NO310618B1 - Kondenserte piperidinforbindelser, fremstilling og anvendelse derav, samt preparater omfattende slike forbindelser - Google Patents

Description

Den foreliggende oppfinnelse vedrører kondenserte piperi-dinforbindelser, en fremgangsmåte for fremstilling av slike forbindelser, anvendelse av slike forbindelser for fremstilling av medikamenter, samt nitrogenmonoksyd-syntaseinhiberende preparater og farmasøytiske preparater omfattende slike forbindelser.

Oppfinnelsen vedrører en nitrogenmonoksyd-syntaseinhibitor. Mer spesielt vedrører oppfinnelsen en kondensert piperidinforbindelse representert ved formelen (I):

hvor alle symbolene har de samme betydninger som definert i det etterfølgende, eller et syreaddisjonssalt eller et hydrat derav.

Oppdagelsen om at mikrofager, en type immunkompetente celler, produserer en stor mengde nitrater førte til oppdagelsen om at nitrogenmonoksyd (NO) syntetiseres biologisk (Proe. Nati. Acad. Sei., U.S.A., Vol. 82, side 7738 - 7742 1985 og J. Immunol., Vol. 138, side 550 - 565 (1987)). Innen området kretsløpsorganer, ble en substans med en relakserende virkning som frigjøres fra endotelialceller oppdaget og betegnet som en endotelcelle-avledet relakserende faktor (Endothelial-cell derived relaxing factor; EDRF). Det ble senere funnet at substansen av EDRF er NO (Nature, Vol. 327, side 524 - 526

(1987)) .

NO, som det i den senere tid er blitt vist at produseres biologisk, syntetiseres gjennom den følgende rute ved virkningen av en nitrogenmonoksyd-syntase (i det etterfølgende forkortet som NOS) på et L-arginin substrat.

NOS inkluderer minst et konstitutivt isozym (endotel-type og nevronal-type) og et induserbart isozym. Endotel NOS forekommer hovedsakelig i endotelceller, og dens aktivitet kon-trolleres av en intercellulær kalsiumkonsentrasjon. Nevronal NOS forekommer i sentralnerveceller, perifere nerveceller, p-celler i celleøyer, gastrointestinalnerver, medulla av binyrene, renal macula densa, etc, og dens aktivitet kon-trolleres av en intercellulær kalsiumkonsentrasjon på samme måte som den endotel-type NOS.

i Den konstitutive NOS (inklusive endotel-type og neuronal-type, i det etterfølgende forkortet som c-NOS) foreligger alltid i cellene i mengder som nesten ikke forandrer seg under fysiologiske tilstander. På den annen side, kan indu-serbar NOS (i det etterfølgende forkortet som i-NOS) fore-ligge i hepatocytter, neutrofile leukocytter, makrofager,"

glatte muskler, fibroblaster, mesangiumceller, gastrointes-tinal elifelium, p-celler i celleøyer, vaskulære glattmuskel-celler, gliocytter etc. Vanligvis observeres den induserbare

NOS ikke i celler men induseres ved stimulering av endotok-siner og/eller forskjellige cytokiner.

NO som er syntetisert gjennom virkningen av NOS utviser en rekke forskjellige virkninger, f.eks. vaskulær relaksasjon, inhibering av blodplateaggregasjon og -adherens, inhibering av leukocyttadherens og -migrasjon, inhibering av sympatisk aktivitet, endotoksinsjokk, endotoksin- eller cytokinindusert hypotensjon, virkning som en neurotransmitter, ischemiske cerebrale celleforstyrrelser, antitumorvirkning, baktericid virkning, induksjon av autoimmune sykdommer, insulinavhengig diabetes mellitus eller artritt, induksjon av vevsforstyrrelser etter transplantasjon og graftrejeksjon, o.l.

En NO-syntaseinhibitor (NOS-inhibitor) er ikke kun anvendbar i analysering av de in vivo fysiologiske aktiviteter av NO men er forventet som et terapeutisk middel for sjokk eller ischemiske sykdommer. Forskjellige NOS inhibitorer har derfor i den senere tid blitt utviklet.

For eksempel er argininanaloger, slik som Nu-monometyl-L-arginin (L-NMMA) , Nco-nitro-L-arginin (L-NNA) , Nu-amino-L-arginin (L-NAA) og Nu-iminoetylornitin (L-NIO), kjent som et substratkompetitivt middel. Kjente kofaktor-kompetitive inhibitorer inkluderer difenylenjodonium (DPI), di-2-tienyl-jodonium (DTI) og kalsineurin. Kjente induksjonsinhibitorer for gentranskripsjon inkluderer kortikosteroid, TGFp, IL-4 og IL-10.

WO 96/35677 omhandler at en forbindelse representert ved formel (A) vist nedenfor, eller et salt derav, og en farma-søytisk tålbar ester derav er en nitrogenmonoksyd-syntaseinhibitor:

hvor R<1A> er valgt fra hydrogen, lavere alkyl, lavere alkenyl, lavere alkynyl, alkyloksy, tioalkoksy, cykloalkyl, heterocyklyl og aryl, som eventuelt kan være substituert med lavere alkyl, lavere alkenyl, lavere alkynyl, cykloalkyl, heterocyklyl, aryl, hydroksy, lavere alkoksy, aryloksy, tiol, lavere tioalkoksy, halogen, cyano, nitro, amino, alkylamino, dialkylamino, aminoalkyl, dialkylaminoalkyl, arylamino, aminoaryl, alkylaminoaryl, acylamino, karboksy, karboksy-alkyl, CONR10AR<11A>, S(O)R10\ S(O)2<R10A>, SO2NR<1>0AR<11A>, PO (OR10A) (0R11A) , amidino, guanidino, hvor alle de nevnte substitusjoner eventuelt kan være substituert med en eller flere av de følgende: halogen, lavere alkyl, amino, alkylamino, dialkylamino, aminoalkyl, aminoacyl, karboksyl, karboalkoksy, karboaryloksy, karboalkylaryloksy, hydroksy, lavere alkoksy, S(O)R<10A>, S(O)2R<10A>, amidino, guanidino,

X<A> = NR<2A>, 0, S, SO, S02, (CH2)pA, CH=CH,

pA = 0 til 6,

AA = NR<3A>, 0, S, SO, S02, (CH2)qA, CH=CH,

= 0 til 6,

BA = NR<4A>, 0, S, SO, S02, (CH2)vA eller CH=CH,

) = 0 til 6,

R<2A> = hydrogen, lavere alkyl, aryl, heterocyklyl,

R<3A> = hydrogen, lavere alkyl, aryl, heterocyklyl,

R4<A> = hydrogen, lavere alkyl, aryl, heterocyklyl,

R<5A>, R<6A> og R<7A> er uavhengig valgt fra hydrogen, lavere alkyl, 5 lavere alkenyl, lavere alkynyl, heterocyklyl, hydroksy, lavere alkoksy, tiol, lavere tioalkoksy, S(0)R9A, S (0)2R9A, halogen, nitro, amino, alkylamino, dialkylamino, aminoalkyl, dialkylaminoalkyl, arylamino, aminoaryl, alkylaminoaryl, acylamino, karboksyl, karboalkoksy, karboaryloksy, karboaryl-alkyloksy, cyano, aminokarbonylalkoksy, aminokarbonylamino, aminokarbonylaminoalkyl, haloalkyl, SO2NR10<A>R<11A>, hvor alle de nevnte substitusjoner eventuelt kan være substituert med en eller flere av de følgende: lavere alkyl, amino, alkylamino, dialkylamino, aminoalkyl, aminoacyl, karboksyl, karboalkoksy, karboaryloksy, karboalkylaryloksy, hydroksy, lavere alkoksy, R5A og R6<A> kan eventuelt sammen danne et alicyklisk hetero-karbon, heterocyklisk eller aromatisk hydrokarbon og den nevnte eventuelt dannede ring kan eventuelt være substituert med en eller flere av de følgende: lavere alkyl, lavere alkenyl, lavere alkynyl som eventuelt kan være substituert med karboksyl, karboalkoksy, karboaryloksy, karboksyalkyl-aryloksy og lavere alkoksy,

R<8A>= hydrogen, hydroksy, O-alkyl,

R 9 A = hydrogen, hydroksy, O-alkyl,

R<10A>= hydrogen, lavere alkyl, alkylaryl, aryl,

R<1>1<A>= hydrogen, lavere alkyl, alkylaryl, aryl,

R10<A> og R<11A> kan sammen være alkylen, hvilket resulterer i en N-holdig heterosyklus.

WO 95/11231 og WO 96/14844 lærer også at lignende forbindelser tjener som en nitrogenmonoksyd-syntaseinhibitor.

Som et resultat av omfattende undersøkelser er det i oppfin-nelsens sammenheng funnet at forbindelser representert ved formel (I) inhiberer en nitrogenmonoksyd-syntase, særlig i-NOS. Den foreliggende oppfinnelse er blitt fullført på basis av dette funn.

Den foreliggende oppfinnelse vedrører således en kondensert piperidinforbindelse som er kjennetegnet ved at den representeres ved formel (I):

hvor -R<1-> representerer en 3- eller 4-leddet karbocyklisk ring sammen med det karbonatom eller -atomer hvortil den er bundet, idet den karbocykliske ring er kondensert til side d eller e av piperidinringen eller bundet til 4-stillingen av piperidinringen gjennom en spiro-sammenslutning, R2 representerer en C^g alkylgruppe,

R3 representerer en C1.6 alkylgruppe, en C2.6 alkenylgruppe, en C2_6 alkynylgruppe eller et halogenatom,

R4 representerer et hydrogenatom, en amino-Cx_4 alkylgruppe eller en fenyl-C1_4 alkylgruppe som kan være substituert med en amino-C1.4 alkylgruppe,

i representerer et helt tall 0 til 3,

n representerer et helt tall 0 til 3, og

de flere R2 'er eller R3 1 er er like eller forskjellige,

eller et syreaddisjonssalt derav eller et hydrat derav.

Den foreliggende oppfinnelse vedrører også en fremgangsmåte for fremstilling av en kondensert piperidinforbindelse representert ved formel (I) i samsvar med oppfinnelsen, som er kjennetegnet ved at den omfatter å underkaste en forbindelse representert ved formel (II) :

hvor R<5> representerer en C1_6 alkylgruppe, og andre symboler er som angitt i det forregående, for en amidineringsreaksjon med ammoniakk og ammoniumklorid eller en forbindelse representert ved formel (III) :

hvor R<41> representerer en amino-C1_4 alkylgruppe eller en karbocyklisk ring-C.^ alkylgruppe som kan være substituert med en amino-C14 alkylgruppe.

Den foreliggende oppfinnelse vedrører også et nitrogenmonoksyd- syntaseinhiberende preparat som er kjennetegnet ved at det omfatter, som en aktiv bestanddel, et kondensert piperidin representert ved formel (I) som angitt i det foregående, et ikke-toksisk salt derav eller et hydrat derav sammen med en bærer eller fortynningsmiddel.

Den foreliggende oppfinnelse vedrører også et farmasøytisk preparat som er kjennetegnet ved at det omfatter, som en aktiv bestanddel, et kondensert piperidin representert ved formel (I) som angitt i det foregående, et ikke-toksisk salt derav eller et hydrat derav sammen med en farmasøytisk tålbar bærer eller fortynningsmiddel.

Den foreliggende oppfinnelse vedrører også anvendelse av en forbindelse representert ved formel (I) som angitt i det foregående, et ikke-toksisk salt derav eller et hydrat derav i fremstilling av et medikament for behandling og/eller forebygging av sykdommer indusert av en nitrogenmonoksyd-syntase.

Den foreliggende oppfinnelse vedrører også anvendelse av en forbindelse representert ved formel (I) som angitt i det foregående, et ikke-toksisk salt derav eller et hydrat derav i fremstilling av et medikament for behandling og/eller forebygging av septikemi, endotoksinsjokk, myokarditt, hjertesvikt, multippel organsvikt, systemisk inflammatorisk responssyndrom, sjokk, tuberkulose, hypotensjon, revmatisk inflammasjon, kronisk artikulær revmatisme, arthritis deformans, ulcerøs kolitt, stress-indusert peptisk ulcus, Chrons sykdom, autoimmune sykdommer, vevsforstyrrelser og graftrejeksjon etter transplantasjon, forstyrrelser i reperfusjon etter ischemi, akutt obstruksjon av koronar-mikroblodkar, sjokk-indusert obstruksjon av blodkar, disseminert intravaskulært koagulasjonssyndrom (DIC), cerebrale ischemiske forstyrrelser, arteriosklerose, pernisiøs anemi, Fanconi-anemi, sigdcelleanemi, pankreatitt, nefrotisk syndrom, leishmaniasis, glomerulonefritt, insulin-avhengig diabetes mellitus, hepatisk porfyri, alkoholisme, Parkinsons" sykdom, kronisk levkemi, akutt levkemi, tumor, bivirkninger av anti-cancermidler, dyspnesyndrom hos barn eller voksne, pulmonal emfysem, Alzheimers sykdom, disseminert sklerose, vitamin E-mangel, aldring, solforbrenthet, muskulær dystrofi, katarakt, influensainfeksjon, malaria, AIDS, strålingsskade eller brannskade.

Den foreliggende oppfinnelse vedrører også anvendelse av en forbindelse representert ved formel (I) som angitt i det foregående, et ikke-toksisk salt derav eller et hydrat derav i fremstilling av et medikament for forbedring av effektiviteten av in vitro fertilisering.

I formel (I) er den 3- eller 4-leddede karbocykliske ring dannet av -R<1-> og det karbonatom eller -atomer hvortil den er bundet er en cyklopropanring eller en cyklobutanring.

Forbindelsene representert ved formel (I) er delt i dem representert ved formler (IA) og (IB) hvori en kondensert ring er på side e av piperidinringen, dem representert ved formler (IC) og (ID) hvori en kondensert ring er på side d av piperidinringen, og dem representert ved formler (IE) og (IF) hvori en spiro-ring er ved 4-stillingen av piperidinringen. C1_6 alkylgruppen representert ved R<2> eller R<3> inkluderer metyl, etyl, propyl, butyl, pentyl, heksyl og isomerer derav.

C1_4 alkyldelen i R4 inkluderer metyl, etyl, propyl, butyl og isomerer derav.

C2_6 alkenylgruppen representert ved R<3> inkluderer vinyl, propenyl, butenyl, pentenyl, heksenyl og isomerer derav.

C2_6 alkynylgruppen representert ved R<3> inkluderer etynyl, propynyl, butynyl, pentynyl, heksynyl og isomerer derav.

Halogenatomet representert ved R<3> inkluderer fluor, klor, brom og jod.

Forbindelsene representert ved formel (I) og forbindelser representert ved formel (I<1>) er ekvivalent med hverandre som illustrert under.

hvor alle symbolene er som definert i det foregående.

Med mindre annet er angitt, er alle de mulige isomerer av forbindelsene inkludert innenfor rammen av den foreliggende oppfinnelse. For eksempel inkluderer alkylgruppen en gruppe med rett kjede og en med forgrenet kjede. Alle isomerene henført til et asymmetrisk karbonatom av f.eks. en forgrenet alkylgruppe er også inkludert.

Forbindelsen representert ved formel (I) kan omdannes til sitt syreaddisjonsalt på en konvensjonell måte. Det er ønskelig at syreaddisjonssaltet er ikke-toksisk og vann-oppløselig. Egnede syreaddisjonssalter inkluderer uorganiske syresalter (f.eks. hydroklorid, hydrobromid, hydrojodid, sulfat, fosfat, nitrat), og organiske syresalter (f.eks. acetat, laktat, tartrat, oksalat, fumarat, maleat, citrat, benzoat, metansulfonat, etansulfonat, benzensulfonat, toluen-sulfonat, isetionat, glukuronat, glukonat).

Forbindelsen med formel (I) eller et salt derav kan omdannes til sitt hydrat på en kjent måte.

Fremgangsmåte for fremstilling av forbindelsen i samsvar med oppfinnelsen:

Forbindelsen med formel (I) i samsvar med den foreliggende oppfinnelse kan fremstilles ved å underkaste en forbindelse representert ved formel (II) :

hvor R<5> representerer en C1_6 alkylgruppe, og de andre symboler er som definert i det foregående,

for en amidineringsreaksjon.

En amidineringsreaksjon er kjent. Den utføres ved f.eks. å reagere forbindelsen med formel (II) med ammoniakk og ammoniumklorid eller en forbindelse representert ved formel

(III) :

H2N-R<41> (III)

hvor R<41> representerer en amino-C1_4 alkylgruppe eller en karbocyklisk ring-C1_4 alkylgruppe som kan være substituert med en amino-C1_4 alkylgruppe,

i et alkohol-løsningsmiddel (f.eks. metanol, etanol, isopropanol) ved 0 til 150°C.

Forbindelsen representert ved formel (II) fremstilles gjennom reaksjonsskjemaer A til F som er vist i det etterfølgende i samsvar med typene av R<1> og R<3>. Symbolene anvendt i reak-sjonsskjemaene er som definert i det foregående eller har de følgende betydninger:

R<21>: hydrogen eller C^g alkylgruppe,

R<22>: hydrogen eller Cx_ 6 alkylgruppe,

R2<3>: hydrogen eller C1^ 6 alkylgruppe,

R<31>: C1_6 alkylgruppe,

R<32>: C1_ 6 alkylgruppe,

X1: halogen,

X2: halogen,

X<1>0: halogen,

Bu3SnH: tributyltinnhydroksyd,

Ph3SnH: trifenyltinnhydrid,

AIBN: 2,2'-azobisisobutyronitril,

BF3 -OEt2: bortrifluorid-dietyleter-kompleks,

PhSMe: tioanisol,

TFA: trifluoreddiksyre,

Bu2CuLi: dibutylkobberlitium,

HMPA: heksametylfosforamid,

mCPBA: m-klorperbenzosyre,

Aliquat-336 : trikaprylylmetylammoniumklorid,

PMB: p-metoksybenzyl.

Utgangsforbindelsene anvendt i reaksjonsskjemaer A til F er kjente eller kan lett fremstilles fra kjente forbindelser ved hjelp av kjente prosesser. Andre utgangsmaterialer eller reagenser som anvendes i den foreliggende oppfinnelse er også kjente eller kan lett fremstilles ved hjelp av kjente prosesser .

Reaksjonsproduktet oppnådd i hver reaksjon som er beskrevet i den foreliggende oppfinnelse kan renses ved hjelp av almin-nelige rensemetoder slik som destillasjon under atmosfære-trykk eller redusert trykk, høyytelses-væskekromatografi på silikagel eller magnesiumsilikat, tynnsjiktskromatografi, kolonnekromatografi, vasking, rekrystallisasjon osv. Rensingen kan utføres for hver reaksjon eller etter en serie av noen få reaksjoner.

Anvendelse i farmasøytiske preparater:

Forbindelsene med formel (I) og deres syreaddisjonssalter og hydrater derav har en inhiberende virkning på nitrogenmonoksyd- syntase. De er derfor forventet å være anvendbare i behandling og/eller forebygging av sykdommer som er indusert av en nitrogenmonoksyd-syntase, f.eks. septikemi, endotoksinsjokk, myokarditt, hjertesvikt, multippel organsvikt, systemisk inflammatorisk responssyndrom, sjokk, tuberkulose, hypotensjon, revmatisk inflammasjon, kronisk artikulær revmatisme, arthritis deformans, ulcerøs kolitt, stress-indusert peptisk ulcus, Chrons sykdom, autoimmune sykdommer, vevsforstyrrelser og graftrejeksjon etter transplantasjon, forstyrrelser i reperfusjon etter ischemi, akutt obstruksjon av koronar-mikroblodkar, sjokk-indusert obstruksjon av blodkar (disseminert intravaskulært koagulasjonssyndrom (DIC), etc), cerebrale ischemiske forstyrrelser, arteriosklerose, pernisiøs anemi, Fanconi-anemi, sigdcelleanemi, pankreatitt, nefrotisk syndrom, leishmaniasis, glomerulonefritt, insulin-avhengig diabetes mellitus, hepatisk porfyri, alkoholismer Parkinsons sykdom, kronisk levkemi, akutt levkemi, tumor, bivirkninger av anti-cancermidler, dyspnesyndrom hos barn eller voksne, pulmonalt emfysem, Alzheimers sykdom, disseminert sklerose, vitamin E-mangel, aldring, solbrenthet, muskulær dystrofi, katarakt, influensainfeksjon, malaria, AIDS, strålingsskade og brannskade, og for forbedring av effektiviteten av in vitro fertilisering (prøverørsbefrukt-ning) .

Når en effektiv mengde av forbindelsene i samsvar med den foreliggende oppfinnelse, ikke-toksiske salter derav og hydrater derav anvendes for de ovenfor beskrevede formål, administreres de vanligvis til mennesker eller dyr oralt eller ikke-oralt og systemisk eller topisk. Doseringen vari-erer avhengig av alderen og kroppsvekten til pasienten, symp-tomene, effekten av behandlingen, administrasjonsruten, behandlingsperioden o.l. Forbindelsen administreres vanligvis oralt ved et dosenivå på 1 mg til 1000 mg/dose en eller flere ganger pr. døgn for en voksen eller ikke-oralt (fore-trukket intravenøst eller intracerebral-ventrikulært) ved et dosenivå på 100 /zg til 100 mg/dose en eller flere ganger pr. døgn for en voksen. Siden doseringen avhenger av forskjellige faktorer som angitt i det foregående kan lavere doser være tilstrekkelig, eller høyere doser kan være påkrevet.

Ved administrering av forbindelsen ifølge den foreliggende oppfinnelse, er denne formulert til faste preparater, flytende preparater eller andre preparater for oral administrasjon eller injiserbare preparater, utvortes preparater, suppositorier, etc. for ikke-oral administrasjon.

De faste preparater for oral administrasjon inkluderer

tabletter, piller, kapsler, pulvere og granuler. De faste preparater fremstilles ved blanding av minst en aktiv bestanddel med minst ett inert fortynningsmiddel, slik som laktose, mannitol, glukose, hydroksypropylcellulose, mikro-krystallinsk cellulose, stivelse, polyvinylpyrrolidon, magne-siummetasilikataluminat, etc.

De faste preparater kan inneholde alminnelig anvendte addi-tiver bortsett fra det inerte fortynningsmiddel, slik som smøremidler (f.eks. magnesiumstearat), desintegrasjonsmidler

(f.eks. cellulose-kalsiumglykolat), oppløsningshjelpemidler (f.eks. arginin, glutaminsyre, asparaginsyre), og stabili-seringsmidler (f.eks. human serumalbumin, laktose).

Tablettene eller pillene kan om ønsket være belagt med en film av en gastrisk eller enterisk substans (f.eks. sukrose, gelatin, hydroksypropylcellulose, hydroksypropylmetylcellu-lose-ftalat).

Kapslene inkluderer harde kapsler og myke kapsler.

De flytende preparater for oral administrasjon inkluderer oppløsninger, emulsjoner, suspensjoner, siruper og eliksirer. De flytende preparater for oral administrasjon kan inneholde generelt anvendte inerte fortynningsmidler (f.eks. renset vann, etanol). Om ønsket kan de flytende preparater inneholde adjuvanser, slik som fuktemidler og suspensjonsmidler, søtningsmidler, smaksmidler, aromamidler og antiseptiske midler i tillegg til de inerte fortynningsmidler.

Andre preparater for oral administrasjon inkluderer sprayer inneholdende en eller flere aktive bestanddeler, som er fremstilt på alminnelig måte. Sprayer kan inneholde stabilise-ringsmidler (f.eks. natriumsulfitt) og buffere for å gjøre preparatet isotonisk (f.eks. natriumklorid, natriumcitrat, sitronsyre) såvel som inerte fortynningsmidler. Sprayene kan være fremstilt ved hjelp av metodende beskrevet i US-patenter 2.868.691 og 3.095.355.

De injiserbare preparater for ikke-oral administrasjon inkluderer sterile vandige eller ikke-vandige oppløsninger, suspensjoner eller emulsjoner.

De injiserbare preparater fremstilles ved blanding av minst en aktiv bestanddel med minst ett inert vandig fortynningsmiddel (f. eks. destillert vann for injeksjoner, fysiologislc saltløsning) eller inert ikke-vandig fortynningsmiddel (f.eks. propylenglykol, polyetylenglykol, olivenolje, etanol, Polysorbate 80 (registrert handelsnavn)). De kan videre inneholde antiseptiske midler og adjuvanser, slik som fuktemidler, emulgeringsmidler, dispergeringsmidler, stabilise-ringsmidler (f.eks. humant serumalbumin, laktose), oppløs-ningshjelpemidler (f.eks. arginin, glutaminsyre, asparaginsyre, polyvinylpyrrolidon), o.l.

De resulterende flytende preparater steriliseres vanligvis ved filtrering gjennom et bakteriefangende filter, etc, inn-lemmelse av baktericider eller bestråling. Det steriliserte preparat kan bringes i fast form ved f.eks. frysetørking for å oppnå et fast preparat, som oppløses i aseptisk vann eller aseptisk fortynningsmiddel ved bruk.

Den foreliggende oppfinnelse vil nå illustreres mer detaljert med henvisning til referanseeksempler, fremstillingseksempler, formuleringseksempel og testeksempler. De eluerende løs-ningsmidler eller utviklende løsningsmidler som anvendes i kromatografisk separasjon er vist i parentes, med forhold gitt på volumbasis.

Referanseeksempel 1

dl-trans-3-okso-5-metyl-7,7-dibrom-2-(p-metoksybenzyl)-2-azabicyklo[4.1.0]heptan:

Til en blandet oppløsning av 1,6 g 4-metyl-l-(4-métoksy-fenylmetyl)-1,2,3,4-tetrahydropyridin-2-on, 20 ml bromoform og 0,05 g Aliquat-336 ble det tilsatt 6,4 g av en 50% vandig natriumhydroksydoppløsning i en argonatmosfære. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 24 timer. Etter fullførelse av reaksjonen ble 20 ml av en mettet vandig ammoniumkloridoppløsning tilsatt til reaksjonsblandingen, og blandingen ble ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble vasket, tørket og konsentrert under redusert trykk. Resten ble renset ved hjelp av silikagel-kolonnekromatografi til å gi 1,68 g av den i overskriften angitte forbindelse, som hadde de følgende fysiske egenskaper.

TLC (tynnsjiktskromatografi): Rf 0,38 (heksan:etylacetat = 2:1),

NMR (CDC13) : 7.29 (2H, d, J=8.4Hzj, 6.89 (2H, d,

J=8.4Hz), 5.46 (1H, d, J=14.8Hz), 3.81 (1H, d, J=14.8Hz),

3.81 (3H, s) , 2.98 (1H, d, J=9.8Hz), 2.40-2.00 (3H, m) ,

1.77 (1H, dd, J=9.8, 5.4Hz), 1.26 (3H, s,J=4.6Hz)

Referanseeksempel 2

dl-trans-3-okso-5,7,7-trimetyl-2-(p-metoksybenzyl)-2-azabicyklo[4.1.0] heptan:

Til en suspensjon av 4,82 g kobbertiocyanat i 30 ml vannfri dietyleter ble det dråpevis tilsatt 77 ml av en 1,03 M opp-løsning av metyllitium i dietyleter ved -78°C i en argonatmosfære. Temperaturen av reaksjonsblandingen ble hevet til - 10°C i løpet av en periode på 1,5 timer under omrøring av blandingen og deretter senket til -2 0°C. En oppløsning av 2,0 g av forbindelsen fremstilt i referanseeksempel 1 i 40 ml dietyleter ble dråpevis tilsatt dertil. Til reaksjonsblandingen ble det videre tilsatt 1,4 ml heksametylfosforamid, etterfulgt av omrøring ved -20°C i 1,5 timer." Reaksjonsblandingen ble avkjølt til -50°C, og 10 ml metyl-jodid ble tilsatt dertil, etterfulgt av omrøring i ytterligere 3 0 min. En mettet vandig ammoniumkloridoppløsning ble tilsatt dertil, og reaksjonsblandingen ble filtrert under anvendelse av Celite. Filtratet ble vasket, tørket og konsentrert under redusert trykk. Resten ble renset ved hjelp av silikagel-kolonnekromatografi til å gi 1,0 g av den i overskriften angitte forbindelse, som hadde de følgende fysiske egenskaper.

TLC: Rf 0,55 (heksan:etylacetat = 1:1)

NMR (CDCI3) : 6 7.22 (2H, d, J=8.8Hz), 6.85 (2H, d,

J=8.8Hz), 5.14 (1H, d, J=14Hz), 3.79 (1H, d, J=14Hz),

3.79 (3H, s) , 2.29-2.01 (3H, m) , 1.78 (1H, m) , 1.10 (3H,

d, «7—6. 6Hz) , 1.00 (3H, s) , 0.86 (3H, s) , 0.69 (1H, dd,

J=8.6Hz, 6.2Hz)

Referanseeksempel 3

dl-trans-3-okso-5,7,7-trimetyl-2-azabicyklo[4.1.0] neptan:

Til en oppløsning av 1,44 g av forbindelsen fremstilt i referanseeksempel 2 i 2,3 ml anisol ble det tilsatt 5,3 ml av et bortrifluorid-dietyleter-kompleks i en argonatmosfaere, og blandingen ble omrørt ved 10 0°C i 3 7 timer. Etter avkjøling ble reaksjonsblandingen helt i isvann og ekstrahert med kloroform. Det organiske laget ble vasket med en mettet vandig natriumhydrogenkarbonatoppløsning, tørket og konsentrert under redusert trykk. Resten ble renset ved hjelp av silikagelkolonnekromatografi til å gi 410 mg av den i overskriften angitte forbindelse, som hadde de følgende fysiske egenskaper.

TLC: Rf 0,15 (heksan:etylacetat = 1:2),

NMR (CDCI3) : 8 5.80 (1H, br), 2.36 (1H, d, J=8.4Hz),

2.14 (1H, dd, J=14Hz, 4Hz), 1.98 (1H, dd, J=14Hz, 12Hz),

1.73 (1H, m), 1.15 <3H, d, J=6.6Hz), 1.04 <3H, s), 0.99

(3H, s), 0.71 (1H, dd, J=8.4Hz, 6Hz)

Referanseeksempel 4 dl-trans-3-etoksy-5,7,7-trimetyl-2-azabicyklo[4.1.0]hept-2-en:

Til en oppløsning av 400 mg av forbindelsen fremstilt i referanseeksempel 3 i 0,5 ml vannfritt metylenklorid ble det tilsatt 1,5 ml av en 2,0 M metylenkloridoppløsning av et Meerweins reagens i en argonatmosfære, og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 15 timer. Konsentrering av reaksjonsblandingen under redusert trykk ga den i overskriften angitte forbindelse, som ble anvendt for den etterfølgende reaksjon uten rensing.

Fremstillingseksempel 1

dl-trans-3-imino-5,5,7-trimetyl-2-azabicyklo[4.1.0] heptan-monohydroklorid:

Til forbindelsen oppnådd i referanseeksempel 4 ble det tilsatt 0,5 ml absolutt etanol i en argonatmosfære. Etter omrøring i 10 min. ble 3 ml av en mettet etanolisk oppløsning av ammoniakk tilsatt dertil, etterfulgt av omrøring i 8 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk, og kloroform ble tilsatt til konsentratet. Oppløs-ningen ble filtrert, og filtratet ble konsentrert under redusert trykk. Resten ble renset ved hjelp av silikagel-kolonnekromatografi. Den resulterende oljeaktige substans ble oppløst i kloroform, og oppløsningen ble vasket suksessivt med en fortynnet vandig natriumhydroksydoppløsning og en mettet vandig natriumkloridoppløsning, og tørket. Til opp-løsningen ble det tilsatt 1 ml 4 N saltsyre, og oppløsningen bl,e omrørt i 3 0 min. , etterfulgt av konsentrering under redusert trykk. Resten ble renset ved hjelp av silikagel-kolonnekromatografi til å gi 125 mg av den i overskriften angitte forbindelse, som hadde de følgende fysiske egenskaper.

TLC: Rf 0,4 6 (kloroform:metanol:eddiksyre = 15:2:1),

NMR (DMSO-d6) : 5 9.40 (1H, br), 8.99 (1H, br), 8.71 (1H,

br), 2.74 (1H, dd, J=15Hz, 3Hz), 2.45 (1H, d, J=8Hz),

2.10 (1H, m), 1.74 (1H, m), 1.22 (3H, d, J=6.6Hz), 1.07

(3H, s), 0.99 (3H, s), 0.83 (1H, dd, J=8Hz, 6Hz)

Fremstillingseksempel l(a)

dl-trans-3-imino-l,5,7,7-tetrametyl-2-azabicyklo[4.1.0]-heptan-monohydroklorid:

Den i overskriften angitte forbindelse med de følgende fysiske egenskaper ble oppnådd på samme måte som i referanseeksempler 1 til 4 og fremstillingseksempel 1.

TLC: Rf 0,49 (kloroform:metanol:eddiksyre = 20:4:1),

NMR (DMSO-d6): 6 9.80 (1H, br), 9.06 (1H, br), 8.57 (1H,

br), 2.42-2.17 (2H, m), 1.67 (1H, m), 1.36 (3H, s), 1.13

(3H, d, J=5.8Hz), 1.12 (3H, s), 0.90 (3H, s), 0.59 (1H, d, J=5.6Hz) _

Referanseeksempel 5

dl-trans-3-oks"o-5, 7-dimetyl-2- (p-metoksybenzyl) -2-azabicyklo-[4.1.0]heptan:

Til en suspensjon av 6,03 g kobbertiocyanat i 35 ml vannfri dietyleter ble det dråpevis tilsatt 96 ml av en 1,03 M opp-løsning av metyllitium i dietyleter ved -78°C i en argonatmosfære. Temperaturen av reaksjonsblandingen ble hevet til - 10°C i løpet av en periode på 1,5 timer under omrøring av blandingen og deretter senket til -20°C. En oppløsning av 2,5 g av forbindelsen fremstilt i referanseeksempel 1 i 45 ml vannfri dietyleter ble dråpevis tilsatt dertil, og blandingen ble omrørt ved -2 0°C i 1,5 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til -50°C, og en mettet vandig ammoniumkloridopp-løsning ble tilsatt dertil, etterfulgt av filtrering ved anvendelse av Celite. Filtratet ble vasket suksessivt med fortynnet vandig ammoniakk om en mettet vandig natriumklorid-oppløsning, tørket og konsentrert under redusert trykk. Resten ble renset ved hjelp av silikagel-kolonnekromatografi til å gi 636 mg av den i overskriften angitte forbindelse, som hadde de følgende fysiske egenskaper.

TLC: Rf 0,38 (heksan:etylacetat = 1:1),

NMR (CDC13) : 6 7.23 (2H, d, J=8.8Hz), 6.85 (2H, d,

J=8.8Hz), 4.76 (1H, d, J=14.2Hz), 4.36 (1H, d, J=14.2Hz),

3.80 (3H, s) , 2.28-2.04 (3H, m) , 1.73 (1H, m) , 1.13 (3H,

d, J=6.6Hz), 0.91 (3H, d, J=6.2Hz), 0.68 (1H, m) , 0.57

(1H, m)

Referanseeksempel 6

dl-trans-3-okso-5,7-dimetyl-2-azabicyklo[4.1.0]neptan:

Til en oppløsning av 730 mg av forbindelsen fremstilt i referanseeksempel 5 i 1,2 ml anisol ble det tilsatt 2,8 ml av et bortrifluorid-dietyleter-kompleks i en argonatmosfære, etterfulgt av omrøring ved 100°C i 37 timer. Etter avkjøling ble reaksjonsblandingen helt i isvann og ekstrahert med kloroform. Det organiske laget ble vasket med en mettet vandig natriumhydrogenkarbonatoppløsning, tørket og konsentrert under redusert trykk. Resten ble renset ved hjelp av silikagel-kolonnekromatografi til å gi 3 07 mg av den i overskriften angitte forbindelse, som hadde de følgende fysiske egenskaper .

NMR (CDCI3) : 6 6.12 <1H, br), 2.32 (1H, ddd, J=8. 4Hz,

3.0Hz, 1.8Hz), 2.14 (1H, dd, J=15Hz, 5.8Hz), 2.01 (1H, d,

J=15Hz), 1.86 (1H, ra), 1.18 (3H, d, J=6.6Hz), 1.02 (3H,

d, J=5.8Hz), 0.81 (1H, m), 0.71 (1H, m)

Fremstillingseksempel 2

dl-trans-3-imino-5,7-dimetyl-2-azabicyklo[4.1.0]heptan-monohydroklorid:

Den i overskriften angitte forbindelse som har de følgende fysiske egenskaper ble fremstilt fra forbindelsen oppnådd i referanseeksempel 6 på samme måte som i referanseeksempel 4 og fremstillingseksempel 1.

TLC: Rf: 0,40 (kloroform:metanol:eddiksyre = 15:2:1),

NMR (CDCI3) : 6 9.80 (1H, br), 9.22 (1H, br), 8.72 (1H,

br), 2.66 (1H, dd, J=16Hz, 4Hz) , 2.43 (1H, dd, J=8Hz,

3Hz), 2.29 (1H, dd, J=16Hz, 9Hz), 1.91 (1H, m), 1.21 (3H,

d, J=6.8Hz), 1.05 (3H, d, J=5.2Hz), 0.96 (1H, m) , 0.85

(1H, m)

Fremstillingseksempler 2(a) til 2(i)

De følgende forbindelser som har de følgende fysiske egenskaper ble oppnådd på samme måte som i referanseeksempel 4 og fremstillingseksempel 1.

Fremstillingseksempel 2(a)

dl-trans-3-imino-5-metyl-7-butyl-2-azabicyklo[4.1.0]heptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,55 (kloroform:metanol:eddiksyre = 15:2:14,

NMR (CDCI3) : 6 9.83 (1H, br), 8.99 (1H, br), 8.88 (1H,

br), 2.64 (1H, dd, J=16Hz, 4Hz) , 2.47 (1H, dd, J=8Hz,

3Hz), 2.29 (1H, dd, J=16Hz, 9Hz), 1.88 (1H, m), 1.40-1.25 (5H, m) , 1.21 (3H, d, J=6.8Hz), 1.10 (lH,m) , 1.0-0.8 (5H, m)

Fremstillingseksempel 2(b)

dl-trans-3-imino-5-metyl-7-etyl-2-azabicyklo[4.1.0] heptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,45 (kloroform:metanol:eddiksyre = 10:1:1),

NMR (DMSO-d6) : 6 9.89 (1H, br s) , 8.84 (1H, br s) , 8.44

(1H, br s), 2.58-2.46 (1H, m), 2.46-2.38 (1H, m), 2.22 (1H, dd, 3*7.2, 16Hz), 2.10-1.91 (1H, m), 1.27-1.17 (2H,

m), 1.08 (3H, d, J=6.6Hz), 1.03-0.85 (2H, m), 0.92 (3H,

t, J=6.6Hz)

Fremstillingseksempel 2(c)

dl-trans-3-imino-1,5,7-trimetyl-2-azabicyklo[4.1.0]neptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,35 (kloroform:metanol:eddiksyre = 20:1:1),

NMR (DMSO-d6) : 6 10.17 (1H, br), 8.89 (1H, br), 8.46 (1H,

br), 2.42 (1H, dd, J=16.4, 5.4Hz), 2.24 (1H, dd, J=16.4,

7.4Hz), 1.98 (1H, m) , 1.31 (3H, s) , 1.20-0.90 (1H, m) ,

1.02 (6H, m), 0.62 (1H, m)

Fremstillingseksempel 2(d)

dl-trans-3-imino-5-metyl-7-butyl-2-azabicyklo[4.1.0]heptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,53 (kloroform:metanol:eddiksyre = 15:2:1),

NMR (CDC13) : 6 9.62 (1H, br), 9.15 (1H, br), 9.01 (1H,

br), 2.81-2.71 (2H, m), 2.17 (1H, dd, J=16Hz, 12Hz),

1.73 (1H, m), 1.42-1.25 (6H, m), 1.23 (3H, d, J=6.6Hz),

1.12-1.00 (2H, m) , 0.91 (3H, t, J=6.2Hz)

Fremstillingseksempel 2(e)

dl-trans-3-imino-5-metyl-7-propyl-2-azabicyklo[4.1.0]heptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,47 (kloroform:metanol:eddiksyre = 20:2:1),

NMR (CDCI3) : 6 9.90-9.80 (1H, br), 9.00-8.85 (1H, br),

8.85-8.70 (1H, br), 2.62 (1H, dd, J=4.4, 16.4Hz), 2.53-2.41 (1H, m) , 2.28 (1H, dd, J=9.4, 16.4Hz), 2.00-1.80

(1H, br), 1.50-1.28 (3H, m), 1.21 (3H, d, J=7.0Hz),

1.16-1.00 (1H, m), 1.00-0.80 (5H, m)

Fremstillingseksempel 2(f)

dl-trans-3-iraino-5-metyl-7-vinyl-2-azabicyklo[4.1.0]heptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,35 (kloroform:metanol:eddiksyre = 20:4:1),

NMR (DMSO-d6) : 6 10.07 (1H, br), 9.01 (1H, br), 8.61 (1H,

br), 5.49 (1H, ddd, J=8.4, 10.2, 17.2Hz), 5.08 (1H, dd,

J=1.8, 17.2Hz), 4.95 (1H, dd, J=l.8, 10.2Hz), 2.88 (1H,

dt, J=3.0, 8.4Hz), 2.54 (1H, m) , 2.28 (1H, dd, J=7.0,

16.0Hz), 2.11 (1H, m), 1.82 (lH,m), 1.29 (1H, m), 1.09

(3H, d, J=6.6Hz)

Fremstillingseksempel 2(g)

dl-trans-3-imino-5,7-dimetyl-2-azabicyklo[4.1.0]heptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,15 (kloroform:metanol:eddiksyre = 20:1:1),

NMR (DMSO-d6) : 6 9.75 (1H, br), 8.97 (1H, br), 8.77 (1H,

br), 2.66 (1H, dd, J=8.0, 6.0Hz), 2.30 (1H, dd, J=15.5,

4.0Hz), 2.19 (1H, dd, J=15.5, 11.5Hz), 1.56 (1H, m) ,

1.08 (3H, d, J=6.5Hz), 1.12-1.02 <1H, m) , 1.00-0.88 (1H,

m) , 0.79 (3H, d, J=6.0Hz)

Fremstillingseksempel 2(h)

dl-trans-3 -imino-5-metyl-7-etyl-2-azabicyklo [4.1.0] heptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,48 (kloroform:metanol:eddiksyre = 15:2:1),

NMR (CDC13) : 8 9.64 (1H, br), 9.35 (1H, br), 8.90 (1H,

br), 2.90-2.70 (2H, m), 2.15 (1H, dd, J=16Hz, 12Hz),

1.77 (1H, m) , 1.40-1.20 (2H, m) , 1.24 (3H, d, J=6.6Hz),

1.12-0.96 (2H, m), 1.01 (3H, t, J=6.8Hz)

Fremstillingseksempel 2(1)

( + ) -trans-3-imino-5,7-dimetyl-2-azabicyklo [4.1.0]heptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,50 (kloroform:metanol:eddiksyre =5:1:1),

NMR (DMSO-d6) : 8 9.70-9.65 (1H, brs) , 9.20-9.00 (1H,

brs), 8.70-8.60 (1H, brs), 2.73 (1H, t, J=7.5Hz), 2.45-2.15 (2H, m) , 1.80-1.50 (1H, m) , 1.15 (3H, d, J=7.0Hz),

1.20-0.90 (2H, m), 0.85 (3H, d, J=6.4Hz)

Referanseeksempel 7

dl-trans-3-okso-5-metyl-7-klor-2-azabicyklo[4.1.0]heptan:

En blanding bestående av 818 mg dl-trans-3-okso-5-metyl-7, 7-diklor-2-azabicyklo-[4.1.0]heptan (fremstilt på samme måte som beskrevet i referanseeksempler 1 og 2), 5,4 ml benzen, 1,64 g trifenyltinnhydrid og 34 mg 2,2 1 -azobisisobutyronitril ble omrørt ved 80°C i 4 timer i en argonatmosfære. Etter fullførelse av reaksjonen fikk reaksjonsblandingen avkjøles til romtemperatur, og 10 ml etylacetat og 10 ml av en 10% vandig kaliumfluoridoppløsning ble tilsatt dertil, etterfulgt av omrøring i 10 min. Reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom Celite, og filtratet ble ekstrahert med etylacetat. Ekstraktet ble vasket med en mettet vandig natriumkloridopp-løsning, tørket og konsentrert under redusert trykk. Resten ble renset ved hjelp av silikagel-kolonnekromatografi til å gi 484 mg av en a-klorforbindelse og 227 mg av en p-klorforbindelse, som hadde de følgende fysiske egenskaper, a-klorforbindelse:

TLC: Rf 0,27 (heksan:etylacetat = 1:5),

NMR (CDC13) : 6.10-5.80 (1H, br), 3.26 (1H, dd, J=7.8,

5.2Hz), 2.86 (1H, dd, J= 5.2, 1.2Hz), 2.28-2.03 (3H, m) ,

1.36-1.25 (1H, m), 1.23 (3H, d, J=6.4Hz)

P-klorforbindelse:

TLC: Rf 0,41 (heksan:etylacetat = 1:5),

NMR (CDCI3) : 6 6.40-6.20 (1H, br), 2.94 (1H, dt, J=9.2,

2.0Hz), 2.85 (1H, dd, J=3.6, 2.0Hz), 2.25-1.90 (3H, m),

1.50-1.38 (1H, ra), 1.26 (3H, d, J=6.6Hz)

Fremstillingseksempel 3

( + ) -trans-3-imino-5-metyl-7-klor-2-azabicyklo[4.1.0]heptan-monohydroklorid:

Den i overskriften angitte forbindelse ble oppnådd-fra forbindelsen fremstilt i referanseeksempel 7 på samme måte som i referanseeksempel 4 og fremstillingseksempel 1. De fysiske egenskaper av forbindelsen var som følger.

TLC: Rf 0,33 (kloroform:metanol:eddiksyre = 10:1:1),

NMR {DMSO-d6) : 6 9.80-9.65 (1H, br), 9.30-9.10 (1H, br),

8.80-8.60 (1H, br), 3.64 (1H, dd, J=7.7, 5.5Hz), 3.04

(1H, dd, J=8.9, 5.5Hz), 2.41 (2H, d, J=8.2Hz), 1.90-1.70

(1H, m) , 1.55-1.40 (1H, m) , 1.21 (3H, d, J=6.8Hz);

Spesifikk rotasjon: [a]<D> + 81,4° (c = 0,160, metanol)

Fremstillingseksempler 3(a) til 3(p)

De følgende forbindelser som har de følgende fysiske egenskaper ble oppnådd på samme måte som i referanseeksempler 7 og 4 og fremstillingseksempel 1.

Fremstillingseksempel 3(a)

dl-trans-3-imino-5-metyl-2-azabicyklo[4.1.0]heptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,18 (kloroform:metanol:eddiksyre = 15:2:1),

NMR (DMSO-d6) : 6 9.98 (1H, br), 8.95 (1H, br), 8.54 (1H,

br), 2.82 (1H, m) , 2.46 (1H, dd, J=16Hz, 5Hz) , 2.27 (1H,

dd, J=16Hz, 7Hz), 2.02 (1H, m), 1.2-1.0 (1H, m), 1.08

(3H, d, J=6.8Hz), 0.88 (1H, m) , 0.73 (1H, m)

Fremstillingseksempel 3 (b)

(-)-trans-3-imino-5-metyl-7-klor-2-azabicyklo[4.1.0]heptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,33 (kloroform:metanol:eddiksyre = 10:1:1),

NMR (DMSO-d6) : 6 10.10-9.85 (1H, br), 9.20-9.00 (1H, br),

8.80-8.60 (1H, br), 3.58 (1H, dd, J=3.9, 2.0Hz), 3.19

(1H, dd, J=9.4, 2.0Hz), 2.45-2.38 (1H, m), 2.36-2.05 (2H,

m) , 1.75-1.56 (1H, m) , 1.10 (3H, d, J=6.4Hz);

Spesifikk rotasjon: [a]<D> - 5,92 (c = 0,385, metanol)

Fremstillingseksempel 3(c)

dl-trans-3-imino-5-metyl-7<x-klor-2-azabicyklo [4.1.0] -heptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,3 3 (kloroform:metanol:eddiksyre = 10:1:1),

NMR (DMSO-d6) : 6 9.90 (1H, br), 9.33 (1H, br), J3.87 (1H,

br), 3.64 (1H, dd, J=5.6, 7.8Hz), 3.06 (1H, ddd, J=l.6, 5.6, 9.2Hz), 2.54-2.39 (2H, m), 1.97-1.74 (1H, m), 1.55-1.41 (1H, m), 1.22 (3H, d, J=6.6Hz)

Fremstillingseksempel 3(d)

dl-trans-3 -imino-5-metyl- 7p-klor-2-azabicyklo[4.1.0]-heptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,33 (kloroform:metanol:eddiksyre = 10:1:1),

NMR (DMSO-d6) : 6 10.27 (1H, br), 9.26 (1H, br), 8.85 (1H,

br), 3.59 (1H, dd, J=2.0, 3.8Hz), 3.19 (1H, ddd, J=2.0,

2.4, 9.4Hz), 2.58-2.45 (1H, m), 2.34-2.10 (2H, m), 1.68-1.57 (1H, m), 1.10 (3H, d, J=6.6Hz)

Fremstillingseksempel 3(e)

(- ) -trans-3 -imino-5-metyl-2-azabicyklo[4.1.0]heptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,30 (kloroform:metanol:eddiksyre = 10:1:1),

NMR (DMSO-d6) : 6 10.09 (1H, br),' 9.02 (1H, br), 8.61 (1H,

br), 2.88-2.76 (1H, m), 2.48 (1H, dd, J=5.0, 16.2Hz),

2.27 (1H, dd, J=6.8, 16.2Hz), 2.12-1.92 (1H, m), 1.20-1.04 (1H, m), 1.09 (3H, d, J=6.8Hz), 0.88 (1H, ddd,

J=5.6, 6.8, 8.8Hz), 0.73 (1H, dt, J=3.4, 5.8Hz);

Spesifikk rotasjon: [a]<D> - 50,1 (c = 0,265, metanol)

Fremstillingseksempel 3(f)

( + ) -trans-3-imino-5-metyl-2-azabicyklo[4.1.0]heptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,27 (kloroform:metanol:eddiksyre = 10:1:11,

NMR (DMSO-d6): 6 10.07 (1H, br s) , 8.90 (1H, br s) , 8.63

(1H, br s), 2.86-2.77 (1H, m), 2.53-2.42 (1H, ra), 2.26

(1H, dd, J=7.0, 16Hz), 2.07-1.96 (1H, m), 1.14-1.07 (1H,

m), 1.09 (3H, d, J=7.0Hz), 0.94-0.83 (1H, m), 0.76-0.69 (1H, m) ;

Spesifikk rotasjon: [oc]D + 53,2 (c = 0,025, metanol)

Fremstillingseksempel 3(g)

dl-cis-3-imino-5-metyl-2-azabicyklo[4.1.0]heptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,21 (kloroform:metanol:eddiksyre = 2 0:2:1),

NMR (DMSO-d6) : 6 9.98 (1H, m) , 8.72 (1H, m) , 8.30 (1H,

m) , 2.90 (1H, m) , 2.36 (1H, m) , 2.20-1.98 (2H, m) , 1.30

(1H, m), 1.02 (3H, d, J=6.2Hz), 0.82 (1H, dt, J^6.4, 6.4,

3.4Hz), 0.64 (1H, dt, J=9.2, 6.4, 6.4Hz)

Fremstillingseksempel 3(h)

dl-cis-3-imino-1,5-dimetyl-2-azabicyklo[4.1.0] heptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,43 (kloroform:metanol:eddiksyre = 10:1:1),

NMR (DMSO-d6) : 6 10.18 (1H, br), 8.75 (1H, br), 8.57 (1H,

br),2.80 (1H, m), 2.38-2.16 (1H, m), 2.00-1.78 (1H, m), 1.52 (3H, s), 1.32-1.18 (1H, m), 1.14 (3H, d, J=6.4Hz),

0.82 (1H, m),0.71 (1H, m)

Fremstillingseksempel 3(i)

dl-trans-3-imino-1,5-dimetyl-2-azabicyklo[4.1.0]heptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,41 (kloroform:metanol:eddiksyre = 10:1:1),

NMR (DMSO-d6) : 6 10.12 (1H, br), 8.92 (1H, br), 8.38 (1H,

br), 2.44 (1H, dd, J=16.6, 5.4Hz), 2.28 (1H, dd, J=16.6,

7.0Hz), 1.98 (1H, m), 1.36 (3H, s), 1.06 (3H, d,

J=7.0Hz), 1.00-0.90 (1H, m), 0.85-0.81 (2H, m)

Fremstillingseksempel 3(j)

( + )-trans-3-imino-5-metyl-7-fluor-2-azabicyklo[4.1.0] heptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,21 (kloroform:metanol:eddiksyre = 10:1:1),

NMR (DMSO-d6) : 6 10.10-9.90 (1H, br) , 9.50-9.20 (1H, br),

9.15-8.80 (1H, br), 4.78 (1H, ddd, J=65.6, 6.2, 4.4Hz),

3.05-2.80 (1H, m), 2.60-2.28 (2H, m), 2.12-1.82 (1H, m),

1.45-1.15 (1H, m), 1.18 (3H, d, J=6.6Hz);

Spesifikk rotasjon: [a]<D> + 57,5 (c = 0,160, metanol)

Fremstillingseksempel 3(k)

(+)-trans-3-benzylimino-5-metyl-7-klor-2-azabicyklo[4.1.0]-heptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,24 (kloroform:metanol = 5:1),

NMR (DMSO-d6) : 6 10.40-10.20 (1H, br), 10.05-9.90 (1H,

br), 7.50-7.30 (5H, m), 4.53 (2H, br), 3.71 (1H, dd,

J=7.7, 5.6Hz), 3.12 (1H, dd, J=9.2, 5.6Hz), 2.70-2.40

(2H, m), 2.00-1.80 (1H, m), 1.60-1.45 (1H, m), 1.23 (3H,

d, J=7Hz);

Spesifikk rotasjon: [a]<D> + 6,47 (c = 0,4750, metanol)

Fremstillingseksempel 3(1)

(+)-trans-3-(3-aminometylbenzyl)imino-5-metyl-7-klor-2-azabicyklo [4.1.0]-heptan-dihydroklorid:

NMR (DMSO-d6) : 6 10.40-10.30 (1H, br), 10.10-10.00 (1H,

br), 8.60-8.30 (3H, br), 7.60-7.40 (3H, m), 7.40-7.30

(1H, m), 4.65-4.52 <2H, br), 4.08-3.94 (2H, br), 3.70

(1H, dd, J=7.6, 5.6Hz), 3.12 (1H, dd, J=8.8, 5.6Hz),

2.70-2.40 (2H, m) , 2.00-1.80 (1H, m) , 1.60-1.45 (1H, m) ,

1.23 (3H, d, J=6.8Hz)

Fremstillingseksempel 3 (m)

(-)-cis-3-imino-5-metyl-7-fluor-2-azabicyklo[4.1.0]-heptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,26 (kloroform:metanol:eddiksyre = 10:1:1),

NMR (DMSO-d6) : 6 10.55-10.35 (1H, brs), 9.20-9.00 (1H,

brs), 8.80-8.60 (1H, brs), 4.85 (1H, dt, J=64.6, 5.4Hz),

3.25-3.00 (1H, m) , 2.80-2.55 (1H, m) , 2.45-2.20 (1H, m) ,

2.00-1.80 (1H, m) , 1.60-1.35 (1H, m) , 1.13 (3H, d,

J=6.6Hz)

Fremstillingseksempel 3(n)

(-)-trans-3-imino-5-metyl-7-klor-2-azabicyklo[4.1.0]-heptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,36 (kloroform:metanol:eddiksyre = 10:1:1),

NMR (DMSO-d6) : 6 10.05-9.90 (1H, brs), 9.50-9.30 (1H,

brs), 9.00-8.80 (1H, brs), 3.64 (1H, dd, J=7.8, 5.6Hz),

3.05 (1H, dd, J=8.8, 5.6 Hz), 2.55-2.30 (2H, m), 1.96-1.72 (1H, m) , 1.56-1.40 (1H, m) , 1.20 (3H, d, J=6.6Hz)

Fremstillingseksempel 3(o)

( + )-cis-3-imino-5-metyl-7-klor-2-azabicyklo[4.1.0] -neptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,30 (kloroform:metanol:eddiksyre = 10:1:1),

NMR (DMSO-d6) : 6 10.50-10.20 (1H, brs), 9.20-8.90 (1H,

brs), 8.90-8.60 (1H, brs), 3.59 (1H, dd, J=8.0, 6.0Hz),

3.40-3.10 (1H, ra), 2.70 (1H, dd, J=16.7, 6.2Hz), 2.50-2.30 (1H, ra), 2.20 (1H, dd, J=16.7, 11.0Hz), 1.80-1.60

(1H, ra), 1.16 (3H, d, J=6.6Hz)

Fremstillingseksempel 3(p)

( + )-cis-3-imino-5-metyl-7-fluor-2-azabicyklo[4.1.0] -heptan-

monohydroklorid:

TLC: Rf 0,2 8 (kloroform:metanol:eddiksyre = 20:4:1),

NMR (CDC13) : 6 10.8-10.3 (1H, br), 8.81 (2H, brs), 4.67

(1H, m) , 3.12-2.75 (2H, m) , 2.45-2.10 (2H, m) , 1.50-1.25

(1H, ra), 1.26 (3H, d, J=6.0Hz)

Fremstillingseksempel 4

( + ) - trans-3-imino-5-metyl-7,7-diklor-2-azabicyklo[4.1.0]-heptan-monohydroklorid:

Den i overskriften angitte forbindelse som har de følgende fysiske egenskaper ble oppnådd fra dl-trans-3-okso-5-metyl-7,7-diklor-2-azabicyklo[4.1.0]heptan på samme måte som i referanseeksempel 4 og fremstillingseksempel 1.

TLC: Rf 0,35 (kloroform:metanol:eddiksyre = 10:1:1),

NMR (DMSO-d6) : 6 10.41 (1H, br), 9.70 (1H, br), 7.25 (1H,

br), 3.55 (1H, d, J=9.8Hz), 2.53 (1H, dd, J=5 . 0 ,~ 15 . 6Hz) ,

2.36 (1H, dd, J=11.8, 15.6Hz), 2.12 (1H, dd, J=5.4,

9.8Hz), 2.03-1.80 (1H, m), 1.27 (3H, d, J=6.6Hz);

Spesifikk rotasjon: [<x]<D> + 44,6 (c = 0,435, metanol)

Fremstillingseksempler 4(a) til 4(c)

De følgende forbindelser som har de følgende fysiske egenskaper ble oppnådd på samme måte som i referanseeksempel 4 og fremstillingseksempel 1.

Fremstillingseksempel 4(a)

dl-trans-7,7-diklor-3-imino-5-metyl-2-azabicyklo [4.1.0]-heptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,63 (kloroform:metanol:eddiksyre = 10:1:1),

NMR (CDC13 + CD3OD) : 6 3.40 (1H, d, J=9.6Hz), 2t68 (1H,

dd, J=15.6, 3.5Hz), 2.29 (1H, dd, J=15.6, 12.5Hz), 2.18-2.20 (1H, m), 1.94 (1H, dd, J=9.6, 5.1Hz), 1.36 (3H, d,

J=6.6Hz)

Fremstillingseksempel 4(b)

(-)-trans-3-imino-5-metyl-7,7-diklor-2-azabicyklo-[4.1.0]-heptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,36 (kloroform:metanol:eddiksyre = 10:1:1),

NMR (DMSO-d6) : 5 9.66 (3H, br s) , 3.55 (1H, d, jJ=9.6Hz),

2.57-2.28 (2H, m), 2.11 (1H, dd, J=5.6, 10Hz), 2.01-1.84

(1H, ra), 1.27 (3H, d, J=6.6Hz);

Spesifikk rotasjon: [<x]<D> - 60,6 (c = 0,45, metanol)

Fremstillingseksempel 4(c)

dl-trans-3-imino-1,5-dimetyl-7,7-diklor-2-azabicyklo[4.1.0]-heptan-monohydroklorid:

TLC: Rf 0,58 (kloroform:metanol:eddiksyre = 20:4:1),

NMR (DMSO-d6) : 5 10.48 (1H, br), 9.56 (1H, br), 9.02 (1H,

br), 2.54-2.40 (2H, ra), 2.04-1.89 (2H, ra), 1.63 (3H, s) ,

1.26 (3H, d, J=6.4Hz)

Referanseeksempel 8

dl-trans-3-okso-5-metyl-7-(2-propenyl)-7-klor-2-azabicyklo-[4.1.0]heptan:

Til en oppløsning av 1,26 g dl-trans-3-okso-5-metyl-7,7-diklor-2-(p-metoksybenzyl)-2-azabicyklo-[4.1.0]heptan i 13 ml vannfri benzen ble det tilsatt 2,58 g allyltributyltinn og 53 mg 2,2'-azobisisobutyronitril i en argonatmosfære, og blandingen ble varmet under tilbakeløp i 33 timer. Til reaksjonsblandingen ble det tilsatt 2,58 g allyltributyltinn og 53 mg 2,2<1->azobisisobutyronitril, etterfulgt av oppvarming under tilbakeløp i 20 timer. Etter at reaksjonsblandingen har fått avkjøles til romtemperatur ble reaksjonsblandingen fortynnet med etylacetat og vasket med en 5% vandig kalium-fluoridoppløsning. Eventuelt produsert uoppløselig stoff ble separert ved hjelp av Celite-f iltrering. FiltrateJ;..ble separert i to faser. Det vandige laget ble ekstrahert med etylacetat og ekstraktet ble kombinert med det organiske laget. Det kombinerte organiske laget ble vasket med en mettet vandig natriumkloridoppløsning og tørket over vannfritt mag-nesiumsulfat, etterfulgt av filtrering. Filtratet ble konsentrert under redusert trykk og resten ble renset ved hjelp av silikagel-kolonnekromatografi til å gi 423 mg av den i overskriften angitte forbindelse som et hvitt faststoff, som hadde de følgende fysiske egenskaper.

TLC: Rf 0,4 0 (heksan:etylacetat = 1:5),

NMR (CDC13) : 6 6.14 (1H, br), 5.86 (1H, ddt, J=6.6, 10.4,

16.6Hz), 5.22-5.08 (2H, m) , 2.65 (1H, dd, J=l.2, 9.4Hz),

2.55 (1H, ddt, J=1.2, 6.6, 15.0Hz), 2.33 (1H, ddt, J=l.2,

6.6, 15.0Hz), 2.27-2.02 (3H, m), 1.22 (3H, d, J=6.4Hz),

1.13 (1H, dd, J=4.4, 9.2Hz)

Fremstillingseksempel 5

dl-trans-3-imino-5-metyl-7-(2-propenyl)-7-klor-2-azabicyklo-[4.1.0]heptan-monohydroklorid:

Den i overskriften angitte forbindelse som har de følgende fysiske egenskaper ble oppnådd fra forbindelsen fremstilt i ref eranseeksempel 8 på samme måte som i ref eranseeksempe"l 4 og fremstillingseksempel 1.

TLC: Rf 0,32 (kloroform:metanol:eddiksyre = 10:1:1),

NMR <DMSO-d6): 6 10.05 (1H, br), 9.34 (1H, br), 8.88 (1H,

br), 5.85 (1H, ddt, J=6.6, 10.4, 17.0Hz), 5.26-5.12 (2H,

m), 2.97 (1H, dd, J=1.2, 9.4Hz), 2.63-2.26 (4H, m),

1.98-1.76 (1H, m), 1.40 (1H, dd, J=5.0, 8.8Hz), 1.21 (3H,

d, J=7.0Hz)

Fremstillingseksempel 5(a)

dl-trans-3-imino-5-metyl-propyl-7-klor-2-azabicyklo[4.1.0] - heptan-monohydroklorid:

Den i overskriften angitte forbindelse som har de følgende fysikalske egenskaper ble fremstilt på samme måte som i referanseeksempel 4 og fremstillingseksempel 1.

TLC: Rf 0,32 (kloroform:metanol:eddiksyre = 10:1:1),

NMR (DMSO-d6) : 6 10.05 (1H, br), 9.32 (1H, br), 8.85 (1H,

br), 2.89 (1H, dd, J=l.2, 9.0Hz), 2.47 (1H, dd, J=5.2,

16.0Hz), 2.33 (1H, dd, J=11.8, 16.0Hz), 1.96-1.43 (5H,

m) , 1.34 (1H, dd, J=5.4, 9.0Hz), 1.21 (3H, d, J=6.8Hz),

0.91 (3H, t, J=7.2Hz)

Referanseeksempel 9

dl-4-okso-3-azabicyklo[4.2.0] oktan:

Til en oppløsning av 0,48 g bicyklo[3.2.0] heptan-3-on i 8 ml maursyre ble det tilsatt 725 mg hydroksylamin-O-sulfonsyre, etterfulgt av koking under tilbakeløp i 3 timer. Reaksjonsblandingen fikk avkjøles, ble helt i isvann, nøytralisert med en 5 N vandig natriumhydroksydoppløsning og ekstrahert med kloroform. Det organiske laget ble vasket, tørket og konsentrert under redusert trykk. Resten ble renset ved hjlep av silikagel-kolonnekromatografi til å gi 48 mg av den i overskriften angitte forbindelse som et brunt faststoff, som hadde de følgende fysiske egenskaper.

Form: Mørkebrunt faststoff

TLC: 0,46 (kloroform:metanol = 9:1),

NMR (CDC13) : 5 6.55 (1H, m) , 3.39 (1H, ddd, J=2. 0Hz,

4.2Hz, 13.2Hz), 3.09 (1H, ddd, J=2.6Hz, 5.6Hz, 13.2Hz),

2.89 (1H, m), 2.70 (1H, m), 2.40 (1H, dd, J=5.8Hz,

15.4Hz), 2.32-2.10 (3H, m), 1.90-1.76 (2H, ra)

Fremstillingseksempel 6

dl-4-imino-3-azabicyklo [4.2.0]oktan-monohydroklorid:

Den i overskriften angitte forbindelse som har de følgende fysiske egenskaper ble oppnådd fra forbindelsen fremstilt i referanseeksempel 9 på samme måte som i referanseeksempel 4 og fremstillingseksempel 1.

TLC: Rf 0,16 (kloroform:metanol:eddiksyre = 20:2:1),

NMR (DMSO-d6) : S 9.74 (1H, ra), 9.20 (1H, ra), 8.83 (1H,

ra), 3.28-3.12 (2H, ra), 2.94-2.42 (4H, ra), 2.28-2.02 (2H,

ra), 1.67 (1H, m), 1.46 (1H, m)

Referanseeksempel 10

1-(2-aminoetyl)cyklopropan-1-acetonitril:

En oppløsning av 5,0 g cyklopropan-l,l-diacetonitril i 200 ml metanol ble avkjølt til -15°C, og 4,95 g koboltklorid-heksahydrat og 4,15 g natriumborhydrid ble tilsatt dertil i denne rekkefølge, etterfulgt av omrøring ved denne temperatur 1 15 min. Reaksjonsblandingen ble surgjort ved tilsetning av 2 N saltsyre og deretter oppvarmet til romtemperatur, hvorved blandingen ble omrørt i 15 min., etterfulgt av konsentrering under redusert trykk. Vann ble tilsatt til resten, og blandingen ble ekstrahert med etylacetat. Det vandige laget ble innstilt til pH 9 med en 5 N vandig natriumhydroksyd-oppløsning, etterfulgt av filtrering. Kloroform ble tilsatt til filtratet, og det organiske laget ble vasket med en mettet vandig natriumkloridoppløsning, tørket over vannfritt natriumsulfat og konsentrert under redusert trykk. Resten ble renset ved hjelp av silikagel-kolonnekromatografi til å gi 1,63 g av den i overskriften angitte forbindelse, som hadde de følgende fysiske egenskaper.

TLC: Rf 0,17 (kloroform:metanol:eddiksyre = 10:1:1) Ninhydrin (rødfiolett),

NMR (CDC13) : 2.85 (2H, t, J=7.6Hz), 2.41 (2H, s) , 1.59

(2H, t, J=7.6Hz), 0.54 (4H, s)

Referanseeksempel 11

2-etoksy-3,4,5,6-tetrahydropyridin-4-spiro-cyklopropan-monohydroklorid:

Til 830 ml av forbindelsen fremstilt i referanseeksempel 10 ble det tilsatt 13 ml av en mettet (omtrent 7 N) hydrogen-kloridoppløsning i absolutt etanol, etterfulgt av omrøring ved romtemperatur i 3 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert til å gi den i overskriften angitte forbindelse som har de følgende fysiske egenskaper, som ble anvendt i den neste reaksjonen i urenset form.

TLC: Rf 0,2 7 (kloroform:metanol:eddiksyre = 10:1:1) Ninhydrin

-brunt)

NMR (DMSO-d6): 6 12.20 (1H, br; HCl) , 4.43 (2H, q,

J=7.2Hz), 3.53 <2H, t, J=5.8Hz), 2.68 (2H, s) , 1.61 <2H,

t, J=5.8Hz), 1.33 (3H, t, J=7.2Hz), 0.50 (4H, s)

Fremstillingseksempel 7

2-iminopiperidin-4-spiro-cyklopropan-monohydroklorid:

Den i overskriften angitte forbindelse ble fremstilt fra forbindelsen oppnådd i referanseeksempel 11 på samme måte som i fremstillingseksempel 1. De fysiske egenskaper var som følger.

TLC: Rf 0,33 (kloroform -.metanol: eddiksyre = 10:1:1),

NMR (DMSO-d6) : 6 9.75 (1H, br), 8.78 (1H, br), 8.53 (1H, br),3.35 (2H; overlappet med vann), 2.45 (2H, s),

1,56 (2H, t, J=5.8Hz), 0,45 (4H, s)

Referanseeksempel 12

dl-trans-4-okso-6-metyl-3-azabicyklo[4.1.0]heptan:

I 81 ml vannfri metylenklorid ble det oppløst 2,0 g 4,5-didehydro-4-metyl-2-piperidon og 4,3 5 ml dijodmetan i en argonatmosfære, og oppløsningen ble avkjølt til 0°C. Til reaksjonsblandingen ble det tilsatt 54 ml av en 1 M heksanoppløsning av trimetylaluminium, og blandingen ble omrørt ved romtemperatur. 2 døgn senere ble 4,3 5 ml dijodmetan tilsatt dertil, og omrøringen ble fortsatt ved romtemperatur. 3 døgn senere ble 2,9 ml dijodmetan og 18 ml av en 1 M heksanoppløsning av trimetylaluminium tilsatt, og omrøringen ble fortsatt i ytterligere 1 døgn. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med 60 ml metylenklorid. Etter avkjøling til 0°C ble 12,09 g natriumfluorid og 3,9 ml vann tilsatt dertil, og blandingen ble omrørt i 3 0 min. og filtrert. Det samlede presipitat ble oppløst i vann og ekstrahert med kloroform. Ekstraktet og filtratet ble kombinert og vasket suksessivt med en vandig natriumtåosulfat-oppløsning og en mettet vandig natriumkloridoppløsning, tørket over vannfritt natriumsulfat og konsentrert under redusert trykk. Resten (19,8 g) ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi til å gi 19,8 g av en gul olje.

Oljen ble oppløst i 50 ml metylenklorid og avkjølt til 0°C. Til oppløsningen ble det tilsatt 7,62 g m-klorperbenzosyre (70%), etterfulgt av omrøring i 2,5 timer. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med 2 00 ml etylacetat, en 1 N vandig natriumhydroksydoppløsning ble tilsatt og blandingen ble omrørt. Det organiske laget ble vasket suksessivt med en vandig natriumtiosulfatoppløsning, en vandig natriumhydro-genkarbonatoppløsning og en mettet vandig natriumkloridopp-løsning, og tørket over vannfritt natriumsulfat, etterfulgt av konsentrering ved redusert trykk. Resten ble renset ved hjelp av kolonnekromatografi til å gi 78 5 g av den i overskriften angitte forbindelse som en fargeløs oljeaktig substans, som hadde de følgende fysiske egenskaper.

Form: Transparent olje

TLC: Rf 0,53 (kloroform:metanol = 10:1),

NMR (CDC13) : 6 6.0-5.65 (1H, br), 3.71 (1H, dd, J=12.6,

2.7Hz), 3.41 (1H, ddd, J=12.6, 5.4, 1.8Hz), 2 Jai (1H, dd, J=33.4, 17.2Hz), 1.17 (3H, s), 1.00 (1H, m), 0.67 (1H, t,

J=5.0Hz), 0.46-0.38 (1H, m)

Fremstillingseksempel 8

dl-trans-4-imino-6-metyl-3-azabicyklo[4.1.0]heptan-monohydroklorid:

Den i overskriften angitte forbindelse som har de følgende fysiske egenskaper ble fremstilt fra forbindelsen .oppnådd i referanseeksempel 12 på samme måte som i referanseeksempel 4 og fremstillingseksempel 1.

TLC: Rf 0,29 (kloroform:metanol:eddiksyre = 20:4:1),

NMR (CDC13) : 6 9.70-9.50 (1H, br), 9.10-8.90 (1H, br),

8.75-8.50 (1H, br), 3.75-3.50 (2H, m), 3.13 (1H, d,

J=17.5Hz), 2.66 (1H, d, J=17.5Hz), 1.21 (3H, s), 1.15-1.02 (1H, m), 0.67-0.47 (2H, m)

Formuleringseksempel 1

Tabletter:

De følgende komponenter ble blandet og tildannet til tabletter på vanlig måte for å oppnå 100 tabletter som hver inneholder 100 mg av den aktive bestanddel.

Testeksempler

Farmakologiske aktiviteter av forbindelsen i samsvar med oppfinnelsen: Den farmakologiske aktivitet av forbindelsen med formel (I) i samsvar med den foreliggende oppfinnelse på i-NOS ble undersøkt ved hjelp av den følgende test.

i-NOS inhiberingstest:

Til human lunge-epitelcellelinje av A549 ble det tilsatt 10 /xg/ml lipopolysakkarid (LPS) , 10 ng/ml tumornekrosefaktor-a

(TNF-cc) , 5 ng/ml interleukin-lp (IL-ip) og 100 ng/ml inter-feron-Y (INF-y)• 16 timer senere ble cellene brutt ved ultralydbehandling og sentrifugert ved 54 000 opm. Supernatanten ble samlet som en kilde av i-NOS.

i-NOS ble bragt til å virke på <14>C-merket L-arginin som et substrat, og L-citrullin produsert i nærvær av forbindelsen i samsvar med oppfinnelsen ble bestemt for å beregne den 50% inhiberende konsentrasjon av testforbindelsen. Mer spesielt ble 10 /xl av en 16,8 /xM oppløsning av L-[U-14C] arginin, 10 /xl av den i det foregående fremstilte i-NOS kilde og 10 /xl av

variert mengde av en testforbindelse tilsatt til 7 0 /xl av en oppløsning omfattende 50 mM HEPES (N-2-hydroksyetylpiperazin-N'-2-etansulfonsyre) (pH 7,8), 1 mM DTT (ditiotreitol), 1 mM NADPH (redusert nikotinamidadenin-dinukleotidfosfat), 0,1 mM BH4 (tetrahydrobiopterin) , 10 /xM FAD (flavin adenin-din-ukleotid) og 500 enheter/ml av CaM (calmodulin), og oppløs-ningen ble innstilt til 100 /xl. Etter inkubering ved 37°C i 10 min. ble 0,225 ml av en reaksjonsterminerende buffer bestående av 100 mM HEPES (pH 5,1 til 5,5) og 10 mM EDTA (etylendiamintetraeddiksyre) tilsatt under avkjøling med is for å stanse den enzymatiske reaksjon. Reaksjonsoppløsningen ble ført gjennom en kolonne pakket med 0,25 ml Dowex 50WX-8 (Na<+> form) for å fjerne ureagert L-arginin og kolonnen ble

vasket med 0,45 ml av den reaksjonsterminerende buffer for å samle en effluent inneholdende L-citrullin. Radioaktiviteten av effluenten ble målt med en væskescintillasjonsteller, som ble tatt som NOS-aktivitet, hvorfra en 50% inhiberingskonsen-trasjon av testforbindelsen ble oppnådd. De oppnådde resul-tater er vist i tabell 1.

Toksisitet:

Forbindelsene i samsvar med den foreliggende oppfinnelse ble vist å ha tilstrekkelig lav toksisitet og derfor tilstrekkelig sikkerhet for anvendelse som farmasøytiske midler.

Oppfinnelsen er nå blitt beskrevet i detalj og med referanse til spesielle utførelsesformer derav.

Denne søknaden er basert på japanske søknader nr. Hei 9-9183 0 og Hei 9-273196, hvis fulle innhold er innlemmet heri ved referanse.

Claims (20)

1. Kondensert piperidinforbindelse, karakterisert ved at den representeres ved formel (I) : hvor -R<1-> representerer en 3 - eller 4-leddet karbocyklisk ring sammen med det karbonatom eller -atomer hvortil den'er bundet, idet den karbocykliske ring er kondensert til side d eller e av piperidinringen eller bundet til 4-stillingen av piperidinringen gjennom en spiro-sammenslutning, R<2> representerer en C^g alkylgruppe, R<3> representerer en C1_6 alkylgruppe, en C2_6 alkenylgruppe, en C2_6 alkynylgruppe eller et halogenatom, R<4> representerer et hydrogenatom, en amino-<C>1_4 alkylgruppe eller en fenyl-C1_4 alkylgruppe som kan være substituert med en amino-C1_4 alkylgruppe, i representerer et helt tall 0 til 3, n representerer et helt tall 0 til 3, og de flere R<2,>er eller R<3>'er er like eller forskjellige, eller et syreaddisjonssalt derav eller et hydrat derav.

2. Kondensert piperidinforbindelse som angitt i krav 1, karakterisert ved at den representeres ved formel (IA) : hvor R<2>, R<3>, R<4>, i og n har de samme betydninger som angitt i krav 1.

3. Kondensert piperidinforbindelse som angitt i krav 1, karakterisert ved at den representeres ved formel (IB): hvor R<2>, R<3>, R<4>, i og n har de samme betydninger som angitt i krav 1.

4. Kondensert piperidinforbindelse som angitt i krav 1, karakterisert ved at den representeres ved formel (IC): hvor R2, R<3>, R<4>, i og n har de samme betydninger som angitt i krav 1.

5. Kondensert piperidinforbindelse som angitt i krav 1, karakterisert ved at den representeres ved formel (ID): hvor R<2>, R<3>, R<4>, i og n har de samme betydninger som angitt i krav 1.

6. Kondensert piperidinforbindelse som angitt i krav 1, karakterisert ved at den representeres ved formel (IE) : hvor R<2>, R<3>, R<4>, i og n har de samme betydninger som angitt i krav l.

7. Kondensert piperidinforbindelse som angitt i krav 1, karakterisert ved at den representeres ved formel (IF): hvor R<2>, R<3>, R<4>, i og n har de samme betydninger som angitt i krav 1.

8. Kondensert piperidinforbindelse som angitt i krav 1, karakterisert ved at i er null.

9. Kondensert piperidinforbindelse som angitt i krav 1, karakterisert ved at i er 1, 2 eller 3, og R<3> er valgt fra gruppen bestående av en C1_6 alkylgruppe, en <C>2_6 alkenylgruppe og en C2_6 alkynylgruppe.

10. Kondensert piperidinforbindelse som angitt i krav l, karakterisert ved at i er 1, 2 eller 3, og minst en av de flere R<3>'er er et halogenatom.

11. Kondensert piperidinforbindelse som angitt i krav 1, karakterisert ved at den er (1) dl-trans-3-imino-5,5,7-trimetyl-2-azabicyklo[4.1.0]-heptan,

(2) dl-trans-3-imino-l,5,7,7-tetrametyl-2-azabicyklo [4.1.0]heptan,

(3 ) dl-trans-3-imino-5,7-dimetyl-2-azabicyklo[4.1.0]heptan, (4) dl-trans-3-imino-5-metyl-7-butyl-2-azabicyklo[4.1.0]-heptan,

(5) dl-trans-3-imino-5-metyl-7-etyl-azabicyklo [4.1.0]heptan,

(6) dl-trans-3-imino-1,5,7-trimetyl-2-azabicyklo[4.1.0]-heptan,

(7) dl-trans-3-imino-5-metyl-7-butyl-2-azabicyklo[4.1.0]-heptan,

(8) dl-trans-3-imino-5-metyl-7-propyl-2-azabicyklo[4.1.0]-heptan,

(9) dl-trans-3-imino-5-metyl-7-vinyl-2-azabicyklo[4.1.0]-heptan,

(10) dl-trans-3-imino-5,7-dimetyl-2-azabicyklo[4.1.0]heptan,

(11) dl-trans-3-imino-5-metyl-7-etyl-2-azabicyklo[4.1.0]-heptan,

(12) (+)-trans-3-imino-5-metyl-7-klor-2-azabicyklo[4.1.0]-heptan,

(13) dl-trans-3-imino-5-metyl-2-azabicyklo[4.1.0] heptan,

(14) ( - ) - trans-3 - imino-5-metyl-7-klor-2-azabicyklo [4.1.0]"-heptan,

(15) dl-trans-3-imino-5-metyl-7a-klor-2-azabicyklo[4.1.0]-heptan,

(16) dl-trans-3-imino-5-metyl-7p-klor-2-azabicyklo[4.1.0]-heptan,

(17) (-)-trans-3-imino-5-metyl-2-azabicyklo[4.1.0]heptan,

(18) ( + )-trans-3-imino-5-metyl-2-azabicyklo [4.1.0]heptan,

(19) dl-cis-3-imino-5-metyl-2-azabicyklo[4.1.0]heptan,

(20) dl-cis-3-imino-l,5-dimetyl-2-azabicyklo [4.1.0]heptan,

(21) dl-trans-3-imino-l, 5-dimetyl-2-azabicyklo [4.1.0] heptan,

(22) (+)-trans-3-imino-5-metyl-7-fluor-2-azabicyklo[4.1.0]-heptan,

(23) ( + ) -trans-3-benzylimino-5-metyl-7-klor-2-azabicyklo-[4.1.0]heptan,

(24) ( + ) - trans-3 - (3-aminometylbenzyl) imino-5-metyl-7-klor-2-azabicyklo [4.1.0]heptan,

(25) ( + )- trans-3-imino-5-metyl-7 , 7-diklor-2-azabicyklo-[4.1.0] heptan,

(26) dl-trans-7,7-diklor-3-imino-5-metyl-2-azabicyklo [4.1.0]heptan,

(27) (-)-trans-3-imino-5-metyl-7 , 7-diklor-2-azabicyklo-[4.1.0]heptan,

(28) dl-trans-3-imino-l,5-dimetyl-7,7-diklor-2-azabicyklo-[4.1.0] heptan,

(29) dl-trans-3-imino-5-metyl-7-(2-propenyl)-7-klor-2-azabicyklo [4.1.0]heptan,

(3 0) dl -trans- 3 - imino -5-metyl -7-propyl -7 -klor-2 - azabicyklo - [4.1.0] heptan,

(31) (-)-cis-3-imino-5-metyl-7-fluor-2-azabicyklo[4.1.0]-heptan,

(32) (+)-trans-3-imino-5,7-dimetyl-2-azabicyklo [4.1.0]heptan,

(33) (-)-trans-3-imino-5-metyl-7-klor-2-azabicyklo[4.1.0]-heptan,

(34) (+)-cis-3-imino-5-metyl-7-klor-2-azabicyklo[4.1.0]-heptan-monohydroklorid, eller

(3 5) ( + )- cis-3-imino-5-metyl-7-f luor-2-azabicyklo[4.1.0]-heptan.

12. Kondensert piperidinforbindelse som angitt i krav 1, karakterisert ved at den er dl-trans-4-imino-6-metyl-3-azabicyklo[4.1.0]heptan.

13. Kondensert piperidin som angitt i krav 1, karakterisert ved at den er dl-4-imino-3 - azabicyklo[4.2.0]oktan.

14. Kondensert piperidin som angitt i krav 1, karakterisert ved at den er 2-iminopiperi-din- 4 -spiro-cyklopropan.

15. Fremgangsmåte for fremstilling av en kondensert piperi-dinf orbindelse representert ved formel (I) som angitt i krav 1, karakterisert ved at den omfatter å underkaste en forbindelse representert ved formel (II): hvor R<5> representerer en C^g alkylgruppe, og andre symboler er som angitt i krav 1, for en amidineringsreaksjon med ammoniakk og ammoniumklorid eller en forbindelse representert ved formel (III): hvor R<41> representerer en amino-C1_4 alkylgruppe eller en karbocyklisk ring-C1_4 alkylgruppe som kan være substituert med en amino-C1_4 alkylgruppe.

16. Nitrogenmonoksyd-syntaseinhiberende preparat, karakterisert ved at det omfatter, som en aktiv bestanddel, et kondensert piperidin representert ved formel (I) som angitt i krav 1, et ikke-toksisk salt derav eller et hydrat derav sammen med en bærer eller fortynningsmiddel.

17. Farmasøytisk preparat, karakterisert ved at det omfatter, som en aktiv bestanddel, et kondensert piperidin representert ved formel (I) som angitt i krav 1, et ikke-toksisk salt derav eller et hydrat derav sammen med en farmasøytisk tålbar bærer eller fortynningsmiddel.

18. Anvendelse av en forbindelse representert ved formel (I) som angitt i krav 1, et ikke-toksisk salt derav eller et hydrat derav i fremstilling av et medikament for behandling og/eller forebygging av sykdommer indusert av en nitrogenmonoksyd- syntase.

19. Anvendelse av en forbindelse representert ved formel (I) som angitt i krav 1, et ikke-toksisk salt derav eller et hydrat derav i fremstilling av et medikament for behandling og/eller forebygging av septikemi, endotoksinsjokk, myokarditt, hjertesvikt, multippel organsvikt, systemisk inflammatorisk responssyndrom, sjokk, tuberkulose, hypotensjon, revmatisk inflammasjon, kronisk artikulær revmatisme, arthritis deformans, ulcerøs kolitt, stress-indusert peptisk ulcus, Chrons sykdom, autoimmune sykdommer, vevsforstyrrelser og graftrejeksjon etter transplantasjon, forstyrrelser i reperfusjon etter ischemi, akutt obstruksjon av koronar-mikroblodkar, sjokk-indusert obstruksjon av blodkar, disseminert intravaskulært koagulasjonssyndrom (DIC), cerebrale ischemiske forstyrrelser, arteriosklerose, pernisiøs anemi, Fanconi-anemi, sigdcelleanemi, pankreatitt, nefrotisk syndrom, leishmaniasis, glomerulonefritt, insulin-avhengig diabetes mellitus, hepatisk porfyri, alkoholisme, Parkinsons sykdom, kronisk levkemi, akutt levkemi, tumor, bivirkninger av anti-cancermidler, dyspnesyndrom hos barn eller voksne, pulmonal emfysem, Alzheimers sykdom, disseminert sklerose, vitamin E-mangel, aldring, solforbrenthet, muskulær dystrofi, katarakt, influensainfeksjon, malaria, AIDS, strålingsskade eller brannskade.

20. Anvendelse av en forbindelse representert ved formel (I) som angitt i krav 1, et ikke-toksisk salt derav eller"et hydrat derav i fremstilling av et medikament for forbedring av effektiviteten av in vitro fertilisering.