateringsmidlet er tilstede i en mengde som er tilstrekkelig for å forsterke den baktericide virkningen av nisin overfor gram positive og gram negative bakterier. En ytterligere sammensetning omfatter lysostafin, nisin og et overflateaktivt middel. Denne sammensetningen I en bærer tilveiebringer et nytt baktericid der det overflateaktive midlet er tilstede i en mengde som er tilstrekkelig for å forsterke den baktericide virkningen av nisin og lysostafin overfor gram positive bakterier.
Sammensetningene kan bli anvendt direkte eller i bærere for behandling og forhindring av bakteriell kontaminasjon og infeksjon ved oppløsning av sammensetningen i et egnet oppløsningsmiddel eller suspendering i en egnet matrise og påføring av denne til et påvirket område eller ved tilsetning av den til en annen sammensetning for å overvinne og forhindre infeksjon.
De fleste kjemiske desinfiseringmidlene er for etsende eller ellers for toksiske til å bli anvendt i matvarer og mange medisinske anvendelser, hovedparten av antibiotika virker for sakte til å bli anvendt som desinfeksjonsmidler og er ikke tillatt i matvarer på grunn av risikoen for ervervet antibiotisk resistens som ville være en følge av en slik anvendelse. Nye baktericider er ikke-etsende, ikke-toksiske og egnede for anvendelse i matvarer og på åpne sår, effektive mot antibiotisk resistente bakterier og virker hurtig på delende eller ikke-delende bakterier, slik at de er nyttige også som et desinfeksjonsmiddel.
Sammensetningene eller baktericidene kan bli inkorporert i salver eller belegg for behandling av Infeksjoner, sårbelegg eller kirurgiske implantater og andre medikasjoner så som nasale instillasjoner, orale skyllinger, desinfiseringsmid-delskrubber, håndklær eller vann. Baktericidene kan bli anvendt for rensing av medisinske instrumenter o.l., og
når det gjelder omgivelsesdesinfeksjon hvor kjemiske bak-teriedrepende midler er utelukket på grunn av risikoen for etsende eller andre toksiske rester. Bredspektrede baktericider er spesielt egnet for matvarebeslektede anvendelser så som behandling av kjøtt, spesielt fjærfe, egg, ost og fisk
eller matvarepakking og håndteringsutstyr, og for kontroll og forhindring av kontaminasjon av råingredienser, bearbeidede matvarer og drikker ved bakterielle patogener og andre mikrobielle ødeleggende organismer.
Ulikt aktiviteten til de fleste bredspektrede bakteriedrep-ende midler som er innbefattet i tilstedeværelse av komplekse organiske stoffer, er bakteriocidsammensetningene og baktericider effektive i nærvær av organisk stoff, så som melk eller serum.
Sammensetningene ifølge foreliggende oppfinnelse omfatter lysostafin og nisin, lysostafin, nisin og et chelateringsmiddel, eller lysostafin, nisin, et chelateringsmiddel og et overflateaktivt middel. For å tilveiebringe forbedrede bredspektrede baktericider blir sammensetningene løst opp i et egnet oppløsningsmiddel eller suspendert i en egnet matrise. Sammensetninger omfattende lysostafin, nisin, et chelateringsmiddel og/eller et overflateaktivt middel løst opp i en egnet bærer for eksempel et vandig oppløsningsmiddel eller en buffer eller suspendert i en egnet matrise, antas å ha bredspektret, hurtig baktericid aktivitet overfor både gram positive og gram negative bakterier.
Sammensetningen blir fortrinnsvis løst opp i en flytende bærer eller suspendert i en væske, kolloid eller polymer matrise slik at lysostafin er tilstede i baktericidet i et område på 0,1 til 100 jjg/ml og blir forsterket ved tilstedeværelse av bakteriocinet nisin i området 0,1 til 300 jjg/ml og det resulterende baktericidet er betraktelig mere bak-tericidalt overfor Staphylococcus enn lysostafin alene. Den totale baktericidale aktiviteten til et slikt nytt baktericid antas å bli ytterligere potensiert og effektiv overfor et bredere område av både gram negative og gram positive bakterielle arter når nisinet i baktercidet blir forsterket av et chelateringsmiddel som hevdet av den inngitte søknaden til Blackburn et al. med tittel Nisin Compositions For Use as Enhanced, Broad Range Bactericides. Kombinasjonen av lysostafin, nisin og chelateringsmiddel bør også inneholde ytterligere bredspektret baktericid aktivitet ved tilsetning av et overflateaktivt middel som også hevdet i søknaden til Blackburn et al.
For eksempel blir nisin aktivert og forsterket mot et stort område gram positive bakterier av et chelateringsmiddel så som EDTA i området 0,1 til 20,0 mM. I nærvær av EDTA har nisin baktericid aktivitet overfor gram negative organismer, og dets aktivitet overfor gram positive bakterier blir forsterket og er aktiv over et bredt pH-område og mot et bredere område av gram positive bakterier. I tillegg forbedrer tilstedeværelsen av et overflateaktivt middel i området 0,01$ til 1, 0% i baktericidet effektiviteten av nisin mot gram positive bakterier. Egnede ikke-ioniske overflateaktive midler omfatter, men er ikke begrenset til, polyoksy-alkylfenoler (f.eks. Triton X-100), polyoksyalkylsorbitaner (f.eks. Tweens) og glyserider (f.eks. monolaurin og diolater). Egnede ioniske overflateaktlve midler omfatter, men er ikke begrenset til, emulgeringsmidler, fettsyrer, kvaternære forbindelser og anioniske overflateaktlve midler (f.eks. natriumdodecylsulfat) og amfoteriske overflateaktlve midler, for eksempel cocamidopropylbetaine.
Egnede bærere for baktericid sammensetningen ifølge foreliggende oppfinnelse omfatter, men er ikke begrenset til, generelt kjente vandige buffere. Egnede matriser for suspensjon av de nye sammensetningene ifølge foreliggende oppfinnelse omfatter, men er ikke begrenset til, organiske oppløsningsmidler, kolloidal suspensjon og polymerer kompatible med baktericider.
Lysostafin anvendt i oppfinnelsen kan bli produsert ved fermenteringsteknikker der S. simulans blir dyrket i flytende kultur. Slike fermenteringsteknikker er beskrevet i US-patent nr. 3.278.378 og i Proceedings of the National Academy of Sciences. 51:414-421 (1964). Forskjellige forbedringer i produksjon av lysostafin ved fermenteringsteknikker er også blitt utført som angitt i US-patent nr. 3.398.056 og 3.594.284. De siste to rerferansene beskriver forbedringer av kulturmediet og inokuleringsteknikker hvorved produksjon av lysostafin ved fermentering kan bli akselerert og forbedret.
I tillegg kan lysostafin bli produsert av rekombinante mikroorganismer, inkludert stammer av Escherichia coli, Baeillus subtilus og Baeillus sphaericus. En fremgangsmåte for tilveiebringing av lysostafin fra mikroorganismer transformert av rekombinante plasmider kodende for genet for lysostafin, er i sin helhet beskrevet i US-patentsøknad nr. 034.464, som er en CIP av US-patentsøknad nr. 852.407. Begge søknader er inkorporert heri som referanse. Lysostafin blir fortrinnsvis tilveiebragt fra B. sphaericus-stamme 00, inneholdende et rekombinant plasmid som leder syntesen av lysostafin. Dette tilveiebringer produksjon av høye nivåer lysostafin, vesentlig fri for staphylococciske immunogene kontaminanter og letter rensing av lysostafin på grunn av at lysostafin akkulmulerer direkte i vekstmediet. B. sphaericus transformanter inneholdende plasmidene pBC16-lL eller pR0J6649-T.L er blitt vist å være spesielt egnede for dette, til tross for at andre stammer også er nyttige som en lysostafinkilde. Disse plasmidene er i sin helhet beskrevet i de ovennevnte inngitte søknader.
Produsert av S. simulans i løpet av eksponensiell vekst, blir lysostafin først utskilt som en inaktiv forløper som blir prosessert ekstracellulært til det modne aktive bakteriocinet av en protease produsert i den stasjonære vekstfasen. I kontrast til den naturlige produksjon av lysostafin, akkumulerer lysostafin produsert av en rekombinant stamme av B. sphaericus som beskrevet i US-patentsøknad nr. 034.464, ekstracellulært, som et modent aktivt protein i løpet av den eksponensielle vekstfasen.
Nisin kan bli tilveiebragt kommersielt som et urent preparat, Nisalin fra Aplin & Barrett, Ltd., Dorset, England, og kan bli tilveiebragt ved isolering av naturlig forekommende nisin fra kulturer av Streptococcus lactis og deretter konsentrer-Ing av nisin ved hjelp av kjente fremgangsmåter. Det er også rapportert fremgangsmåte for produsering av nisin ved anvendelse av andre Streptococcus-stammer. Se Gonzalez et al., US-patent nr. 4.716.115, fra 29. desember 1987. Det bør også være mulig å produsere nisin ved rekombinant DNA. Nisin er et medlem av familien av lantionin inneholdende bakteriociner. Det er antatt at det på grunn av den strukturelle likheten vil andre lantionininneholdende bakteriociner være like effektive som nicin i kombinasjon med lysostafin.
Følgende eksempler vil ytterligere illustrere oppfinnelsen og demonstrere effektiviteten til de nye forsterkende bredspektrede baktericider. Det antas at på grunn av grad og område av nisinaktivitet også blir forsterket av gelaterings-midler, vil sammensetninger av lysostafin, nisin og et chelateringsmiddel også tilveiebringe nye baktericider med forsterket baktericidal aktivitet sammenlignet med sammensetningene av lysostafin og nisin alene.
Alle forsøkene i følgende eksempler ble utført ved 37°C. Effektiviteten til de forsterkede bredspektrede baktericidene ble bestemt ved analysering av baktericid aktivitet målt ved prosent bakteriell overlevelse etter behandling med baktericidet. Generelt ble bakteriene samlet ved sentrifugering i 2 minutter etter inkubasjon av en IO<7>celle pr. ml suspensjon av målartene med det nye baktericidet i spesifikke tidslengder. Den bakterielle pelleten ble vasket fri for baktericidet med en bergingsbuffer, betegnet fagbuffer (50 mM Tris-HCl buffer pH 7,8, ImM MgS04, 4 mM CaCl2, 0,1 M Nacl, og 0, 1% gelatin), resuspendert og seriefortynnet i fagbuffer, og 100 pl av de suspenderte bakteriene ble spredd på nærings-agarskåler. Overlevende bakterier ble bestemt ved registrer-ing av kolonidannende enheter (CFU) etter inkubasjon i 24-48 timer ved 37°C. Et effektivt baktericid ifølge foreliggende oppfinnelse er et som muliggjør at mindre enn 0, 1% av det opprinnelige levedyktige tallet av bakterier overlever.
EKSEMPEL 1
Lysostafin og nisin
Staphylococcus aureus-celler ble suspendert og inkubert i melk ved 37° C i 2 timer med forskjellige konsentrasjoner av lysostafin, nisin eller en kombinasjon av lysostafin og nisin i melken. Den baktericid effektiviteten til baktericidene ble vurdert ved bestemming av prosent overlevelse av bakteriene som beskrevet ovenfor. Resultatene av et slikt eksperiment er angitt i tabell 1.
Nisin alene i melk har liten praktisk baktericid aktivitet overfor Staphylococci. Lysostafin alene i melk er baktericidal overfor S. aureus, og kan produsere mer enn en fem log reduksjon i levedyktige celler i en konsentrasjon på 1,0 jjg/ml. Lysostafin, når kombinert med nisin i melk, tilveiebringer en sammensetning som er et nytt baktericid hvorved baktericid aktivitet til baktericidet er betraktelig og overraskende overlegen i forhold til den til enten baktericin alene og er mere aktiv enn deres anticiperte additive virkninger. Dette blir best illustrert ved en begrensende lysostafinkonsentrasjon (0,1 jjg/ml) vist i tabell 1. Når anvendelse av lysostafin er begrenset av dets tilgjengelige aktivitet, kan en bakteriocinsammensetning omfattende lysostafin med nisin i en egnet bærer så som melk i dette eksempelet, ventes å tilveiebringe et forsterket bredspektret baktericid.
EKSEMPEL 2
L<y>sostafin + nisin + EDTA + overflateaktivt middel
Data i tabell 2 illustrerer den nye baktericidpotentheten til en sammensetning omfattende lysostafin, nisin, EDTA og monoglycerid overflataktivt middel overfor S. aureus og S. agalactiae i melk, et omfattende matvaremedium. Det ble tidligere vist at lave konsentrasjoner av EDTA potensierer aktiviteten av nisin, mens høyere konsentrasjoner av EDTA inhiberer aktiviteten til nisin, se søknaden til Blackburn et al. I melk er høyere konsentrasjoner av EDTA mindre hemmende overfor baktericid aktivitet til baktericinsammensetningen.

Claims (16)

1. Forsterket bredspektret baktericid sammensetning,karakterisert vedat den omfatter lysostafin og et lantionin inneholdende bakteriocin.
2. Sammensetning ifølge krav 1,karakterisertved at det lantionin inneholdende bakteriocin blir valgt fra gruppen bestående av nisin, subtilin, epidermin, cinnamycin, duramycin, ancovenin og Pep 5.
3. Sammensetning ifølge krav 1,karakterisertved at den i tillegg omfatter et chelateringsmiddel.
4. Sammensetning ifølge krav 3,karakterisertved at den omfatter et overflateaktivt middel.
5. Sammensetning ifølge krav 3,karakterisertved at chelateringsmidlet velges fra gruppen bestående av EDTA, CaEDTA, Na2CaEDTA, EGTA og cltrat.
6. Sammensetning ifølge krav 4,karakterisertved at det overflateaktlve midlet blir valgt fra gruppen bestående av tritioner, tweener, glycerider, emulgeringsmidler, fettsyrer, quarternaere forbindelser og amfoteriske midler.
7. Forsterket, bredspektret baktericid ifølge krav 2,karakterisert vedat det omfatter et overflateaktivt middel.
8. Forsterket, bredspektret baktericid ifølge krav 1,karakterisert vedat lysostafin og lantionin-inneholdende bakteriocin er tilstede i til-strekkelige mengder, slik at baktericidet har forsterket aktivitet overfor staphylococci og gram positive bakterier.
9. Forsterket, bredspektret baktericid ifølge krav 3,karakterisert vedat lysostafinet, lantionininneholdende bakteriocin og chelateringsmiddel er tilstede i mengder, slik at baktericidet har forsterket aktivitet overfor staphylococci og overfor minst en av bakteriene fra gruppen bestående av gram negative og gram positive bakterier.
10. Forsterket, bredspektret baktericid ifølge krav 4 og 7,karakterisert vedat det overflateaktive midlet er tilstede i en mengde som er tilstrekkelig, slik at baktericidet har forsterket aktivitet overfor staphylococci og overfor minst en av gruppene bestående av gram negative og gram positive bakterier.
11. Forsterket, bredspektret baktericid ifølge krav 10,karakterisert vedat det overflateaktive midlet blir valgt fra gruppen bestående av tritioner, tweener, glycerider, fettsyrer, emulgeringsmidler, quaternære forbindelser, amfoteriske og anioniske overflateaktive midler.
12. Forsterket, bredspektret baktericid ifølge krav 3,karakterisert vedat det gram negative bakterielle målet blir valgt fra gruppen bestående av Salmonella typhimurium, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Bacteroides gingivalis og Actinobacillus actinomycetescomitans.
13. Forsterket, bredspektret baktericid ifølge krav 3,karakterisert vedat det gram positive bakterielle målet blir valgt fra gruppen bestående av spordannende bacilli, Staphylococcus aureus, Streptococcus mutans, Listeria monocytogenes, Streptococcus agalactiae og coryne formbakterier.
14. Forsterket, bredspektret baktericid ifølge krav 2,karakterisert vedat den effektive konsentrasjonen av lysostafin er mellom 0,1 til 100 jjg/ml og konsentrasjonen til nisin er mellom 0,1 til 300 pg/ml.
15. Forsterket, bredspektret baktericid ifølge krav 3,karakterisert vedat konsentrasjonen av lysostafin er mellom 0,1 til 100 ug/ml, konsentrasjonen av det lantionininneholdende bakteriocinet er mellom omtrent 0,1 til 300 pg/ml og konsentrasjonen av chelateringsmiddel er mellom 0,1 mM og 20 mM.
16. Forsterket, bredspektret baktericid ifølge krav 4 og krav 7,karakterisert vedat konsentrasjonen av overflateaktivt middel er mellom 0,01% og 1,0% av slutt-volumet.
NO904729A 1989-03-01 1990-10-31 Forsterket bredspektret baktericid sammensetning NO304721B1 (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US07/317,627 US4980163A (en) 1989-03-01 1989-03-01 Novel bacteriocin compositions for use as enhanced broad range bactericides and methods of preventing and treating microbial infection
PCT/US1990/001053 WO1990009739A1 (en) 1989-03-01 1990-02-27 Novel bacteriocin compositions for use as enhanced broad range bactericides and methods of preventing and treating microbial infection

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO904729D0 NO904729D0 (no) 1990-10-31
NO904729L NO904729L (no) 1990-11-15
NO304721B1 true NO304721B1 (no) 1999-02-08

Family

ID=23234535

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO904729A NO304721B1 (no) 1989-03-01 1990-10-31 Forsterket bredspektret baktericid sammensetning

Country Status (21)

Country Link
US (1) US4980163A (no)
EP (1) EP0424484B1 (no)
JP (1) JP2984744B2 (no)
KR (1) KR0145738B1 (no)
AT (1) ATE109624T1 (no)
AU (1) AU618714B2 (no)
CA (1) CA2028140C (no)
CZ (1) CZ279273B6 (no)
DD (1) DD301903A9 (no)
DE (1) DE69011460T2 (no)
DK (1) DK0424484T3 (no)
FI (1) FI103861B (no)
HU (1) HU217574B (no)
IE (1) IE64710B1 (no)
IL (1) IL93527A (no)
NO (1) NO304721B1 (no)
NZ (1) NZ232700A (no)
PL (1) PL163940B1 (no)
RU (1) RU2048151C1 (no)
WO (1) WO1990009739A1 (no)
ZA (1) ZA901499B (no)

Families Citing this family (50)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5858962A (en) * 1987-05-11 1999-01-12 Ambi Inc. Composition for treating mastitis and other staphylococcal infections
US5260271A (en) * 1988-06-22 1993-11-09 Applied Microbiology, Inc. Nisin compositions for use as enhanced broad range bactericides
DE3938140A1 (de) * 1989-11-16 1991-08-08 Beiersdorf Ag Desodorierende kosmetische mittel
NO911341L (no) * 1990-04-20 1991-10-21 Haarmann & Reimer Corp Fremgangsmaate for aa drepe gram-negative bakterier.
US5559096A (en) * 1991-04-15 1996-09-24 Applied Microbiology, Inc. Pharmaceutical compositions against gastric disorders
GB9126686D0 (en) * 1991-12-17 1992-02-12 Smithkline Beecham Plc Novel compositions
US5342612A (en) * 1991-12-20 1994-08-30 American Cyanamid Company Compositions for the treatment of mammalian diseases
EP0629347B1 (en) * 1992-01-23 1997-07-02 Morinaga Milk Industry Co., Ltd. Antibacterial agent and treatment of article therewith
DE4229707A1 (de) * 1992-09-05 1994-03-10 Beiersdorf Ag Germicide Wirkstoffkombinationen
JPH08504401A (ja) * 1992-10-29 1996-05-14 デネッケ,ライナー 消化管疾患の治療および特に予防用製剤
DE4307352A1 (de) * 1992-10-29 1994-05-05 Denecke Rainer Dr Med Vet Präparat zur Therapie und insbesondere Prophylaxe von Erkrankungen des Verdauungstraktes
GB9224598D0 (en) * 1992-11-24 1993-01-13 Smithkline Beecham Plc Novel compositions
IL107887A (en) * 1992-12-08 2003-07-06 Ambi Inc Stabilized lanthionine containing bacteriocin compositions
US5368845A (en) * 1993-01-07 1994-11-29 Colgate Palmolive Company Oral composition
US5512269A (en) * 1993-06-09 1996-04-30 Burroughs Wellcome, Co. Method of treating retained pulmonary secretions
AU689494B2 (en) * 1993-08-20 1998-04-02 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Method for the prevention and treatment of bovine mastitis
CA2121989A1 (en) * 1993-11-18 1995-05-19 Aloysius Knipper Thermal abuse resistant egg
US5650320A (en) * 1994-04-20 1997-07-22 University Of Alabama At Birmingham Research Foundation Lanthionine antibiotic compositions and methods
US5762948A (en) * 1995-06-07 1998-06-09 Ambi Inc. Moist bacteriocin disinfectant wipes and methods of using the same
US5866539A (en) * 1995-06-23 1999-02-02 Ambi Inc. Method for the control of antibiotic-resistant gram positive bacteria and treatment of infection
US5703040A (en) * 1995-11-22 1997-12-30 Kansas State University Research Foundation Broad spectrum antibiotic peptide
US5804549A (en) * 1996-01-05 1998-09-08 Ambi Inc. Compositions with activity against helicobacter
US5910479A (en) * 1996-10-18 1999-06-08 Ambi Inc. Method for the treatment of Streptococcus pneumoniae infection
US6238377B1 (en) 1997-01-27 2001-05-29 Jin-Zhou Liu Nasal-nasopharyngeal cleaning system
US6028051A (en) * 1997-07-23 2000-02-22 Ambi Inc. Method for the treatment of staphylococcal disease
US6315996B1 (en) 1999-04-09 2001-11-13 Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Topical lysostaphin therapy for staphylococcus ocular infections
US6187768B1 (en) 1999-06-01 2001-02-13 Becton, Dickinson And Company Kit for flushing medical devices and method of preparation
US6342385B1 (en) 2000-07-28 2002-01-29 The Uab Research Foundation Mutacin I biosynthesis genes and proteins
EP1362089B1 (en) * 2001-02-17 2007-01-03 Novozymes A/S Reduction of malodour from laundry
US7572439B2 (en) * 2002-03-26 2009-08-11 Biosynexus Incorporated Enzyme disruption of bacterial biofilms
EP1560540A4 (en) * 2002-10-18 2008-03-19 Molichem Medicines Inc METHOD FOR TREATING DRY EYES WITH LANTIBIOTICS
CA2508796A1 (en) * 2002-12-10 2004-06-24 Biosynexus Incorporated Topical anti-infective formulations
US20100221237A1 (en) * 2003-03-26 2010-09-02 Biosynexus Incorporated Enzyme disruption of bacterial biofilms
US6989370B2 (en) * 2003-05-01 2006-01-24 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Bacteriocins and novel bacterial strains
JP4926707B2 (ja) * 2003-08-22 2012-05-09 ダニスコ エイ/エス 封入化抗菌材料
MXPA06002068A (es) * 2003-08-22 2006-05-19 Danisco Material antimicrobiano encapsulado.
US20050058673A1 (en) 2003-09-09 2005-03-17 3M Innovative Properties Company Antimicrobial compositions and methods
EP1858482B1 (en) 2005-03-10 2014-04-23 3M Innovative Properties Company Methods of reducing microbial contamination
BRPI0608691A2 (pt) 2005-03-10 2010-12-07 3M Innovative Properties Co composição antimicrobiana, e, métodos para matar ou inativar microorganismos em tecido da mucosa de um mamìfero, para tratar uma lesão ou ferimento infectado, para descolonização de microorganismos, para proporcionar eficácia antimicrobiana residual sobre uma superfìcie e para tratar uma condição
US8476319B2 (en) 2005-03-10 2013-07-02 3M Innovative Properties Company Methods of treating ear infections
US8124016B2 (en) * 2005-11-15 2012-02-28 Lg Electronics, Inc. Articles with antimicrobial property and manufacturing method thereof
ATE470451T1 (de) * 2006-03-31 2010-06-15 Univ St Andrews Antimikrobielle zusammensetzungen mit einem kationischen peptid und glycylglycin- endopeptidase
US8747872B2 (en) * 2007-05-02 2014-06-10 The Regents Of The University Of Michigan Nanoemulsion therapeutic compositions and methods of using the same
WO2009114520A2 (en) * 2008-03-10 2009-09-17 Pharmain Corporation Compositions for treatment with metallopeptidases, methods of making and using the same
WO2009150171A1 (en) * 2008-06-10 2009-12-17 Profos Ag Method of treatment of inflammatory diseases
US8425968B2 (en) * 2009-06-19 2013-04-23 Pepsico., Inc. Beverage preservative system containing pimaricin-cyclodextrin complex
US9200251B1 (en) 2011-03-31 2015-12-01 David Gordon Bermudes Bacterial methionine analogue and methionine synthesis inhibitor anticancer, antiinfective and coronary heart disease protective microcins and methods of treatment therewith
US20140090833A1 (en) * 2012-09-28 2014-04-03 Halliburton Energy Services, Inc. Methods for Treating Wellbore and Wellbore Operation Fluids
RU2629819C1 (ru) * 2016-08-23 2017-09-04 Федеральное бюджетное учреждение науки "Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Антибактериальная композиция на основе хитозана и лизостафина
CN113396937A (zh) * 2020-03-17 2021-09-17 孟州云大高科生物科技有限公司 一种多酶与生物类杀菌剂的组合物

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2744827A (en) * 1951-03-07 1956-05-08 Nat Res Dev Manufacture and preservation of cheese
GB738655A (en) * 1952-05-09 1955-10-19 Aplin & Barrett Ltd A dry nisin preparation
US3278378A (en) * 1962-04-19 1966-10-11 Schindler Charles Alvin Staphylococcus-derived antibiotic
US3579354A (en) * 1968-08-01 1971-05-18 Beatrice Foods Co Preparation of an elastic cheese product
US3899594A (en) * 1971-09-13 1975-08-12 Dirigo Corp Food preservation
US3988307A (en) * 1974-09-06 1976-10-26 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health, Education And Welfare Solid phase synthesis of peptides with carboxyl-terminal amides
PL193146A1 (pl) * 1976-10-19 1978-04-24 Inst Przemyslu Mleczarskiego Preparat enzymatyczny do dojrzewania bialkowych produktow mleczarskich
US4318928A (en) * 1979-12-19 1982-03-09 Sing Edmond L Preparation of cottage cheese containing Streptococcus diacetilactis
US4477471A (en) * 1982-04-15 1984-10-16 Microlife Technics, Inc. Preservation of foods with non-lactose fermenting Streptococcus Lactis subspecies diacetilactis
US4597972A (en) * 1983-06-10 1986-07-01 Aplin & Barrett, Ltd. Nisin as an antibotulinal agent for food products
US4584199A (en) * 1983-06-10 1986-04-22 Aplin & Barrett, Ltd. Antibotulinal agents for high moisture process cheese products
US4716115A (en) * 1983-09-06 1987-12-29 Microlife Technics, Inc. Derived nisin producing microorganisms, method of production and use and products obtained thereby
US4485029A (en) * 1984-03-19 1984-11-27 Minnesota Mining And Manufacturing Company Disinfecting method and compositions
US4929445A (en) * 1988-01-25 1990-05-29 Microlife Technics, Inc. Method for inhibiting Listeria monocytogenes using a bacteriocin

Also Published As

Publication number Publication date
HU902849D0 (en) 1991-05-28
AU5285090A (en) 1990-09-26
PL284095A1 (en) 1992-09-21
KR0145738B1 (ko) 1998-08-01
AU618714B2 (en) 1992-01-02
KR920700003A (ko) 1992-02-19
NO904729L (no) 1990-11-15
ATE109624T1 (de) 1994-08-15
FI905378A0 (fi) 1990-10-31
EP0424484A1 (en) 1991-05-02
IE900721L (en) 1990-09-01
IL93527A0 (en) 1990-11-29
US4980163A (en) 1990-12-25
JP2984744B2 (ja) 1999-11-29
ZA901499B (en) 1990-11-28
PL163940B1 (pl) 1994-05-31
CZ279273B6 (cs) 1995-03-15
IE64710B1 (en) 1995-08-23
FI103861B1 (fi) 1999-10-15
IL93527A (en) 1995-03-15
NZ232700A (en) 1992-10-28
DD301903A9 (de) 1994-06-30
CA2028140A1 (en) 1990-09-02
FI103861B (fi) 1999-10-15
JPH03504864A (ja) 1991-10-24
DE69011460T2 (de) 1994-12-22
EP0424484B1 (en) 1994-08-10
HUT55607A (en) 1991-06-28
HU217574B (hu) 2000-02-28
WO1990009739A1 (en) 1990-09-07
DE69011460D1 (de) 1994-09-15
CA2028140C (en) 1996-12-03
NO904729D0 (no) 1990-10-31
DK0424484T3 (da) 1994-10-03
RU2048151C1 (ru) 1995-11-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0424484B1 (en) Novel bacteriocin compositions for use as enhanced broad range bactericides and methods of preventing and treating microbial infection
EP0545911B1 (en) Lanthionine-containing bacteriocin compositions for use as bactericides
US5217950A (en) Nisin compositions for use as enhanced, broad range bactericides
US5753614A (en) Nisin compositions for use as enhanced, broad range bactericides
US5135910A (en) Nisin compositions for use as enhanced, broad range bactericides
Costa et al. Evaluation antibacterial and antibiofilm activity of the antimicrobial peptide P34 against Staphylococcus aureus and Enterococcus faecalis
JPH03161410A (ja) ランチバイオチツク/リゾチーム配合物による微生物の増殖の制御
RU2092180C1 (ru) Антимикробная композиция
Sirtori et al. Mode of action of antimicrobial peptide P45 on Listeria monocytogenes
Bonhi et al. A comparative profile of bactericidal action of a partially purified bacteriocin from lactic acid bacteria with antibiotics.
KR0143423B1 (ko) 향상된, 광범위 살균제로서 사용하기 위한 니신 조성물
CA1340850C (en) Nisin compositions for use as enhanced, broad range bactericides