NO167588B - Fremgangsmaate til bestemmelse av den fibrinolytiske tilstanden for plasma, og reagens for anvendelse ved fremgangsmaaten. - Google Patents

Fremgangsmaate til bestemmelse av den fibrinolytiske tilstanden for plasma, og reagens for anvendelse ved fremgangsmaaten. Download PDF

Info

Publication number
NO167588B
NO167588B NO860089A NO860089A NO167588B NO 167588 B NO167588 B NO 167588B NO 860089 A NO860089 A NO 860089A NO 860089 A NO860089 A NO 860089A NO 167588 B NO167588 B NO 167588B
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
fibrin
thrombin
reagent
plasma
time
Prior art date
Application number
NO860089A
Other languages
English (en)
Other versions
NO167588C (no
NO860089L (no
Inventor
Knut Bartl
Helmut Lill
Original Assignee
Boehringer Mannheim Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Boehringer Mannheim Gmbh filed Critical Boehringer Mannheim Gmbh
Publication of NO860089L publication Critical patent/NO860089L/no
Publication of NO167588B publication Critical patent/NO167588B/no
Publication of NO167588C publication Critical patent/NO167588C/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/56—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving blood clotting factors, e.g. involving thrombin, thromboplastin, fibrinogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
    • C12Q1/37—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving peptidase or proteinase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/48—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving transferase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2337/00—N-linked chromogens for determinations of peptidases and proteinases
    • C12Q2337/10—Anilides
    • C12Q2337/12—Para-Nitroanilides p-NA
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/195—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from bacteria
    • G01N2333/315—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from bacteria from Streptococcus (G), e.g. Enterococci
    • G01N2333/3153—Streptokinase
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/46—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans from vertebrates
    • G01N2333/4609—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans from vertebrates from reptiles
    • G01N2333/4613—Snake venom
    • G01N2333/462—Snake venom from Agkistrodon sp., e.g. acutase, ACTE
    • G01N2333/4623—Snake venom from Agkistrodon sp., e.g. acutase, ACTE from Agkistrodon rhodostama (Malayan pit viper); Arvin (R); Batroboxin; Ancrod
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/745—Assays involving non-enzymic blood coagulation factors
    • G01N2333/75—Fibrin; Fibrinogen
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
    • G01N2333/914—Hydrolases (3)
    • G01N2333/948—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • G01N2333/972—Plasminogen activators
    • G01N2333/9723—Urokinase
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
    • G01N2333/914—Hydrolases (3)
    • G01N2333/948—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • G01N2333/972—Plasminogen activators
    • G01N2333/9726—Tissue plasminogen activator
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
    • G01N2333/914—Hydrolases (3)
    • G01N2333/948—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • G01N2333/974—Thrombin

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Drying Of Semiconductors (AREA)
  • Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Control Of Indicators Other Than Cathode Ray Tubes (AREA)
  • Crystals, And After-Treatments Of Crystals (AREA)
  • Discharge Heating (AREA)
  • Electrotherapy Devices (AREA)
  • Control Of Stepping Motors (AREA)
  • Measuring Oxygen Concentration In Cells (AREA)

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører en fremgangsmåte til bestemmelse av den fibrinolytiske tilstanden for plasma, og reagens for anvendelse ved fremgangsmåten.
Fibrinolyse er den motsatte reaksjonen av blodkoagulerlng. Ved blodkoagulerlng oppstår fra fibrinogen fibrinmonomerer under innflytelse av enzymet trombin, disse polymeriserer under innflytelse av kalslumioner og andre faktorer til et uoppløselig gitter av fibrin. Fibrinmolekylene som oppstår bevirker at blodkoagulatene blir fastere. Siden dette forløpet med fibrindannelse stadig forløper i karsystemet, er et motsatt system, det fibrinolytiske systemet, også stadig aktivt for å forhindre at det uten grunn dannes tromber. Dette fibrinolytiske systemet fører under innflytelse av plasminogenaktivator til dannelse av plasmin fra plasmlnogen og plasmin bevirker oppløsning av fibrin under dannelse av fibrinspaltningsprodukter. Bestemmelsen av den fibrinolytiske tilstanden i et plasma er følgelig av stor betydning for å bedømme faren for trombose.
Forsøksmetoder som måler den spontane fibrinolytiske aktiviteten i blodet (plasma) henholdsvis den fibrinolytiske reaksjonen på stimulanser, som setter plasmlnogenaktlvatoren fri fra karveggen, er allerede kjente. Herved er det påkrevet å utelukke innflytelsen av plasmainhibitorer, dette oppnås i praksis ikke 1 tilstrekkelig grad og betyr samtidig også en kunstig forandring av prøven.
Ved bestemmelsen av euglobulin-lyseringstiden går man ut fra citratplasma. Dette blandes med eddlksyre og frasentrifu-geres. Bunnfallet løses i buffer og blandes med trombin. Det inkuberes ved 37°C, og tiden til oppløsning av koagulatet måles. Måletiden forkortes imidlertid herved betydelig, man bestemmer likevel en in vitro fibrinolyseaktivitet som ikke nødvendigvis korrelerer med in vivo aktiviteten.
Man har følgelig også allerede utviklet fremgangsmåter som gjennomføres uten eliminering av plasmainhibitorene. En slik fremgangsmåte er f.eks. bestemmelsen av fullblods-lyseringstiden.
Ved bestemmelsen av fullblods-lyseringstiden blandes fullblod med trombin og det dannede koagulatet inkuberes ved 37"C og tiden inntil oppløsning måles. Denne tiden utgjør ved normalverdier ikke under 24 timer. Denne fremgangsmåten er følgelig tidkrevende, ikke automatiserbar og bare egnet til en grov vurdering av den fibrinolytiske tilstanden. En unormalt lav fibrinolytisk aktivitet kan i det hele tatt ikke bestemmes.
Noe kortere tider oppnås når man arbeider med fortynnet blod, de nevnte ulempene består imidlertid.
Nøyaktigere resultater skal den såkalte fibrinplate-testen gi, med denne arbeides det med citratplasma eller resuspen-dert euglobulinbunnfall. Hovedulempen ligger her i den lange inkubasjonstiden på 18 timer ved 37°C.
Til grunn for oppfinnelsen ligger følgelig den oppgaven å tilveiebringe en universell fibrlnolysetest, hvorved man unngår ulempene forbundet med de tidligere kjente fremgangs-måtene og som spesielt gir resultater på relativt kort tid, som gjenspeiler in vivo tilstanden på en pålitelig måte, som lar seg automatisere og som kan bedømmes fotometrisk.
Denne oppgaven løses ifølge oppfinnelsen ved en fremgangsmåte til bestemmelse av den fibrinolytiske tilstanden 1 plasma, som er kjennetegnet ved at man i en naturlig plasmaprøve
a) tilsetter en mengde fibrin som er tilstrekkelig til dannelse av uklarhet eller frembringer denne in situ ved å
tilsette trombin eller et trombln-llgnende enzym og den
tidsavhengige uklarhetsendrIngen eller den tidsavhengige dannelsen av fibrin-spaltningsprodukter måles, eller b) tilsetter et kromogent plasminsubstrat og en mengde fibrin som ikke er tilstrekkelig for dannelse av uklarhet,
fibrinogen-spaltnlngsprodukter eller et enzym som in situ gir fibrin og måler den tidsavhengige fargedannelsen.
Med betegnelsen "uklarhetsmåling" forstås innenfor rammen av oppfinnelsen målingen av uklarhetsøkningen eller -reduksjonen pr. tidsenhet, måling av tiden for oppnåelse av uklarhets-maksimum eller måling av tiden inntil oppnåelse av en spesiell uklarhetsreduksjon eller -økning, relativt til uklarhetsmaksimumet. Også en kombinasjon av disse måle-mulighetene kan anvendes. Foretrukket er måling av tiden inntil oppnåelse av en definert uklarhetsreduksjon eller tiden til oppnåelse av uklarhetsmaksimumet.
FargemålIngen kan foregå ved kinetisk å følge fargedannelsen, herved angis ekstinksjonsendringen pr. tidsenhet. Videre kan den etter en angitt tid oppnådde ekstinksjonen bestemmes eller fargedannelsesreaksjonen kan stoppes etter en angitt tid og på et hvilket som helst senere tidspunkt kan den dannede fargen måles.
Målingen av det dannede flbrin-spaltningsproduktet kan foregå med handelsvanlige forsøksreagenser henholdsvis -fremgangsmåter. Eksempler er stafylokokk-clumping-forsøk (fremstilt av Boehringer Mannheim GmbH) eller immunologiske fremgangsmåter f.eks. ved antistoff-belagte latekspartikler (fremstilt av Wellcome Corp.).
Stoppingen av fargedannelsesreaksjonen kan foregå ved tllsats av egnede inhibitorer, fortrinnsvis plasmininhibitorer eller syrer som f.eks. eddlksyre eller sitronsyre. Fortrinnsvis måles tiden inntil oppnåelse av en bestemt ekstlnksjon.
Den ovenfor angitte fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen gir en bestemmelse av den hyperfibrinolytiske aktiviteten for plasma. Herved utløses reaksjonen av plasminogenaktivatorer som er tilstede eller oppstår i plasma. Denne utførelses-formen av fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen egner seg spesielt til å følge en fibrinolyseterapi. Man kan herved fastslå hvordan den fibrinolytiske tilstanden for utgangs-plasmaet endrer seg under forløpet av terapien.
Ifølge en ytterligere utførelsesform av fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen, tilsettes dessuten en bestemt mengde plasminogenaktivator, hvorved fortrinnsvis terapeutisk anvendelige konsentrasjoner anvendes. Ved denne utførelsesformen av fremgangsmåten bestemmer man den mulige reaktiviteten for plasma i nærvær, av definerte mengder plasminogenaktivator. Dette er spesielt viktig for innledningen av en fibrinolyseterapi. Man kan derved fastslå hvordan den fibrinolytiske tilstanden i plasma endrer seg når man tilsetter et tera-peutikum som skal anvendes for fibrinolyseterapi, som f.eks. t-PA (EPA), uroklnase eller streptokinase.
Ifølge en foretrukket utførelsesform oppnås fibrinet in situ ved tilsats av trombin eller et trombin-lignende enzym som batroxobin eller arvin.
Som fibrinogenspaltningsprodukter anvendes fortrinnsvis produkter som oppnås ved behandling av fibrinogen med bromcyan (I.H. Verheijen, Thromb. Haemostas 48, 266-269
(1982)). Fortrinnsvis anvendes konsentrasjoner på 10-150 pg/ml.
Flbrinmonomerer fremstilles ved behandling av fibrinogen med batroxobin, inaktivering av batroxobinet med diisopropyl-fluorfosfat, fjernelse og deretter oppløsning av fibrin-klumpene i 1-3 molar urinstoffoppløsning. Fortrinnsvis anvendes konsentrasjoner på 1-100 jjg/ml fibrinmonomer.
Som kromogent plasmlnsubstrat kan ethvert plasminsubstrat anvendes fra hvilket det under Innflytelse av plasmin avspaltes en gruppe som er egnet til fargedannelse. Som fargedannende grupper kommer både grupper på tale som kan måles direkte fotometrisk, f.eks. nltroanilin, dinltroanilln og derivater derav, og også forbindelser som ved reaksjon med ytterligere en komponent bevirker fargedannelse.
Ved utførelsesformen av fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen under tllsats av en plasmlnaktlvator, kan man som plasmlno-genaktivator EPA (Extrinsic Plasmlnogen-aktivator t-PA), anvende uroklnase eller streptokinase. Et foretrukket kromogent plasmlnsubstrat er Tos-Gly-Pro-Lys-p-nitroanilin.
Fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen kan gjennomføres ved en hvilken som helst temperatur mellom 20 og 40<*>C.
En ytterligere gjenstand for oppfinnelsen er en reagens til bestemmelse av den fibrinolytiske tilstanden i plasma som er egnet for gjennomføring av fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen. En slik reagens er kjennetegnet ved at den Inneholder plasminogenaktivator, trombin eller trombinlignende enzym og buffer.
Istedet for trombin eller trombin-lignende enzym kan reagensen også inneholde fibrinspaltningsprodukter eller fibrinmonomer.
Dersom reagensen ifølge oppfinnelsen er bestemt for variant b) av fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen, dvs. fargemålIngen, inneholder den i tillegg et kromogent plasminsubstrat.
Ifølge en foretrukket utførelsesform inneholder reagensen Ifølge oppfinnelsen videre minst et stoff fra gruppen polyetylenglykol, ikke-ionogent, overflateaktivt middel og okseserumalbumln.
I en første utførelsesform av reagensen Ifølge oppfinnelsen inneholder denne EPA, batroxobin, trisbuffer pH 7-8, polyetylenglykol og Ikke-Ionogent overflateaktlvt middel.
For fargemållng inneholder denne reagensen istedet for batroxobin med fordel fibrinogen-spaltningsprodukter fremstilt ved bromcyanbehandling av fibrinogen eller istedet for dette, fibrinmonomer og dessuten Tos-Gly-Pro-Lys-p-nitroanilin.
For de enkelte bestanddelene av reagensen Ifølge oppfinnelsen, gjelder tilsvarende de utførelsesformene som er omtalt 1 forbindelse med beskrivelsen av fremgangsmåten.
De følgende eksemplene illustrerer oppfinnelsen med referanse til den vedlagte tegningen.
I denne er:
Fig. 1 en kalibreringskurve for et uklarhetsforsøk med EPA som plasminogenaktivator.
Eksempel 1
Uklarhetsforsøk med EPA som plasminogenaktivator.
Reagenssammensetning:
Trls/HCl, 0,1 mol/l, pH 7,5
Polyetylenglykol 6000, 2 vekt-*
Overflateaktivt middel ("Tveen 80"), 0,1 vekt-* Okseserumalbumln (RSA), 1 vekt-*
Batroxobin 0,02 BU/ml
EPA (0,01-10 ng/ml forsøksblandlng).
Forsøksblandlng: 50 pl prøve (plasma)
1000 pl reagens
Reagens og prøve blandes ved 25 "C og uklarhetsdannelsen forfølges straks med et fotometer ved X - 334 nm. Ekstinksjonsendringen registreres med en skriver (papir-hastighet 0,1 cm/min).
Bestemmelsen av en kalibreringskurve foregår enten ved bestemmelse av tiden t^ til uklarhetsmaksimumet er oppnådd (fig. 1, kurve 1) eller tiden t£ til en ekstlnksjonsreduksjon på 100 mE er oppnådd med utgangspunkt fra uklarhetsmaksimumet (fig. 1, kurve 2).
Eksempel 2
Uklarhetsforsøk med streptokinase henholdsvis urokinase som plasminogenaktivator.
Reagenssammensetning, forsøksblandlng og forsøksgjennomføring tilsvarende eksempel 1, hvorved istedet for EPA, streptokinase henholdsvis urokinase tilsettes i forskjellige konsentrasjoner.
Derved oppnås følgende måleverdier:
a) Streptokinase
b) Urokinase
Konsentrasjon
Eksempel 3
Fargeforsøk med EPA som plasminogenaktivator.
Reagenssammensetning:
Tris/HCl 0,1 mol/1, pH 7,5
Polyetylenglykol 6000, 2 vekt-*
"Tween 80", 0,1 vekt-*
RSA, 1 vekt-*
EPA, 0,1 til 10 ng/ml forsøksblandlng BrCN-fragmenter av fibrin, 75 pg/ml
Plasminsubstrat TOS-Gly-Pro-Lys-pNA, 0,15 mmol/1
Forsøksblandlng: 50 pl prøve (plasma)
1000 pl reagens
Reagens og prøve blandes ved 25"C og fargedannelsen følges med et fotometer ved X - 405 nm. Ekst inksjonsendr ingen registreres med en skriver (paplrhastighet 0,1 cm/min). Man måler tiden t3 inntil en ekstinksjonsøkning på 100 mE er oppnådd med utgangspunkt fra basislinjen (0-reagensverdi ).
Som resultater oppnås:

Claims (13)

1. Fremgangsmåte til bestemmelse av den fibrinolytiske tilstanden for plasma, karakterisert ved at man i en naturlig plasmaprøve a) tilsetter en mengde fibrin som er tilstrekkelig til dannelse av uklarhet eller frembringer denne in situ ved å tilsette trombin eller et trombin-lignende enzym, og den tidsavhengige uklarhetsendringen eller den tidsavhengige dannelsen av fibrin-spaltningsprodukter måles, eller b) tilsetter et kromogent plasminsubstrat og en mengde fibrin som ikke er tilstrekkelig for dannelse av uklarhet, fibrinogen-spaltningsprodukter eller et enzym som in situ gir fibrin og måler den tidsavhengige fargedannelsen.
2. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at man dessuten tilsetter en bestemt mengde plasminogenaktivator .
3. Fremgangsmåte ifølge krav 1 eller 2, karakterisert ved at man oppnår fibrinet in situ ved tilsats av trombin eller et trombinlignende enzym som batroxobin eller arvin.
4. Fremgangsmåte ifølge krav 2 eller 3, karakterisert ved at man som plasminogenaktivator tilsetter EPA, urokinase eller streptokinase.
5. Fremgangsmåte Ifølge et av de foregående krav, karakterisert ved at man som f ibrinogen-spaltningsprodukter anvender produkter som oppnås ved behandling av fibrinogen med bromcyan.
6. Fremgangsmåte ifølge et av de foregående krav, karakterisert ved at man som kromogent plasmin substrat anvender Tos-Gly-Pro-Lys-p-nitroanilin.
7. Reagens til bestemmelse av den fibrinolytiske tilstanden for plasma ved fremgangsmåten ifølge et av kravene 1 til 6, karakterisert ved at den inneholder plasminogenaktivator, trombin eller trombinllgnende enzym og buffer.
8. Reagens til bestemmelse av den fibrinolytiske tilstanden for plasma ved fremgangsmåten ifølge et av kravene 1 til 6, karakterisert ved at den inneholder plasminogenaktivator og fibrinogen-spaltningsprodukter eller fibrinmonomer.
9. Reagens ifølge krav 7 eller 8, karakterisert ved at den i tillegg inneholder et kromogent plasminsubstrat .
10. Reagens ifølge kravene 7-9, karakterisert ved at den inneholder polyetylenglykol, et ikke-ionogent, overflateaktivt middel og/eller okseserumalbumin.
11. Reagens ifølge et av kravene 7-10, karakterisert ved at den inneholder EPA, batroxin, trisbuffer pH 7-8, polyetylenglykol og ikke-ionogent overflateaktivt middel.
12. Reagens ifølge krav 11, karakterisert ved at den inneholder EPA, tris-buffer pH 7-8, polyetylenglykol, ikke-ionogent overflateaktivt middel og ved bromcyanbehandling av fibrinogen fremstilte fibrinogen-spaltningsprodukter eller fibrinmonomer og Tos-Gly-Pro-Lys-p-nitroanilin.
13. Anvendelsen av trombin eller trombinlignende enzym sammen med buffer som reagens til bestemmelse av den fibrinolytiske tilstanden for plasma ved fremgangsmåten ifølge kravene 1 til 6.
NO860089A 1985-01-29 1986-01-13 Fremgangsmaate til bestemmelse av den fibrinolytiske tilstanden for plasma, og reagens for anvendelse ved fremgangsmaaten. NO167588C (no)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19853502878 DE3502878A1 (de) 1985-01-29 1985-01-29 Verfahren zur bestimmung des fibrinolytischen zustands von plasma

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO860089L NO860089L (no) 1986-07-30
NO167588B true NO167588B (no) 1991-08-12
NO167588C NO167588C (no) 1991-11-20

Family

ID=6261029

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO860089A NO167588C (no) 1985-01-29 1986-01-13 Fremgangsmaate til bestemmelse av den fibrinolytiske tilstanden for plasma, og reagens for anvendelse ved fremgangsmaaten.

Country Status (8)

Country Link
EP (1) EP0189910B1 (no)
JP (1) JPS61178000A (no)
AT (1) ATE45771T1 (no)
CA (1) CA1276097C (no)
DE (2) DE3502878A1 (no)
DK (1) DK163189C (no)
ES (1) ES8701841A1 (no)
NO (1) NO167588C (no)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HU193126B (en) * 1985-08-15 1987-08-28 Valeria Duschanek Method for forecasting quality of flesh of the livestocks and for selecting livestocks on the basis of this
DE3705744A1 (de) * 1987-02-23 1988-09-01 Behringwerke Ag Verfahren zur funktionellen bestimmung von protein c-inhibitor
DE3838529A1 (de) * 1988-11-14 1990-05-17 Behringwerke Ag Globaltest zur erfassung der hauptkomponenten des fibrinolysesystems
DE3900493A1 (de) * 1989-01-10 1990-07-12 Thomae Gmbh Dr K Verfahren zur bestimmung der fibrinolytischen gesamtaktivitaet im plasma
WO1993011260A1 (en) * 1991-11-25 1993-06-10 Baxter Diagnostics Inc. Method for measuring fibrinolytic capacity within whole human plasma
DK0556906T3 (da) * 1992-02-17 1996-09-02 Akzo Nobel Nv Kalibrator og dens anvendelse til en immunanalyse
US5708591A (en) 1995-02-14 1998-01-13 Akzo Nobel N.V. Method and apparatus for predicting the presence of congenital and acquired imbalances and therapeutic conditions
US6429017B1 (en) 1999-02-04 2002-08-06 Biomerieux Method for predicting the presence of haemostatic dysfunction in a patient sample
US6898532B1 (en) 1995-06-07 2005-05-24 Biomerieux, Inc. Method and apparatus for predicting the presence of haemostatic dysfunction in a patient sample
US6321164B1 (en) 1995-06-07 2001-11-20 Akzo Nobel N.V. Method and apparatus for predicting the presence of an abnormal level of one or more proteins in the clotting cascade
US6502040B2 (en) 1997-12-31 2002-12-31 Biomerieux, Inc. Method for presenting thrombosis and hemostasis assay data
WO2000046603A1 (en) 1999-02-04 2000-08-10 Akzo Nobel N.V. A method and apparatus for predicting the presence of haemostatic dysfunction in a patient sample
US7179612B2 (en) 2000-06-09 2007-02-20 Biomerieux, Inc. Method for detecting a lipoprotein-acute phase protein complex and predicting an increased risk of system failure or mortality

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2431342C3 (de) * 1973-07-27 1978-10-26 Behringwerke Ag, 3550 Marburg Verfahren zur Messung des Plasminogengehaltes durch Bestimmung der Bildung von Fibrin in einer Probe
DE2525804B2 (de) * 1975-06-10 1980-04-03 Behringwerke Ag, 3550 Marburg Stabiler Clumping-Faktor, Verwendung desselben zum Nachweis von Fibrinogen- und Fibrinspaltprodukten und Herstellung desselben
JPS59210900A (ja) * 1983-05-14 1984-11-29 Mihama Hisaharu 血中プラスミン活性の測定法
DE3330699A1 (de) * 1983-08-25 1985-03-07 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Verfahren zur gleichzeitigen bestimmung von fibrinogen und fibrinogen-spaltprodukten im plasma

Also Published As

Publication number Publication date
DK30686A (da) 1986-07-30
DK163189B (da) 1992-02-03
ES551389A0 (es) 1986-12-16
NO167588C (no) 1991-11-20
EP0189910B1 (de) 1989-08-23
JPS61178000A (ja) 1986-08-09
DK163189C (da) 1992-06-22
ES8701841A1 (es) 1986-12-16
EP0189910A3 (en) 1986-12-10
ATE45771T1 (de) 1989-09-15
DE3502878A1 (de) 1986-07-31
EP0189910A2 (de) 1986-08-06
DE3665196D1 (en) 1989-09-28
DK30686D0 (da) 1986-01-21
CA1276097C (en) 1990-11-13
NO860089L (no) 1986-07-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Soria et al. A new type of congenital dysfibrinogenaemia with defective fibrin lysis—Dusard syndrome: possible relation to thrombosis
JP4361986B2 (ja) 血液凝固第ｖｉｉ因子を活性化するプロテアーゼ
Nesheim et al. Thrombin-catalyzed activation of single chain bovine factor V.
Francis et al. Physiologic regulation and pathologic disorders of fibrinolysis
NO167588B (no) Fremgangsmaate til bestemmelse av den fibrinolytiske tilstanden for plasma, og reagens for anvendelse ved fremgangsmaaten.
CA2108282C (en) Quantitative clotting assay for activated factor vii
JP3792198B2 (ja) 抗血小板剤をモニターする方法及び装置
Astrup et al. The estimation of fibrinogen A revision
US8008086B2 (en) Protocol for monitoring direct thrombin inhibition
US4234682A (en) Method and reagent for determining biologically active heparin in plasma
JP6300793B2 (ja) 血漿及び全血中のトロンビン産生と血餅強度との同時測定
JP4718833B2 (ja) 複合生物媒体における、一時的なタンパク質分解活性の濃度を決定するための診断試験
Retzios et al. A direct-acting fibrinolytic enzyme from the venom of Agkistrodon contortrix contortrix: effects on various components of the human blood coagulation and fibrinolysis systems
Van Wijk et al. Mechanized amidolytic technique for determination of factor X and factor-X antigen, and its application to patients being treated with oral anticoagulants.
Kaplan et al. Molecular mechanisms of fibrinolysis in man
EP0472205B1 (en) Assays using a soluble fibrin-like monomer
US5188940A (en) Method of determining the total fibrinolytic activity in the plasma
Heimburger et al. Blood coagulation and fibrinolysis
Stafford The fibrinolytic mechanism in haemostasis: a review
Stief A direct approach in fibrinolysis diagnostic: mimicry of the leukocyte attack by oxidants
US5096811A (en) Novel assay system for measuring human plasminogen actuator activity
De Cristofaro et al. Effect of sodium on the energetics of thrombin–Thrombomodulin interaction and its relevance for protein C hydrolysis
JP2818673B2 (ja) 繊維素溶解系の主要成分を測定する包括的試験
EP0237332A1 (en) Assay for thrombosis-related materials
Van Wersch Adaptation and evaluation of a chromogenic test procedure for fibrin monomers on a centrifugal analyzer