NO830484L - Fremgangsmaate for fremstilling av klavulansyreestere - Google Patents

Description

Oppfinnelsen vedrører en fremgangsmåte for fremstilling av eteré av klavulansyre.

Norsk patentsøknad hr. 76.3473 beskriver at forbindelser av formel (I) : .

hvor R er.en inert organisk gruppe med opp til 18 karbonatomer, og CO.A er en.estergruppe, kan fremstilles ved foretririg av en . tilsvarende ester av.klavulansyre. Søkeren har na vist at forbindelser innen formel (I) kan fremstilles ved foretring av en tilsvarende, forbindelse hvor R er hydrogen, ved omsetning med et .oksoniumsalt.

Oppfinnelsen tilveiebringer eh fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse av formel (II):

og salter og estere derav, hvor'er et hydrogenatom eller en fenylgruppe. eller en alkylgruppe med opp til 4 karbonatomer, idet fremgangsmåten omfatter omsetning av en ester av klavulansyre med-en forbindelse av formel (III): .

hvor R"'" er.som definert med hensyn til formel (II), og deretter,

om ønskes, dannelse av den frie syre eller et salt derav fra esteren og, om ønskes, dannelse av e"n alternativ ester fra den således dannede frie syre eller saitet.

Foretringsreaksjonen utføres i et inert organisk' løs-ningsmiddel, f.eks. diklormetan, kloroform, karbontetraklorid, eller et annet halogenalkan eller lignende. Fortrinnsvis er reak-

t

sjonsmiljøet strengt ikke-hydroksylisk.

Normalt finner foretringéir. sted ved' en temperatur på fra -60°C til +60PC, mer vanlig fra -4b°C til 30°C, f.eks. fra ca. 0°C til ca. 20°C. Det er ofte bekvemt å starte reaksjonen, ved senket temperatur og a la den øke gradvis til omtrent omgivelsestemperatur

Foretringen finner fortrinnsvis sted i nærvær av en base.

Basen er helst et karbonat'eller bikårbonat, f.eks.' natriumkarbonat, natriumbikarbonat', litiumkarbohat, kåliumkarbonat', kalsium-, karbonat eller lignende.

Så snart foretringen er praktisk talt'ferdig, (f.eks. som vist ved tynnsjiktkromatografi); kan den ønskede forbindelse . oppnås fra reaksjonsblandingen ved vå'sking med vann for fjerning' av ioniske materialer og deretter tørking og fordampning av. den organiske fase og, om ønskes, ytterligere rensning av eteren ved kromatografi.

I ovennevnte foretring kan R"*" være hydrogen , fenyl , metyl ., etyl ,. n-propyl , iso-propyl , n-butyl , iso-butyl ., sek.-butyl eller t-butyl.

R"<*>" er gjerne hydrogen, metyl ellér etyl.

R"*" er svært gjerne hydrogen.

R"'" er svært gjerne metyl.

Esteren av klavulansyre som anvendes ved fremgangsmåten, er gjerne en forbindelse av formel (IV) eller (V):

hvorb} er som definert med hensyn til formel (II), og A1 er' en alkylgruppe med 1-8 karbona torrier som eventuelt er substituert méd hal; ogen, eller en gruppe av formel OA OCOA SA , SO-A hvor A<4>. er en hydrokarbongruppe med opp til 6 karbonatomer; A er. et hydrogenatom, en alkylgruppe med opp til 4 karbonatomer eller en fenylgruppe som eventuelt er substituert med halogen, eller med.en 5 5 gruppe A eller OA hvor A er en alkylgruppe med opp til 6 karbori-atomer; og A<3>er en fenylgruppe som ev. entuelt er substituert m• ed. halogen eller med en gruppe A 5 eller OA hvor A 5er en alkylgruppei Gunstige verdier for A^" inkluderer metyl- og metoksy-metylgrupper, da slike estere bekvemt kan hydrolyseres ved.mild .basehydrolyse ,. f.eks . under anvendelse- av LiOH , N.aOH, KOH eller lignende eller et karbonat osv. ,

Gunstige verdier for CHAÅ inkluderer benzyl-, og p-metoksybenzylesterne da slike estere bekvemt kan. hydrogenolyseres i nærvær av en palladium- eller lignende katalysator.

Estere av forbindelsene åv formel (TI), kan omdannes til den frie syre eller dens salter ved ele fremgangsmåter som er beskrevet i norske. søknader nr. 76.3473<*>bg.75.1407. Slike metoder inkluderer hydrogenering av benzyl- eller p-metoksybenzyl" eller ekvivalente estere, eventuelt i nærvær av en base, f.eks. Li2C0^, Na2C0^i K2C<O>2', NaHCO^eller lignende og i nærvær av en overgangs-metallkatalysator, f.eks. 10% palladium på trekull.

Forbindelsene av formel (II) og deres salter kan for-estres på konvensjonell måte, f.eks. som beskrevet i norske patent-søknader nr . 76.3473 og 75.1407.

Estere av forbindelsene, av formel. (II) som. kan freméti.lles på slik måte, inkluderer dem som•er analoge med forbindelsene av formel (IV) og (V) og inkluderer in-vivo hydrolyserbare estere, . f.eks. av acetoksym.etyi, a-acetoksyetyl, pivaloyloksymetyl, ftalidyl, etoksykårbonyloksymetyl, etoksykarbonyloksyetyl 6.1.

Egnede salter som' kan fremstilles av esterne inkluderer litium-, natrium-, kalium-, .kalsium-, magnesium-, 'ammonium- og substituerte ammoniums.alter, f.eks. monoalkylamin, dialkylamin, trialkylamin. (f.eks. trimetylammonium- og trietylammoniumsalter), kvatérnære alkylamin- og lignende salter.

Gunstige salter inkluderer litium-, natrium-, kalium-

og kalsiumsaltene.

Litiumsaltet foretrekkes da.det er et stabilt salt som. lett omdannes til natrium-, kalium- eller kalsiumsaltene, f.eks.

ved påføring i en kolonne av Ir-120' ^lier lignende ionebytteharpiks i natrium-, kalium- eller kalsiumform..

Natrium-, kalium- og kalsiumsaltene. kan anvendes i farma-søytiske forbindelser med fordel. .Produktene"som inneholder forbindelsene av formel (II) eller deres salter eller estere kan. være sammensatt som beskrevet i de norske patentsøknader nr. 76.3473 og 75.1407.

De forbindelser som fremstilles ved fremgangsmåten i henhold til oppfinnelsen er fortrinnsvis krystallinske. Krystalli-sering av mange forbindelser .som fremstilles ved fremgangsmåter

i henhold til oppfinnelsen kan istairdbringes på konvensjonell måte, f.eks. ved rekrystallisering ut fra ét organisk løsningsmiddel, f.eks. etylacetat, aceton (tørr eller fuktighetsholdig) eller lignende.

Eksempel 1

p- metoksybenzyl- O- etylklavulanat

Til en løsning av p-metoksybenzylklavulanat (9,6 g,0,03 mol) i 500 ml diklormetan omrørt ved -30°C.ble det suksessivt tii-' satt vannfritt. natriumkarbonat (15 goverskudd) og en løsning av triétyloksoniumtetrafluorborat (17,6 g, 0,09 mol) i 100ml diklormetan.

Blandingen ble omrørt ved ca. -10°C i 6 timer, og den "fikk deretter oppvarme seg til omgivelsestemperatur i løpet av

1/2 time.. 100 ml vann ble tilsatt med forsiktighet under omrøring, den.organiske fase ble separert fra, tørket over vannf.ritt natriumsulfat og inndampet til en sirup. Denne ble utsatt for kolonne-krdmatografi på silikagel, innledningsvis eluert med 1:1, deretter

med 2 :1., etylacetat/cykloheksanblandinger. Det først eluerte produkt var etyleteren (4,9 g etter inndampning av løsningsmidler),, fulgt av gjenvunnet p-metoksybenzylklavulanat :(4 g). Etyleteren var en blekgul olje med følgende egenskaper:

I.r. (væskefilm)- 1805 (/3-laktam C-O) 1750 (ester C=0) 1700 cm"<1>(G=C) ; part.nmr (CDCl3) 1,17 (3H, t, J 7HZ, CH_3CH2) 2,96.(lH,d, J 17Hz, 6-.^-CH) 3>41(2H; q, ■ J 7HzCHjCHj-) 3,47 (1H,'.. dd J 17. og 3 Hz,. 6-a-CH) 3,79 (3H, s, 0CH3) 4,03 (2H, d,. J 7Hz, -CH20). 4,82 (1H, t, J 7Hz, CH=) 5,0.4 (lH, s, -3-CH) 5, 11 6 (2H-, s, PhCH2)... ' Eksempel 2' Litium- O.- etylklavulahat

2,5 g metoksybenzyl-0-etylklavulana't i 25 ml tetrahydro-.furan som Inneholdt 0,1 ml vanri ble hydrogénert.over 10% palladisert trekull (0,8 g). Etter 2 timer ble fravær av startmatériale vist ved TLC. Katalysatoren ble .fjernet ved filtrering gjennom et sjikt, av findelt silisiumdioksyd, filtratet fortynnet med samme volum vann

og titrert, til pH 7,0 med l.m litiumhydroksydløsning.Fordampning av løsningsmidlene og triturering med aceton gav litiumsaltet i form av et lyst kremfarvet, krystallinsk faststoff (1,05 g).

(Natriumsaltet ble fremstilt på identisk måte.under anvendelse av 1 m NaOH-løsning: utbytte 0,85 g.) Egenskaper-ved litiumsaltet: NI.r. (nujol mull) 1785 (/3-laktam C=0)' 1685 (C=C) 1615 cm<-1>(^C02~).

. Eksempel . 3

Under anvendelse av fremgangsmåten fra eksempel 1 kan følgende estere av klavulanetyléter fremstilles: benzyl, metyl, metoksymetyl og allylj

Eksempel 4.

Under anvendelse av fremgangsmåten fra eksempel 2 kan.

følgende salter av klavulanyletyleter fremstilles:, natrium, kalium., kalsium og ammonium.

Eksempel, 5

Under anvendelse av fremgangsmåten fra eksempel 1 kan p-metoksybenzyiesteren av de følgende klavulanylalkyletere fremstilles : • metyl, béhzyl og n-propyl.

Eksempel 6

1,63 ml dibutyleter, 1,43 ml 1-brombutan:og•1 molar sølv-tetrafluorborat i 1,2-dikloretan (5 mi) ble blandet og satt til side i 1 time ved 20°C. Det utfelte AgBr ble filtrert fra og vasket .' med 2 ml diklormetan. De kombinerte filtrater ble avkjølt til -20°Cog suksessivt ble 1 g vannfritt Na2C02 og en løsning av .0,5 g p-metoksybenzylklavulanat i 5 mi diklormetan tilsatt under effektiv omrøring. Reaksjonen ble holdt under omrøring ved romtemperatur i 6 timer og deretter holdt ved -20°C i 48 timer. Det uløselige materiale ble filtrert fra og filtratet vasket med 10 ml vann,, tørket (Na^SO^) og inridampet til en gummi som ble utsatt for kolonnekromatografi over silisiumdioksydgel, under eluering med 1:3 etylacetat/cykloheksan.Fraksjoner som inneholdt eteren (TLC-permanganatdusj). ble kombinert og inndampet slik at man fikk det ønskéde materiale som en nesten faryeløs olje (80 mg).

Hydrogénering av ovennevnte produkt (80 mg) i 6 ml tetira-hydrofuran som inneholdt0,02 ml vanti over 10%palladisért trekull

(40 mg) i 15 minutter ved romtemperatur (TLC viste fravær av start-materiale). Materialet ble filtrert og filtratet fortynnet med 20ml vann og titrert til pH 7,5 med0,1 m LiOH-løsning. Materialet ble inndampet til en.halvfast rest i vakuum. Triturering under ca.'2 ml aceton gav et hvitt, fast stoff som ble filtrert. fra, vasket med 5 ml eter og tørket i luft slik at man fikk 40 mg krystallinsk litium-O-butylklavulanat.

Dataene for den intermediære ester er som følger:

I.r. (film) 1805, 1745, 1695 cm"<1>;

N.m.r. 0,89 (3H, t, J 6,5 Hz, CH3CH2-), 1,1 r. 1,8 (4H, m, CH2CH2-CH3) , 2,96 (lH, d, J 17Hz, 6-/3-CH) , 3',31.(2H, t, ^6,5 Hz, 0CH_2-] CH2), 3,39 (lH, dd, J 17 og 3 Hz, 6-a-CH) , 3,74 (3H, s,. 0CH3).,

3,97 (2H, d,- J 7Hz, =CHCH2) , 4,75 (iH dt, J 1,5 og 7 Hz, =CH) , 4,99 (lH, s,. 3-CH) , 5,06 (2H, s, CgH^^) , 5., 58 (lH,; d, J 3 Hz, ... 5-CH) , 6,7.9, 7,19 6 (4H, A2B2q, J 9 Hz, C^)..

Eksempel 7•

Litiumsait.ét av metyleteren åv klavulansyre kan fremstilles ved de fremgangsmåter som er beskrevet i.eksempel 6 når man erstatter løsningen av butyloksoniumsaltet med en ekvivalent mengde av en løsning'av metyloksoniumsaltét.

Eksempel 8

Etyl- 9- O- etylklavulanat

Til en kraftig omrørt suspensjon av kaliumklavulånat (1,52 g) og vannfritt natriumkarbonat (4 g) .. i 70. ml tørt diklormetan som var avkjølt til.-20°C, ble det dråpevis tilsatt en løs-ning av.trietyloksoniumtetrafluorborat (4,86 g).i 40 mi tørt diklormetan..Reaksjonen ble holdt under røring i 3 timer ved ca.. -20°C (meget langsom reaksjon) og deretter i. 1 time ved ca..5°c (isbad). ■ På dette tidspunkt viste TLC en moderat sterk estersone og "en sterk.ester-etersone. 90 ml variri ble t ilsatt, fasene sepa-. rert og den organiske fase tørket over natriumsulfat. Tørkemidlet .ble filtrert fra, og• filtratet inndampet til en orange-farvet olje. Denne ble utsatt for gradient— eluéringskromatografi på silikagel under anvendelse av etylacetat og cykloheksan, gradert fra 1:1 forhold til rent etylacetat. Eter-esterén eluerte føir es teren. Fraksjoner som inneholdt disse (ved TLC) ble henholdsvis kombinert.og inndampet slik at man fikk 44 mg rått etylklavulanat . og 526'mg ester-éter. Disse bie rékrbmatografert separat. (Este ren ble rekromatografert under anvendelse av det opprinnelige løs-nin.gsmiddelsystem slik at man fikk 15. mg ren ester.) Ester-etereri ble rekromatografert under anvendelse åv etylacetat bg cykloheksan gradert fra 3:2 til- 2:3 forhold, slik at man fikk 37 5 mg rent etyl-9-0.-etylklavulanåt i form av en bi ekgul olje..

O.R. ^ makg (f ilm) 1802 ', 1744 og 1699 c^"<1>;

: $ (CDCl3)': 1,14 (3H, t, J 7Hz , eter CH^) , 1,2'6 (3H, t, J 7 Hz, ester CH3) , 2,97 (l'H, d, J 17Hz, 6-)3-CH) , 3,46 (lH, dd, J .17 og 3Hz, 6-a-CH) , 3,39 (2H, q, J 7Hz , 9-0-CH2), 4,01 (2H, d., J 7Hz , 9-CH2) , 4 ,17 (2H, q, J 7Hz/ C02 CIJ2) , 4,78 (lH, t , J 7Hz.', 8-CH) , 4,99 (1H, s, 3-CH) , 5,63 (lH, d, J 3Hz , . 5-CH) .

Tétrametylguan.idiniumklavulahat kan erstatte kaliumklavulånat i denne, reaksjon, men det er ikke fordelaktig,, til tross for saltets løselighet i diklormetan.

Eksempel . 9

Etyl- 9- 0- etylklavulanat

Fremgangsmåten fra eksempel 8 kan forbedres ved tilsetning av en katalytisk mengde (0,17 g i dette tilfelle) av "crowri"-eter ('18 crown 6') til diklormetanløsningen av. reagensene før tilsetning av oksoniumsaltet. I dette tilfelle ble 1,1 g (75 %)

av i alt vesentlig rent etyl-O-etylklavulanat oppnådd etter første

kolonne (basert på 89 %' rent kaliumsalt-utgangsmateriale).. Eksempel 10. Litium- 9- 0- étylklavulanat

En løsning av 1,1 g etyl-9-6-etylklavulanat i tetrahydro-.furan/vann-.(1:2, 60 ml) ble holdt ved pH 9,4 (pH-Stat) ved tilsetning av en lm LiOH-løsning inntil 4,6 ml var brukt (ca. 90min) ved 22°c under røring. Én liten dråpe eddiksyre ble tilsatt for

å bringe pH-verdien ned til 7,0, og løsningen ble så inndampet til

en orangefarvet gummi på den roterende inndamper ved.Omgivelsestemperatur.. Gummien ble oppløst i ca. 20 ml aceton og avkjølt, ved 2-3°C il time, da litiumsaltet.krystalliserte. bet ble filtrert fra, vasket med 20 ml aceton og med 20 ml eter og tørket i vakuum, slik at man fikk høyrent litium-O-e.tylklavulanat i form av et blekgult krystallinsk', fast stoff (0,73 g) .

(Totalt utbytte fra kaliumklavulånat via eksempel 9 = 55 %)

(2.6 under"anvendelse av Cu K a-bestråling - 12, 6, 13, 3, 14 , 7, 17,2, 17.,8, 18,7,19,9 , 20, 8, 21 , 6, 22,8, 24,6, 26,8, 27, 4,

■28,2 og 28,7°) .

Eksempel 11. Natrium- 9- O- étylklavulanat

En del av produktet fra eksempel 10 (0,25 g) i 2 ml vann ble kjørt-gjennom et sjikt av "Amberlité"IR^120 (Na - form,.8 ,ml våt harpiks av standard kvalitet). Elua.tét ble oppsamlet og inn-dam-et under redusert trykk ved omgivelsestemperatur. Inndamp-nirigsresten ble t-riturert under aceton/eter, filtrert fra., vasket med eter' og- tørket slik at man f ikk natri'um-9-0-etylklavulanat (0,2 gj.

Eksempel 12 Etyl- 9- 0- etylklavulanat ■

Krystallinsk hydratisert natriumklavulanat ble- dehydratisert under vakuum med fosforpentoksyd til konstant vekt. En suspensjon av det tørre salt (1,11 g) og- .2,65 g vannfritt natriumkarbonat i tørt . (behandlet med: 3Å moldcylsikt) , metanolfritt mety-'lenklorid (50 ml) ble behandlet med en "crown"-eter (20 mg av ' '18 crown 6') og omrørt og avkjølt til -20°,' beskyttet mot atmosfærisk fuktighet. En løsning, av 3,8 g trietyloksoniumtetrafluorborat

i 50 ml tørt metylenklorid ble tilsatt i løpet av 20minutter og blandingen omrørt kraftig ved.-20° i.3 timer. Det ble tatt prøver •ved intervaller, og disse ble undersøkt ved hjelp av TLC slik at .-. niån fulgte reaksjonen. Den omrørte reaks j onsbl anding. blé så holdt

ved ca. 5° (is/vannbad) inntil mengden av det ønskede produkt var maksimal (bedømt, med TLC mot eri standard prøve). 50 ml vann ble så tilsatt og fasene omrørt og deretter separert. Metylen-kloridløsningen ble vasket med mer vann (50 ml)-, tørket over vannfritt nåtriumsulf at-• og tørkemidlet fjernet ved filtrering.

Løsningsmidlet ble destillert ved redusert trykk ved < 20° slik at man fikk det rå.tittelprpdukt i fbrm av en lys, orange olje (1,10 g). Den rå eter/ester.ble oppløst i en 1:1 blanding av. cykloheksan:etylacetat (.25 ml) og kjørt pa én kolonne av silikagel (30 g) fremstilt i den samme l^sriingsmiddelblanding." Kolon-nen ble kjørt med 1:1 cykloheksan/etylacetat og eluenten undersøkt ved TLC ved 10 ml intervaller. De fraksjoner som inneholdt

tittelforbindelsen, ble kombinert og løsningsmidlet destillert ved redusert trykk og <.20°. Dette ga etyl-9-0-etylklavulanat

ii, ■ ■

i form av.en f arveløs .olje (640 mg-, 50 %). Det- viste de samme

spektrografiske karakteristika som produktet, fra eksempel 8. De fraksjoner som ved hjelp av TLC (mot en standardprøve) viste seg å inneholde etylklavulanat, ble kombinert og løsningsmidlet fjernet.. Esteren ble oppnådd i form av en farveløs olje (350 mg, 31 %).

Eksempel. 13 Etyl- 9- 0- etylklavulanat

1,19 g kaliumklavulånat, 2,65 g vannfritt natriumkar-■bonat og et spor av "crown"-eter (1 dråpe '15-crown-5') ble suspendert i 50 ml nitrometan og blandiHgen omrørt og avkjølt til

-20° og beskyttet mot atmosfærefuktighet. En løsning . av 3-,8 g

trietyloksoniumtetrafluorborat i 50 ml nitrometan ble tilsatt

- , i løpet av 20 minutter og blandingen omrørt kraftig ved -20°

i 3 timer.

Den omrørte reaksjonsblanding ble deretter holdt ved ca. 5° (is/vannbad). i 5 timer, hvoretter en analyse av reaksjonsblandingen ved hjelp av TLCviste nærvær av en stor sone som-var typisk for,etyl-9-0-etylklavulanat (sammenlignet med en

standardprøve). Eksempel 14

Étyl- 9- 0- etylklavulanat.

1,03 g litiumklavulanat ,- 2,65 g vannfritt natriumkarbonat. og. et spor' av "crown"-eter (1 dråpe '15-crown-5') ble suspendert i 50 ml tørt metylenklbrid og. blandingen omrørt og avkjølt til' -20°. og beskyttet mot atmosfæref uktighet. En løsning av

3,8 g. trietyloksoniumtetrafluorborat i 50 ml tørt metylenklorid ble tilsatt i'løpet av 20 minutter og.blandingen omrørt kraftig ved -20° i 1 time. Den omrørte . reaks jonsbland.ing ble så. holdt ved ca. -5°

(is/vannbad) i 5 timer, hvoretter den ble behandlet med 50 ralyann;

og den rå es.ter/éter (250 mg) blé iso'iért som beskrevet i eksem-

pel 12. Dette produkt ble renset på erv silikagelkolonne slik at

man fikk den rene. tittelforbindelse (130-mg, 10 %) og etylklavulanat (50 mg , '5 %) .

Eksempel 15

Etyl- 9- O- etylklavulanat 0,60 g magnesiumklavulanat, 1,5 g vannfritt natrium-karbpnat og et spor av "crown"-eter (10 mg av '18-crown-6'j ble suspendert, i'30 ml tørt metylenklorid, og blandingen omrørt og avkjølt til -20° og beskyttet mot atmosfærefuktighet.' En løsning av 2,15 g .trietyloksoniumtetrafluorborat i 30.ml.tørt metylénklo-rid ble tilsatt i løpet av 15'minuttér og blandingén omrørt kraf- . tig ved -.20° i 1 time.

Den omrørte reaksjonsblandlng ble så holdt ved 5° (is/ vannbad) i 2 timer, hvoretter en analyse av reaksjonsblandingen

ved hjelp av TLC viste nærvær av en stor sone som var typisk for . etyl-9-0-etylklavulanat . og bare en liten sone for etylklav.unalat.

Eksempel 16 Metyl- 9- 0- metylklavulanat Kaliumklavulånat (95 % rent; 1,52 g) og 4,0 g vannfritt natri.umkarbonat ble suspendert i 70 nil tørt metylenklorid. i et-kar .som var beskyttet mot fuktighet ved hjelp av et- kalsiumklorid-tørkerør. 0,17 g |18-crown-6' ble oppløst i .metylenklor.idet. Suspensjonen ble omrørt og avkjølt til ca. -20°, og en suspensjon-,av 4,22 g trimetyloksoniumtetrafluorborat i 90 ml tørt'metylenklorid ble'tilsatt, langsomt. Reaksjonsblandingen blé omrørt ved

-20° i 3 timer og ved ca... 0° i 1 time. 90 ml vann ble så tilsatt

og deri organiske fase separert og tørket (med vannfritt natrium-•sulfat). Løsningsmidlet ble fjernet under vakuum ogproduktet renset ved koloiinekromatograf i på silikagel ,' ved elué.r.ing . med •cykloheksan/etylacetat (1:1). Inndampning av passende eluent f iraks joner ga 0,54 mg .' metyl-9-O-metylklavulanat (41 %) og ytterligere 0,37 g metylklavulanat (29 %). '..

Prøven av metyl-9-O-metylklavulanat.ble hydrolysert i vandig tetrahydrofuranløsning med molart litiumhydroks.yd på.en.. pH-stat ved pH 9,5.

Krystallinsk litium-9-O-metylklavulanat (0,43 g) ble isolert ved inndåmpning og tilsetning av aceton.

Røntgenpulverdiffraktogram-refleksjoner ved- følgende vinkler :.■-.'.

20<,>\ (kobber Ka-be st rål ing) 11,5, 12,9; 14,2,'15,3, .17,9,..'

19,'l 21,021,3, 22,1, 23,5, 24,1 24,6, 25,4, 28,6,

29,4. Eksempel 17 Mety. l- 9- 0^ metylklavulanat Kaliumklavulånat (95 % rent; 4,56 g), vannfritt natrium-k.arbonat (12 g) , "crown-etér ( ' 18-crowrl-6 ' , 0,5. g) og trimetyloksoniumtetrafluorborat (12,7 gj ble avkjølt ved -70°og omrørt 200.ml metylenklorid ble tilsatt langsomt..Etter tilsetning av løsningsmiddel fikk temperaturen stige langsomt til, 20°.. Etter. 3 timers omrøring ved romtemperatur viste TLC-undersø-kelse to. soner (R^ j 0,35 og 0,12) med et... arealfoirh-old på tilnærmet

250 ml vann ble tilsatt til den omrørte reaksjonsblanding, pg den organiske- fase ble separert, tørket over. vannfritt natriumsulfat, inndampet og renset ved kolonnekromatografi som angitt i" eksempel 16. Eluentfraksjonene som inneholdt- det ønskede produkt, ble inndampet slik at man fikk 2,6 g (62 %) metyl-9-O-metylkla<y>ulanat (rent ifølge TLC).;

1,13 g av ovennevnte produkt ble - oppløst, i vandig tetrahydrofuran og hydrolysert på en pH-stat ved pH. 9,5- sl-.ik at ,man f ikk. kalium-9-0-met<y>lklavulanat..

Eksempel. 18

Metyi- 9- O- metylklavulanat

Nåtriumklavulanat (1,6 g, yakuum-dehydratisert. tetra-hydrat), 4,0 g vannfritt natriumkarbonat og 4,9 g trimetyloksoniumtetrafluorborat ble avkjølt- til -70° og omrørt mens 100 .ml tørket metylenklorid som inneholdt "crdwn"-et.er (ca., 50 mg '15-, prown-5 V) ble. tilsatt gradvis.. Omrøringen ble fortsatt mens temperaturen f ikk stige til romtemperatur. Reaksjonens forløp ble overvåket.ved tynnsjiktkromatografi, og etter 3' timer ved romtemperatur ble reaksjonsblandingen opparbeidet som angitt i'eksempel 17.. utbyttet ' av metyl-9-^0-metylklavulanat var 1,03 g (70 %) .

0,22 g metylklavulånat ble også isolert.'

'(CDGl3)2,99 l(H,d, J=16Hz , 6-/3CH) ,. 3 ,24 ' (3H ,s ,eterCH3)

3,44 (1H, dd, J=16Hz og -3. Hz, 6-qCH) ,. 3,72 (3H,

■.'■a-, ester,- CH_3) 3,9.6 (2H., d, j=7Hz, 9^CH20)', 4,79 (lH ,t , J=7Hz , 8-CH] 5 ,00 (IM, bs , 3-CH) , .5 , 6-3

(III ,d , J=3 Hz , 5/3CH) . Eksempel 19

Metyl- 9- 0- métylklavulanat

110 ml tørt metylenklorid inneholdende "c.rowh"-.eter

f-

(ca. 50mg M5-crown-5') ble tilsatt langsomt til en omrørt

■ o i kold (-70 ) blanding av 1,0g krystallinsk litiumklavulanat,

4,0 g vannfritt natriumkarbonat, og 4 ,4'g trimetyloksoniumtetra-. fluorborat..Blandingen ble .tillatt å nå romtemperatur og ble deretter omrørt i ytterligere 4 timeri Etter opparbeidelse og kromatografi som angitt i eksempel 17 bie rent metyl-9-0-metylklavu-ianat isolert (0,65 g , 57 % utbytte) . NMR vår identisk med pro-, duktet i eksempel 18.

Eksempel - 20 Metyl- 9- 0- metylklavulanat. 80 ml tørt metylenklorid inneholdende "crown"-eter (50 mg '1.8-crown-6') ble.langsomt tilsatt til en omrørt kold (-70°)- blanding av 0,6 g magnesiumklavulanat, 3,0 g magnesiumoksyd og trimetyloksoniumtetrafluorborat. Reaksjonsblandingen•ble tillatt å riå romtemperatur og reaksjonsforløpet ble fulgt med TLC. Etter flere timer ved romtemperatur kunne soner tilsvarende metylklavulånat og metyl-9-0-metylklavuianat sees på de utviklete TLC-plater.

Eksempel 21• Metyl- 9- O- metyiklavulanat

110ml tørt nitrometan inneholdende , "crown"-eter (ca.

.20 mg 115-crown-5') ble langsomt tilsatt til en avkjølt, omrørt blanding av 1,52 g kaliumklavulånat, 4,0 g vannfritt natriumkarbonat<p>g 4,5 g trimetyloksoniumtetrafluorborat. Reaksjonsblandingen ble tillatt å oppvarme seg til romtemperatur og ble omrørt ved denne temperatur i 3 timer. Opparbeidelse og rensning som angitt

i eksempel 17 ga metyi-9-O-metylklavulanat (0,72 g, 51 % utbytte)

(NM.R identisk med produktet fra eksempel 18) ..

Eksempel 22 Benzyl- 9- 0rTmetylklavulanat

100 g trimetyloksoniumtetraf luorborat. i 2 .1 tørt dikl.or-

metan ble oppslemmet, ved -30° mens 110 g vannfritt natriumkarboriat blé.tilsatt' i en.porsjon..70 g benzylklavulanat i 1 liter tørt diklormetan ble tilsatt ganske hurtig mens temperaturen ble holdt på -30°C. Réaksjonen ble så utført og opparbeidet på samme måte som beskrevet i eksempel 17 slik at man fikk 39,2 g benzyl-9-0-metyiklavulanat'. Eksempel. 23 p- metoksybenzyl- 9- 0- etylklavuianat Til en løsning av 9,6 g -p-metoksybenzylklavulanat i 500 ml diklormetan som ble omrørt ved -30°C, ble det.suksessivt tilsatt vannfritt natriumkarboriat (15 g',, overskudd) og en løsning '14

av 17 ,6 g. trietyloksoniumtetrafluorborat i 100 ml. diklormetan.

Blandingen ble omrørt ved ca. -10°C i. 6 timer, fikk så. bli oppvarmet til omgivelsestemperatur i løpet av 1/2 time.

100 ml vann ble tilsatt med forsiktighet under omrøring, den organiske fase ble separert, tørket over. vannfritt natriumsulfat og. inndampet til en sirup. Denne blé utsatt ' for kolonnekromatografi på silikagel ved eluering innledningsvis med 1:1, deretter med 2:1,

. etylacetat/cykloheksanblandiriger. Det første eluérte produkt var etyleteren (4,9 g. etter fordampning av løsningsmidler) fulgt av gjenvunnet p-metoksybenzylklavulanat (4 g).. Titte.l.forbindelsen

var en blekgul olje med følgende egeriskaper:

I.R. (flytende film) .1805 (/3^1aktam c=0) 1750' (ester

C=0) 1700 cm"<1>(C=C) ;

NMR (CDCl3) 1,17.(3H, t, J ifcz , C£3CH2) 2,96 (lH.,'d,

J 17 Hz, 6-/3-CH). 3,41 (2H, q, J 7Hz , CH3CH2~) 3,47 (lH, dd, J 17

og 3Hz, 6-a-CH) 3,79 (3H, s, 0CH3) 4,03 (2H , d, J ,7 Hz , -0H_2O) 0,82 (lH,' t, J'7.Hz, CH=) 5,04 (lH, s, 3-CH) 5,11 (2H, s, pHCH2) , 5,65 (1H, d, J;-3H3,.rCH) 6,9, 7,3 (4h, A2B'2<q>'- l0H3' ^ e^^ ' Eksempel 24

Litium- og riatr. ium- 9- O- étylklavulanat

2:, 5 g p-metoksybenzyl-9T-0-etylklavulanat i 25 ml tetra-hydrofurari som inneholdt 0,lml vann, ble hydrogenert over 10 %

palladisert trekull (0,8 g) . Etter 2 timer ble fraværet a-v ut-gangsmåterialet vist ved hjelp av TLC. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering gj.ennom et sjikt ay findelt silika, filtratet ble fortynnet med samme voium vann slik at man fikk. en løsning av 9>-0-etyiklavulansyre. Denne' løsning ble titrert til. pH 7 ,0 med

lm- litiumhydroksydløsning. Fordampning"av løsningsmidlene og tri- •turering-med aceton ga litiumsaltet i form av et kremfarvet " krystallinsk fast stoff (1,05 g) .

Natriumsaltet ble fremstilt på identisk måte under anvendelse av.lm NåOH-iøsning; utbytte 0,85 g..

I.R. - (nujol-mull) 1785 (/3-laktam C=0)

■ '1685 (C=C) .1615 cm<->"'" (-CO^-) . (Begge salter).. (utgangsmateria-let for dette eksempel' er fremstilt som beskrevet i.eksempel ,2.3. ) Eksémpel 25 Etyl- 9- 0- etylklavulanat

1 ,1 g . dehydratisert.natriumklavulånat,.2,65 g vannfritt natriumkarbonat og et spor av "erown"-eter. (10 mg av '18-crown-6 ') ble suspendert i 50 ml tørt, metanolffitt metylenklorid, og blandingen ble omrørt og avkjølt ved -20°.. En løsning av 5,0 g

trietyloksoniumheksafluorfosfat i 50 rhl tørt. metylenklorid ble- tilsatt i løpet av 20 minutter og blandingen omrørt kraftig ved -20°

i 3 timer. Den omrør te reaksjonsblahding ble' deretter holdt ved ca.' 5° i .7 timer', hvoretter den ble behandlet med 50 ml vann og ester/eteren (250 mg) isolert som beskrevet i eksempel 12.

•Dette produkt ble renset på. eh silikagelkolohne slik at man fikk det ønskede etyl-9-O-etylkla'vulanat. Eksempel' 26 9- 0- metylk. lavulansyre En løsning av 0,9 g litium-O-metylklavulanat i 40.ml vann ble dekket med et sjikt av 150 ml etylacetat og omrørt kraftig ved romtemperatur.. En sterk syre-ionebytteharpiks ("Amber-lite" IR 120 (H<+>)) (10 ml våt harpiks)•ble tilsatt.. Etter 5 mi nutter ble harpiksen fjernet ved dekantering , og sjiktene ble separert. • vannsjiktet ble ekstrahert med ytterligere 100 ml etylacetat. Løsningsmiddelsjiktene ble kombinert, vasket med 5 ml vann, tørket over vannfritt kalsiumsulf.at og' filtrert'. Løs-ningen ble. inndampet for krystallisasjon under redusert, trykk; og deretter ble resten av løsningsmidlet fjernet i vakuum, slik at man .fikk den frie O-metylklavulansyre i form av et farveløst, krystallinsk - fast stoff (0,85 g). Eksempel 27 : pr- nitr' obenzyl- 9- Q- metylklavulanat 3 , 51 g •p-nitr.obenzylklavulanat , 3 ,15 g trimetyloksonium tetraf luorborat og' 4,0 g vannfritt natriumkarbonat ble omrørt og avkjølt til -70°. Til den omrørte blanding ble det langsomt til satt 150 ml metylenklorid som inneholdt tilnærmet 100 mg. ' i8-crown-6 '-"cro.wn"-eter . Etter tilsetningen fikk reaks jons-blandingen oppvarme seg til' romtemperatur og ble deretter omrørt i ytterligere 3 timer.. produktet ble isolert som beskrevet i .eksempel 17 slik at man fikk p-nitrobenzyl-9-0-metylkl.avulanat (2,91 g),i form av ét hvitt, krystallinsk fast stoff.

In intro nynor^ iiitic and . irttib uteria] activity. NIC uflm/ rnl

Claims (5)

1. Fremgangsmåte for fremstilling av klavulansyreetere av den generelle formel (II) i henhold til søknad nr. 763473 hvor R er CH2 -R' og A er H:

og farmasøytisk- akseptable salter dg estere derav, hvor R er et hydrogenatom eller en fenylgruppe eller en alkylgruppe med opp til 4 karbonatomer, karakterisert ved at. man omsetter en es' ter av klavulansyre med en forbindelse av formel (III) :

hvor R1 er som angitt ovenfor, og deretter, om ønskelig, danner den frie syre eller et salt derav av esteren og evenr tuéit danner en alternativ ester av den således dannede frie syre eller saltet.

2\ Fremgangsmåte som angitt i krav 1, for fremstilling av .en forbindelse av formel (II) hvor R1 er et hydrogenatom, karakterisert ved omsetning av en ester av klavulansyre med en forbindelse av formel (III'):

3..... Fremgangsmåte som angitt i krav 1, for fremstilling av e-n forbindelse, a.v formel (II) hvor R1 er metyl., karakterisert ved omsetning av en ester av klavulansyre med en forbindelse av fprmel (III''):

4. Fremgangsmåte som angitt i krav 1, karakterisert , ved. at det utføres en mild basisk hydrolyse ■av metoksymetylesteren .

5. Fremgangsmåte som--angitt i krav 1,' . karakterisert ved at en benzyl- eller p-metqksybenzyl-ester nydrogenolyseres, eventuelt i nærvær av en base.