NO326718B1

NO326718B1 - Dinukleotider og farmasøytiske preparater omfattende slike, og anvendelser derav for fremstilling av medikamenter.

Info

Publication number: NO326718B1
Application number: NO19993776A
Authority: NO
Inventors: William Pendergast; Janet L Rideout; Benjamin R Yerxa; Suhaib M Siddiqi
Original assignee: Merck Sharp & Dohme
Priority date: 1997-02-06
Filing date: 1999-08-04
Publication date: 2009-02-02
Also published as: DE69834392D1; US20020082417A1; US6977246B2; KR20000070807A; CA2279963C; NO993776L; PT981534E; CA2279963A1; JP2001526635A; DK0981534T3; EP0981534A2; WO1998034942A2; NZ337225A; CN1292795A; AU6324298A; AU738907C; US6348589B1; DE69834392T2; KR100606131B1; WO1998034942A3

Description

Innledning

Den foreliggende oppfinnelse vedrører en forbindelse valgt fra en gruppe av asymmetriske dinukleosidtetrafosfater, et farmasøytisk preparat omfattende en slik forbindelse, og anvendelser av en slik forbindelse eller et slikt farmasøy-tisk preparat for fremstilling av et medikament for ulike behandlinger.

Teknisk område

Oppfinnelsen omhandler visse dinukleotider som øker hydrati-seringen av beholdte slimsekresjoner, stimulerer produksjonen av muciner og øker ciliær støtfrekvens for å øke renselse av beholdte sekresjoner.

Bakgrunn for oppfinnelsen

Kronisk obstruktiv lungesykdom (chronic obstructive pulmonary disease, COPD) rammer 15 millioner pasienter i USA og er den 6. ledende dødsårsak. Den er karakterisert ved retensjon av slimsekresjoner i lungene. Mange pasienter som har fått diagnosen COPD har en lidelse kalt kronisk bronkitt (chronic bronchitis, CB) og 600.000 pasienter innlegges på sykehus hvert år på grunn av en akutt forverring av CB. Cystisk fibrose og primær ciliær dyskinesi (Primary Ciliary Dyskinesia, PCD) er andre eksempler på lungelidelser som antar en klinisk profil som ligner på COPD. Ciliær dyskinesi, enten den er primær eller sekundær, resulterer i beholdte sekresjoner som kun kan renses ved hosting.

En annen sykdomstilstand karakterisert ved akkumulasjon av beholdte mukøse sekresjoner er sinusitt. Sinusitt er en innflammasjon i de paranasale sinuser som typisk forbindes med en øvre respiratorisk infeksjon. Den er USA's mest vanlige helserelaterte lidelse og rammer anslagsvis 31 millioner mennesker . (A. Moss og V. Parsons, National Center for Health Statistics, 1986: 66-7, DHHS Publication No. (PHS)86-1588 (1985)).

Otitis media (OM) er en viral eller bakteriell infeksjon i mellomøret som primært rammer barn under en alder på tre år. Den fremskyndes vanligvis av en øvre respiratorisk infeksjon som sprer seg inn i mellomøret via nasofarynks og det eusta-kiske rør. Omtrent 25-50 millioner legebesøk utføres hvert år for diagnose og behandling av OM. Ved en alder på tre år vil omtrent 75% av barn ha hatt minst ett tilfelle av akutt OM (J. Klein, Clin. Infect. Dis. 19, 823-33 (1994)). Etter passende behandling med antibiotika er akkumulert fluid til-bake i mellomøret, hvilket forårsaker svekket hørsel og mulige forsinkelser i språklig og kognitiv utvikling. Økt evne til å rense sekresjoner i mellomøret vil redusere eller eliminere signifikante ettersykdommer av otitis media.

En ytterligere lidelse som resulterer fra beholdte sekresjoner er pneumoni. Pasienter som er immobilisert av en rekke ulike årsaker har høy risiko for å utvikle pneumoni. ' På tross av ekstra årvåkenhet og tallrike tiltak utvikles pneumoni i over 400.000 pasienter pr. år, med signifikant morbiditet og mortalitet.

Det er også situasjoner hvor det er terapeutisk ønskelig å øke drenering av det lakrimale system. Når det lakrimale dreneringssystem ikke fungerer på passende måte kan resul-tatet være overdreven tåredannelse (epifora), mukopurulent uttømming og tilbakevendende dakryocystitt. Vanlige behandlinger for tilstoppelse av nese-tåre-kanalen er oftest inntrengende kirurgiske prosedyrer, og forskere har forsøkt å finne ikke-inntrengende farmasøytiske behandlinger.

Tåresekresjon kan stimuleres fra lakrimale aksessoriske vev via P2Y2 og/eller P2Y4 purinerg reseptor-medierte mekanismer som ligner på dem som hydratiserer luftveisepiteler. Tørt øye-sykdom er den generelle betegnelsen for indikasjoner som frembringes ved abnormaliteter i den prekorneale tårefilm som er karakterisert ved en reduksjon i tåredannelse eller en økning i tårefilmfordampning, sammen med den okulære over-flatesykdom som resulterer. For tiden er den farmasøytiske behandling av tørt øye-sykdom oftest begrenset til administrasjon av kunstige tårer (saltoppløsning) for midlertidig å rehydratisere øynene. Lindringen er imidlertid kortvarig og hyppig dosering er nødvendig.

Normalt fjernes mukøse sekresjoner via det mukociliære renselses (MCC) system. MCC er avhengig av den integrerte virkning av tre komponenter: 1) slimsekresjon ved begerceller og submukosale kjertler, 2) bevegelsen av cilier på epitelceller som driver slimet tvers over den luminale overflaten, og 3) ionetransport inn i og ut av luminale epitelceller som samtidig kontrollerer strømmen av vann inn i slimet.

Det er nå kjent at nukleosidfosfater slik som uridin-5'-trifosfat (UTP) modulerer alle komponentene i MCC-systemet. For det første er UTP blitt vist å øke både mengden pr. tidsenhet og den totale mengde mucinsekresjon ved begerceller in vitro (M. Lethem, et al., Am J. Respir. Cell Mol. Biol. 9, 315-22

(1993) ). For det andre er UTP blitt vist å øke støtfrekvens for cilier i humane luftveis-epitelceller in vitro (D. Drutz et al., Drug Dev. Res. 37(3), 185 (1996)). Og for det tredje er UTP blitt vist å øke Cl" sekresjon og således vannsekre-sjon fra luftveis-epitelceller in vitro (S. Mason et al., Br. J. Pharmacol. 103, 1649-56 (1991)). I tillegg menes det at frigivelse av surfaktant fra type II alveolarceller som respons på UTP (Gobran, Am. J. Physiol. 267, L625-L633

(1994) ) bidrar til at lungene fungerer optimalt og kan hjelpe til med maksimalisering av MCC (M. Knowles, et al., N. Engl. J. Med. 325, 533-38 (1991)). UTP er blitt vist å øke intra-cellulær Ca<++> på grunn av stimulering av fosfolipase C ved P2Y2 reseptoren (H. Brown et al., Mol. Pharmacol. 40, 648-55

(1991))•

UTP's modulasjon av alle komponenter av det mukociliære eska-latorsystem resulterer i en 2,5-ganger forbedring i mukoci-liær renselse av lunger hos normale frivillige uten noen signifikante bivirkninger (K. Olivier, et al., Am J. Respir. Crit. Care Med. 154, 217-23 (1996)). I tillegg økte UTP signifikant renselse ved hosting (renselse av beholdte sekresjoner ved hosting) i pasienter med PCD (P. Noone, et al., Am. J. Respir. Crit. Care Med. 153, A530 (1996)).

Det skal anføres at publisert PCT-søknad WO 96/40059, publisert 19. desember 1996, beskriver nukleotidforbindelser som er anvendbare i behandling av luftveissykdommer.

På grunn av UTP's demonstrerte evne til å øke renselsen av beholdte mukøse sekresjoner, ble søkerne motivert til å undersøke hvorvidt andre nukleosidfosfater kunne være like, om ikke mer, terapeutisk effektive. Den foreliggende oppfinnelse er basert på denne undersøkelsen.

Tidligere beskrevne dinukleotider er angitt i tabell I, sammen med deres tilsvarende litteraturreferanser.

(1) M.A.G. Sillero et al., Eur. J. Biochem., 76, 331 (1977) (2) C.G. Vallejo et al., Biochim. Biophys. Acta, 483, 304

(1976)

(3) H. Coste et al., J. Biol.Chem., 262, 12096 (1987)

(4) K.E. Ng et al., Nucleic Acid Res., 15, 3573 (1987)

(5) J. Stepinski et al., Nucleosides & Nucleotides, 14, 717

(1995)

(6) A. Zatorski et al., J. Med. Chem., 39, 2422 (1996)

(7) P. Rotilan et al., FEBS, 280, 371 (1991)

(8) P.C. Zamecnik et al., Proe. Nati. Acad. Sei., 89, 2370

(1992)

(9) J. Walker et al., Biochemistry, 32, 14009 (1993)

(10) R.H. Hiderman et al., J. Biol. Chem., 266, 6915 (1991) (11) J. Luthje et al., Eur. J. Biochem., 173, 241 (1988) (12) R.H. Silverman et al., Microbiological Rev., 43, 27

(1979) (13) CD. Lobaton et al., Eur. J. Biochem., 50, 495 (1975) (14) G. Lowe et al., Nucleosides & Nucleotides, 10, 181

(1991)

(15) G.M. Blackburn et al., Nucleosides & Nucleotides, 10,

549 (1991)

(16) J.C. Baker et al., Mutation Res., 208, 87 (1988)

(17) G. Klein et al., Biochemistry, 27, 1897 (1988)

(18) E. Castro et al., Br. J. Pharmacol., 100, 360 (1990)

(19) D.R. Elmaleh et al., Proe. Nati. Acad. Sei., 81, 918

(1984)

(20) R. Bone et al., J. Biol. Chem., 261, 16410 (1986)

(21) Fed. Amer. Soc. Exper. Bio., Abstr. Part I, no. 1878

(1991)

(22) M.T. Miras-Portugal et al., Ann. NY Acad. Sei., 603, 523

(1990)

(23) A. Guranowski et al., Biochemistry, 27, 2959 (1988)

(24) F. Grummt et al., Plant Mol. Bio., 2, 41 (1983)

(25) A.G. McLennan et al., Nucleic Acid Res., 12, 1609 (1984) (26) P. Zamecnik et al., Analytical Biochem., 134, 1 (1983)

(2 7) E. Rapaport et al., Proe. Nati. Acad. Sei., 78, 83 8

(1981)

(28) T. Kimura et al., Biol. Pharm. Bull., 18, 1556 (1995)

(29) E. Schulze-Lohoff et al., Hypertension, 26, 899 (1995)

(30) B.K. Kim et al., Proe. Nati. Acad. Sei., 89, 11056

(1992)

(31) P.C. Zamecnik et al., Proe. Nati. Acad. Sei., 89, 2370

(1992)

(32) H. Morii et al., Eur. J. Biochem., 205, 979 (1992)

(33) E. Castro et al., Pflugers Arch., 426, 524 (1994)

(34) H. Schluter et al., Nature, 367, 186 (1994)

(35) E. Castro et al., Br. J. Pharmacol., 206, 833 (1992)

(36) T. Casillas et al., Biochemistry, 32, 14203 (1993)

(37) J. Pintor et al., J. Neurochem., 64, 670 (1995)

(38) E. Castro et al., J. Biol. Chem., 270, 5098 (1995)

(39) V.A. Panchenko et al., Neuroscience, 70, 353 (1996)

(40) E. Castro et al., Br. J. Pharmacol., 100, 360 (1990)

(41) J. Pintor et al., Gen. Pharmac, 26, 229 (1995)

(42) J. Pintor et al., Br. J. Pharmacol., 115, 895 (1995)

(43) A. Kanavarioti et al., Tett. Lett., 32, 6065 (1991)

Oppsummering av oppfinnelsen

Oppfinnelsen tilveiebringer nye forbindelser med formel I og farmasøytiske preparater derav. Oppfinnelsen tilveiebringer også forbindelser som er anvendbare ved rensing av beholdt mukøs sekresjon og fremming av ciliær støtfrekvens. Oppfinnelsen er således rettet på valgte forbindelser med generell formel I eller de farmasøytisk akseptable estere eller salter derav:

hvori;

X er oksygen,

n = 1,

m = 1,

n + m = 2, og

B og B<1> er hver uavhengig en purinrest eller en pyrimidinrest forbundet gjennom henholdsvis 9- eller 1-stillingen,

Z = OH,

Z' = OH eller N3,

Y = OH,

Y' = H eller OH,

forutsatt at når Z' er N3 er Y' H, og videre forutsatt at forbindelsene i henhold til tabell I er utelukket.

Den foreliggende oppfinnelse vedrører således en forbindelse, kjennetegnet ved at den er valgt fra den følgende gruppe av asymmetriske dinukleosidtetrafosfater:

P<1->(tymidin 5•-)P<4->(uridin 5•-)tetrafosfat (UP4T) ,

P<1->(inosin 5'-)P<4->(uridin 5<1->)tetrafosfat (UP4I), P<1->(4-tiouridin 5<1->)P<4->(uridin 5•-)tetrafosfat (UP4(4-SH-U)), P<1->(cytosin p-D-arabinofuranosid 5'-) P4-(uridin 5<*->)tetrafosfat (UP4araC),

P<1->(uridin 5 ' -) P4-(xantosin 5'-)tetrafosfat (UP4X) , P<1->(2-deoksyuridin 5'-)P<4->(uridin 5<1->)tetrafosfat (UP4dU), P<1->(3'-azido-3<1->deoksytymidin 5'-)P<4->(uridin 5'-)tetrafosfat (UP4(AZT)),

P<1->(2'-deoksyguanosin 5'-).P<4->(uridin 5'-)tetrafosfat (UP4dG), P<1->(2■-deoksyinosin 5'-)P<4->(uridin 5'-)tetrafosfat (UP4dl), P<1->(2•-deoksycytidin 5'-)P<4->(uridin 5'-)tetrafosfat (UP4dC).

Den foreliggende oppfinnelse vedrører også et farmasøytisk preparat, kjennetegnet ved at det omfatter en forbindelse i henhold til oppfinnelsen eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav sammen med en farmasøytisk akseptabel bærer derfor.

Forbindelsene i henhold til den foreliggende oppfinnelse er svært selektive agonister av den P2Y2 og/eller P2Y4 purinerge reseptor. De kan således være anvendbare i behandling av kroniske obstruktive lungesykdommer slik som kronisk bronkitt, PCD og cystisk fibrose, og kan også være anvendbare i behandling av immobiliserte pasienter som har risiko for å utvikle pneumoni. På grunn av deres generelle evne til å rense beholdte slimsekresjoner og stimulere ciliær støt-frekvens, kan dessuten forbindelsene i henhold til den foreliggende oppfinnelse også være anvendbare i behandling av sinusitt, otitis media og tilstopping av nese-tåre-kanalen. De kan også være anvendbare for behandling av tørt øye, retinal løsning og leging av sår. På grunn av de farmako-logiske virkninger av disse forbindelsene er de i tillegg anvendbare med hensyn til å lette sputuminduksjonsprosedyrer. I tillegg menes det at forbindelsene i henhold til den foreliggende oppfinnelse kan øke yteevnen til idrettsutøvere ved å øke renselsen av mukøse sekresjoner fra lungene.

Den foreliggende oppfinnelse vedrører videre anvendelse av en forbindelse i henhold til oppfinnelsen eller et farmasøytisk preparat i henhold til oppfinnelsen for fremstilling av et medikament for behandling av kronisk obstruktiv lungesykdom i et pattedyr.

I en utførelsesform av den ovennevnte anvendelse av en forbindelse i henhold til oppfinnelsen eller et farmasøytisk preparat i henhold til oppfinnelsen for fremstilling av et medikament for behandling av kronisk obstruktiv lungesykdom i et pattedyr, er forbindelsen P<1->(2<1->deoksycytidin 5'-)P<4->

(uridin 5'-)tetrafosfat (UP4dC).

Den foreliggende forbindelse vedrører videre anvendelse av en forbindelse i henhold til oppfinnelsen eller et farmasøytisk preparat i henhold til oppfinnelsen for fremstilling av et medikament for behandling av sinusitt, otitis media, eller tilstopping av nese-tåre-kanalen i et pattedyr.

Den foreliggende forbindelse vedrører videre anvendelse av en forbindelse i henhold til oppfinnelsen eller et farmasøytisk preparat i henhold til oppfinnelsen for fremstilling av et medikament for behandling av tørt øye i et pattedyr.

Den foreliggende forbindelse vedrører videre anvendelse av en forbindelse i henhold til oppfinnelsen eller et farmasøytisk preparat i henhold til oppfinnelsen for fremstilling av et medikament for behandling av retinal løsning i et pattedyr.

Den foreliggende forbindelse vedrører videre anvendelse av en forbindelse i henhold til oppfinnelsen eller et farmasøytisk preparat i henhold til oppfinnelsen for fremstilling av et medikament for å lette sputuminduksjon i et pattedyr.

Den foreliggende forbindelse vedrører videre anvendelse av en forbindelse i henhold til oppfinnelsen eller et farmasøytisk preparat i henhold til oppfinnelsen for fremstilling av et medikament for å lette ekspektorasjon i et pattedyr.

Den foreliggende forbindelse vedrører videre anvendelse av en forbindelse i henhold til oppfinnelsen eller et farmasøytisk preparat i henhold til oppfinnelsen for fremstilling av et medikament for behandling av cystisk fibrose.

-L. v/

I en utførelsesform av den ovennevnte anvendelse av en forbindelse i henhold til oppfinnelsen eller et farmasøytisk preparat i henhold til oppfinnelsen for fremstilling av et medikament for behandling av cystisk fibrose, er forbindelsen P<1->(2'-deoksycytidin 5'-)P<4->(uridin 5<1->)tetrafosfat (UP4dC) .

Detaljert beskrivelse av oppfinnelsen

Oppfinnelsen tilveiebringer nye forbindelser med formel I og farmasøytiske preparater derav. Oppfinnelsen tilveiebringer også forbindelser som er anvendbare ved rensing av beholdt mukøs sekresjon og økning av ciliær støtfrekvens. Oppfinnelsen er følgelig rettet på valgte nye forbindelser med generell formel I:

hvori:

X er oksygen,

n = 1,

m = 1,

n + m = 2, og

Z = OH,

Z' = OH eller N3,

Y = OH,

Y1 = H eller OH,

forutsatt at når Z<1> er N3 er Y' H, og videre forutsatt at forbindelsene i henhold til tabell I er utelukket, eller farmasøytisk akseptable estere eller salter derav.

Furanosesukkeret er foretrukket i P-konfigurasjonen.

Furanosesukkeret er mest foretrukket i p-D-konfigurasjonen.

Foretrukne forbindelser med formel I er forbindelsene med formel IA

hvori:

X = 0,

n + m = 2,

Z, Z ' , Y og Y1 = OH,

B og B<1> er uracil, tymin, cytosin, xantin, hypoxantin eller som angitt i formel III, eller

X = 0,

n + m = 2,

Z, Y og Z' = OH,

Y<1> = H,

B = uracil,

B1 er uracil, tymin, cytosin, guanin, hypoxantin eller som angitt i formel III, eller

X = 0,

n + m = 2,

Z og Y = OH,

Z' = N3,

Y' = H,

B = uracil,

B' = tymin, eller

forutsatt at forbindelsene i henhold til tabell I er utelukket, eller farmasøytisk akseptable salter derav.

En annen foretrukket gruppe av forbindelsene med formel I er forbindelsene med formel IB eller de farmasøytisk akseptable salter derav:

hvori:

X er oksygen,

n = l,

m = 1,

n + m = 2, og

B og B' er hver uavhengig en pyrimidinrest, som i formel III, forbundet gjennom 1-stillingen. Ribosyl-enhetene er i D-konfigurasjonen, som vist, men kan være L-, eller D- og L-.

D-konfigurasjonen er foretrukket.

B eller B', eller begge, kan være et pyrimidin med den generelle formel i henhold til fig. III, forbundet gjennom 1-stillingen:

hvori:

R4 er hydrogen eller hydroksy,

R5 er hydrogen,

Rg er hydroksy, merkapto eller amino,

R7 er hydrogen eller alkyl, og

R8 er hydrogen,

eller farmasøytisk akseptable estere, amider eller salter derav.

I den generelle strukturen med formel III ovenfor, inneholder alkylgruppene 1 karbonatom.

De valgte forbindelser som den foreliggende oppfinnelse er rettet på er de følgende:

P<1->(tymidin 5'-) P4-(uridin 5'-)tetrafosfat (UP4T) ,

P<1->(inosin 5 •-) P4-(uridin 5 1-)tetrafosfat (UP4I) , P<1->(4-tiouridin 5'-) P4-(uridin 5'-)tetrafosfat (UP4(4-SH-U)), P<1->(cytosin p-D-arabinofuranosid 5 '-) P4-(uridin 5'-)tetrafosfat (UP4araC),

P<1->(uridin 51 -)P4-(xantosin 5■-)tetrafosfat (UP4X) , P<1->(2-deoksyuridin 5<1->)P<4->(uridin 5'-)tetrafosfat (UP4dU), P<1->(3'-azido-3'-deoksytymidin 5'-)P<4->(uridin 5'-)tetrafosfat (UP4(AZT)),

P<1->(21-deoksyguanosin 5<1->)P<4->(uridin 5'-)tetrafosfat (UP4dG), P<1->(2'-deoksyinosin 5'-) P4-(uridin 5<1->)tetrafosfat (UP4dl), P1- (2'-deoksycytidin 5'-)P<4->(uridin 5•-)tetrafosfat (UP4dC) .

Forbindelsene i henhold til den foreliggende oppfinnelse omfatter deres farmasøytisk akseptable estere slik som, men ikke begrenset til, acetyl- og benzoylestere. Esterne kan være dannet ved reaksjon av den ønskede hydroksyforbindelse med den passende syre, aktivert med karbonyldiimidazol, dicykloheksylkarbodiimid eller annet egnet kondensasjons-middel, eller med et syreanhydrid eller syreklorid med eller uten en basisk katalysator slik som et tertiært amin, kvaternært ammoniumsalt eller en uorganisk base.

Forbindelsene i henhold til den foreliggende oppfinnelse omfatter også sine ikke-toksiske farmasøytisk akseptable salter slik som, men ikke begrenset til, et alkalimetallsalt slik som natrium eller kalium, et jordalkalimetallsalt slik som mangan, magnesium eller kalsium, eller et ammoniumsalt eller tetraalkylammoniumsalt, dvs. NX4<+> (hvor X er C1-4) . Farmasøytisk akseptable salter er salter som beholder den ønskede biologiske aktivitet til moderforbindelsen og ikke bibringer uønskede toksikologiske virkninger. Den foreliggende oppfinnelse omfatter også de acylerte prodrugs (f.eks. estere) av forbindelsene omhandlet heri. De fagkyndige på området vil være kjent med ulike syntesemetodologier som kan benyttes til å fremstille ikke-toksiske farmasøytisk akseptable salter og acylerte prodrugs av forbindelsene som omfattes av formler I, IA og IB.

Forbindelsene i henhold til den foreliggende oppfinnelse er svært selektive agonister av den P2Y2 og/eller P2Y4 purinerge reseptor. De er således anvendbare ved behandling av pattedyr omfattende mennesker som lider av kroniske obstruktive lungesykdommer slik som kronisk bronkitt, PCD, og cystisk fibrose, såvel som forebygging av pneumoni på grunn av immobilitet. På grunn av deres generelle evne til å rense beholdte slimsekresjoner og stimulere ciliær støtfrekvens, er forbindelsene i henhold til den foreliggende oppfinnelse videre anvendbare i behandling av sinusitt, otitis media og tilstopping av nese-tåre-kanalen hos pattedyr, omfattende mennesker. I tillegg er forbindelsene i henhold til den foreliggende oppfinnelse anvendbare for behandling av pattedyr omfattende mennesker med tørt øye og retinal løsning.

Selv om forbindelsene i henhold til den foreliggende oppfinnelse primært vedrører behandling av mennesker, kan de også benyttes for behandling av andre pattedyr slik som hunder og katter for veterinære formål.

Den farmasøytiske anvendelighet av forbindelser i henhold til oppfinnelsen er indikert ved inositolfosfat-analysen for P2Y2 og annen P2Y reseptoraktivitet. Denne alminnelig anvendte analyse, som beskrevet i E. Lazarowski et al., Brit. J. Pharm. 116, 1619-27 (1995), beror på måling av inositolfos-fatdannelse som et mål på aktivitet av forbindelser som aktiverer reseptorer forbundet via G-proteiner til fosfolipase C.

Forbindelsene med generelle formler I, IA eller IB kan administreres oralt, topisk, parenteralt, ved inhalasjon eller spray, intraoperativt, rektalt eller vaginalt i doseenhets-formuleringer som inneholder vanlige ikke-toksiske farma-søytisk akseptable bærere, adjuvanser og vehikler. Betegnelsen topisk som anvendt heri inkluderer plastere, geler, kremer, salver, eller nese-, øre- eller øyedråper. Betegnelsen parenteral som angitt heri inkluderer subkutane injeksjoner, intravenøs, intramuskulær, intrasternal injeksjon eller infusjonsteknikker. I tillegg tilveiebringes det en farmasøytisk formulering som omfatter en forbindelse i henhold til den foreliggende forbindelse og en farmasøytisk akseptabel bærer. En eller flere forbindelser i henhold til den foreliggende oppfinnelse kan være tilstede i assosiasjon med en eller flere ikke-toksiske farmasøytisk akseptable bærere eller fortynningsmidler eller adjuvanser og, om ønsket, andre aktive bestanddeler. En slik bærer vil være sukkere hvor forbindelsene kan være intimt innlemmet i matriksen gjennom forglassing eller ganske enkelt blandet med bæreren (f.eks. laktose, sukrose, trehalose, mannitol) eller andre akseptable eksipienser for lunge- eller luftveistil-førsel.

En eller flere forbindelser i henhold til den foreliggende oppfinnelse kan administreres separat eller sammen, eller separat eller sammen med mucolyttiske midler slik som DNAse eller acetylcystein.

De farmasøytiske preparater inneholdende forbindelser i henhold til foreliggende oppfinnelse kan være i en form som er egnet for oral anvendelse, f.eks. som tabletter, piller, vandige eller oljeaktige suspensjoner, dispergerbare pulvere eller granuler, emulsjon, harde eller myke kapsler, eller siruper eller eliksirer. Preparater som ment for oral anvendelse kan fremstilles i samsvar med en hvilken som helst metode som er kjent på området for fremstilling av farma-søytiske preparater og slike preparater kan inneholde ett eller flere midler som er valgt fra gruppen bestående av søtningsmidler, aromamidler, fargemidler og konserveringsmidler for å tilveiebringe farmasøytiske elegante og vel-smakende preparater. Tabletter inneholder den aktive bestanddel i blanding med ikke-toksiske farmasøytisk akseptable eksipienser som er egnet for fremstilling av tabletter. Disse eksipiensene kan f.eks. være inerte fortynningsmidler slik som kalsiumkarbonat, natriumkarbonat, laktose, kalsiumfosfat eller natriumfosfat, granuleringsmidler og desinte-grasjonsmidler som f.eks. maisstivelse eller alginsyre, bindemidler som f.eks. stivelse, gelatin eller akasie, og smøremidler som f.eks. magnesiumstearat, stearinsyre eller talk. Tablettene kan være ubelagt eller de kan være belagt ved hjelp av kjente teknikker for å forsinke desintegrasjon og absorpsjon i mage-tarmkanalen og derved tilveiebringe en vedvarende virkning over en lengre periode. Det kan f.eks. benyttes et tidsforsinkelsesmaterial slik som glyserylmono-stearat eller glyseryldistearat.

Formuleringer for oral anvendelse kan også frembringes som harde gelatinkapsler hvori den aktive bestanddel er blandet med et inert fast fortynningsmiddel som f.eks. kalsiumkarbonat, kalsiumfosfat eller kaolin, eller som myke gelatinkapsler hvori den aktive bestanddel er blandet med vann eller et oljemedium som f.eks. peanøttolje, flytende parafin eller olivenolje.

Vandige suspensjoner inneholder de aktive materialer i blanding med eksipienser som er egnet for fremstilling av vandige suspensjoner. Slike eksipienser er suspensjonsmidler som f.eks.: natriumkarboksymetylcellulose, metylcellulose og natriumalginat. Dispergeringsmidler eller fuktemidler kan være et naturlig forekommende fosfatid eller kondensasjonsprodukter av et allylenoksyd med fettsyrer, eller kondensasjonsprodukter av etylenoksyd med alifatiske alkoholer med lang kjede, eller kondensasjonsprodukter av etylenoksyd med partialestere fra fettsyrer og en heksitol, eller kondensasjonsprodukter av etylenoksyd med partialestere avledet fra fettsyrer og heksitolanhydrider. De fagkyndige på området vil være kjent med de mange .spesifikke eksipienser og fuktemidler som omfattes av den generelle beskrivelse ovenfor. De vandige suspensjoner kan også inneholde ett eller flere konserveringsmidler som f.eks. etyl- eller n-propyl-p-hydroksy-benzoat, ett eller flere fargemidler, ett eller flere aromamidler, og ett eller flere søtningsmidler slik som sukrose eller sakkarin.

Dispergerbare pulvere og granuler som er egnet for fremstilling av en vandig suspensjon ved tilsetning av vann tilveiebringer den aktive bestanddel i blanding med et disperger-ingsmiddel eller fuktemiddel, suspensjonsmiddel og ett eller flere konserveringsmidler. Egnede dispergeringsmidler eller fuktemidler og suspensjonsmidler eksemplifiseres gjennom dem som allerede er nevnt i det foregående. Ytterlige eksipienser, f.eks. søtningsmidler, aromamidler og fargemidler, kan også være tilstede.

Forbindelser med generelle formler I, IA eller IB kan administreres parenteralt i et sterilt medium. Avhengig av den anvendte vehikkel og konsentrasjon, kan medikamentet enten være suspendert eller oppløst i vehikkelen. Adjuvanser slik som lokalbedøvelsesmidler, konserveringsmidler og bufrings-midler kan fordelaktig være oppløst i vehikkelen. Det sterile injiserbare preparat kan være en steril injiserbar oppløsning eller suspensjon i et ikke-toksisk parenteralt akseptabelt fortynningsmiddel eller løsningsmiddel. Blant de akseptable vehikler og løsningsmidler som kan benyttes er sterilt vann, saltoppløsning eller Ringers løsning.

Forbindelsene med generelle formler I, IA eller IB kan også administreres i form av suppositorier for øre, rektal eller vaginal administrasjon av medikamentet. Disse preparater kan fremstilles ved blanding av medikamentet med en egnet ikke-irriterende eksipiens som er fast ved vanlige temperaturer men flytende ved kroppstemperatur og vil derfor smelte til å frigjøre medikamentet. Slike materialer er kakaosmør og polyetylenglykoler.

Oppløsninger av forbindelser med generelle formler I, IA eller IB kan administreres ved intraoperativ innlegging. Doseringsnivåer av størrelsesorden fra omtrent 10"<7>M til omtrent 10_<1>M, foretrukket i området 10"<5>M til 10-<1>M, er anvendbare ved behandling av de ovennevnte tilstander. Mengden aktiv bestanddel som kan være kombinert med bærermaterialene for å frembringe en enkelt doseform vil variere avhengig av verten som behandles og den spesielle administrasjonsmåte. Det vil imidlertid forståes at det spesifikke dosenivå for enhver spesiell pasient vil avhenge av en rekke faktorer som inkluderer aktiviteten av den spesielle forbindelse som benyttes, alderen, kroppsvekten, den generelle helse, kjønnet, dietten, administrasjonstiden, administrasjonsruten og ekskresjonsgraden, medikamentkombinasjonen og alvorligheten av den spesielle sykdom som undergår terapi.

Forbindelser som omfattes av den foreliggende oppfinnelse kan fremstilles ved kondensasjon av et nukleosidmono-, -di- eller

-trifosfat, aktivert med et kondenseringsmiddel slik som, men ikke begrenset til, karbonyldiimidazol eller dicykloheksylkarbodiimid, med et andre molekyl av det samme eller et for-skjellig mono-, di- eller -trifosfat for å danne det ønskede dinukleotidpolyfosfat; eller et nukleosidfosfat, aktivert som ovenfor, kan kondenseres sekvensielt med en ikke-nukleosidmono-, -di- eller -polyfosfat-enhet slik som, men ikke begrenset til, et monofosfat- eller pyrofosfat-anion til å gi det ønskede dinukleotidpolyfosfat, idet det ikke-isolerte mellomprodukt i et slikt tilfelle er et mononukleotidpoly-fosfat; eller en mono-, di- eller polyfosfat-enhet, aktivert som nevnt ovenfor, eller i form av et syrehalogenid eller annet derivat som er reaktivt overfor nukleofil forskyvning, kan kondenseres sekvensielt med et nukleosidfosfat eller - polyfosfat til å gi det ønskede dinukleotidpolyfosfat; eller det ønskede dinukleotidpolyfosfat kan dannes ved modifisering av et forhåndsdannet dinukleotidpolyfosfat ved substitusjon eller derivatisering av en enhet eller enheter på purin-, pyrimidin- eller karbohydratringen. Nukleosidfosfater som benyttes som utgangsmaterialer kan være kommersielt tilgjengelige, eller de kan fremstilles fra de tilsvarende nukleosider ved hjelp av metoder som er velkjente for de fagkyndige på området. Når nukleosider ikke er kommersielt

tilgjengelige kan de likeledes fremstilles ved modifisering av andre lett tilgjengelige nukleosider, eller ved syntese fra heterocykliske og karbohydrat-forløpere ved hjelp av metoder som er velkjente for de fagkyndige på området.

Det etterfølgende er en liste av registrerte handelsnavn som fremkommer i de etterfølgende eksempler:

DEAE cellulose

PEI kolonne (Aldrich)

AG-MP50 sterk kationbytter (BioRad)

Dowex50 (H<+>) harpiks

DEAE Sephadex

PRPX-100 kolonne (Hamilton)

Sephadex DEAE A25 kolonne

De fagkyndige på området vil erkjenne at utgangsmaterialene kan varieres og at ytterlige trinn kan benyttes for å fremstille forbindelser omfattet av den foreliggende oppfinnelse, som vist gjennom de etterfølgende eksempler. I noen til-feller kan beskyttelse av visse reaktive funksjonaliteter være nødvendig for å oppnå noen av de ovennevnte transforma-sjoner. Generelt vil behovet for slike beskyttelsesgrupper være åpenbare for de fagkyndige på området organisk syntese såvel som de betingelser som er nødvendig for å fastgjøre og fjerne slike grupper.

Oppfinnelsen illustreres ytterligere gjennom de etterfølgende eksempler.

Eksempel 7

P<1->(tymidin-5'-)P<4->(uridin-5•-)tetrafosfat(UP4T)

En oppløsning av uridin-5'-trifosfat (UTP) trinatriumsalt (ProBioSint, 5,86 g, 0,01 mol) i vann (5 ml) ble ført gjennom en kolonne med BioRad AG-MP 50 sterk kationbytterharpiks i sin tributylamin-form (50 ml sjiktvolum) og eluert med destillert vann (omtrent 300 ml). Til denne oppløsningen ble det tilsatt tributylamin (5 ml), og suspensjonen ble rystet inntil pH i den vandige fraksjonen hadde steget til 8. Lagene ble separert og den vandige oppløsningen inndampet til et lite volum og deretter frysetørket over natten. Resten ble oppløst i tørr dimetylformamid (DMF, 20 ml) og løsnings-middelet avdampet ved 0,1 mmHg. Det tørkede tributylaminsalt ble tilberedt til 100 ml med vannfritt aceton til å gi en lageroppløsning (0,1 M i UTP). Dicykloheksylkarbodiimid (DCC) Baker, 0,1 g, 0,5 mmol) ble tilsatt til en delmengde av den foregående UTP-oppløsningen (1,0 ml, 0,1 mmol) og opp-løsningen ble omrørt ved romtemperatur i 3 0 min. Det utfelte dicykloheksylurea ble fjernet ved filtrering, reaksjonsblandingen ble ekstrahert med eter (10 ml) og resten ble oppløst i tørt deuterert dimetylsulfoksyd (DMSO-d6, 0,3 ml). Denne oppløsningen av uridin-5<1->cyklisk metafosfat (UcTP) ble tilsatt til en oppløsning av tymidin-5<1->monofosfat (TMP, 0,064 g, 0,2 mmol) og tributylamin (0,2 ml) i DMSO-d6 (0,3 ml) og satt til side ved 50°C i 24 timer. Reaksjonsblandingen ble inndampet under høyvakuum over natten, resten ble oppløst i vann (1,0 ml), filtrert for å fjerne noe resterende dicykloheksylurea og separert ved semipreparativ ionebytterkromatografi (Hamilton PRP X-100 kolonne, under eluering med isokratisk 1,0 M ammoniumbikarbonat, 5 ml/min., 30 min., flere injeksjoner på 100 /il) . Dinukleotidtetrafosfatet eluerte mellom 21 og 23 min. Produktet (11,1% utbytte basert på UTP) ble kvantitert ved sammenligning av dets ultrafiolette absorpsjon ved A,max2 63 nm med dem for standarder av UMP og TMP. <1>H NMR D20, 6 ppm fra tetrametylsilan: 1.78(s,3H);2.19-2.22(m,2H);4.04-4.13(m,6H)4.22-4.27(m,2H); 4.52(m,delvis formørket av D20);4.74(m, delvis formørket av D20) ;5.83(d,J=8.1 Hz,lH) ; 5.84(d,J=5.0 Hz,1H) ; 6.195(t,J=6.9 Hz, 1H); 7.61(S,1H);7.82(d,J=8.1 HZ,1H).

<31>P NMR (D20, 6 ppm fra H3P04)-22 . 71 (m, 2P) ;-10 . 97 (m, 2P) .

Eksempel 8

P1-(inosin-5 ' -) P4-(uridin-5'-)tetrafosfat (UP4I)

Kondensering av uridin-5<1->cyklisk trimetafosfat (UcTP) og inosin-5<1->monofosfat ble utført hovedsakelig som beskrevet i det foregående, unntatt at reaksjonsblandingen ble lagret ved 25°C i 5 uker før avdampning av løsningsmiddelet. Resten ble oppløst i vann (1,0 ml), filtrert og separert i 150 [ il delmengder ved ionebytterkromatografi på en Hamilton PRP X-100 kolonne, under eluering med isokratisk 1,0 M ammoniumbikarbonat, 5 ml/min., 30 min. Fraksjonene som eluerer mellom 6 og 9 minutter ble inndampet og frysetørket over natten for å fjerne buffer. Dinukleotidtetrafosfatet (8% utbytte, 96% renhet ved HPLC (AUC)) ble kvantitert ved sammenligning av dens ultrafiolette absorpsjon ved 2 60 nm med dem av UMP og IMP ved den samme bølgelengden. <1>H NMR (D20, 6 ppm fra tetrametylsilan): 4.13(m,6H)4.24-4.27(m,2H);4.47 (m,delvis formørket av D20);5.78(d,J=7.9 Hz,1H);5.83(d,J=4.7 Hz,lH); 6.003(d,J=5.7 HZ,1H);7.79(d,J=7.9 Hz,1H);8.10(S,1H); 8.37(s,lH). 31P NMR (D20, 8 ppm fra H3P04)-22.43(m,2P);-10.72(m,2P).

Eksempel 9

P<1->(4-tiouridin-5'-)P<4->(uridin-5'-)tetrafosfat (UP4(4-SH-U)) 4-tiouridinmonofosfat-natriumsalt (25 mg, 0,057 mmol) ble oppløst i vann (0,5 ml), tilført til en kolonne med BioRad AG-MP50 sterk kationbytterharpiks (2 ml sjiktvolum, 3 mekv.) i sin tributylatform, kolonnen ble eluert med vann (-10 ml) og eluatet frysetørket. Det resulterende tributylaminsalt av 4-tio-UMP ble kondensert med uridin-51-cyklisk trimetafosfat (0,1 mmol) fremstilt ved aktivering av UTP med dicykloheksylkarbodiimid (2 06 mg) hovedsakelig som beskrevet i eksempel 7 (72 timer reaksjonstid). Etter avdampning av DMSO fra reaksjonsblandingen ble resten oppløst i vann (~1 ml) og separert i 200 /il delmengder ved ionebytterkromatografi på en Hamilton PRP X-100 kolonne, under eluering med isokratisk 1,0 M ammoniumbikarbonat, 5 ml/min., idet elueringen overvåkes ved 328 nm. Fraksjonene som eluerer mellom 15 og 25 min ble frysetørket til å gi den i overskriften angitte forbindelse (9,7% utbytte, 99,7% ren ved HPLC(AUC)), som ble kvantitert ved sammenligning av sin ultrafiolette absorpsjon ved 332 nm med den for 4-tio-UMP ved den samme bølgelengden.

<1>H NMR (D20, 6 ppm fra tetrametylsilan): 4.04(m,delvis overlappet av HOD);4.14(m, delvis overlappet av HOD);5.72(m,3H);6.42(d,J=7.4 Hz);7.55(d,J=7.6 Hz); 7.70(d,J=8.1 Hz).31P NMR (D20, 6 ppm fra H3P04) -20 . 88 (m,2P); -9.27(m,2P).

Eksempler 10-12 ble fremstilt fra uridin-5<1->cyklisk trimetafosfat (0,1 mmol) og det relevante nukleosid 5<1->monofosfat (0,2 mmol) hovedsakelig som beskrevet i eksempel 7, unntatt at heksan ble anvendt i stedet for eter til å ekstrahere overskuddet av DCC fra reaksjonsblandingen.

Eksempel 10

P<1->(cytosin-p-D-arabinofuranosid-5'-)P<4->(uridin-5'-) tetrafosfat, (UP4araC) (20 mg): <1>H NMR (D20) 8 4.30-3.95(m,10H),5.99(d,J=6.7 Hz,1H),6.08(d,J=5.2 Hz,1H),7.82-7.77(m,2H); <31>P NMR (D20) 8-10.79(m,2P),-22.52(m,2P)

Eksempel 11

P<1->(uridin-5'-)-P<4->(xantosin-5'-)tetrafosfat (UP4X) (27,7 mg) : ^■H NMR (D20) : 6 4 . 50-4 . 40 (m, 10H) , 5 . 80-5 . 70 (m, 3H) , 7 . 70 (d, J= 8.0 Hz,lH),7.88(S,1H,); 31PNMR (D20)<:> 8-10.73(m,2P),

-22.41(m,2P)

Eksempel 12

Pi_ (2 • -deoksyuridin-5' -) -P4- (uridin-5' -) tetrafosfat (UP4dU)

(40,6 mg): <X>H NMR (D20) 8 2.20-2.15(m,2H),4.45-3.95 (m,9H) ,5.80-5.74(m,3H),6.12(t,J=6.7 Hz,lH) ,7.80-7.74 (m,2H) , ; <31>P NMR (D20) 82.9(m,2P),-8.9(m,2P)

Eksempel 13

P1- (3' -azido-3' -deoksytymidin-5 ' -) -P4- (uridin-5 ' -) tetrafosfat (UP4(AZT))

3<1->azido-3'-deoksytymidin-5'-monofosfat (AZTMP) natriumsalt (50 mg, 0,135 mmol) ble oppløst i vann (1 ml) og tilført til en kolonne med Biorad AG-MP50 sterk ionebytterharpiks i sin tributylamin-form. Kolonnen ble eluert med vann (- 10 ral) og eluatet ble frysetørket. Det resulterende tributylaminsalt ble kondensert med uridin-5<1->cyklisk trimetafosfat (0,1 mmol) fremstilt ved aktivering av UTP med dicykloheksylkarbodiimid (206 mg) hovedsakelig som beskrevet i eksempel 7. Resten etter inndampning av reaksjonsblandingen ble oppløst i vann (1,0 ml), ført gjennom et 0,45/x sprøytefilter for å fjerne noe faststoff, og filtratet ble underkastet preparativ HPLC

på en Hamilton PRP X-100 kolonne, under eluering med en isokratisk blanding av 1,0 M ammoniumbikarbonat (75%) og metanol (25%), (4 ml/min.). Fraksjonen som eluerer mellom 5 og 8 minutter ble frysetørket til å gi UP4(AZT) (7,9%), kvantitert ved sammenligning av dens ultrafiolette absorpsjon ved 264 nm med dem for UMP og TMP ved den samme bølgelengden.

"""H NMR D20, 6 ppm fra tetrametylsilan: 1.78 (s, 3H) ;2 .30-2.34(m,2H);4.07-4.14(m,6H)4.22-4.29(m,2H); 4.52(m,1H); 5.82(d,J=4.4 Hz,1H);5.84(d,J=8.1 Hz,1H),6.12(t,J=7 Hz,lH); 7.62(S,1H,); 7.81(d,J=8.1 Hz,lH).

<31>P NMR (D20, 6 ppm fra H3P04) -22 . 51 (m, 2P) ;-11. 06 (m, 1P) ; -10.81(m,1P).

Eksempler 17. 19 og 20

pi_ (2 ' -deoksyguanosin-5 ' -) P4- (uridin-5 ' -) tetrafosfat (UP4dG)

(eksempel 17),

pi_ (2 • -deoksyinosin-5 ' -) P4- (uridin-5' -) tetrafosfat (UP4dI)

(eksempel 19),

Pi_ (2 - -deoksycytidin-5' -) P4- (uridin-5' -) tetrafosfat (UP4dC)

(eksempel 20)

Uridin-5'-trifosfat (5,0 g) i vann (18 ml) ble ført gjennom en kolonne med Dowex 50 H+, og tributylamin (3,0 g) ble tilsatt til eluenten. Blandingen ble konsentrert til en olje, tørket ved inndampning med tørt DMF og på ny oppløst i tørt DMF (18 ml). Dicykloheksylkarbodiimid (DCC, 3,5 g) ble tilsatt, oppløsningen ble omrørt ved romtemperatur i 3 0 min. og presipitatet ble fjernet ved filtrering, heksan (70 ml) ble tilsatt til filtratet, og bunnlaget ble separert og vasket igjen med heksan (70 ml) for å fullføre fjerningen av DCC. Denne oppløsningen av uridin-5'-cyklisk metafosfat (UcTP) ble anvendt i de følgende forsøk: Eksempel 17 P1- (2 ' -deoksyguanosin-5 ' -) P4- (uridin-5 1 -) tetrafosfat (UP4dG) 2<1->deoksyguanosin-5<1->monofosfat (d-GMP, Sigma, 500 mg) ble oppløst i DMF ( 4,5 ml), tributylamin (1,0 ml) ble tilsatt og oppløsningen ble konsentrert til en olje under vakuum. En tredjedel av oppløsningen av uridin-5<1->cyklisk metafosfat (UcTP, ovenfor) ble tilsatt og oppløsningen ble oppvarmet ved 40°C i 24 timer. Oppløsningen ble inndampet til en olje, oppløst i vann (10 ml) og tilført til en kolonne med Sephadex DEAE (350 ml i en 4,5 x 22 cm kolonne) i sin bikarbonat-form, for-ekvilibrert med 0,25 M ammoniumbikarbonat. Kolonnen ble eluert suksessivt med 0,25, 0,30, 0,35, 0,40 og 0,50 M ammoniumbikarbonat . Elueringen ble overvåket ved HPLC (SynchroPak AX-300, 75% 0,50 M KH2P04, 25% MeCN 1,0 ml/min. , UV 254 nm), og fraksjonen inneholdende UP4dG ble konsentrert til et faststoff, og deretter ko-inndampet 6-7 ganger med vann til å gi ammoniumsaltet av dinukleotidet som et orange-gult faststoff (140 mg, estimert renhet ved HPLC (AUC) 94%).

Eksempel 19

pl_ (2 1 -deoksyinosin-5' -) P4- (uridin-5 ' -) tetrafosfat (UP4dI) 2'-deoksyinosin-5'-monofosfat (d-IMP, Sigma, natriumsalt 1,0 g) omdannes til den frie syreform med Dowex 50 (H<+>) harpiks som beskrevet for UTP ovenfor. Elueringsmiddelet nøytrali-seres med tributylamin (2,0 ml) og blandingen konsentreres til en olje under vakuum. Det resulterende tributylaminsalt tørkes ved inndampning med DMF, resten oppløses i DMF (4,5 ml) og behandles med uridin-51-cyklisk trimetafosfat hovedsakelig som beskrevet ovenfor til å gi P<1->(2'-deoksyinosin-51-)P<4->(uridin-5<1->)tetrafosfat.

Eksempel 2 0

pl_(2'-deoksycytidin-5'-)P4- (uridin-5'-) tetrafosfat (UP4dC) 2'-deoksycytidin-5'-monofosfat (d-CMP, Sigma, 500 mg) behandlet hovedsakelig som ovenfor ga P<1->(2'-deoksycytidin-51-)P<4->(uridin-5'-)tetrafosfat som et hvitt faststoff (130 mg), estimert HPLC renhet 82%.

Eksempel 21

Farmakologisk aktivitet som målt ved inositolfosfat-analysen Forbindelsene i henhold til eksempler 7-13, 17, 19 og 20 ble testet med hensyn på deres evne til å utløse P2YX, P2Y2, P2Y4 og P2Y6 reseptoraktivitet ved anvendelse av inositolfosfat-analysen som beskrevet av E. Lazarowski, et al., Brit. J. Pharm. 116, 1619-27 (1995). Resultatene er oppsummert i tabell II nedenfor.

Claims

1. Forbindelse, karakterisert ved at den er valgt fra den følgende gruppe av asymmetriske dinukleosidtetrafosfater:P<1->(tymidin 5'-)P<4->(uridin 5<1->)tetrafosfat (UP4T),P<1->(inosin 5'-)P<4->(uridin 5■-)tetrafosfat (UP4I) ,P<1->(4-tiouridin 5'-)P<4->(uridin 5'-)tetrafosfat (UP4(4-SH-U)), P<1->(cytosin Ø-D-arabinofuranosid 5'-)P<4->(uridin 5'-)tetrafosfat (UP4araC),P<1->(uridin 5'-)P<4->(xantosin 5'-)tetrafosfat (UP4X) ,P<1->(2-deoksyuridin 5■-)P<4->(uridin 5'-)tetrafosfat (UP4dU), P<1->(31-azido-3'-deoksytymidin 5<1->)P<4->(uridin 5'-)tetrafosfat (UP4 (AZT)),P<1->(21-deoksyguanosin 5<1->)P<4->(uridin 5'-)tetrafosfat (UP4dG),P<1->(21-deoksyinosin 5<1->)P<4->(uridin 5<1->)tetrafosfat (UP4dl), P<1->(2■-deoksycytidin 5'-)P<4->(uridin 5'-)tetrafosfat (UP4dC).

2. Farmasøytisk preparat, karakterisert ved at det omfatter en forbindelse som beskrevet i krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav sammen med en farmasøytisk akseptabel bærer derfor.

3. Anvendelse av en forbindelse som beskrevet i krav 1 eller et farmasøytisk preparat som beskrevet i krav 2 for fremstilling av et medikament for behandling av kronisk obstruktiv lungesykdom i et pattedyr.

4. Anvendelse av en forbindelse som beskrevet i krav 1 eller et farmasøytisk preparat som beskrevet i krav 2 for fremstilling av et medikament for behandling av sinusitt, otitis media, eller tilstopping av nese-tåre-kanalen i et pattedyr.

5. Anvendelse av en forbindelse som beskrevet i krav 1 eller et farmasøytisk preparat som beskrevet i krav 2 for fremstilling av et medikament for behandling av tørt øye i et pattedyr.

6. Anvendelse av en forbindelse som beskrevet i krav 1 eller et farmasøytisk preparat som beskrevet i krav 2 for fremstilling av et medikament for behandling av retinal løsning i et pattedyr.

7. Anvendelse av en forbindelse som beskrevet i krav 1 eller et farmasøytisk preparat som beskrevet i krav 2 for fremstilling av et medikament for å lette sputuminduksjon i et pattedyr.

8. Anvendelse av en forbindelse som beskrevet i krav 1 eller et farmasøytisk preparat som beskrevet i krav 2 for fremstilling av et medikament for å lette ekspektorasjon i et pattedyr.

9. Anvendelse av en forbindelse som beskrevet krav 1 eller et farmasøytisk preparat som beskrevet i krav 2 for fremstilling av et medikament for behandling av cystisk fibrose.

10. Anvendelse som angitt i krav 6 eller krav 9 hvori forbindelsen er P<1->(2'-deoksycytidin 5'-)P<4->(uridin 5'-)tetrafosfat (UP4dC).