NO823881L - Fremgangsmaate for innkapsling og innkapslede produkter - Google Patents

Fremgangsmaate for innkapsling og innkapslede produkter

Info

Publication number
NO823881L
NO823881L NO823881A NO823881A NO823881L NO 823881 L NO823881 L NO 823881L NO 823881 A NO823881 A NO 823881A NO 823881 A NO823881 A NO 823881A NO 823881 L NO823881 L NO 823881L
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
microbe
substance
lipid
increasing
dye
Prior art date
Application number
NO823881A
Other languages
English (en)
Inventor
Reginald James German
Gwilym Gareth Morris
Nahida Abid Pannell
Original Assignee
Dunlop Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Dunlop Ltd filed Critical Dunlop Ltd
Publication of NO823881L publication Critical patent/NO823881L/no

Links

Classifications

    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B41PRINTING; LINING MACHINES; TYPEWRITERS; STAMPS
    • B41MPRINTING, DUPLICATING, MARKING, OR COPYING PROCESSES; COLOUR PRINTING
    • B41M5/00Duplicating or marking methods; Sheet materials for use therein
    • B41M5/124Duplicating or marking methods; Sheet materials for use therein using pressure to make a masked colour visible, e.g. to make a coloured support visible, to create an opaque or transparent pattern, or to form colour by uniting colour-forming components
    • B41M5/165Duplicating or marking methods; Sheet materials for use therein using pressure to make a masked colour visible, e.g. to make a coloured support visible, to create an opaque or transparent pattern, or to form colour by uniting colour-forming components characterised by the use of microcapsules; Special solvents for incorporating the ingredients
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01JCHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J13/00Colloid chemistry, e.g. the production of colloidal materials or their solutions, not otherwise provided for; Making microcapsules or microballoons
    • B01J13/02Making microcapsules or microballoons
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/005Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor after treatment of microbial biomass not covered by C12N1/02 - C12N1/08

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Manufacturing Of Micro-Capsules (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Treatments For Attaching Organic Compounds To Fibrous Goods (AREA)
  • Inks, Pencil-Leads, Or Crayons (AREA)
  • Paper (AREA)
  • Developing Agents For Electrophotography (AREA)
  • General Preparation And Processing Of Foods (AREA)
  • Compositions Of Macromolecular Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Fremgangsmåte for forøkelse av lipidinnholdet i en dyrket mikrobe omfatter behandling av mikroben med et organisk lipid-forøkende stoff slik at stoffet absorberes av lipidet og bibeholdes passivt i mikroben. Et innkapslet materiale kan fremstilles ved behandling av en dyrket mikrobe med det lipid-for-økende stoff og et materiale som er opplselig eller mikro-dispergerbart i stoffet. Egnede stoffer kan velges ved forsøk som angitt i beskrivelsen. Eksempler på stoffer er noen væskeformige alkoholer, estere, aromatiske hydrokarboner og hydrogenerte aromatiske hydrokarboner. Fremgangsmåten er særlig egnet for fremstilling av innkapslede fargestoffer for bruk i karbonløst kopipapir.

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører en fremgangsmåte for innkapsling og innkapslede produkter som innbefatter en mikrobiell kapsel.
Innkapslingen av forskjellige stoffer for beskyttelse eller for forsinkelse av reaktivitet er velkjent. I US-patent nr. 4.001.480 er det foreslått å fremstille innkapslede produkter ved å bringe fettoppløselige stoffer i kontakt med sopp som har et meget høyt naturlig fettinnhold. Ifølge nevnte patent må stoffene være oppløselige i det naturlige fett, eller lipid,'i soppen og soppen må ha et naturlig fettinnhold på ca. 40-60 vekt-%. Dersom det f.eks. er ønsket å innkapsle et fargestoff i soppen, må fargestoffet være oppløselig i soppens naturlige fett.
Det er nå funnet at det er mulig å innkapsle et fargestoff eller et annet innkapselbart materiale på tilfredsstillende måte i en mikrobe som har et innhold av naturlig fett, dvs. lipid, på mindre enn 4 0 vekt-%. Dette oppnås ved å ta en mikrobe som har et lavt lipidinnhold og behandle den med (i) et lipid-forøkende stoff som vil bli tatt inn i mikroben og derved forøke mikrobens lipidinnhold og (ii) et fargestoff eller et annet materiale som er oppløselig eller dispergerbart i det lipid-forøkende stoff slik at materialet absorberes av mikroben. Det er også funnet at denne teknikk muliggjør innkapsling av et fargestoff eller et annet materiale som er uoppløselig i mikrobens lipid forutsatt at det er oppløselig eller dispergerbart i det lipid-forøkende stoff. Videre er det mulig å forøke lipidinnholdet selv når dette allerede er 4 0% eller mer.
Ifølge et trekk ved foreliggende oppfinnelse omfatter derfor en fremgangsmåte for forøkelse av lipidinnholdet i en dyrket mikrobe, behandling av den dyrkede mikroben med et organisk lipid-forøkende stoff (som definert i det følgende) slik at stoffet opptas av mikroben og bibeholdes passivt i mikroben. Ifølge et annet trekk ved foreliggende oppfinnelse omfatter en fremgangsmåte for fremstilling av et innkapslet materiale forøkelse av lipidinnholdet i en dyrket mikrobe som beskrevet nedenfor og behandling av mikroben med et materiale som er oppløselig eller mikro-dispergerbart i det organiske lipid-forøkende stoff, enten samtidig med behandlingen med det organiske lipid-forøkende stoff eller etter at det organiske lipid-forøkende stoff er opptatt av mikroben/ eller begge deler, slik at materialet inntas i mikroben og bibeholdes passivt deri.
"Ifølge et ytterligere trekk ved foreliggende oppfinnelse omfatter en fremgangsmåte for innkapsling i en mikrobe av et materiale som er ikke-oppløselig i mikrobens lipid, behandling av mikroben med (i) et organisk lipid-forøkende stoff (som definert heri) som er et oppløsningsmiddel eller dispergeringsmedium for materialet, slik at stoffet opptas av mikroben og bibeholdes passivt i mikroben, og (ii) en oppløsning eller mikro-dispersjon av materialet enten samtidig med behandlingen med det organiske lipid-forøkende stoff eller etter at det organiske lipid-forøkende stoff har blitt opptatt av mikroben, eller begge deler, slik at materialet opptas av mikroben og bibeholdes passivt deri.
Ifølge foreliggende oppfinnelse tilveiebringes også lipid-forøkede dyrkede mikrober og innkapslede materialer som har de trekk som resulterer fra de heri definerte fremgangs-måter, s
Ved betegnelsen "dyrket mikrobe" menes en mikrobe som har blitt høstet fra sitt kulturmedium. Mikroben bør fortrinnsvis ha et betydelig lipidinnhold, spesielt minst 10 vekt-% og f.eks. 20-35 vekt-%, skjønt mikrober med høyere lipidinnhold kan også behandles ifølge foreliggende oppfinnelse. En foretrukken mikrobe er en sopp, spesielt en gjær og spesielt en oljeaktig gjær. Om nødvendig kan lipidinnholdet i en mikrobe økes til det ønskede nivå ved dyrking under betingelser med redusert nitrogen. Eksempler på egnede mikrober er Lipomyces-arter slik som lipofer og starkeyi, Trichosporon-arter slik som pullulans og cutaneium, og Candida-arter slik som curvata og 107. Om ønsket, kan det anvendes en mikrobe som normalt ikke er oljeaktig, slik som Saccharomyces cerevisiae (bakegjær) eller Candida utilis.
Mikroben har fortrinnsvis en stor cellestørrelse, f.eks.
på 5-20 ym diameter.
Det lipidforøkende stoff er et stoff som er blandbart med mikrobe-lipidet og som kan komme inn i mikroben ved diffu-sjon gjennom celleveggen for derved å forøke eller svelle lipidet uten cellebrudd. Det vil vanligvis være væske ved normale temperaturer, men det er mulig å benytte et stoff som er et fast stoff ved normale temperaturer forutsatt at det kan flytendegjøres ved svakt forhøyede temperaturer som kan benyttes i lipid-forøkelsesprosessen.
Egnede lipidforøkende stoffer kan velges ved følgende forsøk.
A. Stoffet kan blandes med en lik mengde av en mikrobe i form av en vandig oppslemming (f.eks. 1 g stoff og 1 g mikrobe som en 20% vandig oppslemming) i 2-6 timer ved 30-50°C, idet blandegraden er tilstrekkelig til å opprett-holde homogenitet i blandingen (f.eks. ved anvendelse av en standard magnetisk rører med laboratorie-varmeplate ved middels hastighet). Mikroben blir deretter høstet, hensiktsmessig ved sentrifugering (f.eks. ved ca. 2000 omdr./min.
i 15 minutter), og den høstede mikroben undersøkes under et mikroskop. Egnede stoffer vises ved tilstedeværelsen av en stor glinsende kule i cytoplasmaet. Vanligvis vil kulen oppta vesentlig hele cytoplasmavolumet.
B. Stoffet og mikroben blandes og den resulterende mikroben høstes, som i A, og deretter analyseres mikroben kvalitativt og/eller kvantitativt slik som ved behandling med et oppløsningsmiddel for stoff (f.eks. metanol eller metanol/vann (f.eks. 80/20 v/v)) og analyse av ekstraktet ved en kromatografisk teknikk slik som gass-væske-kromatografi for å detektere tilstedeværelsen av stoffet.
C. Fremstillingen av blandingen som i A modifiseres
ved tilsetning av en kjent mengde (f.eks. 0,02 g) av et fargestoff eller et annet fargende middel i stoffet, den høstede mikroben oppløsningsmiddel-ekstraheres som i B og ekstraktet undersøkes for farge slik som ved bruk av et spektrofotometer. Dersom fargestoffet er et leuco-fargestoff, bør ekstraktet behandles med en syre før fotometrisk under-søkelse. D. Fremstillingen av blandingen som i A modifiseres ved tilsetning av en kjent mengde (f.eks. 0,02 g) av et fargestoff til stoffet,den høstede mikroben omdannes til en vandig suspensjon (f.eks. 20% tørrvekt av mikrobe), suspensjonen påføres på overflaten av et papirark ved en tetthet på ca. 3-10 g/m 2 (f.eks. ved hjelp av en påstrykningskniv),
papiret lufttørkes og deretter utsettes papiret for et lokalisert trykk tilstrekkelig til å sprenge mikroben
(f.eks. ved hjelp av en skrivemaskin eller et manuelt skrive-instrument) for å se om fargestoffet avgis fra den sprengte mikroben. Fargestoffet kan hensiktsmessig være et leuco-fargestoff, f.eks. krystallfiolettlakton, den mikrobebelagte papiroverflate kan settes i kontakt med den leirebelagte overflaten til et annet papirark, og det sammensatte element utsettes for det lokaliserte trykk.
E. Stoffet blandes med en lik mengde (f.eks. 1 ml) soyaolje (f.eks. ved rysting i et reagensrør ved romtemperatur) . Egnede stoffer er de som sees å være blandbare med soyaolje.
Valget av lipid-forøkende stoff synes å være uavhengig av
den mikrobe som skal behandles.
En gruppe stoffer består av. alkoholer som har mer enn tre karbonatomer, spesielt alifatiske alkoholer. Alkoholene kan ha. en eller flere hydroksylgrupper. Eksempler på egnede alkoholer er primære alkoholer, spesielt de med 4-15 karbonatomer, f.eks. n-butanol, oktanol, dekanol og blandinger av langkjedede primære alkoholer, hovedsakelig med 9-15 karbonatomer; sekundære alkoholer f.eks. isobutanol og oktan-2-ol; tertiære alkoholer f.eks. tertiær-butanol; og glykoler slik som dietylenglykol (0(CH2CH2OH)2).
En annen gruppe egnede stoffer består av estere, spesielt
de hvori alkoholkomponenten har mer enn to karbonatomer. Estrene kan være avledet fra syrer med en eller flere karboksylgrupper, f.eks. 2 eller 3 karboksylgrupper, og fra alkoholer med en eller flere hydroksylgrupper, f.eks. 2 eller 3 hydroksylgrupper. Syre- og alkoholkomponentene kan være aromatiske eller alifatiske. Syrekomponenten kan være en hydroksykarboksylsyre. Eksempler på egnede estere er 2-etylheksylacetat, di-2-etylheksyladipat, di-iso-butylftalat, butylbenzylftalat, acetyltributylcitrat, 2,2,4-trimetyl-l,3-pentandiolisobutyrat, glyceryltriacetat (triacetin) og glyceryltributyrat.
Andre egnede stoffer er noen væskeformige hydrokarboner, f.eks. aromatiske hydrokarboner slik som xylen, og hydrogenerte aromatiske hydrokarboner slik som det som er tilgjengelig
som "Santosol 340" og blandingen av 40% hydrogenerte terfenyler tilgjengelig som "HB 40". ■
Blandinger av lipid-forøkende stoffer kan benyttes.
I noen tilfeller, spesielt når stoffet er normalt visøkst, kan det være ønskelig å tynne ut eller fortynne stoffet med et fortynningsmiddel slik som aceton for å lette absorp-sjonshastigheten av mikroben og/eller mengden av absorbert stoff. Stoffer som kan dra fordel av en slik uttynning innbefatter "Santosol 304", "HB 40" og de kommersielt tilgjenge-lige blandinger av langkjedede primære alkoholer.
Når et materiale skal innkapsles ifølge oppfinnelsen, bør det spesielle lipid-forøkende stoff som benyttes være et oppløsjiingsmiddel eller et dispergeringsmiddel for materialet. Det kan være at .det innkapselbare materiale ikke er oppløselig i mikrobe-lipidet; oppløselighet eller forene-lighet med lipidet er imidlertid foretrukket for å mulig-gjøre at så nye som mulig av materialet innkapsles. Materialet kan være et fast stoff eller en væske.
Innkapslingsmetoden er særlig egnet for fremstilling av innkapslede fargestoffer, f.eks. leuco-fargestoffer. Eksempler på egnede fargestoffer er sudantgrønt, sudanblått, etyl-eosin, krystallfiolettlakton, metylenblått-lakton, malakitt-grønt-lakton og benzoylleucometylenblått. Andre eksempler på innkapselbare materialer er adhesiver, adhesivkompo-nenter, farmasøytika (f.eks. stimulerende midler slik som feroner), smaksstoffer, rodenticider, insekticider, herbi-cider, fungicider og luktstoffer. To eller flere raktive komponenter kan innkapsles av separate celler, f.eks. de reaktive komponentene i et to-komponentadhesiv.
Materialet blir hensiktsmessig oppløst eller mikro-dispergert i det lipid-forøkede stoff før kontakt med mikroben. Det mikrobielle lipid kan alternativt eller i tillegg for-økes av det lipid-forøkende stoff og deretter kan mikroben behandles med det innkapselbare materiale. I sistnevnte tilfelle kan materialet være i form av en oppløsning eller dispersjon i et ytterligere lipid-forøkende stoff eller i en væske som er blandbar med det lipid-forøkende stoff.
Når mikroben behandles med det lipid-forøkende stoff, bør det være intakt, dvs. ikke lysert. Behandlingen vil vanligvis omfatte omrøring av mikroben i det lipid-forøkende stoff. Mikroben kan være i form av en pasta eller oppslemming i vann, men en foretrukken teknikk omfatter anvendelse av mikroben kun i fuktig form. Behandlingen kan hensiktsmessig foretas ved romtemperatur eller en svakt forhøyet temperatur, f.eks. 40-50°C, hvilket i noen tilfeller kan forøke mikrobiell absorpsjon av stoffet. En forhøyet temperatur kan også øke mengden av innkapselbart materiale opp-løst i det lipid-forøkende stoff. Vanligvis bør behandlings-tiden være minst 2 timer,.mer vanlig minst 3 timer, for oppnåelse av optimal lipid-forøkelse.
Mengden av materialet som innkapsles vil avhenge av det for-økede lipidinnhold i mikroben og materialets oppløselighet eller dispergerbarhet deri for å oppnå innkapsling av en stor mengde materiale og for å lette spredning eller dis-pergering av materiale dersom og når det senere frigjøres fra de mikrobielle kapsler, er det vanligvis ønsket at en stor mengde lipid-forøkende stoff opptas av mikroben. I de fleste tilfeller er det ikke nødvendig at mengden av benyttet lipidforøkende stoff overskrider vekten av mikroben.
Det innkapslede materiale kan få anvendelse som et fritt-stående produkt eller festet til et substrat. Et eksempel på en anvendelse av foreliggende oppfinnelse er fremstillingen av "karbonløst" kopipapir hvor et belegg av kaplser inneholdende et fargestoff er festet til en side av et papirark, slik at når papiret utsettes for trykk, f.eks. fra trykk-flaten i en skrivemaskin eller av et manuelt skriveinstru-ment, vil avtrykket dubliseres på et papirark i kontakt med belegget. Det er.funnet at når innkapslede fargestoffer fremstilt ifølge foreliggende oppfinnelse påføres i form av en vandig suspensjon på papiret, vil kapslene feste seg til papiret på tilfredsstillende måte uten 'hjelp av et binde-middel eller adhesiv. Det innkapslede materiale kan være
et materiale som gir en sterk farge bare når det reagerer
med et annet materiale, som selv kan være innkapslet eller kan være i form av et ikke-innkapslet belegg på papiret.
Det innkapslede materiale kan f.eks. være et leuco-fargestoff som er oksyderbart av et surt materiale slik som en sur leire for frembringelse av den ønskede avtrykks-fargen. Det er foretrukket at en side av papirarket har et belegg av det innkapslede materiale og den andre siden har et belegg av sur leire, slik at flere ark kan settes sammen med den leirbelagte flaten på et ark i kontakt med den kapselbelagte flaten til det tilstøtende ark. Alternativt kan et^blandet belegg av kapsler og leire benyttes.
I noen tilfeller kan det være ønskelig å benytte mer enn ett innkapslet fargestoff for å oppnå en ønsket farge.
En alternativ anvendelse av kapsler ifølge oppfinnelsen, er under forhold slik at frigjøringen av det innkapslede materiale blir forsinket eller forlenget av en langsom eller gradvis lysering av de mikrobielle cellene. Dette kan være fordelaktig for administrasjon av farmasøytika.
Oppfinnelsen illustreres i de følgende eksempler.
Eksempel I
Lipomyces lipofer 5841 (CBS) ble dyrket i følgende medium:
Kulturen ble dyrket i rysteflasker under anvendelse av en orbitalinkubator ved 180 omdr./min og 28°C i 72 timer. De dyrkede gjærcellene ble høstet ved sentrifugering (800 omdr./ min. i 5 minutter).
Lipidinnholdet i gjæren ble bestemt ved følgende metode. Omtrent 1,5 g fuktige celler (0,2 g tørrvekt) ble veiet nøy-aktig og deretter hydrolysert med 2 ml 6N HC1 i et kokende vannbad i 2 timer. Hydrolysatet ble blandet med 30 ml av en 2:1 (v/v) kloroform:metanol-blanding natten over. Den
resulterende blanding ble overført til en skilletrakt med
5 ml 0,9% vandig NaCl og kloroform/metanol-laget ble sepa-rert. , Den gjenværende blanding ble vasket to ganger med 10 ml kloroform og vaskeoppløsningene ble kombinert og inn-dampet til tørrhet i et på forhånd veiet begerglass. Beger-glasset ble deretter veiet på nytt for å bestemme vekten av lipidet som ble funnet å være ca. 30 vekt-% basert på gjærens tørrvekt.
Gjæren produsert fra den ovenfor angitte kultur ble omdannet til en 15% (vekt/vol.) oppslemming med destillert vann og en kjent vekt av denne vandige oppslemming, inneholdende 1 g (tørrvekt) mikrober, ble blandet med 0,8 g av en 1% (vekt/ vol.) oppløsning av krystallfioleottlakton i 2-etylheksylacetat. Blandingen ble omrørt i 6 timer ved romtemperatur under anvendelse av en standard varmplate-magnetisk rører for laboratoriebruk ved en middels hastighet for opprett-holdelse av homogenitet og det resulterende mikrobielt innkapslede fargestoff ble høstet ved sentrifugering. De høst-ede kapsler ble suspendert i destillert vann ved en konsentrasjon på omkring 15% tørrvekt av celler i vannet og suspensjonen ble påført på den motsatte siden av leirebelagt papir under anvendelse av K-Bar nr. 4 levert av R.K. Print-Coat Instruments Ltd., Storbritannia. Mengden av kapsler påført på papiret var av størrelsesorden 6-10 g/m 2. Papiret ble tørket og testet med henblikk på dubliseringsevne i en standard kontor-skrivemaskin. Det ble funnet å virke tilfredsstillende som et "karbonløst" kopipapir.
Eksempel II
Fremgangsmåten i eksempel I ble gjentatt med.unntagelse av at følgende mikrober ble benyttet individuelt isteden for Lipomyces lipofer 5841. Lipidinnholdet i mikrobene er gitt nedenfor som omtrentlige vekt-prosentandeler basert på mikrobens tørrvekt.
Skrivemaskintesten ga meget klare og effektive kopier i lik-het med det som ble oppnådd i eksempel I med alle disse mikrobene.
Eksempel III
Fremgangsmåten i eksempel I ble gjentatt med unntagelse av at følgende væsker ble benyttet individuelt isteden for 2-etylheksylacetat, nemlig oktanol, dekanol, en kommersielt tilgjengelig blanding av C12 og C13 primære alkoholer, en kommersielt tilgjengelig blanding av C14 og C15 primære alkoholer, en kommersielt tilgjengelig blanding av C9-C11 primære alkoholer, dietylenglykol (digol), di-iso-butylftalat, butylbenzylftalat, acetyltributylcitrat, 2,2,4-trimetyl-1,3-pentandioliso-butyrat, glyceryltriacetat (triacetin) og glyceryltributyrat.
Alle disse væsker resultererte i et tilfredsstillende "karbonløst" kopipapir.
Eksempel IV
Fremgangsmåten i eksempel I ble gjentatt med unntagelse av at en 2% (vekt/vol) oppløsning av krystallfiolettlakton i di-2-etylheksyladipat ("Lankroflex" DOA) ble benyttet isteden for 1% 2-etylheksylacetat-oppløsningen.
Et tilfredsstillende "karbonløst" kopipapir ble oppnådd.
Eksempel V
Fremgangsmåten i eksempel I ble gjentatt med unntagelse av at tiden i hvilken den vandige mikrobeoppslemming ble om-rørt med oppløsningen av krystallfiolettlakton i 2-etylheksylacetat, ble variert. Tidene var 1,2,3,4,6 og 24 timer.
Skrivemaskintesten viste at produktet fra 3-timers inkuber-ingstiden var like godt som produktene fra høyere inku-beringstider.
Eksempel VI
Fremgangsmåten i eksempel I ble gjentatt med unntagelse av at konsentrasjonen av krystallfiolettlakton i 2-etylheksylacetat var 3% (vekt/vol) og den vandige mikrobielle oppslemming ble omrørt med fargestoff/acetat-oppløsningen i 3 timer ved 60°C.
Skrivemaskintesten ga forbedrede kopier sammenlignet med det i eksempel I.
Eksempel VII
Fremgangsmåten i eksempel VI ble gjentatt med unntagelse av at følgende mengder av fargestoff/acetat-oppløsning ble benyttet individuelt, nemlig 1,0, 0,8, 0,6 og 0,4 g pr.
g tørt mikrobemateriale.
Skrivemaskinkopiet frembragt ved anvendelse av mengden på 0,6 g var lik de kopier som ble frembragt under anvendelse av mengdene på 0,8 og 1,0 g og var overlegent i forhold til det frembragt under anvendelse av mengden på 0,4 g.
Eksempel VIII
Saccharomyces cerevisiae og Candida utilis 707 ble hver for seg dyrket under betingelser med redusert nitrogen og høstet, ved fremgangsmåten i eksempel I. 1 g av hver stamme ble omdannet til en 15% vandig oppslemming og deretter blandet med 1 g av en 1% (vekt/vol) oppløs-ning av krystallfiolettlakton i 2-etylheksylacetat. Hver blanding ble omirørt som beskrevet i eksempel I i 3 timer og det resulterende innkapslede fargestoff ble høstet ved sentrifugering.
Kapslene ble påført på separate papirark og utsatt for en skrivemaskintest som beskrevet i eksempel I. Begge produkter ga et tilfredsstillende avtrykk.
De totale lipidinnhold (vekt-% basert på tørrvekten av mikrobematerialet), målt som beskrevet i eksempel I, var 11,3% for S. cerevisiae og 12,3% for C. utilis 707.
Eksempel IX
En kultur av Lipomyces starkeyi 1809 ble dyrket i følgende medium:
Kulturen ble dyrket i en 10 liters fermenteringsbeholder
ved 28°C under anvendelse av en røreverk-hastighet på 200 omdr./min. og en beluftningshastighet på 1 volum/volum/minutt. De dyrkede gjærcellene ble høstet ved sentrifugering ved
2000 omdr./min. i 10 minutter.
Det totale lipidinnhold i gjæren, bestemt under anvendelse av samme metoden som i eksempel I, ble funnet å være 35,12 vekt-% basert på gjærens tørrvekt.
En 20% vandig oppslemming inneholdende 1 g (tørrvekt) av mikrobematerialet ble blandet med 0,8 g av en 2,5% vekt/ vekt-qppløsning av krystallfiolettlakton kjent som "Pergascript Blue I - 2,R" og benzoyleucometylenblått kjent som "Pergascript Blue S - 4G" (1,5:0,5 g blanding) i oktan-2-ol. Blandingen ble omrørt i 2,5 time ved 50°C under anvendelse av en varmplate-magnetisk rører for laboratoriebruk ved en middels hastighet for å sikre blandingens homogenitet.
Det resulterende mikrobielle innkapslede fargestoff ble høstet ved sentrifugering ved 200 0 omdr./min. i 10 minutter. De høstede kapslene ble suspendert i destillert vann ved
en konsentrasjon på omtrent 25 vekt-% kapsler i vann, og suspensjonen ble påført på den motsatte siden av leirebelagt papir som beskrevet i eksempel I. Mengden av kapsler påført på papiret var av størrelsesorden 3-6 g/m 2. Papiret ble tørket og testet med henblikk på dubliseringsevne under anvendelse av en standard kontor-skrivemaskin. De oppnådde kopier var tilfredsstillende.
Eksempel X
Fremgangsmåten i eksempe IX ble fulgt med unntagelse av
at xylen ble benyttet isteden for oktan-2-ol. Skrivemaskintesten ga et tilfredsstillende kopi.
Eksempel XI
Fremgangsmåten i eksempel IX ble fulgt 'med unntagelse av at 0,7 g av en 2% vekt/vekt-oppløsning av fargestoffblandingen i en 50/50 vekt/vekt-blanding av aceton (som fortynningsmiddel) og en kommersielt tilgjengelig blanding av C12-
C15 langkjedede primære alkoholer ble benyttet isteden for oktan-2-ol-oppløsningen.
Skrivemaskintesten ga forbedrede kopier sammenlignet med når C12-C15 alkoholblandingen og aceton ble benyttet hver for seg.
Eksempel XII
Fremgangsmåten i eksempel IX ble fulgt med unntagelse av
at "HB, 40" (en kommberiselt tilgjengelig blanding av 40% hydrogenerte terfenyler.) ble benyttet isteden for oktan-2-ol og blandetiden var 3 timer.
Skrivemaskintesten har et positivt avtrykk, men ikke så godt som det oppnådd i eksempel I.
Denne fremgangsmåte ble gjentatt med unntagelse av at en 50/50 vekt/vekt-blanding av aceton og "HB 40" ble benyttet isteden for "HB 40".
Skrivemaskintesten ga et bedre kopi enn når "HB 40" ble benyttet alene.
Eksempel XIII
Fremgangsmåten i eksempel XII ble gjentatt med unntagelse
av at "Santosol 340" (en kommersielt tilgjengelig blanding av hydrogenerte aromatiske hydrokarboner) ble benyttet isteden for "HB 40".
Skrivemaskintesten ga lignende resultater som i eksempel XII, idet aceton/"Santosol"-blandingen ga bedre kopier enn "Santosol" alene.
Eksempel XIV
En 20% vandig oppslemming inneholdende '1 g (tørrvekt) av mikrobematerialet fremstilt ifølge eksempel IX ble blandet med 0,8 g 2-etylheksylacetat ved middels omrøring under anvendelse av en varmplate-magnetisk rører for laboratoriebruk i 1,5 time ved 50°C og det resulterende lipid-for-økede mikrobemateriale ble høstet ved sentrifugering. Mikro-skopisk undersøkelse viste at en stor glinsende kule opptok hele gjærcellens cytoplasma.
En 20% vandig oppslemming inneholdende 1 g (tørrvekt) av det lipidforøkede mikrobemateriale ble blandet med 0,8 g av en 2% (vekt/vol) oppløsning av leucofargestoff i propanol (ublandbart med soyaolje, men blandbart med 2-etylheksylacetat) ved middels omrøring under anvendelse av en varmplate-magnetisk rører for laboratoriebruk i 2,5 time ved 50°C og det resulterende mikrobematerialet ble høstet ved sentrifugering.
Skrivemaskintesten ga et tilfredsstillende kopi.
En parallell fremgangsmåte ble utført med unntagelse av at mikrobematerialet ikke ble behandlet med 2-etylheksylacetat. Skrivemaskintesten ga et dårligere kopi enn når 2-etylheksylacetat ble benyttet.
Eksempel XV
En 20% vandig oppslemming inneholdende 3 g (tørrvekt) av gjæren fremstilt som beskrevet i eksempel I, ble blandet med 3 g nellikolje og 0,5 ml 2-etylheksylacetat ved middels omrøring under anvendelse av en varmplate-magnetisk rører for laboratoriebruk i 3 timer ved 50°C. Mikrobeproduktet ble høstet ved sentrifugering og ovnstørket ved 70°C.
Når det resulterende mikrobematerialet ble knust, ble det observert en tydelig lukt av nellikolje.

Claims (10)

1. Fremgangsmåte for forøkelse av lipidinnholdet i en dyrket mikrobe, karakterisert ved at man behandler den dyrkede mikroben med et organisk lipid-forøkende stoff slik at stoffet opptas av mikroben og bibeholdes passivt i mikroben.
2. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at mikroben behandles med et materiale som er opp-løselig eller mikro-dispergerbart i det organiske lipid-forøkende stoff, enten samtidig som behandlingen med det organiske lipid-forøkende stoff eller etter at det organiske lipid-forøkende stoff har blitt opptatt av mikroben, eller begge deler, slik at materialet inntas i det forøkede lipid i mikroben og bibeholdes passivt deri.
3. Fremgangsmåte ifølge krav 2, karakterisert ved at materialet er et leuco-fargestoff egnet for bruk i karbonløst kopipapir.
4. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 1-3, karakterisert ved at mikroben har et lipidinnhold på minst 10 vekt-%.
5. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at mikroben er en gjær. r
6. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at stoffet er en væske valgt fra alifatiske alkoholer, estere, aromatiske hydrokarboner og hydrogenerte aromatiske hydrokarboner.
7. Fremgangsmåte ifølge krav 6, karakterisert ved at stoffet er valgt fra primære alkoholer med 4-15 karbonatomer, iso-butanol, oktan-2-ol, tertiær-butanol, dietylenglykol, di-2-etylheksyladipat, di-iso-butylftalat, butylbenzylftalat, acetyltributylcitrat, 2,2,4-trimetyl-l, 3-pentandioliso-butyrat, glyceryltriacetat, glyceryltributyrat, 2,-etylheksylacetat og xylen.
8. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at stoffet fortynnes ved blanding med et fortynningsmiddel slik som aceton.
9. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at mikroben er i form av en vandig oppslemming for blanding med stoffet.
10. Karbonløst kopipapir, karakterisert ved at det som innkapslet fargestoff benytter et mikrobielt innkapslet fargestoff fremstilt ved en fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av de foregående krav under anvendelse av et fargestoff som er oppløst eller mikro-dispergert i stoffet.
NO823881A 1981-11-21 1982-11-19 Fremgangsmaate for innkapsling og innkapslede produkter NO823881L (no)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB8135153 1981-11-21

Publications (1)

Publication Number Publication Date
NO823881L true NO823881L (no) 1983-05-24

Family

ID=10526062

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO823881A NO823881L (no) 1981-11-21 1982-11-19 Fremgangsmaate for innkapsling og innkapslede produkter

Country Status (12)

Country Link
EP (1) EP0085805B1 (no)
JP (1) JPH06102026B2 (no)
AT (1) ATE18576T1 (no)
AU (1) AU9072582A (no)
DE (1) DE3269886D1 (no)
DK (1) DK517782A (no)
ES (1) ES8500992A1 (no)
FI (1) FI823939L (no)
IE (1) IE53627B1 (no)
NO (1) NO823881L (no)
NZ (1) NZ202548A (no)
ZA (1) ZA828504B (no)

Families Citing this family (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB2162147A (en) * 1984-07-26 1986-01-29 Dunlop Ltd Encapsulation and encapsulated products
US4696863A (en) * 1984-08-28 1987-09-29 Mitsubishi Paper Mills, Ltd. Biocapsule
US5288632A (en) * 1986-04-12 1994-02-22 Ad2 Limited Encapsulation of material in microbial cells
GB8608964D0 (en) * 1986-04-12 1986-05-14 Pannell N A Producing microbially encapsulated materials
EP0460945B1 (en) * 1990-06-05 1995-10-11 Mitsubishi Paper Mills, Ltd. Process for producing microcapsules
GB9013220D0 (en) * 1990-06-13 1990-08-01 Wellcome Found Pesticidal formulations
EP0528466B1 (en) * 1991-08-16 1995-04-26 Quest International Nederland Bv Chewing gum with improved flavor release
GB9306700D0 (en) * 1993-03-31 1993-05-26 British Textile Tech Method for encapsulating substances
GB9509937D0 (en) * 1995-05-17 1995-07-12 Cpc International Inc Encapsulated product
IT1294368B1 (it) * 1997-08-29 1999-03-24 Dox Al Italia Spa Microorganismi inattivati contenenti enzimi digestivi, processo per la loro preparazione e loro uso in campo alimentare
DE10003241A1 (de) * 2000-01-26 2001-08-02 Werner Lubitz Verschließen von Bakterienghosts
JP3885195B2 (ja) 2001-11-15 2007-02-21 三栄源エフ・エフ・アイ株式会社 マイクロカプセル及びそれを含有する経口組成物
GB2406053B (en) * 2003-09-10 2008-08-20 Micap Plc Antimicrobial composition
PL1711058T3 (pl) 2004-01-23 2022-02-07 Eden Research Plc Sposoby zabijania nicieni obejmujące aplikację składnika terpenowego
CA2606322A1 (en) * 2004-04-27 2005-11-03 Micap Plc Microbial encapsulation
PT2338332E (pt) 2004-05-20 2014-05-15 Eden Research Plc Partícula oca de glucano ou partícula de parede celular que encapsula um componente de terpeno
KR101478012B1 (ko) * 2005-11-30 2015-01-02 에덴 리서치 피엘씨 티몰, 유게놀, 게라니올, 시트랄, 및 l―카르본에서 선택된 테르펜 또는 테르펜 혼합물을 포함하는 조성물 및 방법
MX2008006927A (es) 2005-11-30 2008-10-24 Eden Research Plc Composiciones que contienen terpenos y metodos para hacer y usar los mismos.
GB0721005D0 (en) * 2007-10-25 2007-12-05 Univ Manchester Encapsulation
WO2013083693A1 (de) * 2011-12-06 2013-06-13 Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. Komposite und beschichtungsstoffe mit in biologischem hüllmaterial inkludierten wirkstoffen
GB201220940D0 (en) 2012-11-21 2013-01-02 Eden Research Plc Method P

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2179528A1 (en) * 1972-04-11 1973-11-23 Serozym Laboratoires Modification of micro-organisms - by addition of neodymium or magnesium chlorides or onion juice
JPS5071896A (no) * 1973-11-09 1975-06-14
US4001480A (en) * 1974-08-16 1977-01-04 Swift & Company Encapsulation process utilizing microorganisms and products produced thereby

Also Published As

Publication number Publication date
NZ202548A (en) 1986-06-11
ZA828504B (en) 1983-11-30
ES517494A0 (es) 1984-11-01
AU9072582A (en) 1983-05-26
JPS58107189A (ja) 1983-06-25
DK517782A (da) 1983-05-22
EP0085805A1 (en) 1983-08-17
FI823939L (fi) 1983-05-22
ATE18576T1 (de) 1986-03-15
DE3269886D1 (en) 1986-04-17
FI823939A0 (fi) 1982-11-17
JPH06102026B2 (ja) 1994-12-14
IE822758L (en) 1983-05-21
ES8500992A1 (es) 1984-11-01
EP0085805B1 (en) 1986-03-12
IE53627B1 (en) 1988-12-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO823881L (no) Fremgangsmaate for innkapsling og innkapslede produkter
EP0242135B1 (en) Microbial encapsulation
US5288632A (en) Encapsulation of material in microbial cells
AU695215B2 (en) Encapsulated product
Wang et al. Study on the spray-drying encapsulation of lutein in the porous starch and gelatin mixture
GB2162147A (en) Encapsulation and encapsulated products
Pham-Hoang et al. Encapsulation in a natural, preformed, multi-component and complex capsule: yeast cells
EP0460945B1 (en) Process for producing microcapsules
Fiedler et al. Algae biocers: astaxanthin formation in sol–gel immobilised living microalgae
Kurek et al. Encapsulation of anthocyanins from chokeberry (Aronia melanocarpa) with plazmolyzed yeast cells of different species
EP0453316B1 (en) Process for preparation of microcapsules
JPS6388033A (ja) マイクロカプセルの製造方法
JPH04117245A (ja) マイクロカプセルの製造方法
Van Etten et al. Physiological and morphological correlation of Rhizopus stolonifer spore germination
US20110175245A1 (en) Encapsulation
JP2811742B2 (ja) 糖度測定用インキ組成物および検査体
Lloyd The isolation of mitochondria from the colourless alga Prototheca zopfii
Rost et al. Structural and histochemical characterization of the cotyledon storage organelles of jojoba (Simmondsia chinensis)
Treffry Biogenesis of the photochemical apparatus
JPH0732871B2 (ja) マイクロカプセルの製造方法
JPS62186937A (ja) マイクロカプセルの製造方法
HAYASHIBE et al. Synthesis of cell wall polysaccharides in the cell cycle of baker's yeast
Jhondri et al. Bindering and the stability of beta caroten from Neurospora sitophila.
Suzuki et al. Studies on the production of lipids in fungi XIII. Changes of amount and composition of lipids in fungi in species of the genus Pellicularia from cellulose by cultural conditions
Muliasari et al. Comparison of total phenolic and flavonoid content of Sargassum polycystum extracted by ethanol and crude cellulase