NO160554B - Reagens for bestemmelse av ristocetin-kofaktoren (willebrand-faktor). - Google Patents

Reagens for bestemmelse av ristocetin-kofaktoren (willebrand-faktor). Download PDF

Info

Publication number
NO160554B
NO160554B NO823508A NO823508A NO160554B NO 160554 B NO160554 B NO 160554B NO 823508 A NO823508 A NO 823508A NO 823508 A NO823508 A NO 823508A NO 160554 B NO160554 B NO 160554B
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
ristocetin
reagent
platelets
determination
ristocetin cofactor
Prior art date
Application number
NO823508A
Other languages
English (en)
Other versions
NO823508L (no
NO160554C (no
Inventor
Peter Fuhge
Konrad Braun
Udo Becker
Original Assignee
Behringwerke Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Behringwerke Ag filed Critical Behringwerke Ag
Publication of NO823508L publication Critical patent/NO823508L/no
Publication of NO160554B publication Critical patent/NO160554B/no
Publication of NO160554C publication Critical patent/NO160554C/no

Links

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/86Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood coagulating time or factors, or their receptors
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/56Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving blood clotting factors, e.g. involving thrombin, thromboplastin, fibrinogen
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/745Assays involving non-enzymic blood coagulation factors
    • G01N2333/755Factors VIII, e.g. factor VIII C [AHF], factor VIII Ag [VWF]
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10TTECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
    • Y10T436/00Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10T436/10Composition for standardization, calibration, simulation, stabilization, preparation or preservation; processes of use in preparation for chemical testing
    • Y10T436/101666Particle count or volume standard or control [e.g., platelet count standards, etc.]

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

Oppfinnelsen vedrører et middel til bestemmelse av ristocetin-kof atoren, også betegnet som v.Willebrand-faktor eller F VIII R:RCF. Dette inneholder et garvet, med protease-inhlbitor behandlet og eventuelt med fargestoff behandlet trombocyter og ristocetin A.
For diagnose av v.Willebrand-syndromet (WS) er bestemmelse av ristocetin -kofaktor ~- (F VIII R:RCF)-aktiviteten egnet. Kjente fremgangsmåter beror på at antibiotikumet ristocetin A i humant platerikt plasma induserer aggregering av plater, imidlertid ikke i plasma av mennesker med v.Willebrand-syndromet.
Ristocetin-kofaktoren kan bestemmes ifølge teknikkens stand som følger: Humant citratplasma tilsettes en suspensjon av vaskede humane blodplater, aggregeringen av platene utløses ved tilsetning av ristocetin og måles over transmisjonsendringen i et fotometer med en innretning til måling av aggregasjoner (aggregometer). Transmisjonen øker ved aggregeringen av platene. For å få en referansekurve anvendes avtrappede blandede human-plasmafortynninger. Aggregeringen kan måles som økning av transmisjonen i tidsenheten og oppføres mot plasmafortynningen. Fra referansekurven kan det avleses innholdet av et pasientplasma av ristocetin-kofaktoren.
Ulemper ved slike fremgangsmåter er at de krever erfarent teknisk personale, nøyaktig arbeide og en skriver som nøyaktig gjengir transmisjonsendringen ved aggregeringen, da en feil i stigningsmålingen på 1 grad kan tilsvare en feil på 1056 i ristocetin-kofaktor-konsentrasjonen.
Det er dessuten meget omstendelig å tilveiebringe de for fremgangsmåten nødvendige friske blodplatesuspensjoner med konstant plateantall. Disse suspensjoner er bare begrenset lagringsdyktige.
En ytterligere ulempe ved nevnte fremgangsmåte er det store prøvevolum som krever store mengder av det dyre ristocetin. Da ristocetin-konsentrasjonen bare kan varieres innen et snevert område er en innsparing bare mulig ved en nedsettelse av prøvevolumet. En agglutinasjonsprøve på prøveplater av typen en lateks-prøve nedsetter prøvevolumet til 1/10 uten å påvirke prøvens følsomhet. Friske platesuspensjoner er ikke egnet hertil da det allerede inneholder plateaggregater som frembringer en agglutinasjon av nullkontrollen.
Bestemmelse av ristocetin-kofaktoren ble allerede viderefor-enklet ved anvendelse av garvede plater. Ved fiksering med glutardialdehyd (DE-OS 25 46 166) eller formalin (Allain et al., J. Lab. Clin. Med. (1975), 85, 318) får man blodplatesuspensjoner som også er aktive etter lagring, spesielt når man lyofiliserer dem. Når man suspenderer slike lyofiliserte plater finner man riktignok også formert plateaggregater som påvirker anvendelsen i en agglutinasjonsprøve, da også her nullkontrollen viser spontane agglutinasjoner. Også når plater lyofiliseres sammen med ristocetin, danner det seg ved resuspendering spontant aggregater som umuliggjør deres anvendelse i en agglutinasjonsprøve.
Det er nå funnet at de omtalte ulemper ved de kjente fremgangsmåter unngås ved anvendelse av reagens som beror på det overraskende funn, at med en proteaseinhibitor og et for fiksering av proteiner kjent garvestoff behandlede trombocyter lar seg lyofilisere med ristocetin og hjelpemidler og lagre lengre tid ved værelsestemperatur eller sågar ved 37"C uten å tape deres anvendbarhet til bestemmelse av ristocetin-kof aktoren .
Oppfinnelsens gjenstand er et reagens til bestemmelse av ristocetin-kofaktoren inneholdende trombocyter fiksert av et for proteiner kjent garvestoff, og ristocetin A, idet reagenset er karakterisert ved at trombocytene også er behandlet med en serinprotelnaseinhibitor og eventuelt et for farging av proteinet kjent fargestoff.
Reagenset Ifølge oppfinnelsen muliggjør en semikvantitativ bestemmelse av ristocetin-kofaktoren etter agglutina-sjonsmetoden og med bare to pipetteringstrinn (reagens og prøve) og under anvendelse av bare litt ristocetin.
Det har vist seg gunstig å fiksere platene med en oppløsning med C^-C4-alkanaldehyd, fortrinnsvis formaldehyd eller et C2-C^-dialdehyd, fortrinnsvis glutardialdehyd i en minstekonsentrasjon på 0,2$ (vekt:volum) i minst 2 timer mellom 4°C og 37°C og dessuten å behandle med en protease-inhibitor, fortrinnsvis diisopropylfluorfosfat i en minstekonsentrasjon på IO-* mol. Trombocytene farges eventuelt med et for farging av proteiner kjent fargestoff, spesielt med et i gelektroforese anvendt fargestoff som coomassie blå eller et reaktivfargestoff som "remazolturkisblå" i EEAD 505. Derved er fargestoffkonsentrasjonen minst 0,05 mg/ml og fargevarig-heten er maksimalt 24 timer. ;Suspensjonen som inneholder IO<7> til 10<11> trombocyter/ml, tilsettes så meget ristocetin A at den inneholder 0,2-10 mg/ml, fortrinnsvis 2,5 mg/ml. Suspensjonen tørkes sammen med lyofiliseringshjelp. Som hjelpemiddel tilsettes pr. ml suspensjon 1 til 100 mg av en eller flere aminosyrer, fortrinnsvis glycin og natriumglutaminat, 2 til 30 mg av et sukker, fortrinnsvis saccharose og 0,5 til 10 mg av et beskyttelseskolloid, fortrinnsvis humanalbumin. ;Oppfinnelsen skal forklares nærmere ved hjelp av et eksempel: 1,3 1 trombocytkonsentrat suspenderes 14 1 fosfatbuffer 0,15 M, pH 7,2 og erytrocyttene frasentrifugeres. Vasking og sentrifugering gjentas to ganger og deretter innstilles det overstående på 3 x IO<9> plater/ml. Under strenge forsik-tighetsforholdsregler (avtrekk, hansker) tilsettes diisopropylfluorfosfat til en sluttkonsentrasjon på 10~<3> M og omrøres i 1 time ved værelsestemperatur. Etter sentrifugering kasseres det overstående og utfellingen vaskes to ganger med fosfatbuffer. Platesuspensjonen innstilles med en 35^-ig formaldehydoppløsning til en konsentrasjon på 4% formaldehyd og omrøres svakt 44 timer ved 4°C. Deretter dialyseres fullstendig mot fosfatbuffer. Platekonsentrasjonen innstilles på 3 x 10^/ml og settes til 1 liter suspensjon 2,5 g ristocetin A, 10 g saccharose, 10 g glycin, 16,7 g N-glutamlnat og 2 g humanalbumin. Etter innfrysing lyofiliseres. Platetallet før og etter lyofilisering forblir konstant. ;Platene kan etter fiksering også farges, eksempelvis med "remazolblå" (Hoechst EE AD 505) som farger platene intenst blå og øker prøvens følsomhet. ;Platene kan farges ved tilsetning av 0,25 mg/ml "remazolblå" til den fikserte og dialyserte platesuspensjon og 30 minutters omrøring. Deretter sentrifugeres og utfellingen vaskes. Etter sentrifugering viderebehandles platene som de ufargede plater. ;Også ved dette reagens er det etter rekonstitusjon i HgO ikke å iaktta noen aggregater. ;Bestemmelse av ristocetin-kofaktoren ;Hertil rekonstitueres lyofilisatet til 1 ml utgangssuspensjon med 1 ml vann, tilsettes en geometrisk fortynningsrekke av blandet humanplasma og agglutinasjonen vurderes. ;Prøveblanding: 50 pm plasmafortynning og 50 pm reagens blandes godt på en glassplate, rystes 1 minutt og etter 1 minutt hvile avleses titertrinnet. ;Stabilitet etter belastningsforsøk: Etter 4 ukers lagring ved 37°C finnes samme titertrinn. *

Claims (4)

1. Reagens til bestemmelse av ristocetin-kofaktoren, inneholdende trombocytter fiksert av et for proteiner kjent garvestoff, og ristocetin A, karakterisert ved at trombocyttene også er behandlet med en serinproteinaseinhibitor og eventuelt et for farging av proteinet kjent fargestoff.
2. Reagens Ifølge krav 1, karakterisert ved at proteinasein-hibitoren er diisopropylfluorofosfat.
3. Reagens ifølge krav 1, karakterisert ved at trombocyttene er behandlet med fargestoffet "Remazol-tyrkisk blå" EEAD 505.
4. Reagens ifølge krav 1, karakterisert ved at det i tillegg inneholder 1-100 mg aminosyrer, 2-30 mg av et sukker og 0,5-10 mg av et beskyttelseskolloid og ca. 3 x IO<9> trombocytter, og er lyofilisert.
NO823508A 1981-10-22 1982-10-21 Reagens for bestemmelse av ristocetin-kofaktoren (willebrand-faktor). NO160554C (no)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19813141894 DE3141894A1 (de) 1981-10-22 1981-10-22 Reagenz fuer die bestimmung des ristocetin-cofaktors (v. willebrand-faktor)

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO823508L NO823508L (no) 1983-04-25
NO160554B true NO160554B (no) 1989-01-16
NO160554C NO160554C (no) 1989-04-26

Family

ID=6144625

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO823508A NO160554C (no) 1981-10-22 1982-10-21 Reagens for bestemmelse av ristocetin-kofaktoren (willebrand-faktor).

Country Status (11)

Country Link
US (1) US4510126A (no)
EP (1) EP0078451B1 (no)
JP (1) JPS5878599A (no)
AT (1) ATE12839T1 (no)
AU (1) AU549733B2 (no)
CA (1) CA1191771A (no)
DE (2) DE3141894A1 (no)
DK (1) DK155766C (no)
ES (1) ES516672A0 (no)
NO (1) NO160554C (no)
NZ (1) NZ202239A (no)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0186476A3 (en) * 1984-12-21 1987-10-21 Hemochek Corporation Diagnostic kit and method for assaying blood components
JPH03193735A (ja) * 1989-12-22 1991-08-23 Shionogi & Co Ltd グリコペプチド系抗生物質の安定化組成物
DE4016885A1 (de) * 1990-05-25 1991-11-28 Behringwerke Ag Methode zur bestimmung des von-willebrand-faktors
JP4445589B2 (ja) * 1992-05-29 2010-04-07 ザ・ユニバーシティー・オブ・ノース・カロライナ・アット・チャペル・ヒル 製薬的に許容しうる固定乾燥ヒト血液血小板
DE19964109A1 (de) 1999-12-29 2001-07-05 Dade Behring Marburg Gmbh Gebrauchsfertiges langzeitstabiles Ristocetin Cofaktor Testreagenz
DE10013377A1 (de) * 2000-03-17 2001-09-20 Dade Behring Marburg Gmbh Induzierte Aggregation und Agglutination von Plättchen
US20060074014A1 (en) * 2002-11-18 2006-04-06 Vicuron Pharmaceuticals Inc. Dalbavancin compositions for treatment of bacterial infections
CA2543296A1 (en) * 2003-10-31 2005-05-12 Point Biomedical Corporation Reconstitutable microsphere compositions useful as ultrasonic contrast agents
DE102006019520A1 (de) * 2006-04-27 2007-11-08 Dade Behring Marburg Gmbh Verfahren zur Bestimmung hoher Ristocetin-Kofaktor-Aktivitäten des von-Willebrand-Faktors

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2546166A1 (de) * 1975-10-15 1977-04-28 Behringwerke Ag Gegerbte thrombozyten
US4145185A (en) * 1977-02-25 1979-03-20 Research Triangle Institute Reagents for screening tests and bioassay of von Willebrand's factor (platelet aggregating factor) in blood plasmas
US4287087A (en) * 1977-02-25 1981-09-01 Research Triangle Institute Fixed-dried blood platelets

Also Published As

Publication number Publication date
ES8307376A1 (es) 1983-06-16
NO823508L (no) 1983-04-25
EP0078451A1 (de) 1983-05-11
JPS5878599A (ja) 1983-05-12
DE3263152D1 (en) 1985-05-23
US4510126A (en) 1985-04-09
AU8967482A (en) 1983-04-28
NO160554C (no) 1989-04-26
DK155766B (da) 1989-05-08
AU549733B2 (en) 1986-02-06
CA1191771A (en) 1985-08-13
DK155766C (da) 1989-09-25
NZ202239A (en) 1985-07-12
ES516672A0 (es) 1983-06-16
ATE12839T1 (de) 1985-05-15
DE3141894A1 (de) 1983-05-05
JPH0322590B2 (no) 1991-03-27
DK468582A (da) 1983-04-23
EP0078451B1 (de) 1985-04-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4731330A (en) Whole blood control sample
US4056484A (en) Stable blood plasma, process for preparing it and its use as comparative plasma in coagulation tests
WO1991001497A1 (en) Improved stable coagulation controls
HU188298B (en) Process for producing phamraceutival compositions increasing coagulability of blodd, containing humane proteines
GB1563839A (en) Stabilized erythrocytes and their use
NO178682B (no) Fremgangsmåte for å stabilisere blodkoagulasjonsfaktorer, samt kontrollplasma og reagens for å bestemme biologisk aktivitet av blodkoagulasjonsfaktorer
NO160554B (no) Reagens for bestemmelse av ristocetin-kofaktoren (willebrand-faktor).
JP4106111B2 (ja) イムノアッセイ用較正/対照用配合物
NZ207626A (en) Photometric determination of activated partial thromboplastin and reagent therefor
Zugker et al. Preparation of quality control specimens for coagulation
NO161079B (no) Reagens for optisk bestemmelse av blodkoaguleringsforholdet.
CN113234792A (zh) 一种用于凝血检测的质控组合物
NO303801B1 (no) Reagens til bestemmelse av faktor VIII aktivitet
JPS61185199A (ja) 血漿中のプロカリクレインを光度測定する方法
JPS62209362A (ja) 免疫凝集反応用組成物
JP4532731B2 (ja) 長期に安定で即時使用可能なリストセチン補因子試験試薬
CN112557665A (zh) 一种狼疮抗凝物的确认试剂及其制备方法
Sher et al. Purification and study of L-arginine decarboxylase from Escherichia coli B
Grannis et al. The spectrophotometry determination of thrombin activity in plasma
RU2310204C1 (ru) Способ количественного определения фетального гемоглобина человека
IE55289B1 (en) Composition and method for detecting antistreptolysin o
JPS60501191A (ja) アンギオテンシン転換酵素を測定する方法及び試薬
Rodeghiero et al. Fibrin cross-linking in congenital factor XIII deficiency.
AU700355B2 (en) Process for preparing clear sera which are stable over a long period
Booij Some divergent results of protein standardization