NO782001L - Nye cefalosporinderivater, fremgangsmaate for fremstilling derav og sammensetninger inneholdende de samme - Google Patents

Abstract

Nye cefalosporinderivater, fremgangsmåte for fremstilling av disse og preparater inneholdende de samme.

Description

Foreliggende oppfinnelse angår nye cefalosporinderivater med den generelle formel

samt addisjonssalter derav med syrer og eventuelt metallsalter derav og addisjonssalter derav med nitrogenholdige organiske baser. Oppfinnel-sen angår også fremstilling av de nye cefalosporinderivater samt farmasøytiske preparater inneholdende disse.

I den generelle formel I angir R en karboksygruppe

(enten i fri form eller i form av metallsalt eller addisjons-

salt med en organisk base) eller en gruppe med den generelle formel

der R^ angir e.t hydrogenatom eller en alkylgruppe inneholdende 1 til 4 karbonatomer, og R2angir en rett eller forgrenet alkylgruppe inneholdende 1 til ^ karbonatomer eller en cykloheksyl-gruppe, hvorved gruppen

er en gruppe som er lett å fjerne på enzymatisk måte slik som

pivaloyloksymetyl.

Forbindelen ved formel I stammer fra formlene D, L og DL av en aminosyre med formelen

Oppfinnelsen angår både de diastereoisomere former av forbindelsen med formel I som blandinger derav.

De nye forbindelser med formelen I kan ifølge oppfinnel-sen fremstilles ved at syren med formel IV, hvilken foreligger i racemisk form eller i optisk aktiv form og hvis aminogruppe er beskyttet på forhånd,■eller et reaktivt derivat av denne syre, omsettes.med et cefalosporin med den generelle formel

der R har den ovenfor angitte betydning.

a) Når man anvender syren med formel IV, kan aminogruppen beskyttes på en hvilken.som helst kjent måte for blok-kering av en aminogruppe uten at resten av molekylet påvirkes. Det er nødvendig å anvende en gruppe som er lett å fjerne slik som tertiært butoksykarbonyl eller 2,2,2-trikloretoksykarbonyl. Det er spesielt hensiktsmessig å anvende gruppen tert-butoksykarbonyl som kan innføres ved omsetning med ditert-butyldikarbo-nat, tert-butylazidoformiat, tert-butylklorformiat eller tert-buty1-p-nitrofenyIkarbonat (blandet karbonat).

Det er også mulig å beskytte aminogruppen. i form av et enamin med den generelle formel der R, angir en alkylgruppe inneholdende 1 til 4 karbonatomer og R^angir en alkylgruppe inneholdende 1 til 4 karbonatomer,

en alkoksygruppe hvis alkyldel inneholder 1 til 4 karbonatomer eller en fenylgruppe.

Enaminet med den generelle formel VI kan fremstilles ifølge den fremgangsmåte som er beskrevet av E. Dane et al., "Chem. Ber.", 98, 789 (1965).

a) Når R angir en karboksygruppe, kondenseres vanlig-

vis forbindelsen med formelen IV, hvis syregruppe er fri og

hvis aminogruppe er beskyttet på forhånd, med 7_amino-3-des-acetoksycefalosporansyre hvis syregruppe er beskyttet på forhånd med en gruppe som er lett å fjerne slik som benshydryl, tert-butyl eller 2,2,2-triklorety1.

Vanligvis gjennomføres kondensasjonen i et organisk opp-løsningsmiddel slik som dimetylformamid, acetonitril, tetrahydrofuran eller kloroform i nærvær av et kondensasjonsmiddel slik som et karbodiimid (f.eks. dicykloheksylkarbodiimid) eller N,N'-karbonyldimidazol, ved en temperatur mellom 4 og 40°C.

Man fjerner deretter beskyttelsesgruppen for aminogruppen og syregruppen.

Avhengig av arten av beskyttelsesgruppene kan denne

fjerning gjennomføres i ett eller to trinn.

Når beskyttelsesgruppen for aminogruppen er en tertiær butyloksykarbonylgruppe, gjennomføres fjerningen på en av de følgende måter, avhengig av arten av beskyttelsesgrupper for syregruppen. 1) Når syregruppen er beskyttet ved hjelp av en tertiær butylgruppe eller en benshydrylgruppe, gjennomføres gjerningen i ett eneste trinn ved behandling i surt medium. Man anvender fortrinnsvis trifluoreddiksyre og arbeider ved en temperatur mellom 0 og 20°C (og i nærvær av anisol når beskyttelsesgruppen er en benshydrylgruppe). Alternativt anvender man paratoluen-sulfonsyre. Under disse betingelser oppnås forbindelsen med. formel I i form av trifluoracetat eller paratoluensulfonat,

hvis aminogruppe kan frigjøres ifølge en hvilken som helst kjent fremgangsmåte for fremstilling av et amin ved å gå ut fra et salt derav uten at resten av molekylet påvirkes. Man kan spesielt bringe saltet i kontakt med en ionebytter (f.eks. en polystyrenaminoionebytter slik som "Amberlite IR-45") eller i

kontakt med en organisk base.

2) Når syregruppen er beskyttet med en 2,2,2-triklor-etylgruppe, gjennomføres først behandling med sink i eddiksyre hvoretter den tertiære butyloksykarbonylgruppe fjernes ved behandling i surt medium. Behandlingen i surt medium gjen-nomføres ved hjelp av trifluoreddiksyre. Herved oppnås forbindelsen med formel I i form av trifluoracetat og aminet kan frigjøres fra sitt' salt på ovenfor beskrevne måte.

Når beskyttelsesgruppen for aminogruppen er en 2,2,2-trikloretoksykarbonylgruppe, gjennomføres fjerningen av be-sky ttelsesgruppen på en av de følgende måter, avhengig av arten av besky.ttelsesgruppen for syregruppen. 1) Når beskyttelsesgruppen for syregruppen er tertiær butylgruppe eller en benshydrylgruppe, gjennomføres først behandling med sink i eddiksyre og deretter behandling i surt medium, fortrinnsvis ved hjelp av trifluoreddiksyre. 2) Når beskyttelsesgruppen for syregruppen er en 2,2,2-trikloretylgruppe, gjennomføres behandling med sink i eddiksyre .

Når aminogruppen er beskyttet i form av et enamin, gjen-nomføres fjerning av beskyttelsesgruppene på en av de følgende måter, avhengig av arten av beskyttelsesgruppen for syregruppen. 1) Når beskyttelsesgruppen for syregruppen er en tertiær butylgruppe eller en benshydrylgruppe, gjennomføres først hydrolyse i fortynnet surt medium, f.eks. i nærvær av saltsyre, og deretter behandling med trifluoreddiksyre. 2) Når beskyttelsesgruppen for syregruppen er en 2,2,2-trikloretyIgruppe, gjennomføres først hydrolyse i surt medium, f.eks. i nærvær av saltsyre, og deretter behandling med sink i eddiksyre.

Når R angir en gruppe med den generelle formel II, kondenserer man vanligvis syren med formel IV med cefalosporin-derivatet med formel V i et organisk oppløsningsmiddel slik som dimetylformamid eller kloroform i nærvær av et kondensasjonsmiddel slik som et karbodiimid (f.eks. dicykloheksylkarbodiimid) eller N,N'-karbonyldiimidazol, ved'en temperatur mellom 0 og 40°C, hvoretter man fjerner beskyttelsesgruppen for aminogruppen under de ovenfor angitte betingelser.

b) Når man anvender et derivat av syren med formel IV, er det hensiktsmessig å anvende anhydrid, et blandet anhydrid eller en reaktiv ester med den generelle formel

der R,- angir en suksinimidogruppe, en bensotriazol-l-ylgruppe eller en 2,4-dinitrofenylgruppe, og hvis aminogruppe er beskyttet på forhånd. Det er også hensiktsmessig å anvende syreklo-rider hvorved man omsetter hydrokloridet av syrekloridet av"syren med formel IV med cefalosporinet med formel V. Det er også mulig å anvende Leuchs anhydrid. Når man anvender anhydridet, et blandet anhydrid, Leuchs anhydrid eller syrekloridet, hvilket kan fremstilles in situ, gjennomføres kondensasjonen i et organisk oppløsningsmiddel slik som tetrahydrofuran, kloroform eller metylenklorid, i nærvær av en syreakseptor slik som en nitrogenholdig organisk base, f.eks. pyridin eller trietylamin, eller i et vannholdig organisk medium i nærvær av et alkalisk kondensasjonsmiddel slik som natriumdikarbonat, og man arbeider ved en temperatur mellom -40 og +40°C. Man erstatter deretter eventuelt beskyttelsesgruppen for aminogruppen med et hydrogenatom. Når R betegner en karboksygruppe,.er det ikke nødvendig å beskytte syregruppen.

Når man anvender en reaktiv ester med den generelle formel VII, arbeider man vanligvis i nærvær av trietylamin i et organisk oppløsningsmiddel slik som dimetylformamid ved en temperatur mellom 0 og 40°C, hvoretter man erstatter beskyttelsesgruppen for aminogruppen med et hydrogenatom. Når R angir en karboksygruppe, er det ikke nødvendig å beskytte syregruppen.

Syren med formel IV kan fremstilles ifølge en av de følgende metoder. a) Ved deformylering av a-formylamino-(1,3_ditiin-5-yl)-eddiksyre.

Denne reaksjon gjennomføres vanligvis i et vannholdig surt medium ved en temperatur mellom 0 og 100°C. Man anvender fortrinnsvis en vannoppløsning av en mineralsyre slik som saltsyre ved en temperatur nær 100°C.

a-formylamino-(1,3_ditiin-5_yl)-eddiksyre kan fremstilles ved forsåpning av tilsvarende ester med den generelle formel

der Rg angir en alkylgruppe inneholdende 1 til 4 karbonatomer, hvorved man arbeider under betingelser som muliggjør forsåpning av en ester til den tilsvarende syre uten at resten av molekylet påvirkes.

Den ester som skal forsåpes behandles vanligvis med et alkalimetallhydroksyd i et vann-alkoholmedium ved en temperatur mellom 0 og 50°C. Man anvender fortrinnsvis metylesteren eller etylesteren og gjennomfører forsåpningen i en blanding av vann og metanol eller i en blanding av vann og etanol ved en temperatur nær 5°C.

Esteren med formelen VII kan fremstilles ved at et

isocyanoacetat med formelen

CN - CH2- COORg (IX)

der Rg har den ovenfor angitte betydning, omsettes med 1,3-ditiacykloheksan-5-on.

Denne reaksjon gjennomføres vanligvis i et vannfritt organisk oppløsningsmiddel slik som tetrahydrofuran i nærvær av et alkalisk kondensasjonsmiddel slik som kaliumtertbutylat,, og ved en temperatur mellom -70 og 0°C.

Isocyanoacetat med formelen IX kan fremstilles ifølge

den fremgangsmåte som er beskrevet av U. Schøllkopf et al.,

i "Chem. Ber.", 108, 1580 (1975).

1,3_ditiacykloheksan-5-on kan fremstilles ifølge den fremgangsmåte som er beskrevet av E. B. Howard og R. V. Lindsey

•i "J. Amer. Chem. Soc", 82, 158 (1960).

De optisk aktive former av syren med formel IV kan fremstilles ved å gå ut fra racematet enten på enzymatisk måte eller ved tillempning av fysikalsk-kjemiske metoder.

b) Ved forsåpning av en ester med den generelle formel

der angir en alkylgruppe inneholdende 1 til 4 karbonatomer, hvoretter beskyttelsesgruppen for aminogruppen fjernes.

Forsåpningen gjennomføres hensiktsmessig i et vann-alkpholmedium hvorved man behandler et alkalimetallhydroksyd ved en temperatur mellom 0 og 50°C.

Man anvender fortrinnsvis natriumhydroksyd og behandler metylesteren eller etylesteren i en blanding av vann og metanol eller i en blanding av vann og etanol ved en temperatur nær-20°C.

Når man ønsker å oppnå en forbindelse med.formel IV hvis aminogruppe er fri, fjernes beskyttelsesgruppen vanligvis ved hjelp av trifluoreddiksyre ved en temperatur mellom 0 og 30°C.

Hvis man ønsker å oppnå D-formen eller L-formen av syren med formel IV, kan det være hensiktsmessig å gjennomføre separering av de optisk aktive former før fjerning av beskyttelsesgruppen for aminogruppen.

Man kan f.eks. behandle den racemiske form med kinin i et oppløsningsmiddel slik som metyletylketon.

Saltene med formene D og L renses ved krystallisering. De frie syrer med formene D og L isoleres ved å gå ut fra disse salter hvoretter beskyttelsesgruppen for aminogruppen fjernes for dannelse av formene D og L av aminosyren med formelen IV.

Esteren med formelen X kan fremstilles ved at kalium-tert-butylat omsettes med en forbindelse med formelen

der R^har den ovenfor angitte betydning.

Man arbeider vanligvis i et organisk oppløsningsmiddel slik som tetrahydrofuran ved en temperatur mellom -78 og 0°C.

Forbindelsen med formel XI kan fremstilles ved at et alkylisotiocyanatoacetat (f.eks. etylisotiocyanatoacetat) omsettes med 1,3-ditiacykloheksan-5-on i nærvær av kalium-tert-butylat, hvoretter det resulterende produkt omsettes med di-tert-butyIdikarbonat.

Man arbeider vanligvis i et oppløsningsmiddel slik som

tetrahydrofuran ved en temperatur mellom -78 og 0°C.

Den forbindelse med formel V der R angir en karboksygruppe er 7-amino-3-desacetoksicefalosporansyre (eller 7-ADCA). Denne syre kan fremstilles enten ved å gå ut fra et penicillin ifølge den fremgangsmåte som er beskrevet i belgisk patent nr. 747.382 eller ved desacetoksylering av 7_aminocefalosporansyre (elle'r 7~ACA) ifølge den fremgangsmåte som er beskrevet i. belgisk patent nr. 779-034.

Den forbindelse med formel V der R angir en gruppe med formel II hvori R^og R2har den ovenfor angitte betydning, kan fremstilles ved å gå ut fra 7_amino-3-desacetokxycefalos-poransyre ifølge.en hvilken som helst kjent fremgangsmåte for fremstilling av en ester ved å gå ut fra en syre uten at resten av molekylet påvirkes.

Et alkalimetallsalt eller et salt med et tertiært amin av 7-amino-3-cesacetoksycefalosporansyre omsettes vanligvis med et halogenid med den generelle formel

der R1 og R2har de ovenfor angitte betydninger og Z■angir et halogenatom, i et inert oppløsningsmiddel slik som dimetylformamid ved en temperatur mellom 0 og 30°C.

Forbindelsen med formelen XII kan fremstilles ifølge den fremgangsmåte som er beskrevet i DE-OS 2.350.230.

De forbindelser med formel I der R angir en gruppe med formel II hvori R-^ og Rp nar den ovenfor angitte betydning, kan også fremstilles ved forestring av en forbindelse med formel I der R angir-en karboksygruppe og hvis aminogruppe er beskyttet på forhånd ved tillempning av en hvilken som helst kjent fremgangsmåte for fremstilling av en ester fra en- syre uten at resten av molekylet påvirkes.

Vanligvis omsetter man et alkalimetallsalt eller et salt med et tertiært amin av en forbindelse med formel I der R angir en karboksygruppe og hvis aminogruppe er beskyttet på forhånd, med et halogenid med den generelle formel XII der R-, , R2og Z har den ovenfor angitte betydning. Man arbeider fortrinnsvis i et inert oppløsningsmiddel slik som dimetylformamid ved en tem peratur mellom 0 og 30°C, hvoretter man fjerner beskyttelsesgruppen for aminogruppen på en hvilken som helst kjent måte.

De diastereoisomere former av forbindelsene med formel

I kan også fremstilles ved å gå ut fra blandinger av disse ved tillempning av kjente metoder. Det er mulig å'gjennomføre denne separering i ulike stadier av syntesen. Separeringen kan f.eks. gjennomføres ved at en forbindelse med formel I hvis amino- og syregruppe er beskyttet, kromatograferes på en egnet bærer. Diastereoisomerene av forbindelsen med formel I isoleres deretter etter fjerning av beskyttelsesgruppene under vanlige betingelser.

De nye forbindelser med formel I kan eventuelt renses ved tillempning av fysikalske metoder slik som krystallisering eller kromatografi.

De nye forbindelser med formel I kan omdannes til addisjonssalter med syrer. Ifølge'oppfinnelsen fremstilles forbindelsen med formel I i form av trifluoracetat eller paratoluensulfonat. Forbindelsene med formel I som er fremstilt i form .av disse salter kan frigjøres og omdannes til salter med andre syrer ifølge vanlige metoder.

De forbindelser med formel I der R angir en karboksygruppe kan også omdannes til metallsalter eller til addisjonssalter med nitrogenholdige organiske baser ifølge velkjente metoder. Disse salter kan fremstilles ved at en metallbase (f.eks. en alkalimetallbase eller en jordalkalimetallbase) eller et amin omsettes med en forbindelse med formel I i et egnet oppløsningsmiddel slik som en alkohol, en eter eller vann. Saltene kan også fremstilles ved utbyttingsreaksjon med et salt av en organisk syre. Det dannede salt fraller ut, eventuelt etter konsentrering av oppløsningen og det fjernes ved filtrering eller dekantering.

De nye cefalosporinderivater ifølge oppfinnelsen oppvi-ser meget interessante antibakterielle egenskaper. De har en bemerkelsesverdig aktivitet så vel in vivo som in vitro både mot grampositive og gramnegative bakterier.

In vitro er forbindelsene med formel I virksomme i en konsentrasjon av 2 til 15 ug/cm^ mot Staphylococcus-stammer som er' følsomme for penicillin G (Staphylococcus aureus Smith), i en konsentrasjon av 10-150 yg/cm^ mot Staphylococcus-stammer som er resistente mot penicillin G (Staphylococcus aureus MB 9), i en konsentrasjon av 0,125-1,5 yg/cm mot Streptococcus 'pyogenes Dig' 7, i en konsentrasjon av 2-30 yg/cm-' mot Escherichia colijstamme Monod, i en konsentrasjon av 4-30 yg/cm'' mot Klebsiella pneumoniae, i en konsentrasjon av 1-8 yg/cm^.mot Salmonella typhi, i en konsentrasjon av 1-8 yg/cirr - 7. mot Chigella flexneri og i en konsentrasjon av 5~20 yg/cm^ mot Proteus,mira-bilis.

In vivo er forbindelsene med formel I virksomme mot eksperimentelt fremkalte bakterieinfeksjoner hos mus. I en oral eller subkutan dose på 0,05-0,6 mg/kg er forbindelsene således virksomme mot Staphylococcus aureus Smith'(følsom for penicillin G), og i en oral eller subkutan dose på 1-6 mg/kg er forbindelsene virksomme mot Escherichia coli.

Ved 'subkutan inngivelse til mus er forbindelsen med formel I ugiftig i doser på 2,5 g/kg.

Av meget spesiell interesse er de forbindelser med formel I der R angir en karboksygruppe, spesielt den forbindelse der den til cefalosporinkjernen bundede aminosyre foreligger i D-form.

Oppfinnelsen skal illustreres ved følgende ikke begrensende eksempler.

Eksempel 1

Til en oppløsning av 13 g D,L-a-tert-butoksykarbonylamino-(1,3_ditiin-5-yl)-eddiksyre i 160 cm tetrahydrofuran setter man under omrøring 6,25 cm^ trietylamin. Man avkjøler den oppnådde blanding til -10°C hvoretter man dråpevis tilsetter 5,8 cm^ isobutyIklorformiat. Reaksjonsblandingen omrøres i 10 min. ved -10°C og deretter tilsettes en oppløsning av 9354 g 7-amino-2-karboksy-3-metyl-8-okso-5-tia-l-azabicyklo-/4.2.0/-okt-2-en i en blanding av 140 cm^ tetrahydrofuran,

140 cnr 3 vann og 6,25 cm 3 trietylamin. Man omrører den resulterende reaksjonsblanding ved 0°C i 30 min. og deretter ved 20°C

i 90 min. Oppløsningsmidlet dampes av under et redusert trykk av 20 mm Hg ved 30°C. Man tilsetter deretter 300 cm^ vann og 50 cm^ av en mettet vannoppløsning av natriumbikarbonat hvoretter man ekstraherer med 500 cm^ etylacetat. Vannfasen separeres og gjøres sur til pH 2,0 ved tilsetning av 4N saltsyre i nærvær av 500 cm^ etylacetat. Man separerer den organiske fase

og ekstraherer på nytt med 200 cm^ etylacetat. De to sistnevnte organiske faser forenes, vaskes med 150 cm^ av en mettet vann-oppløsning av natriumklorid, tørkes over natriumsulfat<p>g filtreres i nærvær av avfargingskull. Man konsentrerer til tørr

tilstand under et redusert trykk av 20 mm Hg ved 30°C. Man oppnår på denne måte 18,7 g 7~Z~D, L-a-tert-butoksykarbonylamino-(l,3_ditiin-5_yl)-acetamido7-2-karboksy-3-metyl-8-okso-5-tia-l-azabicyklo-Z7l. 2 .0_7-okt-2-en i form av en hvit marenglignende masse.

Man oppløser 2,7 g 1~ IS>S L-a-tert-butoksykarbonylamino-(1,3_ditiin-5_yl)-acetamidQ7-2-karboksy-3-metyl-8'-okso-5-tia-l-azabicyklo-Z7i • 2.0_7-okt-2-en i 3 cm^ anisol og 15 cm^ trifluoreddiksyre. Den oppnådde oppløsning omrøres ved 20°C i 15 min. Man konsentrerer deretter til tørr tilstand under et redusert trykk av 0,5 mm Hg ved 30 o C. Resten tas opp i 15 cnr 3 etylacetat og deretter tilsettes 100 cirr isopropyleter. Herved dannes en hvit utfelling som separeres ved filtrering. Man oppnår 2,4 g urent trifluoracetat av 7-/D,L-a-amino-(1,3-ditiin-5_yl)-acetamido_7-2-karboksy-3-metyl-8-okso-5-tia-l-azabicyklo-Z"4 . 2 . 0_7-okt-2-en i form av et hvitt fast stoff.

En oppløsning av 11,9 g trif luoracetat av 7~ £b ,L-ot-amino-(1,3,ditiin-5-yl)-acetamido7-2-karboksy-3-metyl-8-okso-5_tia-l-azabicykld-/f4 . 2 . 0_7-okt-2-en i 500 cm^ destillert vann ekstra-heres med 3 ganger 100 cirr etylacetat. Vannfasen- behandles med 50 cm^ fuktig ionebytter "Amberlite IR-45" i OH -form inntil pH-verdien er stabilisert ved 5,25 (ca. 1 time). Ionebytteren separeres ved filtrering. Vannfasen lyofiliseres. Man oppnår herved 5,7 g 7~£D, L-a-amino-(1,3-ditiin-5~yl)-acetamido7-2-karboksy-3-metyl-8-okso-5-tia-l-azabicyklo-/I4 . 2 . 0_7-okt-2-en med følgende egenskaper: a^<0>= + 131,2<1>2° (c - 0,98; vann)

Elementæranalyse: Beregnet, % : C 43,39 H 4,42 N 10,84

0 16,52 S 24,83

Funnet, % : C 42,6 H 3,8 N 10,7

S 24,6

o IR-spektrum: Karakteristiske bånd:

3300-2200 cm"<1>(NH-amid og NH +)

-1

1755 cm. : karbonyl av g-laktam 1685 cm<-1>: -CONH-

1575 cm<-1>: -C00H

D,L-a-tert-butoksykarbonylamino-(1,3-ditiin-5-yl)-eddiksyre kan f-remsti-1-l-es- -på følgende måte. Til en suspensjon av 19,1 g D,L-a-amino-(1,3_ditiin-5-yl)eddiksyre i en blanding av 130 cm^ dioksan og 130 cm^ vann setter man først 10,6 g natriumkarbonat og deretter en oppløsning av 24 g ditertbutyl-dikarbonat i 130 cm^ dioksan. Suspensjonen omrøres i 18 timer ved 20°C. Løsningsmidlet dampes deretter av under et redusert trykk av 20 mm Hg ved 40°C. Man tilsetter 200 cm^ vann og 50 cm^ av en mettet vannoppløsning av natriumbikarbonat. Man vasker 3 ganger med 300 cm^ etylacetat. Vannfasen surgjøres til pH 1,5 med 4N saltsyre. Man ekstraherer med 2 ganger 250 cm^ etylacetat. De forenede organiske ekstrakter vaskes med 150 cm'' av en mettet natriumkloridoppløsning og tørkes over natriumsulfat. Løsningen behandles med avfargingskull hvoretter den filtreres og konsentreres til tørr tilstand under et redusert trykk av 20 mm Hg ved 50°C. Man oppnår herved 26 g D,L-a-tert-butoksykarbonylamino- (1,3_ditiin-5-yl)-eddiksyre i form av en hvit marenglignende masse.

DaL-a-amino-(1,3~ditiin-5~y1)-eddiksyre kan fremstilles på følgende måte. En suspensjon av 63 g D,L-a-formylamino-(1,3-ditiin-5-yl)-eddiksyre i 320 cm^ 4N saltsyre oppvarmes til 90°C inntil fullstendig oppløsning. Man avkjøler deretter til 20°C og behandler med avfargingskull. Oppløsningen filtreres hvoretter pH-verdien innstilles til 4,5 ved tilsetning av 4N natriumhydroksydoppløsning. Den dannede utfelling separeres ved filtrering. Man oppnår herved 41 g D,L-a-amino-(1,3-ditiin-5-yl)-eddiksyre i form av et hvitt fast stoff som smel-ter ved 270°C under spalting.

D,L-a-formylamino-(1,3-ditiin-5_yl)-eddiksyre kan fremstilles på følgende måte. En suspensjon av 72 g av en like-vektsblanding av etyl-a-formylamino-(4,5-dihydro-l,3~ditiin-5-yliden)-acetat og etyl-D,L-a-formylamino-(1,3~ditiin-5-yl)-acetat i 720 cm^ etanol og 200 cm^ vann avkjøles til 5°C. Man tilsetter 80 cm^ 4N natriumhydroksydoppløsning og ■omrører den. resulterende reaksjonsblanding ved 5°C i 90 min. Man konsentrerer deretter til et. volum av 100 cm 3 under et redusert trykk av 20 mm Hg. Den oppnådde oppløsning avkjøles i et is-bad og surgjøres til pH 2,0 ved tilsetning av 4N saltsyre. Den dannede utfelling separeres ved filtrering. Man oppnår herved 67 g uren D,L-a-formylamino-(1,3_ditiin-5-yl)-eddiksyre i form av et hvitt fast stoff.

Blandingen av etyl-a-formylamino-(4,5-dihydro-l,3~ditiin-5-yliden)-acetat og etyl-D,L-a-formylamino-(1,3-ditiin-5-yl)-acetat kan fremstilles på følgende måte. En oppløsning av 27,2 g kalium-tert-butylat i 200 cirr 3 tetrahydrof uran av-kjøles til 0°C. Man tilsetter dråpevis en oppløsning av 25 g etylisocyanoacetat i 150 cm^ tetrahydrofuran. Man omrører reaksjonsblandingen i 1 time ved 0°C og tilsetter deretter en opp-løsning av 29,6 g 1,3-ditiacykloheksan-5~on i 375 cm^ tetrahydrofuran. Reaksjonsblandingen omrøres ved 0°C i 90 min. Man tilsetter deretter 50 cm^ eddiksyre og separerer den dannede felling ved filtrering. Oppløsningsmidlet dampes av under et redusert trykk av 20 mm Hg ved 30°C. Resten opptas i 2500 cm^ metylenklorid. Man ekstraherer med en blanding av 500 cm^ vann og 300 cm^ av en mettet vannoppløsning av natriumbikarbonat. Den organiske fase vaskes med 500 cm 3 vann og tørkes over natriumsulfat. Oppløsningen behandles med avfargingskull, filtreres og konsentreres til tørr tilstand under et redusert trykk av 20 mm'Hg ved 30 o C. Resten omrøres kraftig med 400 cirr3 etyleter. Den oppnådde utfelling separeres ved filtrering. Man oppnår herved 18,5 g etyl-a-formylamino-(4,5-dihydro-l,3~ ■ ditiin-5-yliden)-acetat. Filtratet konsentreres til tørr tilstand under et redusert trykk av 20 mm Hg ved 20°C. Resten renses ved kromatografi på 250 g silisiumdioksyd i en kolonne med en diameter av 3,7 cm og en høyde av 47 cm. Man eluerer med 2 liter av en blanding av metylenklorid og etylacetat i et volumforhold 85:15* Man oppnår herved 4,4 g av en blanding av etyl-a-formylamino-(4,5-dihydro-l,3-ditiin-5-yliden)-acetat og etyl-a-formylamino-(1,3-ditiin-5_yl)-acetat.

Etylisocyanoacetat kan fremstilles ifølge den fremgangsmåte som er beskrevet av U. Schøllkopf, D. Hoppe og R. Jentsch, "Chem. Ber,", 108, 1580 (1975).

1,3-ditiacykloheksan-5-on kan fremstilles ifølge den

fremgangsmåte som er beskrevet av E. G. Howard og R. V. Lindsey, "J. Amer. Chem. Soc", 82, 158 (1960).

Eksempel 2

Til en omrørt oppløsning av 102 g D-a-tert-butoksykarbonylamino-(I,3-ditiin-5_yl)-eddiksyre i 1330 cm^ tetrahydrofuran setter man 49 cm^ trietylamin. Man avkjøler reaksjonsblandingen til i-10°C og tilsetter dråpevis 48,4 cm^ isobutyl-klorformiat. Reaksjonsblandingen omrøres i 15' min. ved -10°C

og deretter tilsettes en oppløsning av 75 g 7-amino-2-karboksy-3-metyl-8-okso-5-tia-l-azabicyklo-Z1t. 2 . 0_7-okt-2-en i en blan-'ding av 1190 cm 3 tetrahydrof uran og 49 cirr 3 trietylamin. Man om-rører reaksjonsblandingen ved 0°C i 1 time og deretter ved 20°C i 2 timer. Oppløsningsmidlet dampes av under et redusert trykk av 20 mm Hg ved 40°C. Man tilsetter 1000 cm<5>vann og 200 cm<5>

av en mettet vannoppløsning av natriumbikarbonat hvoretter man ekstraherer med 1000 cm^ etylacetat. Vannfasen surgjøres til

pH 2 ved tilsetning av 4N saltsyre i nærvær av 1000 cirr etylacetat. Man separerer den organiske fase og ekstraherer ytterligere 2 ganger med 500 cirr etylacetat. De organiske faser forenes, vaskes med 1000 cm^ av en mettet vannoppløsning av natriumklorid, tørkes over magnesiumsulfat, filtreres og konsentreres til tørr tilstand under et redusert trykk av 20 mm Hg ved 30°C. Resten behandles med 1500 cm^ cykloheksan. Det uoppløselige stoff filtreres av og tørkes. Man oppnår herved 158,5 g 7-/- b- a-tert-butoksykarbonylamino- (1, 3-ditiin-5-yl)-acetamido7-2-karboksy-3-nietyl-8-okso-5-tia-l-azabicyklo- Z"4 . 2 . 07-okt-2-en i form av et urent hvitt pulver.

354,5 g av et produkt oppstått under de ovenfor angitte

3 o

betingelser oppløses i 1770 errr metanol ved 35 C. Man tilsetter 145 cm^ dicykloheksylamin . og deretter 1770 cm^ aceton. Man lar reaksjonsblandingen stå i 90 min. ved 0°C hvoretter de dannede krystaller filtreres av og tørkes under et redusert trykk av 1 mm Hg ved 20°C. 'Man oppnår herved 326,4 g dicykloheksylamin-salt av 7-^D-a-tert-butoksykarbonylamino-(1, 3.-ditiin-5-yl)-acetamido7-2-karboksy-3-metyl-8-okso-5-tia-l-azabicyklo-Z"4 . 2 . 0_7-okt-2-en i form av hvite krystaller.

■En suspensjon av 29,5 g av det ovenfor angitte salt i 300 cm^ vann surgjøres til en pH-verdi på 2 ved tilsetning av 4N saltsyre i nærvær av 3-00 cm^ etylacetat. Man separerer den

organiske fase og ekstraherer ytterligere 2 ganger med til sammen 150 cm-' etylacetat. De organiske faser forenes, vaskes med 150 cm^ av en mettet vannoppløsning av natriumklorid, tørkes over nåtriumsulfat, filtreres og konsentreres til tørr tilstand under et" redusert trykk av 20 mm Hg ved 30°C. Man oppnår herved 21,5 g 7-£D-a-tert-butoksykarbonylamino-(1,3-ditiin-5_y1)_acetamido7-2-karboksy-3_metyl-8-okso-5-tia-1-azabicyklo- D\.2.Q7-okt-2-en i form av et hvitt fast stoff.

IR-spektrum (KBr): karakteristiske bånd

3320 cm ^ (NH-amid og karbamat)

1770 cm<-1>(karbonyl av Ø-laktam)

1700 cm ^ (karbonyl av syre og av karbamat)

l680 cm ^ (karbonyl av amid)

1390' og 1365 cm-1(tert-butyl)

En oppløsning av 20,3 g 7-ZX,-a-tert-butoksykarbonylamino-(l,3-ditiin-5_yl)-acetamido7-2-karboksy-3-metyl-8-okso-5-tia-l-azabicyklo-Z7t. 2 . Q7-okt-2-en i 200 cm-5 trif luoreddik-syre omrøres i 20 min. ved ca. 20°C.'Oppløsningen settes i løpet av 30 min. og under omrøring til 1000 cm-5 etyleter ved

0°C. Den dannede utfelling filtreres av og tørkes under et redusert trykk av 1 mm Hg ved 20°C. Man oppnår 15,7 g trifluoracetat av 7-^D-a-amino-(1,3-ditiin-5-yl)-acetamido7-2-kar-boksy-3-metyl-8-okso-5-tia-l-azabicyklo-£4 .2.07-okt-2-en som oppløses i 750 cm-<5>aceton. Man tilsetter deretter 3,2 cm<5>trietylamin for innstilling av pH-verdien. til 4,8. Den dannede felling filtreres av og vaskes med 400 cm<5>etyleter. Man oppnår herved 10,.6 g 7_£D-a-amino- (1, 3_ditiin-5-yl)-acetamidoJ7-2-karboksy-3-metyl-8-okso-.5-tia-l-azabicyklo-Z^ . 2 . 0_7-okt-2-en i form av et beigefarget fast stoff.

Man oppløser 14,45 g 7-Zb-a-aminoj- (1, 3-ditiih-5-yl) - acetamido7-2-karboksy-3-metyl-8-okso-5-tia-l-azabicyklo-Z~4 . 2 . Oj7-3 - 3 okt-2-en 1 750 cm vann hvoretter man tilsetter 750 cirr acetonitril. Etter 1 time filtreres de dannede krystaller av og tørkes under et redusert trykk av 1 mm Hg ved 20°C. Man oppnår herved 9,8 g 7~.£D-a-amino- (1, 3-ditiin-5_yl)-acetamido7-2-karboksy-3-metyl-8-okso-"5-tia-l-azabicyklo- A . 2 . 0.7-okt-2-en i form av hvite krystaller.

f a7p°= + 137 ~ 2° (c = I, 0,1 N natriumbikarbonat)

Elementæranalyse: Beregnet, % : C 43,39 H 4,42 N 10,84

0 16,52 S 24,83

Funnet, % : C.43,9 H 4,9 N 10,3

016,6 S 23,5 D-a-tert-butoksykarbonylamino-(l,3-ditiin-5-yl)-eddiksyre kan fremstilles på følgende måte. Man koker under tilbake-løp en oppløsning av 212 g D,L-a-tert-butoksykarbonylamino-(1,3_ditiin-5-yl)-eddiksyre og 236 g kinin i 4300 cirr metyletylketon. Etter avkjøling omrøres reaksjonsblandingen i 3 timer. Man separerer ved filtrering 169 g hvite krystaller som fjernes. Filtratet omrøres i 16 timer ved romtemperatur. Etter filtrering isoleres 150 g hvite krystaller.

En suspensjon av 375 g krystaller oppnådd på denne måte

i 3750 cm<5>metyletylketon oppvarmes ved 80°C til fullstendig oppløsning. Den resulterende oppløsning avkjøles hvoretter de dannede krystaller separeres ved filtrering. Man oppnår herved l87 g kininsalt av D-a-tert-butoksykarbonylamino-(1,3-ditiin-5-yl)-eddiksyre i form av hvite krystaller.

Man setter 98,5 g kininsalt av D-a-tert-butoksykarbonylamino- (1,3_ditiin-5-yl)-eddiksyre til en blanding av 2 liter vann og 2 liter etyleter, hvorved pH-verdien holdes på 11 ved tilsetning av 4N natriumhydroksydoppløsning. Etter oppløsning dekanteres vannfasen og surgjøres til pH 1 ved tilsetning av 4N saltsyre i nærvær av 1 liter etyleter. Man dekanterer den organiske fase og ekstraherer med ytterligere 1 liter etyleter. De organiske ekstrakter forenes og tørkes over magnesiumsulfat. Man konsentrerer til tørr tilstand under redusert trykk av 20 mm Hg ved 30°C. Herved oppnås 4l,7 g D-a-tert-butoksykarbonylamino- (1,3-ditiin-5-yl)-eddiksyre i form av en gul olje.

5 g av den således oppnådde syre oppløses i en blanding av

3 3 10 cm isopropyleter og 25 cm cykloheksan under tilbakeløps-koking. Etter avkjøling avfiltreres de dannede krystaller og man oppnår herved 4 g D-a-tert-butoksykarbonylamino-(1,3-ditiin-5~yl)-eddiksyre i form av hvite krystaller med smeltepunkt 110°C (Kofler).

ra7p°= - 121 - 2° (c = 1, . dimetylformamid)

D,L-a-tert-butoksykarbonylamino-(1,3_ditiin-5~y1)-eddiksyre kan fremstilles på følgende måte. En suspensjon av 0,96 g etyl-a-tert-butoksykarbonylamino-(4,5-dihydro-l,3~ditiin-5- yliden)-acetat i 7 cm<5>etanol og 3,3 cm<5>IN natriumhydroksyd-oppløsning omrøres ved 20°C i 40 min. Man konsentrerer deretter til et volum på 5 era<5>under et redusert trykk av 20 mm Hg ved 30°C.Den oppnådde oppløsning surgjøres til pH 2,0 ved tilsetning av IN saltsyre i nærvær av 25 cm<5>etyleter. Den organiske fasen dekanteres og tørkes over natriumsulfat. Oppløsningen filtreres og konsentreres til tørr tilstand under et redusert trykk av 20 mm Hg ved 30°C. Man oppnår herved 0,85 g D,L-a-tert-butoksykarbonylamino- (1,3-ditiin-5-yl)-eddiksyre med føl-gende analyse.

Elementæranalyse: Beregnet, % : C 45,34 H 5,88 N 4,80

0 21,97 S 22,01

Funnet, C44,8 H5,7 N4,7

S 21,5 Etyl-a-tert-butoksykarbonylamino-(4,5-dihydro-l,3_ditiin-5-yliden)-acetatet kan fremstilles på følgende måte. En oppløs-ning av 5,35 g kalium-tert-butylat i 40 cm<5>tetrahydrofuran avkjøles til -70°C. Man tilsetter dråpevis en oppløsning av 9 g 3-tert-butoksykarbony1-4-etoksykarbony1-2-tiokso-l-oksa-7, 9~ ditia-3~azaspiro-Z?4 . 57-dekan i 40 cm<5>tetrahydrof uran. Man om-rører reaksjonsblandingen i 3 timer og tilsetter deretter 2,9 g eddiksyre. Reaksjonsblandingens temperatur får deretter stige til romtemperatur. Tetrahydrofuran dampes av under et redusert trykk av 20 mm Hg ved 30°C. Den oppnådde rest oppløses til 25 cm<5>etylacetat. Den resulterende oppløsning vaskes med 25 cm<5>vann og tørkes deretter over natriumsulfat. Oppløsnin-gen -filtreres og konsentreres til tørr tilstand under et redusert trykk av 20 mm Hg. Man oppnår en fast rest som man behandler med 100 cm 3 petroleter. Fellingen filtreres av og tør-kes under et redusert trykk. Man oppnår derved 5,3 g etyl-a-tert-butoksykarbonylamino- (4,5-dihydro-l,3-ditiin-5_yliden)-acetat i form av et beigefarget fast stoff med et Kofler-smeltepunkt på 154°C.

3-tert-butoksykarbony1-4-etoksykarbony1-2-tiokso-oksa-7-,9-ditia-3_azaspior- D\ .57-dekanet kan fremstilles på følgende måte. En oppløsning av 4,6 g kalium-tert-butylat i 40 cm<5>tetrahydrofuran avkjøles til -70°C. Man tilsetter dråpevis en oppløsning av 5,8 g etylisotiocyanatoacetat og 5,4 g 1,3-ditia-cykloheksan-5-on i 80 cm<5>tetrahydrofuran. Etter 40 min. opp-

varmes oppløsningen til ca. 0°C og man tilsetter en oppløsning av 8,75 g di-tert-butylkarbonat i 10 cm<5>tetrahydrofuran. Den resulterende blanding omrøres i 12 timer ved ca. 20°C hvoretter den konsentreres til tørr tilstand under et redusert trykk av 20 mm Hg ved 30°C. Resten oppløses i 150 cm? metylenklorid.

Man tilsetter 3 cm<5>eddiksyre og separerer det uoppløselige stoff ved filtrering. Filtratet konsentreres til tørr tilstand under et redusert trykk av 20 mm Hg ved 30°C. Resten krystal-liseres i 100 cm 3 etyleter og de oppnådde krystaller filtreres av og tørkes- under et redusert trykk av 1 mm Hg ved 20°C. Man oppnår herved 9,8 g 3_tert-butoksykarbonyl-4-etoksykarbonyl-2-tiokso-l-oksa~7,9_ditia-3-azaspiro-A.57-dekan i form av hvite krystaller med et Kofler-smeltepunkt på 125°C.

Etylisotiocyanatoacetatet kan fremstilles ifølge den fremgangsmåte som er' beskrevet av D. Hoppe og R. Follmann i "Chem. Ber.", 109, 3047 (1976).

Eksempel 3

24 g 7-ZjD-a-tert-butoksykarbonylamino-(1,3-ditiin-5_ yl)-acetamido7-2-karboksy-3-metyi-8-okso-5_tia-l-azabicyklo-A.2. Q_7-okt-2-en som er fremstilt på ovenfor angitte måte opp-løses i 750 cm<5>acetonitril. Man tilsetter 18,7 g p-toluen-sulfonsyre og lar den resulterende blanding reagere ved 20°C

1 20 timer. Man tilsetter deretter 40 cm<5>vann og behandler

med avfargingskull. Oppløsningen filtreres og 17,2 cm 3 trietylamin tilsettes langsomt opp til pH 4,8. Krystallene avfiltreres og tørkes under et redusert trykk av 1 mm Hg ved 20°C. Man oppnår herved 17,7 g 7-ÆD-a-amino-(1, 3_ditiin-5-yl)-acetamidoT"-2-karboksy-3-metyl-8-okso-5_tia-l-azabicyklo-A .2.0_7-okt-2-en. Dette produkt har identisk samme egenskaper som det i eksempel 2 fremstilte produkt.

Eksempel 4

Man oppløser 18,7 g 7-Zt>, L-a-.tert-butoksykarbonyl- • amino-(l,3-ditiin-5-yi)-acetamido7-2-karboksy-3_metyl-8-okso-5-tia-l-azabicyklo-A.2.Q7-okt-2-en, fremstilt som i eksempel 1, i 200 cm<5>tetrahydrofuran hvoretter man tilsetter en oppløs-ning av 7,45 g difenyldiazometan i 50 cm<5>tetrahydrofuran. Re-aks j onsb landingen omrøres i 16 timer ved 20°C og dampes deretter inn til tørr tilstand under- et redusert trykk av 20 mm Hg ved 30°C. Resten opptas i 350 cm<5>etylacetat. Det organiske sjikt vaskes med 100 cm<5>av en mettet vannoppløsning av natriumbikarbonat og tørkes deretter over natriumsulfat. Oppløs-ningen behandles med avfargingskull og filtreres hvoretter den konsentreres til tørr tilstand under et redusert trykk.av 20 mm Hg ved 30°C. Resten renses ved kromatografi på 400 g silisiumdioksyd i en kolonne med en diameter på 4,5 cm og en høyde på 54 cm. Man eluerer med blandinger av etylacetat og cykloheksan inneholdende økende gehalter av etylacetat. Man eluerer således først med 1000 cm<5>av en blanding av etylacetat og cykloheksan i et volumforhold på 10:90, deretter med 1000 cm<5>av en blanding i volumforhold 20:80 og til slutt med 1000 cm av en blanding med volumforhold 25:70 idet man samler fraksjoner på 100 cm<5.>Fraksjonene 35-45 konsentreres til tørr tilstand under et redusert trykk av 20 mm Hg ved 30°C. Man oppnår herved 10 g 7-z^Dj L-a-tert-butoksykarbonylamino-(1, 3-ditiin-5_yl)-ac et amido_7-2-b ens hydryloksy karbonyl- 3-metyl-8-okso-5-tia-l-azabicyklo-A . 2 . 0_7-okt-2-en i form av en hvit marenglignende mas se.

Et urent produkt oppstått ved forestring av 13,6 g 7-ZJ), L-a-ter t-b ut oksykarbony lamino- (1, 3_ di ti in- 5-y 1) -acetamidoJ-2-karboksy-3_metyl-8-okso-5-tia-l-azabicyklo- £k .2.07-okt-2-en med difenyldiazometan kromatograferes på 1200 g silikagel i en kolonne med diameter 6,6 cm og høyde 73 cm. Man eluerer med 1500 cm<5>av en blanding av cykloheksan og etylacetat i et volumforhold på 90:10, deretter med 150Q cm<5>av en blanding av cykloheksan og etylacetat i volumforholdet 85:15, deretter med 1500 cm^av en blanding av cykloheksan og etylacetat i volumforholdet 75:25, deretter med 1500 cm<5>av en blanding av cykloheksan og etylacetat i volumforholdet 70:30 og til slutt med 5000 cm<5>av en blanding.av cykloheksan og etylacetat i volumforholdet 65:35. Man oppsamler eluatfraksjoner med volum på 250 cm<3>.

Fraksjonene 35-37, oppnådde ved eluering med blandingen av cykloheksan og etylacetat i volumforholdet 65:35, gir etter inndamping 1,83 g 7-Æ-a-tert-butoksykarbonylami.no-(1, 3-ditiin-5-yl)-acetamid oj-2-benshydryloksykarbonyl-3-mety1-8-okso-5-tia-1-azabicyklo- D\ .2. 07-okt-2-en. Etter omkrystallisering av dette produkt 165 cm<5>metanol, oppnås 1,19 g produkt i form av hvite krystaller. Fraksjonene 38-40 gir 3,09 g av en blanding

av formene D og L.

Fraksjonene 41-45 gir etter inndamping 3,09 g av et produkt som omkrystalliseres i 150 cm5 etanol. Man oppnår herved 2,01 g 7-/L-a-tert-butoksykarbonylamino-(1,3_ditiin-5-yl)_ ace tamido_7~2-b enshy dry loksy karbonyl-3-met yl-8-oks 0-5-tia-1-azabicyklo-A . 2 . Q_7-okt-2-en i form av hvite krystaller.

Man oppløser 1,09 g 7-Z£>-a-tert-butoksykarbonylamino-(l,3-ditiin-5-y 1) -ac etamido_7-2-b ens hy dry loks y karbonyl-3-me ty 1-8-okso-5-tia-l-azabicyklo-£4 . 2 .0_7-okt-2-en i 1,3 cm<3>anisol og 50 .cm5 trifluoreddiksyre. Den oppnådde oppløsning omrøres i 15 min. ved 20°C og konsentreres deretter til tørr tilstand under et redusert trykk av 0,5 mm Hg ved 30°C. Resten oppløses i 5 cm 3 etylacetat. Den oppnådde oppløsning helles i 40 cirr 3 isopropyleter. Den dannede utfelling separeres ved filtrering. Man oppnår herved 0,94 g av et hvitt pulver som oppløses i 20 cm<5>vann og 10 cm 0,1N saltsyre. Vannfasen vaskes 2 ganger med 15 cirr 3 etylacetat og behandles deretter under omrøring med 15 cirr<3>fuktig ionebytter "Amberlite IR-45" i OH -form inntil pH-verdien er stabilisert på 5,0. Ionebytteren fjernes deretter ved filtrering og filtratet lyofiliseres. Man oppnår 0,33 g 7- £b- a-amino- (l,3-ditiin-5-yl) -acetamido_7-2-karboksy-3-metyl-8-okso-5-tia-l-azabicyklo-ZT4 . 2 . 07-okt-2-en .

CoJ^ ° = + 128 - 4° (c = 1,020, vann)

Elementæranalyse: Beregnet, % : C 43,39 H 4,42 N 10,84

0 16,52 S 24,83

Funnet, % : C 39,7 H 3,5 N 10,0

S 22,1 NMR-spektrum: 6 (ppm) (CF^COOH) : 2,40 (s, CH^i 3-stilling, 3H); 3,46

(s, -CH2-S- cefenv 2H); 3,55 (s,-'CH2-S- ditiin, 2H); 4,06 (s, -S-CH -S-, 2H); 5,15 (s, -CH-CO, 1H); 5,26 (d, J = 5Hz,

N<

H i 6-stilling); 5,80 (d, J = 5Hz, H i 7-stilling); 7,06 (s, -CH=, 1H).

Dette produkt har en minste bakteriostatisk konsentrasjon på 2 yg/cm<5>mot Staphylococcus■aureus Smith og en minste bakteriostatisk konsentrasjon på 15 yg/cm<5>mot Staphylococcus aureus MB 9, Escherichia coli og Klebsiella pneumoniae.

Når man arbeider på samme måte som ovenfor, og går ut fra 1, 99 g 7-.Z~L-a-tert-butoksykarbony lamino- (1, 3-ditiin-5~yl)-acetamido7-2-benshydryloksykarbonyl-3-metyl-8-okso-5-tia-l-azabicyklo-/T4 . 2 . 0_7-okt-2-en, oppnår man 0,57 g 7-£T>a-amino-(1,3~ditiin-5-yl)-acetamido7-2-karboksy-3_metyl-8-okso-5-tia-l-azabicyklo-Z?4 . 2. Q7-okt-2-en.

CoJ^ ° =<1>2° (c, 1,012, Elementæranalyse: Beregnet, % : C 43,39 H 4,42 N 10,84

0 16,52 S 24,83

Funnet, % : C 42,7 H 3,8 N 11,1

S 24,5 NMR-spektrum: 6 (ppm) (CF^COOH); 2,43 (s, CH^- i 3-stilling, 3H), 3,43

(s, -CH2-S- cefem, 2H); 3,55 (s, -CHg-S- ditiin, 2H), 4,06 (s, -S-CH?-S-, 2H); 5,13 (s, -CH-CO-, 1H); 5,26 (d, J = 5Hz,

N<

H i 6,stilling), 5,70 (d, J = 5Hz, H i 7-stilling); 7,03

(s, -CH=, 1H).

Eksempel 5

Til en oppløsning på 10 g D-a-tert-butoksykarbonylamino- (1,3_ditiin-5~yl)-eddiksyre i 100 cm<5>dimetylformamid setter man 11,3 g 7-amino-3_metyl-8-okso-2-pivaolyloksy-metoksykarbonyl-5-tia-l-azabicyklo-£4 . 2 . 0_7-okt-2-en og 7,1 g dicykloheksylkarbodiimid. Reaksjonsblandingen omrøres i 2 timer og filtreres deretter. Filtratet fortynnes med 300 cm<5>etylacetat og 500 cm<5>vann. Den organiske fase dekanteres, vaskes med 100 cm<3>vann og deretter med 100 cm<3>av en mettet vannopp-løsning av natriumbikarbonat, tørkes' over natriumsulfat og filtreres i nærvær av avfargingskull. Man konsentrerer deretter til tørr tilstand under et redusert trykk av 20 mm Hg ved 30°C. Resten kromatograferes på 150 g silisiumdioksyd i en kolonne med diameter 3,5 cm og høyde 35 cm. Man eluerer med blandinger av etylacetat og cykloheksan inneholdende økende gehalter av etylacetat. Man eluerer således først med 500 cm<5>av en blanding av etylacetat og cykloheksan i volumforholdet 10:90, deretter med 500 cm<3>av en blanding med volumforholdet 20:80, deretter med 500 cm3 av en blanding med volumforholdet 30:70 og til slutt med 2000 cm<5>av en blanding med volumforholdet 40:60. Man samler opp eluatfraksjoner med volumer på 200 cm<5>. Fraksjonene 14-21 konsentreres til tørr tilstand under et redu sert trykk av 20 mm Hg ved 30°C. Man oppnår herved 8 g 7-ZT)-a-tert-butoksykarbonylamino-(1,3-ditiin-5-yl)-acetamido7-3-metyl-8-oks o-2-pi valoy loks yrne t oksykarbony 1-5- ti a-l.-azab i cy klo- A . 2 . 07-okt-2-en i form av en orangefarget marenglignende masse.

Det således fremstilte produkt oppløses i 50 cm<3>trifluoreddiksyre og den resulterende oppløsning omrøres ved 20°C i 15 min. Oppløsningen konsentreres deretter til tørr tilstand under et redusert trykk av 0,5 mm Hg ved 30°C. Resten løses opp i 200 cm 3 vann og den resulterende oppløsning vaskes med 1■ 00 cm<J>^ eter. Vannfasen omrøres med 250 cm<3>etylacetat. Man tilsetter under omrøring 100 cm<5>av en mettet vannoppløsning av natriumbikarbonat. Den organiske fase dekanteres, tørkes over natrium-sulf at og filtreres i nærvær av avfargingskull. Man konsentrerer til 15 cm<5>under et redusert trykk av 20 mm Hg ved 30°C. Man tilsetter 100 cm<3>etyleter og deretter tilsetter man dråpevis 10 cm<5>av en 2,7N eteroppløsning av vannfri saltsyre. Man omrører i 10 min. og filtrerer deretter av fellingen. Man oppnår herved 4,8 g hydroklorid av 7_/D-a-amino-(1,3-ditiin-5-y1)-acetamidoJ-3-mety1-2-pivaloyloksyrnetoksykarbony1-8-oks0-5-tia-l-azabicyklo-Z7l. 2 .0_7-okt-2-en i form av et hvitt pulver.

Elementæranalyse: Beregnet, % : C 44,64 H 5,24 Cl 6,59

N 7,81 0 17,84 S17,88 Funnet, % : C45,3 H5,4 Cl 6,7

N 7,9 S 17,7 7-amino-3-mety1-8-oks0-2-pivaloyloksyrnetoksykarbony1-5-tia-l-azabicyklo-A . 2 . 0_7-okt-2-en kan fremstilles ifølge den fremgangsmåte som er beskrevet i det tyske patentskrift 1.951.012.

Oppfinnelsen angår også terapeutisk anvendbare farma-søytiske preparater som inneholder, minst en forbindelse med formelen I som aktiv bestanddel i kombinasjon med ett eller flere farmasøytisk akseptable fortynningsmidler eller hjelpestoffer'. Disse preparatene kan anvendes oralt, parenteralt eller rektalt.

Som faste preparater for oralinngivelse kan man anvende

tabletter, piller, pulvere eller granulater. I disse preparater er den aktive forbindelse ifølge oppfinnelsen blandet med ett eller flere inerte fortynningsmidler eller hjelpestoffer slik som sakarose, laktose eller stivelse. Disse preparater kan også inneholde andre stoffer enn fortynningsmidler, f.eks. smøremidler slik som magnesiumstearat.

Som flytende preparater for oralinngivelse kan man anvende farmasøytiske godtagbare emulsjoner, oppløsninger, suspensjoner, siruper eller eleksirer inneholdende inerte fortynningsmidler slik som vann eller parafinolje. Disse preparater kan også inneholde andre stoffer enn fortynningsmidlene, f.eks. fuktemidler, søtningsmidler eller aromatiseringsmidler.

Som preparater for parenteral inngivelse kan man anvende sterile oppløsninger (både vannholdige og ikke vannholdige),

suspensjoner eller emulsjoner. Som oppløsningsmiddel eller bærer kan man anvende propylenglykol, polyetylenglykol, vege-tabilske oljer, spesielt olivenolje, og injiserbare organiske estere, f.eks. etyloleat. Disse preparater kan også inneholde hjelpestoffer, spesielt fuktemidler, emulgeringsmidler eller

dispergeringsmidler. Steriliseringen kan gjennomføres på flere måter, f.eks. ved hjelp av et bakteriologisk filter, ved tilsetning av steriliserende stoffer til preparatet, ved bestrå-ling eller ved oppvarming. Man kan også fremstille faste sterile preparater som ved anvendelsestilfelle kan oppløses i

sterilt vann eller et annet injiserbart sterilt medium.

Preparater for rektalinngivelse utgjøres av suppositorier som foruten den aktive bestanddel kan inneholde drøyemiddel slik som kakaosmør eller suppositorievoks.

Innen humanterapien kan preparatene ifølge oppfinnelsen spesielt anvendes for behandlinger av infeksjoner av bakterie-opprinnelse.

Legen bestemmer vanligvis hvilken dose som skal anvendes med hensyn til pasientens alder og kroppsvekt, infeksjons-grad og andre faktorer. Dosene er vanligvis mellom 1 og 12 g aktiv forbindelse pr. døgn ved oral, intramuskulær eller intra-venøs inngivelse til voksne mennesker.

I dedenfor følgende ikke begrensende eksempler illu-strerer preparatene ifølge oppfinnelsen.

Eksempel A

Man fremstiller en injiserbar oppløsning med følgende sammensetning: 7-Z~D-a-amino- (l,3_ditiin-5-yl)-acetamido_7-2-karboksy-3~niety l-8-okso-5-tia-l-azabicyk-

Eksempel B

Man fremstiller på vanlig måte tabletter med følgende

sammensetning:

Claims (1)

1. Fremgangsmåte for fremstilling av et cefalosporinderivat med den generelle formel

   der R angir en karboksygruppe eller en gruppe med den generelle formel

   der R^ angir et hydrogenatom eller en alkylgruppe inneholdende 1-4 karbonatomer og R^ angir en rett eller forgrenet alkyl- gruppe inneholdende 1-4 karbonatomer eller en cykloheksyIgruppe hvorved gruppen

   er lett å fjerne på enzymatisk måte; i form av diastereoisomerer eller blandinger derav, addisjonssalter derav med syrer og eventuelt metallsalter derav og addisjonssalter derav med nitrogenholdige organiske baser, karakterisert ved at(a) en syre med formelen

   som foreligger i racemisk form eller i optisk aktiv form bg hvis aminogruppe er beskyttet på forhånd, eller et reaktivt derivat av denne syre, omsettes med et cefalosporin med den generelle' formel:

   der R har den ovenfor angitte betydning, hvorved syregruppen eventuelt er beskyttet, hvoretter beskyttelsesgruppen fjernes og det, oppnådde produkt eventuelt omdannes til et addisjonssalt med en syre eller, når R angir en karboksygruppe, til et metallsalt eller et addisjonssalt med en nitrogenholdig organisk base, eller at(b) en forbindelse med formel I der R angir en karboksygruppe og hvis aminogruppe er beskyttet på forhånd, forestres ifølge kjente metoder for fremstilling av en ester ved å gå ut fra en syre uten at resten av molekylene påvirkes for dannelse av en forbindelse med formel I der R angir en gruppe med formelen

   der R^ og R2 har den ovenfor angitte betydning, hvoretter beskyttelsesgruppen for aminogruppen fjernes og det oppnådde produkt eventuelt omdannes til et addisjonssalt med en syre, hvoretter en fremstilt forbindelse med formelen I, hvilken inneholder en blanding av diastereoisomerer og hvis amino- og syregrupper eventuelt er beskyttet, eventuelt oppdeles i sine diastereoisomerer ved tillempning av fysikalske metoder, hvoretter beskyttelsesgruppene fjernes og hver oppnådd diastereo-isomer eventuelt omdannes til et addisjonssalt med en syre eller når R angir en karboksygruppe, til et metallsalt eller til et addisjonssalt med en nitrogenholdig organisk'base.