NO172264B - Immunokjemisk ettrinns-fremgangsmaate for bestemmelse av et av immunoglobulinantistoffene a, m, d eller e samt reagens for utfoerelse av fremgangsmaate - Google Patents
Immunokjemisk ettrinns-fremgangsmaate for bestemmelse av et av immunoglobulinantistoffene a, m, d eller e samt reagens for utfoerelse av fremgangsmaate Download PDFInfo
- Publication number
- NO172264B NO172264B NO882204A NO882204A NO172264B NO 172264 B NO172264 B NO 172264B NO 882204 A NO882204 A NO 882204A NO 882204 A NO882204 A NO 882204A NO 172264 B NO172264 B NO 172264B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- antigen
- antibody
- immunoglobulin
- solid phase
- antibodies
- Prior art date
Links
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 title claims abstract description 40
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 title claims abstract description 40
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 42
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title claims description 15
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 title claims description 7
- 238000010915 one-step procedure Methods 0.000 title description 8
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 66
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 66
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 66
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims abstract description 23
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 16
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 14
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 9
- 238000002372 labelling Methods 0.000 claims description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 4
- 241000223997 Toxoplasma gondii Species 0.000 claims description 3
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 claims description 2
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 claims description 2
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 claims description 2
- 241000589884 Treponema pallidum Species 0.000 claims description 2
- 208000005252 hepatitis A Diseases 0.000 claims description 2
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 claims description 2
- 201000005404 rubella Diseases 0.000 claims description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 abstract description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 abstract 2
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 abstract 2
- 241000223996 Toxoplasma Species 0.000 description 14
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 13
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 12
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 10
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 10
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 7
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 7
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 7
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 7
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 5
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 4
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 4
- 229940043517 specific immunoglobulins Drugs 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 3
- 230000000274 adsorptive effect Effects 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 3
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 3
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- GHCZTIFQWKKGSB-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid;phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O GHCZTIFQWKKGSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 2
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 2
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 2
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 2
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 2
- 238000003115 checkerboard titration Methods 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 2
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 2
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 229920005615 natural polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N periodic acid Chemical compound OI(=O)(=O)=O KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M sodium periodate Chemical compound [Na+].[O-]I(=O)(=O)=O JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 2
- 239000013026 undiluted sample Substances 0.000 description 2
- APWRZPQBPCAXFP-UHFFFAOYSA-N 1-(1-oxo-2H-isoquinolin-5-yl)-5-(trifluoromethyl)-N-[2-(trifluoromethyl)pyridin-4-yl]pyrazole-4-carboxamide Chemical compound O=C1NC=CC2=C(C=CC=C12)N1N=CC(=C1C(F)(F)F)C(=O)NC1=CC(=NC=C1)C(F)(F)F APWRZPQBPCAXFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 1
- 241000710799 Rubella virus Species 0.000 description 1
- 239000002262 Schiff base Substances 0.000 description 1
- 150000004753 Schiff bases Chemical class 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000012876 carrier material Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000000432 density-gradient centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 1
- 230000000951 immunodiffusion Effects 0.000 description 1
- 238000000760 immunoelectrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000007373 indentation Methods 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 229940043515 other immunoglobulins in atc Drugs 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 1
- 239000013610 patient sample Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 1
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 239000012898 sample dilution Substances 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 230000001235 sensitizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 1
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6854—Immunoglobulins
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
- G01N33/54386—Analytical elements
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/962—Prevention or removal of interfering materials or reactants or other treatment to enhance results, e.g. determining or preventing nonspecific binding
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/82—Hepatitis associated antigens and antibodies
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Foreliggende oppfinnelse vedrører en immunokjemisk ettrinns-fremgangsmåte for bestemmelse av et av immunoglobulinantistoffene Å, M, D eller E i en væske. Videre vedrører den en reagens for utførelse av fremgangsmåten.
Immunoglobuliner er antistoffer som dannes av organismens immunsystem mot fremmede stoffer (antigener) (f.eks. proteiner av sykdomsfremkallere, bakterielle polysakkarider, serumproteiner, vevsproteiner eller andre immunoglobuliner). Immunoglobulinmolekylet består av ett eller flere sett av fine polypeptidkjeder, to tunge kjeder med en molekylvekt på ca. 53.000 dalton og to lette kjeder på ca. 22.000 dalton som er forbundet ved disulfidbroer.
Immunoglobuliner inndeles generelt i klassene G, A, M, D og E og betegnes tilsvarende med IgG, IgA, IgM, IgD og IgE. Disse fem immunoglobul inkl as sene skiller seg fra hverandre ved de antigeniske determinantene i den tunge kjeden som betegnes som gamma—, alfa—, my—, delta— og epsilon—kjede; videre finnes det ved IgG, IgA og IgM også immunoglobulin-under-klasser.
Immunoglobuliner kan spaltes i fragmenter som også beholder den antigenbindende egenskapen, eller fragmenter uten antigenbindende egenskaper. Antigenbindende fragmenter er f.eks. Fab—, Fab'— og F(ab'fragmenter. Fragmenter uten antigenbindende egenskap er f.eks. Fc— og Fc'-fragmenter. Konsentrasjonen av immunoglobuliner i normalt menneskelige serum er (i mg/ml): IgG 8-16, IgA 1,4-4, IgM 0,5-2, IgD 0,0-0,4 og IgE 0,000017-0,00045.
Kvantitativt er immunoglobuliner av IgG-klassen sterkest representert i humant serum. Immunoglobuliner av IgM-klassen opptrer meget tidlig etter en infeksjon, deres bestemmelse er derfor av betydning for en tidlig diagnostisering av en infeksjonssykdom, eller for diagnosen av en akutt infeksjon. Immunoglobuliner av klassen IgA er det nest sterkest representerte immunoglobulinet og utgjør det viktigste sekretoriske antistoffet.
Immunoglobuliner av klassene IgD og IgE kan finnes i forhøyet konsentrasjon ved bestemte patologiske prosesser; IgE har eksempelvis mastcelle-sensibiliserende egenskaper og spiller en betydelig patogen rolle ved en rekke allergiske reak-sjoner. IgD-antistoffer finnes ved autoimmunsykdommer.
Bestemmelsen av antigenspesifikke immunoglobuliner, spesielt av en bestemt klasse, er av spesiell betydning for påvisningen av bestemte sykdommer forårsaket av parasitter, bakterier eller vira, hvorved det her er mulig å skille mellom akutte og helbredede infeksjoner, og eventuelt kan prognostiske uttalelser muliggjøres.
For bestemmelse av immunoglobuliner er en rekke immunologiske fremgangsmåter kjente. Fremgangsmåter for fysikalsk adskil-lelse av immunoglobuliner ifølge klasser, f.eks. immunodif-fusjon, immunoelektroforese eller tetthetsgradient-sentrifugering er omstendelige, unøyaktige og lett utsatt for forstyrrelser.
Antigenspesifikke immunoglobuliner kan bestemmes i såkalte direkte fremgangsmåter med immunoanalyseteknikker; for dette formålet kobles en immunkomponent med bindende affinitet for den antistoffklassen som skal bestemmes til en fast bærer, f.eks. antistoff mot jj-kjeden av humant IgM og den antigen-spesifikke immunoglobulin-andelen detekteres enten ved hjelp av merket antigen eller som kombinasjon av umerket antigen og antigenspesifikt merket antistoff. Kvantitativt bestemmes den til den faste fasen bundne andelen av de merkede immunkomponentene som er direkte proporsjonal med konsentrasjonen av antistoffet som skal påvises.
For merking anvendes eksempelvis fluorescerende og kromofore stoffer eller radioaktive isotoper, enzymer eller med immunkomponenter belagte partikler som erytrocytter eller latekspartikler; for synliggjørelse av den avsluttede reaksjonen kan det også anvendes en biologisk funksjon for det anvendte antigenet, f.eks. hemolyse.
En ulempe ved fremgangsmåten ifølge teknikkens stand består i at den ikkeantigen-spesifikke immunoglobulindelen av en antatt immunoglobulinklasse konkurrerer med den antigen-spesifikke andelen om det aktuelle fastfase-antistoffet (competition). Derved kan det avhengig av denne mengde-relasjonen komme til forskjellige resultater, selv når den antigen-spesifikke antistoffandelen er uforandret (den ikke-antigen-spesif ikke immunoglobulinandelen kan derved variere med en faktor 5 eller mer).
I alle hittil omtalte og siterte, såkalte direkte og indirekte fremgangsmåter er det vesentlig å fjerne ubundet materiale ved vasking etter omsetning (inkubering) av prøven med immunkomponentene på den faste bæreren og før omsetning med påvisningsimmunkomponentene. Denne fremgangsmåten betegnes derfor som "totrinnsfremgangsmåte".
Derfor krever en test med en ferdig bærerbundet komponent minst tre reaksjonstrinn (prøve/andre immunkomponent/påvisningsreaksjon), som er adskilt fra hverandre ved minst to vasketrinn, hvorved hvert reaksjonstrinn tar en viss reaksjonstid, slik at den samlede forsøkstiden finnes som summen av trinnene.
Hensikten med foreliggende oppfinnelse besto i å forkorte og forenkle den direkte testen og å unngå konkurransen mellom ikke-antigen-spesifikke og antigen-spesifikke immunoglobuliner for å muliggjøre en pålitelig kvantitativ bestemmelse av den antigen-spesifikke antistoffandelen.
Overraskende er det nå funnet at dette er mulig ved at bærer-bundne immunkomponenter, analyttholdig prøve og merkede påvisningsimmunkomponenter bringes sammen, uten å vaske mellom tilsatsen av prøven og tilsatsen av de merkede påvisningsimmunkomponentene.
Denne "ettrinnsfremgangsmåten" ble mulig etter at man hadde lykkes i å overvinne to uheldige påvirkningsmuligheter: For det første måtte innvirkningen av det antigen-spesifikke IgG-antistoffet overvinnes, slik at det ikke lenger, eller bare i uvesentlig grad, reagerte med antigenet, hvorved den egentlige påvisningsfremgangsmåten ville blitt forstyrret. Denne forstyrrelsen er prinsippielt gitt fordi ved bestemmelsen av antigen-spesifikke antistoffer fra en av immunoglobulinklassene IgA, IgM, IgE eller IgD i pasientprøven er det som regel samtidig tilstede antigen-spesifikke IgG-antistoffer, og generelt i en høyere konsentrasjon.
For det andre må aktiviteten av reumafaktoren (RF), dvs. antistoffer mot IgG, som tilhører forskjellige immunoglobu-linklasser, overvinnes idet disse kan føre til feilaktige resultater. Denne feilen muliggjøres ved at RF bindes til fast fase-antistoffet og bindes via det av RF bundne antigen-spesifikke IgG-antigenet og det oppnås derved en falsk positiv påvisningsreaksjon.
Begge disse forstyrrelsesmulighetene kunne eksempelvis unngås ved tilsats av anti-human-IgG, gamma-kjede, ("RF-absorbens" fra Behringwerke AG) til prøven (f.eks. serum).
Gjenstand for oppfinnelsen er en immunokjemisk ettrinns-fremgangsmåte for bestemmelse av et av immunoglobulinantistoffene A, M, D eller E i en væske, hvorved en fast fase, hvortil antistoffer mot denne immunoglobulin-klassen eller et fragment av et slikt antistoff er bundet, bringes i kontakt med denne væsken hvorved immunoglobulinet fra denne klassen bindes til den faste fasen, og denne faste fasen bringes i kontakt med et antigen som eventuelt bærer et merkemiddel og et merket antistoff eller et merket fragment av et antistoff mot antigenet, dersom antigenet ikke er merket, og fra mengden av det til den faste fasen bundne merkemidlet bestemmes mengden av immunoglobulinantistoffet. Fremgangsmåten er kjennetegnet ved at den faste fasen samtidig står i kontakt med væsken som inneholder immuno-globulinantistof f et som skal bestemmes og det eventuelt merkede antigenet, hvorved det til væsken er tilsatt antihumant IgG (-y-kjede) for fjerning av antigen-spesif ikt IgG-antistoff og reumatoidfaktoraktivitet.
Anti-humant-IgG, gamma-kjede, ("RF-absorbens" fra Behringwerke AG) kan eksempelvis tilsettes til prøvefortynnings-bufferen, fortrinnsvis i en mengde slik at i middel 50 mg/ml IgG kompleks bindes i serum (beregnet på basis av den ufortynnede prøven).
Ved disse forholdsregler muliggjøres en ettrinnsfremgangs-måte, hvorved prøven kan testes i en faktor 3 til 8 større fortynning (f.eks. 1:700) sammenliknet med totrinnsfremgangsmåten ifølge teknikkens stand (forsøksfortynning 1:100 til 1:200).
Samtidig unngås den nevnte konkurransen (competition) praktisk talt fullstendig, hvorved det er mulig korrekt og reproduserbart å oppnå mengdebestemmeIse og en høyere påvisningsfølsomhet (se tabell 2).
Foretrukket er en utførelsesform av fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen hvori det anvendes merket antigen.
Det kan imidlertid også anvendes umerket antigen og et mot dette antigenet rettet merket antistoff eller et merket fragment av et slikt antistoff.
For merking anvendes eksempelvis fluorescerende og kromofore stoffer eller radioaktive isotoper, enzymer eller partikler belagt med immunkomponenter som erytrocytter eller latekspartikler; for synliggjørelse av den avsluttede reaksjonen kan det også anvendes en biologisk funksjon av det anvendte antigenet, f.eks. hemolyse.
Fortrinnsvis anvendes et enzym.
Fortrinnsvis bindes til den faste fasen antistoffer mot immunoglobulinklassen M eller fragmenter av slike antistoffer som har beholdt reaktiviteten med disse immunoglobulinene.
Fortrinnsvis anvendes fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen for bestemmelse av antistoffer som er rettet mot hepatitt B-kjerneprotein, mot antigener av hepatitt A—, humant immun-svikt— (HIV), røde hunder— eller cytomegali—virus eller antigener av treponema pallidum eller toksoplasma gondii.
Gjenstand for oppfinnelsen er videre en reagens for utførelse av fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen, som er kjennetegnet ved at den minst består av antihumant IgG (-y-kjede), en bærer, hvortil det er bundet antistoffer spesifikke for humant IgM, merket antigen, som er spesifikt for dette IgM, og reagenser for påvisning eller til bestemmelse av merkingen.
Fortrinnsvis består en slik reagens minst av en bærer, hvortil de for humant IgM spesifikke antistoffene er bundet, antigen, merkede antigen-spesifikke antistoffer og reagenser for påvisning av merkingen.
Foretrukket er også et slikt middel som består av et eneste element hvori alle for fremgangsmåten påkrevde reagenser finnes i tørr form.
Som bærermateriale for den faste fasen er plaster egnede som polystyren, polyvinylklorid, polyamid eller andre syntetiske polymerer, naturlige polymerer som cellulose, samt avledede naturlige polymerer som celluloseacetat eller nitrocellulose og også glass, spesielt glassfibrer.
Bæreren kan ha form av kuler, staver, små rør og mikrotestplater. Flateformige strukturer som riflet papir, plater og membraner er også egnede. Overflaten av bæreren kan både være gjennomtrengelig og ugjennomtrengelig for vandige opp-løsninger .
Foretrukkede bærere er mikrotestplater.
En for fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen egnet fast fase fremstilles ved at et antistoff-preparat irreversibelt bindes til en bærer. Uttrykket "fastfase" brukes i foreliggende beskrivelse både for bæreren selv og også for bæreren med dertil bundne immunokjemiske reaktanter.
En irreversibel binding i foreliggende oppfinnelse foreligger eksempelvis ved 1) en adsorptiv binding som ikke spaltes ved de i fremgangsmåten anvendte reagensene som merkede immunreagenser, fortynnings- eller bufferoppløsninger, 2) en over en immunokjemisk (høyaffinitets antistoff) eller ikke immunokjemisk bindende avstandsgiver formidlet bioaffinitets-binding, hvorved avstandsgiveren kan bestå av biotin og avidin eller av andre pardannelser av reseptorer og ligander,
3) en kovalent direkte binding, eller
4) en kovalent, ved en kjemisk bifunksjonell avstandsgiver formidlet binding.
Foretrukket er den kovalente bindingen i tilfelle med anvendelse av vanngjennomtrengelige bærere, eller den adsorptive binding i tilfelle med anvendelse av vanngjennomtrengelige, og også vann-ugjennomtrengelige, bærere.
Spesielt foretrukket er den direkte adsorptive bindingen av antistoff-preparatene til polystyren som er behandlet med gammastråler som bærer.
For antistoff-merkingen kan det anvendes monoklonale eller polyklonale antistoffer samt antigen-bindende fragmenter derav som oppnås ifølge fremgangsmåter som er beskrevet som teknikkens stand.
Som antigen til fremstilling av merket antigen kommer rene proteiner, syntetiske peptider eller genteknisk fremstilte proteiner på tale, hvis fremstilling er beskrevet ifølge teknikkens stand.
Merkingen foregår ved fremgangsmåter som for de nevnte merkene er beskrevet som teknikkens stand.
I tilfelle merking av antistoff med peroksydase som enzym kan periodat-teknikken (J. Histochem. Cytochem. 1974, 22, 1084-1090) anvendes eller en fremgangsmåte ifølge J. Immunoassay
(1983), 4, 209-327, hvori partneren knyttes sammen med en heterobifunksjonell reagens.
Anvendelsesmulighetene for den beskrevne oppfinnelsen i form av en ettrinns-immuntest er prinsipielt identiske med anvendelsen av de tidligere omtalte direkte og indirekte flertrinnstestene. Den foreliggende nye fremgangsmåten adskiller seg fra disse på fordelaktig måte når det gjelder følgende tre punkter: Ved simultaninkuberingen av analyttholdig prøve og merkede immunreagenser bortfaller et inkuberingstrinn og en vaske-prosedyre, hvilket har til følge en betydelig forenkling av forsøksgjennomføringen.
Som det fremgår av de angitte eksemplene tillater ettrinns-fremgangsmåten en betydelig forkortelse av varigheten av testen, hvilket ved siden av den tidligere angitte fordelen har stor betydning for en praktisk håndterbarhet av fremgangsmåten og også muliggjør en rask påvisning av akutte infeksjoner i klinikken.
For det tredje er det ved denne ettrinns-fremgangsmåten mulig å undersøke prøven ved en høy forsøksfortynning, hvilket fører til eliminering av en mulig konkurranse (competition) og dermed tillates en pålitelig, reproduserbar bestemmelse med samtidig høyere påvisningsfølsomhet for antigen-spesifikke immunoglobuliner.
Det følgende eksemplet utgjør et utførelseseksempel av oppfinnelsen.
Eksempel
Bestemmelse av toksoplasma-spesifikt immunoglobulin M i humant serum
A. Preparat av polyklonalt anti-humant-IgM geit-anti-humant-IgM ble fremstilt som i "Methods of Enzymatic Analysis", 3. utgave 1986, bind X, "Antigens and Antibodies 1", redaktør: Hans Ulrich Bergmeyer, side 292-308.
B. Fremstilling av toksoplasma antigen
Toksoplasma gondii parasitter ble formert i bukhulen hos mus i løpet av 3 dager. Etter avlivelse av musene ble parasittene utvunnet ved spyling av bukhulen med fosfatbufret koksaltoppløsning, pH 7,2, ble vasket ved gjentatt sedimentering ved hjelp av sentrifugering og resuspendert. En på denne måten fremstilt suspensjon ble ultralyd-behandlet under avkjøling, frasentrifugert og overvæsken ble anvendt som antigen for enzymmerkingen.
C. Enzymmerking av antigenet
a) 20 mg peroksydase (POD) ble opptatt i 0,5 ml fosfatbufret koksaltoppløsning (PBS), pH 7,0 og aktivert ved tilsats av
0,6 ml natriumperjodat. Etter ca. 30 minutter ved romtemperatur ble perjodatoverskuddet fjernet ved kromatografi ("G25 Sephadex") og det brungule eluatet (aktivert POD) ble fanget opp.
b) Kobling av peroksydasen til antigenet
Til to vektdeler aktivert peroksydase ble det tilsatt 1
vektdel toksoplasma-antigen med koksalt-karbonatbuffer, pH 9,5, og dette ble blandet. Etter inkubering i 2 timer ved romtemperatur ble den dannede schiff-basen redusert ved tilsats av natriumborhydrid ( 1 mg/l mg POD). Det fargede konjugatet ble stabilisert ved tilsats av 1 mg/ml fenol og 2% > okseserumalbumin. Den optimale bruks for tynn i ngen ved testen ble bestemt ved sjakkbrett-titrering, hvorved toksoplasma-IgM-positive og —negative sera, som angitt i avsnitt E, ble vurdert i ettrinns-testen med forskjellige konsentrasjoner av antigen-peroksydase-konjugatet. Som optimal konsentrasjon ble den konsentrasjonen valgt hvorved signalforskjellen mellom positiv og negativ prøve var størst.
D. Belegging av polystyren-mikrotiterplater med anti-humant IgM
Bestrålte polystyren-mikrotiterplater (ifølge europeisk patentskrift 0 061 167) ble pr. fordypning inkubert med 100 pl av en oppløsning av anti-humant IgM i fosfatbufret koksaltoppløsning, pH 7,5, i flere timer ved romtemperatur. Den optimale konsentrasjonen av antistoffoppløsningen ble på forhånd bestemt ved serievis fortynning og uteksperimentering av disse prøvebelegningene. Deretter ble platene suget tomme, vasket med fosfatbufret koksalt-oppløsning, tørket ved hjelp av silikagel og pakket luft-og vanndamptett.
E. Bestemmelse av toksoplasma IgM-antistoffer ved ettrinns-fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen
a) En serumprøve samt en av hver av en toksoplasma IgM-positiv og toksoplasma IgM-negativ kontrollprøve ble
fortynnet 1:350 med 0,3 mol/l trisbufferoppløsning, pH 7,5, inneholdende 5 ml/100 ml toksoplasma-antistoff fritt okseserum, 0,1 ml/100 ml "Tween 20" (polyoksyetylen-sorbitanmonolaurat) og antistoff mot humant IgG (gamma-kjede) i en slik konsentrasjon at 15 mg/ml IgG, beregnet på basis av den ufortynnede prøven, bindes;
b) i ethvert tilfelle 50 pl derav ble plassert pr. fordypning på den belagte mikrotiterplaten hvor det på forhånd pr. fordypning var anbrakt 50 pl peroksydase-merket toksoplasma-antigen i på forhånd, ved sjakkbrett-titrering bestemt optimal konsentrasjon i den samme bufferen. c) forsøksplaten ble dekket og inkubert i 2 timer ved 47°C; d) deretter ble innholdet frasugd og vasket 3 ganger med PBS, inneholdende 0,1 ml/100 ml "Tween 20"; e) det ble så pr. fordypning tilsatt 100 pl kromogen (o-fenylendiamin-HCl) i citrat-fosfatbuffer, pH 5,5, og inkubert ved romtemperatur i 30 minutter; f) deretter ble det pr. fordypning tilsatt 10 pl 1 normal svovelsyre for avslutning av den enzymatiske substrat-omsetningen og oppløsningene ble målt i et fotometer ved 492 nm. g) Eksempler på oppnådde resultater:
En prøve betegnes som positiv når den ligger over en verdi
som fremkommer fra ekstinksjonen av negativ-kontrollen pluss 100 mE (i eksemplet 158 mE).
F. Bestemmelse av IgM-antistoffer ved totrinnsfremgangsmåten ifølge teknikkens stand
Det ble anvendt det samme peroksydase-merkede toksoplasma-antigenet hvis fremstilling er beskrevet i avsnitt Cb) av eksemplet, og den samme mikrotestplaten, hvis fremstilling er beskrevet i avsnitt D av eksemplet. a) De i tabell 2 oppførte serumprøvene ble fortynnet, alle 1:200 med 0,3 mol/l trisbufferoppløsning, pH 7,5, inneholdende 5 ml/100 ml toksoplasma-antistoff-fritt okseserum og 0,1 ml/100 ml "Tween 20" (polyoksyetylen-sorbitanmonolaurat); b) 50 pl derav ble tilsatt i hver fordypning på den belagte mikrotestplaten; c) testplaten ble dekket og inkubert i 1 time ved 37°C; d) innholdet ble frasugd og 3 ganger vasket med PBS inneholdende 0,1 ml/100 ml "Tween 20"; e) deretter ble det pr. fordypning tilsatt 50 pl peroksydase-merket toksoplasma-antigen; f) forsøksplaten ble igjen dekket og inkubert i 2 timer ved 37°C; g) deretter ble innholdet frasugd og vasket 3 ganger med PBS inneholdende 0,1 ml/100 ml "Tween 20"; h) nå ble det pr. fordypning tilsatt 100 pl kromogen (o-fenylendiamin-HCl) i citrat-fosfatbuffer, pH 5,5, og
inkubert ved romtemperatur i 30 minutter;
i) deretter ble det pr. fordypning tilsatt 100 pl 1 normal svovelsyre for avslutning av den enzymatiske substrat-omsetningen og oppløsningene ble målt i et fotometer ved 492 nm;
de i tabell 2 angitte serumprøvene ble også behandlet ved den i avsnittene Ea) til Ef) angitte ettrinnsfremgangsmåten.
Resultatene fra begge fremgangsmåtene er angitt i tabell 2.
Fra de målte verdiene for ekstinksjonen, som er et mål for innholdet av toksoplasma IgM-antistoffer i sera, fremgår at ettrinnsfremgangsmåten ga positive resultater ved pasientsera 1-6 (mE Ann „ større enn 88 pluss 100), som ved to-492 nm c
trinnsfremgangsmåten ga negative resultater (mE^g nm mindre enn 136 pluss 100).
Utelatelsen av RF-absorbens i ettrinnsfremgangsmåten forårsaker ved mange sera falske negative verdier, eksempelvis ved sera 1-6, eller reduserte verdier eksempelvis ved serum 7, hvilket fremgår av verdiene i parenteser.
Påvisningen av toksoplasma IgM-antistoffer ifølge ettrinns-fremgangsmåten er følgelig mer følsom og påvisningen av de nevnte og andre antistoffer kan gjennomføres raskere og enklere, hvilket fremgår av en sammenlikning av arbeidstiden for begge fremgangsmåtene, hvilket fremgår av avsnittene E og
F.
Claims (6)
1.
Immrounokjemisk ettrinns-fremgangsmåte for bestemmelse av et av immunoglobulinantistoffene A, M, D eller E i en væske, hvorved en fast fase, hvortil antistoffer mot denne immunoglobulin-klassen eller et fragment av et slikt antistoff er bundet, bringes i kontakt med denne væsken hvorved immunoglobulinet fra denne klassen bindes til den faste fasen, og denne faste fasen bringes i kontakt med et antigen som eventuelt bærer et merkemiddel og et merket antistoff eller et merket fragment av et antistoff mot antigenet, dersom antigenet ikke er merket, og fra mengden av det til den faste fasen bundne merkemidlet bestemmes mengden av immunoglobulinantistoffet, karakterisert ved at den faste fasen samtidig står i kontakt med væsken som inneholder immunoglobulinantistoffet som skal bestemmes og det eventuelt merkede antigenet, hvorved det til væsken er tilsatt antihumant IgG ('y-kjede) for fjerning av antigen-spesif ikt IgG-antistoff og reumatoidfaktoraktivitet.
2.
Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at det tilsettes anti-humant-IgG, aggregert humant IgG eller et gamma-Fc-fragment.
3.
Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at antistoffene som skal bestemmes er slike fra immunoglobulin-klasse M, som er rettet mot hepatitt B-kjerneprotein, mot antigener av hepatitt A—, humant immun-svikt— (HIV), røde hunder— eller cytomegali—virus eller proteiner av treponema pallidum eller toksoplasma gondi.
4.
Reagens for utførelse av fremgangsmåten ifølge krav 1, karakterisert ved at den minst består av
antihumant IgG (-y-kjede), en bærer, hvortil det er bundet antistoffer spesifikke for humant IgM, merket antigen, som er spesifikt for dette IgM, og reagenser for påvisning eller til bestemmelse av merkingen.
5.
Reagens for utførelse av fremgangsmåten ifølge krav 1, karakterisert ved at den minst består av antihumant IgG (-y-kjede), en bærer hvortil det er bundet antistoff spesifikt for humant IgM, antigen, merket antigen— spesifikt antistoff og reagenser for påvisning av merkingen.
6.
Reagens for utførelse av fremgangsmåten ifølge krav 1, karakterisert ved at den minst består av ett eneste element hvori alle for fremgangsmåten påkrevde reagenser finnes i tørr form.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE19873717401 DE3717401A1 (de) | 1987-05-23 | 1987-05-23 | Einschritt-immuntest zur bestimmung von antigen-spezifischen antikoerpern aus einer der immunglobulin-klassen a, m, d oder e und dazu geeignetes mittel |
Publications (4)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
NO882204D0 NO882204D0 (no) | 1988-05-20 |
NO882204L NO882204L (no) | 1988-11-24 |
NO172264B true NO172264B (no) | 1993-03-15 |
NO172264C NO172264C (no) | 1993-06-23 |
Family
ID=6328247
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
NO882204A NO172264C (no) | 1987-05-23 | 1988-05-20 | Immunokjemisk ettrinns-fremgangsmaate for bestemmelse av et av immunoglobulinantistoffene a, m, d eller e samt reagens for utfoerelse av fremgangsmaate |
Country Status (11)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US6632682B1 (no) |
EP (1) | EP0292810B1 (no) |
JP (1) | JP2636331B2 (no) |
AT (1) | ATE93060T1 (no) |
AU (1) | AU619183B2 (no) |
CA (1) | CA1336063C (no) |
DE (2) | DE3717401A1 (no) |
DK (1) | DK173687B1 (no) |
ES (1) | ES2059434T3 (no) |
FI (1) | FI89984C (no) |
NO (1) | NO172264C (no) |
Families Citing this family (21)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE3837616A1 (de) * | 1988-11-05 | 1990-05-10 | Behringwerke Ag | Einschritt-immuntest zur bestimmung von antigen-spezifischen antikoerpern aller immunglobulin-klassen und dazu geeignetes mittel |
FR2640143B1 (fr) * | 1988-12-13 | 1991-03-15 | Maes Ludo | Anticorps polymerises, diriges contre des immunoglobulines - leur utilisation dans des tests de diagnostic |
JPH0325366A (ja) * | 1989-06-22 | 1991-02-04 | Dai Ichi Pure Chem Co Ltd | 特異抗体の測定法 |
EP0456794A1 (en) * | 1989-12-01 | 1991-11-21 | PB Diagnostic Systems, Inc. | Immunoassay for antibodies to infectious disease agents |
DE4040306A1 (de) * | 1990-12-17 | 1992-06-25 | Behringwerke Ag | Verfahren zur bestimmung von antikoerpern gegen lipocortine |
JP2760896B2 (ja) * | 1991-04-11 | 1998-06-04 | シーダーズ―サイナイ・メディカル・センター | HIV特異的IgMの検出のための免疫検定 |
DE4439452A1 (de) * | 1994-11-04 | 1996-05-09 | Boehringer Mannheim Gmbh | Antikörperklassenspezifisches Entstörungsreagenz |
DE19649389A1 (de) * | 1996-11-29 | 1998-06-04 | Boehringer Mannheim Gmbh | Antigenspezifischer IgM-Nachweis |
ATE328278T1 (de) * | 1998-03-30 | 2006-06-15 | Orasure Technologies Inc | Sammelapparat für einschrittigen test von mundflüssigkeiten |
US6303081B1 (en) * | 1998-03-30 | 2001-10-16 | Orasure Technologies, Inc. | Device for collection and assay of oral fluids |
US8062908B2 (en) * | 1999-03-29 | 2011-11-22 | Orasure Technologies, Inc. | Device for collection and assay of oral fluids |
ATE403866T1 (de) * | 1998-06-24 | 2008-08-15 | Alk Abello As | Verfahren zum nachweis von antikörpern in flüssigen proben |
US20050069962A1 (en) | 2001-10-12 | 2005-03-31 | Archer Robert M | Antibody complexes and methods for immunolabeling |
US8323903B2 (en) | 2001-10-12 | 2012-12-04 | Life Technologies Corporation | Antibody complexes and methods for immunolabeling |
US20110189704A1 (en) | 2007-08-23 | 2011-08-04 | Mitsubishi Chemical Medience Corporation | Non-specific reaction inhibitor |
KR101343035B1 (ko) * | 2008-12-22 | 2013-12-18 | 삼성전자 주식회사 | 제1수용체, 차단물질 및 제2수용체가 고정화된 고체 기판을포함하는 표적물질을 분석하기 위한 물품 및 그 용도 |
WO2011074965A1 (en) * | 2009-12-17 | 2011-06-23 | Stichting Sanquin Bloedvoorziening | Methods and means for counteracting an activity of an fc domain |
US10260111B1 (en) | 2014-01-20 | 2019-04-16 | Brett Eric Etchebarne | Method of detecting sepsis-related microorganisms and detecting antibiotic-resistant sepsis-related microorganisms in a fluid sample |
US11959917B2 (en) | 2018-09-18 | 2024-04-16 | Siemens Healthcare Diagnostics Inc. | Methods and reagents for Zika virus immunoassays |
FR3110245A1 (fr) * | 2019-05-16 | 2021-11-19 | Universite Jean Monnet Saint Etienne | Procede de detection de pneumocoques |
CN111077323A (zh) * | 2020-01-12 | 2020-04-28 | 天津市宝坻区人民医院 | 消除胰岛素自身抗体干扰的胰岛素测定试剂盒 |
Family Cites Families (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4130634A (en) * | 1974-03-15 | 1978-12-19 | University Of Illinois Foundation | Method for detecting and quantifying antigens |
DE2643208C2 (de) * | 1976-09-25 | 1985-09-05 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Immunologisches Bestimmungsverfahren |
US4273756A (en) * | 1978-07-28 | 1981-06-16 | Abbott Laboratories | Immunoassay for class specific antibodies |
US4292403A (en) * | 1978-08-24 | 1981-09-29 | Akzona Incorporated | Detection and/or determination of IgM, IgA, IgD and IgE immunoglobulins |
EP0008473B1 (en) * | 1978-08-24 | 1983-06-01 | Akzo N.V. | Method for the detection and/or determination of an antigen specific immunoglobulin, immuno-reagents to be used in said method and test kit for said determination |
DE2930706A1 (de) * | 1979-07-28 | 1981-02-05 | Medac Klinische Spezialpraep | Verfahren zum nachweis von erregerspezifischen antikoerpern |
US4486530A (en) * | 1980-08-04 | 1984-12-04 | Hybritech Incorporated | Immunometric assays using monoclonal antibodies |
DE3111474A1 (de) | 1981-03-24 | 1982-10-07 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | "mittel zur immunologischen diagnose sowie verfahren zu seiner herstellung" |
EP0083869B1 (en) * | 1982-01-05 | 1985-10-16 | International Institute Of Cellular And Molecular Pathology (Icp) | Method of immunoassay |
US4434227A (en) * | 1982-02-08 | 1984-02-28 | Abbott Laboratories | Immunoassay for class specific immunoglobulin antibodies |
DE3206729A1 (de) * | 1982-02-25 | 1983-09-01 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Immunologisches agglutinationsverfahren |
US4477576A (en) * | 1982-07-26 | 1984-10-16 | Mex Research Associates | Antigen assay method and kit |
FR2534030A1 (fr) * | 1982-10-01 | 1984-04-06 | Pasteur Institut | Procede de detection et de dosage d'une substance biologique par erythroadsorption |
US4663277A (en) * | 1983-05-20 | 1987-05-05 | Profile Diagnostic Sciences Inc. | Virus detection method and materials |
JPS60256057A (ja) * | 1984-06-01 | 1985-12-17 | Dai Ichi Pure Chem Co Ltd | 免疫学的測定法 |
JPS61942A (ja) * | 1984-06-14 | 1986-01-06 | Matsushita Electric Ind Co Ltd | 光情報記録媒体 |
BE901567A (fr) * | 1985-01-24 | 1985-05-17 | Inst Internat De Pathologie Ce | Procede de dosage immunologique d'anticorps de diverses classes dans un echantillon liquide. |
EP0189389B1 (fr) * | 1985-01-24 | 1989-04-05 | Institut International De Pathologie Cellulaire Et Moleculaire | Procédé de dosage immunologique d'anticorps de diverses classes dans un échantillon liquide |
IL80129A0 (en) * | 1986-09-23 | 1986-12-31 | Savyon Diagnostics Ltd | Method for the determination of igm and iga immunoglobulins and reagents therefor |
US4962023A (en) * | 1987-06-22 | 1990-10-09 | Louisiana State University, Agricultural And Mechanical College | Single incubation immuno sorbent assay method using particle labels to detect test antigen specific antibodies in presence of other antibodies |
-
1987
- 1987-05-23 DE DE19873717401 patent/DE3717401A1/de not_active Withdrawn
-
1988
- 1988-05-13 ES ES88107704T patent/ES2059434T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1988-05-13 DE DE8888107704T patent/DE3883073D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1988-05-13 AT AT88107704T patent/ATE93060T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-05-13 EP EP88107704A patent/EP0292810B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1988-05-19 FI FI882356A patent/FI89984C/fi not_active IP Right Cessation
- 1988-05-20 AU AU16485/88A patent/AU619183B2/en not_active Ceased
- 1988-05-20 JP JP63122214A patent/JP2636331B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1988-05-20 NO NO882204A patent/NO172264C/no unknown
- 1988-05-20 CA CA000567380A patent/CA1336063C/en not_active Expired - Fee Related
- 1988-05-20 DK DK198802775A patent/DK173687B1/da not_active IP Right Cessation
-
1995
- 1995-05-22 US US08/445,584 patent/US6632682B1/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AU1648588A (en) | 1989-11-23 |
FI882356A (fi) | 1988-11-24 |
DK277588A (da) | 1988-11-24 |
FI89984C (fi) | 1993-12-10 |
NO882204D0 (no) | 1988-05-20 |
NO172264C (no) | 1993-06-23 |
US6632682B1 (en) | 2003-10-14 |
JPH01118769A (ja) | 1989-05-11 |
ES2059434T3 (es) | 1994-11-16 |
DK277588D0 (da) | 1988-05-20 |
DK173687B1 (da) | 2001-06-25 |
NO882204L (no) | 1988-11-24 |
FI882356A0 (fi) | 1988-05-19 |
JP2636331B2 (ja) | 1997-07-30 |
EP0292810A2 (de) | 1988-11-30 |
DE3883073D1 (de) | 1993-09-16 |
FI89984B (fi) | 1993-08-31 |
DE3717401A1 (de) | 1988-12-08 |
EP0292810A3 (en) | 1989-10-11 |
ATE93060T1 (de) | 1993-08-15 |
CA1336063C (en) | 1995-06-27 |
AU619183B2 (en) | 1992-01-23 |
EP0292810B1 (de) | 1993-08-11 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
NO172264B (no) | Immunokjemisk ettrinns-fremgangsmaate for bestemmelse av et av immunoglobulinantistoffene a, m, d eller e samt reagens for utfoerelse av fremgangsmaate | |
US4292403A (en) | Detection and/or determination of IgM, IgA, IgD and IgE immunoglobulins | |
US4925788A (en) | Immunoassay system and procedure based on precipitin-like interaction between immune complex and Clq or other non-immunospecific factor | |
US4332783A (en) | Process for immunologic determination tests | |
CA1098032A (en) | Solid phase assay of non-human antibody | |
US4347311A (en) | Enzyme immunoassay for determining antigen specific antibodies and test kit for carrying out this assay | |
US4294817A (en) | Method of fluoro immunoassay | |
CA1123336A (en) | Method for the demonstration and determination of an antigen or antibody | |
JP2599058B2 (ja) | クラス特異的な免疫グロブリン抗体の免疫分析法 | |
US4894347A (en) | Erythrocyte agglutination assay | |
KR20000057315A (ko) | 항원-특이적 IgM 검출방법 | |
EP0310132A2 (en) | Immunoassay utilizing IgG capture antibody and multiple monoclonal antibody detection system | |
CA1148858A (en) | Determination of immunoglobulins | |
AU611102B2 (en) | A method for the determination of anti-hiv, means therefore and their use in this method | |
Vaheri et al. | Evaluation of solid‐phase enzyme‐lmmunoassay procedure in immunity surveys and diagnosis of rubella | |
CA2008100A1 (en) | Method for the determination of immunologically detectable substance | |
JPH01209370A (ja) | 免疫活性物質の測定法及び測定試薬 | |
EP0308242A2 (en) | Agglutination assay | |
AU624650B2 (en) | One-step immunoassay for determining antigen-specific antibodies of all immunoglobulin classes, and an agent therefor | |
EP0485377A1 (en) | Solid phase immuno-assay with labelled conjugate | |
AU645970B2 (en) | A method for the determination of antibodies against organisms causing infectious diseases in body fluids, agents for this purpose and the use thereof in this method | |
CA1308652C (en) | Agglutination assay | |
WO1995006255A1 (en) | Hydrazine derivatized cells | |
AU624580B2 (en) | Reagent, method and kit for agglutination assay | |
Gandhi et al. | A simple spot-test for circulating Entamoeba histolytica antigen-antibody complexes in patients with amoebic |