NO811631L - Heparinestere og deres fremstilling. - Google Patents

Heparinestere og deres fremstilling.

Info

Publication number
NO811631L
NO811631L NO811631A NO811631A NO811631L NO 811631 L NO811631 L NO 811631L NO 811631 A NO811631 A NO 811631A NO 811631 A NO811631 A NO 811631A NO 811631 L NO811631 L NO 811631L
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
heparin
esters
quaternary ammonium
salt
carboxyl groups
Prior art date
Application number
NO811631A
Other languages
English (en)
Inventor
Jean Mardiguian
Original Assignee
Pharmindustrie
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pharmindustrie filed Critical Pharmindustrie
Publication of NO811631L publication Critical patent/NO811631L/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
    • C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
    • C08B37/0075—Heparin; Heparan sulfate; Derivatives thereof, e.g. heparosan; Purification or extraction methods thereof

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Estere av heparin avledet fra heparin oppnås ved erstatning av karboksylgruppene av heparin med grupper med forjnelen:hvori R er et hydrogenatom eller en metylgruppe og A er et hydrogenatom eller en metyl-, fenyl-,. X betyr et kloratom eller en nitrogruppe, en alkylgruppe med 1-4 karbonatomer eller en' metoksygruppe og Y betyr et hydrogenatom eller et kloratom, idet erstatningen er partiell eller total når A ikke er et hydrogenatom eller en metyl- eller fenylgruppe og erstatningen er partiell tilsvarende eri 10 - 90% forestring av karboksylgruppene når A er et hydrogenatom eller en metyl- eller fenylgruppe, samt alkalimetall-, jordalkalimetall-, magnesium-, kvaternære ammonium- og aminsalter av estrene.Forbindelsene er mellomprodukter ved fremstilling av terapeutisk brukbare forbindelser.

Description

Gjenstand for foreliggende oppfinnelse er nye estere av heparin og deres alkalimetall-, jordalkalimetall-, magnesium-, kvaternære ammonium- eller aminsalter. Disse forbindelser kan benyttes som mellomprodukter ved fremstilling av terapeutisk aktive forbindelser.
Generelt er metyl- og benzylestere av heparin allerede kjent, se GB-PS 973.894 og FR-medisinpatent 2.739 M. Heparinestere som oppnås ved partiell eller total erstatning av karboksylgruppene i heparinstrukturen med gruppene
(n = 1, 2 eller 3) , R,.,Rg = alkyl 1-4 C) er også kjent, se f.eks. GB-PS 1.501.095 og FR-PS 2.150.724. Disse estere er hovedsakelig antikoagulasjonsmidler med forlenget virkning^
Heparinestrene ifølge oppfinnelsen avledes fra heparin ved erstatning av karboksylgrupper i heparinstrukturen ved grupper med formelen:
hvori R er et hydrogenatom eller en metylgruppe og A er et hydrogenatom eller en metyl-, fenyl-, -C-0-CH-., -C-O-C-H^, CN eller
0 O
gruppe, X betyr et kloratom eller en nitro-,
alkyl- med 1-4 C-atomer eller metoksygruppe og Y betyr et hydrogenatom eller et kloratom, idet erstatningen er partiell eller total når A ikke er et hydrogenatom eller en metyl-
eller fenylgruppe og erstatningen er partiell tilsvarende 10 - 90% forestring av karboksylgruppene når A er et hydrogenatom eller en metyl- eller fenylgruppe.
I den ovenfor angitte formel (I) er R fortrinnsvis
et hydrogenatom og A en
(p-klor-fenyl) eller -gruppe.
Alkalimetall-, jordalkalimetall-, magnesium-, kvaternære ammonium- og aminsalter av de foregående estere ut-gjør også en del av oppfinnelsén. Alkalimetallsalter som skal nevnes er spesielt natriumsaltehe og som jordalkalimetallsalter skal nevnes kalsiumsalter. Aminsalter kan være salter av tertiære aminer, spesielt salter av trietylamin, pyridin eller imidazol. Salter av kvaternært ammonium kan være de langkjedede alkyl- eller aralkyl-kvaternære ammoniumsalter, spesielt dodecyltrimetylammonium- og benzétoniumsalt-er og cetylpyridiniumsalter.
Heparinestrene ifølge oppfinnelsen kan være ikke-selektive estere eller selektive estere. Med ikke-selektive estere menes heparinestere hvori karboksylgruppene av D-glukuronsyre-, ikke-sulfatert L-iduronsyre- og sulfatert L-iduronsyrebindinger vilkårlig er forestret. Med selektive estere er ment heparinestere der partielt eller totalt er forestret kun karboksylgruppene i D-glukuronsyrebindinger eller kun karboksylgrupper av D-glukuronsyre- og ikke-sulfatert L-iduronsyrebindinger, eller kun karboksylgruppene i ikke-sulfatert L-iduronsyre- og sulfatert L-iduronsyrebindinger, eller kun karboksylgruppene av sulfatert L-iduronsyrebindinger.
De ikke-selektive heparinestere ifølge oppfinnelsen kan fremstilles som følger: (a) Det fremstilles først et syresalt av heparin ved å erstatte syresulfatgruppene i heparin med kvaternære ammoniumsulfatgrupper, idet karboksylgruppene i heparin forblir i fri form. For å oppnå et slikt surt salt av heparin er det f.eks. tilstrekkelig å behandle et nøytralt salt av heparin hvori sulfat- og karboksylgrupper av heparin er er-stattet henholdsvis av kvaternære ammoniumsulfatgrupper og kvaternære ammoniumkarboksylatgrupper, med én karboksylisk kationbytter i. syreform.
hvori R og A har den samme betydning som under formel (I) fremstilles for å påvirke syresaltet av heparin.
Reaksjonen i trinn (b) gjennomføres.ved lav temperatur, f.eks. 0°C, i et inert oppløsningsmiddel som f.eks. dimetylformamid eller metylenklorid, i nærvær av et kondensasjonsmiddel av karbodiimidtypen, f.eks. dicykloheksylkarbo-diimid. Forestringsprosentandelen for karboksylgruppene avhenger av driftsbetingelsene (arten av alkohol med formel (II), reaksjonslengde, andeler av reaktantene).
Estrene av heparin som oppnås i trinn (b) der sulfatgruppene foreligger i kvaternær ammoniumsulfatform omdannes til alkalimetall-, jordalkalimetall-, magnesium, eller aminsalter eller til en heparinester som ikke er i saltform ved i og seg kjente metoder. For f.eks. å fremstille alkalimetall-, jordalkalimetall- eller magnesiumsaltene må det tilsvarende acetat tillates å virke på heparinesteren i kvaternær ammoniumsulfatform. For å fremstille aminsaltene omsettes natriumacetat med heparinesteren i kvaternær ammoniumsulfatform for å danne natriumsaltet, dette saltet overføres så via en sulfonkationkationbytter i H+<->form slik at man oppnår syren, hvoretter syren saltdannes med aminet og det dannede produkt isoleres ved lyofilisering eller utfelling ved tilsetning av aceton.
De ikke-selektive heparinestere i henhold til oppfinnelsen fremstilles fortrinnsvis, ved omsetning av et nøytralt kvaternært ammoniumsalt eller et aminsalt av heparin, dvs. av et salt av heparin hvori alle syrefunksjonene i heparinet er saltdannet, med et halogenderivat med formelen: hvori Hal angir et klor-, brom- eller jodatom og R og A har den samme betydning som angitt i formel (I). Reaksjonen kan vises generelt som følger:
hvor Hep og M i formelen angir en heparinrest, henholdsvis en kvaternær ammonium- eller aminrest.
Reaksjonen av det nøytrale kvaternære ammonium-eller aminsalt av heparinet med halogenderivatet med formel (I) gjennomføres i oppløsning eller i suspensjon i et inert oppløsningsmiddel ved en temperatur mellqm.-20°C og +60°C. Som inert oppløsningsmiddel skal spesielt nevnes dimetyl-formåmid, kloroform, heksametylfosforylamid, metylenklorid, dimetylsulfoksyd, tetrahydrofuran og aceton. Forestringsprosentandelen av karboksylgruppene avhenger av driftsbetingelsene (arten av halogenderivatene med formel (III) og av oppløsningsmidlet, reaksjonslengden, andelen av reaktantene, temperaturen osv.).
Oppnådde heparinestere der sulfatgruppene og even-tuelt ikke-forestrede karboksylgrupper foreligger i kvaternær ammonium- eller aminsulfat- eller karboksylatform, kan omdannes til et alkalimetall-, jordalkalimetall-, eller magnesiumsalt eller til en heparinester som ikke foreligger i saltform ved i og for seg kjente metoder, spesielt som angitt ovenfor.
De partielle eller totale estere som oppnås ved fremgangsmåten som er beskrevet ovenfor kan omdannes ved ufullstendig hydrolyse til estere med en lavere forestrings-grad. En slik ufullstendig hydrolyse kan f.eks. bevirkes ved å underkaste de partielle eller totale estere påvirkning av en vandig oppløsning av et alkalimetallkarbonat, spesielt dinatriumkarbonat, i 30 minutter til 6 timer ved en tem-
peratur av 5 - 25°C.
De selektive heparinestere ifølge oppfinnelsen der helt eller delvis er forestret enten kun karboksylgruppene i D-glukuronsyrebindingene eller kun karboksylgruppene i D-glukuronsyre- og usulfaterte L-iduronsyrebindinger oppnås ved å omsette et halogenderivat med den ovenfor angitte formel (III) med et surt kvaternært ammoniumsalt av heparin hvori ved siden av sulfatgruppene er saltdannet enten kun karboksylgruppene i D-glukuronsyrebindingene eller kun karboksylgruppene i D-glukuronsyre- og.sulfaterte L-iduronsyrebindinger, hvorved de andre karboksylgrupper foreligger i fri syreform. Denne reaksjon gjennomføres under de samme betingelser som reaksjonen mellom et halogenderivat med formel (III) med et nøytralt kvaternært ammoniumsalt av heparin.
De sure kvaternære ammoniumsalter av heparin hvori er saltdannet ved siden av sulfatgruppene kun karboksylgruppene av D-glukuronsyrebindinger fremstilles ved omsetning av et kvaternært ammoniumsalt med heparin i et vandig medium
hvis pH-verdi ligger mellom 3 og 4.
De sure kvaternære ammoniumsalter av heparin hvori er saltdannet ved siden av sulfatgruppene kun karboksylgruppene av D-glukuronsyre- og usulfaterte L-iduronsyrebindinger oppnås ved omsetning av et kvaternært ammoniumsalt med heparin, i et vandig medium hvis pH-verdi er lav nok til å danne det kvaternære ammoniumsalt av heparin hvori kun sulfatgruppene er saltdannet, i praksis ligger pH-verdien fra 2 - 2,5, og deretter selektivt å nøytralisere karboksylgruppene av D-glukuronsyre- og usulfaterte L-iduronsyrebindinger i produktet som således oppnås ved tilsetning av en på forhånd be-stemt mengde kvaternært ammoniumhydroksyd i et dimetylformamidmedium.
Mengden kvaternært ammoniumhydroksyd som tilsettes beregnes fra nøytraliseringskurven i et dimetylformamidmedium for en prøve av produktet med kjent vekt.
De selektive heparinestere ifølge oppfinnelsen der helt eller delvis er forestret enten kun karboksylgruppene i sulfaterte L-iduronsyrebindinger eller kun karboksylgruppene i ikke-sulfaterte L-iduronsyre- og sulfaterte L-iduronsyrebindinger fremstilles ved omsetning av en alkohol med formel (II) med heparin i et vandig medium i nærvær av et vannopp-løselig kondensasjonsmiddel av karbodiimidtypen slik som f.eks. l-etyl-3-.(3-dimetylaminopropyl)-karbodiimid, idet pH-verdien i mediet justeres til en verdi innen området 3,5 - 4,5 i det første tilfellet og innen området 2 - 3 i det annet tilfelle. Som alkohol med formel (II) som kan benyttes skal spesielt nevnes metanol og etanol i hvilket tilfelle man oppnår en selektiv metylester av heparin og en selektiv etylester av separin henholdsvis.
Forbindelsene ifølge oppfinnelse undergår når de underkastes påvirkning av en 0,1N - 0,6N vandig oppløsning av natriumhydroksyd ved en temperatur fra 20 - 60°C eller ved påvirkning av en organisk base slik som 1,5-diazabicyklo- •
[4 .3.0]non-5-en i metylenklorid en depolymerisering som fører til blandinger av sulfaterte polysakkarider med en midlere molekylvekt mindre enn den for heparin. Disse blandinger er antikoaguleringsmidler og antitrombotiske midler brukbare for å forhindre og å behandle tromboser.
De følgende eksempler skal illustrere oppfinnelsen uten å begrense den. Eksemplene 1-12 angår fremstilling av ikke-selektive estere, eksemplene 13 - 20 angår fremstilling av selektive estere.
Det nøytrale benzetoniumsalt av heparin eller benzetoniumheparinat nyttes som utgangsprodukt i eksemplene 1,
6, 7 og 8 og oppnås fra heparin fra griseinnvoller og har følgende karakteristika: midlere molekylvekt i vket: 16.000 dalton spesifikk rotasjonsevne i vandig oppløsning ved 20°C:
r n 20 ^ .,o
[aJD : + 41
kodeks antikoaguleringsaktivitet: 157 i.e./mg.
Det nøytrale benzetoniumsalt av heparin eller benzetoniumheparinat som benyttes som utgangspunkt i eksemplene 2, 3, 4 og 5 er oppnådd fra et heparin av okseinnvoller som
har følgende karakteristika:
midlere molekylvekt i vekt: 11.400 dalton optisk dreining:
r -,20 ., „o
[aJD 37
kodeks antikoaguleringsaktivitet: 128 i.e./mg.
Det nøytrale benzetoniumsalt av heparin eller benzetoniumheparinat som benyttes som utgangsprodukt i eksemplene 10 - 12 oppnås fra et heparin fra svineslim med en midlere molekylvekt i vekt på 16.000, en spesifikk rotasjonsevne i vandig oppløsning ved 20°C på + 44° og en kodeks antikoaguleringsaktivitet på 180 internasjonale enheter/mg.
Natriumsaltet av heparin som benyttes som utgangsprodukt i eksemplene 13 - 20 tilsvarer det ovenfor angitte heparin fra svineslim.
Eksempel 1
30 g (4-klor)-benzylklorid tilsettes til en oppløs-ning av 30 g benzetoniumheparinat i 600 ml dimetylformamid. Etter oppløsning settes stoffene hen for kontakt i 60 timer ved omgivelsestemperatur, ca. 20°C, hvoretter 600 ml av en 10%-ig oppløsning av natriumacetat i metanol tilsettes. Det dannede presipitat separeres ved filtrering, vaskes med metanol og tørkes i vakuum. På denne måte oppnås 10,75 g (4-klor)-benzylester av heparin i form av natriumsaltet.
Det oppnådde produkt viser i vandig oppløsning en maksimal absorbsjon i ultrafiolett område ved 220 nm. Den optiske densitet ved denne bølgelengde av en vandig oppløs-ning inneholdende 5 mg produkt i 100 ml vann er 0,605 for en tykkelse på 1 cm.
Eksempel 2
5 g etylkloracetat tilsettes til en oppløsning av
5 g benzetoniumheparinat i 125 ml diklormetan og,, etter opp-løsning, settes oppløsningen hen i 3 dager ved omgivelsestemperatur. Oppløsningsmidlet fordampes "i vakuum og resten tas opp i 75 ml dimetylformamid og 75 ml av en 10%-ig oppløs-ning av natriumacetat i metanol tilsettes. Presipitatet, separert ved filtrering, vaskes med metanol, og tørkes.der etter i vakuum. Det oppnås på denne måte 1,72 g karboksymetyl-ester av heparin i form av natriumsaltet.
Eksempel 3
10 g (4-klor)-benzylklorid tilsettes til en oppløs-ning, av benzetoniumheparinat i 250 ml diklormetån og oppløs-es under omrøring. Oppløsningen settes hen i 2 4 timer ved omgivelsestemperatur hvoretter oppløsningsmidlet fordampes under vakuum. Resten tas opp i 150 ml dimetylformamid og 150 ml en en 10%-ig oppløsning av natriumacetat i metanol tilsettes. Etter filtrering vaskes presipitatet som oppnås med metanol og det tørkes i vakuum. Man oppnår på denne måte 3,84 g (4-klor)-benzylester av heparin i form av natriumsaltet.
Det oppnådde produkt viser i vandig oppløsning en maksimal absorbsjon i ultrafiolett område ved 220 nm. Den optiske densitet ved denne bølgelengde av, en vandig oppløs-ning inneholdende 5 mg produkt i 100 ml vann er 0,337 for en tykkelse på 1 cm.
Eksempel 4
5 g (4-nitro)-benzylklorid tilsettes til en oppløs-ning av 5 g benzetoniumheparinat i 125 ml diklormetån og oppløsningen gjennomføres ved omrøring. Oppløsningen settes deretter hen i 3 dager ved omgivelsestemperatur hvoretter opp-løsningsmidlet fordampes, i vakuum og resten oppløses i 75 ml dimetylformamid. Den dannede ester felles ut ved tilsetning av 75 ml av en 10%-ig oppløsning av natriumacetat i metanol. Filtratet separeres ved filtrering, vaskes med metanol og tørkes i vakuum. Man oppnår på denne måte 1,89 g av (4-nitro)-benzylesteren av heparin i form av natriumsaltet.
Det oppnådde produkt viser i vandig oppløsning en maksimal ultrafiolett absorbsjon ved 272 nm. Den optiske densitet ved denne bølgelengde av en vandig oppløsning inneholdende 5 mg produkt i 100 ml vann er 0,408 for en tykkelse på 1 cm.
Eksempel 5
10 g (4-klor)-benzylklorid tilsettes til en oppløs-ning av 10 g benzetoniumheparinat i 250 ml diklormetån og det hele oppløses ved omrøring. Oppløsningen settes hen ved omgivelsestemperatur i 24 timer hvoretter oppløsningsmidlet fordampes i vakuum. Resten tas opp med 200 ml eter og presipitatet som dannes isoleres ved filtrering. Man oppnår på denne måte 10 g (4-klor)-benzylesteren av heparin i form av benzetoniumsaltet.
Eksempel 6
120 g (4-klor)-benzylklorid tilsettes til en opp-løsning av 120 g benzetoniumheparinat i 2,4 liter dimetylformamid og det hele oppløses ved omrøring..Oppløsningen settes hen ved omgivelsestemperatur i 60 timer hvoretter 2,4 liter av en 10%-ig oppløsning av natriumacetat i metanol tilsettes. Presipitatet som dannes separeres ved filtrering, vaskes med metanol og tørkes under vakuum. 46 g (4-klor)-benzylester av heparin oppnås på denne måte i form av natriumsaltet.
Det oppnådde produkt viser i vandig oppløsning en maksimal UV-absorbsjon ved 220 nm. Den optiske densitet ved denne bølgelengde av en vandig oppløsning inneholdende 5 mg produkt i 100 ml vann er 0,573 for en tykkelse på 1 cm. Eksempel 7
30 g etylkloracetat tilsettes til en oppløsning .
av 30 g benzetnoniumheparinat i 600 ml dimetylformamid. Etter oppløsning settes blandingen hen i kontakt i 60 timer véd omgivelsestemperatur hvoretter 600 ml av en 10%-ig oppløsning av natriumacetat i metanol tilsettes. Det dannede presipitat separeres ved filtrering, vaskes méd metanol og tørkes under vakuum. 10,78 g karboksylmetyleter av heparin oppnås på denne måte i form av natriumsaltet.
Eksempel 8
5 g kloracetonitril tilsettes til en oppløsning av 5 g benzetoniumheparinat i 125 ml diklormetån og oppløses under omrøring. Oppløsningen settes hen i 4 8 timer ved omgivelsestemperatur hvoretter oppløsningsmidlet fordampes under vakuum. Resten oppløses i 75 ml dimetylformamid og 75 ml av en 10%-ig oppløsning av natriumacetat i metanol tilsettes. Presipitatet separeres ved filtrering, vaskes med metanol og tørkes under vakuum og man oppnår 1,03 g cyano-metylester av heparin i form av natriumsaltet.
Eksempel 9
3 g (4-klor)-benzylester av heparin oppnådd i eksempel 6 oppløses under omrøring i 120 ml av en 10%-ig vandig oppløsning av dinatriumkarbonat. Etter omrøring i 2 timer ved en temperatur av 20 - 25°C bringes pH-verdien i oppløsningen til 6 ved tilsetning av en IN vandig oppløs-ning av saltsyre og deretter tilsettes et volum metanol til- . svarende 2 x volumet av den vandige oppløsning. Det dannede presipitat isoleres ved filtrering og det oppnås 2,1 g (4-klor)-benzylester av heparin..
Det oppnådde produkt viser i vandig oppløsning en maksimal absorbsjon i ultrafiolett område ved 220 nm. Den optiske densitet ved denne bølgelengde.for en vandig oppløs-ning av 5 mg produkt i 100 ml vann er 0,260 for en tykkelse på 1 cm.
Eksempel 10
10 ml benzylklorid tilsettes til en oppløsning av
10 g benzetoniumheparinat i 50 ml diklormetån. Etter oppløs-ning settes blandingen hen i 96 timer ved omgivelsestemperatur hvoretter 50 ml av en 10%-ig oppløsning av natriumacetat
i metanol tilsettes. Det dannede presipitat samles ved filtrering, vaskes med metanol og tas opp med 20 ml av en 10%-ig vandig oppløsning av natriumklorid. Etter tilsetning av 5 0
ml metanol, isoleres 3,62 g benzylester av heparin i.form av natriumsaltet.
Karakteristika for det oppnådde produkt: Forestringsprosentandel av karboksylgruppene: 70%.
Absorbsjonsspektrum i ultrafiolett område for en vandig oppløsning inneholdende 50 yg/ml:
Absorbs jonsmaksima : 195 nm og 205. nm.
Optisk densitet ved 205 nm for .1 cm tykkelse: 0,359. Eksempel II
0,9 ml metyljodid tilsettes til en oppløsning av 10 g benzetoniumheparinat i 50 ml diklormetån og blandingen settes hen i 24 timer ved omgivelsestemperatur. Deretter tilsettes 50 ral av en 10%-ig oppløsning av natriumacetat i metanol. Presipitatet som dannes isoleres deretter ved filtrering, vaskes med metanol og oppløses i 20 ml av en 10%-ig vandig oppløsning av vandig natriumklorid. Etter tilsetning av 50 ml metanol samles 3,3 8 g metylester av heparin.i form av natriumsaltet ved filtrering. I dette produkt er forestringsprosentandelén for karboksylgruppene 55%.
Eksempel 12
1 ml metyljodid tilsettes til en oppløsning av 10 g benzetoniumheparinat i 50 ml diklormetån og oppløsningen settes hen i 24 timer ved omgivelsestemperatur. Deretter tilsettes 50 ml av en 10%-ig natriumacetatoppløsning i metanol. 'Det"" dannede presipitat isoleres ved f iltrering, vaskes med" """ metanol og oppløses i 20 ml av en 10%-ig vandig oppløsning
av na-triuTuklarid. -5 0 ml metanol feiis-ettes og 3,45 g~etyA=
ester av heparin i form av natriumsaltet.samles ved filtrering. I dette produkt er f orestringsprosentandelén av karboksylgruppene 45%.
Eksempel 13
2 ,5 ml eddiksyre-og-deretter -langsomt bg under om- ~~ : rør ing T5ø~nrl~~av eir' 10%-±g ~~ vandig^oppl^srririg ~ av benz e ton iuirr—=—— klbrid tilsettes, til. en oppløsning, av 10 g heparin i form - av natriumsaltet i 40 ml vann. Det dannede presipitat.sam-
les ved séntrifugering, vaskes med vann og tørkes. Det opp-
nås på denne måte 19,76 g benzetoniumsyreheparinat.
5 g av det ovenfor angitte produkt oppløses i
100 ml dimetylformamid og 5 g (4-klor)-benzylklorid tilsettes. Reaktantene settes hen i 4 8 timer ved omgivelsestemperatur hvoretter 100 ml av en 10%-ig oppløsning av natriumacetat i metanol tilsettes. Det dannede presipitat isoleres ved filtrering, vaskes med metanol og tørkes under vakuum. Man oppnår således 2,11 g (4-klor)-benzylester av heparin i form av natriumsaltet..
Karakteristika for det oppnådde produkt:
Prosentandel forestring av karboksylgruppene: 22%.
Absorbsjonsspektrum i ultrafiolett område av en
vandig oppløsning inneholdende 50 yg/ml:
Absorbsjonsmaksima: 196 nm og 220 nm.
Optisk densitet ved 220 nm for en 1 cm tykk prøve: 0,120.
Eksempel 14
2,5 ml eddiksyre og deretter langsomt og under om-røring 150 ml av en 10%-ig vandig oppløsning av benzetoniumklorid tilsettes til en oppløsning av 10 g heparin i form av natriumsalt i 40 ml vann. Det dannede presipitat samles ved sentrifugering, vaskes med vann og tørkes, og man oppnås således 19,67 g benzetoniumsyreheparinat. 5 g av det ovenfor angitte produkt oppløses i 25 ml diklormetån hvoretter 2,2 ml metyljodid tilsettes. Opp-løsningen holdes i 2 4 timer ved omgivelsestemperatur og av-skjermet for lys. 75 ml av en 10%-ig oppløsning av natriumacetat i metanol tilsettes. Det dannede presipitat isoleres ved filtrering, vaskes med metanol og tørkes under vakuum. 2 g metylester av heparin oppnås i form av natriumsaltet. I dette produkt utgjør prosentandelen forestring av karboksylgruppene 22%.
Eksempel 15
2,5 ml maursyre og deretter og under omrøring 150 ml av en 10%-ig vandig oppløsning av benzetoniumklorid tilsettes til en oppløsning av 10 g heparin i form av natriumsalt i 40 ml vann. Presipitatet samles ved sentrifugering, vaskes med vann og tørkes under vakuum. Det oppnås 20,5 g benzetoniumsyreheparinat. 10 g av dette produkt oppløses i 200 ml dimetylformamid hvoretter 2 7,4 ml av en 0,1N oppløsning av tetra-butylammoniumhydroksyd i en n-propanol/metanolblanding tilsettes. Etter tilsetning av 10 g (4-klor)-benzylklorid settes oppløsningen hen i 5 dager ved omgivelsestemperatur.
250 ml av en 10%-ig oppløsning av natriumacetat i metanol tilsettes. 4,50 g (4-klor)-benzylester av heparin isoleres ved filtrering i form av natriumsaltet.
Karakteristika for det oppnådde produkt: Prosentandel forestring av karboksylgruppene: 45% Absorbsjonsspektrum i ultrafiolett område for en vandig oppløsning inneholdende 50 yg/ml:
Absorbsjonsmaksima: 19 6 nm og 220 nm.
Optisk densitet ved 220 nm for en 1 cm tykk prøve: 0,265.
Eksemplene 16 - 20
0,300 g l-etyl-3-(3-dimetylaminopropyl)-karbodi-imidl tilsettes til en oppløsning av 0,600 g heparin i form av natriumsalt i 7 ml vann hvis pH-verdi var justert til den ønskede verdi (se tabellen nedenfor) ved tilsetning av en IN vandig oppløsning av saltsyre.
Etter. 1 times kontakt med omgivelsestemperatur tilsettes 2,5 ml av en vandig oppløsning av natriumklorid inneholdende 280 g/l og deretter 15 ml metanol. Det dannede presipitat samles ved filtrering, vaskes méd metanol og tørkes under vakuum. Metylestere av heparin, i form av natriumsaltet, oppnås på denne måte. Den prosentuale forestring av karboksylgruppene er gitt i tabellen nedenfor.

Claims (19)

1. Estere av heparin, karakterisert ved at de er avledet fra heparin ved erstatning av karboksylgruppene i heparin med grupper med formelen:
hvori R er et hydrogenatom eller en metylgruppe og A er et hvdroaenatom eller en metvl-, fenvl-, -C-O-CH-, -C-0-C„H- -. CN- eller
ii j ii ~ > 0 0 gruppe, X betyr et kloratom eller en nitrogruppe, en alkylgruppe med 1-4 karbonatomer, eller en metoksygruppe og Y betyr et hydrogenatom eller et kloratom, idet erstatningen er partiell eller total når A ikke er et hydrogenatom eller en metyl- eller fenylgruppe og erstatningen er partiell tilsvarende 10 - 90% forestring av karboksylgruppene når A er et hydrogenatom eller en metyl- eller fenylgruppe, samt alkalimetall-, jordalkalimetall-, magnesium-, kvaternære ammonium- og aminsalter av estrene.
2. Heparinestere ifølge krav 1, karakter i-s r t v p> ri at i arimnpn mf^ rl -formpl ( 7) p>r R ot- hvrlrnapn-
samt alkalimetall-, jordalkalimetall-, magnesium-, kvaternære ammonium- og aminsalter av estrene.
3. Heparinestere ifølge krav 1, karakterisert ved at de er ikke-selektive estere, samt alkalimetall-, jordalkalimetall-, magnesium-, kvaternære ammonium- og aminsalter av estrene.
4. Heparinestere ifølge krav 1, karakterisert ved at de er selektive estere hvori partielt eller totalt det er forestret kun karboksylgruppene av D-glukuronsyrebindingene, samt alkalimetall-, jordalkalimetall-, magnesium-, kvaternære ammonium- og aminsalter av estrene.
5. Heparinestere ifølge krav 1, karakterisert ved at de er selektive estere hvori det partielt eller totalt er forestret karboksylgruppér av D-glukuronsyrebindinger og usulfaterte L-iduronsyrebindinger. samt alkalimetall-, jordalkalimetall-, magnesium-, kvaternære ammonium- og aminsalter av estrene.
6. Heparinestere ifølge krav 1, karakterisert ved at de er selektive estere hvori det partielt eller totalt er forestret karboksylgruppene i usulfaterte L-iduronsyre- og sulfaterte L-iduronsyrebindinger, samt alkalimetall-, jordalkalimetall-, magnesium-, kvaternære ammonium- og aminsalter av estrene.
7. Heparinestere ifølge krav 1, karakterisert ved at de er selektive estere hvori det partielt eller totalt er forestret kun karboksylgruppene i sulfaterte L-iduronsyrebindinger, samt alkalimetall-, jordalkalimetall-, magnesium-, kvaternære ammonium- og aminsalter av estrene.
8. Alkalimetallsalter av estere ifølge et hvilket som helst av kravene 1-7, karakterisert ved at alkalimetallkationet er natrium.
9. Jordalkalimetallsalter av estere ifølge et hvilket som helst av kravene 1-7, karakterisert ved at jordalkalimetallkationet er kalsium.
10. Magnesiumsalter av estere i henhold til et hvilket som helst av kravene 1-7.
11. Kvaternære ammoniumsalter av estere ifølge et hvilket som helst av kravene 1 - 7, karakterisert ved at det kvaternære ammoniumkation er benzetonium-kationet.
12. Fremgangsmåte for fremstilling av forbindelser ifølge krav 3, karakterisert , v- ed at (a) et syresalt av heparin fremstilles ved å erstatte de sure sulfatgrupper i heparin ved kvaternære ammo-niumsulf atgrupper mens karboksylgruppene i heparin forblir i fri form, (b) at nevnte sure salt av heparin omsetttes med en alkohol med formelen: HO - CH - A (II) R hvori R og A har den ovenfor i krav.1 angitte betydning. (c) det kvaternære ammoniumsalt av heparinesteren som således oppnås hvisø nskelig omdannes til et alkalimetall-, jordalkalimetall-, magnesium-*- eller aminsalt av esteren eller til en heparinester som ikke foreligger i saltfbrm.
13. Fremgangsmåte for fremstilling-av forbindelser ifølge krav 3, karakterisert ved at et nøy-tralt kvaternært ammonium- eller aminsalt av heparin omsettes med et halogenderivat med formelen: Hal - CH - A (III) i R • hvori Hal angir et klor-, brom- eller jodatom og R og A har den samme betydning som angitt i krav 1,b g det således oppnådde kvaternære ammonium- eller aminsalt av heparinesteren hvis ønskelig omdannes til et alkalimetall-, jordalkalimetall-eller magnesiumsalt av esteren eller til en ester av heparin som ikke foreligger i saltform.
14. Fremgangsmåte for fremstilling av forbindelser ifølge krav 3, karakterisert ved at forbindelsene som oppnås ved en fremgangsmåte i.henhold til et hvilket som helst av kravene 12 og. 13.underkastes en ufullstendig hydrolyse.
15. Fremgangsmåte ifølge krav 14., karakterisert ved åt den ufullstendige hydrolyse gjennomføres ved hjelp av en vandig oppløsning av et alkalimetallkarbonat.
16. Fremgangsmåte for fremstilling av forbindelser ifølge krav 4, karakterisert ved at et halogen derivat med formel:
hvori Hal er et klor-, brom-, eller jodatom og R og A har den samme betydning som i krav 1, omsettes- med et surt kvaternært ammoniumsalt av heparin hvori ved siden av sulfatgruppene kun karboksylgruppene i D-glukuronsyrebindingene er santdannet.
17. Fremgangsmåte for fremstilling av forbindelser ifølge krav 5, karakterisert ved at et halogenderivat med formel:
"hvori Hål er et klor-,' brom- eller jodatom og R og A har den i krav 1 angitte betydning, omsettes med et surt kvaternært ammoniumsalt av heparin hvori ved siden av sulfatgruppene kun karboksylgruppene i D-glukuronsyre- og usulfatért L-iduronsyrebindingene er saltdannet.
18. Fremgangsmåte for fremstilling av forbindelser ifølge krav 6, karakterisert ved at en alkohol med formelen:
hvori R og A har den i krav 1 angitte betydning, omsettes med.heparin i et vandig medium til en pH-verdi fra 2 - 3 i nærvær av et vannopplø selig kondensasjonsmiddel av karbodiimidtypen.
19. Fremgangsmåte for fremstilling av forbindelser ifølge krav 7, karakterisert ved at en alkohol med formelen:
hvori R og A har den i krav 1 angitte betydning, omsettes med heparin i et vandig medium hvis pH-verdi er fra 3,5 - 4,5 i nærvær av et vannoppløselig kondensasjonsmiddel av .karbodiimidtypen.
NO811631A 1980-05-14 1981-05-13 Heparinestere og deres fremstilling. NO811631L (no)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR8010792A FR2482603A1 (fr) 1980-05-14 1980-05-14 Nouveaux esters d'heparine utilisables pour la preparation de medicaments, et procedes pour leur preparation

Publications (1)

Publication Number Publication Date
NO811631L true NO811631L (no) 1981-11-16

Family

ID=9241966

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO811631A NO811631L (no) 1980-05-14 1981-05-13 Heparinestere og deres fremstilling.

Country Status (20)

Country Link
US (1) US4440926A (no)
EP (1) EP0044228B1 (no)
JP (1) JPS5952163B2 (no)
KR (1) KR840000724B1 (no)
AU (1) AU543032B2 (no)
CA (1) CA1183132A (no)
DE (1) DE3168868D1 (no)
DK (1) DK189581A (no)
ES (1) ES502200A0 (no)
FI (1) FI811470L (no)
FR (1) FR2482603A1 (no)
GR (1) GR73918B (no)
IE (1) IE51348B1 (no)
IL (1) IL62850A (no)
IN (1) IN153355B (no)
MA (1) MA19144A1 (no)
NO (1) NO811631L (no)
NZ (1) NZ197021A (no)
PT (1) PT72995B (no)
ZA (1) ZA813175B (no)

Families Citing this family (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4851521A (en) * 1985-07-08 1989-07-25 Fidia, S.P.A. Esters of hyaluronic acid
US5202431A (en) * 1985-07-08 1993-04-13 Fidia, S.P.A. Partial esters of hyaluronic acid
US4871357A (en) * 1986-01-21 1989-10-03 Baxter International Inc. Ionic heparin coating
US5147861A (en) * 1986-06-30 1992-09-15 Fidia S.P.A. Esters of alginic acid
IT1203814B (it) * 1986-06-30 1989-02-23 Fidia Farmaceutici Esteri dell'acido alginico
US4745106A (en) * 1986-08-20 1988-05-17 Griffin Charles C Heparin derivatives having improved anti-Xa specificity
US4745108A (en) * 1986-08-20 1988-05-17 Foley Kevin M Heparin derivatives having decreased anti-Xa specificity
US4745107A (en) * 1986-08-20 1988-05-17 Foley Kevin M Heparin derivatives with improved permeability
US4745105A (en) * 1986-08-20 1988-05-17 Griffin Charles C Low molecular weight heparin derivatives with improved permeability
IT1198449B (it) * 1986-10-13 1988-12-21 F I D I Farmaceutici Italiani Esteri di alcoli polivalenti di acido ialuronico
US5047020A (en) * 1987-09-14 1991-09-10 Baxter International Inc. Ionic heparin coating
EP0337327A1 (en) * 1988-04-09 1989-10-18 Bioiberica, S.A. Process for the preparation of new oligosaccharide fractions by controlled chemical depolimerization of heparin
US4981955A (en) * 1988-06-28 1991-01-01 Lopez Lorenzo L Depolymerization method of heparin
IT1230582B (it) 1988-10-21 1991-10-28 Opocrin S P A Lab Farmabiologi Oliogosaccaridi di dermatan solfato ed eparina aventi attivita' antiaterosclerotica
USRE38743E1 (en) 1990-06-26 2005-06-14 Aventis Pharma S.A. Mixtures of particular LMW heparinic polysaccharides for the prophylaxis/treatment of acute thrombotic events
IT1243300B (it) * 1990-12-20 1994-05-26 Fidia Spa Derivati dell'eparina
US5922690A (en) * 1996-04-25 1999-07-13 Van Gorp; Cornelius L. Dermatan disulfate, an inhibitor of thrombin generation and activation
US6409987B1 (en) 1999-04-07 2002-06-25 Intimax Corporation Targeted agents useful for diagnostic and therapeutic applications
US6969705B2 (en) * 2000-07-21 2005-11-29 Aventis Pharma S.A. Compositions of polysaccharides derived from heparin, their preparation and pharmaceutical compositions containing them
ES2282368T3 (es) * 2002-06-20 2007-10-16 Chemi S.P.A. Procedimiento para la preparacion de esteres de heparina.
US20030236221A1 (en) * 2002-06-20 2003-12-25 Chemi Spa Process for the preparation of esters of heparin
US20040171819A1 (en) * 2002-10-10 2004-09-02 Aventis Pharma S.A. Mixtures of polysaccharides derived from heparin, their preparation and pharmaceutical compositions containing them
US7956046B2 (en) * 2003-07-24 2011-06-07 Aventis Pharma S.A. Oligosaccharide mixtures derived from heparin, preparation thereof and pharmaceutical compositions containing them
US7563780B1 (en) * 2004-06-18 2009-07-21 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Heparin prodrugs and drug delivery stents formed therefrom
US20110112050A1 (en) * 2008-05-20 2011-05-12 Crystal Clear Partnership Separation of polysaccharides by charge density gradient
CN101825379A (zh) * 2010-03-30 2010-09-08 德华科电器科技(安徽)有限公司 一种热泵双回路循环系统
CA2811186C (en) * 2010-09-14 2018-12-04 Michio Muguruma High purity heparin and production method therefor
ES2357601B1 (es) 2011-01-26 2012-03-21 Laboratorios Farmacéuticos Rovi, S.A. Procedimiento de preparación de derivados de glicosaminoglicanos donadores de óxido n�?trico y su uso en tratamiento de úlceras crónicas.
CN105418804B (zh) * 2015-12-01 2018-08-10 蚌埠医学院 一种疏水化低抗凝血性肝素及其制备方法和应用
CN114616340A (zh) 2019-07-09 2022-06-10 奥普蒂姆维亚有限公司 合成抗凝血多糖的方法

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3065140A (en) * 1958-07-05 1962-11-20 Roussel Uclaf Heparin derivatives and methods of preparing same
FR1363866A (fr) * 1960-06-21 1964-06-19 Roussel Uclaf Nouveaux dérivés de l'héparine et procédé de préparation
DK108622C (da) * 1963-01-18 1968-01-15 Roussel Uclaf Fremgangsmåde til fremstilling af benzylheparinat eller dets alkalimetalsalte.
US3506642A (en) * 1967-07-03 1970-04-14 Canada Packers Ltd Stable orally active heparinoid complexes
FR2100735B1 (no) * 1970-06-08 1974-08-30 Mar Pha Etu Expl Marques
GB1399824A (en) * 1971-08-16 1975-07-02 Mar Pha Etu Expl Marques Heparin esters
GB1501095A (en) * 1974-04-11 1978-02-15 Mar Pha Etu Expl Marques Heparin derivatives
US4331697A (en) * 1980-09-02 1982-05-25 Teijin Limited Novel heparin derivative, method for production thereof, and method for rendering biomedical materials antithrombotic by use of the novel heparin derivative

Also Published As

Publication number Publication date
AU7052081A (en) 1981-11-19
IL62850A0 (en) 1981-07-31
CA1183132A (fr) 1985-02-26
FR2482603B1 (no) 1982-04-30
ES8206556A1 (es) 1982-08-16
JPS5952163B2 (ja) 1984-12-18
DK189581A (da) 1981-11-15
JPS578201A (en) 1982-01-16
IN153355B (no) 1984-07-07
DE3168868D1 (en) 1985-03-28
ZA813175B (en) 1982-05-26
GR73918B (no) 1984-05-22
IL62850A (en) 1984-06-29
IE811073L (en) 1981-11-14
AU543032B2 (en) 1985-03-28
MA19144A1 (fr) 1981-12-31
US4440926A (en) 1984-04-03
KR840000724B1 (ko) 1984-05-24
ES502200A0 (es) 1982-08-16
FR2482603A1 (fr) 1981-11-20
PT72995A (fr) 1981-06-01
KR830006332A (ko) 1983-09-24
EP0044228A3 (en) 1982-02-17
NZ197021A (en) 1984-07-06
PT72995B (fr) 1982-07-01
IE51348B1 (en) 1986-12-10
EP0044228A2 (fr) 1982-01-20
FI811470L (fi) 1981-11-15
EP0044228B1 (fr) 1985-02-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO811631L (no) Heparinestere og deres fremstilling.
KR840001753B1 (ko) 황산화다당류의 신규 혼합물 제조방법
RU2550602C2 (ru) Производное гиалуроновой кислоты, способ его получения и способ его модификации
CA2093147C (en) Semi-synthetic glycosaminoglycans with heparin or heparan structure of –-l-iduronic-2-sulfate acid modified in position 2
KR0148799B1 (ko) 항아테롬성 동맥경화 활성을 갖는 신규한 황산더마탄 및 헤파린 올리고당류
CZ302856B6 (cs) Zpusob prípravy derivátu polysacharidu
US8003623B2 (en) Mixtures of sulfated oligosaccharides
PT1556414E (pt) Misturas de oligossacáridos derivados de heparina, sua preparação e composições farmacêuticas que as contêm
US5430132A (en) Semi-synthetic glycosaminoglycans containing α-L-galacturonic acid substituted with nucleophilic groups in position 3
US8513407B2 (en) Process for the preparation of N-acyl-(epi)K5-amine-O-sulfate-derivatives and products thus obtained
JP2006291028A (ja) 低分子ヘパリンまたはその塩、ならびにその製造方法
US11155647B2 (en) Water-soluble polysaccharide derivatives, process for their preparation, and their uses
US3914214A (en) Thiolation of polysaccharides
KR920703644A (ko) 신규한 헤파린 유도체
EP0618235B1 (en) Process for the synthesis of semisynthetic glycosaminoglycans containing alpha-L-galacturonic acid substituted with nucleophilic radicals in position 3
Chanda et al. 276. The constitution of a pear cell-wall xylan
EP0618234B1 (en) Process for the synthesis of semisynthetic glycosaminoglycans with heparin or heparan structure modified in position 2 of the alpha-L-iduronic-2-0-sulfate acid
CA2489866A1 (en) Process for the manufacture of n-acyl-(epi)k5-amine-o-sulfate-derivatives and products thus obtained
US5705493A (en) Oligosaccharides having biological activity and preparation of same from supersulfated dermatan
Wolfrom et al. A synthetic heparinoid from amylose
SU1244151A1 (ru) Способ получени сернокислых эфиров полиоксиполимеров
EP2857411B1 (en) Method for preparing fully protection heparin pentasaccharide and intermediate thereof
GB796737A (en) A process for the production of glycan poly-(sulphuric acid esters)
EA046236B1 (ru) Способ прямого сульфатирования полисахаридов в экологически приемлемом растворителе
JP2511677B2 (ja) Ｎ−カルボキシメトキシメチレンカルボニルキトサン化合物の製造方法