NO934834L - 2-amino-6,7-dihydroksy-4-tiaheptasyrederivater, fremstilling og anvendelse av disse - Google Patents

2-amino-6,7-dihydroksy-4-tiaheptasyrederivater, fremstilling og anvendelse av disse

Info

Publication number
NO934834L
NO934834L NO934834A NO934834A NO934834L NO 934834 L NO934834 L NO 934834L NO 934834 A NO934834 A NO 934834A NO 934834 A NO934834 A NO 934834A NO 934834 L NO934834 L NO 934834L
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
compound
gly
amino
glu
tht
Prior art date
Application number
NO934834A
Other languages
English (en)
Other versions
NO934834D0 (no
Inventor
Seiichi Tanida
Tsuneaki Hida
Mitsuhiro Wakimasu
Setsuo Harada
Koichi Yukishige
Original Assignee
Takeda Chemical Industries Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Takeda Chemical Industries Ltd filed Critical Takeda Chemical Industries Ltd
Publication of NO934834D0 publication Critical patent/NO934834D0/no
Publication of NO934834L publication Critical patent/NO934834L/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0806—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atoms, i.e. Gly, Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0606—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing heteroatoms not provided for by C07K5/06086 - C07K5/06139, e.g. Ser, Met, Cys, Thr
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/081—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing O or S as heteroatoms, e.g. Cys, Ser
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0819—Tripeptides with the first amino acid being acidic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/1005—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/1013—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing O or S as heteroatoms, e.g. Cys, Ser
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Thiazole And Isothizaole Compounds (AREA)

Description

Foreliggende oppfinnelse angår 2-amino-6,7-dihydroksy-4-tiaheptansyrederivater som er nyttige som terapeutiske midler for leukocytopeni forårsaket av forskjellige grunner, sykdommer på grunn av reduksjon av leukocytter, sykdommer som krever, fra terapeutisk synspunkt, øking av benmargceller eller leukocytter, trombocytopeni forårsaket av forskjellige grunner, sykdommer som skyldes trombocyttreduksjon, eller sykdommer som fra terapeutisk synspunkt krever trombocytt-øknlng.
Bakgrunn for oppfinnelsen.
I Hoppe-Seyler's Zeitschrift fur Physiologische Chemie 364, sidene 593-606 (1983), blir det beskrevet et syntetisk peptid avledet fra lipoprotein fremstilt av E. coli, som er vist av formelen:
I JPA H4 (1992 )-046194 blir et stoff WS 1279A vist med f ormelen:
Achiwa et al. syntetiserte disse forbindelsene som optisk aktive forbindelser. [Se JPA H4 (1992 )-099796, Chem. Pharm. Bull. 39, side 2590 (1991) og Peptide Chemistry, side 361
(1991)] .
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er imidlertid ikke beskrevet i disse referansene.
Forkortelser for aminosyrer, peptider og lignende benyttet 1 foreliggende oppfinnelse, er ifølge IUPAC-IUB Commission on Biochemical Nomenclature eller de som konvensjonelt blir benyttet i beslektede felt, og mulige optiske isomerer av aminosyrer er, hvis ikke annet er spesifisert, L-isomerer.
Kjemoterapi eller radioterapi av cancer forårsaker alvorlig leukocytopeni eller alvorlig trombocytopeni. Den første induserer senking av resistansen mot infeksjoner eller andre forskjellige sykdommer slik at tilstrekkelig terapeutiske effekter ikke er forventet. Den siste induserer mangler i hemostatisk mekanisme slik at tilstrekkelig terapeutisk effekt ikke kan forventes. Disse blir vurdert som alvorlige innen feltet cancer-terapi. Under slike forhold, har utvikling av medikamenter som mildner undertrykkingen av hematopoetisk funksjon forårsaket av disse terapeutiske fremgangsmåtene og er i stand til å fremme bedringen av leukocytt-tall eller trombocytt-tall, blitt sterkt ønsket. Videre, i terapien av benmargstransplantasjon, er medikamenter som er i stand til å fremme proliferasjonen av benmargceller når de er transplantert og i stand til å bedre antallet leukocytter hurtig, ønskelig. Videre kan disse medikamentene bli benyttet som terapeutiske midler for trombocytopeni etter benmargstransplantasjon eller autoimmune sykdommer som følger etter trombocytopeni, slik som aplastisk anemi og paroksysmal trombocytopenisk purpurea.
Under hensyntagen til betraktningene ovenfor, er det derfor gjennomført studier fra et nytt synspunkt på forbindelser som har virkningen å øke antallet leukocytter. Som et resultat er det funnet at nye 2-amino-6,7-dihydroksy-4-tiaheptansyrederivater fremmer proliferasjonen av benmargceller hos mus og øker antallet perifere leukocytter. Videre stimulerer også nevnte forbindelser benmargceller hos mus for således å fremme proliferasjonen og differensieringen av megakaryocytter. Basert på disse funnene er det utført ytterligere studier for å fullføre foreliggende oppfinnelse.
Oppsummering av oppfinnelsen.
Foreliggende oppfinnelse fremskaffer:
1) Forbindelse med formel (I):
hvor hver av R<1>og R<2>er hydrogen eller alifatisk acyl, A er amino som kan være beskyttet, X er en aminosyresekvens bestående av 1 til 10 aminosyrerester som inneholder minst en aminosyrerest som har en vannoppløselighetsøkende gruppe, eller et salt av dette.
2) Forbindelse ifølge 1), hvor A er amino.
3) Forbindelse ifølge 1), hvor A er amino som kan være substituert med substituert oksykarbonyl. 4) Forbindelse ifølge 1), hvor aminosyreresten som har en vannoppløselighetsøkende gruppe, er en sur aminosyrerest. 5) Forbindelse ifølge 1), hvor aminosyreresten som har en vannoppløselighetsforbedrende gruppe, er en basisk aminosyrerest. 6) Forbindelse ifølge 1), hvor alifatisk acyl er C2- 3Q alifatisk acyl. 7) Forbindelse ifølge 1), hvor minst en av R<1>og R<2>er alifatisk acyl.
8) Forbindelse Ifølge 1), hvor R<1>er alifatisk acyl.
9) Forbindelse Ifølge 1), hvor R<2>er alifatisk acyl.
10) Forbindelse ifølge 1), hvor forbindelsen er (2R.6R)-2-amino-6,7-bis(heksadekanoyloksy)-4-tiaheptanoyl-glycyl-glutamyl-glutaminsyre. 11) Forbindelse ifølge 1), hvor forbindelsen er (2R.6R)-2-amino-6,7-bis(heksadekanoyloksy)-4-tiaheptanoyl-glycyl-glycyl-glutaminsyre. 12) Forbindelse ifølge 1), hvor forbindelsen er (2R.6R)-2-amino-6,7-bis(heksadekanoyloksy)-4-tiaheptanoyl-glutamyl-glycyl-glutaminsyre. 13) Forbindelse Ifølge 1), hvor forbindelsen er (2R.6R)-2-amino-6,7-bis(heksadekanoyloksy)-4-tlaheptanoyl-glycyl-D-glutaminsyre. 14) Immunstimulerende sammensetning som har en leukocytt-økende virkning, som omfatter en forbindelse eller et salt av denne som definert i 1). 15) Immunstimulerende sammensetning ifølge 14), hvor minst en av R<1>og R<2>er alifatisk acyl. 16) Sammensetning for behandling av trombocytopeni, som består av en forbindelse eller et salt av dette som definert il). 17) Fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse eller et salt av denne, som definert i 1), som omfatter å utsette en forbindelse med formel (II):
hvor av R<1>og R<2>er hydrogen eller alifatisk acyl, R<3>er en beskyttende gruppe, A er en arainogruppe som kan være beskyttet, X' er en aminosyresekvens bestående av 1 til 10 eventuelt beskyttede aminosyrerester som kan inneholde minst en eventuelt beskyttet aminosyrerest som har en vannoppløse-lighetsøkende gruppe, eller dets salt, for en avbeskyttelses-reaksj on.
Detaljert beskrivelse av oppfinnelsen.
Med referanse til formel (I) og (II), omfatter eksempler på alifatiske acylgrupper vist ved R<1>eller R<2>alifatiske acylgrupper avledet fra alifatisk karboksyl syre. Eksempler på alifatisk acylgrupper inkluderer mettede eller umettede alifatiske acylgrupper som har maksimalt 34 karbonatomer (f.eks. formyl, acetyl, propionyl, butyryl, isobutyryl , valeryl, isovaleryl, heksanoyl, heptnoyl oktanoyl, dekanoyl, dodekanoyl, tridekanoyl, tetradekanoyl, pentadekanoyl, heksadekanoyl, heptadekanoyl, oktadekanoyl, nonadekanoyl, tetrakosanoyl, heksakosanoyl, icosanoyl, heneikosanoyl, dokosanoyl, tetrakosanoyl, heksakosanoyl, etyldodekanoyl, metyltridekanoyl, etyltridekanoyl, metyltetradekanoyl , etyltetradekanoyl, metylpentadekanoyl, etylpentadekanoyl, metylheksadekanoyl, etylheksadekanoyl, metylheptadekanoyl, etylheptadekanoyl, metyloktadekanoyl, etyloktadekanoyl, oktakosanoyl, triakontanoyl, dotriankotanyol, tetra-trianiotanoyl, akryloyl, propioloyl, metakryloyl, krotonoyl, isokrotonoyl, myristoleoyl, oleoyl, palmitoleoyl, elaidoyl, cis, cls-9 ,12-oktadekatrlenoyl, 9,12,15-oktadekatrienoyl, 9,11,13-oktadekatrienoyl, 5,8,11,14-icosatetraenoyl, cis-15-tetracosaenoyl, osv.).
Foretrukne eksempler på alifatiske acylgrupper omfatter C2-20mettede eller umettede alifatiske acylgrupper (f.eks. acetyl, propionyl, butyryl, isobutyryl, valeryl, isovaleryl, heksanoyl, heptanoyl, oktanoyl, dekanoyl, dodekanoyl, tridekanoyl, tetradekanoyl, pentadekanoyl, heksadekanoyl , heptadekanoyl, oktadekanoyl, nonadekanoyl, icosanoyl, heneikosanoyl, dokosanoyl, etyldodekanoyl, metyltridekanoyl, etyltridekanoyl, metyltetradekanoyl, etyltetradekanoyl, metylpentadekanoyl, etylpentadekanoyl, metylheksadekanoyl , etylheksadekanoyl, metylheptadekanoyl, etylheptadekanoyl, metyloktadekanoyl, etyloktadekanoyl tetrakosanoyl, heksakosanoyl, oktakosanyol, triakontanoyl, myristoleoyl, oleoyl, palmitoleoyl, elaidoyl, cis, cis-9,12-oktadekatrienoyl, 9,12,15-oktadekatrienoyl, 9,11,13-oktadekatrienoyl, 5,8,11,14-icosatetraenoyl, cis-15-tetrakosaenoyl, osv.).
Spesielt foretrukne eksempler på alifatiske acylgrupper vist ved R<1>eller R<2>omfatter C2-.16mettede eller umettede alifatiske acylgrupper.
Fortrinnsvis er minst en av R<1>og R<2>en alifatisk acylgruppe.
Mer foretrukket er både R<1>og R<2>en alifatisk acylgruppe.
I formelen (I) og (II) ovenfor, inkluderer eksempler på beskyttende grupper for eventuelt beskyttede aminogrupper vist ved A, formyl, C<y_>^Q<a>rylkarbonyl (f.eks. fenyl-karbonyl), substituert oksykarbonyl [f.eks. C^.^alkyloksy karbonyl (f.eks. metoksykarbonyl, etoksykarbonyl, osv.), c7-10aryloksykarbonyl (f.eks. fenyloksykarbonyl, osv.), 9-fluorenylmetyloksykarbonyl, Cy.^g aralkyloksykarbonyl (f.eks. benzyloksykarbonyl, osv.), adamantyloksy-karbonyl, osv.], Cy_ iQ aralkylkarbonyl (f.eks. benzylkarbonyl, osv.), trityl og ftaloyl. Disse beskyttende gruppene som er forskjellig fra formyl, kan være substituert. Eksempler på substituenter omfatter halogenatomer (f.eks. fluor, klor, brom og Jod), C^_^alkylkarbonyl (f.eks. acetyl, etyl-karbonyl, butylkarbonyl, osv.) og nltrogruppe. Antallet substituenter varierer fra 1 til 3. A har fortrinnsvis de ovenfornevnte betydninger når R<1>og R<2>både er alifatiske acylgrupper.
Fortrinnsvis er A en aminogruppe som kan være beskyttet med substituert oksykarbonyl. Mer foretrukket er A en aminogruppe .
I formelen (I) betyr aminosyren i aminosyresekvensen vist ved X en forbindelse som har i dets molekyl en aminogruppe eller en sur gruppe (f.eks. karboksylgruppe, sulfonsyregruppe ). Foretrukne eksempler på aminosyren omfatter de beskrevet av Dal Yuhkl Kagaku (Encyclopedia of Organic Chemistry) Vol. 21 "Natural Polymers III", samlet sammen under oppsyn av dr. Munio Kotake, utgitt av Asakura Shoten i Japan, 1960, og "Amino acids and peptides" av Chapman & Hall, samlet sammen av J.S. Davles, 1985 i USA.
Mer konkret, kan det f.eks. nevnes aminosyrer som Inngår i protein [f.eks. alifatisk monoamino monokarboksylsyre slik som glycin, alanin, valin, leucin, isoleucin eller lignende, alifatisk hydroksyaminosyre slik som serin, treonin eller lignende, sure aminosyrer slik som aspartinsyre, glutaminsyre eller lignende, sure aminosyreamider slik som aspargin, glutamin eller lignende, aromatisk aminosyre slik som fenylalanin, tyrosin, tryptofan eller lignende, imlno-karboksylsyre slik som prolin, hydroksyprolin eller lignende, basisk aminosyre slik som arginin, lysin, histidin eller lignende, og svovel inneholdende aminosyre slik som metionin, cystin, cystein eller lignende], aminosyre fremstilt fra naturlige kilder slik som, f.eks., metabolitter fra mikroorganismer eller komponenter av dyr og planter [f.eks. alifatisk monoamino monokarboksylsyre slik som L-a-amino-sraørsyre, t-aminosmørsyre, e-aminoisosmørsyre, p-alanin, homoserin, c<-metyl-D-serin, O-karbamyl-D-serin, S-hydroksy-r- okso-norvalin, eller lignende, monoamino dikarboksylsyre slik som L-a-aminoadipinsyre, L-g<->aminoadipinsyre, L-teanin, L-t-metylenglutaminsyre, L-t-metylglutaminsyre eller lignende, diaminomonokarboksylsyre slik som L-ornitin, e-lysin, a,e-diaminopropionsyre, L-a,T-diaminosmørsyre, eller lignende, diaminokarboksylsyre slik som diaminopimelinsyre eller lignende, svovel inneholdende monoaminomonokarboksylsyre slik som cysteinsyre eller lignende, svovelsyreinneholdende aminosyre slik som taurin eller lignende, aromatisk aminosyre slik som kynurenin, 3,4-dioksyfenyl-L-alanln eller lignende, heterocyklisk aminosyre slik som 2,3-dikarboksyaziridin, [S]-2-amino-3-(lsoksazolin-5-en-4-yl)-propionsyre, antikapsin eller lignende, basisk aminosyre slik som L-4-oksalysin, L-4-oksolysin, [3R,5R]-3,6-diamino-5-hydroksyheksansyre, eller lignende, svovelInneholdende aminosyre slik som lantionin, S-metyl-L-cystein eller lignende, cyklisk aminosyre slik som pipekolinsyre, azetidin-2-karboksylsyre, [IR,2S]-2-amino-cyklopentan-l-karboksylsyre, eller lignende, aminosyre som er substituert med en spesifikk funksjonell gruppe slik som citrullin, alanosin, L-azaserin, eller lignende], og aminosyrer fremstilt ved organisk syntese [f.eks. 6-amino-heksansyre, 8-aminooktansyre, 12-aminododekansyre, 4-aminobenzosyre, 4-(aminometyl)benzosyre, 4-(N-(karboksy-raetyl )aminometyl)benzosyre, osv.]
Aminosyrerest betyr en divalent gruppe som avledet fra aminosyre og har bindinger henholdsvis til aminogruppen og syregruppen.
Selv om gruppen er ustabil som aminosyre i tilfeller hvor aminogruppen er acylert eller syregruppen har amidobinding, kan gruppen bli benyttet som en aminosyrerestgruppe. Eksempler på slike aminosyrer omfatter (6-aminoheksyl )kar-baminsyre.
Med referanse til formel (I), omfatter eksempler av aminosyre som har en vannoppløselighetsforbedrende gruppe i aminosyre sekvensen vist ved X, de ovenfornevnte sure aminosyrene og basiske aminosyrene, fortrinnsvis de sure aminosyrene.
Eksempler på denne sure aminosyren omfatter en forbindelse som har en eller flere syrefunksjonelle grupper (f.eks. karboksylgruppe, sulfonsyregruppe, osv.) i tillegg til en karboksylgruppe og en aminogruppe. Foretrukne eksempler på den sure aminosyren omfatter en forbindelse som har en aminogruppe og to eller flere karboksylgrupper. For å angi mer korrekt, kan det f.eks. nevnes aminodikarboksylsyre (f.eks. aspartinsyre, glutamlnsyre, L-a-aminoadipinsyre, L-p-aminoadipinsyre, 2,3-dikarboksyaziridin, osv.), mer foretrukket a-aminodikarboksylsyre (f.eks. aspartinsyre, glutamlnsyre, L-a-aminoadipinsyre, osv.), og blant dem er aspartinsyre og glutamlnsyre spesielt foretrukket.
Eksempler på den basiske aminosyren omfatter en forbindelse som har en eller flere funksjonelle grupper (f.eks. amino, et basisk nitrogen inneholdende heterocykllske grupper slik som imidazolyl, lndolyl, osv., guanidino, osv.). Foretrukne eksempler på basiske aminosyrer omfatter en forbindelse som har en aminogruppe, en karboksylgruppe og en eller flere av nevnte basiske funksjonelle grupper.
For å angi mer korrekt, kan det nevnes f.eks. basisk aminosyre som er byggesten i protein (f.eks. arginin, lysin, histidin, osv.) og en basisk aminosyre fremstilt fra naturlige kilder slik som f.eks. metabolitter fra mikroorganismer eller komponenter fra dyr og planter (f.eks. diaminokarboksylsyre slik som L-ornitin, ø-lysin, a, e-diaminopropionsyre, L-a, i-diaminosmørsyre, eller lignende, L-4-oksalysin, L-4-oksolysin, [3R ,5R]-3,6-dlamino-5-hydroksy-heksansyre, osv.), mer foretrukket en basisk a-aminosyre som er byggesten i protein (f.eks. arginin, lysin, histidin, osv.) og en basisk aminosyre fremstilt fra naturlige kilder slik som f.eks. metabolitter fra mikroorganismer eller komponenter fra dyr og planter (f.eks. L-ornitin, e-lysin, a, e-diaminopropionsyre, L-a, -r-diaminosmørsyre, L-4-oksalysin, L-4-oksolysin, osv.), og blant dem er lysin, arginin og histidin spesielt foretrukket.
I formel (II) blir det som de beskyttende gruppene vist ved R^, fortrinnsvis benyttet beskyttende grupper for karboksylgruppe beskrevet senere.
I formel (II) har aminosyre i den eventuelt beskyttede aminosyreresten i aminosyresekvensen vist ved X', den samme betydning som den i aminosyreresten i den ovenfornevnte aminosyresekvensen vist ved X.
I formel (II) har aminosyre i den eventuelt beskyttede aminosyreresten som har en gruppe som forbedrer vannoppløse-ligheten til aminosyresekvensen vist ved X<*>, den samme betydning som den 1 aminosyreresten som har en gruppe som forbedrer vannoppløseligheten i den ovenfornevnte aminosyresekvensen vist ved X.
Som den beskyttende gruppen, kan det nevnes kjente beskyttende grupper benyttet for beskyttelse av aminogruppe, karboksylgruppe eller hydroksylgruppe 1 peptidsyntese. Disse er beskyttende grupper som kan bli fjernet ved f.eks. hydrolyse, hydrogenolyse, reduksjon, aminolyse eller hydrazinolyse.
Eksempler på de aminobeskyttende gruppene omfatter uretantype beskyttende grupper (f.eks. benzyloksykarbonyl, t-butoksykarbonyl, allyloksykarbonyl, t-amyloksykarbonyl, isobornyl-oksykarbonyl, 4-metoksybenzyloksykarbonyl, 2-klorobenzyloksy-karbonyl, adamantyloksykarbonyl, 9-fluorenylmetyloksykarbonyl, 2 ,2 ,2-trlkloroetyloksykarbonyl, eller lignende), acyltype beskyttende grupper (f.eks. C^.^lav fettsyrerester som eventuelt har en substituent som halogen, f.eks. formyl, acetyl, propyl, trlfluoroacetyl, kloroacetyl, eller lignende, ftalyl, tosyl, 2-nitrosulfenyl, 4-metoksy-2-nitrosulfenyl, benzoyl, eller lignende), og alkyltype beskyttende grupper (f.eks. trltyl, benzyl eller lignende).
Blant disse er uretantype beskyttende grupper spesielt foretrukket.
Karboksylgrupper blir beskyttet ved å omdanne dem til f.eks. amidogruppe, hydrazidogruppe eller ester. Foretrukne amidogrupper eller hydrazidogrupper er de som er substituert med en passende substituent. Foretrukne amidogrupper er de som er substituert med en Cy.^g aralkylgruppe som eventuelt er substituert med f.eks. alkoksygruppe (f.eks. 3,4-dimetoksybenzyl gruppe eller bis-(p-metoksyfenyl)-metyl gruppe). Foretrukne hydrazidogrupper er de som er substituert med f.eks. C^_5alkyloksykarbonyl gruppe som eventuelt er substituert med halogen (f.eks. fluor, klor, brom, osv.), c6-12arylgruppe (f.eks. fenyl, p-bifenylyl, osv.) (f.eks. benzyloksykarbonylgruppe, trikloroetyloksykarbonylgruppe , tert-butyloksykarbonylgruppe, 2-(p-bifenylyl)-isopropyloksy-karbonyl, osv.), halogenert C2_(, alkanoylgruppe (f.eks. trifluoroacetylgruppe, osv.) og 07.^9aralkylgruppe (f.eks. tritylgruppe, osv.), blant andre. Videre kan karboksyl-gruppene bli beskyttet som estere med en eventuelt substituert lavalkohol (f.eks. metanol, etanol, cyanometylalkohol, benzoylmetylalkohol, tert-butanol, osv.), aralkanol [f.eks. benzylalkohol eller benzhydroler (f.eks. benzhydrol, p-nitrobenzylalkohol, p-metoksybenzylalkohol, 2,4,6-trimetyl-benzylalkohol, osv.) som eventuelt er substituert med f.eks. lavalkylgruppe, lavalkoksygruppe eller halogenatom], fenol og tiofenol som eventuelt er substituert med en elektrontil-trekkende gruppe (f.eks. tiofenol, tiokresol, p-nitrotio-fenol, 2,4,5- og 2 ,4 ,6-triklorofenol, p-cyanofenol, p-metansulfonylfenol, osv.), og videre, med N-hydroksyimid (f.eks. N-hydroksysuccinimid, N-hydroksyftalimid, osv.), N-hydroksypiperidin, 8-hydroksykinolin eller lignende.
Som den spesielle beskyttende gruppen for karboksyl som kan bli fjernet under nøytrale betingelser, kan nevnes en hydrokarbyl-silyl-etyl gruppe, f.eks. 2-(trimetylsilyl )-etylgruppe (beskrevet i DE-PS 2.706.490).
Hydroksyl kan være beskyttet ved f.eks. acylering eller eteriflsering.
Den spesielt foretrukne acylgruppen i tilfelle acylering, er en gruppe avledet fra karbonsyre (f.eks. benzyloksykarbonylgruppe eller etyloksykarbonylgruppe). For eteriflsering, er f.eks. benzylgruppe, tetrahydropyranylgruppe eller tert-butylgruppe, foretrukket. For beskyttelse av hydroksylgruppen, blir 2,2,2-trifluoro-l-tert-butoksykarbonylamino-etylgruppe eller 2,2,2-trifluoro-l-benzyloksykarbonylamino-etylgruppe [Chem. Ber., Vol. 100 (1967), s. 3838-3849] fortrinnsvis benyttet.
I formel (I), i tilfelle hvor aminosyreresten kan være en optisk aktiv isomer, kan den ta en hvilken som helst av L-, D- og DL-form.
De foretrukne eksemplene på forbindelse (I) eller salt av denne omfatter
(2R,6R )-2-amino-6,7-bis(heksadekanoyloksy)-4-tiaheptanoyl-Gly-Glu-Glu-OH,
(2R,6R )-2-amino-6,7-bis(heksadekanoyloksy)-4-tiaheptanoyl-Gly-Glu-Glu-OH,
(2R,6R )-2-amino-6,7-bis(heksadekanoyloksy)-4-tiaheptanoyl-Glu-Gly-Glu-OH,
(2R,6R)-2-amino-6,7-bis(heksadekanoyloksy)-4-tiaheptanoyl-Gly-D-Glu-OH, eller salt av disse.
Under blir det beskrevet fremgangsmåte for fremstilling av de ovenfor nevnte forbindelsene.
Beskyttende grupper og reagenser som ofte blir benyttet er forkortet som følger 1 den påfølgende beskrivelse.
Fmoc : 9-fluorenyl metyloksykarbonyl
Z : benzyloksy karbonyl
<l>Bu : t-butyl
otBu : t-butoksy
TFA : trifluoreddiksyre
TEA : trietylamin
DMF : N,N-dimetylformamid
DCC : N,N<»->dicykloheksylkarbodiimid
BOP : benzotriazol-l-yloksy tris (dimetylamino )
fosfoniunr heksafluorofosfat
DIC : N,N'-diisopropylkarbodiimid
HONB : N-hydroksy-5-norbonen-2,3-dikarboksyimid
DEPC : dietyl fosforocyanidat
HOBT : 1-hydroksybenzotriazol
DCM : diklorometan
MeOH : metanol
THF : tetrahydrofuran
WSC : vannoppløselig karbodiimid•hydroklorid
DMAP : 4-dimetylaminopyridin
Boe : t-butoksykarbonyl
R- : R-konfigurasjon
S- : S-konfigurasjon
Forbindelsen, som er hovedskjelettet til forbindelsene i denne beskrivelsen, er 2-amlno-6,7-dihydroksy-4-tiaheptansyre.
I denne beskrivelsen er tiaheptanoyl forkortet som THT, tiaheptansyre er forkortet som THT-OH. Oktadekanoyl er forkortet som Ste, heksadekanoyl som Pam, tetradekanoyl som Myr, og oktadekanoyloksy som SteO, heksadekanoyloksy som PamO, tetradekanoyloksy som MyrO.
Forbindelser representert ved formel (I) eller salt av denne, kan bli fremstilt ved å utsette en forbindelse representert ved formel (II) eller et salt av denne for en avbeskyttelsesreaksjon.
Avbeskyttelsesreaksjonen kan bli utført ved en per se kjent fremgangsmåte, f.eks. en fremgangsmåte som konvensjonelt blir benyttet innen peptidkjemien [se Synthetic Chemistry Series, Peptide Synthesis; IZUMIYA Nobuo, UNO Motonori, KATO Tetsuo & AOYAGI Haruhiko; utgitt av Maruzen Co. Ltd. 1975 i Japan].
Avbeskyttelsesreaksjonen på aminogruppen beskyttet med en uretantype beskyttende gruppe blir utført ved å bringe aminogruppen i kontakt med en syre i fravær av oppløsnings-middel eller i et oppløsningsmiddel som ikke gir noen negativ påvirkning på reaksjonen. Som oppløsningsmiddel blir det benyttet halogenerte hydrokarboner (f.eks. diklorometan, kloroform, 1,2-dikloroetan, osv.), alkoholer (f.eks. metanol, etanol, osv.), vann og en blanding av dem i et passende forhold. Denne reaksjonen blir utført ved å bringe forbindelsen (II) eller et salt av denne i kontakt med en syre. Som syre blir det f.eks. benyttet en haloeddiksyre (f.eks. trifluoreddiksyre, osv.), hydrohalogensyre (f.eks. saltsyre, hydrogenbromid, osv.), blant andre. Det er fordelaktig at N-benzyloksykarbonyl gruppe og N-4-metoksybenzyloksykarbonyl gruppe blir fjernet ved katalytisk hydrogenering ved anvendelse av f.eks. palladiumkatalysator (f.eks. palladium-karbon, palladlum-bariumsulfat, palladium black, osv.) eller rhodlumkatalysator. I dette tilfellet blir et kjent oppløs-ningsmiddel, f.eks. cyklisk eter (f.eks. tetrahydrofuran, osv.), alkoholer (f.eks. metanol, etanol, osv.), osv., eller, avhengig av tilfellet, en blanding av cyklisk eter og annet inert oppløsningsmiddel [f.eks. lav alifatisk syreamid (f.eks. dlmetylformamid, osv.), osv.] benyttet.
N-9-fluorenylmetyloksykarbonyl gruppe blir fortrinnsvis fjernet ved anvendelse av et organisk amin, f.eks. dietyl-amin, piperidin, morfolin, 4-dImetylaminopyridin eller dicykloheksylamin. Reaksjonen blir utført i et oppløsnings-middel som ikke gir noen negativ virkning på reaksjonen. Som oppløsningsmiddel blir det f.eks. benyttet amider (f.eks. dlmetylformamid, acetamid, osv.), alkoholer (f.eks. metanol, etanol, osv.), halogenerte hydrokarboner (f.eks. kloroform, diklorometan, 1,2-dikloroetan, osv.), osv., eller en blanding av dem i et passende forhold.
Det blir foretrukket at N-2,2,2-trikloroetyloksykarbonyl gruppe blir fjernet ved anvendelse av metall (f.eks. sink, osv.) sammen med en organisk karboksyl syre (f.eks. eddiksyre, propionsyre, osv.). Reaksjonen blir utført i et oppløsnings-middel som ikke gir noen negativ påvirkning på reaksjonen. Som oppløsningsmiddel blir det benyttet de ovenfor nevnte karboksylsyrene, alkoholene (f.eks. metanol, etanol, osv.), vann eller en blanding av dem i et passende forhold.
Avbeskyttelsesreaksjon (deacylert reaksjon) av acylert hydroksygruppe blir utført ved å bringe den i kontakt med en syre i et oppløsningsmiddel som ikke gir noen negativ påvirkning. Som oppløsningsmiddel blir det benyttet halogenerte hydrokarboner (f.eks. diklorometan, kloroform, 1,2-dikloroetan, osv.), alkoholer (f.eks. metanol, etanol, osv.), vann og en blanding av dem i et passende forhold. Denne reaksjon blir utført ved å bringe forbindelsen (II) eller et salt av denne i kontakt med en syre. Som syre blir det f.eks. benyttet haloeddiksyre (f.eks. trifluoreddiksyre, osv.), hydrohalogensyre (f.eks. saltsyre, hydrogenbromid, osv.), osv.
Eliminering av O-benzyl gruppe blir fortrinnsvis utført ved katalytisk hydrogenering med f.eks. palladiumkatalysator slik som palladiumkarbon, palladium/bariumsulfat og palladium black, eller en rhodlumkatalysator ved, i dette tilfelle, å benytte et kjent oppløsningsmiddel, f.eks. cyklisk eter (f.eks. tetrahydrofuran, osv.) som en blanding med andre inaktive oppløsningsmidler [f.eks. lav alifatisk syreamid (dlmetylformamid eller lignende), osv.].
Eliminering av O-tetrahydropyranyl gruppe eller O-tert-butyl gruppe kan bli utført som den ovenfor nevnte deacyleringen, ved hydrolyse med en syre.
Eliminering av en karboksylbeskyttende gruppe kan bil utført som i det ovenfor nevnte tilfellet, ved hydrolyse med en syre. Benzylester kan f.eks. bli avbeskyttet ved katalytisk hydrogenering som ved den ovenfor nevnte avbeskyttelsen ved O-benzylgruppe-eliminerIngen. Den ovenfor nevnte 2-(trimetyl-silyl )-etylgruppen kan bli eliminert ved virkning av f.eks. et salt av hydrogenfluorld, f.eks. et salt av kvaternær nitrogenbase med hydrogenfluorid (f.eks. tetraetylammonium-fluorid, osv.) i et passende oppløsningsmiddel under nøytrale betingelser.
Forbindelsen representert ved den generelle formel (II) eller et salt av denne, som er startmaterialet som blir benyttet for fremstillingen av den ovenfor nevnte generelle formel (I) eller et salt av denne, kan bli fremstilt ved å utsette et materiale som har en reaktiv karboksylgruppe som tilsvarer til en eller to fragmenter separert ved en valgfri posisjon av peptidbindingen og et materiale som har en reaktiv aminogruppe som tilsvarer til det andre fragmentet, for kondensasjon ved konvensjonelle midler som blir benyttet i peptldsyntesen.
Som konvensjonelle midler for peptidsyntese, kan det f.eks. nevnes en hvilken som helst væskefase syntetisk metode og fastfase syntetisk metode. Silke midler for peptidsyntese som nevnt ovenfor omfatter f.eks. fremgangsmåte beskrevet i "Peptide Synthesis" skrevet av M. Bondosky og M. Ondetti , Interscience, New York, 1966; "The Proteins" skrevet av F.M. Finn og K. Hoffmann, Vol. 2, redigert av H. Nenrath og R.L. Hill, Academic Press Inc. New York, 1976; "Base & Experiment of Peptide Synthesis" skrevet av IZUMIYA Nobuo, Maruzen Co. Ltd., 1985; "Seikagaku Jikken Koza 1" skrevet av YAJIMA Haruaki, SAKAKIBARA Shunpei, et al., samlet av Japan Biochemistry Society, Tokyo Kagaku Dojin, 1977, "Zoku Seikagaku Jikken Koza 2" skrevet av KIMURA Shun et al., samlet av Japan Biochemistry Society, Tokyo Kagaku Dojin, 1987; "Solid Phase Peptide Synthesis" skrevet av J.M. Slewart og J.D. Young, Pizs chemical company, Illinois, 1984, eller fremgangsmåter analoge til dem. Praktiske eksempler på slike metoder som over omfatter f.eks. azid-metode, klorid-metode, syreanhydrid-raetode, blandet syreanhydrid-metode , DCC-metode, aktiv ester-metode, metode ved anvendelse av Woodword reagens K, karbonylimidazol-metode, redoc-metode , DCC/HONB-metode, DIC/HONB-metode, DCC/HONB-metode, metode ved anvendelse av BOP reagens, metode ved anvendelse av DEPC reagens eller 1ignende.
Som foretrukne praktiske eksempler på en av startfragmentene, for fremstilling av den ovenfor nevnte forbindelse (II) eller et salt av denne, kan det f.eks. nevnes en forbindelse representert ved den generelle formel (III):
hvor X' og R<3>har samme betydning som definert ovenfor, eller et salt av dette.
Forbindelsen (III) eller et salt av denne kan bli fremstilt ved f.eks. de ovenfornevnte konvensjonelle midlene for peptidsyntese.
Foretrukne eksempler for forbindelsen (III) omfatter de følgende forbindelser.
Som startfragment for fremstilling av forbindelse (II) ved kombinasjon med den ovenfor nevnte forbindelse (III), blir det benyttet en forbindelse representert ved formel (IV):
hvor Y står for en aminobeskyttende gruppe; R<*>og R<2>har samme betydning som definert ovenfor.
Den aminobeskyttende gruppen representert ved Y i den ovenfor nevnte generelle formel (IV), har samme betydning som definert for den ovenfor beskrevne aminobeskyttende gruppen.
Forbindelsen (IV) eller et salt av denne, hvor R<*>og R<2>står for en og samme gruppe, kan bli fremstilt ved passende anvendelse av en per se kjent fremgangsmåte [f.eks. Inter-national Journal of Peptide and Protein Research, 38 1991
s. 545-554; Chemical and Pharmaceutical Bulletin,.39 s. 2590-2596] .
For de tilfeller hvor R<1>og R<2>er to ulike grupper, blir den vanligste produksjonsveien beskrevet under.
Først blir monoacylforbindelsen av et glycerinderivat, f.eks. glycidol eller eplklorhydrln, fremstilt. På den annen side blir disulfldbindingen av cystin hvor aminogruppen og karboksylgruppen er beskyttet, åpnet reduktivt for å gi et cysteinderivat.
Ved å utsette dette cysteinderivatet for addisjon til det ovenfor nevnte monoacyl glycerinderivatet blir det fremstilt 2-amino-6-hydroksy-7-acyloksy-4-tiaheptansyre hvor aminogruppen og karboksylgruppen er beskyttet.
I denne reaksjonen gir anvendelse av R-( +)-glycidol et (6R)-2-amino-6-hydroksy-7-acyloksy-4-tiaheptansyrederivat, mens anvendelse av S-(- )-glycidol gir et (6S)-2-amino-6-hydroksy-7-acyloksy-4-tiaheptansyrederivat.
Ved konvensjonell acylering av hydroksylgruppen ved 6-posisjon til 2-amino-6-hydroksy-7-acyloksy-4-tiaheptansyren fremstilt 1 den ovenfor nevnte reaksjonen, kan det bli fremstilt et 2-amino-6,7-bis(acyloksy)-4-tiaheptansyrederivat som har en annen O-acyl gruppe.
Ved direkte å anvende f.eks. glycidol i stedet for et acylglycerinderivat, blir 2-amino-6,7-dihydroksy-4-tiaheptan-syrederivat fremstilt, og acyleringen av dette produktet ved konvensjonell fremgangsmåte gir 2-amino-6,7-bis(acyloksy )-4-tlaheptansyrederivat med den samme O-acyl gruppen.
Ved, på den ovenfor nevnte måte, å fjerne den beskyttende gruppen på karboksylgruppen til det således fremstilte 2-amino-6,7-bis(acyloksy)-4-tiaheptansyrederivatet, kan 2-amino-6,7-bis(acyloksy)-4-tiaheptansyre som har beskyttet aminogruppe, bli fremstilt.
Foretrukne eksempler på forbindelse (IV) omfatter 2-amino-6,7-bis(acyloksy)-4-tiaheptansyre som har beskyttet aminogruppe .
Ytterligere eksempler er vist under:
Startfragmentene fremstilt ovenfor blir utsatt for kondensasjon på den følgende måte, og så, hvis nødvendig, blir den aminobeskyttende gruppen vist ved Y, fjernet for å gi forbindelse (II) eller et salt av dette.
Som forbindelsen fremstilt ved aktivering av karboksylgruppen til startforbindelsen, kan det nevnes f.eks. korresponderende syreanhydrider, azider, aktive estere [f.eks. estere med alkohol (f.eks. pentaklorofenol, 2,4,5-triklorofenol, 2,4-dinitrofenol, cyanometylalkohol, p-nltrofenol, N-hydroksy-5-norbornen-2,3-dikarboksyimid, N-hydroksysuccinimid, N-hydroksyfalimid, N-hydroksybenzotriazol)]. Som startforbindelsen hvis aminogruppe er aktivert, kan nevnes f.eks. tilsvarende fosforsyreamid.
Kondenseringen kan bli utført i nærvær av et oppløsnings-middel. Oppløsningsmidlet kan bli valgt blant de som er kjent å være anvendelige for peptidkondenseringsreaksjon. Eksempler på oppløsningsmidler omfatter amider slik som vannfri eller vanninneholdende formamid, dlmetylformamid, N-metyl-pyrrolldon, osv., sulfoksider slik som dimetylsulfoksid, osv., aromatiske aminer slik som pyridin, osv., halogenerte hydrokarboner slik som kloroform, diklorometan, osv., etere slik som tetrahydrofuran, dioksan, osv., nitriler slik som acetonitril, osv., estere slik som etylacetat, etylformat, osv., eller blandinger av dem i et passende forhold.
Reaksjonstemperaturen kan passende bli valgt i området som er kjent å være anvendelig for peptidbindingsreaksjoner, f.eks. vanligvis fra omkring -20'C til 40°C.
Reaksjonstiden kan bli valgt i området som er kjent å være nødvendig for peptidbindingsreaksjon, spesifikt f.eks. fra omkring flere minutter til omkring 48 timer.
Fjerning av den aminobeskyttende gruppen vist ved Y, blir utført på hovedsakelig samme måte som beskrevet ovenfor.
Forbindelsen (I) eller et salt av denne fremstilt slik, kan bli gjenvunnet etter fullførelse av reaksjonen ved midler for separering av peptid, f.eks. ekstraksjon, skilling, gjen-utfelling, krystallisering, forskjellige kromatografiske fremgangsmåter, høy-ytelse væskekromatografi, osv.
Et salt av forbindelsen (I) ifølge oppfinnelsen med en base, spesielt med en farmasøytisk akseptabel base, kan bli fremstilt ved en per se kjent fremgangsmåte.
Eksempler på basen omfatter et alkalimetall slik som natrium, kalium, osv., et jordalkaliemetall slik som kalsium, magnesium, osv., en organisk base slik som trietylamin, pyridln, osv., og så videre. Et salt av forbindelsen (I) med en syre, spesielt en farmasøytisk akseptabel syre, kan bli fremstilt ved en fremgangsmåte kjent per se. Eksempler på syren omfatter en uorganisk syre (f.eks. saltsyre, svovel-syre, fosforsyre, osv.), en organisk syre (f.eks. eddiksyre, propionsyre, citronsyre, tartarsyre, maleinsyre, oksalsyre, osv. ) og så videre.
Som saltene av forbindelsene (II) til (IV), kan det bli benyttet hovedsakelig de samme som saltene av forbindelsen
(I).
Forbindelsen (I) eller salt av disse som har aktiviteter med bemerkelsesverdig forbedring av hematopoiesisinsufflsiens-tilstanden, kan bli benyttet som terapeutika eller profylak-tiske midler for leukocytopeni forårsaket av radioterapi eller kjemoterapi for cancer hos pattedyr (f.eks. hund, gris, ku, hest, ape, menneske, osv.), som hematopoetisk stimulerende midler ved benmargstransplantasjon, som immuno- stimulerende midler som har leukocyttøkende virkning, og videre som terapeutiske midler for trombocytopeni.
Forbindelsen (I) eller salter av dette har lav toksisitet og kan bli benyttet sikkert.
Ved administrering av forbindelsen (I) eller et salt av dette, til f.eks. mennesket, kan den bli sikkert administrert oralt eller ikke-oralt alene eller i en farmasøytisk sammensetning ved blanding med en passende farmasøytisk akseptabel bærer, eksipiens eller fortynningsmiddel.
Eksempler på de ovenfor nevnte farmasøytiske sammensetningene omfatter injeksjoner, oralt administrerbare sammensetninger (f.eks. pulver, korn, kapsler, tabletter), topiske midler (f.eks. transnasalt middel, transdermalt middel, osv.), stikkpiller (f.eks. rektale stikkpiller, vaginale stikkpiller).
Disse farmasøytiske sammensetningene kan ble fremstilt ved per se kjente fremgangsmåter som vanlig blir benyttet i fremstillingen av farmasøytiske preparater.
Forbindelsen (I) eller et salt av denne ifølge oppfinnelsen, kan f.eks. bli preparert til vandige injeksjoner sammen med dispergeringsmiddel [f.eks. Tween 80 (fremstilt av Atlas Powder Co., USA), HCO 60 (fremstilt av Nikko Chemicals), polyetylenglycol, karboksymetylcellulose, natriumalginat eller lignende], et konserveringsmiddel (f.eks. metylparaben, propylparaben, benzylalkohol, klorobutanol eller lignende) og et isotoniserende middel (f.eks. natriumklorid, glycerin, sorbitol, glukose eller lignende), eller andre, eller til oleagenoseinjeksjoner ved oppløsning, suspensjon eller emulsjon i en vegetabilsk olje slik som olivenolje, sesamolje, peanøttolje, bomullsfrøolje, maisolje eller lignende, propylenglycol, eller andre.
For å bearbeide forbindelse (I) eller et salt av denne ifølge foreliggende oppfinnelse til sammensetninger for oral administrasjon, blir den utsatt for presstøping, ifølge en per se kjent fremgangsmåte, sammen med en eksipiens (f.eks. laktose, sukrose, stivelse eller lignende), et disintegre-ringsmiddel (f.eks. stivelse, kalsiumkarbonat eller lignende), et bindemiddel (f.eks. stivelse, gummi arabicum, karboksymetylcellulose, polyvinylpyrrolidon, hydroksypropyl-cellulose eller lignende) eller et smøremiddel (f.eks. talk, magnesiumstearat, polyetylenglycol 6000), osv., fulgt av, hvis nødvendig, maskering av smaken eller belegging ved en per se kjent fremgangsmåte for å gi enterisk belegg eller fremstilling av sammensetninger for forsinket frigiving. Eksempler på beleggingsmidler omfatter hydroksypropylmetyl-cellulose, etylcellulose, hydroksymetylcellulose, hydroksy-propylcellulose, polyoksyetylenglycol, Tween 80, Brulonick F68, celluloseacetatftalat, hydroksypropylmetylcellulose-ftalat, hydroksymetylcelluloseacetatsuccinat, Eudragit (fremstilt av Rohm, Tyskland, metakrylsyre.akrylsyre-kopolymer) og et pigment slik som titanoksider, rødt Jernoksid, osv. Underbeleggingslag kan bli fremskaffet mellom det enteriske belegget og kjernen ifølge en per se kjent fremgangsmåte.
For bearbeiding av forbindelsen (I) eller et salt av denne til f.eks. fast, halvfast eller flytende sammensetninger for toplkal anvendelse, kan en per se kjent fremgangsmåte bli benyttet. For bearbeiding av faste sammensetninger blir f.eks. forbindelsen (I) eller et salt av denne bearbeidet til pulverformige sammensetninger alene eller i blanding med en eksipiens (f.eks. glycol, mannitol, stivelse, mikrokrystal-llnsk cellulose eller lignende), et fortykningsmiddel (f.eks. naturlig gummi, cellulosederIvater, akrylsyrepolymerer eller lignende). Som den ovenfor nevnte væskesammensetningen blir det nesten som for injeksjoner, benyttet oleagenøse eller vandige suspensjoner. Som den halvfaste sammensetningen, blir det fortrinnsvis benyttet vandige eller oleagenøse gel- sammensetninger eller salver. Disse sammensetningene kan bli tilsatt en pH-regulator (f.eks. karbonsyre, fosforsyre, citronsyre, saltsyre, natriumhydroksid, osv.), et konserveringsmiddel (f.eks. para-hydroksybenzosyreestere , klorobutanol, benzalkoniumklorid, osv.), blant andre.
For fremstilling av stikkpiller kan forbindelsen (I) eller et salt av denne ifølge foreliggende oppfinnelse, bli bearbeidet inn i oleagenøst eller vannoppløselig faststoff, halvfast stoff eller flytende stikkpiller. Som den oleagenøse basen for de ovenfor nevnte sammensetningene, kan en hvilken som helst av de som ikke oppløser forbindelsen (I) eller et salt av denne, bli benyttet, som f.eks. glycerid av høyere fettsyre [f.eks. kakaosmør, Wittepsols (fremstilt av Dynamite Nobel, Inc.), osv.], mellomklasse fettsyre [f.eks. Migliols (fremstilt av Dynamite Nobel, Inc.), osv.] eller vegetabilsk olje (f.eks. sesamolje, soyaolje, bomullsfrøolje, osv.), blant andre. Eksempler på den vannoppløselige basen omfatter polyetylenglykoler og propylenglykoler, og, eksempler på vannoppløselige gelbaser omfatter naturlig gummi, cellulosederivater, vinylpolymerer, akrylsyrepolymerer. osv.
Mens doseringen av forbindelsen (I) eller et salt av denne administrert til mennesket som injeksjoner varierer med sykdom, administrasjonsvei, alder til pasienten og sykdoms-tilstanden, er den vanligvis I området fra omkring 0,01 pg til 20 mg av aktiv komponent, fortrinnsvis fra omkring 0,1 ug til 0,2 mg, mer foretrukket fra omkring 0,5 pg til 50 pg for en vanlig voksen pasient (50 kg kroppsvekt).
Eksempler
Ved hjelp av de følgende referanseeksempler, arbeids-eksempler, eksperimentelle eksempler og formulerings-eksempler, vil foreliggende oppfinnelse bli beskrevet i ytterligere detalj, men eksemplene er ikke ment å begrense oppfinnelsen på noen måte. Tallangivelsene som viser blandingsforhold 1 blandede oppløsningsmidler betyr volum-forhold av hvert oppløsningsmiddel. Prosent (%) betyr vekt-# hvis ikke annet er angitt. -NMR spekter er bestemt ved hjelp av et Varian Gemini 200 (200 MHz) type spektrometer ved bruk av tetrametylsilan som den interne standard, og uttrykking av alle S-verdier som ppm.
Symbolene som er benyttet i referanseeksemplene og arbeids-eksemplene har følgende betydning.
s; singlet, d: dublett, t: triplett, q: kvartett, dd: dobbel dublett, dt: dobbel triplett, m: multiplett, br: bred.
Referanseeksempel 1
Fremstilling av H-Gly-Gly-Gly-Glu(O<t>Bu)-Thr(<t>Bu)-Thr(<t>Bu)-0tBu (P-l)
H-Gly-Gly-Gly-OH (10,0 g, 52,9 mmol, fremstilt av Peptide Research Labs) ble oppløst i en 4N vandig oppløsning av natriumhydroksid (13,3 ml). Til oppløsningen ble det under isavkjøling tilsatt en 4N vandig oppløsning av natriumhydroksid (15,9 ml) og benzyloksykarbonylklorid (9,31 ml), så ble blandingen omrørt over natten ved 20'C. Reaksjonsblandingen ble vasket med eter. Til det vandige laget ble det under isavkjøling tilsatt 5M HC1 for å justere dets pH til 3, og blandingen ble satt på et kaldt sted over natten. Resulterende krystallinsk utfelling ble oppsamlet ved filtrering, vasket med kaldt vann og tørket. De således fremstilte krystaller ble benyttet videre uten rensing. Utbyttet var 13,4 g (78,5 %).
Z-Gly-Gly-Gly-0H (3,04 g, 9,41 mmol) fremstilt slik, ble oppløst i DMF (200 ml). Til oppløsningen ble det under isavkjøling tilsatt H0NB (1,86 g, 10,4 mmol) og DCC (2,14 g, 10,4 mmol). Blandingen ble omrørt i 2 timer under isavkjøling og så ble uoppløselig stoff filtrert fra.
Z-Glu(O<t>Bu)-Thr(<t>Bu)-Thr(<t>Bu)-O<t>Bu (6,66 g, 9,41 mmol) ble oppløst i metanol (300 ml). Til oppløsningen ble det tilsatt 10 % palladium-karbon. Blandingen ble omrørt i 2 timer under hydrogenstrøm ved romtemperatur under normaltrykk. Katalysatoren ble filtrert av og oppløsningsmidlet destillert av. Resten ble oppløst i DMF (150 ml). Til oppløsningen ble det under isavkjøling tilsatt diisopropyletylamin (1,80 ml, 10,4 mmol). Blandingen ble omrørt og tilsatt oppløsningen fremstilt ovenfor, og blandingen ble omrørt over natten ved 20<4>C, og så ble oppløsningsmidlet destillert av. Resten ble tilsatt kloroform og vann og ekstrahert med kloroform. Kloroformlaget ble vasket med en 10 % (vekt/volum) vandig oppløsning av citronsyre, vann, en mettet vandig oppløsning av natriumhydrogenkarbonat og vann, og tørket over vannfri natriumsulfat. Så ble oppløsningsmidlet destillert av. Resten ble renset ved silikagel kolonnekromatografi (5 volum-^ metanol-kloroform), fulgt av rekrystallisering fra etylacetat-acetonitril for å gi Z-Gly-Gly-Gly-Glu(OtBu )-Thr(<t>Bu)-Thr(<t>Bu)-O<t>Bu som krystaller. Utbyttet var 5,74 g
(75,4 SÉ)
smp. 167,5-168,0'C
[a]D2<5>+ 7,28°(c-1,03 i DMF)
Elementanalyse for C43H70<N>5<O>13<:>
Beregnet: C, 58,75; H, 8,03; N, 9,56
Funnet : C, 58,52; H, 7,78; N, 9,35
Aminosyreanalyse [6N HC1, 11CC, hydrolyse i 24 timer; verdier i parentes viser teoretiske verdier] : Glu 1,00 (1); Thr 1,81 (2); Gly 2,84 (3) Z-Gly-Gly-Gly-Glu(O<t>Bu)-Thr(<t>Bu)-Thr(<t>BuJ-O<t>Bu fremstilt ovenfor (1,97 g, 2,24 mmol) ble oppløst i metanol (60 ml). Til oppløsningen ble tilsatt 10 % palladium-karbon (120 mg). Blandingen ble omrørt i 2 timer under hydrogenstrøm ved vanlig temperatur under normaltrykk. Katalysatoren ble fjernet, så ble oppløsningsmidlet destillert av for å etterlate P-l som et fast produkt. Utbyttet var 1,64 g (98 *).
FAB-MS (M+H)=879 (teoretisk verdi - 879).
Referanseeksempel 2
Fremstilling av H-Gly-Gly-Gly-Glu( oHu )-Thr( tBu )-OtBu (P-2)
a) H-Glu(O<t>Bu)-Thr(<t>Bu)-O<t>Bu (1,27 g, 3,05 mmol) og Z-Gly-Gly-Gly-OH (0,99 g, 3,05 mmol) ble oppløst I DMF (20
ml). Til oppløsningen ble det tilsatt HOBT (453 mg, 3,35 mmol) og WSC (643 mg, 3,35 mmol). Blandingen ble omrørt i 8 timer ved 20°C. Reaksjonsblandingen ble konsentrert, konsentratet suspendert i 0,2 M vandig oppløsning av citronsyre (70 ml), fulgt av ekstraksjon med etylacetat (100 ml, 70 ml). Etylacetatlagene ble slått sammen og vasket med en 10 % (vekt/volum) vandig oppløsning av ammoniumklorid, 5 %
(vekt/volum) vandig oppløsning av natriumhydrogenkarbonat, vann og en mettet vandig saltvannsoppløsning, tørket over vannfri natriumsulfat, fulgt av konsentrasjon. Til konsentratet ble det tilsatt eterheksan. Den resulterende utfellingen ble samlet ved filtrering for å gi Z-Gly-Gly-Gly-Glu(O<t>Bu)-Thr(<t>Bu)-O<t>Bu (Z-P-2) som et hvitt pulverformig produkt (1,87 g, 85 %).
[a]D23+6,9'(c=0,55 i kloroform)
Elementanalyse for C35H55N5O11<:>
Beregnet: C, 58,24; H, 7,68; N, 9,70
Funnet : C, 57,87; H, 7,64; N, 9,97 b) Dette pulverformige produktet (1,09 g) ble oppløst i metanol (36 ml), og tilsatt 10 % palladium-karbon (109 ml). Blandingen ble omrørt i 2 timer i hydrogenstrøm ved vanlig temperatur under normaltrykk. Katalysatoren ble fjernet og oppløsningsmidlet ble destillert av for å gi P-2 som et pulverformig produkt (861 mg).
[<q>]d23+9,1<*>(c=0,53 i kloroform)
Elementanalyse for C27<H>4<qN>5<0>q<:>
Beregnet: C, 55,18; H, 8,40; N, 11,92
Funnet : C, 54,88; H, 8,57; N, 11,68
Referanseeksempel 3
Fremstilling av H-Glu(O<t>Bu)-Gly-Glu(O<t>Bu)-Gly-D-Glu(O<t>Bu)-O<l>Bu (P-3)
Hovedsakelig på samme måte som i Referanseeksempel 2 ble H-Glu(O<t>Bu)-Gly-Glu(O<t>Bu)-Gly-D-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (P-3) fremstilt.
Forbindelse Z-P-3: [a]D<20>+ 5,0° (c-0,54, i kloroform) Elementanalyse for C43H67<N>5<O>14<:>
Beregnet: C, 58,82; H, 7,69; N, 7,98
Funnet : C, 58,67; H, 7,67; N, 8,26
Forbindelse P-3: [a]D<20>- 6,1 (C-0,51, i kloroform) Elementanalyse for C35H61<N>5<O>12'
Beregnet: C, 56,51; H, 8,27; N, 9,42
Funnet : C, 56,66; H, 8,30; N, 9,63
Referanseeksempel 4
Fremstilling av H-Gly-Gly-Gly-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (P-4)
Hovedsakelig på samme måte som i Referanseeksempel 2 ble H-Gly-Gly-Gly-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (P-4) fremstilt.
Forbindelse Z-P-4: [a]])<23>+ 9,6° (c=>0,56, i kloroform) Elementanalyse for C27H40N4O9:
Beregnet: C, 57,43; H, 7,14; N, 9,92
Funnet : C, 57,60; H, 7,12; N, 9,88
Forbindelse P-4: [a]]]<23>+ 13,1° (c-0,51, i kloroform) Elementanalyse for C-^ql^^Oy • 0 , 5H2O:
Beregnet: C, 51,92; H, 8,03; N, 12,75
Funnet : C, 52,09; H, 7,89; N, 12,56
Referanseeksempel 5
Fremstilling av H-Gly-Gly-Gly-D-Glu( OlBu)-OtBu (P-5)
Hovedsakelig på samme måte som i Referanseeksempel 2 ble H-Gly-Gly-Gly-D-Glu-(O<t>Bu)-O<t>Bu (P-5) fremstilt.
Forbindelse Z-P-5: [a]D23 - 9,1° (c=0,54, i kloroform) Elementanalyse for C27H4Q<N>4O9:
Beregnet: C, 57,43; H, 7,14; N, 9,92
Funnet : C, 57,38; H, 7,06; N, 10,02
Forbindelse P-5: [a]D<23>- 13,5° (c-0,54, i kloroform) Elementanalyse for C19H34N4O7•0,5H2O
Beregnet: C, 51,92; H, 8,03; N, 12,75
Funnet : C, 51,98; H, 7,93; N, 12,68
Referanseeksempel 6
Fremstilling av H-Glu(O<t>Bu)-Gly-D-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (P-6)
Hovedsakelig på samme måte som Referanseeksempel 2 ble H-Glu(O<t>Bu)-Gly-D-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (P-6) fremstilt.
[a]D<23>- 12° (c-0,54, i kloroform)
Elementanalyse for 039^3^0^0:
Beregnet: C, 64,71; H, 7,38; N, 5,80
Funnet : C, 64,55; H, 7,43; N, 6,09
c) Dette pulverformlge produktet (2,10 g) ble oppløst i diklorometan (63 ml) og tilsatt plperidin (7,0 ml), og
blandingen ble omrørt i en time ved romtemperatur. Til reaksjonsblandingen ble det tilsatt etylacetat (300 ml) og blandingen ble ekstrahert med IN HC1 (70 ml) og 0.03N HC1 (100 ml x 2). Det vandige laget ble justert til pH 6,0 og vasket med en blanding av heksan:eter (=1:1) (100 ml x 5). pH ble så justert til 8,6, fulgt av ekstraksjon med etylacetat (150 ml x 2). Ekstraktet ble tørket over vannfri natriumsulfat fulgt av konsentrasjon for å gi P-6 som et fargeløst oljeformig produkt (1,31 g).
[a]D<23>- 17° (c-0,47, i kloroform)
Elementanalyse for C24H43N3O3<:>
Beregnet: C, 57,47; H, 8,64; N, 8,38
Funnet : C, 57,40; H, 8,73; N, 8,60
Referanseeksempel 7
Fremstilling av H-Gly-Gly-Glu(O<t>Bu)-0<t>Bu (P-7)
Hovedsakelig på samme måte som i Referanseeksempel 2 ble H-Gly-Gly-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (P-7) fremstilt.
Forbindelse Z-P-7:
Elementanalyse for C25H37N3O8'0,5H2O
Beregnet: C, 58,13; H, 7,41; N, 8,13
Funnet : C, 58,44; H, 7,37; N, 8,33
Referanseeksempel 8
Fremstilling av H-Gly-Gly-Gly-Asp(0<t>Bu)-0<t>Bu (P-8)
På hovedsakelig samme måte som i Referanseeksempel 2 ble H-Gly-Gly-Gly-Asp(O<t>Bu)-O<t>Bu (P-8) fremstilt.
Forbindelse Z-P-8:
Elementanalyse for 039^3^09:
Beregnet: C, 56,72; H, 6,96; N, 10,18
Funnet : C, 56,48; H, 6,88; N, 10,23
Forbindelse P-8:
Elementanalyse for C1gH32N4C'7:
Beregnet: C, 51,91; H, 7,74; N, 13,45
Funnet : C, 51,80; H, 8,11; N, 13,50
Referanseeksempel 9
Fremstilling av H-Gly-Gly-D-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (P-9)
På hovedsakelig samme måte som i Referanseeksempel 2 ble H-Gly-Gly-D-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (P-9) fremstilt.
Forbindelse Z-P-9: [a]D<24>- 9,3° (c-0,53, i kloroform) Elementanalyse for C25<H>37<N>30g<*>0,5H2O
Beregnet: C, 58,13; H, 7,41; N, 8,13
Funnet : C, 58,31; H, 7,42; N, 8,24
Forbindelse P-9: [ot]n<23>- 11,9' (c-0,37, i kloroform) Elementanalyse for C17H31<N>306•0,25H20:
Beregnet: C, 54,02; H, 8,40; N, 11,12
Funnet : C, 53,84; H, 8,58; N, 11,24
Referanseeksempel 10
Fremstilling av H-Gly-D-GlutC^Bu)-O<t>Bu (P-10)
På hovedsakelig samme måte som i Referanseeksempel 2 ble H-Gly-D-Glu(0<t>Bu)-O<t>Bu (P-10) fremstilt.
Forbindelse Z-P-10: [a]n<20>- 10,3° (c- 0,52, i kloroform) Elementanalyse for C23H34<N>2O7•0,25H2O:
Beregnet: C, 60,71; H, 7,64; N, 6,16
Funnet : C, 60,79; H, 7,68; N, 6,28
Forbindelse P-10: [a]D20 - 17,9° (c-0,52, i kloroform) Elementanalyse for C^^g^C^:
Beregnet: C, 56,94; H, 8,92; N, 8,85
Funnet : C, 56,81; H, 8,95; N, 9,04
Referanseeksempel 11
Fremstilling av H-Gly-Glu(OtBu)-Glu( 0lBn)-0tBu (P-ll)
På hovedsakelig samme måte som i Referanseeksempel 2 ble H-Gly-Glu(0<t>Bu)-Glu(0<t>Bu)-O<t>Bu (P-ll) fremstilt.
Forbindelse Z-P-ll: smp. 92,4-92,7'C
Caln<24>- 3.5°(c-0,51, i kloroform)
Elementanalyse for C32<H>4g<N>3<0>1o•0,25H20:
Beregnet: C, 60,03; H, 7,79; N, 6,56
Funnet : C, 60,18; H, 7,81; N, 6,26
Forbindelse P-ll: [a]D<24>- 6,8° (c-0,54, I kloroform) Elementanalyse for 0241143^03-0 ,25H20:
Beregnet: C, 56,95; H, 8,66; N, 8,30
Funnet : C, 56,92; H, 8,74; N, 8,06
Referanseeksempel 12
Fremstilling av H-Gly-Glu(0<t>Bu)-D-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (P-12)
På hovedsakelig samme måte som i Referanseeksempel 2 ble H-Gly-Glu(0<t>Bu)-D-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (P-12) fremstilt.
Forbindelse Z-P-12: [a]D<23>- 11,5° (c-0,53, 1 kloroform) Elementanalyse for C32H4g<N>3<0>10<:>
Beregnet: C, 60,46; H, 7,77; N, 6,61
Funnet : C, 60,47; H, 7,88; N, 6,53
Forbindelse P-12: [oc]D<23>- 19,8<*>(c-0,51, 1 kloroform) Elementanalyse for 0241143^03' 0 ,5H20:
Beregnet: C, 56,45; H, 8,69; N, 8,23
Funnet : C, 56,52; H, 8,77; N, 8,25
Referanseeksempel 13
Fremstilling av H-Glu(0<t>Bu)-Gly-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (P-13)
På hovedsakelig samme måte som i Referanseeksempel 2 ble H-Glu(0<t>Bu)-Gly-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (P-13) fremstilt.
Forbindelse Z-P-13: [a]D<24>+ 4,2" (c-0,53, 1 kloroform) Elementanalyse for C32H49N3<O>10<:>
Beregnet: C, 60,46; H, 7,77; N, 6,61
Funnet : C, 60,48; H, 7,78; N, 6,88
Forbindelse P-13: [a]D<24>+ 7,0° (c-0,52, i kloroform) Elementanalyse for 0241143^03* 0 ,25H20:
Beregnet: C, 56,95; H, 8,66; N, 8,30
Funnet : C, 56,94; H, 8,60; N, 8,04
Referanseeksempel 14
Fremstilling av H-Glu(O<t>Bu)-D-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (P-14)
På hovedsakelig samme måte som i Referanseeksempel 2 ble H-Glu(O<t>Bu)-D-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (P-14) fremstilt.
Forbindelse Z-P-14: [ot]D<2>2<3>- 7,9e (c-0,56, i kloroform) Elementanalyse for C30H46N2O9<:>
Beregnet: C, 62,27; H, 8,01; N, 4,84
Funnet : C, 62,49; H, 8,14; N, 5,07
Forbindelse P-14: [a]D<23>+ 2,3° (c-0,61, i kloroform) Elementanalyse for C22<H>40<N>2O7'1,5H2O:
Beregnet: C, 56,03; H, 9,19; N, 5,94
Funnet : C, 56,04; H, 8,96; N, 5,92
Referanseeksempel 15
Fremstilling av H-Glu(O<t>Bu)-Glu(O<t>Bu)-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (P-15)
På hovedsakelig samme måte som i Referanseeksempel 2 ble H-Glu(0<t>Bu)-Glu(0<t>Bu)-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (P-15) fremstilt.
Forbindelse Z-P-15: [a]D<24>- 11,7<»>(c=0,53, i kloroform) Elementanalyse for C3gH6iN30i2<:>
Beregnet: C, 61,32; H, 8,05; N, 5,50
Funnet : C, 61,40; H, 8,13; N, 5,28
Forbindelse Z-15: [a]D<24>- 13,9' (c-0,49, i kloroform) Elementanalyse for C31H55N3O10'
Beregnet: C, 59,12; H, 8,80; N, 6,67
Funnet : C, 58,96, H, 8,91; N, 6,80
Referanseeksempel 16
Fremstilling av H-Glu(O<t>Bu)-Glu(O<t>Bu)-D-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (P-16)
På hovedsakelig samme måte som i Referanseeksempel 2 ble H-Glu(O<t>Bu)-Glu(O<t>Bu)-D-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (P-16) fremstilt.
Forbindelse Z-P-16: [a]D<24>- 20,6' (c=0,52, i kloroform)Elementanalyse for C3gH61N30i2-
Beregnet: C, 61,32; H, 8,05; N, 5,50
Funnet : C, 61,20; H, 8,26; N, 5,31
Forbindelse P-16: [a]D<24>- 25,5' (c=0,54, i kloroform) Elementanalyse for C31<H>55<N>3010'0>25H2°:
Beregnet: C, 58,70; H, 8,82; N, 6,63
Funnet : C, 58,76; H, 8,91; N, 6,45
Referanseeksempel 17
Fremstilling av NH2(CH2)7CO-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (P-17)
a) Til en oppløsning av 8-(benzyloksykarbonylamino )-oktansyre (1,55 g) og H-Glu( O^ u )-OtBu hydroklorid (1,88 g) i
DMF (50 ml) ble det tilsatt TEA (1,76 ml) og DEPC (1,29 g), og blandingen ble omrørt 1 24 timer ved 20"C. Til reaksjonsblandingen ble det tilsatt vann, og blandingen ble ekstrahert med etylacetat. Ekstraktet ble vasket med en 5 % (vekt/volum, heretter på den samme måten) vandig oppløsning av citronsyre, en mettet vandig oppløsning av natriumhydrogenkarbonat og en mettet vandig saltvannsoppløsning, og tørket over vannfri natriumsulfat. Oppløsningsmidlet ble destillert av og resten ble renset ved silikagel kolonnekromatografi (heksan:etylacetat=2:l) for å gi Z-NH(CH2)7C0-Glu( OlBu)- OtBu (Z-P-17)
(2,40 g, utbytte 85 K>) som et fargeløst, oljeaktig produkt.
IR (neat) >/: 3310, 1720, 1650 cm-<1>
<X>H-NMR (CDC13) S: 1,10-1,37 (8H,m), 1,44 ( 9H, s ) , 1,47 (9H,s), 1,48-2,43 (8H,m), 3,18 (2H,q,J = 6,6Hz ) , 4,41-4,54 (lH.ra), 4,70-4,88 (lH,m), 5,10 (2H,s ) , 6,15 (lH.d,J-8,0Hz ) , 7,27-7,37 (5H,m)
b) Til en oppløsning av forbindelsen Z-P-17 (1,19 g) fremstilt som ovenfor i etanol (20 ml) ble det tilsatt 10 %
palladium-karbon (100 mg). Blandingen ble omrørt i 2 timer ved 20<*>0 i hydrogenstrøm. Reaksjonsblandingen ble filtrert for å oppnå P-17 (739 mg, utbytte 83 %) som et fargeløst, oljeformig produkt.
IR (neat) >/: 3280, 1720, 1660 cm-<1>
<1>H-NMR (CDCI3) 5: 1,20-1,40 (6H,m), 1,44 (9H,s ) , 1,47 (9H,s), 1,52-2,38 (l0H,m) 2,38-2,65 (2H,m), 2,73 (2B,t,J-7,0Hz ) , 4,42-4,55 (lH,m) 6,21 (1H,d,J=8,2Hz)
Referanseeksempel 18
Fremstilling av NH2(CH2)11<C>O-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (P-18)
På hovedsakelig samme måte som 1 Referanseeksempel 17 hie NH2(C<E>2)11CO-Glu(0<t>Bu)-O<t>Bu (P-18) syntetisert.
Forbindelse Z-P-18: IR (neat) V: 3310, 1725, 1650 crn-1
<*>H-NMR (CDC13) S: 1,10-1,41 (16H,m), 1,44 (9H,s ) , 1,47 (9H,s) 1,41-2,44 (8H,m), 3,19 (2H,dt,J=7,0, 7,0Hz), 4,42-4,56 (lH,m), 5,10 (2H,s), 6,13 (1H,d,J-7,6Hz ) , 7,23-7,40 (5H,m) Forbindelse P-18: IR (neat) v/: 3280, 1730, 1650 cm-<1><i>H-NMR (CDC13) S: 1,05-1,40 (l6H,m), 1,44 (9H,s), 1,47 (9H,s), 1,55-1,72 (4H,m), 1,72-2,50 (lOH.m), 2,68 (2H,t,J=7,0Hz), 3,19 (2H,t,J=7,6Hz), 4,43-4,57 (lH,m), 6,14
(lH,d,J=7,8Hz)
Referanseeksempel 19
Fremstilling av 4-aminobenzoyl-Glu(0<t>Bu)-O<t>Bu (P-19)
Til en oppløsning av 4-aminobenzosyre (6,86 g) og H-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu hydroklorid (14,8 g) i DMF (200 ml) ble det tilsatt TEA (17 ml) og DEPC (12,2 g). Blandingen ble omrørt i 48 timer ved 20'C. Til reaksjonsblandingen ble det tilsatt vann, hvorpå blandingen ble ekstrahert med etylacetat. Ekstraktet ble vasket med en 5 % vandig oppløsning av citronsyre, en mettet vandig oppløsning av natriumhydrogenkarbonat og en mettet vandig saltvannsoppløsning, fulgt av tørking over vannfri natriumsulfat. Oppløsningsmidlet ble destillert av og resten ble vasket med eter for å gl forbindelsen P-19 (16,2 g, utbytte 86 %) som et hvitt pulverformig produkt.
IR (KBr) v/: 3450, 3390, 3370, 1715, 1625, 1610 cm-<1>
%-NMR (CDC13) S: 1,42 (9H,s), 1,49 (9H,s ) , 1,90-2,53 (4H,m), 3,99 (2H,br s), 4,60-4,73 (lH.m), 6,61-6,72 (2H,m), 6,76 (lH,d,J=7,6 Hz), 7,60-7,71 (2H,m)
Referanseeksempel 20
Fremstilling av 4-(glycylamino)benzoyl-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (P-20)
a) Til en oppløsning av forbindelsen P-19 (568 g) fremstilt 1 Referanseeksempel 19 i pyridin (2 ml) ble det tilsatt fosfortriklorid (0,087 ml) og blandingen ble omrørt i 2 timer ved romtemperatur. Til blandingen ble det ytterligere tilsatt Z-glycin (209 mg), som ble omrørt 1 18 timer ved 20°C. Til reaksjonsblandingen ble det tilsatt vann, hvorpå blandingen ble ekstrahert med etylacetat, fulgt av tørking av etylacetatfasen over vannfri natriumsulfat. Oppløsningsmidlet ble destillert av og resten ble renset ved silikagel kolonnekromatografi (heksan:etylacetat=l:1) for å gi forbindelsen Z-P-20 (414 mg, utbytte 73 %) som et hvitt pulverformig produkt. IR (KBr) <J: 3310, 1700, 1640, 1600 cm-<1> <1>H-NMR (CDCI3) S: 1,42 (9H , s ), 1,49 (9H,s ) , 1,95-2,55 (4H,m) 4,02 (2H,d,J-5,8Hz ), 4,59-4,72 (lH.m), 5,17 (2H , s ) , 5,59-5,75 (lH,m), 7,09 (1H,d,J-7,8Hz), 7,30-7,42 (5H,m), 7,53 (2H,d,J=8,0Hz) , 7,77 (2H,d,J=8,0Hz), 8,30-8,50 (lH,m) b) Til en oppløsning av forbindelsen Z-P-20 (414 mg) i etanol (4 ml) ble det tilsatt 10 % palladium-karbon (40 mg).
Blandingen ble omrørt i 2 timer ved 20°C med hydrogenstrøm. Reaksjonsblandingen ble filtrert for å gi forbindelsen P-20 (296 mg, utbytte 94 %) som et hvitt pulverformig produkt.
IR (KBr) V: 3425, 3400, 1740, 1720, 1680, 1640, 1610 cm-<1><1>H-NMR (CDCI3) S: 1,41 (9H,s). 1,48 (9H,s), 1,90-2,55 (4H,m), 3,59 (2H,br s), 4,58-4,72 (lH.ra), 7,02-7,15 (lH.m), 7,65 (2H,d,J-8,8Hz), 7,77 (2H,d,J-8,8Hz), 9,65-9,77 (lH,m)
Referanseeksempel 21
Fremstilling av NH2(CH2)5CO-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (P-21)
Etter hovedsakelig samme prosedyre som i Referanseeksempel 17 hie NH2(C<H>2)5C0-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (P-21) syntetisert.
Forbindelse P-21: ^H-NMR (CDC13) 5: 1,389 (2H,m), 1,444 (9H,s), 1,50-1,75 (4H,m), 1,75-2,15 (2H,m), 2,15-2,38 (4H,m), 2,796 (2H,t,J-6,6Hz) , 3,320 (2H,bs), 4,460 (lH.m), 6,400
(lH,d,J-7,4 Hz)
IR (neat) s/ : 3270, 3040, 2970, 2920, 2855, 1725, 1645. 1540, 1470, 1450, 1390, 1360, 1320, 1290, 1250, 1220, 1150 cm-1
Referanseeksempel 22
Fremstilling av NH2(CH2)6NHC0-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (P-22)
a) Heksametylendiamin (2,32 g, 20 mmol) ble oppløst i metanol (20 ml). Til oppløsningen ble det tilsatt en IN
vandig oppløsning av natriumhydroksid (22 ml) og en oppløs-ning av karbobenzoksyklorld (3,4 g, 20 mmol) 1 THF (20 ml) samtidig. Blandingen ble omrørt i en time ved 20°C. Reak-sjonsblandlngen ble konsentrert til tørrhet, og konsentratet
ble opplost 1 kloroform (100 ml). Oppløsningen ble vasket med vann og en mettet vandig saltvannsoppløsning. Det organiske laget ble tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert til tørrhet under redusert trykk. Konsentratet ble absorbert på en sillkagel kolonne (20 g) blandet med ammoniakk. Eluering ble utført med kloroform-metanol-vann (65:25:4) for å gi et fargeløst oljeaktlg produkt. Dette produktet ble oppløst i TEA (1,34 ml, 9,64 mmol) og DCM (10 ml). Til oppløsningen ble det under isavkjøling tilsatt 4-nitrofenylkloroformat (971 mg, 4,82 mmol), og blandingen ble omrørt 1 en time. Til reaksjonsblandingen ble det tilsatt kloroform (20 ml), hvorpå blandingen ble vasket med vann og en mettet vandig saltvannsoppløsning. Det organiske laget ble tørket over vannfri natriumsulfat og konsentrert til tørrhet under redusert trykk. Konsentratet ble vasket med etyleter for å gl 6-benzyloksykarbonylamino-l-(p-nitrofenyloksy-karbonyl)amlnoheksan som fargeløse krystaller (1,16 g, utbytte 14,5 <t>)
<i>H-NMR (CDC13) S: 1,25-2,70 (8H,m), 3,225 (4H,m), 4,742 (lH.br s), 5,099 (2H,s), 5,25 (lH.br s) 7,284 (2H,d,J=9,0Hz), 8,237 (2H,d,J = 9,0Hz )
b) Forbindelsen fremstilt som ovenfor (1,16 g, 2,79 mmol) og H-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu hydroklorld (825 mg, 2,79 mmol) ble
oppløst i DCM (10 ml). Til oppløsningen ble det tilsatt DMAP (680 mg, 5,58 mmol) og TEA (0,77 ml, 5,58 mmol), og blandingen ble omrørt i 2 timer ved 20°C. Til reaksjonsblandingen ble det tilsatt kloroform (20 ml). Blandingen ble vasket med vann ved pH 3,5, fulgt av vasking med en mettet vandig oppløsning av natriumhydrogenkarbonat. Det organiske laget ble tørket over vannfri natrlumsulfat og konsentrert under redusert trykk. Konsentratet ble renset ved sillkagel kolonnekromatografi [20 g, etylacetat - n-heksan (2:3)] for å gi Z-NH(CH2 )6NHC0-Glu(0tBu)-0tBu (Z-P-22) som et hvitt, fast produkt (1,50 g, utbytte 100 %).
^H-NMR (CDCI3) S: 1,20-1,38 (8H,m), 1,436 (9H,s ) , 1,453 (9H,s), 1,70-2,22 (2H,m), 2,326 (2H,m), 3,169 (4H,m), 4,340
(lH.m), 4,626 (lH.br s), 4,869 (lH.br s), 5,045 (lH,d,J=7,6Hz), 5,103 (2H,s ) , 7,352 (5H,s)
IR (neat) V: 3350, 2980, 2940, 2855, 1730, 1640, 1560, 1455, 1395, 1370, 1330, 1255, 1150, 1100, 1030, 850, 750, 735, 700 cm-<1>
c) 10 % palladium-karbon (250 mg) ble suspendert 1 metanol (20 ml). Suspensjonen ble omrørt 1 30 minutter under
hydrogenstrøm og tilsatt forbindelsen Z-P-22 (1,50 g, 2,79 mmol), fulgt av omrøring i 1,5 time ved 20<*>C under hydrogen-strøm. Fra reaksjonsblandingen ble det fjernet uoppløselig stoff ved filtrering. Filtratet ble konsentrert til tørrhet under redusert trykk for å gi P-22 som et fargeløst fast produkt (1,12 g, utbytte 100 %).
1-H-NMR (CDC13) S: 1,391 (lOH.rn), 1,431 ( 9H, s ) , 1,451 (9H,s), 1,747 (2H,m), 1,60-2,15 (2H,m), 2,90-3,20 (4H,m), 4,321 (lH.m), 6,013 (2H,m)
IR (neat) ^: 3350. 2980, 2930, 2860, 1730, 1640, 1560, 1500 1475, 1455, 1390, 1365, 1250, 1150 cm-<1>
Referanseeksempel 23
Fremstilling av 4-(aminometyl )benzoyl-Glu(0tBu)-0tBu hydroklorid (P-23)
a) Til en oppløsning av 4-(aminometyl )benzosyre (25 g)
i en 2N vandig oppløsning av natriumhydroksid (100 ml) ble
det dråpevls under Isavkjøling tilsatt en oppløsning av benzyloksykarbonylklorid (33,8 g) i THF (50 ml), og blandingen ble omrørt i 2 timer. Den resulterende utfellingen ble samlet ved filtrering, vasket med vann, IN HC1 og eter, fulgt av tørking under redusert trykk for å gi 4-(Z-aminometyl )benzosyre som et hvitt pulverformig produkt (10,5 g, utbytte 22 %).
IR (neat) V: 3313, 1684, 1612, 1529, 1430, 1322, 1292, 1253, 1054, 761, 696 cm-<1>
1-H-NMR (CDCI3) 5: 4,26 (2H,d,J=6,2Hz), 5,05 (2H, s ) , 7,31 (2H,d,J=8,0 Hz), 7,36 (5H,s), 7,87 (2H,d,J=8,0Hz)
b) Til en oppløsning av 4-(Z-aminometyl)benzosyre (1,0 g) syntetisert som ovenfor, H-Glu(0'tBuJ-O^Bu hydroklorid (1,15 g) og DEPC (860 mg) i DMF (20 ml) ble det dråpevis tilsatt TEA (1,06 g). Blandingen ble omrørt i en time ved 20"C. Oppløsningsmidlet ble destillert av under redusert trykk og resten ble renset ved sillkagel kolonnekromatografi (n-heksan:etylacetat=2:1) for å gi 4-(Z-aminoraetyl )benzoyl-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (1,86 g, utbytte 100 %) som et fargeløst voksformig produkt. IR (neat)>/: 1720, 1700, 1640, 1530, 1500, 1360, 1250, 1145 cm-1 <i>H-NMR (CDC13) S: i'42 (9H,s), 1,49 (9H,s), 1,90-2,55 (4H,m), 4,43 (2H,d,J=6,0Hz), 4,66 (lH.m), 5,15 (3H,s ) , 7,01 (lH,d,J=7,0Hz), 7,30-7,40 (7H,m), 7,79 (2H,d,J=8,4Hz ) c) En suspensjon av forbindelsen fremstilt ovenfor (1,85 g) og 10 % palladium-karbon (200 mg) i metanol (13 ml) ble
utsatt for katalytisk reduksjon med forbruk av hydrogen (80
ral). Katalysatoren ble filtrert fra, og til filtratet ble det tilsatt 4N HC1 etylacetatoppløsning (0,88 ml). Oppløsningen ble konsentrert for å gi 4-(aminometyl)benzoyl-Glu(OtBu )-OtBu hydroklorid (P-23) som et amorft produkt.
IR (neat) n/: 3400, 3000, 1731, 1650, 1540, 1506, 1369, 1235, 1151 cm-<1>
■1-H-NMR (CDC13) S: 1,41 ( 9H, s ) , 1,48 (9H,s), 1,90-2,40 (4H,m), 4,13 (2H,s), 4,59 (lH.m), 7,48 (2H,d,J=8,0Hz ) , 7,69
(3H,d,J=8,0Hz)
Referanseeksempel 24
Fremstilling av 4-(N-(t-butyloksykarbonylmetyl )-aminometyl )benzoyl-Glu(OtBu)-OtBu (P-24 )
a) Til en oppløsning av metyltereftalaldehydat (3,0 g), H-Gly-o<t>Buhydroklorid(3,0 g), TEA (1,81 g) og eddiksyre
(1,08 g), ble det under isavkjøling tilsatt natrlumcyano-borhydrld (1,15 g), og blandingen ble omrørt 1 en time ved
20'C. Reaksjonsblandingen ble konsentrert og resten oppløst 1 etylacetat. Oppløsningen ble vasket med en mettet vandig oppløsning av natriumhydrogenkarbonat, fulgt av tørking. Den resulterende blandingen ble konsentrert, og konsentratet ble renset på en silikagelkolonne (n-heksan:etylacetat=9:1 - 5:1) for å gi metyl 4-(N-t-butyloksykarbonylmetyl)-aminometyl )benzoat (1,98 g, utbytte 39 .
IR (neat) >/: 2975, 1720, 1605, 1455, 1430, 1410, 1390, 1360, 1280, 1225, 1150, 1100 cm-<1>
l-H-NMR (CDC13) S: 1,47 (9H,s), 3,30 (2H,s), 3,85 (2H, s) , 3,91 (3H,s), 7,41 (2H,d,J=8,4Hz), 8,00 (2H,d,J=8,4Hz ) b) Til en oppløsning av forbindelsen syntetisert som ovenfor (1,03 g) og TEA (445 mg) i DCM (20 ml) ble det
dråpevis under isavkjøling tilsatt benzyloksykarbonylklorld (690 mg). Blandingen ble omrørt i 2 timer. Oppløsningsmidlet ble destillert av under redusert trykk. Resten ble oppløst i en blanding av THF (6 ml)-MeOH (10 ml )-H20 (1 ml). Til oppløsningen ble det tilsatt LiOITB^O (400 mg), og blandingen ble omrørt i 4 timer ved 20°C. Oppløsningsmidlet ble destillert av under redusert trykk. Resten ble gjort sur med en 5 ^ vandig oppløsning av KHSO4, fulgt av ekstraksjon med kloroform. Ekstraktet ble tørket, så ble oppløsningsmidlet destillert av under redusert trykk. Resten ble renset på en sillkagel kolonne (n-heksan:etylacetat=l:1) for å gi 4-(N-benzyloksykarbonyl-N-(t-butyloksykarbonylmetyl )aminometyl)benzosyre (337 mg, utbytte 23 *).
IR (neat) V: 1735, 1705, 1700, 1450, 1410, 1360, 1290, 1230, 1220, 1150 cm-<1>
<*>H-NMR (CDCI3) 5: 1,37 (l/2x9H,s) 1,45 (l/2x9H,s), 3,81 (l/2x2H,s), 3,92 (l/2x2H,s), 4,60-4,75 (2H,m), 5,20 (2H,s), 7,25-7,45 (7H,m), 8,05 (1/2x2H,d,J=8,0Hz ) , 8,08
(l/2x2H,d,J=8,0Hz)
c) En oppløsning av forbindelsen fremstilt som ovenfor (335 mg), H-Glu(O<t>Bu)-0<t>Bu hydroklorid (273 mg), DEPC (205
mg) og TEA (255 mg) i DMF (8 ml) ble omrørt 1 en time ved 20°C. Oppløsningsmidlet ble destillert av under redusert trykk og resten ble renset på en sillkagel kolonne (n-heksan:etylacetat~4:1) for å gi 4-(N-benzyloksykarbonyl-N-(t-butyloksykarbonylmetyl)aminometyl)benzoyl-Glu(O<t>Bu-O<t>Bu (504 mg, utbytte 94 %). IR (neat) s/: 3350, 2970, 1730, 1710, 1660, 1530, 1495, 1450, 1360, 1240, 1220, 1150 cm-<1><1>H-NMR (CDC13) S: 1,37 (l/2x9H,s), 1,42 (9H,s), 1,45 (l/2x9H,s), 1,50 (9H,s), 1,95-2,50 (4H,m), 3,77 (l/2x2H,s), 3,88 (l/2x2H,s), 4,60-4,75 (3H,m), 5,20 (2H,s), 7,02 (lH,d,J=7,4Hz), 7,20-7,40 (7H,m), 7,77 (1/2x2H,d,J-8,0Hz), 7,80 (l/2x2H,d,J=8,0Hz) d) En oppløsning av forbindelsen fremstilt som ovenfor (500 mg) og 10 % Pd-C (200 mg) i MeOH (8 ml) ble utsatt for
katalytisk reduksjon med et forbruk på 20 ml hydrogen. Katalysatoren ble fjernet, så ble oppløsningsmidlet destillert av under redusert trykk. Resten ble pulverisert fra n-heksan-etylacetat (3:1) for å gi forbindelsen P-24 (265 mg, utbytte 67 %) som et hvitt pulverformig produkt.
IR (neat) 3400, 2970, 1730, 1650, 1535, 1525, 1360, 1245, 1150 cm_<1>
^H-NMR (CDC13) S: 1,43 (9H,s), 1,47 (9H,s), 1,49 (9H,s), 1,90-2,50 (4H,m), 3,53 (2H,s), 4,41 (2H,s) , 4,65 (lH,m), 7,18 (lH,d,J=7,2Hz), 7,70 (2H,d,J=8,0Hz), 7,88 ( 2H,d,J=8,0Hz )
Referanseeksempel 25
Fremstilling av H-Gly-Lys(Boc )-Gly-OtBu (P-25)
På hovedsakelig samme måte som i Referanseeksempel 2, ble H-Gly-Lys(Boc)-Gly-O<t>Bu (P-25) fremstilt.
Forbindelse Z-P-25: [a]D<24>- 13,4' (c-0,58, i kloroform) Elementanalyse for 027^2^08*0,5H2O:
Beregnet: C, 57,95; H, 7,74; N, 10,01
Funnet : C, 57,73; H, 7,44; N, 10,03
Forbindelse P-25: [a]D<24>- 23,8° (c=0,58, i kloroform) Elementanalyse for C19<H>35N4O6"B^O:
Beregnet: C, 52,52; H, 8,81; N, 12,89
Funnet : C, 52,72; H, 8,81; N, 12,86
Eksempel 1
Fremstilling av (Fmoc-(S)-Cys-OtBu )2
D-cystin (5,00 g, 20,8 mmol) ble oppløst 1 60 % perklorsyre (10,2 ml), og under isavkjøling ble det tilsatt t-butylacetat (117 ml) og reaksjonsblandingen ble omrørt i 2 dager ved 20°C. Reaksjonsblandingen ble filtrert for å samle opp krystaller. Krystallene ble vasket med eter (150 ml), så suspendert i en mettet vandig oppløsning av natriumhydrogenkarbonat (100 ml). Suspensjonen ble utsatt for ekstraksjon med etylacetat (2 x 150 ml). Etylacetatlagene ble slått sammen, vasket med vann og tørket over vannfri natriumsulfat, fulgt av konsentrasjon for å gi et fargeløst oljeformig produkt (4,16 g). Dette oljeformige produktet ble oppløst I THF (60 ml). Til oppløsningen ble det under isavkjøling tilsatt N-(9-fluorenylmetyloksykarbonyloksy)succlnimid (8,16 g, 24,2 mmol) og N-etylmorfol in (3,08 ml, 24,2 mmol) oppløst i THF (10 ml), og blandingen ble omrørt 1 2,5 timer ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble konsentrert, og konsentratet ble suspendert i en 10 % vandig oppløsning av citronsyre (200 ml). Suspensjonen ble ekstrahert med kloroform (2 x 200 ml). Kloroformlagene ble slått sammen, vasket med vann, og så tørket over vannfri natriumsulfat, fulgt av konsentrasjon. Konsentratet ble krystallisert fra etylacetat for å gl (Fmoc-(SJ-Cys-O^Bu )2 som fargeløse krystaller (8,68 g, utbytte 52 smp. 149,5-150°C.
[a]D2<3>+ 5,9° (c-0,52, i kloroform)
Elementanalyse for C44H48N2<O>8S2<:>
Beregnet: C, 66,31; H, 6,07; H, 3,51; S, 8,05
Funnet : C, 66,55; H, 6,13; H, 3,43; S, 7,97
Eksempel 2
Fremstilling av (2R,6S)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(PamO )-4-THT-0H
(GC-1)
a) (Fmoc-(R)-Cys-O<t>Bu)2(10,0 g, 12,5 mmol) fremstilt ved fremgangsmåten beskrevet i litteraturreferanse (J.W.
Metzger et al., Int. J. Peptide Protein Res. 38, s. 545, 1991) ble oppløst i DCM (80 ml). Til oppløsningen ble det under Isavkjøling tilsatt sinkpulver (3,27 g, 50,0 mmol) og en samblanding av MeOH-36#HCl-konsentrert H2S04(100:7:1)
(heretter kalt "syreblandlngsoppløsning" (40 ml). Den resulterende blanding ble omrørt 1 30 minutter ved 20°C. Til reaksjonsblandingen ble det tilsatt (S)-(-)-glycidol (8,29 ml, 125 mmol), som ble omrørt i 2 timer ved 40°C. Reaksjonsblandingen ble konsentrert inntil dets volum var redusert til 40 ml, så ble uoppløselig stoff filtrert fra. Til filtratet ble det tilsatt en mettet vandig saltvannsoppløsning (200 ml), og blandingen ble ekstrahert med DCM (2 x 300 ml). DCM-lagene ble kombinert, tørket over vannfri natriumsulfat, og så konsentrert. Konsentratet ble kromatografert på en sillkagel kolonne, eluert med etylacetat-heksan (1:1, 2:1). Fraksjoner inneholdende den ønskede forbindelsen ble slått sammen og konsentrert for å gi (2R,6S)-2-Fmoc-amino-6,7-dihydroksy-4-THT-0<t>Bu (GC-la) som et hvitt pulverformig produkt (10,9 g, utbytte 92 %).
[a]D2<1>+ 6,7°(c-0,56, i kloroform)
Elementanalyse for C25H3iN0^'H2<0:>
Beregnet: C, 61,08; H, 6,77; N, 2,85; S, 6,52 Funnet : C, 60,95; H, 6,62; N, 2,70; S, 6,31 b) Forbindelsen GC-la (11,0 g, 23,2 mmol) ble oppløst 1 THF (200 ml), og tilsatt palmitinsyre (19,1 g, 74,3 mmol), DIC (11,6 ml, 74,3 mmol) og 4-dimetylaminopyridin (DMAP, 1,13 g, 9,26 mmol). Blandingen ble omrørt i 12 timer ved 20"C. Reaksjonsblandingen ble konsentrert og konsentratet ble suspendert 1 10 % vandig oppløsning av citronsyre (400 ml). Suspensjonen ble ekstrahert med etylacetat (800 ml). Etylacetatlaget ble vasket med vann, og så konsentrert. Konsentratet ble kromatografert på en sillkagel kolonne, eluert med etylacetat-heksan (1:20, 1:10) etter hverandre. Fraksjoner inneholdende den ønskede forbindelsen ble blandet og konsentrert. Konsentratet ble krystallisert fra heksan for å gi (2R,6S)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-0<t>Bu (GC-lb) som fargeløse krystaller (14,4 g, utbytte 65
smp. 62,5-63,5'C
Elementanalyse for C57Hq^N0gS:
Beregnet: C, 72,03; H, 9,65; N, 1,47; S, 3,37
Funnet : C, 71,94; H, 9,85; N, 1,51; S, 3,23
c) Forbindelsen GC-lb (14,4 g, 15,2 mmol) ble oppløst i TFA (200 ml), og oppløsningen ble satt i 30 minutter ved
20°C. Reaksjonsblandingen ble konsentrert, og konsentratet ble oppløst i etylacetat (500 ml). Denne oppløsningen ble vasket med vann, tørket over vannfri natriumsulfat, fulgt av konsentrering. Resulterende krystaller ble rekrystallisert fra etylacetat-heksan for å gi GC-1 som fargeløse krystaller (12,4 g, utbytte 91
smp. 82,5-83,5°C
[a]D2<3>+ 14,9°(c-0,55, i kloroform)
Elementanalyse for C53H83NO8S<:>
Beregnet: C, 71,18; H, 9,35; N, 1,57; S, 3,59
Funnet : C, 70,96; H, 9,36; N, 1,57; S, 3,58
Eksempel 3
Fremstilling av (2R,6R )-2-Fmoc-amino-6,7-dihydroksy-4-THT-O<t>Bu (GC-2a), (2R,6R )-2-Fmoc-amlno-6,7-bis(PamO )-4-THT-OtBu (GC-2b) og (2R,6R)-2-Fmoc-amlno-6,7-bis(Pam0)-4-THT-0H (GC-2)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 2, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-dihydroksy-4-THT-0<t>Bu (GC-2a), (2R,6R )-2-Fmoc-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-0<t>Bu (GC-2b) og (2R , 6R )-2-Fmoc-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-0H (GC-2) fremstilt.
Forbindelse GC-2a: [a]D<21>- 8,8° (c=0,65, i kloroform) Elementanalyse for C^B^NOfcS-0,5H20: Beregnet: C, 62,22; H, 6,68; N, 2,90; S, 6,64
Funnet : C, 62,14; H, 6,66; N, 2,81; S, 6,54 Forbindelse GC-2b: smp. 58,0'C
Elementanalyse for C57H91NO3S<:>
Beregnet: C, 72,03; H, 9,65; N, 1,47; S, 3,37
Funnet : C, 71,94; H, 9,58; N, 1,43; S, 3,36 Forbindelse GC-2: smp- 90,0"C
[a]D2<0>+ 12,9°(c-0,73, i kloroform)
Elementanalyse for C53Hg3N0gS:
Beregnet: C, 71,18; H, 9,35; N, 1,57; S, 3,59
Funnet : C, 71,23; H, 9,12; N, 1,54; S, 3,47
Eksempel 4
Fremstilling av (2S,6R )-2-Fmoc-amino-6,7-bls(PamO)-4-THT-0tBu (GC-3a), (2S,6R)-2-Fmoc-amlno-6,7-bls(Pam0)-4-THT-0<t>Bu (GC-3b) og (2S,6R)-2-Fmoc-amlno-6,7-bis(Pam0)-4-THT-0H (GC-3)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 2, ble (2S,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(PamO )-4-THT-0tBu (GC-3a), (2S,6R )-2-Fmoc-araino-6,7-bis(Pamo )-4-THT-0tBu (GC-3b) og (2S,6R)-2-Fmoc-amlno-6,7-bis(PamO)-4-THT-OH (GC-3) fremstilt.
Forbindelse GC-3a: [a]D<23>- 7,6° (c=0,67, i kloroform) Elementanalyse for C25H31NO: Beregnet: C, 63,40; H, 6,60; N, 2,96; S, 6,67 Funnet : C, 63,12; H, 6,55; N, 2,90; S, 6,81
Forbindelse GC-3b: smp. 62 ,5-63 ,0"C
Elementanalyse for CsyHgiNOgS:
Beregnet: C, 72,03; H, 9,65; N, 1,47; S, 3,37
Funnet : C, 72,04; H, 9,78; N, 1,49; S, 3,38 Forbindelse GC-3: smp. 82,5-83,0<*>C
[a]D2<3>- 16,0°C (c=0,51, i kloroform)
Elementanalyse for C53Hg3N0gS:
Beregnet: C, 71,18; H, 9,35; N, 1,57; S, 3,59
Funnet : C, 71,20; H, 9,38; N, 1,45; S, 3,53
Eksempel 5
Fremstilling av (2S,6S)-2-Fmoc-amino-6,7-dihydoksy-4-THT-0<t>Bu (GC-4a), (2S,6S)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-0<t>Bu (GC-4b) og (2S,6S)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(Pamo)-4-THT-0H (GC-4)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 2, ble (2S,6S)-2-Fmoc-amlno-6,7-dihydroksy-4-THT-0<t>Bu (GC-4a), (2S,6S )-2-Fmoc-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-0<t>Bu (GC-4b) og (2S,6S )-2-Fmoc-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-0H (GC-4) fremstilt.
Forbindelse GC-4a: [a]D<23>+ 8,4° (c-0,67, i kloroform) Elementanalyse for C25H31NO5S: Beregnet: C, 63,40, H, 6,60; N, 2,96; S, 6,77
Funnet : C, 63,15; H, 6,47; N, 2,88; S, 6,67 Forbindelse GC-4b: smp. 58,0<*>C
Elementanalyse for C57HgiN0gS:
Beregnet: C, 72,03; H, 9,65; N, 1,47; S, 3,37
Funnet : C, 72,01; H, 9,55; N, 1,34; S, 3,36 Forbindelse GC-4: smp. 88,5-89,0'C
[a]D23 -13,1'(c=0,56, 1 kloroform)
Elementanalyse for C53Hg3N0gS:
Beregnet: C, 71,18; H, 9,35; N, 1,57; S, 3,59
Funnet : C, 71,20; H, 9,23; N, 1,46; S, 3,56
Eksempel 6
Fremstilling av (2R,6S)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu-Thr-Thr-OH (Forbindelse 1)
a) Forbindelsen GC-1 (1,79 g) syntetisert i Eksempel 2 ble oppløst i DMF (20 ml) og under isavkjøling tilsatt HONB
(394 mg), DIC (344 jjÆ) og H-Gly-Gly-Gly-Glu( OtBu )-Thr ("tBu )-Thr(<t>Bu)-O<t>Bu (P-l) (1,64 g) fremstilt i Referanseeksempel 1. Blandingen ble omrørt i 24 timer ved 20°C. Reaksjonsblandingen ble konsentrert og resten oppløst i kloroform. Oppløsningen ble vasket med en 10 % vandig oppløsning av cltronsyre, vann, en mettet vandig oppløsning av natriumhydrogenkarbonat og vann i rekkefølge. Kloroformlaget ble tørket over vannfri natriumsulfat og så konsentrert. Til konsentratet ble det tilsatt acetonitril. Den resulterende utfellingen ble oppsamlet ved filtrering for å gi (2R,6S)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu-(OtBu )-Thr(<t>Bu)-Thr(<t>Bu)-0<t>Bu (la) som et hvitt pulverformig produkt (3,16 g, utbytte 97 %).
[o<]d<18>+ 6,5° (c-0,54, i kloroform)
Elementanalyse for CggH^sNyOigS:
Beregnet: C, 65,20; H, 9,02: N, 6,05; S, 1,98
Funnet : C, 64,90; H, 8,83; N, 5,86; S, 1,78 Aminosyreanalyse [6N HC1, 110'C, hydrolyse 1 20 timer; verdiene 1 parentes viser teoretiske verdier]: Glu 1,00 (1); Thr 1,93 (2); Gly 2,96 (3)
FAB-MS (M+Na) - 1643 (teoretisk verdi - 1643)
b) Forbindelsen la (2,70 g) ble oppløst i DMF (27 ml). Til oppløsningen ble det tilsatt piperidin (2,7 ml), og
blandingen ble omrørt i en time ved 20"C. Reaksjonsblandingen ble konsentrert og kromatografert på en sillkagel kolonne, eluert med kloroform-metanol (50:1, 20:1), i rekkefølge. Fraksjoner inneholdende den ønskede forbindelsen ble kombinert og konsentrert for å gi (2R,6S )-2-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu(0<t>Bu)-Thr(<t>Bu)-Thr(<t>Bu)-0<t>Bu (lb) som et hvitt pulverformig produkt (2,10 g, utbytte 90 *.
[a]D1<8>+ 7,1°(c-0,49, i kloroform)
Elementanalyse for C73<H>135<N>7O16S<:>
Beregnet: C, 62,67; H, 9,73; N, 7,01; S, 2,29
Funnet : C, 62,55; H, 9,85; N, 6,95; S, 2,21 Aminosyreanalyse [6N HC1, 110°C, hydrolyse i 20 timer; verdier i parentes viser teoretiske verdier]: Glu 1,00 (1); Thr 1,92 (2); Gly 2,95 (3)
FAB-MS (M+Na) - 1399 (teoretisk verdi = 1399)
c) Forbindelsen lb (200 mg) ble oppløst i TFA (2,0 ml) og satt i 1,5 time ved 20°C. Reaksjonsblandingen ble
konsentrert og tilsatt acetonitril. Den resulterende utfellingen ble oppsamlet ved filtrering for å gl forbindelse 1 som et hvitt pulverformig produkt (164 mg).
Elementanalyse for C57Hio3N7°16s'1•5H2°:
Beregnet: C, 56,98; H, 8,89; N, 8,16; S, 2,67
Funnet : C, 57,04; H, 8,80; N, 8,11; S, 2,72
Eksempel 7
Fremstilling av (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu-Thr-Thr-OH (Forbindelse 2)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(PamO )-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu(0tBu)-Thr(<t>Bu)-Thr(<t>Bu)-O<t>Bu (2a), (2R ,6R )-2-amlno-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu(O<t>Bu)-Thr(<t>Bu)-Thr(<t>Bu)-O<t>Bu (2b) og (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu-Thr-Thr-OH (Forbindelse 2) fremstilt.
Forbindelse 2a: [cx]D20 + 3,4a (c=0,66, i kloroform) Elementanalyse for CggH^sNyOigS• 0,5H2O: Beregnet: C, 64,84; H; 9,03; N, 6,01; S, 1,97
Funnet : C, 64,88; H, 9,18; N, 6,08; S, 1,95 Forbindelse 2b: [a]D<20>+ 4,9" (c-0,55, i kloroform) Elementanalyse for C73<H>135<N>7016S•0,5H20: Beregnet: C, 62,27; H, 9,74; N, 6,96; S, 2,28
Funnet : C, 62,31; H, 9,73; N, 6,99; S, 2,19 Forbindelse 2: [a]D<21>- 2.3° (c=0,58, i 5 % TFA-kloroform) Elementanalyse for C53<H>1o3<N>7°16s'1■5H2°: Beregnet: C, 56,98; H, 8,89; N, 8,16; S, 2,67
Funnet : C, 56,72; H, 8,62; N, 8,11; S, 2,63
Eksempel 8
Fremstilling av (2S,6R)-2-amlno-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu-Thr-Thr-OH (Forbindelse 3)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2S,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(Pamo)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu(0<t>Bu)-Th^(<t>Bu)-Thr(<t>Bu)-0<t>Bu (3a), (2S,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu(O<t>Bu)-Thr(<t>Bu)-Thr(<t>Bu)-O<t>Bu (3b) og (2S,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu-Thr-Thr-OH (Forbindelse 3) fremstilt.
Forbindelse 3a: [a]n20 + 15,9<*>(c-0,51, i kloroform) Elementanalyse for CggHj^NyOigS' 0 , 5H2O: Beregnet: C, 64,84; H, 9,03; N, 6,01; S, 1,97
Funnet : C, 64,63; H, 9,07; N, 5,80; S, 2,21 Forbindelse 3b: [a]n<20>+ 21,4' (c-0,64, 1 kloroform) Elementanalyse for C73H135N7<O>15<S:>Beregnet: C, 62,68; H, 9,73; N, 7,01; S, 2,29
Funnet : C, 62,75; H, 9,41; N, 7,05; S, 2,40 Forbindelse 2: [a]D<21>- 21,7° (c-0,63, 1 5 <t> TFA-kloroform) Elementanalyse for C57<H>io3<N>7°16s'H2°: Beregnet: C, 57,41; H, 8,88; N, 8,22; S, 2,69
Funnet : C, 57,38; H, 8,66; N, 8,27; S, 2,59
Eksempel 9
Fremstilling av (2S,6S)-2-aarino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu-Thr-Thr-OH (Forbindelse 4)
På hovedsakelig samme måte som 1 Eksempel 6, ble (2S,6S)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu(0<t>Bu)-Thr(<t>Bu)-Thr(<t>Bu)-O<t>Bu (4a), (2S,6S)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu(O<t>Bu)-Thr(<t>Bu)-Thr(<t>Bu)-O<t>Bu (4b) og (2S,6S)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu-Thr-Thr-0H (Forbindelse 4) fremstilt.
Forbindelse 4a: [c<]d20 + 15,3° (c=0,65, i kloroform) Elementanalyse for CggHj^NyOigS: Beregnet: C, 65,20; H, 9,02; N, 6,05; S, 1,98
Funnet : C, 65,05; H, 9,05; N, 6,07; S, 1,86 Forbindelse 4b: [a]D<20>+ 24,4" (c-0,62, i kloroform) Elementanalyse for C73H135<N>7O15<S:>Beregnet: C, 62,68; H, 9,73; N, 7,01; S, 2,29
Funnet : C, 62,53; H, 9,48; N, 6,93; S, 2,31 Forbindelse 4: [a]D<21>- 15,6<*>(c-0,5, i 5 <f> TFA-kloroform) Elementanalyse for C53Hio3<N>7<0>i6s'1-5H20: Beregnet: C, 56,98; H, 8,89; N, 8,16; S, 2,67
Funnet : C, 56,74; H, 8,57; N, 8,03; S, 2,72
Eksempel 10
Fremstilling av (2R ,6R )-2-amino-6,7-bis(PamO-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu-Thr-OH (Forbindelse 5)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(Pamo)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu(0<t>Bu)-Thr(<t>Bu)-0<t>Bu (5a), (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu(O<t>Bu)-Thr(<t>Bu)-O<t>Bu (5b) og (2R,6R )-2-amino-6 , 7-bis(Pam0)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu-Thr-0H (Forbindelse 5) fremstilt.
Forbindelse 5a: [a]D<23>- 6,9" (c=0,51, i kloroform) Elementanalyse for CgoH^sgN^O^^S: Beregnet: C, 65,63; H, 8,95; N, 5,74; S, 2,19
Funnet : C, 65,59; H, 9,16; N, 5,94; S, 2,27 Forbindelse 5b: [a]D<23>- 6,9° (c-0,50, i kloroform) Elementanalyse for C65Hi20N6°14s'•
Beregnet: C, 62,87; H, 9,74; N, 6,77; S, 2,58
Funnet : C, 62,96; H, 9,57; N, 6,89; S, 2,42 Forbindelse 5: [a]D<23>- + 4,9° (c-0,49 i 5 % TFA-kloroform) Elementanalyse for C^^^ b^ b^ lA5' 0' 5^ 20: Beregnet: C, 58,81; H, 9,03; N, 7,76; S, 2,96
Funnet : C, 58,94; H, 8,82; N, 7,70; S, 2,99
Eksempel 11
Fremstilling av (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu-Gly-Glu-Gly-D-Glu-OH (Forbindelse 6)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(PamO )-4-THT-Glu(0tBu)-Gly-Glu(OtBu)-Gly-D-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (6a), (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu(O<t>Bu)-Gly-Glu(O<t>Bu)-Gly-D-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (6b) og (2R.6R)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu-Gly-Glu-Gly-D-Glu-OH (Forbindelse 6) fremstilt.
Forbindelse 6a: [a]D23 + 1,8' (c-0,50, i kloroform) Elementanalyse for Cgg<H>j^<N>fcOigS: Beregnet: C, 65,24; H, 8,83; N, 5,19; S, 1,98
Funnet : C, 65,05; H, 8,87; N, 5,15; S, 1,91 Forbindelse 6b: [a]D<23>+ 1,0' (c-0,50, 1 kloroform) Elementanalyse for Cj2^ l32^ bGn^' Q >^ 20: Beregnet: C, 62,32; H, 9,53; N, 5,97; S, 2,28
Funnet : C, 62,30; H, 9,53; N, 5,77; S, 2,19 Forbindelse 6 : [a]D<21>+ 3,8° (c=0,53 1 5 % TFA-kloroform) Elementanalyse for CsoHgn^O^S^^O: Beregnet: C, 57,46; H, 8,63; N, 7,05; S, 2,69
Funnet : C, 57,56; H, 8,60; N, 7,24; S, 2,54
Eksempel 12
Fremstilling av (2R,6R )-2-amino-6,7-bls(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu-OH (Forbindelse 7)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (7a), (2R,6R)-2-amlno-6,7-bls(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (7b) og (2R,6R)-2-amlno-6,7-bis(PamO )-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu-OH (Forbindelse 7) fremstilt.
Forbindelse 7a: [a]D<23>- 6,4° (c-0,50, i kloroform) Elementanalyse for C72Hn5N5014S: Beregnet: C, 66,18; H, 8,87; N, 5,36; S, 2,45
Funnet : C, 66,03; H, 8,87; N, 5,31; S, 2,22 Forbindelse 7b: [a]D<23>- 6,7<*>(c=0,63, i kloroform) Elementanalyse for Csy<H>iøs<N>sO-^S^I^O: Beregnet: C, 62,09; H, 9,78; N, 6,35; S, 2,91
Funnet : C, 62,12; H, 9,59; N, 6,36; S, 2,87 Forbindelse 7: [a]D<23>+ 8,3" (c-0,60 i 5 % TFA-kloroform) Elementanalyse for C4gHggN50i2S<*>H20<:>Beregnet: C, 59,43; H, 9,26; N, 7,07; S, 3,24
Funnet : C, 59,19; H, 8,96; N, 6,96; S, 3,26
Eksempel 13
Fremstilling av (2R,6R )-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-D-Glu-OH (Forbindelse 8)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bls(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-D-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (8a), (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-D-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (8b) og (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-D-Glu-OH (Forbindelse 8) fremstilt.
Forbindelse 8a: [a]rj23 - 7,1<*>(c-0,49, i kloroform) Elementanalyse for C72<H>115<N>5O14S: Beregnet: C, 66,18; H, 8,87; N, 5,36; S, 2,45
Funnet : C, 66,12; H, 8,77; N, 5,52; S, 2,45 Forbindelse 8b: [a]D<23>- 14,5" (c=0,53, i kloroform) Elementanalyse for C57<H>105<N>5O12S: Beregnet: C, 63,13; H, 9,76; N, 6,46; S, 2,96
Funnet : C, 63,10; H, 9,83; N, 6,44; S, 2,77 Forbindelse 8: [a]D<23>+ 8,1<*>(c-0,62 15* TFA-kloroform) Elementanalyse for C4qHgg<N>5<0>^2s*0•5H20: Beregnet: C, 59,97; H, 9,24; N, 7,14; S, 3,27
Funnet : C, 59,82; H, 9,14; N, 6,96; S, 3,38
Eksempel 14
Fremstilling av (2R,6S)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu-OH (Forbindelse 9)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6S)-2-Fmoc-araino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu(OtBu)-OtBu (9a), (2R,6S)-2-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (9b) og (2R,6S)-2-amino-6,7-bis(Pam0-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu-OH (Forbindelse 9) fremstilt.
Forbindelse 9a: [a]])<24>- 3,3° (c=0,51, i kloroform) Elementanalyse for C72H1^5N50^4S,H20: Beregnet: C, 66,18; H, 8,87; N, 5,36; S, 2,45
Funnet : C, 66,10; H, 8,89; N, 5,46; S, 2,58 Forbindelse 9b: [a]D<21>- 5,5° (c-0,73, i kloroform) Elementanalyse for C57H105<N>5O12S: Beregnet: C, 63,13; H, 9,76; N, 6,46; S, 2,96
Funnet : C, 62,84; H, 9,61; N, 6,42; S, 2,96 Forbindelse 9: [a]D<21>+ 13,5° (c=0,671 5 % TFA-klorof orm) Elementanalyse for C4qHggN50i2s'2»5H2°: Beregnet: C, 57,85; H, 9,31; N, 6,88; S, 3,15
Funnet : C, 57,89; H, 8,82; N, 6,88; S, 3,05
Eksempel 15
Fremstilling av (2R,6S )-2-amino-6,7-bls(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-D-Glu-OH (Forbindelse 10)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6S)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-Gly-Gly-Gly-D-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (10a), (2R,6S)-2-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-Gly-Gly-Gly-D-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (10b) og (2R,6S)-2-aroino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-D-Glu-OH (Forbindelse 10) fremstilt. Forbindelse 10a: [a]D<24>- 5,1' (c=0,57, i kloroform) Elementanalyse for C72<H>2i5N5<0>^4S*H20: Beregnet: C, 66,18; H, 8,87; N, 5,36; S, 2,45
Funnet : C, 66,07; H, 8,94; N, 5,48; S, 2,49 Forbindelse 10b: [a]D<21>- 10,7° (c-0,57, i kloroform) Elementanalyse for C57Hio5<N>5°12s: Beregnet: C, 63,13; H, 9,76; N, 6,46; S, 2,96
Funnet : C, 63,13; H, 9,51; N, 6,46; S, 2,96 Forbindelse 10: [a]D<21>+ 13,2' (c = 0,67 i 5 % TFA-kloroform) Elementanalyse for C4g<H>g9<N>50i2s'2H2°: Beregnet: C, 58,36; H, 9,29; N, 6,95; S, 3,18
Funnet : C, 58,30; H, 8,90; N, 6,76; S, 3,25
Eksempel 16
Fremstilling av (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu-Gly-D-Glu-OH (Forbindelse 11)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amlno-6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu(0<t>Bu)-Gly-D-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (lia), (2R,6R)-2-amino-6,7-bls(PamO)-4-THT-Glu(0<t>Bu)-Gly-D-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (11b) og (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu-Gly-D-Glu-OH (Forbindelse 11) fremstilt.
Forbindelse lia: [a]D<23>- 7,0' (c-0,56, i kloroform) Elementanalyse for C77H124<N>4015S: Beregnet: C, 67,12; H, 9,07; N, 4,07; S, 2,33
Funnet : C, 67,01; H, 9,19; N, 4,01; S, 2,31 Forbindelse 11b: [a]D<23>- 18' (c-0,53, i kloroform) Elementanalyse for C62<H>114<N>4013S: Beregnet: C, 64,44; H, 9,94; N, 4,85; S, 2,77
Funnet : C, 64,23; H, 9,95; N, 4,94; S, 2,64 Forbindelse 11: [a]D<21>+ 2,1» (c=0,53i 5 % TFA-kloroform) Elementanalyse for CsnHgo^O^S-B^O: Beregnet: C, 59,73; H, 9,22; N, 5,57; S, 3,19
Funnet : C, 59,56; H, 9,05; N, 5,48; S, 3,15
Eksempel 17
Fremstilling av (2R,6R )-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Glu-OH (Forbindelse 12)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bls(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (12a), (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-Gly-Gly-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu
(12b) og (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-Gly-Gly-Glu-0H (Forbindelse 12) fremstilt.
Forbindelse 12a: [a]D<23>- 5,2° (c-0,58, i kloroform) Elementanalyse for C7qHi12<n>4°13<s:>Beregnet: C, 67,28; H, 9,03; N, 4,48; S, 2,57
Funnet : C, 67,22; H, 8,84; N, 4,55; S, 2,51 Forbindelse 12b: [a]D<23>- 7,9" (c=0,60, 1 kloroform) Elementanalyse for C55<H>io2N4°lls•0,5H20: Beregnet: C, 63,73; H, 10,02; N, 5,41; S, 3,09
Funnet : C, 63,88; H, 10,22; N, 5,48; S, 3,09 Forbindelse 12: [a]D<23>+ 14,8° (c=0,68 i 5 % TFA-kloroform) Elementanalyse for C47<H>86<N>4011S-2,5H20: Beregnet: C, 58,78; H, 9,55; N, 5,83; S, 3,34
Funnet : C, "58,91; H, 8,83; N, 5,67; S, 3,06
Eksempel 18
Fremstilling av (2R,6R )-2-aarino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-0H (Forbindelse 13)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bls(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-O<t>Bu (13a), (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-Gly-Gly-Gly-0<t>Bu (13b) og (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-Gly-Gly-Gly-0H (Forbindelse 13) fremstilt.
Forbindelse 13a: [a]D<23>- 11,0' (c-0,60, i kloroform) Elementanalyse for C63<H>1oo<N>4<0>lls: Beregnet: C, 67,47; H, 8,99; N, 5,00; S, 2,86
Funnet : C, 67,47; H, 8,86; N, 4,92; S, 2,89 Forbindelse 13b: [a]D<23>- 14,3° (c-0,48, i kloroform) Elementanalyse for C48HgoN4Og<S:>Beregnet: C, 64,11; H, 10,09; N, 6,23; S, 3,57
Funnet : C, 63,97; H, 10,01; N, 6,21; S, 3,44 Forbindelse 13: "[cOd23 + 12,2° (c-0,63 i 5 <f> TFA-klorof orm) Elementanalyse for C44H82<N>40gS-2,5H20: Beregnet: C, 59,50; H, 9,87; N, 6,31; S, 3,61
Funnet : C, 59,21; H, 9,17; N, 6,16; S, 3,34
Eksempel 19
Fremstilling av (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Glu-OH (Forbindelse 14)
På hovedsakelig samme måte som 1 Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amlno-6,7-bls(PamO )-4-THT-Gly-Glu(0tBu)-0tBu (14a), (2R,6R)-2-amino-6,7-bls(PamO)-4-THT-Gly-Glu(0<t>Bu)-O<t>Bu (14b) og (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-Gly-Glu-0H (Forbindelse 14) fremstilt.
Forbindelse 14a: [a]D<23>- 2,0'C (c-0,50, 1 kloroform) Elementanalyse for C^gHio9<N>3<0>12<s:>Beregnet: C, 68,48; H, 9,21; N, 3,52; S, 2,69
Funnet : C, 68,62; H, 9,26; N, 3,60; S, 2,68 Forbindelse 14b: [a]D<23>- 5,6' (c-0,57, 1 kloroform) Elementanalyse for C53H99N3<O>1QS: Beregnet: C, 65,60; H, 10,28; N, 4,33; S, 3,30
Funnet : C, 65,51; H, 10,31; N, 4,20; S, 3,25 Forbindelse 14: [a]D<21>+ 2,1<»>(c=0,53 1 5 K> TFA-klorof orm) Elementanalyse for C45<H>83<N>30iqS"0,5H20: Beregnet: C, 62,32; H, 9,76; N, 4,85; S, 3,70
Funnet : C, 62,16; H, 9,64; N, 4,61; S, 3,67
Eksempel 20
Fremstilling av (2R,6R)-2-amlno-6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu-OH
(Forbindelse 15)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (15a), (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(Pam0 )-4-THT-Glu(0tBu)-0tBu (15b) og (2R.6R)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu-0H (Forbindelse 15) fremstilt.
Forbindelse 15a: [a]D<23>- 2,0° (c=0,58, i kloroform) Elementanalyse for Cfj6<H>^o6<N>20lls: Beregnet: C, 69,81; H, 9,41; N, 2,47; S, 2,82
Funnet : C, 69,79; H, 9,26; N, 2,44; S, 2,74 Forbindelse 15b: [cx]D<23>- 10,1° (c-0,56, i kloroform) Elementanalyse for C51<H>96N2O9S: Beregnet: C, 67,06; H, 10,59; N, 3,07; S, 3,51 Funnet : C, 67,04; H, 10,36; N, 3,09; S, 3,45 Forbindelse 15: [a]D<23>+ 3,7<*>(c-0,60 i 5 % TFA-kloroform) Elementanalyse for C43Hgø<N>209S-0,5H2O: Beregnet: C, 63,75; H, 10,08; N, 3,46; S, 3,96
Funnet : C, 63,70; H, 9,75; N, 3,31; S, 3,88
Eksempel 21
Fremstilling av (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Asp-OH (Forbindelse 16)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Asp(0tBu J-OtBu (16a), (2R,6R)-2-amino-6,7-bls(PamO)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Asp(0<t>Bu)-0<t>Bu (16b) og (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(Pamo)-4-THT-Gly-Gly-Gly-Asp-OH (Forbindelse 16) fremstilt.
Forbindelse 16a: [a]D<22>+ 3,7" (c-0,61, i kloroform) Elementanalyse for C71<H>113<N>5O14S: Beregnet: C, 65,97; H, 8,81; N, 5,42; S, 2,48
Funnet : C, 65,61; H, 9,13; N, 5,90; S, 2,24 Forbindelse 16b: [a]D<22>- 1,5" (c-0,55, i kloroform) Elementanalyse for C5(,E1o3N5°12s: Beregnet: C, 62,83, H, 9,70; N, 6,54; S, 3,00
Funnet : C, 62,77; H, 9,92; N, 6,75; S, 2,94 Forbindelse 16: [a]D<25>+ 19,2' (c-0,64 i 5 * TFA-kloroform) Elementanalyse for C4gHg7<N>50i2S'1,5H2<0:>Beregnet: C, 58,51; H, 9,21; N, 6,87; S, 3,25
Funnet : C, 58,68; H, 9,00; N, 6,87; S, 3,25
Eksempel 22
Fremstilling av (2R,6R )-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Gly-D-Glu-OH (Forbindelse 17)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(Pamo)-4-THT-Gly-Gly-D-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (17a) , (2R ,6R )-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Gly-D-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (17b) og (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-Gly-Gly-D-Glu-OH (Forbindelse 17) fremstilt.
Forbindelse 17a: [a]D<24>- 10,0' (c-0,54, i kloroform) Elementanalyse for C7oHn2N4°13s' 0 > 5H2°: Beregnet: C, 66,79; H, 9,05; N, 4,45; S, 2,55 Funnet : C, 66,59; H, 8,75; N, 4,75,; S, 2,53 Forbindelse 17b: [a]D<24>- 15,7° (c-0,49, i kloroform) Elementanalyse for C55H:lo2n4011s'0-5H2° : Beregnet: C, 63,73; H, 10,02; N, 5,41; S, 3,09
Funnet : C, 63,67; H, 10,23; N, 5,28; S, 3,07 Forbindelse 17: [a]D<24>+ 6,0' (c-0,51, i 5 % TFA-kloroform) Elementanalyse for C47H86N4O11S•2H2O: Beregnet: C, 59,34; H, 9,54; N, 5,89; S, 3,37
Funnet : C, 59,01; H, 9,17; N, 5,92; S, 3,08
Eksempel 23
Fremstilling av (2R ,6R )-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Gly-OH (Forbindelse 18)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(PamO )-4-THT-Gly-Gly-0tBu (18a), (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO )-4-THT-Gly-Gly-0tBu (18b) og (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO )-4-THT-Gly-Gly-0H (Forbindelse 18) fremstilt.
Forbindelse 18a: [a]D<24>- 7,6' (c=0,52 i kloroform) Elementanalyse for C^HgyNsOigS: Beregnet: C, 68,83; H, 9,18; N, 3,95; S, 3,01
Funnet : C, 69,06; H, 9,28; N, 4,09; S, 2,88 Forbindelse 18b: [a]D<24>- 13,4' (c-0,52, i kloroform) Elementanalyse for C^HgyNsOgS" 0 ,5^0: Beregnet: C, 64,90; H, 10,42; N, 4,94; S, 3,77
Funnet : C, 64,99; H, 10,45; N, 4,82; S, 3,49 Forbindelse 18: [a]D<25>+ 10,7° (c-0,51 i 5 % TFA-kloroform) Elementanalyse for C42H7gN30gS*1,5H20: Beregnet: C, 62,03; H, 10,16; N, 5,17; S, 3,94
Funnet : C, 61,80; H, 9,97; N, 4,85; S, 4,04
Eksempel 24
Fremstilling av (2R,6R )-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-D-Glu-OH (Forbindelse 19)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-aralno-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-D-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (19a), (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-Gly-D-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (19b) og (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-Gly-D-Glu-0H (Forbindelse 19) fremstilt.
Forbindelse 19a: [a]D<24>- 12, 5' (c-0,55 i kloroform) Elementanalyse for C^gHiog^O^S: Beregnet: C, 68,43; H, 9,21; N, 3,52; S, 2,69
Funnet : C, 68,31; H, 9,25; N, 3,72; S, 2,48 Forbindelse 19b: [ot]D<24>- 16,4° (c-0,53, i kloroform) Elementanalyse for C53<H>ggN30ios'0,8H20: Beregnet: C, 64,64; H, 10,30; N, 4,27; S, 3,26
Funnet : C, 64,62; H, 10,25; N, 4,08; S, 3,22 Forbindelse 19: [a]D<24>+ 14,2° (c-0,52 i 5 t TFA-kloroform) Elementanalyse for C45Hg3N3<0>10s*2>2H20: Beregnet: C, 60,19; H, 9,81; N, 4,68; S, 3,57
Funnet : C, 60,05; H, 9,44; N, 4,35; S, 3,61
Eksempel 25
Fremstilling av (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-D-Glu-0H
(Forbindelse 20)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(PamO )-4-THT-D-Glu(C^Bu)-OtBu (20a), (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-D-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (20b) og (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-D-Glu-0H (Forbindelse 20) fremstilt.
Forbindelse 20a: [a]D<22>- 7,4° (c=0,60i kloroform) Elementanalyse for Cé^Hiob^OllS*
Beregnet: C, 69,81; H, 9,41; N, 2,47; S, 2,82
Funnet : C, 69,66; H, 9,52; N, 2,85; S, 2,53 Forbindelse 20b: [ot]])22 - 15,9° (c-0,66, 1 kloroform) Elementanalyse for C^ iEc) fiii2Q9s' G ' 5^ 20: Beregnet: C, 66,41; H, 10,60; N, 3,04; S, 3,48
Funnet : C, 66,42; H, 10,42; N, 3,25; S, 3,21 Forbindelse 20: [a]D<25>- 1,5° (c-0,55 15* TFA-kloroform) Elementanalyse for C43HgnN2<0>gS<:>Beregnet: C, 64,46; H, 10,06; N, 3,50; S, 4,00
Funnet : C, 64,56; H, 9,92; N, 3,42; S, 3,90
Eksempel 26
Fremstilling av (2R ,6R )-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Asp-0H
(Forbindelse 21)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Asp(O<t>Bu)-O<t>Bu (21a), (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-Asp(0<t>Bu)-0<t>Bu (21b) og (2R.6R)-2-amlno-6,7-bis(Pam0)-4-THT-Asp-0H (Forbindelse 21) fremstilt.
Forbindelse 21a: [a]D<22>+ 5,2" (c-0,65 1 kloroform) Elementanalyse for C65B404<N>2<O>11<S:>Beregnet: C, 69,61; H, 9,35; N, 2,50; S, 2,86
Funnet : C, 69,38; H, 9,49; N, 2,77; S, 2,69 Forbindelse 21b: [a]D22 - 1,1" (c-0,70, 1 kloroform) Elementanalyse for C50H94N2<O>9<S:>Beregnet: C, 66,76; H, 10,54; N, 3,11; S, 3,57
Funnet : C, 66,87; H, 10,55; N, 3,36; S, 3,30 Forbindelse 21: [a]D<25>+ 5,5<*>(c-0,63 i 5 K> TFA-kloroform) Elementanalyse for C42H78N2O9<S:>Beregnet: C, 64,09; H, 9,99; N, 3,56; S, 4,07
Funnet : C, 64,23; H, 9,74; N, 3,44; S, 4,02
Eksempel 27
Fremstilling av (2R,6R )-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-D-Asp-0H
(Forbindelse 22)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-D-Asp(0<t>Bu)-0<t>Bu (22a) , (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-D-Asp(0<t>Bu)-0<t>Bu (22b) og (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-D-Asp-0H (Forbindelse 22) fremstilt.
Forbindelse 22a: [a]D<22>- 12, 7° (c-0,51 1 kloroform) Elementanalyse for C65H104<N>2O11S: Beregnet: C, 69,61; H, 9,35; N, 2,50; S, 2,86
Funnet : C, 69,82; H, 9,48; N, 2,98; S, 2,53 Forbindelse 22b: [ot]n<22>- 22,7' (c-0,67, i kloroform) Elementanalyse for CsQB^^OgS' 0 , SHgO : Beregnet: C, 66,11; H, 10,54; N, 3,08; S, 3,53
Funnet : C, 65,83; H, 10,38; N, 2,93; S, 3,40 Forbindelse 22: [a]D<25>- 10,8' (c-0,62 i 5 % TFA-kloroform) Elementanalyse for C42<H>7<g>N20gS: Beregnet: C, 64,09; H, 9,99; N, 3,56; S, 4,07
Funnet : C, 64,13; H, 9,60; N, 3,47; S, 4,06
Eksempel 28
Fremstilling av (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Glu-Glu-OH (Forbindelse 23)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(PamO )-4-THT-Gly-Glu(0tBu)-Glu(0tBu)-0tBu (23a), (2R.6R )-2-amino-6,7-bis(Pamo)-4-THT-Gly-Glu(OtBu)-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (23b) og (2R,6R)-2-amlno-6,7-bis(Pamo)-4-THT-Gly-Glu-Glu-OH (Forbindelse 23) fremstilt.
Forbindelse 23a: [a]D<24>- 7,0° (c-0,50 i kloroform) Elementanalyse for C77<H>124<N>4O15S: Beregnet: C, 67,12; H, 9,07; N, 4,07; S, 2,33
Funnet : C, 67,16; H, 9,05; N, 4,10; S, 2,40 Forbindelse 23b: [a]])24 - 10,6° (c-0,50, i kloroform) Elementanalyse for C^ Bn^ H^ Oi^' o ,5H20: Beregnet: C, 63,94; H, 9,95; N, 4,81; S, 2,75
Funnet : C, 63,91; H, 9,80; N, 4,74; S, 2,71 Forbindelse 23: [a]])<21>+ 13,0° (c=0,52 i 5 * TFA-kloroform) Elementanalyse for CsøHgo^O^S• 1,5H2O: Beregnet: C, 59,20; H, 9,24; N, 5,52; S, 3,16
Funnet : C, 59,15; H, 9,09; N, 5,50; S, 3,41
Eksempel 29
Fremstilling av (2R ,6R )-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Glu-D-Glu-OH (Forbindelse 24)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Glu(0<t>Bu)-D-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (24a), (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Glu(OtBu )-D-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (24b) og (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO )-4-THT-Gly-Glu-D-Glu-OH (Forbindelse 24) fremstilt.
Forbindelse 24a: [a]D24 - 12,3' (c-0,52 i kloroform) Elementanalyse for C77Hi24<N>4°i5s'0»5H20: Beregnet: C, 66,68; H, 9,08; N, 4,04; S, 2,31
Funnet : C, 66,82; H, 8,83; N, 4,34; S, 2,33 Forbindelse 24b: [a]D<24>- 15,9° (c-0,49, i kloroform) Elementanalyse for O^^l^^O^S* 0 , 5H2O: Beregnet: C, 63,94; H, 9,95; N, 4,81; S, 2,75
Funnet : C, 64,04; H, 9,84; N, 4,86; S, 2,76 Forbindelse 24: [a]])<24>+ 5,0'(c=0,47i 5 % TFA-kloroform) Elementanalyse for C50H9QN4<O>13S'H2O: Beregnet: C, 59,73; H, 9,22; N, 5,57; S, 3,19
Funnet : C, 59,73; H, 9,25; N, 5,48; S, 3,18
Eksempel 30
Fremstilling av (2R,6R )-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu-Gly-Glu-OH (Forbindelse 25)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu(0<t>Bu)-Gly-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (25a), (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu(O<t>Bu)-Gly-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (25b) og (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(PamOJ-4-THT-Glu-Gly-Glu-OH (Forbindelse 25) fremstilt.
Forbindelse 25a: [a]D<24>- 1,7<*>(c-0,51 i kloroform) Elementanalyse for C77<H>124<N>4015S: Beregnet: C, 67,12; H, 9,07; N, 4,07; S, 2,33
Funnet : C, 66,97; H, 9,12; N, 4,06; S, 2,25 Forbindelse 25b: [a]D<24>- 9,6<*>(c-0,53, i kloroform) Elementanalyse for C^<H>i^^O^S-H^O: Beregnet: C, 63,45; H, 9,96; N, 4,77; S, 2,73
Funnet : C, 63,31; H, 9,81; N, 4,82; S, 2,65 Forbindelse 25: [a]D<24>+ 8,7<»>(c=0,52 1 5 % TFA-kloroform) Elementanalyse for CsnHgo^O^S* 1,5H20: Beregnet: C, 59,20; H, 9,24; N, 5,52; S, 3,16
Funnet : C, 59,34; H, 9,13; N, 5,53; S, 3,21
Eksempel 31
Fremstilling av (2R , 6R )-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu-Glu-OH (Forbindelse 26)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6 ,7-bis(PamO )-4-THT-Glu( OlBu )-Glu( OlBu J-C^Bu (26a) , (2R.6R)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu(0<t>Bu)-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (26b) og (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu-Glu-OH (Forbindelse 26) fremstilt.
Forbindelse 26a: (a)D<24>- 7,4° (c-0,51 i kloroform) Elementanalyse for C75<H>121<N>3O14S<:>Beregnet: C, 68,20; H, 9,23; N, 3,18; S, 2,43
Funnet : C, 68,26; H, 9,09; N, 2,95; S, 2,57 Forbindelse 26b: [a]D<24>- 17,7° (c-0,53, i kloroform) Elementanalyse for C5o<H>lliN3°i2s'0•^H20: Beregnet: C, 65,06; H, 10,19; N, 3,79; S, 2,89
Funnet : C, 64,88; H, 10,29; N, 3,81; S, 2,95 Forbindelse 26: [a]D<24>- 0,9° (c=0,52 i 5 K> TFA-kloroform) Elementanalyse for C4g<Hg>7N30^2s<*>H2°: Beregnet: C, 60,79; H, 9,46; N, 4,43; S, 3,38
Funnet : C, 60,89; H, 9,40; N, 4,41; S, 3,38
Eksempel 32
Fremstilling av (2R,6R )-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu-D-Glu-OH (Forbindelse 27)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu(O<t>Bu)-D-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (27a), (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu(O<t>Bu)-D-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (27b) og (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu-D-Glu-OH (Forbindelse 27) fremstilt.
Forbindelse 27a: [a]D<24>- 12,6' (c~0,52 i kloroform) Elementanalyse for C75Hi21<N>3°14S<:>Beregnet: C, 68,20; H, 9,23; N, 3,18; S, 2,43
Funnet : C, 68,27; H, 9,46; N, 3,14; S, 2,30 Forbindelse 27b: [a]D24 - 21,3°(c=0,51, i kloroform) Elementanalyse for C^øHm^O^S • 0 , 5^0: Beregnet: C, 65,06; H, 10,19; N, 3,79; S, 2,89
Funnet : C, 65,05; H, 10,33; N, 3,65; S, 2,88 Forbindelse 27: [a]D<24>- 5,9° (c=0,53i 5 % TFA-kloroform) Elementanalyse for C4gHg7N30i2S<*>H20: Beregnet: C, 60,79; H, 9,46; N, 4,43; S, 3,38
Funnet : C, 60,88; H, 9,25; N, 4,43; S, 3,19
Eksempel 33
Fremstilling av (2R,6R )-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu-Glu-Glu-OH (Forbindelse 28)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bls(PamO )-4-THT-Glu(0tBu)-Glu(0tBu)-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (28a), (2R,6R )-2-amino-6,7-bis(PamO )-4-THT-Glu(O<t>Bu)-Glu(O<t>Bu)-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (28b) og (2R,6R)-2-amino- 6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu-Glu-Glu-OH (Forbindelse 28) fremstilt.
Forbindelse 28a: [a]D<24>- 13,2<»>(c-0,52 i kloroform) Elementanalyse for Cg^s^O-i^S: Beregnet: C, 66,99; H, 9,10; N, 3,72; S, 2,18
Funnet : C, 67,08; H, 9,14; N, 3,78; S, 2,16 Forbindelse 28b: [a]D<24>- 19,5° (c-0,53, i kloroform) Elementanalyse for C6qH126N4<0>15s'0•5H2°: Beregnet: C, 64,10; H, 9,90; N, 4,33; S, 2,48
Funnet : C, 64,28; H, 9,92; N, 4,21; S, 2,47 Forbindelse 28: [a]D<24>- 5,1° (c=0,53 i 5 % TFA-kloroform) Elementanalyse for C53<H>g4N4<0>15S-0,5H20: Beregnet: C, 59,58; H, 8,96; N, 5,24; S, 3,00
Funnet : C, 59,36; H, 8,91; N, 5,20; S, 2,95
Eksempel 34
Fremstilling av (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu-Glu-D-Glu-OH (Forbindelse 29)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu(0<t>Bu)-Glu(0<t>Bu)-D-
Glu(O<t>Bu)_O<t>Bu (29a), (2R,6R)-2-amino-6,7-bls(PamO)-4-THT-Glu(O<t>Bu)-Glu(O<t>Bu)-D-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (29b) og (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu-Glu-D-Glu-OH (Forbindelse 29) fremstilt.
Forbindelse 29a: [a]D<24>- 12,7' (c-0,49 i kloroform) Elementanalyse for C84<H>136<N>4O17S: Beregnet: C, 66,99; H, 9,10; N, 3,72; S, 2,13
Funnet : C, 66,80; H, 9,15; N, 3,65; S, 2,15 Forbindelse 29b: [oi]D24 - 20,7' (c = 0,51, i kloroform) Elementanalyse for C(,gHi26N4°15^'H20 : Beregnet: C, 63,66; H, 9,91; N, 4,30; S, 2,46
Funnet : C, 63,67; H, 9,88; N, 4,26; S, 2,48 Forbindelse 29: [a]D<24>- 16,1' (c=0,52 i 5 H TFA-kloroform) Elementanalyse for C53Hg4N40i5S<*>H2<0:>Beregnet: C, 59,08; H, 8,98; N, 5,20; S, 2,98
Funnet : C, 58,85; H, 8,90; N, 5,17; S, 2,81
Eksempel 35
Fremstilling av (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6-hydroksy-7-PamO-4-THT-0<t>Bu (GC-5a), (2R,6R )-2-Fmoc-amino-6-heksanoyloksy-7-PamO-4-
THT-O^Bu (GC-5b) og (2R,6R )-2-Fmoc-amino-6-heksanoyloksy-7-Pam0-4-THT-0H (GC-5)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 2, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6-hydroksy-7-PamO-4-THT-O<t>Bu (GC-5a), (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6-heksanoyloksy-7-Pam0-4-THT-0<t>Bu (GC-5b) og (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6-heksanoyloksy-7-PamO-4-THT-OH (GC-5) fremstilt.
Forbindelse GC-5a: smp. 57,5-58,8°C
[a]D<20>- 2,9° (c-0,55 i kloroform)
Elementanalyse for C41<H>61NO7S:
Beregnet: C, 69.16; H, 8,64; N, 1,97; S, 4,50
Funnet : C, 68,95; H, 8,67; N, 1,83; S, 4,48 Forbindelse GC-5b: [a]D<20>+ 1,1' (c-0,52, i kloroform) Elementanalyse for C47<H>7^N0gS: Beregnet: C, 69,68; H, 8,83; N, 1,73; S, 3,96
Funnet : C, 69,78; H, 8,90; N, 1,78; S, 3,80 Forbindelse GC-5: [cx]D<20>+ 14,0" (c-0,56 1 kloroform)
Elementanalyse for C43<H>53NO8S:
Beregnet: C, 68,49; H, 8,42; N, 1,86; S, 4,25
Funnet : C, 68,27; H, 8,34; N, 1,83; S, 4,26
Eksempel 36
Fremstilling av (2R,6R )-2-amino-6-heksanoyloksy-7-PamO-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu-OH (Forbindelse 30)
På hovedsakelig samme måte som I Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6-heksanoyloksy-7-PamO-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (30a), (2R,6R )-2-amlno-6-heksanoyloksy-7-PamO-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu(o<t>BuJ-O<t>Bu (30b) og (2R , 6R )-2-amino-6-heksanoyloksy-7-Pam0-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu-0H (Forbindelse 30) fremstilt.
Forbindelse 30a: [oc]D<22>- 6,4' (c=0,53 i kloroform)Elementanalyse for C62H95N5O14<S:>Beregnet: C, 63,84; H, 8,21; N, 6,00; S, 2,75
Funnet : C, 63,67; H, 8,09; N, 5,89; S, 2,84 Forbindelse 30b: [a]D<22>- 8,2a (c=0,56, i kloroform) Elementanalyse for C47Hg5N50^2<s:>Beregnet: C, 59,78; H, 9,07; N, 7,42; S, 3,40
Funnet : C, 59,64; H, 8,87; N, 7,42; S, 3,37 Forbindelse 30: [a]D<22>+ 9,5' (c-0,57 i 5 % TFA-kloroform) Elementanalyse for C3gH6qN50^2s'1•: Beregnet: C, 54,53; H, 8,45; N, 8,15; S, 3,37
Funnet : C, 54,56; H, 8,09; N, 8,21; S, 3,69
Eksempel 37
Fremstilling av (2R ,6R )-2-Fmoc-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu-Gly-D-Glu-OH (Forbindelse 31)
Forbindelse lia (600 mg) ble oppløst i TFA (6,0 ml), og oppløsningen ble satt i 2 timer ved 20°C. Reaksjonsblandingen ble konsentrert, og konsentratet ble suspendert i acetonitril. Suspensjonen ble filtrert for å samle opp forbindelse 31 som et hvitt pulverformig produkt (517 mg, utbytte 98 %).
[a]D2<5>- 16,5°(c-0,58, i 5 % TFA-kloroform)
Elementanalyse for C65HiooN4°15s'H20:
Beregnet: C, 63,60; H, 8,38; N, 4,56; S, 2,61
Funnet : C, 63,83; H, 8,47; N, 4,46; S, 2,52
Eksempel 38
Fremstilling av (2R,6R )-2-acetylamino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu-Gly-D-Glu-0H (Forbindelse 32)
Med utgangspunkt i forbindelse 11b, ble (2R,6R)-2-acetylamino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Glu-Gly-D-Glu-0H (Forbindelse 32) fremstilt via (2R,6R )-2-acetylamlno-6,7-bis(PamO )-4-THT-Glu(O<t>Bu)-Gly-D-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (32a).
a) Forbindelsen 11b (700 mg) ble oppløst i DCM (7,0 ml), til hvilken ble tilsatt eddiksyreanhydrid (86 pl), og
blandingen ble omrørt i en time ved 20°C. Reaksjonsblandingen ble konsentrert. Konsentratet ble suspendert i acetonitrll. Suspensjonen ble filtrert for å samle opp forbindelse 32a som et hvitt pulverformig produkt (580 mg).
[a]D2<4>- 12,8°(c-0,49, 1 kloroform)
Elementanalyse for C^Hnfc^O^S' o ,5H20:
Beregnet: C, 63,70; H, 9,77; N, 4,64; S, 2,66 Funnet : C, 63,80; H, 9,79; N, 4,54; S, 2,55 b) En TFA-oppløsning (5,3 ml) av forbindelse 32a (530 mg) ble bearbeidet på hovedsakelig samme måte som i avbeskyttelsesreaksjonen i Eksempel 37 for å gi forbindelse 32 som et hvitt pulverformig produkt (455 mg).
[a]D25 - 16,6° (c-0,52, i 5 % TFA-kloroform)
Elementanalyse for C52<Hg>2N40i4S<*>H20:
Beregnet: C, 59,63; H, 9,05; N, 5,35; S, 3,06
Funnet : C, 59,59; H, 8,99; N, 5,15; S, 2,91
Eksempel 39
Fremstilling av (2R , 6R )-2-heksanoylamino-6-heksanoyloksy-7-Pam0-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu-0H (Forbindelse 33)
Med utgangspunkt i forbindelse 30b, ble (2R,6R)-2-heksanoylamino-6-heksanoyloksy-7-PamO-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu-OH (Forbindelse 33) fremstilt via (2R,6R)-2-heksanoylamino-6-heksanoyloksy-7-Pam0-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (33a).
a) Forbindelsen 30b (550 mg) ble oppløst i DCM (10 ml). Til oppløsningen ble det under isavkjøling tilsatt HOBT (87
mg), WSC (123 mg) og heksansyre (80 jjI). Blandingen ble omrørt i 18 timer ved 20°C. Reaksjonsblandingen ble konsentrert, og konsentratet ble oppløst i etylacetat, fulgt av vasking med en 10 K> vandig oppløsning av ammoniumklorid, en 2 % vandig oppløsning av natrlumhydrogenkarbonat og vann. Etylacetatlaget ble tørket over vannfri natriumsulfat og så konsentrert. Konsentratet ble suspendert i acetonitril og suspensjonen ble filtrert for å samle opp (2R,6R)-2-heksanoylamino-6-heksanoyloksy-7-ParaO-4-THT-Gly-Gly-Gly-Glu(OtBu )-0tBu (33a) som et hvitt pulverformig produkt (534 mg, utbytte 88 %).
Forbindelse 33a: [a]D<22>- 8,0° (c-0,56, i kloroform) Elementanalyse for 053^5^0^38:
Beregnet: C, 61,07; H, 9,19; N, 6,72; S, 3,08 Funnet : C, 61,02; H, 9,10; N, 6,71; S, 3,05 b) Forbindelsen 33a (480 mg) ble oppløst i TFA (5,0 ml), og oppløsningen ble omrørt i 2 timer ved 20<*>C. Reaksjonsblandingen ble konsentrert og konsentratet ble suspendert i acetonitril. Suspensjonen ble filtrert for å samle opp forbindelse 33 (408 mg, utbytte 95 *).
Forbindelse 33: [a]D<22>- 12,7<*>(c-0,64, i 5 % TFA-kloroform )
Elementanalyse for 0451^X50138' 0 , 5H2O:
Beregnet: C, 57,55; H, 8,59; N, 7,46; S, 3,41
Funnet : C, 57,74; H, 8,54; N, 7,41; S, 3,43
Eksempel 40
Fremstilling av (2R ,6R )-2-Fmoc-amino-6,7-bis(SteO)-4-THT-0tBu (GC-6a) og (2R,6R)-2-Fmoc-amlno-6,7-bis(Ste0)-4-THT-0H (GC-6)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 2, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bls(SteO)-4-THT-0<t>Bu (GC-6a) og (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(SteO)-4-THT-OH (GC-6) fremstilt.
Forbindelse GC-6a: smp. 64,2-65,9'C
[a]D24 + 0,2° (c=0,92, 1 kloroform)
Elementanalyse for C^iHggNOgS:
Beregnet: C, 72,79; H, 9,91; N, 1,39; S, 3,19
Funnet : C, 72,60; H, 10,10: N, 1,66; S, 3,37 Forbindelse GC-6: smp- 92,0-92,8'C
[a]D<24>+ 11,0<*>(c=0,67, i kloroform)
Elementanalyse for C57H91NO3S<:>
Beregnet: C, 72,03; H, 9,65; N, 1,47; S, 3,37
Funnet : C, 72,21; H, 10,05; N, 1,57; S, 3,24
Eksempel 41
Fremstilling av (2R,6R )-2-Fmoc-amino-6,7-bis(MyrO)-4-THT-0tBu (GC-7a) og (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bls(Myr0)-4-THT-0H (GC-7)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 2, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(MyrO)-4-THT-O<t>Bu (GC-7a) og (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(MyrO )-4-THT-0H (GC-7) fremstilt.
Forbindelse GC-7a: smp. 49,2-50,9°C
[a]£><22>+ 0,5° (c-0,83, i kloroform)
Elementanalyse for C53Hg3N0gS:
Beregnet: C, 71,18; H, 9,35; N, 1,57; S, 3,59
Funnet : C, 70,97; H, 9,24; N, 1,62; S, 3,52 Forbindelse GC-7: smp. 82,8-83,5°C
[a]D2<2>+ 12,7°(c-0,58, i kloroform)
Elementanalyse for C4g<H>75N0gS•0,25H20:
Beregnet: C, "69,84; H, 9,03; N, 1,66; S, 3,81
Funnet : C, 69,85; H, 9,09; N, 1,62; S, 3,78
Eksempel 42
Fremstilling av (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(SteO)-4-THT-Gly-Glu-Glu-OH (Forbindelse 34
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bls(SteO)-4-THT-Gly-Glu(O<t>Bu)-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (34a), (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(Ste0)-4-THT-Gly-Glu(0<t>Bu)-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (34b) og (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(SteO)-4-THT-Gly-Glu-Glu-OH (Forbindelse 34) fremstilt.
Forbindelse 34a: [a]D<24>- 6,6' (0,62, 1 kloroform) Elementanalyse for Cgi<H>i32<N>4°l5s: Beregnet: C, 67,84; H, 9,28; N, 3,91; S, 2,24
Funnet : C, 67,59; H, 9,54; N, 4,27; S, 2,46 Forbindelse 34b: [a]D<24>- 10,7° (c=0,75, i kloroform) Elementanalyse for C5^Hi22N4°13s'H2°: Beregnet: C, 64,46; H, 10,16; N, 4,56; S, 2,61
Funnet : C, 64,46; H, 10,07; N, 4,83; S, 2,64 Forbindelse 34: [ot]D<24>+ 10,8" (c-0,65, 5*1 TFA-kloroform) Elementanalyse for C54HggN40i3S•4H2O: Beregnet: C, 58,14; H, 9,58; N, 5,02; S, 2,87
Funnet : C, 58,48; H, 9,20; N, 5,20; S, 2,72
Eksempel 43
Fremstilling av (2R,6R )-2-amino-6,7-bis(MyrO)-4-THT-Gly-Glu-Glu-OH (Forbindelse 35)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(Myr0)-4-THT-Gly-Glu(0<t>Bu)-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (35a) , (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(MyrO)-4-THT-Gly-Glu(0<t>Bu)-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (35b) og (2R , 6R )-2-amlno-6,7-bis(MyrO)-4-THT-Gly-Glu-Glu-OH (Forbindelse 35) fremstilt.
Forbindelse 35a: [a]D<22>- 7,6° (c=0,71, i kloroform) Elementanalyse for C73<H>115<N>4O15S: Beregnet: C, 66,33; H, 8,85; N, 4,24; S, 2,43
Funnet : C, 66,30; H, 8,97; N, 4,38; S, 2,42 Forbindelse 35b: [a]D<22>- 12,0° (c-1,11, i kloroform) Elementanalyse for C5g<H>io6<N>4°13s: Beregnet: C, 63,36; H, 9,72; N, 5,10; S, 2,92
Funnet : C, 63,14; H, 9,69; N, 5,21; S, 2,81 Forbindelse 35: [a]D<22>+ 10,9" (c-0,86, i 5 % TFA-kloroform) Elementanalyse for C46Hg2N4<0>i3S<*>4H2O: Beregnet: C, 55,07; H, 9,04; N, 5,58; S, 3,20
Funnet : C, 54,96; H, 9,12; N, 5,25; S, 2,94
Eksempel 44
Fremstilling av (2R,6R )-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-NH(CH2)7C0-Glu-0H hydroklorid (Forbindelse 36)
a) Til en oppløsning av GC-2 (179 mg) syntetisert i Eksempel 3 og P-17 (80 mg) syntetisert i Referanseeksempel 17
i DMF (4 ml) ble det tilsatt TEA (0,033 ml) og DEPC (49 mg). Blandingen ble omrørt i 90 minutter ved 20°C. Reaksjonsblandingen ble tilsatt vann og ekstrahert med etylacetat. Ekstraktoppløsningen ble vasket med en 5 * vandig oppløsning av citronsyre, en mettet vandig oppløsning av natriumhydrogenkarbonat og en mettet vandig saltvannsoppløsning, fulgt av tørking over vannfri natriumsulfat. Oppløsnings-midlet ble destillert av, og resten ble renset ved sillkagel kolonnekromatografi (heksan:etylacetat=l:1) for å gi (2R.6R)-2-Fmoc-amlno-6 ,7-bis(PamO)-4-THT-NH(CH2)7C0-Glu(0tBu)-0tBu (36a) (105 mg, utbytte 41 *) som en fargeløs, voksaktig forbindelse.
IR (KBr) V: 3300, 1730, 1685, 1660, 1645 cm-<1>
<X>H-NMR (CDC13) S: 0,88 (6H , t,J=7,0Hz), 1,03-1,38 (56H,m), 1,44 (9H,s), 1,47 (9H,s), 1,49-2,40 (12H,m), 2,79 (2H,d,J=5,2Hz), 2,93 (2H ,d,J=7,0Hz), 3,17-3,32 (2H,m), 4,00-4,56 (7H,m), 5,17-5,32 (lH.m), 5,78-5,90 (lH.m), 6,19 (lH,d,J=8,0Hz), 6,44-6,56 (lH.m), 7,26-7,46 (4H,m), 7,61 (2H,d,J=7,4Hz), 7,78 (2H,d,J=7,4Hz)
b) Til forbindelsen 36a (104 mg) fremstilt ovenfor, ble det tilsatt piperidin (2 ml) og blandingen ble omrørt i 30
minutter ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble så konsentrert. Konsentratet ble renset ved sillkagel kolonne-kromatograf i (heksan:etylacetat-l:1 - kloroform:metanol=19:1) for å gi (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(Pam0)-4-THT-NH(CH2)7C0-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (36b) (80 mg, utbytte 93 %) som en fargeløs, voksaktig forbindelse.
IR (KBr) v/: 3320, 1735, 1650 cm-<1>
<!>h-NMR (CDCI3) S: 0,88 (6H,t,J,6,8Hz ) , 1,03-1,38 (52H,m), 1,44 (9H,s), 1,47 (9H,s), 1,49-2,43 (l2H,m), 2,20
(2H,t,E-7,8Hz), 2,31 (2H,t,J=7,8Hz), 2,33 (2H,t,J-7,4Hz ) , 2,72 (lH.dd,J-8,8, 13,6Hz), 2,75 (2H,d,J=6,OHz), 3,12 (lH,dd,J-3,8, 13,6Hz), 3,15-3,29 (2H,m), 3,48 (1H,dd,J-3,8, 8,8Hz), 4,14 (lH,dd,J=6,0, 11,8Hz), 4,35 (1H,dd,J=3,6, 11,8Hz), 4,41-4,55 (lH.m), 5,09-5,22 (lH.m), 6,15 (lH.d,J=8,0Hz), 7,40 (1H,t,J-5,8Hz).
c) Til forbindelsen 36b (80 mg) fremstilt ovenfor, ble det tilsatt en 4N HC1 etylacetatoppløsning (4 ml), og
blandingen ble omrørt 1 4 timer ved 20<*>C. Oppløsningsmidlet ble destillert av for å gi (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO )-4-THT-NH(CH2 )7C0-Glu-0H hydroklorid (36 ) (74 mg, utbytte 100<<>f>) som et hvitt pulverformig produkt, smp. 53-56°C.
[a]D<23>+ 6,0° (c-0,50, i kloroform)
Elementanalyse for Cs^gg^OnSCl•2H20:
Beregnet: C, 59,49; H, 8,93; N, 5,34; S, 3,05
Funnet : C, 59,62; H, 8,77; N, 5,37; S, 3,14
IR (KBr) V: 3250, 1740, 1715, 1640 cm"<1>
<1>H-NMR (CDC13) S: 0,88 (6H,t,J-6,8Hz ) , 1,03-1,50 (56H,m), 1,50-1,80 (6H,m), 1,80-3,55 (16H,m) 4,03-4,70 (4H,m), 5,10-5,35 (lH,m)
Eksempel 45
Fremstilling av (2R ,6R )-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-NH(CH2)11C0-Glu-0H hydroklorid (Forbindelse 37)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 44, ble (2R,6R)-2-Fraoc-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-NH(CH2)11CO-Glu(O<t>Bu)-O<t>Bu (37a), (2R,6R)-2-amino-6,7-bis (PamO )-4-THT-NH( CH2 )nC0-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (37b) og (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-NH(CH2)11C0-Glu-0H hydroklorid (Forbindelse 37) fremstilt. Forbindelse 37a: IR (KBr) V: 3280, 1730, 1685, 1645 cm"<1><i>H-NMR (CDC13) S: 0,88 (6H,t,J-7,0Hz), 0,95-1,38 (64H,m), 1,44 (9H,s), 1,47 (9H,s), 1,50-2,40 (12H,m), 2,79 (2H,d,J=5,2Hz), 2,86-2,96 (lH,m), 3,18-3,32 (2H,m), 4,08-4,55 (6H,m), 5,18-5,33 (lH.m), 5,73-5,85 (lH.m), 6,14 (lH,d,J-7,8Hz), 6,40-6,53 (lH.m), 7,25-7,45 (4H,m), 7,61 (2H,d,J=7,4Hz), 7,78 (2H.d,J-7,0Hz).
Forbindelse 37b: IR (KBr) v/: 3360, 3310, 1730, 1650 cm"<1><i>H-NMR (CDCI3) S: 0,88 (6H,t,J-6,4Hz ), 1,03-1,39 (56H,m) 1,44 (9H,s), 1,47 (9H,s), 1,52-1,72 (12H,m), 1,72-2,43 (2H,m), 2,20 (2H,t,J=8,0Hz), 2,31 (2H,t,J-7,8Hz ) , 2,33 (2H,t,J=7,6Hz), 2,73 (1H,dd,J-8,7, 13,0Hz), 2,75 (2H,d,J-7,4Hz), 3,11 (lH,dd,J-3,7, 13,0Hz), 3,23 (2H,dt,J=7,4Hz), 3,48 (1H,dd,J=3,7, 8,7Hz ) , 4,14 (lH,dd,J=6,2, 12,0Hz), 4,35 (1H,dd,J-3,2, 12,0Hz), 4,42-4,56 (lH,m), 5,08-5,22 (lH.m), 6,15 (1H,d,J-7,8Hz ), 7,39 (lH,t,J=7,4Ez).
Forbindelse 37: smp. 61-64°C
[a]D2<3>+ 4,2' (c-0,50, i kloroform)
Elementanalyse for C55<H>104<N>3010SC1•2H20:
Beregnet: C, 61,68; H, 10,16; N, 3,92; S, 2,99
Funnet : C, 62,02; H, 9,33; N, 3,73; S, 2,64
IR (KBr) v/: 3250, 1740, 1720, 1640 cm"<1>
<i>H-NMR (CDCI3) S: 0,88 (6H,t,J-6,8Hz ) , 1,03-1,50 (64H,m), 1,50-1,80 (6H,m), 1,80-3,55 (16H,m), 4,03-4,70 (4H,m), 5,10-5,35 (lH.m).
Eksempel 46
Fremstilling av (2R,6R)-4-(2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-amino)benzoyl-Glu-0H hydroklorid (Forbindelse 38) a) Til en oppløsning av forbindelse P-19 (85 mg) i pyridin (1,5 ml) ble det tilsatt fosfortriklorid (0,01 ml). Blandingen ble omrørt 1 2 timer ved 20'C og deretter tilsatt forbindelse GC-2 (100 mg), fulgt av omrøring i 3 timer ved 20°C. Til reaksjonsblandingen ble det tilsatt vann, hvorpå den ble ekstrahert med etylacetat. Ekstraktet ble vasket med en 5 * vandig oppløsning av citronsyre, en mettet vandig oppløsning av natriumhydrogenkarbonat og en mettet vandig saltvannsoppløsning, fulgt av tørking over vannfri natriumsulfat. Oppløsningsmidlet ble destillert av, og resten ble renset ved sillkagel kolonnekromatografi
(kloroform:heksan-7:1) for å gi (2R,6R )-4-(2-Fmoc-amino-6 , 7-bis(Pam0)-4-THT-amino)benzoyl-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (38a) (107 mg, utbytte 84 *) som en fargeløs voksaktig forbindelse.
IR (KBr) y/ x 3300, 1730, 1685, 1660, 1640, 1600 cm-<1>^H-NMR (CDC13) 5: 0,88 (6H,t,J-7,0Hz), 1,10-1,38 (48H,m), 1,42 (9H,s), 1,49 (9H,s) 1,55-1,83 (4H,m), 1,90-2,58 (8H,m), 2,75-2,86 (2H,m), 3,02 (2H,d,J=6,6Hz), 4,21-4,72 (8H,m), 5,24-5,49 (lH.m), 5,74-5,86 (lH.m), 7,01 (2H,d,J-7,6Hz ) , 7,32 (2H,d,J=7,6Hz), 7,35-7,87 (8H,m), 8,70 (lH.br s).
b) Til forbindelsen 38a (107 mg) fremstilt som ovenfor, ble det tilsatt plperidin (2 ml). Blandingen ble omrørt 1 3
timer ved 20°C og så ble reaksjonsblandingen konsentrert. Konsentratet ble renset ved sillkagel kolonnekromatografi (heksan:etylacetat-l:7 ) for å gi (2R,6R)-4-(2-amino-6 ,7-bis(Pam0)-4-THT-amino)benzoyl-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (38b) (66 mg, utbytte 68 %) som et fargeløst voksaktig produkt.
IR (KBr) v/: 3430, 3380, 1735, 1640 cm-<1>
<1>H-NMR (CDCI3) 5: 0,88 (6H ,t, J-6,6Hz ) , 1,05-1,37 (48H,m), 1,42 (9H,s), 1,49 (9H,s), 1,52-1,82 (4H,m), 1,93-2,53 (8H,m), 2,70-4,00 (5H,m), 4,05-4,72 (3H,m), 5.10-5,24 (lH.m), 7,23-7,95 (4H,m). 9,71 (lH.br s).
c) Til forbindelsen 38b (66 mg) fremstilt som ovenfor, ble det tilsatt 4N HC1 etylacetatoppløsnlng (3 ml), og blandingen ble omrørt i 4 timer ved 20°C. Oppløsningsmidlet ble destillert av for å gi forbindelse 38 (61 mg, utbytte 100*) som et fargeløst pulverformig produkt, smp. 94,0-96,0'C.
[a]D23 + 6,2" (c-0,50, i kloroform)
Elementanalyse for C5oHg6N3<0>10SCl•2H20:
Beregnet: C, 60,49; H, 9,14; N, 4,23; S, 3,23
Funnet : C, 60,39; H, 8,98; N, 4,19; S, 3,18
IR (KBr) v/: 3400, 1750, 1630, 1610 cm-<1>
<1>H-NMR (CDC13) S: 0,88 (6H,t,J-6,8Hz), 1,02-1,48 (48H,m), 1,48-1,68 (4H,m), 2,00-2,85 (13H,m), 4,05-5,32 (4H,m), 7,40-8,00 (4H,m).
Eksempel 47
Fremstilling av (2R,6R )-4-(2-amino-6,7-bls(PamO)-4-THT-Gly-amino )benzoyl-Glu-OH hydroklorid (Forbindelse 39)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 44, ble (2R,6R)-4-(2-Fmoc-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-amino)benzoyl-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (39a), (2R,6R )-4-(2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-amino )benzoyl-Glu(OtBu J-G^u (39b) og ( 2R , 6R )-4-( 2-amino-6,7-bis(PamO )-4-THT-Gly-amino)benzoyl-Glu-OH hydroklorid (Forbindelse 39) fremstilt.
Forbindelse 39a: IR (KBr) v/: 3300, 1735, 1730, 1700, 1655, 1640 cm-<1>
<1>H-NMR (CDC13) S: 0,88 (6H,t,J-6,6Hz ), 1,02-1,84 (64H,m), 1,42 (9H,s), 1,49 (9H,s), 1,84-3,15 (l3H,m), 4,00-4,73 (9H,m), 5,15-5,28 (lH.m), 5,80-5,92 (lH.m), 6,92-7,13 (2H,m), 7,26-7,83 (12H,m), 8,53 (lH,br s).
Forbindelse 39b: IR (KBr) <S: 3350, 1735, 1650, 1600 cm-<1>1-H-NMR (CDCI3) S: 0,88 (6H , t, J-7,0Hz), 1,52-1,76 (4H,m), 1,95-2,53 (8H,m), 2,75 (2H,d,J-6,6Hz ), 2,92 (1H,dd,J-7,8, 13,6Hz), 3,11 (lH,dd,J=4,2, 13,6Hz), 3,66 (1H,dd,J-4,2, 7,8Hz), 4,01-4,24 (3H,m), 4,37 (1H,dd,J-3,4, 11,8Hz), 4,57-4.62 (lH.m), 5,08-5,22 (lH.m), 7,00 (1H,d,J-7,6Hz ) , 7,59 (2H,d,J=8,8Hz) , 7,79 (2H,d,J-8,8Hz), 8,19 (1H,t,J-5,6Hz), 8.63 (lH.s).
Forbindelse 39: smp. 100-101'C
IR (KBr) v/: 3400, 1735 cm-<1>
Elementanalyse for C5iHq£,N301QSCl • H2O:
Beregnet: C, 61,44; H, 9,91; N, 4,41; S, 3,22
Funnet : C, 61,17; H, 9,81; N, 4,26; S, 3,21
<1>H-NMR (CDCI3) 5: 0,88 (6H,t,J-6,8Hz), 0,93-1,47 (48H,m), 1,47-1,70 (4H,m), 1,70-3,32 (16H,ra), 3,70-4,60 (4H,m), 4,60-4,78 (lH.m), 5,17-5,32 (lH.m), 7,47-7,90 (4H,m).
Eksempel 48
Fremstilling av (2R,6R )-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-NH(CH2 )5C0-Glu-0H TFA salt (Forbindelse 40)
På hovedsakelig samme måte som 1 Eksempel 44, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amlno-6,7-bls(PamO)-4-THT-NH(CH2)5C0-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (40a) syntetisert. Deretter ble (2R ,6R )-2-amlno-6,7-bls(PamO)-4-THT-NH(CH2)5CO-Glu(O<t>Bu)-0<t>Bu (40b) og (2R,6R)-2-amlno-6,7-bis(Pam0)-4-THT-NH(CH2)5C0-Glu-0H TFA salt (Forbindelse 40) fremstilt.
Forbindelse 40a:<1>H-NMR (CDC13) S: 0,878 (6H,t,J-6 ,0Hz ), 1,247 (52H,s), 1,433 (9H,s ), 1,463 (9H,s ) , 1,465-1,720 (6H,m), 1,72-2,15 (2H,m), 2,15-2,40 (16H,m), 2,785 (2H,d,J-5,8Hz ), 2,927 (2H,d,J-6,2Hz), 3,265 (2H,m), 4,05-4,55 (7H,m), 5,232 (lH.br s), 5,825 (1H,d,J-8,2Hz ), 6,236 (lH,d,J-8,2Hz), 6,595 (lH.br s), 7.366 (4H,m), 7,600 (2H,d,J=7,0Hz), 7,766 (2H,d,J-7,0Hz )
IR (neat) V: 3300, 2920, 2850, 1735, 1650, 1530, 1440, 1370, 1255, 1245, 1225, 1155 cm-<1>
b) Forbindelsen 40a (112 mg) ble oppløst i DCM (0,2 ml). Til oppløsningen ble det tilsatt piperldln (2 ml), og
blandingen ble omrørt 1 2 timer ved 20°C. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk. Konsentratet ble adsorbert på en silikagelkolonne (5 g) behandlet med ammoniakk. Elueringen ble utført med kloroform for å gl forbindelse 40b som et fargeløst oljeformlg produkt (83 mg, utbytte 89 ,8 *).
<1>H-NMR (CDCI3) 5: 0,878 (6H , t,J-6,0Hz ), 1,254 (52H,s), 1,467 (9H,s), 1,499 (9H,s), 1,47-1,75 (6H,m), 1,72-2,15 (2H,m), 2,15-2,40 (lOH.m), 2,60-2,80 (3H,m), 3,107 (lH,dd,J=3,8Hz, 13,6Hz), 3,242 (2H,q,J=6,2Hz ) , 3,475 (lH,dd,J=4,0Hz, 6,8Hz), 4,142 (1H,dd,J-6,0Hz, 12,0Hz), 4,358 (lH,dd,J=3,4Hz, 11,8Hz), 4,472 (2H,m), 5,154 (lH.m), 6,90 (lH,d,J-7,6Hz), 7,424 (1H,t,J-7,2Hz).
IR (neat) J: 3300, 2920, 2850, 1735, 1650, 1530, 1440, 1370, 1255, 1245, 1225, 1155 cm"<1>
c) Forbindelsen 40b (83 mg) ble oppløst i DCM (0,2 ml). Til oppløsningen ble det tilsatt TFA (1 ml), og blandingen
ble omrørt 1 2 timer ved 20°C. Til reaksjonsblandingen ble det tilsatt toluen (1 ml) og blandingen ble konsentrert under redusert trykk. Denne prosessen ble gjentatt for å gi
forbindelse 40 som et hvitt pulverformig produkt (83 mg, utbytte 100 *), smp. 62-63°C.
[a]D2<3>+ 3,4° (c-0,16, i kloroform);
<1>H-NMR (CDCI3-TFA) S: 0,879 (6H,t,J-6,6Hz ) , 1,256 (52H,s), 1,567 (6H,m), 1,90-2,20 (2H,m), 2,374 (8H,m), 2,597 (2H,t,J=6,4Hz), 2,744 (2H,d,J-7,0Hz), 3,100 (2H,m), 4,130 (lH,dd,J-6,0Hz, 12,0Hz), 4,28-4,50 (2H,m), 4,650 (lH.m), 5,170 (lH.m), 7,080 (1H,d,J-7,5Hz ), 7,420 (lH.br s)
IR (KBr) v/: 3320, 3100, 2920, 2850, 1740, 1665, 1550, 1465, 1200 cm-<1>
Elementanalyse for C5iHg2N30i2SF3"<H>2<0:>
Beregnet: C, 58,54; H, 9,05; N, 4,02; S, 3,06
Funnet : C, 58,35; H, 8,91; N, 4,06; S, 2,76
Eksempel 49
Fremstilling av (2R,6R )-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-NH(CH2)6NHC0-Glu-0H TFA salt (Forbindelse 41)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 48, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6 ,7-bis(PamO )-4-THT-NH(CH2 )6NHC0-Glu( O^u )-OtBu (41a), (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-NH(CH2 JfcNHCO-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (41b) og (2R,6R)-2-amlno-6,7-bis(PamO )-4-THT-NH(CH2 )(jNHC0-Glu-0H TFA salt (Forbindelse 41) fremstilt. Forbindelse 41a:<1>H-NMR (CDC13) S: 0,879 (6H,t,J-7,0Hz ), 1,254 (52H,s), 1,430 (9H,s), 1,448 (9H, s) , 1,727 (8H,m), 1,75-2,20 (2H,m), 2,325 (6H,m), 2,780 (2H,d,J-5,0Hz). 2,944 (2H,d,J-5,2Hz), 3,05-3,50 (4H,m), 4,00-4,50 (9H,m), 4,860 (lH.t,J-6,0Hz ), 5,249 (2B,d,J-8,2Hz), 6,08 (lH.br s), 6,710 (lH.br s), 7,260-7,55 (4H,m), 7,612 (2H,d,J-8,OHz ), 7,767 (2H,d,J-8,0Hz).
IR (neat) v/: 3300, 2920, 2850, 1730, 1685, 1640, 1560, 1550, 1530, 1460, 1445, 1360, 1250, 1150, 1100, 1030 cm-<1>. Forbindelse 41b:<1>H-NMR (CDC13) S: 0,879 (6H,t,J-6 , 2Hz ) , 1,254 (52H,s), 1,439 (9H,s), 1,461 (9H,s), 1,597 (8H,m), 1,75-2,20 (2H,m), 2,311 (6H,m), 2,745 (2H,m), 3,00-3,45 (4H,m), 3,483 (lH,m), 4,136 (1H,dd,J-6,4Hz, 12,4Hz), 4,353 (2H,m), 4,700 (1H,t,J-5,2Hz), 5,078 (lH,d,J=7,6 Hz), 5,162 (lH.br s), 7,440 (lH.br s).
IR (neat) V: 3350, 2920, 2850, 1730, 1640, 1560, 1460, 1450, 1390, 1360, 1250, 1260, 1150, 1100, 750, 730 cm-<1>. Forbindelse 41: smp. 44-46°C
[cxJd<23>- 2,9" (c-0,415, i kloroform);
<i>H-NMR (CDCI3) 5: 0,880 (6H,t,J-6,2Hz), 1,255 (52H,s), 1,591 (8H,m), 2,0-2,20 (2H,m), 2,302 (6H,m), 2,779 (2H,m), 3,00-3,45 (3H,m), 3,516 (2H,m), 3,80-4,25 (6H,m), 4,340 (2H,m), 5,200 (lH.br s), 7,57 (1H, br s), 7,710 (lH,br s)
IR (KBr) v/: 3400, 2920, 2850, 1740(sh.), 1700, 1670(sh.), 1460, 1420, 1280, 1260, 1240, 1200, 1175, 1130 cm-<1>.
Elementanalyse for C50H95N4<O>12SF3•
Beregnet: C, 58,11; H, 9,27; N, 5,42; S, 3,10
Funnet : C, 58,19; H, 8,77; N, 5,24; S, 2,78
Eksempel 50
Fremstilling av (2R ,6R )-4-(2-amlno-6,7-bis(PamO)-4-THT-amlnometyl)benzoyl-Glu-0H hydroklorid (Forbindelse 42)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 44, ble (2R,6R)-4-(2-Fmoc-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-aminometyl)benzoyl-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (42a), (2R,6R )-4-(2-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT-aminometyl)benzoyl-Glu(0<t>Bu)-0<t>Bu (42b) og (2R,6R)-4-(2- amino-6,7-bis(PamO )-4-THT-aminometyl )benzoyl-Glu-OH hydroklorid (Forbindelse 42) fremstilt.
Forbindelse 42a: IR (neat) v/: 3300, 2920, 2850, 1730, 1660, 1530, 1500, 1445, 1360, 1240, 1150 cm-<1>.
<1>H-NMR (CDC13) 5: 0,88 (6H,t,J-6,8Hz ) , 1,25 (48H,s), 1,42 (9H,s), 1,49 (9H,s), 1,40-1,65 (4H,m), 1,95-2,50 (8H,m), 2,77 (2H,d,J=6,6Hz), 2,90-3,00 (2H,m), 4,05-4,55 (8H,m), 4,66 (lH.m), 5,24 (lH.m), 5,78 (lH.br), 6,98 (lH.br), 7,02 (lH,d,J-7,4Hz), 7,25-7,45 (6H,ra), 7,58 (2H,d,J-7,4Hz), 7,76 (2H,d,J=7,2Hz), 7,78 (2H ,d , J-8,4Hz).
Forbindelse 42b: IR (neat) v/: 3350, 2920, 2850, 1730, 1650, 1535, 1520, 1500, 1460, 1450, 1360, 1250, 1150 cm-<1.>
<1>H-NMR (CDCI3) S: 0,88 (6H,t,J=6,8Hz), 1,25 (48H,s), 1,42 (9H,s), 1,49 (9H,s), 1,45-1,65 (4H,m), 1,73 (2H.br s), 1,90-2,50 (8H,m), 2,75 (2H,d,J-6,4Hz), 2,81 (1H,dd,J-13,4, 8,4Hz), 3,14 (1H,dd,J-13,4, 3,8Hz), 3,57 (1H,dd,J=8,4, 4,0Hz ), 4,14 (lH,dd,J=12,0, 6,2Hz), 4,36 (1H,dd,J-12,0, 3,2Hz), 4,49 (2H,d,J=6,2Hz), 4,66 (lH,m), 5,16 (lH.m), 7,02 (lH,d,J=7,4Hz), 7,35 (2H,d,J=8,2Hz), 7,79 (2H,d,J-8,2Hz), 7,83 (lH.br).
Forbindelse 42: smp. 79-80aC
[a]D2<0>+ 15,1" (c=0,305, i kloroform);
IR (KBr) V: 3450, 2920, 2850, 1730, 1710, 1690, 1670, 1640, 1630, 1620, 1560, 1540, 1500, 1460 cm-<1>.
<1>H-NMR (CDCI3-TFA ) 5: 0,88 (6H,t,J-6,8Hz ) , 1,25 (48H,s), 1,40-1,65 (4H,m), 2,00-3,30 (12H,m), 4,00-4,80 (6H,ra), 5,22 (lH,m), 7,00-8,10 (6H,ra).
Elementanalyse for C5iH87N3010S'HCl'^0:
Beregnet: C, 61,95; H, 9,17; N, 4,25; S, 3,24, Cl, 3,59 Funnet : C, 61,66; H, 8,93; N, 4,24; S, 3,44; Cl, 3,79
Eksempel 51
Fremstilling av (2R,6R )-4-(N-(2-Fmoc-amino-6,7-bis(PamO )-4-THT )-N-(karboksymetyl)aminometyl)benzoyl-Glu-OH (Forbindelse 43)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 44, ble (2R,6R)-4-(N-(2-Fmoc-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT)-N-(t-butyloksykarbonylmetyl)aminometyl)benzoyl-Glu(O<t>BuJ-O^Bu (43a) og (2R,6R)-4-(N-(2-Fmoc-amino-6,7-bis(PamO)-4-THT)-N-(karboksymetyl)aminometyl)benzoyl-Glu-OH (Forbindelse 43) fremstilt.
Forbindelse 43a: IR (neat) V: 2920, 2850, 1730, 1650, 1360, 1250, 1150 cm-<1>.
<1>H-NMR (CDCI3) S: 0,88 (6H,t,J-6,8Hz), 1,25 (48H,s), 1,40 (l/2x9H,s), 1,42 (9H,s), 1,44 (l/2x9H,s), 1,49 (9H,s), 1,45-1,70 (4H,m), 2,00-2,50 (8H,m), 2,65-3,20 (4H,m), 3,70-4,50 (8H,m), 4,60-4,80 (3H,m), 5,17 (lH,m), 5,70-5,80 (lH.m), 7,00-7,10 (lH.m), 7,25-7,45 (6H,m), 7,61 (2H,d,J-7,4Hz ) , 7,75-7,90 (4H,m).
Forbindelse 43: smp. 58-59'C
[a]D2<0>- 12,6' (c-0,25, 1 kloroform);
IR (KBr) V: 2921, 2852, 1739, 1640, 1540, 1465, 1450, 1250, 1220, 1160 cm-<1>.
<1>H-NMR (CDC13) S: 0,87 (6H,t,J-6,6Hz), 1,25 (48H,s), 1,40-1,70 (4H,m), 2,00-2,50 (8H,m), 2,60-3,00 (4H,m), 3,90-4,50 (8H,m), 5,17 (lH.m), 6,27 (lH.m), 7,15-7,45 (6H,m), 7,50-7,85 (6H,m).
Elementanalyse for CfcgHiQn^O^S-B^O:
Beregnet: C, 66,21; H, 8,33; N, 3,41; S, 2,60
Funnet : C, 66,44; H, 8,32; N, 3,21; S, 2,66
Eksempel 52
Fremstilling av (2R,6R )-2-amlno-6,7-bls(PamO)-4-THT-Gly-Lys-Gly-OH 2 TFA salt (Forbindelse 44)
På hovedsakelig samme måte som i Eksempel 6, ble (2R,6R)-2-Fmoc-amino-6,7-bis(PamO )-4-THT-Gly-Lys(Boe J-Gly-OtBu ( 44a), (2R,6R)-2-amlno-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Lys(Boe)-Gly-O<t>Bu (44b) og (2R,6R)-2-amlno-6,7-bis(PamO)-4-THT-Gly-Lys-Gly-OH 2 TFA salt (Forbindelse 44) fremstilt.
Forbindelse 44a: [a]D<25>- 10,0° (c-0,66 i kloroform) Elementanalyse for C72<H>117N5<O>13S: Beregnet: C, 66,89; H, 9,12; N, 5,42; S, 2,48
Funnet : C, 67,10; H, 9,37; N, 5,18; S, 2,49 Forbindelse 44b: [a]D<25>- 15,2" (c-0,56 i kloroform) Elementanalyse for C57H107N5O11<S:>Beregnet: C, 63,95; H, 10,07; N, 6,54; S, 3,00
Funnet : C, 63,70; H, 10,20; N, 6,50; S, 2,99 Forbindelse 44: [a]D<25>+ 5,5° (c-0,62 i 5 * TFA-kloroform) Elementanalyse for C^Hg^OqS<*>2TFA: Beregnet: C, 54,67; H, 8,21; N, 6,13; S, 2,81
Funnet : C, 54,29; H, 8,19; N, 6,47; S, 3,06
Eksempel 53
Fremstilling av natriumsalt
1) Forbindelse 12 (5,0 g) ble oppløst 1 20 volum-* acetonitril-0,5 * (vekt/volum) vandig oppløsning av natriumhydrogenkarbonat (5 1) ved 40°C. Etter Justering av pH til oppløsningen til 9,5, ble oppløsningen kromatografert på en Dialon HP-20 (1,0 L, Mitsubishi Kasei Corp. Japan) som på forhånd var svellet med 20 volum-* vandig acetonltrll. Harpiksen ble vasket med 20 vekt-* vandig acetonltrll (5 1), fulgt av eluerlng med 40 volum-* vandig acetonltrll (4 1) og 60 volum-* vandig acetonltrll (5 1). Eluatet ble konsentrert og så frysetørket for å gi et pulverformig produkt. Pulverproduktet ble suspendert i aceton (150 ml). Uoppløselig stoff ble oppsamlet ved filtrering for å gi dinatriumsaltet av forbindelse 12 (4,5 g) som et hvitt pulver.
FAB-massespekter (M+H) = 959
Elementanalyse for C47Hg4N40i1SNa2 ' 3^0 :
Beregnet: C, 55,71; H, 8,95; N, 5,53; S, 3,16; Na, 4,54 Funnet : C, 55,90; H, 9,39; N, 5,34; S, 3,16; Na, 4,78 2) Forbindelse 19 (11,0 g) ble oppløst 1 15 volum-* acetonitril-0,5 * (vekt/volum) vandig oppløsning av natrlumhydrogenkarbonat (5 1) ved 40°C. Etter justering av pH til 9,5 ble oppløsningen kroraatografert på Diaion HP-20 (1,0 L, Mitsubishi Kasei Corp. Japan) som på forhånd var svellet med 15 volum-* vandig acetonltrll. Harpiksen ble vasket med 15 volum-* vandig acetonltrll (5 1), fulgt av eluering med 40 volum-* vandig acetonltrll (12 1). Eluatet ble konsentrert og så frysetørket for å gi et pulverformig produkt. Pulverproduktet ble suspendert i aceton (200 ml). Uoppløselig stoff ble oppsamlet ved filtrering for å gi dlnatrlumsaltet av forbindelse 23 (9,9 g) som et hvitt pulver.
FAB-massespekter (M+H) = 902
Elementanalyse for C45<H>giN3<0>ioSNa2'3H2°:
Beregnet: C, 56,52; H, 9,17; N, 4,39; S, 3,35; Na, 4,81 Funnet : C, 56,61; H, 9,14; N, 4,26; S, 3,35; Na, 5,25 3) Forbindelse 23 (14,0 g) ble oppløst i 5 volum-* acetonitrl1-0,5 * (vekt/volum) vandig oppløsning av natriumhydrogenkarbonat (7 1) ved 40"C. Etter justering av pH i oppløsningen til 9,5 ble oppløsningen kromatografert på Diaion HP-20 (1,4 L, Mitsubishi Kasei Corp. Japan) som på forhånd var svellet med 5 volum-* vandig acetonltrll. Harpiksen ble vasket med 5 volum-* vandig acetonltrll (7 1), fulgt av eluering med 40 volum-* vandig acetonltrll (8,5 1). Eluatet ble konsentrert og så frysetørket for å gi et pulverformig produkt. Pulverproduktet ble suspendert i aceton (600 ml). Uoppløselig stoff ble samlet ved filtrering for å gi trinatrlumsaltet av forbindelse 23 (11,5 g) som et hvitt pulver.
FAB-massespekter (M+H) = 1053
Elementanalyse for CsoHgy^O^SNas * 4^0 :
Beregnet: C, 53,37; H, 8,51; N, 4,98; S, 2,85; Na, 6,13 Funnet : C, 53,48; H, 8,81; N, 4,89; S, 3,03; Na, 6,0 4) Forbindelse 25 (8,0 g) ble oppløst i 5 volum-* acetonitril-0,5 * (vekt/volum) vandig oppløsning av natriumhydrogenkarbonat (4 1) ved 40"C. Etter justering av pH i oppløsningen til 9,5, ble oppløsningen kromatografert på Diaion HP-20 (1,5 L, Mitsubishi Kasei Corp. Japan) som på forhånd var svellet med 5 volum-* vandig acetonltrll. Harpiksen ble vasket med 5 volum-* vandig acetonltrll (7,5 1), fulgt av eluering med 40 volum-* vandig acetonltrll (6 1). Eluatet ble konsentrert og så frysetørket for å gl et pulverformig produkt. Pulverproduktet ble suspendert i aceton (200 ml). Uoppløselig stoff ble samlet ved filtrering for å gi trinatriumsaltet av forbindelse 25 (7,0 g) som et hvitt pulver.
FAB-massespekter (M+H) = 1053
Elementanalyse for C50H87N4013SNa3•2,5H20:
Beregnet: C, 54,68; H, 8,44; N, 5,10; S, 2,92; Na, 6,28 Funnet : C, 54,48; H, 8,64; N, 5,09; S, 2,79; Na, 6,13 5) Forbindelse 7 (200 mg) ble oppløst i 30 volum-* metanol-0,5 * (vekt/volum) vandig oppløsning av natriumhydrogenkarbonat (300 ml) ved 40°C. Etter justering av pH i oppløsningen til 9,5, ble oppløsningen kromatografert på Diaion HP-20 (50 ml, Mitsubishi Kasei Corp. Japan) som på forhånd var svellet med 30 volum-* vandig metanol. Harpiksen ble vasket med 30 volum-* vandig metanol (200 ml) og 50 volum-* vandig metanol (200 ml), fulgt av eluering med 80 volum-* vandig metanol (600 ml). Eluatet ble konsentrert og så frysetørket for å gi et pulverformig produkt. Pulverproduktet ble suspendert 1 aceton (8 ml). Uoppløselig stoff ble samlet ved filtrering for å gi dinatriumsaltet av forbindelse 7 (75 mg) som et hvitt pulver.
Elementanalyse for C49Hg7N5<0>i2SNa2"2>5H2°:
Beregnet: C, 55,45; H, 8,74; N, 6,60; S, 3,02
Funnet : C, 55,47; H, 8,55; N, 6,48; S, 3,11
Strukturformel til forbindelsene fremstilt i eksemplene ovenfor er vist i Tabell 1. Retensjonstid til forbindelser 1 til 15 i høy-ytelse vaeskekromatograf i er vist som følger: Kolonne: YMC-Pack A-602 NH2(Yamamura Chemical Laboratories,
Japan)
Mobil fase: 85 * metanol/0,02M fosfatbuffer (pH 4,8) Strømningshastighet: 1,0 ml/min
Detekteringsmetode: UV, 214 nm
Retensjonstid (minutt): Forbindelse 1, 17,3;
Forbindelse 2, 17,1; Forbindelse 3, 15,9;
Forbindelse 4, 15,8; Forbindelse 5, 18,5;
Forbindelse 7, 20,7; Forbindelse 8, 19,7;
Forbindelse 9, 20,7; Forbindelse 10, 19,8;
Forbindelse 12, 19,4; Forbindelse 14, 9,4;
Forbindelse 15, 18,4
Biologiske aktiviteter til Forbindelse (I) er beskrevet som følger.
Eksperimentelt eksempel 1
Virkninger av Forbindelse (I) produsert 1 foregående eksempler på økning av proliferasjonen av benmargceller i mus er vist i Tabell 2.
Bestemmelsesmetode:
Til et RPMI 1640 kulturmedium [Bio-Wlttaker Inc. (heretter forkortet til BW), USA] inneholdende 2 x 10<6>/ml benmargceller fra BALB/c mus, 2mM L-glutamin, 20 ug/ml gentamicin (Flow Laboratories, Inc., Scotland), 10 * føtalt kalveserum (BW, USA) ble benyttet som testforbindelse i en vandig konsentrasjon, som ble Inkubert ved 37"C i 3 dager i 5 * karbondioksid 1 luft fulgt av bestemmelse av proliferasjonen av benmargceller ved MTT reduksjonsmetoden [Tada et al., Journal of Immunological Methods, Vol. 93, s. 157, 1986],
Eksperimentelt eksempel 2
Virkninger av Forbindelse (I) i økningen av antallet miltceller fra mus er vist i Tabell 3.
Bestemmelsesmetode:
En BALB/c mus ble injisert intraperitonalt med cyklofosfamid oppløst i fysiologisk saltvannsoppløsning med en dose på 200 mg/kg. Fra dagen derpå ble dyret administrert lntraperitonalt i 4 følgende dager med testforblndelsen suspendert 1 fysiologisk saltvannsoppløsning inneholdende 2 % gummi arabicum. På dagen etter fullførelse av administrasjonen, ble antallet trypan blue kromofobe celler i milten talt.
Eksperimentelt eksempel 3
Virkning av Forbindelse (I) på økning av antall leukocytter hos mus er vist 1 Tabell 4.
Bestemme1 sesmetode:
Seks uker gamle hunkjønn CDFl/Crj mus (5 dyr/gruppe) ble utsatt for eksperimentet. Hvert dyr ble oralt administrert med cyklofosforamid oppløst i fysiologisk saltvannsoppløsning med en dose på 150 mg/kg. Fra neste dag ble hvert dyr administrert subkutant med forbindelsen suspendert i 5 * glukose med de følgende doseringer i 5 dager en gang pr. dag.
På dagen etter fullførelse av administrasjonen, ble omkring
100 pl perifert blod oppsamlet fra orbitalvene ved bruk av et EDTA-behandlet hårrørsglass. Så ble antallet leukocytter talt ved bruk av en automatisk celleanalysator (Sysmex K-2000, Toa Medical Electronics, Japan).
Eksperimentelt eksempel 4
Virkning av Forbindelse (I) produsert 1 de foregående eksemplene på økningen av utviklingen av megakaryocyttkolonier er vist i Tabell 5.
Bestemmelsesmetode:
Produksjonen av megakaryocyttkolonier ble studert ifølge plasmaklumpmetoden [Mizoguti et al., Experimental Hema-tology, Vol. 7, s. 345 til 351, 1979].
Til et NCTC-109 kulturmedium (Gibco BRL Inc., USA) inneholdende 5 x 10^/ml benmargceller fra BALB/c mus, 20 % føtalt kalveserum (BW, USA), 1 % albuminserum, 0,026 mg/ml CaCl2, 0,02 mg/ml L-asparagln, 10 % bovint natriumcltrat-behandlet plasma, ble tilsatt en testforbindelse ved passende konsentrasjon og så blandet grundig. En 0,4 ml prøve av dette ble plassert i senteret av plastskål 35 x 10 mm (A/S Nunc, Danmark) og utsatt for klumpdannelse. Til kulturskålen ble det tilsatt 0,6 ml a-MEM kulturmedium (BW, USA) Inneholdende 10 % føtalt kalveserum, og så ble kulturen inkubert ved 37°C i 5 % C02i luft I 7 dager. Etter inkuberlng ble kultur-medlet som omgir plasmaklumpen fjernet, og plasmaklumpen ble dehydrert ved å plassere et stykke fllterpaplr på dens overflate. Så ble 1 til 2 dråper 5 H> glutaraldehyd dryppet på det gjenværende fllterpaplret over klumpen. Etter 10 minutter ble fllterpapirstykket fjernet, og så ble klumpen vasket med 0,1 M fosfatbuffer (pH 6,0). Klumpen ble så utsatt for acetylcholinesterase (heretter forkortet AchE) farging. Til 0,1 M fosfatbuffere (45 ml) inneholdende acetyltiocholinjodid (30 mg) ble det tilsatt 30 mM vandig koppersulfatoppløsning (6 ml) og 0,1 M vandig natriumcitratoppløsning (3 ml) og 5 mM vandig kaliumferricyanidoppløsning (6 ml) i rekkefølge. To ml av hver av de resulterende oppløsninger ble tilsatt til platen. Etter henstand ved 33°C i 4 til 6 timer ble antallet megakaryocyttkolonier talt.
Eksperimentelt eksempel 5
Virkning av Forbindelse (I) produsert i de foregående eksempler på utvikllngsøkning av AchE positive celler er vist i Tabell 6.
Bestemmelsesmetode:
AchE aktiviteten ble studert ifølge fluorescensmetoden (Ishibashi et al., Proceedings of the National Academy of Science U.S.A., Vol. 86, s. 5953 til 5957, 1989). Ikkevedhengende benmargceller fra BALB/c mus (1 x IO<6>celler/ml) ble suspendert 1 Iscoves modifikasjon av Dulbeccos medium (Gibco BRL Inc., USA) inneholdende 1 % Neutridoma-SP (Boheringer Mannheim, Tyskland). 25 pl av en testforbindelsesoppløsning i passende konsentrasjoner ble inokulert i en 96-brønners plate. Til hver av disse opp-løsningene i brønnen ble det tilsatt 100 pl av den ikkevedhengende benmargscellesuspensjon. Etter inkubering ved 37<*>C i 5 dager ble 25 pl av 6 * vandig glutalaldehyd-oppløsnlng tilsatt til brønnen. Etter henstand ved 4°C i 30 minutter ble blandingen sentrifugert (850 x g) ved 5°C, og supernatanten ble fjernet. Etter vasking av avsetningen i brønnen med 100 pl fosfatbufret saltvann, ble avleiringen tilsatt 100 pl buffer (pH 7,5) inneholdende 0,2 % polyoksyetylen-10-oktylfenyl eter (POPE), 1 mM etylendiamintetraacetat (EDTA), 0,12 M natriumklorid og 50 mM N-2-hydroksyetylpiperadin-N'-2-etansulfonsyre (HEPES). Til dette ble det tilsatt 10 pl vandig acetyltiocholinjodid-oppløsning (konsentrasjon: 1,6 mg/ml). Etter inkubering ved 33<*>C i 3 timer ble 10 pl av den resulterende oppløsningen separert. Til dette ble det tilsatt 10 pl av en vandig 0,4 mM 7-dletylamlno-3-(4'-maleimidylfenyl)-4-metylcoumrin-oppløsnlng og 100 pl buffer (pH 5,0) inneholdende 0,2 % POPE, 1 mM EDTA og 50 mM natriumacetat og fluorescensemisjonen ble bestemt ved et fluorometer (eksitasjonsbølgelengde: 365 nm, fluorescensbølgelengde: 450 nm).
Eksperimentelt eksempel 6
Toksisitetstest
Ingen mus administrert intraperitonalt med Forbindelse 3 ved en dose på 100 mg/kg ble funnet død.
Eksperimentelt eksempel 7
Tosisitetstest
Ingen mus administrert subkutant med dinatriumsaltet av Forbindelse 7 ved en dose på 100 mg/kg ble funnet død.
Forbindelse (I) eller et salt av dette har lav toksisitet og kan bli benyttet sikkert.
Som det er klart fra de foregående eksperimentelle eksempler, har Forbindelse (I) eller et salt av dette, en aktivitet med bemerkelsesverdig forbedring av hematopoetisk forstyrrelse, og kan bli benyttet som et terapeutisk eller profylaktisk middel for leukocytopeni forårsaket av radioterapi eller kjemoterapi for cancer hos pattedyr (f.eks. hund, katt, ku, hest, ape, menneske, osv.), som et hematopoetisk stimulerende middel ved benmargstransplantasjon, som et Immunologisk forbedrende middel som har en virkning ved øking av leukocytter, og, videre som et terapeutisk middel for trombocytopeni .
Formulerlngseksempel 1
Forbindelsen 2 (4 g) fremstilt i Eksempel 8 og mannitol (50
g) ble oppløst i sterilisert destillert vann (1 1) inneholdende polyetylenglykol 400 (30 vekt-*). Oppløsningen ble
sterilfUtrert og ble fordelt med 1 ml 1 hver ampulle for å gi Intravenøse Injeksjoner hver inneholdende 4 mg av forbindelsen 2.
Formulerlngseksempel 2
Trinatriumsaltet av Forbindelse 23 (40 mg) fremstilt i Eksempel 53 og mannitol (50 g) ble oppløst 1 sterilisert destillert vann (1 1) inneholdende polyetylenglykol 400 (30 vekt-*). Oppløsningen ble sterilfUtrert og fordelt på ampuller hver inneholdende 1 ml, for å fremstille intravenøse injeksjoner hver inneholdende 40 pg av trinatriumsaltet av Forbindelse 23.

Claims (11)

1. Forbindelse, karakterisert ved at den har formelen:
hvor hver av R <1> og R <2> er hydrogen eller alifatisk acyl, A er amino som kan være beskyttet, X er en aminosyresekvens bestående av 1 til 10 aminosyrerester som inneholder minst en aminosyrerest som har en vannoppløselighetsøkende gruppe, eller et salt av denne.
2. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at A er amino.
3. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at A er amino som kan være substituert med substituert oksykarbonyl.
4. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at aminosyreresten som har en vannoppløselighets-økende gruppe, er en sur aminosyrerest.
5. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at aminosyreresten som har en vannoppløselighets-økende gruppe, er en basisk aminosyrerest.
6. Forbindelse Ifølge krav 1, karakterisert ved at alifatisk acyl er C2-30<a> lifatisk acyl.
7. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at minst en av R <1> og R <2> er alifatisk acyl.
8. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at forbindelsen er valgt blant gruppen bestående av (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(heksadekanoyloksy)-4-tiaheptanoyl-glycyl-glutamyl-glutamlnsyre, (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(heksadekanoyloksy)-4-tiaheptanoyl-glycyl-glycyl-glutaminsyre, (2R,6R )-2-amino-6,7-bis(heksadekanoyloksy)-4-tiaheptanoyl-glutamyl-glycyl-glutaminsyre og (2R,6R)-2-amino-6,7-bis(heksadekanoyloksy)-4-tlaheptanoyl-glycyl-D-glutaminsyre.
9. Immunstimulerende sammensetning med en leukocyttøkende virkning, karakterisert ved at den omfatter en forbindelse ifølge krav 1 eller et salt av denne.
10. Sammensetning for behandling av trombocytopeni, karakterisert ved at den omfatter en forbindelse ifølge krav 1 eller et salt av denne.
11. Fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse ifølge krav 1 eller et salt av denne, karakterisert ved at den omfatter å utsette en forbindelse med formelen:
hvor hver av R <1> og R <2> er hydrogen eller alifatisk acyl, R <3> er en beskyttelsesgruppe, A er amino som kan være beskyttet, X' er en aminosyresekvens bestående av 1 til 10 eventuelt beskyttede aminosyrerester som inneholder minst en eventuelt beskyttet aminosyrerest som har en vannoppløselighetsøkende gruppe, eller dets salt, for en avbeskyttelsesreaksjon.
NO934834A 1992-12-28 1993-12-27 2-amino-6,7-dihydroksy-4-tiaheptasyrederivater, fremstilling og anvendelse av disse NO934834L (no)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP34906292 1992-12-28
JP5618593 1993-03-16
JP18173593 1993-07-22

Publications (2)

Publication Number Publication Date
NO934834D0 NO934834D0 (no) 1993-12-27
NO934834L true NO934834L (no) 1994-06-29

Family

ID=27295829

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO934834A NO934834L (no) 1992-12-28 1993-12-27 2-amino-6,7-dihydroksy-4-tiaheptasyrederivater, fremstilling og anvendelse av disse

Country Status (15)

Country Link
US (1) US5478808A (no)
EP (1) EP0604957B1 (no)
KR (1) KR940014436A (no)
CN (1) CN1094731A (no)
AT (1) ATE170871T1 (no)
AU (1) AU666789B2 (no)
CA (1) CA2112523A1 (no)
DE (1) DE69320931T2 (no)
FI (1) FI935888A (no)
HU (1) HUT65865A (no)
IL (1) IL108173A (no)
NO (1) NO934834L (no)
NZ (1) NZ250588A (no)
PH (1) PH30687A (no)
TW (1) TW264479B (no)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1313754A4 (en) * 2000-09-01 2006-09-27 Gryphon Therapeutics Inc COMPOSITIONS PRODUCING STABLE THIOESTERS WITH OPHILIC NUCL, PROCESSES FOR PRODUCTION AND USE
EP1382352A1 (de) * 2002-07-19 2004-01-21 GBF Gesellschaft für Biotechnologische Forschung mbH Bisacyloxypropylcystein-Konjugate und deren Verwendung
DE102005024040A1 (de) * 2005-05-25 2006-12-14 Rovi Gmbh & Co. Kosmetische Rohstoffe Kg Kosmetisches oder therapeutisches Kombinationspräparat mit Theanin
WO2006138238A2 (en) * 2005-06-13 2006-12-28 Cleveland Biolabs, Inc. Methods of protecting against apoptosis using lipopeptides
CN101421293B (zh) 2006-03-01 2013-09-25 福冈县政府 含有肽脂质的载体和使用该载体将化合物引入细胞的方法
DE102009034779A1 (de) * 2009-07-25 2011-02-03 Emc Microcollections Gmbh Synthetische Analoga bakterieller Lipopeptide und ihre Anwendung zur Therapie und Prophylaxe allergischer Erkrankungen
EA023725B1 (ru) * 2010-03-23 2016-07-29 Новартис Аг Соединения (липопептиды на основе цистеина) и композиции в качестве агонистов tlr2, применяемые для лечения инфекционных, воспалительных, респираторных и других заболеваний

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0000330B1 (de) * 1977-06-20 1981-08-05 Ciba-Geigy Ag Lipopeptide, Verfahren zu deren Herstellung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
EP0014815A3 (de) * 1978-12-20 1980-10-29 Ciba-Geigy Ag Peptidderivate, Verfahren zu deren Herstellung und Zwischenprodukte sowie pharmazeutische Präparate mit einer dieser Verbindungen
ATE67769T1 (de) * 1983-01-25 1991-10-15 Ciba Geigy Ag Neue peptidderivate.
DE3546150A1 (de) * 1985-06-24 1987-01-22 Hoechst Ag Membrananker-wirkstoffkonjugat, seine herstellung sowie seine verwendung
JPH0446194A (ja) * 1990-06-13 1992-02-17 Fujisawa Pharmaceut Co Ltd Ｗｓ１２７９ａ物質、その生産法及び用途
JPH0499796A (ja) * 1990-08-13 1992-03-31 Kazuo Achinami 新規リポペプタイド及び抗腫瘍剤
ATE147404T1 (de) * 1991-12-19 1997-01-15 Ciba Geigy Ag Aminosulfonsäurederivate und verfahren zu ihrer herstellung

Also Published As

Publication number Publication date
NO934834D0 (no) 1993-12-27
US5478808A (en) 1995-12-26
DE69320931D1 (de) 1998-10-15
PH30687A (en) 1997-09-16
EP0604957B1 (en) 1998-09-09
DE69320931T2 (de) 1999-05-20
AU666789B2 (en) 1996-02-22
IL108173A (en) 1998-03-10
HUT65865A (en) 1994-07-28
CA2112523A1 (en) 1994-06-29
EP0604957A1 (en) 1994-07-06
AU5261493A (en) 1994-07-07
TW264479B (no) 1995-12-01
FI935888A (fi) 1994-06-29
NZ250588A (en) 1995-03-28
KR940014436A (ko) 1994-07-18
HU9303761D0 (en) 1994-04-28
CN1094731A (zh) 1994-11-09
FI935888A0 (fi) 1993-12-27
IL108173A0 (en) 1994-04-12
ATE170871T1 (de) 1998-09-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0114787A2 (de) Neue Peptidderivate
EP0111266A2 (de) Substituierte Tetrapeptide
JPS6360760B2 (no)
DK2697246T3 (en) SELECTIVE CYSTEIN PROTEASE INHIBITORS AND USES THEREOF
JPH04208299A (ja) プロリルエンドペプチターゼ阻害ペプチド
NO934834L (no) 2-amino-6,7-dihydroksy-4-tiaheptasyrederivater, fremstilling og anvendelse av disse
US8835392B2 (en) Mimetic peptides and the use thereof in the form of 20S, 26S and immunoproteasome inhibitors
US5478809A (en) TAN-1511, its derivatives, production and use thereof
EP0931792B1 (en) Depsipeptides containing non-natural amino acids
JP3556967B2 (ja) ２−アミノ−６，７−ジヒドロキシ−４−チアヘプタン酸誘導体
CA2131639A1 (en) Thioglycerol derivatives
EP0638588A1 (en) Derivatives of 6,7-Dihydroxy-4-thiaheptonic acid and their use
Blagodarov et al. Improving the synthesis of hemin derivatives and their effect on bacterial biofilms
JP2934905B2 (ja) 新規リポペプタイド及び抗腫瘍剤
JPH07252295A (ja) ６，７−ジヒドロキシ−４−チアヘプタン酸誘導体
JPH0499796A (ja) 新規リポペプタイド及び抗腫瘍剤
JPH07145084A (ja) Ｔａｎ−１５１１関連化合物
EP0454302A2 (en) Tuftsin derivatives
JPH07126243A (ja) チオグリセロール誘導体
JPH07252163A (ja) 血小板減少症治療剤
WO2021129579A1 (zh) 血红素衍生物及其制法和用途
JPH0253800A (ja) ペプチド及び抗痴呆剤
JPH11322786A (ja) 非天然アミノ酸を含有するデプシペプチド
Samir et al. SYNTHESIS AND BIOLOGICAL EVALUATION OF CYCLO (NITRO) PROCTOLIN ANALOGS
JPH04178398A (ja) 新規ペプタイド化合物及びその用途