NO310754B1

NO310754B1 - Anvendelse av CY-A/X-III for pulmonal administrasjon samt farmasöytisk preparat omfattende CY-A/X-III

Info

Publication number: NO310754B1
Application number: NO19921012A
Authority: NO
Inventors: John Morley; Andreas Rummelt; Martin List
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 1991-03-18
Filing date: 1992-03-16
Publication date: 2001-08-27
Also published as: TW215901B; FI921125A; JP2549794B2; NZ241975A; EP0504760A1; HUT61324A; FI921125A0; FR2674249A1; ES2093130T3; SA92120536B1; ATA53492A; ITRM920181A0; ITRM920181A1; AU658172B2; DE4208258A1; IL101244A0; KR920017644A; LU88087A1; NO921012L; GB2253853B

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører nye farmasøytiske anvendelser og nye farmasøytiske preparater omfattende "Ciclosporin" i ikke-solvat ortorombisk krystallform betegnet

CY-A/X-III.

Ciclosporin, også kjent som syklosporin A, er den medisinsk aktive substans med -formel

MeBmt-aAbu-Sar-MeLue-Val-MeLeu-Ala-(D)-Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal

Ciclosporin er kjent og kommersielt tilgjengelig under handelsbetegnelsen 'Sandimmun11 eller "Sandimmune".

I fast tilstand foreligger Ciclosporin i både amorf og krystallinsk form. I den krystallinske tilstand forekommer forskjellige modifikasjoner. I et første aspekt vedrører den foreliggende oppfinnelse Ciclosporin i krystallformen, som nevnt betegnet "CY-A/X-III". Med "CY-A/X-IH" som benyttet i foreliggende sammenheng menes Ciclosporin i en ikke-solvat ortorombisk (P2i2i2i) krystallform.

CY-A/X-III er beskrevet og angitt sammen med fremgangsmåter for dets fremstilling i GB patent nr. 2 211 848 (A) (patentsøknad nr. 88 295563 inngitt 19. desember 1988 med publikasjonsdato 12. juli 1989) og ekvivalenter verden over, inkluderende f.eks. New Zealand patentsøknad nr. 227384.

Som omhandlet i det nevnte GB patentet er dimensjonene av krystallgitteret av CY-A/X-III: - 12,7 Å, b - 15,7 Å, c = 36,3 Å. Volumet pr. asymmetrisk enhet = 1804 A<3>. CY-A/X-III fremviser følgende røntgen-pulverdiffraksjonskarakteristikker, f.eks. som bestemt under anvendelse av et Guinier-DeWolff II kamera under anvendelse av CuKa-stråling X = 1,542 Å:

Som drøftet i det nevnte GB patentet anvendes Ciclosporin klinisk eller er foreslått for slik anvendelse som et immunosuppressivt middel for behandling av resipienter av

organtransplantater og for behandling av en lang rekke autoimmune sykdommer. Videre områder for undersøkelser har inkludert mulig anvendbarhet som et antiparasittisk middel så vel som bruk ved reversering av tumorresistens til kjemoterapeutisk, f.eks. cytostatisk, medisinterapi og for å fremme hårvekst.

Mer nylig er Ciclosporin videre funnet A være effektivt ved behandling av obstruktive eller inflammatoriske luftveissykdommer, særlig astma. Kontrollerte kliniske forsøk involverende oral tilførsel av Ciclosporin til astmatikere, f.eks. astmatikere som er resistente overfor eller avhengig av steroid astmaierapi, er blitt foreslått og nå rapportert i litteraturen, se f.eks. Czczecklik et al, Allergy, 46 Art. 72 (1991) og Alexander et al, Lancet 339 (8. febr. 1992) s. 24 og videre referanser anført deri.

Rapporter har også forekommet i litteratur som beskriver tilførsel av Ciclosporin, særlig ved lungetransplantasjonsyremodeller, ved pulmonal veg: se f.eks. Dowling et al, Surgery (St. Louis) 108, (2), 198-205 (1990); Zenati et al,. Heart T-ransplant 9, (1), 64

(1990); Muggerburg et al, Am. Rev. Resp. Dis., 139 (4/Pt 2), A 267 (1989); og Burckart et 1, J. Clin. Pharmacol., 29, (9), 860 (1989). Suppresjon av eosinofil infiltrering av luftveiene etter pulmonal tilførsel av mikronisert Ciclosporin i eksperimentelle astmadyremodeller er også blitt beskrevet, se f.eks. Boubeckeur et 1, Eur. i. Pharmacol., 183 (4), 1187-1188 (1990).

I samsvar med læren i den ovennevnte GB-patent nr. 211 848 er CY-A/X-III foreslått for anvendelse som aktivt prinsipp i Ciclospoirn-holdige galeniske preparater. Spesifikke preparater som er foreslått inkluderer topiske ormer for dermal eller oftalmisk tilførsel og injiserbare ormer for infusjon, intralesjonal injeksjon (f.eks. ved behandling av psoriasis) og intraartikulær injeksjon (f.eks. ed behandling av inflammatoriske/autoimmune sykdommer i leddene, for eksempel reumatoid artritt). Galeniske reparater for enteral tilførsel er også foreslått.

Den foreliggende oppfinnelse er i ett aspekt basert på erkjennelsen av at CY-A/X-III har overraskende og uventede fordeler når det tilføres ved pulmonal veg.

Som allerede drøftet er bruk av oralt tilført Ciclosporin for behandling av luftveissykdommer, for eksempel astma, tidligere kjent. For behandling av pulmonal sykdom som f.eks. astma, har imidlertid oral tilførsel av Ciclosporin tydelige ulemper. Ciclosporin er en kraftig immunosuppressiv medisin og kan som sådan bevirke en generell nedsettelse av kroppens immunrespons etter systemisk resorpsjon. En slik virkning er klart uønsket i individer for eksempel astmatikere, hvis tilstand kan være en følge av eller utløst eller forverret ved infeksjon, for eksempel infeksjon i pulmonalkanalen. I tillegg medfører oral tilførsel av Ciclosporin den kjente fare for uønsket systemisk bivirkning, for eksempel renal-dysfunksjon, etter langvarig bruk.

For å møte denne vanskelighet ville det klart være ønskelig med midler for lokal tilførsel til luftveiene og lungene med så langt som mulig unngåelse av systemisk medisin-resorpsjon. Lokal tilførsel av Ciclosporin til luftveiene og lungene frembyr imidlertid tallrike problemer.

For det første er Ciclosporin meget hydrofobt og bærermidler tilgjengelige for dets galeniske sammensetning, f.eks. vegetabilske oljer og lignende, er ikke passende for bruk en inhalert form. For det annet er der problemet som følger ned ethvert pulmonalt/ inhalert tilførselssystem, at en hovedprosentandel av den tilførte medisinsubstans ikke kommer inn i luftveiene og lungene, med forblir innfanget i kinnhulen, eller på membranoverflatene av svelget, for deretter å bli svelget ned i maven. I pasienter med vanskeliggjort lungefunksjon, f.eks. astmatikere, er dette problemet særlig akutt. Kontrollerte forsøk har vist at når tørre substanser tilføres slike individer ved inhalering går den største del av den tilførte medisin, opp til 80 % eller mer, faktisk i mave-tarm-kanalen. Faren for regulær systemisk resorpsjon og bivirkning etter pulmonal tilførsel av Ciclosporin er således fremdeles tilstede. For det tredje er der problemet å tilveiebringe en form som vil være effektiv ved behandling av den aktuelle sykdom inne i luftveiene og lungen, dvs. som er aktiv ved det tilsiktede tilførselssete.

I samsvar med den foreliggende oppfinnelse er det nå overraskende funnet at CY-A/X-III tilveiebringer et middel for lokal tilførsel av Ciclosporin til luftveiene og lungene og som avhjelper de ovennevnte vanskeligheter og er fordelaktig effektiv og gunstig for slik anvendelse.

Spesifikt tilveiebringer CY-A/X-III Ciclosprorin i en form som i seg selv er tilpasset eller tilpassbar til pulmonal tilførsel og som er meget effektiv ved behandling av sykdommer eller andre dårlige tilstander i lungene eller luftveiene, både med hensyn til potens og varighet av virkningen. Spesifikt tilveiebringene CY-A/X-III en form av Ciclosporin som er uventet bedre egnet for pulmonal tilførsel og fordeling ved lungeoverflatene sammenlignet med andre former av Ciclosporin. Enda mer overraskende er det funnet at bruken av CY-A/X-III for pulmonal tilførsel begrenser faren for systemisk resorpsjon og derav følgende bivirkning, f.eks. etter uunngåelig eller utilsiktet systemisk tilførsel, f.eks. ved svelging, sammenlignet med bruk av Ciclosporin i annen form.

Pulmonal tilførsel av CY-A/X-III så vel som behandling av sykdommer eller tilstander i lufveiene eller lungene ved pulmonal tilførsel av CY-A/X-IIT- er ny. Den foreliggende oppfinnelse tilveiebringer følgelig: A: Anvendelse av CY-A/X-III som er en ortorombisk krystallinsk form av ciclosporin og som har følgende krystallgitter: a = 12,7 Å, b = 15,7 Å, c = 36,3 Å, og et volum pr asymmetrisk enhet = 1804 Å<3>, for fremstilling av et farmasøytisk preparat for pulmonal administrasjon.

Foretrukne utførelser av den ovenfor definerte anvendelse ifølge oppfinnelsen fremgår fra medfølgende krav 2-8.

CY-A/X-III tilføres altså via den pulmonale vei, f.eks. ved inhalasjon. CY-A/X-III tilføres derved i luftveiene og lungene til å bevirke topisk tilførsel inne i luftveiene eller lungen.

Ved hjelp av foreliggende oppfinnelse kan Ciclosporin-terapi av luftveiene eller lungen gjennomføres. Oppfinnelsen kan anvendes ved behandling av et hvilket som helst individ som har behov derfor, f.eks. for hvilke slik behandling er passende eller indikert. Oppfinnelsen kan anvendes ved behandling av en hvilken som helst sykdom eller tilstand i luftveiene eller lungen som kan underkastes Ciclospoirnterapi eller for hvilke Ciclosporin-terapi er passende eller indikert, inkluderende parasittisk og/eller mykotisk sykdom som coccidiomycose og reversering av tumorresistens til kjemoterapeutisk medisinsk terapi.

Spesielt kan oppfinnelsen anvendes ved behandling av en hvilken som helst sykdom eller tilstand i luftveiene eller lungen som krever immunosuppressiv eller antiinflammatorisk terapi, for eksempel autoimmune eller inflammatoriske sykdommer i lungene, særlig inflammatorisk sykdom i lungene omfattende en autoimmun komponent som en del av eller i forbindelse med dens etiologi. Eksempler på slike sykdommer inkluderer for eksempel sarkoidose og interstitial lungefibrose. Fremgangsmåten i henhold til oppfinnelsen kan også utøves for å opprettholde lungetransplantat i lunge- eller hjerte-lunge-transplantasj onspasienter.

Oppfinnelsen er imidlertid mest spesielt anvendbar for behandling av inflammatoriske eller obstruktive luftveissykdommer og sykdommer i luftveier og lunger som involverer inflammatoriske fenomener fulgt av eosinofil og/eller neutrofil akkumulasjon, særlig astma og bronkitt.

Oppfinnelsen er anvendbar for behandling av astma av hvilken som helst type eller genese. Den er anvendbar for både indre og spesielt ytre astma. Den er særlig anvendbar for behandling av allergiske eller atopiske (dvs. IgE-mediert) astma og ikke-atopisk astma, så vel som f.eks. bronkittisk astma, øvelsesindusert astma, yrkesastma, astma indusert etter bakterieinfeksjon og andre ikke-allergiske astmatype. Behandling av astma skal også forstås og omfatte behandling av individer, f.eks. med alder under 4 eller 5 år, som fremviser symptomer med pipende pust, særlig om natten, og som diagnostiseres eller kan diagnostiseres som "pipendepust-barn" som er en etablert pasientkategori av stor medisinsk betydning og som nå mer korrekt identifiseres som begynnende eller tidligfase-astmatikere. Denne spesielle astmatiske tilstand blir nå generelt omtalt som "pipendepust-barn-syndromet".

Ved en spesifikk utførelsesform er oppfinnelsen anvendbar for behandling av astma, f.eks. av en hvilken som helst type eller genese som angitt i det foregående, i individer hvis astmatiske status enten er steroidavhengig eller steroidresistent.

Den foreliggende oppfinnelse er også anvendbar ved behandling av bronkitt eller spesielt ved behandling av kronisk eller akutt luftveisobstruksjon assosiert dermed. I denne henseende kan oppfinnelsen anvendes for behandling av bronkitt av hvilken som helst type eller genese, inkluderende f.eks. akutt bronkitt, arakidisk bronkitt, katarralbronkitt, kronisk bronkitt, kruppøs bronkitt, ftinoid bronkitt og så videre.

Den foreliggende oppfinnelse er i tillegg anvendbar ved behandling av pneumokoniosis (en inflammatorisk, vanlig yrkessykdom av lungene, ofte fulgt av luftveisobstruksjon, kronisk eller akutt, og bevirket ved gjentatt inhalering av støv) av hvilken som helst type eller genese, inkluderende f.eks. aluminose, antrakose, asbestose, chalikose, ptilose, siderose, silikose, tobakkose og særlig byssinose.

Den foreliggende oppfinnelse kan også anvendes ved behandling av eosinofilrelaterte forstyrrelser i luftveiene (f.eks. involverende morbid eosinofil Infiltrering av pulmonalt vev) inkluderende hypereosinoriii når denne påvirker luftveiene eller lungene så vel som for eksempel eosinofilrelaterte forstyrrelser av luftveiene som følge av eller samtidig med Lofflers syndrom, eosinofil pneumoni, parasittisk (spesielt sort. skyldes metazoer) infeksjon (inkluderende tropisk eosinofili), bronkopulmonal aspergillose, polyarteritt nodosa (inkluderende Churg-Strauss syndrom) og eosinofilrelaterte forstyrrelser som påvirker luftveiene bevirket ved medisinreaksjon.

Når det passer, f.eks. som anvendt ved inflammatorisk eller obstruktive luftveissykdommer som angitt i det foregående, skal den foreliggende oppfinnelse forstås som og omfatte både symptomatiske og profylaktiske terapimåter, dvs. behandling av sykdomssymptomer, f.eks. inflammasjon som de forekommer (symptomatisk terapi) så vel som forhåndsbehandling for å forhindre eller mildne forekomsten av slike symptomer eller å begrense langtidssymptomatologi (profylaktisk terapi). Betegnelsen "behandling" som anvendt i den foreliggende sammenheng skal fortolkes tilsvarende som inkluderende både symptomatisk behandling og profylaktisk behandling, f.eks. i tilfellet av astma, symptomatisk behandling for å mildne akutte inflammatoriske tilstander og assosiert bronkial forverring og profylaktisk behandling for å begrense forekommende inflammatorisk status og å mildne fremtidig forverring.

I forbindelse med foreliggende oppfinnelse tilføres Ciclosporin som CY-A/X-IQ. Hensiktsmessig blir passende alt eller hovedsakelig alt, f.eks. minst 75 %, foretrukket minst 85 % eller 90 %, mest foretrukket 95 % eller mer av Ciclosporin tilført som CY-A/X-III. Egnede preparater vil passende være preparater hvori alt eller hovedsakelig alt av tilstedeværende Ciclosporin er tilstede som CY-A/X-III.

Ved utøvelsen av den foreliggende oppfinnelse tilføres CY-A/X-III via den pulmonale veg, for eksempel ved inhalering fra en passende dispenserinnretning.

For dette formål kan CY-A/X-III anvendes i en hvilken som helst egnet eller passende findispergert eller findispergerbar form, i stand til f.eks. A være egnet eller passende for pulmonal tilførsel, dvs. tilførsel inn i luftveiene og/eller lungene. Det kan tilføres ved oral inhalering, for eksempel i findelt tørr partikkelform eller i partikkelform dispergert eller fordelt i et hvilket som helst passende fast eller flytende fortynnings- eller bærer-medium (dvs. som er pulmonalt tilførselsbart eller egnet for pulmonal tilførsel) hvori integriteten av CY-A/X-III opprettholdes, dvs. hvori CY-A/X-III hovedsakelig er ikke-utsatt for oppløsning eller omdannelse til noen annen modifikasjon. Flytende media som nevnt inkluderer f.eks. flyktige media som for eksempel komprimerte gasser.

For tilførsel i tørr partikkelform kan CY-A/X-III anvendes enten som sådant (dvs. uten noen tilsetningsmaterialer), i fortynning med annen passende findelt inert fast bærer eller fortynningsmiddel (f.eks. glukose, laktose, mannitol, sorbitol, ribose, mannose, arabinose, sakkarose, galaktose, fruktose eller xylose), i belagt partikkelform (med eller uten ytterligere inert bærer eller fortynningsmiddel, for eksempel som nevnt) eller i hvilken som helst annen passende form som kjent på området for tilførsel av findelte faststoffer.

For pulmonal tilførsel vil CY-A/X-III-1 passende være i partikkelform med en aerodynamisk masse-medianpartikkelstørrelse ("AMMPS") på <10 u, foretrukket <5 u, mer foretrukket omtrent 3 u eller mindre. Passende vil minst 70 %, foretrukket minst 80 % og mer foretrukket minst 85 eller 90 av partiklene tilstede i CY-A/X- III-partikkelpreparater for pulmonal tilførsel ha en partikkel-størrelse på <10 u, foretrukket <5 u, mer foretrukket omtrent 3 u eller mindre.

Minimumspartikkelstørrelse vil generelt være mindre kritisk, selv om CY-A/X-III i partikkelform med en AMMPS på <0,1 u, foretrukket <0,5 u, mer foretrukket <1,0 u normalt vil foretrekkes. Passende vil minst 75 %, foretrukket minst 80% eller 90 % av de tilstedeværende partikler ha en partikkelstørrelse <0,1 u, foretrukket <0,5 u, mer foretrukket <1,0 u.

For pulmonal tilførsel anvendes CY-A/X-III med en AMMPS i området fra 0,1, 0,5 eller 1,0 u opp til 10 u, foretrukket opp til 5 u. Mest foretrukket vil AMMPS være i området fra 1,0 u til 5 u, f.eks. ca. 3,0 u.

Som videre forklart i det følgende er det i overensstemmelse ned den foreliggende oppfinnelse overraskende funnet at CY-A/X-III-partikkelsystemer, f.eks. som beskrevet i det foregående, har overlegne pulmonale tilførselsegenskaper, f.eks. med hensyn til mengde material som tilføres inn i luftveiene, i sammenligning med partikkelsystemer omfattende Ciclosporin i annen fast form. I denne forbindelse kan det bemerkes at de spesifikke aerosoliserings/pulmonale tilførselsegenskaper av det selekterte CY-A/X-HI-partikkelnaterial om ønsket kan varieres ved hjelp av hvilket som helst av de metoder som er kjent eller praktisert på området, for eksempel ved blanding med inerte respirable eller ikke-respirable partikkelformede materialer, som angitt i det foregående, med forskjellig gjennomsnittlig partikkelstørrelse eller densitet.

Som beskrevet i den tidligere nevnte GB patent nr 211 848 A er CY-A/X-III velegnet for fremstilling av fine partikkelformede systemer som svarer til de ovennevnte krav til partikkelstørrelse og slike systemer egnet for bruk i samsvar med den foreliggende oppfinnelse kan oppnås ved metodene beskrevet deri, for eksempel ved hjelp av direkte mikrokrystallisasjonsmetoder og/eller ved findeling, f.eks. ved maling, knusing, ultralydbehandling eller annen mikronisering av initialt oppnådd nativt CY-A/X-III-krystall-produkt. Det kan imidlertid være foretrukket å anvende CY-A/X-III-partikkelpreparater oppnådd direkte ved mikrokrystallisasjonsmetoder f.eks. ultralydbehandling (og om nødvendig frafiltrering av oppnådde større krystaller, f.eks. ved filtrering gjennom et mikrofilter eller sikt) snarere enn findeling. Grunnen til dette er, som forklart i det ovennevnte GB patentet, den fordel som kan oppnås f.eks. med hensyn til unngåelse av irritasjon eller skade, ved bruk av mikrokrystaller i nativ, ikke-frakturert/ikke-abrasiv tilstand.

Om ønsket kan overflateegenskapene av CY-A/X-III-partikkelformet material endres fysisk, for eksempel for å modifisere partikkelstørrelsesareal, for eksempel ved deformasjon eller annen behandling. Med slike metoder kan det oppnås modifisering av Ciclosporin-tilførselsegenskapene av CY-A/X-III-materialet inne i lungen eller av fuktbarheten eller andre egenskaper av CY-A/X-III-materialet. Slike virkninger kan for eksempel oppnås ved å utsette CY-A/X-III-materialet for ultralydbehandling eller overflatemessige kjemiske nedbrytningsmetoder. En spesiell form for modifisering av særlig interesse i forbindelse med den foreliggende oppfinnelse omfatter omdannelse til sfæroid partikkelform som beskrevet i det følgende. Som tidligere indikert kan CY-A/X-ITI-partikkelmaterialet om ønsket underkastes partikkelbelegning med et passende belegnings- eller smøremiddel for ytterligere å begrense enhver mulig irriterende eller abrasiv virkning ved luftveienes eller lungens overflater.

Både tørre og flytende galeniske systemer som beskrevet i det foregående kan innlemme hvilke som helst andre passende tilsetningsmidler eller bestanddeler som kjent på området i forbindelse med pulmonal tilførsel, for eksempel konserveringsmidler, antioksydasjonsmidler, overflateaktive materialer, buffermidler, tonsitetsregulerende midler, aromamidler og lignende, så vel som drivmidler eller andre midler som fremmer fordeling i inhalerbar form, for eksempel fremmer atomisering eller forstøvning eller forhindrer adhesjon eller sammenklumping av partikler.

Eksempler på galeniske former omfattende CY-A/X-III egnet for anvendelse i samsvar med oppfinnelsen er angitt i følgende eksempel 3.

Tilførsel av galeniske former kan gjennomføres under anvendelse av hvilke som helst passende system som kjent på området for tilførsel av medisinsubstanser i tørr eller flytende form ved inhalasjon, f.eks. en atomisør, nebulisør, tørrpulver inhaleringsinnretning eller lignende innretning. Foretrukket anvendes en inhaleringsinnretning med avmålt dose ("MDI"), dvs. som er i stand til å tilføre en forut bestemt mengde av medisinsubstans ved hver utløsning. Slike innretninger for avmålt tilførsel er også velkjent på området og inkluderer f.eks. pustutløste MDI, MDI med et ekstensjons-kammer eller avstandsstykke for å redusere orofaryngeal avsetning og pustopererte tilførselssystemer for tørrpulver.

Ifølge foreliggende oppfinnelse tilveiebringes også:

B: Farmasøytisk preparat, kjennetegnet ved at det omfatter CY-A/X-III som definert i hvilket som helst av de medfølgende krav 1-8 sammen med et farmasøytisk akseptabelt fortynningsmiddel eller bærer derfor.

Et farmasøytisk preparat ifølge oppfinnelsen kan oppnås ved fremstilling av CY-A/X-III, for eksempel CY-A/X-III fremstilt i samsvar med metodene beskrevet og angitt i GB-patent nr 2 211 848 (A) i partikkelform, for eksempel partikkelform med størrelses-egenskaper som beskrevet i det foregående og når det trenges, fordeling eller dispergering av den nevnte fremstilte partikkelform i et pulmonalt tilførselsbart fast eller flytende fortynnings- eller bærer-medium.

Som tidligere bemerket er et vanlig problem med tilførsel av medisiner ved pulmonal veg, f.eks. ved inhalasjon, retensjon av det inhalerte material i kinnhulen og svelgarealet og endelig tilførsel i fordøyelseskanalen. Faren er særlig høy for astmatikere og andre individer hvis lungefunksjon er nedsatt, enten ved sykdom eller av annen grunn.

Det er et spesielt og overraskende funn ved den foreliggende oppfinnelse at faren for systemisk resorpsjon, f.eks. som et resultat av svelging, og for derav følgende bivirkning, f.eks. generalisert immunosuppresjon eller renal dysfunksjon, er betydelig og uventet redusert ved pulmonal tilførsel av Ciclosporin som CY-A/X-III, for eksempel i sammenligning med pulmonal tilførsel av Ciclosporin i oppløsning, i amorf form eller i annen krystallinsk form. Den foreliggende oppfinnelse muliggjør således effektiv terapi for sykdommer i luftveier og lunger med samtidig opptredende nedsettelse eller unngåelse av systemisk medisinresorpsjon/fare for Ciclospoirnindusert bivirkning. Ved de fordeler som dette medfører kan den foreliggende oppfinnelse forventes å gjøre pulmonal, f.eks. inhalert, Ciclosporinterapi tilgjengelig for individer for hvilke fordelene med terapi ellers kunne være utelukket på basis av betraktninger om risiko/fordel. Oppfinnelsen utstrekker således fordelene med Ciclosporinterapi til en stor pasient-populasjon som behøver denne og for hvilke oral Ciclosporinterapi ikke passer eller for hvilke inhalert Ciclospoirnterapi ved hjelp av andre midler er utelukket eller i det minste begrenset.

Anvendelse av CY-A/X-III i samsvar med den foreliggende oppfinnelse gir også høy lokal medisineffektivitet inne i luftveiene og lungene, dvs. høy terapeutisk fordel, også her med unngåelse av vesentlig systemisk resorpsjon.

Anvendelse av CY-A/X-IQ i samsvar med den foreliggende oppfinnelse er også funnet å være overraskende fordelaktig i relasjon til prosedyrene ved mekanisk eller pulmonal tilførsel. Således fremviser CY-A/X-III utmerkede inhalerte tilførselsegenskaper som bestemt ved standard testmodeller, f.eks. som beskrevet i det følgende i eksempel 4. Resultater er således oppnåelige med CY-A/X-III som ikke bare synes overlegne resultatene som kan oppnås med Ciclosporin i f.eks. amorf eller tetragonal krystallform, men overlegne de resultater som kan oppnås ved impinger-berøringsforsøk for inhalerbare medisinsubstanser generelt i tørr pulverform eller partikkelform. Den foreliggende oppfinnelse har således den vesentlige fordel med å redusere doserings-kravene for inhalert Ciclosporin.

Dyreforsøk under anvendelse av inhalert CY-A/X-DI indikerer også en redusert tendens til akkumulering i og blokkering av de mindre luftveispassasjer sammenlignet for eksempel med inhalert amorf Ciclosporin/Ciclosporin i tetragonal krystallform.

Aktuelle doser av CY-A/X-IQ vil selvfølgelig variere i avhengighet av den spesielle tilstand som behandles, alvorligheten av tilstanden, det individ som skal behandles (f.eks. på basis av kroppsvekt, alder og så videre) så vel som den ønskede virkning. Generelt, for anvendelse i samsvar med oppfinnelsen, f.eks. for anvendelse ved behandling av inflammatorisk eller obstruktiv luftveissykdom, for eksempel astma, oppnås tilfredsstillende resultater ved tilførsel av CY-A/X-III i en enkel dose til lungene på omtrent fra 3 til 10 mg/kg. En passende dose for større dyr, f.eks. mennesker vil således være omtrent fra 210 til 700 mg. For regelmessig dosering vil en passende daglig dose for mennesker være omtrent 25 eller 50 til 400 mg/døgn og mer passende fra 50 til 300, f.eks. fra 100-200 mg/døgn.

Doser vil passende tilføres fra et system med avmålt tilførsel, i serie på fra 1 til 5, f.eks. 1 eller 2 pust, tilført én til fire ganger daglig. Doseringer ved hver tilførsel vil således være fra omtrent 6 til 12,5 til 100 mg, er passende fra 25 eller 50 til 100 mg, f.eks. tilført lx til 4x daglig, med en innretning for avmålt tilførsel, f.eks. i stand til å tilføre 6 til 25 mg

CY-A/X-III pr. utløsning og med lx eller 4x utløsning ved hver tilførsel.

I samsvar med foreliggende oppfinnelse er det nå også meget overraskende funnet at krystallinsk Ciclosporing, inkluderende CY-A/X-IQ kan induseres til å anta en sfæroid form uten tap av krystallidentitet. Mer spesielt er funnet at det utvendige utseende, f.eks. av native Ciclosporinkrystaller eller krystallpartikler eller fragmenter, kan omdannes til å gi et krystallinsk partikkelformet produkt hvis enkeltpartikler er sfæroidale. Denne omdannelse kan for eksempel gjennomføres ved å underkaste krystallinsk Ciclosporin i ikke-sfæroidal partikkelform i dispers fase til betingelser med forhøyet trykk og/eller temperatur.

Det krystallinske Ciclosporin-utgangsmaterial kan omfatte Ciclosporin i en hvilken som helst krystallmodifikasjon. Det oppnådde sfæroidale produkt omfatter Ciclosporin i den selvsamme modifikasjon som utgangsmaterialet. Spesielt kan utgangsmaterialet være CY-A/X-III eller Ciclosporin i den form som er betegnet som CY-A/X-I. Med "CY-A/X-I" som anvendt heri og i patentkravene menes tetragonal (P41) krystallform av Ciclosporin.

[CY-A/X-I er beskrevet i den tidligere nevnte GB patent nr 2 211 848 (A) og er beskrevet og omhandlet sammen med fremgangsmåter for dets fremstilling, f.eks. i østerriksk patentskrift nr. 353,961. CY-A/X-I har et krystallgitter a=b= 13,8 Å, c= 41,2 Å. Volumet pr. asymnetrisk enhet = 1974 Å<3>. CY-A/X-I omfatter ca. 2 molekyler H20 pr. Ciclosporinmolekyl og har et smeltepunkt ved ca. 140-150°C. CY-A/X-I fremviser følgende røntgen-pulverdiffraksjonsdata, f.eks. som bestemt under anvendelse av et Guinier DeWolff II kamera under anvendelse av CuKa-stråling, X = 1,542 Å.

CY-A/X-I kan passende fremstilles ved omkrystallisasjon fra aceton, f.eks. ved å oppløse amorft Ciclosporin i ca. 3x mengden av aceton (f.eks. 20 g Ciclosporin/50 ml aceton) ved oppvarming ved 40-50°C etterfulgt av avkjøling til romtemperatur og fullføring av krysallisasjonen ved 50°C i 4 timer og ved -150C i 17 timer. Samlede krystaller vaskes passende med aceton og tørkes under vakuum.]

Det partikkelformede utgangsmaterial for omdannelsesprosedyren kan omfatte native Ciclosporinkrystaller, f.eks. CY-A/X-I eller CY-A/X-III mikrokrystaller, eller fragmientert eller pulverisert, f.eks. knust krystallinsk material. Omdannelsen gjennomføres i dispers fase, dvs. med utgangsmaterialpartikler dispergert eller fordelt i et større volum. Hvis utgangsmaterialet er utilstrekkelig dispergert kan individuelle partikler koalescere under omdannelsesprosessen for til slutt å frembringe en større sammenkaket masse snarere enn det ønskede sfæroidale partikkelformede produkt. Dispergering gjennomføres passende i et flytende medium hvori det valgte krystallinske material er ikke-oppløselig. Mest passende dispergeres utgangsmaterialet i et vandig medium, f.eks. vann. For ytterligere å redusere koalescens under omdannelsesprosessen kan overflateaktive midler tilsettes. Generelt er det oppnådd tilfredsstillende resultater med unngåelse av vesentlig koalescering under anvendelse av en dipersjon med ca. 5 % eller mindre, foretrukket 1 % eller indre krystallinsk utgangsmaterial i vann. Alternative metoder til dispersjon, for eksempel i gassfase eller under betingelser med redusert tyngdekraft vil være nærliggende for dem som er fagkyndige på området.

Selve omdannelsen gjennomføres ved forhøyet trykk og/eller temperatur. De nøyaktige betingelser som anvendes kan varieres i avhengighet av f.eks. de relative trykk og/eller temperaturer som anvendes, varigheten av prosedyren og partikkelstørrelsen av utgangsmaterialet. Generelt vil temperaturen være under f.eks. 20° til 60°C under det normale smeltepunkt av krystallmodifikasjonen som underkastes omdannelse. Ved et normalt eller noe forhøyet trykk, f.eks. trykk fra 1 til 2,5 atm., gjennomføres således omdannelse av CY-A/X-I passende ved en temperatur fra omtrent 60° til 100°C, mer foretrukket 70° til 90°C, f.eks. omtrent 80°C og omdannelse av CY-A/X-III gjennomføres passende ved en temperatur fra omtrent 100° til 140°C, mer foretrukket 110° til 130°C, f.eks. omtrent 120°C, f.eks. ved 121°C.

Varigheten av omdannelsesprosedyren vil også variere avhengig av de anvendte betingelser. Det er generelt funnet at et hovedsakelig sfærisk partikkelformet produkt kan oppnås med utgangsmaterial med en partikkelstørrelse i området fra ca. 1 u opp til 20 eller 50 u under anvendelse av betingelser som angitt i det foregående over en periode på fra 1 til 5, f.eks. 2 eller 3 minutter. Hvis lengre tidsperioder anvendes, vil det være passende med rysting, f eks. omrøring, å unngå koalescens.

Det oppnådde produkt omfatter partikkelformet krystallinsk Ciclosporin, f.eks. CY-A/X-I eller CY-A/X-III, idet partiklene er sfæroidale, dvs. har sfæroidal utvendig utseende. For forklaring vises i fig. 1, 2 og 3 representasjoner av veipelektronmikro-grafier av partikkelformet krystallinsk Ciclosporin før og etter omdannelse i samsvar med de generelle prosedyrer i eksempel 5 i det følgende.

Spesifikt:

Fig. 1 er et elektronmikrografi av native CY-A/X-III

mikrokrystaller med en størrelse i det generelle

område fra 3 til 50 u og fremstilt i samsvar med

prosedyrene beskrevet i GB patent nr 2 211 848.

Fig. 2 er et elektronmikrografi av CY-A/X-III i sfæroidal

partikkelform fremstilt fra nativt CY-A/X-III,

nemlig med skjematisk apparisjon som vist i fig. 1, og

Fig. 3 er en forstørrelse av fig. 2.

Som det sees er produktet vist i fig. 2 og 3 sfærisk eller hovedsakelig sfærisk. Den grad hvormed produktpartiklene nærmer seg den sfæriske form kan selvfølgelig variere i avhengighet av betingelsene ved omdannelsen, for eksempel behandlingsvarigheten. Overflaten behøver således ikke nødvendigvis å være fullstendig kontinuerlig eller ensartet. Formen kan også være varierbar avhengig av utøvelse av f.eks. skjærkraft eller gravitasjonskraft som gjerne vil utstrekke eller på annen måte deformere partikler under omdannelse langs én eller flere akser, til å gi et produkt hvori individuelle partikler er f.eks. ellipseformet eller avlange. Betegnelsen "sfæroid" eller "sfæroidal" som anvendt i foreliggende sammenheng skal forstås slik at de omfatter en hvilken som helst form som er sfærisk eller som gjerne vil nærme seg eller tilnærmes den sfæriske form, inkluderende f.eks. elliptisk og avlange sfæroide former og former hvori overflaten ikke er fullstendig regelmessig eller ensartet i utseende. Produktpartikler vil imidlertid foretrukket være sfæriske eller hovedsakelig sfæriske. Overflaten av en slik partikkel vil også foretrukket være regelmessig eller ensartet eller hovedsakelig regelmessig eller ensartet.

Forutsatt at koalescens unngås under omdannelsesprosessen vil størrelsen (dvs. gjennomsnittlig diameter) av sfæroide partikler som fremstilles bli bestemt av partikkelstørrelsen av det anvendte utgangsmaterial. Om ønsket kan gjennomsnittlig partikkelstørrelse også nedsettes under omdannelsen, f.eks. ved ultralydbehandling eller annen høyenergitilførsel. Alternativt kan partikler av et spesielt ønsket størrelsesområde gjenvinnes fra initialt oppnådd mindre homogent material ved bruk av prosedyrer med mikrofiltrering eller sikting. For å begrense koalescens kan det være foretrukket at det som utgangsmaterial anvendes partikkelformet material omfattende native Ciclosporinkrystaller snarere enn krystaller som er blitt f.eks. malt eller knust.

Som det forstås heri er omdannelsesprosessen en hovedsakelig mekanisk prosedyre. Hverken kjemien eller de essensielle krystallegenskaper av Ciclosporin endres idet bare det utvendige utseende av produktet endres.

Krystallinsk Ciclosporin, f.eks. CY-A/X-I eller CY-A/X-III i sfæroidal partikkelform er en ny substansform. Det er også fordelaktig ved fremstilling av nye galeniske former omfattende Ciclosporin som aktiv bestanddel. Spesielt, ved at de har rund form, vil slike partikler i seg selv gjerne ha mindre tendens til å bevirke irritasjon eller skade, f.eks. abrasjon av fine vev eller forverring av den inflammatoriske respons, enn malt partikkelformet eller nativt mikrokrystallinsk material. Ettersom stæroide partikler også har tendens til å ha et minimalt forhold overflate:volum kan slike partikler også forventes å besørge mer sakte Ciclosporinfrigivelse ved tilførselssete og følgelig ha en lengre terapeutisk virkningsvarighet. Ifølge foreliggende oppfinnelse omfatter foretrukne utførelser: C<1>: Krystallinsk Ciclosporin, nemlig CY-A/X-III i sfæroid partikkelform;

C<3>: Et farmasøytisk preparat omfattende krystallinsk Ciclosporin i sfæroid

partikkelform;

Preparater som definert under C<3> i det foregående vil passende omfatte krystallinsk Ciclosporin som angitt i en tilstand egnet for farmasøytisk anvendelse, f.eks. i steril eller hovedsakelig steril tilstand.

Selv om Ciclosporin er tilstede i preparater som definert under C<3> i det foregående i angitt form (dvs. krystallinsk og sfæroidal partikkelform), kan selve preparatene ha en hvilken som helst passende konstitusjon. Preparater som definert under C<3> inkluderer således faste former, som pulvere eller granulater, halvfaste former som geler, kremer og pastaer, så vel som flytende former, f.eks. omfattende den definerte Ciclosporin-komponent suspendert eller dispergert i et farmasøytisk tålbart fortynningsmiddel eller bærer hvori Ciclosporinkomponenten er ikke-oppløselig. Hvor det tilsiktes enteral, f.eks. oral tilførsel, for eksempel CY-A/X-I, kan slike preparater også inkludere kompakterte former, f.eks. tabletter omfattende CY-A/X-I i sfæroidal partikkelform med de individuelle partikler pressformet til en sammenhengende masse, om nødvendig med anvendelse av tilblandede farmasøytisk tålbare bindemidler, fortynningsmidler og lignende. Alternativt kan det sfæroide partikkelformede material være fylt eller presset inn i kapsler.

Foretrukket vil Ciclosporinkomponenten i preparater som angitt under C<3> fullstendig eller hovedsakelig fullstendig bestå av krystallinsk Ciclosporin i sfæroid partikkelform.

Preparater som definert under C<3> i det foregående inkluderer former egnet for topisk tilførsel, f.eks. dermal eller topisk oftalmisk tilførsel, så vel som former for parenteral tilførsel, f.eks. ved injeksjon, inkluderende subkutan eller intramuskulær injeksjon og spesielt intralesjonal eller intraartikulær injeksjon. Slike injiserbare former kan inkludere former som skal ha en forlenget virkningsvarighet, f.eks. depotformer for intramuskulær eller intraartikulær injeksjon og som har fordel av det lave forhold overflate:volum av den definerte aktive bestanddel. Slike former kan også inkludere former for enteral tilførsel, selv om særlig når den aktive bestanddel omfatter CY-A/X-III i sfæroidal partikkelform vil disse være mindre foretrukket.

Preparater som angitt under C<3> i det foregående inkluderer preparater for pulmonal tilførsel, f.eks. av den type eller som omfatter komponenter beskrevet i det foregående i forbindelse med den foreliggende oppfinnelse som definert i det ovenstående. I samsvar med læren for den foreliggende oppfinnelse vil preparater som definert under C<3> i det foregående for pulmonal tilførsel foretrukket omfatte CY-A/X-III snarere enn f.eks. CY-A/X-I, spesielt med hensyn til den økte fare for systemisk resorpsjon når CY-A/X-I anvendes.

Størrelsen av partiklene anvendt i preparater som definert under C<3> i det foregående kan spesielt variere i avhengighet av den tilsiktede tilførselsveg så vel som den ønskede virkning. Hvor således intramuskulær injeksjon for depotvirkning tilsiktes kan således bruk av partikler med større størrelser være mer passende enn i tilfellet med preparater tilsiktet for intraartikulær eller særlig pulmonal tilførsel. Generelt vil hovedandelen av partiklene ha en gjennomsnittlig diameter på <30 eller <20 u, foretrukket <10 u, passende <5 u, f.eks omtrent 3 u, hvorved større diameter kan tåles, f.eks. hvor intramuskulær injeksjon tilsiktes. Passende vil minst 70 %, foretrukket minst 80 %, mer foretrukket minst 85 % eller 90 % av partiklene være i samsvar med de ovennevnte partikkelstørrelseskrav. Minimum partikkelstørrelse vil generelt være mindre kritisk, selv om systemer omfattende høyst 25 %, passende høyst 20 % eller 10 %, av partiklene med en partikkelstørrelse på <0,1 u, <0,3 u eller <0,5 u vil foretrekkes. Samlet gjennomsnittlig partikkelstørrelsesdiameter for krystallinsk Ciclosporin som definert under C<1>, eller som anvendt i preparater som definert under C<3> i det foregående vil således ligge i området fra 0,1, 0,3 eller 0,5 u opp til 10, 20 eller 30 |a.

For pulmonal anvendelse vil partikkelstørrelsen for krystallinsk Ciclosporin som definert under Cl eller som anvendt f.eks. i preparater som definert under C<3>, passende være i samsvar med spesifikasjonene beskrevet i det foregående for pulmonal tilførsel av CY-A/X-III partikkelformede preparater generelt, krystallinsk Ciclosporin, f.eks. CYA/X-III eller CY-A/X-II, i sfæroidal partikkelform, med en AMMPS eller gjennomsnittlig partikkelstørrelsesdiameter i området fra 0,1, 0,5 eller foretrukket 1,0 opp til 10 u, foretrukket opp til 5 u, f.eks. omtrent 3,0 u som særlig passende. Preparater som definert under C<3> i det foregående kan fremstilles analogt med metoden beskrevet for og under anvendelse av hvilke som helst av hjelpestoffene omhandlet for bruk ved fremstillingen av preparatene omfattende CY-A/X-II som angitt i den ovennevnte GB patent nr 2 211 848 A, eller som beskrevet heri i forbindelse med den foreliggende oppfinnelse som definert under Bl eller B2 i det foregående eller i vedføyde eksempel 6.

Oppfinnelsen som definert ovenfor kan benyttes ved behandling av hvilken som helst sykdom eller tilstand for hvilke Ciclosporinterapi er indikert eller passende, spesielt for å bevirke immunosuppresjon eller antiinflarnmatorisk terapi, f.eks. for behandling av hvilken som helst inflammatorisk sykdom eller tilstand med en etiologi som har en autoimmun komponent. Således kan oppfinnelsen anvendes i forbindelse med vedlike-hold av organtransplantat, for eksempel hjerte, lunge, kombinert hjerte-lunge, lever, nyre, pankreas, benmarg, hud eller kornealtransplantat, for behandling av artritt (for eksempel reumatoid artritt, arthritis chronica progrediente og arthritis deformans) så vel som for behandling av autoimmun sykdom, f.eks. hvilke som helst av de spesifikke autoimmune sykdommer for hvilke Ciclospoirnterapi er kjent eller er blitt foreslått, for eksempel autoimmune sykdommer som anført på side 2 i GB patent nr 2 211 848 A. Spesielt kan CY-A/X-III i sfæroid partikkelform også anvendes ved behandling av hvilken som helst sykdom eller tilstand i luftveiene eller lungene som angitt i det foregående, spesielt astma.

Som tidligere indikert vil anvendelse i samsvar med oppfinnelsen av krystallinsk Ciclosporin i sfæroid partikkelform være spesielt fordelaktig ved behandling av inflammatoriske sykdommer eller tilstander f.eks. av ledd eller luftveier eller lunger, som et middel for å unngå eller begrense ytterligere vevskade eller forverring av den inflammatoriske tilstand.

Doser av krystallinsk Ciclosporin i sfæroid partikkelform vil selvfølgelig variere, f.eks. i avhengighet av tilførselsveien, den tilstand som behandles, alvorligheten av tilstanden, individet som skal behandles og den ønskede virkning.

For pulmonal tilførsel, f.eks. for behandling av inflammatoriske eller obstruktive luftveissykdommer, vil passende doser være av den samme eller lignende størrelse som dem som er beskrevet i det foregående i forbindelse med den pulmonale tilførsel av CY-A/X-III generelt. Passende doser eller preparatkonsentrasjoner for dermal eller topisk oftalmisk tilførsel eller for tilførsel ved injeksjon, f.eks. for subkutan, intramuskulær eller annen parenteral injeksjon, spesielt intraartikulær injeksjon, vil være av samme eller lignende størrelse som dem som er beskrevet i forbindelse med tilførsel av CY-A/X-m via disse veger i GB patent nr 2 211 848 A.

Det er nå også funnet at Ciclosporin fremviser overraskende høy oppløselighet i polyklorofluorohydrokarbon-dirvmidler. Spesielt er det uventet funnet at ikke bare amorft Ciclosporin men også CY-A/X-I og CY-A/X-III oppløses lett i slike drivmidler. Dette funn frembyr muligheten med å tilføre Ciclosporin ad pulmonal veg i oppløsning under anvendelse av enkel aerosol-teknikk som lenge kjent og praktisert på området.

Ifølge en foretrukket utførelsesform av foreliggende farmasøytiske preparat tilveiebringes: D: Et farmasøytisk preparat som definert i medfølgende krav 9 og som er kjenne

tegnet ved at det er i oppløsning i et polyklorfluorhydrokarbon.

Selv om oppfinnelsen i forbindelse med ovennevnte drivmiddel gir brukbart alternativ for den pulmonale tilførsel av Ciclosporin, av de grunner som er beskrevet så vel som økologiske betraktninger, vil denne metode for pulmonal tilførsel av Ciclosporin generelt være mye mindre foretrukket. Tilførsel av Ciclosporin i oppløsning vil således ikke ha noen av fordelene ved tilførsel av CYA/X-IH, f.eks. redusert fare for systemisk bivirkning, gunstige pulmonale tilførselskarakteristikker og så videre.

Polyklorofluorohydrokarbon-drivmidler inkluderer hvilke som helst av dem som er kjent på området, f.eks. som beskrevet i "Rompp Chemie Lexikon, 90, erweiterte und neubearbeitete Auflage", publ. Georg Thieme Verlag, Stuttgart + New York (1989) i tabellen på side 701, spesielt triklorofluorometan, diklorofluorometan og 1,1,2-triklorotrifluoroetan [C12FC-CC1F2].

Konsentrasjonen av Ciclosporin i preparater som definert under (D) vil passende være omtrent 2 mg pr. 90 ul polyklorofluorohydrokarbon eller mer. For anvendelsen blir de angitte preparater fylt inn i og avgitt fra vanlige aerosolbeholdere eller bomber som kjent på området under anvendelse av polyklorofluorohydrokarbon-teknologi. Passende daglige doser vil være omtrent tilsvarende dem som er beskrevet i det foregående for pulmonal tilførsel av CY-A/X-III, hvorved høyere Ciclosporintilførsel generelt vil være nødvendig for å kompensere for relativt dårligere pulmonale tilførselskarakteristikker. Anvendelse av den foreliggende oppfinnelse i hvert av dens forskjellige aspekter kan påvises ved standard dyremodeller eller klinisk, f.eks. i samsvar med prosedyrene beskrevet i de etterfølgende eksempler.

Eksempel 1: Innvirkning av CY-A/X-III på allergenindusert

eosinofili i marsvin

Introduksjon:

Eosinofili er karakteristisk for luftveiene i astmatiske pasienter i milde så vel som alvorlige former av sykdommen [Frigas og Gleich, i. Allergy Clin. Immunol., 77, 527-537, (1985)]. Eosinofili er tydelig i bronkoalveolart skyllefluid fra pasienter med atopisk astma og intensiveres ved allergiske (IgE-medierte) reaksjoner. Eosinofili av luftveiene er også uttalt i ikke-atopisk astma og kan intensiveres ved prosedyrer hvori IgE ikke er implisert (f.eks. eksponeringfor aspirin).

1.1 Pulmonal tilførsel:

Flekkede Himalaya-marsvinhanner som veier ca. 300 g sensitiveres overfor ovalbumin (OA) ved i.p. tilførsel av 1 ml av en suspensjon av 10 Fig. OA, 0,25 ml B. pertussis vaksine og Al(OH)3 (2,0 mg) i saltløsning (0,9 % vekt/volum). Prosedyren gjentas 2x med 3 ukers mellomrom og dyrene anvendes 1 uke etter den siste injeksjon.

Prøven gjennomføres ved tilførsel av forstøvet OA (0,01 %) i saltløsning innført i et eksponeringskammer, etter fortynning ned ren luft. Dyrene utsettes for OA ved bare neseinhalering i 60 minutter.

I ubehandlede (kontroll) dyr bevirker OA-behandlingen innflyting av eosinofiler (5-10 ganger) og andre inflammatoriske celler i luftveishulrommet i sensitiverte marsvin, som bestemt ved bronkeolar vasking og celletelling gjennomført på følgende måte: Dyrene drepes ved i.p. injeksjon av pentobarbiton (100 mg/kg). Luftrøret avdekkes og kannuleres. Påfølgende delmengder (10 ml) av Ca<++> og Mg<++> fri Hanks balanserte saltoppløsning inneholdende bovint serumalbun, in (0,3 %), EDTA (10 mm) og HEPES (10 mm) innføres i lungene og aspireres med én gang ved forsiktig sammentrykking av lungevevet. Prosedyren utføres 6x. Aspirasjonsvæske samles ved romtemperatur i Falcon plastrør (60 ml). Væske utvunnet fra de seks vaskinger overstiger vanlig 50 ml (85 %). Cellesuspensjonen sentrifugeres (200 g i 10 minutter), supernatanten kastes og cellepelleten resuspenderes i 1 ml supplert Hanks balansert saltløsning. Totale celletall i samlede eluater bestemmes under anvendelse av en automatisk celleteller. For differensiell celletelling tilsettes 10 (il av den 1 ml cellesuspensjon til 190 ul Turks væske og telling foretas fra utstrykninger farget med "Diff-Quick". Celler identifiseres og telles under oljeneddykning. Et minimum av 500 celler telles pr. utstrykning og den totale populasjon av hver celletype beregnes.

For å bestemme aktiviteten ved inhalering tilføres mikronisert testsubstans via nesekonus med tilførsel fra en børstetilført mikroniserende stralemølle-pulveraerosoljenerator som beskrevet i Bernstein et al "Aerosols: Science, technology and Industrial Application of Airborne Particles", Extended Abstract, utg. B.Y.H. Lin et al, Elsevier Science, New York, 1984. Forsøksdyrene holdes på plass i gjennomstrønnings-eksponeringskarnmer med bare nesen i høyst 15 minutter før behandlingen.

I den foregående testmodell resulterer tilførsel av mikronisert CY-A/X-III [partikkel-størrelse ca. 89 % <3 u] i vesentlig reduksjon i eosinofil- og neutrofiltall ved totalt inhalerte doser på fra 3,0 til 10,0 mg/kg i sammenligning med ubehandlede kontrolldyr.

Tilførsel av en mikronisert 1:1 blanding av amorft Ciclosporin og partikkelstørrelse ca.

90 % < u] gir sammenlignbare resultater.

Ved denne forsøksmodell etableres således CY-A/X-III som ekvipotent eller hovedsakelig ekvipotent til amorft Ciclosporin:CY-A/X-I ved tilførsel ved inhalering.

1.2 Oral tilførsel

Testing gjennomføres i samsvar med prosedyrene beskrevet i det foregående men ved testsubstansen tilført oralt i suspensjon i karboksymetylcellulose 15 min. før behandlingen.

Med denne forsøksmodell vises reduksjon av eosinofil og neutrofil infiltrasjon bare ved oral tilførsel av CY-A/X-III i doser på mer enn 60 mg/kg. Utvetydig inhibering iakttas bare ved doser på over 100 mg/kg f.eks. mellom 100 og 240 mg/kg.

I motsetning til dette iakttas utvetydig inhibering ved oral tilførsel_av en 1:1 blanding av amorft Ciclosporin og CY-A/X-I i doser fra 20 mg/kg og mer, f.eks. mellom 20 og 80 mg/kg.

1.3 Konklusjon

Sammenligning av effektiviteten mellom CY-A/X-III og amorft Ciclosporin.CY-A/X-I tilført oralt indikerer markert reduksjon i systemisk resorpsjon (ca. 3 ganger) i tilfellet av CY-A/X-III. Ettersom doser av CY-A/X-III nødvendige for effektivitet ved den inhalerte tilførsel er hovedsakelig (ca. 10 ganger) lavere enn dem som kreves for effektivitet via oral tilførsel kan effekten av inhalert CY-A/X-III ikke tilskrives resorpsjon som følge av tilsiktet oral tilførsel i løpet av testprosedyren.

Eksempel 2: Systemiske resorpsjonsegenskaper

Ciclosporin tilføres til hanmarsvin (Dunkin-Hartley) med en vekt ca. 300-400 g ved oral veg, i CY-A/X-III form eller i form av en 1:1 blanding av amorft Ciclosporin og CY-A/X-I. I hvert tilfelle skjer tilførsel i gelsuspensjon i karboksymetylcellulose. Forsøksdyrene deles i grupper hvor individuelle grupper mottar Ciclosporin som CY-A/X-III med 4, 20 og 40 mg/kg (grupper 1 til 3), eller amorft Ciclosporin-CY-A/X-I med 4, 20 og 40 mg/kg (grupper 4 til 6). Blodprøver tas før tilførsel av Ciclosporin og 1, 2, 4 og 6 timer etter tilførsel og Ciclospoirnnivåer bestemmes ved screening under anvendelse av standard monoklonale RIA analysemetoder.

Betydelig systemis resorpsjon bestemmes for gruppene (4) til (6) etter ciclosporintilførsel påvist ved bestemte Ciclosporin-blodnivåer. I grupper (1) til (3) bestemmes ingen eller vesentlig redusert påvist resorpsjon etter tilførsel som sammenlignet med gruppene (3) og (4).

Eksempel 3: Inhalerbare galeniske preparater

I hvert av de etterfølgende eksempler anvendes CY-A/X-III i fin partikkelform med gjennomsnittlig AMMPS på fra 0,5 til 10,0, foretrukket 5,0 u, foretrukket ca. 3,0 u eller mindre. Typisk anvendes native CY-A/X-III-krystaller fremstilt i samsvar med prosedyrene i eksemplene 1 eller 2 av den tidligere nevnte GB patent nr 2 211 848 med etterfølgende mikronisering i en kolloidmøUe eller luftstrålemølle til å gi et mikronisert produkt med en gjennomsnittlig AMMPS-størrelse på ca. 9,9 u, 5 u, 3 u eller mindre, f.eks. 2-3 u. Alternativt er materialet nativt mikrokrystallinsk CY-A/X-III med en gjennomsnittlig AMMPS-krystallpartikkelstørrelse på fra 2-10 u, fremstilt ved å gjennomføre krystallisasjon med utøvelse av ultralyd ved fra ca. 10 000 til 30 000 sykler pr. sek., på nytt som beskrevet i GB patent nr 2 211 848.

Det finpartiklede CY-A/X-III-material fylles i en hård gelatinkapsel for innsetting og avgivelse fra en konvensjonell tørrpulver-inhaleringsinnretning.

Komponenter (a) og (b) blandes intimt på konvensjonellmåte og det resulterende homogene pulverprodukt siktes og fylles i en hård-gelantinkapsel for anvendelse som indikert under 3.1 i det foregående.

Komponent (a) suspenderes i et vandig system omfattende komponenter (b) til (f) på konvensjonell måte og den oppnådde suspensjon fylles i beholderen i en konvensjonell forstøvningsinnretning.

Preparater som beskrevet i det foregående er nyttige for pulmonal tilførsel, f.eks. ved behandling av astma.

Eksempel 4: Inhalerings-tilførselsegenskaper av CY-A/X-III

partikkelpreparater

Forsøket gjennomføres under anvendelse av en dobbelt impinger-inriretning som beskrevet i Hallworth et al, J. Pharm. Pharmacol, 39, 966-972 (1987) og metodikk i samsvar med The British Pharmacopoeia 1988, vol. II appendix XVII C (A 204 -A 207). Forsøksmaterial omfatter et strålemalt CY-A/X-III-preparat med 90 % av partiklene med en partikkelstørrelse <10 u. Forsøksmaterial tilføres impinger-innretningen fra en størrelse 3 kapsel under anvendelse av en Boehringer tørrpulverapplikator

Resultater for CY-A/X-III-material viser overraskende høy tilførsel til det nedre impinger eller impingingskammer (jf. Hallworth og British Pharmacopoeia loe. eit.) tilsvarende etilførsel i høyt nivå til lungen. Ved en forsøksrekke blir således ca. 42 % av materialet utnyttet fra det nedre impinger-kammer.

Forbedring av CY-A/X-III-tilførselsegenskaper kan oppnås ved blanding av forsøks-materialet med andre inerte, finpartiklede, inhalerbare eller ikke-inhalerbare fortynningsmidler (f.eks. som beskrevet i det foregående) for å øke eller nedsette den gjennomsnittlige partikkelstørrelse eller densitet for blandingen av CY-A/X-III + fortynningsmiddel.

Eksempel 5: Fremstilling av CY-A/X-IQ i sfæroidal

partikkelform

CY-A/X-III i partikkelform med en partikkelstørrelse fra ca. 3,0 til 40 u og hvori partiklene består av native CY-A/X-III-mikrokrystaller (f.eks. med utseende som vist i fig. 1) i 1 % vandig suspensjon oppvarmes i en autoklav ved 120-121°C ved ca. 2,5 atm. trykk i 2 til 3 minutter. Den oppnådde suspensjon filtreres og partiklene tørkes. Produktpartiklene omfatter CY-A/X-III i hovedsakelig sfærisk form med partikkel-diametere i området fra ca. 3,0 til 40 u (f.eks. med utseende som vist i Fig. 2 og 3).

Ved å gjenta prosessen med et partikkelformet CY-A/X-HI-utgangsmaterial omfattende ultralydbehandlet CY-A/X-III-mikrokrystaller med en partikkelstørrelse fra 1,0 til 5,0 u og en gjennomsnittlig- partikkelstørrelse på ca. 3,0 u og med eller oppliving, f.eks. ved omrøring, av suspensjonen under forløpet av autoklavbehandling, oppnår CY-A/X-III sfæroidal artikkelform med gjennomsnittlig partikkelstørrelse ca. 3,0 u.

Ekvivalente resultater oppnås ved å erstatte utgangsmaterialet med CY-A/X-I i ikke-sfæroid partikkelform.

Eksempel 6: Galeniske preparater omfattende CY-A/X-m eller CY-A/X-I

i sfæroid partikkelform

6.1 Injiserbar form for intralesjonal injeksjon

En suspensjon av CY-A/X-HI i sfæroidal partikkelform med en partikkeldiameter i området fra ca. 3,0 til 40 u, fremstilt i samsvar med prosedyren i eksempel 5, fremstilles under sterile betingelser under anvendelse av de følgende bestanddeler:

Den oppnådde suspensjon fylles i injeksjonsampuller for intralesjonal injeksjon, nyttig ved behandling av psoriasis.

6.2 Injiserbar form av intraartikulær injeksjon

En injiserbar form omfattende CY-A/X-m i sfæroidal partikkelform med en partikkeldiameter i området fra 1,0 til 5,0 u og fremstilt i samsvar med prosedyren i eksempel 5 fremstilles under sterile betingelser under anvendelse av følgende bestanddeler:

Den oppnådde blanding fylles i ampuller nyttige for intrainjeksjon ved behandling av reumatoid artritt.

6.3 Innalerbare ror er for bruk i. eks, ved behandling av astma Preparater fremstilles analogt med eksemplene 3.1 til 3.3 men under anvendelse av CY-A/X-III i sfæroid partikkelform med en gjennomsnittlig AMMPS i området fra 1,0 til 5,0 u, foretrukket ca. 3,0 u eller mindre, og fremstilt i samsvar med prosedyren i eksempel 5. Preparatene siktes og fylles f.eks. i en hård gelatinkapsel for innføring i og

avgivelse fra en konvensjonell tørrpulver-inhaleringsinnretning, nyttig f.eks. for astmaterapi.

Ekvivalente preparater til dem som er beskrevet under 6.1 til 6.3 i det foregående kan fremstilles men ved erstatning av CY-A/X-ffl-komponenten med CY-A/X-I i sfæroidal partikkelform.

Eksempel 7: Fremstilling av et aerosolpreparat omfattende

Ciclosporin i oppløsning i et polyklorofluorohydrokarbon-drivmiddel 1 vektdel Ciclosporin i form av en 1:1 blanding av amorft Ciclosporin og CY-A/X-I eller sort k~Y-A/X-III tilsettes til en blanding omfattende 0,65 vektdel "Span" 85, 21,22 vektdel "Frigen" 113 og 21,13 vektdel "Frigen" 11/12. Ciclosporinkomponenten oppløses i "Frigen"-komponenten til å gi en oppløsning som fylles inn i beholderen i en konvensjonell inhaleringsinnretning i stand til å avgi f.eks. 1,0, 2,0, 5,0 eller 10,0 mg Ciclosporin ved hver utløsning og nyttig f.eks. ved astmaterapi.

Effektiviteten av CY-A/X-III anvendt i samsvar med den foreliggende oppfinnelse, unngåelse av systemisk resorpsjon og andre fordeler som angitt i det foregående kan også påvises ved kliniske forsøk, for eksempel gjennomført som følger:

Kliniske forsøk

Forsøksindivider velges fra pasienter diagnostisert som fremvisende kronisk astma, og inkluderende pasienter som krever regelmessig inntagelse av glukokorikosteroidnedisiner for å oppnå sykdomskontroll. Individer mottar CY-A/X-III i doser på mellom 50 og 200 mg, f.eks. 100, mg/døgn, tilført i delte doser 3 til 4x daglig. CY-A/X-III tilføres i partikkelform omfattende: et pulverpreparat avledet fra strålemalt nativt mikrokrystallinsk CY-A/X-III-material med en AMMPS i området fra 0,5 til 5,0 u, typisk ca. 3,0 u, eller

CY-A/X-III i sfæroidal partikkelform, f.eks. fremstilt i samsvar med prosedyren i eksempel 5 og med en AMMPS i området fra 1,0 til 5,0 u, typisk ca. 3,0 u. CY-A/X-III avgis ad pulmonal veg fra en konvensjonell tørrpulver, innretning for avmålt avgivelse. De følgende parametere måles med forut bestemte mellomrom under forløpet av forsøket: tvangsmessig utåndingsvolum (FEV.), topp utåndingsstrømningstakt (PEFR) og i individer som er følsomme for spesifikke antigener, luftveissobstruksjon etter inhalering av testdoser av antigen. I tillegg overvåkes nødvendig steroid opprettholdelsesdose eller bruk av annen anti-inflammatorisk anti-astmamedisinterapi under forsøket. Bronkeolar vasking (BAL) gjennomføres i deltagende individer før de inngår i forsøket og også ved fullføringen av forsøket, i tilfellet med de lengre forsøksprotokoller, under forløpet derav. Vaskeprøver underkastes screening for forekomst av inflammatoriske celler i partikkelformede eosinofiler. Blodprøver av deltagende personer tas før, under forløpet av (f.eks. med 14 døgns mellomrom) og ved fullføring av forsøket. Alle prøver overvåkes for vanlige parametere så vel som for Ciclosporinkosentrasjoner i helblod (under anvendelse av standard monoklonalt antistoff

RIA).

Resultater for individer som mottar CY-A/X-III sammenlignes med resultater for parallelle grupper av pasienter med sammenlignbar astmatisk status som bare mottar vanlig terapi. Alternativt gjennomføres forsøket som dobbelt blindprøve i parallelle pasientgrupper som mottar (i) CY-A/X-m som beskrevet eller (ii) placebo-pulvermaterial alene. Individuelle forsøk er lagt opp til å foregå over perioder fra 1 uke og mindre opp til 1 til 6 måneder hvor steroidbruk skal overvåkes.

Individer som mottar CY-A/X-m i kliniske forsøk lagt opp som nevnt i det foregående viser forbedring i målte lungefunksjonsparametere, en reduksjon i BAL inflammatorisk celletall, så vel som bestemt progressiv inkremental reduksjon av steroidbruk eller bruk av xantin eller andre anti-inflammatoriske terapier under forløpet av forsøket sammenlignet med kontrollgrupper som ikke mottar CY-A/X-III eller som mottar placebo. Ciclosporin-blodnivåer bestemt i grupper som mottar CY-A/X-m er forholdsvis lave til neglisjerbare. CY-A/X-III-terapi tåles bra uten noen signifikant forekomst av påviste bivirkninger eller i retning av innvirkning på blodserumparametere. Anvendelse av CY-A/X-III er uproblematisk som bestemt ved både uavhengig iakttagelse og subjektive pasientrapporter.

Claims

1. Anvendelse av CY-A/X-III som er en ortorombisk krystallinsk form av ciclosporin og som har følgende krystallgitter: a = 12,7 Å, b = 15,7 Å, c = 36,3 Å, og et volum pr asymmetrisk enhet = 1804 Å<3>, for fremstilling av et farmasøytisk preparat for pulmonal administrasjon.

2. Anvendelse ifølge krav 1, i fremstillingen av et farmasøytisk preparat for bruk i behandlingen av inflammatorisk eller obstruktiv luftveissykdom ved pulmonal administrasjon.

3. Anvendelse ifølge krav 2, hvor sykdommen er astma.

4. Anvendelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-3, hvor CY-A/X-HI er i partikkelform med en AMMPS på mindre enn 10

5. Anvendelse ifølge krav 4, hvor nevnte AMMPS er mindre enn 5 u.

6. Anvendelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-5 i partikkelform, hvor partiklene omfatter native CY-A/X-III-krystaller.

7. Anvendelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-6, hvor CY-A/X-III-krystallene har en sfæroid partikkelform.

8. Anvendelse ifølge krav 7, hvor de sfæroide partiklene har en gjennomsnittlig diameter på mindre enn 30 u.

9. Farmasøytisk preparat, karakterisert ved at det omfatter CY-A/X-HI som definert i hvilket som helst av kravene 1-8 sammen med et farmasøytisk akseptabelt fortynningsmiddel eller bærer derfor.

10. Farmasøytisk preparat ifølge krav 9, karakterisert ved at det er i oppløsning i et polyklorfluorhydrokarbon.