NO326905B1 - Reversering av viral-indusert systemisk sjokk og andenod ved blokkering av lymfotoksin-<beta>-veien - Google Patents
Reversering av viral-indusert systemisk sjokk og andenod ved blokkering av lymfotoksin-<beta>-veien Download PDFInfo
- Publication number
- NO326905B1 NO326905B1 NO20011757A NO20011757A NO326905B1 NO 326905 B1 NO326905 B1 NO 326905B1 NO 20011757 A NO20011757 A NO 20011757A NO 20011757 A NO20011757 A NO 20011757A NO 326905 B1 NO326905 B1 NO 326905B1
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- beta
- lymphotoxin
- blocking agent
- receptor
- individual
- Prior art date
Links
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 title claims abstract description 21
- 230000035939 shock Effects 0.000 title claims abstract description 20
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 title claims abstract description 16
- 108090000542 Lymphotoxin-alpha Proteins 0.000 title description 30
- 102000004083 Lymphotoxin-alpha Human genes 0.000 title description 10
- 230000037361 pathway Effects 0.000 title description 6
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 title description 5
- 239000002981 blocking agent Substances 0.000 claims abstract description 71
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims abstract description 9
- 230000005860 defense response to virus Effects 0.000 claims abstract description 6
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims description 39
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 claims description 39
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 32
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 claims description 29
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 claims description 29
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims description 15
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims description 15
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 14
- 108020001756 ligand binding domains Proteins 0.000 claims description 10
- 208000001490 Dengue Diseases 0.000 claims description 6
- 206010012310 Dengue fever Diseases 0.000 claims description 6
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 claims description 6
- 208000025729 dengue disease Diseases 0.000 claims description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 6
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 claims description 6
- 230000009429 distress Effects 0.000 claims description 4
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 claims description 4
- 102000007592 Apolipoproteins Human genes 0.000 claims description 2
- 108010071619 Apolipoproteins Proteins 0.000 claims description 2
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 claims description 2
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 claims description 2
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 2
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 claims description 2
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 claims description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims description 2
- 108020001580 protein domains Proteins 0.000 claims description 2
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 claims description 2
- 241001115402 Ebolavirus Species 0.000 claims 1
- 241000712902 Lassa mammarenavirus Species 0.000 claims 1
- 241001115401 Marburgvirus Species 0.000 claims 1
- 241000150288 Sin Nombre orthohantavirus Species 0.000 claims 1
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 24
- 206010038687 Respiratory distress Diseases 0.000 abstract description 9
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 abstract 1
- 102000003959 Lymphotoxin-beta Human genes 0.000 description 62
- 108090000362 Lymphotoxin-beta Proteins 0.000 description 62
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 42
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 40
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 39
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 32
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 26
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 25
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 23
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 22
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 21
- 102100026238 Lymphotoxin-alpha Human genes 0.000 description 20
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 18
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 17
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 17
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 17
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 17
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 16
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 16
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 15
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 14
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 14
- 108010091221 Lymphotoxin beta Receptor Proteins 0.000 description 13
- 102000018170 Lymphotoxin beta Receptor Human genes 0.000 description 13
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 13
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 13
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 13
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 12
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 12
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 11
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 11
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 10
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 10
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 10
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 9
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 8
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 8
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 7
- 230000006870 function Effects 0.000 description 7
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 6
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 6
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 6
- 230000004044 response Effects 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 101000764294 Homo sapiens Lymphotoxin-beta Proteins 0.000 description 5
- 101000611183 Homo sapiens Tumor necrosis factor Proteins 0.000 description 5
- 108010061593 Member 14 Tumor Necrosis Factor Receptors Proteins 0.000 description 5
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 5
- 102100028785 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 14 Human genes 0.000 description 5
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 5
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 5
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 5
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 5
- 201000011001 Ebola Hemorrhagic Fever Diseases 0.000 description 4
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 4
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 4
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 3
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 3
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 3
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 3
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 3
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 3
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 3
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 3
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 3
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 3
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 3
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 241000972773 Aulopiformes Species 0.000 description 2
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 2
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 2
- 101100044298 Drosophila melanogaster fand gene Proteins 0.000 description 2
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 2
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 2
- 101150064015 FAS gene Proteins 0.000 description 2
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 2
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 2
- 229940123038 Integrin antagonist Drugs 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 241000712899 Lymphocytic choriomeningitis mammarenavirus Species 0.000 description 2
- 108010021466 Mutant Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000008300 Mutant Proteins Human genes 0.000 description 2
- 101100335198 Pneumocystis carinii fol1 gene Proteins 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 239000012876 carrier material Substances 0.000 description 2
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 2
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 2
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 230000004154 complement system Effects 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 229960000633 dextran sulfate Drugs 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 230000014828 interferon-gamma production Effects 0.000 description 2
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 2
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 2
- 231100000225 lethality Toxicity 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- -1 poly(2-hydroxyethyl methacrylate) Polymers 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 239000003087 receptor blocking agent Substances 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 235000019515 salmon Nutrition 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XMQUEQJCYRFIQS-YFKPBYRVSA-N (2s)-2-amino-5-ethoxy-5-oxopentanoic acid Chemical compound CCOC(=O)CC[C@H](N)C(O)=O XMQUEQJCYRFIQS-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZMRMMAOBSFSXLN-UHFFFAOYSA-N 4-[4-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)phenyl]butanehydrazide Chemical compound C1=CC(CCCC(=O)NN)=CC=C1N1C(=O)C=CC1=O ZMRMMAOBSFSXLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102100027207 CD27 antigen Human genes 0.000 description 1
- 101150013553 CD40 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- YASYEJJMZJALEJ-UHFFFAOYSA-N Citric acid monohydrate Chemical compound O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O YASYEJJMZJALEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 229920001917 Ficoll Polymers 0.000 description 1
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 101000914511 Homo sapiens CD27 antigen Proteins 0.000 description 1
- 101000851376 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Proteins 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 102000009786 Immunoglobulin Constant Regions Human genes 0.000 description 1
- 108010009817 Immunoglobulin Constant Regions Proteins 0.000 description 1
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000013463 Immunoglobulin Light Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010065825 Immunoglobulin Light Chains Proteins 0.000 description 1
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 1
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 208000029523 Interstitial Lung disease Diseases 0.000 description 1
- 206010023927 Lassa fever Diseases 0.000 description 1
- 102100026894 Lymphotoxin-beta Human genes 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 108010037274 Member 9 Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily Proteins 0.000 description 1
- 102000011769 Member 9 Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily Human genes 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 1
- 208000001388 Opportunistic Infections Diseases 0.000 description 1
- 241000150452 Orthohantavirus Species 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241000699692 Peromyscus maniculatus Species 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N Ribavirin Chemical compound N1=C(C(=O)N)N=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N 0.000 description 1
- 108700012920 TNF Proteins 0.000 description 1
- 108060008683 Tumor Necrosis Factor Receptor Proteins 0.000 description 1
- 101710165473 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4 Proteins 0.000 description 1
- 102100022153 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4 Human genes 0.000 description 1
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 description 1
- 102100036857 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Human genes 0.000 description 1
- 108091005906 Type I transmembrane proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- OFHCOWSQAMBJIW-AVJTYSNKSA-N alfacalcidol Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)C[C@H](O)C1=C OFHCOWSQAMBJIW-AVJTYSNKSA-N 0.000 description 1
- 238000012870 ammonium sulfate precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 238000003782 apoptosis assay Methods 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 102000012740 beta Adrenergic Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010079452 beta Adrenergic Receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N but-3-enoic acid;ethene Chemical compound C=C.OC(=O)CC=C DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FCCCRBDJBTVFSJ-UHFFFAOYSA-N butanehydrazide Chemical compound CCCC(=O)NN FCCCRBDJBTVFSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 238000002701 cell growth assay Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229960002303 citric acid monohydrate Drugs 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 229940000986 dextran 110 Drugs 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000005038 ethylene vinyl acetate Substances 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 230000003325 follicular Effects 0.000 description 1
- 210000000285 follicular dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000012537 formulation buffer Substances 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002357 guanidines Chemical class 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 230000008004 immune attack Effects 0.000 description 1
- 230000034435 immune system development Effects 0.000 description 1
- 230000000899 immune system response Effects 0.000 description 1
- 230000009851 immunogenic response Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 229940099472 immunoglobulin a Drugs 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 229940125721 immunosuppressive agent Drugs 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 1
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 1
- 238000010212 intracellular staining Methods 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 210000001865 kupffer cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000000670 ligand binding assay Methods 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000005210 lymphoid organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 210000005033 mesothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 230000004898 mitochondrial function Effects 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 231100001221 nontumorigenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000005305 organ development Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 1
- 229920001200 poly(ethylene-vinyl acetate) Polymers 0.000 description 1
- 229920002338 polyhydroxyethylmethacrylate Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000005522 programmed cell death Effects 0.000 description 1
- 208000037821 progressive disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 description 1
- 229960000329 ribavirin Drugs 0.000 description 1
- HZCAHMRRMINHDJ-DBRKOABJSA-N ribavirin Natural products O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1N=CN=C1 HZCAHMRRMINHDJ-DBRKOABJSA-N 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000008299 semisolid dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J sodium diphosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 229940048086 sodium pyrophosphate Drugs 0.000 description 1
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 239000008227 sterile water for injection Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 235000019818 tetrasodium diphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001577 tetrasodium phosphonato phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 1
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940038773 trisodium citrate Drugs 0.000 description 1
- 102000003298 tumor necrosis factor receptor Human genes 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
- C07K16/241—Tumor Necrosis Factors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- A61K38/1793—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/191—Tumor necrosis factors [TNF], e.g. lymphotoxin [LT], i.e. TNF-beta
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/16—Central respiratory analeptics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
- C07K16/241—Tumor Necrosis Factors
- C07K16/242—Lymphotoxin [LT]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2866—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for cytokines, lymphokines, interferons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/30—Non-immunoglobulin-derived peptide or protein having an immunoglobulin constant or Fc region, or a fragment thereof, attached thereto
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Virology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Description
Foreliggende oppfinnelse angår generelt anvendelse av et lymfotoksin-p-blokkerende middel eller et lymfotoksin-p-reseptor blokkerende middel samt et farmasøytisk akseptabelt bæremiddel for fremstilling av en farmasøytisk sammensetning for induksjon av en antiviral respons i et individ som lider av viralindusert systemisk sjokk og/eller lungenød, hvor nevnte farmasøytiske sammensetninger er egnet til å adminstreres til et individ.
Bakgrunn for oppfinnelsen
Flere virus innbefattende Sin Nombre (SNV), Ebola, Marburg, Lassa og Dengue forårsaker alle akutte sykdommer med mange av de følgende symptomer: rask opptreden, feber, systemisk sjokk og luftveisnød (Lacy et al. (1997) Adv.Ped.Inf.Dis. 12:21). En annen vanlig opptreden blant disse infeksjoner er den systemiske fordeling av viralinfeksjon som setter som mål endotelialceller og makrofager ((Lacy et al. (1997) Adv.Ped.Inf.Dis. 12:21). De fleste av disse oppkomne virus med unntak av SNV ble opprinnelig identifisert for flere tiår siden. I løpet av årene siden deres oppdagelse har disse patogener opptrådt på nytt i utbrudd over hele ver-den. Inntil juni 1998 har det vært 183 bekreftede tilfeller av SNV som er det forårsakede middel av Hantavirus pulmo-nart sjokksyndrom i de sydvestlige Forenede Stater grunnet en økning i hjortemuspopulasjoner. Kun 55% av disse tilfeller har overlevd infeksjonen (Centers for Disease and Prevention. MMWR. 47,449(1998)). Lite er for tiden kjent omkring patogenesen av disse virus og heller ikke hvordan effektivt å behandle de tusener av pasienter som globalt er infisert hvert år og som lider av viral-indusert systemisk sjokk og åndenød.
Således eksisterer det et behov for å identifisere nye medikamenter for behandling av viral-indusert systemisk sjokk og åndenød hos individer.
Oppsummering av oppfinnelsen
Foreliggende oppfinnelse løser problemet referert til ovenfor ved å fremskaffe farmasøytiske sammensetninger for å behandle viral-indusert systemisk sjokk og åndenød hos et individ.
De aktuelle sammensetningene baserer seg delvis på oppdagelsen at visse midler definert heri som lymfotoksin-beta(LT-B)-blokkerende midler kan bli brukt ved behandling av viral-indusert systemisk sjokk og åndenød hos et individ. I en utførelsesform er de LT-B-blokkerende midler et lymfotoksin-beta-reseptor (LT-B-R)-blokkerende middel.
I en foretrukket utførelsesform er LT-B-R et antistoff mot en lymfotoksin-B-reseptor eller en oppløselig lymfotoksin-B-reseptor. I en mest foretrukket utførelsesform er det LT-B-R-blokkerende middel et rekombinant LT-B-R fusjonsprotein som har et LT-B-R ekstracellulært ligandbindende domene fusert til et immunoglobulin konstant tungdomene.
De foregående og andre mål, trekk, aspekter og fordeler ved foreliggende oppfinnelse samt oppfinnelsen i seg selv vil bli mer fullstendig forstått fra den følgende beskrivelse av foretrukne utførelsesformer.
Kort beskrivelse av figurene
Figur 1 viser at infeksjon av NZB-mus med klon 13LCMV resulterer i dødelighet. Dødelighetskurve av NZB-mus infisert med LCMV-13 (n=14) og virale titere i forskjellige vev av LCMV-13 (n=7) infiserte mus seks dager etter infeksj onen. Figur 2 viser den histologiske profil av LCMV-13-infeksjonen i NZB-mus. (A)Normal lunge ved (100X,H+E),
(B)Interstitial pneumonitis med mononukleært celleinfiltrat og alveolar veggfortykning i lungen, dag 5 etter infeksjon
(100X, H+E), (C)Lymfoid utarming, cellulær nekrose og
fjerning av follikulær arkitektur i milten (25X, (H+E),
(D)Høyere forstørrelse som viser cellulær nekrose og karioretisk avfall i milten (158,H+E), (E)LCMV-13 positive
endotelialceller (piler) og makrofager (hvite piler) i lungen (100X,IHC), (F)LCMV-13 positive endotelialceller (piler) og mesotelialceller (pilhoder) og makrofager (hvite piler) i milten (50X,IHC), (G) LCMV-13 positive endotelialceller i hjertet (100X,IHC), (H)LCMV-13 positive Kupffer-celler og sinusoidal-lagceller i leveren (100X,IHC). Figur 3 viser at blokkering av LTPR-signaliserende veier forbedrer i vesentlig grad overlevelse blant klon-13-infiserte NZB-mus. Dødelighetskurver for klon-13-infiserte NZB-mus behandlet som beskrevet er presentert her. NZB-mus ble gitt 2,5 x IO<6> pfu Cl 13 i.v. fulgt av to i.p.-injeksjoner inneholdende 250 ug TN3-19,12 antistoff i endotoksinfri PBS (se referanse S) på dag 1 og dag 4 etter infeksjonen. Kontrollmus ble injisert med samme volum av PBS som manglet antistoff på de samme dager. Mus ble behandlet som beskrevet i referanse R. For den trippelbehandlede gruppe ble TNFR55-Ig og LTPR-Ig proteiner gitt på dag 0 og dag 3 etter infeksjon, i.p. i 200 ug mengder. Kontrollmus ble gitt humant antistoff benyttet ved syntesen av disse proteiner (AY1943-29) på samme dager i identiske mengder. Mus som mottok LTPR-Ig alene ble behandlet identisk bortsett fra at TNFR55-Ig-injeksjoner ble utelatt. Data ble samlet inn fra flere forsøk anti-TNF (TN3-19,12) alene, n=16 for LTPR-Ig alene, n=10 for trippelbehandlingsgruppen, (n=10 for trippelbehandlingsgruppen, n=22 for LTPR-Ig alene, n=10 for LTPR-Ig + TNFR55-Ig gruppen, n=5 for anti-TNF og TNFR55-Ig behandlet gruppe, n=6 for anti-TNF (TN3-19, 12 ) alene og n=25 for kontroll). Figur 4 viser at blokkering av LTpR-veien resulterer i minskning i CD8 T-cellefunksjonen. Splenocytter fra mus i forskjellige behandlingsgrupper ble høstet inn på dag 6 etter infeksjonen og farget med en L<d> tetramer inneholdende et NP118 9mer peptid som tidligere beskrevet. Verdier som er gitt justeres for ikke-spesifikk bakgrunns farging. For å overvåke interferongamma-produksjon som reaksjon på samme peptid ble celler inkubert i 5 timer ved 37°C i nærvær av NP118 ved 0,1 ug sluttkonsentrasjon og IL-2. Verdier gitt her er justert for bakgrunnsnivå ved fravær av peptid. Splenocytter fra tre mus behandlet med kontroll human lg ble slått sammen i likhet med dem fra to LTPR-Ig mus (LT
beta #2/3). Alle andre resultater er fra individuelle mus.
Figur 5 viser at utarming av CD8<+> T-celler, ikke CD4<+> T-celler, reverserer de dødelige effekter av LCMV-13-infeksjonen i NZB-mus. Mus ble behandlet som beskrevet for utarming av cellepopulasjoner in vivo. En dødelighetskurve er presentert for hver av de behandlede grupper(n=4).
Detaljert beskrivelse av oppfinnelsen
Definisj oner
For mer klart og nøyaktig å angi gjenstanden for den krevde oppfinnelse er de følgende definisjoner gitt for spesielle uttrykk benyttet i den følgende skrevne beskrivelse og de medfølgende krav.
Lymfotoksin-beta (LT-beta) er et medlem av TNF-familien av ligander som også innbefatter ligandene mot Fas, CD27, CD30, CD40, OX-40 og 4-1BB reseptorer (Smith et al., Cell, 76, sider 959-62(1994). Signalisering fra forskjellige medlemmer av TNF-familien innbefattende TNF, LT-alfa, LT-beta og Fas kan indusere tumorcelledød ved nekrose eller apoptose (programmert celledød). I ikke-tumorogene celler influerer TNF og mange av TNF-familien ligand-reseptor-interaksjoner immunsystemutvikling og responser overfor forskjellige immunangrep.
Lymfotoksin-beta (også kalt p33) har blitt identifisert på overflaten av T-lymfocytter, T-cellelinjer, B-cellelinjer og lymfokinaktiverte dreper (LAK)celler. LT-beta-reseptoren, som er et medlem av TNF-familien av reseptorer, binder spesifikt til overflate LT-ligander. LT-beta-R binder LT-heteromere komplekser (i hovedsak LT-alfa l/beta 2 og LT-alfa 2/beta 1) men binder ikke TNF eller LT-alfa (Crowe et al., Science, 264, sider 707-10(1994)). Signalisering av LT-beta-R kan spille en rolle i perifer lymfoid organutvikling og i humorale immunresponser. LT-beta-R mRNA finnes i human milt, tymus og andre hovedorga-ner. LT-beta-R ekspresjonsmønstre er like dem rapportert for p55-TNF-R bortsett fra at LT-beta-R mangler på perifere blod T-celler og T-cellelinjer.
Uttrykket "LT-beta-blokkerende middel" refererer til et middel som kan senke ligandbinding til LT-beta, celleoverflate LT-beta-samling eller LT-beta-signalisering, eller som kan innvirke på hvordan LT-beta-signalet blir tolket inne i cellen. Eksempler på LT-beta-blokkerende midler innbefatter anti-LT-beta, oppløselig LT-beta-R-Fc-molekyler og anti-LT-alfa, anti-LT-alfa/beta og anti-LT-beta-R Abs. Fortrinnsvis kryssreagerer antistoffene ikke med den utskilte form av LT-alfa.
Uttrykket "LT-beta-reseptorblokkerende middel" refererer til et middel som kan senke ligandbinding til LT-beta-R, celleoverflate LT-beta-R-aggregering eller LT-beta-R signalisering, eller som kan innvirke på hvordan LT-beta-R-signalet blir tolket inne i cellen. Eksempler på LT-beta-R-blokkerende midler innbefatter oppløselige LT-beta-R-Fc molekyler og anti-LT-beta-R Abs. Fortrinnsvis kryssreagerer antistoffene ikke med den utskilte form av LT-alfa.
Uttrykket "anti-LT-beta-reseptor antistoff" refererer til ethvert antistoff som spesifikt binder til minst en epitop av LT-beta-reseptoren.
Uttrykket "anti-LT antistoff" refererer til ethvert antistoff som spesifikt binder til minst en epitop av LT-alfa, LT-beta eller et LT-alfa/beta kompleks.
Uttrykket "LT-ligand" refererer til LT heteromert kompleks eller derivat derav som spesifikt kan binde til LT-beta-reseptoren .
Uttrykket "LT-beta-R-signalisering" refererer til molekylære reaksjoner assosiert med LT-beta-R-veien og etter-følgende molekylære reaksjoner som vil resultere fra dette.
Uttrykket "LT-beta-R ligandbindende domene" refererer til den del eller deler av LT-beta-R som er involvert i spesifikk gjenkjennelse av og interaksjon med en LT-ligand.
Uttrykkene "LT-alfa/beta heteromert kompleks" og "LT-heteromert kompleks" refererer til en stabil assosiasjon mellom minst en alfa LT-alfa og en eller fler LT-beta subenheter, innbefattende oppløselige, mutante, endrede og kimeriske former av en eller fler av subenhetene. Subenhetene kan assosiere via elektrostatiske, van der Waals eller kova-lente interaksjoner. Fortrinnsvis har LT-alfa/62 heteromert kompleks minst to tilstøtende LT-beta subenheter og mangler tilstøtende LT-alfa subenheter. Når LT-alfa/beta heteromert kompleks virker som et LT-beta-R aktiverende middel i et cellevekstassay, er komplekset fortrinnsvis oppløselig og har støkiometrien LT-alfa l/beta 2.
Oppløselige LT-alfa/62 heteromere komplekser mangler et transmembrant domene og kan bli utskilt av en passende vertscelle som har blitt manipulert til å uttrykke LT-alfa og/eller LT-beta subenheter (Crowe et al.,
J.Immunol.Methods. 168, sider 7 9-89,(1994)).
Uttrykkene "overflate LT-alfa/62 kompleks" og "overflate LT-kompleks" refererer til et kompleks omfattende LT-alfa og membranbundet LT-beta subenheter innbefattende mutante, endrede og kimeriske former av en eller fler av subenhetene som blir oppvist på celleoverflaten. "Overflate LT-ligand" refererer til et overflate LT-kompleks eller derivat derav som spesifikt kan binde til LT-beta reseptoren.
En "effektiv mengde" er en mengde som er tilstrekkelig til å oppnå gunstige eller ønskede kliniske resultater. En effektiv mengde kan bli administrert i en eller fler administrasjoner. En effektiv mengde av et middel som blokkerer bindingen av lymfotoksin-B til sin reseptor er en mengde av midlet som er tilstrekkelig til å svekke, stabilisere eller forsinke utviklingen av en viralrespons, og spesielt et middel som er tilstrekkelig til å svekke, stabilisere eller forsinke utviklingen av viralindusert sjokk og åndenød. Påvisning og måling av disse indi-kasjoner på effektivitet er kjent for fagpersonen.
Et "individ" refererer til virveldyr, spesielt medlemmer av pattedyrarter og innbefatter, men er ikke begrenset til husdyr, sportsdyr og primater, innbefattende mennesker.
"Funksjonell ekvivalent" av et aminosyreresiduum er (i) en aminosyre som har lignende reaktive egenskaper som aminosyreresiduet som ble erstattet med den funksjonelle ekvivalent; (ii) en aminosyre av en antagonist hvor aminosyren har lignende egenskaper som aminosyreresiduet som ble erstattet den funksjonelle ekvivalent; (iii) et ikke-aminosyremolekyl som har lignende egenskaper som aminosyreresiduet som ble erstattet med den funksjonelle ekvivalent.
Et første polynukleotid som koder for et protein er "funksjonelt ekvivalent" sammenlignet med et andre polynukleotid som koder for proteinet dersom det tilfreds-stiller minst en av de følgende betingelser: (a): den "funksjonelle ekvivalent" er et første polynukleotid som hybridiserer til det andre polynukleotid under standard hybridiseringsbetingelser og/eller er degenerert i forhold til første polynukleotidsekvens. Mest foretrukket koder den for et mutant protein som har aktiviteten av et integrin antagonist protein;
(b): den "funksjonelle ekvivalent" er et første polynukleotid som koder ved ekspresjon for en aminosyre-sekvens kodet av det andre polynukleotidet.
"Funksjonell ekvivalent" av et aminosyreresiduum er (i) en aminosyre som har lignende egenskaper som aminosyreresiduet som ble erstattet med den funksjonelle ekvivalent; (ii) en aminosyre av et protein hvor aminosyren har lignende egenskaper som aminosyreresiduet som ble erstattet med den funksjonelle ekvivalent; (iii) et ikke-aminosyremolekyl som har lignende egenskaper som aminosyreresiduet som ble erstattet med den funksjonelle ekvivalent.
Et første polynukleotid som koder for et protein er "funksjonelt ekvivalent" sammenlignet med et andre polynukleotid som koder for proteinet dersom det tilfreds-stiller en av de følgende betingelser: (a) : den "funksjonelle ekvivalent" er et første polynukleotid som hybridiserer til andre polynukleotid under standard hybridiseringsbetingelser og/eller degenerert i forhold til første polynukleotidsekvens. Mest foretrukket koder det for et mutant protein som har aktiviteten til et integrin antagonist protein; (b) : den "funksjonelle ekvivalent" er et første polynukleotid som ved ekspresjon koder for en aminosyrese-kvens kodet av det andre polynukleotid.
De LT-b-blokkerende midler benyttet i oppfinnelsen innbefatter, midler opplistet heri så vel som deres funksjonelle ekvivalenter. Som benyttet heri refererer uttrykket "funksjonell ekvivalent" følgelig til et LT-B-blokkerende middel eller et polynukleotid som koder for det LT-B-blokkerende middel som har samme eller en forbedret gunstig effekt på mottakeren som det LT-B-blokkerende middel for hvilket det ble ansett å være en funksjonell ekvivalent. Slik det vil bli forstått av fagpersonen kan et funksjonelt ekvivalent protein bli dannet ved rekombinante teknikker, for eksempel ved å uttrykke et "funksjonelt ekvivalent DNA". Følgelig kan det i foreliggende oppfinnelse anvendes LT-B-blokkerende midler kodet av naturlig forekommende DNA så vel som ikke-naturlig forekommende DNA som koder for samme protein som kodet ved det naturlig forekommende DNA. Grunnet degenerasjonen av de kodende nukleotidsekvenser kan andre polynukleotider bli brukt for å kode LT-B-blokkerende midler. Disse innbefatter alt eller deler av de overnevnte sekvenser som er endret ved substitusjon av forskjellige kodoner som koder for samme aminosyreresiduum innen sekvensen for således å danne en stum endring. Slike endrede sekvenser er ansett som ekvivalenter av disse sekvenser. For eksempel blir Phe(F) kodet av to kodoner, TTC eller TTT, Tyr(Y) er kodet av TAC eller TAT og His(H) er kodet av CAC eller CAT. På den andre side er Trp(W) kodet av et enkelt kodon, TGG. Følgelig vil det bli forstått at for en gitt DNA-sekvens som koder for et spesielt integrin vil det være mange degenererte DNA-sekvenser som vil kode for dette.
Uttrykket "fusjon" eller "fusjonsprotein" refererer til en ko-lineær, kovalent binding av to eller fler proteiner eller fragmenter derav via deres individuelle peptidstammer, mest foretrukket via genetisk ekspresjon av et polynukleo-tidmolekyl som koder for disse proteiner. Det er foretrukket at proteinene eller fragmentene derav er fra forskjellige kilder slik at denne type fusjonsprotein blir kalt et "chimerisk" molekyl. Således er de foretrukne fusjonsproteiner chimeriske proteiner som innbefatter LT-B-blokkerende midler eller fragment som er kovalent bundet til en andre enhet som ikke er et LT-B-blokkerende middel. Foretrukne fusjonsproteiner kan innbefatte deler av intakte antistoff som beholder antigenbindende spesifitet, for eksempel Fab-fragmenter, Fab'-fragmenter, F(ab')2-fragmenter, F(v)-fragmenter, tungkjedede monomere eller dimere, lettkjedede monomere eller dimere, dimere som består av en tung og en lett kjede og lignende.
De mest foretrukne fusjonsproteiner er chimeriske og omfatter en LT-B-blokkerende middelenhet, fusert eller på annen måte bundet til alt eller deler av hengslet og de konstante områder av en immunoglobulin lett kjede, tung kjede eller begge deler. Således kan det i foreliggende oppfinnelse anvendes et molekyl som innbefatter: (1) en LT-B-blokkerende middelenhet, (2) et andre peptid, for eksempel et som øker oppløseligheten eller in vivo levetiden av den LT-B-blokkerende middelenhet, for eksempel et medlem av immunoglobulin superfamilien eller et fragment eller del derav, for eksempel en del eller fragment av IgG, eksempel-vis det humane IgGl konstante tungkjedeområde, for eksempel CH2, CH3 og hengselsområder. Spesielt er en "LT-B eller LT-B-R/Ig fusjon" et protein omfattende et biologisk aktivt LT-B-blokkerende middel, (for eksempel et oppløselig LT-B-R eller et biologisk aktivt fragment derav bundet til en N-terminal av en immunoglobulinkjede hvor en del av N-terminalen av immunoglobulinet er erstattet med det LT-B-blokkerende midlet. En type av LT-B eller LT-B-R/Ig fusjon er en "LT-B-R/Fc fusjon" som er et protein omfattende en LT-B-R bundet til minst en del av det konstante domene av et immunoglobulin. En foretrukket Fc-fusjon omfatter et LT-B-blokkerende middel bundet til et fragment av antistoff inneholdende det C-terminale domene av de tunge immunoglu-bolinkj eder.
"Standard hybridiseringsbetingelser" - salt og temperatur-betingelser som i hovedsak tilsvarer 0,5 x SSC til omkring 5 x SSC og 65°C for både hybridisering og vask. Uttrykket "standard hybridiseringsbetingelser" som benyttet heri, er følgelig en operasjonsmessig definisjon og omfatter et område av hybridiseringsbetingelser. Høyere stringensbetingelser kan, for eksempel, innbefatte hybridisering med
plakk utvelgingsbuffer (0,2% polyvinylpyrrolidon, 0,2% "Ficoll 400" (GE-Healthcare, CAS nr. 26873-85-8, MW = 400000), 0,2% bovinserumalbumin, 50 mM Tris-HCl (pH 7,5); 1 M NaCl; 0,1% natriumpyrofosfat; 1% SDS); 10% dekstransulfat, og 100 ug/ml denaturert, ultralydbehandlet laksemelke DNA ved 65°C i 12-20 timer, og vask med 75 mM NaCl/7,5 mM natriumcitrat (0,5 x SSC)/1% SDS ved 65°C. Lavere stringensbetingelser kan for eksempel innbefatte hybridisering med plakk utvelgingsbuffer, 10% dekstransulfat og 110 ug/ml denaturert, ultralydbehandlet laksemelke DNA ved 55°C i 12-20 timer, og vask med 300 mM NaCl/30 mM natriumcitrat (2,0 x SSC)/1% SDS ved 55°C. Se også Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, Inc. New York, Del 6.3.1.-6.3.6, (1989).
En "terapeutisk sammensetning" som benyttet heri, er definert som å omfatte de aktuelle proteinene samt andre biologisk kompatible bestandeler. Den terapeutiske sammensetning kan inneholde eksipienter så som vann, mineraler og bærermaterialer så som protein.
II. Beskrivelse av foretrukne utførelsesformer
Foreliggende oppfinnelse avhenger delvis av oppdagelsen at LT-B-blokkerende midler kan indusere an antiviral respons hos et individ. Det ble funnet at det å behandle et individ infisert med et virus kan i stor grad øke overlevelsesgraden til individet. Spesielt ble det vist at behandling av LCMV-13 infiserte NZB-mus med et LT-B -blokkerende middel, så som LTPR-Ig fusjonsprotein øket deres overlevelsesgrad med 73%.
For tiden tilgjengelige behandlinger for Ebola, Dengue, SNV og andre virus nevnt heri er preventivt via lærdom om over-føring av sykdommen. Vaksiner eksisterer ikke for disse svært patogene virus. Ribavirin, som er en guanidinanalog har blitt benyttet som et generisk antiviralt medikament på flere av disse infeksjoner med reproduserbar effekt kun dokumentert ved behandling av Lassa-feber når benyttet tid-lig i sykdommen (M.D. Lacy og R.A. Smego, Adv. Ped. Inf. Dis., 12, 21 (1997). Søkers data indikerer at noe av patologien assosiert med disse virus kan være immun-mediert. Blokkering av LT-systemet kunne i stor grad øke muligheten for overlevelse ved transient å redusere virus-spesifikt CD8-T-celler i antall samt deres funksjonalitet. Kliniske forsøk som benyttet flere metoder for å blokkere TNFa-veien er allerede underveis for behandlingen av flere sykdommer (H.I.Pass, D.Mew, H.A. Pass, et al., Chest Surg. Clin. N. Amer, 5, 73 (1995). Det er antatt at LTØR-Ig-behandling bør bli tatt med i betraktning for videre testing i dyremodeller for eventuelt bruk i humanforsøk som involverer pasienter med akutte, rask progressive virale infeksjoner som involverer sjokk og/eller pustevanskeligheter.
LT- B- blokkerende midler
I en utførelsesform av foreliggende oppfinnelse omfatter det LT-beta-blokkerende middel et antistoff (Ab) rettet mot LT-beta som inhiberer LT-beta-signalisering. Foretrukket er det aktuelle anti-LT-beta Ab et monoklonalt antistoff (mAb). Inhibitoriske anti-LT-beta Abs og andre LT-beta-blokkerende midler kan bli identifisert ved å bruke utvelgende metoder som påviser egenskapen hos ett eller flere midler til å binde til en LT-ligand, eller til å inhibere effektene av LT-beta-signalisering på celler.
En annen utførelsesform av foreliggende oppfinnelse omfatter at det LT-beta-blokkerende middel er en LT-beta-reseptor (LT-B-R) blokkerende middel. I en foretrukket utførelsesform, er det LT-B-R-blokkerende middel et antistoff (Ab) rettet mot LT-beta-R som inhiberer LT-beta-R-signalisering. Foretrukket er det aktuelle anti-LT-beta-R Ab et monoklonalt antistoff (mAb). Et slikt inhibitorisk anti-LT-beta-R mAb er BDA8 mAb. Inhibitoriske anti-LT-beta-R Abs og andre LT-beta-R-blokkerende midler kan bli identifisert ved å bruke utvelgende metoder som påviser egenskapen hos ett eller flere midler til å binde til LT-beta-R eller LT-ligand, eller å inhibere effektene av LT-beta-R-signalisering på celler.
En utvelgende metode tar i bruk de cytotoksiske effekter av LT-beta-R-signalisering på tumorceller som bærer LT-beta-R. Tumorceller eksponeres til ett eller flere LT-beta-R-aktiverende midler for å indusere LT-beta-R-signalisering. LT-beta-R-aktiverende midler innbefatter LT-alfa/62 heteromere komplekser (fortrinnsvis oppløselig LT-alfa l/beta 2) i nærvær av IFN-gamma, eller ett aktiverende anti-LT-beta-R Ab.
Antistoff og andre midler som kan blokkere LT-beta-R-signalisering velges ut basert på deres egenskap å inhibere den cytotoksiske effekt av LT-beta-R signalisering på tumorceller i det følgende assay: 1) tumorceller så som HT29-celler dyrkes i tre til fire dager i en serie av vevskulturbrønner inneholdende medium og minst ett LT-beta-R-aktiverende middel i nærvær eller fravær av serie fortynninger av midlet som blir undersøkt; 2) et vitalt fargemiddel som måler mitokondrien funksjon så som MTT tilsettes til tumorcelleblandingen og omsettes i flere timer; 3) den optiske tetthet av blandingen i hver brønn mengde-bestemmes med lys ved 550 nm bølgelengde (OD 550). OD 550-verdien er proposjonal med antallet tumorceller som er til-bake i nærvær av det LT-beta-R-aktiverende middel og det undersøkte LT-beta-R-blokkerende middel i hver brønn. Et middel eller kombinasjon av midler som kan redusere LT-beta-R-aktivert tumorcelle cytotoksisitet med minst 20% i dette assay er et LT-beta-R-blokkerende middel innenfor betydningen i foreliggende oppfinnelse.
Ethvert middel eller kombinasjon av midler som aktiverer LT-beta-R-signalisering kan bli brukt i det ovennevnte assay for å identifisere LT-beta-R-blokkerende midler. LT-beta-R aktiverende midler som induserer LT-beta-R-signalisering (så som aktiverende anti-LT-beta-R mAbs) kan bli valgt basert på deres evne alene eller i kombinasjon med andre midler for tumorcelle-cytotoksisitet ved å forsterke tumorcelleassayet beskrevet over.
Enannen metode for å velge et LT-beta-R-blokkerende middel er å overvåke evnen til det aktuelle middel for å hemme direkte LT-lignand-reseptorbinding. Et middel eller kombinasjon av midler som kan blokkere ligand-reseptorbinding med minst 20% er et LT-beta-R-blokkerende middel innenfor betydningen av foreliggende oppfinnelse.
Ethvert antall assays som måler styrken av ligand-reseptorbinding kan bli brukt for å utføre konkurranseassays med forsøksvise LT-beta-R-blokkerende midler. Styrken av bindingen mellom en reseptor og ligand kan bli målt ved å bruke et enzym-tilknyttet immunoadsorpsjonsassay (ELISA) eller et radio-immunoassay (RIA). Spesifikk binding kan også bli målt med fluorescent merkende antistoff-antigen-komplekser og utføre fluorescens-aktivert cellesortering (FACS) analyse, eller ved å utføre andre slike immunopå-visningsmetoder, hvorav alle er teknikker som er velkjent innen faget.
Ligand-reseptorbinding-interaksjonen kan også bli målt med et BIAcore TM-instrument (Pharmacia Biosensor) som utnytter plasmonresonans-påvisning (Zhou et al., Biochemistry, 32, s. 8193-98 (1993); Faegerstram og 0'Shannessy, "Surface plasmon resonance detection in affinity technologies", in Handbook of Affinity Chromatography, s. 229-52, Marcel Dekker, Inc., New York (1993)).
BIAcore TM-teknologien tillater å binde reseptoren til en gulloverflate og å strømme ligand over denne. Plasmonresonans-påvisning gir direkte mengdebestemmelse av mengden masse bundet til overflaten i sann tid. Denne teknikk gir både på og av hastighetskonstanter og således kan en ligand-reseptor dissosiasjonskonstant og affinitetskonstant bli direkte bestemt ved nærvær og fravær av det forsøksvise LT-beta-R-blokkerende middel.
Med enhver av disse eller andre teknikker for å måle reseptor-ligand-interaksjoner er det mulig å vurdere egenskapen hos et LT-beta-R-blokkerende middel, alene eller i kombinasjon med andre midler, til å inhibere binding av overflate eller oppløselige LT-ligander til overflate eller oppløselige LT-beta-R-molekyler. Slike assays kan også bli brukt til å undersøke LT-beta-R-blokkerende midler eller derivater av slike midler (for eksempel fusjoner, chimeriske materialer, mutanter, og kjemisk endrede former)- alene eller i kombinasjon for å optimalisere egenskapen av det endrede middel til å blokkere LT-beta-R-aktivering.
De LT-beta-R-blokkerende midler omfatter i en utførelses-form av foreliggende oppfinnelse oppløselige LT-beta-reseptor-molekyler. Sekvensen av den ekstracellulære del av det humane LT-beta-R, som koder for det ligandbindende domene er vist i Figur 1 av US patentnummer 5,925,351. Ved å bruke sekvensinformasjonen i Figur 1 av US patentnummer 5,925,351 samt rekombinante DAN-teknikker som er velkjent innen faget, kan funksjonelle fragmenter som koder for det LT-beta-R-ligandbindende domene bli klonet i en vektor og uttrykt i en passende vertsorganisme for å gi et oppløselig LT-beta-R-molekyl. Oppløselige LT-beta-R-molekyler som kan konkurrere med native LT-beta-reseptorer for LT-ligandbinding i henhold til assayene beskrevet heri, blir valgt som LT-beta-R-blokkerende midler.
En oppløselig LT-beta-reseptor omfattende aminosyresekven-ser valgt fra dem vist i Figur 1 av US patentnummer 5,925,-351 kan bli festet til ett eller flere heterologe protein-domener ("fusjonsdomene") for å øke in vivo- stabiliteten av reseptor-fusjonsproteinet, eller å modulere dets biologiske aktivitet eller plassering. Foretrukket blir stabile plasmaproteiner - som typisk har en halveringstid som er større enn 20 timer i sirkulasjonen - benyttet for å konstruere reseptor-fusjonsproteinene. Slike plasmaproteiner innbefatter: immunoglobuliner, serumalbumin, lipoproteiner, apolipoproteiner og transferrin. Sekvenser som kan målrette det oppløselige LT-beta-R-molekyl til en spesiell celle eller vevstype kan også bli festet til det LT-beta-R-ligandbindende domene for å danne et spesifikt lokalisert oppløselig LT-beta-R-fusjonsprotein. Alt eller en funksjonell del av det LT-beta-R-ekstracellulære område (Fig. 1 av US patent nr. 5,925,351) omfattende det LT-beta-R-ligandbindende domene kan bli fusert til et immunoglobin konstantområde lik Fc-domene av en human IgGl-tung kjede (Browning et al., J. Immunol., 154, s. 33-46 (1995)). Oppløselige reseptor-IgG-fusjonsproteiner er vanlige immunologiske reagenser og fremgangsmåter for deres konstruksjon er kjent innen faget (se for eksempel US patent nr. 5,225,538). Et funksjonelt LT-beta-R-ligandbindende domene kan bli kondensert til et immunoglobulin (lg) Fc-domene avledet fra en immunoglobulin klasse eller subklasse andre enn IgGl. Fc-domenene av antistoff som tilhører forskjellige Ig-klasser eller subklasser, kan aktivere forskjellige sekundære effektorfunksjoner. Aktivering inntreffer når Fc-domenet er bundet av en kognat Fc-reseptor. Sekundære effektorfunksjoner innbefatter egenskapen å aktivere komplement-systemet, til å krysse placen-ta, og til å binde forskjellige mikrobielle proteiner. Egenskapen av de forskjellige klasser og subklasser av immunoglobuliner er beskrevet i Roitt et al., Immunology, s. 4.8 (Mosby-Year Book Europe Ltd., tredje utgave, 1993). Komplementenzym-kaskaden kan bli aktivert av Fc-domenene av et antigen-bundet IgGl-, IgG3- og IgM-antistoff. Fc-domenet av IgG2 synes å være mindre effektivt, og Fc-domenene av IgG4, IgA, IgD og IgE er ineffektive til å aktivere komplement. Således er det mulig å velge ut et Fc-domene basert på hvorvidt dets assosierte sekundære effektorfunksjoner er ønskelige for den spesielle immunrespons eller sykdom som blir behandlet med LT-beta-R-Fc-fusjonsproteinet. Dersom det vil være fordelaktig å skade eller drepe den LT-ligandbærende målcelle, vil det være mulig å velge ut et spesielt aktivt Fc-domene (IgGl) for å danne LT-beta-R-Fc-fusjonsproteinet. Alternativt, dersom det vil være ønskelig å målrette LT-beta-R-Fc-fusjonsmateriale til en celle uten å aktivere komplementsystemet, kunne et inaktivt IgG4-Fc-domene blir valgt.
Mutasjoner i Fc-domener som reduserer eller eliminerer binding til Fc-reseptorer og komplementaktivering, har blitt beskrevet (S. Morrison, Annu. Rev. Immunol., 10, s. 239-65
(1992)). Disse eller andre mutasjoner kan bli brukt, alene eller i kombinasjon, for å optimalisere aktiviteten av Fc-domenet benyttet til å konstruere LT-beta-R-Fc-fusjonsproteinet .
Produksjonen av et oppløselig humant LT-beta-R-fusjonsprotein omfattende ligandbindende sekvenser kondensert til et humant immunoglobulin Fc-domene (hLT-beta-R-Fc) er beskrevet i eksempel 1 av US patent nr. 5,925,351. En CHO-linje dannet i henhold til eksempel 1 som skiller ut hLT-beta-R-Fc, blir kalt "hLT beta; R-hGl CHO#14". En prøve av denne linje ble deponert 21. juli 1995 hos the American Type Culture Collection (ATCC) (Rockville, Md.) i henhold til reglene i Budapest-konvensjonen og ble gitt ATCC tilgangsnummer CRL 119 65.
Produksjonen av et oppløselig murint LT-beta-R-fusjonsmole-kyl (mLT-beta-R-Fc) er beskrevet i eksempel 2 av US patent nr. 5,925,351 innbefattet per referanse heri. En CHO-linje dannet i henhold til eksempel 2 av US patent nr. 5,925,351 som skiller ut mLT-beta-R-Fc blir kalt "mLT beta; R-hGl CHO#l.3.BB". En prøve på denne linje ble deponert 21. juli 1995 hos the American Type Culture Collection (ATCC) (Rockville, Md.) i henhold til reglene i Budapest-konvensjonen og ble gitt ATCC-tilgangsnummer CRL 11964.
Forskjellige aminosyreresiduer som danner samlepunktet av reseptor-Ig-fusjonsproteinet kan endre strukturen, stabiliteten og den sluttelige biologiske aktivitet av det oppløselige LT-beta-reseptor-fusjonsprotein. En eller flere aminosyrer kan bli lagt til C-terminalen av det utvalgte LT-beta-R-fragment for å modifisere knutepunktet med det utvalgte fusjonsdomene.
N-terminalen av LT-beta-R-fusjonsproteinet kan også bli variert ved å endre posisjonen hvor ved det utvalgte LT-beta-R DNA-fragment spaltes ved sin 5'ende for innsetning i den rekombinante ekspresjonsvektor. Stabiliteten og aktiviteten av hvert LT-beta-R-fusjonsprotein kan bli undersøkt og optimalisert ved å bruke rutinemessige forsøk og assayene for å velge ut LT-beta-R-blokkerende midler beskrevet heri.
Ved å bruke de LT-beta-R-ligandbindinde domenesekvenser innen det ekstracellulære domene vist i Fig. 1, kan amino-syresekvens varianter også bli konstruert for å modifisere affiniteten av den oppløselige LT-beta-reseptor eller fusjonsprotein for LT-ligand. De oppløselige LT-beta-R-molekyler ifølge foreliggende oppfinnelse kan konkurrere for overflate LT-ligandbinding med endogene celleoverflate LT-beta-reseptorer. Det er tenkt at ethvert oppløselig molekyl omfattende et LT-beta-R-ligandbindende domene som kan konkurrere med celleoverflate LT-beta-reseptorer for LT-ligandbinding, er et LT-beta-R-blokkerende middel som faller innenfor omfanget av foreliggende oppfinnelse.
I en annen utførelsesform av foreliggende oppfinnelse vir-ket antistoff direkte mot den humane LT-beta-reseptor (an-ti-LT-beta-R Abs) som LT-beta-R-blokkerende midler for bruk ved behandling av tilstander som plasserer individer, innbefattende mennesker i, eller med risiko for, viral-indusert systemisk sjokk og respiratorisk nød. Anti-LT-beta-R Abs anvendt ifølge foreliggende oppfinnelse kan være polyklonale eller monoklonale (mAbs) og kan bli modifisert til å optimalisere sin egenskap til å blokkere LT-beta-R-signalisering, deres in vivo tilgjengelighet, stabilitet eller andre ønskede egenskaper.
Polyklonale antistoffsera rettet mot den humane LT-beta-reseptor blir fremstilt ved å bruke konvensjonelle teknikker ved å injisere dyr så som geiter, kaniner, rotter, hamsterer eller mus subkutant med et humant LT-beta-reseptor-Fc fusjonsprotein (Eksempel 1 av US patent nr. 5,925,351) i fullstendig Freunds adjuvant, fulgt av for-sterkende intraperitoneal eller subkutan injeksjon i ufull-stendig Freunds. Polyklonale antisera inneholdende de ønskede antistoff rettet mot LT-beta-reseptoren blir under-søkt med konvensjonelle immunologiske fremgangsmåter.
Monoklonale museantistoff (mAbs) rettet mot et humant Lt-beta-reseptor-Fc-fusjonsprotein fremstilles som beskrevet i US patent nr. 5,925,351, eksempel 5. En hybridom-cellelinje (BD.A8.AB9) som danner muse anti-humant LT-beta-R mAb BDA8, ble deponert 12. januar 1995 hos the American Type Culture Collection (ATCC) (10801 University Boulevard, Manassas, Va. 20110-2209) i henhold til bestemmelsene i Budapest-konvensjonen, og ble gitt ATCC-tilgangsnummer HB11798.
Forskjellige former av anti-LT-beta-R-antistoff kan også bli dannet ved å bruke standard rekombinante DNA-teknikker (Winter and Milstein, Nature, 349, s. 293-99 (1991)). For eksempel kan "chimeriske"- antistoff bli konstruert hvor det antigenbindende domene fra et animalsk antistoff blir bundet til et humant konstantdomene (for eksempel Cabilly et al., US patent nr. 4,816,567; Morrison et al., Proe. Nati. Acad. Sei. U.S.A., 81, s. 6851-55 (1984)). Chimeriske antistoff reduserer de observerte immunogene responser fremskaffet av animalske antistoff når benyttet i humane kliniske behandlinger. I tillegg kan rekombinante "humaniserte antistoff" som gjenkjenner LT-beta-R, bli syntetisert. Humaniserte antistoff er chimeriske forbindelser omfattende for det meste humane IgG-sekvenser innen hvilke områdene som er ansvarlige for spesifikk antigenbinding har blitt satt inn (for eksempel WO 94/04679). Dyr immuniseres med det ønskede antigen, de tilsvarende antistoff isoleres, og delen av sekvensene i det variable område som er ansvarlige for spesifikk antigenbinding fjernes. De animalsk avledede antigenbindende områder blir så klonet inn i de passende posisjonen av humane antistoffgener hvor de antigenbindende områder har blitt fjernet. Humaniserte antistoff minimali-serer bruken av heterologe (inter-artslige) sekvenser i humane antistoff, og er mindre sannsynlige til å fremskaffe immunresponser i det behandlede individ.
Konstruksjon av forskjellige klasser rekombinante anti-LT-beta-R-antistoff kan også bli utført ved å danne chimeriske eller humaniserte antistoff omfattende de anti-LT-beta-R variable domener og humane konstantdomener (CH1, CH2, CH3) isolert fra forskjellige klasser immunoglobuliner. For eksempel kan anti-LT-beta-R IgM-antistoff med økede antigenbindende områdevalenser blir rekombinant fremstilt ved å klone det antigenbindende sete i vektorer som bærer de humane mu kjedekonstante områder (Arulanandam et al., J. Exp. Med., 177. s. 1439-50 (1993); Lane et al., Eur. J. Immunol., 22, s. 2573-78 (1993); Tranunecker et al., Nature, 339, s. 68-70 (1989)). I tillegg kan standard rekombinante DNA-teknikker bli brukt for å endre bindingsaf-finitetene av rekombinante antistoff med deres antigener ved å endre aminosyreresiduer i nærheten av de antigen-bindende seter. Den antigen bindende affinitet av et huma-nisert antistoff kan bli øket med mutagenese basert på molekylær modulering (Queen et al., Proe. Nati. Acad. Sei. U.S.A., 86, s. 10029-33 (1989); WO 94/04679).
Det kan være ønskelig å øke eller å minske affiniteten av anti-LT-beta-R Abs for LT-beta-R avhengig av den målrettede vevstype eller den spesielle behandlingsmetode som er påtenkt. For eksempel kan det være fordelaktig å behandle en pasient med konstante nivåer av anti-LT-beta-R Abs med redusert egenskap å signalisere gjennom LT-beta-veien for semi-profylaktiske behandlinger. Likeledes kan inhibitoriske anti-LT-beta-R Abs med øket affinitet for LT-beta-R være fordelaktig for kort-tids behandlinger.
Ved å undersøke andre antistoff rettet mot den humane LT-beta reseptor er det ventet at ytterligere anti-LT-beta-R-antistoff som virker som LT-beta-R-blokkerende midler i mennesker kan bli identifisert for å behandle tilstander som plasserer individer, innbefattende mennesker, i, eller ved en risiko for, viral-indusert systemisk sjokk og respiratorisk nød ved å bruke rutinemessig forsøk og assayene beskrevet heri.
En annen foretrukket utførelsesform av foreliggende oppfinnelse innbefatter anvendelse sammensetninger som omfatter antistoff rettet mot LT-ligand som virker som LT-beta-R-blokkerende midler. Som beskrevet ovenfor for anti-LT-beta-R Abs kan anti-LT-ligand antistoff som virker som LT-beta-R-blokkerende midler være polyklonale eller monoklonale, og kan være modifisert i henhold til rutinemessige fremgangsmåter for å modulere deres antigen-bindende egenskaper og deres immunogenisitet. De aktuelle anti-LT-antistoffene kan bli fremskaffet mot hver av de to LT-subenheter individuelt, innbefattende oppløselige, mutante, endrede og chimeriske former av LT-subenheten. Dersom LT-subenheter blir benyttet som antigen, er de fortrinnsvis LT-beta-subenheter.
Alternativt kan antistoff rettet mot et homomert (LT-beta) kompleks omfattende en eller fler LT-subenheter bli fremskaffet og utvalgt for aktivitet som LT-beta-R-blokkerende midler.
Monoklonale anti-LT-beta antistoff har også blitt beskrevet (Browning et al., J.Immunol.,54,sider 33-46 (1995)). Muse anti-human LT-beta mAbs ble fremstilt som beskrevet i eksempel 6 i US patent nr. 5.925.351. Hybridomcellelinje (B9.C9.1) som danner muse anti-human LT-beta-R mAb B9 ble deponert 21. juli 1995 hos the American Type Culture Collection(ATCC) (10801 University Boulevard, Manassas, Va. 20110-2209) i henhold til bestemmelsene i Buda-pestkonvensjonen og ble gitt ATCC tilgangsnr. 11962.
Et fluorescensaktivert cellesorterende(FACS) assay ble ut-viklet for å velge ut for antistoff rettet mot LT-subenheter og LT-komplekser som kan virke som LT-beta-R-blokkerende midler som beskrevet i eksempel 6 og 7 i US patent nr. 5.925.351. I dette assay blir oppløselig humant LT-beta-R-Fc fusjonsprotein tilsatt til PMA-aktiverte 11-23 celler som uttrykker overflate LT-komplekser (Browning et al., J.Immunol.,154,sider 33-46 (1995)) - i nærvær av økende mengder av forsøksantistoffet. Et antistoff som kan inhibere LT-beta reseptor-ligand interaksjon med minst 20% velges ut som et LT-beta-R-blokkerende middel.
Administrasjon
Sammensetningene beskrevet heri vil bli administrert ved en effektiv dose i fremgangsmåter for å behandle viral-indusert systemisk sjokk og respiratorisk åndenød hos et individ. Bestemmelse av en foretrukket farmasøytisk formule-ring og et terapeutisk effektivt doseregime for en gitt anvendelse ligger godt innenfor kompetansen til fagpersonen ved for eksempel å ta i betraktning tilstanden og vekten hos pasienten, utstrekningen av den ønskede behandling og toleransen hos pasienten for behandlingen. Doser på omkring 1 mg pr. kg av et oppløselig LT-beta-R er ventet å være egnede startpunkter for optimalisering av behandlings-doser.
Bestemmelse av en terapeutisk effektiv dose kan også bli funnet ved å utføre in vitro-forsøk som måler konsentrasjonen av det LT-beta-R-blokkerende middel som er nødvendig for å belegge målceller (LT-beta-R eller LT-ligand-positive celler avhengig av det blokkerende middel) i 1 til 14 dager. De reseptor-ligandbindende assays beskrevet heri kan bli brukt for å overvåke celletilføringsreaksjonen. LT-beta-R eller LT-ligand-positive celler kan bli adskilt fra de aktiverte lymfocyttpopulasjoner ved å bruke FACS. Basert på resultatene av disse in vitro-bindende assays kan et område av egnede LT-beta-R-blokkerende middelkonsentra-sjoner bli valgt ut til undersøkelse i dyr i henhold til assayene beskrevet heri.
Administrasjonen av de aktuelle oppløselige LT-beta-R-molekyler, anti-LT-ligand og anti-LT-beta-R Abs, alene eller i kombinasjon, innbefattende isolerte og rensede former av antistoffene eller kompleksene, deres salter eller farmasøytiske akseptable derivater derav kan bli utført ved å bruke enhver av de konvensjonelt aksepterte administrasjonsmåter for midler som oppviser immuno-suppresiv aktivitet.
De farmasøytiske sammensetninger benyttet i disse behandlinger kan også foreligge i en mengde former. Disse innbefatter for eksempel faste, semi-faste og flytende dose-ringsformer så som tabletter, piller, pulvere, flytende oppløsninger eller suspensjoner, suppositorer og injiser-bare og infuserbare oppløsninger. Den foretrukne form avhenger av den påtenkte administrasjonsmåte og den terapeutiske anvendelse.
Administrasjonsmåter kan innbefatte oral, parenteral, subkutan, intravenøs, intralesjonal eller topisk administrasjon. De aktuelle oppløselige LT-beta-R-molekyler, anti-LT-ligand og anti-LT-beta-R Abs kan for eksempel bli plassert i sterile isotone formuleringer med eller uten kofaktorer som stimulerer opptak eller stabilitet. Formuleringen er fortrinnsvis flytende eller kan være frysetørket pulver. For eksempel kan de aktuelle oppløse-lige LT-beta-R-molekyler, anti-LT-ligand og anti-LT-beta-R-Abs bli fortynnet med en formuleringsbuffer omfattende 5,0 mg/ml sitronsyremonohydrat, 2,7 mg/ml trinatriumsitrat, 41 mg/ml mannitol, 1 mg/ml glysin og 1 mg/ml polysorbat 20. Denne oppløsning kan bli frysetørket, lagret under nedkjøling og rekonstituert før administrasjon med sterilt vann-for-injeksjon (USP).
Sammensetningene vil også fortrinnsvis innbefatte konvensjonelle farmasøytiske akseptable bæremidler som er velkjent innen faget (se for eksempel Remingtons Pharmaceuti-cal Sciences, 16. utgave, 1980, Mac Publishing Company). Slike farmasøytiske akseptable bæremidler kan innbefatte andre medisinske midler, bærematerialer, genetiske bæremidler, adj uvanter, eksipienter, osv. så som human serum albumin eller plasmapreparater. Sammensetningene er fortrinnsvis i form av en enhetsdose og vil vanligvis bli administrert en eller flere ganger daglig.
De aktuelle farmasøytiske sammensetningene kan også bli administrert ved å bruke mikrosfærer, liposomer, andre mikropartikulære avleveringssystemer eller formuleringer for vedvarende frigjøring plassert i, nær eller på annen måte i kommunikasjon med angrepet vev eller i blodbanen. Passende eksempler på vedvarende frigjøringsbærere innbefatter semipermeable polymermatriser i form av formede artikler så som suppositorer eller mikrokapsler. Implanterbare eller mikrokapsulære vedvarende frigjørings-matriser innbefatter polyaktider (US patent nr. 3.773.319; EP 58.481), kopolymere av L-glutaminsyre og etyl-L-glutamat (Sidman et al., Biopolymers, 22, s. 547-5 6(1985)); poly(2-hydroksyetyl-metakrylat) eller etylenvinylacetat (Langer et al., J.Biomed.Mater.Res.15, s.167-277(1981); Langer, Chem. Tech. 12, s.98-105 (1982)) .
Liposomer inneholdende de aktuelle oppløselige LT-beta-R-molekyler, anti-LT-ligand og anti-LT-beta-R Abs kan, alene eller i kombinasjon, bli fremstilt ved velkjente metoder (se f.eks. DE 3.218.121; Epstein et al.,Proe.Nati.Acad.Sei. USA, 82, s. 3688-92(1985); Hwang et al., Proe. Nati. Acad. Sei. USA, 77, s. 4030-34(1980); US pat. nr. 4.485.045 og 4.544.545). Vanligvis er liposomene av liten (omkring 200-800 Ångstrom) unilamellær type hvor lipidinnholdet er større enn omkring 30 mol% kolesterol. Andelen av kolesterol blir valgt for å kontrollere den optimale hastighet av oppløselig LT-beta-R-molekyl, anti-LT-ligand og anti-LT-beta-R Ab-frigjøring.
De aktuelle oppløselige LT-beta-R-molekyler, anti-LT-ligand og anti-LT-beta-R Abs kan også bli festet til liposomer inneholdende andre LT-beta-R-blokkerende midler, immunosuppresive midler eller cytokiner for å modulere den LT-beta-R-blokkerende aktivitet. Festing av LT-beta-R-molekyler, anti-LT-ligand og anti-LT-beta-R Abs til liposomer kan bli utført med ethvert kjent kryssbindende middel så som heterobifunksjonelle kryssbindende midler som har blitt mye brukt for å koble toksiner eller kje-moterapeutiske midler til antistoff for målrettet avleve-ring. Konjugering til liposomer kan også bli utført ved å bruke det karbohydratrettede kryssbindende reagens 4-(4-ma-leimidofenyl)smørsyrehydrazid(MPBH)(Duzgunes et al., J.Cell.Biochem.Abst.Suppl. 16E 77(1992)).
De LT-beta-R-blokkerende midler i de aktuelle sammensetningene kan bli modifisert for å oppnå et ønsket nivå av LT-beta-R-signalisering avhengig av tilstanden, lidelsen eller sykdommen som blir behandlet. Det er påtenkt at det absolutte nivå av LT-beta-R-signalisering kan bli fin-justert ved å manipulere konsentrasjonen og affinitetene av de LT-beta-R-blokkerende midler for sine respektive molekylære mål. For eksempel blir sammensetninger omfattende oppløselige LT-beta-R-molekyler administrert til et individ. Den oppløselige LT-beta-reseptor kan effektivt konkurrere med celleoverflate LT-beta-reseptorer for binding av overflate LT-ligander. Egenskapen til å konkurrere med overflate LT-ligander avhenger av de relative konsentrasjo-ner av de oppløselige og celleoverflate LT-beta-R-molekyler, samt av deres affiniteter for ligandbinding.
Oppløselige LT-beta-R-molekyler som inneholder mutasjoner som øker eller minker bindingsaffiniteten av denne mutante oppløselige LT-beta-R med overflate LT-ligand kan bli dannet ved å bruke standard rekombinante DNA-teknikker som er velkjent for fagpersonen. Store antall molekyler med sete-rettede eller tilfeldige mutasjoner kan bli undersøkt for sin egenskap å virke som LT-beta-R-blokkerende midler ved å bruke rutinemessige forsøk og teknikkene beskrevet heri.
På lignende måte virker, antistoff rettet mot enten LT-beta-reseptoren eller en eller fler av LT-ligand subenhetene som LT-beta-R-blokkerende midler. Egenskapen hos disse antistoff til å blokkere LT-beta-reseptorsignali-sering kan bli modifisert ved mutasjon, kjemisk modifi-sering eller med andre metoder som kan variere den effek-tive konsentrasjon eller aktivitet av antistoffet tilført individet.
Anvendelser
Generelt angitt kan de aktuelle medikamenter bli benyttet for å indusere en antiviral respons hos et individ hvor medikamentet omfatter en effektiv mengde av et LT-B-blokkerende middel og et farmasøytisk akseptabelt bæremiddel. Den virale respons som skal behandles kan være forårsaket av et antall kjente virus innbefattende, Sin Nombre(SNV), Ebola, Marburg, Lassa and Dengue.
Eksempel
Tumor nekrosefaktor (TNFa) spiller en nøkkelrolle i å fremme akutte sjokkresponser mot virale infeksjoner og andre immunogener (K.C.F.Sheehan, N.H.Ruddle og R.D. Schreiber., J.Immunol., 142 3884(1989); G.W.H. Wong og D.V. Goeddel Nature 323,819(1986); B. Beutler, I.W. Milsark,
A. Cerami, Science 229,8 69(1985); F. Mackay, P.R. Bourdon,
D.A. Griffiths, et al., J. Immunol. 159,3299(1997); P.D. Crowe, T.L. VanArsdale, B.N. Walter, et al., Science 264,707(1994)). I løpet av episoder av Dengue-feber som involverer sjokk blir nivåer av TNFa i serum fra pasienter øket og det er også nivåer av oppløselig TNFR-75(D. Hober et al., J.Trop.Med.Hyg., 48,324(1993); D.B. Bethell, K. Flobbe, C.X.T. Phuong et al., J. Infect. Dis. 177, 778
(1998)). Søker målte TNFa-nivåer i serumet hos mus infisert med en variant av lymfocytisk koriomeningittvirus, LCMV, klon 13(LCMV-13)(HH,II). TNFa-nivåer i serumet fra mus infisert med LCMV-13 ble funnet å være like over påvis-ningsnivået for assayet inntil dag 4 etter infeksjon (Serum TNFa-nivå ble målt med ELISA-assay (Genzyme Corporation, katalog nr. 80-2802-00)). På dag 5 og 6, når sykdommen hadde sin topp øket TNFa-nivå i serumet 3-6 ganger over normalt (data ikke vist). Søker valgte følgelig å blokkere TNFa-funksjonen ved å bruke et monoklonalt antistoff, TN3-19,12 som er kjent for å binde til både utskilt TNFa for således å forårsake fjerning fra musen som bekreftet med ELISA (K.C.F. Sheehan, N.H.Ruddle og R.D. Schreiber., J.Immunol., 142 3884(1989); G.W.H. Wong og D.V. Goeddel Nature 323,819(1986); B. Beutler, I.W. Milsark, A. Cerami, Science 229,8 69(1985); F. Mackay, P.R. Bourdon, D.A. Griffiths, et al., J. Immunol. 159,3299(1997); P.D. Crowe, T.L. VanArsdale, B.N. Walter, et al., Science 264, 707(1994)). D. Hober et al., J.Trop.Med.Hyg., 48,324(1993); D.B. Bethell, K. Flobbe, C.X.T. Phuong et al., J. Infect. Dis. 177,778(1998)). Serum TNFa-nivå ble målt ved ELISA-assay (Genzyme Corporation, katalognr. 80-2802-00). NZB-mus ble gitt 2,5xl0<6> pfu Cl 13 i.v. fulgt av to i.p.injeksjoner inneholdende 250ng av TN3-19,12 antistoff i endotoksinfri PBS (se referanse S) på dag 1 og 4 etter infeksjon. Kontrollmus ble injisert med samme volum PBS uten antistoff på de samme dager. Denne behandling (anti-TNF) hadde liten effekt på overlevelsesgraden av disse mus (Fig.3). Lymfotoksin-alfa (LTa), også kjent som TNFP er selv om den deler identiske reseptorer og mange av dets biologiske effekter med TNFa, ikke gjenkjent av dette antistoff (F.Mackay, P.R. Bourdon, D.A. Griffiths et al., J.Immunol. 159,3299(1997). Det er mulig at målretting av både TNFa og LTa er nødvendig for å øke overlevelsesgrader. For å undersøke denne hypotese benyttet søker det ovennevnte TN3-19,12 mAb og et reseptorfusjonsprotein som fuserte det ekstracellulære domene av TNFp55 reseptoren til CH2 og CH3 domenene av human IgGl (TNFR55-Ig)(W.R. Force, B.N. Walter, C. Hession et al., J.Immunol, 155,5280(1995); G.T. Miller, P.S. Hochman, W. Meier et al., JEM, 178,211
(1993); J.L. Browning, I. Dougas, A. Ngam-ek, et al., J.Immunol., 154:33(1995). Mus ble behandlet som beskrevet i referanse R. For den trippelbehandlede gruppe ble TNFR55-Ig og LTPR-Ig proteiner gitt på dag 0 og dag 3 etter infeksjonen, i.p. i 200^ mengder. Kontrollmus ble gitt humant antistoff benyttet ved syntesen av disse fusjonsproteiner (AY1943-29) på samme dager i identiske mengder. Mus som mottok LTPR-Ig alene ble behandlet identisk bortsett fra at TNFR55-Ig-injeksjonene ble utelatt). Denne behandling endret heller ikke i vesentlig grad overlevelsesgrader i LCMV-13-infiserte NZB-mus (se anti-TNF og TNFR55-Ig-gruppe) Membranformen av lymfotoksin som er en heteromer av LTa og LTP gjenkjenner ikke TNFR-75 eller TNFR-55, men binder i stedet til en tredje reseptor kalt LTPR(15). Søker valgte å bruke et fusjonsprotein inneholdende det LTpR-ekstracellulære domene også festet til CH2 og CH3-domener av humant IgGl(LTPR-Ig). Behandling av musene med anti-TNFa mAb, TNFR55-Ig og LTPR-Ig(trippelbehandling eller TNFR55-Ig og LTPR-Ig) resulterte i en dramatisk økning i overlevelse til henholdsvis 80% og 70%. I motsetning til dette overlevde kun 20% av mus behandlet med anti-TNFa mAb og TNFR55-Ig infeksjon. Nylig ble en andre ligand for LTPR, LIGHT identifisert (D.N. Mauri, R. Ebner, R.I. Montgomery et al., Immunity 8,21, (1998); R. I. Montomery, M.S. Warner, B. Lum et al., Cell, 87,427,(1996)). LIGHT har også blitt vist å binde herpesvirus inngangsmediator (HVEM) som er et type I transmembranprotein med en signifikant homologi til medlemmer av TNFR-familien som blir uttrykt på aktiverte CD4 og CD8 T-celler (D.N. Mauri, R. Ebner, R.I. Montgomery et al., Immunity 8,21, (1998); R. I. Montomery, M.S. Warner, B. Lum et al., Cell, 87,427,(1996)). Basert på resultater presentert her var forhindring av LTpR-signalisering og potensiell HVEM-signalisering ved bindingen av LTP2OC1 og LIGHT av LTPR-Ig sannsynligvis ansvarlig for det meste av effekten som observeres i trippelbehandlingsgruppen. Søker bekreftet denne hypotese ved å behandle LCMV-13-infiserte NZB-mus med bare LTPR-Ig fusjonsproteinet. Overlevelsesgraden av mus i denne gruppe (73%) var nesten så høy som den trippelbehandlede gruppe (fig.3). Tatt sammen representerer disse data den første påvisning at LTPR og/eller HVEM-signaliserende vei er involvert i reguleringen av en akutt dødelig sykdom som involverer systemisk sjokk og respiratorisk nød.
I et forsøk på å bestemme mekanismen for overlevelse bak LTp-blokkeringsbehandling ble både CD8/tetramer ko-farging for NP118-spesifike T-celler som er den dominante CD8-epitop i NZB L<D->systemet og intracellulær farging for interferongamma produksjon av splenocytter stimulert med NP118-peptid utført på prøver fra LCMV-13-infiserte NZB-mus som var behandlet med kontroll-antistoff, LTPR-Ig alene eller trippelbehandlet. Figur 4 viser en reduksjon i antallet NP118-spesifike CD8 T-celler med den største effekt obser-vert i trippelbehandlingsmusen. I mus behandlet med kontroll-antistof f dannet kun 10% av tetramerpositive celler aktivt INFy.
Trenden av anergiske T-celler i løpet av LCMV-13-infeksjonen har tidligere blitt dokumentert og er trolig grunnet høye nivåer av viralt antigen i musen (Fig. 1). Ikke bare har antallet NP118-spesifikke celler minket i de LTPR-Ig behandlede mus, men prosentdelen av de celler som danner INF-y var også redusert. Denne effekt var enda mer uttalt i den triple behandlede gruppe. Det er således mulig at CD8-rommet kan være kilden for denne dødelige NZB-respons mot LCMV-13-infeksjon. Det faktum at aktiverte CD8-deler er kjent for å oppvise LTp2ax er konsistent med denne hypotese
(Y. Abe, A. Horiuchi, Y. Osuka, et al., Lymph. Ctyok. Res., 11, 115 (1992); C.F.Ware, P.D.Crowe, M.H. Grayson, et al., J. Immunol, 149, 3881 (1992); J. L. Browning, A. Ngam-ek, P. Lawton, et al., Cell, 72, 847 (1993)). For å støtte denne antagelse utarmet søker infiserte NZB-mus for deres CD8 eller CD4 positive T-celler in vivo (NZB-hannmus ble gitt 2,5 x IO<6> pfu LCMV-13 i.v. fulgt av to 500 ul i.p. injeksjoner av anti-T-celle-antistoff. mAb-materialet Lyt 2,43 ble brukt til å fjerne CD8<+> T-celler mens GK 1,5 (Ml) antistoffet ble brukt for CD4<+> T-cellefjerning. Begge antistoff ble fremstilt med en ammoniumsulfat-utfelling fra hybridomsupernatanter fulgt av dialyse mot PBS. FACS-analyse ble brukt for å verifisere fjerningen hos flere av musene.). Fjerning av CD4 T-celler øket ikke overlevelse. Derimot resulterte fjerning av CD8 T-celler i 100% overlevelse ved fravær av sykdomssymptomer ulik de LTPR-Ig behandlede mus (Fig. 5). Fordi virale titrer i flere vev av CD8-utarmede mus var høyere enn dem som ikke var behandlet, er det sannsynlig at død resulterte fra en toksisk immunrespons fremskaffet av CD8 T-celler istedenfor destruksjon av vev av viral infeksjon.
Søker har rapportert her at NZB-mus, når infisert med en høy dose av LCMV-13 intravenøst, utvikler en akutt, rask progressiv sykdom som deler flere fellestrekk med Ebola, Marburg, Lassa, Dengue, og Sin Nombre-infeksjoner. Døde-lighet av denne sykdom var avhengig av tilstedeværelsen av CD8<+> T-celler som er kjent for å uttrykk TNFa, LTa, og LTP når aktivert. Selv om dette er et oppmuntrende funn, ville behandling av viral infeksjon ved fjerning av CD8<+> T-celler ikke være tilrådelig. Slik behandling kunne etterlate pasienter sårbare for andre opportunistiske infeksjoner. Videre siden viral fjerning er usannsynlig ved fravær av CTL, er risikoen for at pasienten tolererer viruset ved re-etablering av CD8<+->rommet meget reell. Søker har vist at blokkering av LTPR/HVEM-veiene ved administrasjon av LTPR-Ig representerer en kraftig behandling som er transient i natur med meget rask tilbakevending til homeostase når behandlingen en gang er stoppet (Mackay og Browning, upublisert). Overlevende mus behandlet på denne måte fjernet til slutt virus fra vev som var undersøkt (data ikke vist) og viser ikke lenger tegn på sykdom.
Disse data representerer den første påvisning om at LTPR-signalisering spiller en viktig rolle i antivirale responser og CD8 T-cellefunksjon. Lymfotoksin-systemet er nært knyttet til organisering av lymfoid arkitektur mest sannsynlig via kontroll av ekspresjonen av flere kjemokiner som delegerer T- og B-celleorganisering (Chaplin et al. Curr. Opin. Immunol. 10, 289 (1998), J. Cyster, under trykking). Den ferdige funksjonelle status av follikulære dendritt-celler blir opprettholdt ved konstant B-celle-signalisering og disse celler forsvinner innen en dag ved opphold av LTPR-signaliseringen. Disse celler er kritiske for pre-sentasjonen av antigen til B og T-celle-rommene. En rimelig spekulasjon er at et eller annet aspekt av antigen-pre-sentasjon til CD8-celler eller passende plassering av disse celler i en kjemokin-gradient under utvikling blir forhin-dret ved ødeleggelse av LTpR-signalisering. Tidligere stu-dier av LT-funksjon har fokusert i hovedsak på B-celle-biologi og involveringen i en T-cellefunksjon var ikke forutsett. Hver LT har ytterligere funksjoner eller disse data reflekterer en rolle for den nye liganden LIGHT. Hvilken rolle HVEM og LIGHT kan spille i progresjonen av sykdommen dokumentert her er for tiden uklart.
Claims (12)
1. Anvendelse av et lymfotoksin-p (LT-p) blokkerende middel eller et lymfotoksin-p-reseptor (LT-p-R) blokkerende middel samt et farmasøytiske akseptabelt bæremiddel for fremstilling av en farmasøytisk sammensetning for induksjon av en antiviral respons i et individ som lider av viral-indusert systemisk sjokk og/eller lungenød, hvor nevnte farmasøytiske sammensetning er egnet til å administreres til et individ.
2. Anvendelse av et lymfotoksin-p (LT-p) blokkerende middel eller et lymfotoksin-p-reseptor (LT-p-R) blokkerende middel samt et farmasøytiske akseptabelt bæremiddel for fremstilling av en farmasøytisk sammensetning til reduksjon av viral-indusert systemisk sjokk hos et individ hvor nevnte farmasøytiske sammensetning er egnet til å administreres til et individ.
3. Anvendelse av et lymfotoksin-p (LT-p) blokkerende middel eller et lymfotoksin-p-reseptor (LT-p-R) blokkerende middel samt et farmasøytiske akseptabelt bæremiddel for fremstilling av en farmasøytisk sammensetning til reduksjon av viral infeksjon hos et individ som lider av viral-indusert systemisk sjokk og/eller lungenød, hvor nevnte farmasøytiske sammensetning er egnet til å administreres til et individ.
4. Anvendelse av et lymfotoksin-p (LT-p) blokkerende middel eller et lymfotoksin-p-reseptor (LT-p-R) blokkerende middel samt et farmasøytiske akseptabelt bæremiddel for fremstilling av en farmasøytisk sammensetning for reduksjon av viral-indusert lungenød hos et individ, hvor nevnte farmasøytiske sammensetning er egnet til å administreres til et individ-
5. Anvendelse ifølge ethvert av kravene 1-4, hvor nevnte LT-p-blokkerende middel er et antistoff mot lymfotoksin-p.
6. Anvendelse ifølge ethvert av kravene 1-4, hvor nevnte LT-p-R blokkerende middel er en oppløselig lymfotoksin-p-reseptor eller et antistoff mot lymfotoksin-p-reseptoren.
7. Anvendelse ifølge krav 6, hvor nevnte oppløselige LT-p-R omfatter et LT-p-R lignadbindende domene.
8. Anvendelse ifølge krav 6, hvor det oppløselige LT-p-R er kondensert til et heterologt proteindomene valgt fra gruppen bestående av et immunoglobulin, serum albumin, et lipoprotein, et apolipoprotein og transferrin.
9. Anvendelse ifølge krav 8, hvor nevnte immunoglobulin omfatter et humant immunoglobulin Fc-domene.
10. Anvendelse ifølge ethvert av kravene 1 til 9, 11 og 12, hvor nevnte individ er smittet med Sin Nombre-virus, Ebola-virus, Marburg-virus, Lassa-virus eller Dengue.
11. Anvendelse ifølge ethvert av kravene 1-4, hvor LT-p-R-middelet er et lymfotoksin-p-R/lg fusjonsprotein.
12. Anvendelse ifølge krav 11, hvor nevnte immunoglobulin omfatter et humant immunoglobulin Fc-domene.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US10366298P | 1998-10-09 | 1998-10-09 | |
| PCT/US1999/023477 WO2000021558A1 (en) | 1998-10-09 | 1999-10-08 | Reversal of viral-induced systemic shock and respiratory distress by blockade of the lymphotoxin beta pathway |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO20011757D0 NO20011757D0 (no) | 2001-04-06 |
| NO20011757L NO20011757L (no) | 2001-06-08 |
| NO326905B1 true NO326905B1 (no) | 2009-03-16 |
Family
ID=22296372
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO20011757A NO326905B1 (no) | 1998-10-09 | 2001-04-06 | Reversering av viral-indusert systemisk sjokk og andenod ved blokkering av lymfotoksin-<beta>-veien |
Country Status (27)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US20020001585A1 (no) |
| EP (1) | EP1119370B1 (no) |
| JP (2) | JP4713738B2 (no) |
| KR (1) | KR100888832B1 (no) |
| CN (1) | CN1200733C (no) |
| AT (1) | ATE329618T1 (no) |
| AU (1) | AU777492C (no) |
| BR (1) | BR9915025A (no) |
| CA (1) | CA2344049C (no) |
| CY (1) | CY1105059T1 (no) |
| CZ (1) | CZ20011272A3 (no) |
| DE (1) | DE69931944T2 (no) |
| DK (1) | DK1119370T3 (no) |
| EA (1) | EA006703B1 (no) |
| EE (1) | EE04661B1 (no) |
| ES (1) | ES2267294T3 (no) |
| HU (1) | HUP0103773A3 (no) |
| IL (2) | IL142284A0 (no) |
| IS (1) | IS2514B (no) |
| NO (1) | NO326905B1 (no) |
| NZ (1) | NZ510560A (no) |
| PL (1) | PL195264B1 (no) |
| PT (1) | PT1119370E (no) |
| SG (1) | SG121778A1 (no) |
| SK (1) | SK4662001A3 (no) |
| TR (1) | TR200100974T2 (no) |
| WO (1) | WO2000021558A1 (no) |
Families Citing this family (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5925351A (en) * | 1995-07-21 | 1999-07-20 | Biogen, Inc. | Soluble lymphotoxin-β receptors and anti-lymphotoxin receptor and ligand antibodies as therapeutic agents for the treatment of immunological disease |
| US6998108B1 (en) | 1997-07-07 | 2006-02-14 | La Jolla Institute For Allergy And Immunology | Antibodies to p30 polypeptides and methods making and using same |
| US7118742B2 (en) | 1997-07-07 | 2006-10-10 | La Jolla Institute For Allergy And Immunology | Ligand for herpes simplex virus entry mediator and methods of use |
| US7060667B1 (en) * | 1998-01-30 | 2006-06-13 | Biogen Idec Ma, Inc. | Treatment of follicular lymphomas using inhibitors of the LT pathway |
| JP4713738B2 (ja) * | 1998-10-09 | 2011-06-29 | バイオジェン・アイデック・エムエイ・インコーポレイテッド | リンホトキシンβ経路の遮断によるウイルス誘導性全身性ショックおよび呼吸窮迫の逆転 |
| TR200504220T2 (tr) | 1998-12-17 | 2007-04-24 | Biogen Idec Ma Inc. | Aktif limfotoksin-beta reseptör imunoglobülin şimeAktif limfotoksin-beta reseptör imunoglobülin şimerik proteinlerinin yüksek düzey ifadesi ve saflaştrik proteinlerinin yüksek düzey ifadesi ve saflaştırılması için bir yöntem.ırılması için bir yöntem. |
| WO2001079496A2 (en) * | 2000-03-13 | 2001-10-25 | La Jolla Institute For Allergy And Immunology | Ligand for herpes simplex virus entry mediator and methods of use |
| ATE483807T1 (de) * | 2000-04-12 | 2010-10-15 | Jolla Inst Allergy Immunolog | Ligand des zelleintritt-vermittelnden proteins von herpes simplex und methoden zu dessen verwendungen |
| JP5068072B2 (ja) * | 2003-06-27 | 2012-11-07 | バイオジェン・アイデック・エムエイ・インコーポレイテッド | 連結ペプチドを含む改変された結合分子 |
| BRPI0509201A (pt) * | 2004-03-23 | 2007-08-28 | Biogen Idec Inc | agentes de acoplamento de receptor e usos terapêuticos destes |
| WO2006074399A2 (en) * | 2005-01-05 | 2006-07-13 | Biogen Idec Ma Inc. | Multispecific binding molecules comprising connecting peptides |
| US8338376B2 (en) * | 2006-10-20 | 2012-12-25 | Biogen Idec Ma Inc. | Compositions comprising variant LT-B-R-IG fusion proteins |
| EA200900581A1 (ru) * | 2006-10-20 | 2009-08-28 | Байоджен Айдек Эмэй Инк. | Способ лечения демиелинизирующего заболевания (варианты), способ стимулирования ремиелинизации, доставочное устройство (варианты) и набор, способ инструктирования больного, страдающего демиелинизирующим заболеванием |
| WO2009039310A2 (en) * | 2007-09-18 | 2009-03-26 | La Jolla Institute For Allergy And Immunology | Light inhibitors for asthma, lung and airway inflammation, respiratory, interstitial, pulmonary and fibrotic disease treatment |
| CN106591446A (zh) * | 2016-12-07 | 2017-04-26 | 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 | 细胞通路调控分子在作为药物靶点及诊断ebov感染中的应用 |
Family Cites Families (23)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3773919A (en) | 1969-10-23 | 1973-11-20 | Du Pont | Polylactide-drug mixtures |
| IE52535B1 (en) | 1981-02-16 | 1987-12-09 | Ici Plc | Continuous release pharmaceutical compositions |
| US4485045A (en) | 1981-07-06 | 1984-11-27 | Research Corporation | Synthetic phosphatidyl cholines useful in forming liposomes |
| DE3218121A1 (de) | 1982-05-14 | 1983-11-17 | Leskovar, Peter, Dr.-Ing., 8000 München | Arzneimittel zur tumorbehandlung |
| US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
| US4544545A (en) | 1983-06-20 | 1985-10-01 | Trustees University Of Massachusetts | Liposomes containing modified cholesterol for organ targeting |
| US5225538A (en) | 1989-02-23 | 1993-07-06 | Genentech, Inc. | Lymphocyte homing receptor/immunoglobulin fusion proteins |
| US7030080B2 (en) | 1990-06-27 | 2006-04-18 | Biogen, Inc. | Lymphotoxin-β, lymphotoxin-β complexes, pharmaceutical preparations and therapeutic uses thereof |
| DE69132629T2 (de) | 1990-06-27 | 2002-04-18 | Biogen, Inc. | Oberflächenkomplexbildung von lymphotoxin |
| US5670149A (en) * | 1990-06-27 | 1997-09-23 | Biogen, Inc. | Lymphotoxin-β, Lymphotoxin-β complexes, pharmaceutical preparations and therapeutic uses thereof |
| WO1994013808A2 (en) | 1992-12-04 | 1994-06-23 | Biogen, Inc. | LYMPHOTOXIN-β, LYMPHOTOXIN-β COMPLEXES, PHARMACEUTICAL PREPARATIONS AND THERAPEUTIC USES THEREOF |
| WO1994004679A1 (en) | 1991-06-14 | 1994-03-03 | Genentech, Inc. | Method for making humanized antibodies |
| US6312691B1 (en) | 1996-01-26 | 2001-11-06 | Jeffrey L. Browning | Lymphotoxin-α/β complexes and anti-lympotoxin-β receptor antibodies as anti-tumor agents |
| EP0809510B1 (en) | 1995-01-26 | 2004-06-09 | Biogen, Inc. | Lymphotoxin-alpha/beta complexes and anti-lymphotoxin-beta receptor antibodies as anti-tumor agents |
| US5925351A (en) | 1995-07-21 | 1999-07-20 | Biogen, Inc. | Soluble lymphotoxin-β receptors and anti-lymphotoxin receptor and ligand antibodies as therapeutic agents for the treatment of immunological disease |
| US6291207B1 (en) * | 1995-07-28 | 2001-09-18 | Northwestern University | Herpes virus entry receptor protein |
| US7255854B1 (en) | 1996-10-25 | 2007-08-14 | Biogen, Inc. | Use of lymphotoxin-β receptor blocking agents for the treatment of antibody mediated immunological diseases |
| ATE331531T1 (de) * | 1996-10-25 | 2006-07-15 | Biogen Idec Inc | Lösliche lymphotoxin-beta rezeptoren, anti- lymphotoxin-antikörper und anti-lymphotoxin ligand antikörper als therapeutische wirkstoffe zur behandlung von immunologischen krankheiten |
| GB9622660D0 (en) * | 1996-10-31 | 1997-01-08 | Biocine Spa | Immunogenic detoxified mutant toxin |
| US7060667B1 (en) | 1998-01-30 | 2006-06-13 | Biogen Idec Ma, Inc. | Treatment of follicular lymphomas using inhibitors of the LT pathway |
| JP4713738B2 (ja) * | 1998-10-09 | 2011-06-29 | バイオジェン・アイデック・エムエイ・インコーポレイテッド | リンホトキシンβ経路の遮断によるウイルス誘導性全身性ショックおよび呼吸窮迫の逆転 |
| TR200504220T2 (tr) | 1998-12-17 | 2007-04-24 | Biogen Idec Ma Inc. | Aktif limfotoksin-beta reseptör imunoglobülin şimeAktif limfotoksin-beta reseptör imunoglobülin şimerik proteinlerinin yüksek düzey ifadesi ve saflaştrik proteinlerinin yüksek düzey ifadesi ve saflaştırılması için bir yöntem.ırılması için bir yöntem. |
| CN1678625A (zh) * | 2002-07-01 | 2005-10-05 | 比奥根艾迪克Ma公司 | 人源化抗淋巴毒素β受体的抗体 |
-
1999
- 1999-10-08 JP JP2000575531A patent/JP4713738B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1999-10-08 EA EA200100430A patent/EA006703B1/ru not_active IP Right Cessation
- 1999-10-08 CZ CZ20011272A patent/CZ20011272A3/cs unknown
- 1999-10-08 KR KR1020017004493A patent/KR100888832B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1999-10-08 HU HU0103773A patent/HUP0103773A3/hu unknown
- 1999-10-08 PL PL99347177A patent/PL195264B1/pl unknown
- 1999-10-08 ES ES99950270T patent/ES2267294T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-10-08 TR TR2001/00974T patent/TR200100974T2/xx unknown
- 1999-10-08 EE EEP200100211A patent/EE04661B1/xx not_active IP Right Cessation
- 1999-10-08 PT PT99950270T patent/PT1119370E/pt unknown
- 1999-10-08 IL IL14228499A patent/IL142284A0/xx unknown
- 1999-10-08 WO PCT/US1999/023477 patent/WO2000021558A1/en active IP Right Grant
- 1999-10-08 SG SG200303599A patent/SG121778A1/en unknown
- 1999-10-08 BR BR9915025-5A patent/BR9915025A/pt not_active Application Discontinuation
- 1999-10-08 AU AU62964/99A patent/AU777492C/en not_active Ceased
- 1999-10-08 AT AT99950270T patent/ATE329618T1/de active
- 1999-10-08 CN CNB998119555A patent/CN1200733C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1999-10-08 NZ NZ510560A patent/NZ510560A/en not_active IP Right Cessation
- 1999-10-08 SK SK466-2001A patent/SK4662001A3/sk unknown
- 1999-10-08 DE DE69931944T patent/DE69931944T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-10-08 EP EP99950270A patent/EP1119370B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-10-08 CA CA002344049A patent/CA2344049C/en not_active Expired - Fee Related
- 1999-10-08 DK DK99950270T patent/DK1119370T3/da active
-
2001
- 2001-03-09 IS IS5882A patent/IS2514B/is unknown
- 2001-03-27 IL IL142284A patent/IL142284A/en not_active IP Right Cessation
- 2001-04-06 NO NO20011757A patent/NO326905B1/no not_active IP Right Cessation
- 2001-04-09 US US09/829,031 patent/US20020001585A1/en not_active Abandoned
-
2004
- 2004-04-21 US US10/829,720 patent/US7452530B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2006
- 2006-06-26 CY CY20061100872T patent/CY1105059T1/el unknown
-
2008
- 2008-10-08 US US12/247,374 patent/US20090087403A1/en not_active Abandoned
-
2010
- 2010-02-19 JP JP2010035451A patent/JP2010155852A/ja active Pending
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20090087403A1 (en) | Reversal of viral-induced systemic shock and respiratory distress by blockade of the lymphotoxin beta pathway | |
| EP0751781B1 (en) | Use of monoclonal antibodies or soluble oligomeric ligands in the manufacture of a medicament for the prevention or treatment of neoplastic disorders | |
| US7622444B2 (en) | Methods for using OX-40 ligand to enhance an antigen specific immune response | |
| EP1060247B1 (en) | Compositions containing an ox-40 receptor binding agent or a nucleic acid encoding the same and methods for enhancing antigen-specific immune response | |
| US9732140B2 (en) | Use of soluble forms of CD83 and nucleic acids encoding them for the treatment or prevention of diseases | |
| HU227508B1 (en) | Soluble lymphotoxin-beta receptors and anti-lymphotoxin receptor and ligand antibodies, as therapeutic agents for the treatment of immunological disease | |
| US9102726B2 (en) | Nucleic acid of recombination expression vector encoding soluble forms of CD83, host cells transformed/transfected therewith and pharmaceutical compositions containing same | |
| US6015559A (en) | Fas antagonists | |
| US20040116338A1 (en) | Use of soluble forms of CD83 and nucleic acids encoding them for the treatment or prevention of diseases | |
| US20030170232A1 (en) | Agents that specifically block CD28-mediated signaling and uses therefor | |
| MXPA01003605A (en) | Reversal of viral-induced systemic shock and respiratory distress by blockade of the lymphotoxin beta pathway | |
| CA2362783A1 (en) | Adjuvant and cell maturation agent | |
| MXPA00008176A (en) | Compositions containing an ox-40 receptor binding agent or a nucleic acid encoding the same and methods for enhancing antigen-specific immune response |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM1K | Lapsed by not paying the annual fees |