NO340878B1 - Benzamidforbindelser som er anvendbare som histon-deacetylasehemmere - Google Patents

Benzamidforbindelser som er anvendbare som histon-deacetylasehemmere Download PDF

Info

Publication number
NO340878B1
NO340878B1 NO20081582A NO20081582A NO340878B1 NO 340878 B1 NO340878 B1 NO 340878B1 NO 20081582 A NO20081582 A NO 20081582A NO 20081582 A NO20081582 A NO 20081582A NO 340878 B1 NO340878 B1 NO 340878B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
compound
pharmaceutically acceptable
acceptable salt
formula
compound according
Prior art date
Application number
NO20081582A
Other languages
English (en)
Other versions
NO20081582L (no
Inventor
Elaine Sophie Elizabeth Stokes
Andrew Turner
David Michael Andrews
Michael James Waring
Original Assignee
Astrazeneca Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Astrazeneca Ab filed Critical Astrazeneca Ab
Publication of NO20081582L publication Critical patent/NO20081582L/no
Publication of NO340878B1 publication Critical patent/NO340878B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/454—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pimozide, domperidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics

Description

BENZAMIDFORBINDELSER SOM ER ANVENDBARE SOM HISTON-DEACETYLASEHEMMERE.
Foreliggende oppfinnelse angår visse nye benzamidforbindelser, eller far-masøytisk akseptable salter derav, som er kraftige hemmere av enzymet histon-deacetylase (HDAC). Oppfinnelsen angår også fremgangsmåter for fremstilling av disse nye benzamidforbindelser, farmasøytiske preparater inneholdende dem, og anvendelse av dem i terapeutiske metoder, for eksempel ved fremstilling av medikamenter til å hemme HDAC hos et varmblodig dyr, så som mennesket.
HDAC-aktivitet er blitt forbundet med flere sykdomstilstander, så som kreft (Marks et al., Nature Reviews, 1, 194-202, (2001)), cystisk fibrose (Li, S. et al, J. Biol. Chem., 274, 7803-7815, (1999)), Huntingdons chorea (Steffan, J. S. et al., Nature, 413, 739-743, (2001)) og sigdcelle-anemi (Gabbianelli, M. et al., Blood, 95, 3555-3561, (2000)). Følgelig omfatter oppfinnelsen også metoder for behandling av en hvilken som helst av ovennevnte sykdommer, ved anvendelse av benz-amidforbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse, så vel som anvendelse av disse benzamidforbindelser ved fremstilling av et medikament for behandling av disse sykdomstilstander.
I den eukaryote cellen blir DNA rutinemessig pakket sammen for å forhindre tilgjengelighet til transkripsjonsfaktoren. Når cellen blir aktivert blir dette sammen-pakkede DNA gjort tilgjengelig for DNA-bindingsproteiner, og tillater derved induk-sjon av gentranskripsjon (Beato, M., J. Med. Chem., 74, 711-724 (1996); Wolffe, A. P., Nature, 387, 16-17 (1997)). Nukleært DNA går sammen med nukleære proteiner kjent som histoner, og danner et kompleks betegnet kromatin. Kjerne-histonene, betegnet H2A, H2B, H3 og H4, er omgitt av 146 basepar i DNA, og danner den fundamentale enheten kromatin, som er kjent som nukleosomet. De N-terminale halene til kjerne-histonene inneholder lysinrester som er seter for post-transkripsjonell acetylering. Acetylering av den terminale aminogruppen på lysin-sidekjeden nøytraliserer den muligheten som sidekjeden har til å danne en positiv ladning, og er antatt å innvirke på kromatinstrukturen.
Histon-deacetylaser (HDACer) er sink-inneholdende enzymer som kataly-serer fjerning av acetylgrupper fra s-amino-termini på lysinrester samlet nær amino-terminus på nukleosomale histoner. HDACer kan deles opp i to klasser, der de første (HDAC 1, 2, 3 og 8) er representert ved gjær-Rpd3-lignende proteiner, og der de andre (HDAC 4, 5, 6, 7, 9 og 10) er representert ved gjær-Hda1 -lignende proteiner. Den reversible prosessen med acetylering er kjent for å være viktig i transkripsjonen regulering og cellecyklus-progresjon. I tillegg er HDAC-deregulering blitt forbundet med mange krefttyper, og HDAC-hemmere, så som Trichostatin A (et naturlig produkt isolert fra Streptomyæs hygroscopicus), er blitt vist å oppvise signifikant celleveksthemning og anti-tumoreffekter (Meinke, P. T., Current Medicinal Chemistry, 8, 211-235 (2001)). Yoshida et al, (Exper. Cell Res., 177, 122-131 (1988)) lærer at Trichostatin A forårsaker stans av rotte-fibroblaster i G1- og G2-fasene av cellecyklusen, noe som derved impliserer rollen som HDAC spiller i regulering av cellecyklusen. Videre er Trichostatin A blitt vist å fremkalle terminal differensiering, hemme cellevekst og forhindre dannelse av tumorer hos mus(Finnin et al., Nature, 401, 188-193(1999)).
Det er kjent fra de publiserte internasjonale patentsøknader nr. WO 03/087057 og WO 03/092686 at visse benzamid-derivater er hemmere av HDAC. Én spesiell forbindelse beskrevet i WO 03/087057, er N-(2-aminofenyl)-4-[1-(pyrid-2-ylmetyl)piperidin-4-yl]benzamid [1] (idet strukturen til dette er vist nedenfor).
Det er nå funnet at visse benzamid-derivater som har en eventuelt substituert pyrazolgruppe istedenfor pyridylgruppen, er kraftige hemmere av HDAC. I tillegg er spesielle forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse også funnet å ha andre fordelaktige farmasøytiske egenskaper, omfattende fordelaktig celle- eller in wVo-effekt, fordelaktige DMPK-egenskaper (for eksempel en fordelaktig biotil-gjengelighetsprofil og/eller fordelaktige fritt-plasmanivåer og/eller en fordelaktig halveringstid og/eller et fordelaktig fordelingsvolum), så vel som god eller forbedret oppløselighet. I tillegg viser benzamid-derivatene ifølge foreliggende oppfinnelse generelt en spesielt lav aktivitet i et hERG-kodet kaliumkanal-hemningsforsøk, som er en indikator på uønskede og alvorlige kardiovaskulære bivirkninger i klinkk.
Ifølge foreliggende oppfinnelse tilveiebringes det en forbindelse med formel
(IA)
hvor R<2>, R<3>og R<5>er hver uavhengig valgt fra hydrogen eller metyl; eller et farma-søytisk akseptabelt salt derav.
Det skal forstås at visse forbindelser med formel (IA) definert ovenfor, kan oppvise fenomenet tautomerisme. Det skal forstås at foreliggende oppfinnelse, i sin defi-nisjon, omfatter en hvilken som helst slik tautomerform eller blanding derav som har ovennevnte aktivitet, og ikke er ment å være begrenset kun til én enkelt tautomer form anvendt i tegningene av formlene eller nevnt i eksemplene.
Som anvendt her, angir betegnelsen "alkyl" lineære eller forgrenede kjeder. Betegnelsen "cykloalkyl" omfatter ringstrukturer, men kan i tillegg omfatte kjeder i form av cykloalkylalkylgrupper. Analogt omfatter betegnelsene "alkoksy" og "cyk-loalkoksy" alkyl, cykloalkyl eller cykloalkylalkylgrupper bundet gjennom et oksy-genatom.
Det vil forstås at ringatomene i pyrazoldelen av molekylet med formel (IA) generelt er nummerert som vist i diagrammet ovenfor. Imidlertid er molekylet ut-satt for tautomerisme i tilfellet hvor R<2>er hydrogen, hvor byttingen av hydrogen-grupper fra ett nitrogen i pyrazolringen til det andre betyr at substituerte pyrazoler, hvor minst én av R<3>eller R<5>er forskjellig fra hydrogen, nødvendigvis er blandinger av hver tautomer, og at R3 og R5 derfor er ansett å være innbyrdes utbyttbare.
I en spesiell utførelsesform er minst én, og fortrinnsvis to, gruppe R<2>, R<3>og R<5>forskjellig fra hydrogen.
Spesielle forbindelser ifølge oppfinnelsen omfatter en hvilken som helst av følgende: N-(2-aminofenyl)-4-{1 -[(1 -metyl-1 H-pyrazol-4-yl)metyl]piperidin-4-yl}benzamid;
N-(2-aminofenyl)-4-{1 -[(1,3-dimetyl-1 H-pyrazol-4-yl)metyl]piperidin-4-yl}-benzamid;
N-(2-aminofenyl)-4-{1 -[(1,3,5-trimetyl-1 H-pyrazol-4-yl)metyl]piperidin-4-yl}-benzamid;
N-(2-aminofenyl)-4-{1 -[(1,5-dimetyl-1 H-pyrazol-4-yl)metyl]piperidin-4-yl}-benzamid;
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
Det skal forstås at visse forbindelser med formel IA ovenfor kan eksistere i usolvaterte former så vel som solvaterte former, så som for eksempel hydratiserte former. Det skal forstås at foreliggende oppfinnelse omfatter alle slike solvaterte former som har antiproliferativ aktivitet.
Det skal også forstås at visse forbindelser med formel IA kan vise polymorf-isme, og at foreliggende oppfinnelse omfatter alle slike former som har antiproliferativ aktivitet.
Et egnet farmasøytisk akseptabelt salt av en forbindelse med formel IA er for eksempel et syreaddisjonssalt av en forbindelse med formel IA, for eksempel et syreaddisjonssalt med en uorganisk eller organisk syre, så som saltsyre, bromhydrogensyre, svovelsyre, trifluoreddiksyre, sitronsyre eller maleinsyre; eller for eksempel et salt av en forbindelse med formel IA som er tilstrekkelig surt, for eksempel et alkali- eller jordalkalimetallsalt, så som et kalsium- eller magnesiumsalt, eller et ammoniumsalt. Et ytterligere, egnet farmasøytisk akseptabelt salt av en forbindelse med formel IA, er for eksempel et salt dannet i menneske- eller dyrekroppen etter administrering av en forbindelse med formel IA.
Forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan administreres i form av et promedikament - det vil si en forbindelse som blir brutt ned i menneske- eller dyrekroppen og frigjør en forbindelse ifølge oppfinnelsen. Et promedikament kan anvendes for å endre de fysiske egenskapene og/eller de farmakokinetiske egenskapene til en forbindelse ifølge oppfinnelsen. Et promedikament kan dannes når forbindelsen ifølge oppfinnelsen inneholder en egnet gruppe eller substituent som en egen-skaps-modifiserende gruppe kan være bundet til. Eksempler på promedikamenter omfatter in wVo-spaltbare amid-derivater som kan dannes ved en aminogruppe i en forbindelse med formel IA.
Følgelig omfatter foreliggende oppfinnelse de forbindelser med formel IA som definert ovenfor når gjort tilgjengelig ved organisk syntese, og beskrevet er også forbindelser med formel IA, gjort tilgjengelig i menneske- eller dyrekroppen ved spaltning av et promedikament derav. Følgelig omfatter foreliggende oppfinnelse de forbindelser med formel IA som blir produsert ved hjelp av organisk syntese, og også slike forbindelser som beskrevet her som blir produsert i menneske-eller dyrekroppen ved metabolisme av en forløperforbindelse, det vil si at en forbindelse med formel IA kan være en syntetisk fremstilt forbindelse eller en meta-bolsk produsert forbindelse.
Et egnet farmasøytisk akseptabelt promedikament av en forbindelse med formel IA, er et som basert på rimelig medisinsk bedømmelse er egnet for administrering til menneske- eller dyrekroppen uten uønskede farmakologiske aktiviteter og uten unødvendig toksisitet.
Forskjellige former for promedikamenter er beskrevet, for eksempel i føl-gende dokumenter: a) Methods in Enzymology, bind 42, s. 309-396, ed. K. Widder, et al. (Aca-demic Press, 1985); b) Design of Pro-drugs, ed. H. Bundgaard, (Elsevier, 1985); c) A Textbook av Drug Design and Development, ed. Krogsgaard-Larsen og H. Bundgaard, kapittel 5 "Design and Application of Pro-drugs", av H. Bundgaard s. 113-191 (1991); d) H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8, 1-38 (1992); e) H. Bundgaard, et al., Journal of Pharmaceutical Sciences, 77, 285 (1988); f) N. Kakeya, et al., Chem. Pharm. Bull., 32, 692 (1984); g) T. Higuchi og V. Stella, "Pro-drugs as Novel Delivery Systems", A.C.S.
Symposium Series, bind 14; og
h) E. Roche (ed.), "Bioreversible Carriers in Drug Design", Pergamon Press, 1987.
Et egnet farmasøytisk akseptabelt promedikament til en forbindelse med formel IA, er for eksempel et in wVo-spaltbart amid-derivat derav. Egnede farma-søytisk akseptable amider dannet av en aminogruppe, omfatter for eksempel et amid dannet med (1-10C)alkanoylgrupper, så som acetyl, benzoyl, fenylacetyl og substituerte benzoyl- og fenylacetylgrupper. Eksempler på ring-substituenter på fenylacetyl- og benzoylgruppene omfatter aminometyl, N-alkylaminometyl, N,N-di-alkylaminometyl, morfolinometyl, piperazin-1-ylmetyl og 4-(1-4C)-alkylpiperazin-1-ylmetyl.
In wVo-effektene av en forbindelse med formel IA, kan delvis utøves av én
eller flere metabolitter som blir dannet i menneske- eller dyrekroppen etter administrering av en forbindelse med formel IA. Som angitt ovenfor, kan in wVo-effektene av en forbindelse med formel IA også utøves ved metabolisme av en forløper-forbindelse (et promedikament).
Fremstilling av forbindelser med formel IA.
Det vil forstås av fagfolk på området at det kan være nødvendig/ønskelig å beskytte eventuelle sensitive grupper i forbindelsene i noen av prosessene/- reaksjonene nevnt her. Tilfellene hvor beskyttelse er nødvendig eller ønskelig, og egnede metoder for å gi slik beskyttelse, er kjent for fagfolk på området. Konvensjonelle beskyttelsesgrupper kan anvendes i henhold til standard praksis (for illus-trasjon, se T.W. Greene & P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3. utgave, John Wiley and Sons, 1999). Således kan det, hvis reaktantene omfatter grupper så som amino, karboksy eller hydroksy, være ønskelig å beskytte gruppen i noen av reaksjonene nevnt her.
En hvilken som helst beskyttelsesgruppe anvendt i prosessene beskrevet her, kan generelt velges fra en hvilken som helst av gruppene beskrevet i litteraturen eller som for en kyndig kjemiker er kjent for å passe for beskyttelse av den aktuelle gruppen, og kan innføres ved konvensjonelle metoder. Beskyttelsesgrupper kan fjernes ved en hvilken som helst hensiktsmessig metode, som beskrevet i litteraturen eller som for en kyndig kjemiker er kjent for å passe for fjerning av den aktuelle beskyttelsesgruppen, idet slike metoder velges slik at det bevirker fjerning av beskyttelsesgruppen med minimal forstyrrelse av grupper andre steder i molekylet.
Spesifikke eksempler på beskyttelsesgrupper er gitt nedenfor for enkelhets skyld, der "lavere", som for eksempel i lavere alkyl, betyr at gruppen som det gjel-der for fortrinnsvis har 1-4 karbonatomer. Det vil forstås at disse eksempler ikke er uttømmende. Der spesifikke eksempler på metoder for fjerning av beskyttelsesgrupper er angitt nedenfor, er disse likeledes ikke uttømmende. Anvendelse av beskyttelsesgrupper og metoder for avbeskyttelse som ikke er spesifikt nevnt, ligger selvfølgelig innenfor omfanget av oppfinnelsen.
En egnet beskyttelsesgruppe for en amino- eller alkylaminogruppe er for eksempel en acylgruppe, for eksempel en alkanoylgruppe, så som acetyl, en alkoksykarbonylgruppe, for eksempel en metoksykarbonyl-, etoksykarbonyl- eller t-butoksykarbonylgruppe, en arylmetoksykarbonylgruppe, for eksempel benzyloksykarbonyl, eller en aroylgruppe, for eksempel benzoyl. Avbeskyttelsesbetingel-sene for beskyttelsesgruppene ovenfor varierer nødvendigvis med valg av beskyttelsesgruppe. Således kan for eksempel en acylgruppe, så som en alkanoyl- eller alkoksykarbonylgruppe eller en aroylgruppe fjernes for eksempel ved hydrolyse med en egnet base, så som et alkalimetallhydroksid, for eksempel litium- eller natriumhydroksid. Alternativt kan en acylgruppe, så som en t-butoksykarbonylgruppe, fjernes, for eksempel ved behandling med en egnet syre, så som saltsyre, svovelsyre eller fosforsyre eller trifluoreddiksyre, og en arylmetoksykarbonylgruppe, så som en benzyloksykarbonylgruppe, kan fjernes, for eksempel ved hydrogenering over en katalysator, så som palladium-på-karbon, eller ved behandling med en Lewis-syre, for eksempel bortris(trifluoracetat). En egnet alternativ beskyttelsesgruppe for en primær aminogruppe er for eksempel en ftaloylgruppe, som kan fjernes ved behandling med en alkylamin, for eksempel dimetylaminopropylamin, eller med hydrazin.
En egnet beskyttelsesgruppe for en hydroksygruppe er for eksempel en acylgruppe, for eksempel en alkanoylgruppe, så som acetyl, en aroylgruppe, for eksempel benzoyl, eller en arylmetylgruppe, for eksempel benzyl. Avbeskyttelses-betingelsene for beskyttelsesgruppene ovenfor vil nødvendigvis variere med valg av beskyttelsesgruppe. Således kan for eksempel en acylgruppe, så som en alkanoyl- eller en aroylgruppe, fjernes, for eksempel ved hydrolyse med en egnet base, så som et alkalimetallhydroksid, for eksempel litium- eller natriumhydroksid. Alternativt kan en arylmetylgruppe, så som en benzylgruppe, fjernes, for eksempel ved hydrogenering over en katalysator, så som palladium-på-karbon.
En egnet beskyttelsesgruppe for en karboksygruppe er for eksempel en esterdannende gruppe, for eksempel en metyl- eller etylgruppe, som for eksempel kan fjernes ved hydrolyse med en base, så som natriumhydroksid, eller for eksempel en t-butylgruppe, som for eksempel kan fjernes ved behandling med en sy- re, for eksempel en organisk syre, så som trifluoreddiksyre, eller for eksempel en benzylgruppe, som for eksempel kan fjernes ved hydrogenering over en katalysator, så som palladium-på-karbon.
Beskyttelsesgruppene kan fjernes på et hvilket som helst hensiktsmessig stadium i syntesen, ved anvendelse av konvensjonelle teknikker velkjent innen det kjemiske område.
I et ytterligere aspekt tilveiebringer foreliggende oppfinnelse en fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse med formel (IA), eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, idet fremgangsmåten omfatter:
(a) reaksjonen av en forbindelse med formel (II)
hvor anilingruppen kan være passende beskyttet;
med en forbindelse med formel (III)
i nærvær av et reduksjonsmiddel, hvor R2, R3 og R5 er som definert i krav 1;
og deretter, hvis nødvendig, fjerning av hvilken som helst gjenværende beskyttelsesgrupper som kan være til stede.
Et egnet reduksjonsmiddel for fremgangsmåte (a) omfatter for eksempel et uorganisk borhydridsalt, så som natriumborhydrid, natriumtriacetoksyborhydrid eller natriumcyanoborhydrid og hydrogen. Reduktiv aminering ved anvendelse av hydrogen blir eventuelt utført i nærvær av en egnet katalysator, så som for eksempel Pd/C, Pd(OH)2/C, Pt/C, Pt02eller Rh på aluminiumoksid, og kan også utføres under trykk, for eksempel 1 -10 bar, over et temperaturområde, for eksempel 0-150°C.
Fremgangsmåte (a) kan utføres i nærvær av en egnet syre. En egnet syre for fremgangsmåte (a) omfatter en Bronsted-syre, så som for eksempel maursyre, eddiksyre, trifluoreddiksyre, saltsyre, svovelsyre, paratoluensulfonsyre eller kam-fersulfonsyre; eller en Lewis-syre med formel MQZ, hvor M er et metall, Q er en reaktiv gruppe, så som for eksempel en halogen- eller sulfonyloksygruppe, for eksempel en klor-, brom-, jod-, metansulfonyloksy-, trifluormetansulfonyloksy- eller toluen-4-sulfonyloksygruppe, og z er i området 1-6, og verdien av z vil avhenge av metallet M. Typiske eksempler på egnede Lewis-syrer omfatter bortrifluorid, scan-dium(lll)trifluormetansulfonat, tinn(VI)klorid, titan(IV)isopropoksid eller sink(ll)-klorid.
Alternativt kan forbindelsene med formel (IA) fremstilles ved
(b) reaksjonen av en forbindelse med formel (II)
med en forbindelse med formel (IV)
i nærvær av en egnet base;
hvor R2, R3 og R5 er som definert i krav 1 og X er en reaktiv gruppe;
og deretter, hvis nødvendig, fjerning av hvilken som helst gjenværende beskyttelsesgrupper som kan være til stede.
En egnet reaktiv gruppe X er for eksempel en halogen- eller sulfonyloksygruppe, for eksempel en klor-, brom-, jod-, metansulfonyloksy-, triflurometansulfo-nyloksy- eller toluen-4-sulfonyloksygruppe.
En egnet base for anvendelse i fremgangsmåte (b) ovenfor, er for eksempel en organiskaminbase, så som foreksempel pyridin, 2,6-lutidin, collidin, 4-dimetylaminopyridin, trietylamin, morfolin, diisopropyletylamin (DIPEA), N-metylmorfolin eller diaza-bicyklo[5.4.0]undec-7-en, eller for eksempel et alkali- eller jordalkalimetallkarbonat eller hydroksid, for eksempel natriumkarbonat, kaliumkarbonat, kalsiumkarbonat, natriumhydroksid eller kaliumhydroksid, eller for eksempel et alkalimetallhydrid, for eksempel natriumhydrid, et jordalkalimetall-hydrogen- karbonat, så som natriumhydrogenkarbonat, eller et metallalkoksid, så som natriumetoksid.
En egnet beskyttelsesgruppe for anilingruppen eller piperidinringen kan være et karbamat, så som tert-butoksykarbonyl eller benzyloksykarbonyl.
Reaksjonene definert i fremgangsmåter (a) og (b) blir hensiktsmessig utført i nærvær av et egnet inert løsningsmiddel eller fortynningsmiddel, for eksempel en alkanol eller ester, så som metanol, etanol, isopropanol eller etylacetat, et halogener! løsningsmiddel, så som metylenklorid, kloroform eller karbontetraklorid, en eter, så som tetrahydrofuran, 1,2-dimetoksyetan eller 1,4-dioksan, et aromatisk løsningsmiddel, så som toluen, eller et dipolart, aprotisk løsningsmiddel, så som N,N-dimetylformamid, N,N-dimetylacetamid, N-metylpyrrolidin-2-on eller dimetylsulfoksid.
Fremstilling av utgangsmaterialer.
Fremstilling av forbindelsen med formel II.
Forbindelsen med formel II ovenfor kan fremstilles ved en hvilken som helst av de følgende fremgangsmåter: (c) Omsetning av en forbindelse med formel (V), hvor anilinet kan være passende beskyttet,
hvor X er en reaktiv gruppe som definert ovenfor,
med en forbindelse med formel (VI) i nærvær av en egnet base
hvor M er et metall, L er en ligand, heltallet z er 0 til 3 og tetrahydropyridinringen kan beskyttes; eller omsetning av en forbindelse med formel (VII), hvor anilinet og tetrahydropyridinet kan være passende beskyttet og M, L og z er som definert ovenfor, med en forbindelse med formel (VIII):
i nærvær av en egnet base;
hvor X er en reaktiv gruppe som definert ovenfor,
og deretter, hvis nødvendig, og i en hvilken som helst egnet rekkefølge eller kombinasjon: fjerning av eventuelle beskyttelsesgrupper fra tetrahydropyridinet og/eller reduksjon av tetrahydropyridinet til piperidin, og/eller
fjerning av eventuelle gjenværende beskyttelsesgrupper til stede.
En egnet beskyttelsesgruppe for tetrahydropyridinringen er en gruppe, så som tert-butoksykarbonyl (også referert til her som "BOC") eller benzyloksykarbonyl. En egnet beskyttelsesgruppe for anilingruppen kan også være et karbamat, så som BOC eller benzyloksykarbonyl.
En egnet base for fremgangsmåte (c) er for eksempel en organisk amin-base, så som for eksempel pyridin, 2,6-lutidin, collidin, 4-dimetylaminopyridin, trietylamin, morfolin, N-metylmorfolin eller diazabi-cyklo[5.4.0]undec-7-en, eller for eksempel et alkali- eller jordalkalimetallkarbonat eller hydroksid, for eksempel natriumkarbonat, kaliumkarbonat, kalsiumkarbonat, cesiumkarbonat, natriumhydroksid eller kaliumhydroksid, eller for eksempel et alkalimetallhydrid, for eksempel natriumhydrid, eller et alkalisk metallhydrogenkarbonat, så som natriumhydrogenkarbonat, eller et metallalkoksid, så som natriumetoksid.
Omsetningen definert i fremgangsmåte (c) ovenfor blir hensiktsmessig ut-ført i nærvær av et egnet inert løsningsmiddel eller fortynningsmiddel, for eksempel en alkanol eller ester, så som metanol, etanol, isopropanol eller etylacetat, et halogener! løsningsmiddel, så som metylenklorid, kloroform eller karbontetraklorid, en eter, så som tetrahydrofuran, 1,2-dimetoksyetan eller 1,4-dioksan, et aromatisk løsningsmiddel, så som toluen, eller et dipolart, aprotisk løsningsmiddel, så som N,N-dimetylformamid, N,N-dimetylacetamid, N-metylpyrrolidin-2-on eller dimetylsulfoksid. Reaksjonene blir hensiktsmessig utført ved en temperatur i området fra for eksempel 10 til 250°C, fortrinnsvis i området 40 til 80°C;
Metall M kan være et hvilket som helst metall som er kjent i litteraturen for å danne organometalliske forbindelser som gjennomgår katalytiske krysskoblings-reaksjoner. Eksempler på egnede metaller omfatter bor, tinn, sink og magnesium.
En egnet verdi for heltallet z er avhengig av metall M, men er vanligvis i området 0-3.
Egnede verdier for ligand L, når til stede, omfatter for eksempel en hydroksy-, halogen-, (1-4C)alkoksy- eller (1-6C)alkyl-ligand, for eksempel en hydroksy-,
brom-, klor-, fluor-, jod-, metoksy-, etoksy-, propoksy-, isopropoksy-, butoksy-, metyl-, etyl-, propyl-, isopropyl- eller butyl-ligand, eller, der heltallet z er 2 og M er bor, kan de to ligandene til stede være bundet slik at de, sammen med boratomet som de er bundet til, danner en ring.
Hensiktsmessig er gruppen MLZ en gruppe med formelen -BL<1>L<2>, hvor B er bor og L<1>og L<2>er som definert for ligand L ovenfor. Spesielt kan ligandene L<1>og L<2>være bundet slik at de, sammen med boratomet som de er bundet til, danner en ring. For eksempel kan L<1>og L<2>sammen definere en oksy-(2-4C)alkylenoksy-gruppe, for eksempel en oksyetylenoksy-, pinacolato(-0-C(CH3)2C(CH3)2-0-)- eller oksypropylenoksygruppe, slik at de, sammen med boratomet som de er bundet til, danner en cyklisk boronsyre-estergruppe.
En egnet katalysator for fremgangsmåte (c) omfatter for eksempel en metal-lisk katalysator, så som en palladium(O)-, palladium(ll)-, nikkel(O)- eller nikkel(ll)-katalysator, for eksempel tetrakis(trifenylfosfin)palladium(0), palladium(ll)klorid, palladium(ll)bromid, bis(trifenylfosfin)palladium(ll)klorid, tetrakis(trifenylfosfin)-nikkel(O), nikkel(ll)klorid, nikkel(ll)bromid, bis(trifenylfosfin)nikkel(ll)klorid eller diklor[1-1'-bis(difenylfosfino)ferrocen]palladium(ll). I tillegg kan en fri rest-initiator hensiktsmessig tilsettes, for eksempel en azoforbindelse, så som azo(bisiso-butyronitril).
Hensiktsmessig blir tetrahydropyridinringen redusert til en piperidinring i fremgangsmåte (c) ovenfor, ved hydrogenering. Hydrogenering blir eventuelt ut-ført i nærvær av en egnet katalysator, så som for eksempel Pd/C, Pd(OH)2/C, Pt/C, Pt02eller Rh-på-aluminiumoksid, og kan også utføres undertrykk, foreksempel 1-10 bar. Hydrogenering blir også hensiktsmessig utført i nærvær en egnet syre, foreksempel bromhydrogensyre, saltsyre, sitronsyre, eddiksyre og metansulfonsyre, og i et passende løsningsmiddel eller løsningsmiddelblanding, så som for eksempel vann, etanol, tetrahydrofuran (THF), metanol, acetonitril eller propan-2-ol.
d) Omsetning av en forbindelse med formel (IX), hvor Qi er -OH, -Cl eller - 0"Q.2<+>(hvor Q.2+ er et kation)
med en forbindelse med formel (X) i nærvær av et egnet løsningsmiddel, og hvor én av aminogruppene i forbindelsen med formel (X) kan beskyttes; hvilket gir en forbindelse med formel (XI):
hvor anilinet kan beskyttes;
og deretter:
omdannelse av forbindelsen med formel (XI) til en forbindelse med formel (II) ved redusering av pyrindin-4-ylringen til en piperidin-4-ylring ved anvendelse av et egnet reduksjonsmiddel og/eller egnede reduserende betingelser; og eventuelt fjerning av eventuelle gjenværende beskyttelsesgrupper til stede. En egnet verdi for Qi er -0"Na<+>(det vil si -0"Q.2+, hvor Q.2+ er Na<+>).
Hensiktsmessig er én av aminogruppene i forbindelsen med formel (X) beskyttet med et egnet aminobeskyttelsesgruppe som ovenfor definert, så som en Boc-gruppe.
Hensiktsmessig er anilinet beskyttet med en aminobeskyttelsesgruppe som ovenfor definert, så som en Boc-gruppe, i forbindelsen med formel (XI).
Et hvilket som helst egnet løsningsmiddel, så som dem tidligere nevnt her, kan anvendes for omsetning av forbindelser IX og X.
Forbindelsen med formel (XI) blir omdannet til en forbindelse med formel (II), ved anvendelse av et egnet reduksjonsmiddel og/eller egnede reduserende betingelser. En egnet fremgangsmåte er hydrogenering. Hydrogenering blir eventuelt utført i nærvær av en egnet katalysator, så som for eksempel Pd/C, Pd(0H)2/C, Pt/C, Pt02eller Rh på aluminiumoksid, og kan også utføres under trykk, for eksempel 1-10 bar. Hydrogenering blir også hensiktsmessig utført i nærvær en egnet syre, for eksempel bromhydrogensyre, saltsyre, sitronsyre, eddiksyre og metansulfonsyre, og i et passende løsningsmiddel eller løsningsmid-delblanding, så som foreksempel vann, etanol, tetrahydrofuran (THF), metanol, acetonitril eller propan-2-ol.
En egnet metode for fremstilling av forbindelsen med formel (XI), omfatter omdannelse av forbindelsen (IX) til et reaktivt derivat av karboksylsyren (som kan fremstilles in situ og ikke nødvendigvis er isolert), fulgt av påfølgende omsetning med en forbindelse med formel (X).
Et egnet reaktivt derivat av en karboksylsyre er for eksempel et acylhalo-genid, foreksempel et acylklorid dannet ved omsetning av syren og et uorganisk syreklorid, for eksempel tionylklorid; et blandet anhydrid, for eksempel et anhydrid dannet ved omsetning av syren og et klorformiat, så som isobutylklorformiat; en aktiv ester; reaksjonsproduktet av syren og et karbodiimid, så som di-cykloheksyl-karbodiimid; eller reaksjonsproduktet av en syre med 4-(4,6-dimetoksy-1,3,5-tri- azinyl-2-yl)-4-metylmorfoliniumklorid (DMTMM), eller reaksjonsproduktet av en syre med 1,1'-karbonyldiimidazol (CDI).
Forbindelser med formlene (III) og (IV) kan enten oppnås fra kommersielle kilder, foreksempel Flurochem Ltd, Old Glossop, Derbyshire SK13 7RY, UK, eller de kan syntetiseres ved anvendelse av metoder som er kjent for fagfolk på området og/eller angitt i litteraturen, for eksempel Makino, K.; Kim, H.S. og Kurasawa Y; J. Heterocyclic Chem. 1998, 35, 489-497 og referanser deri.
Forsøk.
Følgende forsøk (a) til (c) kan anvendes for å måle virkningene av én eller flere av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse som HDAC-hemmere, som in Wfro-hemmere av rekombinant humant HDAC1 produsert i Hi5-insektceller, og som in vitro- & in wVo-fremkallere av Histon H3-acetylering i hele celler og tumorer. De vurderer også evnen som slike forbindelser har til å hemme proliferasjon av humane tumorceller.
(a) Enzvm- måling in vitro av rekombinant HDAC1.
HDAC-hemmere ble screenet mot rekombinant humant HDAC1 produsert i Hi5-insektceller. Enzymet ble klonet med et FLAG-merke på den C-terminale en-den til genet og affinitetsrenset ved anvendelse av Anti-FLAG M2-agarose fra SIGMA (A2220).
Deacetylase-forsøket ble utført i en 50 ul reaksjon. HDAC1 (75 ng enzym) fortynnet i 15 ul reaksjonsbuffer (25 mM TrisHCI (pH 8), 137 mM NaCI, 2,7 mM KCI, 1 mM MgCl2) ble blandet med enten buffer alene (10 ul) eller buffer inneholdende forbindelse (10 ul), i 30 minutter ved omgivelsestemperatur. 25 uM acety-lert histon H4-peptid (Kl 174 Biomol) fortynnet i 25 ul buffer ble deretter tilsatt til reaksjonen og inkubert i én time ved omgivelsestemperatur. Reaksjonen ble stan-set ved tilsetning av et likt volum (50 ul) Fluor de Lys-utvikler (Biomol) inneholdende Trichostatin A ved 2 uM. Reaksjonen fikk utvikles seg i 30 minutter ved omgivelsestemperatur, og deretter ble fluorescens målt ved en eksitasjonsbølgelengde på 360 nM og en emisjonsbølgelengde på 465 nM. ICso-verdierfor HDAC-enzym-hemmer ble bestemt ved å utføre doseresponskurver med individuelle forbindelser og bestemmelse av konsentrasjonen av hemmer som gir femti prosent reduksjon av det maksimale signalet (fortynningsmiddelkontroll).
(b) Måling in vitro av hemning av proliferasion i hele celler.
Hemning av proliferasjon i hele celler ble målt ved anvendelse av Promega-celletiteren 96 vandig proliferasjonsforsøk (Promega #G5421). HCT116-celler ble podet på 96-brønners plater i en mengde av 1x10<3>celler/brønn og tillatt å feste seg over natten. De ble behandlet med hemmere i 72 timer. 20 ul av tetrazolium-fargestoffet MTS ble tilsatt til hver brønn og platene re-inkubert i 3 timer. Absor-bans ble deretter målt med en 96-brønners plateleser ved 490 nM. ICso-verdier for HDAC-hemmere ble bestemt ved å utføre doseresponskurver med individuelle forbindelser og bestemmelse av konsentrasjonen av hemmer som ga femti prosent reduksjon av det maksimale signalet (fortynningsmiddelkontroll).
(c) Enzym- måling in vitro av Histon- deacetylase- aktivitet i hele celler.
Histon H3-acetylering i hele celler ble målt ved anvendelse av immunohis-tokjemi og analyse ved anvendelse av Cellomics array-scanning. A549- eller HCT116-celler ble podet på 96-brønners plater i en mengde av 1x10<4>celler/brønn og tillatt å feste seg over natten. De ble behandlet med hemmere i 24 timer og deretter fiksert i 1,8% formaldehyd i tris-bufret saltløsning (TBS) i én time. Celler ble permeabilisert med iskald metanol i 5 minutter, skyllet i TBS og deretter blok-kert i TBS 3% lav-fett-tørrmelk i 90 minutter. Celler ble deretter inkubert med poly-klonale antistoffer spesifikke for det acetylerte histon H3 (Upstate #06-599) fortynnet 1 til 500 i TBS 3% melk i én time. Celler ble skyllet tre ganger i TBS, og deretter inkubert med fluorescein-konjugerte sekundære antistoffer (Molecular Probes #A11008) & Hoechst 333542 (1 ug/ml) (Molecular Probes #H3570) i TBS pluss 1% bovint serumalbumin (Sigma #B6917) i én time. Ubundet antistoff ble fjernet ved tre skyllinger med TBS, og etter den siste skyllingen ble 100 ul TBS tilsatt til cellene og platene forseglet og analysert ved anvendelse av Cellomics-array-scanning.
EC5o-verdier for HDAC-hemmere ble bestemt ved å utføre doseresponskurver med individuelle forbindelser og deretter bestemmelse av konsentrasjonen av hemmer som ga femti prosent av det maksimale signalet (referanseforbindelse-kontroll - Trichostatin A (Sigma)).
hERG-aktiviteten og oppløseligheten til forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan også evalueres ved anvendelse av forsøk (d) til (f) angitt nedenfor:
(d) hERG- kodet kaliumkanal- hemningsforsøk.
Cellekultur.
Chinese Hamster Ovary- (CHO) celler som uttrykker den hERG-kodede ka-nalen ble dyrket til halvveis sammenflyting ved 37°C i fuktet miljø (5% CO2) i F-12 Ham-medium inneholdende L-glutamin, 10% føtalt kalveserum (FCS) og 0,6 mg/ml Hygromycin (alle Sigma). Før anvendelse ble enkeltlaget vasket ved anvendelse av en forhånds-oppvarmet (37°C) 3 ml alikvot av Versene 1:5.000 (Invi-trogen). Etter aspirering av denne løsningen ble kolben inkubert ved 37°C i en inkubator med ytterligere 2 ml Versene 1:5.000 i en periode på 6 minutter. Celler ble deretter løsnet fra bunnen av kolben ved forsiktig banking, og 10 ml Dul-beccos-PBS inneholdende kalsium (0,9 mM) og magnesium (0,5 mM) (PBS) (Invi-trogen) ble deretter tilsatt til kolben og sugd opp i et 15 ml sentrifugerør før sentri-fugering (50 g, i 4 minutter).
Den resulterende supernatanten ble kastet og pelleten forsiktig resuspen-dert i en 3 ml alikvot av PBS. En 0,5 ml alikvot av cellesuspensjon ble fjernet for automatisert celletelling (Innovatis Cedex) og det endelige cellesuspensjonsvolum regulert med PBS, hvilket gir den ønskede, endelige cellekonsentrasjon.
Elektrofysiologi.
Prinsippene for, og operasjonen av, denne anordningen, er beskrevet tidligere (Schroeder et al., Journal of Biomolecular Screening (2003) 8(1), 50-64). Kort sagt er teknologien basert på en 384-brønners plate (PatchPlate™) hvor en registrering blir forsøkt i hver brønn ved anvendelse av sug for å forsøke å posi-sjonere og holde en celle på et lite hull som skiller to isolerte fluidkammere. Straks forseglingen har funnet sted, blir løsningen på undersiden av PatchPlate™ endret til én inneholdende amphotericin B (Sigma). Dette permeabiliserer lappen ("patch") av cellemembran som dekker hullet i hver brønn, og tillater som effekt at en perforert hel-celle-lapp-klemme- ("patch damp") registrering blir forsøkt i hver brønn.
For hver kjøring på lonWorks™ HT ble den operert på følgende måte ved romtemperatur (-21 °C). "Båten" i "buffer"-stilling ble fylt med 4 ml PBS, og den i "celler"-stilling med CHO-hERG-cellesuspensjonen beskrevet ovenfor. En 96-brønners plate (V-bunn, Greiner Bio-one) inneholdende forbindelsene som skal testes (3X deres endelige testkonsentrasjon) ble plassert i "plate 1 "-stilling, og en PatchPlate™ ble plassert i anordningen og holdt i posisjon ved anvendelse av PatchPlate™ -dekselet.
Hver forbindelsesplate ble anordnet slik at det muliggjør konstruksjon av ti 8-punkts konsentrasjon-effekt-kurver; de gjenværende to kolonner på platen ble tatt opp med konstituent (0,33% DMSO) for å definere forsøks-grunnlinjen, og en supra-maksimal blokkenngskonsentrasjon av cisaprid (10 for å definere 100% hemningsnivået. Fluidics-hodet (F-hode) på lonWorks™ HT tilsatte deretter 3,5 ul PBS til hver brønn på PatchPlate™, og dens underside ble dynket med "indre" løsning som hadde følgende sammensetning (i mM): K-Gluconate 100, KCI 40, MgCl23,2, EGTA3 og HEPES 5 (alle Sigma) (pH 7,25-7,30, ved anvendelse av 10 M KOH). Etter priming og fjerning av bobler ble Elektronics-hodet (E-hode) deretter beveget rundt på PatchPlate™ for å utføre en hel test (det vil si å påføre en spenningsimpuls for å bestemme hvorvidt hullet i hver brønn var åpent). F-hode tømte deretter ut 3,5 ul av cellesuspensjonen beskrevet ovenfor i hver brønn på PatchPlate™, og cellene ble gitt 200 sekunder til å nå og forsegle hullet i hver brønn. E-hodet beveget seg deretter rundt på PatchPlate™ for å bestemme for-seglings-resistensen oppnådd i hver brønn.
Løsningen på undersiden av PatchPlate™ ble deretter endret til "tilgang" - løsning som hadde følgende sammensetning (i mM): KC1140, EGTA 1, MgCl21 og HEPES 20 (alle Sigma) (pH 7,25-7,30 ved anvendelse av 10 M KOH) pluss
100ug/ml amphotericin B. Etter 9 minutter for å tillate perforering av lappen å fin-ne sted, beveget E-hodet seg deretter rundt til alle 384 brønner på lapp-platen for å oppnå før-forbindelse hERG-strøm-målinger. F-hodet tilsatte deretter 3,5 ul løs-ning fra hver brønn på forbindelsesplaten til 4 brønner på PatchPlate™. Det ble programmert til å starte med den mest fortynnede brønnen på forbindelsesplaten
og bevege seg til den mest konsentrerte brønnen for å minimalisere virkningen av eventuell overføring.
Etter omtrent tre og et halvt minutt inkubering beveget E-hodet seg deretter rundt til alle 384 brønner på PatchPlate™ for å innhente hERG-strøm-målinger etter forbindelse. På denne måten kunnde det produseres ikke-kumulative kon-sentrasjonseffekt-kurver hvor effekten av hver konsentrasjon av testforbindelse, forutsatt at aksept-kriteriene ble oppnådd i en tilstrekkelig prosentdel av brønner (se nedenfor), var basert på registrering fra mellom 1 og 4 celler.
Aksept-kriteriene for hver brønn var: før-scanning-forseglings-resistens >60 MQ, før-scanning hERG-halestrøm-amplitude >0,15 nA; etter-scanning-forseg-lings-resistens >60 MQ. hERG-strøm før og etter forbindelse ble fremkalt ved en spenningsimpuls bestående av en 20 s periode hold ved -70 mV, et 160 ms trinn til -60 mV, et 100 ms trinn tilbake til -70 mV, et 1 s trinn til +40 mV, et 2 s trinn til -30 mV, og til slutt et 500 ms trinn til -70 mV. Innimellom spenningsimpulsene før og etter forbindelse var det ikke noen klemming ("clamping") av membranpotensia-let.
e) Vurdering av vandig oppløselighet.
Testforbindelse (fra 1 til 1,6 mgs) blir veiet opp i et glass og 1 ml 0,1 M fosfatbuffer (pH 7,4) blir tilsatt. Mellom 1,0 og 1,6 mgs av testforbindelse blir samtidig oppløst i 1,8 ml DMSO i et glass, for anvendelse som kalibreringsløsning. Begge løsninger blir omrørt i 24 timer ved 25°C. Den mettede, vandige løsning og DMSO-kalibreringsløsning blir deretter overført til dype 96-brønners plater. Den mettede bufferløsningsplaten blir sentrifugert ved en relativ sentrifugeringsstyrke på 4310 g, og deretter blir den vandige supernatanten overført til en annen dyp-brønnsplate og sentrifugert. Etter en ytterligere overføring av den vandige supernatanten og 50% fortynning med buffer, blir den endelige prøveplaten og DMSO-kalibreringsplaten analysert ved anvendelse av HPLC-UV-MS. Kvantifisering av prøve-oppløseligheten skjer ved sammenligning av prøve- og kalibrerings-UK-toppområder ved 250 nm (alternativ bølgelengde valgt hvis 250 nm er uegnet) med MS-bekreftelse av forbindelses-id. f) Vurdering av vandig oppløselighet i buffere og simulert tarmfluid.
Oppløselighet blir testet i følgende medium ved de spesifiserte temperaturer: Simulated Intestinal Fluid (Fasted) FaSSIF (Galia and Dressman et al, Pharms Res, 15(5), 1998, p698).
Natrium-taurocholat(3 mM); egglecitin (0,75 mM); KH2PO4(0,03 M); KCI (0,1 M); NaOH (for å regulere til pH 6,5). Målt ved 37°C.
Sørensens fosfatbuffer (Handbook of Biochemistry, s. 234-237).
Løsning A 0,067 M monokaliumfosfat.
Løsning B 0,067 M dinatriumfosfat.
Målt ved 25 °C og 37 °C.
Passende mengder (bestemt ut fra oppløselighetstest (f) ovenfor og/eller forutsagt pH-oppløselighetskurve) av forbindelsen under undersøkelse blir nøyak-tig veiet opp in duplo i 2-drams glass.
Til hvert sett av like ("replicate") glass, minimum 1,50 ml av det passende medium blir tilsatt pH 6,8 Sørensens fosfatbuffer eller FaSSIF. Alle veiinger må være tilstrekkelige til å mette mediet i hvert tilfelle.
En PTFE-belagt magnet blir tilsatt til hvert medisinglass før de blir forseglet og plassert på en Variomag magnetisk reaksjonsrørerblokk (CamLab). Rørerblok-kene blir holdt ved passende temperatur (se ovenfor), dekket med aluminiumsfolie for å redusere eksponering for lys og omrørt i alternerende retninger ved 800 r.p.m.
Hvert medisinglass blir tatt prøve fra på det foreskrevne tidspunkt for mediene testet. Først blir pH og deretter det aktive innhold i hver prøve bestemt på hvert tidspunkt på følgende måte.
pil.
Ved anvendelse av en egnet pH-måler (Hydrus 400 - Fisher), elektrode og standard pH-buffere, kalibrer instrumentet ved pH 4,01 og 7,00 ved omgivelsestemperatur.
Ved å plassere elektroden i hver like prøve, bestemme pH ved omgivelsestemperatur og rapportere resultatet til én desimalplass. Elektroden blir skyllet med av-ionisert vann og tørket mellom bestemmelser.
Aktivt innhold ifølge HPLC.
Fra hver prøve blir en 0,4 ml alikvot overført til et polykarbonat-ultrasentri-fugerør (Beckman). Prøvene blir sentrifugert ved 40 000 r.p.m. i 15 minutter ved den passende temperatur for mediene testet ved anvendelse av TL Optima Ultra-centrifuge (Beckman). Supernatanten fra hvert ultrasentrifugerør blir overført til et annet ultrasentrifugerør og sentrifugert én gang til under samme betingelser.
Supernatanten fra hver prøve blir analysert ved hjelp av den optimaliserte HPLC-metoden for forbindelsen som blir undersøkt, og det aktive innhold bestemt mot en ytre standard. Supernatanten kan kreve fortynning med et egnet løs-ningsmiddel for å bringe konsentrasjonen innen det lineære området for HPLC-metoden. Dette kan normalt beregnes ut fra den vandige forutsagte pH-oppløse-lighetskurve, og i tilfellet med med-oppløsningsmidlene utfra mengden av forbindelse som er blitt tilsatt.
Selv om de farmakologiske egenskapene til forbindelsene med formel IA varierer med strukturelle forandringer som forventet, kan aktiviteten som forbindelser med formel IA har generelt demonstreres ved følgende konsentrasjoner eller doser i én eller flere av testene (a), (b), (c) eller (d) ovenfor: Test (a):- ICso for eksempel i området 100 nM eller mindre;
Test (b):- ICso for eksempel i området 1 jxM eller mindre;
Test (c):- ICso for eksempel i området 1^M eller mindre;
Test (d):- ICso ved for eksempel mer enn 30 nM.
Eksempelvis ga forbindelsen beskrevet i eksempel 4 heri, ved anvendelse av test (a) for hemning av HDAC1 og test (b) for hemning av proliferasjon i hele celler, ICso-resultatene vist i tabell A nedenfor. Tabellen omfatter også det tilsva-rende resultfor N-(2-aminofenyl)-4-(1-(pyrid-2-yl metyl)piperidin-4-yl)benzamid (forbindelse [1] ovenfor):
Ingen fysiologisk uakseptabel toksisitet ble observert i test (d) ved den effektive dose for forbindelser testet ifølge foreliggende oppfinnelse. Følgelig er ingen uheldige toksikologiske effekter forventet når en forbindelse med formel IA, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, blir administrert i doseområdene definert nedenfor.
I tillegg har forbindelsene med formel IA, selv om oppløseligheten til forbindelsene med formel IA nødvendigvis vil variere med strukturell forandring som forventet, generelt ha en oppløselighet målt med test (e) ovenfor, på for eksempel mer enn 100jxM.
I henhold til et ytterligere aspekt ifølge oppfinnelsen, tilveiebringes det et farmasøytisk preparat som omfatter en forbindelse med formel (IA), eller et farma-søytisk akseptabelt salt derav, som definert ovenfor, sammen med et farmasøytisk akseptabelt fortynningsmiddel eller bærer.
Preparatene ifølge oppfinnelsen kan være i en form egnet for oral anvendelse (for eksempel som tabletter, pastiller, harde eller myke kapsler, vandige eller oljeaktige suspensjoner, emulsjoner, dispergerbare pulvere eller granuler, siruper eller eliksirer), fortopisk anvendelse (foreksempel som kremer, salver, geler eller vandige eller oljeaktige løsninger eller suspensjoner), for administrering ved inhalering (for eksempel som et findelt pulver eller en flytende aerosol), for administrering ved insufflasjon (for eksempel som et findelt pulver) eller for parenteral administrering (for eksempel som en steril, vandig eller oljeaktig løsning for intravenøs, subkutan, intramuskulær eller intramuskulær dosering, eller som et suppositorium for rektal dosering).
Preparatene ifølge oppfinnelsen kan oppnås ved konvensjonelle prosedyrer ved anvendelse av konvensjonelle farmasøytiske tilsetningsmidler velkjent på området. Således kan preparater ment for oral anvendelse inneholde for eksempel ett eller flere fargemidler, søtningsmidler, smaksmidler og/eller konserveringsmidler.
Egnede farmasøytisk akseptable tilsetningsmidler for en tablettformulering omfatter for eksempel inerte fortynningsmidler, så som laktose, natriumkarbonat, kalsiumfosfat eller kalsiumkarbonat, granulerings- og desintegreringsmidler, så som maisstivelse eller alginsyre; bindemidler, så som stivelse; smøremidler, så som magnesiumstearat, stearinsyre eller talk; konserveringsmidler, så som etyl-eller propyl-p-hydroksybenzoat, og antioksidanter, så som askorbinsyre. Tablett-formuleringer kan være ubelagte eller belagte, enten for å modifisere deres desin-tegrering og den påfølgende absorpsjon av den aktive bestanddel i mage-tarmkanalen, eller for å forbedre deres stabilitet og/eller utseende, i ethvert tilfelle ved anvendelse av konvensjonelle belegningsmidler og prosedyrer velkjent på området.
Preparater for oral anvendelse kan være i form av harde gelatinkapsler hvor den aktive bestanddel blir blandet med et inert, fast fortynningsmiddel, for eksempel kalsiumkarbonat, kalsiumfosfat eller kaolin, eller som myke gelatinkapsler hvor den aktive bestanddel blir blandet med vann eller en olje, så som jordnøttolje, flytende paraffin, soyabønneolje, kokosnøttolje eller fortrinnsvis olivenolje, eller en hvilken som helst annen akseptabel konstituent.
Vandige suspensjoner inneholder generelt den aktive bestanddel i finpulve-risertform sammen med ett eller flere suspenderingsmidler, så som natriumkar-boksymetylcellulose, metylcellulose, hydroksypropylmetylcellulose, natriumalginat, polyvinylpyrrolidon, tragantgummi og akasiegummi; dispergerings- eller fuktemidler, så som lecitin, eller kondensasjonsprodukter av et alkylenoksid med fettsyrer (for eksempel polyoksyetylenstearat) eller kondensasjonsprodukter av etylenoksid med langkjedede alifatiske alkoholer, for eksempel heptadecaetylenoksycetanol, eller kondensasjonsprodukter av etylenoksid med partielle estere avledet fra fettsyrer og en heksitol, så som polyoksyetylensorbitol-monooleat, eller kondensasjonsprodukter av etylenoksid med langkjedede alifatiske alkoholer, for eksempel heptadecaetylenoksycetanol, eller kondensasjonsprodukter av etylenoksid med partielle estere avledet fra fettsyrer og en heksitol, så som polyoksyetylensorbitol-monooleat, eller kondensasjonsprodukter av etylenoksid med partielle estere avledet fra fettsyrer og heksitolanhydrider, for eksempel polyetylensorbitan-monooleat. De vandige suspensjonene kan også inneholde ett eller flere konserveringsmidler (så som etyl- eller propyl-p-hydroksybenzoat, antioksidanter (så som askorbinsyre), fargemidler, smaksmidler og/eller søtningsmidler (så som sukrose, sakkarin eller aspartam).
Oljeaktige suspensjoner kan formuleres ved å suspendere den aktive bestanddel i en vegetabilsk olje (så som jordnøttolje, olivenolje, sesamolje eller ko-kosnøttolje) eller i en mineralolje (så som flytende paraffin). De oljeaktige suspensjonene kan også inneholde etfortykningsmiddel, så som bivoks, hard paraffin eller cetylalkohol. Søtningsmidler, så som dem angitt ovenfor, og smaksmidler, kan tilsettes for å gi et tiltalende oralt preparat. Disse preparater kan konserveres ved tilsetning av en anti-oksidant, så som askorbinsyre.
Dispergerbare eller lyofiliserte pulvere og granuler egnet for fremstilling av en vandig suspensjon eller løsning ved tilsetning av vann, inneholder generelt den aktive bestanddel sammen med et dispergerings- eller fuktemiddel, suspender-ingsmiddel og ett eller flere konserveringsmidler. Egnede dispergerings- eller fuktemidler og suspenderingsmidler er eksemplifisert ved dem allerede nevnt ovenfor. Ytterligere tilsetningsmidler, så som søtningsmidler, smaksmidler og fargemidler, kan også være til stede.
De farmasøytiske preparater ifølge oppfinnelsen kan også være i form av olje-i-vann-emulsjoner. Den oljeaktige fasen kan være en vegetabilsk olje, så som olivenolje eller jordnøttolje, eller en mineralolje, så som for eksempel flytende paraffin, eller en blanding av hvilke som helst av disse. Egnede emulgeringsmidler kan for eksempel være naturlig forekommende gummier, så som akasiegummi eller tragantgummi, naturlig forekommende fosfatider, så som soyabønne, lecitin, estere eller partielle estere avledet fra fettsyrer og heksitolanhydrider (for eksempel sorbitan-monooleat), og kondensasjonsprodukter av de nevnte partielle estere med etylenoksid, så som polyoksyetylensorbitan-monooleat. Emulsjonene kan også inneholde søtningsmidler, smaksmidler og konserveringsmidler.
Siruper og eliksirer kan formuleres med søtningsmidler, så som glycerol, propylenglykol, sorbitol, aspartam eller sukrose, og kan også inneholde et lindren-de middel, konserveringsmiddel, smaksmiddel og/eller fargemiddel.
De farmasøytiske preparater kan også være i form av en steril, injiserbar, vandig eller oljeaktig suspensjon, løsninger, emulsjoner eller spesielle systemer som kan formuleres i henhold til kjente prosedyrer ved anvendelse av ett eller flere av de passende dispergerings- eller fuktemidler og suspenderingsmidler som er nevnt ovenfor. Et sterilt, injiserbart preparat kan også være en steril, injiserbar løs-ning eller suspensjon i et ikke-toksisk, parenteralt akseptabelt fortynningsmiddel eller løsningsmiddel, for eksempel en løsning i polyetylenglykol.
Suppositoriumsformuleringer kan fremstilles ved blanding av den aktive bestanddel med et egnet, ikke-irriterende tilsetningsmiddel som er fast stoff ved nor-male temperaturer, men flytende ved rektal temperatur og som derfor vil smelte i rektum for frigjøring av medikamentet. Egnede tilsetningsmidler omfatter for eksempel kakaosmør og polyetylenglykoler.
Topiske formuleringer, så som kremer, salver, geler og vandige eller oljeaktige løsninger eller suspensjoner, kan generelt oppnås ved formulering av en aktiv bestanddel med en konvensjonell, topisk akseptabel konstituent eller fortynningsmiddel ved anvendelse av konvensjonell prosedyre velkjent på området.
Preparater for administrering ved insufflasjon kan være i form av et findelt pulver inneholdende partikler med en gjennomsnittlig diameter på for eksempel 30 nm eller meget mindre, fortrinnsvis 5 \ im eller mindre, og mer foretrukket mellom 5 nm og 1 nm, idet pulveret selv omfatter enten aktiv bestanddel alene eller er fortynnet med én eller flere fysiologisk akseptable bærere, så som laktose. Pulveret for insufflasjon blir deretter hensiktsmessig beholdt i en kapsel inneholdende for eksempel 1 til 50 mg aktiv bestanddel for anvendelse med en turbo-inhalator-anordning, så som slike som blir anvendt for insufflasjon av det kjente midlet natriumkromglykat.
Preparater for administrering ved inhalering kan være i form av en konvensjonell aerosol under trykk arrangert til å tømme ut den aktive bestanddel enten som en aerosol inneholdende findelt fast stoff eller flytende små dråper. Konvensjonelle aerosoldrivmidler, så som flyktige, fluorerte hydrokarboner eller hydrokar boner, kan anvendes, og aerosolanordningen blir hensiktsmessig arrangert til å tømme ut en oppmålt mengde av aktiv bestanddel.
For ytterligere informasjon om formulering henvises leseren til kapittel 25.2 i bind 5 av Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board), Pergamon Press 1990.
Generelt kan preparatene ovenfor fremstilles på konvensjonell måte ved anvendelse av konvensjonelle tilsetningsmidler.
Forbindelsen med formel (IA) vil normalt bli administrert til et varmblodig dyr i en enhetsdose innen området 5-5000 mg/m<2>av dyrets kroppsoverflate, det vil si omtrent 0,1-100 mg/kg, og dette gir normalt en terapeutisk effektiv dose. En en-hetsdoseform, så som en tablett eller kapsel, vil vanligvis inneholde for eksempel 1-250 mg aktiv bestanddel. Fortrinnsvis blir en daglig dose i området 1-50 mg/kg anvendt. Imidlertid vil den daglige dosen nødvendigvis variere, avhengig av verten som behandles, den spesielle administreringsvei og alvorlighetsgraden av sykdommen som behandles. Følgelig kan den optimale dose bestemmes av legen som behandler den enkelte pasient.
Vi har funnet at forbindelsene definert i foreliggende oppfinnelse, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, er effektive cellecyklushemmere (anti-celle-proliferasjonsmidler), og denne egenskapen er antatt å stamme fra deres HDAC-hemmende aktivitet. Vi antar også at forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan medvirke til hemning av angiogenese, aktivering av apoptose og differensiering. Følgelig er forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse forventet å være anvendelige ved behandling av sykdommer eller medisinske tilstander mediert helt eller delvis av HDAC-enzymer, det vil si at forbindelsene kan anvendes for å gi en HDAC-hemmende effekt hos et varmblodig dyr med behov for slik behandling. I henhold til et annet aspekt av foreliggende oppfinnelse tilveiebringes det en forbindelse med formel (IA), eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, som definert ovenfor, for anvendelse ved en metode for behandling av menneske- eller dyrekroppen ved terapi.
Således tilveiebringes det, i henhold til et ytterligere aspekt ifølge oppfinnelsen, en forbindelse med formel (IA), eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller promedikament derav, som definert ovenfor, for anvendelse som medikament.
Videre er det beskrevet anvendelse av en forbindelse med formel (IA), eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller promedikament derav, som definert ovenfor, ved fremstilling av et medikament for anvendelse til å gi en HDAC-hemmende effekt hos et varmblodig dyr, så som mennesket.
Også beskrevet er en metode for å gi en HDAC-hemmende effekt hos et varmblodig dyr, så som mennesket, med behov for slik behandling, som omfatter administrering til nevnte dyr av en effektiv mengde av en forbindelse med formel (IA), eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, som definert ovenfor.
Også beskrevet er anvendelse av en forbindelse med formel (IA), eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, som definert ovenfor, ved fremstilling av et medikament for anvendelse til å gi en cellecyklus-hemmende (an-ti-celle-proliferasjon) effekt hos et varmblodig dyr, så som mennesket.
Også beskrevet er en metode for å gi en cellecyklus-hemmende (an-ti-celle-proliferasjon) effekt hos et varmblodig dyr, så som mennesket, med behov for slik behandling, som omfatter administrering til nevnte dyr av en effektiv mengde av en forbindelse med formel (IA), eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, som definert ovenfor.
I henhold til et ytterligere trekk ved dette aspekt ifølge oppfinnelsen, tilveiebringes det en metode for behandling av kreft hos et varmblodig dyr, så som mennesket, med behov for slik behandling, som omfatter administrering til nevnte dyr av en effektiv mengde av en forbindelse med formel (IA), eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, som definert ovenfor.
I henhold til et ytterligere trekk ifølge oppfinnelsen tilveiebringes det en forbindelse med formel (IA), eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, som definert ovenfor, ved fremstilling av et medikament for anvendelse ved behandling av kreft.
I henhold til et ytterligere trekk ved dette aspekt ifølge oppfinnelsen, tilveiebringes det en forbindelse med formel (IA), eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, som definert ovenfor, for anvendelse ved behandling av kreft.
I henhold til et ytterligere trekk ved dette aspekt ifølge oppfinnelsen, tilveiebringes det anvendelse av en forbindelse med formel (IA), eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, som definert ovenfor, for anvendelse ved fremstilling av et medikament for behandling av kreft.
I et ytterligere aspekt av foreliggende oppfinnelse tilveiebringes det anvendelse av en forbindelse med formel (IA), eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, som definert ovenfor, ved fremstilling av et medikament for anvendelse ved lungekreft, kolorektalkreft, brystkreft, prostatakreft, lymfom og/eller leukemi.
I et ytterligere aspekt av foreliggende oppfinnelse tilveiebringes det en metode for behandling av lungekreft, kolorektalkreft, brystkreft, prostatakreft, lymfom eller leukemi hos et varmblodig dyr, så som mennesket, med behov for slik behandling, som omfatter administrering til nevnte dyr av en effektiv mengde av en forbindelse med formel (IA), eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, som definert ovenfor.
Kreft som er mottagelige for behandling med foreliggende oppfinnelse, omfatter øsofagealkreft, myelom, hepatocellulær, pankreatisk og cervikal kreft, Ew-ings tumor, nevroblastom, kaposis sarkom, eggstokk-kreft, brystkreft, kolorektalkreft, prostatakreft, blærekreft, melanom, lungekreft (omfattende ikke-småcellet lungekreft (NSCLC) og småcellet lungekreft (SCLC)), gastrisk kreft, hode- og hals-kreft, hjernekreft, nyrekreft, lymfom og leukemi.
Behandlingen definert ovenfor kan anvendes som eneste terapi, eller kan, i tillegg til en forbindelse ifølge oppfinnelsen, involvere én eller flere andre substan-ser og/eller behandlinger. Slik kombinert behandling kan oppnås ved samtidig, sekvensiell eller separat administrering av de individuelle komponenter av behandlingen. I området medisinsk onkologi er det normal praksis å anvende en kombinasjon av forskjellige former av behandling for å behandle hver pasient med kreft. Innen medisinsk onkologi kan den andre komponenten(e) i en slik kombinert behandling, i tillegg til den cellecyklus-hemmende behandlingen definert ovenfor, være kirurgi, radioterapi eller kjemoterapi. Slik kjemoterapi kan omfatte én eller flere av de følgende kategorier av anti-tumormidler: (i) antiproliferative/antineoplastiske medikamenter og kombinasjoner derav som anvendt innen medisinsk onkologi, så som alkyleringsmidler (for eksempel cis-platin, karboplatin, cyklofosfamid, nitrogensennep, melfalan, klorambucil, bu-sulfan og nitrosourinstoffer); antimetabolitter (for eksempel antifolater, så som fluorpyrimidiner som 5-fluoruracil og tegafur, raltitrexed, metotrexat, cytosin arabi-nosid og hydroksyurinstoff; antitumor-antibiotika (for eksempel antracykliner som adriamycin, bleomycin, doxorubicin, daunomycin, epirubicin, idarubicin, mitomycin- C, dactinomycin og mithramycin); antimitotiske midler (for eksempel vinca-alkaloider som vincristin, vinblastin, vindesin og vinorelbin, og taxoider som taxol og taxotere); og topoisomerase-inhibitorer (for eksempel epipodofyllotoksiner som etoposid og teniposid, amsacrin, topotecan og camptothecin); (ii) cytostatiske midler, så som antioøstrogener (for eksempel tamoxifen, tore-mifen, raloxifen, droloxifen og jodxyfen), østrogenreseptor-nedregulerende midler (foreksempel fulvestrant), antiandrogener (for eksempel bicalutamid, flutamid, nilutamid og cyproteron-acetat), LHRH-antagonister eller LHRH-agonister (for eksempel goserelin, leuprorelin og buserelin), progestogener (for eksempel me-gestrol-acetat), aromatase-hemmere (for eksempel som anastrozol, letrozol, vorazol og exemestan) og hemmere av 5a-reduktase, så som finasterid; (iii) midler som hemmer kreftcelle-invasjon (for eksempel metalloproteinase-hemmere som marimastat og hemmere av urokinaseplasminogen-aktivator-reseptor-funksjon); (iv) hemmere av vekstfaktorfunksjon, for eksempel omfatter slike hemmere vekstfaktor-antistoffer, vekstfaktorreseptor-antistoffer (for eksempel anti-erbb2-antistoffet trastuzumab [Herceptin™] og anti-erbb1-antistoffet cetuximab [C225]), farnesyltransferasehemmere, MEK-hemmere, tyrosinkinasehemmere og serin/- treoninkinasehemmere, for eksempel hemmere av den epidermale vekstfaktorfamilie (for eksempel EGFR-familie-tyrosinkinasehemmere, så som N-(3-klor-4-fluorfenyl)-7-metoksy-6-(3-morfolinopropoksy)kinazolin-4-amin (gefitinib,), N-(3-etynylfenyl)-6,7-bis(2-metoksyetoksy)kinazolin-4-amin (erlotinib, OSI-774) og 6-akrylamido-N-(3-klor-4-fluorfenyl)-7-(3-morfolinopropoksy)kinazolin-4-amin (Cl 1033)), for eksempel hemmere av blodetplate-avledet vekstfaktorfamilie, og for eksempel hemmere av hepatocytt-vekstfaktorfamilien; (v) antiangiogene midler, så som de som hemmer virkningene av vaskulært endotel-vekstfaktor, (for eksempel det anti-vaskulære endotelcelle-vekstfaktor-antistoffet bevacizumab [Avastin™], forbindelser så som dem beskrevet i internasjonale patentsøknader WO 97/22596, WO 97/30035, WO 97/32856 og WO 98/13354) og forbindelser som virker ved andre mekanismer (for eksempel li-nomid, hemmere av integrin avp3-funksjon og angiostatin); (vi) kar-skadende midler, så som Combretastatin A4 og forbindelser beskrevet i internasjonale patentsøknader WO 99/02166, WO00/40529, WO 00/41669, WO01/92224, WO02/04434 og WO02/08213; (vii) antisense-terapier, for eksempel dem rettet mot målene listet opp ovenfor, så som ISIS 2503, et anti-ras-antisense; (viii) genterapi-metoder, omfattende for eksempel metoder for å erstatte avvikende gener, så som avvikende p53 eller avvikende BRCA1 eller BRCA2, GDEPT- (gen-rettet enzym-promedikament-terapi) metoder, så som de som anvender cytosin-deaminase, thymidinkinase eller et bakterielt nitroreduktase-enzym, og metoder for å øke pasientens toleranse overfor kjemoterapi eller radioterapi, så som multi-medikamentresistens-genterapi;
(ix) immunoterapi-metoder, omfattende for eksempel ex vivo- og in vivo-metoderforå øke immunogenisiteten til pasientens tumorceller, så som transfek-sjon med cytokiner, så som interleukin 2, interleukin 4 eller granulocytt-makrofag-koloni-stimulerende faktor, metoder for å redusere T-celle-anergi, metoder som metoder som anvender transfekterte immunceller, så som cytokin-transfekterte dendrittceller, metoder som anvender cytokin-transfekterte tumorcellelinjer og metoder som anvender anti-idiotypiske antistoffer;
(x) cellecyklushemmere, omfattende for eksempel CDK-hemmere (for eksempel flavopiridol) og andre hemmere av cellecyklus-sjekkpunkter (for eksempel sjekkpunkt-kinase); hemmere av aurorakinase og andre kinaser involvert ved mi-tose- og cytokineseregulering (for eksempel mitotiske kinesiner); og andre histon-deacetylasehemmere; og
(xi) differensieringsmidler (for eksempel retinsyre og vitamin D).
I henhold til dette aspekt ifølge oppfinnelsen tilveiebringes det et farmasøy-tisk preparat omfattende en forbindelse med formel (IA) som definert ovenfor, og en ytterligere anti-tumor-substans som definert ovenfor, for kombinert behandling av kreft.
Det tilveiebringes videre en forbindelse med formel (IA), eller et farmasøy-tisk akseptabelt salt derav, som definert ovenfor, for anvendelse ved en metode for behandling av inflammatoriske sykdommer, autoimmune sykdommer og allergi/atopiske sykdommer.
Spesielt tilveiebringes det en forbindelse med formel (IA), eller et farmasøy-tisk akseptabelt salt derav, som definert ovenfor, for anvendelse ved en metode for behandling av inflammasjon av ledd (spesielt revmatoid artritt, osteoartritt og gikt), inflammasjon av mage-tarmkanalen (spesielt inflammatorisk tarmsykdom, ulcerøs kolitt og gastritt), inflammasjon av huden (spesielt psoriasis, eksem, dermatitt), multippel sklerose, aterosklerose, spondyloartropatier (ankyloserende spondylitt, psoriatisk artritt, artritt forbundet med ulcerøs kolitt), AIDS-relaterte nev-ropatier, systemisk lupus erythematosus, astma, kroniske obstruktive lungesyk-dommer, bronkitt, pleuritt, voksen åndenødssyndrom, sepsis og akutt og kronisk hepatitt (enten viral, bakteriell eller toksisk).
Videre tilveiebringes det en forbindelse med formel (IA), eller et farmasøy-tisk akseptabelt salt eller promedikament derav, som definert ovenfor, for anvendelse som et medikament ved behandling av inflammatoriske sykdommer, autoimmune sykdommer og allergi/atopiske sykdommer hos et varmblodig dyr, så som mennesket.
Spesielt tilveiebringes det en forbindelse med formel (IA), eller et farmasøy-tisk akseptabelt salt derav, som definert ovenfor, for anvendelse som et medikament ved behandling av inflammasjon av ledd (spesielt revmatoid artritt, osteoartritt og gikt), inflammasjon av mave-tarmkanalen (spesielt inflammatorisk tarmsykdom, ulcerøs kolitt og gastritt), inflammasjon av huden (spesielt psoriasis, eksem, dermatitt), multippel sklerose, aterosklerose, spondyloartropatier (ankyloserende spondylitt, psoriatisk artritt, artritt forbundet med ulcerøs kolitt), AIDS-relaterte nev-ropatier, systemisk lupus erythematosus, astma, kroniske obstruktive lungesyk-dommer, bronkitt, pleuritt, voksen åndenødssyndrom, sepsis og akutt og kronisk hepatitt (enten viral, bakteriell eller toksisk).
Videre tilveiebringes det anvendelse av en forbindelse med formel (IA), eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, som definert ovenfor, ved fremstilling av et medikament for anvendelse ved behandling av inflammatoriske sykdommer, autoimmune sykdommer og allergi/atopiske sykdommer hos et varmblodig dyr, så som mennesket.
Som angitt ovenfor vil størrelsen av dosen som er nødvendig for terapeutisk eller profylaktisk behandling av en spesiell celle-proliferasjonssykdom nødvendig-vis variere, avhengig av verten som behandles, administreringsveien og alvorlig hetsgraden av sykdommen som behandles. En enhetsdose i området for eksempel 1-100 mg/kg, fortrinnsvis 1-50 mg/kg, forespeiles.
I tillegg til anvendelse av dem i terapeutisk medisin, er forbindelsene med formel (IA) og deres farmasøytisk akseptable salter derav, også anvendelige som farmakologisk verktøy i utviklingen og standardisering av in vitro- og in wVo-test-systemer for evaluering av virkningene av hemmere av cellecyklus-aktivitet i labo-ratoriedyr, så som katter, hunder, kaniner, aper, rotter og mus, som en del av sø-kingen etter nye terapeutiske midler.
Oppfinnelsen vil nå bli illustrert i de følgende eksempler, hvor, generelt:
(i) prosedyrer ble utført ved omgivelsestemperatur, det vil si i området 17 til 25°C og under en atmosfære av en inert gass, så som argon, hvis ikke annet er angitt; (ii) inndampninger ble utført ved rotasjonsinndampning under vakuum og opparbeidelsesprosedyrer ble utført etter fjerning av gjenværende faste stoffer ved filtrering; (iii) kolonnekromatografi (med flash-metoden) og medium trykk væske-kromatografi (MPLC) ble utført med Merck Kieselgel silika (Art. 9385) eller Merck Lichroprep RP-18 (Art. 9303) reversert fase-silika anskaffet fra E. Merck, Darm-stadt, Tyskland, eller ved anvendelse avferdig forhåndspakkede ("proprietory pre-packed") normalfase-silikapatroner, for eksempel Redisep(TM) kromatografipatro-ner for éngangsbruk anskaffet fra Presearch Ltd., Hitchin, UK, eller høytrykks-væskekromatografi (HPLC) ble utført med C18 reversert fase-silika, for eksempel met et Dynamax C-18 60Å preparativ reversert fase-kolonne; (iv) utbytter, hvor til stede, er ikke nødvendigvis de maksimalt oppnåeli-ge; (v) generelt ble strukturene til sluttproduktene med formel (IA) bekreftet ved kjernemagnetisk resonans- (NMR) og/eller massespektralteknikker; hurtig atom-bombardement- (FAB) massespektraldata ble oppnådd ved anvendelse av et Plat-form-spektrometer og, hvor passende, ble enten positivt ion-data eller negativt ion-data oppsamlet; NMR-kjemiske skiftverdier ble målt med delta-skala, proton-magnetiske resonansspektre ble bestemt ved anvendelse av et Jeol JNM EX 400-spektrometer som opererer ved en feltstyrke på 400 MHz, et Varian Gemini 2000-spektrometer som opererer ved en feltstyrke på 300 MHz, et Bruker DPX-400 som opererer ved 400 MHz, eller et Bruker AM300-spektrometer som opererer ved en feltstyrke på 300 MHz - målinger ble gjort ved omgivelsestemperatur, hvis ikke spesifisert på annen måte; (vi) mellomprodukter ble generelt ikke fullstendigkarakterisert, og renhet ble bedømt ved tynnsjikt-kromatografisk, HPLC, infra-rød (IR) og/eller NMR-analyse; (vii) smeltepunkter er ikke korrigert, og ble bestemt ved anvendelse av et Mettler SP62 automatisk smeltepunktapparat eller et olje-badapparat; smeltepunkter for sluttproduktene med formel (IA) ble bestemt etter krystallisasjon fra et kon-vensjonelt organisk løsningsmiddel, så som etanol, metanol, aceton, eter eller heksan, alene eller i blanding;
(viii) følgende forkortelser er blitt anvendt:
DMSO dimetylsulfoksid
TH F tetrahydrofuran
DIPEA N,N-diisopropyletylamin
I PA isopropylalkohol
Boc/BOC tert-butyloksykarbonyl
HCI saltsyre
Cbz/CBZ benzyloksykarbonyl
Tf trifluormetylsulfonyl
LiHMDS litiumheksametyl-disilazid
PhNTf2N-fenyl-bis(trifluormetan-sulfonimid)
DME 1,2-dimetoksyetan
CDMT 2-klor-4,6-dimetoksy-1,3,5-triazin
Eksempel 1
N-( 2- aminofenvl)- 4-{ 1 -[( 1 - metvl- 1 H- pvrazol- 4- vl) metvllpiperidin- 4- vl) benzamid.
Til et reaksjonskar fylt med 1-metyl-1H-pyrazol-4-karboksaldehyd (84,5 mg, 0,77 mmol) ble det tilsatt en løsning av tert-butyl-2-[(4-piperidin-4-ylbenzoyl)-aminojfenylkarbamat (fremstilt som beskrevet i metode 1 nedenfor; 300 mg, 0,76 mmol) i diklormetan (7 ml) og N,N-dimetylformamid (0,5 ml). Tert-butyl-2-[(4-piperidin-4-ylbenzoyl)amino]fenylkarbamat kan også fremstilles i henhold til fremgangsmåten beskrevet i metode 4 nedenfor. Eddiksyre (50 ni, 0,87 mmol) ble tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt ved omgivelsestemperatur i 45 minutter. Natrium-triacetoksyborhydrid (250 mg, 1,18 mmol) ble deretter tilsatt, og reaksjonsblandingen ble omrørt i ytterligere 76 timer før den ble fortynnet med metanol og hellet direkte i en SCX-2-patron (10 g). Patronen ble vasket gjennom med metanol (80 ml) før eluering av produktene med en 2M løsning av ammoniakk i metanol (50 ml). Det relevante fraksjoner ble inndampet til tørrhet og det resulterende residuet gjenoppløst i diklormetan (3 ml) og behandlet med trifluoreddiksyre (1 ml). Denne blandingen ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 2 timer før fortynning med diklormetan og helling i en SCX-2-patron (5 g). Patronen ble vasket med metanol (20 ml), deretter ble produkter eluert med en 2M løsning av ammoniakk i metanol (20 ml). Den ammoniakkalske fraksjonen ble inndampet til tørrhet og det resulterende residuet renset ved flash-kromatografi på silika under eluering med 10 % metanol i diklormetan, hvilket gir tittelforbindelsen (117 mg, 40 %); NMR-spektrum: (DMSO de) 6 1,70 (m, 4H), 2,01 (t, 2H), 2,57 (m, 1H), 2,95 (m, 2H), 3,38 (s, 2H), 3,81 (s, 3H), 4,86 (s, 2H), 6,60 (m, 1H), 6,78 (m, 1H), 6,97 (m, 1H), 7,18 (m, 1H), 7,31 (s, 1H), 7,37 (d, 2H), 7,57 (s, 1H), 7,91 (d, 2H), 9,56 (s, 1H); massespektrum: M+H<+>390.
Eksempel 2A og referanse- eksempel 2B
Ved anvendelse av en metode analog med den beskrevet i eksempel 1, ble tert-butyl-2-[(4-piperidin-4-ylbenzoyl)amino]fenylkarbamat omsatt med det passende pyrazolkarbaldehyd-utgangsmateriale (SM), hvilket gir forbindelsene beskrevet i tabell 1
Referanse- eksempel 3
N-( 2- aminofenvl)- 4-[ 1 -( 1 H- pvrazol- 3- vlmetvl) piperidin- 4- vllbenzamid.
Tert-butyl-2-[(4-piperidin-4-ylbenzoyl)amino]fenylkarbamat (fremstilt som beskrevet i metode 1 nedenfor; 200 mg, 0,51 mmol) og 1 H-pyrazol-3-karbaldehyd (50,7 mg, 0,53 mmol) ble omrørt ved omgivelsestemperatur i diklormetan (5 ml) i 1 time. Natrium-triacetoksyborhydrid (150 mg, 0,71 mmol) ble tilsatt og blandingen omrørt ved omgivelsestemperatur i 48 timer. Den resulterende løsningen ble absorbert på en SCX-2-kolonne som ble vasket med metanol (2 kolonnevolumer), og deretter ble produktet eluert med en 2M løsning av ammoniakk i metanol (2 kolonnevolumer), hvilket gir et skum. Dette ble oppløst i 1,4-dioksan (2 ml), en 4M løsning av hydrogenklorid i 1,4-dioksan (2 ml) ble tilsatt og løsningen omrørt ved omgivelsestemperatur i 48 timer. Produktet ble filtrert og vasket med dietyleter og luft-tørket. Det resulterende faste stoffet ble oppløst i vann, gjort basisk med 2N natriumhydroksid og det resulterende faste stoffet filtrert, vasket med vann og tør-ket under vakuum, hvilket gir tittelforbindelsen (61 mg, 44 %). NMR-spektrum:<1>H NMR (DMSO de) 8 1,71 (m, 4H), 2,07 (m, 2H), 2,56 (m, 1H), 2,95 (m, 2H), 3,53 (s, 2H), 4,86 (s, 2H), 6,16 (s, 1H), 6,60 (m, 1H), 6,78 (d, 1H), 6,97 (t, 1H), 7,18 (d, 1H), 7,37 (d, 2H), 7,64 (m, 1H), 7,91 (d, 2H), 9,55 (s, 1H), 12,59 (m, 1H); massespektrum: M+H<+>376.
Referanse- eksempel 4
N-( 2- aminofenvl)- 4-( 1-[( 5- metoksv- 1, 3- dimetvl- 1H- pvrazol- 4- vl) metvllpiperidin- 4- vl) benzamid.
Ved anvendelse av en metode analog med den beskrevet i referanse-eksempel 3, ble tert-butyl-2-[(4-piperidin-4-ylbenzoyl)amino]fenylkarbamat (fremstilt som beskrevet i metode 1 nedenfor; 200 mg, 0,51 mmol) omsatt med 5-metoksy-1,3-dimetyl-1H-pyrazol-4-karbaldehyd (92,6 mg, 0,60 mmol), hvilket gir tittelforbindelsen (68 mg, 36 %); NMR-spektrum: (DMSO de) 5 1,63 (m, 2H), 1,78 (m, 2H), 2,00 (m, 2H), 2,06 (s, 3H), 2,57 (m, 1H), 2,94 (m, 2H), 3,25 (s, 2H), 3,50 (s, 3H), 3,99 (s, 3H), 4,86 (brs, 2H), 6,60 (m, 1H), 6,78 (d, 1H), 6,97 (m, 1H), 7,17 (d, 1H), 7,37 (d, 2H), 7,91 (d, 2H), 9,55 (s, 1H); massespektrum: M+H<+>434.
Referanse- eksempel 5
N-( 2- aminofenvl)- 4-{ 1-[( 3- etvl- 1H- pvrazol- 4- vl) metvllpiperidin- 4- vl) benzamid.
Tert-butyl-2-[(4-piperidin-4-ylbenzoyl)amino]fenylkarbamat (fremstilt som beskrevet i metode 1 nedenfor; 395 mg, 1,0 mmol) og 3-etyl-1 H-pyrazol-4-karb-aldehyd (149 mg, 1,2 mmol) omrørt ved omgivelsestemperatur i diklormetan (10 ml) i 1 time. Natrium-triacetoksyborhydrid (297 mg, 1,4 mmol) ble tilsatt og blandingen omrørt ved omgivelsestemperatur i 24 timer. Den resulterende løsningen ble absorbert på en SCX-2-kolonne som ble vasket med metanol (2 kolonnevolumer), og deretter ble produktet eluert med en 2M løsning av ammoniakk i metanol (2 kolonnevolumer), hvilket gir produktet som et hvitt skum. Dette ble renset ved kromatografi på silika under eluering med 10% metanol i diklormetan. Residuet ble oppløst i diklormetan (4 ml) og trifluoreddiksyre (1 ml) tilsatt og blandingen omrørt i 3 timer ved omgivelsestemperatur. Den resulterende løsningen ble absorbert på en SCX-2-kolonne som ble vasket med metanol (2 kolonnevolumer), og deretter ble produktet eluert med en 2M løsning av ammoniakk i metanol (2 kolonnevolumer), hvilket gir tittelforbindelsen (232 mg, 75 %). NMR-spektrum: (DMSO de) 6 1,18 (t, 3H), 1,65 (m, 2H), 1,77 (m, 2H), 2,00 (m, 2H), 2,57 (m, 3H), 2,95 (m, 2H), 3,34 (s, 2H), 4,86 (brs, 2H), 6,60 (m, 1H), 6,78 (d, 1H), 6,97 (m, 1H), 7,17 (d, 1H), 7,29 (brs, 1H), 7,37 (d, 2H), 7,91 (d, 2H), 9,55 (s, 1H), 12,39 (s, 1H); massespektrum: M+HM04.
Eksempel 6
N-( 2- aminofenyl)- 4-{ 1 -[( 1, 3, 5- trimetyl- 1 H- pyrazol- 4- vl) metvllpiperidin- 4- yl)-benzamid.
Ved anvendelse av en metode analog med den beskrevet i referanse-eksempel 5, ble tert-butyl-2-[(4-piperidin-4-ylbenzoyl)amino]fenylkarbamat (fremstilt som beskrevet i metode 1 nedenfor; 200 mg, 0,51 mmol) omsatt med 1,3,5-trimetyl-1H-pyrazol-4-karbaldehyd (83,5 mg, 0,60 mmol), hvilket gir tittelforbindelsen (70 mg, 56 %); NM R-spektrum: (DMSO d6) 8 1,65 (m, 2H), 1,77 (m, 2H), 1,98 (m, 2H), 2,09 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,57 (m, 1H), 2,92 (m, 2H), 3,24 (s, 2H), 3,63 (s, 3H), 4,86 (brs, 2H), 6,60 (m, 1H), 6,78 (d, 1H), 6,97 (m, 1H), 7,17 (d, 1H), 7,37 (d, 2H), 7,91 (d, 2H), 9,55 (s, 1H); massespektrum: M+H<+>418.
Eksempel 7A
N-( 2- aminofenvl)- 4-{ 1 -[( 1, 3- dimetvl- 1 H- pvrazol- 4- vl) metvllpiperidin- 4- vl)-benzamid.
Tert-butyl (2-{[4-(1 -{1,3-dimetyl-1 H-pyrazol-4-ylmetyl}piperidin-4-yl)benzoyl]-amino}fenyl)karbamat (fremstilt som beskrevet i metode 6 nedenfor; 7,61 g, 15,11 mmol) ble oppløst i 1,4 dioksan (70 ml) og avkjølt til 0 °C, ved anvendelse av et is-vannbad. En 4M løsning av hydrogenklorid i 1,4-dioksan (150 ml, 600 mmol) ble deretter langsomt tilsatt. Den resulterende suspensjon fikk oppvarmes til romtemperatur og klumper brukket opp ved omrøring med en glasstav. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 18 timer. Blandingen ble filtrert, under sug. Det oppnådde faste stoffet ble oppløst i vann (200 ml) og løsningen regulert til pH 12 ved langsom tilsetning av en 2M vandig løsning av natriumhydroksid. Blandingen oppnådd ble ekstrahert med diklormetan (300 ml) og de organiske faser separert. Den vandige fasen ble videre ekstrahert med diklormetan (200 ml) og de samlede ekstrakter vasket med saltvann, tørket over magnesiumsulfat, filtrert og inndampet, hvilket gir en klar gummi. Gummien ble tatt opp i dietyleter og gjeninn-dampet til tørrhet, hvilket gir tittelforbindelsen (5,69 g, 93 %); NMR-spektrum (CDCb) 6 1,81 (m, 4H), 2,07 (m, 2H), 2,25 (s, 3H), 2,56 (m, 1H), 3,04 (m, 2H), 3,39 (s, 2H), 3,81 (s, 3H), 3,85 (s, 2H), 6,84 (m, 2H), 7,08 (m, 1H), 7,24 (s, 1H), 7,33 (m, 3H), 7,82 (m, 3H). Massespektrum: M+HM04.
Eksempel 7B
N-( 2- aminofenvl)- 4-{ 1 -[( 1, 3- dimetvl- 1 H- pvrazol- 4- vl) metvllpiperidin- 4- vl)-benzamid.
Tert-butyl(2-{[4-(1 -{1,3-dimetyl-1 H-pyrazol-4-ylmetyl}piperidin-4-yl)benzoyl]-amino}fenyl)karbamat (metode 6 nedenfor; 92,3 g, 183,3 mmol) ble oppslemmet i metanol (754 ml) og vann (141 ml) og avkjølt til 0-5 °C. Konsentrert saltsyre ble tilsatt, hvilket opprettholder temperaturen under 20 °C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 20 timer ved omgivelsestemperatur. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til 0-5 °C og vandig natriumhydroksid-løsning tilsatt, hvilket opprettholder temperaturen på under 20 °C inntil en pH på 12-14 blir oppnådd. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til tilbakeløpstemperatur i 30 minutter, før avkjøling til 20 °C i løept av ca. 4 timer. Produktet ble oppsamlet ved filtrering og vasket med vandig metanol før det ble tørket under vakuum ved 45 °C til konstant vekt, hvilket gir tittelforbindelsen (63,3 g 86 %). NMR-spektrum (DMSO de), 1,65 (m, 2H), 1,73 (m, 2H), 1,96 (t, 2H), 2,08 (s, 3H), 2,55 (m, 1H), 2,92 (d, 2H), 3,28 (s, 2H), 3,75 (s, 3H), 4,87 (s, 2H), 6,59 (m, 1H), 6,77(m, 1H), 6,96 (m, 1H), 7,2 (d, 1H), 7,35 (d, 2H), 7,44 (s, 1H), 7,90 (d, 2H), 9,56 (s, 1H). Massespektrum: M+HM04.
Eksempel 8
N-( 2- aminofenyl)- 4-{ 1 -[( 1, 5- dimetyl- 1 H- pyrazol- 4- vl) metvllpiperidin- 4- yl)-benzamid.
Tert-butyl{2-[(4-{1 -[(1,5-dimetyl-1 H-pyrazol-4-yl)metyl]piperidin-4-yl}-benzoyl)amino]fenyl}karbamat (fremstilt som beskrevet i metode 7; 308 mg, 0,61 mmol) ble tatt opp i diklormetan (2 ml) og trifluoreddiksyre (1 ml) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 1 time før den ble hellet i en SCX-3-patron (5 g). Patronen ble vasket med diklormetan (50 ml) og metanol (50 ml) før eluering av produktet med en 2M løsning av ammoniakk i metanol (50 ml). Den ammoniakkalske fraksjonen ble inndampet, hvilket gir et hvitt, fast stoff (182 mg) som ble renset ved reversert fase-preparativ HPLC, hvilket gir tittelforbindelsen (134 mg, 55%); NMR-spektrum: (DMSO de) 5 1,70 (m, 4H), 2,01 (m, 2H), 2,22 (s, 3H), 2,57 (m, 1H), 2,95 (m, 2H), 3,28 (s, 2H), 3,71 (s, 3H), 4,86 (s, 2H), 6,60 (m, 1H), 6,78 (m, 1H), 6,97 (m, 1H), 7,17 (m, 1H), 7,23 (s, 1H), 7,37 (d, 2H), 7,90 (d, 2H), 9,55 (s, 1H); massespektrum: M+HM04.
Referanse- eksempel 9
N-( 2- aminofenvl)- 4-{ 1 -[( 1 - etvl- 5- metvl- 1 H- pvrazol- 4- vl) metvHpiperidin- 4- vl)-benzamid.
En løsning av 1-etyl-5-metyl-1H-pyrazol-4-karbaldehyd (141 mg, 1,02 mmol) i diklormetan (1 ml) ble satt til en løsning av tert-butyl-2-[(4-piperidin-4-ylbenzoyl)amino]fenylkarbamat (fremstilt som beskrevet i metode 1 nedenfor; 300 mg, 0,76 mmol) i diklormetan (6,5 ml). Eddiksyre (45 ni, 0,79 mmol) ble tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt i 4 timer. N,N-dimetylformamid (1 ml) ble deretter tilsatt og omrøring fortsatt i ytterligere 30 minutter før tilsetning av natrium-triacetoksyborhydrid (245 mg, 1,16 mmol) som fast stoff. Reaksjonsblandingen ble deretter omrørt ved omgivelsestemperatur i 18 timer (natten over). Reaksjonsblandingen ble fortynnet til det doble volum ved tilsetning av metanol og hellet direkte i en forhåndsvasket (med metanol) SCX-2-patron (10 g). Patronen ble vasket med metanol (60 ml) før eluering av produkter med en 2M ammoniakkløsning i metanol (50 ml). Det ammoniakkalske elueringsmiddel ble inndampet, hvilket gir en farge-løs gummi (420 mg) som ble tatt opp i diklormetan (5 ml) og behandlet med trifluoreddiksyre (2 ml). Blandingen ble omrørt i 2 timer før fortynning med diklormetan (10 ml) og helling i en forhåndsvasket (med metanol) SCX-2-patron (10 g). Patronen ble vasket gjennom med diklormetan (40 ml), metanol (50 ml), og deretter ble produkter eluert med en 2M løsning av ammoniakk i metanol (50 ml). Inndampning av den ammoniakkalske fraksjon ga en blekgul gummi (300 mg) som ble renset ved revers fase-preparativ HPLC, hvilket gir tittelforbindelsen (172 mg, 54%); NMR-spektrum: (DMSO de) 8 1,27 (t, 3H), 1,66 (m, 4H), 1,98 (m, 2H), 2,21 (s, 3H), 2,56 (m, 1H), 2,92 (m, 2H), 3,29 (s, 2H), 4,02 (q, 2H), 4,85 (s, 2H), 6,59
(m, 1H), 6,77 (m, 1H), 6,95 (m, 1H), 7,16 (m, 1H), 7,23 (s, 1H), 7,35 (d, 2H), 7,89 (d, 2H), 9,54 (s, 1H); massespektrum: M+HM18.
Referanse- eksempler 10 og 11
Ved anvendelse av en metode analog med den beskrevet i eksempel 9, ble tert-butyl-2-[(4-piperidin-4-ylbenzoyl)amino]fenylkarbamat (fremstilt som beskrevet i metode 1 nedenfor) omsatt med det passende pyrazolkarbaldehyd-utgangsmateriale, hvilket gir forbindelsene beskrevet i tabell 2.
Eks- R Analytiske data SM empel
11 NMR-spektrum: (DMSO de) 5 1,32 Kommersielt (t, 3H), 1,67 (m, 4H), 1,98 (m, 2H), tilgjengelig 2,12 (s, 3H), 2,56 (m, 1H), 2,92 }>(m, 2H), 3,28 (s, 2H), 3,99 (q, 2H), "N 4,85 (s, 2H), 6,58 (m, 1H),6,77
/ (m, 1H), 6,95 (m, 1H), 7,16 (m,
1H), 7,35 (d, 2H), 7,47 (s, 1H),
7,89 (d, 2H), 9,54 (s, 1H); mass-
espektrum: M+HM18
Metode- del - Fremstilling av utgangsmaterialer.
Metode 1
Tert- butvl { 2- r( 4- piperidin- 4- vlbenzovl) aminolfenvl>karbamat.
Til en løsning av benzyl-4-{4-[({2-[(tert-butoksykarbonyl)amino]fenyl}amino)-karbonyl]fenyl}-3,6-dihydropyridin-1(2H)-karboksylat (269 g, 524 mmol; fremstilt som beskrevet i metode 2 nedenfor) i metanol (3000 ml) ble det tilsatt 10 % palladium-på-trekull (10 g). Reaksjonsblandingen ble plassert under 5 bar trykk på hydrogengass og oppvarmet til 50 °C i 1 time. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur, filtrert gjennom et sjikt av celitt og løsningsmidlet inndampet under redusert trykk. Det resulterende skum ble utgnidd under dietyleter og filtrert, hvilket gir et hvitt, fast stoff. Dette produktet ble finmalt og omrørt med 95:5 dietyleter/- etylacetat, deretter oppsamlet ved sugefiltrering. Dette faste stoffet ble vasket med dietyleter, isoheksan og tørket under vakuum, hvilket gir tittelforbindelsen (167 g, 81 %); NMR-spektrum: (DMSO-de) 1,45 (s, 9H), 1,57 (m, 2H), 1,72 (m, 2H), 2,61 (t, 2H), 2,69 (m, 1H), 3,07 (m, 2H), 7,18 (m, 2H), 7,40 (d, 2H), 7,53 (d, 2H), 7,91 (d, 2H), 8,70 (brs, 1H), 9,82 (brs, 1H); massespektrum: M+H<+>396.
Metode 2
Benzvl- 4-{ 4- r({ 2- r( tert- butoksvkarbonvl) aminolfenvl) amino) karbonvllfenyl>-3, 6- dihvdropyridin- 1( 2H)- karboksvlat.
Tetrakis(trifenylfosfin)palladium(0) (8,0 g, 6,92 mmol) ble tilsatt til en omrørt suspensjon av N-(2-t-butoksykarbonylaminofenyl)-4-(4,4,5,5-tetrametyl-1,3,2,-di-oksaborolan-2-yl)benzamid (288 g, 657 mmol; fremstilt som beskrevet i interna-sjonal patentpubl. nr. WO 03/087057, metode 13, side 60) og benzyl-4-{[(trifluor-metyl)sulfonyl]oksy}-3,6-dihydropyridin-1(2H)-karboksylat (240 g, 657 mmol; fremstilt som beskrevet i metode 3 nedenfor) i 1,2-dimetoksyetan (3000 ml) og mettet vandig natriumbikarbonat-løsning (3000 ml). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til 80 °C i 7 timer før den fikk avkjøles til omgivelsestemperatur, med omrøring. Reaksjonsblandingen ble deretter hellet i vann (2000 ml) og ekstrahert med etylacetat. De organiske ekstrakter ble deretter tørket over magnesiumsulfat, filtrert og inndampet til tørrhet, hvilket gir råproduktet som et grått, fast stoff. Dette ble renset ved flash-kolonnekromatografi på silika, under eluering med etylacetat/heksan (30:70 volum/volum), hvilket gir tittelforbindelsen (279 g, 82 %); NMR-spektrum: (DMSO-de) 8 1,44 (s, 9H), 2,56 (m, 2H), 3,66 (m, 2H), 4,14 (m, 2H), 5,13 (s, 2H), 6,34 (m, 1H), 7,18 (m, 2H), 7,33 (m, 1H), 7,40 (m, 4H), 7,54 (m, 2H), 7,62 (d, 2H), 7,94 (d, 2H), 8,64 (brs, 1H), 9,81 (brs, 1H); massespektrum: MNa<+>550.
Metode 3
Benzvl- 4-{[( trifluormetvl) sulfonvlloksv)- 3, 6- dihvdropyridin- 1( 2H)- karboks^
Benzyl-4-oksopiperidin-1-karboksylat (147 g, 630 mmol) ble oppløst i tetrahydrofuran (500 ml) under en atmosfære av nitrogen. Denne løsningen ble, dråpevis i løpet av 2 timer, tilsatt til en omrørt løsning av litiumheksametyl-disilazid (20 % løsning i tetrahydrofuran, 556 ml, 662 mmol) under nitrogen, hvilket opprettholder reaksjonstemperaturen under -70 °C. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved -75 °C i ytterligere 1 time før dråpevis tilsetning i løpet av 2 timer av en løsning av N-fenyl-bis(trifluormetansulfonimid) (236 g, 661 mmol) i tetrahydrofuran (950 ml), hvilket igjen opprettholder reaksjonstemperaturen under -70 °C. Reaksjonen fikk deretter oppvarmes til romtemperatur natten over, fulgt av porsjonsvis tilsetning av 2M vandig natriumhydroksid-løsning (800 ml). Lagene ble separert og det organiske laget vasket med ytterligere 2M vandig natriumhydroksid-løsning (600 ml), før inndampning til tørrhet. Det resulterende faste stoffet ble oppløst i dietyleter og vasket med vann. Det organiske laget ble deretter filtrert gjennom celitt, tørket over natriumsulfat og inndampet til tørrhet, hvilket gir tittelforbindelsen (140 g, 61 %), som ble tatt med videre til neste trinn uten ytterligere rensning.
Metode 4
Tert- butyl{ 2- r( 4- piperidin- 4- ylbenzoyl) aminolfenyl) karbamat ( alternativ metode).
Til tert-butyl{2-[4-pyrid-4-ylbenzoyl)amino]fenyl}karbamat (20 g, 51,35 mmol; fremstilt som beskrevet i metode 5A eller 5B nedenfor), 10 % palladium-på-trekull (3,17 g) og sitronsyre (4,75 g, 24,65 mmol) ble det tilsatt vann (80 ml) og IPA (80 ml). Reaksjonsblandingen ble plassert under 4 bar trykk på hydrogengass og oppvarmet til 70 °C i 5 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til 50 °C og filtrert gjennom et sjikt av celitt. Blandingen ble oppvarmet til 70 °C før 20 % vekt/- vekt vandig natriumhydroksid-løsning ble tilsatt (15 ml) i løpet av 10 minutter til pH 10-11. Ytterligere vann (30 ml) ble tilsatt, og deretter ble blandingen avkjølt til 40 °C i løpet av 1 time, deretter igjen oppvarmet til 60 °C i 30 minutter før avkjøling tilbake til omgivelsestemperatur. Det resulterende, utfelte stoff ble oppsamlet ved filtrering, vasket med vann (2 x 20 ml) og tørket under vakuum, ved 50 °C, hvilket gir tittelforbindelsen (17,6 g, 84 %); NMR-spektrum: (DMSO-de) 8 1,45 (s, 9H), 1,53 (m, 2H), 1,70 (m, 2H), 2,58 (m, 1H), 2,66 (m, 2H), 3,03 (m, 2H), 3,31 (brs, 1H), 7,17 (m, 2H), 7,35 (d, 2H), 7,54 (m, 2H), 7,89 (d, 2H), 8,65 (brs, 1H), 9,75 (br s, 1H). Massespektrum: M+H<+>396.
Metode 5A
Tert- butvl{ 2- r4- pvrid- 4- vlbenzovl) aminolfenyl) karbamat.
Til natrium-4-(4-pyridyl)benzoat (55,2 g, 236,2 mmol), boc-o-fenylendiamin (45,7 g, 217,6 mmol) og N-metylmorfolin (24 ml) i acetonitril (300 ml) ble det tilsatt en siktet løsning av 2-klor-4,6-dimetoksy-1,3,5-triazin (48,5 g, 270,5 mmol) i acetonitril (152 ml) i løpet av 3 timer. Blandingen ble omrørt i 22 timer før vann (460 ml) ble tilsatt. Det resulterende presipitat ble oppsamlet ved filtrering, vasket med 50 % vandig acetonitril (3 x 100 ml) og tørket under vakuum, ved 50 °C, hvilket gir tittelforbindelsen (75,6 g, 90 %); NMR-spektrum: (DMSO-de): 81,45 (s, 9H), 7,17 (m, 2H), 7,56 (m, 2H), 7,81 (d, 2H), 7,99 (d, 2H), 8,11 (d, 2H), 8,69 (d, 2H), 9,94 (brs, 1H). Massespektrum: M+H<T>390.
Metode 5B
Tert- butvl{ 2-[ 4- pvrid- 4- vlbenzovl) aminolfenvl) karbamat.
Natrium-4-(4-pyridyl)benzoat (10 g, 45,2 mmol) i acetonitril (60 ml) ble oppvarmet til 70 °C, og deretter ble tionylklorid (6,6 ml, 90,4 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved tilbakeløpstemperatur i 5 timer før den ble avkjølt til omgivelsestemperatur. Trietylamin (12,6 ml, 90,4 mmol) ble forsiktig tilsatt, fulgt av en oppvarmet løsning av Boc-o-fenylendiamin (9,42 g, 45,2 mmol) i acetonitril (15 ml) som ble tilsatt i løpet av 10 minutter. En løsning av natriumhydroksid (8,6 g, 109 mmol) i vann (60 ml) ble tilsatt og det resulterende faste stoffet oppsamlet ved filtrering, vasket med vann (20 ml) og tørket under vakuum, ved 50 °C, hvilket gir tittelforbindelsen (12,6 g, 68 %). NMR-spektrum: (DMSO-de): 8 1,45 (s, 9H), (7,17 (m, 2H), 7,56 (m, 2H), 7,81 (d, 2H), 7,99 (d, 2H), 8,11 (d, 2H) 8,69 (d, 2H), 9,94 (br s, 1H). Massespektrum: M+H<T>390.
Metode 6A
Tert-butyl(2-{[4-(1 -{1,3-dimetyl-1 H-pyrazol-4-ylmetyl}piperidin-4-yl)benzoyl]-amino}fenyl)karbamat.
Tert-butyl-2-[(4-piperidin-4-ylbenzoyl)amino]fenylkarbamat (6,83 g, 17,3 mmol) og 1,3-dimetyl-1H-pyrazol-4-karbaldehyd (3,0 g, 24,2 mmol) ble oppløst i diklormetan (150 ml). Eddiksyre (996 ni, 17,3 mmol) ble deretter tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt ved romtemperatur i fire timer. Natrium-triacetoksyborhydrid (5,49 g, 25,9 mmol) ble deretter tilsatt og reaksjonsblanding omrørt i ytterligere 18 timer. Mettet, vandig natriumbikarbonat-løsning (300 ml) ble deretter forsiktig tilsatt, fulgt av diklormetan (100 ml). Det organiske laget ble separert og det vandige laget igjen ekstrahert med mer diklormetan (150 ml). De samlede organiske ekstrakter ble tørket over magnesiumsulfat, filtrert og inndampet til tørrhet. Det oppnådde residuet ble renset ved flash-kromatografi på silika, under eluering med en 5 % (volum/volum) løsning av metanol i diklormetan, fulgt av en stigende gradient av 5 -10 % (volum/volum) metanol i diklormetan, hvilket gir en klar gummi som ble tatt opp i dietyleter og inndampet til tørrhet, hvilket gir tittelforbindelsen (7,61 g, 87 %); NMR-spektrum: (DMSO de) 8 1,43 (s, 9H), 1,69 (m, 4H), 1,98 (m, 2H), 2,10 (s, 3H), 2,56 (m, 1H), 2,92 (m, 2H), 3,26 (s, 2H), 3,70 (s, 3H), 7,15 (m, 2H), 7,40 (m, 3H), 7,52 (m, 2H), 7,87 (d, 2H), 8,60 (s, 1H), 9,73 (s, 1H); massespektrum: M+HT504.
Metode 6B
Tert- butvl( 2-( r4-( 1 -{ 1, 3- dimetvl- 1 H- pvrazol- 4- vlmetvl) piperidin- 4- vl) benzovll-aminolfenvDkarbamat.
Tert-butyl-2-[(4-piperidin-4-ylbenzoyl)amino]fenylkarbamat (fremstilt som beskrevet i metode 4 ovenfor; 108,1 g, 273,3 mmol), 1,3-dimetyl-1H-pyrazol-4-karbaldehyd (35,6 g, 287 mmol) og palladium-på-trekull (3,09 g, 1,37 mmol) ble tilsatt til et egnet trykk-kar. Tetrahydrofuran (920 ml), vann (54 ml) og eddiksyre (32,8 g, 546,7 mmol) ble tilsatt og den omrørte blandingen oppvarmet til 60 °C under 3 bar hydrogen, inntil reaksjonen ble ansett som fullført. Blandingen ble deretter avkjølt til 40 °C og 2 M natriumhydroksid-løsning (410 ml, 820 mmol) tilsatt. Ved avkjøling til 25 °C ble blandingen filtrert for å fjerne katalysator før tetrahydrofuran (650 ml) ble tilsatt og den organiske fasen separert. Den organiske fasen ble delvis inndampet ved destillasjon før toluen (575 ml) ble tilsatt. Destilleringen ble fortsatt samtidig som reaksjonsvolumet ble opprettholdt med ytterligere tilsetning av toluen (690 ml). Reaksjonsblandingen fikk avkjøles til omgivelsestemperatur i løpet av ca. 3 timer, og i løpet av denne tiden krystalliseres produktet. Det faste stoffet ble oppsamlet ved filtrering, vasket med toluen (460 ml), deretter etylacetat (230 ml), før det blir tørket under vakuum ved 45 °C til konstant vekt, hvilket gir tittelforbindelsen (114,9 g, 83 %). Spektrum: (DMSO de), 8 1,434(s, 9H), 1,70 (m, 4H), 1,98 (m, 2H), 2,11 (s, 3H), 2,56 (m, 1H), 2,93 (m, 2H), 3,28 (s, 2H), 3,71 (s, 3H), 7,16 (m, 2H), 7,40 (m, 3H), 7,52 (m, 2H), 7,87 (d, 2H), 8,60 (s, 1H), 9,73 (s, 1H); massespektrum: M+H<+>504.
Metode 7
Tert- butvl( 2-[( 4-( 1 -[( 1. 5- dimetvl- 1 H- pvrazol- 4- vl) metvllpiperidin- 4- vl)-benzoyl) aminolfenyl) karbamat.
1,5-dimetyl-1H-pyrazol-4-karbaldehyd (114 mg, 0,92 mmol) ble tilsatt til en løsning av tert-butyl-2-[(4-piperidin-4-ylbenzoyl)amino]fenylkarbamat (289 mg,
0,73 mmol) i diklormetan (6 ml), fulgt av eddiksyre (50 ni, 0,87 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt under nitrogen i 2,5 time. Natrium-triacetoksyborhydrid (233 mg, 1,10 mmol) ble tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt ved omgivelsestemperatur i 18 timer (natten over). Mettet, vandig natriumbikarbonat-løsning (10 ml) ble
deretter satt til reaksjonen og ble omrørt i 15 minutter. Den organiske fasen ble
separert og den vandige fasen igjen ekstrahert med diklormetan (10 ml). De samlede organiske lag ble vasket med vann, tørket over magnesiumsulfat og inndampet til tørrhet, hvilket gir produktet som en fargeløs gummi (308 mg, 84%) som ble anvendt uten ytterligere rensning; massespektrum: M+H<T>504.

Claims (12)

1. Forbindelse med formel (IA)
hvor R<2>, R<3>og R<5>er hver uavhengig valgt fra hydrogen eller metyl; eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
2. Forbindelse ifølge krav 1, hvor minst én gruppe valgt fra R<2>, R3 og R5 er forskjellig fra hydrogen.
3. Forbindelse ifølge krav 1, som er A/-(2-aminofenyl)-4-{ 1-[(1-metyl-1H-pyrazol-4-yl)metyl]piperidin-4-yl}benzamid eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
4. Forbindelse ifølge krav 1, som er A/-(2-aminofenyl)-4-{ 1-[(1,3-dimetyl-1/-/- pyrazol-4-yl)metyl]piperidin-4-yl}benzamid eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
5. Forbindelse ifølge krav 1, som er N-(2-aminofenyl)-4-{ 1-[(1,3,5-trimetyl-1H-pyrazol-4-yl)metyl]piperidin-4-yl}benzamid eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
6. Forbindelse ifølge krav 1, som er N-(2-aminofenyl)-4-{1-[(1,5-dimetyl-1H-pyrazol-4-yl)metyl]piperidin-4-yl}benzamid eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
7. Farmasøytisk preparat som omfatter forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1 til 6 eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, sammen med et farmasøytisk akseptabelt fortynningsmiddel eller bærer.
8. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1 til 6 eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, for anvendelse som et medikament.
9. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1 til 6 eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, for anvendelse ved behandling av kreft.
10. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1 til 6 eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, for anvendelse ved behandling av lungekreft, kolorektal kreft, brystkreft, prostatakreft, lymfom og/eller leukemi.
11. Forbindelse eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, ifølge hvilket som helst av kravene 1 til 6 for anvendelse ved behandling av kreft, hvor forbindelsen blir administrert samtidig, sekvensielt eller separat med et kjemoterapeutisk middel valgt fra én eller flere av de følgende kategorier av anti-tumormidler: (i) antiproliferative/antineoplastiske medikamenter; (ii) cytostatiske midler; (iii) midler som hemmer kreftcelleinvasjon; (iv) inhibitorer av vekstfaktorfunksjon; (v) antiangiogene midler; (vi) vaskulærskadende midler; (vii) antisenseterapier; (viii) genterapimetoder; (ix) immunoterapimetoder; (x) cellecyklus inhibitorer; og (xi) differensieringsmidler.
12. Fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, hvor fremgangsmåten omfatter enten: (a) reaksjonen av en forbindelse med formel (II)
hvor anilingruppen kan være passende beskyttet; med en forbindelse med formel (III)
i nærvær av et reduksjonsmiddel, hvor R2, R3 og R5 er som definert i krav 1; eller (b) reaksjonen av en forbindelse med formel (II) som definert ovenfor med en forbindelse med formel (IV)
i nærvær av en egnet base; hvor R2, R3 og R5 er som definert i krav 1 og X er en reaktiv gruppe; og deretter, hvis nødvendig, fjerning av hvilken som helst gjenværende beskyttelsesgrupper som kan være til stede.
NO20081582A 2005-10-19 2008-04-01 Benzamidforbindelser som er anvendbare som histon-deacetylasehemmere NO340878B1 (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB0521244.4A GB0521244D0 (en) 2005-10-19 2005-10-19 Benzamide compounds
PCT/GB2006/003838 WO2007045844A1 (en) 2005-10-19 2006-10-17 Benzamide compounds useful as histone deacetylase inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
NO20081582L NO20081582L (no) 2008-05-06
NO340878B1 true NO340878B1 (no) 2017-07-03

Family

ID=35458263

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20081582A NO340878B1 (no) 2005-10-19 2008-04-01 Benzamidforbindelser som er anvendbare som histon-deacetylasehemmere

Country Status (32)

Country Link
US (2) US8207202B2 (no)
EP (1) EP1954690B1 (no)
JP (1) JP5340736B2 (no)
KR (1) KR101464004B1 (no)
CN (1) CN101331123B (no)
AR (1) AR057162A1 (no)
AU (1) AU2006303111B2 (no)
BR (1) BRPI0617654B8 (no)
CA (1) CA2625970C (no)
CY (1) CY1114521T1 (no)
DK (1) DK1954690T3 (no)
EC (1) ECSP088457A (no)
ES (1) ES2422859T3 (no)
GB (1) GB0521244D0 (no)
HK (1) HK1121749A1 (no)
HR (1) HRP20130683T1 (no)
IL (1) IL190429A (no)
ME (1) ME01595B (no)
MY (1) MY145569A (no)
NO (1) NO340878B1 (no)
NZ (1) NZ566944A (no)
PL (1) PL1954690T3 (no)
PT (1) PT1954690E (no)
RS (1) RS52881B (no)
RU (1) RU2448965C2 (no)
SA (1) SA06270384B1 (no)
SI (1) SI1954690T1 (no)
TW (1) TWI385162B (no)
UA (1) UA98757C2 (no)
UY (1) UY29869A1 (no)
WO (1) WO2007045844A1 (no)
ZA (1) ZA200803096B (no)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE102007028198A1 (de) 2007-06-16 2008-12-24 Schebo (R) . Biotech Ag Neue Pharmazeutika, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung in der Therapie
CA2716932C (en) 2008-03-27 2017-07-04 Eddy Jean Edgard Freyne Aza-bicyclohexyl substituted indolyl alkyl amino derivatives as novel inhibitors of histone deacetylase
EP2330894B8 (en) 2008-09-03 2017-04-19 BioMarin Pharmaceutical Inc. Compositions including 6-aminohexanoic acid derivatives as hdac inhibitors
JP5586692B2 (ja) * 2009-06-08 2014-09-10 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド アルカノイルアミノベンズアミドアニリンｈｄａｃインヒビター化合物
US8957066B2 (en) 2011-02-28 2015-02-17 Biomarin Pharmaceutical Inc. Histone deacetylase inhibitors
US10059723B2 (en) 2011-02-28 2018-08-28 Biomarin Pharmaceutical Inc. Histone deacetylase inhibitors
CA2828524C (en) 2011-02-28 2020-01-07 Repligen Corporation Histone deacetylase inhibitors
WO2014159214A1 (en) * 2013-03-14 2014-10-02 Chdi Foundation, Inc. Histone deacetylase inhibitors and compositions and methods of use thereof
WO2014159218A1 (en) 2013-03-14 2014-10-02 Chdi Foundation, Inc. Histone deacetylase inhibitors and compositions
EP2968233A4 (en) 2013-03-14 2016-08-03 Chdi Foundation Inc HISTON DEACETYLASE HEMMER AND COMPOSITIONS AND METHOD FOR USE THEREOF
JP6503338B2 (ja) 2013-03-15 2019-04-17 バイオマリン ファーマシューティカル インコーポレイテッド Ｈｄａｃ阻害剤
RU2634694C2 (ru) * 2013-04-29 2017-11-03 Чонг Кун Данг Фармасьютикал Корп. Новые соединения для селективных ингибиторов гистондеацетилазы и фармацевтическая композиция, включающая такие соединения
CA2951026A1 (en) 2014-06-02 2015-12-10 Chdi Foundation, Inc. Histone deacetylase inhibitors and compositions and methods of use thereof
KR102236356B1 (ko) 2017-11-24 2021-04-05 주식회사 종근당 루푸스의 예방 또는 치료를 위한 조성물
GB201914006D0 (en) * 2019-09-27 2019-11-13 Celleron Therapeutics Ltd Combination Therapy
GB201913988D0 (en) * 2019-09-27 2019-11-13 Celleron Therapeutics Ltd Novel treatment

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003087057A1 (en) * 2002-04-05 2003-10-23 Astrazeneca Ab Benzamide derivatives useful as histone deacetylase inhibitors

Family Cites Families (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CH117273A4 (no) * 1973-01-26 1976-07-15
CH187973A4 (de) * 1973-02-09 1977-03-31 Hoechst Ag Verfahren zum optischen Aufhellen von Textilmaterialien
DE2918965A1 (de) * 1979-05-11 1980-11-20 Bayer Ag Benzofuranverbindungen sowie deren verwendung als optische aufheller
IT1232252B (it) * 1989-02-22 1992-01-28 Rotta Research Lab Derivati della n fenil benzamide ad attivita' antiulcera ed antiallerica e procedimento per la loro preparazione
JPH05239069A (ja) 1992-02-28 1993-09-17 Canon Inc 液晶性化合物、これを含む液晶組成物、それを有する液晶素子、それらを用いた表示方法および表示装置
JP4405602B2 (ja) 1998-04-16 2010-01-27 バイエル・シエーリング・ファーマ アクチエンゲゼルシャフト ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤
GB9826412D0 (en) 1998-12-03 1999-01-27 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
JP4390024B2 (ja) 1999-04-23 2009-12-24 アステラス製薬株式会社 新規なジアゼパン誘導体又はその塩
US6632815B2 (en) * 1999-09-17 2003-10-14 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of factor Xa
RU2002110295A (ru) 1999-09-17 2003-12-10 Милленниум Фармасьютикалс, Инк. (Us) Ингибиторы фактора Ха
AU783504C (en) 1999-11-23 2006-08-03 Methylgene Inc. Inhibitors of histone deacetylase
AU776053B2 (en) 2000-03-31 2004-08-26 Astellas Pharma Inc. Diazepan derivatives or salts thereof
EP1217000A1 (en) 2000-12-23 2002-06-26 Aventis Pharma Deutschland GmbH Inhibitors of factor Xa and factor VIIa
EP1429765A2 (en) 2001-09-14 2004-06-23 Methylgene, Inc. Inhibitors of histone deacetylase
DE10204115A1 (de) * 2002-02-01 2003-08-07 Bayer Cropscience Ag DELTA·1·-Pyrroline
GB0209715D0 (en) * 2002-04-27 2002-06-05 Astrazeneca Ab Chemical compounds
US20040072770A1 (en) 2002-07-03 2004-04-15 Besterman Jeffrey M. Methods for specifically inhibiting histone deacetylase-7 and 8
AR043633A1 (es) 2003-03-20 2005-08-03 Schering Corp Ligandos de receptores de canabinoides
AU2004276337B2 (en) 2003-09-24 2009-11-12 Methylgene Inc. Inhibitors of histone deacetylase
JP5319113B2 (ja) 2004-03-26 2013-10-16 メチルジーン インコーポレイテッド ヒストンデアセチラーゼの阻害剤
AR050926A1 (es) 2004-09-03 2006-12-06 Astrazeneca Ab Derivados de benzamida como inhibidores de la histonadesacetilasa(hdac)
GB0427758D0 (en) 2004-12-18 2005-01-19 Astrazeneca Ab Novel benzamide compounds
GB0500828D0 (en) 2005-01-15 2005-02-23 Astrazeneca Ab Benzamide derivatives
GB0501146D0 (en) 2005-01-20 2005-02-23 Astrazeneca Ab Novel benzamide derivatives
GB0526351D0 (en) 2005-12-23 2006-02-01 Astrazeneca Ab Novel benzamide derivatives
GB0526352D0 (en) 2005-12-23 2006-02-01 Astrazeneca Ab Benzamide derivatives

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003087057A1 (en) * 2002-04-05 2003-10-23 Astrazeneca Ab Benzamide derivatives useful as histone deacetylase inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
UA98757C2 (ru) 2012-06-25
ME01595B (me) 2014-09-20
UY29869A1 (es) 2007-05-31
WO2007045844A1 (en) 2007-04-26
BRPI0617654A2 (pt) 2011-08-02
NZ566944A (en) 2011-05-27
US8735429B2 (en) 2014-05-27
MY145569A (en) 2012-02-29
CN101331123B (zh) 2015-11-25
KR101464004B1 (ko) 2014-11-20
BRPI0617654B1 (pt) 2020-09-15
GB0521244D0 (en) 2005-11-30
DK1954690T3 (da) 2013-07-29
ZA200803096B (en) 2009-02-25
BRPI0617654B8 (pt) 2021-05-25
CY1114521T1 (el) 2016-10-05
IL190429A0 (en) 2008-11-03
JP5340736B2 (ja) 2013-11-13
SA06270384B1 (ar) 2010-08-02
AR057162A1 (es) 2007-11-21
AU2006303111B2 (en) 2010-11-25
CN101331123A (zh) 2008-12-24
EP1954690A1 (en) 2008-08-13
RU2448965C2 (ru) 2012-04-27
PL1954690T3 (pl) 2013-09-30
HK1121749A1 (en) 2009-04-30
KR20080067656A (ko) 2008-07-21
CA2625970C (en) 2015-12-01
JP2009512668A (ja) 2009-03-26
PT1954690E (pt) 2013-07-31
RU2008119411A (ru) 2009-11-27
EP1954690B1 (en) 2013-05-15
NO20081582L (no) 2008-05-06
RS52881B (en) 2014-02-28
ECSP088457A (es) 2008-06-30
ES2422859T3 (es) 2013-09-16
HRP20130683T1 (en) 2013-10-11
US20080269294A1 (en) 2008-10-30
US8207202B2 (en) 2012-06-26
CA2625970A1 (en) 2007-04-26
TW200800944A (en) 2008-01-01
SI1954690T1 (sl) 2013-08-30
AU2006303111A1 (en) 2007-04-26
IL190429A (en) 2012-08-30
US20120225907A1 (en) 2012-09-06
TWI385162B (zh) 2013-02-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO340878B1 (no) Benzamidforbindelser som er anvendbare som histon-deacetylasehemmere
KR101467593B1 (ko) Ｆｇｆｒ 억제제로서의 아실아미노피라졸
KR101750965B1 (ko) 칼슘 방출-활성화 칼슘 통로의 조정제로서의 피라졸 유도체
SK1942001A3 (en) 1h-imidazopyridine derivatives
US20080269250A1 (en) Pyrrolidine and Piperidine Acetylene Derivatives for Use as Mglur5 Antagonists
KR102497095B1 (ko) 피페리딘 cxcr7 수용체 조절제
KR20100016291A (ko) 단백질 키나아제 억제제로 유용한 [2,6] 나프티리딘
MX2007002612A (es) Compuestos de benzamida.
NO331951B1 (no) Kinazolinderivater, farmasoytisk preparat inneholdende slike samt anvendelse av slike for fremstilling av medikament for behandling av sykdom
KR20210114972A (ko) 치환된 피롤리딘 아마이드 iii
US6627647B1 (en) Substituted 1-(4-aminophenyl)imidazoles and their use as anti-inflammatory agents
WO2006077387A2 (en) Novel benzamide derivatives
WO2007071961A1 (en) Benzamide derivatives
Muniyappan et al. Synthesis, anticancer and molecular docking studies of new class of benzoisoxazolyl-piperidinyl-1, 2, 3-triazoles
EP2799436A1 (en) Phenyltriazole derivative
WO2007071956A1 (en) Novel benzamide derivatives
US20090312556A1 (en) N-(2-aminiphenyl)-4-(5-((ethylamino)methyl)-1,2-thiazol-2-yl) benzamide and n-(2-aminophenyl)-4-(5-((isopropylamino)methyl)-1,2-thiazol-2-yl) benzamide as hdac inhibitors