PL101808B1 - A method of producing new soluble in water choline salts of antibiotics from the group of polyene macrolides or n-sugar derivatives thereof - Google Patents

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania rozpuszczalnych w wodzie biologicznie czynnych no¬ wych soli cholinowych antybiotyków przeciwgrzybowych z grupy makrolidów polienowych lub ich N-cukro- wych pochodnych.

Znane sa sposoby otrzymywania róznych rozpuszczalnych w wodzie kompleksów z metalami, soli makroli¬ dów polienowych lub soli ich pochodnych, np. soli sodowych, amonowych, imidazolowych i innych z N-acylowa- na grupa aminowa mykozaminy, chlorowodorki estrów metylowych z zestryfikowana grupa karboksylowa lakto- nowej czesci czasteczki antybiotyku, sole z zasadami organicznymi i nieorganicznymi pochodnych cukrowych, gdzie cukier reaguje z grupa aminowa mykozaminy, a zasada z grupa karboksylowa laktonowej czesci czasteczki antybiotyku oraz sole zasad organicznych, gdzie zasada organiczna zwiazana jest z grupa karboksylowa makroli- dowej czesci czasteczki.

Otrzymane przez nas, nieopisane dotad w pismiennictwie rozpuszczalne w wodzie sole cholinowe antybio¬ tyków z grupy makrolidów polienowych zawieraja w czasteczce grupe hydroksylowa zwiazana z cholina, zwia¬ zkiem o dzialaniu lipotropowym, nalezacym do grupy amin endogennych. Zarówno sole cholinowe antybioty¬ ków z grupy makrolidów polienowych z wolna grupa aminowa mykozaminy, jak i sole cholinowe N-cukrowych pochodnych tych antybiotyków, wykazaly jednakowo cenne wlasciwosci biologiczne. Sole te moga byc wyko¬ rzystane w weterynarii, zwlaszcza w leczeniu grzybic pszczól.

Sposobem wedlug wynalazku antybiotyk o charakterze makrolidu polienowego, posiadajacy wolna grupe karboksylowa, taki jak nystatyna, polifungina, amfoterycyna B, lub jego N-glikozylowa pochodna z N-acylowana grupa aminowa mykozaminy przeprowadza sie w sól cholinowa w srodowisku rozpuszczalnika organicznego, np. dwumetyloformamidu, dwumetylosulfotlenku, nizszych alkoholi, korzystnie metanolu, lub w srodowisku wo¬ dnym, w temperaturze 15-65°C, korzystnie w temperaturze 18-23°C, przez dzialanie na roztwór antybiotyku roztworem choliny lub weglanu choliny.2 101808 Mieszanine poreakcyjna zadaje sie wyzej wrzacym rozpuszczalnikiem organicznym, korzystnie n-butano- lem, mieszanine zageszcza sie przez odparowanie i zageszczony roztwór poddaje sie krystalizacji lub zadaje eterem etylowym, eterem naftowym lub cykloheksanem celem wytracenia produktu albo poddaje liofilizacji.

W ten sposób otrzymuje sie sól cholinowa antybiotyku, która jest dobrze rozpuszczalna, w wodzie i daje klarowny 4% roztwór, co umozliwia stosowanie jej do iniekcji.

Sposób wytwarzania tych nowych zwiazków jest prosty, dogodny i ekonomiczny ze wzgledu na stosowanie typowych rozpuszczalników i odczynników.

Przyklad I. 2 g polifunginy oE}^ = 676 przy 304 nm rozpuszczono w 150 ml metanolu, ogrzewa¬ jac do 65CC, a nastepnie dodano 8,6 ml metanolowego roztworu weglanu choliny o stezeniu 1.95 mg/100 ml oraz 6 ml wody destylowanej. Calosc odsaczono przez bibule filtracyjna, do roztworu dodano 100 ml n-butano- lu i zageszczono w temperaturze 45°C pod zmniejszonym cisnieniem do objetosci okolo 25 ml. Zageszczony roztwór pozostawiono w chlodni na 18 godzin do krystalizacji. Wytracony osad odsaczono, przemyto eterem naftowym, a nastepnie wysuszono w temperaturze pokojowej. Uzyskano 0,8 g soli cholinowej polifunginy, roz¬ puszczalnej w wodzie, o Eicm = 591 przy 304 nin i mocy biologicznej 2610 j/mg.

Przyklad II. 2 g nystatyny o E}^m = 784 przy 304 nm, rozpuszczono w 150 ml metanolu, a naste¬ pnie postepowano jak w przykladzie I. Uzyskano 0,9 g soli cholinowej nystatyny, rozpuszczalnej w wodzie, 0 El cm = 542 przy 304 nm i mocy biologicznej 2217 j/mg.

Przyklad III. 2 g amfoterycyny B o Ejem = 1250 przy 382 nm, rozpuszczono w 1500 ml metanolu, ogrzewajac do 60°C, nastepnie dodano 8,6 ml metanolowego roztworu weglanu choliny o stezeniu 1,95 mg/100 ml oraz 6 ml wody. Calosc odsaczono przez bibule filtracyjna. Do przesaczu dodano 1000 ml n-butanolu i calosc zageszczono w temperaturze 45°C pod zmniejszonym cisnieniem do objetosci okolo 50 ml.

Zageszczony roztwór pozostawiono w chlodni na 18 godzin do krystalizacji, po czym wytracony osad odsaczono i przemyto eterem naftowym, a nastepnie wysuszono w temperaturze pokojowej. Uzyskano 1,3 g soli cholinowej amfoterycyny B, rozpuszczalnej w wodzie, o EJcm = 1235 przy 382 nm i mocy biologicznej 565 j/mg.

Przyklad IV. 2 g polifunginy rozpuszczono w 250 ml metanolu o temperaturze pokojowej 15-25°C i dodano 8,2 ml metanolowego roztworu weglanu choliny o stezeniu 1,95 mg/100 ml oraz 10 ml wody. Uzyska¬ ny roztwór odsaczono, a nastepnie dodano do przesaczu 165 ml n-butanolu. Roztwór zageszczono w temperatu¬ rze 45°C pod zmniejszonym cisnieniem do objetosci okolo 50 ml. Osad wytracono 50 ml eteru etylowego i pozostawiono w chlodni przez 18 godzin. Wytracony osad odsaczono, przemyto eterem etylowym i wysuszono w temperaturze pokojowej. Uzyskano 0,75 g soli cholinowej polifunginy, rozpuszczalnej w wodzie, 0 Ei?m = 601 przy 304 nm i mocy biologicznej 2580 j/mg.

Przyklad V. 2 g nystatyny rozpuszczono w 250 ml metanolu o temperaturze pokojowej 15-25°C i da¬ lej postepowano jak w przykladzie IV, z tym, ze osad wytracono eterem naftowym. Uzyskano 0,9 g soli cholino¬ wej nystatyny, rozpuszczalnej w wodzie, o Ej^m = 539 przy 304 nm i mocy biologicznej 2470 j/mg.

Przyklad VI. 2 g amfoterycyny B rozpuszczono w 1500 ml metanolu ogrzewajac do temperatury 60°C, a nastepnie dodano 8,6 ml wodnego roztworu weglanu choliny o stezeniu 195 mg/100 ml. Calosc odsa¬ czono przez bibule filtracyjna. Do przesaczu dodano 1000 ml n-butanolu i calosc zageszczono pod zmniejszo¬ nym cisnieniem do objetosci okolo 100 ml. Osad wytracono 100 ml cykloheksanu jak w przykladzie IV i dalej postepowano jak w przykladzie III, z ta róznica, ze osad przemyto eterem etylowym, a nie eterem naftowym.

Uzyskano 1,1 g rozpuszczalnej w wodzie soli cholinowej amfoterycyny B o EJcm = 1270 przy 382 nm i mocy biologicznej 580j/mg.

Przyklad VII. 2 g N-glikozylowej pochodnej polifunginy rozpuszczono w 200 ml metanolu w tempe¬ raturze pokojowej, nastepnie dodano 9 ml metanolowego roztworu weglanu choliny o stezeniu 1,93 mg/100 ml oraz 6 ml wody destylowanej. Dalej postepowano jak w przykladzie I. Uzyskano 1,8 g soli cholinowej N-glikozy¬ lowej pochodnej polifunginy oEJ?m = 540 przy 304 nm i mocy biologicznej 2380 j/mg.

Przyklad VIII. 2 g N-glikozylowej pochodnej nystatyny rozpuszczono w 200 ml metanolu w tempera¬ turze pokojowej i postepowano jak w przykladzie V. Uzyskano 1,4 g soli cholinowej N-glikozylowej pochodnej nystatyny o EJcm =510 przy 304 nm i mocy biologicznej 1780 j/mg.

Przyklad IX. 2 g N-glikozylowej pochodnej amfoterycyny B rozpuszczono w 1000 ml metanolu w temperaturze 60°C i postepowano jak w przykladzie III. Uzyskano 1,2 g soli cholinowej N-glikozylowej pocho¬ dnej amfoterycyny B o E^m =1215 przy 382 nm i mocy biologicznej 560j/m.

Przyklad X. Do 100 ml wodnego roztworu 1,4 g choliny dodano w czasie mieszania i 1 polifunginy.

Po rozpuszczeniu jej, nie przerywajac mieszania, dodano malymi porcjami 1,2 g jonitu w formie wodorowej i kontrolowano pH roztworu. Gdy pH wynioslo okolo 8,0, odsaczono jonit, a roztwór liofilizowano. Uzyskano sól cholinowa polifunginy oE|4i = 608 przy 304 nm i mocy biologicznej 2300 j/mg.101 808 3

Claims (2)

Zastrzezenia patentowe

1. Sposób wytwarzania nowych rozpuszczalnych w wodzie soli chinolinowych antybiotyków /grupy ma¬ krolidów polienowych, znamie n n y t y m, ze antybiotyk z grupy makrolidów polienowych, taki jak nysta- tyna, polifungina lub amfoterycyna B, poddaje sie reakcji z cholina lub jej weglanem, po czym produkt wyodre¬ bnia sie i oczyszcza.

2. Sposób wytwarzania nowych rozpuszczalnych w wodzie soli cholinowych N-cukrowych pochodnych antybiotyków z grupy makrolidów polienowych, znamienny ty m, ze N-cukrowa pochodna antybiotyku z grupy makrolidów polienowych, takiego jak nystatyna, polifungina lub amfoterycyna B, poddaje sie reakcji z cholina lub jej weglanem, po czym produkt wyodrebnia sie i oczyszcza.