NO760414L - - Google Patents

Info

Publication number
NO760414L
NO760414L NO760414A NO760414A NO760414L NO 760414 L NO760414 L NO 760414L NO 760414 A NO760414 A NO 760414A NO 760414 A NO760414 A NO 760414A NO 760414 L NO760414 L NO 760414L
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
microorganisms
growth medium
hydrocarbon
liquid growth
utilizing
Prior art date
Application number
NO760414A
Other languages
English (en)
Inventor
B Khosrovi
H Topiwala
Original Assignee
Shell Int Research
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shell Int Research filed Critical Shell Int Research
Publication of NO760414L publication Critical patent/NO760414L/no

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/32Processes using, or culture media containing, lower alkanols, i.e. C1 to C6
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/26Processes using, or culture media containing, hydrocarbons

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

"Fremgangsmåte for fremstilling
av mikroorganismer"..
Denne oppfinnelse angår en fremgangsmåte for fremstilling av mikroorganismer. Det er kjent mange mikroorganismer som kan utnytte hydrokarboner eller visse derivater derav som karbon- og/ eller energikilde. Den tørrede biomasse som kan oppnåes ved dyrkning av slike mikroorganismer, ofte betegnet som én-celle protein, er rik på protein og kan anvendes som et mulig forstoff 'eller for-stoffs-supplement for mennesker og dyr.
En fremgangsmåte for dyrkning av hydrokarbon-utnyttende mikroorganismer omfatter vanligvis vekst av slike organismer under aerobe betingelser i et vandig vekstmedium inneholdende i tillegg til karbonkilden, forskjellige næringsstoffer så som assimilerbare kilder for nitrogen og vesentlige metallsalter. En slik fremgangsmåte kan utføres satsvis, halvkontinuerlig, men fortrinnsvis i en kontinuerlig strømmende kultur. For kontinuerlig strøm-mende kultur kan mikroorganismene dyrkes i ethvert egnet fermenteringskar. Mikroorganisme-cellene kan oppsamles fra vekstmediet ved en hvilken som helst av de standard metoder som vanligvis anvendes. Ved en kontinuerlig strømmende kultur uttappes flytende vekstmedium regelmessig fra fermenteringskaret, cellene skilles fra det flytende medium, og det flytende medium kan derefter helt eller delvis resirkuleres til fermenteringskaret. De næringsstoffer som efter fraskillelse av cellemassen fremdeles er tilstede i det flytende vekstmedium, resirkuleres således og anvendes sammen med væsken på ny ved dyrkningstrinnet. Friske næringsstoffer kan selvsagt settes til det resirkulerte medium eller kan alternativt settes separat til fermenteringskaret.
Det er et formål ved foreliggende oppfinnelse å tilveie-bringe en forbedret fremgangsmåte for kontinuerlig dyrkning av
mikroorganismer.
Oppfinnelsen tilveiebringer således en fremgangsmåte for fremstilling.av mikroorganismer, som omfatter kontinuerlig dyrkning av én eller flere hydrokarbon-utnyttende mikroorganismer, eventuelt sammen med én eller flere ikke-hydrokarbon-utnyttende mikroorganismer, som er i stand til å metabolisere organiske stoffer som dannes av den(de) hydrokarbon-utnyttende mikroorganisme (r), under aerobe betingelser i et flytende vekstmedium som inneholder assimilerbare kilder for nitrogen og vesentlige metallsalter i nærvær av et hydrokarbon,'uttappning av flytende vekstmedium inneholdende mikroorganismer fra den voksende kultur, ffaskillelse av mikroorganismer fra det avtappende flytende vekstmedium og resirkulering av minst noe av det avtappende flytende vekstmedium til den voksende kultur, ved hvilken fremgangsmåte det'avtappede flytende vekstmedium avkjøles til en temperatur i området fra -5 til 20°C før eller under fraskillelsen av mikroorganismene.
Betegnelsen "hydrokarbon" som her anvendt, skal forståes
å omfatte ikke bare hydrokarboner, men også oksygenerte derivater derav.
Betegnelsen "mikroorganisme" er her anvendt i vid betyd-ning for å omfatte ikke bare bakterier, men også gjærsopper, fil-amentaktige sopper, actinomyceter og protozoa.
Hovedfordelen ved fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen er
at man unngår opphopning av veksthemmende materiale under separer-ingstrinnet. Det viste set at uten avkjøling av det avtappede flytende vekstmedium, kan det dannes materialer i dette medium som ved returnering til vekstkulturen vil hemme veksten av mikroorganismene i kulturen og kan til slutt ødelegg hele kulturen. En ytterligere fordel ved fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen er av-kjøling av det avtappede flytende vekstmedium reduserer tendensen til forurensning av separerings- og resirkuleringsledningene av uønskede anaerobe organismer.
Fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen er særlig nyttig ved fremgangsmåter som omfatter dyrkning av hydrokarbon-utnyttende bakterier, eventuelt i nærvær av ikke-hydrokarbon-utnyttende bakterier, f.eks. fremgangsmåter som.fører til dannelse av mikrobio-logisk protein fra metanol, metan eller natrumgass. Slike fremgangsmåter er f.eks. beskrevet i belgisk patent 810.941 og neder- landsk patentansøkning 74.16.644. Ved disse fremgangsmåter kan næringsstoffene tilføres i konsentrerte vandige strømmer som muliggjøre resirkulering av opptil 90% av vannet. Karbonkilden kan tilføres som en ren væské, en konsentrert oppløsning i vann eller som én gass.
Det avtappede flytende vekstmedium avkjøles fortrinnsvis til en temperatur i området fra -5 til 15°C og særlig foretrukket i området fra. -5 til 10°C.
Det flytende vekstmedium inneholder en nitrogenholdig for-bindelse som kan være ammoniakk, urinstoff, et ammoniumsalt, f.eks. ammoniumsulfat eller ammoniumklorid, eller et nitrat, f.eks. et alkalimetallnitrat. Nitrogen er hensiktsmessig tilstede i en konsentrasjon fra 3 til 60 g/l.
Andre elementer som kan være tilstede i mediet, omfatter fosfor, svovel, magnesium og jern. Fosfor kan være tilstede i form av et eller flere fosfater, f.eks. K2HP04, KH2P04, Na2HP04eller (NH^^HPO^, eller fosforsyre, og er fortrinnsvis tilstede i en konsentrasjon fra 3 til 20 g/l. Svovelkilden kan svovelsyre eller et sulfat, f.eks. (NH^^SO^, og er hensiktsmessig tilstede i en konsentrasjon fra 0,5' til 10,0 g svovel/l.. De to metaller tilveiebringes hensiktsmessig som et av deres salter, f.eks. MgS04.7H20 i en konsentrasjon fra 0,2 til 20 g/l og FeCl3.6H20 i en konsentrasjon fra 0,01 til 3 g/l.
Mediet kan også inneholde spormengder av andre elementer i forma av egnede salter, f.eks. kalsium, mangan, sink, kobolt, molybden og bor.
Fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen utføres i en kontinuerlig strømmende kultur, hvor mikroorganismene kan dyrkes i ethvert egnet fermenteringskar, f.eks. et fermenteringskar utstyrt med ledeplater og som omrøres, eller er i form av et dusj-tårh, som er forsynt med enten indre avkjøling eller en utvendig re-sirkuleringskjøle-spiral og med tilstrekkelig resirkulerings-ledninger. Hvis metan eller naturgass anvendes som karbonkilde, bringes en gassblanding inneholdende metan og oksygen og eventuelt karbondioksyd eller andre gasser i kontakt med mediet, fortrinnsvis ved å bli boblet kontinuerling gjennom et dusj-kar ved karets bunn. Oksygenkilden for kulturen kan være luft, oksygen eller oksygen-anriket luft. Brukt gass fjernes fra karets topp. Brukt gass kan resirkuleres enten gjennom en ytre spiral eller innvendig ved hjelp av et gassfremdrigende' skovelhjul. Gass-strømmene og resirkuleringen bør ordnes slik at man får maksimal vekst av organismene og maksimal utnyttélse av metan.
Kulturens temperatur holdes vanligvis mellom 30 og 60°C og fortrinnsvis mellom 40 og 50°C. Kulturens pH reguleres til én verdi mellom 6,0 og 8,0 og fortrinnsvis mellom 6,4 og 7,4 ved pas-sende tilsetning av et alkali, f.eks. NaOH, KOH, NH^OH og/eller en syre, f.eks. I^SO^eller H^PO^.
Mikroorganisme-cellene kan oppsamles fra det flytende vekstmedium ved en hvilken som helst av de standard metoder som vanligvis anvendes, f.eks. flokkulering, sedimentering og/eller utfelling, fulgt av sentrifugering og/eller filtrering. Derefter tørres biomassen f.eks. ved frysetørring, flash-tørring og/eller forstøvningstørring og kan anvendes i denne form som et protein-næringsstoff eller næringsstoff-supplement for mennesker eller dyr. De følgende eksempler skal tjene til å illustrere oppfinnelsen ytterligere.
EKSEMPEL I
A. En blandet kultur av mikroorganismer (inneholdende en metanol-utnyttende bakterie og fire ikke-metanol-utnyttende bakterier) betegnet JMS 72 og fullstendig beskrevet i belgisk patent 810.941, ble dyrket i et kontinuerlig fermenteringskar (volum: 2,6 liter) under sterile betingelser ved anvendelse av det følgende definerte medium.
pH ble regulert ved tilsetning' av en ekvimolar blanding av NaOh og KOH. Før resirkuleringen begynte ble denne konsentrerte strøm ført inn i fermenteringskaret blandet med vann. De betingelser som ga stabil tilstand, var som følger:
Den utstrømmende blanding fra fermenteringskaret (dvs. flytende vekstmedium pluss celler) ble ført til en steril sentrifuge (Sharples: Type 1AP) som ble drevet med en hastighet på 30.000 omdreininger/min., fra hvilken det ble tatt ut en klar vandig fase. Da stabil tilstand var oppnådd i fermenteringskaret, ble vannstrømmen erstattet med den vandige fase fra sentrifugen og tilført med samme hastighet. Resirkuleringsforholdet R(dvs. strøm av resirkulert vann : strøm av næringsstoffer) var 480 : 96 = 5,0. Efter 90 minutter viste hemning seg tydelig ved opphopning av metanol i fermenreringskaret og en redusert respirasjonsgrad. Efter 3 timer hadde respirasjonen stoppet, og kulturen begynte
å ødelegges.
B. Forsøket i eksempel IA ble gjentatt med den forskjell at den utstrømmende væske og sentrifugen ble avkjølt til 0°C. Resirkuleringen ble holdt ved R = 5 i 12 timer da sentrifugens be-holder hadde nådd sin kapasitet og den utstrømmende væske fra sentrifugen ikke lenger var klar. I løpet av denne tid kunne det ikke iakttas noen opphopning av metanol eller forandring i res-piras jonsgraden .
EKSEMPEL II
Den blandede kultur JMS 72 ble dyrket i et kontinuerling fermenteringskar (volum = 2,1 1) under de følgende betingelser med stabil tilstand:
Strømningshastigheter:
Konsentrert saltsammensetning (i mmol):
H3P04- 400 ; MgS04- 60 ; K2S°4"80 ; Na2S04~ 80 FeS04 - 8 ; CaCl2- 6 : ZnS04- 2 ; CuS04- 0,5 ;
Kl - 0,5 ; CoCl2- 0,5 ; H3BC>3- 0,6 ; Na2Mo04- 0,5 ;
Kl - 0,5 .
Den utstrømmende væske fra fermenteringskaret ble avkjølt til 0°C og ført til en steril sentrifuge avkjølt til 8°C. Den klare, vandige fase fra sentrifugen ble resirkulert til fermenteringskaret i en mengde på 450 ml/t istedenfor vannstrømmen for å gi et resirkuleringsforhold på 450/48,56 =9,27. Disse betingelser ble holdt i 30 timer uten at det kunnde iakttas noen forandring i respirasjonsgraden eller celletettheten.

Claims (4)

1. Fremgangsmåte for fremstilling av mikroorganismer, som omfatter kontinuerlig dyrkning av én eller flere hydrokarbon-utnyttende mikroorganismer under aerobe betingelser i et flytende vekstmedium inneholdende assimilerbare kilder for nitrogen og vesentliae metallsalter i nærvær av et hydrokarbon, avtapning fra den voksende kultur av flytende vekstmedium inneholdende mikroorganismer, fraskillelse av mikroorganismer fra det avtappede flytende vekstmedium og resirkulering av minst noe av det avtappede flytende vekstmedium til den voksende kultur, ved hvilken fremgangsmåte det avtappede flytende vekstmedium avkjøles til en temperatur i området fra -5 til 20°C før eller under fraskillelsen av mikroorganismene.
2. Fremgangsmåte som angitt i krav 1, karakterisert ved at den(de) hydrokarbonutnyttende mikroorganisme(r) dyrkes i nærvær av én eller flere ikke-hydrokarbon-utnyttende mikroorganismer som kan metabolisere organiske stoffer som dannes av den(de) hydrokarbonutnyttende mikroorganisme(r).
3. Fremgangsmåte som angitt i krav 1 eller 2, karakterisert ved at dyrkningen av mikroorganismene utføres ved en temperatur i området 30 til 60°C.
4. Fremgangsmåte som angitt i et av kravene 1 til 3, karakterisert ved at det avtappede flytende vekstmedium avkjøles til en temperatur i området fra -5 til 10°C.
NO760414A 1975-02-11 1976-02-09 NO760414L (no)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB5747/75A GB1528011A (en) 1975-02-11 1975-02-11 Continuous culture of micro-organisms

Publications (1)

Publication Number Publication Date
NO760414L true NO760414L (no) 1976-08-12

Family

ID=9801902

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO760414A NO760414L (no) 1975-02-11 1976-02-09

Country Status (9)

Country Link
BE (1) BE838312A (no)
CA (1) CA1059049A (no)
DE (1) DE2604993A1 (no)
FR (1) FR2300803A1 (no)
GB (1) GB1528011A (no)
IE (1) IE42634B1 (no)
IT (1) IT1055875B (no)
NL (1) NL7601314A (no)
NO (1) NO760414L (no)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2492403A1 (fr) * 1980-10-20 1982-04-23 Bel Fromageries Procede de culture de microorganismes, en particulier de levures, sur du lactoserum avec une association de souches judicieusement choisies et des mutants specifiques d'une souche

Also Published As

Publication number Publication date
NL7601314A (nl) 1976-08-13
IE42634L (en) 1976-08-11
GB1528011A (en) 1978-10-11
DE2604993A1 (de) 1976-08-19
FR2300803A1 (fr) 1976-09-10
IE42634B1 (en) 1980-09-24
FR2300803B1 (no) 1978-11-10
IT1055875B (it) 1982-01-11
BE838312A (nl) 1976-08-06
CA1059049A (en) 1979-07-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA1294235C (en) Microbiological desulfurization of gases
WO2008100782A2 (en) Process for the preparation of coenzyme qlo by culturing rhodobacter sphaeroides in a defined medium
EP0015669B1 (en) Microbiological process for the production of poly (beta-hydroxybutyric acid) and micro-organisms for use therein
BR112021009004A2 (pt) composição de meio de crescimento, processo para preparação da mesma e métodos para produção de biomassa e de produtos de valor agregado
JPS60199392A (ja) ポリ−d(−)−3−ヒドロキシ酪酸のバイオテクノロジ−による製造方法
EP0218958A2 (en) Microbiological desulfurization of gases
US3996105A (en) Mixed methane-utilizing cultures for production of micro-organisms
SU421199A3 (ru) Способ получения биомассы
NO760414L (no)
US4743451A (en) Alcohol production
CA1265078A (en) Continuous process for ethanol production by bacterial fermentation
SU603348A3 (ru) Способ получени биомассы микроорганизмов
US3986933A (en) Method of preparing yeasts enriched in l-lysine and capable of excreting organic acids
JP3224992B2 (ja) 水素生産光合成微生物及びこれを用いた水素の生産方法
CA1058105A (en) Culture of methylococcus on methane gas
SU671738A3 (ru) Способ получени биомассы микроорганизмов
JPS59500253A (ja) 無機ピロリン酸塩による細菌生育刺激
RU2768401C1 (ru) Способ культивирования аэробных метанассимилирующих микроорганизмов
RU2755539C1 (ru) Способ получения биомассы метанокисляющих микроорганизмов и линия для ее производства
JPH06277081A (ja) メタン生成細菌による5−アミノレブリン酸の生産方法
SU908085A1 (ru) Способ получени биомассы
JPH0198472A (ja) 酢酸の製造方法
JPH03143397A (ja) β―ヒドロキシ酪酸およびその重合体の製造方法
SU908084A2 (ru) Способ выращивани микроорганизмов
SU452236A1 (ru) Способ выращивани микроорганизмов