NO169875B - Fremgangsmaate for fremstilling av et konsentrat av den anti-hemofile faktor viii - Google Patents
Fremgangsmaate for fremstilling av et konsentrat av den anti-hemofile faktor viii Download PDFInfo
- Publication number
- NO169875B NO169875B NO84844610A NO844610A NO169875B NO 169875 B NO169875 B NO 169875B NO 84844610 A NO84844610 A NO 84844610A NO 844610 A NO844610 A NO 844610A NO 169875 B NO169875 B NO 169875B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- peg
- ahf
- concentrate
- factor viii
- units
- Prior art date
Links
- 229960000301 factor viii Drugs 0.000 title claims description 31
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 title claims description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 19
- 102100026735 Coagulation factor VIII Human genes 0.000 claims description 58
- 101000911390 Homo sapiens Coagulation factor VIII Proteins 0.000 claims description 58
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 57
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 52
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 43
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 34
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 34
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 34
- 108010054218 Factor VIII Proteins 0.000 claims description 29
- 102000001690 Factor VIII Human genes 0.000 claims description 29
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 28
- 238000009938 salting Methods 0.000 claims description 28
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 14
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 claims description 14
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 claims description 13
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 claims description 13
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 claims description 13
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 claims description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 13
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 12
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 8
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 claims description 7
- 102100027378 Prothrombin Human genes 0.000 claims description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 7
- 229940039716 prothrombin Drugs 0.000 claims description 7
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 6
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 6
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims description 6
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 6
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 6
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 6
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 5
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims description 5
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 claims description 4
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 3
- 229960003589 arginine hydrochloride Drugs 0.000 claims description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims description 2
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 claims description 2
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 claims description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 claims description 2
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 claims description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 claims description 2
- -1 preferably basic Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 claims 1
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 54
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Inorganic materials [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 30
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 27
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 16
- 229920002560 Polyethylene Glycol 3000 Polymers 0.000 description 14
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 14
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 3
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 3
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 2
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 2
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 2
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 2
- 229910052593 corundum Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N glycine betaine Chemical compound C[N+](C)(C)CC([O-])=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 229910001845 yogo sapphire Inorganic materials 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 201000003542 Factor VIII deficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000009292 Hemophilia A Diseases 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 101710093543 Probable non-specific lipid-transfer protein Proteins 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000603 anti-haemophilic effect Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 208000031169 hemorrhagic disease Diseases 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000760 immunoelectrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 125000001483 monosaccharide substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 238000005185 salting out Methods 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2/00—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor
- A61L2/0005—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor for pharmaceuticals, biologicals or living parts
- A61L2/0011—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor for pharmaceuticals, biologicals or living parts using physical methods
- A61L2/0023—Heat
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/13—Amines
- A61K31/14—Quaternary ammonium compounds, e.g. edrophonium, choline
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2/00—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor
- A61L2/02—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor using physical phenomena
- A61L2/04—Heat
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
- C07K14/755—Factors VIII, e.g. factor VIII C (AHF), factor VIII Ag (VWF)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/829—Blood
- Y10S530/83—Plasma; serum
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Den foreliggende oppfinnelse angår en fremgangsmåte for fremstilling av et konsentrat av den anti-hemofile Faktor VIII, kalt AHF, som er i det vesentlige fritt for denaturert AHF og andre plasmaproteiner som er til stede i utgangsmaterialet for konsentratet, men ikke for faktor VIII:RP, hvilket konsentrat er lyofiliserbart uten proteintilsetning, og oppviser en oppløselighet i et vandig injeksjonsmedium på 45-500 enheter AHF pr. ml og en spesifikk aktivitet på 3,85-50 enheter AHF pr. mg protein som stammer fra utgangsmaterialet for konsentratet, ved hvilken fremgangsmåte en oppløsning av et kryoprecipitat fra blodplasma eller en annen faktor Vlll-holdig blodfraksjon renses for å fjerne prothrombin og derefter underkastes fraksjonering med polyetylenglykol, PEG, omfattende et trinn for utfeining av hovedparten av fibrinogen ved hjelp av 2-6 vekt% PEG 200-2 0.000 ved 6-22"C og pH 6,0-8,5 og et etterfølgende trinn for utfeining av AHF, fortrinnsvis ved 18-22'C.
Det er kjent at blodets evne til å koagulere styres av et system av koagulasjonsproteiner, hvorav AriF eller Faktor VIII
er en viktig komponent.
Personer med hemofili-A eller blødesykdom har helt eller delvis mistet evnen til å produsere AHF. Til behandling av denne sykdom injiseres AHF-holdige preparater, og det har derfor betydning å råde over preparater inneholdende passende høye konsentrasjoner av AHF og med lavest mulig innhold av andre proteiner, såsom fibrinogen og immunglobuliner.
Især ved behandling av inhibitorpasienter, d.v.s. pasienter som produserer antistoffer mot AHF og som derfor skal ha preparatet tilført i overskudd, med høye doser av AHF, er det viktig at den spesifikke aktivitet (enh. AHF/mg protein) er høy, idet en tilførsel av "andre proteiner" i større mengder kan fremkalle uønskede bivirkninger. Med 1 enhet AHF forstås faktor VIII aktiviteten av 1 ml. normalt blodplasma. Bivirkninger ved AHF-behandling forårsaket av immunglobuliner er f.eks. beskrevet av Tilsner et al., Munch. Med. Wschr. 124 (1982) nr. 22, s. 553-557.
AHF utvinnes normalt av det såkalte kryoprecipitat, som hovedsakelig består av fibrinogen, albumin, IgG og IgM, mens AHF utgjør mindre enn 1 % av den totale proteinmengde. Den spesifikke aktivitet av et kryoprecipitat er typisk 0,1 - 0,3 enn. AHF/mg protein.
Det er kjent at man kan fjerne en del av det unødvendige protein ved felling med glycin eller polyetylenglykol (PEG). Eventuelt kan felling utføres flere ganger, først med den ene og deretter med den annet fellingsmiddel.
Det har således lenge vært kjent å felle AHF med ca. 2 M glycin ved lav temperatur, jfr. Webster et al., se Amer. J. Med. Sc. 250, nr. 6, s. 643-650 (1965). Webster anvendte et kryoprecipitat som ble oppløst i vann og fraksjonert ved lav temperatur (<10°C) med stigende konsentrasjoner av glycin inntil 2,3 molar. Ved denne type felling utnyttes at AHF i kulden utfelles sammen med fibrinogen ved tilsetning av glycin. Herved oppnås en spesifikk aktivitet på 0,3 - 0,5 enh. AHF/mg protein.
Fra beskrivelsen til EP patent nr. 32655, er det kjent at man ved å gjennomføre fraksjoneringen av gjenoppløst kryoprecipitat med 2 M glycin som fellingsmiddel ved høyere temperaturer, såsom 30 - 45°C, først får utfelt en stor del av de andre proteiner, såsom fibrinogen, slik at AHF forblir i supernatanten, hvorfra det kan utvinnes.
Når PEG anvendes som fellingsmiddel, foretas hyppigst en fraksjonert PEG-felling, hvor hoveddelen av fibrinogenet og noe IgM fjernes ved felling med lav PEG-konsentrasjon (2 - 6 %), hvoretter AHF utfelles fra den albumin-holdige supernatant med høy PEG-konsentrasjon (5 - 15 %). Slike PEG/PEG-fellinger er beskrevet av bl.a. Newman et al., Brit. J. Haematology 21, 1972, s. l; US-patent 3.652.530; DK patentnr. 146.855, FR patent nr. 2.460.305, DK patentans. nr. 3602/81, norsk patentnr. 145.563. Ved disse metoder oppnås et AHF-konsentrat med en spesifikk aktivitet på 1 - 3 enh./mg protein.
Prosesser med flertrinnsfellinger, hvor mer enn ett fellingsmiddel anvendes, er likeledes kjent. F.eks. kan glycinfelling ved lav temperatur utføres både før og efter PEG/PEG-fellinger, eventuelt kan glycinfellinger utføres såvel før som efter PEG/PEG-fellingene. Dette er beskrevet i US-patentskrift 3.631.018. Vanligvis oppnås herved preparater med en spesifikk aktivitet på 1 - 3 enh./mg protein.
Når det i denne sammenheng felles med glycin ved lav temperatur, utnyttes det AHF-holdige bunnfall, d.v.s. at det ved etterfølgende PEG-fellinger på gjenoppløst AHF-holdig precipitat kun er en lav konsentrasjon av glycin i oppløsningen.
Anvendes glycin ved høy temperatur i forbindelse med PEG-felling, utføres først en glycin-felling som efterlater AHF i supernatanten hvor konsentrasjonen av glycin er høy, og derefter felles AHF derfra med en PEG-felling ved høy PEG-konsentrasjon. Herved oppnås en spesifikk aktivitet på 1 - 3 enh./mg protein.
Ved denne type glycin/PEG-felling ble det oppnådd et konsentrat som ligner et konsentrat oppnådd ved PEG/PEG-felling. Som det fremgår av tabell 1 inneholder 1. fellings-supenatant mer IgM og IgG efter en varm felling med 2 M glycin enn efter en felling med lav PEG-konsentrasjon (4%). Efter sluttfellingen med høy PEG-konsentrasjon (9%), inneholder konsentratet fra glycin/PEG-fellingen imidlertid mindre IgM og IgG enn konsentratet fra PEG/PEG-fellingen.
Årsaken til dette er ikke tidligere erkjent, men det må antas at den polare aminosyre i glycinsupernatanten virker innsaltende, især på basiske proteiner, således at IgM og IgG ikke så lett utfelles med PEG. Det ved glycin/PEG-fellingen oppnådde konsentrat har imidlertid stadig et uønsket høyt innhold av fibrinogen, IgG og IgM, jfr. tabell 2 nedenfor.
Formålet med foreliggende oppfinnelse er å tilveiebringe et høyrent, direkte lyofiliserbart AHF-konsentrat som har en så høy oppløselighet og spesifikk aktivitet at det kan administreres intravenøst i injeksjonsdoser på 1000 enheter oppløst i 2-5 ml injeksjonsmedium, og som inneholder faktor Vlll-kompleksets annen bestanddel faktor VIII: RP, som virker stabiliserende på den koagulasjonsaktive faktor VIII:C.
Dette oppnås ved fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen, som kjennetegnes ved det som er angitt i karakteristikken til krav l.
Det bemerkes at det ikke er en entydig sammenheng mellom
et AHF-konsentrats spesifikke aktivitet og dets oppløselighet, idet sistnevnte avhenger av arten av øvrige proteiner, særlig fibrinogen, men at en høy spesifikk aktivitet alt annet likt også vil innebære en høy oppløselighet.
Oppfinnelsen er basert på den overraskende erkjennelse at man kan oppnå et særlig rent AHF-preparat inneholdende såvel faktor VIII:C som faktor VIIlrRP, men som i det vesentlige er befridd for andre proteiner, især immunglobuliner, ved å fraksjonere et kryoprecipitat med PEG på en slik måte at det først utfelles hovedparten, fortrinnsvis minst 80 % av fibrinogenet, og at det i et etterfølgende trinn felles med mer PEG i nærvær av et innsaltningsmiddel. Tilsetningen av innsaltningsmidlet medfører ikke i seg selv utfellinger, men på grunn av tilstedeværelsen av innsaltningsmidlet, modifiseres betingelsene under den etterfølgende PEG-felling, slik at det oppnås en skarpere fraksjonering, d.v.s. et renere AHF-preparat med en høy spesifikk aktivitet, jfr. tabell 2 nedenfor. Den høye renhet bevirker at preparatet har en oppløselighet på 45-500, oftest 200-500 enheter Faktor VIII:C (AHF) pr. ml. Da en normal injeksjonsdose er 1000 enheter, kan man således klare seg med ca. 2 - 5 ml injeksjonsmedium. Da oppløseligheten av de besteAHF-preparater på markedet er angitt å være 40-50 enheter pr. ml svarende til et injeksjonsvolum på 20 - 25 ml, medfører preparatet fremstilt ifølge oppfinnelsen således en meget betydelig lettelse for pasienten.
Ved fellingen ifølge oppfinnelsen er glycin således anvendt som innsaltningsmiddel, idet det stabiliserer de uønskede proteiner ved å holde dem i oppløsning, men derimot de hittil kjente metoder -utnytter glycins utsaltende effekt på figrinogen/AHF. Ved anvendelse av innsaltningsmiddel under en PEG/PEG-felling oppnås altså en mer selektiv utfelling av AHF.
Uten å ville være bundet til noen bestemt teori antas det at innsaltningsmidlets virkning beror på at det øker forskjellen i overflateladning mellom Faktor VIII og de øvrige proteiner, særlig IgG.
Det er viktig å fjerne hovedparten av fibrinogenet i første trinn, fordi AHF-preparatet ellers ville være sterkt forurenset med fibrinogenet og fordi tilstedeværelsen av fibrinogen i annet trinn vil motvirke innsaltningseffekten og hindre en selektiv utfelling av Faktor VIII.
Som innsaltningsmiddel ved fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen benyttes hensiktsmessig en aminosyre, spesielt basiske aminosyrer, fortrinnsvis lycin eller arginin tilsatt i form av hydrokloridet. Andre anvendelige aminosyrer er histidin, samt polare aminiosyrer såsom serin, glutamin, glycin og c-aminoheksansyre. Andre anvendelige innsaltningsmidler er karbohydrater såsom mono- eller disakkarider, f.eks. glukose og sakkarose, men også oligosakkarider samt sukkeralkoholer, f.eks. sorbitol og glycerol.
En oversikt er gitt i tabell 3.
Det foretrukne innsaltningsmiddel er lysin-HCl. På tegningen er vist lysins innflytelse på PEG/PEG-felling av AHF uttrykt som henholdsvis enh. AHF/mg protein (fig. 1) og % utbytte i forhold til kryoprecipitatet ved forskjellige lysinkonsentrasjoner (fig. 2). Lysin tilsettes fortrinnsvis i konsentrasjoner på 0,1 - 0,9, spesielt 0,4 - 0,8, helst 0,5 - 0,7 mol/l.
Som det fremgår av fig. 1, er det proporsjonalitet mellom tilsatt lysinmengde og spesifikk aktivitet av sluttproduktet, men selv små lysinmengder har en klar effekt. Som det fremgår av fig. 2 faller utbyttet av AHF ved den anvendte PEG-konsentrasjon imidlertid, hvis det anvendes mer enn 0,7 M lysin, idet denne mengde lysin også virker innsaltende på AHF.
Et annet foretrukket innsaltningsmiddel er arginin-HCl, hvis innflytelse på PEG/PEG-fellingen av AHF fremgår av nedenstående tabell 4, hvor det sees at tilfredsstillende utbytter oppnås ved konsentrasjoner på 0,2 - 0,8. Under hensyn til utbyttet er den foretrukne mengde 0,3 - 0,5, spesielt 0,4 mol/l.
De anvendte konsentrasjoner av PEG og innsaltningsmiddel samt pH under fellingen avhenger særlig av det anvendte innsaltningsmiddel, idet det som generell regeel kan sies at de mer ladete innsåltningsmidler kan anvendes i mindre konsentrasjoner. Den valgte innsaltningsmiddelkonsentrasjon hviler på et kompromiss, idet man ved høye konsentrasjoner kan redusere IgG-mengden nesten fullstendig, men samtidig innsaltes også en del Faktor VIII, hvorved utbyttet reduseres.
Ved fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen anvendes PEG med en molekylvekt på 200 - 20.000, fortrinnsvis 2.000 - 12.000, spesielt 3.000 - 6.000, men PEG 3000 foretrekkes. PEG-konsentrasjonen i det første fellingstrinn er 2 - 6 vekt %, fortrinnsvis ca. 4 vekt % og i det annet trinn 6-20 vekt %, fortrinnsvis ca. 12 vekt %. pH under første fellingstrinn kan være 6,0 - 8,5, fortrinnsvis 6,2 - 6,6, spesielt 6,4, og under annet trinn 5,0 - 8,5, fortrinnsvis 6,0 - 6,6, spesielt ca. 6,3.
Temperaturen i det første fellingstrinn kan være 6 - 22 °C, fortrinnsvis 18 - 22'C. I annet fellingstrinn er temperaturen også fortrinnsvis 18 - 22°C (romtemperatur).
Ved utvinningen av det omtalte Faktor VIII-konsentrat kan man anvende kryoprecipitat fra humant blodplasma eller andre Faktor Vlll-holdige blodfraksjoner, likesom man kan anvende plasmafraksjoner fra dyrearter, f.eks. gris. I dette tilfelle vil man normalt ikke anvende kryoprecipitatet, men en blodfraksjon oppnådd f.eks. ved PEG-felling.
Fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen skal i det følgende forklares nærmere ved hjelp av noen eksempler, som også illustrerer opparbeidelsen av konsentratet. Til preparatfrem- stilling kan AHF-oppløsningen om ønsket underkastes en varme-behandling i 10 timer ved 60'C i nærvær av en passende stabili-sator for å oppnå en hepatitis-sikring og/eller om ønsket frysetørring.
EKSEMPEL 1
Kryoprecipitat fra 600 ml human blodplasma inneholdende
240 enheter Faktor VIII:C gjenoppløses i 28 ml citrat/glukose-buffer og befris for protrombinkompleks ved adsorbsjon med A1203. Derefter tilsettes 4 vekt % PEG 3000. pH justeres til
6,4med 0,5 M HC1, og blandingen inkuberes 30 minutter ved romtemperatur. Utfelt protein fjernes ved sentrifugering, og lysin-HCl tilsettes til en konsentrasjon på 0,55 mol/l.Ytterligere 8 vekt % PEG 3000 tilsettes, og pH justeres til 6,3 med0,1 M NaOH. Efter inkubering i 45 minutter ved romtemperatur, isoleres bunnfallet ved sentrifugering og gjenoppløses i citrat/glukose-NaCl, pH 7,8. Det gjenoppløste bunnfall som inneholdt 112 enheter faktor VIII:C og 9 mg totalprotein, har således en spesifikk aktivitet på 12 enheter Faktor VIII:C
(AHF) pr. mg protein, og utbyttet av Faktor VIII:C fra plasma er 2 0 %. Det ble ikke foretatt oppløselighetsbestemmelse, men det må antas at oppløseligheten er minst 200 enheter Faktor VIII:C/ml, jfr. eksempel 5 og 6.
Disse resultater er opptatt i nedenstående tabell 5 sammen med resultatet for sammenligningsforsøk uten lycintilsetning.
Tabellen viser at det ved fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen kan oppnås en vesentlig økning i spesifikk aktivitet og en reduksjon av innholdet av immunglobulin G i forhold til enPEG/PEG-felling uten tilstedeværelse av innsaltningsmiddel.
EKSEMPEL 2
3 0 ml kryo-oppløsning oppnådd analogt med eksempel 1 og adsorbert med A1203, tilsettes 4 vekt % PEG 3000. pH justeres til 6,4 med 0,5 M HC1, og blandingen inkuberes i 30 minutter ved romtemperatur. Utfelt protein fjernes ved sentrifugering,
og "innsaltningsmiddel" tilsettes. Derefter tilsettes ytterligere8vekt % PEG 3000, og pH justeres til 6,3 med 0,1 M NaOH. Efter
inkubering i 45 minutter ved romtemperatur isoleres bunnfallet ved sentrifugering og gjenoppløses i citrat/glukose-NaCl, pH 7,8.
Tabell6angir de oppnådde resultater for forskjellige innsaltningsmidler. Det ble ikke foretatt oppløselighets-bestemmelser, men det antas at oppløseligheten er minst 200 enheter Faktor VIII:C/ml, jfr. eksempel 5 og 6.
EKSEMPEL 3
Kryoprecipitat fra 2,5 1 plasma gjenoppløses i 100 ml citrat/glukosebuffer og befris for protrombinkompleks ved adsorbsjon med A1203. Det tilsettes 4 vekt % PEG 3000. pH justeres til 6,4 med 0,5 M HC1, og blandingen inkuberes i 30 minutter ved romtemperatur. Utfelt protein fjernes ved sentrifugering, og arginin-HCl tilsettes til en konsentrasjon på 0,40 mol/l. Ytterligere 8 vekt % PEG 3000 tilsettes, og pH justeres til 6,3 med 0,1 M NaOH. Efter inkubering i 45 minutter ved romtemperatur isoleres bunnfallet ved sentrifugering og gjenoppløses i 20 ml citrat/sakkarose/NaCl, pH 7,8. Konsentratet inneholder 3 60 enheter Faktor VIII:C og 52 mg protein (spesifikk aktivitet 7 enh./mg). Det ble ikke foretatt bestemmelse av oppløseligheten av konsentratet, men det antas å være minst 200 enheter/ml, jfr. eksempel 5 og 6.
EKSEMPEL 4
Kryoprecipitat fra 2,5 1 plasma gjenoppløses i 100 ml citrat/glukosebuffer og befris for protrombinkompleks ved adsorbsjon med A1203. Det tilsettes 4 vekt % PEG 3000. pH justeres til 6,4 med 0,5 M HC1, og blandingen inkuberes i 30 minutter ved romtemperatur. Utfelt protein fjernes ved sentrifugering, og lysin HCl tilsettes til en konsentrasjon på 0,55 mol/l. Ytterligere 8 vekt % PEG 3000 tilsettes, og pH justeres til 6,3 med 0,1 M NaOH. Efter inkubering i 45 minutter ved romtemperatur, isoleres bunnfallet ved sentrifugering og gjenoppløses i 5 ml citrat/sakkarose/NaCl, pH 7,8. Konsentratet inneholder 460 enh. Faktor VIII:C og 30 mg protein (spesifikk aktivitet 15 enh./mg). Det ble ikke foretatt bestemmelse av oppløsligheten av konsentratet, men det antas å være minst 200 enheter/ml, jfr. eksempel 5 og 6.
EKSEMPEL 5
Kryoprecipitat fra 80 kg plasma gjenoppløses i 2500 ml citrat-buffer og befries for protrombinkompleks ved adsorbsjon med A1203. Det tilsettes 4 vekt% PEG 3 000. pH justeres til 6,4 med 0,5 M HC1, og blandingen inkuberes i 30 minutter ved romtemperatur. Utfelt protein fjernes ved sentrifugering, og lysin-HCl tilsettes til en konsentrasjon på 0,55 mol/l. Ytterligere 8 vekt% PEG 3000 tilsettes, og pH justeres til 6,3 med 0,1 M NaOH. Efter inkubering i 45 minutter ved romtemperatur, isoleres bunnfallet ved sentrifugering og gjenoppløses i 60 ml citrat/sakkarose/NaCl. Oppløsningen sterifiltreres og dispenseres i 15 hetteglass. Efter frysing og frysetørkning inneholder hvert hetteglass 1000enh. AHF med en spesifikk aktivitet på 37 enh./mg protein.
Da de ialt 15.000 enh. AHF er utvunnet av 60 ml oppløsning, kan det fastslåes at oppløseligheten er minst 250 enh. pr. ml.
EKSEMPEL 6
Kryoprecipitat fra 13 liter plasma gjenoppløses i 525 ml citrat/glucose-buffer og befries for protrombin-kompleks ved adsorbsjon ved A1203. Det tilsettes 4 vekt% PEG 3000. pH innstilles på 6,4 med 0,5 M HC1, og blandingen inkuberes i 3 0 minutter ved romtemperatur. Utfelt protein fjernes ved sentrifugering, og lysin-HCl tilsettes til en konsentrasjon på 0,55 mol pr. liter. Ytterligere 8 vekt% PEG 3000 tilsettes, og pH justeres til 6,3 med 0,1 M NaOH. Efter inkubering i 45 minutter ved romtemperatur isoleres bunnfallet ved sentrifugering og gjenoppløses i 2,1 ml citrat/sakkarose/NaCl, pH 7,8. Konsentratet, som .er på 3,1 ml, inneholder 2180 enh. FVIIIrC og 81mg protein. Oppløseligheten er således 703 enheter pr. ml,
og den spesifikke aktivitet 27 enh./mg.
EKSEMPEL 7
I dette eksempel undersøkes det hvorvidt den innsaltende virkning av glycin kunne forbedres ved tilsetning av NaCl, som hever ionestyrken, og hvorvidt NaCl, som er et kjent innsalt-nings-middel, alene har tilstrekkelig innsaltende virkning under en PEG-feining til å føre til et ønsket konsentrat.
For ytterligere å variere prosessbetingelsene ble det valgt å gjennomføre felningen ved lav temperatur (6-9°C). 50 g kryoprecipitat gjenoppløses i 2 00 ml destillert H20 ved romtemperatur. 12,3 ml 1,3% A1203og 7,9 g PEG 3000 (3%) tilsettes. pH justeres til 6,7 med 1 M HAc, og blandingen nedkjøles til 10°C. Efter nedkjøling fjernes bunnfall ved sentrifugering i 15 minutter ved 9°C. Ytterligere 8% PEG, 2 M glycin (13%) og 14% NaCl tilsettes, hvorefter pH justeres til5,7, og blandingen nedkjøles til 6°C. Bunnfallet isoleres ved sentrifugering i 15 minutter ved 6°C og gjenoppløses i 50 ml (1/5 kryo vol.) 5mM citrat, 0,13 M NaCl og 0,1 M glycin, pH 7,3.
FVIII og proteininnholdet i det gjenoppløste konsentrat var lavt. Derfor ble det med varierende NaCl- og glycin-konsentrasjonen undersøkt om innsaltningen som forventet skyldes glycin. Som det fremgår av nedenstående tabell ble FVIII bare i liten grad utfelt uten NaCl. NaCl-tilsetning alene medfører imidlertid ikke øket proteinutfeining (som PEG-tilsetning). Tvert i mot virker NaCl i høy grad innsaltende. Ved den lave temperatur medvirker glycin til å felle FVIII, men den høye spesifikke aktivitet kan ikke oppnåes uten NaCl-tilsetning.
Virkning av glycin og varierende NaCl-konsentrasjon.
EKSEMPEL 8 (Bestemmelse av faktor VIII:PR-innholdet)
Det fremgår av Zimmermann, US patent 4 3 61 509 at det for
å oppnå en adskillelse av de to komponenter i faktor VIII-komplekset må benyttes spesifikke rensningsmetoder, så som immunadsorbsjon eller ionebyttekromatografi.
I de foregående eksempler hvor det som utgangsmateriale anvendes (oppløst) kryoprecipitat, som således inneholder faktor Vlll-komplekset, foretaes det på intet tidspunkt slike rensninger, og det er derfor åpenbart for en gjennomsnitts-fagmann at de i eksemplene oppnådde faktor Vlll-konsentrater stadig inneholder såvel koagulasjonsaktiv faktor VIII:C som som Willebrand-faktoren faktor VIII:RP.
Imidlertid ble det ikke gjennomført målinger av faktor VIIIrRP-innholdet, og det er derfor ikke mulig å tilføre tallverdier for disse i de eksisterende eksempler.
Det er imidlertid gjennomført faktor VIII:C og faktor VIII:RP-bestemmelse på en rekke AHF-preparater fremstilt ifølge oppfinnelsen, som forhandles under betegnelsen "NORDIOCTO®" og som er fremstilt analogt med eksempel 5, det vil si i enhetsdoser på 1000 enheter faktor VIII:C (±20%).
Det ble oppnådd følgende resultater:
FVIII-RP er bestemt ved rakettimmunelektroforese med antistoff fra DAKO (A 082). Som standard er anvendt en pool av normal plasma (ca; 1 enh. FVIII-RP/ml).
FVIII:C er bestemt ved en ett-trinnskoagulasjonsunder-søkelse. Som standard er anvendt en pool av normal plasma (ca.
1 enh. FVIII:C/ml)'. f
Det er lett å se for en fagmann at det kan oppnås en effekt av innsaltningsmiddel på en PEG/PEG-felling under andre betingelser enn anført ovenfor. Ved annerledes pH og temperatur, skal det således anvendes andre konsentrasjoner av PEG og innsaltningsmiddel. De mest hensiktsmessige betingelser kan fastlegges ved forsøk.
Claims (6)
1. Fremgangsmåte for fremstilling av et konsentrat av den antihemofile faktor VIII (AHF), som er i det vesentlige fritt for denaturert AHF og andre plasmaproteiner som er til stede i utgangsmaterialet for konsentratet, men ikke for faktorVIII:RP, hvilket konsentrat er lyofiliserbart uten proteintilsetning, og oppviser en oppløselighet i et vandig injeksjonsmedium på 45-500 enheter AHF pr. ml og en spesifikk aktivitet på3,85-50 enheter AHF pr. mg protein som stammer fra utgangsmaterialet for konsentratet, ved hvilken fremgangsmåte en oppløsning av et kryopresipitat fra blodplasma eller en annen faktor Vlll-holdig blodfraksjon renses for å fjerne prothrombin og derefter underkastes fraksjonering med polyetylenglykol,PEG, omfattende et trinn for utfeining av hovedparten av fibrinogen ved hjelp av 2-6 vekt% PEG 200-20.000 ved 6-22'C og pH6,0-8,5 og et etterfølgende trinn for utfeining av AHF, fortrinnsvis ved 18-22"C,
karakterisert vedat supernatanten fra den førstnevnte PEG-feining felles med 6-20 vekt% PEG 200-20.000 ved pH5,0-8,5 i nærvær av et innsaltningsmiddel valgt blant aminosyrer, fortrinnsvis basiske, karbohydrater og sukkeralkoholer, hvorpå det utskilte bunnfall med konsentrert innhold av AHF utvinnes og om ønsket, frysetørres.
2. Fremgangsmåte ifølge krav 1,karakterisertved at det som innsaltningsmiddel anvendes lysin-HCl eller argenin-HCl i en mengde svarende til en lysin- eller arginin-konsentrasjon på henholdsvis 0,1-0,9 og 0,2-0,8 mol pr. liter, fortrinnsvis 0,4-0,8 og 0,3-0,5 mol pr. liter.
3. Fremgangsmåte ifølge krav 1,karakterisertved at det som innsaltningsmiddel anvendes et karbohydrat, fortrinnsvis et mono- eller disakkarid.
4.Fremgangsmåte ifølge krav 3, kar a^ k t e r i s e r t ved at det som innsaltningsmiddel anvendes sakkarose.
5. Fremgangsmåte ifølge krav 1-4,karakterisertved at det i annet felningstrinn tilsettes PEG svarende til en total konsentrasjon på ca. 12 vekt%.
6. Fremgangsmåte ifølge krav 1-5,karakterisertved at den pH som anvendes under annet felningstrinn er 6,0-6,6, især 6,3.
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DK127483A DK127483D0 (da) | 1983-05-09 | 1983-05-09 | Fremgangsmade til fremstilling af et koncentrat af den anti-hemofile faktor viii |
DK549483A DK157170C (da) | 1983-05-09 | 1983-12-01 | Koncentrat af den anti-hæmofile Faktor VIII samt fremgangsmåde til fremstilling deraf |
DK64684A DK64684A (da) | 1983-05-09 | 1984-02-14 | Fremgangsmaade til fremstilling af et koncentrat af den anti-haemofile faktor viii |
PCT/DK1984/000019 WO1984003628A1 (en) | 1983-05-09 | 1984-03-20 | A concentrate of the antihemophilic factor viii and a process for producing it |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
NO844610L NO844610L (no) | 1984-11-20 |
NO169875B true NO169875B (no) | 1992-05-11 |
NO169875C NO169875C (no) | 1992-08-19 |
Family
ID=27220842
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
NO84844610A NO169875C (no) | 1983-05-09 | 1984-11-20 | Fremgangsmaate for fremstilling av et konsentrat av den anti-hemofile faktor viii |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4650858A (no) |
EP (1) | EP0148843B2 (no) |
DE (1) | DE3481109D1 (no) |
FI (1) | FI80382C (no) |
NO (1) | NO169875C (no) |
WO (1) | WO1984003628A1 (no) |
Families Citing this family (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DK525384D0 (da) * | 1984-11-05 | 1984-11-05 | Nordisk Insulinlab | Praeparat paa basis af faktor viii til behandling af haemofili a inhibitorpatienter samt fremgangsmaade til fremstilling af et saadan praeparat |
SE8501050D0 (sv) * | 1985-03-05 | 1985-03-05 | Kabivitrum Ab | Biologically active fragments of human antihemophilic factor and method for preparation thereof |
GB8505882D0 (en) * | 1985-03-07 | 1985-04-11 | Central Blood Lab Authority | Purification of blood coagulation factor viii |
DE3625090A1 (de) * | 1986-07-24 | 1988-01-28 | Behringwerke Ag | Mittel zur therapie faktor viii-resistenter haemophilie a und verfahren zu seiner herstellung |
DE3851696T2 (de) * | 1987-12-21 | 1995-02-23 | Miles Inc | Faktor VIII- Gelfiltration. |
EP0399321B1 (en) * | 1989-05-24 | 1993-06-23 | Miles Inc. | Gel filtration of heat treated factor viii |
DE4111393A1 (de) * | 1991-04-09 | 1992-10-15 | Behringwerke Ag | Stabilisierte faktor viii-praeparationen |
AU670793B2 (en) * | 1992-04-30 | 1996-08-01 | Alpha Therapeutic Corporation | Improved solubilization and stabilization of factor VIII complex |
US5330974A (en) * | 1993-03-01 | 1994-07-19 | Fibratek, Inc. | Therapeutic fibrinogen compositions |
GB9424732D0 (en) * | 1994-12-08 | 1995-02-08 | Common Services Agency | Heat treated blood plasma proteins |
US5659017A (en) * | 1995-11-07 | 1997-08-19 | Alpha Therapeutic Corporation | Anion exchange process for the purification of Factor VIII |
JP5149470B2 (ja) | 1999-02-22 | 2013-02-20 | バクスター・インターナショナル・インコーポレイテッド | 新規のアルブミンを含有していない第viii因子処方物 |
LT1596887T (lt) * | 2003-02-26 | 2022-04-25 | Nektar Therapeutics | Polimero-faktoriaus viii fragmento konjugatai |
NZ593190A (en) | 2008-11-07 | 2013-01-25 | Baxter Int | Factor viii formulations |
ES2966234T3 (es) | 2009-06-09 | 2024-04-18 | Prolong Pharmaceuticals Llc | Composiciones de hemoglobina |
US9624262B2 (en) | 2011-09-16 | 2017-04-18 | Ge Healthcare Bioprocess R&D Ab | Plasma protein fractionation by sequential polyacid precipitation |
Family Cites Families (21)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3652530A (en) * | 1967-08-28 | 1972-03-28 | American Nat Red Cross | Antihemophilic factor prepared from blood plasma using polyethylene glycol |
US3631018A (en) * | 1970-05-01 | 1971-12-28 | Baxter Laboratories Inc | Production of stable high-potency human ahf using polyethylene glycol and glycine to fractionate a cryoprecipitate of ahf concentrate |
US3682881A (en) * | 1970-10-02 | 1972-08-08 | Baxter Laboratories Inc | Fractionation of plasma using glycine and polyethylene glycol |
US4069216A (en) * | 1975-06-16 | 1978-01-17 | Edward Shanbrom, Inc. | Simplified methods for preparation of very high purity Factor VIII concentrate |
US4027013A (en) * | 1976-01-22 | 1977-05-31 | William L. Wilson | Clottable fibrinogen free factor VIII and albumin product and process |
JPS52125609A (en) * | 1976-04-09 | 1977-10-21 | Green Cross Corp:The | Purification of agglutination factor viii |
DE2916711A1 (de) * | 1979-04-25 | 1980-11-06 | Behringwerke Ag | Blutgerinnungsfaktoren und verfahren zu ihrer herstellung |
FR2460305A2 (fr) * | 1979-06-29 | 1981-01-23 | Merieux Inst | Procede de preparation d'un concentre de facteur viii |
SE448945B (sv) * | 1979-12-20 | 1987-03-30 | Blombaeck E G B | Forfarande for rening och /eller koncentrering av faktor viii-komplexet |
US4289691A (en) * | 1980-01-18 | 1981-09-15 | The Canadian Red Cross Society | Method of obtaining intermediate purity factor VIII |
US4386068A (en) * | 1980-02-26 | 1983-05-31 | Cutter Laboratories, Inc. | Antihemophilic factor concentrate and method for preparation |
AT369263B (de) * | 1980-08-27 | 1982-12-27 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung eines faktor viii(ahf) -hochkonzentrates |
EP0062456B1 (en) * | 1981-04-08 | 1988-12-21 | United Kingdom Atomic Energy Authority | Blood fractionation improvement |
US4435318A (en) * | 1981-05-22 | 1984-03-06 | Ionics, Incorporated | Electrodialysis preparation of purified AHF concentrate |
JPS5874617A (ja) * | 1981-10-28 | 1983-05-06 | Green Cross Corp:The | 人由来血液凝固第7因子含有水溶液の加熱処理方法 |
US4361509A (en) | 1981-12-14 | 1982-11-30 | Scripps Clinic And Research Foundation | Ultrapurification of factor VIII using monoclonal antibodies |
US4495175A (en) * | 1982-08-05 | 1985-01-22 | University Of Rochester | Preparation of highly purified human antihemophilic factor |
US4478825A (en) * | 1983-10-14 | 1984-10-23 | Armour Pharmaceutical Company | Warm ethanol method for preparation of low fibrinogen antihemophilic factor |
US4508709A (en) * | 1983-12-05 | 1985-04-02 | Armour Pharmaceutical Company | Process for purifying factor VIII:C |
US4486410A (en) * | 1984-02-09 | 1984-12-04 | Armour Pharmaceutical Company | Heat defibrinogenation of AHF preparation |
US4543210A (en) * | 1984-10-04 | 1985-09-24 | Miles Laboratories, Inc. | Process for producing a high purity antihemophilic factor concentrate |
-
1984
- 1984-03-20 EP EP84901337A patent/EP0148843B2/en not_active Expired - Lifetime
- 1984-03-20 US US06/673,753 patent/US4650858A/en not_active Expired - Fee Related
- 1984-03-20 WO PCT/DK1984/000019 patent/WO1984003628A1/en active IP Right Grant
- 1984-03-20 DE DE8484901337T patent/DE3481109D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1984-11-20 NO NO84844610A patent/NO169875C/no unknown
- 1984-11-20 FI FI844557A patent/FI80382C/fi not_active IP Right Cessation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DE3481109D1 (de) | 1990-03-01 |
EP0148843B2 (en) | 1994-05-04 |
EP0148843A1 (en) | 1985-07-24 |
FI80382C (fi) | 1990-06-11 |
FI844557A0 (fi) | 1984-11-20 |
FI844557L (fi) | 1984-11-20 |
NO844610L (no) | 1984-11-20 |
WO1984003628A1 (en) | 1984-09-27 |
US4650858A (en) | 1987-03-17 |
NO169875C (no) | 1992-08-19 |
EP0148843B1 (en) | 1990-01-24 |
FI80382B (fi) | 1990-02-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US5177194A (en) | Process for purifying immune serum globulins | |
US4216205A (en) | Process of preparing a serum protein composition for intravenous application | |
NO169875B (no) | Fremgangsmaate for fremstilling av et konsentrat av den anti-hemofile faktor viii | |
US4203891A (en) | Method of collecting anti-hemophilic factor VIII from blood and blood plasma using heparin or sodium heparin | |
EP0428758B1 (en) | Method for producing an albumin preparation | |
US20080242844A1 (en) | Ultra-high Yield Intravenous Immune Globulin Preparation | |
ES2320919T3 (es) | Proceso para separar el inhibidor de alfa-1-proteinasa de una pasta de fraccion cohn iv-1+iv-4. | |
EP0367220B1 (en) | Albumin preparation and process for preparing the same | |
US7879332B2 (en) | Ultra-high yield intravenous immune globulin preparation | |
EP0176926B1 (en) | Process for producing a high purity antihemophilic factor concentrate | |
EP0469985B1 (en) | Process for manufacturing von Willebrand factor having a very high purity | |
US4670544A (en) | Process for the manufacture of the cold insoluble globulin and pharmaceutical preparation containing it | |
AU549584B2 (en) | Heat stabilization of plasma proteins | |
RU2097047C1 (ru) | Препарат человеческого фактора xi свертывания крови и способ его получения | |
US5097019A (en) | Pharmaceutical containing tissue protein pp4, a process for the preparation of pp4 and for the pasteurization thereof, and the use of pp4 | |
US4814435A (en) | Method of producing a factor VIII (AHF) containing fraction | |
EP0035616A1 (en) | Production of immunoglobulin having a high monomer content | |
AU635535B2 (en) | Gel filtration of heat treated factor viii | |
EP0011739B1 (en) | Process for obtaining blood coagulation factor xiii derived from human placenta | |
JPH0381290A (ja) | 精製されたアルブミン溶液の製造方法 | |
KR20000036002A (ko) | 혈장 단백질 함유 약제를 제조하는 방법 | |
JPH11504644A (ja) | 免疫グロブリンの製造 | |
CA2150612A1 (en) | Process for producing albumin preparation | |
US5277818A (en) | Albumin preparation and process for preparing the same | |
JPS6242887B2 (no) |