NO327744B1 - Fremgangsmate for fremstilling av CLAisomerer - Google Patents
Fremgangsmate for fremstilling av CLAisomerer Download PDFInfo
- Publication number
- NO327744B1 NO327744B1 NO20025084A NO20025084A NO327744B1 NO 327744 B1 NO327744 B1 NO 327744B1 NO 20025084 A NO20025084 A NO 20025084A NO 20025084 A NO20025084 A NO 20025084A NO 327744 B1 NO327744 B1 NO 327744B1
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- isomers
- cla
- octadecadienoic acid
- isomer
- acid
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 19
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title abstract description 39
- 230000008569 process Effects 0.000 title description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 43
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 claims abstract description 15
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 claims abstract description 7
- ADHNUPOJJCKWRT-JLXBFWJWSA-N (2e,4e)-octadeca-2,4-dienoic acid Chemical class CCCCCCCCCCCCC\C=C\C=C\C(O)=O ADHNUPOJJCKWRT-JLXBFWJWSA-N 0.000 claims description 22
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 14
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 claims description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 4
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 claims 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 21
- OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N linoleic acid Natural products CCCCC\C=C/C\C=C\CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N 0.000 abstract description 17
- 235000013305 food Nutrition 0.000 abstract description 16
- 229940108924 conjugated linoleic acid Drugs 0.000 abstract description 12
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 abstract description 12
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 abstract description 10
- 239000013589 supplement Substances 0.000 abstract description 4
- JBYXPOFIGCOSSB-GOJKSUSPSA-N 9-cis,11-trans-octadecadienoic acid Chemical class CCCCCC\C=C\C=C/CCCCCCCC(O)=O JBYXPOFIGCOSSB-GOJKSUSPSA-N 0.000 abstract 2
- 125000005313 fatty acid group Chemical group 0.000 abstract 1
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- JBYXPOFIGCOSSB-XBLVEGMJSA-N 9E,11E-octadecadienoic acid Chemical class CCCCCC\C=C\C=C\CCCCCCCC(O)=O JBYXPOFIGCOSSB-XBLVEGMJSA-N 0.000 description 14
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N glycerol group Chemical group OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 11
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 10
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N Linoleic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N 0.000 description 7
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 7
- 235000020778 linoleic acid Nutrition 0.000 description 7
- ADHNUPOJJCKWRT-UHFFFAOYSA-N octadeca-2,4-dienoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC=CC=CC(O)=O ADHNUPOJJCKWRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 6
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 6
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 6
- 238000006317 isomerization reaction Methods 0.000 description 6
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 6
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 6
- 239000012855 volatile organic compound Substances 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 5
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 5
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 4
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 4
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 4
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 4
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 4
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 4
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 4
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 4
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 4
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 4
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 4
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 4
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 4
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 4
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- GKJZMAHZJGSBKD-UHFFFAOYSA-N (10E,12E)-Octadeca-9,11-dienoic acid Natural products CCCCCC=CC=CCCCCCCCCC(O)=O GKJZMAHZJGSBKD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GKJZMAHZJGSBKD-BLHCBFLLSA-N (10e,12e)-octadeca-10,12-dienoic acid Chemical compound CCCCC\C=C\C=C\CCCCCCCCC(O)=O GKJZMAHZJGSBKD-BLHCBFLLSA-N 0.000 description 3
- GKJZMAHZJGSBKD-ANYPYVPJSA-N 10-trans-12-cis-linoleic acid Natural products CCCCCC=C\C=C\CCCCCCCCC(O)=O GKJZMAHZJGSBKD-ANYPYVPJSA-N 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 3
- 241000282849 Ruminantia Species 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical group 0.000 description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 3
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 3
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 3
- 150000002190 fatty acyls Chemical group 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 238000000199 molecular distillation Methods 0.000 description 3
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 2
- YVBAUDVGOFCUSG-UHFFFAOYSA-N 2-pentylfuran Chemical compound CCCCCC1=CC=CO1 YVBAUDVGOFCUSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YGHRJJRRZDOVPD-UHFFFAOYSA-N 3-methylbutanal Chemical compound CC(C)CC=O YGHRJJRRZDOVPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N Pentane Chemical compound CCCCC OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- 241000030538 Thecla Species 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 2
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 239000002702 enteric coating Substances 0.000 description 2
- 238000009505 enteric coating Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- FXHGMKSSBGDXIY-UHFFFAOYSA-N heptanal Chemical compound CCCCCCC=O FXHGMKSSBGDXIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JARKCYVAAOWBJS-UHFFFAOYSA-N hexanal Chemical compound CCCCCC=O JARKCYVAAOWBJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 2
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 2
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 2
- 150000004668 long chain fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- SYSQUGFVNFXIIT-UHFFFAOYSA-N n-[4-(1,3-benzoxazol-2-yl)phenyl]-4-nitrobenzenesulfonamide Chemical class C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1S(=O)(=O)NC1=CC=C(C=2OC3=CC=CC=C3N=2)C=C1 SYSQUGFVNFXIIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JGFMXQLVWUGIPI-UHFFFAOYSA-N octadeca-11,13-dienoic acid Chemical compound CCCCC=CC=CCCCCCCCCCC(O)=O JGFMXQLVWUGIPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QJKCKUNKNNYJNS-UHFFFAOYSA-N octadeca-8,10-dienoic acid Chemical compound CCCCCCCC=CC=CCCCCCCC(O)=O QJKCKUNKNNYJNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BNJOQKFENDDGSC-UHFFFAOYSA-N octadecanedioic acid Chemical compound OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O BNJOQKFENDDGSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NUJGJRNETVAIRJ-UHFFFAOYSA-N octanal Chemical compound CCCCCCCC=O NUJGJRNETVAIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021485 packed food Nutrition 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 2
- 235000020777 polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000012134 supernatant fraction Substances 0.000 description 2
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 2
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000005623 Carcinogenesis Diseases 0.000 description 1
- 229920000623 Cellulose acetate phthalate Polymers 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N Methyl isobutyl ketone Chemical compound CC(C)CC(C)=O NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001661345 Moesziomyces antarcticus Species 0.000 description 1
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000286209 Phasianidae Species 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 1
- 235000019742 Vitamins premix Nutrition 0.000 description 1
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 1
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 208000022531 anorexia Diseases 0.000 description 1
- 230000003217 anti-cancerogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 238000006701 autoxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 235000008429 bread Nutrition 0.000 description 1
- 230000036952 cancer formation Effects 0.000 description 1
- 239000011203 carbon fibre reinforced carbon Substances 0.000 description 1
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 1
- 229940081734 cellulose acetate phthalate Drugs 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 125000003636 chemical group Chemical group 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical class OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 235000015223 cooked beef Nutrition 0.000 description 1
- 235000020247 cow milk Nutrition 0.000 description 1
- MLUCVPSAIODCQM-NSCUHMNNSA-N crotonaldehyde Chemical compound C\C=C\C=O MLUCVPSAIODCQM-NSCUHMNNSA-N 0.000 description 1
- MLUCVPSAIODCQM-UHFFFAOYSA-N crotonaldehyde Natural products CC=CC=O MLUCVPSAIODCQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 150000001982 diacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 239000005350 fused silica glass Substances 0.000 description 1
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical group 0.000 description 1
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000007914 intraventricular administration Methods 0.000 description 1
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000000207 lymphocyte subset Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000008268 mayonnaise Substances 0.000 description 1
- 235000010746 mayonnaise Nutrition 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 235000013622 meat product Nutrition 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 150000002759 monoacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000009826 neoplastic cell growth Effects 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- PJSQIDIRJGWHOB-UHFFFAOYSA-N octadeca-4,6-dienoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCC=CC=CCCC(O)=O PJSQIDIRJGWHOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CNKMVAJDUBKHMS-UHFFFAOYSA-N octadeca-6,8-dienoic acid Chemical compound CCCCCCCCCC=CC=CCCCCC(O)=O CNKMVAJDUBKHMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HACBQSMIIGXKGA-UHFFFAOYSA-N octadeca-7,9-dienoic acid Chemical compound CCCCCCCCC=CC=CCCCCCC(O)=O HACBQSMIIGXKGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- -1 octadecadiene fatty acid Chemical class 0.000 description 1
- 235000014593 oils and fats Nutrition 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 235000014059 processed cheese Nutrition 0.000 description 1
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- 210000004767 rumen Anatomy 0.000 description 1
- 235000014438 salad dressings Nutrition 0.000 description 1
- 238000007127 saponification reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001932 seasonal effect Effects 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 235000011888 snacks Nutrition 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 239000003760 tallow Substances 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 235000010692 trans-unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- DCXXMTOCNZCJGO-UHFFFAOYSA-N tristearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC DCXXMTOCNZCJGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 1
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
- C07C69/52—Esters of acyclic unsaturated carboxylic acids having the esterified carboxyl group bound to an acyclic carbon atom
- C07C69/587—Monocarboxylic acid esters having at least two carbon-to-carbon double bonds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C51/00—Preparation of carboxylic acids or their salts, halides or anhydrides
- C07C51/347—Preparation of carboxylic acids or their salts, halides or anhydrides by reactions not involving formation of carboxyl groups
- C07C51/353—Preparation of carboxylic acids or their salts, halides or anhydrides by reactions not involving formation of carboxyl groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C51/00—Preparation of carboxylic acids or their salts, halides or anhydrides
- C07C51/42—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Fats And Perfumes (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Description
OMRÅDE FOR OPPFINNELSEN
Den foreliggende oppfinnelse angår lipid-biokjemi, og nærmere bestemt en fremgangsmåtefor fremstilling av forskjellige isomerer av konjugert linolsyre.
BAKGRUNN FOR OPPFINNELSEN
1 1978 påviste forskere ved universitetet i Wisconsin et stoff i tilberedt storfekjøtt som syntes å inhibitere mutagenesis. Stoffet ble funnet å være en blanding av posisjonsisomerer av linolsyre (Cl8:2) med konjugerte dobbeltbindinger. Isomerene c9,tl 1 og tl0,cl2 var til stede i størst mengde, men det var usikkert hvilke isomerer som var ansvarlige for den observerte biologiske aktivitet. Studier med opptak av merkede forbindelser viste at 9,11-isomeren syntes å være noe foretrukket ved opptak og innlemmelse i fosfolipidrfaksjonen i dyrevev, og i mindre grad 10,12-isomeren. (Ha, et al, Cancer Res., 50: 1097(1990)).
Den biologiske aktivitet forbundet med konjugerte linolsyrer (kalt CLA) er mangfoldig og kompleks. For tiden er svært lite kjent angående virkningsmekanismene, selv om flere pågående prekliniske og kliniske undersøkelser sannsynligvis vil kaste nytt lys over den fysiologiske og biokjemiske virkningsmodus. De antikarsinogene egen-skaper hos CLA er blitt vel dokumentert. Administrasjon av CLA inhiberer tumorigen-esis hos hunnrotter, som demonstrert av Birt et al, Cancer Res., 52:2035s (1992). Ha. et al, supra, rapporterte tilsvarende resultater i formage hos mus ved en neoplasiamodell. CLA er også blitt identifisert som et sterkt cytotoksisk middel mot human målmelanoma, colorektal og brystcancerceller in vitro.
Selv om mekanismene ved CLA-virkningen fortsatt er uklare, så foreligger bevis på at noen komponent(er) i immunsystemet kan være involvert, i det minste in vivo. I US patentskrift nr. 5585400 beskrives en fremgangsmåte for å dempe allergiske reaksjoner hos dyr, formidlet av type I- eller IgE-hypersensitivitet ved å administrere en diett som inneholder CLA. CLA i konsentrasjoner fra 0,1 til 1,0 % ble også vist å være et effektivt adjuvans ved bevaring av hvite blodceller. I US patentskrift nr. 5674901 beskrives at oral eller parenteral administrasjon av CLA i form av en enten fri syre eller salt resulterte i en forhøyning i CD-4 og CD-8 lymfocytt-subpopulasjoner i forbindelse med celleformidlet immunitet. Uheldige virkninger som skyldes forbehandling med eksogen tumor-nekrosefaktor kunne mildnes indirekte ved å forhøye eller beholde nivåene av CD-4- og CD-8-celler i dyr som var gitt CLA. Til slutt beskrives i US patentskrift nr. 5430066 virkningen av CLA når det gjelder å hindre vekttap og anoreksi ved immunstimulering.
Bortsett fra mulige terapeutiske og farmakologiske anvendelser av CLA, som angitt over, har det vært mye oppstyr angående anvendelse av CLA som et diettsupplement. Det er funnet at CLA har en dyp generell virkning på kroppens sammensetning, spesielt omdirigering av fordelingen av fett og mager vevsmasse. I US patentskrift nr.
5554646 beskrives en fremgangsmåte hvor CLA benyttes som et diettsupplement ved at griser, mus og mennesker ble gitt dietter som inneholdt 0,5 % CLA. Hos hver art ble det observert et signifikant fall i fettinnholdet med en samtidig økning av proteinmassen. Det er interessant at hos disse dyr resulterte økningen i fettsyreinnholdet i dietten gjennom tilsetning av CLA, ikke i noen økning i kroppsvekt, men var forbundet med en omfordeling av fett og mager masse i kroppen. Et annet diettfenomen av interesse er virkningen av CLA-tilskudd på stoffskiftet. I US patentskrift nr. 5428072 presenteres data som viser at innlemmelse av CLA i dyrefor (fugler og pattedyr) økte stoffskiftets effektivitet og ledet til større vektøkning hos fugler og pattedyr som hadde fatt CLA-tilskudd. De potensielt gunstige virkninger av CLA-tilskudd for kjøttprodusenter er åpenbare.
Et annet viktig og interessant trekk ved CLA, og som understreker det tidlige kommersielle potensiale, er at det forekommer naturlig i næringsmidler og for som fortæres både av mennesker og dyr. Spesielt er CLA rikelig til stede i produkter fra drøvtyggere. For eksempel har flere studier blitt gjennomført hvor CLA er blitt kartlagt i forskjellige meieriprodukter. Aneja et al. ( J. Dairy Sei., 43:231 (1990)) observerte at bearbeiding av melk til yoghurt resulterte i en konsentrering av CLA. Shanta, et al, ( Food Chem., 47:257 (1993)) viste at en kombinert økning i bearbeidingstemperatur og tilsetning av myse økte CLA-konsentrasjonen under fremstilling av smelteost. I en separat undersøkelse rapporterte Shanta et al. ( J. Food Sei, 60:695 (1995)) at selv om bearbeidings- og lagringsbetingelser ikke reduserte CLA-konsentrasj onene vesentlig, så observerte de ingen økninger. Faktisk har mange undersøkelser vist at sesongmessige variasjoner, eller variasjoner fra dyr til dyr, kan tilskrives så mye som en trefoldig forskjell i CLA-innhold i kumelk (se f.eks. Parodi, et al., J. Dairy Sei., 60:1550 (1977)). Også diettfaktorer er blitt trukket inn i variasjonen i CLA-innhold (Chin et al, JFood Camp. Anal. 5: 185 (1992)). På grunn av denne variasjon i CLA-innhold i naturlige kilder, vil fortæring av foreskrevne mengder av forskjellige næringsmidler ikke garantere at individet eller dyret vil få optimale doser for å sikre at det oppnås en ønsket ernærings-messig effekt.
I utviklingen av en definert kommersiell kilde for CLA, både for terapeutiske og ernæringsmessige anvendelser, er det behov for en fremgangsmåte hvor det dannes store mengder definert materiale. Problemet med de fleste CLA-produkter fremstilt ved kon-vensjonelle utførelser, er heterogeniteten og en vesentlig variasjon i iso-former fra sats til sats. En nylig publikasjon dokumenterer denne variasjon og antyder at produsenter av CLA må verdsette den komplekse natur hos sine produkter (se Christie et al, JAOCS 74(11):1231 (1971)).
Det faktum at fortæring av store mengder hydrogenerte oljer og fett, istedenfor animalsk talg, har resultert i en diett med høyt innhold av trans-fettsyrer, har fått betydelig oppmerksomhet. For eksempel viste Holman, et al, ( Proc. Natl. Acad. Sci.
88:4830 (1991)), at når rotter ble-matet med hydrogenerte oljer, så medførte dette en akkumulering i rotteleveren av uvanlige flerumettede fettsyreisomerer som viste seg å innvirke på den normale metabolisme av naturlig forekommende flerumettede fettsyrer. Det eksisterer derfor et sterkt behov for kjemisk og biologisk analyse av de forskjellige CLA-isomerer.
SAMMENFATNING AV OPPFINNELSEN
Den foreliggende oppfinnelse angår lipid-biokjemi, og nærmere bestemt en fremgangsmåte for fremstilling av forskjellige isomerer av konjugert linolsyre (oktadekandiensyre). Den foreliggende oppfinnelse angår således en fremgangsmåte kjennetegnet ved at den omfatter: a) å tilveiebringe en første delvis renset oktadekadiensyreisomer som har et konjugert bindingssystem, og b) oppvarme den delvis rensede oktadekadiensyreisomer til 200-240 °C slik at det konjugerte bindingssystem migrerer og derved danner en blanding omfattende minst den første oktadekadiensyreisomer og én andre oktadekadiensyreisomer, hvor den første og andre oktadekadiensyreisomer er valgt fra den følgende liste med par:
og hvor den andre isomer er til stede i en konsentrasjon på over 20 vekt% av den første isomeren.
Med særlig foretrukne utførelsesformer av den foreliggende oppfinnelse tilveiebringes en blanding av acylglyseroler som omfatter syrerester av konjugerte linolsyreisomerer. Isomerene kan tilveiebringes som frie fettsyrer, alkyestere eller acylglyserider.
Andre utførelsesformer av fremgangsmåten omfatter også trinn c) å separere den første delvis rensede oktadekadiensyreisomer og den andre oktadekadiensyreisomer slik at det oppnås en andre delvis renset oktadekadiensyreisomer. I ytterligere utførelses-former utføres separeringstrinnet med gass- eller væske-kromatografi.
Slik det er anvendt her, henviser "konjugert linolsyre" eller "CLA" til hvilken som helst konjugert linolsyre eller fri oktadekadienfettsyre. Det er ment at dette begrep innbefatter og angir alle posisjonelle og geometriske isomerer av linolsyre med to konjugerte karbon-karbon-dobbeltbindinger på et hvilket som helst sted i molekylet. CLA skiller seg fra ordinær linolsyre ved at den ordinære linolsyre har dobbeltbindinger ved karbonatomer 9 og 12. Eksempler på CLA innbefatter cis- og trans-isomerer ("E/Z-isomerer") av følgende posisjonsisomerer: 2,4-oktadekandiensyre, 4,6-oktadekadiensyre, 6,8-oktadekadiensyre, 7,9-oktadekadiensyre, 8,10-oktadekadiensyre, 9,11-oktadekadiensyre og 10,12-oktadekadiensyre, 11,13-oktadekadiensyre. Slik det er anvendt her, innbefatter "CLA" en enkeltisomer, en utvalgt blanding av to eller flere isomerer og en ikke utvalgt blanding av isomerer oppnådd fra naturlige kilder, samt syntetisk og semisyntetisk CLA.
Slik det anvendes her, henviser begrepet "isomerisert konjugert linolsyre" til CLA som er syntetisert ved kjemiske metoder (for eksempel vandig alkalisk isomerisering, ikke-vandig alkalisk isomerisering eller alkalisk alkoholatisomerisering).
Slik det anvendes her, henviser begrepet "konjugert linolsyregruppe" til enhver forbindelse eller flere forbindelser som inneholder konjugerte linolsyrer eller -derivater. Eksempler innbefatter, men er ikke begrenset til, fettsyrer, alkylestere og triglyserider av konjugert linolsyre.
Slik det anvendes her, er det ment at "triglyserider" med CLA inneholder CLA i hvilken som helst eller i alle de tre posisjoner (for eksempel posisjoner SN-1, SN-2 eller SN-3) på glyserolryggraden. Følgelig kan et CLA-holdig triglyserid inneholde hvilke som helst av de posisjonelle og geometriske isomerer av CLA. "Acylglyserol", slik det anvendes her, henviser til et glyserolmolekyl som har én (monoacylglyserol), to (diacyl-glyserol) eller tre (triacylglyserol eller triglyserid) fettacylrester i hvilken som helst av de tilgjengelige posisjoner på glyserolmolekylet. Blandinger av triglyserider eller acylglyseroler kan inneholde varierende mengder av bestemte CLA-isomerer, avhengig av konsentrasjonen av de bestemte isomerer i det CLA som anvendes til å fremstille triglyseridet, og dersom det anvendes enzymatiske fremgangsmåter for å fremstille triglyseridet eller acylglyserolen, hvilken spesifikk lipase eller lipaser som anvendes. Følgelig er det hensiktsmessig å karakterisere den resulterende triglyserid- eller acylglyserolblanding eller -sammensetning på grunnlag av den inneholdte mengde, på prosentbasis, av en bestemt CLA-isomer i hele blandingen eller sammensetningen. Som ikke-begrensende eksempel kan en triglyserid- eller acylglyserolblanding som inneholder CLA-rester i de forskjellige posisjoner på glyserolryggraden, sies å ha et innhold av fettacylrest på minst 25% av en bestemt konjugert linolsyreisomer når den konjugerte linolsyreisomer okkuperer minst 5% av hvilke som helst av posisjonene SN-1, SN-2 og SN-3 på triglyseridene i blandingen. Sagt på en annen måte, dersom fettacylrestene fjernes ved forsåpning, vil den resulterende blanding av salter og fettsyrer inneholde minst 25% av den bestemte isomer.
Slik det er anvendt her, er det ment at "estere" av CLA innbefatter hvilke som helst eller alle posisjonelle og geometriske isomerer av CLA bundet gjennom en ester-binding til en alkohol eller en annen kjemisk gruppe som innbefatter, men ikke er begrenset til, fysiologisk akseptable naturlig forekommende alkoholer (f.eks. metanol, etanol, propanol). En ester av CLA eller et forestret CLA kan derfor inneholde hvilke som helst av de posisjonelle og geometriske isomerer av CLA.
Det er ment at "ikke naturlig forekommende isomerer" av CLA innbefatter cll,tl3; tll,cl3; tll,tl3; cll,cl3; c8,tl0; t8,cl0; t8,tl0; c8,cl0 ogtrans-trans-isomerer av oktadekadiensyre. Imidlertid innbefatter definisjonen ikke tl0,cl2- og c9,tl 1-isomerer av oktadekadiensyre. "Ikke naturlig forekommende isomerer" kan også bli betegnet "mindre isomerer" av CLA fordi disse isomerer generelt dannes i små mengder når CLA syntetiseres ved alkaliisomerisering.
Slik det er anvendt her, henviser "lav-forurenset" CLA til CLA-blandinger, innbefattende frie fettsyrer, alkylestere og triglyserider, som totalt inneholder mindre enn 1 % av 8,10-oktadekadiensyrer, 11,13-oktadekadiensyrer og trans-trans-oktadekadiensyrer.
Slik det er anvendt her, innbefatter "c" en kjemisk binding med cis-orientering og "t" henviser til en kjemisk binding med trans-orientering. Dersom en posisjonsisomer av CLA er angitt uten "c" eller "t", innbefatter angivelsen alle de fire mulige isomerer. For eksempel innbefatter 10,12-oktadekadiensyre både cl0,tl2-; tl0,cl2-; tl0,tl2- og cl0,cl2-oktadekadiensyre, mens tl0,c 12-oktadekadiensyre eller CLA henviser til kun den ene isomer.
Slik det er anvendt her, henviser begrepet "olje" til en frittflytende væske som inneholder langkjedede fettsyrer (for eksempel CLA) eller andre langkjedede hydro-karbongrupper. De langkjedede fettsyrer innbefatter, men er ikke begrenset til, forskjellige isomerer av CLA.
Slik det er anvendt her, henviser begrepet "fysiologisk akseptabel bærer" til enhver bærer eller eksipient som vanligvis anvendes for oljeaktige farmasøytika. Slike bærere eller eksipienter innbefatter, men er ikke begrenset til, oljer, stivelser og sukkere (f.eks. sukrose og laktose).
Slik det er anvendt her, henviser begrepet "oral avgivende bærer" enhver inn-retning for å avlevere et farmasøytisk preparat oralt, innbefattende kapsler, piller,
tabletter og siruper, uten å være begrenset til disse.
Slik det er anvendt her, henviser begrepet "næringsmiddelprodukt" til ethvert næringsmiddel eller for som er egnet for fortæring av mennesker, ikke drøvtyggende dyr eller drøvtyggende dyr. "Næringsmiddelprodukt" kan være ethvert fremstilt og emballert næringsmiddel (for eksempel majones, salaltdressing, brød eller ost) eller et dyrefor (for eksempel ekstrudert og granulert dyrefor eller grovblandet for). "Tilberedt næringsmiddelprodukt" betyr ethvert emballert næringsmiddel godkjent for fortæring av mennesker eller dyr.
Slik det er anvendt her, henviser begrepet "matvare" til ethvert stoff som er egnet for fortæring av mennesker eller dyr.
Slik det er henvist her, henviser begrepet "flyktig organisk forbindelse" til enhver karbonholdig forbindelse som er helt eller delvis i gassform ved en gitt temperatur. Flyktige organiske forbindelser kan bli dannet ved oksidasjon av en organisk forbindelse (for eksempel CLA). Flyktige organiske forbindelser innbefatter, men er ikke begrenset til, pentan, heksan, heptan, 2-butenal, etanol, 3-metylbutanal, 4-metylpentanon, heksanal, heptanal, 2-pentylfuran og oktanal.
Slik det er anvendt her, henviser begrepet "metalloksidantchelator" til enhver antioksidant som chelaterer metaller. Eksempler innbefatter, men er ikke begrenset til, lecithin og sitronsyreestere.
Slik det er anvendt her, betyr begrepet "delvis rensing" enhver prosess hvor det fjernes noe av en kontaminant fra den aktuelle komponent, så som å fjerne uønskede isomerer fra et preparat med konjugert linolsyre. Derved øker prosent renset komponent i prøven (dvs. den aktuelle komponent blir konsentrert).
Slik det anvendes her, henviser begrepet "søsterisomerer" til slike par med konjugerte linolsyreisomerer som kan omdannes til hverandre ved én eller annen behandling (for eksempel oppvarming). Eksempler på søsterisomerer er gitt i tabell 1 nedenfor.
Slik det anvendes her, henviser begrepet "konjugert bindingssystem til følgende arrangement med innettede dobbeltbindinger i en karbohydratkjede: -C=C-C=C- (dvs. to dobbeltbindinger skilt med en enkeltbinding).
Slik det er anvendt her vil begrepet "migrere", når det anvendes i sammenheng med et konjugert bindingssystem i en karbohydratkjede, henvise til omleiringen av umettede karbon-karbon-dobbeltbindinger inne i karbohydratkjeden slik at dobbeltbindingene beveges opp eller ned langs kjeden.
NÆRMERE BESKRIVELSE AV OPPFINNELSEN
Den foreliggende oppfinnelse angår lipid-biokjemi, og nærmere bestemt en fremgangsmåte for fremstilling av forskjellige isomerer av konjugert linolsyre. Omleiringen av dobbeltbindingene i linolsyre til konjugerte posisjoner har vist seg å forekomme under behandling med katalysatorer, så som nikkel eller alkali, ved høye temperaturer og under autooksidasjon. Teoretisk kan det ved isomerisering av c9,c 12-oktadekadiensyre dannes åtte mulige geometriske isomerer av 9,11- og 10,12-oktadekadiensyre (c9,cl 1; c9,tl 1; t9,cl 1; t9,tl 1; cl0,cl2; cl0,tl2; tl0,cl2 og tl0,tl2). En generell mekanisme for isomerisering av linolsyre er beskrevet av J.C. Cowan (JAOCS 72:492-99
[1950]. Det antas at dobbeltbindingen polariseres som et resultat av en kollisjon med en aktiverende katalysator. Det polariserte karbonatom og karbonet i naboposisjon er så fri til å rotere, og kreftene er slik at det gjør det ustabile karbonatom hovedsakelig plant. Når systemet så beveger seg for å avlaste disse krefter som er påført som et resultat av kollisjonen, dannes både cis- og trans-isomerer. Dannelse av visse CLA-isomerer er termodynamisk favorisert. Dette skyldes den ko-planare tilstand hos de fem karbonatomer rundt den konjugerte dobbeltbinding og en romlig konflikt for resonansradikalet. Den relativt høyere fordeling av 9,11- og 10,12-isomerer er åpenbart et resultat av den ytterligere stabilisering av de geometriske c9,tl 1- eller tl0,cl2-isomerer. Utviklingen innen gasskromatografi har gjort at forskere kan bestemme nøyaktig isomersammensetningen i prøver av CLA. Disse undersøkelser viser at det faktisk dannes mange flere enn åtte isomerer under konjugeringen. I Christie et al., (JAOCS 74 (11): 1231 [1997] er det rapportert at isomerfordelingen i en kommersiell prøve av CLA var som følger: 8,10 (14%); 9,11 (30%); 10,12 (31%) og 11,13 (24%). I en annen under-søkelse av Christie et al. (Lipids 33(2):217-21 [1998]), ble det rapportert følgende CLA-isomersammensetning i et kommersielt CLA-preparat: ti l,tl3 (0,74%); tl0,tl2 (1,23%); t9,tl 1 (1,18%); t8,tl0 (0,46%); cl l,tl3 og ti l,cl3 (21,7%); cl0,tl2 og tl0,cl2 (29,0%); c9,tl 1 og t9,cl 1 (29,5%); c8,tl0 og t8,cl0 (12,3%); cl l,cl3 (0,96%); cl0,cl2 (0,88%); c9,cl 1 (0,88%) og c8,cl0 (0,20%). Selv om dannelsen av visse isomerer er favorisert, så viser disse undersøkelser at andre CLA-isomerer i høy grad kan bidra til sammensetningen av alkaliisomeriserte CLA-preparater.
A. Migrering av konjugerte dobbeltbindinger
Med den foreliggende oppfinnelse tilveiebringes fremgangsmåter for fremstilling av blandinger som er anriket med forskjellige CLA-isomerer. En delvis renset eller konsentrert CLA-isomer blir behandlet under slike betingelser at det medfører migrering av dobbeltbindingssystemet ved oppvarming av minst én isomer til ca. 200-240 °C, fortrinnsvis til ca. 220 °C. I andre utførelsesformer omfatter betingelsene også å omsette den delvis rensede eller konsentrerte isomer, eller isomerer, under nitrogen i en forseglet beholder. Med henvisning til tabell 1, så kan isomerene i kolonne 1 anvendes til å fremstille preparater som inneholder en vesentlig mengde av den motsvarende isomer i kolonne 2. Etter den første omdannelsesreaksjon vil preparatet inneholde både utgangsisomeren og "søster"isomeren. Likeledes kan de fremstilte isomerer i kolonne 2 bli anvendt til å produsere vesentlige mengder av den motsvarende isomer i kolonne 1. Preparater som inneholder begge isomerer kan så bli behandlet for å rense søsterisomeren (for eksempel med gasskromatografi). Slik det vil forstås av fagfolk på området, så er det mulig å starte med mer enn én delvis renset isomer, og derved fremstille et preparat som inneholder fire, seks, åtte eller flere isomerer. I ytterligere utførelsesformer kan et renset preparat av søsterisomeren bli fremstilt av det behandlede preparat som inneholder utgangsisomeren og søsterisomeren ved hjelp av kjente fremgangsmåter (dvs. gass- eller væske-kromatografi).
Som vist i eksemplene, vil behandling av renset tl0,cl2-oktadekadiensyre resultere i dannelse av cl l,tl3-oktadekadiensyre. Likeledes kan konsentrert eller delvis renset cl l,tl3-oktadekadiensyre anvendes til å fremstille tlO,c 12-oktadekadiensyre. Etter at den delvis rensede isomer er behandlet for å fremstille en søsterisomer, omfatter det resulterende preparat fortrinnsvis mer enn 20% av søsterisomeren sammenlignet med den første delvis rensede isomer. I andre utførelsesformer omfatter det resulterende preparat mer enn 40% av søsterisomeren sammenlignet med den første delvis rensede isomer. I ytterligere utførelsesformer omfatter det resulterende preparat mellom ca. 20% og 80% av søsterisomeren sammenlignet med den første delvis rensede isomer. I andre utførel-sesformer vil det resulterende preparat omfatte eller hovedsakelig bestå av mer enn 20% av søsterisomeren på vektbasis (f.eks. inneholder preparatet ca. 20 gram av søsteriso-meren og ca. 80 gram av den første delvis rensede isomer). I ytterligere utførelsesformer omfatter det resulterende preparat mer enn 40% av søsterisomeren på vektbasis. I ytterligere utførelsesformer omfatter preparatet mellom ca. 20% og 80% av søsterisomeren på vektbasis.
B. Anvendelse av renset isomer og par med søsterisomerer
De rensede isomerer og parene med søsterisomerer beskrevet over, har mange anvendelser. I noen tilfeller finner de rensede isomerer eller par med søsterisomerer anvendelse som standarder i gasskromatografi og væskekromatografi. Rensede eller anrikede kilder med disse isomerer kan anvendes som standarder for analyse av kommersielle CLA-produkter som hittil kan ha inneholdt uidentifiserte topper som representerer uidentifiserte isomerer.
I andre tilfeller blir preparatet som inneholder de rensede isomerer eller par med søsterisomerer, anvendt ved undersøkelser av foring av dyr og som næringstilskudd. Det er tatt i betraktning at de rensede isomerer og par med søsterisomerer kan anvendes som kontroll i undersøkelser av foring av dyr slik at de biologiske virkninger (for eksempel fordeling innen organer og celler, virkninger på lipid-biosynteser og metabolisme) av isomerene kan studeres. Isomerene kan fremskaffes som frie fettsyrer, alkylestere (for eksempel metyl- eller etylestere av CLA), triglyserider eller kombinasjoner derav. Fortrinnsvis gis isomerene oralt. I andre tilfeller kan isomerene bli formulert med egnede bærere som stivelse, sukrose eller laktose til tabletter, piller, drageer, kapsler, løsninger, væsker, oppslemminger, suspensjoner og emulsjoner. Fortrinnsvis inneholder isomer-formuleringene antioksidanter. Disse kan innbefatte "Controx" (Grunau (Henkel), Illertissen, DE), "Covi-OX" (Grunau (Henkel), Illertissen, DE), lecithin og oljeløselige former av vitamin C. Isomerene kan tilveiebringes som vannløsning, oljeløsning eller i hvilken som helst av de andre former diskutert over. Tabletten eller kapselen kan bli belagt med et enterisk belegg som oppløses ved ca. pH 6,0 til 7,0. Et egnet enterisk belegg som oppløses i tynntarmen men ikke i magesekken, er celluloseacetatftalat. I noen utførelsesformer tilveiebringes isomerene som myke gelatinkapsler. CLA kan også tilføres på en hvilken som helst måte, innbefattende intravenøst, intramuskulært, intra-arterielt, intramedulært, intratekalt, intraventrikulært, transdermalt, subkutant, intra-peritonealt, intranasalt, enteralt, topisk, sublingualt eller rektalt. Ytterligere detaljer angående formuleringsteknikker og administrasjon kan finnes i den siste utgave av Remington's Pharmaceutical Sciences (Maack Publishing Co., Easton, PA, USA).
En effektiv mengde isomerer kan også tilveiebringes som et supplement i forskjellige næringsmiddelprodukter, innbefattende dyrefor og næringsdrikker. For formålet med denne søknad henviser "næringsmiddelprodukter som inneholder CLA-isomerer" til ethvert naturlig, bearbeidet, diettmessig eller ikke-diettmessig næringsmiddelprodukt som er blitt eksogent tilsatt CLA-isomerer. Likeledes henviser "for-produkter som inneholder CLA" til ethvert dyrefor som er blitt eksogent tilsatt CLA-isomerer. CLA kan derfor innlemmes direkte i forskjellige tilberedte næringsmiddelprodukter, innbefattende diettdrinker, diettplater, supplementer, tilberedte frosne måltider, sukkertøy, snacksprodukter (for eksempel chips), tilberedte kjøttprodukter, melk, ost, yoghurt og ethvert annet fett- eller oljeholdig næringsmiddel.
I ytterligere utførelsesformer av den foreliggende oppfinnelse kan isomer-preparatene bli renset ytterligere (for eksempel ved molekyldestillasjon eller adsorpsjon) for å fjerne flyktige organiske forbindelser. I henhold til den foreliggende oppfinnelse er det derfor tatt i betraktning å tilveiebringe isomerpreparater som inneholder mindre enn 100 ppm flyktige organiske forbindelser, og fortrinnsvis mindre enn 5 ppm flyktige organiske forbindelser.
EKSPERIMENTELT
De følgende eksempler er gitt for å demonstrere og ytterligere belyse visse foretrukne utførelsesformer og aspekter vedrørende den foreliggende oppfinnelse.
I beskrivelsen av eksemplene som følger, er det anvendt følgende forkortelser: M(molar); mM (millimolar); uM (mikromolar); kg (kilogram); g (gram); mg (milligram); ug (mikrogram); ng (nanogram); 1 (liter); ml (milliliter); ul (mikroliter); cm (centimeter); mm (millimeter); nm (nanometer); °C (grad Celsius); KOH (kaliumhydroksid); HC1 (saltsyre); Hg (kvikksølv).
Eksempel 1
Fremstilling av CLA-isomerer
I dette eksempel beskrives fremstilling av cl l,tl3-oktadekadiensyre fra tl0,cl2-oktadekadiensyre. Det ble oppløst 50 g KOH i propylenglykol under moderat oppvarming. Det ble så tilsatt 100 g med 98% linolsyre til blandingen, og blandingen ble varmet til 150 °C og omrørt i 3 timer. Blandingen ble deretter avkjølt og vasket flere ganger med varmt vann, og så tørket under vakuum ved moderat varme. Den resulterende CLA-blanding besto av c9,tl 1- og tl0,c 12-oktadekadiensyre, samt spor av CLA-isomerer. Blandingen ble konvertert til metylester ved koking under tilbakeløp i surgjort metanol. Det ble oppløst 50 g konjugerte frie fettsyrer i metanol som inneholdt 4,5% svovelsyre og som så fikk koke i 1 time i et vannbad under betingelser med tilbakeløp. Blandingen ble avkjølt og bunnlaget kastet. Frisk metanol med 4,5% svovelsyre ble tilsatt, og blandingen fikk koke i ytterligere 1 time under betingelser med tilbakeløp. Etter avkjøling ble denne metylesterblanding vasket flere ganger med vann og så tørket under vakuum ved moderat varme. Av metylesteren ble 10 g oppløst i aceton og avkjølt over natten i en fryser til -60 °C. Et fast presipitat ble samlet opp ved filtrering og på nytt oppløst i aceton, og igjen avkjølt til -60 °C over natten. Presipitatet ble tørket under vakuum og med GLC-analyse viste det seg å inneholde 97% tlO,cl2-CLA. Analyse-utstyret besto av en Perkin Eimer GLC med automatisk prøvetaker. Kolonnen var av type høypolar, smeltet silika.
Følgende programinnstilling ble anvendt:
Av den rensede tl0,cl2-isomer ble så ett gram dekket med nitrogen i et forseglet rør og varmet i to timer ved 220 °C. Etter avkjøling ble de resulterende metylestere analysert med GC som over. De relative innhold av tl0,cl2 i blandingen var redusert til 52,32% og cl l,tl3-isomeren var til stede i en konsentrasjon på 41,96% (se tabell 2).
Eksempel 2
Fremstilling av CLA-isomerer
I dette eksempel beskrives fremstilling av t8,cl0-oktadekadiensyre fra c9.tl 1-oktadekadiensyre. Renset c9,tl 1-oktadekadiensyre kan anskaffes fra kommersielle kilder (Matreya, State College, PA, USA) eller ved fermentering med rumen-mikroorganismer (se for eksempel US patentskrift nr. 5 674 901). Den rensede c9,tl 1-oktadekadiensyre ble konvertert til en høy prosentandel (for eksempel 25% til 50%) med t8,cl0-oktadekadiensyre ved å anbringe c9,tl 1-oktadekadiensyren i et forseglet rør under nitrogen og oppvarming til 220 °C i ca. 2 timer.
Eksempel 3
Fremstilling av CLA-isomerer
I dette eksempel beskrives fremstilling av t6,c8-oktadekadiensyre fra c7,t9-oktadekadiensyre. Renset c7,t9-oktadekadiensyre kan oppnås med gasskromatografi i preparativ skala. Den rensede c7,t9-oktadekadiensyre ble konvertert til en høy prosentandel (for eksempel 25% til 50%) med t6,c8-oktadekadiensyre ved å anbringe c9,tl 1-oktadekadiensyren i et forseglet rør under nitrogen og oppvarming til 220 °C i ca. 2 timer.
Eksempel 4
Fremstilling av CLA-isomerer
I dette eksempel beskrives fremstilling av cl2,tl4-oktadekadiensyre fra ti l,cl3-oktadekadiensyre. Renset ti l,cl3-oktadekadiensyre kan oppnås med gasskromatografi i preparativ skala (for eksempel ved å følge fremgangsmåten beskrevet i eksempel 1). Den rensede ti l,cl3-oktadekadiensyre ble konvertert til en høy prosentandel (for eksempel 25% til 50%) med cl2,tl4-oktadekadiensyre ved å anbringe c9,tl 1-oktadekadiensyren i et forseglet rør under nitrogen og oppvarming til 220 °C i ca. 2 timer.
Eksempel 5
Fremstilling av CLA-isomerer
I dette eksempel beskrives fremstilling av t5,c6-oktadekadiensyre fra c6,t8-oktadekadiensyre. Renset c6,t8-oktadekadiensyre kan oppnås med gasskromatografi i preparativ skala. Den rensede c6,t8-oktadekadiensyre ble konvertert til en høy prosentandel (for eksempel 25% til 50%) med t5,c6-oktadekadiensyre ved å anbringe c9,tl 1-oktadekadiensyren i et forseglet rør under nitrogen og oppvarming til 220 °C i ca. 2 timer.
Eksempel 6
Fremstilling av CLA-isomerer
I dette eksempel beskrives fremstilling av t4,c6-oktadekadiensyre fra c5,t7-oktadekadiensyre. Renset c5,t7-oktadekadiensyre kan oppnås med gasskromatografi i preparativ skala. Den rensede c5,t7-oktadekadiensyre ble konvertert til en høy prosentandel (for eksempel 25% til 50%) med t4,c6-oktadekadiensyre ved å anbringe c9,tl 1-oktadekadiensyren i et forseglet rør under nitrogen og oppvarming til 220 °C i ca. 2 timer.
Eksempel 7
Fremstilling av CLA-isomerer
I dette eksempel beskrives fremstilling av t3,c5-oktadekadiensyre fra c4,t6-oktadekadiensyre. Renset c4,t6-oktadekadiensyre kan oppnås med gasskromatografi i preparativ skala. Den rensede c4,t6-oktadekadiensyre ble konvertert til en høy prosentandel (for eksempel 25% til 50%) med t3,c5-oktadekadiensyre ved å anbringe c9,tl 1-oktadekadiensyren i et forseglet rør under nitrogen og oppvarming til 220 °C i ca. 2 timer.
Eksempel 8
Fremstilling av CLA-isomerer
I dette eksempel beskrives fremstilling av cl3,tl5-oktadekadiensyre fra tl2,cl4-oktadekadiensyre. Renset tl2,cl4-oktadekadiensyre kan oppnås med gasskromatografi i preparativ skala. Den rensede tl2,cl4-oktadekadiensyre ble konvertert til en høy prosentandel (for eksempel 25% til 50%) med cl3,tl5-oktadekadiensyre ved å anbringe c9,tl 1-oktadekadiensyren i et forseglet rør under nitrogen og oppvarming til 220 °C i ca. 2 timer.
Eksempel 9
Fremstilling av CLA-isomerer
I dette eksempel beskrives fremstilling av cl4,tl6-oktadekadiensyre fra tl3,cl5-oktadekadiensyre. Renset tl3,cl5-oktadekadiensyre kan oppnås med gasskromatografi i preparativ skala. Den rensede tl3,cl5-oktadekadiensyre ble konvertert til en høy prosentandel (for eksempel 25% til 50%) med cl4,tl6-oktadekadiensyre ved å anbringe c9,tl 1-oktadekadiensyren i et forseglet rør under nitrogen og oppvarming til 220 °C i ca. 2 timer.
Eksempel 10
Fremstilling av triacylglyseroler med CLA ved direkte forestring
Immobilisert Candida antarctica lipase (1,25 g) ble tilsatt til en blanding av glyserol (1,22 g, 13,3 mmol) og den ønskede CLA-isomer. Blandingen ble forsiktig omrørt med en magnetrører på en varm plate ved 65 °C under kontinuerlig vakuum på 0,01-0.5 torr. Flyktig vann dannet under reaksjonsprosessen ble kontinuerlig kondensert i en kjølefelle med flytende nitrogen. Etter 48 h ble reaksjonen avbrutt, n-heksan tilsatt og enzymet skilt fra ved filtrering. Den organiske fase ble behandlet med en basisk vann-løsning av natriumkarbonat for å fjerne overskudd av frie fettsyrer (om nødvendig). Det organiske løsninsgmiddel (etter tørking over vannfritt magnesiumsulfat når det er hensiktsmessig) ble fjernet i vakuum i en rotasjonsfordamper, fulgt av behandling under høyt vakuum for å danne et praktisk talt rent produkt. Når det anvendes støkiometriske mengder med frie fettsyrer, benyttes titrering med standardisert natriumhydroksid for å bestemme innholdet av fri fettsyre i det rå reaksjonsprodukt.
Eksempel 11
Rasjoner inneholdende CLA-isomerer
I dette eksempel beskrives typiske rasjoner for dyr, hvor rasjonene inneholder CLA-holdige frie fettsyrer, triglyserider og estere ifølge den foreliggende oppfinnelse. Preparatet med CLA-isomer kan være i form av frie fettsyrer, alkylestere, triglyserider eller kombinasjoner derav. Det er ikke ment at den foreliggende oppfinnelse skal være begrenset til noen bestemt formulering. Faktisk menes at CLA-isomerer i forskjellige konsentrasjoner vil finne anvendelse i ulike rasjoner.
A. Startrasjoner for svin
B. Vekstavsluttende rasjoner for svin (fra 18 til 109 kg)
C. Vekstavsluttende rasjoner for svin (for svin 55-109 kg) 1. Sammensetning og analyse av spormineral-premiks for svin 2. Sammensetning av vitamin-premiks for svin D. Rasjon med 18 % protein for høns
E. Start- og sluttrasjoner for broilere
F. VEkst/slutt-rasjoner for kalkun G. Tørrfor-formulering for hunder
H. Halvfuktig hundefor, formuleringer
Eksempel 12
Fremstilling av triacylglyserider
CLA-isomerer ble fremstilt som beskrevet over og destillert i et molekyl-destillasjonsanlegg ved 150 °C og et trykk på IO"<2> mbar. Deretter ble 1000 kg av det destillerte produkt blandet med 97 kg ren glyserol og 80 kg lipse. Reaksjonen fikk pågå i 12 timer ved 55 °C under vakuum og med omrøring. Triacylglyseirdproduktet ble destillert i en molekyldestillasjonsapparatur for å fjerne uomsatte fettsyrer.
Eksempel 13
Syntese av cll,tl3-CLA
I dette eksempel beskrives fremstilling av en CLA-prøve som inneholder ca. 60% av cl l,tl3-isomeren av CLA. Kort fortalt ble to porsjoner med 95% tl0,cl2-fettsyre-etylesterblanding, 30 g hver, overført til 70 ml prøverør. Prøverørene ble spylt med nitrogen og forseglet. Prøverørene ble forvarmet i ett minutt på et 100 °C vannbad og deretter plassert direkte i et 220 °C oljebad. Etter to timer ble ett av prøverørene fjernet fra oljebadet og fikk så avkjøle. Etter ytterligere 1 time ble det andre prøverør fjernet, og fikk så avkjøle. Isomerprofilene for den opprinnelige prøve og for de to oppvarmede prøver ble bestemt med GC (tabell 13).
Det ble tatt ut tre prøver fra hver av de to oppvarmede prøver og fortynnet med 3,5,4,5 og 5,5 ml aceton pr. gram fett i 70 ml prøverør (tabell 14). Prøverørene med acetonløsning ble så avkjølt til -60 °C i en fryser. Etter 3 døgn ble prøver tatt ut fra de overliggende fraksjoner. Isomerprofilen for de overliggende fraksjoner ble bestemt med GC (tabell 15).
Oppvarmingen av den opprinnelige prøve (totalt CLA ca. 99%, oljesyre 0,9%) til 220 °C i 2 og 3 timer medførte en delvis omdannelse av tl0,cl2-isomeren til cl l,tl3-isomeren. De oppvarmede prøver inneholdt 35-45% med cl l,tl3-isomer (tabell 13). Det nøyaktige isomerinnhold kunne ikke bestemmes på grunn av ufullstendig separering under de valgte GC-betingelser.
Krystalliseringen av prøven oppvarmet i to timer skilte seg fra krystalliseringen av prøven oppvarmet i tre timer ved at den ga bedre (fastere) krystaller. Prøven oppvarmet i tre timer ga sørpete krystaller. Analyse av de overliggende fraksjoner avslørte at krystalliseringen av prøven oppvarmet i to timer ga en bedre separasjon med et høyere innhold av cl l,tl3 i den overliggende fraksjon. Innholdet av cl I,tl3-CLA og tl0,cl2-CLA i disse overliggende fraksjoner var henholdsvis 56-60% og 27-30%. Innholdet av cl l,tl3 var svakt høyere i de overliggende fraksjoner hos prøvene med et lavere forhold fett/aceton (tabell 15).
<*> I de oppvarmede prøver representerer verdiene gitt i c9,tl 1-kolonnen, c9,tl 1 og t8,cl0, som skyldes en tilsvarende omdannelse fra c9,tl 1. Verdiene gitt for mengdene av cl0,cl2 og cl l,cl3 er verdier integrert med GC. Disse verdier kan avvike fra det virkelige innhold på grunn av ufullstendig preparering på kromatogrammene.
Av ovenstående fremgår klart at med den foreliggende oppfinnelse tilveiebringes fremgangsmåter for fremstilling av nye blandinger av CLA-isomerer. Disse CLA-isomerer kan anvendes for forskjellige formål, innbefattende kontrollprøver ved gasskromatografi og kontrollprøver ved fSringsstudier, samt som næringstilskudd for mennesker og dyr.
Claims (6)
1. Fremgangsmåte,
karakterisert ved at den omfatter: a) å tilveiebringe en første delvis renset oktadekadiensyreisomer som har et konjugert bindingssystem, og b) oppvarme den delvis rensede oktadekadiensyreisomer til 200-240 °C slik at det konjugerte bindingssystem migrerer og derved danner en blanding omfattende minst den første oktadekadiensyreisomer og en andre oktadekadiensyreisomer, hvor den første og andre oktadekadiensyreisomer er valgt fra den følgende liste med par:
og hvor den andre isomer er til stede i en konsentrasjon på over 20 vekt% av den første isomeren.
2. Fremgangsmåte ifølge krav 1, hvor den også omfatter trinnet c) å separere den første delvis rensede oktadekadiensyreisomer og den andre oktadekadiensyreisomer slik at det oppnås en andre delvis renset oktadekadiensyreisomer.
3. Fremgangsmåte ifølge krav 2, hvor separasjonstrinnet utføres med gass- eller væskekromatografi.
4. Fremgangsmåte ifølge krav 1, hvor oktadekadiensyreisomeren omfatter en alkylester.
5. Fremgangsmåte ifølge krav 1, hvor den også omfatter å syntetisere en acylglyserol med blandingen omfattende minst den første delvis rensede oktadekadiensyreisomer og en andre oktadekadiensyreisomer.
6. Fremgangsmåte ifølge krav 5, hvor acylglyserolen er et triglyserid.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US09/563,072 US6380409B1 (en) | 2000-04-24 | 2000-04-24 | Methods for preparing CLA isomers |
| PCT/US2001/040595 WO2001081290A2 (en) | 2000-04-24 | 2001-04-24 | Methods for preparing cla isomers |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO20025084D0 NO20025084D0 (no) | 2002-10-23 |
| NO20025084L NO20025084L (no) | 2002-12-11 |
| NO327744B1 true NO327744B1 (no) | 2009-09-14 |
Family
ID=24249002
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO20025084A NO327744B1 (no) | 2000-04-24 | 2002-10-23 | Fremgangsmate for fremstilling av CLAisomerer |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6380409B1 (no) |
| EP (1) | EP1276709B1 (no) |
| JP (1) | JP2004516232A (no) |
| AT (1) | ATE307108T1 (no) |
| AU (2) | AU5762701A (no) |
| CA (1) | CA2406228C (no) |
| DE (1) | DE60114176T2 (no) |
| ES (1) | ES2247105T3 (no) |
| NO (1) | NO327744B1 (no) |
| WO (1) | WO2001081290A2 (no) |
Families Citing this family (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7101914B2 (en) * | 1998-05-04 | 2006-09-05 | Natural Asa | Isomer enriched conjugated linoleic acid compositions |
| WO2001078531A2 (en) | 2000-04-18 | 2001-10-25 | Natural As | Conjugated linoleic acid powder |
| US20030149288A1 (en) * | 2000-04-18 | 2003-08-07 | Natural Asa | Conjugated linoleic acid powder |
| US6677470B2 (en) | 2001-11-20 | 2004-01-13 | Natural Asa | Functional acylglycerides |
| WO2003061705A1 (en) * | 2002-01-22 | 2003-07-31 | Mars, Incorporated | Weight management system for obese animals |
| US20030138547A1 (en) * | 2002-01-22 | 2003-07-24 | Mars, Incorporated | Weight management system for animals |
| US6743931B2 (en) | 2002-09-24 | 2004-06-01 | Natural Asa | Conjugated linoleic acid compositions |
| US6897327B2 (en) * | 2003-05-08 | 2005-05-24 | Stepan Company | Manufacture of conjugated linoleic salts and acids |
| US20050069593A1 (en) * | 2003-09-29 | 2005-03-31 | Life Time Fitness, Inc. | Nutritional supplement containing 7-Keto-DHEA and conjugated linoleic acid |
| EP1729851A2 (en) * | 2004-03-10 | 2006-12-13 | Natural ASA | Compositions comprising reverse isomers of conjugated linoleic acid |
| DE102005057832A1 (de) * | 2005-12-03 | 2007-06-06 | Cognis Ip Management Gmbh | Verfahren zur enzymatischen Synthese von Triglyceriden |
| EP1957063B1 (en) * | 2005-12-05 | 2010-08-25 | Stepan Company | Process for preparing conjugated linoleic acid and derivatives thereof from ricinoleic acid |
| US9062276B2 (en) | 2012-12-03 | 2015-06-23 | Board Of Trustees Of The University Of Arkansas | Conjugated linoleic acid rich vegetable oil production from linoleic rich oils by heterogeneous catalysis |
| WO2014124162A1 (en) * | 2013-02-08 | 2014-08-14 | Board Of Trustees Of The University Of Arkansas | Conjugated linoleic acid rich vegetable oil production |
| AU2014228387B2 (en) | 2013-03-11 | 2016-09-01 | Sciadonics, Inc. | Lipid compositions containing bioactive fatty acids |
| US20230348951A1 (en) | 2022-04-28 | 2023-11-02 | Société des Produits Nestlé S.A. | Diagnosing and treating chronic kidney disease in a feline |
Family Cites Families (36)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB558881A (no) | 1900-01-01 | |||
| US2350583A (en) * | 1944-06-06 | Drying oils | ||
| US2242230A (en) * | 1941-05-20 | Process of producing conjugation in | ||
| DE1156788C2 (de) * | 1959-12-02 | 1973-11-22 | Brinckmann Harburger Fett | Verfahren zur Umwandlung von Fettsaeureestern einwertiger Alkohole mit isolierten Doppelbindungen (íÀIsolenfettsaeureesterníÂ) in Fettsaeureester mit konjugierten Doppelbindungen (íÀKonjuenfettsaeureesteríÂ) |
| US3729379A (en) * | 1971-08-31 | 1973-04-24 | Us Agriculture | Hydroxy-conjugated fatty acids |
| US4164505A (en) * | 1977-07-08 | 1979-08-14 | Sylvachem Corporation | Flow process for conjugating unconjugated unsaturation of fatty acids |
| DE3019963A1 (de) * | 1980-05-24 | 1981-12-03 | Henkel KGaA, 4000 Düsseldorf | Verfahren zur konjugierung mehrfach ungesaettigter fettsaeuren und fettsaeuregemische |
| US5017614A (en) * | 1989-02-17 | 1991-05-21 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Methods of preventing oxidation, quenching singlet oxygen and inhibiting mold growth and novel compositions therefor |
| US5070104A (en) * | 1989-02-17 | 1991-12-03 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Methods of chelating metal and novel compositions therefor |
| US5208356A (en) * | 1989-02-17 | 1993-05-04 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Octadecadienoic phospholipic esters, antioxidant and mold inhibiting compositions |
| US5288619A (en) * | 1989-12-18 | 1994-02-22 | Kraft General Foods, Inc. | Enzymatic method for preparing transesterified oils |
| US5468887A (en) * | 1992-03-13 | 1995-11-21 | The Dial Corp. | Production of fatty acid methyl esters and soaps therefrom |
| US5674901A (en) | 1995-06-01 | 1997-10-07 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Methods of treating animals to maintain or increase CD-4 and CD-8 cell populations |
| US5554646A (en) * | 1992-04-29 | 1996-09-10 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Method for reducing body fat in animals |
| US5430066A (en) * | 1992-04-29 | 1995-07-04 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Methods for preventing weight loss, reduction in weight gain, and anorexia due to immune stimulation |
| US5760082C1 (en) * | 1994-08-29 | 2001-03-06 | Wisconsin Alumni Res Found | Dietetic foods containing conjugated linoleic acids |
| US5814663A (en) | 1994-08-29 | 1998-09-29 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Method for maintaining an existing level of body fat |
| MY118354A (en) | 1995-05-01 | 2004-10-30 | Scarista Ltd | 1,3-propane diol derivatives as bioactive compounds |
| US5856149A (en) * | 1995-06-01 | 1999-01-05 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Method of producing conjugated fatty acids |
| EP0779033B1 (en) | 1995-11-14 | 2001-09-26 | Unilever N.V. | Edible fat-spread |
| DE69609196T3 (de) | 1995-11-14 | 2006-01-26 | Loders Croklaan B.V. | Verfahren zur Herstellung von Materialien mit hohem Gehalt an isomeren von konjugierter Linolsäure |
| US5585400A (en) * | 1996-02-27 | 1996-12-17 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Methods of attenuating the allergic response in animals |
| US6165518A (en) | 1996-04-11 | 2000-12-26 | Loders Croklaan B.V. | Free flowing fat compositions |
| US5725873A (en) * | 1996-07-22 | 1998-03-10 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Method of improving the growth or the efficiency of feed conversion of an animal and compositions for use therein |
| US5804210A (en) * | 1996-08-07 | 1998-09-08 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Methods of treating animals to maintain or enhance bone mineral content and compositions for use therein |
| US5760083A (en) | 1996-08-07 | 1998-06-02 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Use of CLA to reduce the incidence of valgus and varus leg deforomities in poultry |
| JP3017108B2 (ja) * | 1996-10-30 | 2000-03-06 | リノール油脂株式会社 | 共役リノール酸の製造方法 |
| US5855917A (en) * | 1996-12-04 | 1999-01-05 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Method for controlling body fat and/or body weight in animals and pharmaceutical compositions for use therein comprising 20-carbon conjugated unsaturated fatty acids |
| US5885594A (en) * | 1997-03-27 | 1999-03-23 | The Procter & Gamble Company | Oral compositions having enhanced mouth-feel |
| US5851572A (en) * | 1997-04-25 | 1998-12-22 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Method of increasing fat firmness and improving meat quality in animals with conjugated linolenic acid |
| DE19718245C5 (de) | 1997-04-30 | 2004-11-11 | Cognis Deutschland Gmbh & Co. Kg | Synthetische Triglyceride auf Basis konjugierter Linolsäure, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung |
| US6015833A (en) * | 1998-03-17 | 2000-01-18 | Conlinco., Inc. | Conjugated linoleic acid compositions |
| CA2289648C (en) * | 1998-03-17 | 2004-06-01 | Conlinco, Inc. | Conjugated linoleic acid compositions |
| US7078051B1 (en) * | 1998-08-11 | 2006-07-18 | Natural Asa | Conjugated linoleic acid alkyl esters in feedstuffs and food |
| MX228618B (es) * | 1998-05-04 | 2005-06-21 | Conlinco Inc | Metodos para utilizar composiciones de acido linoleico conjugado enriquecidas por isomeros. |
| GB9929897D0 (en) * | 1999-12-18 | 2000-02-09 | Slabas Antoni R | Improvements in or relating to conjugated fatty acids and related compounds |
-
2000
- 2000-04-24 US US09/563,072 patent/US6380409B1/en not_active Expired - Lifetime
-
2001
- 2001-04-24 JP JP2001578388A patent/JP2004516232A/ja active Pending
- 2001-04-24 ES ES01931164T patent/ES2247105T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-04-24 CA CA002406228A patent/CA2406228C/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-04-24 EP EP01931164A patent/EP1276709B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-04-24 DE DE60114176T patent/DE60114176T2/de not_active Expired - Fee Related
- 2001-04-24 AU AU5762701A patent/AU5762701A/xx active Pending
- 2001-04-24 AT AT01931164T patent/ATE307108T1/de not_active IP Right Cessation
- 2001-04-24 AU AU2001257627A patent/AU2001257627B2/en not_active Ceased
- 2001-04-24 WO PCT/US2001/040595 patent/WO2001081290A2/en active IP Right Grant
-
2002
- 2002-10-23 NO NO20025084A patent/NO327744B1/no not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2004516232A (ja) | 2004-06-03 |
| CA2406228A1 (en) | 2001-11-01 |
| NO20025084D0 (no) | 2002-10-23 |
| ATE307108T1 (de) | 2005-11-15 |
| AU5762701A (en) | 2001-11-07 |
| WO2001081290A2 (en) | 2001-11-01 |
| AU2001257627B2 (en) | 2006-06-22 |
| DE60114176D1 (de) | 2006-03-02 |
| EP1276709A2 (en) | 2003-01-22 |
| DE60114176T2 (de) | 2006-07-13 |
| ES2247105T3 (es) | 2006-03-01 |
| US6380409B1 (en) | 2002-04-30 |
| NO20025084L (no) | 2002-12-11 |
| EP1276709B1 (en) | 2005-10-19 |
| WO2001081290A3 (en) | 2002-06-13 |
| CA2406228C (en) | 2009-03-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR100619651B1 (ko) | 공액 리놀레산 조성물 | |
| AU747058B2 (en) | Isomer enriched conjugated linoleic acid compositions | |
| NO333298B1 (no) | Konjugerte linolsyreblandinger | |
| NO327744B1 (no) | Fremgangsmate for fremstilling av CLAisomerer | |
| US20020032233A1 (en) | Methods of using isomer enriched conjugated linoleic acid compositions | |
| NO335632B1 (no) | Fremgangsmåte for fremstilling av konjugert linolsyre-holdig materiale | |
| AU2001257627A1 (en) | Methods for preparing CLA isomers | |
| NO325536B1 (no) | Blanding omfattende et pulver inneholdende konjugert linolsyre, fremgangsmate for fremstilling og anvendelse derav. | |
| NO332556B1 (no) | Fremgangsmate for a tilveiebringe et stabilisert, konjugert linolsyreprodukt | |
| JP2015129136A (ja) | 共役リノール酸組成物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM1K | Lapsed by not paying the annual fees |